Иммуногенные и протективные свойства эшерихиозного анатоксина тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат ветеринарных наук Караев, Ян Михайлович

• Караев, Ян Михайлович
• кандидат ветеринарных наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Караев, Ян Михайлович

Введение.'.'.

1. Обзор литературы.

1.1. Этиология и распространение эшерихиоза.

1.2. Факторы патогенности эшерихий.

1.3. Токсины Е. coli.

1.4. Адгезивные антигены.

1.5. Специфическая профилактика.

2. Материалы и методы исследований.

3. Результаты исследований.

3.1. Получение эшерихиозного анатоксина.

3.1.1. Характеристика штаммов-продуцентов.

3.1.2. Подбор оптимальной среды и режима культивирования для продукции эшерихиями экзотоксинов.

3.1.3. Получение анатоксина.

3.2. Разработка эритроцитарного диагностикума.

3.3. Влияние эшерихиозного анатоксина на иммуно-биологическую реактивность лабораторных животных.

3.3.1. Влияние эшерихиозного анатоксина на картину крови.

3.3.2. Влияние эшерихиозного анатоксина на систему фагоцитоза.

3.3.2.1. Влияние эшерихиозного анатоксина на захватывающую и переваривающую способность нейтрофильных гранулоцитов.

3.3.2.2. Влияние эшерихиозного анатоксина на микробицидные свойства Нейтрофильных гранулоцитов.

3.3.3. Влияние эшерихиозного анатоксина на гуморальное звено иммунитета.

3.3.3.1. Иммуногенные свойства анатоксина.

3.3.3.2. Протективные свойства зшерихиозного анатоксина.

4. Обсуждение результатов исследования.

Выводы.

Практические предложения.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммуногенные и протективные свойства эшерихиозного анатоксина»

Актуальность работы. Согласно данным отечественных ученых желудочно-кишечные болезни являются основной причиной гибели молодняка сельскохозяйственных животных [6, 41, 54, 88, 103, 107]. Особое место в ряду болезней сопровождающихся поражением пищеварительного тракта, занимает эшерихиоз, поскольку им могут поражаться до 50100% новорожденных телят и поросят, при этом летальность доходит до 30-50% [5, 26, 39].

Предрасполагающими факторами появления и распространения эше-рихиоза служат не только нарушения ветеринарно-санитарных правил и зоогигиенических режимов содержания животных, но и биологические свойства возбудителя болезни - Escherichia coli. Являясь постоянным обитателем кишечника животных и человека, данный микроорганизм составляет его микробиоценоз. В норме кишечная палочка выполняет ряд полезных для хозяина функций - синтез витаминов и аминокислот, поддерживает колонизационную резистентность кишечника и обеспечивает антигенную стимуляцию местного иммунитета [28, 51]. Между тем, при нарушениях микроэкологического характера, Е. coli способна резко наращивать не только свое количественное присутствие, но и проявлять патогенные свойства. Постоянный антигенный дрейф, наличие или приобретение различных факторов патогенности (экзотоксины, гемолизины, некротизирующий и гемолитический фактор, сидерофоры) затрудняют проведение эффективной специфической профилактики эшерихиоза, что побуждает не только постоянно осуществлять эпизоотологический мониторинг данной инфекции, но изучать и контролировать биологические свойства возбудителя (прежде всего его антибиотикорезистентность и наличие различных маркеров патогенности).

За более чем вековой промежуток времени со дня открытия кишечной палочки и установления ее этиологической роли в развитии диарей у человирования токсигенных штаммов Е. coli, при которых происходит максимальное накопление термолабильного, термостабильного и шигаподобно-го токсинов. Разработан эритроцитарный диагностикум для выявления специфических (антитоксических) антител в сыворотке крови животных после иммунизации эшерихиозным анатоксином. Установлены особенности изменения гематологических показателей, функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов и образования специфических антител в ответ на введение животным различных доз эшерихиозного анатоксина. Выявлено влияние гидроокись алюминия и полиакриловой кислоты на иммунногенные свойства эшерихиозного анатоксина. Изучена протектив-ная активность эшерихиозного анатоксина при экспериментальной коли-энтеротоксимии.

Научная новизна работы подтверждена положительным решением на выдачу патента на изобретение по заявке № 2007112764/13(013860).

Теоретическая и практическая значимость. Результаты проведенных исследований позволили установить оптимальные условия культивирования экзотоксинпродуцирующих штаммов кишечной палочки. В ходе выполнения работы был разработан эритроцитарный диагностикум для выявления антитоксических антител в сыворотке крови у иммунизированных животных. Полученные данные позволили выявить особенность реагирования организма животных в ответ на введение инактивированных токсинов Е. coli, а также установить протективную активность полученного эшерихиозного анатоксина.

Апробация работы. Результаты исследований были доложены на научных конференциях сотрудников факультета ветеринарной медицины Кубанского ГАУ (Краснодар, 2006, 2007, 2008); 1-ой Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых (Краснодар, 2007). Результаты работы были отмечены дипломом 2-й степени.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 научных работ, в т. ч. в рецензируемом журнале рекомендованном ВАК.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- Определение оптимальных условий культивирования энтеротокси-генных эшерихий с контролем накопления токсинов и последующей их инактивацией;

- Особенности влияния различных доз анатоксина на гематологические показатели и функциональную активность нейтрофильных грануло-цитов в динамике;

- Особенность антителообразования в ответ на введение эшерихиоз-ного анатоксина и его протективная активность.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 127 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов исследования, обсуждения результатов исследования, выводов, предложений и списка использованной литературы. Работа включает 32 таблицы и 11 рисунков. Список литературы содержит 186источников, из числа которых 78 иностранных.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Караев, Ян Михайлович

Выводы

1. Для производства анатоксина предпочтительнее использовать авторскую среду, содержащую кислотный гидролизат крови, аутолизат пекраских дрожжей и ферментативный пептон, так как она обеспечивает лучшие условия для продуцирования токсигенными Е.соН выработку термолабильного, термостабильного и шигаподбного токсинов. При этом время инкубирования для получения БТ- и ЬТ-токсинов должно быть не менее 6 дней, БТХ-токсина - не менее 7 дней.

