Фитохимическое изучение побегов водяники черной (Empetrum nigrum L.) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Понкратова Анастасия Олеговна

• Понкратова Анастасия Олеговна
• кандидат наук
• 2022

Оглавление диссертации кандидат наук Понкратова Анастасия Олеговна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Систематическое положение и распространение представителей рода Empetrum L, общее ботаническое описание Empetrum nigrum L

1.2 Основной состав вторичных метаболитов Empetrum nigrum L

1.2.1 Флавоноиды

1.2.2 Бибензилы и 9,10-дигидрофенантрены

1.2.3 Дибенз [b,f] оксепины

1.2.4 Фенолкарбоновые кислоты

1.2.5 Алифатические соединения

1.2.6 Терпеновые соединения

1.2.7 Другие классы соединений, идентифицированные в Empetrum nigrum ... 22 1.3. Биологическая активность и применение Empetrum nigrum L

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Материалы исследования

2.2 Методы фотохимического исследования

ГЛАВА 3. ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЙ ФИТОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПОБЕГОВ

EMPETRUM NIGRUM

3.1 Предварительный фитохимический анализ методом ВЭТСХ

3.2 Предварительный фитохимический анализ методом ВЭЖХ-УФ

3.3 Предварительный фитохимический анализ методом газовой

хроматографии с масс-спектрометрическим детектором (ГХ-МС)

3.4 Предварительный фитохимический анализ методом ВЭЖХ-МС

ГЛАВА 4. ДЕТАЛЬНЫЙ ФИТОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ

4.1 Выделение и установление структуры флавоноидов

4.1.1 Выделение и установление структуры халконов и дигидрохалконов

4.1.2 Выделение и установление структуры других подклассов флавоноидов

4.2 Выделение и установление структуры бибензилов

4.3 Выделение и установление структуры 9,10-дигидрофенантренов

4.4 Выделение и установление структуры проантоцианидинов

ГЛАВА 5. ГХ-МС АНАЛИЗ ЛИПОФИЛЬНЫХ ВТОРИЧНЫХ МЕТАБОЛИТОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ПОБЕГОВ EMPETRUM NIGRUM L

5.1 Расшифровка EI-MS фрагментации бибензилов

5.2 Расшифровка EI-MS фрагментации 9,10-дигидрофенантренов

5.3 Расшифровка EI-MS фрагментации халконов

5.4 Расшифровка EI-MS фрагментации дигидрохалконов

5.5 Расшифровка EI-MS фрагментации флаванона

ГЛАВА 6. СРАВНЕНИЕ ВЭЖХ И ГХ-МС ПРОФИЛЕЙ ЭКСТРАКТОВ EMPETRUM NIGRUM, СОБРАННЫХ В РАЗЛИЧНЫХ РЕГИОНАХ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

6.1 Сравнение ВЭЖХ профилей экстрактов Empetrum nigrum

6.2 Сравнение ГХ-МС профилей экстрактов Empetrum nigrum

ГЛАВА 7. ПРОГНОЗ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ОСНОВНЫХ ВТОРИЧНЫХ МЕТАБОЛИТОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ПОБЕГОВ EMPETRUM NIGRUM

7.1 Прогноз биологической активности выделенных соединений,

относящихся к подклассам халконов и дигидрохалконов

7.2 Прогноз биологической активности выделенных соединений,

относящихся к другим подклассам флавоноидов

7.3 Прогноз биологической активности выделенных соединений, относящихся классу бибензилов

7.5 Прогноз биологической активности выделенных соединений, относящихся классу 9,10-дигидрофенантренов

7.6 Прогноз биологической активности выделенных соединений, относящихся классу проантоцианидинов А-типа

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фитохимическое изучение побегов водяники черной (Empetrum nigrum L.)»

ВВЕДЕНИЕ ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы исследования. Одной из ключевых задач современной фармации является поиск новых перспективных соединений - потенциальных лекарственных кандидатов. Природные объекты, в особенности растительные, издавна являются богатыми источниками новых молекул, нашедшие широкое применение в мировой пищевой и фармацевтической промышленности [1-6]. Химический состав некоторых растений, имеющих полезные свойства согласно данным этнофармакологии, исследован незначительно или вовсе не изучен [7]. Таким образом, выделение, установление структуры и исследование природных соединений, которые проявляют высокую степень структурного разнообразия, является неотъемлемой частью современного поиска и разработки новых лекарственных препаратов [8].

На счет видовой принадлежности представителей рода Empetrum нет единого мнения, так как внутри рода имеется значительное разнообразие морфологических признаков, филогенетическая полезность которых ограниченна [9]. Водяника черная (Empetrum nigrum L.), представляющая собой вечнозеленый кустарничек из семейства Ericaceae, содержит в своем составе разнообразные классы вторичных метаболитов, которые обеспечивают широкий диапазон применения водяники черной. Водяника черная широко применяется в народной медицине многих стран в качестве противоцинготного, гепатопротекторного, церебропротекторного средства, для лечения заболеваний нервной системы, судорожных состояний, а также мочевыделительной системы [10,11]. В научной литературе имеются данные о противосудорожной, противомикробной, противовоспалительной и гипогликимической активности экстрактов из водяники черной [10,12-16]. Также следует отметить обширную сырьевую базу данного вида на территории Российской Федерации [16]. Таким образом, выделение из побегов E. nigrum вторичных метаболитов в индивидуальном виде и установление их структуры позволит получить ряд потенциальных фармацевтических субстанций и

биологически активных добавок на их основе. А сравнение состава вторичных метаболитов побегов водяники черной, произрастающей в различных регионах Российской Федерации, в дальнейшем может быть использованы для обоснованного выбора места заготовки объекта для проведения дальнейших химико-фармакологических исследований для разработки перспективных лекарственных кандидатов.

Степень разработанности темы исследования. Проводился ряд исследований по фитохимическому анализу плодов и побегов E. nigrum в результате которых был выделен ряд соединений [44-49,52,62,81,84]. Фитохимический анализ побегов водяники черной с использованием методов ВЭЖМ-МС, ГХ-МС и ВЭТСХ, изучение ГХ-МС фрагментаций выделенных индивидуальных соединений, а также сравнение ВЭЖХ и ГХ-МС профилей экстактов, полученных из сырья, собранного в различных местах обитания ранее не проводились.

Цель диссертационной работы.

Провести фитохимическое изучение побегов Empetrum nigrum путем выделения вторичных метаболитов в индивидуальном виде и установления их структуры, а также осуществить компьютерный прогноз биологической активности выделенных индивидуальных соединений.

Задачи диссертационного исследования.

1. Провести предварительный фитохимический анализ суммарных экстрактов и подфракций, полученных с использованием растворителей различной полярности из побегов Empetrum nigrum, используя современные физико-химические методы анализа - ВЭТСХ, ВЭЖХ-УФ, ГХ-МС и ВЭЖХ-МС.

2. Выделить вторичные метаболиты в индивидуальном виде, используя методы колоночной хроматографии на открытых колонках с сорбентами различной селективности, а также с использованием препаративной ВЭЖХ, и установить структуры выделенных индивидуальных соединений с помощью современных спектроскопических и физико-химических методов анализа:

одномерной (1Н, 13С) и двумерной (COSY, NOESY, HSQC, HMBC) ЯМР-спектроскопии, масс-спектрометрии высокого разрешения.

3. Провести анализ компонентного состава побегов Empetrum nigrum и установить основные биомаркеры, позволяюще проводить определение подлинности и доброкачественности данного сырья.

4. Провести ГХ-МС анализа липофильных вторичных метаболитов, выделенных из побегов Empetrum nigrum L., установления основных путей фрагментации и индексов удерживания, с целью использования данной информации в идентификации данных соединений в других объектах.

5. Провести сравнение качественного состава сырья побегов Empetrum nigrum произрастающих в различных регионах Российской Федерации.

6. Провести компьютерный прогноз биологической активности выделенных индивидуальных соединений в программе PASS (Prediction of Activity Spectra for Substances).

Научная новизна исследования. Впервые проведено комплексное фитохимическое изучение состава побегов E. nigrum методами ВЭЖХ-УФ и ВЭТСХ, в результате которого установлено содержание основных классов вторичных метаболитов: флавоноидов, фенолкарбоновых кислот, конденсированных танинов, бибензилов, 9,10-дигидрофенантренов, халконов и дигидрохалконов, среди которых мажорными оказались бибензилы и дигидрохалконы.

В результате ГХ-МС анализа побегов E. nigrum установлено содержание 39 соединений, относящихся к группам ароматических альдегидов и карбоновых кислот, терпенов, а также производным бибензила, 9,10-дигидрофенантрена, халкона и дигидрохалкона.

