Фармакологические подходы к активации регенерации мягких тканей при сахарном диабете тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Пахомов Дмитрий Владимирович

• Пахомов Дмитрий Владимирович
• кандидат наук
• 2022

Оглавление диссертации кандидат наук Пахомов Дмитрий Владимирович

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ОСНОВЫ РЕГУЛЯЦИИ РЕГЕНЕРАЦИИ ДИАБЕТИЧЕСКИХ РАН: ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ МИШЕНИ ДЛЯ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1 Клеточные аспекты регенерации мягких тканей

1.1.1 Гемостаз

1.1.2 Регуляция воспалительной реакции в процессе восстановления целостности мягких тканей

1.1.3 Регуляция пролиферативной фазы тканевой репарации

1.1.4 Роль ремоделирования матрикса в ранозаживлении

1.2 Механизмы хронизации ранозаживления

1.3 Современные терапевтические подходы к лечению повреждений мягких тканей при сахарном диабете

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Дизайн исследования

2.2 Биоэтические аспекты выполнения исследования

2.3 Характеристика исследуемого лекарственного вещества, его лекарственной формы, а также препаратов сравнения. Обоснование выбора доз

2.4 Метод исследования клеточной токсичности исследуемого соединения

2.5 Лабораторные животные. Моделирование экспериментального сахарного диабета. Обезболивание животных

2.6 Моделирование экспериментальных ран

2.6.1 Метод воспроизведения линейной раны

2.6.2 Метод воспроизведения плоской раны

2.6.3 Моделирование инфицированной раны

2.7 Методы морфологического исследования

2.7.1 Классическая световая микроскопия

2.7.2 Иммуногистохимия

2.8 Иммуноферментный анализ

2.9 Метод оценки тканевой стресс-реакции

2.10 Метод оценки экспрессии рецептора фактора роста фибробластов 3 типа (FGFR3) с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени

2.11 Метод исследования противомикробной активности исследуемого соединения церия в виде спрея

2.12 Статистический анализ результатов проведенного диссертационного исследования

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

ГЛАВА 3. СИНТЕЗ ДЕЙСТВУЮЩЕГО ВЕЩЕСТВА ЛХТ-8-17. РАЗРАБОТКА ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ. ЦИТОТОКСИЧНОСТЬ СПРЕЯ

3.1 Синтез церия N-ацетил-б-аминогексаноата. Получение жидкой лекарственной формы

3.2 Клеточная токсичность церия N-ацетил-б-аминогексаноата в опытах in vitro

ГЛАВА 4. РАНОЗАЖИВЛЯЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ ЦЕРИЯ N-АЦЕТИЛ-б-АМИНОГЕКСАНОАТА В ФОРМЕ СПРЕЯ НА МОДЕЛЯХ ЛИНЕЙНЫХ И ПЛОСКИХ ДИАБЕТИЧЕСКИХ РАН

4.1 Стимуляция регенерации линейного дефекта кожи крыс с сахарным диабетом 1 типа

4.2 Регенераторная активность ЛХТ-8-17 на модели плоской раны у животных с сахарным диабетом 1 и 2 типов................................................................................ б1

ГЛАВА 5. МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ ЛХТ-8-17 ПО СТИМУЛЯЦИИ РЕГЕНЕРАЦИИ ДИАБЕТИЧЕСКОЙ РАНЫ

5.1 Влияние ЛХТ-8-17 на продукцию и тканевую концентрацию цитокинов, регулирующих воспалительную реакцию

5.2 Влияние ЛХТ-8-17 на местные свободнорадикальные процессы у животных с сахарным диабетом 1 и 2 типов

5.3 Влияние ЛХТ-8-17 на васкуляризацию регенерирующей диабетической раны

5.4 Экспрессия FGFR3 в очаге регенерации диабетической раны на фоне топического воздействия ЛХТ-8-17

5.5 Локальное воздействие ЛХТ-8-17 и пролиферативный потенциал тканей в области раневого дефекта на фоне сахарного диабета 1 и 2 типов

5.6 Противомикробная активность местного применения ЛХТ-8-17 на модели инфицированной плоской раны у мышей с сахарным диабетом 2 типа

ГЛАВА 6. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

6.1 Перспективы дальнейшего развития темы диссертационного

исследования

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК ОБОЗНАЧЕНИЙ И СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакологические подходы к активации регенерации мягких тканей при сахарном диабете»

Актуальность работы

Разработка терапевтических подходов к лечению диабетических ран является одной из наиболее сложных и важных современных научных проблем, затрагивающих как широкие аспекты клинической, так и фундаментальной медицины [1]. Во всем мире диабетические язвы представляют собой самое частое хирургическое осложнение сахарного диабета (СД) и обусловливают высокие социально-экономические потери, связанные со снижением качества и продолжительности жизни пациентов, высокой инвалидностью, существенными финансовыми затратами на проведение лечебно-диагностических и реабилитационных мероприятий. Эпидемиологические исследования показывают, что около 25% случаев формирования диабетических язв связаны с сокращением продолжительности жизни, тогда как 24% всех затрат, ассоциированных с сахарным диабетом приходятся на борьбу с осложнениями в виде диабетических язв [2-4].

Нарушение целостности мягких тканей при сахарном диабете могут возникать вследствие неблагоприятного течения основного заболевания как результат травматического повреждения или хирургических манипуляций. Также большое значение для формирования и прогрессии кожного процесса играет тип метаболического нарушения [5].

Замедление и затруднение репарации диабетической раны строго ассоциированы с молекулярными, клеточными и тканевыми изменениями на различных этапах процесса заживления. Они включают особенности регуляции и течения воспалительной фазы, течение процесса формирования сосудистого ложа вновь образующихся тканей, клеточную пролиферацию, дифференцировку и рост [6-8].

При этом молекулярная сигнализация и клеточная кооперация могут как ограничивать время завершения репарационного процесса, так и направление

тканевых событий (субституция или реституция), так и определять структуру, прочность и стабильность формирующегося рубца [7, 8].

Бактериальное загрязнение дефектов мягких тканей при сахарном диабете утяжеляет течение раневого процесса и требует проведения дополнительных интервенций [9].

Следовательно, современный лечебный подход к ведению повреждения мягких тканей на фоне диабетического процесса требует мультидисциплинарных решений, включающих, помимо хирургических манипуляций, и нехирургические воздействия [10]. Оптимальным представляется использование топических лекарственных форм фармакологически активных агентов, воздействующих на воспалительную, регенераторную фазы ранозаживления, а также процесс микробной контаминации.

Степень разработанности темы исследования

В недавних исследованиях зарубежных авторов было показано, что церий, металл из группы лантоноидов с переменной валентностью, обладает широким спектром фармакологической активности [11, 12]. В виде оксида и органических солей вещество продемонстрировало мощную противомикробную активность и способность стимулировать процессы регенерации на фоне ожоговых повреждений мягких тканей [13-15]. Кроме того, рядом авторов был продемонстрирован высокий потенциал церий-содержащих соединений по контролю за активностью свободнорадикальных реакций и нейротрансмиссии [16, 17].

К-ацетил-6-аминогексановая (е-аминокапроновая) кислота - известное вещество с фибринолитической активностью, у которого в последние годы установлены противомикробная, противовирусная и противовоспалительная активность [18, 19]. В исследовании, проведенном М.А. Мироновым и соавт. был установлен высокий ранозаживляющий потенциал серебряной и 3-гидроксипиридиновой солей К-ацетил-6-аминогексановой кислоты, в том числе и противомикробное действие [20-22].

Цель работы

Обосновать эффективность церий-содержащего соединения К-ацетил-6-аминогексановой кислоты в качестве потенциального лекарственного средства для стимуляции регенерации мягких тканей на фоне экспериментального сахарного диабета 1 и 2 типов.

Задачи исследования

1. Разработать метод органического синтеза и технологию получения жидкой лекарственной формы церий-содержащего соединения К-ацетил-6-аминогексановой кислоты (ЛХТ-8-17).

2. Изучить цитотоксичность различных концентраций церий-содержащего соединения К-ацетил-6-аминогексановой кислоты в культуре человеческих эпидермальных клеток.

3. Изучить терапевтический эффект церий-содержащего соединения N ацетил-6-аминогексановой кислоты на модели линейной кожной раны у лабораторных крыс со стрептозотоциновым сахарным диабетом.

4. Изучить особенности топического воздействия церий-содержащего соединения К-ацетил-6-аминогексановой кислоты на область плоской кожной раны у С57В16 мышей со стрептозотоциновым сахарным диабетом и мутантных мышей линии С57ВЬКБ/1 с сахарным диабетом 2 типа.

5. Определить ключевые механизмы действия церий-содержащего соединения К-ацетил-6-аминогексановой кислоты, участвующие в реализации эффекта ЛХТ-8-17 по стимуляции регенерации кожной раны у животных с сахарным диабетом 1 и 2 типа.

6. Изучить противомикробное действие церий-содержащего соединения N ацетил-6-аминогексановой кислоты при топическом применении на область инфицированной плоской кожной раны у мутантных мышей линии С57ВЬКБ/1 с сахарным диабетом 2 типа.

Научная новизна

Впервые проведено комплексное экспериментальное изучение топического действия церий-содержащего соединения N-ацетил-б-аминогексановой кислоты (лабораторный шифр соединения ЛХТ-8-17) в условиях нарушения целостности мягких тканей грызунов с сахарным диабетом 1 и 2 типа. Приоритетными являются данные о способе синтеза вещества, а также технологии создания его жидкой лекарственной формы на основе растворения наночастиц N-ацетил-б-аминогексаноата церия в гликолях различной концентрации.

Показано, что культивирование человеческих эпидермальных клеток в среде с добавлением церий-содержащего соединения N-ацетил-б-аминогексановой кислоты в диапазоне концентраций от 0 до 30 мкг/мл не сопровождается проявлением цитотоксичности. Соединение ЛХТ-8-17 при этом проявляет низкую клеточную токсичность: интегральные показатели цитотоксичности (CL3o, CL50 и CL70) составляют соответственно 47, 63 и 88 мкг/мл среды культивирования.

Впервые показано, что топическое применение церий-содержащего соединения N-ацетил-б-аминогексановой кислоты в суточной дозе 8 мг на область линейного кожного дефекта лабораторных крыс со стрептозотоциновым сахарным диабетом в течение 14 суток в 1,4 раза при сравнении с контролем ускоряет заживление раны, улучшает механические и косметические характеристики формирующегося рубца в виде повышения его прочности на фоне сокращения размеров.

