Экспериментальное обоснование эффективности топического применения солей N-ацетил-6-аминогексановой кислоты при неосложненных и инфицированных кожных ранах тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.06, кандидат наук Миронов Михаил Анатольевич

• Миронов Михаил Анатольевич
• кандидат наук
• 2019

Оглавление диссертации кандидат наук Миронов Михаил Анатольевич

СОДЕРЖАНИЕ

ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

1. СОВРЕМЕННЫЕ ДОСТИЖЕНИЯ В ПОНИМАНИИ МЕХА-

НИЗМОВ ЗАЖИВЛЕНИЯ КОЖНЫХ РАН - БИОЛОГИЧЕСКИХ

МИШЕНЕЙ ДЛЯ РАЗРАБОТКИ ЭФФЕКТИВНЫХ МЕТОДОВ

ЛЕЧЕНИЯ (обзор литературы)

1.1 Характеристика основных этапов и механизмов заживления острых ран

1.1.1 Адекватный гемостаз

1.1.2 Воспалительная реакция - важнейший процесс раноза-живления

1.1.3 Пролиферативная фаза заживления ран

1.1.4 Фаза ремоделирования - завершающий этап ранозажив-ления

1.2 Современные лечебные стратегии при хронических ранах

1.2.1 Инфекционный фактор как биологический объект для

фармакологического воздействия

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Дизайн исследования

2.2 Следование требований к соблюдению биоэтических процедур при работе с лабораторными животными и возбудителями инфнкций

2.3 Характеристика лабораторных животных и экспериментальных групп

2.4 Характеристика магистральных лекарственных форм исследуемых в работе веществ

2.5 Методы исследования острой токсичности и внеэкспери-

4.

ментального прогнозирования активности

2.6 Методы формирования экспериментальных кожных ран

2.7 Методы инфицирования ран

2.8 Морфологические методы исследования

2.9 Методы определения общего белка, билирубина, амино-трансфераз, щелочной фосфатазы в периферической крови

2.10 Методы исследования активности свободнорадикальных процессов в ткани раны

2.11 Метод количественного определения некоторых цитоки-нов в тканях раны крыс

2.12 Методы изучения противомикробной активности действующих веществ ЛХТ-6-17 и ЛХТ-7-17

2.13 Методы статистического анализа полученных экспериментальных данных

ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОРИГИНАЛЬНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ К-АЦЕТИЛ-6-АМИНОГЕКСАНОВОЙ

КИСЛОТЫ И ПРОГНОЗИРОВАНИЕ РЕГЕНЕРАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ

РАНОЗАЖИВЛЯЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ ПРОИЗВОДНЫХ N

АЦЕТИЛ-6-АМИНОГЕКСАНОВОЙ КИСЛОТЫ НА МОДЕЛЯХ

НЕИНФИЦИРОВАННЫХ КОЖНЫХ РАН

4.1 Эффективность солей К-ацетил-6-аминогексановой кислоты на модели линейных ран кожи крыс

4.2 Эффективность солей К-ацетил-6-аминогексановой кислоты на модели плоскостных ран кожи крыс

4.3 Динамика микроскопических изменений плоскостной не-инфицированной раны кожи в процессе заживления на фоне различных методов консервативного лечения

3

4.4 Влияние топического воздействия солями К-ацетил-6-аминогексановой кислоты на состояние детоксицирующих систем организма, активность ПОЛ и цитокиновый про-

филь тканей неинфицированной плоскостной раны

5. ПРОТИВОМИКРОБНАЯ АКТИВНОСТЬ ПРОИЗВОДНЫХ N АЦЕТИЛ-6-АМИНОГЕКСАНОВОЙ КИСЛОТЫ НА МОДЕЛИ ХИРУРГИЧЕСКОЙ РАНЕВОЙ ИНФЕКЦИИ

6. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕГО РАЗВИТИЯ ТЕМЫ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ

АОА антиоксидантная активность

АЛТ аланиновая трансаминаза

АСТ аспарагиновая трансаминаза

ГГТП гамма-глутамилтранспептидаза

ИЛ интерлейкин

ИФА иммуноферментный анализ

МПК минимальная подавляющая концентрация

ФНО фактор некроза опухолей

ЛД50 среднелетальная доза

ШТД широта терапевтического действия

ЩФ щелочная фосфатаза

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспериментальное обоснование эффективности топического применения солей N-ацетил-6-аминогексановой кислоты при неосложненных и инфицированных кожных ранах»

Актуальность работы

Раны, в том числе хронические, являющиеся последствием сахарного диабета, ожогов, заболеваний вен, синдрома длительного раздавливания и др., представляют большую практическую и научную проблему. Длительно персистируя, раневые дефекты формируют стойкий болевой синдром, депрессивные состояния, являются источником инфекции и обусловливают до 4% экономических затрат системы медицинской помощи в развитых странах Запада [1].