В результате ВЭЖХ-МС анализа побегов водяники черной было идентифицировано 44 соединения, относящихся к классам флавонолов, флаванонов, дигидрофлаванолов и их гликозидов, флаван-3-олов, танинов, 9,10-дигидрофенантренов, бибензилов, халконов и дигидрохалконов.

Было выделено 19 индивидуальных соединений, из которых три соединения -(1-(3,5-дигидрокси-4-метоксифенил)-2-фенилэтан) (10), 6-гидрокси-2,3,4-триметокси-9,10-дигидрофенантрен (13) и 2',4'-диметоксидигидрохалкон (6) являются новыми природными соединениями. Впервые из E. nigrum выделены в индивидуальном виде и установлена структура трех димерных проантоцианидинов А-типа - эпикатехин-(2р^0^7, 4р^8)-катехин (Процианидин А1) (19), эпикатехин-(2р^0^7, 4р^8)-эпикатехин (Процианидин A2) (18) и проантоцианидин А-типа с редким типом межмономерной связи - эпикатехин-(2p^O^5, 4р^6)-катехин (17), а также производных 9,10-дигидрофенантрена -4,7-дигидрокси-2,3-диметокси-9,10-дигидрофенантрен (эфемерантол-A) (14) и 2,3,4,7-тетраметокси-9,10-дигидрофенантрен (15).

Впервые установлены основные биомаркеры для определения подлинности и доброкачественности побегов E. nigrum - 2',4 - дигидроксихалон, 2,3,4-триметокси-5-гидрокси-9,10-дигидрофенантрен и 2',4'-дигидроксидигидрохалкон.

Впервые приведены расшифровки путей ГХ-МС фрагментаций выделенных липофильных соединений.

Впервые, с помощью ВЭЖХ-УФ и ГХ-МС, проведено сравнение качественного состава вторичных метаболитов, содержащихся в побегах E. nigrum произрастающих в различных регионах РФ.

Также впервые проведено компьютерное прогнозирование биологической активности для выделенных соединений с использованием программы PASS.

Теоретическая и практическая значимость работы. В результате фитохимического анализа экстрактов установлен состав основных вторичных метаболитов, содержащихся в побегах E. nigrum. Выделенные в индивидуальном виде мажорные вторичные метаболиты из побегов водяники черной с учетом результатов компьютерного прогнозирования их биологической активности являются потенциальными фармацевтическими и пищевыми субстанциями, требующие дальнейшего изучения методами in vitro, in situ и in vivo. Определены основные биомаркеры, по которым возможно определение подлинности и

доброкачественности побегов E. nigrum. Разработанные методики выделения индивидуальных соединений из побегов Empetrum nigrum универсальны и применимы для выделения индивидуальных соединений схожих химических классов из других видов сырья. Приведены расшифровки путей ГХ-МС фрагментации выделенных липофильных соединений, которые могут быть использованы для скрининга других природных источниках и обнаружения халконов, дигидрохалконов, бибензилов, 9,10-дигидрофенантренов и флаванонов. Результаты проведенного сравнительный анализ качественного состава вторичных метаболитов побегов Empetrum nigrum, собранных в различных регионах РФ, могут в дальнейшем использоваться для обоснованного выбора места заготовки данного объекта. Информация об основных путях фрагментаации полифенольных соединений при анализе метолом ГХ-МС, на примиере бибензилов, 9,10-дигидрофенантренов, халкаонов и дигиидрохалконов были внедрены в учебный процесс ФГБОУ ВО СПХФУ Минздрава России (акты от 15 ноября 2021 г.). Методология комплексного фитохимического анализа внедрена в научно-исследовательский процесс ФГБОУ ВО СПХФУ Минздрава России (акт от 15 ноября 2021 г.), методики выделения индивидуальных соединений, относящихся к классам халконов, дигидрохалконов, бибензилов, 9,10-дигидрофенантренов и конденсированных танинов внедрены в производство АО «Фармпроект» (акт от 10 ноября 2021 г.).

Методология и методы исследования. Исследование проводилось в период с 2019 по 2021 г. с использованием комплекса современных физико- химических методов анализа: ВЭТСХ, ВЭЖХ-УФ, ГХ-МС, ВЭЖХ-МС, ЯМР-спектроскопия и масс-спектрометрия высокого разрешения. Теоретическую основу исследования составляли труды зарубежных и отечественных ученых по фитохимическому анализу основных вторичных метаболитов плодов и побегов E. nigrum. Методология исследования заключалась в выделении индивидуальных веществ из побегов водяники черной и установлении их структуры.

Положения, выносимые на защиту

1. Результаты фитохимического анализа побегов Empetrum nigrum, полученные с помощью современных физико-химических методов анализа.

2. Результаты выделения и установления структуры выделенных индивидуальных соединений с помощью современных спектроскопических и физико-химических методов анализа. индивидуальных природных соединений из побегов Empetrum nigrum.

3. Результаты ГХ-МС анализа и расшифровка путей фрагментации, выделенных в индивидуальном виде липофильных вторичных метаболитов.

4. Результаты сравнение качесвтенного состава побегов Empetrum nigrum, собранных в различных регионах Российской Федерации.

5. Результаты компьютерного прогноза биологической активности выделенных индивидуальных соединений.

Степень достоверности и апробация работы. Основные результаты работы доложены на VII Российско-Финском Симпозиум «Санкт-Петербург и Турку: общие вызовы в области Наук о жизни» (Санкт-Петербург, 2020), IX Российско-Китайской встрече по арктической тематике «Двусторонние российско-китайские отношения: состояние и перспективы» (Санкт-Петербург, 2020), X и XI Всероссийские научные конференции студентов и аспирантов с международным участием «Молодая фармация - потенциал будущего» (Санкт-Петербург 2020,2021).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 научных работ, включая 4 статьи в журналах Scopus, в том числе 1 статья в журнале Web of Science и 3 статьи в журналах перечня рецензируемых научных изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертации, рекомендованные ВАК Минобрнауки России.

Связь задач исследования с планом фармацевтических наук.

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ федерального государственного бюджетного

образовательного учреждения высшего образования «Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, в рамках тематики государственного задания «Разработка методологической концепции контроля качества лекарственных средств и субстанций природного происхождения с использованием инновационных аналитических методов» (регистрационный номер АААА-А20-120121790032-2 от 17.12.2020).

Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Научные положения соответствуют паспорту специальности 3.4.2. Фармацевтическая химия, фармакогнозия, а именно: пункту 6 - изучение химического состава лекарственного растительного сырья, установление строения, идентификация природных соединений, разработка методов выделения, стандартизации и контроля качества лекарственного растительного сырья и лекарственных форм на его основе.

Личный вклад автора в проведенное исследование и получение научных результатов. Автором лично проведен поиск отечественной и зарубежной литературы, разработаны и выполнены все стадии эксперимента на базе ФГБОУ ВО СПХФУ (кафедра фармакогнозии) и Ресурсного Центра СПбГУ и проанализированы результаты исследований. Автор принимал непосредственное участие в планировании и выполнении экспериментов в рамках решения задач исследования. Им проведен детальный анализ полученных результатов и сделаны основные выводы и обобщения. При подготовке и написании научных трудов по теме диссертации участие автора является преобладающим. Доля участия автора составляет не менее 90 %. Диссертация представляет собой самостоятельный научный труд и включает исследования автора за период с 2019 по 2021 годы.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 146 страниц компьютерного набора, иллюстрирована 44 рисунками и 26 таблицами, состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части (6 глав) и заключения, списка литературы, включающей 137 наименований (103 источника зарубежной литературы).

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Систематическое положение и распространение представителей рода Empetrum L, общее ботаническое описание Empetrum nigrum L.

Род Empetrum L. - водяника, принадлежит к семейству Ericaceae, порядку Ericales. Изначально род Empetrum входил в семейство Empetraceae, которое включало в себя 3 рода - Empetrum L., Corema D. Don., и Ceratiola Michx, и относилось к порядку Ericales [17]. Данное семейство было отделено от Ericaceae на основании уменьшенного околоцветника и опыления ветром [9]. Однако некоторыми авторами семейства Ericacea и Empetraceae были признаны близкими родственниками на основании общих экологических признаков. Все представители данных семейств являются кустарничками или деревьями, предпочитающими кислые почвы, и имеют схожие морфологические, анатомические и эмбриологические характеристики: гаустории эндосперма и пыльников, перевернутых в процессе развития [9,19-21]. Однако позднее, на основании молекулярно-филогенетических исследований и изучения морфологических признаков род Empetrum L. таксономически понижен в ранге до трибы Empetrасeae подсемейства Ericoideae, относящегося к семейству Ericaceae [9,22-25]. Empetrum демонстрирует амфитропический характер распространения, широко произрастая в приполярных регионах Северного полушария, и ограниченно в Чили, Фолклендсикх остравах и Огненной земле на Южном полушарии [26].