Установлено, что на экспериментальной модели плоской раны у С57В1б с сахарным диабетом 1 типа и у мутантных мышей db/db линии C57BLKS/J с сахарным диабетом 2 типа местное применение ЛХТ-8-17 в суточной дозе 8 мг в течение 21 суток повышает скорость заживления кожного дефекта, снижает площадь рубцовой ткани за счет предотвращения воспалительной трансформации процесса ранозаживления, ранней активации формирования грануляционной ткани и стимуляции регенерации. По своей активности церий-содержащее соединение N-ацетил-б-аминогексановой кислоты превосходит препарат

сравнения Э-пантенол, а наибольшая эффективность регистрировалась у животных с сахарным диабетом 1 типа.

При изучении механизма фармакологического действия впервые установлено, что в основе эффекта ЛХТ-8-17 по стимуляции регенерации дефекта мягких тканей животных с нарушением углеводного обмена лежит комплекс факторов, включающий оптимизацию концентрации про- и противовоспалительных цитокинов, свободнорадикальных процессов, активацию образования микрососудов в регенерирующих тканях кожной раны, индукцию пролиферации про-кератиноцитов и фибробластов вследствие локального повышения экспрессии гена рецептора фактора роста фибробластов 3 типа

Новые данные были получены при изучении противомикробного действия соединения ЛХТ-8-17 при местном применении. Было установлено, что церий-содержащее соединение К-ацетил-6-аминогексановой кислоты обладает собственным противомикробным эффектом в отношении штамма АСТТ 43300 метициллин-резистентного золотистого стафилококка на модели инфицированной плоской раны у мутантных мышей линии С57ВЬКБ/1 с врожденной

инсулинорезистентностью, ожирением и сахарным диабетом.

Научно-практическая значимость работы

Полученные данные о способе органического синтеза церий-содержащего соединения К-ацетил-6-аминогексановой кислоты, а также создание технологии получения жидкой лекарственной формы соединения ЛХТ-8-17 могут быть использованы для дальнейшего проведения работ по получению фармацевтической субстанции, готовой лекарственной формы потенциального лекарственного средства, создания нормативной и технической документации на лекарственную форму.

Комплекс полученных экспериментальных данных об особенностях реализации фармакологического эффекта церий-содержащего соединения N ацетил-6-аминогексановой кислоты в виде жидкой лекарственной формы (спрей),

в том числе данные о его клеточной токсичности, механизмах действия при топическом воздействии на кожный дефект у животных с сахарным диабетом 1 и 2 типов может расширить современные представления о свойствах соединений церия и N-ацетил-б-аминогексановой кислоты и может быть применен для углубления доклинических исследований вещества с целью создания эффективного ранозаживляющего лекарственного средства на его основе.

Методология и методы исследования

При получении субстанции и жидкой лекарственной формы церий-содержащего соединения N-ацетил-б-аминогексановой кислоты использовали методы органической и фармацевтической химии. В связи с тем, что в качестве единственного пути введения соединения ЛХТ-8-17 использован местный (топическое нанесение на область раны) при решении вопроса о выборе метода изучения токсичности действующего вещества остановились на методе in vitro, позволяющем исследовать цитотоксичность в культуре клеток мишеней -человеческих эпидермальных клеток.

Для воспроизведения сахарного диабета 1 типа воспользовались известным методом с применением стрептозотоцина, селективно подавляющего бета-клетки островковой части поджелудочной железы. В качестве биологической in vivo платформы сахарного диабета 2 типа использовали мутантных мышей db/db линии C57BLKS/J с врожденной инсулинорезистентностью, ожирением и сахарным диабетом.

Линейный дефект кожи моделировали у лабораторных белых крыс обоего пола со стрептозотоциновым сахарным диабетом. Плоская рана воспроизводилась хирургическим путем у мышей С57В1б с сахарным диабетом 1 типа и мышей db/db линии C57BLKS/J с сахарным диабетом 2 типа. Оценивали динамику ранозаживления, размеры и прочность формирующегося рубца, микроморфологию тканей регенерирующего раневого дефекта на различных этапах процесса ранозаживления. Окрашивание тканей проводили гематоксилином и эозином, для оценки образования коллагеновых волокон

использовали цитохимический метод Ван-Гизона. Тканевую концентрацию цитокинов определяли методом количественного ИФА типа «сэндвич». Активность свободнорадикальных реакций в грануляционной ткани оценивали методом индуцированной хемилюминесценции. Интенсивность неоангиогенеза определяли методом иммуногистохимии с анти-СЭЗб антителами. Локальную экспрессию и мутации горячих точек 7 экзона гена рецептора фактора роста фибробластов 3 типа (ЕОЕЯЗ) оценивали секвенированием по Сэнгеру с последующим проведением полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Противомикробную активность ЛХТ-8-17 изучали по регистрации роста колоний в среде культивирования метициллин-резистентного золотистого стафилококка, после посева на них гомогенатов инфицированных ран, на фоне местного лечения.

Связь диссертации с основными научными темами

Настоящее диссертационное исследование в рамках программы «Изучение фундаментальных аспектов тканевой регенерации в условиях метаболических нарушений» ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский университет).

Основные научные положения диссертационной работы внедрены в учебную работу кафедры фармакологии и клинической фармакологии с курсом фармацевтической технологии Медицинского института ФГБОУ ВО «МГУ им. Н.П. Огарёва», кафедры фармацевтической технологии и фармакологии Института профессионального образования ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский университет). Результаты исследования используются в работе научного семинара кафедры оперативной хирургии и топографической анатомии Института клинической медицины им. Н.В. Склифосовского, кафедры пропедевтики внутренних болезней и клинической фармакологии ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России Института профессионального образования (Сеченовский

университет), отдела химии, технологии и аналитического контроля АО «Всесоюзный научный центр по безопасности биологически активных веществ».

Основные положения, выносимые на защиту

1. Полученное путем органического синтеза церий-содержащее соединение N-ацетил-б-аминогексановой кислоты (с лабораторным шифром ЛХТ-8-17), использованное в жидкой лекарственной форме, разработанной на основе растворения наночастиц церия N-ацетил-б-аминогексаноата в гликолях различной концентрации, обладает низкой цитотоксичностью в отношении человеческих эпидермальных клеток in vitro.

2. Топическое применение церий-содержащего соединения N-ацетил-б-аминогексановой кислоты в виде спрея в суточной дозе 8 мг на область линейной и плоской раны у грызунов с сахарным диабетом 1 и 2 типов приводит к активации регенерации дефекта кожи, повышению механических и косметических свойств формирующегося рубца, сопровождается локальным противомикробным действием.

3. Механизм ранозаживляющего действия церий-содержащего соединения N-ацетил-б-аминогексановой кислоты в виде спрея комплексный и обусловлен подавлением воспалительной реакции и свободнорадикальной липопероксидации в первые сутки раневого процесса, повышением антиоксидантных свойств формирующейся грануляционной ткани, индукцией полноценной эпителизации и васкуляризации диабетической раны, оптимизации межклеточной кооперации за счет активации FGF^J-опосредованного сигнального пути.

Степень достоверности

Достоверность выводов и положений настоящего диссертационного исследования определяется грамотно спланированным и построенным дизайном исследования; математически обоснованным объемом лабораторных животных, включенных в сформированные группы (контроля, препарата сравнения, исследуемого вещества); соблюдением принципов и норм гуманного обращения с

лабораторными животными, а также требований национального регулятора к условиям их содержания, кормления и проведения манипуляций, в том числе причиняющих боль; использованием в экспериментальной части работы лабораторных животных, приобретенных в сертифицированных питомниках и прошедших ветеринарный контроль; использованием субстанций и лекарственных форм веществ, прошедших процедуру аналитического контроля и сертификации производителя; применением в работе международно-признанных методов исследования, исправного и поверенного научного оборудования; современных методов ведения баз данных, сбора, анализа и статистической обработки научной информации.

Апробация диссертационной работы

Апробация диссертационной работы проведена на межучрежденческом расширенном совместном заседании кафедр фармакологии и клинической фармакологии с курсом фармацевтической технологии, госпитальной терапии, педиатрии и факультетской хирургии с курсами топографической анатомии и оперативной хирургии, урологии и детской хирургии ФГБОУ ВО «МГУ им. Н.П. Огарёва» и кафедр фармацевтической технологии и фармакологии Института профессионального образования; оперативной хирургии и топографической анатомии Института клинической медицины им. Н.В. Склифосовского ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), протокол №1 от 06.09.2021 г.

Результаты представленного исследования докладывались и обсуждались на XXVII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2020), конференции «Исследования молодых ученых в решении актуальных проблем медицинской науки и практики» (Самара, 2018), Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва, 2019), научной конференции Мордовского госуниверситета «Огарёвские чтения» (Саранск, 2021).

Личный вклад автора

Диссертанту принадлежит авторство научной идеи настоящей работы. Автор принимал включенное участие в разработку методов синтеза церий-содержащего соединения N-ацетил-б-аминогексановой кислоты и получения его жидкой лекарственной формы. Диссертант лично провел все опыты in vitro по изучению клеточной токсичности вещества ЛХТ-8-17. Диссертант выполнил все модельные эксперименты на лабораторных крысах и мышах, воспроизводил раневую патологию, осуществлял ее лечение, получал биологические образцы тканей. Диссертант непосредственно участвовал в проведении гистологических, цитохимических и иммуногистохимических исследований. При включенном исследовании автора выполнены ИФА, фотометрирование проб, секвенирование 7 экзона гена FGFR3, ПЦР в режиме реального времени. При непосредственном участии автора проведены исследования противомикробной активности ЛХТ-8-17. Диссертант лично провел обработку полученных экспериментальных данных. Диссертант участвовал в подготовке публикаций, лично написал рукопись диссертации.

Публикации по теме диссертационной работы

По теме диссертационного исследования опубликовано 10 научных работ, из них 3 полнотекстовых статьи изданы в научных рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК при Министерстве науки и высшего образования Российской Федерации, в том числе 2 статьи опубликованы в журналах, индексируемых международными системами цитирования Web of Science и Scopus, получен 1 патент на изобретение РФ.

Объём и структура работы

Диссертация написана по традиционному плану, включает следующие разделы: введение, главу 1 - литературный обзор, главу 2 с описанием материалов и методов исследования, 3 главы с изложением собственных результатов, главу 6 - заключение, выводы, практические рекомендации, список сокращений и

обозначений и список литературы.

