Генетический полиморфизм тиопуринметилтрансферазы у детей с гемобластозами, хроническими заболеваниями, здоровых детей и взрослых, жителей России тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.09, кандидат медицинских наук Руднева, Анастасия Евгеньевна

• Руднева, Анастасия Евгеньевна
• кандидат медицинских наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Руднева, Анастасия Евгеньевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ТИОПУРИНМЕТИЛТР АНС ФЕР АЗ А, ЕЕ РОЛЬ В МЕТАБОЛИЗМЕ ПУРИНОВЫХ ОСНОВАНИЙ. ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПОЛИМОРФИЗМ ТПМТ И ЕГО КЛИНИЧЕСКОЕ

ЗНАЧЕНИЕ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

Пуриновые препараты в клинической практике.

Метаболизм и механизм действия пуриновых препаратов.

Открытие и биохимические свойства ТПМТ.

Непосредственное измерение активности ТПМТ.

Полиморфизм гена ТПМТ и его исследование.

Биохимические свойства мутантной ТПМТ.

Токсичность пуринов у лиц со сниженной активностью ТПМТ.

Влияние активности ТПМТ на результаты терапии пуринами.

Ассоциация генетического дефекта ТПМТ с транслокацией t(12;21) TEL/AML в бластных клетках при ОЛЛ.

Популяционные исследования полиморфизма ТПМТ.

Активность ТПМТ и мутации гена ТПМТ у обследованных с разными заболеваниями.

Фармакоэкономические аспекты исследования генотипа ТПМТ.34 Проблемы расовой и национальной принадлежности.

ГЛАВА 2. ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХ И МЕТОДЫ

ИССЛЕДОВАНИЯ.

Набор материала.

Формирование групп обследованных.

Определение расовой принадлежности обследованных.

Генотипирование.

Анализ выживаемости у детей с ОЛЛ.

Статистические методы.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Общая характеристика носителей мутантных аллелей гена

ТПМТ.

Частота и варианты выявленных мутантных аллелей гена

ТПМТ.

Частота и варианты мутантных аллелей гена ТПМТ у детей с онкологическими заболеваниями и в группе сравнения.

Частота и варианты мутантных аллелей гена ТПМТ у представителей разных рас.

Варианты мутантных аллелей гена ТПМТ в регионах Российской

Федерации.

Анализ некоторых биологических характеристик бластных клеток и результатов лечения ОЛЛ у пациентов — носителей мутантной аллели и гомозигот по «дикой» аллели гена ТПМТ.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Генетический полиморфизм тиопуринметилтрансферазы у детей с гемобластозами, хроническими заболеваниями, здоровых детей и взрослых, жителей России»

Пуриновые препараты (6-меркаптопурин (6-МП), 6-тиогуанин (6-ТГ) и азатиоприн (АЗА)) применяются в тех областях медицины, где необходимо достижение антипролиферативного и цитотоксического эффекта (онкогематология, клиническая иммунология, трансплантация органов и др.). Выраженность цитотоксического действия пуриновых препаратов зависит, в частности, от активности фермента тиопуринметилтрансферазы (ТПМТ) в тканях организма [65].