На счет видовой принадлежности представителей рода Empetrum нет единого мнения, так как внутри рода имеется значительное разнообразие морфологических признаков, филогенетическая полезность которых ограниченна, вследствии чего число видов сильно различается у разных авторов [9]. Согласно одним авторам, род монотипен и включает в себя единственный вид - водяника черная (Empetrum nigrum L.) [26], в то время как другие авторы считают, что должно быть выделено несколько видов - Empetrum nigrum L., E. rubrum Vahl ex Willdenow., E. hermaphroditum Lange ex Hagerup и E. subholarcticum V.N. Vassil [28-30]. На территории России, также согласно данным разных систематиков, число видов

составляет от 1 до 10 [31-33]. В то же время, некоторые авторы считают, что виды Empetrum, произрастающие в России и Евразии в целом, не имеют между собой четких различий, а в местах контакта их ареалов встречаются переходные состояния между экземплярами, вероятно гибридного происхождения, поэтому их следует описывать под общим названием - Empetrum nigrum L., а остальные объекты, соответственно, отнести к внутривидовым таксонам [34,35]. Согласно базе данных The Plant List [36] род Empetrum состоит из трех видов - Empetrum eamesii Fernald & Wiegand, Empetrum rubrum Vahl ex Willdenow, а также Empetrum nigrum L., внутри которого выделяют 8 подвидов: albidum (V.N. Vassil) Kuvaev., androgynum (V.N. Vassil) Kuvaev., asiaticum (Nakai) Kuvaev., caucasicum (Juz.) Kuvaev., hermaphroditum (Hagerup) Böcher., kardakovii (V.N. Vassil) Kuvaev., sibiricum (V.N. Vassil) Kuvaev., и subholarcticum (V.N. Vassil) Kuvaev. Однако подобный взгляд вызывает сомнение, в особенности с учетом данных хемосистематических исследований. С помощью метода проточной цитометрии чешскими учеными были обнаружены диплоидные, триплоидные и тетраплоидные особи, произрастающие в различных местах обитания [37]. На сегодняшний день можно сделать заключение, что систематика рода Empetrum сложна и не однозначна, и требуется проведение дополнительных исследований для ее уточнения.

Род Empetrum имеет широкое циркумполярное распространение в северном полушарии, тогда как в южном полушарии его распространение ограничено. E. rubrum преимущественно произрастает в странах Южной Америки - Аргентина (южная Патагония Огненная Земля), Чили, на Тристан-да-Кунья и Фолклендских островах, а E. eamesii встречается на северо-востоке США и востоке Канады [22,38,39]. Ареал вида E. nigrum в России весьма обширен и распространен на всей территории России, начиная примерно от 60 параллели и кончая северной оконечностью материка. Имеются значительные запасы E. nigrum в Российской Федерации. Хозяйственные запасы сырья, с учетом потери в массе при высушивании 55% и условий периодичности заготовок (1 раз в 6 лет), только в некоторых изученных регионах составляют: Хибины - 4200 т, плато Путорана -

20250 т, Енисейский кряж - 427 т, Приполярный Урал - 1100 т, Западный Саян -20474 т, Восточная Камчатка - 33000 т [16]. Также данный вид распространен в Китае, странах северной Европы (Скандинавские страны, северная часть Великобритании), Гренландии и севере Японии. К типичным местообитаниям вида относятся как сухие сосновые, еловые и лиственные леса, так и сфагновые болота, мохово-лишайниковые тундры, сырые и заболачиваемые хвойные леса. В Арктике обычно растет в кустарничковых и кустарничко-моховых тундрах, нередко являясь их эдификатором [34].

E. nigrum представляет собой вечнозеленый кустарничек с длинными, стелющимися, сильно ветвистыми стеблями, красновато-черного цвета, достигающие длины 1 м и более. Молодые веточки с короткими железистыми волосками, могут быть голыми или покрыты шерстистым опушением из более длинных извилистых волосков. Листья простые, расположенные в мутовках, продолговатые, продолговато-овальные, широколинейные или овальные, блестящие или матовые, с параллельными или закругленными боковыми сторонами. На адаксиальной поверхности листья глубоко бороздчатые, бороздка почти закрывается перекрывающимися краевыми железистыми волосками, образуя центральную продольную полость. Верхняя и нижняя поверхности листа покрыты кутикулой. Цветки одиночные, мелкие, покрыты железистыми волосками. Околоцветник присутствует. Лепестки чашелистиков свободны, в количестве от трех до шести. Растение однодомное с обоеполыми цветками или двудомное с раздельнополыми цветками. Плод черная ягода, с сизым налетом, диаметром до 5 мм с твердыми светло-коричневыми семенами. В плодах содержится от 6 до 9 твердых семян [34,40].

1.2 Основной состав вторичных метаболитов Empetrum nigrum L.

E. nigrum содержит большое разнообразие вторичных метаболитов, в том числе полифенольной природы, среди которых преобладающими группами можно назвать флавоноиды, в том числе халконы и дигидрохалконы, бибензилы, 9,10-

дигидрофенантрены, а также танины [41-47]. Помимо этого, в E. nigrum были обнаружены алифатические и терпеновые соединения [48-52].

1.2.1 Флавоноиды

Флавоноиды являются группой соединений, к биосинтезу которых способны только представители царства Plantae, за исключением некоторых представителей морских кораллов и грибов [53]. Флавоноиды представляют собой крупнейший класс полифенолов, имеющих структуру бензо-у-пирона и широко встречающийся в овощах и фруктах [54,55]. Флавоноиды можно разделить на несколько классов -флавоны, флавонолы, флаваноны, флаваны, халконы, проантоцианидины и др [53]. Данная группа соединений достаточно хорошо изучена, однако интерес к ней до сих пор возрастает из-за разносторонней пользы флавоноидов для здоровья человека [55].

Различными научными коллективами в надземной части E. nigrum были обнаружены соединения, относящиеся к различным классам флавоноидов и находящиеся преимущественно в виде гликозидов - галактозидов, арабинозидов, рамнозидов и ксилозидов флавонолов (кемпферола, кверцетина, мирицетина, морина, ларицитрина, сирингетина, изорамнетина), флаванонов (нарингенина) и дигидрофлаванола (дигидрокверцетина). [43,56-60]. Преобладающими гликозидами кверцетина являются кверцетин-3-О^^-глюкопиранозид и кверцетин-3-О^-й-галактозид [61]. Moore с соавт. обнаружил в плодах и листьях водяники гликозид госсипетина - госсипетин-3-О^^-галактозид [26], а Краснов Е.А с соавт. впервые выделили из побегов E. nigrum 6,8-диметил-5,7-дигидроксифлаванон (6,8-диметилпиноцембрин) [62]. Также в водянике черной был обнаружен рутин [43]. Общее содержание флавоноидов в пересчете на катехин, в свежих и высушенных плодах E. nigrum 2.46 ± 0.01 и 3.94 ± 0.106 мг/гр сухого веса соответственно [41].

1.2.1.1 Антоцианы

Антоцианы - это ярко окрашенные растительные пигменты синего, красного или пурпурного цвета, содержащиеся во многих органах растений, особенно в цветках, плодах и клубнях [63]. Антоцианы представляют собой производные замещенных катионов флавилия [53,63]. Наиболее распространёнными в растениях являются антоцианидины - пеларгонидин, цианидин, пеонидин, дельфинидин, петунидин и мальвидин [53,63].

Из плодов E. nigrum был выделен ряд антоцианидинов и антоцианов -глюкозидов, галактозидов и арабинозидов цианидина, пеонидина, петунидина, дельфинидина и мальвидина. При этом галактозиды цианидина, дельфинидина и мальвидина были мажорными компонентами и составляли около 60 % от общего содержания антоцианов [60,64-72]. Рядом авторов также было отмечено, что количество и соотношение антоцианов может изменяться в зависимости от условий произрастания. Например, в образцах, собранных в центральной и восточной части Финляндии дельфинидин-3-О-В-О-галактозид является мажорным антоцианом, составляющим более 24% от общего количества антоцианов, в то время как в образцах, собранных на севере и западе Финляндии преобладал цианидин-3- О-В-D-галактозид [73]. Согласно сведениям Jurikova с соавт. содержание антоцианов в свежих плодах водяники черной составляет 460 мг/100 г [41].