Местное воздействие на область раневого дефекта, направленное на ускорение процесса регенерации, профилактику его инфицирования, достижение оптимального косметического результата, является актуальной проблемой современной хирургии [2].

Многообразие видов ран и психосоматический статус пациентов обусловливает необходимость разработки универсальных лекарственных форм, применение которых позволяло бы достигать надежного клинического результата в кратчайшие сроки без формирования нежелательных последствий консервативного воздействия. В настоящее время в мире существует большое количество лекарственных форм для местного применения, используемых в хирургии [3; 4], однако проведенные мета-исследования доказали ограниченную эффективность и рациональность их применения в клинической практике [5].

Вместе с тем, одним из перспективных веществ для поиска высокоактивных ранозаживляющих агентов с высоким потенциалом безопасности является Н-ацетил-6-аминогексановой кислота и ее производные, показавшие обнадеживающие результаты в ряде экспериментальных и клинических исследований [6-8].

На протяжении последних пятидесяти лет Н-ацетил-6-аминогексановая кислота и содержащие ее лекарственные формы с успехом используются в

различных областях клинической медицины. Неослабевающий интерес к лекарственному веществу обусловлен его уникальной способностью стимулировать процессы регенерации эпителиальной, костной ткани, тканей зубов, стимулировать ангиогенез, минерализацию костей [8-8]. Основная биомишень соединений на основе К-ацетил-б-аминогексановой кислоты - рецепторы костных морфогенетических белков (БМРЯ 1А, 2) и активатора ядерного фактора каппа В (ЯАМк1), а также клетки-носители указанных рецепторов: остеоциты, остеобласты, хондроциты, фиброциты, лимфоидные клетки [913].

Степень разработанности темы исследования

В нашей стране существовал препарат К-ацетил-б-аминогексановая кислота, который выпускался отечественной промышленностью в виде 20% раствора для приема внутрь и лекарственной формы для наружного применения (порошок). Однако, указанный препарат был снят с производства в силу ряда обстоятельств, среди которых наиболее значимыми являлись отсутствие в России производственной базы для выпуска субстанции, неудобство и низкая комплаентность пациентов целевой группы, находящихся в вынужденном положении (в положении лежа), к приему внутрь раствора (требовало значительных усилий по дозированию).

Сложности создания оптимальных лекарственных форм, невысокая биодоступность при приеме внутрь обусловили необходимость создания более перспективных соединений на основе К-ацетил-б-аминогексановой кислоты, сочетающих высокий фармакологический потенциал предшественника по стимуляции тканевой репарации и оптимизирующих токсикологический и фармацевтический профиль вещества. Серия таких соединений, представляющих собой соли К-ацетил-б-аминогексановой кислоты, была синтезирована в АО «Всесоюзный научный центр по безопасности биологически активных веществ», а их ранозаживляющий потенциал на моделях инфицированных и неинфицированных хирургических ран является предметом настоящего исследования.

Цель работы

Экспериментальное обоснование эффективности двух новых отечественных производных К-ацетил-6-аминогексановой кислоты при топическом воздействии в условиях формирования неосложненных и инфицированных хирургических ран.

Задачи исследования

1. Проведение внеэкспериментального скрининга фармакологических свойств производных К-ацетил-6-аминогексановой кислоты и изучение острой токсичности наиболее перспективных веществ при различных путях введения.

2. Изучение эффективности топического применения мягких лекарственных форм соединений ЛХТ-6-17 и ЛХТ-7-17 для заживления неослож-ненной линейной кожной раны.

3. Исследование динамики и эффективности регенерации неосложнен-ной плоскостной кожной раны на фоне местного воздействия 3-оксипиридиновым и серебряным соединениями К-ацетил-6-аминогексановой кислоты.

4. Изучение механизмов заживления плоскостной неосложненной кожной раны, явлений эндогенной интоксикации и местных свободнорадикаль-ных процессов у животных на фоне топического воздействия соединений ЛХТ-6-17 и ЛХТ-7-17 в виде 1% мазей.

