Функциональная активность фагоцитов и популяционный состав иммунокомпетентных клеток крови у больных туберкулезом легких тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат наук Ершова, Анастасия Викторовна

• Ершова, Анастасия Викторовна
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Ершова, Анастасия Викторовна

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. СОСТОЯНИЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ ОРГАНИЗМА ПРИ ТУБЕРКУЛЕЗЕ ЛЕГКИХ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1 Изучение иммунологической реактивности организма как фактора диагностики и прогнозирования течения туберкулезной инфекции

1.2 Современные возможности лабораторной диагностики иммунных нарушений при туберкулезе

1.3 Реакция иммунной системы на МЛиЪетсЫозгя

1.4 Изменение иммунологических показателей при различных формах туберкулезного воспалительного процесса

1.5 Показатели иммунитета при инфекции с разным объемом поражения ткани легкого, вызванной МЛиЪетсЫозгя

1.6 Иммунологические показатели крови, характеризующие туберкулез, вызванный лекарственно-чувствительными и лекарственно-устойчивыми изолятами МЛиЪетсЫозгя

1.7 Изменение лабораторных иммунологических показателей при разной

активности туберкулезного процесса

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1 Клиническая характеристика больных

2.2 Методы исследования

2.2.1 Используемый материал

2.2.2 Общеклинические методы исследования

2.2.3 Иммунологические методы исследования

2.2.3.1 Оценка функционально-метаболической активности фагоцитов

2.2.3.2 Оценка экспрессии молекул адгезии на фагоцитах

2.2.3.3 Оценка экспрессии НЬЛ-ОЯ на фагоцитах

2.2.3.4 Изучение клеточного иммунитета

2.2.3.5 Оценка гуморального иммунитета

2.2.4 Статистическая обработка результатов исследования

ГЛАВА 3. ОЦЕНКА ФУНКЦИОНАЛЬНО-МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ФАГОЦИТОВ И ПОПУЛЯЦИОННОГО СОСТАВА ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК КРОВИ БОЛЬНЫХ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ФОРМЫ ТУБЕРКУЛЕЗНОГО ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА

3.1 Изменение функционально-метаболической активности фагоцитирующих клеток пациентов в зависимости от особенностей туберкулезного воспалительного процесса

3.2 Изучение показателей клеточного звена иммунитета в зависимости от формы туберкулезного воспалительного процесса

3.3 Оценка некоторых показателей гуморального иммунитета у пациентов с разными формами воспалительного ответа при поражении легких

МЛиЪегсиЪзгя

ГЛАВА 4. ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ БОЛЬНЫХ ИНФИЛЬТРАТИВНЫМ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ОБЪЕМА ПОРАЖЕНИЯ И ЛЕКАРСТВЕННОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ИЗОЛЯТА М.ТиБЕЯСиЬ0313

4.1 Исследование функционально-метаболической активности фагоцитирующих клеток пациентов в зависимости от распространенности туберкулезного процесса и лекарственной чувствительности возбудителя

4.2 Изучение показателей клеточного звена иммунитета при инфильтративном туберкулезе различной распространенности с учетом различной лекарственной чувствительности возбудителя

4.3 Оценка некоторых показателей гуморального иммунитета у пациентов с инфильтративным туберкулезом легких различной распространенности

процесса и разной лекарственной чувствительности МЛиЪетсЫозгя

ГЛАВА 5. ФУНКЦИОНАЛЬНО-МЕТАБОЛИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ФАГОЦИТОВ И ПОПУЛЯЦИОННОГО СОСТАВА ИММУНОКОМ-

ПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК КРОВИ БОЛЬНЫХ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ФАЗЫ АКТИВНОСТИ ТУБЕРКУЛЕМЫ

5.1 Сравнительная функционально-метаболическая оценка фагоцитирующих клеток больных в зависимости от фазы активности туберкулемы

5.2 Изучение показателей клеточного звена иммунитета у больных с разными фазами активности туберкулемы

5.3 Оценка некоторых показателей гуморального иммунитета у пациентов

с разными фазами активности туберкулемы

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ 1

ПРИЛОЖЕНИЕ 2

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Функциональная активность фагоцитов и популяционный состав иммунокомпетентных клеток крови у больных туберкулезом легких»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования и степень ее разработанности

По данным ВОЗ (Всемирная организация здравоохранения), в 2015 году в мире зарегистрировано 10,4 миллионов новых случаев заболевания туберкулезом, умерло от туберкулеза около 1,5 миллионов больных, при этом неуклонно растет количество случаев заболевания туберкулезом с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) Mycobacterium tuberculosis [72, 148].

Несмотря на устойчивую тенденцию к снижению, заболеваемость туберкулезом в Российской Федерации в последние годы остается на стабильно высоком уровне [46, 92] и составила в 2015 г. 58 случаев на 100 тысяч населения [56]. В этих условиях поиск способа совершенствования диагностики и повышения эффективности лечения больных туберкулезом легких, и в частности лиц, выделяющих M.tuberculosis с множественной и широкой лекарственной устойчивостью, а также низкой эффективностью химиотерапии, приобретает высокую актуальность.

В формировании и развитии туберкулезного процесса важную роль играет не только наличие определенного патогенного штамма микобактерий, но также и иммунологическая реактивность организма, определяющая ответную реакцию на внедрение и последующее размножение патогена [1, 53, 133].

Универсальным ответом организма на любую инфекцию, в том числе на появление M.tuberculosis, является воспаление, нередко переходящее в синдром системного воспалительного ответа, который в настоящее время находится под пристальным вниманием многих исследователей Российской Федерации [20, 27]. Сбалансированность комплекса составляющих воспалительный ответ реакций или, напротив, нарушение физиологического контроля над ним определяют развитие и характер течения туберкулезного процесса, а именно, преобладания продуктивной или экссудативной реакции организма [36].

Согласно современным представлениям во фтизиатрии, фагоцит является ключевым звеном в защите организма от M.tuberculosis [1, 51, 61]. Результаты

исследований фагоцитирующих клеток суммированы в монографиях и обзорах М.М. Авербаха (1976, 2012), Г.О. Каминской (2004), Л.И. Матузковой (1979). Однако эти данные были получены до появления современного диагностического оборудования и ограничены рутинными лабораторными тестами, которые позволяют изучать процесс на примере небольшой выборки клеток: не более 100 единиц у одного индивидуума.

Исследования последних лет выявили, что помимо фагоцитов в процессе противостояния M.tuberculosis принимают участие и другие клетки иммунной системы, что оправдывает необходимость комплексного подхода в изучении популяционного состава крови [85, 129, 145]. Внедрение в клиническую практику проточных цитофлюориметров-анализаторов для количественной и функциональной оценки состояния клеток открыло новые возможности, такие как большие выборки клеток одного типа (от нескольких тысяч до миллионов) за сравнительно небольшой промежуток времени (минуты) и исследование малоизученных популяций иммунокомпетентных клеток крови, которые невозможно было детектировать иными способами. Это дало значительные преимущества в исследовании показателей состояния иммунной системы. Таким образом, получаемые вновь сведения становятся более достоверными и имеют более высокую информативность в сравнении с полученными ранее данными.

В отечественной литературе работ, оценивающих фагоцитоз с применением проточного цитофлюориметра при туберкулезе легких, нами встречено не было. Подобных исследований при других патологических процессах отмечено немного, обобщены результаты этих исследований в работах И.В. Кудрявцева с соавт., С.В. Хайдукова с соавт. [58, 64, 80]. Вместе с тем, повышение достоверности результатов иммунологического обследования больных, введение современных методов диагностики в клиническую практику актуально для медицинских учреждений Российской Федерации.

Интересно отметить, что в большинстве опубликованных ранее работ туберкулез, с точки зрения изменения иммунологических показателей,

исследован как единое заболевание [3, 36, 48, 69, 76], тогда как в действительности клинические формы его могут быть многообразными. В большинстве случаев туберкулез легких представлен одной из трех клинических форм: туберкулема, инфильтративный и фиброзно-кавернозный туберкулез (ФКТ). Сравнительное изучение особенностей иммунного ответа между клиническими формами заболевания не проводилось. Анализ основных типов клинического течения туберкулеза легких с точки зрения иммунного ответа является важной и актуальной задачей.

Все большее значение приобретает изучение защитных функций макроорганизма - фагоцитоза, клеточного и гуморального звена иммунитета - с использованием современного диагностического оборудования, а также с учетом различных клинических форм туберкулеза легких, что даст возможность установить, какие нарушения приводят к заболеванию туберкулезом легких, а также прогрессированию заболевания.

Вышеизложенное определило цель нашего исследования.

Цель: Выявить взаимосвязи функциональной активности фагоцитов и популяционного состава иммунокомпетентных клеток крови с основными вариантами клинического течения воспалительного процесса при туберкулезе легких (туберкулема, инфильтративный, фиброзно-кавернозный туберкулез).

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Провести анализ функционально-метаболической активности фагоцитов, показателей клеточного и гуморального иммунитета у больных с туберкулемами легкого, в том числе исследовать реакцию крови в зависимости от фазы активности процесса, разработать иммунологические критерии активности туберкулемы. Предложить способ лабораторной диагностики активности туберкулемы с использованием метода проточной цито флюориметрии.

