Фармакологическое и клиническое изучение отечественного С1-эстеразного ингибитора при системной воспалительной реакции тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.25, доктор медицинских наук Лазарева, Наталья Борисовна

• Лазарева, Наталья Борисовна
• доктор медицинских наук
• 2009

Оглавление диссертации доктор медицинских наук Лазарева, Наталья Борисовна

Общая характеристика работы.

Актуальность.

Цель исследования.

Задачи исследования.

Научная новизна.

Практическая значимость.9.

Внедрение в практику.

Положения, выносимые на защиту.

Апробация работы.

Публикации.

Глава 1. Обзор литературы.

Глава 2. Материалы и методы.

Глава 3.Характеристика состояния системы комплемента в рамках системной воспалительной реакции.

Глава 4.Изучение фармакологической активности С1-эстеразного ингибитора в условиях экспериментального сепсиса.

Глава 5. Изучение безопасности С1-эстеразного ингибитора при введении лабораторным животным.

Глава 6. Фармакокинетический анализ С1-эстеразного ингибитора.

Глава 7. Фармакодинамический анализ

Глава8.Изучение клинической эффективности применения С1-эстеразного ингибитора у больных сепсисом в составе комплексной терапии.

Глава 9. Оценка безопасности препарата С1-эстеразного ингибитора при внутривенном введении.

Глава 10. Обсуждение результатов собственных исследований.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакологическое и клиническое изучение отечественного С1-эстеразного ингибитора при системной воспалительной реакции»

Актуальность работы.

Сохраняющиеся на протяжении последних десятилетий крайне высокие показатели летальности (20-80%) [Vincent et al., 2006; Angus et al., 2001; Alberti et al., 2003] определяют сепсис как одну из наиболее актуальных проблем современного здравоохранения и обуславливают поиск новых подходов к фармакотерапии.

В патогенезе сепсиса важную роль играют разнообразные нарушения в иммунной системе пациента, возникающие вследствие воздействия инфекционного агента и проявляющиеся развитием системной воспалительной реакции, характеризующейся активацией системы комплемента, повышенным синтезом цитокинов, метаболитов арахидоновой кислоты и других вазоактивных веществ, дисрегуляцией свертывающей-противосвертывающей систем, приводящие к дисфункции сердечнососудистой системы, формированию различных вариантов метаболических нарушений.

Чрезвычайная сложность патогенеза сепсиса, с одной стороны, создает существенные сложности в поиске подходов к терапии [Lin et al., 2004] и является причиной отрицательных результатов в клинических испытаниях [Russell et al., 2007], а с другой стороны - стимулирует поиск новых терапевтических мишеней. Детальное изучение патогенеза системной воспалительной реакции способствовало созданию лекарственных препаратов, направленных на блокирование тех или иных звеньев системного воспаления.

Экспериментальные и клинические данные позволяют говорить о высоком терапевтическом потенциале препаратов, нацеленных на блокирование чрезмерной активации системы комплемента. В этой связи дальнейшего детального изучения требует эффективность применения данного класса препаратов при сепсисе и септическом шоке.

С1-эстеразный ингибитор является белком острой фазы воспаления, принадлежит к суперсемейству сериновых протеаз и является единственным из известных ингибиторов классического, альтернативного и маннозно-лектинового путей активации комплемента, а также инактиватором факторов свертывания XII, Х1а и калликреина, антагонистом брадикинина.

При тяжелом сепсисе и септическим шоке отмечается абсолютная и функциональная недостаточность С1-эстеразного ингибитора, вследствие его повышенного расщепления и потребления как в системном кровотоке, так и в очаге воспаления. В связи с этим назначение высоких доз экзогенного С1- эстеразного ингибитора предполагает локальный и системный противовоспалительный эффект, а также стабилизацию гемодинамики в связи уменьшением проницаемости капилляров.

Учитывая перспективы применения нового отечественного препарата С1-эстеразного ингибитора, полученного оригинальным способом, в клинической практике, требуется проведение полного спектра доклинического и клинического изучения безопасности и эффективности препарата у больных сепсисом. С1-ингибитор относится к иммунобиологическим препаратам, что определяет существенные отличия в фармакокинетике и фармакодинамике по сравнению с традиционными химически синтезированными JIC и требует выработки новых комплексных подходов в изучении свойств данного препарата. Оценка фармакологической активности препарата требует разработки экспериментальной модели для оценки антикомплементарной активности. Изучение клинической эффективности и безопасности препарата у больных сепсисом определяет необходимость проведения проспективного рандомизированного сравнительного исследования у пациентов с сепсисом.

Цель исследования: На основании экспериментальных и клинических исследований провести комплексное фармакологическое и клиническое изучение, выработать оптимальный режим дозирования оригинального отечественного иммунобиологического препарата ингибитора при системной воспалительной реакции.

С1-эстеразного

Задачи исследования:

1. Охарактеризовать состояние системы комплемента в условиях системной воспалительной реакции на основании показателей активности эндогенного С1-ингибитора, концентрации СЗ и С4 компонентов комплемента и исследовать взаимосвязь этих показателей с активностью системного воспаления.

2. Оценить фармакологическую активность С1-эстеразного ингибитора в условиях экспериментального сепсиса.

3. Провести оценку общетоксического действия С1-эстеразного ингибитора: острой токсичности, подострой токсичности, хронической токсичности, местнораздражающего действия. Провести оценку аллергизирующего и иммунотоксического действия.