5. Изучение ранозаживляющего действия и противомикробных свойств соединений ЛХТ-6-17 и ЛХТ-7-17 в мягкой лекарственной форме на модели осложненной - инфицированной - кожной раны.

Научная новизна

Впервые проведено комплексное экспериментальное обоснование эффективности консервативного лечения хирургической патологии - линейных и неосложненных и инфицированных плоскостных кожных ран - с помощью двух новых отечественных соединений К-ацетил-6-аминогексановой кислоты в виде 1% магистральной мази.

Впервые при проведении программного скрининга фармакологической активности по стимуляции регенерации тканей наибольшей вероятностью развития эффекта (выше 50%) обладают 3-гидроксипиридиновая (ЛХТ-6-17) и серебряная (ЛХТ-7-17) соли К-ацетил-б-аминогексановой кислоты.

При парентеральных путях введения (внутривенном, подкожном и вну-трибрюшинном) вещества ЛХТ-б-17 и ЛХТ-7-17 менее токсичны, чем прототип, при этом при подкожном введении серебряная соль более токсична, чем 3-гидроксипиридиновая. При внутрижелудочном введении показатель ЛД50 солей ЛХТ-б-17 и ЛХТ-7-17 выше, чем у К-ацетил-б-аминогексановой кислоты, что, с учетом результатов токсикологических исследований при внутривенном введении свидетельствует о большей биодоступности солей из ЖКТ при сравнении с прототипом.

Впервые установлено, что местное трехкратное - на 2, 5 и 9 сутки после формирования линейной раны кожи спины крыс, топическое воздействие 1% мазью, содержащей 3-оксипиридиновую и серебряную соли К-ацетил-б-аминогексановой кислоты приводит к более полноценной эпителизации и формированию более прочного соединения, нежели в отсутствие воздействия. Применение серебряной соли органической кислоты ЛХТ-7-17 в виде 1% мягкой лекарственной формы превосходит топический эффект «Актове-гин-геля» по изучаемым критериям активности.

В первые показано, что исследуемые вещества в мягкой лекарственной форме сокращают сроки заживления плоскостного неосложненного раневого дефекта, более, чем в два раза. При этом, производные К-ацетил-б-аминогексановой кислоты оказывали также и благоприятное косметическое воздействие, уменьшая площадь формирующегося рубца. При межгрупповом сравнении получены достоверные результаты, свидетельствующие о большей эффективности соединения ЛХТ-7-17.

При микроскопическом исследовании фрагментов кожи, подкожно-жировой клетчатки животных, полученных на 4, 8 и 21 сутки наблюдения установлены признаки формирования асептического воспаления с формиро-

ванием на поверхности раны грубого соединительно-тканного рубца. Впервые показано, что топическое воздействие исследуемыми мягкими лекарственными формами солей К-ацетил-6-аминогексановой кислоты приводит к предотвращению воспалительной трансформации процесса закрытия раневого дефекта и активации первичной эпителизации раны. В основе консервативного воздействия лежит способность веществ подавлять местные свободно-радикальные реакции, оптимизировать тканевое содержание про- и противовоспалительных регуляторных молекул, предотвращать формирование гипопротеинемии.

Впервые показано, что при инфицировании кожной раны использование ЛХТ-6-17 и ЛХТ-7-17 в виде мазей приводит к элиминации бактерий из инфицированной ткани. Исследуемые соединения эффективно препятствуют распространению микроорганизмов в подлежащие ткани и генерализации инфекционного процесса. Эффективность исследуемых соединений в отношении экспериментальных микробных хирургических раневых инфекций, продемонстрированная в исследовании свидетельствует об противомикроб-ной активности веществ при местном применении.

Научно-практическая значимость работы

Представленные результаты обогащают современную фармакологию производных К-ацетил-6-аминогексановой кислоты сведениями о токсикологическом профиле 3-оксипиридинового и серебряного соединений в виде мягких лекарственных форм (магистральных 1 % мазей), их влиянии на течение кожной регенерации, местные кислород-зависимые процессы, концентрацию регуляторных цитокинов, явления эндогенной интоксикации. Результаты изучения противомикробной активности веществ открывают новые возможности для последующего клинического использования лекарственных форм на основе веществ ЛХТ-6-17 и ЛХТ-7-17.

Полученные в настоящем исследовании данные являются экспериментальным обоснованием эффективности консервативного лечения хирургической патологии - неосложненных и осложненных (инфицированных) кожных

ран - с использованием 1% мазей на основе солей N-ацетил-б-аминогексановой кислоты в виде ускорения заживления, повышения прочности формирующегося соединения, преобладания процессов эпителизации над рубцеванием, а также собственной противомикробной активностью в отношении основных возбудителей внутрибольничной инфекции - S.aureus и P. aeruginosa.