Снижение активности ТПМТ, возникающее вследствие точечных мутаций в гене ТПМТ, приводит к увеличению гематологической токсичности экзогенных пуринов [14, 26, 65], поэтому терапия пуриновыми препаратами у лиц с ТПМТ-недостаточностью сопряжена с рядом проблем. У носителей мутантных аллелей применение пуриновых препаратов в стандартных дозах, используемых в программном лечении лейкозов (6-МП в гу дозе 50-75 мг/м /сут), иммунологических заболеваний и для профилактики отторжения органов (АЗА в дозе 1-3 мг/кг/сут), вызывает выраженную миелосупрессию и цитопению. В этих условиях повышается риск развития тяжелых, иногда смертельных, инфекционных осложнений; приходится прерывать прием не только пуриновых препаратов, но и других иммуносупрессивных агентов [13, 14, 30, 79, 92]. Перерывы в терапии отрицательно сказываются на результатах лечения основного заболевания, а стоимость терапии многократно увеличивается [14, 71, 92, 99]. Кроме того, лица с низкой активностью ТПМТ имеют повышенный риск развития вторичных опухолей после терапии острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ) [81, 88, 101]. Для таких пациентов возможным решением проблемы является применение альтернативных схем лечения (без азатиоприна) в иммунологии и трансплантологии или снижение доз пуринов при лечении лейкозов. При лечении ОЛЛ снижение доз пуринов для пациентов с недостаточностью ТПМТ позволяет избежать токсических осложнений и применять остальные химиопрепараты в полных дозах. Эффективность терапии при этом не снижается [8, 29, 30, 62, 72].

Многие исследователи рекомендуют проводить скрининговое исследование активности ТПМТ (непосредственное или с помощью генотипирования) до начала терапии пуринами, чтобы избежать риска развития гематологической токсичности пуринов у пациентов с ТПМТ-недостаточностью [21, 39, 58, 99].

Впервые популяционный анализ активности ТПМТ был проведен в 1980 году в Германии [103]. Было обследовано 298 здоровых добровольцев. Около 89% из них имели высокую активность ТПМТ, 11% -промежуточную и 0,33% - низкую. Такое распределение соответствует закону Харди-Вайнберга для признака, наследуемого по аутосомно-доминантному типу: лица, у которых активность была высокой — гомозиготы по аллели, кодирующей фермент с высокой активностью, промежуточной - гетерозиготы, а низкой — гомозиготы по аллели, кодирующей фермент с низкой активностью. Дальнейшие исследования показали, что среди жителей разных стран частота встречаемости'гетеро- и гомозиготных носителей мутантной аллели гена ТПМТ может быть иной [17, 19, 33, 53, 68, 89, 90 и др.].

В настоящее время идентифицировано не менее 20 мутантных аллелей гена, кодирующего ТПМТ с низкой активностью. В разных странах Европы; Азии, Африки, в США проведены многочисленные исследования, посвященные изучению частоты разных вариантов мутантных аллелей у лиц различной расовой и этнической принадлежности. Показано, что наиболее частыми являются мутации *2, *ЗА и *ЗС, их совокупная доля среди всех мутантных аллелей превышает 95%, остальные варианты встречаются в единичных случаях [17, 19, 36, 37, 38, 52, 53, 54, 55, 68, 70, 90 и др.].

Задачи исследования

1. Определить варианты мутаций гена ТПМТ, встречающиеся у жителей РФ.

2. Определить общую частоту и частоту разных вариантов мутантных аллелей гена ТПМТ у обследованных жителей РФ.

3. Сравнить частоту мутантных аллелей в когорте детей с онкологическими заболеваниями и в группе людей, не имеющих онкологических заболеваний.

4. Сравнить частоту разных вариантов мутантных аллелей у обследованных представителей разных рас.

5. Сравнить результаты программного лечения детей с ОЛЛ — носителей мутантной аллели гена ТПМТ и гомозигот по «дикой» аллели.

6. Провести анализ наличия ассоциации генетического дефекта ТПМТ с наиболее часто встречающимися хромосомными аберрациями, характерными для лейкемических лимфобластов у детей с ОЛЛ.

Научная новизна

Впервые проведено масштабное исследование генетического полиморфизма ТПМТ у жителей РФ. Выявлены различия в частоте встречаемости носителей мутантных аллелей среди обследованных в зависимости от наличия или отсутствия онкологического заболевания. Определены варианты мутантных аллелей, характерные для представителей некоторых рас, проживающих на территории РФ.