2. Изучить основные иммунологические показатели у больных с инфильтра-тивным туберкулезом легких, в том числе с различной распространенностью

патологического процесса и в зависимости от реакции организма на присутствие возбудителя с разной лекарственной чувствительностью. Разработать иммунологические критерии оценки распространенности инфильтративного процесса, реакции организма на присутствие возбудителя туберкулеза с различной лекарственной чувствительностью.

3. Установить изменения иммунологических показателей, характеризующих фиброзно-кавернозный туберкулез легких и выделить лабораторные критерии, отражающие его наличие у больного.

4. Выявить информативные лабораторные критерии наличия любой формы туберкулеза легких - туберкулемы, инфильтративного туберкулеза или фиб-розно-кавернозного туберкулеза. Разработать алгоритм интерпретации результатов иммунологического обследования больного для оценки течения инфекционного процесса, а именно: дифференциации формы туберкулезного процесса, установления фазы активности туберкулемы, распространения инфильтра-тивного туберкулеза легких, определения реакции организма на присутствие возбудителя туберкулеза с разной лекарственной чувствительностью, определить аналитические характеристики лабораторных тестов.

Апробация результатов

Основные результаты работы доложены на Всероссийской конференции молодых ученых с международным участием «Новые технологии в эпидемиологии, диагностике и лечении туберкулеза взрослых и детей» (Москва, 2013), Региональной научно-практической конференции с международным участием «Пути повышения качества и эффективности деятельности противотуберкулезных учреждений» (Екатеринбург, 2013), II конгрессе Национальной ассоциации фтизиатров (Санкт-Петербург, 2013), Научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «От эпидемиологии к диагностике инфекционных заболеваний: подходы, традиции, инновации» (Санкт-Петербург, 2014), Российском научном форуме на Урале с международным участием «Актуальные вопросы фундаментальной медицины» XI Уральском съезде иммунологов (Екатеринбург, 2014), III Конгрессе

Национальной ассоциации фтизиатров: «Современные направления развития фтизиатрии: научные разработки и практический опыт борьбы с туберкулезом» (Санкт-Петербург, 2014), XV Всероссийском научном форуме с международным участием имени академика В.И. Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (Санкт-Петербург, 2015).

Личный вклад соискателя состоит в непосредственном участии во всех этапах диссертационного исследования. Практическая лабораторная часть исследования, включавшая выполнение широкого спектра иммунологических методик, проводилась автором исключительно самостоятельно. Формулировка основной идеи, планирование научной работы, включая формулировку рабочей гипотезы, целей, задач работы, определение методологии диссертационного исследования, интерпретация и анализ полученных результатов проводились диссертантом совместно с научным руководителем д.б.н. Бердюгиной О.В., научным консультантом д.м.н. Скорняковым С.Н. Подбор групп пациентов осуществлялся совместно с врачами клиники, заведующими отделений: к.м.н. Кильдюшевой Е.И., Гапонюком П.Ф, к.м.н. Неретиным А.В., Залетаевой Г.Е., врачом-терапевтом к.м.н. Сабадаш Е.В. Патоморфологическое исследование осуществлялось при участии к.м.н. Бердникова Р.Б., бактериологическое -к.б.н. Кравченко М.А., молекулярно-генетические - к.м.н. Камаева Е.Ю. Использовались данные рентгенологического обследования (заведующий отделением лучевой диагностики - к.м.н. Савельев А.В.). Анализ, систематизация, обобщение литературы по изучаемому вопросу проводились автором самостоятельно. Статистическая обработка данных, оформление рукописи диссертации, формулировка положений, выносимых на защиту, выводов и практических рекомендаций, представление результатов исследования в виде докладов на конференциях осуществлялись диссертантом лично. Подготовка публикаций по теме диссертации осуществлялась автором совместно с научным руководителем.

Положения, выносимые на защиту:

1. У больных туберкулезом легких вне зависимости от клинической формы заболевания, фазы активности, распространенности процесса, вида лекарственной чувствительности возбудителя наблюдается увеличение числа Т-хелперов, экспрессирующих CD95, количества ^^-клеток, увеличение концентрации MIF (фактор ингибирования миграции макрофагов).

2. Изменения результатов индивидуальных иммунологических показателей позволяют оценить активность туберкулезного процесса, его распространенность, реакцию организма на присутствие возбудителя, имеющего разную лекарственную чувствительность.

3. Распространенность туберкулезного процесса ассоциирована со снижением метаболической активности моноцитов и увеличением концентрации ^-10, фазу активности туберкулемы отражает увеличение экспрессии CD11b, HLA-DR на моноцитах и CD11b на нейтрофилах.

Научная новизна

1. Впервые установлено, что все изученные формы туберкулезного воспалительного процесса (инфильтративный, фиброзно-кавернозный туберкулез и туберкулема) независимо от фазы активности, распространенности заболевания и вида лекарственной чувствительности возбудителя сопровождаются увеличением количества Т-регуляторных клеток и Т-хелперов, экспрессирующих CD 95.

2. Впервые выделены особенности функционально-метаболической активности фагоцитов, клеточного и гуморального звена иммунитета больных в зависимости от формы туберкулеза легких, распространенности патологического процесса и фазы активности туберкулезного процесса. Впервые доказано, что туберкулема легкого сопровождается снижением экспрессии HLA-DR и продукции супероксид-аниона моноцитами, увеличением числа Т-лимфоцитов, повышением на них экспрессии CD95, повышением числа Т-хелперов, у5-Т-клеток, снижением количества ЫК-лимфоцитов; инфильтративный туберкулез характеризуется увеличением числа моноцитов, экспрессирующих HLA-DR, снижением количества Т-лимфоцитов,

экспрессирующих маркер CD95, уменьшением количества Т-цитотоксических лимфоцитов; фиброзно-кавернозный туберкулез ассоциирован с повышением экспрессии молекул адгезии CD11b и CD11c на моноцитах, увеличением функционально-метаболической активности гранулоцитов, увеличением количества В-лимфоцитов.

3. Впервые определено, что иммунологическими характеристиками инфильтративного туберкулеза 4 и более сегментов легкого являются снижение общего количества лимфоцитов, и их популяций: Т-лимфоцитов, Т-цитотоксических клеток, а также повышение уровня INF-y (interferon, интерферон).

4. Впервые охарактеризована реакция организма на присутствие лекарственно-чувствительного возбудителя туберкулеза при инфильтративном процессе, выражающаяся в повышении экспрессии HLA-DR и снижении экспрессии CD1^ на моноцитах крови, снижении экспрессии CD11b на гранулоцитах, повышении экспрессии HLA-DR и снижении CD95 на Т-лимфоцитах, увеличении числа NK-лимфоцитов, снижении количества В-клеток и понижении уровня IL-4 в сравнении с показателями у здоровых лиц. Реакция иммунной системы на присутствие изолятов M.tuberculosis с МЛУ при инфильтративном туберкулезе легких характеризуется понижением числа NKT-клеток, увеличением соотношения CD4+/CD8+ Т-лимфоцитов.

5. Впервые описаны индивидуальные особенности иммунологических показателей крови, характеризующие активные туберкулемы: увеличение количества гранулоцитов и лимфоцитов, снижение индекса CD4+/CD8+, а также туберкулемы в фазе умеренной и стихающей активности - понижение экспрессии HLA-DR на моноцитах, увеличение экспрессии CD95 на Т-лимфоцитах, повышение количества у5-Т-клеток, снижение концентрации INF-Y в сравнении с показателями здоровых людей.

6. Впервые выявлена ассоциация количества у5-Т-клеток с направлением течения туберкулезного процесса, в частности при туберкулемах абсолютное количество у5-Т-клеток увеличивается почти в полтора раза, а при

инфильтративном и фиброзно-кавернозном туберкулезе количество этих клеток заметно снижается.

7. Впервые предложен способ лабораторной диагностики активности туберкулемы с использованием метода проточной цитофлюориметрии. Теоретическая и практическая значимость исследования.

Проведенное исследование позволило выявить взаимосвязь функциональной активности фагоцитов и популяционного состава иммунокомпетентных клеток крови с вариантом клинического течения туберкулезного процесса. На основании данных лабораторных исследований разработаны критерии оценки активности туберкулемы, увеличения объема поражения тканей при инфильтративном туберкулезе легких, дифференцирования реакции организма на присутствие возбудителя, имеющего разную лекарственную чувствительность. Полученный патент на изобретение «Способ оценки активности туберкулемы» (Пат. 2585385 Российская Федерация, МПК G01N 33/53) позволяет повысить эффективность диагностики до оперативного вмешательства. Алгоритм обследования больного, разработанный в дополнение к стандартному клинико-рентгенологическому обследованию пациента, позволяет повысить эффективность оценки активности и распространенности процесса, выявить реакцию организма на присутствие возбудителя с множественной лекарственной устойчивостью. Внедрение результатов исследования в практику.