2. Для выявления титров специфических антител у иммунизированных эшерихиозным анатоксином животных разработан эритроцитарный диагно-стикум для РИГА, который в 16 раз является более чувствительным, чем РДП. В качестве носителей антигенного материала предпочтительней использовать формалинизированные эритроциты барана.

3. В ответ на введение эшерихиозного анатоксина в течение первых 24 ч у животных на 10,0-40,8% увеличивается количество нейтрофилов и снижается количество лимфоцитов. Максимальное увеличение количества ней-трофильных гранулоцитов (до 65%) происходило у крыс, которым ввели анатоксин в дозе 0,6 мл. Последующие 48 ч характеризовались выраженным лейкоцитозом при снижении в составе клеток белой крови пула нейтрофилов и повышении лимфоцитов. Спустя 168 ч картина крови подопытных животных не отличалась от таковой у интактных животных.

4. В течение первых 12 ч после введения животным эшерихиозного анатоксина изменение функциональной способности нейтрофильных гранулоцитов характеризовалось повышением их переваривающей активности (до 68-81%), через 24 ч - увеличением количества фагоцитирующих клеток (до 63,4-81,6%) и их захватывающей способности (до 5,3-5,7 клеток стафилококка), а через 72 ч функциональная активность фагоцитов снижалась и спустя 168 ч ничем не отличалась от животных контрольных групп.

5. Повышение фагоцитарной активности нейтрофилов в течение первых 24 ч после введения эшерихиозного анатоксина связано с активизацией их кислородзависимых микробицидных систем и хлорацетатэстеразы с сохранением мобилизационной способности. Высокая доза (0,6 мл) анатоксина инициировала наибольшую активность, но это сопровождалось гипервозбуждением кислородных систем фагоцитов и приводило к истощению их мобилизационных способностей, а также изменению активности МП, ХА и КБ.

6. Через 7 дней после однократного введения эшерихиозного анатоксина в сыворотке крови животных появляются специфические антитоксические антитела, уровень которых был выше у тех из них, которым антиген вводился в меньшей дозе (0,15 мл). При двукратном введении анатоксина уровень антител повышается в 2-3 раза, но продолжительность их нахождения в организме не превышает 3 недель. Использование эшерихиозного анатоксина с ПАК и ГОА в качестве адъювантов способствует усилению в 4-5 раз гуморального иммунного ответа и увеличению продолжительности циркуляции специфических антител. Лучшие адъювантные свойства были получены при использовании анатоксина с ПАК.

7. Эшерихиозный анатоксин обладает выраженными протективными свойствами, т.к. предохраняет до 80% животных от гибели в остром опыте при экспериментальном заражении экзотоксинами кишечной палочки. Его показатель ИД50 в 1,7 раза меньший (0,27 мл), чем у вакцины Коли-Вак (0,45 мл).

Практические предложения

1. Для получения экзотоксинов кишечной палочки лучше использовать жидкую питательную среду, содержащую в качестве основных компонентов гидролизат крови животных, аутолизат пекарских дрожжей и ферментативный пептон.

2. Для выявления в сыворотке крови иммунизированных животных специфических антитоксических антител можно применять реакцию непрямой гемагглютинации с использованием формалинизированных эритроцитов барана сенсибилизированных инактивированными токсинами эшери-хий.

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Караев, Ян Михайлович, 2008 год

1. Алтухов Н. М. Состояние органов пищеварения поросят в зависимости от рационов свиноматок / Н. М. Алтухов // Ветеринария, 1979. №5. - С. 59— 60.

2. Алтухов Н. М. Проблемы патологии обмена веществ в современном животноводстве / Н. М. Алтухов // Воронеж, 1981. - С. 203.

3. Альберте Б. Молекулярная биология клетки: в 3 т. / Б. Альберте, Д. Брей, Дж. Льюис и др. // М.: Мир, 1994. - 504 с.

4. Ашмарин И.П. Статистические методы в микробиологических исследованиях / И.П. Ашмарин, А.А. Воробьев / Л., 1962. - 180 с.

5. Беднягин В.Е. Атипичная форма колибактериоза поросят / В.Е. Бедня-гин // Автореф. дис. канд. вет. наук М., 2000. - 16 с.

6. Белов Л. Г. Холерная вакцина для профилактики диареи у телят / Л. Г. Белов, И. И. Калюжный, И. И. Ирьянов // Ветеринария, 2002. №9. - С. 17— 20.

7. Бовкун Г. Ф. Роль микрофлоры при заболеваниях органов пищеварения у цыплят / Г. Ф. Бовкун // Ветеринария, 2004. №4. - С. 14—16.

8. Бондаренко В. М. «Острова» и «Островки» патогенности бактерий / В. М. Бондаренко // Аграрная Россия, 2002. №2. - С. 33-36.

9. Бондаренко В. М. Токсические биомолекулы патогенных энтеробакте-рий / В. М. Бондаренко // Аграрная Россия, 2002. №2. - С. 29-32.

10. Веревкин В. В., Баннов В. А., Светоч Э. А. Поиск и характеристика бактериофагов, специфически лизирующих Escherichia coli серогруппы 0157 / В.В. Веревкин, В. А. Баннов, Э. А. Светоч // Пробл.биол.и экол.безопасности. Оболенск, 2000. - С. 168-170.

11. Войтенко А. С. Конструирование штаммов Е. coli / А. С. Войтенко, Л. Ф. Ливанова, Г. А. Ерошенко, А. А. Щербаков, Н. И. Смирнова // Ветеринария, 2000. №9. - С. 27-31.