Методология и методы исследования

В рамках современных требований к фармакологическому скринингу анализ токсических свойств, а также потенциального влияния на регенерацию проведен внеэкспериментальным методом с помощью лицензионного программного обеспечения. Острая токсичность при различных путях введения, в том числе и накожном, изучена в соответствие с действующими «Методическими рекомендациями».

Для воспроизведения раневой хирургической патологии воспользовались двумя экспериментальными моделями: методом нанесения линейной кожной раны вдоль позвоночного столба крыс [14] и методом нанесения плоскостной кожной раны площадью около 500 мм2 на коже спины крысы [15]. Осложненную (инфицированную) кожную рану моделировали внесением в свежую рану инокулюма возбудителей внутрибольничной инфекции S.aureus и P. aeruginosa в стерильном боксе.

Влияние мягких лекарственных форм ЛХТ-6-17 и ЛХТ-7-17 на течение процесса заживления ран исследовали путем определения прочности и площади образующегося рубца, регистрации скорости и времени закрытия раневого дефекта. Контроль ранозаживления проводили при помощи патоморфо-логического исследования с окрашиванием фиксированных срезов ран на 4, 8 и 21 сутки гематоксилином и эозином, а также по Ван Гизону.

Влияние топического воздействия 1% мазями солей N-ацетил-б-аминогексановой кислоты на явления эндогенной интоксикации оценивали путем определения плазменного уровня общего белка, билирубина, амино-

трансфераз, щелочной фосфатазы, глюкозы с помощью биохимического анализатора и ветеринарных диагностических наборов «FUJIFILM» (Япония).

Роль кислород-зависимых реакций в реализации местного воздействия ЛХТ-6-17 и ЛХТ-7-17 в виде 1% мазей на процесс ранозаживления оценивали методом индуцированной хемилюминисценции в свежей грануляционной ткани на 8 сутки после формирования ран одновременно с определением тканевого уровня регуляторных молекул - ИЛ-10 и ФНО-альфа методом количественного ИФА.

Связь диссертации с основными научными темами университета

Представленная диссертационная работа выполнялась в рамках комплексного плана научных исследований Медицинского института ФГБОУ ВО «ПГУ».

Результаты диссертационного исследования внедрены в работу научно-исследовательского семинара и учебную работу кафедр общей и клинической фармакологии, хирургии ФГБОУ ВО «ПГУ» (г. Пенза); в учебную и научную работу кафедр фармакологии и клинической фармакологии с курсом фармацевтической технологии и факультетской хирургии, а также исследовательский процесс лабораторий лекарственной токсикологии, фармако-кинетики и таргетной фармакотерапии Центра перспективных исследований инновационных лекарственных средств Медицинского института ФГБОУ ВО «МГУ им. Н.П. Огарёва» (г. Саранск).

Основные положения, выносимые на защиту

1. 3-оксипиридиновая (ЛХТ-6-17) и серебряная (ЛХТ-7-17) соли N-ацетил-6-аминогексановой кислоты в мягкой лекарственной форме (в виде 1% мазей) являются нетоксичными веществами, обладающими высоким ранозаживляющим, противовоспалительным и антимикробным действием на моделях неосложненных линейной и плоскостной и осложненных (инфицированных) кожных ран.

2. Основными критериями эффективности консервативного лечения хирургической раневой патологии - неосложненных и осложненных кожных

ран - с использованием топического воздействия солей N-ацетил-б-аминогексановой кислоты - являются: ускорение заживления, повышение прочности формирующегося соединения, преобладания процессов эпители-зации над рубцеванием (косметический результат лечения), отсутствие явлений эндогенной интоксикации.

3. В основе ранозаживляющего эффекта (ускорение эпителизации, формирование прочного рубцового соединения) солей N-ацетил-б-аминогексановой кислоты в виде 1% мазей лежат свойства веществ по сдерживанию формирования воспалительной фазы процесса регенерации за счет повышения тканевой концентрации противовоспалительного цитокина ИЛ-10 и уменьшения содержания ФНО-альфа, собственной противомикробной активности в отношении внутрибольничных штаммов S.aureus и P. Aeruginosa, ограничению активности местных кислород-зависимых реакций, предотвращению развития гипопротеинемии и экспансии соединительнотканных элементов в область раны.