1.2.1.2 Конденсированные танины

Конденсированные танины также известны под названием проантоцианидины [74,75]. Проантоцианидины являются достаточно распространенным классом соединений в растительном мире, присутствующих в цветках, плодах, семенах и коре, а также других органах, и участвующих в защите растения от биотических и абиотических факторов [75]. Степень полимеризации проантоцинидинов находится в диапазоне от 2 до 11, а строительными блоками выступают катехин и эпикатехин, которые могут быть связаны между собой С-С или С-О-С связями. Проантоцианидины делятся на проантоцианидины В-типа и А-

типа. Если звенья проантоцианидинов связаны посредством единственной С-С связи между C4^C6 или C4^C8, то данные проантоцианидины относятся к типу В, а если дополнительно к данной связи присутствует эфирная связь С2^О7, то к типу-А [75,76]. В зависимости от структуры составляющих их мономеров выделяют процианидины (катехин, эпикатехин), пропеларгонидины (афзелехин и эпиафзелехин), продельфинидины (галлокатехин и эпигаллокатехин), профисетиниды (лейко-фисетинидин) и проробинетинидины (робинетинидол)

[77].

В водянике черной, в отличие от других представителей семейства Ericaceae, в которых преобладающими являются проантоцианидины В-типа, мажорной группой танинов являются проантоцианидины с А-типом межмономерной связи

[78]. В плодах E. nigrum, собранных в штате Аляска (США) описано содержание танинов, принадлежащих к классу проантоцианидинов А-типа. Kellog c соавтр. установил с помощью метода ВЭЖХ-МС/МС наличие в плодах водяники черной димеров, тримеров и тетрамеров проантоцианидинов А-типа, состоящих из различных мономеров - катехина, эпикатехина, галлокатехина, эпигаллокатехина, афзелехина и эпиафзелехина. В общей сложности в E. nigrum было обнаружено порядка семи проантоцианидинов А-типа [79].

1.2.1.3 Халконы и дигидрохалконы

Халконы и дигидрохалконы относятся к группе флавоноидов, и от всех остальных соединений, относящихся к данной группе, отличаются отсутствием центрального гетероциклического кольца - кольца С. Соединения халкона имеют общий химический каркас из 1,3-диарил-2-пропен-1-она, также известного как халконоид [80]. За счет наличия в халконах двойной связи между а и В атомами углерода, в данных соединениях образуется сопряженная система п-связей, так что цвет многих халконов становится желтым, в отличие от дигидрохалконов, у которых двойная связь между а и В атомами отсутствует, и кристаллы которых чаще всего белого цвета [53]. Атомы углерода в данной группе соединений

обозначаются с использованием уникальной системы нумерации. Атомы углерода кольца-А обозначаются штрихованными числами, а атомы углерода кольца-В обозначаются номерами без штрихов. Халконы могут существовать в виде агликонов или О-гликозидов, а также в виде С-гликозидов, которые встречаются достаточно редко [53].

В экстрактах из побегов E. nigrum было обнаружено около десяти соединений, относящихся к группе халконов и дигидрохалконов, из которых порядка пяти были выделены. Из ацетонового и хлороформного экстрактов учеными из России и Китая были выделены 2',4'-дигидрокси-3',5'-диметил-6'-метокси-а,в-дигидрохалкон (анголетин), 2',4'-дигидрокси-а,в-дигидрохалкон (эмпетрон), 4'-гидрокси-2'-метокси-а,в-дигидрохалкон (метилэмпетрон), 2',4'-дигидроксихалкон, а также 2',5'-диметил-3'-метокси-4',6'-

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Понкратова Анастасия Олеговна, 2022 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Bernardini, S. Natural products for human health: an historical overview of the drug discovery approaches / S. Bernardini, A. Tiezzi, V Laghezza Masci, E. Ovidi // Natural Product Research. - 2018. - Vol.32. - №16. -P. 1926-1950. DOI: 10.1080/14786419.2017.1356838

2. Кудашкина, Н.В. Влияние некоторых видов лекарственного растительного сырья на систему гемостаза in vitro / Н.В. Кудашкина, Э.Х. Галиахметова, Л.И. Баширова, С.Р. Хасанова, А.А. Низамова, Н.К. Жалалова и др. // Традиционная медицина. -2021. -Т. 1. -№ 64. - С. 38-42.

3. Кудашкина, Н.В. Фитопрепарат для лечения воспалительных заболеваний пародонта / Н.В. Кудашкина, С.В. Аверьянова, С.Р. Хасанова, К.А. Хайрзаманова // Стоматология. -2017. -Т. 96. - № 6-2. - С. 96-97.

4. Корочинский, А.В. Актуальные аспекты медицинского применения ореха черного - Juglans nigra L. (обзор) / А.В. Корочинский, Ж.В. Дайронас, В.В. Верниковский, И.Н. Зилфикарова, Э.Ф. Степанова, М.В. Черников // Разработка и регистрация лекарственных средств. -2019. -Т.8. - № 3. - С. 21-28.

5. Меньшов, П.Н. Изучение гастропротекторной активности масла, полученного из семян шиповника / П.Н. Меньшов, И.Е. Каухова, В.Ц. Болотова, А.В. Сергиенко, И.Н. Зилфикаров. // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия: медицина, фармация. -2015. -Т. 4. -№ 201. - С. 172-175.

6. Куркин, В.А. Научное обоснование использования лекарственных растений в оториноларингологии / В.А. Куркин, Е.В. Авдеева, О.Е. Правдивцева, А.В. Куркина, Н.Р. Варина, В.В. Стеняева, А.С. Цибина, С.В. Первушкин // Наука и инновации в медицине. -2021. -Т. 6. -№ 2. - С. 54-59.

7. Balandrin, M. F. Natural plant chemicals: Sources of industrial and medicinal materials / M.F. Balandrin, J.A. Klocke, E.S. Wurtele, W.H. Bollinger // Science. -1985. - Vol. 228. - P. 1154-60.

8. Mouhssen, L. Screening of natural products for drug discovery / L. Mouhssen // Expert Opinion on Drug Discovery. - 2007. - Vol.2. - №.5. - P. 697-705. DOI: 10.1517/17460441.2.5.697

9. Kron, K. Phylogenetic relationships of Empetraceae, Epacridaceae, Ericaceae, Monotropaceae, and Pyrolaceae: Evidence from Nuclear Ribosomal 18s Sequence Data / K. Kron // Annals of Botany. -1996. - Vol. 77. - P. 293-303.

10. Hyun, T.K. Antioxidant, Antimicrobial, and Antidiabetic Activities of Crowberry Fruits / T.K. Hyun, J.H. Ra, S.H. Han, J.S. Kim // Indian Journal of Pharmaceutical Sciences. -2018. -Vol. 80. - № 3. - P. 489-495.DOI: 10.4172/pharmaceutical-sciences.1000382

11. Варлаков, М.Н. Список растений Восточного Забайкалья, применяемых в тибетской медицине / Варлаков М.Н. -Москва: Изд-во Медгиз, 1963. - 106-171 c.

12. Fan, J. Berry and citrus phenolic compounds inhibit dipeptidyl peptidase IV: Implications in diabetes management / J. Fan, M.H. Johnson, M.A. Lila, G. Yousef, E.G. Mejia // Evidence-based Complementary and Alternative Medicine. -2013. -Vol. 2013. -P. 479505.

13. Nohynek, L. J. Berry phenolics: antimicrobial properties and mechanisms of action against severe human pathogens / L.J. Nohynek, H.L. Alakomi, M.P. Kahkonen, M. Heinonen, I.M. Helander, K.M. Oksman-Caldentey, R.H. Puupponen-Pimia // Nutrition and Cancer. -2006. -Vol. 54. - №1. - P. 18-32.

14. Rauha, J. P. Antimicrobial effects of finnish plant extracts containing flavonoids and other phenolic compounds / J.P. Rauha, S. Remes, M. Heinonen M, A. Hopia, M. Kahkonen, T. Kujala, P. Vuorela // International Journal of Food Microbiology. -2000. -Vol. 56. - №1. - P. 3-12.

15. Ермилова, Е.В. Изучение видов водяники как перспективного источника фитопрепаратов / Е.В. Ермилова, Т.В. Кадырова // Фармация в 21 в.: инновации и традиции.-1999. - С. 154

16. Bezverkhniaia, E.A. Screening study for anticonvulsive activity of lipophilic fractions from Empetrum nigrum L. / E.A. Bezverkhniaia, T.N. Povet'eva, T.V. Kadyrova, N.I. Suslov, Y.V. Nesterova, O.G. Afanas'eva et al. // Research results in Pharmacology. -2020. -Vol. 6. - №3. -P. 67-73. DOI: 10.3897/rrpharmacology.6.55015

17. Куваев, В.Б. Хемосистематика и поиски новых лекарственных растений. Хемосистематика и эволюционная биохимия высших растений / В.Б. Куваев, Е.А. Краснов. - Москва: СБС АН СССР, 1990. - 50-52 с.