4. Изучить характер фармакокинетической кривой С1-ингибитора после однократного и многократного введения препарата и определить основные фармакокинетические параметры С1-этеразного ингибитора у больных сепсисом: Cmax5 Ттах, AUCo-t, CI, Т]/2, ке].

5. Оценить безопасность и переносимость препарата С1-эстеразного ингибитор у больных сепсисом и септическим шоком при многоразовом внутривенном введении в составе комплексной терапии.

6. Оценить влияние С1-эстеразного ингибитора на основные биохимические маркеры сепсиса (уровень С-реактивного белка, ИЛ-6, прокальциотонин), охарактеризовать динамику комплемент-зависимого воспаления (концентрация С4, СЗ, концентрация и активность С1-эстеразного ингибитора) и клиническое состояние больных (по шкалам SAPSII, APACHE II). Охарактеризовать динамику тяжести состояния при сепсисе на фоне введения С1-ингибитора.

Оценить влияние С1-эстеразного ингибитора на исходы сепсиса и септического шока.

7. Определить рациональный режим дозирования С1-ингибитора у больных сепсисом.

Научная новизна работы. Работа является комплексным научным исследованием, посвященным экспериментальному и клиническому изучению фармакологических свойств нового отечественного иммунобиологического препарата С1-эстеразного ингибитора (Бицизар® производства ООО «БиоГениус», Москва, Российская Федерация), назначаемого в суперфизиологических концентрациях пациентам с сепсисом в составе комплексной терапии. Впервые было проведено комплексное доклиническое (экспериментальное) и клиническое изучение безопасности и эффективности С1-эстеразного ингибитора. Предложена модель экспериментального сепсиса для оценки эффективности и переносимости С1-эстеазного ингибитора у животных. Впервые была проведена комплексная оценка состояния системы комплемента у больных сепсисом, в том числе на фоне введения С1-эстеразного ингибитора. Впервые была изучена взаимосвязь основных фармакокинетических параметров с тяжестью системного воспаления у больных сепсисом.

Впервые проведен фармакокинетический-фармакодинамический анализ С1-эстеразного ингибитора. Впервые в нашей стране, на основании клинического исследования, доказана безопасность и эффективность применения С1-эстеразного ингибитора у больных сепсисом в составе комплексной терапии. В ходе работы выявлены основные нежелательные лекарственные реакции, связанные с внутривенным введением С1-эстеразного ингибитора.

В ходе работы на примере С1-эстеразного ингибитора были идентифицированы проблемы, связанные с изучением фармакокинетики и фармакодинамики иммунобиологических препаратов.

Предложены новые подходы к анализу фармакокинетической кривой С1эстеразного ингибитора: выделение стадии активного воспаления, когда фармакокинетические параметры обусловлены выраженностью воспалительного процесса, и стадии реконвалесценции, когда анализ кривой проводится с помощью стандартного внемодельного подхода. Впервые выявлены предикторы иммунологического ответа на введение С1-эстеразного ингибитора. Предложен рациональный режим дозирования препарата у больных сепсисом.

По результатам проведенных исследований были разработаны проекты нормативных документов для регистрационного досье нового отечественного препарата Бицизар® (С1-эстеразный ингибитор). Практическая значимость.

Материалы исследования позволяют научно обосновать применение высоких доз экзогенного С1-эстеразного ингибитора с целью восполнения дефицита данного белка при сепсисе. Данные, полученные в ходе работы, свидетельствуют об уменьшении выраженности системного воспаления у больных сепсисом при введении С1-эстеразного ингибитора. Обосновано выделение двух периодов для анализа фармакокинетической кривой: 1- период активного воспаления; 2-период реконвалесценции. Обосновано использование СЗ и С4 компонентов системы комплемента и исходной активности С1-эстеразного ингибитора у больных сепсисом в качестве маркеров функционального дефицита С1-эстеразного ингибитора. В результате данной работы выявлено, что исходная концентрация прокальцитонина позволяет оценить величину площади под фармакокинетической кривой С1-эстеразного ингибитора и степень прироста активности С1-эстеразного ингибитора после первого введения 6000МЕ, а уровень тяжести состояния, оцененный по шкале SAPS II, может служить предиктором величины площади под фармакокинетической кривой С1-эстеразного ингибитора после введения препарата. Результаты проведенного исследования позволяют выделить группу больных с функциональным дефицитом С1-эстеразного ингибитора и выраженной системной воспалительной реакцией, для которых предложен и обоснован рациональный режим дозирования С1-эстеразного ингибитора — 6000- 6000 ME с интервалом в 24 часа.

Результаты исследования позволяют предполагать возможность положительного влияния С1-эстеразного ингибитора на исходы сепсиса. Внедрение в практику.

Результаты работы внедрены в деятельность фармацевтической компании ООО «БиоГениус» в виде рекомендаций по проведению фармакологического и клинического изучения, а также проведения фармакокинетических исследований иммунобиологических препаратов. Выработанная методика комплексного анализа используется при подборе схем дозирования препарата. Результаты исследования применялись при разработке проекта фармакопейной статьи предприятия на Бицизар 500МЕ (С1-эстеразный ингибитор) лиофилизат для приготовления раствора для инфузий. Результаты исследования легли в основу проекта инструкции по медицинскому применению препарата Бицизар 500МЕ (С1-эстеразный ингибитор) лиофилизат для приготовления раствора для инфузий. Результаты исследования используются в учебном процессе на кафедре клинической фармакологии и пропедевтики внутренних болезней ММА им. И.М.Сеченова. Основные положения работы излагаются при чтении лекций и проведении практических занятий, семинаров и элективных курсов со студентами.