12. Волков И. А. Вакцинопрофилактика колибактериоза свиней / И. А. Волков

13. Ветеринария,2008.- №4.-С. 14-16.

14. Волощик П.А. Использование минеральных премиксов / П.А. Волощик // Свиноводство, 1972. №5. - С. 28-29.

15. Гельман В.Я. Медицинская информатика / В.Я. Гельман // СПб.: Питер, 2001.-480 с.

16. Головко А.Н. Антигенная вариабельность фимбриальных адгезинов Е. coli /А.Н. Головко // Ветеринария, 1997. №8. - С. 23-25.

17. Гуненко В.В., Сухарев Л.И. Инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота / В.В. Гуненко, Л.И. Сухарев // М., 1987. - 59 с.

18. Девришов Д.А. Экспериментальное испытание ассоциированной инакти-вированной вакцины ОКЗ / Д.А. Девришов, Е.С. Воронин, З.М. Бедоева, В.В. Шведов//Ветеринария, 1998. -№12. С. 12-14.

19. Джупина С.И. Факторные инфекционные болезни животных. / С.И. Джу-пина // Ветеринария, 2001. №3. - С. 6-9.

20. Дж. Хейхоу Ф.Г. Гематологическая цитохимия / Ф.Г. Дж. Хейхоу, Д. Гваг-лино//-М.: Медицина, 1983.-С. 155-175.

21. Долгушин И.И. Нейтрофилы и гомеостаз / И.И. Долгушин, П. Бухарин // -Екатеринбург: Уро РАН, 2001. 278 с.

22. Дурдыев Ш.К. Влияние Е. coli на организм птиц, вакцинированных против ньюкаслской болезни / Ш.К. Дурдыев // Ветеринария, 2002. №2. - С. 2526.

23. Езепчук Ю.В. Патогенность как функции биомолекул. М.: Медицина. 1985.- 158 с.

24. Емельяненко П.А Защита норок от бактериальных энтеротоксинов / П.А. Емельяненко, A.A. Егоров, В.М. Мамушкин, Н.М. Лупанова //

25. Кролиководство и звероводство, 2000. №6. - С. 24.

26. Емельяненко П.А. Эитеротоксины кишечных бактерий / П.А. Емельяненко // Ветеринария, 2000. №2. - С. 25-27.

27. Жосан H.H. Диагностика колибактериоза новорожденных телят / H.H. Жосан // Диагностика и специф. профилактика инфекц. болезней животных и птиц. Кишинев, 1989. - С. 39-41.

28. Зароза В.Г. Эшерихиоз телят. / В.Г. Зароза // М.: Агропромиздат, 1991.-239 с.

29. Земсков В.М. Фагоцитоз: физиологические и молекулярные аспекты /

30. B.М. Земсков // Успехи современной биологии. 1984. - Т. 98. - Вып. 2.-С. 219-234.

31. Иманалиев М. Колибактериоз телят и разработка средств специфической профилактики / М. Иманалиев // Автореф. дис. докт. вет. наук. -Фрунзе, 1990.-48 с.

32. Исхаков О.З. Анализ экономических исследований в ветеринарии / О.З. Исхаков, Л.Я. Юшкова, Т.А. Копылова // Ветеринария, 1993. № 2.1. C. 60-63.

33. Камышников B.C. О чем говорят медицинские анализы / B.C. Камышников // Справочное пособие. Минск: Беларуская навука, 1997. - 198 с.

34. Каральник Б.В. Сравнительная оценка стабилизации эритроцитов для реакций пассивной гемагглютинации формальдегидом и ацетальдеги-дом / Б.В, Каральник, В.А, Шамардин, М.Ф. Шмутер // М.: Вакцины и сыворотки, 1973. - №20. - С. 122.

35. Караулов A.B. Клиническая иммунология / A.B. Караулов // М.: Медицинское информационное агентство, 1999. - 604 с.

36. Клечанов В. К. Применение стационарно выращенных бульонных культур для получения энтеротоксинов эшерихий / В. К. Клечанов // Журн. микро-биол., эпидемиол. и иммунобиол. 1982. — № 3. - С. 45—48.

37. Клиническая интерпретация лабораторных исследований / под ред. А. Б.1.l

38. Белевитина, С. Г. Щербаков //-СПб.: ЭЛБИ-СПб, 2006. 384 с.

39. Клиническая лабораторная аналитика / под ред. В. В. Меньшикова // Частные аналитические технологии. 1999. - Т П. - С. 57-58.

40. Клиническая цитохимия / под ред. А. В. Ягоды, Н. А. Локтевой // Ставрополь. Изд.: СтГМА, 2005. - 485 с.

41. Клюкина Н.Д. Полиакриловая кислота как адъювант в противоящурной вакцине / Н.Д. Клюкина // Автореферат дисс. на соискание ученой степени канд. вет. наук. Владимир, 2007. - 24 с.

42. Кольчак В.В. Предупреждение колибактериоза телят. Амурская область./ В.В. Кольчак // Ветеринария, 1986. №3. - С. 15-16.

43. Коробов А. В. Эффективность препарата лентон при желудочно-кишечных болезнях телят / А.В. Коробов, Л.К. Антипова, П.А. Ленин, Н.Г. Кирюхина // Ветеринария, 2001. №11. - С. 17-18.

44. Коткова Н.В. Экспериментальная колиэнтеротоксемия, обусловленная шигаподобным токсином Escherichia coli / Н.В. Коткова // Дисс. на соискание ученой степени канд. вет. наук. Краснодар, 2007.

45. Кочанова С.Я. Общие вопросы профилактики болезней сельскохозяйственных животных. М.: ВНИИТЭИСХ, 1980. С. 34-57.

46. Курашвили Т.К. Адгезивный антиген К88 ad Е. coli / Т.К. Курашвили, Н.А. Соколова // Ветеринария, 1991.- №3. С. 26-27.