Степень достоверности

Достоверность полученных результатов и положений, сформулированных на их основе выводов и практических рекомендаций определяется неукоснительным соблюдением Принципов надлежащей лабораторной практики на всех этапах выполнения исследования: планирования, проведения исследования, его этической экспертизы, учета, обработки и хранения результатов.

Достоверность подтверждается использованием в работе достаточного количества лабораторных животных, международно-признанных методов воспроизведения хирургической патологии и методов оценки эффективности консервативного лечения, используемыми в работе лекарственными формами, разработанными в соответствие с требованиями национального регулирующего органа; корректными методами статистической обработки результатов исследования.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности

Полученные в работе результаты, область и способы исследования соответствуют п. 1 «Поиск новых биологически активных фармакологических веществ среди природных и впервые синтезированных соединений, продуктов биотехнологии, генной инженерии и других современных технологий на экспериментальных моделях патологических состояний» специальности 14.03.0б - фармакология, клиническая фармакология и п. 4 «Экспериментальная и клиническая разработка методов лечения хирургических болезней и их внедрение в клиническую практику» паспорта научной специальности 14.01.17 - хирургия.

Апробация результатов работы

Апробация диссертационного исследования проведена на расширенном совместном межучрежденческом заседании кафедр «Общая и клиническая фармакология» и «Хирургия» Медицинского института ФГБОУ ВО «ПГУ», оперативной хирургии и топографической анатомии лечебного факультета ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский университет), протокол №1 от 28.01.2019 г.

Результаты исследования докладывались на международной научно-практической конференции «Перспективы развития науки и образования» (Тамбов, 2018), конгрессе «Фундаментальная наука и клиническая медицина - человек и его здоровье» ХУШ-й Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей с международным участием (Санкт-Петербург, 2018), Всероссийских научно-практических конференциях с международным участием «Аспирантские чтения» (Самара, 2018).

Личный вклад автора

Диссертант выдвинул идею проведения настоящего исследования, детально проработал и обосновал актуальность выдвинутой им гипотезы. Автор самостоятельно спланировал работу, провел аналитический обзор современных научных тенденций в рассматриваемой области. Лично автор выполнил весь экспериментальный раздел работы на лабораторных мышах и кры-

сах. Автор лично изучил острую токсичность веществ при различных путях введения. При непосредственном участии автора были приготовлены, окрашены и просмотрены микропрепараты ран, выполнены биохимические, им-муноферментные исследования, проведен анализ результатов метода индуцированной хемилюминисценции. Автор лично осуществил статистический анализ полученных результатов. При его непосредственном и самом активном участии были подготовлены и изданы научные работы по теме диссертационного исследования.

Публикации по теме диссертационной работы

По теме диссертационного исследования опубликовано 8 научных работ, из них: 4 статьи - в журналах, рекомендованных ВАК при Министерстве науки и высшего образования Российской Федерации.

Объём и структура работы

Диссертационная работа построена по традиционному плану и включает введение, главу 1 (литературный обзор), главу 2 с описанием материалов и методов исследования, три главы (3-5) с изложением результатов собственных исследований, обсуждение результатов, заключение, описание перспектив дальнейшего развития темы, выводы и практические рекомендации.

Диссертация изложена на 147 станицах компьютерного текста, иллюстрирована двенадцатью рисунками и двадцатью двумя таблицами. Библиографический список содержит 182 работ, из которых 7 работ отечественных и 175 зарубежных авторов.

1. СОВРЕМЕННЫЕ ДОСТИЖЕНИЯ В ПОНИМАНИИ МЕХАНИЗМОВ ЗАЖИВЛЕНИЯ КОЖНЫХ РАН - БИОЛОГИЧЕСКИХ МИШЕНЕЙ

ДЛЯ РАЗРАБОТКИ ЭФФЕКТИВНЫХ МЕТОДОВ ЛЕЧЕНИЯ

(обзор литературы)

Заживление раневого дефекта без формирования осложнений представляется важнейшим процессом с позиций выживания, поскольку позволяет восстановить целостность кожных покровов, обеспечить защиту организма от болезнетворных микроорганизмов и дегидратации [1-16]. У взрослых пациентов процесс ранозаживления включает четко структурированную и хорошо организованную серию (последовательность) событий, ведущих к восстановлению структурной организации поврежденных тканей и формированию рубца.