Положения, выносимые на защиту.

1. В условиях системной воспалительной реакции имеет место функциональный дефицит С1-эстеразного ингибитора. Введение экзогенного С1-ингибитора повышает активность С1-ингибитора у больных сепсисом.

2. Данные изучения фармакологической активности С1-эстеразного ингибитора. С1-эстеразный ингибитор приводит к достоверному по сравнению с контролем повышению выживаемости животных в условиях модели экспериментального сепсиса, способствует стабилизации клинико-лабораторных параметров, отражающих степень активации системной воспалительной реакции при введении летальной дозы ЛПС.

3. Данные изучения общетоксического действия С1-эстеразного ингибитора. После однократного внутрибрюшинного введения мышам не вызывает признаков интоксикации и гибели животных, в связи с чем не удалось установить показателей ЛД50 и других параметров токсичности препарата. Исследование токсичности С1-эстеразного ингибитора в условиях субхронического эксперимента на кроликах свидетельствуют о том, что лекарственная форма С1-эстеразного ингибитора хорошо переносится животными и не влияет на гематологические показатели, а также на функциональное состояние основных органов и систем организма подопытных животных.

4. Критерии оценки аллергизирующего и иммунотропного действия С1-эстеразного ингибитора. Оценка влияния препарата на клеточность подколенного лимфоузла у мышей свидетельствует об отсутствии аллергизирующих свойств. С1-эстеразный ингибитор не влияет на клеточный иммунитет в реакции гиперчувствительности замедленного типа у мышей.

5. Системная воспалительная реакция, развивающаяся в рамках сепсиса, оказывает влияние на фармакокинетические параметры С1-эстеразного ингибитора: определяет Д%, величину площади под фармакокинетической кривой, обуславливает длительный период полувыведения. Фармакокинетическая кривая С1-эстеразного ингибитора на терминальном участке кривой может быть адекватно описана с помощью модельно- независимого метода статистических моментов.

6. У больных сепсисом на фоне введения С1-эстеразного ингибитора отмечается рост концентрации СЗ, С4 компонентов системы комплемента, а также уменьшение выраженности системного воспалительного ответа. Апробация работы.

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на заседании кафедры клинической фармакологии и пропедевтики внутренних болезней Московской медицинской академии им. И.М.Сеченова. Результаты исследования были доложены на научно-практической конференции: клиническая фармакология в России: достижения и перспективы (Москва, 2004), Российском научном форуме «Скорая помощь 2004», 17-м Национальном конгрессе по болезням органов дыхания (Казань, 2007г), 10 Российской конференции «Современные проблемы антимикробной химиотерапии» (Москва, 2008г). Основные положения диссертации в виде постерных докладов были представлены на 14 European Respiratory Society Annual Congress (Глазго, 2004), 15 European Respiratory Society Annual Congress (Копенгаген, 2005), 16 European Respiratory Society Annual Congress (Мюнхен, 2006), 28 International Congress on Intensive Care and Emergency Medicine (Брюссель, 2008), 21European Society of Intensive Care Medicine (Лиссабон, 2008), 29 International Congress on Intensive Care and Emergency Medicine (Брюссель, 2009).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 25 печатных работ. В том числе 12 статей в журналах, включенных в «Перечень ведущих рецензируемых научных изданий и журналов.» ВАК Министерства образования и науки РФ, 1 публикация в коллективных монографиях и руководствах.

Объем и структура работы

Диссертация изложена на 210 страницах машинописи, иллюстрирована 28 рисунками, содержит 66 таблиц, состоит из введения, 10 глав, выводов и практических рекомендаций. Библиографический указатель содержит 150 источников.

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Лазарева, Наталья Борисовна

Практические рекомендации:

1. У больных сепсисом рекомендуется проводить мониторинг концентрации РСТ, СЗ и С4 компонентов системы комплемента и активности С1-эстеразного ингибитора для выявления пациентов с выраженным дефицитом С1-эстеразного ингибитора, которым показано назначение С1 -эстеразного ингибитора.

2. Для оценки фармакологической активности лекарственных средств, применяемых в терапии сепсиса, рекомендуется использовать экспериментальную модель, предложенную в данной работе.

3. Учитывая длительный период полувыведения препарата рекомендуется оптимизация методов введения С1-эстеразного ингибитора у больных сепсисом — двукратное внутривенное введение 6000МЕ С1-эстеразного ингибитора с интервалом в 24 часа, вместо предложенной ранее схемы: 6000-3000-2000-1000МЕ через каждые 12 часов.

4. Использование С1-эстеразного ингибитора может быть рекомендовано у больных сепсисом в составе комплексной терапии.

5. При проведении терапии С1-эстеразным ингибитором необходимо проведение мониторинга безопасности.

Список литературы диссертационного исследования доктор медицинских наук Лазарева, Наталья Борисовна, 2009 год

1. Brun-Buisson, С. The costs of septic syndromes in the intensive care unit and influence of hospital-acquired sepsis / C. Brun-Buisson, F. Roudot-Thoraval, E. Girou // Intensive Care Med. 2003. - V. 29. - P. 1464^1471.

2. Angus, D. Epidemiology of severe sepsis in the United States: analysis of incidence, outcome and associated costs of care/ D. C. Angus, W. T. Linde-Zwirble, J. Lidicker // Crit. Care Med. 2001. - V. 29. - P. 1303-1310.