47. Лабораторные тесты. Микробиологическая и вирусологическая диагностика. Справочник в 3-х частях. Под общей редакцией проф. М.Х. Турьянова. Редактор-составитель к. м. н. М.О. Биргер. Справочная библиотека врача. Выпуск №9. М., КАППА, 1995.

48. Маянский А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский // Новосибирск: Наука, 1983. - 92 с.

49. Маянский А.Н. Актуальные проблемы фагоцитоза / А.Н. Маянский // Моделирование и клиническая характеристика фагоцитарных реакций: респ. сб. науч. тр., под ред. А.Н. Маянского. Горьков. мед. ин-т; Горький, 1989.-С. 3-15.

50. Маянский А.Н. Клинические аспекты фагоцитоза / А.Н. Маянский, О.И. Пикуза//-Казань: Магариф, 1993.- 192 с.

51. Маянский А.Н. Проблема управления фагоцитарными механизмами / А.Н. Маянский, H.A. Невмятуллин, H.A. Маянский // Журн. микро-биол., эпидемиол. и иммунобиол. 1995. - № 3. - С. 21-26.

52. Медицинская микробиология / Гл. ред. В.И. Покровский, O.K. Поздеев //-М.:ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1999.- 1200 с.

53. Медуницин Н.В. Вакцинология / Н.В. Медуницын // М.: «Триада-Х», 1999.-272 с.

54. Методы оценки функциональной активности гранулоцитов. Методические рекомендации / И.В. Нестерова, Н.В. Колесникова, Г.А. Чудилова //-Краснодар, 1993. -20 с.

55. Мищенко В.А. Меры борьбы с диареями новорожденных телят / В.А. Мищенко, H.A. Яременко, Д.К. Павлов и др. // Ветеринария, 2002. №4. -С.16-19.

56. Мозжухин Ю.П. О некоторых особенностях краевой эпизоотологии инфекционных заболеваний молодняка сельскохозяйственных животных в Амурской области / Ю.П. Мозжухин // Ветеринария, 1959. №4. - С.ЗЗ-36.

57. Моргунова В.И. Возможность и динамика адгезии эшерихий в эксперименте на поросятах / В.И. Моргунова, Н.М. Алтухов // Акту-ал.пробл.ветеринарии. Барнаул, 1995. - С. 79.

58. Нестерова И.С. Распространение Esherichia coli 0157:Н7 среди мелких домашних животных / И.С. Нестерова, В.Ю. Коптев, H.A. Шкиль // Российский ветеринарный журнал. Мелкие домашние и дикие животные, 2005. №3. - С. 3-34.

59. Определитель бактерий Берджи в 2-х т.: Пер. с англ. / Под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снита и др // М.: Мир, 1997. - 800 с.

60. Панин А.Н. Иммунобиология и кишечная микрофлора / А.Н. Панин, Н.И. Малик, Е.В. Малик // М.: Аграр. наука, 1998. - 47 с.

61. Пальцев М. А. Межклеточные взаимодействия / М. А. Пальцев, А. А. Иванов. М.: Медицина, 1995. - 224 с.

62. Паутова И.Г. Изучение условий культивирования штамма HI9 Е. coli для получения шигеллоподобного токсина / И.Г. Паутова, Ю.В. Верти-ев, И.С. Николаева // Сборник научных трудов НИИЭиМ им Н.Ф. Гамалеи «Бактериальные токсины». Москва, 1987. - С. 103-108.

63. Петров Р. В. Искусственные антигены и вакцины / Р.В. Петров, P.M. Хаитов / М.: Медицина, 1988. - 304 с.

64. Пигаревский В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства / В.Е. Пигарев-ский // —М.: Медицина, 1978.- 128 с.

65. Пирожков М.К. Биологические препараты для специфической профилактики и терапии эшерихиоза животных / М.К. Пирожков // Дисс. док. вет. наук. Москва., 2002. - 298 с.

66. Покровский В. И. Иммунология инфекционного процесса / В. И Покровский, С. П. Гордиенко, В. И. Литвинова / Руководство для врачей -М., 1994.- 304 с.

67. Полякова О. А. Колибактериоз одна из причин заболевания новорожденных телят / О. А. Полякова // Ветеринария, 1976. - №7. - С. 59-61.

68. Простяков А. П. Ветеринарные проблемы промышленного свиноводства / А.П.Простяков //-Киев, 1983.-159с.

69. Ракова Т. Н. Развитие поросят под влиянием премиксов и устойчивость к диспепсии / Т. Н. Ракова, Ю. Н. Кондратьев // Ветеринария, 1978. №5. -С. 90-92.

70. Ратинер Ю.А. Энтерогеморрагические кишечные палочки и вызываемые ими заболевания / Ю.А. Ратинер, В.М. Бондаренко, А. Зкопеп // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунологии, 1998. №5. - С. 87-96.

71. Розанов Н.И. Микробиологическая диагностика заболеваний сельскохозяйственных животных / Н.И. Розанов // М., Гос. из-во с.-х. литературы. - 1952.- С.88-91.

72. Ройт А. Иммунология // А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл. М.: Мир, 2000. - 592 с.

73. Романов Е.А. Производственное испытание ассоциированной вакцины против инфекционноной диареи новоржденных телят / Е.А. Романов // Науч. основы пр-ва вет. биол. препаратов. Щелково, 2000. - С.70-71.

74. Романов Е.А. Эксперементальная оценка эффективности ассоциированной вакцины против инфекционной диареи новорожденных телят / Е.А. Романов, Гаффаров Х.З., Спирдонов Н.Г. // Науч. основы пр-ва вет. биол. препаратов. Щелково, 2000. - С. 68-70.

75. Романов Е.А. Эффективность ассоциированной вакцины против диареи телят смешанной этиологии / Е.А. Романов, Х.З. Гаффаров, E.JI. Матвеева, Г.Н. Спиридонов, И.Н. Залялов // Ветеринария, 2000. №12. - С. 18-20.