Результаты исследования использованы в программе дополнительного профессионального образования по специальности «Фтизиатрия» на базе Федерального государственного бюджетного учреждения «Уральский научно -исследовательский институт фтизиопульмонологии» Министерства Здравоохранения Российской Федерации. Они включены в программу обследования пациентов Государственного бюджетного учреждения здравоохранения «Противотуберкулезный диспансер города Екатеринбурга» Свердловской области. Разработанный комплекс лабораторных тестов позволяет оценивать активность туберкулемы, распространенность

инфекционного процесса при инфильтративном туберкулезе, определять реакцию организма на присутствие возбудителя с различной лекарственной чувствительностью. Способ лабораторной диагностики активности туберкулемы дает возможность повысить эффективность комплексной оценки активности процесса на дооперационном этапе. Публикации

По теме диссертации опубликовано 16 печатных работ, из них 6 статей и 1 патент в журналах, рекомендованных Высшей Аттестационной Комиссией (ВАК) Российской Федерации для публикации результатов диссертационных исследований. Получен Патент на изобретение «Способ оценки активности туберкулемы» (Пат. 2585385 Российская Федерация, МПК G01N 33/53, Приложение 1 ).

ГЛАВА 1. СОСТОЯНИЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ ОРГАНИЗМА ПРИ ТУБЕРКУЛЕЗЕ ЛЕГКИХ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

Возбудитель туберкулеза, социально зависимого инфекционного заболевания, за последние годы был хорошо изучен, расшифрована его генетическая структура, определены факторы вирулентности [14]. Однако, в связи с тем, что уровень заболеваемости и смертности от туберкулеза во многих странах продолжает оставаться высоким, поиск новых методов его диагностики и лечения сегодня также актуален, как и в середине XX века.

Уже 50 лет назад говорили о важном значении иммунологических методов, как обязательного компонента обследования больных при установлении диагноза и лечения больного. Иммунологические исследования уже тогда были способны существенно помочь в дифференциальной диагностике туберкулеза и нетуберкулезных заболеваний легких, определить латентную фазу туберкулеза, на ранних стадиях установить болезнь. В настоящее время они позволяют решать вопрос об оптимальном сроке хирургического лечения, а также времени окончания химиотерапии [1]. 1.1 Изучение иммунологической реактивности организма как фактора диагностики и прогнозирования течения туберкулезной инфекции

Первые успехи в изучении неспецифической реактивности организма на присутствие МЛиЪетсЫозгя были связаны с разработкой такого способа диагностики, как кожные туберкулиновые пробы (Проба Коха и проба Пирке) [51]. Создание новых кожных тестов не прекращается и в настоящее время, следствием чего стала разработка и внедрение в практику Диаскинтеста -метода, способного дифференцировать поствакцинальную и инфекционную реакцию, в основе которой лежит реакция гиперчувствительности замедленного типа.

Современные методы лабораторной диагностики туберкулеза основаны на изучении иммунологической реактивности в ответ на появление МЛиЪетсиОгз в организме, например, продукции специфических антител, которые можно детектировать, используя иммуноферментный,

иммунохроматографический анализ или дот-блоттинг. Последние два метода являются модификациями твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) или ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay, твердофазный иммуноферментный анализ) недорогого, высокочувствительного и воспроизводимого метода диагностики [34].

Подробное изучение генетической структуры возбудителя туберкулеза позволило предположить, что в основе иммунологической реакции на него лежит реакция взаимодействия, опосредованная двумя антигенами M.tuberculosis - ESAT6 (early secretory antigenic target, 6 kDa, ранняя секреторная антигенная мишень, белок с молекулярной массой 6 кДа) и CFP10 (culture filtrate protein, 10 kDa, белок культурального фильтрата с молекулярной массой 10 кДа) - которые отсутствуют у M.bovis BCG (Bacillus Calmette-Guerin, бацилла Кальметта - Герена) и большинства нетуберкулезных микобактерий. Установлено, что они экспрессируются при размножении M.tuberculosis, в связи с чем последние были использованы при разработке специфических диагностических тестов, дифференцирующих иммунный ответ при туберкулезной инфекции и вакцинации BCG. QFT-G (QuantiFERON-TB Gold test, квантифероновый тест голд), QFT-IT (Quantiferon-in-tube, квантифероновый тест в пробирке), ELISPOT (enzyme-linked immunosorbent spot assay, тест система для иммуноферментного анализа), T-SPOTTB (T-cells-spot-tuberculosis, тест определения количества Т-лимфоцитов, продуцирующих интерферон-гамма при туберкулезе) - тесты, в основу создания которых был положен этот принцип, позволяют определять концентрацию INF-y (interferon-gamma, интерферон-гамма) в крови или количество INF-у-продуцирующих Т-клеток после инкубации с антигенами M.tuberculosis для диагностики латентной туберкулезной инфекции. Было установлено, что лица с положительной реакцией этих тестов заболевают в течение двух последующих лет после проведения анализа значительно чаще, чем туберкулин-положительные пациенты [34].

Зарубежные исследователи большое внимание уделяют диагностике латентного туберкулеза лабораторными методами, основанными на изучении иммунореактивности пациента. Появление квантиферонового теста (КФТ) положило начало работам, посвященным сравнительному анализу данного метода диагностики с традиционными кожными пробами [94, 111]. По результатам многочисленных исследований QuantiFERON-TB-Gold-in-tube, метод, основанный на определении продукции IFN-y клетками периферической крови в ответ на стимуляцию ранними антигенами микобактерий ESAT-6 и CFP-10 и ТВ 7.7. (пептид, кодируемый регионом RD11), является высокоспецифичным при выявлении лиц, инфицированных M.tuberculosis. Возможности метода для определения инфицирования и в оценке активности туберкулезного процесса на основе использования других биомаркеров, в частности цитокинов, в настоящее время изучаются [10, 49, 50, 70, 93]. 1.2. Современные возможности лабораторной диагностики иммунных нарушений при туберкулезе

В последние годы в иммунологических лабораториях при противотуберкулезных учреждениях все чаще стало появляться современное диагностическое оборудование, позволяющее получать значительно более достоверные сведения о состоянии противоинфекционной защиты организма, чем при использовании ранее применявшихся устаревших малопродуктивных и низкоинформативных методик.

Примером может являться внедрение метода проточной цитофлюориметрии для определения функционально-метаболической активности фагоцитов. Оценка поглотительной способности клеток на проточном цитофлюориметре, которая используется пока лишь в некоторых лабораториях, дает возможность выявлять несколько тысяч фагоцитов за короткий период времени, тогда как использование стандартной методики -оценки фагоцитоза методом микроскопии - позволяет сфокусироваться не более чем на 100 - 200 клетках. Это же можно сказать и об оценке бактерицидной способности фагоцитов - анализе оксидативного потенциала

клетки. НСТ-тест (тест восстановления нитросинего тетразолия), ранее широко применяемый для этой цели, отличается субъективностью определения и сложностью подсчета более 100 - 200 клеток в одном образце. Кроме того, используя данную малопродуктивную методику, можно было установить только функциональную активность нейтрофилов, так как популяция этих клеток в крови составляет до 65% от числа всех лейкоцитов, моноциты из-за их небольшого количества, оставались неисследованными.

Изучение окислительного взрыва, поглотительной способности фагоцитов, их способности к миграции в очаг воспаления методом проточной цитофлюориметрии за рубежом находит все более широкое клиническое применение, так как не имеет перечисленных выше недостатков. В последние годы эти исследования начали входить в практику и некоторых отечественных лабораторий. Для постановки одного из самых современных методов диагностики туберкулеза - квантиферонового теста - на данный момент используется преимущественно ИФА, однако уже существуют попытки адаптации этого теста к проточной цитофлюориметрии [118]. Прочие цитокины также все более широко анализируются методом проточной цитометрии [82].

До недавнего времени оценка субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови осуществлялась при помощи моноклональных антител (МКАТ) и люминесцентного микроскопа. В последние годы в практику лабораторий в качестве средства измерения количества меченых клеток прочно входит проточная цитофлюориметрия. Для определения субпопуляционного состава лимфоцитов фирмами-производителями выпускается огромное количество МКАТ и их сочетаний с разными типами флюорохромов. Оценка иммунного статуса методом проточной цитофлюориметрии уже вошла в число рутинных исследований во многих лабораториях. Несомненным преимуществом этого метода над микроскопией является скорость анализа образца и значительно большее количество клеток, которые могут быть подсчитаны прибором, по сравнению с тем количеством, которое способен подсчитать оператор, используя микроскоп. Следствием этого является более

качественная идентификация субпопуляций клеток, более корректный результат анализа. Кроме того, при микроскопии невозможно окрашивание клеток несколькими флюоресцентными красителями одновременно, в то время как при анализе иммунокомпетентных клеток методом проточной цитофлюориметрии допускается проведение окрашивания до девяти -двенадцати и даже шестнадцати флуорохромами одной клетки [80, 81].

Другим иммунологическим методом, широко используемым во фтизиатрии, является ИФА. Он известен свыше 40 лет, однако только в последние годы его широко стали использовать для изучения гуморальных факторов иммунитета, в частности определения уровня цитокинов [10, 43]. За короткий период были разработаны десятки апробированных тест-систем.