В случае возникновения острой кожной раны, обусловленной повреждением тканей, ее заживление идет по пути переходящих одна в другую фаз гемостаза, воспаления, пролиферации и ремоделирования. Повреждение кожи само по себе инициирует свертывание крови за счет тромбоцитарного звена и формирования фибринового тромба. Тромбоциты, в свою очередь, вырабатывают целую серию медиаторов, тем или иным образом регулирующих модификацию раневого дефекта. В частности, происходит миграция макрофагов и фибробластов к месту повреждения [17]. Стадия воспаления начинается с момента появления в месте ранения нейтрофилов, а затем макрофагов и лимфоцитов.

Пролиферативная фаза характеризуется формированием новых кровеносных сосудов (ангиогенез), синтезом ключевых компонентов экстрацел-люлярного матрикса и реэпителизацией [18]. Фаза ремоделирования характеризуется продукцией коллагена, созреванием и регрессией сосудистого русла. В типичных случаях фаза ремоделирования - наиболее продолжительная - длится в течение 6-24 мес. в зависимости от объема повреждения (рис. 1.1)

Гемостаз Фаза воспаления

Секунды - часы Часы - дни

Фаза пролиферации Ремоделирование Дни - недели Недели - месяцы

Факторы

роста

Вазоконстрикция

Агрегация

тромбоцитов

Миграция

лейкоцитов

Ранняя фаза - нейтрофилов Выделение хемоаттрактантов

Поздняя - макрофаги Фагоцитоз, уничтожение инородных тел, бактерий

Пролиферация фибробластов

Синтез коллагена

Реорганизция

экстрацеллюлярного

матрикса

Ангиогенез

Формирование грануляций Эпителизация

Ремоделирование Эпителизация Ремоделирование матрикса

Повышение прочности раневого рубца

Зажившая рана

А О О Р О

Четыре фазы заживления острой кожной раны

Рисунок 1.1 - Этапы заживления острой кожной раны по [16]. Ред. автора (пояснение в тексте)

Каскад восстановления целостности тканей на месте раневого дефекта может быть нарушен на любом этапе заживления, приводя к формированию хронически-незаживающих ран [18]. Различные медиаторы, включая факторы клеток воспаления, факторы роста, протеазы, такие как матриксные ме-таллопротеиназы (ММП), клеточные и экстрацеллюлярные агенты, играют важнейшую роль в данном процессе. Естественное течение ранозаживления может быть нарушено также и целым комплексом эндогенных причин, таких как конкурирующие заболевания (например, сахарный диабет, почечная недостаточность, нарушение питания, курение, воздействие радиоактивного излучения, инфекции и иммунодефицитные состояния). Присутствие указанных факторов обусловливает в подавляющем большинстве случаев торможение или невозможность заживления раны и трансформацию ее в хроническую форму [19].

Могут наблюдаться и противоположные ситуации, когда происходит повышение темпов отдельных фаз восстановительного процесса, оборачивающихся формированием фибропролиферативных элементов - келоидных рубцов и гипертрофических рубцов [20]. Таким образом, эффективное закрытие дефекта кожи представляется сложным многокомпонентным процессом, воздействие на отдельные элементы которого позволяет эффективно управлять в целом заживлением кожной раны.

1.1 Характеристика основных этапов и механизмов заживления

острых ран 1.1.1 Адекватный гемостаз

Острая рана вызывает повреждение кровеносных сосудов и развитие кровотечения. В связи с чем приоритетным направлением естественного восстановительного процесса в данном случае является предотвращение крово-потери путем вазоконстрикции и формирования тромба, закупоривающего поврежденный сосуд. Гемостаз инициируется воздействием компонентов крови на субэндотелиальный слой сосудистой стенки, куда прилипают тром-

боциты, агрегируют и формируют начальный сгусток. С этого начинается сосудистая гемокоагуляция и активация комплемента. Тканевой путь свертывания представлен формированием тромбина из активированного протромбина, в свою очередь, тромбин необходим для образования фибрина. Последний при участии тромбоцитов, плазменного фибронектина образует фибриновый тромб. Сформированный тромб, состоящий преимущественно из перекрещивающихся нитей фибрина, клеточных элементов - эритроцитов и тромбоцитов, протеинов внеклеточного матрикса - фибронектина, тром-боспондина [21] - помимо предотвращения кровопотери выполняет еще целый ряд важных функций: защита от микробной инвазии, среда для миграции и размножения клеток воспаления [21]. Адгезивность тромбоцитов обусловлена активацией интегриновых рецепторов на поверхности клеток [22, 23]. Клетки в составе тромба претерпевают дегрануляцию и выделение потенциально высокоактивных хемоаттрактантов для клеток воспаления, факторы активации для локальных фибробластов и эндотелиальных клеток, а также сосудосуживающие вещества, такие как лиганд 5 хемокина (ССЬ5), тромбин, трансформирующий фактор роста - бета (ТОБ-Р), тромбоцитарный фактор роста (РБОБ), фактор роста эндотелия сосудов (УБОБ) [21]. При этом, наиболее мощным фактором привлечения моноцитов является ССЬ5.