3. Martin GS, Mannino DM, Eaton et al. The epidemiology of sepsis in the United States from 1979 through 2000. N Engl J Med 2003 348: 1546-1554.

4. Brun-Buisson, C. EPISEPSIS: a reappraisal of the epidemiology and outcome of severe sepsis in French intensive care units / C. Brun-Buisson, P. Meshaka, P. Pinton // Intensive Care Med. 2004. - V. 30. - P. 580-588.

5. Quartin, A. Magnitude and duration of the effect of sepsis on survival / A. Quartin, R. M. H. Schein, D. H. Kett // JAMA. 1997. - V. 277. - P.1058-1063.

6. Alberti, C. Influence of systemic inflammatory response syndrome and sepsis on outcome of critically ill infected patients/ C. Alberti, C. Brun-Buisson, S. V. Goodman // Am. J. Resp. Crit. Care Med. 2003. - V. 168. - P. 77-84.

7. Ashare, A. Anti-inflammatory response is associated with mortality and severity of infection in sepsis / A. Ashare, L. S. Powers, N. S. Butler //Am. J. Physiol. -2005. -V. 288. P. 633-640.

8. Vincent, J. Sepsis Occurrence in Acutely 111 Patients Investigators (2006) Sepsis in European intensive care units: results of the SOAP study / J. L. Vincent, Y. Sakr, C. L. Sprung // Crit. Care Med. 2006. - V. 34. - P. 344^-353.

9. Bone RC: Pulmonary and Critical Care Medicine, ed. Mosby Year Book Inc. 1998

10. Morrison DC, Danner RL, Dinarello CA, et al: Bacterial endotoxins and pathogenesis of gram-negative infections: Current status and future direction. J Endotoxin Res 1994; 1:71-83

11. Rietschel, E. Т., Т. Kirikae, F. U. Schade, et al. Bacterial endotoxin-molecular relationships of structure to activity and function. 1994; FASEB J. 8:217-225.

12. Suffredini AF, Gromm RE, Parker MM, et al: The cardiovascular response of normal humans to the administration of endotoxin. N Engl J Med 1989; 321:280287

13. Ishiguro, E. E., D. Vanderwel, and W. Kusser. Control of lipopoly-saccharide biosynthesis and release by Escherichia coli and Salmonella typhimurium. J. Bacterid. 1986 168:328-333.

14. Hoekstra, D., J. W. Van Der Laan, L. De Leij, and B. Witholt. Release of outer membrane fragments from normally growing Escherichia coli. Biochim. Biophys. Acta 1976 455:889-899.

15. Fenton MJ, Golenbock DT: LPS-binding proteins and receptors. J Leukoc Biol 64:25-32, 1998

16. Appelmelk BJ, An YQ, Thijs BG, et al: Recombinant human bactericidal/permeability-increasing protein (rBPI23) is a universal lipopolysaccharide-binding ligand. Infect Immun 62:3564-3567, 1994

17. Wright, S. D., R. A. Ramos, P. S. Tobias, R. J. Ulevitch, and J. C. Mathison. CD 14, a receptor for complexes of lipopolysaccharide (LPS) and LPS binding protein. //Science 1990 249:1431-1433.

18. O'Neill LA, Dinarello CA: The ИЛ-1 receptor/toll-like receptor superfamRJIy: crucial receptors for inflammation and host defense.//Immunol Today 2000, 21:206-209.

19. Medzhitov R, Preston-Hurlburt P, Kopp E, Stadlen A, Chen C, Ghosh S, Janeway CA Jr: MyD88 is an adapter protein in the hToll/il-1 receptor family signaling pathways. Mol Cell 1998,2:253-258.

20. Timmerman CP, Mattsson E, Martinez-Martinez L, et al: Induction of release of tumor necrosis factor from human monocytes by staphylococci and staphylococcal peptidoglycans. Infect Immun 1993; 61: 4167-4172

21. Dziarski R: Cell-bound albumin is the 70-kDa peptidoglycan-, lipopolysaccharide-, and lipoteichoic acid-binding protein on lymphocytes and macrophages. //J Biol Chem 269:20431-20436, 1994

22. Weidemann B, Brade H, Rietschl ET, et al: Soluble peptidoglycan-induced monokine production can be blocked by anti-CD 14 monoclonal antibodies and by lipid A partial structures. //Intensive Care Medicine 20(suppl 1):S10, 1994

23. Michael A. Flierl, Daniel Rittirsch, Brian A. Nadeau, et al. Functions of the complement components C3 and C5 during sepsis. FASEB J, Oct 2008; 22: 3483 3490.

24. MR Haeney. The role of the complement cascade in sepsis J. Antimicrob. Chemother., Jan 1998; 41: 41 46.

25. Peter A. Ward. Role of the complement in experimental sepsis J. Leukoc. Biol., Mar 2008; 83: 467 470.32Hack CE , Voerman HJ , Eisele В , et al. CI esterase inhibitor substitution in sepsis.// Lancet.- 1992.- 339.- P. 378.