В целом, диагностические возможности изучения иммунных нарушений при туберкулезе в настоящее время существенно превышают потенциал иммунологов начала и середины XX века, что, несомненно, сыграло важную роль в последних достижениях ученых этой области науки. 1.3. Реакция иммунной системы на М.1иЬегеи1оз18

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Ершова, Анастасия Викторовна, 2017 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Авербах, М.М. Иммунология и иммунопатология туберкулеза / М.М. Авербах. - М.: Медицина, 1976. - 311с.

2. Авербах, М.М. Продукция МИФ в культурах спленоцитов мышей при экспериментальном туберкулезе у инбредных мышей линий C57BL/6 и / М.М. Авербах, В.В. Евстифеев, Е.В. Кондратьева // Туберкулез и болезни легких. - М.: Издательский дом «НЬЮ ТЕРРА». - 2012. - №10. - С.37-40.

3. Арчакова, Л.И. Иммуногенетический профиль больных туберкулезом легких и возможности совершенствования терапии / Л.И. Арчакова, Б.Е. Кноринг, М.В. Павлова [и др.] // Вестник Санкт-Петербургского Университета. - Серия 11: Медицина. - 2009. - №2. - С.61-66.

4. Белова Е.В. Оценка влияния иммунологической реактивности на чувствительность к туберкулину у длительно и часто болеющих детей в первичном звене здравоохранения в условиях фтизиопедиатрического участка / Е.В. Белова, В.А. Стаханов, М.В. Яснева // Вестник новых медицинских технологий. - 2015. - №2. - с.9. - электронный журнал.

5. Беляев, Д.Л. Xарактеристика механизмов защиты у больных с лекарственно-устойчивым туберкулезом легких / Д.Л. Беляев, Б.М. Малиев, Р.П. Селицкая [и др.] // Проблемы туберкулеза и болезней легких. - М.: Медицина. - 2005. - №6. - С.33-36.

6. Беляева, С.В. Полиморфизмы гена ТЫБ-а(-308 и -238) у больных туберкулезом легких представителей русской популяции Челябинской области / С.В. Беляева, А.Л. Бурмистрова, Д.С. Сташкевич [и др.] // Вестник Карагандинского Университета. Серия: Биология. Медицина. География. -2013. - №3(71). - С.72-77.

7. Богадельникова, И.В. Исследование уровней гетерозиготности у больных туберкулезом легких с различной эффективностью лечения / И.В. Богадельникова, А.С. Сергеев, Р.К. Агапова // Вестник РАМН: Издательство Общественная организация «Союз педиатров России». - 2000.-№3. - С.15-21.

8. Бурмистрова, А.Л. Визуализация генетических комбинаций, участвующих в формировании воспалительного ответа при туберкулезе легких методом канонического анализа соответствий / А.Л. Бурмистрова, С.В. Беляева // Вестник Челябинского государственного университета. - 2015. - № 21 (376). Биология. Вып. 3. - С. 12-16.

9. Бородулин, Б.Е. Показатели иммунитета в диагностике силикотуберкулеза / Б.Е. Бородулин, Е.А. Бородулина // Проблемы туберкулеза и болезней легких. - М.: Медицина. - 2004. - №6. - С.28-31.

10. Васильева, Е.В. Комбинированное определение спонтанной и антигениндуцированной продукции цитокинов для дифференциальной диагностики активного туберкулеза легких и латентной туберкулезной инфекции / Е.В. Васильева, В.Н. Вербов, В.Б. Ивановский [и др.] // Инфекция и иммунитет. - Издательство: НИИЭМ имени Пастера. - 2013. - Т.3. - №3. -С.235-242.

11. Визель, А.А. Туберкулез / А.А. Визель, М.Э. Гурылева, науч. ред. М.И. Перельман. - М.: ГЭОТАР Медицина. - 1999. - 208с.

12. Владимирский, М.А. Антиген-специфическая индукция фактора некроза опухоли в оценке активности туберкулезной инфекции / М.А. Владимирский, Л.И. Мордовская, Л.К. Шипина [и др.] // Туберкулез и болезни легких. - М.: Издательский дом «НЬЮ ТЕРРА». - 2011. - №11. - С.45-49.

13. Воробьева, О.А. Множественная лекарственная устойчивость микобактерий туберкулеза на территории города Иркутска и Иркутской области / О.А. Воробьева, В.С. Семечкина, Б.Ц. Чимитдоржиев // Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра СО РАМН. - Иркутск: СО РАМН.-2011. - №2. - С.26-29.

14. Воронкова, О.В. Генотипическая характеристика M.tuberculosis -возбудителей остропрогрессирующего деструктивного туберкулеза легких / О.В. Воронкова, О.И. Уразова, Р.Р. Хасанова [и др.] // Бюллетень сибирской медицины. - Томск: СГМУ. - 2011. - №1. - С.12 - 18.

15. Вуколов, Э.А. Основы статистического анализа. Практикум по статистическим методам и исследованию операций с использованием пакетов STATISTICA и EXCEL. - М.: Форум-ИНФА-М. - 2004. - 464с.

16. Гариб, Ф.Ю. Взаимодействия патогенных бактерий с врожденными иммунными реакциями хозяина / Ф.Ю. Гариб, А.П. Ризопулу // Инфекция и иммунитет. - СПб.: НИИЭМ имени Пастера. - 2012. - №3. - С.581-596.

17. Гисматов, Р.Х. Иммунологические и клинические эффекты использования препаратов «бактиспорин» и «иммурег» в комплексной терапии больных туберкулезом легких / Р.Х. Гисматов, Ю.А. Медведев, М.М. Алсынбаев [и др.] // Медицинский вестник Башкортостана. - Изд-во БГМУ. - 2010. - Т.5. - №2. -С.47-51.

18. Гисматов, Р.Х. Сравнительный эффект сопроводительной терапии пациентов с заболеваниями легких с использованием разных иммуномодуляторов / Р.Х. Гисматов, Е.С. Галимова // Медицинский вестник Башкортостана. - Изд-во БГМУ. - 2011. - Т.6. - №6. - С.38-43.

19. Гисматов, Р.Х. Использование иммуномодуляторов в сопроводительной терапии пациентов с заболеваниями легких / Р.Х. Гисматов, Е.С. Галимова // Медицинские науки. Фундаментальные исследования. - М.: Издательский Дом «Академия Естествознания». - 2012. - №2. - С.283-286.

20. Гусев, Е.Ю. Цитокиновый ответ и другие отличительные особенности критических фаз системного воспаления при сепсисе / Е.Ю. Гусев, Н.В. Золотова, М.А. Лазарева // Медицинская иммунология. - СПб.: РО РААКИ. - 2014.- №2.-С.173-182.

21. Диагностика и лечение туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью возбудителя. Методические материалы к проведению цикла тематического усовершенствования врачей / Коллектив авторов ЦНИИТ РАМН, Американский международный союз здравоохранения. - М.: Валент. -2012. - 656с.

22. Дудина, К.Р. Неоптерин - потенциальный диагностический и прогностический маркер при инфекционных заболеваниях / К.Р. Дудина, М.М.

Кутателадзе, О.О. Знойко [и др.] // Казанский медицинский журнал. - Казань: ОАО Татмедиа. - 2014. - Т.95.№6. - С.938-943.

23. Дьякова, М.Е. Активность фагоцитирующих клеток бронхоальвеолярной жидкости при инфильтративном и фиброзно-кавернозном туберкулезе легких / М.Е. Дьякова, О.Т. Титаренко, Д.С. Эсмедляева [и др.] // Биомедицинская химия. - 2007. - Т.53. - №5. - С.585-592.

24. Еремеев, В.В. Взаимодействие макрофаг - микобактерия в процессе реакции микроорганизма на туберкулезную инфекции / В.В. Еремеев, К.Б. Майоров // Проблемы туберкулеза и болезней легких. - М.: Медицина. -2002. - №3. - С.54-58.

25. Есимова, И.Е. Причины дисрегуляции иммунного ответа при туберкулезе легких: влияние МЛиЪетсЫозгя на течение иммунного ответа / И.Е. Есимова, О.И.Уразова, В.В. Новицкий [и др.] // Бюллетень сибирской медицины. -Томск: СГМУ. - 2012. - №3. - С.79-86.

26. Железникова, Г.Ф. Роль гамма-интерферона в иммунопатогенезе инфекций (обзор литературы) / Г.Ф. Железникова // Клиническая лабораторная диагностика. - М.: Медицина. - 2008. - №4. - С.3-8.

27. Иванов, Д.В. Сравнительный анализ системной воспалительной реакции при ревматических заболеваниях / Д.В. Иванов, Л.А. Соколова, Е.Ю. Гусев [и др.] // Уральский медицинский журнал. - Екатеринбург: Уральский центр медицинской и фармацевтической информации. - 2011. - №6. - С.100-105.

28. Каминская, Г.О. Оксид азота - его биологическая роль и участие в патологии органов дыхания / Г.О. Каминская // Проблемы туберкулеза и болезней легких. - М.: Медицина. - 2004. - №6. - С.3-11.