76. Ряпис Л.А., Характеристика штаммов Escherichia coli 0157:Н7, изолированных на территориях Центрального Федерального округа / Л.А. Ряпис, Н.Н. Филатов, Н.Я. Салов, и др. // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2005- №1. - С. 7—11.

77. Светоч Э.А. Фено- и генотипические свойства штаммов Е. coli, продуцирующих антиген К88 / Э.А. Светоч, Е.И. Попов, В.В. Гусев // Ветеринария, 1997. № 11. С. 19-23.

78. Светоч Э.А. Проблемы медицинской и экологической биотехнологии. Оболенск, 1999. - 248 с.

79. Светоч Э.А. Этиология постотъемной колидиареи свиней / Э.А. Светоч,

80. B.В. Гусев // Ветеринария, 2005. №12. - С. 23-26.

81. Селиванова О.М. Протеолиз рибосомного белка SI из Escherichia coli и Thermus thermophilic приводит к образованию двух разных фрагментов / О.М. Селиванова, Ю.Ю. Федорова, И.Н. Сердюк // Биохимия, 2007. -Т. 72.-N 11.-С. 1506-1514.

82. Сидорчук А.А. Оценка иммунологической эффективности различных адъювантов при изготовлении бактериальных вакцин / А.А. Сидорчук,

83. C.Д. Панасюк, Ю.Н. Федоров /Тр. ВИЭВ, 1989 Т. 67. - С. 3-10.

84. Староселов М.А. Оценка сравнительной эффективности иммунокорректо-ров для повышения резистентности крупного рогатого скота / М.А. Староселов // Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук. Краснодар, 2008.

85. Степанова М.В. Изучение продукции термостабильного энтеротоксина штаммами кишечной палочки / М.В. Степанова, Ю.В. Езепчук // Сборник научных трудов НИИЭиМ им Н.Ф. Гамалеи «Бактериальные токсины» Москва, 1987. - С. 157-162.

86. Степаншин Ю.Г. Бактерионосительство энтерогемморагических эше-рихий серовара 0157:Н7 у животных / Ю.Г. Степаншин, Э.А. Светоч, Б.В. Ерусланов и др. // Ветеринария, 2005. №7. - С. 17-23.

87. Субботин В.В. Профилактика желудочно-кишечных болезней новорожденных животных с симптомокомплексом диареи /В.В. Субботин, М.А. Сидоров // Ветеринария, 2001. №4. - С. 3-8.

88. Супотницкий М.В. ДНК иммунизация в профилактике инфекционных болезней сельскохозяйственных животных / М.В. Супотницкий // Ветеринария, 1998. №5. - С. 18-24.

89. Татарчук О.П. Апрамицин в борьбе с отечной болезнью поросят / О.П. Татарчук / Российский ветер, журнал. Селькохозяйственные животные, 2005.-№4.-С. 28-29.

90. Терехов В. И. Способ приготовления кормовой добавки / В. И. Терехов, С. Н. Тельнов, А. Н. Марков // Патент РФ на изобретение № 2186497.-2000.

91. Терехов В. И. Способ биотестирования токсигенности кишечной палочки / В. И. Терехов // Патент РФ на изобретение № 2262529. 2003.

92. Тотолян А.А. Клетки иммунной системы. Нейтрофилы / А.А. Тотолян, И.С. Фрейдлин // СПб.: Наука, 2000. - 231 с.

93. Троценко Н.И. Практикум по ветеринарной вирусологии / Н.И. Трощенко, Р.В. Белоусова, Э.А. Преображенская // М., 2000, - С. 132— 143.

94. Турдиев Ш.А. Клинико-эпизоотологическое проявление колибактерио-за телят и их лечение в условиях республики Таджикистан / Ш.А. Турдиев // Автореф. дис. канд. вет. наук. Душанбе, 1997. - 24 с.

95. Урбан В.П. Болезни молодняка в промышленном животноводстве / В.П. Урбан, И.Л. Найманов // М.: Колос, 1984. - 207 с.

96. Ушкалов В.А. Факторы патогенности Е. coli выделенных от телят / В.А. Ушкалов, А.Н. Головко // Ветеринария, 1992. №4. - С. 23-24.

97. Федоров Ю.Н. Иммунопрофилактика болезней новорожденных телят / Ю.Н. федоров // Ветеринария, 1996, - №11.- С. 3-6.

98. Федотова Г. Г. Морфофункциональное исследование нейтрофилов в условиях эндотоксикоза / Г. Г, Федотова // Дисс. док. биол. наук. Саранск, 2007.-292 с.

99. Фокин А. А. Разработка технологии изготовления и оценка эффективности ассоциированной вакцины против гемофилезного полисерозита, отечной болезни и эшерихиоза поросят-отъемышей / А. А. Фокин // Дисс. соиск. Канд. вет. наук. Казань, 2005. - 178 с.

100. Хитрова А.Е. Оценка антигенной активности вирусных компонентов опытной серии вакцины «Комбовак-К» на лабораторных животных / А.Е. Хитрова // Актуал. пробл. инфекц. патологии животных. Владимир, 2003. -С. 438-441.

101. Хитрова А.Е. Эффективность применения комбинированных вакцин серии Комбовак / А.Е. Хитрова, В.А. Сергеева, Т.И. Алипер, O.A. Верховский //

102. Ветеринария, 2006. №9. - С. 17-20.

103. Частная медицинская микробиология с техникой микробиологических исследований / под ред. А.С.Лабинской, Л.П.Блинковой, А.С.Ещиной // М.: Медицина, 2005. - С. 480.

104. Шульга Н.Н. Ситуация по колибактериозу телят в Амурской области / Н.Н. Шульга, Н.В. Яковлева // Ветеринария, 2006. №7. - С. 21-23.

105. Щербаков П.Н. Профилактика и лечение при желудочно-кишечных и респираторных болезнях телят / П.Н. Щербаков, А.Г. Гусев // Ветеринария, 2002.-№3.-С. 15-16.