18.Jianhua, Li. Phylogenetic relationships of Empetraceae inferred from sequences of chloroplast gene matK and nuclear ribosomal DNA ITS region / Li Jianhua, J. Alexander, T. Ward, P.T. Del, R. Nicholson // Molecular phylogenetics and evolution. -2002. - №.25. -P. 306-315.

19.Cronquist, A. An Integrated system of classification of flowering plants / A. Cronquist // Columbia University Press. -1981. -P. 248-250.

20.Dahlgren, R. General aspects of angiosperm evolution and macrosystematics / R. Dahlgren // Nordic Journal of Botany. -1983. - Vol. 3. -P. 119-149.

21.Thorne, F.R. Classification and geography of the flowering plants / F.R. Thorne // The Botanical Review. -1992. -№58. -P. 225-327.

22.Fernández, M. G. Leaf anatomy and biomineralization in Empetrum rubrum Valh ex Willd. (Ericaceae) / M.G. Fernández, M.O. Arriaga, A. F. Zucol // Botanica complutensis. -2012. -Vol. 36. -P. 113-121. D0I:10.5209/revB0CM.2012.v36.39449

23.Kron, K.A. Systematics of Ericaceae, Empetraceae, Epacridaceae, and related taxa based upon rbcL sequence data / K.A. Kron, M.W. Chase // Annals of the Missouri Botanical Garden. -1993. -№80. -P. 735-741.

24.Gillespie, E. Molecular phylogenetic relationships and a revised classification of the subfamily Ericoideae (Ericaceae) / E. Gillespie, K. Kron // Molecular phylogenetics and evolution. - 2010. -Vol 56. -P. 343-354. D0I:10.1016/j.ympev.2010.02.028

25.Chen, Z.D. Tree of life for the genera of Chinese vascular plants / Z.D. Chen, T Yang, L Lin, L. Lu // Journal of systematics and evolution. -2016. -Vol. 54. -P. 277-306.D0I: 10.1111/jse.12219

26.Moore, D.M. Chemotaxonomy, variation and geographical distribution of the Empetraceae /D.M. Moore, J.B. Harborne, C.A. Williams // Botanical journal of the Linnean Society. -1970. -№63, -P. 277-293.

27.Moore, D.M. Flora of Tierra del Fuego / D.M. Moore. - Missouri: Lubrecht & Cramer Ltd, 1983. - 365 pp.

28.Anderberg, A. A. Phylogeny of the Empetraceae, with special emphasis on character evolution in the genus Empetrum / A.A. Anderberg // Systematic Botany. - 1994. -№19. - P. 35-46.

29.Good, M.A. The genus Empetrum L / M.A. Good // Journal of the Linnean Society of London. -1927. -Vol. 47. -№ 317. -P. 489-523. D0I:10.1111/j.1095-8339.1927.tb00520.x.

30.Васильев, В.Н. Empetraceae. Флора СССР/ Васильев, В.Н. - Москва: Академия наук, 1949. -Т.14. - 511-517 с.

31.Stace, C. A. New Flora of the British Isles, 3rd edition / C.A. Stace. - England: Cambridge University press, 2010. -525 pp.

32.Черепанов, С.К. Сосудистые растения СССР / С.К. Черепанов. - Ленинград: Наука,1981. -510 с.

33.Васильев, В.Н. Род Empetrum / В.Н. Васильев. -Москва - Ленинград: Изд-во АН СССР, 1961. -132 с.

34.Цвелев, Н.Н. Род Empetrum L. - Шикша, вороника, водяника. Арктическая флора СССР / Н.Н. Цвелев. -Москва-Ленинград: Изд-во «Наука», 1980. -Вып. 8. - 21-29 с.

35.Куваев, В.Б. К диагностике и хемосистематике внутривидовых таксонов / В.Б. Куваев, В.Н. Василец, Е.А. Краснов, Т.П. Березовская // Ботанический журнал. -1996. -Т. 81. -№ 10. - С. 104-115.

36.The Plant List [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.theplantlist.org/tpl1.1/record/kew-2788473 (Дата обращения: 15.08.2021).

37.Suda, J. Cytotype Distribution in Empetrum (Ericaceae) at Various Spatial Scales in the Czech Republic / J. Suda, R. Malcova, D. Abazid, M. Banas M, F. Prochazka, O. Sida, M. Stech // Folia Geobotanica. -2004. -P.161-171. DOI: 10.1007/BF02805244

38.Popp, M. A single Mid-Pleistocene long-distance dispersal by a bird can explain the extreme bipolar disjunction in crowberries (Empetrum) / M. Popp, V. Mirre, C. Brochmann // PNAS. -2011. - Vol. 108. -№16. -P. 6520-6525. DOI: 10.1073/pnas.1012249108

39.Stevens, P.F. Flowering Plants. Dicotyledons: Celastrales, Oxalidales, Rosales, Cornales, Ericales. The families and genera of vascular plants / P.F. Stevens, J. Luteyn, E.G.H. Oliver, T.L. Bell, E.A. Brown et al. - Berlin - New York: Springer, 2004. -P. 145-194.

40.Altan, Y. Morphological and anatomical studies on economically important Empetrum nigrum L. Subsp. Hermaphroditum (Hagerup) Bocher (Empetraceae) / Y. Altan, C. Özdemir // Economic Botany. -2004. - Vol. 58. -№4. -P. 679-683. DOI: 10.1663/0013-0001(2004)058[0679:MAASOE]2.0.CO;2

41.Jurikova, T. Black crowberry (Empetrum nigrum L.) flavonoids and their health promoting activity / T. Jurikova, J. Mlcek, S. Skrovankova, S. Balla, J. Sochor, M. Baro, D. umczynski // Molecules. -2016. -Vol. 21. - №12, -P. 1685.

42.Dudonne, S. Comprehensive analysis of phenolic compounds and abscisic acid profiles of twelve native Canadian berries / S. Dudonne, S. Dube, P. Anhe // Journal of Food Composition and Analysis. - 2015. -Vol. 44. - P. 214-224.

43.Laaksonen, O. Orosensory contributing compounds in crowberry (Empetrum nigrum) press-by products / O. Laaksonen, M. Sandell, R. Jarvinen, H. Kallio // Food Chemistry. -2011. -Vol. 124. - № 4. -P. 1514-1524.

44.Wollenweber, E.D. Lipophilic phenolics from the leaves of Empetrum nigrum -chemical structures and exudate localization. / E.D. Wollenweber, M. Dorr M, R. Stelzer, F.J. Arriaga-Giner // Botanica Acta. - 1992. -Vol.105. -№ 4, -P. 300-305.

45.Jarevang, T. A bibenzyl from Empetrum nigrum / T, Jarevang, M.C. Nilsson, A. Wallstedt, G. Oldham, O.A. Sterner // Phytochemistry. -1998. -Vol. 48. - № 5. -P. 893-896.

46.Arriaga-Giner, F.J. Bibenzyl from crowberry leaves / F.J. Arriaga-Giner, E. Wollenweber, M. Doerr // Phytochemistry. -1993. -Vol. 33. - № 3. -P. 725-726.

47.Matsuura. H. Antibacterial and antifungal compounds from Empetrum nigrum / H. Matsuura, G. Saxena G, S.W. Farmer S.W, R.E.W. Hancock, G.H.N. Towers // Planta Medica. -1995. -Vol. 61. - № 6. - P. 580.

48.Ермилова, Е.В. Компоненты растений семейства Empetraceae I. Углеводороды из Empetrum nigrum. / Е.В. Ермилова, Е.А. Краснов, Г.З. Ханин // Химия природных соединений. -1987. -№ 4. - С. 598-599.

49.Редькина, Н.Н. Компоненты растений семейства Empetraceae. III. Циклоалканы из Empetrum nigrum / Н.Н. Редькина, О.В. Брянский, Е.А. Краснов, А.А. Семенов, Е.В. Ермилова // Химия природных соединений. - 1989. - № 5. - C. 719-720.

50.Vedel-Petersen I., Schollett M., Nymand J. and Rinnan R. Volatile organic compounds emission profiles of four common arctic plants. Atmospheric environment. - 2015. -Vol. 120. - P. 117- 126.