29. Кибраева, З.Ю. Проблема и профилактика туберкулеза на современном этапе / З.Ю. Кибраева // Наука и мир. - М.: Научное обозрение. - 2014. - №7 (11). - С.89-91.

30. Кибрик, Б.С. Острое прогрессирование как фаза туберкулезного процесса / Б.С. Кибрик, О.Г. Челнокова, А. Таххан [и др.] // Пульмонология. - М.: РРО. -2010. - №3. - С.82-88.

31. Кисина, Т.Е. Особенности специфического иммунного ответа у отдельных больных фиброзно-кавернозным туберкулезом легких / Т.Е. Кисина, И.С.Фрейдлин, Б.Е. Кноринг [и др.] // Медицинская иммунология.- СПб.: РО РААКИ. - 2006. - Т.8. - №4. - С.501-510.

32. Кноринг, Б.Е. Особенности продукции цитокинов в зависимости от состояния иммунитета у больных туберкулезом легких / Б.Е. Кноринг, И.Я. Сахарова, Г.П. Логинова [и др.] // Медицинская иммунология. - СПб.: РО РААКИ. - 2000. - Т.2.- №2. - С.167-169.

33. Кноринг, Б.Е. Некоторые закономерности иммунного ответа у больных туберкулезом легких с лекарственно-устойчивыми штаммами микобактерий / Б.Е. Кноринг, Б.М. Ариэль, Б.И. Вишневский [и др.] // Проблемы туберкулеза и болезней легких. - М.: Медицина. - 2008. - №12. - С.22-26.

34. Кожная проба с препаратом «Диаскинтест» - новые возможности идентификации туберкулезной инфекции / Под ред. М.А. Пальцева. - М.: Шико. - 2011. - 255с.

35. Колобовникова, Ю.В. Показатели клеточного и гуморального иммунного ответа при туберкулезе легких, сопровождающемся эозинофилией / Ю.В. Колобовникова, О.И. Уразова, В.В. Новицкий [и др.] // Бюллетень сибирской медицины. - Томск: СГМУ.- 2012. - №1. - С.39-45.

36. Комиссарова, О.Г. Особенности синдрома системного воспалительного ответа и морфологических реакций в лёгочной ткани у больных туберкулёзом лёгких с множественной лекарственной устойчивостью возбудителя О.Г. Комиссарова, Р.Ю. Абдуллаев, Л.Н. Лепеха [и др.] // Туберкулез и болезни легких. - М.: Издательский дом «НЬЮ ТЕРРА». - 2011. - №10. -С.44-49.

37. Корецкая, Н.М. Инфильтративный туберкулез легких / Н.М. Корецкая // Туберкулез и болезни легких.- М.: Издательский дом «НЬЮ ТЕРРА».- 2012. -№4. - С.46-49.

38. Краснов, В.А. Активированные кислородные метаболиты при туберкулезе / В.А. Краснов, Н.К. Зенков, А.Р. Колпаков [и др.] // Проблемы туберкулеза и болезней легких. - М.: Медицина. - 2005. - №9. - С.9-17.

39. Культуральные методы диагностики туберкулеза: учебное пособие для проведения базового курса обучения специалистов бактериологических лабораторий учреждений противотуберкулезной службы. Учебное пособие для проведения базового курса обучения специалистов бактериологических лабораторий учреждений противотуберкулезной службы. Под ред. В.В. Ерохина - М. - Тверь: ООО «Издательство «Триада». - 2008. - 208с.

40. Лядова, И.В. Нейтрофилы при туберкулезе: протекция или патология? / И.В. Лядова, Е.Н. Цыганов, М.В. Костюкевич // Туберкулез и болезни легких. - М.: Издательский дом «НЬЮ ТЕРРА». - 2012. - №7 - С.12-21.

41. Макинский, А.И. Антимикробная активность фагоцитов крови у больных туберкулезом и саркоидозом органов дыхания / А.И. Макинский, С.Е. Борисов, Л.Ю. Петрова // Проблемы туберкулеза и болезней легких. - М.: Медицина. - 2004. - №9. - С.42-45.

42. Маркелов, Ю.М. Особенности туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью и приоритетные мероприятия по ограничению его распространения в Карелии / Ю.М. Маркелов // Вестник современной клинической медицины. - Издательство ООО ММЦ «Современная клиническая медицина». - 2011. - Т.4. - №3. - С.50-56.

43. Маркелова, Е.В. Характеристика уровня цитокинов (ТЫБ-а, 1Ь-6, 1Ь-10) и их растворимых рецепторов (SRр55 ТЫБ-а, SRр75 TNFа,SR ГЬ-6) у больных ВИЧ-инфекцией, ВИЧ-ассоциированным туберкулезом и туберкулезом легких / Е.В. Маркелова, С.А. Сотниченко, Л.Ф. Скляр [и др.] // Медицинская иммунология. - СПб.: РО РААКИ. - 2008. - Т.10. - №6. - С.519-526.

44. Матузкова, Л.И. Клинико-иммунологические исследования у оперированных по поводу деструктивного туберкулеза легких / Л.И. Матузкова, И.В. Халикова, Н.Н. Фролова // Проблемы туберкулеза. - М.: Медицина. - 1979. - №10. - С.44-48.

45. Мезенцева, М.В. Цитокины как маркеры развития инфильтративного туберкулеза легких / М.В. Мезенцева, В.А. Стаханов, М.В. Захарова [и др.] // Инфекция и иммунитет. - СПб.: НИИЭМ имени Пастера. - 2011. - Т.1. - №4. -С.367-372.

46. Нечаева, О.Б. Перспективы и возможности выполнения индикаторов госпрограммы развития здравоохранения Российской Федерации до 2020 года по туберкулезу / Нечаева О.Б. // Медицинский альянс. - М.: БИНОМ. - 2013. -№4.- С.19-26.

47. Никулина, Е.Л. Аллельный полиморфизм гена ШБу при туберкулезе легких / Е.Л. Никулина, И.О. Наследникова, О.И. Уразова [и др.] // Медицинская иммунология. - СПб.: РО РААКИ. - 2010. - Т.12. - №3. -С.259-264.

48. Новицкий, В.В. Особенности поверхностного фенотипа лимфоцитов крови у больных туберкулезом / В.В. Новицкий, А.К. Стрелис, О.И. Уразова [и др.] // Медицинская иммунология. - СПб.: РО РААКИ. - 2005. - Т.7 - №5-6. - С.587-592.

49. Пат. 2503005, МПК G01N33/53 Способ диагностики туберкулеза легких / Е.В. Васильева, В.Н. Вербов, А.А.Тотолян, И.В. Лядова, И.Ю.Никитина ^Ц). - № 2012128311/15; заявл. 02.07.2012; опубл. 27.12.2012, Бюл. № 36. - 11с.

50. Пат. 2503006, МПК G01N33/53 Способ диагностики туберкулезного инфицирования / Е.В. Васильева, В.Н. Вербов, А.А. Тотолян, И.В. Лядова, И.Ю. Никитина ^Ц). - № 2012128312/15; заявл. 02.07.2012; опубл. 27.12.2012, Бюл. № 36. - 9с.

51. Перельман, М.И. Фтизиатрия: учебная литература для студентов медицинских вузов. / М.И. Перельман, В.А. Корякин, И.В. Богадельникова. -3-е изд. - М.: Медицина. - 2004. - 520с.

52. Петри, А. Наглядная статистика в медицине. Перевод с английского. / А.Петри, К. Сэбин. - М.: ГЭОТАР-МЕД. - 2003. - 144с.

53. Писаренко, М.С. Особенности секреции интерферона гамма при лекарственно-устойчивом туберкулезе легких / М.С. Писаренко //

Фундаментальные исследования. - М.: Издательский Дом «Академия Естествознания». - 2013. - №9. - С.444-447.

54. Пичугина, Л.В. Изменение фенотипа лимфоцитов при неиммунодефицитных патологиях / Л.В. Пичугина // Лабораторная медицина. - М.: РАМЛД.- 2008. - №9. - С.39-45.

55. Платонов, А.Е. Статистический анализ в медицине и биологии: задачи, терминология, логика, компьютерные методы. - М.: Издательство РАМН. -2000. - 52с.

56. Подгаева В.А. Эпидемическая ситуация по туберкулезу и деятельность противотуберкулезной службы на Урале в 2015 году / Под ред. д.м.н. С.Н. Скорнякова. Екатеринбург. - 2016. - 425 с.

57. Приказ МЗ РФ № 109 от 21 марта 2003 года «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации»

58. Проточная цитометрия в экспериментальной биологии / И.В. Кудрявцев, С.В. Хайдуков, А.В. Зурочка [и др.] - Екатеринбург: РИО УрО РАН. - 2012. -192с.

59. Салина, Т.Ю. Особенности продукции цитокинов у больных туберкулезом легких / Т.Ю. Салина, Т.И. Морозова // Клиническая лабораторная диагностика. - М.: Медицина. - 2013. - №3 - С.18-20.