Диссертация изложена на 124 станицах компьютерного текста, иллюстрирована двадцатью рисунками и шестью таблицами. Библиографический список содержит выходные данные 241 работы, из которых 3 работы отечественных и 238 зарубежных авторов.

ГЛАВА 1. МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ОСНОВЫ РЕГУЛЯЦИИ РЕГЕНЕРАЦИИ ДИАБЕТИЧЕСКИХ РАН: ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ МИШЕНИ ДЛЯ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

Тысячелетия эволюционного процесса сделали человеческую кожу высоко адаптивным и многофункциональным органом, который защищает индивида от ежедневных агрессивных воздействий химических, физических и биологических факторов. Зачастую неблагоприятное окружающее воздействие проявляется в повреждении кожи, что обусловливает наличие довольно сложного механизма репарации - восстановления структурной и функциональной целостности, -позволяющего осуществлять быстрое и эффективное заживление. Однако, несмотря на высокий репарационный потенциал, заложенный в органе, различные клеточные аспекты повреждения и индивидуальной реакции на него могут замедлять и даже компрометировать закрытие кожного дефекта. Это замедление -как правило результат системных патологических изменений, зачастую ассоциированных либо с возрастными изменениями регенерации, либо с прогрессированием диабетического процесса. В самом деле, возраст и сахарный диабет (СД) являются ведущими факторами риска развития хронической раны (заживающей более 12 недель). К сожалению, эти хронические раны (раны вследствие болезней вен, сдавления, диабетическая стопа) представляют собой большое поле нерешенных клинических вопросов, транслируемых на все современное человечество [23].

1.1 Клеточные аспекты регенерации мягких тканей

Одной из многочисленных функций кожи является взаимодействие с внешней средой и обеспечение широкого спектра гомеостатических функций - от регуляции термостабильности до восприятия внешних стимулов. Важно понимать, что кожа - это первый и один из главнейших защитных барьеров, предотвращающих высушивание, механическое, химическое, термическое и

лучевое повреждение внутренних структур и органов человеческого организма [24]. Эта защита простирается, в том числе, и на довольно сложный иммунный механизм, позволяющий противостоять патогенным микроорганизмам и, напротив, поддерживать симбиотическое существование с микробами -комменсалами посредством тонко настроенного механизма поддержание микробиоты [25]. Кожа также обладает эффективным и быстрым механизмом восстановления своей целостности, известным как ранозаживление. Ранозаживление, согласно классической традиции стадируется на 4 главные фазы: гемостаз, воспаление, пролиферация и ремоделирование кожи [26] вследствие архитектурного и физиологического восстановления поврежденных структур мягких тканей (рисунок 1).

Рисунок 1 - Схематическое изображение основных фаз ранозаживления по Wilkinson и Hardman (2020) [10] в ред. автора. Пояснение в тексте

18

1.1.1 Гемостаз

Сразу же после нарушения целостности кожи поврежденные кровеносные сосуды сокращаются, формируется фибриновый сгусток, предотвращающий обескровливание [27]. Тромбоциты, являющиеся важнейшими участниками гемостаза, активируются после их контакта с субэндотелиальным матриксом. Активация происходит посредством тромбоцитарных рецепторов (гликопротеин VI) и белков матрикса (фибронектин, коллаген, фактор фон Виллебранда), ее следствием является адгезия тромбоцитов к сосудистой стенке. Также активирует тромбоциты тромбин, который индуцирует конформационную перестройку и высвобождение альфа и плотных гранул, содержащих биоактивные молекулы, стимулирующие гемокоагуляцию [28]. Нерастворимый фибриновый сгусток, содержащий в своем составе фибронектин, витронектин и формы тромбоспондина [29] первично выполняет функции тампонады раны и остановки кровотечения. Сгусток также выполняет ряд немаловажных функций, среди которых стоит выделить экранирование раны от патогенных микроорганизмов, создание каркаса для мигрирующих иммунных клеток, формирование пула цитокинов и факторов роста, определяющих поведение клеток на ранних этапах ранозаживления [30].

Тромбоциты также играют ключевую роль в привлечении иммунных клеток в место повреждения мягких тканей как посредством прямого захвата клеток в сгусток, так и путем выделения секретома, содержащего хемокины-аттрактанты [28]. Также установлено, что секретом тромбоцитов содержит факторы роста, стимулирующие кожные клетки-резиденты, такие как фибробласты и кератиноциты [31]. Будучи наиболее многочисленными клеточными структурами на ранних этапах ранозаживления, тромбоциты вносят существенный вклад в подавление бактериальной инфекции: они экспрессируют несколько toll-like рецепторов [32, 33], которые регулируют продукцию противомикробных пептидов [34]. Сразу же после формирования тромба, процесс гемокоагуляции переключается с целью предотвращения избыточного тромбообразования. В рамках этого изменения регуляции агрегация тромбоцитов ингибируется

простациклином, тромбин блокируется антитромбином III, происходит деградация факторов свертывания V и VII активированным протеином С [35]. В это же время поврежденная сосудистая стенка восстанавливается путем пролиферации гладкомышечных и эндотелиальных клеток, активированных тромбоцитарным фактором роста (platelet-derived growth factor - PDGF) [36]. Для ускорения процесса восстановления целостности сосудистой стенки в очаг повреждения рекрутируются эндотелиальные клетки-предшественники, поскольку зрелые эндотелиоциты обладают ограниченной пролиферативной способностью [37].

1.1.2 Регуляция воспалительной реакции в процессе восстановления

целостности мягких тканей

Первичная воспалительная реакция развивается как защитный ответ на патогенную раневую инвазию. Этот вариант иммунного ответа запускается сигналами повреждения. Совокупность таких сигналов формирует так называемый ассоциированный с повреждением молекулярный паттерн, состоящий из молекул, образующихся при некрозе клеток и нарушении целостности тканей, а также патоген-ассоциированный молекулярный паттерн, связанный с бактериальным компонентом повреждения. В совокупности оба молекулярных паттерна активируют резидентные иммунные клетки - тучные клетки, клетки Лангерганса, Т-лимфоциты и макрофаги, - путем взаимодействия и связывания с рецепторами распознавания, что индуцирует воспалительную реакцию [38].

Последующее выделение провоспалительных цитокинов и хемокинов привлекает в очаг воспаления циркулирующие лейкоциты [39]. Провоспалительные молекулы также стимулируют вазодилатацию, что, наряду с экспрессией эндотелиальных молекул адгезии, таких как селектины, стимулирует адгезию и диапедез нейтрофилов и моноцитов через сосудистую стенку [40]. Важная роль селектинов и привлечении иммунных клеток была доказана в фармакологических и фармакогенетических исследованиях с применением

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Пахомов Дмитрий Владимирович, 2022 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. New horizons in the understanding of the causes and management of diabetic foot disease: report from the 2017 Diabetes UK Annual Professional Conference Symposium / M. Clokie, A.L. Greenway, K. Harding [et al.] // Diabet Med. - 2017. - Vol. 34. - P. 305-315.

2. Cost-of-illness studies in chronic ulcers: a systematic review / B. Chan, S. Cadarette, W. Wodchis [et al.] // J Wound Care. - 2017. - Vol. 26. - P. 4-14.

3. The humanistic and economic burden of chronic wounds: a systematic review / M. Olsson, K. Jarbrink, U. Divakar [et al.] // Wound Repair Regen. - 2019. -Vol. 27. - P. 114-125.

4. Diabetic foot complications and their risk factors from a large retrospective cohort study / K. Al-Rubeaan, M. Al Derwish, S. Ouizi [et al.] // PLoS ONE. - 2015. -Vol. 10. - P. e0124446.

5. Animal models in diabetes mellitus: an overview / M. Maqbool, M.A. Dar, I. Gani [et al.] // J Drug Delivery Therapeutics. - 2019. - Vol. 9. - P. 472-475.

6. Wilkinson, H.N. Wound healing: cellular mechanisms and pathological outcomes / H.N. Wilkinson, M.J. Hardman // Open Biol. - 2020. - Vol. 10. - P. 200223.

7. Velnar, T. The wound healing process: an overview of the cellular and molecular mechanisms / T. Velnar, T. Bailey, V. Smrkolj // J Int Med Red. - 2005. -Vol. 37. - P. 1528-1542.

8. Takeo, M. Wound healing and skin regeneration / M. Takeo, W. Lee, M. Ito // Cold Spring Harb Perspect Med. - 2015. - Vol. 5. - P. a023267.

9. Epidemiology of methicillin-resistant staphylococcus aureus diabetic foot infections in a large academic hospital: implications for antimicrobial stewardship / K. Reveles, B. Duhon, R. Moore [et al.] // PLOS ONE. - 2016. - Vol. 11 (8). P. e0161658.

10. Wilkinson, H.N. Wound healing: cellular mechanisms and pathological outcomes / H.N. Wilkinson, M.J. Hardman // Open Biol. - 2020. - Vol. 10. - P. 200223.

11. Jakupec, M.A. Pharmacological properties of cerium compounds / M.A. Jakupec, P. Unfried, B.K. Keppler // Rev Physiol Biochem Pharmacol. - 2005. - Vol. 153. - P. 101-111.

12. Pharmacological potential of cerium oxide nanoparticles / I. Celardo, J.Z. Pedersen, E. Traversa [et al.] // Nanoscale. - 2011. - Vol. 3. - P. 1411-1420.

13. Gagnon, J. Toxicity and protective effects of cerium oxide nanoparticles (Nanoceria) depending on their preparation method, particle size, cell type, and exposure route / J. Gagnon, K.M. Fromm // Eur J Inorg Chem. - 2015. - Vol. 27. - P. 4510-4517.

14. Charbgoo, F. Cerium oxide nanoparticles: green synthesis and biological applications / F. Charbgoo, M.B. Ahmad, M. Darroudi // Int J Nanomedicine. - 2017. -Vol. 12. - P. 1401-1413.

15. Kargar, H. Size-controlled and bio-directed synthesis of ceria nanopowders and their in vitro cytotoxicity effects / H. Kargar, H. Ghazavi, M. Darroudi // Ceramics Int. - 2015. - Vol. 41. - P. 4123-4128.

16. Dowding, J.M. Cerium oxide nanoparticles accelerate the decay of peroxynitrite (ONOO-) / J.M. Dowding, S. Seal, W.T. Self // Drug Deliv Transl Res. -2013. - Vol. 3. - P. 375-379.