51.Muravnik, L.E. Leaf glandular trichomes in Empetrum nigrum: morphology, histochemistry, ultrastructure and secondary metabolites / L.E. Muravnik, A.L. Shavarda // Nordic Journal of Botany. - 2012. - Vol. 30. - № 4. - P. 470-481.

52.Wollenweber, E.D. A new skeletal triterpenoid isolated from Empetrum nigrum / E.D. Wollenweber, C. Toiron, A. Rumbero A, F.G. Arriaga, M. Bruix // Tetrahedron Letters.

- 1995. - Vol. 36. - № 36. - P. 6559 - 6562.

53.Iwashina, T. The structure and distribution of the flavonoids in Plants /T. Iwashina // Journal of plant research. - 2000. - Vol. 113. -P. 287-299.

54.Panche, A.N. Flavonoids: an overview / A.N. Panche, A.D. Diwan, S.R. Chandra // Journal of nutritional science. - 2016. - Vol.5. - №47. - P. 1-15. DOI: 10.1017/jns.2016.41

55.Kumar, S. Chemistry and biological activities of flavonoids: An overview. / S. Kumar, A. Pandey // The scientific world journal. - 2013. - P. 1-16.

56.Краснов, Е.А. Материалы к исследованию химического состава вороники -Empetrum nigrum L / Е.А. Краснов, А.М. Халецкий // Аптечное дело. - 1963. - №6.

- С. 28-31.

57.Kaisu, R. Distribution and Contents of Phenolic Compounds in Eighteen Scandinavian Berry Species / K. Riihinen, A. Kamal-Eldin, P. H. Mattila, A. M. Gonzalez-Paramas, A. R. Torronen // Journal of Agricultural and Food Chemistry. - 2004. - Vol.52. -P. 4477-4486.DOI:10.1021/jf049595y

58.Anna, M. Survey of bioactive components in Western Canadian berries / M. A. Bakowska-Barczak, M. Marianchuk, P. Kolodziejczyk // Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. - 2007. - Vol.85. - P.1139-1152.

59.Törrönen, R. Fortification of blackcurrant juice with crowberry: Impact on polyphenol composition, urinary phenolic metabolites, and postprandial glycemic response in health subjects / R. Törrönen, G.J. McDougall, G. Dobson, D. Stewart, J. Hellström, P. Mattila, J.M. Pihlava, A. Koskela, R. Karjalainen // Journal of functional foods. -2012. -№.4. -P.746-756.DOI: 10.1016/jjff.2012.05.001

60.Häkkinen, S. Screening of selected flavonoids and phenolic acids in 19 berries / S. Häkkinen, M. Heinonen, S. Kärenlampi, H. Mykkänen, J. Ruuskanen, R. Törrönen // Food Research International. -1999. -Vol. 32. - № 5. - P. 345-353.

61.Кадырова, Т.В. Исследование биологически активных веществ водяники и возможности создания безотходной технологии ее переработки /Т.В. Кадырова. - Автореф. дисс. на соискание ученой степени кандидата фармацев. наук. Пермь, -2001.

62.Краснов, Е.А. Фенольные компоненты экстракта Empetrum nigrum и кристаллическая структура 2'-метокси-4'-гидрокси-а^- дигидрохалкона / Е.А. Краснов, Е.В. Ермилова, Т.В. Кадырова, В.А. Ралдугин, И.Ю. Багрянская, Ю.В. Гатилов и др. // Химия природных соединений. -2000. -№ 2. - C. 389-391.

63.Khoo, H.E. Anthocyanidins and anthocyanins: colored pigments as food, pharmaceutical ingredients, and the potential health benefits / Н.Е. Khoo, А. Azlan, S.T. Tang, S.M. Lim // Food and nutrition research. -2017. -Vol. 61. -№ 1. -P. 1-21. DOI: 10.1080/16546628.2017.1361779

64.Vincevica-Gaile Z. From forest to pharmacy: studies of pharmaceutically valuable compounds in wild black crowberry (Empetrum nigrum) /Z. Vincevica-Gaile, S. Strauta, J. Kviesis, R. Muceniece, M. Klavins // Intrinsic Activity. -2017. -5:A2.37. D0I:10.25006/IA.5.S2-A2.37

65.Lavola, A. Phytochemical variation in the plant-part specific phenols of wild crowberry (Empetrum hermaphroditum Hagerup) populations / A. Lavola, A. Salonen, V. Virjamo, R. Julkunen-Tiitto // Phytochemistry Letters. -2017. -Vol. 21. -P.11-20.

66.Ogawa, K. Anthocyanin composition and antioxidant activity of the crowberry (Empetrum nigrum) and other berries / K. Ogawa, H. Sakakibara, R. Iwata, T. Ishii, T. Sato, T. Goda, S. Kumazawa // Journal of Agricultural and Food Chemistry. - 2008. -Vol. 56. -№ 12 -P. 4457-4462.

67.Kärppä, J. Anthocyanins of crowberry Empetrum nigrum coll / J. Kärppä, H. Kallio, I. Peltonen, R. Link // Journal of Food Science. -1984. -Vol. 49. -№ 2. -P. 634-636.

68.Hayashi, K. Empetrin a new pigment from the Japanese crowberry / K. Hayashi, G. Suzushino G, K. Ouchi // Proceedings of the Japan Academy. -1951. -Vol. 27. - P. 430-435.

69.Hayashi, K. Anthocyanins. XX. Empetrin a new anthocyanin from the fruit of Empetrum nigrum / K. Hayashi, G. Suzushino, K. Ouchi // Miscellaneous reports of the Research Institute for Natural Resources. -1951. -№ 23. -P. 8-14.

70.Karppa, J. Ahtonen S. Antocyanin contents of crowberry and crowberry juice /J. Karppa, R. Linko, H. Kallio // Lebensmittel-Wissenschaft und Technologie. -1983. -Vol. 16. - № 6. -P. 343-345.

71.Karppa, J. Analysis of antocyanins during ripening of crowberry Empetrum nigrum coll. / J. Karppa // Lebensmittel-Wissenschaft und Technologie. - 1984. -Vol. 17. - №3. -P .175-176.

72.Hegnauer, R. Chemotaxonomie der Pflanzen / R. Hegnauer. - BirkäuserVerlag, Basel, Stuttgart, 1973. -P. 711-713.

73.Koskela, A.K.J. Variation in the anthocyanin concentration of wild populations of crowberries (Empetrum nigrum L subsp. Hermaphroditum) / A.K.J. Koskela, M.J. Anttonen, T.H. Soininen, N.M.M. Saviranta, S. Auriola, R. Julkunen-Tiitto, R.O. Karjalainen // Journal of agriculture and food chemistry. - 2010. -№.58. -P. 12286-12291.DOI: 10.1021/jf1037695

74.Iglesia, R. Healthy preperties of proanthocyanidins /R. Iglesia, F.I. Milagro, J.

Campion, N. Boque, J.A. Martinez // BioFactors. -2010. -Vol. 36. -P. 159-168. 75.Rauf, A. Proanthocyanidins: A comprehensive review / A. Rauf, M. Imran, T. Abu-Izneid, H. Iahtisham, S. Patel, X. Pan, S. Naz, A.S. Silva, F. Saeed F, H.A.R. Suleria //

Biomedicine and pharmacotherapy. - 2019. -Vol. 116. -P. 1-6. DOI: 10.1016/j .biopha.2019.108999

76.Yokota, K. Analysis of A-type and B-type highly polymeric proanthocyanidins and their biological activities as nutraceuticals / K. Yokota // Journal of Chemistry. -2013. -Vol. 2013. -P. 1-7. DOI: 10.1155/2013/352042

77.Navarro-Hoyos, M. Proanthocyanidin Characterization and Bioactivity of Extracts from Different Parts of Uncaria tomentosa L. (Cat's Claw). / M. Navarro-Hoyos, R. Lebrón-Aguilar, J. Quintanilla-López, C. Cueva, D. Hevia, S. Quesada, G. Azofeifa, M.V. Moreno-Arribas, M. Monagas, B. Bartolomé // Antioxidants. -2017. -Vol. 6. -№ 12. -P. 2-18. DOI: 10.3390/antiox6010012

78.Hellstróm, J.K. Proanthocyanidins in common food products of plant origin /J.K. Hellstróm, A.R. Tórrónen, P.H. Mattila // Journal of Agricultural and food chemistry. -2009. -Vol.57. -№ 17. -P. 7899-7906.

79.Kellogg, J. Alaskan wild berry resources and human health under the cloud of climate change / J. Kellogg, J. Wang, C. Flint, D. Ribnicky, P. Kuhn, E.G. Mejia, I. Raskin, M. Lila // Journal of Agricultural and food chemistry. -2010. -Vol. 58. -P. 1884-3900.