Тромбин, помимо участия в формировании фибринового тромба, активирует выделение провоспалительных цитокинов - ССЬ5, ИЛ-1, 6, 8, ФНО-альфа эндотелиальными клетками [24], которые, в свою очередь индуцируют хемотаксис моноцитов [25].

Среди хемокинов, высвобождающихся в ответ на повреждение тканей, важная роль принадлежит также лиганду 4 хемокина (ССЬ4), который участвует в гемокоагуляции, а также предотвращает ранний неоангиогенез [26].

Деградация фибрина ведет к последующей активации системы компонентов комплемента, что представляется ключевым моментом в генерации воспалительной реакции, формировании новых кровеносных сосудов в ране и пролиферации стромальных клеток. Фибрин связывается с молекулами ад-

гезии интегрина СВ11Ь/СВ18 на инфильтрирующих поврежденные ткани моноцитах и нейтрофилах. Также фибрин соединяется и активирует фактор роста фибробластов 2 типа (ЕОБ-2) и УБОБ, что приводит к активации вас-куляризации тканей раневого дефекта. Пролиферация стромальных клеток под действием продуктов деградации фибрина обусловлена активацией ин-сулиноподобного фактора роста 1 типа (ЮЕ-1) [21, 27, 28]. В условиях тром-боцитопенических состояний, компенсаторную роль по выделению тромбо-цитарных факторов роста играют макрофаги и Т-лифмоциты, способные активировать воспалительную реакцию [29].

1.1.2 Воспалительная реакция - важный процесс ранозаживления

Воспалительная реакция включает вовлечение в процесс нейтрофилов, макрофагов и лимфоцитов. После реализации первичного гемостаза происходит вторичная вазодилатация в ответ на гемокоагуляцию и активацию системы комплемента. Брадикинин (образованный в ходе каскада свертывания крови) и С3а, С5а компоненты комплемента (т.н. анафилатоксины) повышают проницаемость сосудов и индуцируют миграцию нейтрофилов и моноцитов в рану [30]. Указанные компоненты комплемента также стимулируют выделение гистамина и лейкотриенов тучными клетками. В последующем нарушается прочность межклеточных контактов эндотелиоцитов, что приводит к повышению проницаемости сосудов и прикреплению клеток воспаления к краям раны [31]. Первая популяция лейкоцитов, представленная в раневом дефекте образована преимущественно нейтрофилами. Тромбин и ИЛ-8 стимулируют проницаемость эндотелиального слоя посредством модуляции адегрин-опосредованной адгезии и сокращения эндотелиальных клеток, облегчая таким образом проникновение лейкоцитов в поврежденные ткани из циркуляции [32, 33]. В самой ране нейтрофильная реакция по деконтамина-ции пораженного участка развивается несколькими путями, включая секрецию протеаз и антимикробных пептидов, а также продукцию активных форм кислорода, посредством так называемого респираторного взрыва [34].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Миронов Михаил Анатольевич, 2019 год

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Linden, L. Topical preparations for wound healing / L. Linden, P. Emmans, S. Safranek // Am. Fam. Physician. - 2014. - Vol. 89, No. 12. - P. 978979.

2. Langford, J.H. Topical antimicrobial prophylaxis in minor wounds / J.H. Langford, P. Artemi, S.I. Benrimoj // Ann. Pharmacother. - 1997. - Vol. 31, No. 5. - P. 559-563.

3. Dixon, A.J. Randomized clinical trial of the effect of applying ointment to surgical wounds before occlusive dressing / A.J. Dixon, M.P. Dixon, J.B. Dixon // Br. J. Surg. - 2006. - Vol. 93, No. 8. - P. 937-943.

4. Wound repair and regeneration / G.C. Gartner, C. Werner, V. Barrandon, M.T. Longaker // Nature. - 2008. - Vol. 453, No. 7103. - P. 314-321.