17. Cerium oxide nanoparticles promote neurogenesis and abrogate hypoxia-induced memory impairment through AMPK-PKC-CBP signaling cascade / K. Bhargava, A. Arya, A. Gangwar, [et al.] // Int J Nanomedicine. - 2016. - Vol. 11. - P. 1159-1173.

18. Skvaril, F. Inhibition of spontaneous splitting of y-globulin preparations with e-aminocaproic acid / F. Skvaril, D. Grunberger // Nature. - 1962. - Vol. 196. -P. 481-482.

19. Serkedjieva, J. Synergistic inhibition of influenza A virus replication by a plant polyphenol-rich extract and epsilon-aminocaproic acid in vitro and in vivo / J. Serkedjieva, E. Nikolova, N. Kirilov // Acta Virol. - 2010. - Vol. 54. - P. 137-145.

20. Миронов, М.А. Токсикологическая характеристика оригинальных производных №ацетил-6-аминогексановой кислоты / М.А. Миронов, Е.В. Блинова

// Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. Медицинские науки. - 2018. - № 3 (37). - С. 26-34.

21. Морфофункциональные аспекты репарации плоских инфицированных ран на фоне применения некоторых производных N-ацетил-б-аминогексановой кислоты / М.А. Миронов, А.Н. Митрошин, А.Н. Максимкин [и др.] // Вестник «Биомедицина и социология» - 2018. - Т. 3, № 4. - С. 100-102.

22. Перспективный подход к оптимизации заживления инфицированных послеоперационных ран / М.А. Миронов, Е.В. Блинова, И.С. Степаненко [и др.] // Оперативная хирургия и клиническая анатомия (Пироговский журнал). - 2018. -№4. - С. 9-12.

23. The humanistic and economic burden of chronic wounds: a systematic review / M. Olsson, K. Jarbrink, U. Divakar [et al.] // Wound Repair Regen. - 2019. -Vol.27. - P. 114-125.

24. Takeo, M. healing and skin regeneration / M. Takeo, W. Lee, M. Ito // Cold Spring Harb. Perspect. Med. - 2015. - Vol. 5. - P. a023267.

25. Naik, S. Commensal-dendritic-cell interaction specifies a unique protective skin immune signature / S. Naik // Nature. - 2015. - Vol. 520. - P. 104-108.

26. Broughton, G.I. Wound healing: an overview / G.I. Broughton, J.E. Janis, C.E. Attinger // Plast. Reconstruct. Surg. - 2006. - Vol. 117. - P. 1e-S-32e-S.

27. Velnar, T. The wound healing process: an overview of the cellular and molecular mechanisms / T. Velnar, T. Bailey, V. Smrkolj // J. Int. Med. Red. - 2009. -Vol. 37. - P. 1528-1542.

28. Golebiewska, E.M. Platelet secretion: from haemostasis to wound healing and beyond / E.M. Golebiewska, A.W. Poole // Blood Rev. - 2015. - Vol. 29. - P. 153162.

29. Zaidi, A. Physiology of haemostasis / A. Zaidi, L. Green // Anaesth. Intensive Care Med. - 2019. - Vol. 20. - P. 152-158.

30. Macrophages in skin injury and repair / B.M. Delavary, W.M. van der Veer, M. van Egmond [et al.] // Immunobiology. - 2015. - Vol. 216. - P. 753-762.

31. Scully, D. Optimising platelet secretomes to deliver robust tissue-specific regeneration / D. Scully // J. Tissue Eng. Regen. Med. - 2020. - Vol. 14. - P. 82-98.

32. Evidence of Toll-like receptor molecules on human platelets / F. Cognasse, H. Hamzeh, P. Chavarin [et al.] // Immunol. Cell Biol. - 2005. - Vol. 83. - P. 196-198.

33. Shiraki, R. Expression of Toll-like receptors on human platelets / R. Shiraki // Thromb. Res. - 2004. - Vol. 113. - P. 379-385.

34. Tang, Y.Q. Antimicrobial peptides from human platelets / Y.Q. Tang, M.R. Yeaman, M.E. Selsted // Infect. Immun. - 2002. - Vol. 70. - P. 6524-6533.

35. Mann, K.G. Factor Vll-activating protease: coagulation, fibrinolysis, and atherothrombosis / K.G. Mann // Circulation. - 2003. - Vol. 107. - P. 654-655.

36. ERK1/2 mediates PDGF-BB stimulated vascular smooth muscle cell proliferation and migration on laminin-5 / K. Kingsley, J. Huff, W. Rust [et al.] // Biochem. Biophys. Res. Commun - 2002. - Vol. 293. - P. 1000-1006.

37. Stem cell recruitment after injury: lessons for regenerative medicine / R.C. Rennert, M. Sorkin, R.K. Garg [et al.]// Regen. Med. - 2012. - Vol. 7. - P. 833-850.

38. Chen, L. Toll-like receptor function in acute wounds / L. Chen, L.A. DiPietro // Adv. Wound Care. - 2017. - Vol. 6. - P. 344-355.

39. Martin, P. Inflammatory cells during wound repair: the good, the bad and the ugly / P. Martin, S.J. Leibovich // Trends Cell Biol. - 2005. - Vol. 15. - P. 599-607.

40. Vestweber, D. How leukocytes cross the vascular endothelium / D. Vestweber // Nat. Rev. Immunol. - 2015. - Vol. 15. - P. 692-704.

41. Role of endothelial selectins in wound repair / M. Subramaniam, S. Saffaripour, L. Van De Wate [et al.] // Am. J. Pathol. - 1997. - Vol. 150. - P. 17011709.

42. Endothelial selectins regulate skin wound healing in cooperation with L-selectin and ICAM-1 / T. Yukami et al. // J. Leukoc. Biol. - 2007. - Vol. 82. - P. 519531.

43. Kolaczkowska, E. Neutrophil recruitment and function in health and inflammation / E. Kolaczkowska, P. Kubes // Nat. Rev. Immunol. - 2013. - Vol.13. -P. 159-175.

44. Segel, G.B. The paradox of the neutrophil's role in tissue injury / G.B. Segel, M.W. Halterman, M.A. Lichtman // J. Leukoc. Biol. - 2011. - Vol. 89. - P. 359-372.

45. Neutrophil extracellular traps kill bacteria / V. Brinkmann, U. Reichard, C. Goosmann [et al.] // Science. - 2004. - Vol. 303. - P. 1532-1535.

46. Macrophage-mediated inflammation in normal and diabetic wound healing / A.E. Boniakowski, A.S. Kimball, B.N. Jacobs [et al.] // J. Immunol. - 2017. - Vol. 199. - P. 17-24.

47. Impaired wound healing with defective expression of chemokines and recruitment of myeloid cells in TLR3-deficient mice / Q. Lin , D. Fang , J. Fang [et al.] // J. Immunol. - 2011. - Vol. 186. - P. 3710-3717.

48. Dynamics of neutrophil infiltration during cutaneous wound healing and infection using fluorescence imaging / M.H. Kim, W. Liu, D.L. Borjesson [et al.] // J. Invest. Dermatol. - 2017. - Vol. 128. - P. 1812-1820.

49. Yoo, S.K. Spatiotemporal photolabeling of neutrophil trafficking during inflammation in live zebrafish / S.K. Yoo, J.Huttenlocher // Leukoc. Biol. - 2011. -Vol. 89. - P. 661-667.

50. Visualizing the function and fate of neutrophils in sterile injury and repair / J. Wang, M. Hossain, A. Thanabalasuriar [et al.] // Science. - 2017. - Vol. 358. - P. 111-116.

51. Buckley, C.D. Identification of a phenotypically and functionally distinct population of long-lived neutrophils in a model of reverse endothelial migration / C.D. Buckley // J. Leukoc. Biol. - 2006. - Vol. 79. - P. 303-311.

52. In vivo imaging reveals a pioneer wave of monocyte recruitment into mouse skin wounds / M.P. Rodero, F. Licata, L. Poupel [et al.] // PLoS ONE. - 2014. -Vol. 9. - P. e115508.

53. Monocyte and macrophage plasticity in tissue repair and regeneration / A. Das, M. Sinha, S. Datta [et al.] // Am. J. Pathol. - 2015. - Vol. 185. - P. 2596-2606.

54. Baum, C.L. Normal cutaneous wound healing: clinical correlation with cellular and molecular events / C.L. Baum, C.J. Arpey // Dermatol. Surg. - 2005. -Vol. 31. - P. 674-686.

55. Mantovani, A. Macrophage polarization comes of age / A. Mantovani, A. Sica, M. Locati // Immunity. - 2005. - Vol. 23. - P. 344-346.

56. Transcriptome-based network analysis reveals a spectrum model of human macrophage activation / J. Xue et al. // Immunity. - 2014. - Vol. 40. - P. 274-288.

57. Tissue- resident macrophage enhancer landscapes are shaped by the local microenvironment / Lavin Y., Winter D., Blecher-Gonen R. [et al.] // Cell. - 2014. -Vol. 159. - P. 1312-1326.

58. New insights into the multidimensional concept of macrophage ontogeny, activation and function / F. Ginhoux, J.L. Schultze, P.J. Murray, [et al.] // Nat. Immunol. - 2016. - Vol. 17. - P. 34-40.

59. Mosser, D.M. Exploring the full spectrum of macrophage activation / D.M. Mosser, J.P. Edwards. // Nat. Rev. Immunol. - 2008. - Vol. 8. - P. 958-969.

60. Macrophages: a review of their role in wound healing and their therapeutic use / R.J. Snyder, J. Lantis, R.S. Kirsner [et al.] // Wound Repair Regen. - 2016. - Vol. 24. - P. 613-629.

61. Macrophage plasticity in experimental atherosclerosis / J. Khallou-Laschet et al. // PLoS ONE. - 2010. - Vol. 5. - P. e8852.

62. Engulfment of apoptotic cells by macrophages: a role of microRNA-21 in the resolution of wound inflammation / A. Das, K. Ganesh, S. Khanna [et al.] // J. Immunol. - 2016. - Vol. 192. - P. 1120-1129.

63. Nelson, S.M. Selenium levels affect the IL-4-induced expression of alternative activation markers in murine macrophages / S.M. Nelson, X. Lei, K.S. Prabhu // J. Nutr. - 2011. - Vol. 141. - P. 1754-1761.