106. Щипков В.П. Плазмиды и патогенность бактерий / В.П. Щипков, А.П. Пе-хов // Аграрная Россия. 2002. - №2. - С. 36-42.

107. Acres S.D. Enterotoxigenic Escherichia coli infections in newborn calves / S.D. Acres // J. Dairy Sc., 1985. Vol. 68. - N1. - P. 229-256.

108. Alexa P. Differentiation of verotoxigenic strains of Escherichia coli isolated from piglets and calves in the Czech Republic / P. Alexa, E. Salajka, J. Hamrik // Veter.Med. Praha, 2000 - R.45 - C.2. - S. 39-43.

109. Alexa P. Kombinovana parenteralni a oralni imunizace proti prujmu selat po odstavu vyvolanemu enterotoxigennimi kmeny Escherichia coli / P. Alexa, E. Salajka, Z. Salajkova // Veter.Med., Praha 1995 - Vol.40. - N 12. - S. 365-370.

110. Alexa P. Oedema disease of swine:formation of antibodies neutralizing Shiga-like toxin IIv piglets immunized with the toxoid SLTII / P. Alexa, E. Salajka, J. Hamrik // Veter.Med. Praha, 1998 - R.43 - c.l. - S. 11-16.

111. Alexa P. The occurrence of diarrhoea in piglets after birth caused by Escherichia with the factor 987P and its prevention / P. Alexa, E. Salajka, Z.

112. Salajkova // Proceedings. 2a, 1987. S. 12.

113. Alexa P. Edemova nemoc selat po odstavu / P. Alexa, J. Hamrik, E. Salajka // Veterinarstvi, 2000 R.50 - C.5. - S. 179-182.

114. Baker D.R. Distribution of K88 Escherichia coli-adhesive and nonadhesive phenotypes among pigs of four breeds / D.R. Baker, L.O. Billey, D.H. Francis//Veter.Microbiol. 1997-Vol.54-N 2.-P. 123-132.

115. Bertschinger H.U. Grundsatzliche Aspekte der Vakzination gegen neonatale Colidiarrhoe beim Schwein / H.U. Bertschinger // Schweiz. Arch. Tierheilk, 1984 -T. 126. N 2. - S. 59-63.

116. Bertschinger H.U. Orale Vakzination von Ferkeln gegen Colienterotoxamie mit einer Streptomycin-Deoendenz-Revertante von Escherichia coli / H.U. Bertschinger, H. Jucker, H.P. Pfirter // Schweiz. Arch. Tierheilk, 1984. T. 126.-N 10.-S. 497-509.

117. Bertschinger H.U. Vererbte Resistenz gegen Colienterotoxamie beim Schwein / H.U. Bertschinger, M. Munz-Muller, H.P. Pfirter, A. Schneider // J. anim. Breedg Genet, 1986. T. 103. - N 4. - p. 255-264.

118. Bertschinger H.U. Inheritance of resistance to oedema disease in the pig:Experiments with an Escherichia coli strain expressing fimbriae 107 / H.U. Bertschinger, M. Stamm, P. Vogeli // Veter.Microbiol., 1993. Vol. 35.-N1/2.-P. 79-89.

119. Booher S.L. Persistence of Escherichia coli 0157:H7 in experimentally infected swine / S.L Booher, N.A. Cornick, H.W. Moon // Veter. Microbiol. -2002. Vol. 89, X1. - P. 69-81.

120. Castrucci G. The efficacy of Colostrums from cows vaccinated with rotavirus in protecting calves to experimentally induced rotavirus infection / G. Castrucci // Comp. Immunol. Microbiol. Infect. Dis., 1984. Vol. 7. -N.l. - P. 11-18.

121. Clark R. A. Two cytostatic components of the human neutrophil respiratory burst oxidase translocate to the plasma membrane during cell activation / R. A. Clark, B. D. Volpp, K. G. Leidal et al. // J. Clin. Invest. 1990. - Vol. 85. -P. 714—721.

122. Da Suva A. S. Investigation of putative CDT gene in Escherichia coli isolates from pigs with diarrhea / A. S. Da Siiva, S. Leite // Veter. Microbiol 2002. - Vol. 89, N 2/3. - P. 195-199.

123. Dean E.A. Age-specific colonization of porcine intestinal epithelium by 987P-piliated enterotoxigenic Escherichia coli / E.A. Dean, S.C. Whipp, H.W. Moon // Infect. Immun. 1989. - T. 57. - N 1. - P. 82-87.

124. Dean-Nystrom E.A. A monoclonal antibody identifies 2134P fimbriae as adhesins on enterotoxigenic Escherichia coli isolated from postweaning pigs /E.A. Dean-Nystrom, T.A. Casey, R.A. Schneider// Veter.Microbiol, 1993 -Vol.37-N 1/2.-P. 101-114.

125. Duquesne-Purina Le Colibacilie Ol03 // Cuniculture Fr, 1986 T. 67. - P. 25-27.

126. Dube J.P. La diarrhee chez les veaux nouveau-nes / J.P. Dube // Producteur agr., 1990.-T. 13.

127. Ewald P. W. Evolution of infectious disease / P. W. Ewald // Oxford: Oxford University Press, 1994.

128. Greene H. J. Some recent fidings on the prevention and treatment of neonatal calf diarrhea / H. J. Greene // Irish veter. J., 1984. T. 38. - №4. - P. 6870.

129. Hadzimuratovic M. Enteropatogeni sojevic E. coli kao uzrocnici kolibaciloze teladi na govedarskim uzgojima u Bosni i Hercegovini / M. Hadzimuratovic, R. Cutuk, A. Nevjestic // Veterinaria (Sarajevo), 1991. T. 40.-№ 112. -S. 99-111.