80.Zhuang, C. Chalcone: a privileged structure in medicinal chemistry / C. Zhuang, W. Zhang, C. Sheng, W. Zhang, C. Xing, Z. Miao // Chemicals reviews. -2017. -Vol. 117. -P. 7762-7810. DOI: 10.1021/acs.chemrev.7b00020

81.Bao, S. Structure elucidation and NMR assignments of a new dihydrochalcone from Empetrum nigrum subsp. Asiaticum (Nakai ex H.Ito) Kuvaev / S. Bao, Q. Wang, W. Bao, W. Ao // Natural product research. -2018. -P. 1-5. DOI: 10.1080/14786419.2018.1542390

82.Vitalini, S. Dihydroresveratrol type dihydrostilbenois: chemical diversity, chemosystematics, and bioactivity/ S. Vitalini, S.S. Cicek, S. Granica, Z. Christian // Phytochemical analysis. -2018. -Vol. 29. -№ 1. -P. 30-47. DOI: 10.2174/0929867324666170830112343.

83.Kovacs, A. Natural phenanthrenes and their biological activity / A. Kovacs, A. Vasas, J. Hohmann // Phytochemistry. -2008. -Vol. 69. -P. 1084-1110. DOI: 10.1016/j .phytochem.2007.12.005

84.Li, H. Dibenz[b,f]oxepin and Antimycobacterial Chalcone Constituents of Empetrum nigrum / H. Li, S. Jean S, D. Webster, G.A. Robichaud, L.A. Calhoun, J.A. Johnson, C.A. Gray // Journal of Natural Products. -2015. -Vol. 78. -№ 11. -P. 2837-2840.

85.Nilsson, M.C. Ingibition of Scots Pine seeding establishment by Empetrumhermaphroditum / M.C. Nilsson, O. Zacrisson // Journal of Chemical Ecology. -1992. -Vol. 18. - №10. - P. 1857-1870.

86.Nilsson, M.C. Temporal variability of phenolic and batatasin-III in Empetrum hermaphroditum leaves over an eight-year period: interpretation of ecological function / M.C. Nilsson, C. Gallet, A. Wallstedt // Oicos. -1998. -Vol. 81. -№1. -P. 6-16.

87.Nilsson, M.C. Characterisation of the differential interference effects of tow boreal dwarf shrub species / M.C. Nilsson, O. Zacrisson, O. Sterner O, A. Wallstedt A // Oecologia. -2000. -Vol. 123. -P. 122-128.

88.Brannas, E. Potential toxic effect on aquatic fauna by the dwarf shrub Empetrum hermaphroditum / E. Brannas, M.C. Nilsson, L. Nilsson, K. Brannas, R. Berglind, L.O. Eriksson // Journal of Chemical Ecology. -2004. -Vol. 30. -№ 1. -P. 215-227.

89.Wallstedt, A. A method of quantity the allelopatic compound batatasin - III in extracts from Empetrum hermaphroditum using gas chromatography: applied on extracts from leaves of different age. / A. Wallstedt, M.C. Nilsson, G. Odham, O. Zacrisson. Jounal of Chemical Ecology. -1997. -Vol. 23. -№ 10. -P. 2345-2355.

90.Gallet, C. Phenolic methabolites of ecological significance in Empetrum hermaphroditum leaves and associated humus / C. Gallet, M.C. Nilsson, O. Zacrisson // Plant and Soil. -1999. -Vol. 210. -№ 1. -P. 1 -9.

91.Olivera, R. Dibenzo [bf]oxepines: Syntheses and applications. A review / R. Olivera, R. Sanmartin, F. Churruca, E. Dominguez // Organic preparations and procedures international: the new journal for organic synthesis. -2004. -Vol. 36. -№ 4. -P. 297330. DOI: 10.1080/00304940409458673

92.Kumar, N. Phenolic acids: Natural versatile molecules with promising therapeutic applications / N. Kumar, N. Goel // Biotechnology reports. -2019. -Vol.24. -P. 1-10. DOI: 10.1016/j.btre.2019.e00370

93.Ermilova, E. V. Standardization of Thick Crowberry Extract / E.V. Ermilova, T.V. Kadyrova, E.A. Krasnov, A.A. Blinnikova // Pharmaceutical Chemistry Journal. -2002. -Vol. 36. -№ 9, -P. 500-503. 94.Salasoo, I. Epicuticular wax alkanes of some heath plants in central Alaska / I. Salasoo

// Biochemical Systematics and Ecology. -1987. -Vol. 15. -№ 1. -P. 105-107. 95.Salasoo, I. Alkane distribution in epicuticular wax of some heath plants in Norway I.

Salasoo // Biochemical Systematis and Ecology. -1987. -Vol. 15. -№ 4. -P. 663- 665. 96.Salasoo, I. Epicuticular wax alkanes of Ericaceae and Empetrum from alpine and subalpine heaths in Austria / I. Salasoo // Plant systematics and evolution. -1989. -Vol. 163. - P.71-79.

97.Jarvinen, R. Cutin composition of selected northern berries and seeds / R. Jarvinen, M. Kaimainen, H. Kallio // Food chemistry. -2010. -Vol. 122. -№ 1. -P. 137-144.

98.Ермилова, Е.В. Компоненты растений семейства Empetraceae. IV. Сложные эфиры из видов Empetrum / Е.В. Ермилова, Е.А. Краснов, Л.А. Цой, О.О. Крашенинин // Химия природных соединений. -1993. -№ 5. - С. 501.

99.Ермилова, Е.В. Изучение химического состава экстракта водяники, обладающего противосудорожной активностью. Фармацевтическая наука и практика в новых социально-экономических условиях / Е.В. Ермилова, Е.А. Краснов, Т.В. Кадырова // Научные труды НИИ Фармации. - 1997. -Т. XXXVI. -Ч. 2. -С. 78-87.

100. Ермилова, Е.В. Спектрофотометрическое определение спиртов в препарате «Эмпетрин» / Е.В. Ермилова, Е.А. Краснов, Т.В. Кадырова, Т.Г. Хоружая Т.Г., Биттер О.А // Химико-фармацевтический журнал. -1997. -Т. 31. -№ 10. -С. 5254.

101. Ермилова, Е.В. Разделение липофильных кислородсодержащих соединений водяники комплексообразованием с TiCL4 / Е.В. Ермилова, Т.В. Кадырова, Е.А. Краснов // Химико-фармацевтический журнал. -2001. -Т. 35. -№ 7. -С. 39-40.

102.Фокина, Г.А. Тритерпеноиды и стероиды некоторых видов порядка Ericales / Г.А. Фокина, Н.Е. Зайцева, Н.Е. Фокина // Химия природных соединений. -1988. -№ 4. -C. 602- 603.

103.Бухаров, В. Г. Гликозиды урсоловой кислоты из Empetrum sibiricum V. Vassil. / В.Г. Бухаров, Л.Н. Карнееваю // Изв. АН СССР. Сер. хим. - 1970. - № 1. -С. 171172.

104.Puntari, I. Volatiles of Crowberry Empetrum nigrum / I. Puntari, H. Kallio, P. Linko // Lebensmittel-Wissenschaft und Technologie. -1985. - Vol.18. - №7. -P. 249-251.

105.Johansson, A. Characterization of seed oils of wild, edible Finnish berries / A. Johansson, P. Laakso, H. Kallio // Zeitschrift für Lebensmittel-Untersuchung und -Forschung A. -1997. -Vol. 204. -№ 4. -P. 300-307.

106.Johansson, A.K. Geographical variation in seed oil from Rubus chamaemorus and Empetrum nigrum / A.K. Johansson, P.H. Kuusisto, P.H. Laakso, K.K. Derome, P.J. Sepponen, J.K. Katajisto, H.P. Kallio // Phytochemistry. -1997. -Vol. 44. -№ 8. -P.1421-1427.

107.Johansson, A. Molecular weight distribution of the triacylglycerols of berry seed oils analyzed by negative ion chemical ionization mass -spectrometry / A. Johansson, P. Laakso, H. Kallio // Zeitschrift für Lebensmittel-Untersuchung und -Forschung A. -1997. -Vol. 204. - № 4. - P. 308-315.

108.Johansson, A. Berry seed oils: new potential sources of food supplements and health products / A. Johansson, T. Laine, H. Kallio // Special publication - Royal Society of chemistry. -1999. -Vol. 229. - P. 348-352.