64. Receptor- interacting protein 140 orchestrates the dynamics of macrophage M1/M2 polarization / Y.-W. Lin, Lee, B. P.-S. Liu [et al.] // J. Innate Immun. - 2016. -Vol. 8 - P. 97-107.

65. Growth factors and cytokines in wound healing / S. Barrientos, O. Stojadinovic, M.S. Golinko [et al.] // Wound Repair Regen. - 2008. - Vol. 16. - P. 585-601.

66. Eming, S.A. Inflammation in wound repair: molecular and cellular mechanisms / S.A. Eming, T. Krieg, J.M. Davidson // J. Invest. Dermatol. - 2007. -Vol. 127. - P. 514-525.

67. Local arginase 1 activity is required for cutaneous wound healing / L. Campbell, C.R. Saville, P.J. Murray [et al.] // J. Invest. Dermatol. - 2013. - Vol. 133. -P. 2461-2470.

68. Wound administration of M2-polarized macrophages does not improve murine cutaneous healing responses / N. Jetten, N. Roumans, M.J. Gijbels [et al.] // PLoS ONE. - 2013. - Vol. 9. - P. e102994.

69. Live imaging of wound angiogenesis reveals macrophage orchestrated vessel sprouting and regression / D.B. Gurevich, C.E. Severn, C. Twomey [et al.] // EMBO J. - 2018. - Vol. 37. - P. e97786.

70. Mirza, R. Selective and specific macrophage ablation is detrimental to wound healing in mice / R. Mirza, L.A. DiPietro, T.J. Koh // Am. J. Pathol. - 2009. -Vol. 175. - P. 2454-2462.

71. Differential roles of macrophages in diverse phases of skin repair / T. Lucas, A. Waisman, R. Ranjan [et al.] // J. Immunol. - 2010. - Vol. 184. - P. 39643977.

72. Cutting edge: regulatory T cells facilitate cutaneous wound healing / A. Nosbaum [et al.] // J. Immunol. - 2016. - Vol. 196. - P. 2010-2014.

73. Dendritic epidermal T cells facilitate wound healing in diabetic mice / Z. Liu [et al.] // Am. J. Transl. Res. - 2016. - Vol. 8. - P. 2375-2384.

74. Keyes, B.E. Impaired epidermal to dendritic T cell signaling slows wound repair in aged skin / B.E. Keyes // Cell. - 2016. - Vol. 167. - P. 1323-1338.

75. Mast cells are required for normal healing of skin wounds in mice / K. Weller, K. Foitzik, R. Paus [et al.] // FASEB J. - 2006. - Vol. 20. - P. 2366-2368.

76. Shaw, T.J. Wound repair: a showcase for cell plasticity and migration / T.J. Shaw, P. Martin // Curr. Opin. Cell Biol. - 2010. - Vol. 42. - P. 29-37.

77. Li, J. Pathophysiology of acute wound healing / J. Li, J. Chen, R. Kirsner // Clin. Dermatol. - 2007. - Vol. 25. - P. 9-18.

78. Wager, L.J. MicroRNA regulation of epithelial-to-mesenchymal transition during re-epithelialisation: assessing an open wound / L.J. Wager, D.I. Leavesley // Wound Pract. Res. - 2015. - Vol. 23. - P. 132-142.

79. Direct evidence that PKCa positively regulates wound re-epithelialization: correlation with changes in desmosomal adhesiveness / H.A. Thomason, N.H. Cooper, D.M. Ansell [et al.] // J. Pathol. - 2012. - Vol. 227. - P. 346-356.

80. Ephrin-Bs drive junctional downregulation and actin stress fiber disassembly to enable wound re- epithelialization / R. Nunan, J. Campbell, R. Mori [et al.] // Cell Rep. - 2015. - Vol. 13. - P. 1380-1395.

81. Rousselle, P. Re- epithelialization of adult skin wounds: cellular mechanisms and therapeutic strategies / P. Rousselle, F. Braye, G. Dayan // Adv. Drug Deliv. Rev. - 2019. - Vol. 146. - P. 344-365.

82. Wnt-dependent de novo hair follicle regeneration in adult mouse skin after wounding / M. Ito, Z. Yang, T. Andl [et al.] // Nature. - 2007. - Vol. 447. - P. 316320.

83. Stem cells in the hair follicle bulge contribute to wound repair but not to homeostasis of the epidermis / M. Ito, Y. Liu, Z. Yang [et al.] / Nat. Med. - 2005. -Vol. 11. - P. 1351.

84. Hair follicle bulge stem cells appear dispensable for the acute phase of wound re- epithelialization / C.L. Garcin, D.M. Ansell, D.J. Headon [et al.] // Stem Cells. - 2016. - Vol. 34. - P. 1377-1385.

85. Driskell, I. Genetically induced cell death in bulge stem cells reveals their redundancy for hair and epidermal regeneration / I. Driskell, F. Oeztuerk-Winder, P. Humphreys // Stem Cells. - 2015. - Vol. 33. - P. 988-998.

86. Single-cell transcriptomics of traced epidermal and hair follicle stem cells reveals rapid adaptations during wound healing / S. Joost, T. Jacob, X. Sun [et al.] // Cell Rep. - 2018. - Vol. 25. - P. 585-597.

87. Santoro, M.M. Cellular and molecular facets of keratinocyte reepithelization during wound healing / M.M. Santoro, G. Gaudino // Exp. Cell Res. -2015. - Vol. 304. - P. 274-286.

88. Driskell, R.R. Distinct fibroblast lineages determine dermal architecture in skin development and repair / R.R. Driskell // Nature. - 2013. - Vol. 504. - P. 277281.

89. Sinha, M. Direct conversion of injury-site myeloid cells to fibroblast-like cells of granulation tissue / M. Sinha. // Nat. Commun. - 2018. - Vol. 9. № 936.

90. Xue, M. Extracellular matrix reorganization during wound healing and its impact on abnormal scarring / M. Xue, C.J. Jackson // Adv. Wound Care. - 2015. -Vol. 4. - P. 119-136.

91. Cyclooxygenase-2 increases hypoxia-inducible factor-1 and vascular endothelial growth factor to promote angiogenesis in gastric carcinoma / S.-P. Huang, M.-S. Wu, C.-T. Shun [et al.] // J. Biomed. Sci. - 2005. - Vol. 12. - P. 229-241.

92. Role of angiogenesis and angiogenic factors in acute and chronic wound healing / T.M. Honnegowda, P. Kumar, E. Udupa [et al.] // Plast. Aesthet. Res. - 2015.

- Vol. 2. - P. 243-249.

93. Activation of vascular endothelial growth factor receptor-1 sustains angiogenesis and Bcl-2 expression via the phosphatidylinositol 3-kinase pathway in endothelial cells / J. Cai, S. Ahmad, W.G. Jiang [et al.] // Diabetes. - 2003. - Vol. 52. -P. 2959-2968.

94. Kalebic, T. Basement membrane collagen: degradation by migrating endothelial cells / T. Kalebic, S. Garbisa, B. Glaser// Science . - 1983. - Vol. 221. - P. 281-283.

95. Du Cheyne, C. The complex TIE between macrophages and angiogenesis / C. Du Cheyne, H. Tay, W. De Spiegelaere // Anat. Histol. Embryol. - 2019. - Vol. 49.

- P. 585-596.

96. Willenborg, S. CCR2 recruits an inflammatory macrophage subpopulation critical for angiogenesis in tissue repair / S. Willenborg // Blood. - 2012. - Vol. 120. -P. 613-625.

97. Tissue macrophages act as cellular chaperones for vascular anastomosis downstream of VEGF-mediated endothelial tip cell induction / A. Fantin, J.M. Vieira, G. Gestri [et al.] // Blood. - 2010. - Vol. 116. - P. 829-840.

98. Macrophages engulf endothelial cell membrane particles preceding pupillary membrane capillary regression / R.A. Poché, C.-W. Hsu, M.L. McElwee [et al.] // Dev. Biol. - 2015. - Vol. 403. - P. 30-42.

99. Stefater III, J.A. Regulation of angiogenesis by a non-canonical Wnt-Flt1 pathway in myeloid cells / J.A. Stefater III // Nature. - 2011. - Vol. 474. - P. 511-515.

100. Theocharidis, G. Autonomic nerve dysfunction and impaired diabetic wound healing: The role of neuropeptides / G. Theocharidis, A. Veves // Autonomic Neurosci. - 2020. - Vol. 223. - P. 102610.

101. Jung, N. Substance P modulates properties of normal and diabetic dermal fibroblasts / N. Jung, J. Yu, J. Um, M.J. Dubon // Tissue Eng. Regen. Med. - 2016. -Vol. 13. - P. 155-161.

102. Substance P enhances EPC mobilization for accelerated wound healing / J. Um, N. Jung, S. Chin [et al.] // Wound Repair Regen. - 2016. - Vol. 24. - P. 402-410.

103. Leal, E.C. Substance P promotes wound healing in diabetes by modulating inflammation and macrophage phenotype / E.C. Leal // Am. J. Pathol. - 2015. - Vol. 185. - P. 1638-1648.

104. Um, J. Substance P accelerates wound healing in type 2 diabetic mice through endothelial progenitor cell mobilization and Yes-associated protein activation / J. Um, J. Yu , K.S. Park // Mol. Med. Rep. - 2017. - Vol. 15. - P. 30353040.

105. Substance P combined with epidermal stem cells promotes wound healing and nerve regeneration in diabetes mellitus / F.-B. Zhu, X.-J. Fang, D.-W. Liu [et al.] // Neural Regen. Res. - 2016. - Vol. 11. - P. 493-501.

106. Parfejevs, V. Injury-activated glial cells promote wound healing of the adult skin in mice / V. Parfejevs // Nat. Commun. - 2018. - Vol. 9. №236.

107. Darby, I.A. Fibroblasts and myofibroblasts in wound healing. Clin. Cosmet. Investig / I.A. Darby, B. Laverdet, F. Bonté, // Dermatol.- 2014. - Vol. 7. - P. 301-311.

108. Schultz, G.S. Interactions between extracellular matrix and growth factors in wound healing / G.S. Schultz, A. Wysocki // Wound Repair Regen. - 2009. - Vol. 17. - P. 153-162.

109. Witte, M.B. General principles of wound healing / M.B. Witte, A. Barbul // Surg. Clin. North Am. - 1997. - Vol. 77. - P. 509-528.

110. Diegelmann, R.F. Wound healing: an overview of acute, fibrotic and delayed healing / R.F. Diegelmann, M.C. Evans // Front. Biosci. - 2004. - Vol. 9. - P. 283-289.