130. Huebert M. Field testing a bacterin-toxoid that protects swine litters from enteric colibacillosis / M. Huebert, D.E. Cochran, T. Wetzell / Veter. Med., 1989; T. 84. N. 2,-p. 219-221.

131. Ikemori Y. Avidity of chicken yolk antibodies to enterotoxigenic Escherichia coli fimbriae / Y. Ikemori, R.C. Peralta, M. Kuroki, H. Yokoyama, Y. Kodama//Poultry Sc. 1993. - Vol. 72. -N 12. - P. 2361-2365.

132. Imberechts H. Prevalence of Fl 07 fimbriae on Escherichia coli isolated from pigs with oedema disease or postweaning diarrhoea / H. Imberechts, H.U. Bertschinger, M. Stamm // Veter.Microbiol, 1994; Vol.40,N 3/4. P. 219230.

133. Irino K. Serotypes and virulence markers of Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) isolated from dairy cattle in Sao Paulo State, Brazil. / K. Irino, M.A.M.F. Kato, T.M.I. Vaz //Veterinary Microbiology, Jan2005 -Vol. 105 Issue 1. - P. 29-36.

134. Kang S.J., Occurrence and characteristics of tinterohemorrhagic Escherichia coli 0157 in calves associated with diarrhoea / Kang S.J., Ryu S.J., С пае J.S., Ко S.K., Woo G.J., I.ee J.H. // Veterinary Microbiology. 2004. -Vol. 98, N 3/4. - P. 321-328.

135. Kielstein P. Zur Chemotherapie und Bekaempfung von Koliinfektionen und

136. Schweinedysenterie /.P. Kielstein, W. Wittig, K. Lutter // Mh. Veter.-Med, 1984 T. 39. - N 16. - S. 541-547.

137. Klebanoff S.J. Oxygen metabolism and the toxic properties of phagocytes / SJ. Klebanoff// Ann. Intern. Med. 1980. - Vol. 93. - P. 480-489.

138. Kuzuya M. Purification of K88 and K99 pili from porcine enterotoxigenic Escherichia coli by affinity chromatography / M. Kuzuya, H. Yokoyama, Y. Kodama // Japan. J. veter. Sc. 1988 - T. 50. -N 4. - p. 951-95.

139. Leclerc B. Evaluation of the adhesive capacity of Escherichia coli isolates associated with avian cellulitis / B. Leclerc, J.M. Fairbrother, M. Bou-lianne,S. Messier// Avian Dis.-2003. Vol. 47, N 1. - 121-31.

140. Matise I. Vascular ultrastructure and DNA fragmentation in swine infected with shiga toxin-producing Escherichia coli /1. Matise, T. Sirinarumitr, B.T. Bosworth, H.W. Moon // Veter. Pathol., 2000. Vol. 37. - N 4. - P. 318327.

141. Moon H.W. Comparative prevalence of four enterotoxin genes among Escherichia coli isolated from swine / H.W Moon, R.A Schneider, S.L. Mose-ley // Am. J. veter. Res 1986 - T. 47. - N 2. - p. 210-212.

142. Moon H.W. Effects of an orally administered live Escherichia coli pilus vaccine on duration of lacteal immunity to enterotoxigenic Escherichia coli in swine / H.W. Moon, D.G. Rogers, R. Rose // Am. J. veter. Res. 1988 -T. 49.-N 12.-p. 2068-2071.

143. Moon H.W. Prevalences of some virulence genes among Escherichia coli isolates from swine presented to a diagnostic laboratory in Iowa / H.W. Moon, L.J. Hoffman, N.A Cornick // J.veter.diagnostic Investig., 1999; -Vol.ll.-N6.-P. 557-560.

144. Moon H.W. Prevalence of virulence factors among hemolytic Escherichiacoli / H.W. Moon, N.A. Cornick, L.J. Hoffman // AS publ. Iowa State Univ.Coop.Extens.Serv Ames(Iowa) , 1998 -N 638 - P. 148-149.

145. Morris J.A., Chanter N., Sherwood D. Occurrence and properties of FY(Att25)+ Escherichia coli associated with diarrhoea in calves / J.A. Morris , N. Chanter, D. Sherwood // Veter. Rec, 1987; T. 121. N 9. p. 189-191.

146. Morris J.A. Serological comparison of the Escherichia coli prototype strains for the F (Y) and Att 25 adhesins implicated in neonatal diarrhoea in calves / J.A. Morris, W.J. Sojka, R.A. Ready // Res. in veter. Sc, 1985 - T. 38. - N 2. - P. 246-247.

147. Nagy B. Apilus- (fimbria-) vakcinak human- es allatorvosi jelentosege / B. Nagy // Magyar allatorv. Lapja 1984 - T. 39. - N 3. - p. 131-136.

148. Nogrady N. Class 1 integrons and their conjugal transfer with and without virulence-associated genes in extra-intestinal and intestinal Escherichia coli of poultry / N. Nogrady, J. Paszti, H. Piko // Avian Pathology 2006 -Vol.35-N4.-P. 349-356.

149. Osek J. Molecular characterisation of shiga toxin-producing Escherichia coli 0157 strains isolated in Poland / J. Osek // Res. in veter. Sc. 2001. -Vol. 70, X2.-P. 175-177.

150. Osek J. Detection of cytolethal distending toxin genes in shiga toxin-producing Escherichia coli isolated from different sources / J. Osek // Bull. Veter. Inst. 2005. - Vol. 49, N 2. - P. 153-156.

151. Oswald E. Detection of Escherichia coli strains producing cytotoxic necrotizing factor type two (CNF2) by enzyme linked immunosorbent assay / E. Oswald, M. Sugai, A. Labigne, et al. // PNAS., 1994. - V. 91. - P. 38143818.

152. Penteado A.S. Serobiotypes and virulence genes of Escherichia coli strains isolated from diarrheic and healthy rabbits in Brazil / A.S. Penteado, L.A. Ugrinovich, J. Blanco et al. // Veter. Microbiol. 2002. Vol. 89, N 1. - P. 41-51.