26. Stevens JH , O'Hanley P , Shapiro JM , et al: Effects of anti-C5a antibodies on the adult respiratory distress syndrome in septic primates . J Clin Invest 1986 ; 77 : 1818-1826

27. Fischer MB , Prodeus AP , Nicholson-Weller A , et al: Increased susceptibility to endotoxin shock in complement C3- and C4-deficient mice is corrected by CI inhibitor replacement. J Immunol 1997 ; 159 : 976-982

28. Cavaillon JM , Fitting С , Haeffner-Cavaillon N : Recombinant C5a enhances interleukin 1 and tumor necrosis factor release by lipopolysaccharide-stimulated monocytes and macrophages . Eur J Immunol 1990 ; 20 : 253-257

29. LeGall JR , Klar J , Lemeshow S , et al: The logistic organ dysfunction system . JAMA 1996 ; 276 : 802-810

30. Woo P, Lachmann PJL, Harrison RA and Amos N (1985) Simultaneous turnover of normal and dysfunctional CI inhibitor as a probe of in vivo activation of CI and contact activatable proteases. Clin Exp Immunol 61:1-8.

31. Zahedi K, Prada AE, Prada JA and Davis AEr (1997b) Characterization of the INF-gamma-responsive element in the 59 flanking region of the CI-Inhibitor gene. J Immunol 159:6091-6096.

32. Heda GD, Kehoe KJ, Mahdi F and Schmaier AH (1996) Phosphatase 2A participates in Interferon-g's induced upregulation of CI inhibitor mRNA expression. Blood 87:2831-2838.

33. Schmidt B, Gyapay G, Valay M and Fust G (1991) Human recombinant macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) increases CI-esterase inhibitor (C1INH) synthesis by human monocytes. Immunology 74:677-679.

34. Lappin DF, Guc D, НИЛ1 A, McShane T and Whaley К (1992) Effect of interferongamma on complement gene expression in different cell types. Biochem J 281:437-442.

35. Complement activation during sepsis in humans. H Schreiber, D Rittirsch, M Flierl, et al. Adv Exp Med Biol, Jan 2006; 586: 21726.

36. Weiss SJ (1989) Tissue destruction by neutrophHJIs. N Engl J Med 320:365376.

37. Ляшенко A.A. Уваров В.Ю. Цитокины и факторы роста: вопросы классификации. Доказательная медицина и молекулярная терапия в клинике внутренних болезней. Диалог-МГУ. (1999)

38. Janeway, С. A., Jr. 2001. Appendix III, p. 677-679. In С. A. Janeway Jr., P.Travers, M. Walport, and M. J. Shlomchick (ed.), Immunobiology, 5th ed. Garland Publishing, New York, N.Y.

39. Abraham E: Physiologic stress and cellular ischemia: Relationship to immunosuppression and susceptibility to infection. //Crit Care Med 1991; 19:613618

40. Browder W, WHJIliams D, Pretus H, et al: Beneficial effect of enhanced macrophage function in the trauma patient. Ann Surg; 211:605-612 (1990)

41. Wakefield CH, Carey PD, Foulds S, et al: Changes in major histocompatibility complex class II expression in monocytes and T cells of patients developing infection after surgery. Br J Surg; 80:205-209 (1993)

42. Bone RC: Sir Isaac Newton, sepsis, SIRS, CARS. Crit Care Med 24:1125-281996)

43. Murata A et al.: Cytokine imbalance in critically ИЛ1 patients: SIRS and CARS. Nippon Geka Gakkai Zasshi 100(7):414-8 (1999)

44. Docke WD et al.: Monocytes deactivation in septic patients. Nat Med 3:678-811997)

45. Dendorfer U, Oettgen P, Libermann ТА: Multiple regulatory elements in the interleukin-6 gene mediate induction by prostaglandins, cyclic AMP, and lipopolysaccharide. Mol Cell Biol 14: 4443-4454, 1994

46. Papanicolaou DA, WRJIder RL, Manolagas SC, et al. The pathophysiologic roles of interleukin-6 in human disease. NIH conference. Ann Intern Med 1998;128:127-37.

47. Fattori E, Cappelleti M et al. Defective inflammatory respomse in ИЛ6 deficient mice. J Exp Med 1994; 180:1243-50

48. Igonin AA, Armstrong VW, Shipkova M, Kukes V, Oellerich M. The monoethylglycinexylidide (MEGX) test as a marker of hepatic dysfunction in septic patients with pneumonia. Clin Chem Lab Med 2000; 38(11): 1125-1128

49. Damas P, Canivet JL, DeGroote D, et al. Sepsis and serum cytokine concentrations. Crit Care Med. 1997;25:405-412

50. Monton С et al. Cytokine expression in severe pneumonia: A bronchoalveolar lavage study Crit Care Med 1999; Vol.27, P. 1745-1753

51. Dehoux MS, Boutten A, Ostinelli J, et al: Compartmentalized cytokine production within the human lung in unHJIateral pneumonia. Am J Respir Crit Care Med 1994; 150:710-716

52. Monton С et al. Cytokine expression in severe pneumonia: A bronchoalveolar lavage study //Crit Care Med 1999; Vol.27, P.1745-1753

53. Puren AJ, Feldman C, Savage N, et al: Patterns of cytokine expression in community acquired pneumonia. Chest 1995; 107: 1342-1349

54. Ortqvist A, Hedlund J, Wretlind B, et al. Diagnostic and prognostic value of interleukin-6 and C-reactive protein in community acquired pneumonia. Scand J Infect Dis 1995; 27:457-462

55. Meyer ТА, Wang J, Tiao GM, et al. Sepsis and endotoxemia stimulate interleukin-6 production. Surgery 1995;118:336-42

56. Ertel W, Kremer JP et al. Downregulation of proinflammatory cytokine release in whole blood from septic patients. Blood 1995 85 (5): 1341-47

57. Cohen, J. Diagnosis of infection in sepsis: An evidence-based review / J. Cohen, C. Brun-Buisson // Crit. Care Med. 2004. - V. 32, N. 11 (Suppl.l 1). -P. 466-494.