Показано, что в РФ встречаются три наиболее распространенные в мире мутации: *2, *ЗА и *ЗС. Общая частота мутантных аллелей у обследованных жителей РФ несколько ниже, чем по данным обследований, проводившихся в ряде стран Европы, Азии, Африки, Северной и Южной Америки. Полученные данные о различиях в частоте разных вариантов мутации у представителей разных рас совпадают с различиями, описанными в этих странах.

Проведен анализ влияния носительства мутантной аллели на результаты программного лечения ОЛЛ.

Практическая значимость

Проведенное исследование показало, что около 5,5% жителей РФ могут являться гетерозиготными носителями мутантного гена ТПМТ, и при необходимости проведения терапии пуриновыми препаратами (в частности, в случае заболевания ОЛЛ) нуждаются в индивидуальном подходе, поскольку имеют повышенный риск развития осложнений такой терапии. При этом индивидуализация доз пуриновых препаратов не приводит к снижению эффективности программной терапии ОЛЛ.

Заключение диссертации по теме «Педиатрия», Руднева, Анастасия Евгеньевна

выводы

1. В когорте обследованных жителей РФ'обнаружены гетерозиготные носители трех самых распространенных- в мире вариантов мутантных аллелей - *2, *ЗА и *ЗС. Мутантные аллели *ЗВ, *3D, *7 и *8 не обнаружены.

2. Частота мутантных аллелей у обследованных жителей РФ составила1

2,8%, частота встречаемости носителей мутантной аллели — 5,5%. Самой распространенной оказалась аллель *ЗА (2,3%), более редкими - аллели *ЗС (0,4%) и *2 (0,1%).

3. Среди обследованных детей с онкологическими! заболеваниями носители мутантных аллелей встречаются значимоj чаще, чем в группе обследованных, не имеющих онкологического заболевания (7,4% и 4,0%, соответственно, £>=0,0199).

4. Среди обследованных европеоидов гетерозиготные- носители мутантных аллелей встречались с частотой 5,9%. Мутация *ЗА обнаружена у 5,1% обследованных европеоидов; *ЗС - у 0,7%. Среди обследованных монголоидов обнаружен один, носитель мутантной аллели *ЗС (4,5%), других мутаций у монголоидов' не обнаружено. Разница в частоте мутантных аллелей *2, *ЗА и *ЗС у европеоидов и монголоидов статистически значима (р=0,0351).

5. Результаты программной терапии ОЛЛ1 у детей — носителей мутантной аллели гена ТПМТ и гомозигот по «дикой» аллели значимо не различаются (EFS - 0,9 и 0,83, соответственно,р-0,56).

6. У детей с ОЛЛ, носителей мутантной аллели гена ТПМТ, хромосомная* аберрация t(12;21)TEL/AML в бластных клетках встречается в 2,3 раза чаще, чем v у гомозигот по «дикой» аллели, однако различия статистически незначимы (р=0,1041). Других ассоциаций наличия мутантного гена ТПМТ с обнаружением хромосомных аберраций в опухолевых клетках при ОЛЛ и других гемобластозах не выявлено.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Метод генотипирования с помощью ТПМТ-биочипов позволяет быстро и достоверно выявлять мутации в гене ТПМТ в больших когортах обследованных. Метод может быть использован для получения достоверных данных о частоте и характере распределения мутантных аллелей прицельно в регионах России, о значении носительства мутантных аллелей в гене ТПМТ в развитии различных онкологических заболеваний.

2. Учитывая доказанную токсичность лечения пуринами при недостаточности ТПМТ, рекомендуется проводить исследование генотипа ТПМТ всем лицам, у которых развивается гематологическая токсичность при терапии пуринами, с целью выявления носительства мутантной аллели гена ТПМТ и подбора индивидуальной дозы пуринов, что позволит улучшить результаты специфического лечения.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Руднева, Анастасия Евгеньевна, 2006 год

1. Богатенков Д.В., Дробышевский C.B. Введение в антропологию. Курс лекций. М, 2005.