111. Young, A. The physiology of wound healing / A. Young, C.-E. McNaught // Surgery. - 2011. - Vol. 29. - P. 475-479.

112. Elastin as a matrikine / L. Duca, N. Floquet, A.J. Alix [et al.] // Crit. Rev. Oncol. Hematol. - 2004. - Vol. 49. - P. 235-244.

113. Almine, J.F. Elastin signaling in wound repair / A.F. Almine, S.G. Wise, A.S. Weiss // Birth Defects Res. C Embryo Today. - 2012. - Vol. 96. - P. 248-257.

114. Fibrillin-1 and elastin are differentially expressed in hypertrophic scars and keloids / T.P. Amadeu, A.S. Braune, L.C. Porto [et al.] // Wound Repair Regen. - 2004. - Vol. 12. - P. 169-174.

115. Mechanical tension controls granulation tissue contractile activity and myofibroblast differentiation / B. Hinz, D. Mastrangelo, C.E. Iselin [et al.] // Am. J. Pathol. - Vol. 159. - P. 1009-1020.

116. Whole animal knockout of smooth muscle alpha-actin does not alter excisional wound healing or the fibroblast-to-myofibroblast transition / J.J. Tomasek, C.J. Haaksma, R.J. Schwartz [et al.] // Wound Repair Regen. - 2013. - Vol. 21. - P. 166-176.

117. Stadelmann, W.K. Physiology and healing dynamics of chronic cutaneous wounds / W.K. Stadelmann, A.G. Digenis, R.G. Tobin // Am. J. Surg. - 1998. - Vol. 176. - P. 26S-38S.

118. Larouche, J. Immune regulation of skin wound healing: mechanisms and novel therapeutic targets / J. Larouche, S. Sheoran, K. Maruyama // Adv. Wound Care.

- 2018. - Vol. 7. - P. 209-231.

119. Werner, S. Regulation of wound healing by growth factors and cytokines / S. Werner, R. Grose // Physiol. Rev. - 2003. - Vol. 83. - P. 835-870.

120. Epidermal development and wound healing in matrix metalloproteinase 13-deficient mice / B. Hartenstein, B.T. Dittrich, D. Stickens [et al.] // J. Invest. Dermatol.

- 2006. - Vol. 126. - P. 486-496.

121. Guo, L. Keratinocyte growth factor is required for hair development but not for wound healing / L. Guo, L. Degenstein, E. Fuchs // Genes Dev. - 1996. - Vol. 10. -P. 165-175.

122. TGFa deficiency results in hair follicle and eye abnormalities in targeted and waved-1 mice / N.C. Luetteke, T.H. Qiu, R.L. Peiffer [et al.] // Cell. - 1998. - Vol. 73. - P. 263-278.

123. Retroviral delivery of dominant-negative vascular endothelial growth factor receptor type 2 to murine wounds inhibits wound angiogenesis / R. Tsou, C. Fathke, F. Wilson [et al.] // Wound Repair Regen. - 2002. - Vol. 10. - P. 222-229.

124. Health economic burden that wounds impose on the National Health Service in the UK / J.F. Guest, N. Ayoub, T. McIlwraith [et al.] // BMJ Open. - 2015. -Vol. 5. - P. e009283.

125. Lindholm, C. Wound management for the 21st century: combining effectiveness and efficiency / C. Lindholm, R. Searle // Int. Wound J. - 2016. - Vol. 13. - P. 5-15.

126. Alav, A. Diabetic foot ulcers: Part I. Pathophysiology and prevention / A. Alavi // J. Am. Acad. Dermatol. - 2016. - Vol. 70. - P. 1-19.

127. A long-standing hyperglycaemic condition impairs skin barrier by accelerating skin ageing process / H.Y. Park, J.H. Kim, M. Jung [et al.] // Exp. Dermatol. - 2011. - Vol. 20. - P. 969-974.

128. Seyfarth, F. Dry skin, barrier function, and irritant contact dermatitis in the elderly / F. Seyfarth, S. Schliemann, D. Antonov // Clin. Dermatol. - 2011. - Vol. 29. -P. 31-36.

129. Impaired biomechanical properties of diabetic skin: implications in pathogenesis of diabetic wound complications / D.M. Bermudez, B.J. Herdrich, J. Xu [et al.] // Am. J. Pathol. - 2011. - Vol. 178. - P. 2215-2223.

130. Skin ageing: changes of physical properties of human skin in vivo / S. Diridollou, V. Vabre, M. Berson [et al.] // Int. J. Cosmet. Sci. - 2011. - Vol. 23. - P. 353-362.

131. Wilkinson, H.N. In press. Wound senescence: a functional link between diabetes and ageing / H.N. Wilkinson, M.J. Hardman // Exp. Dermatol. - 2020. -Vol. 30. - P. 68-73.

132. Childs, B.G. Cellular senescence in aging and age-related disease: from mechanisms to therapy / B.J. Childs, M. Durik, D.J. Baker // Nat. Med. - 2015. - Vol. 21. - P. 1424.

133. Nelson, G. The senescent bystander effect is caused by ROS-activated NF-kB signaling / G. Nelson, O. Kucheryavenko, J. Wordsworth // Mech. Ageing Dev. -2018. - Vol. 170. - P. 30-36.

134. Elevated local senescence in diabetic wound healing is linked to pathological repair via CXCR2 / H.N. Wilkinson, C. Clowes, K.L. Banyard, P. [et al.] // J. Invest. Dermatol. - 2019. - Vol. 139. - P. 1171-1181.

135. Galkowska, H. Expression of natural antimicrobial peptide P-defensin-2 and Langerhans cell accumulation in epidermis from human non-healing leg ulcers / H. Galkowska, W.L. Olszewski, U. Wojewodzka // Folia Histochem. Cytobiol. - 2005. -Vol. 43. - P. 133-136.

136. Increased number of Langerhans cells in the epidermis of diabetic foot ulcers correlates with healing outcome / O. Stojadinovic, N. Yin, J. Lehmann [et al.] // Immunologic research. - 2013. - Vol. 57. - P. 222-228.

137. Diegelmann, R.F. Excessive neutrophils characterize chronic pressure ulcers / R.F. Diegelmann // Wound Rep. Regen. - 2013. - Vol. 11. - P. 490-495.

138. Loots, M.A. Differences in cellular infiltrate and extracellular matrix of chronic diabetic and venous ulcers versus acute wounds / M.A. Loots, E.N. Lamme, J. Zeegelaar // J. Invest. Dermatol. - 1998. - Vol. 111. - P. 850-857.

139. Sindrilaru, A. An unrestrained proinflammatory M1 macrophage population induced by iron impairs wound healing in humans and mice / A. Sindrilaru // J. Clin. Invest. - 2013. - Vol. 121. - P. 985-997.

140. Tissue inhibitor of metalloproteinases-1 is decreased and activated gelatinases are increased in chronic wounds / E.C. Bullen, M.T. Longaker, D.L. Updike [et al.] // J. Invest. Dermatol. - 1995. - Vol. 104. - P. 236-240.

141. Analysis of the acute and chronic wound environments: the role of proteases and their inhibitors / N.J. Trengove, M.C. Stacey, S. Macauley [et al.] // Wound Repair Regen. - 1999. - Vol. 7. - P. 442-452.

142. Wysocki, A.B. Wound fluid from chronic leg ulcers contains elevated levels of metalloproteinases MMP-2 and MMP-9 / A.B. Wysocki, L. Staiano-Coico, F. Grinneill // J. Invest. Dermatol. - 1993. - Vol. 101. - P. 64-68.

143. Rayment, E.A. Increased matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) activity observed in chronic wound fluid is related to the clinical severity of the ulcer / E.A. Rayment, Z. Upton, G.K. Shooter // Brit. J. Dermatol. - 2008. - Vol. 158. - P. 951961.

144. Large and sustained induction of chemokines during impaired wound healing in the genetically diabetic mouse: prolonged persistence of neutrophils and macrophages during the late phase of repair / C. Wetzler, H. Kämpfer, B. Stallmeyer [et al.] // J. Invest. Dermatol. - 2000. - Vol. 115. - P. 245-253.

145. Neutrophil extracellular traps directly induce epithelial and endothelial cell death: a predominant role of histones / M. Saffarzadeh, C. Juenemann, M.A. Queisser

[et al.] // PLoS ONE. - 2012. - Vol. 7. - P. e32366.

146. Diabetes primes neutrophils to undergo NETosis, which impairs wound healing / S.L. Wong, M. Demers, K. Martinod [et al.] // Nat. Med. - 2015. - Vol. 21. -P. 815-819.

147. Hanses, F. Reduced neutrophil apoptosis in diabetic mice during staphylococcal infection leads to prolonged Tnfa production and reduced neutrophil clearance / F. Hanses, S. Park, J. Rich // PLoS ONE. - 2011. - Vol. 6. - P. e23633.

148. Khanna, S. Macrophage dysfunction impairs resolution of inflammation in the wounds of diabetic mice / S. Khanna // PLoS ONE. - 2010. - Vol. 5. - P. e9539.

149. Phagocytic activity is impaired in type 2 diabetes mellitus and increases after metabolic improvement / A. Lecube, G. Pachón, J. Petriz [et al.] // PLoS ONE. -2011. - Vol. 6. - P. e23366.

150. Pettersson, U.S. Increased recruitment but impaired function of leukocytes during inflammation in mouse models of type 1 and type 2 diabetes / U.S. Pettersson, G. Christoffersson, S. Massena // PLoS ONE. - 2011. - Vol. 6. - P. 22480.

151. Bannon, P. Diabetes induces stable intrinsic changes to myeloid cells that contribute to chronic inflammation during wound healing in mice / P.Bannon, S. Wood, T. Restivo // Dis. Models Mech. - 2013. - Vol. 6. - P. 1434-1447.

152. Tellechea, A. Mast cells regulate wound healing in diabetes / A. Tellechea et al. // Diabetes. - 2016. - Vol. 65. - P. 2006-2019.

153. Impaired T-cell differentiation in diabetic foot ulceration / J. Moura, J. Rodrigues, M. Gon?alves [et al.] // Cell. Mol. Immunol. - 2017. - Vol. 14. - P. 758769.

154. Molecular pathogenesis of chronic wounds: the role of P-catenin and c-myc in the inhibition of epithelialization and wound healing / O. Stojadinovic, H. Brem, C. Vouthounis [et al.] // Am. J. Pathol. - 2005. - Vol. 167. - P. 59-69.