109.Черепнин, В.Л. Пищевые растения Сибири / В.Л. Черепнин. -Новосибирск: Изд-во «Наука», 1987. - 192 с.

110.Steiner, G. M. Autoecological studies on mire plants. 1. Characterization of the important plant families of bogs and poor fens with regard to their cation contents / G.M. Steiner // Flora. -1985. - Vol. 176. -№ 1-2. -P. 37-60.

111.Malmer, N. Inorganic elements above and below ground in dwarf- shrubs on subarctic peat bog / N. Malmer, B. Wollen // Oicos. -1986. -Vol. 46. -P. 200-206.

112.Вершинин, Н.В. Новые лекарственные средства из сибирского лекарственного растительного сырья и их применение / Н.В. Вершинин, Д.Д. Яблоков // -Томск: Труды 5-го пленума Ученого мед. совета М3 РСФСР, 1947. - 215-230 c.

113.Горяев, М.И. Лекарственные растения флоры Монголии/ М.И. Горяев. - Алма-Ата: Изд-во Наука, 1980. -77 с.

114.Гром, И.И. Сведения о лекарственных растениях народной медицины Коми АССР / И.И. Гром // Вопросы фармакогнозии. - 1965. -№ 3. - 199 - 214 c.

115.Wang, Q. Chemical constituents of ethyl acetate extract of Empetrum nigrum var. japonicum and their effect on alcoholic fatty liver of rats / Q. Wang, C. Zheng, S. Jin, H. Guo, Z. Wang // Chinese Traditional and Herbal Drugs. -2016. -№18. -P.3164-3168.

116. Kim, K. Empetrum nigrum var. japonicum extract suppresses y-ray radiation-induced cell damage via inhibition of oxidative stress / K. Kim, I.K. Lee, K.A. Kang, B.J. Kim, D. Kim, J.Y. Moon, J. W. Hhyun // The American Journal of Chinese Medicine. -2011. -Vol. 39ю - № 01. -P. 161-170.

117.Kim, K. C. Empetrum nigrum var. japonicum extract suppresses ultraviolet B-induced cell damage via absorption of radiation and inhibition of oxidative stress / K.C. Kim, D. Kim, S.C. Kim, E. Jung, D. Park, J. W. Hyun // Evidence-Based Complementery and Alternative Medicine. -2013. -Vol. 2013. -P. 1-10.

118.Ermilova, E.V. Dense Crowberry extract: production technology, antioxidant and antihypoxant activity / E.V. Ermilova, T.V. Kadyrova, E.A. Krasnov, V.A. Khazanov, S.V. Il'yushenko, S.I. Pisareva // Pharmaceutical Chemistry Journal. -2001. -Vol.35. -№.11. -P. 610-612.D0I: 10.1023/A:1015197827847

119.Nakajima, J. I. LC/ PDA/ESI-MS profiling and radical scavenging activity of anthocyanins in various berries / J.I. Nakajima, I. Tanaka, S. Seo, M. Yamazak, K. Saito // BioMed Research International. - 2004. - Vol. 2004. -№ 5. -P. 241-247.

120.Краснов, Е. А. Флора Сибири - источник биологически активных веществ и лекарственных средств / Е.А. Краснов // Бюллетень сибирской медицины. Приложение. -2006. - Т. 2. -С. 11-18

121.Андреева, Н. В. Виды шикши как перспективный источник БАВ в условиях Якутии / Н.В. Андреева, И.Ш. Малогулова // Современные наукоемкиетехнологии. -2013. -№ 9. -С. 51-52.

122.Park, S. Y. Antioxidative effects of two native berry species, Empetrum nigrum var. japonicum k. Koch and Rubus buergerimiq, from the Jeju island of Korea / S.Y. Park,

E.S. Lee, S.H. Han, H.Y. Lee, S. Lee // Journal of Food Biochemistry. -2012. -Vol. 36. -№ 6, -P. 675-682. DOI: 10.1111/j. 1745-4514.2011.00582.x. 123.Jain, P. K. Coumarin: chemical and pharmacological profile / P.K. Jain, H. Joshi //

Journal of Applied Pharmaceutical Science. -2012. -Vol. 2. -№ 6, -P. 236-240. 124.Subramaniam, S. R. Umbelliferone and esculetin protect against N-nitrosodiethylamine-induced hepatotoxicity in rats / S.R. Subramaniam, E.M. Ellis // Cell biology international. -2016. -Vol. 40. - №7. - P. 761-769.

125.Ермилова, Е.В. Химическое изучение растений рода Empetrum и возможности использования их в медицине / Е.В. Ермилова // Автореф. дисс. на соискание ученой степени доктора фармацев. наук. -Пермь. 2002.

126.Huttunen, S. Inhibition activity of wild berry juice fractions against Streptococcus pneumoniae binding to human bronchial cells / S. Huttunen, M. Toivanen, S. Arkko, M. Ruponen, C. Tikkanen Kaukanen // Phytotherapy Research. -2011. -Vol. 25. - № 1. -P. 122-127.

127.Hyun. T. K. Antioxidant, a-glucosidase inhibitory and anti-inflammatory effects of aerial parts extract from Korean crowberry (Empetrum nigrum var. japonicum) / T.K. Hyun, H. C. Kim, Y. J. Ko, J. S. Kim // Saudi Journal of Biological Sciences. -2016. -Vol. 23. -№ 2. -P. 181-188.

128.Vuong, Q. V. Extraction and isolation of catechins from tea / Q.V. Vuong, J. B. Golding, M. Nguyen, P.D. Roach // Journal of Separation Science. -2010. -Vol 33. - № 21. -P. 3415-3428. D0I:10.1002/jssc.201000438

129.Porter, L.J. Cacao procyanidins: major flavonoids and identification of some minor metabolites / L.J. Porter, Z. Ma Z, B.G. Chan // Phytochemistry. -1991. -Vol. 30. - № 5, -P. 1657-1663. DOI: 10.1016/0031-9422(91)84228-k.

130.Lou, H. A-type proanthocyanidins from peanut skins / H. Lou, Y. Yamazaki, T. Sasaki, M. Uchida, H. Tanaka, S. Oka // Phytochemistry. -1999. -№51. - P. 297-308. DOI: 10.1016/S0031-9422(98)00736-5

131.Denes, T. Polyphenol content of Ononis arvensis L. and Rhinanthus serotinus oborny used in the Transylvanian ethnomedicine / T. Denes, N. Papp, K. Marton, A. Kaszas et

al. // International journal of pharmacognosy and phytochemistry. -2015. -Vol. 30. -№1, -P. 1301-1307.

132.Baki, P. M. A. Aquaretic activity of Solidago canadensis L. cultivated in Egypt and determination of the most bioactive fraction / P.M.A. Baki, M.M. El-Sherei, A.E. Khaleel, A.A.A. Motaal, H.M. Abdallah // Iranian Journal of Pharmaceutical research. -2019. -Vol. 18. -№2. - P. 922-937. DOI: 10.22037/ijpr.2019.2390.

133.Yifan, Y. Impact of temperature regimes on flavonoid accumulation in Merlot (Vitis vinifera L.) grapes / Y. Yifan. - Vancouver: University of British Columbia. - 2020. DOI: 10.14288/1.0383334.

134.Апрышко, Г.Н. Прогнозирование биологической активности химических соединений из базы данных по противоопухолевым веществам РОНЦ им Н.Н. Блохина РАМН с помощью системы PASS / Г.Н. Апрышко, Д.А. Филимонов, В.В. Поройков // Вестник РОНЦ им Н.Н. Блохина РАМН. -2008. -Vol. 19. -№3. -P. 1115.

135.Filimonov, D.A. Computer-aided prediction of biological activity spectra for chemical compounds: opportunities and limitation / D.A. Filimonov, D.S. Druzhilovskiy, A. Lagunin, T. Gloriozova, A.V. Rudik, A.V. Dmitriev et al. // Biomedical Chemistry: Research and Methods. -2018. -Vol. 1. -№1. - P. e00004. DOI: 10.18097/BMCRM00004.

136.Dolhyi, V. Tubilin role in cancer development and treatment / V. Dolhyi, D. Avierin, M. Hojouj, I. Bondarenko // Asploro Journal of Biomedical and Clinical Case Reports. - 2019. - Vol. 2. -№2. - P. 15-22. DOI: 10.36502/2019/ASJBCCR.6154

137.Murphy, M.P. Alzheimer's Disease and the в-Amyloid Peptide / M.P. Murphy, H. LeVine // Journal of Alzheimer's Disease. -2010. -Vol.19. -№1. -P. 311-323. DOI: 10.3233/JAD-2010-1221

ПРИЛОЖЕНИЕ