2. Карачунский А.И. Стратегия терапии острого лимфобластного лейкоза у детей. Автореферат диссертации на соискание звания доктора медицинских наук. М, 1999.

3. Самочатова Е.В., Карачунский А.И., Мякова Н.В., Руднева А.Е., Трубина Н.М., Чупова Н.В., Румянцев А.Г. Активность тиопуринметштрансферазы у детей с острым лгшфобластным лейкозом. Гематология и трансфузиология, 2002; 47(6): 17-20.

4. Тишков В.А. (гл. ред.). Энциклопедия «Народы России». М, 1994.

5. Тишков В.А. (гл. ред.). «Народы и религии мира». М, 1998.

6. Хрисанфова E.H., Перевозчиков И.В. Антропология. М, Высшая школа, 2002.

7. Чебоксаров H.H., Чебоксарова И.А. Народы. Расы. Культуры. М, Наука, 1985.

8. Чупова Н.В. Генетический полиморфизм тиопуринметштрансферазы у детей с острыми лейкозами, жителей Российской Федерации. Автореферат диссертации на соискание звания кандидата медицинских наук. М., 2004.

9. Aarbakke J., Janka-Schaub G., Elion G.B. Thiopurine biology and pharmacology. TiPS, 1997; 18:3-7.

10. Aberer W, Wolff-Schreiner E.C., Stingl G., Wolff K. Azathioprine in the treatment of pemphigus vulgaris. J Am Acad Dermatol, 1987; 16:527-533.

11. Ameyaw M.M., Collie-Dugid E.S.R., Powrie R.H., Ofori-Adjei D., McLeod H.L. Thiopurine methyltransferase alleles in British and Ghanian populations. Hum Mol Gen, 1999; 8(2):367-370.

12. Anstey A.V., Wakelin S., Reynolds N.J. Guidelines for prescribing azathioprine in dermatology. Br. J. Derm, 2004; 1151:1123-1132.

13. Black A.J., McLeod H.L., Cappel A.H., Powrie R.H., Matowe L.K., Pritchard S.C., Collie-Duguid E.S.R., Reid D.M. Thiopurine methy¡transferase genotype predicts therapy-limiting severe toxicity from azathioprine. Ann Intern Med, 1998; 129:716-718.

14. Breen D.P., Marinaki A.M., Arenas M., Hayes P.C. Pharmacogenetic association with adverse drug reactions to azathioprine immunosuppressive therapy following liver transplantation. Liver Transpl, 2005; 11(7): 826-33.

15. Cara C., Pena A., Sans M., Rodrigo L., Guerrero-Esteo M. et al. Reviewing the mechanism of action of thiopurine drugs: towards a new paradigm in clinical practice. Med Sci Monit, 2004; 10(1 l):RA247-254.

16. Chang J.G., Lee L.S., Chen C.M., Shin M.C., Wu M.C., Tsai F.J., Liang D.C. Molecular analysis of thiopurine S-methyltransferase alleles in South-east Asian populations. Pharmacogenetics, 2002; 12:191-195.

17. Chocair P.R., Duley J.A., Simmonds H.A., Cameron J.S. The importance of thiopurine methyltransferase activity for the use of azathioprine in transplant patients. Transplantation, 1993; 53:1051.

18. Collie-Duguid E.S.R., Pritchard S.C., Powrie R.H., Sludden J., Li T., McLeod H.L. The frequency and distribution of thiopurine methyltransferase alleles in Caucasian and Asian population. Pharmacogenetics, 1999; 9:37-42.

19. Corominas H., Domenech M., Gonzalez D. et al. Allelic variants of the thiopurine s-methyltransferase deficiency in patients with ulcerative colitis and in healthy controls. Am J Gastroenterol, 2000; 95:2313-2317.

20. Coulthard S.A ., Rabello C., Robson J., Howell C., Minto L., Middleton P.G., Gandhi M.K. et al. A comparison of molecular and enzyme-based assays for the detection of thiopurine methyltransferase mutations. Br J Hem, 2000; 110:599-604.