58. Белобородова, Н. Диагностическая ценность некоторых маркеров инфекции в раннем послеоперационном периоде у кардиохирургичексих больных/ Н. В. Белобородова, Д. А. Попов // Анестизиология и реаниматология. 2005. - №3. - С. 45-49.

59. Reinhart, К. Markers for sepsis diagnosis: what is useful? / K. Reinhart, M. Meisner, F. M. Brunkhorst // Crit .Care Clin. 2006. - V. 22. - P. 503-519.

60. Uzzan, B. Procalcitonin as a diagnostic test for sepsis in critically ill adults and after surgery or trauma: a systematic review and meta-analysis / B. Uzzan, R. Cohen, P. Nicolas // Crit. Care Med. 2006. - V. 34. - P. 1996-2003.

61. Christ-Crain, M. Procalcitonin guidance of antibiotic therapy in community-acquired pneumonia: a randomized trial / M. Christ-Crain, D. Stolz, R. Bingisser // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2006. -V. 174. - P. 84-93.

62. Novotny, A. Use of procalcitonin for early prediction of lethal outcome of postoperative sepsis / A. Novotny Alexander, K. Emmanuel, E. Matevossian // The American Journal of Surgery. 2007. - V. 194. - P. 35-39.

63. Lopez Sastre JB, Solis DP, Serradila VR et al. Evaluation of procalcitonin for diagnosis of neonatal sepsis of vertical transmission. BMC Pediatr.2007 Feb 26; 79

64. Н.В.Белобородова, Д.А.Попов. Тест на прокальцитонин: алгоритмы применения и новые возможности. Пособие для врачей.М.,2008, 74С.

65. Boussekey N., Leroy О, Alfandari S et al. Procalcitonin kinetics in the prognosis of severe community-acquired pneumonia. Intensive Care Med. 2006;32(3):469-472.

66. Casey, L. Plasma cytokine and endotoxin levels correlate with survival in patients with the sepsis syndrome / L. C. Casey, R. A. Balk, R. C. Bone // Ann. Intern. Med. 1993. V. 119. - P. 771-778.

67. Boeken U, Feindt P, Petzold T et al. Diagnostic value of procalcitonin: the influence of cardiopulmonary bypass, aprotinin, SIRS and sepsis. Thorac Cardiovasc Surg. 1998 Dec; 46 (6):348-51.

68. Rivers, E. The influence of early hemodynamic optimization on biomarker patterns of severe sepsis and septic shock / E. P. Rivers, J. A. Kruse, G. Jacobsen // Crit. Care Med. 2007. - V. 35, № 9. - P. 2016 - 2024.

69. Bernard, G. Efficacy and safety of recombinant human activated protein С for severe sepsis / G. R. Bernard, J. L. Vincent, P. F. Laterre// N. Engl. J. Med. 2001.- V. 344. P. 699-709.

70. Vincent, J. Effects of drotrecogin alfa (activated) on organ dysfunction in the PROWESS trial / J. L. Vincent, D. C. Angus, A. Artigas // Crit. Care Med. 2003.- V.31. -P.834-840.

71. Dellinger, R. Surviving Sepsis Campaign guidelines for management of severe sepsis and septic shock/ R. P. Dellinger, J. M. Carlet, H. Masur// Crit. Care Med. -2004. V. 32, № 3. - P. 858-873.

72. Abraham, E. Drotrecogin alfa (activated) for adults with severe sepsis and a low risk of death / E. Abraham, P.F. Laterre, R. Garg //N. Engl. J. Med. 2005. -V.353.-P. 1332-1341.

73. Ely, E. Drotrecogin alfa (activated) administration across clinically important subgroups of patients with severe sepsis / E. W. Ely, P. F. Laterre, D. C. Angus // Crit. Care Med. -2003. V. 31. P. 12-19.

74. Warren, B. Caring for the critically ill patient: high-dose antithrombin III in severe sepsis; a randomized controlled trial / B. L. Warren, A. Eid, P. Singer // JAMA. 2001.-V. 286.-P. 1869-1878.

75. Wiedermann, С. High-dose antithrombin III in the treatment of severe sepsis in patients with a high risk of death: Efficacy and safety / C. J. Wiedermann, J. N. Hoffmann, M. Juers // Crit. Care Med. 2006. - V. 34, № 2. - P. 285 - 292.

76. D. Annane, G. Umberto Meduri, and P. Marik Critical illness-related corticosteroid insufficiency and community-acquired pneumonia: back to the future!

77. Eur. Respir. J., Jun2008; 31: 1150 1152.

78. G Colin and D Annane. Corticosteroids and human recombinant activated protein С for septic shock. Clin Chest Med, Dec 2008; 29(4): 705-12.

79. Dellinger, R. Surviving Sepsis Campaign:international guidelines formanagement of severe sepsis and septic shock:2008 / R. P. Dellinger, M.M. Levy, J. M. Carlet // Crit. Care Med. 2008. - V. 36, № 1. - P. 296 - 327.