60. Сахно, Л.В. Дефект антигенпрезентирующих клеток у больных туберкулезом легких / Л.В. Сахно, Ж.М. Распай, М.А. Тихонова // Медицинская иммунология. - СПб.: РО РААКИ. - 2009. - №11(2-3). - С.245-254.

61. Сахно, Л.В. Дисфункции макрофагов, генерированных из моноцитов крови больных туберкулезом легких / Л.В. Сахно, М.А. Тихонова, С.Д. Никонов [и др.] // Бюллетень СО РАМН. - Изд-во СО РАН. - 2010. - №30(2). - С.101-108.

62. Свирщевская, Е.В. Иммунитет при туберкулезе и аспергиллезе (обзор) / Е.В. Свирщевская, В.С. Митрофанов, Р.И. Шендерова [и др.] // Проблемы медицинской микологии. - СПб. - 2005. - №7(1). - С.3-13.

63. Сибиряк, С.В. Апоптоз и иммунная система / С.В. Сибиряк, О.М. Капулер, Н.Н. Курчатова [и др.] // Медицинский вестник Башкортостана. - Изд-во БГМУ. - 2006. - Т.1.- №1. - С.127-133.

64. Современные методы оценки функций фагоцитов в экспериментальной биологии / И.В. Кудрявцев, А.В. Зурочка, С.В. Хайдуков [и др.] - М.: Наука. -2012. - №3(1). - С.3-20.

65. Ставицкая, Н.В. Исследование генетических факторов у детей с латентной туберкулезной инфекцией / Н.В. Ставицкая // Фундаментальные исследования. - М.: издательский Дом «Академия Естествознания».- 2010. - №5. - С.53-59.

66. Стрелис, А.К. Продукция оксида азота мононуклеарами крови у больных лекарственно-чувствительным и лекарственно-устойчивым туберкулезом легкого / А.К. Стрелис, В.В. Новицкий, О.И. Уразова [и др.] // Бюллетень сибирской медицины. - Томск: СГМУ. - 2006. - №4. - С.57-62.

67. Суркова, Л.К. Продукция цитокинов и функциональное состояние альвеолярных макрофагов в очаге воспаления у больных туберкулезом легких с множественной лекарственной устойчивостью / Л.К. Суркова, Н.С. Шпаковская, М.И. Дюсьмикеева [и др.] // Медицинская иммунология. -СПб.: РО РААКИ. - 2006. - Т.8 - №2-3. - С.292-293.

68. Суховей, Ю.Г. Иммунный статус больных с впервые выявленным инфильтративным туберкулезом легких, страдающих частой респираторной инфекцией / Ю.Г. Суховей, С.А. Петрова, А.В. Попов [и др.] // Проблемы туберкулеза и болезней легких. - М.: Медицина.- 2004. - №5. - С.26-29.

69. Тарасова, Л.Г. Иммунологический статус больного туберкулезом / Л.Г. Тарасова, Е.Н. Стрельцова // Инфекция и иммунитет. - СПб.: НИИЭМ имени Пастера. - 2015. - Т.5. -№1. - С.85-88.

70. Титаренко, О.Т. Сравнительная ценность биохимических маркеров клеточного иммунитета в диагностике туберкулезного плеврита / О.Т. Титаренко, Д.С. Эсмедляева, Т.Л. Перова [и др] // Клиническая лабораторная диагностика. - М.: Медицина. - 2010. - №1. - С46-49.

71. Титаренко, О.Т. Возможность прогнозирования результатов интенсивной фазы лечения больных инфильтративным туберкулезом легких / О.Т. Титаренко, М.Е. Дьякова, Д.С. Эсмедляева [и др] // Медицинский альянс. -СПб.: Национальная ассоциация фтизиатров. - 2013. - №2 - С.21-27.

72. Туберкулез. Выявление, лечение и мониторинг по К.Томену / под ред Т. Фридена. Перевод с англ. - Всемирная организация здравоохранения. Женева. - 2004. - 388с.

73. Туберкулез. Особенности течения, возможности фармакотерапии / под ред. А.К. Иванова. - Санкт-Петербург. - 2009. - 108с.

74. Туберкулез с множественной лекарственной устойчивостью / под ред. И. Бастиан, Ф. Порталс.// М.: «Медицина и жизнь». - 2003. - 368с.

75. Тюлькова, Т.Е. Иммунологические особенности туберкулезной инфекции на разных этапах ее развития / Т.Е. Тюлькова, Ю.П. Чугаев, Э.А. Кашуба // Тюмень: ООО «Сити-пресс», 2008. - 60с.

76. Филинюк, О.В. Функциональные и цитохимические особенности фагоцитов у больных туберкулезом легких // О.В. Филинюк, Н.А. Земляная, О.И. Уразова [и др.] // Бюллетень сибирской медицины. - Томск: СГМУ. -2005. - № 1. - С.24-27.

77. Фрейдлин, И.С. Взаимосвязи врожденного и приобретенного иммунитета при инфекциях (ревизия классических догм) / И.С. Фрейдлин // Инфекция и иммунитет. - СПб.: Изд-во НИИЭМ имени Пастера. - 2011. - Т.1. -№3. -С.199-206.

78. Хаитов, М.Р. руководство по клинической иммунологии / М.Р. Хаитов, Б.В. Пинегин, А.А. Ярилин. - М.: ГЭОТАР-Медиа. - 2009. - 352с.

79. Хаитова, З.К. Особенности иммунофенотипа дендритных клеток и Т-лимфоцитов у больных туберкулезом легких / З.К. Хаитова, О.И. Уразова, Р.Р. Хасанова [и др.] // Фундаментальные исследования. - М.: Издательский Дом «Академия Естествознания». - 2012. - №12(2). - С.386-390.

80. Хайдуков, С.В. Вопросы современной проточной цитометрии. Клиническое применение / Под ред. С.В. Хайдукова, А.В. Зурочки -

Челябинск: Челябинская государственная медицинская академия. - 2008. -196с.

81. Хайдуков, С.В. Цитометрический анализ в клинической иммунологии / С.В. Хайдуков, А.В. Зурочка, В.А. Черешнев. - Екатеринбург: УрО РАН. -2011. - 220с.

82. Хайдуков, С.В. Возможности проточной цитофлюориметрии в диагностике инфекционных заболеваний. Часть I / С.В. Хайдуков, А.В. Зурочка // Инфекция и иммунитет. - СПб.: Изд-во НИИЭМ имени Пастера. -2011. - Т.1. -№1. - С.59-66.

83. Холодок, О.А. Морфологические аспекты активности туберкулом легкого / О.А. Холодок, М.И. Черемкин // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. - Владивосток: ФГБУ ДНЦ ФПД СО РАМН. - 2013. - Вып. 49. - С.51-54.

84. Хонина, Н.А. Апоптоз лимфоцитов возможный механизм нарушения антигенспецифического ответа при туберкулезе легких / Н.А. Хонина, Л.В. Сахно, М.Н. Норкин [и др.] // Медицинская иммунология. - СПб.: РО РААКИ. - 2001. - Т.3. - №1. - С.51-59.

85. Чернушенко, Е.Ф. Цитокины в оценке иммунной системы у больных туберкулезом легких / Е.Ф. Чернушенко, Л.П. Кадан, О.Р. Панасюкова [и др.] // Украинский пульмонологический журнал. - Киев. - 2010. - №2 - С.39-43.

86. Чернушенко, Е.Ф. Противотуберкулезный иммунитет / Е.Ф. Чернушенко, Р.Г. Процюк // Часть II. Украинский пульмонологический журнал. - Киев. -2010. - №4 - С.53-58.

87. Чечина, О.Е. Белки семейства ВСЬ-2 - молекулярные мишени проапоптотического действия ИЛ-2 и ИЛ-4 / О.Е. Чечина, Н.В. Рязанцева, В.В. Новицкий [и др.] // Иммунология. - М.: Медицина. - 2011. - №3. - С.127-130.

88. Чурина, Е.Г. Субпопуляционный состав регуляторных Т-клеток крови у больных туберкулезом легких с множественной лекарственной устойчивостью / Е.Г. Чурина, В.В. Новицкий, О.И. Уразова [и др.] // Бюллетень сибирской медицины. - Томск: СГМУ. - 2011. - №4. - С.183-186.

89. Чурина, Е.Г. Показатели апоптоза и пролиферативной активности лимфоцитов у больных туберкулезом легких с множественной лекарственной устойчивостью к M.tuberculosis / Е.Г. Чурина, В.В. Новицкий, О.И. Уразова [и др.] // Медицинская иммунология. - СПб.: РО РААКИ. - 2012. - Т.14 - №1-2.

- С.119-126.

90. Чурина, Е.Г. Иммуносупрессорные эффекты регуляторных Т-лимфоцитов крови при диссеминированном туберкулезе легких с множественной лекарственной устойчивостью M.tuberculosis / Е.Г. Чурина, О.И. Уразова, В.В. Новицкий [и др.] // Бюллетень сибирской медицины. - Томск: СГМУ. - 2013. -Т.12. - №1. - С.143-146.