21. Coulthard S.A., Howell C., Robson J., Hall A.G. The relationship between thiopurine methyltransferase activity and genotype in blasts from patients with acute leukemia. Blood, 1998; 92 (8):2856-2862.

22. Dervieux T., Blanco J.G., Krynetski E.Y., Vanin E.F., Roussel M.F., Relling M.V. Differing contribution of thiopurine methyltransferase to mercaptopurine versus thioguanine effects in human leukemic cells. Cancer Res, 2001;61:5810-5816.

23. Du Viver A., Munro D.D., Verbov J. Treatment of psoriasis with azathioprine. Br Med J, 1974; i:49-51.

24. Dubinsky M.C., Lamothe S., Yang H.Y., Targan S.R., Sinet D., Theoret Y., Seidman E.G. Pharmacogenomics and metabolite measurement for 6-mercaptopurine therapy in inflammatory bowel disease. Gastroenterology 2000; 118:705-713.

25. Evans W.E., Horner M., Chu Y.Q., Kalwinsky D., Roberts W.M. Altered mercaptopurine metabolism, toxic effects, and dosage requirement in a thiopurine methyltransferase deficient child with acute lymphocytic leukemia. J Pediatr, 1991; 119:985-989.

26. Evans W.E., Rodman J., Relling M.V., Crom W.R., Rivera G.K., Crist W.M., Pui C.H. Individualized dosages of chemotherapy as a strategy to improve response for acute lymphocytic leukemia. Sem Hem, 1991; 28(3) Sup 4:15-21.

27. Ford L., Prout C., Gaffney D., Berg J. Whose TPMT activity is it anyway? Ann Clin Biochem, 2004; 41(Pt 6):498-500.

28. Hiratsuka M., Inoue T., Omori F., Agatsuma Y., Mizugaki M. Genetic analysis of thiopurine methyltransferase polymorphism in a Japanese population. Mutation Res, 2000; 48:91-95.

29. Hon Y.Y., Fessing M.Y., Pui C.H., Relling M.V., Krynetski E.Y., Evans W.E. Polymorphism of the thiopurine s-methyltransferase gene in African-Americans. Hum Mol Gen, 1999; 8(2):371-376.

30. Kham S.K., Tan P.L., Tay A.H.N., Heng C.K., Yeoh A.E.J., Quah T.C. Thiopurine methyltransferase polymorphisms in a multiracial Asian population and children with acute lymphoblastic leukemia. J Ped Hem/One, 2002; 24(5): 353-336.

31. Kimura F., Furutama D., Imagawa K., Tagami M,. Tuji K., Ohshava N. Azathioprine — induced pancytopenia in a patient of refractory myasthenia gravis with low TPMT activity. J Neur Sci, 1997; 150(1001):S53.

32. Kroplin T., Iven H. Methylation of 6-mercaptopurine and 6-thioguanine by thiopurine s- methyltransferase. Eur J Clin Pharmacol, 2000; 56:343-345.

33. Krynetskaia N.F., Cai X., Nitiss J.L., Krynetski E.Y., Relling M.V. Thioguanine substitution alters DNA cleavage mediated by topoisomerase II. The FASEB Journal, 2000; 14:2339-2344

34. Krynetski E.Y., Evans W.E. Drug methylation in cancer therapy: lessons from the TPMT polymorphism. Oncogene, 2003; 22:7403-7413.

35. Krynetski E.Y., Evans W.E. Genetic polymorphism of thiopurine s-methyltransferase: molecular mechanisms and clinical importance. Pharmacology, 2000; 61:136-146.

36. Krynetski E.Y., Evans W.E. Pharmacogenetics as a molecular basis for individualized drug therapy: the thiopurine s-methyltransferase paradigm. Pharm Research, 1999; 16(3), 342-349.