153. Pospischil A. Attaching and effacing bacteria in the intestines of calves and cats with diarrhea / A. Pospischil, J.G Mainil, G. Baljer // Veter. Pathol -1987 T. 24. - N 4. - p. 330 - 334.

154. Python P.; H. Fine-mapping of the intestinal receptor locus for enterotoxigenic Escherichia coli F4ac on porcine chromosome 13 / P. Python, H. Jorg, S. Neuenschwander // Anim.Genet., 2002 T.33 - N 6. - P. 441^47.

155. Rippinger P. Designations F18ab and F18ac for the related fimbrial types Fl07, 2134p and 8813 of Escherichia coli isolated from porcine postwean-ing diarrhea and from oedema disease / P. Rippinger // Vet. Microbiol. -1995.-Vol. 45. -P.281-295.

156. Rossi F. Mechanisms and functions of thee oxygen radicals producing respiration of phagocytes / F. Rossi, B. Delia, P. De Togni // Comp. Immuniol. -1985.-Vol. 8.-P. 187-204.

157. Runnels P.L., Moon H.W. Capsule reduces adherence of enterotoxigenic Escherichia coli to isolated intestinal epithelial ceels of pigs / P.L. Runnels, H.W. Moon // Infect. Immun. 1984 - T. 45. - N 3. - p. 737-740.

158. Runnels R.L. Effects of microbial and host variables on the interaction ofrotavirus and Escherichia coli infections in gnotobiotic salves / R.L Runnels, H.W. Moon , P.J. Matthews // Am. J. veter. Res. 1986 - T. - 47. - N 7. -p. 1542-1550.

159. Said A.M. Factours et marguens de virulence de souche Escherichia coli isoles de diarrhees chez des veaux ages de 4 a 45 jons en Algerie / A.M. Said, M. Contrepois, V.M. Per // Rev. evel. et med. vet. pays, troh., 1994. -Vol. 47.-N2.-P. 169-175.

160. Sarmiento J.I. Effects of weaning on diarrhea caused by enterotoxigenic Escherichia coli in three-week-old pigs / J.I. Sarmiento, E.A Dean, H.W. Moon // Am. J. veter. Res 1988 - T. 49. - N 12. - p. 2030-2033.

161. Sarmiento J.I. Effects of preweaning exposure to a starter diet on enterotoxigenic Escherichia coli-induced postweaning diarrhea in swine / J.I Sarmiento, P.L. Punnels, H.W. Moon // Am. J. veter. Res 1990 - T. - 51. - N 8.-p. 1180-1183.

162. Sarrazin E. Role of fimbriae Fl8 for actively acquired immunity against porcine enterotoxigenic Escherichia coli / E. Sarrazin, H.U. Bertschinger // Veter.Microbiol., 1997. Vol. 54. - N 2. - P. 133-144.

163. Sengelov H. Mobilization of granules and secretory vesicles during in vivo exudation of human neutrophils / H. Sengelov, P. Follin, L. Kjeldsen et al. // J. Immunol. 1995. - Vol. 154. - P. 4157.

164. Skyberg J.A. Characterizing avian Escherichia coli isolates with multiplex polymerase chain reaction / J.A. Skyberg, S.M. Home, C.W. Giddings, R.E. Wooley, P.S. Gibbs, L.K. Nolan // Avian Ow. 2003. - Vol. 47. - N 4. - P.1441-1447.

165. Snoeck V. Influence of porcine intestinal pH and gastric digestion on a.ntigcnicity of F4 fimbriae for oral immunisation / V. Snoeck, B. Cox, F.

166. Verdonck, J. Joensuu, B. Goddeeris // Veterinary Microbiology. 2004. -Vol. 98.-N1.-P. 45-53.

167. Sollner T. A protein assembly-disassembly pathway in vitro that correspond to sequential steps of synaptic vesicle docking, activation, and fusion / T. Sollner, M. K. Bennett, S. W. Whiteheart et al. // Cell 1993. - Vol. 75. - P. 409-418.

168. Stepanek J. Nova polyvalentni vakcina proti enteralnim infekcim novo-rozenych telat / J. Stepanek, E. Salajka, A. Zuffa // Veter. Med. Praha, 1987 - T. 32. - N 2. - S. 65-80.

169. To S.C. Type 1 pili (Fl) of porcine enterotoxigenic Escherichia coli: Vaccine trial and tests for production in the small intestine during disease / S.C. To, H.W. Moon, P.L. Runnels // Infect. Immun. 1984. - T. 43. - N 1. - P. 1-5.

170. Tzipori S. The aetiology and diagnosis of calf diarrhoea / S. Tzipori // Veter. Rec.- 1981.-Vol. 108.-N 13.-P. 510-514.

171. Valpotic I. Phenotyping of pigs for the presence of intestinal receptors mediating adhesion of enterotoxigenic Escherichia coli-bearing K88ac pilus antigen by ELISA / I. Valpotic, E.A. Dean, H.W Moon // Veter. Arh 1979.1. T. 59.-N4.-s. 161-175.

172. Whipp S.C. Microscopic alterations in jejunal epithelium of 3-week-old pigs induced by pig-specific, mouse-negative,heat-stable Escherichia coli entero-toxin / S.C Whipp, S.L Moseley, H.W Moon // Am. J. veter. Res 1986. -T. - 47.-N3.-p. 615-618.

173. Wittig W.Virulenzfaktoren bei tierpathogenen Escherichia-coli-staemmen Mh. / W. Wittig // Veter. Med 1983. - T. 38. - N 19. - S. 721-722.

174. Zurek L., Evaluation of the German cockroach (Blattella germanica) as a vector for verotoxigenic Escherichia coli F18 in confined swine production / L. Zurek, C. Schal // Veterinary Microbiology. 2004. - Vol. 101. - N 4. - P. 263-267.