80. JC Schefold, S von Haehling, M Corsepius, et al. A novel selective extracorporeal intervention in sepsis: immunoadsorption of endotoxin, interleukin 6, and complement-activating product 5a. Shock, Oct 2007; 28(4): 418-25.

81. Bhole D., Stahl G. Therapeutic potential of targeting the complement cascade in critical care medicine. Critical Care Medicine Vol. 31, N 1, 2003.

82. Czermak BJ, Sarma V, Pierson CL et al. Protective effects of C5a blockade in sepsis. Nat Med, Jul 1999; 5(7): 788-92.

83. Caliezi С , Wuillemin WA , Zeerleder S , et al: CI-esterase inhibitor : An antiinflammatory agent and its potential use in the treatment of diseases other than hereditary angioedema . Pharmacol Rev 2000 ; 52 : 91—112

84. Hack CE , OgMJIvie AC , Eisele В , et al: CI inhibitor substitution therapy in septic shock and in vascular leak syndrome induced by high doses of interleukin-2 . Intensive Care Med 1993 ; 19 : 19-28

85. Stevens JH , O'Hanley P , Shapiro JM , et al: Effects of anti-C5a antibodies on the adult respiratory distress syndrome in septic primates . J Clin Invest 1986 ; 77 : 1818-1826

86. P. Jansen, B. Eisele, I. de Jong, A. Changet al. Effect of CI Inhibitor on Inflammatory and Physiologic Response Patterns in Primates Suffering from Lethal Septic Shock The Journal of Immunology, 1998, 160: 475-484.

87. Stevens JH , O'Hanley P , Shapiro JM , et al: Effects of anti-C5a antibodies on the adult respiratory distress syndrome in septic primates . J Clin Invest 1986 ; 77 : 1818-1826

88. Zwijnenburg P., van der Poll Т., Florquin S. CI Inhibitor treatment improves host defense in pneumococcal meningitis in rats and mice. The Journal of Infectious Diseases 2007; 106:115-23

89. Stevens JH , O'Hanley P , Shapiro JM , et al: Effects of anti-C5a antibodies on the adult respiratory distress syndrome in septic primates . J Clin Invest 1986 ; 77 : ■ 1818-1826

90. Pharmacorinetics and Pharmacodynamics of Biotech Drugs: Principles and Case Studies in Drug Development. Edited by B. Meibohm//2006 WilEY-VCH Veglag GmbH & Co. KGA, Weinheim, pp. 6, 28-30

91. Molineux G:Peglication: Engineering improved biopharmaceuticals for oncology. Pharmacotherapy. (2003) 23(Pt 2): 3S-8S.

92. Findalay JWA, Das I: Validation of immunoassays for macromolecules from biotechnology. J. Clin. Ligand Assay (1998) 21:249-253

93. Hartman C, Smeyers-Verbeke J, Massart DL, et all.: Validation of bioanalytical chromatographic metods. J. Pharm. Biomed. Annal. (1998) 17:193218

94. Guidelines for industry on bioanalytical method validation — A revisit with a decade of progress. Pharm. Res. (2000) 17:1551-1557.

95. Сергиенко, В. Прикладная фармакокинетика: основные положения и клиническое применение./ В. И. Сергиенко, Р. Джелифф, И. Б. Бондарева. -М.: Издательство РАМН, 2003г. 252с.

96. Мирошниченко, И. Основы фармакокинетики./ И. И. Мирошниченко. -М.: ГЭОТАР-МЕД, 2002.-192с.

97. Соловьев, В. Фармакокинетика. / В. Н. Соловьев, А. А.Фирсов, В. А. Филов. М.Медицина, 1980. - 494с.

98. Холодов, JI. Клиническая фармакокинетика. / JI. Е. Холодов, В. П. Яковлев. -М.: Медицина, 1985. 464с.

99. Пиотровский, В. Метод статистических моментов и внемодельные характеристики распределения и элиминации лекарственных средств / В. К. Пиотровский //Хим.-фарм. Журн. -1984.-Т. 18, № 7. С. 845-849.

100. Белоусов Ю.Б. Руководство по фармакокинетике., М.,2006.

101. Tang, L. Pharmacokinetic aspects of biotechnology products / L. Tang, A. M. Persky , G. Hochhaus // J. Pharm. Sci. 2004. - V. 93. P. 2184-2204.

102. Pharmacorinetics and Pharmacodynamics of Biotech Drugs: Principles and Case Studies in Drug Development. Edited by B. Meibohm//2006 WILEY-VCH Veglag GmbH & Co. KGA, Weinheim, p.3

103. Colburn, W. 1991. Peptid, peptoid, and protein pharmacokinetics/pharmacodynamics. In: P. Garzone, W. Colburn, and M.

104. Mokotoff (Eds.), Peptid, peptoid, and protein. Harvey Whitney Books Cincinnaty, OH, pp. 94-115

105. Toon, S. The relevance of pharmacokinetics in the development of biotechnology products / S. Toon // Eur. J. Drug Metab. Pharmacokinet. — 1996. -V.21.-P. 93-103

106. Mohler, M. Altered pharmacokinetics of recombinant human deoxyribonuclease in rats due to the presense of binding protein / M. Mohler, J. Cook, D. Lewis//Drug Metab. Dispos. 1993. - V.21. - P. 71-75.

107. Tan, A. Atrial natriuretic peptid. An overview of clinical pharmacology and pharmacokinetics / A. C. Tan, T. Russel, T. Thien // Clin. Pharmacokinet. 1993. - V. 24. - P. 28-45.