37. Krynetski E.Y., Evans W.E. Pharmacogenetics of cancer therapy: getting personal. Am J Hum Genet, 1998; 63:11-16.

38. Krynetski E.Y., Krynetskaia N.F., Yanishevski Y., Evans W.E. Methylation of mercaptopurine, thioguanine, and their nucleotide metabolites by heterologously expressed human thiopurine s-methyltransferase. Mol Pharm, 1995;47:1141-1147.

39. Krynetski E.Y., Schuets J.D., Galpin A.J., Pui C.H., Relling M.V., Evans W.E. A single point mutation leading to loss of catalytic activity in human thiopurine s-methyltransferase. Proc Natl Acad Sci, 1995; 92:949-953.

40. Krynetski E.Y., Tai H.L., Yates C.R., Loennechen T., Schuets J.D. et al. Genetic polymorphism of thiopurine s-methyltransferase: clinical importance and molecular mechanisms. Pharmacogenetics, 1996; 6:279-290.

41. Kubota T., Chiba K. Frequencies of thiopurine s-methyltransferase mutant alleles (TPMT*2, *3A, *3B and *3CJ in 151 healthy Japanese subjects and the inheritance of TPMT*3C in the family of a propositus. Br J Clin Pharmacol, 2000; 51:475-477.

42. Kumagai K., Hiyama K., Ishioka S., Sato H., Yamanishi Y., McLeod H.L., Konishi F., Maeda H., Yamakido M. Allelotype frequency of the thiopurine methyltransferase (TPMT) gene in Japanese. Pharmacogenetics, 2001; 11:275278.

43. Kurzawski, M., Dziewanowski, K., Gawronska-Szklarz, B., Domanski L., Drozdzik, M. The impact of thiopurine s-methyltransferase polymorphism on azathioprine-induced myelotoxicity in renal transplant recipients. Ther Drug Monit, 2005; 27(4):435-441.

44. Kurzawski M., Gawronska-Szklarz B., Drozdzik M. Frequency distribution of thiopurine S-methyltransferase alleles in a polish population. Ther Drug Monit, 2004; 6(5):541-545.

45. Langley P.G., Underhill J., Tredger J.M., Norris S., McFarlane I.G. Thiopurine methyltransferase phenotype and genotype in relation to azathioprine therapy in autoimmune hepatitis. J Hep, 2002; 37:441-447.

46. Lennard L. The clinical pharmacology of 6-mercaptopurine. Eur J Clin Pharmacol, 1992; 43:329-339.

47. Lennard L. Therapeutic drug monitoring of cytotoxic drugs. Br J Clin Pharmacol, 2001; 52:75S-87S.

48. Lennard L. TPMT in the treatment of Crohn's disease with azathioprine. Gut, 2002;51:143-146.

49. Lennard L., Chew T.S., Lilleyman J.S. Human thiopurine methyltransferase activity varies with red blood cell age. Br J Clin Pharmacol, 2001; 52(5):539-46.

50. Lennard L., Lilleyman* J.S., Van Loon J., Weinshilboum R. Genetic variation in response to 6-mercaptopurine for childhood acute lymphoblastic leukaemia. Lancet, 1990; 336:225-229.

51. Lennard L., Van Loon J., Weinshilboum R. Pharmacogenetic of acute azathioprine toxicity: relationship to thiopurine methyltransferase genetic polymorphism. Clin Pharmacol Ther, 1989; 46:149-54.

52. Lennard L., Welch J.C., Lillieyman J.S. Thiopurine drugs in the treatment of childhood leukaemia: the influence of inherited thiopurine methyltransferase activity on drug metabolism and cytotoxicity. Br J Clin Pharmacol, 1997; 44:455-461.

53. Lilleyman J.S., Lennard L. Mercaptopurine metabolism and risk of relapse in childhood lymphoblastic leukaemia. Lancet, 1994; 343:1188-1190.