91. Шепелькова, Г.С. Исследование молекулярных механизмов патогенеза туберкулеза на экспериментальных моделях / Г.С. Шепелькова, В.В. Евстифеев, А.С. Апт // Туберкулез и болезни легких. - М.: Издательский дом «НЬЮ ТЕРРА». - 2012. - №7 - С.3-11.

92. Шилова, М.В. Туберкулез в России в 2012 - 2013 году / М.В. Шилова. -М.,2014. - 244с.

93. Шурыгин, А.А. Значимость концентрации ИЛ-1Р в сыворотке крови в определении инфицирования микобактериями туберкулеза / А.А. Шурыгин, О.В. Моисеева // пермский медицинский журнал. - Пермь. - 2009. - Т. XXVI.

- №1. - С.58 - 63.

94. Arjan J. Kwakernaak, A comparison of an interferon-gamma release assay and tuberculin skin test in refractory inflammatory disease patients screened for latent tuberculosis prior to the initiation of a first tumor necrosis factor ainhibitor /A.J. Kwakernaak, P.M.Houtman, J.F.L. Weel [et al.] // ClinRheumatol. - 2011. -Р.505-509.

95. Bekker, L.G. TNF-alpha controls intracellular mycobacterial growth by both inducible nitric oxide synthase-dependent and inducible nitric oxide synthase-independent pathways / L.G. Bekker, S. Freeman, P.J. Murray[et al.] // J Immunol. -2001. - №166(11). - Р.6728-6734.

96. Beham, A. W. A TNF-regulated recombinatorial macrophage immune receptor implicated in granuloma formation in tuberculosis / A.W. Beham, K. Puellmann, R.Laird [et al.] // PLoSPathog. - 2011. - №7(11) - e1002375. doi: 10.1371/journal.ppat.1002375. Epub 2011 Nov 17.

97. Bold, T. D. CD4+T cell dependent IFN-y production by CD8+ effector T cells in M. tuberculosis infection / T.D. Bold, J.D. Ernst // J. Immunol. - 2012. - №189 (5). - P.2530-2536.

98. Bruns, H. Abelson tyrosine kinase controls phagosomal acidification required for killing of Mycobacterium tuberculosis in human macrophages / H. Bruns, F.Stegelmann[et al.] // The J. of Immun. -2012. - №10. - P. 4049 -1201538.

99. Buu, N. The Bcg Host-Resistance Gene / N. Buu, F. Sanchez, E. Schurr // Clinical Infectious Diseases. - 2000. - №31(3). - P.81-85.

100. Cho, H. Recombinant guinea pig tumor necrosis factoralfa stimulates the expression of interleukin-12 and the inhibition of Mycobacterium tuberculosis growth in macrophages /H. Cho, T.M. Lasko // Infect. Immun. - 2005. - №73(3). -P.1367-1376.

101. Clemens, A. R. PRAM-1 is required for optimal integrin-dependent neutrophil function / A.R. Clemens, A.S.Newbrough, Y. Chung [et al.] // Mol Cell Biol. - 2004. - №24(24). - P.10923-10932.

102. Cooper, A.M. The role of cytokines in the initiation, expansion and control of cellular immunity to tuberculosis / A.M. Cooper, S.A. Khader // Immunological Reviews. - 2008. - №226(1). - P.191-204.

103. Daker, S. An abnormal phenotype of lung Vy9V52 T cells impairs their responsiveness in tuberculosis patients / E.S.Daker, A. Sacchi, C. Montesano [et al.] // Cell Immunol. - 2013. - №282 (2). - P. 106-112.

104. Danelishvili, L. Inhibition of the Plasma-Membrane Associated Serine Protease Cathepsin G by Mycobacterium Tuberculosis Rv3364c Suppresses Caspase-1 and Pyroptosis in Macrophages / L.Danelishvili, L.J.Everman, J.M.McNamara[et al.] // Front. Microbiol. - 2012. - №2. - P.281-283.

105. Deretic, V. Mycobacterium tuberculosis inhibition of phagolysosome biogenesis and autophagy as a host defence mechanism / V. Deretic, S. Singh, S. Master // Cellular Microbiol. - 2006. - №8(5). - P.719-727.

106. Deveci, F. Lymphocyte Subpopulations in Pulmonary Tuberculosis Patients / F. Deveci, H. Handan Akbulut, Il.Celik [et al.] // Mediators of Inflammation. -2006. - №89070. - P.1-6.

107. Gonzalez-Juarrero, M. Dynamics of Macrophage Cell Populations During Murine Pulmonary Tuberculosis / M. Gonzalez-Juarrero, T.S. Shim, A. Kipnis [et al.] // Journal of Immunology. - 2003. - №171. - P.3128-3135.

108. Guglielmetti, L. Lymphocyte subpopulations in active tuberculosis: association with disease severity and the QFT-GIT assay / L. Guglielmetti, A. Cazzadori, M. Conti [et al.] // Int J Tuberc Lung Dis. - 2013. - №17(6) - P.825-828.

109. Hall-Stoodley Mycobacterium tuberculosis binding to human surfactant proteins A and D, fibronectin, and small airway epithelial cells under shear conditions / Hall-Stoodley, L.G. Watts, J.E. Crowther [et al.] // Infect and Immun. -2006 - №74(6). - P.3587-3596.

110. Hayashi, F. Toll-like receptors stimulate human neutrophil function / F.Hayashi, K.T. Means, D. Luster // Blood. - 2003. - №102(7). - P.2660-2669.

111. Henriette, R. S. Prospective Comparison of two brands of tuberculin skin tests and Quantiferon-TB Gold in-tube Assay performances for tuberculosis infection in hospitalized children / R. St. Henriette, Gh. Murgoci, I.Ulea [et al.] // A J. of clinical medicine. - Bucharest, Romania. - 2010. - №5(2). - P.271-275.

112. Hussain, T. CD4+, CD8+, CD3+ cell counts and CD4+/CD8+ ratio among patients with mycobacterial diseases (Leprosy, Tuberculosis), HIV infections and Normal Healthy Adults: A comparative analysis of studies in different regions of India / T.Hussain, K.K. Kulshreshtha, V.S. Yadav [et al.] // J Immunoassay Immunochem. - 2015. - №36(4) - P.420-443.

113. Ibrahim, L. Crucial role of CD4+CD25+FOXP3+ T regulatory cell, interferon-Y and interleukm-16 in malignant and tuberculous pleural effusions / L. Ibrahim,

M. Salah, A.A.E. Rahman [et al.] // Immunol. Invest. - 2013. - №42(2). - P.122-136.

114. Kamath, A.B. Cytolytic CD8+ T cells recognaizing CFP10 are recruited to the lung after Mycobacterium tuberculosis infection / A.B. Kamath, J. Woodworth, X.Xiong [et al.] // The J of Exp. Med. - 2004. - №200(11). - P.1479-1489.

115. Kamath, A.T. Synchronization of dendritic cell activation and antigen exposure is required for the induction of Th1/Th17 responses / A.T. Kamath, B. Mastelic, D.Christensen [et al.] // J Immunol. - 2012. - №188(10). - P.4828-4837.

116. Katti, M.K. Assessment of serum IL-1, IL-2 and IFN-y levels in untreated pulmonary tuberculosis patients: role in pathogenesis / M.K. Katti // Arch Med Res.

- 2011. - №42(3) - P.199-201.

117. Kibiki, G.S. Serum and BAL macrophage migration inhibitory factor levels in HIV infected Tanzanians with pulmonary tuberculosis or other lung diseases / G.S. Kibiki, van der Ven A.J., A. Geurts-Moespot [et al.] // Clin. Immunol. - 2007.

- №123(1) - P.60-65.

118. Korbel, D.S. Innate immunity in tuberculosis: myths and truth / D.S. Korbel, B. Schneider, U.E. Schaible // Microbes. Infect. - 2008. - №9. - Vol.10. - P.995-1004.

119. Lafont, V. Production of TNF-alpha by human V gamma 9V delta 2 T cells via engagement of Fc gamma RIIIA, the low affinity type 3 receptor for the Fc portion of IgG, expressed upon TCR activation by nonpeptidic antigen / V. Lafont, J. Liautard, J.P. Liautard [et al.] // J Immunol. - 2011. - №166 (12). - P.7190-7199.

120. Li, L. Increased frequency of CD4(+)CD25(high) Treg cells inhibit BCG-specific induction of IFN-gamma by CD4(+) T cells from TB patients/ L. Li, S.H. Lao, C.Y. Wu // Tuberculosis. - 2007. - №87(6). - P.526-534.

121. Li, Y. The role of airway epithelial cells in response to mycobacteria infection / Y. Li, Y. Wang, X. Liu // Clin. And Dev. Immun. - 2012. - №791392. - P 9-11.

122. Masood, K.I. Expression of M.tuberculosis-induced suppressor of cytokine signaling (SOCS) 1, SOCS3, FoxP3 and secretion of IL-6 associates with differing

clinical severity of tuberculosis / K.I Masood, M.E. Rottenberg, N. Salahuddin [et al.] // Infectious Diseases. - 2013. - №13. - P.1-9.