155. Waikel, R.L. Deregulated expression of c-Myc depletes epidermal stem cells / R.L. Waikel, Y. Kawachi, P.A. Waikel // Nat. Genet. - 2001. - Vol. 28. - P. 165-168.

156. Deregulation of keratinocyte differentiation and activation: a hallmark of venous ulcers / O. Stojadinovic, I. Pastar, S. Vukelic [et al.] // J. Cell. Mol. Med. -2008. - Vol. 12. - P. 2675-2690.

157. Attenuation of the transforming growth factor beta-signaling pathway in chronic venous ulcers / I. Pastar, O. Stojadinovic, A. Krzyzanowska [et al.] // Mol. Med. - 2010. - Vol. 16. - P. 92-101.

158. Deregulation of epidermal stem cell niche contributes to pathogenesis of nonhealing venous ulcers / O. Stojadinovic, I. Pastar, A.G. Nusbaum [et al.] // Wound Repair Regen. - 2014. - Vol. 22. - P. 220-227.

159. Expression and proteolysis of vascular endothelial growth factor is increased in chronic wounds / G. Lauer, S. Sollberg, M. Cole [et al.] // J. Invest. Dermatol. - 2000. - Vol. 115. - P. 12-18.

160. Ability of chronic wound fluids to degrade peptide growth factors is associated with increased levels of elastase activity and diminished levels of proteinase inhibitors / D.R. Yager, S.M. Chen, S.I. Ward [et al.] // Wound Repair Regen. - 1997.

- Vol. 5. - P. 23-32.

161. Wallace, H.J. Levels of tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) and soluble TNF receptors in chronic venous leg ulcers: correlations to healing status / H.J. Wallace, M.C. Stacey // J. Invest. Dermatol. - 1998. - Vol. 110. - P. 292-296.

162. Stephens, P. An analysis of replicative senescence in dermal fibroblasts derived from chronic leg wounds predicts that telomerase therapy would fail to reverse their disease-specific cellular and proteolytic phenotype / P. Stephens // Exp. Cell Res.

- 2003. - Vol. 283. - P. 22-35.

163. Fibroblast dysfunction is a key factor in the non- healing of chronic venous leg ulcers / I.B. Wall, R. Moseley, D.M. Baird Kipling [et al.] // J. Invest. Dermatol. -2008. - Vol. 128. - P. 2526-2540.

164. Vande, B.J.S. Fibroblast senescence in pressure ulcers / B.J.S. Vande, R. Rudolph, C. Hollan // Wound Repair Regen. - 1998. - Vol. 6. - P. 38-49.

165. Fibroblasts from chronic wounds show altered TGF-beta-signaling and decreased TGF-beta Type II receptor expression / B.C. Kim, H.T. Kim, S.H. Park [et

al.] // J. Cell. Physiol. - 2003. - Vol. 195. - P. 331-336.

166. Hasan, A. Dermal fibroblasts from venous ulcers are unresponsive to the action of transforming growth factor-beta 1 / A. Hasan, H. Murata, A. Falabella, S. Ochoa // J. Dermatol. Sci. - 1997. - Vol. 16. - P. 59-66.

167. Reduced iron in diabetic wounds: An oxidative stress-dependent role for STEAP3 in extracellular matrix deposition and remodeling / H.N. Wilkinson, S.E. Upson, K.L. Banyard [et al.] // J. Invest. Dermatol. - 2019. - Vol. 139. - P. 23682377.

168. Tissue iron promotes wound repair via m2 macrophage polarization and the chemokine (cc motif) ligands 17 and 22 / H.N. Wilkinson, E.R. Roberts, A.R. Stafford, K.L. Banyard [et al.] // Am. J. Pathol. - 2015. - Vol. 189. - P. 2196-2208.

169. Duscher, D. Transdermal deferoxamine prevents pressure-induced diabetic ulcers / D. Duscher // Proc. Natl Acad. Sci. USA. - 2015. - Vol. 112. - P. 94-99.

170. Deferoxamine can prevent pressure ulcers and accelerate healing in aged mice / C.A. Bonham, M. Rodrigues, M. Galvez [et al.] // Wound Repair Regen. - 2018. - Vol. 26. - P. 300-305.

171. Stegenga, M.E. Effect of acute hyperglycaemia and/or hyperinsulinaemia on proinflammatory gene expression, cytokine production and neutrophil function in humans / M.E. Stegenga // Diabet. Med. - 2008. - Vol. 25. - P. 157-164.

172. Prattichizzo, F. Short-term sustained hyperglycaemia fosters an archetypal senescence- associated secretory phenotype in endothelial cells and macrophages / F. Prattichizzo // Redox Biol. - 2018. - Vol. 15. - P. 170-181.

173. Gkogkolou, P. Advanced glycation end products: key players in skin aging / P. Gkogkolou, M. Bohm // Dermatoendocrinology. - 2010. - Vol. 4. - P. 259-270.

174. Ramasamy, R. Receptor for AGE (RAGE): Signaling mechanisms in the pathogenesis of diabetes and its complications / R. Ramasamy, S.F. Yan, A.M. Schmidt // Ann. N. Y. Acad. Sci. - 2011. - Vol. 1243. - P. 88-102.

175. Diabetic impairments in NO-mediated endothelial progenitor cell mobilization and homing are reversed by hyperoxia and SDF-1 alpha / K.A. Gallagher, Z.J. Liu, M. Xiao [et al.] // J. Clin. Invest. - 2017. - Vol. 117. - P. 1249-1259.

176. Thangarajah, H. The molecular basis for impaired hypoxia-induced VEGF expression in diabetic tissues / H. Thangarajah // Proc. Natl Acad. Sci. USA. - 2009. -Vol. 106. - P. 13 505-13 510.

177. Walsh, J.Association of diabetic foot ulcer and death in a population-based cohort from the United Kingdom / J. Walsh, O. Hoffstad, M. Sullivan // Diabet. Med. -2016. - Vol. 33. - P. 1493-1498.

178. Januszyk, M. Diabetes irreversibly depletes bone marrow-derived mesenchymal progenitor cell subpopulations / M. Januszyk // Diabetes. - 2014. - Vol. 63. - P. 3047-3056.

179. Rennert, R.C. Diabetes impairs the angiogenic potential of adipose-derived stem cells by selectively depleting cellular subpopulations / R.C. Rennert // Stem Cell Res. Ther. - 2014. - Vol. 5. - P. 79.

180. Whittam, A.J. Small molecule inhibition of dipeptidyl peptidase-4 enhances bone marrow progenitor cell function and angiogenesis in diabetic wounds / A.J. Whittam // Transl. Res. - 2019. - Vol. 205. - P. 51-63.

181. Vulesevic, B. Glyoxalase-1 overexpression in bone marrow cells reverses defective neovascularization in STZ-induced diabetic mice / B. Vulesevic // Cardiovasc. Res. - 2014. - Vol. 101. - P. 306-316.

182. Harding, K. Science, medicine, and the future: healing chronic wounds / K. Harding, H. Morris, G. Patel // Brit. Med. J. - 2002. - Vol. 324. - P. 160-163.

183. Pierce, G.F. Detection of platelet-derived growth factor (PDGF)-AA in actively healing human wounds treated with recombinant PDGF-BB and absence of PDGF in chronic nonhealing wounds / G.F. Pierce // J. Clin. Invest. - 1995. - Vol. 96. -P. 1336-1350.

184. Han, G. Chronic wound healing: a review of current management and treatments / G. Han, R. Ceilley // Adv. Ther. - 2017. - Vol. 34. - P. 599-610.

185. A prospective, descriptive study to identify the microbiological profile of chronic wounds in outpatients / S. Basu, T.R. Panray, T.B. Singh [et al.] // Ostomy Wound Manage. - 2009. - Vol. 55. - P. 14-20.

186. Strain-and species-level variation in the microbiome of diabetic wounds is associated with clinical outcomes and therapeutic efficacy / L.R. Kalan, J.S. Meisel, M.A. Loesche [et al.] // Cell Host Microbe. - 2019. - Vol. 25. - P. 641-655.

187. Loesche, M. Temporal stability in chronic wound microbiota is associated with poor healing / M. Loesche // J. Invest. Dermatol. - 2017. - Vol. 137. - P. 237244.

188. Clinton, A. Chronic wound biofilms: Pathogenesis and potential therapies / A. Clinton, T. Carter // Lab. Med. - 2015. - Vol. 46. - P. 277-284.

189. Kim, H.J. Segregation of age-related skin microbiome characteristics by functionality / H.J. Kim // Sci Rep. - 2019. - Vol. 9. № 16748.

190. Longitudinal study of the diabetic skin and wound microbiome / M. Gardiner, M. Vicaretti, J. Sparks [et al.] // PeerJ. - 2017. - Vol. 5. - P. e3543.

191. Dasu, M.R. Toll-like receptor expression and signaling in human diabetic wounds / M.R. Dasu, S.J. Martin // World J. Diabetes. - 2014. - Vol. 5. - P. 219-223.

192. Nod2 deficiency impairs inflammatory and epithelial aspects of the cutaneous wound-healing response / L. Campbell, H. Williams, R.A. Crompton [et al.] // J. Pathol. - 2013. - Vol. 229. - P. 121-131.

193. Cutaneous Nod2 expression regulates the skin microbiome and wound healing in a murine model / H. Williams, R.A. Crompton, H.A. Thomason [et al.] // J. Invest. Dermatol. - 2017. - Vol. 137. - P. 2427-2436.

194. Wilkinson, H.N. Comparing the effectiveness of polymer debriding devices using a porcine wound biofilm model / H.N. Wilkinson, A.J. McBain, C. Stephenson // Adv. Wound Care. - 2016. - Vol. 5. - P. 475-485.

195. Stephen-Haynes, J. The different methods of wound debridement / J. Stephen-Haynes, G. Thompson // Br. J. Community Nurs. - 2007. - Vol. 12. - P. S6-S16.

196. Treating the chronic wound: a practical approach to the care of nonhealing wounds and wound care dressings / M.A. Fonder, G.S. Lazarus, D.A. Cowanb [et al.] // J. Am. Acad. Dermatol. - 2008. - Vol. 58. - P. 185-206.

197. Baltzis, D. Pathogenesis and treatment of impaired wound healing in diabetes mellitus: new insights / D. Baltzis, I. Eleftheriadou, A. Veves // Adv. Ther. -2014. - Vol. 31. - P. 817-836.