54. Loennechen T., Utsi E., Hartz I., Lysaa R., Kildalsen H., Aarbakke J. Detection of one single mutation predicts thiopurine s-methytransferase activity in a population of Saami in northern Norway. Clin Pharmacol Ther, 2001;70:183-188.

55. Lu H.F., Shih M.C., Hsueh S.C., Chen C.M., Chang J.Y., Chang J.G. Molecular analysis of the thiopurine S-methyltransferase alleles in Bolivians and Tibetans. J Clin Pharm Ther, 2005; 30(5):491-496

56. McLeod H., Siva C. The thiopurine s-methyltransferase gene locus — implications for clinical pharmacogenomics. Pharmacogenomics, 2002; 3(l):89-98.

57. McLeod H.L, Coulthard S.A., Thomas A.E., Pritchard S.C., King D.J., Richards S.M., Eden O.B., Hall A.G., Gibson B.E.S. Analysis of thiopurine methyltransferase variant alleles in childhood acute lymphoblastic leukaemia. Br J Hem, 1999; 105:696-700.

58. McLeod H.L., Krynetski E.Y., Relling M.V., Evans W.E. Genetic polymorphism of thiopurine methyltransferase and its clinical relevance for childhood acute lymphoblastic leukemia. Leukemia, 2000; 14:567-572.

59. McLeod H.L., Krynetski E.Y., Wilimas J.A., Evans W.E. Higher activity of polymorphic thiopurine S-methyltransferase in erythrocytes from neonates compared to adults. Pharmacogenetics, 1995; 5(5):281-286.

60. McLeod H.L., Miller D.R., Evans W.E. Azathioprine-induced myelosupression in thiopurine methyltransferase deficient heart transplant recipient. (Letter). Lancet, 1993; 341:1151.

61. McLeod H.L., Relling M.V., Li Q., Pui C.H., Evans W.E. Polymorphic thiopurine methyltransferase in erytrocytes is indicative of activity in leukemic blasts from children with acute lymphoblastic leukaemia. Blood 1995; 85(7): 1897-1902.

62. Meggitt S.J., Reynolds NJ. Azathioprine in atopic dermatitis. Clin Exp Dermatol, 2001; 26:369-75.

63. Mircheva J., Legendre C., Soria-Royer C., Thervet E., Beaune P., Kreis H. Monitoring of azathioprine-induced immunosupression with thiopurine methyltrasferase activity in kidney transplant recipients. Transplantation, 1995; 60(7):639-642.

64. Murphy L.A., Atherton D. A retrospective evaluation of azathioprine in severe childhood atopic eczema, using thiopurine methyltransferase levels to exclude patients at high risk of myelosupression. Br J Dermatol, 2002; 147:308315.

65. Neglia J.P., Meadows A.T., Robison L.L., Kim T.H., Newton W.A., Ruymann F.B. et al. Second neoplasms after acute lymphoblastic leukaemia in childhood. N Engl J Med 1991; 325(19): 1330-1336.

66. Pui C.H. Childhood leukemias. N Engl J Med 1995; 332(24):1618-1630.

67. Relling M.V., Davies S. Pharmacogenetics of childhood lymphoblastic leukemia. Hematology (ASH) 2003, 108-112.

68. Relling M.V., Hancock MIL., Boyett J.M. Pui G.H., Evans W.E. Prognostic importance of 6-mercaptopurine dose intensity in acute lymphoblastic leukemia. Blood, 1999; 93(9):2817-2823.

69. Relling M.V., Hancock M.L., Rivera G.K., Sandlund J.T., Ribeiro R.C., Krynetski E.Y., Pui C.H., Evans W.E. Mercaptopurine therapy intolerance and heterozygosity at the thiopurine s-methyltransferase gene locus. J Nat Can Ins, 1999; 91(23):2001-2008.

70. Relling M.V., Rubnitz J.E., Rivera G.K., Boyett J.M., Hancock M.L., Felix C.A., Kun L.E., Walter A.W., Evans W.E., Pui C.H. High incidence of secondary brain tumors after radiotherapy and antimetabolites. Lancet, 1999; 354:34-39.