123. Mazurek, J. Divergent effects of Mycobacterial cell wall glycolipids on maturation and function of human monocyte-derived dendritic cells / J.Mazurek, L. Ignatowich, G.Kallenius [et al.] // PLoS One. -2012. - №7(8): 42515.

124. Mihret, A. Dendritic cells activate and mature after infection with Mycobacterium tuberculosis / A. Mihret, G. Mamo, M. Tafesse [et al.] // BMC Research Notes. - 2011. - №4(247). - P.1-7.

125. Muralidhar, K. K. / The fbpA mutant derived from Mycobacterium tuberculosis H37Rv has an enhanced susceptibility to intracellular antimicrobial oxidative mechanisms, undergoes limited phagosome maturation and activates macrophages and dendritic cells / K.K. Muralidhar, D. Guixiang, L.Y. Armitige [et al.] // Cellular Microbiology. - 2008. - №10(6). - P.1286-1303.

126. Nagarkar, D.R. Airway epithelial cells activate TH2 cytokine production in mast cells through IL-1 and thymic stromal lymphopoietin / D.R. Nagarkar; J. A. Poposki; R. P. Schleimer [et al.] // J Allergy ClinImmunol. - 2012. - №130(1). -P.225-232.

127. Nathan, C. Reactive oxygen and nitrogen intermediates in the relationship between mammalian hosts and microbial pathogens / C. Nathan, U.M. Shiloh // PNAS. -2000. - №97. - P.168841-168848.

128. Noss, E.N. Toll-like receptor 2-dependent inhibition of macrophage class II MHC expression and antigen processing by 19-kDa lipoprotein of Mycobacterium tuberculosis / E.N. Noss, R.K. Pai, T.J. Sellati // J. Immunol. - 2001. - №167. -P.910-918.

129. Ocejo-Vinyals, J.-G. Mannose-Binding Lectin Promoter Polymorphisms and Gene Variants in Pulmonary Tuberculosis Patients from Cantabria (Northern Spain) / J.G. Ocejo-Vinyals, L. Lavin-Alconero, P. Sanchez-Velasco [et al.] // Pulmonary Medicine. - 2012. - №2012. -P. 1-6.

130. Olleros, M. L. Contribution of Transmembrane Tumor Necrosis Factor to Host Defense against Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guerin and

Mycobacterium tuberculosis Infections / M.L. Olleros, R.Guler, D.Vesin[et al.] // Am J Pathol. - 2005. - №166(4). - P.1109-1120.

131. Peters, W. Mechanisms of cell recruitment in the immune response to Mycobacterium tuberculosis / W. Peters, J.D. Ernst // Microbes and Infect. - 2003. -№5(2). - P.151-158.

132. Pitt, J.M. Blockade of IL-10 signaling during BCG vaccination enhances and sustains Th1, Th17, and innate lymphoid IFN-y and IL-17 responses and increases protection to Mycobacterium tuberculosis infection / J. M. Pitt, E. Stavropoulos, An.O'Garraand [et al.] // J of Immunol. - 2012. - №189(8). - P.4079-4087.

133. Raja A. Immunology of tuberculosis / A. Raja // Indian J. Med Res 120. -2004. - №120. - P.213-232.

134. Repasy, T. Intracellular Bacillary Burden Reflects a Burst Size for Mycobacterium tuberculosis In Vivo / T.Repasy, J. Lee, S. Marino [et al.] // Plos. -2013. - №9(2). - P.1-14.

135. Rivas-Santiago, B. b-Defensin Gene Expression during the Course of Experimental Tuberculosis Infection / B. Rivas-Santiago, E.Sada, V.Tsutsumi [et al.] // J of Infect Dis. - 2006. - №194 (5). - P.697-701.

136. Sakaguchi, S. Regulatory T Cells and Immune Tolerance / S. Sakaguchi, T.Yamaguchi, T. Nomura [et al.] // Cell. - 2008. - №33(1). - P.775-787.

137. Santini, S.M. A new type 1 IFN-mediated pathway for the rapid differentiation of monocytes into highly active dendritic cells / S.M. Santini, T.D. Pucchini, C.Lapenta [et al.] // Stem cells. - 2003. - №21. - P.357-362.

138. Scheller, J. The pro- and anti-inflammatory properties of the cytokine interleukin-6 / J.Scheller, A.Chalarisb, D. Schmidt-Arrasb [et al.] // Biochimica et Biophysica Acta. - 2011. - P.878-888.

139. Selvaraj, P. NRAMPI gene polymorphism in pulmonary and spinal tuberculosis / P. Selvaraj, G. Chaandra, S.M. Kurian // Curr Sci. - 2002. - №82. -P.451-454.

140. Sever-Chroneos, Z. Prolonged survival of scavenger receptor class A-deficient mice from pulmonary Mycobacterium tuberculosis infection / Z. Sever-

Chroneos, A.Tvinnereim, R.L. Hunter [et al.] // Tuberculosis. - 2011. - №1. - Р.69-74.

141. Shan A.J. Human TOLLIP regulates TLR2 and TLR4 signaling and its polymorphisms are associated with susceptibility to tuberculosis / J.A Shah, J.C. Vary, T.T.H. Chau [et al.] // The J of Immunol. - 2012. - №10. - Р.40496 1103541.

142. Shenjie, T. Increased Cytokines Response in Patients with Tuberculosis Complicated with Chronic Obstructive Pulmonary Diasease / T. Shenjie, H. Cui, L.Yao [et al.] // Plos one. - 2013. - №8(4). - eb2385.

143. Soloff, A.C. Enemy at the gates: dendritic cells and immunity to mucosal pathogens / A.C. Soloff, S.M. Barratt-Boyes // Cell Research. - 2010. - №20(8). -Р.872-885.

144. Stenger, S. Immunological control of tuberculosis: role of tumour necrosis factor and more / S. Stenger // Annals of the Rheumatic Dis. - 2005. - №64(4). - Р. 24-28.

145. Takeda, K. Toll-like receptor in innate immunity / K. Takeda, А. Shizuo // Int. Immunol. -2005. - №17(1). - Р.1-14.

146. Voskuil, I.M. The response of Mycobacterium tuberculosis to reactive oxygen and nitrogen

species / I.M.Voskuil, L.I.Bartek, K.Viskonti [et al.] // Front Microbio. - 2011. - №2. - Р.105-108.

147. Wang, J. MTB-specific lymphocyte responses are impaired in tuberculosis patients with pulmonary cavities / J. Wang, Y.Dai, J.Liu, Y.Yin [et al.] // Eur. J. Med. Res. - 2017. - 22:4. - С.1-7.

148. WHO GLOBAL MINISTERIAL CONFERENCE [электронный ресурс] http://www.who.int/tb/features archive/Global MininsterialConf TB/en/

149. Witko-Sarsat, V. Neutrophils: Molecules, Functions and Pathophysiological Aspects / V. Witko-Sarsat, Ph. Rieu, B. Descamps-Latscha [et al.] // Laboratory Investigation; a Journal of Technical Methods and Pathology. - 2000. - №80. -P.617-653.

150. Wivagg, C. Molecular genetics of beta-lactam sensitivity and resistance in M. Tuberculosis / C. Wivagg // Harvard University, Massachusetts. - 2012. - 165p.

151. Wu Li. Roles of Mucosal Immunity against Mycobacterium tuberculosis / Wu Li, G. Deng, M. Li [et al.] // Tuberculosis Research and Treatment. - 2012. - №

2012. - P.1-12.

152. Yao, S. CD4+ T cells contain early extrapulmonary tuberculosis (TB) dissemination and rapid TB progression and sustain multieffector functions of CD8+ T and CD3-lymphocytes: mechanisms of CD4+ T cell immunity / S. Yao, D. Huang, C.Y. Chen [et al.] // J. Immul. - 2014. -№192 (5). - P.2120-2132.

153. Yassin, M.A. Can Interferon-Gamma or Interferon-Gamma-Induced-Protein-10 Differentiate Tuberculosis Infection and Disease in Children of High Endemic Areas? / M.A. Yassin, R. Petrucci, K.T. Garia [et al.] // Plos One. - 2011. -September 23. - DOI: 10.1371/journal.pone.0023733

154. Zaki, H.Y. Common polimorphisms in TLR4 gene associated with susceptibility to pulmonary tuberculosis in the Sunanese / H.Y. Zaki, K.H. Leung, W.C. Yiu [et al.] // Int J Tuberc Lung Dis. - 2012. - №16(7). - P.934-940.

155. Zhang, W. Variants of the natural resistence-associated macrophage protein 1 gene (NRAMP1) are associated with severe forms of pulmonary tuberculosis / W. Zhang, L. Shao, X. Weng [et al.] // Clinical Infectious Diseases. - 2005. -№40(9). - P.1232-1236.

156. Zufferey, C. The contribution of non-conventional T cells and NK cells in the mycobacterial-specific IFNy response in Bacille Calmette-Guerin (BCG)-immunized infants / C.Zufferey, S. Germano, B. Dutta [et al.] // PloS One. -

2013. - №8(10). - P.1-9.