108. Stahl GL, Reenstra WR, Frendi G. Complement-mediated loss of endothelium relaxation of porcine coronary arteries: role of the terminal membrane attack complex. Circ Res 1995, 76:575-583

109. Piscitelli, S. Pharmacokinetic studies with recombinant cytokines. Scientific issues and practical considerations / S. C. Piscitelli, W.D. Figg, W.P. Petros // Clin. Pharmacokinet. 1997. - V. 23. - P. 406 - 414.

110. Leid, R. Cleavage and inactivation of human CI inhibitor by the human leukocyte proteinase, proteinase 3 / R. W. Leid, B.E.P.B. Ballieux, I. Van der Heijden // Eur. J. Immunol. 1993. - V. 23. - P. 2939-2944.

111. Wallace, E. Degradation of Cl-inhibitor by plasmin: Implications for the control of inflammatory process / E. M. Wallace, S. J. Perkins, R. B. Sim // Mol. Med. 1997. -V. 3. - P. 385-396

112. Stephen J. Wolf, Zachary D. Tebb, Richard L. Byyny, et al. Clinical Effectiveness and Early Goal-Directed Therapy for Severe Sepsis and Septic Shock Chest, Feb 2008; 133: 584 585.

113. Smedsrod, В. Clearance of tissue plasminogen activator by mannose and galactose receptors in the liver / B. Smedsrod, M. Einarsson // Thromb. Haemost.- 1990. V. 63.-P. 60-66.

114. Schellekens H. Bioequivalence and the immunogenisity of biopharmaceuticals. Nature Reviews. Drug Dis 2002; 1:457-62.

115. Schellekens, H. Factors influencing the imunogenecity of therapeutic proteins / H. Schellekens //Nephrol. Dial. Transplant. 2005. - V. 20, Suppl. 6. - P. 3-9.

116. Martin, G. The epidemiology of sepsis in the United States from 1979 through 2000 / G. S. Martin, D. M. Mannino, S. Eaton // N. Engl. J. Med. 2003. - V. 348.1. P.1546-1554.

117. M Quastel, R Harrison, M Cicardi, et al. Behavior in vivo of normal and dysfunctional CI inhibitor in normal subjects and patients with hereditary angioneurotic edema. J Clin Invest, Apr 1983; 71(4): 1041-6.

118. P Woo, PJ Lachmann, RA Harrison, et al. Simultaneous turnover of normal and dysfunctional CI inhibitor as a probe of in vivo activation of CI and contact activatable proteases. Clin Exp Immunol, Jul 1985; 61(1): 1-8.

119. В J de Smet, JP de Boer, J Agterberg, et al. Clearance of human native, proteinase-complexed, and proteolytically inactivated CI-inhibitor in rats.Blood, Jan 1993; 81: 56 61.

120. Hack, CE, Ogilvie, AC, Eisele, B. CI inhibitor substitution therapy in septic shock and in vascular leak syndrome induced by high doses of interleukin-2. Intensive Care Med 1993; 19,19-28

121. JE Gadek, SW Hosea, JA Gelfand, et al. Replacement therapy in hereditary angioedema: successful treatment of acuteepisodes of angioedema with partly purified CI inhibitor N. Engl. J. Med., Mar 1980; 302: 542 546.

122. Diris J., Hermens W., Hemker P. et al. Pharmacokinetics of Cl-inhibitor protein in patients with acute myocardial infarction. Clin Pharmacol Ther 2002; 72:498-504.

123. C. de Zwaan, A.H. Kleine, J.H.C. Diris, et al. Continuous 48-h Cl-inhibitor treatment, following reperfusion therapy, in patients with acute myocardial infarction.//Eur. Heart J., Nov 2002; 23: 1670 1677.

124. VH Donaldson, RR Harrison. Complexes of Cl-inhibitor (Cl-INH) and hemostatic enzymes in normal plasma. Adv Exp Med Biol, Jan 1983; 156: 149-55.

125. Inhibition of acid sialidase by inorganic sulfate. A Greffard, N Trabelsi, H Terzidis, J Bignon, MC Jaurand, and Y Pilatte Biochim Biophys Acta, Mar 1997; 1334(2-3): 140-8.

126. D Liu, S Cai, X Gu, et al. CI Inhibitor Prevents Endotoxin Shock Via a Direct Interaction with Lipopolysaccharide. The Journal of Immunology, 2003, 171: 2594-2601.

127. P. Jansen, B. Eisele, I. de Jong et. Effect of CI Inhibitor on Inflammatory and Physiologic Response Patterns in Primates Suffering from Lethal Septic Shock. //The Journal of Immunology, 1998, 160: 475-484.

128. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Под ред. Фисенко В.П., Арзамасцева Е.В., Бабаяна Э.А. и др. М. «Ремедиум», 2000.

129. Marquez-Velasco R., R.Bojalil, A.Buelna. et al. Anti-tumor necrosis antibody fragments protect in murine polymicrobial sepsis: concentration and early intervention are fundamental to the outcome. //Inflamm.Res.2006;55:378-384.

130. Abraham, E., A. Anzueto, G. Gutierrez et al. 1998. Double-blind randomized controlled trial of monoclonal antibody to human tumor necrosis factor in treatment of septic shock: NORASEPTII Study Group. //Lancet 351: 929-933.

131. Dinarello, C. A. 2001. Anti-cytokine therapies in response to systemic infection. //J. Invest. Dermatol. Symp. Proc. 6: 244-250