71. Rossi A.M., Bianchi M., Guarnieri C., Barale R., Pacifici G.M. Genotype-phenotype correlation for thiopurine s-methyltransferase in healthy Italian subjects. Eur J Clin Pharmacol, 2001; 57:51-54.

72. Schaeffeler E., Fischer C., Brockmeier D. et al. Comprehensive analysis of correlation in a large population of German-Caucasians and identification of novel TPMT variants. Pharmacogenetics, 2004; 14:407-417.

73. Shutz E., Gummert J., Mohr F., Oellerich M. Azathioprine-induced myelosupression in thiopurine methyltransferase deficient heart transplant recipient. (Letter). Lancet, 1993; 341:436.

74. Snow J.L., Gibson L.E. The role of genetic variation in thiopurine methyltransferase activity and the efficacy and/or side effects of azathioprine in dermatologic patients. Arch Dermatol, 1995; 131:193-197.

75. Somerville L., Krynetski E.Y., Krynetskaia N.F., Evans W.E. et al. Structure and dynamics of thioguanine-modified duplex DNA. J Biol Chem, 2003;278:1005-1011.

76. Szumlanski C., Weinshilboum R. Sulphasalasine inhibition of thiopurine methyltransferase: a possible mechanism for interaction with 6-mercaptopurine and azathioprine. Br J Clin Pharmacol, 1995; 39:456-459.

77. Tavadia S.M.B., Mydlarski P.R., Reis M.D., Mittmann N., Pinkerton P.H., Shear N., Sauder D.N. Screening for azathioprine toxicity: a pharmacoeconomic analysis based on a target case. J Am Acad Dermatol, 2000; 42:628-632.

78. Thervet E., Anglicheau D., Toledano N., Houllier A.M., Noel L.H., Beaune P., Legendre C. Long-term results of TPMT activity monitoring in azathioprine-treated renal allograft recipients. J Am Soc Nephrology, 2001; 12(1).

79. Thomsen J.B., Shroder H., Kristinsson J., Madsen B., Szumlanski C., Weinshilboum R., Andersen J.B., Schmiegelow K. Possible carcinogenic effect of 6-mercaptopurine on bone marrow stem cells. Cancer, 1999; 86:1080-1086.

80. Van Loon J.A., Weinshilboum R.M. Thiopurine methyltransferase biochemical genetics: human lymphocyte activity. Biochem Genet 1982; 20: 637-658.

81. Weinshilboum R.M., Sladek S.L. Mercaptopurine pharmacogenetics: monogenic inheritance of erythrocyte thiopurine methyltransferase activity. Am J Hum Genet, 1980; 32:651-662.

82. Weinshilboum R. Thiopurine pharmacogenetics: clinical and molecular studies of thiopurine methyltransferase. Drug Metabol Dispos, 2001; 29(4):601-605.

83. Woodson L.C., Weinshilboum R. Human kidney thiopurine methyltransferase. Purification and biochemical properties. J Pharmacol 1983; 32:651-662.

84. Weyer N., Kroplin T., Fricke L., Iven H. Human thiopurine s-methyltransferase activity in uremia and after renal transplantation. Eur J Clin Pharmacol, 2001; 57:129-136.

85. Wisehart J.M. Wegener's granulomatosis — controlled by azathioprine and corticosteroids. Br J Dermatol, 1975; 92:461-467.

86. Xin H.W., Fischer C., Schwab M., Klotz U. Thiopurine S-methyltransferase as a target for drug interactions. Eur J Clin Pharmacol, 2005; 61(5-6):395-398.

87. Zimm S, Collins J.M., Riccardi R. et al. Variable oral bioavailability of mercaptopurine. Is maintenance chemotherapy in acute lymphoblastic leukaemia being optimally delivered? N Eng J Med, 1983; 308:1005-1009.