198. Skorkowska-Telichowska, K. The local treatment and available dressings designed for chronic wounds / K. Skorkowska-Telichowska, M. Czemplik, A. Kulma // J. Am. Acad. Dermatol. - 2013. - Vol. 68. - P. e117-ee26.

199. Pre-clinical assessment of single-use negative pressure wound therapy during in vivo porcine wound healing / V.R. Brownhill, E. Huddleston, A. Bell [et al.] // Adv. Wound Care. . - 2021. - Vol. 10. - P. 345-356.

200. Konop, M. Certain aspects of silver and silver nanoparticles in wound care: a minireview / M. Konop, T. Damps, A. Misicka // J. Nanomater. - 2016. - № 7614753.

201. Arndt, S. Cold atmospheric plasma (CAP) activates angiogenesis-related molecules in skin keratinocytes, fibroblasts and endothelial cells and improves wound angiogenesis in an autocrine and paracrine mode / S. Arndt, P. Unger, M. Berneburg // J. Dermatol. Sci. - 2018. - Vol. 89. - P. 181-190.

202. Isbary, G. A first prospective randomized controlled trial to decrease bacterial load using cold atmospheric argon plasma on chronic wounds in patients / G. Isbary // Br. J. Dermatol. - 2010. - Vol. 163. - P. 78-82.

203. Dose-dependent modulation effects of bioactive glass particles on macrophages and diabetic wound healing / W. Xie, X. Fu, F. Tang [et al.] // J. Mater. Chem. B. - 2010. - Vol. 7. - P. 940-952.

204. Probiotics or pro-healers: The role of beneficial bacteria in tissue repair / J. Lukic, V. Chen, I. Strahinic [et al.] // Wound Repair Regen. - 2017. - Vol. 25. - P. 912-922.

205. El-Shibiny, A. Bacteriophages: the possible solution to treat infections caused by pathogenic bacteria / A. El-Shibiny, S. El-Sahhar // Can. J. Microbiol. -2017. - Vol. 63. - P. 865-879.

206. Johnson, B.K. Small molecules that sabotage bacterial virulence / B.K. Johnson, R.B. Abramovitch // Trends Pharmacol. Sci. - 2017. - Vol. 38. - P. 339-362.

207. Redefining the chronic-wound microbiome: fungal communities are prevalent, dynamic, and associated with delayed healing / L. Kalan, M. Loesche, B.P. Hodkinson [et al.] // mBio. - 2016. - Vol. 7. - P. e01058-16.

208. Hickson, L.J. Senolytics decrease senescent cells in humans: preliminary report from a clinical trial of Dasatinib plus Quercetin in individuals with diabetic kidney disease / L.J. Hickson // EBioMedicine. - 2019. - Vol. 47. - P. 446-456.

209. Hohmann, M.S. Quercetin enhances ligand- induced apoptosis in senescent idiopathic pulmonary fibrosis fibroblasts and reduces lung fibrosis in vivo / M.S. Hohmann, M.L. Habiel, A.L. Coelho // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. - 2019. - Vol. 60. - P. 28-40.

210. Chen, S. Therapeutic effects of quercetin on inflammation, obesity, and type 2 diabetes / S. Chen, H. Jiang, X. Wu // Mediators Inflamm. - 2016. - № 9340637. - P. 1- 5.

211. Han, M.K. Randomised clinical trial to determine the safety of quercetin supplementation in patients with chronic obstructive pulmonary disease / M.K. Han, T.A. Barreto, F.J. Martinez // BMJ Open Respir. Res. - 2020. - Vol. 7. - P. e000392.

212. Rennard, S.I. CXCR2 antagonist MK-7123. A phase 2 proof-of-concept trial for chronic obstructive pulmonary disease / S.I. Rennard // Am. J. Respir. Crit. Care Med. - 2015. - Vol. 191. - P. 1001-1011.

213. Kucharzewski, M. Novel trends in application of stem cells in skin wound healing / M. Kucharzewski, E. Rojczyk, K. Wilemska-Kucharzewskan // Eur. J. Pharmacol. - 2019. - Vol. 843. - P. 307-315.

214. Veith, A.P. Therapeutic strategies for enhancing angiogenesis in wound healing / A.P. Veith, K. Henderson, A. Spencer // Adv. Drug Deliv. Rev. - 2019. - Vol. 146. - P. 97-125.

215. Ebner, F. Topical use of dexpanthenol in skin disorders / F. Ebner, A. Heller, F. Rippke // Am J Clin Derm. - 2002. - Vol. 3. - P. 427-433.

216. Dell'Acqua, G. Panthenyl triacetate transformation, stimulation of metabolic pathways, and wound-healing properties in the human skin / G. Dell'Acqua, K. Schweikert // J Cosmet Sci. - 2012. - Vol. 63. - P. 1-13.

217. Elder, R.L. Final report on the safety assessment of panthenol and pantothenic acid / R.L. Elder // J Am Col Toxicol. - 1987. - Vol. 6. - P. 139-162.

218. Stozkowska, W. Investigation of some topical formulations containing dexpanthenol / W. Stozkowska, W.R. Piekos // Acta Poloniae Pharmaceutica - Drug Research. - 2004. - Vol. 61. - P. 433-437.

219. Guidelines on the control of methicillin-resistant Staphylococcus aureus in the community / Report of a combined Working Party of the British Society for Antimicrobial Chemotherapy and the Hospital Infection Society // J Hosp Infect. -1995. - Vol. 31. - P. 1-12.

220. Mossman, T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays / T. Mossman // J Immunol Methods. - 1983. - Vol. 65. - P. 55-63.

221. Diabetic animal models with infectious diseases: focus on the dysfunction of immune system / L.T. Yeh, Y.P. Chuang, S.J. Chen [et al.] // J Diabetes Metab. -2015. - Vol. 5. - P. 417.

222. Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse / D.J. Langford, A.L. Bailey, M.L. Chanda [et al.] // Nat Methods. - 2010. - Vol. 7. - P. 447-449.

223. Nefopam and ketoprofen synergy in rodent models of antinociception / P. Girard, D. Verniers, M.C. Coppe [et al.] // Eur J Pharm. - 2008. - Vol. 584. - P. 263271.

224. Dorsett-Martin, W.A. Rat models of skin wound healing: a review / W.A. Dorsett-Martin // Wound Repair Regen. - 2004. - Vol. 12. -P. 591-599.

225. Grose, R. Wound-healing studies in transgenic and knockout mice / R. Grose, S. Werner, // Mol Biotechnol. - 2004. - Vol. 28. - P. 147-166.

226. Dose-dependent effect of plasma-chemical NO-containing gas flow on wound healing. An experimental study / A.B. Shekhter, A.V. Pekshev, A.B. Vagapov [et al.] // Clin Plasma Med. - 2020. - Vol. 19-20. - P. 100101.

227. Dzhatdoeva, A.A. Tissue chemiluminescence as a method of evaluation of superoxide radical producing ability of mitochondria / A.A. Dzhatdoeva, A.M.

Polimova, E.W. Proskurina // Bulletin of Russian State Medical University. - 2016. -Vol. 1. - P. 49-55.

228. Antimicrobial activity of a new group of compounds in vivo in a model of experimental surgical wound infection / I.S. Stepanenko, S.A. Yamashkin, A.K. Durib, S.S. Muhsen // Ann Topical Med Public Health. - 2021. - Vol. 24. - P. 270-283.

229. McRipley, R.J. Characterization and quantitation of experimental surgical-wound infections used to evaluate topical antibacterial agents / R.J. McRipley, R.R. Whitney // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. - 1976. - Vol. 10. - P. 38-44.

230. Boon, R.J. Efficacy of topical mupirocin against an experimental Staphylococcus aureus surgical wound infection / R.J. Boon, A.S. Beale, R. Sutherland // J Antimicrob Chemother. - 1985. - Vol. 16. - P. 519-526.

231. Fibroblast growth factors as tissue repair and regeneration therapeutics / Q.M. Nunes, Y. Li, C. Sun [et al.] // PeerJ. - 2016. - Vol. 4. - P. e1535.

232. Immune histochemical study of KI-67 level and ribonucleic acid in the process of healing of burn wounds after treatment with drugs containing dexpanthenol and ceramide / Y. Butko, O. Tkachova, V. Ulanova [et al.] // Biointerface Research in Applied Chemistry. - 2019. - Vol. 9. - P. 4586-4590.

233. Special aspects of cosmetic spray safety evaluations: Principles on inhalation risk assessment / H. Rothe, R. Fautz, E. Gerber [et al.] // Toxicol Let. - 2011.

- Vol. 205. - P. 97-104.

234. Cerium-containing N-acetyl-6-aminohexanoic acid formulation accelerates wound reparation in diabetic animals / E. Blinova, D. Pakhomov, D. Shimanovsky [et al.] // Biomolecules. - 2021. - Vol. 11. - P. 834

235. Ozougwu, J. The pathogenesis and pathophysiology of type 1 and type 2 diabetes mellitus / J. Ozougwu, K.C. Obimba, C.D. Belonwu // J Physiol Pathophysiol.

- 2013. - Vol. 4. - P. 46-57.

236. Differential effects of empagliflozin on microvascular complications in murine models of type 1 and type 2 diabetes / S.A. Eid, P.D. O'Brien, L.M. Hinder [et al.] // Biology. - 2020. - Vol. 9. - P. 347.

237. Early hepatic insulin resistance precedes the onset of diabetes in obese C57BLKS-db/db mice / R. Davis, L. Castellani, M. Hosseini [et al.] // Diabetes. - 2010. - Vol. 59. - P. 1616-25.

238. Scar assessment tools: implications for current research / P. Van Zuijlen, A. Angeles, R. Kreis [et al.] // Plastic and reconstructive surgery. - 2002. - Vol. 109. - P. 1108-1122.

239. Direct comparison of reproducibility and reliability in quantitative assessments of burn scar properties / M. Baumann, D. DeBruler, B. Blackstone [et al.] // Burns. - 2020. - Vol. 47. - P. 466-478.

240. Diegelmann, R.F. Wound healing: an overview of acute, fibrotic and delayed healing / R.F. Diegelmann, M.C. Evans // Front Biosci. - 2004. - Vol. 9. -P. 283-289.

241. Broughton, G. Wound healing: an overview / G. Broughton, J.E. Janis, C.E. Attinger // Plast Reconstr Surg. - 2006. - Vol. 117. - 1e-S-32e-S.