5. Murine Model Imitating Chronic Wound Infections for Evaluation of Antimicrobial Photodynamic Therapy Efficacy / G. Fila, K. Kasimova, Y. Arenas, J. Nakonieczna, M. Grinholc, K.P. Bielawski, L. Lilge // Front. Microbiol. - 2016. - Vol. 7. - P. 1258.

6. Bertelli, A. The anti-inflamatery effects of the aminokapron acid and acetylaminokapron acid / Bertelli A., Prato M. // Atti Accad. Med. Lombarda. 1962. Vol. 17, №1. P. 204-208.

7. Fort, V. Action de l'acide acetyl-6- aminohexanoque dans les stades precoces de la reparation des fractures experimentales chez le lapin / Fort V., Monnier J.P., Antoine G. // Memoire original. Revue de patpologie comparee. 1968. №7. P. 9-15.

8. Зорькин, М.В. Сравнительное исследование гастропротекторного действия этоксидола и производных аминогексановой и ацетилглютамино-вой кислот / Зорькин М.В., Аткарская О. А., Зорькина А.В. // Современные проблемы науки и образования. 2014. №2. URL:http://science-education.ru/ru/article/view?id=12796 (дата обращения: 07.06.2018).

9. Wound healing in mammals and amphibians: Towards limb regeneration in mammals / Kawasumi A., Sagawa N., Hayashi S., Yokoyama H., Tamura K. // Curr. Top. Microbial. Immunol. - 2013. - Vol. 367. - P. 33-49.

10. Surgical inflammatory stress: the embryo takes hold of the reins again / Aller M.A., Arias J.I., Prieto I., Gilsanz C., Arias A., Yang H., Arias J. // Theor. Biol. Med. Model. - 2013. - Vol. 10. - P. 6.

11. Zarei, F. Role of growth factors and biomaterials in wound healing / Za-rei F., Soleimaninejad M. // Artif. Cells Nanomed. Biotechnol. - 2018. - Vol. 15. -P. 1-6.

12. Fibroblast growth factor and vascular endothelial growth factor play a critical role in endotheliogenesis from human adipose-derived stem cells / Khan S., Villalobos M.A., Choron R.L., Chang S., Brown S.A., Carpenter J.P., et al. // J. Vasc. Surg. - 2017. - Vol. 65 (5). - P. 1483-1492.

13. Recombinant human granulocyte macrophage colony stimulating factor in deep second-degree burn wound healing / Yan D., Liu S., Zhao X., Bian H., Yao X., Xing J., et al. // Medicine (Baltimore). - 2017. - Vol. 96 (22). - e6881.

14. Evaluation of in vivo wound healing activity of Bacopa monniera on different wound model in rats / Murthy S., Gantam M.K., Shalini G., Purohit V., Sharma H., Goel R.K. // Bio. Med. Res. Int. - 2013. - Vol. 2103: art.ID972028. doi:10.1155/2013/972028

15. Determination of effective miRNAs in wound healing in an experimental rat model / Coskunpiran E., Arkan H., Dedeoglu B.G. et al. // Cell. Mol. Biol. -2015. - Vol. 61(8). - P. 89-96.

16. Current concepts in the physiology of adult wound healing / Thiruvoth F.M., Mohapatra D.P., Sivakumar D.K., Chittoria R.K., Nandhagopal V. // Plast. Aesthet. Res. - 2015. - Vol. 2. - P. 250-256.

17. Singer, A.J. Cutaneous wound healing / Singer A.J., Clark R.A. // N. Engl. J. Med. - 1999. - Vol. 341. - P. 738-746.

18. Enoch, S. Recent advances and emerging treatments / Enoch S., Grey J.E., Harding K.G. // BMJ. - 2006. - Vol. 332. - P. 962-965.

19. Guo, S. Factors affecting wound healing / Guo S., Dipietro L.A. // J. Dent. Res. - 2010. - Vol. 89. - P. 219-229.

20. Kose, O. Keloids and hypertrophic scars: are they two different sides of the same coin? / Kose O., Waseem A. // Dermatol. Surg. - 2008. - Vol. 34. - P. 336-346.

21. Sen, C.K. Wound healing / Sen C.K., Roy S. In: Rodriguez E., Losee J., Neligan P.C. editors. Plastic Surgery: Volume 3: Craniofacial, Head and Neck Surgery and Pediatric Plastic Surgery, 3rd Ed. - Philadelphia: Saunders, 2012. - P. 240-266.

22. Bennett, J.S. The structure and function of platelet integrins / Bennett J.S., Berger B.W., Billings P.C. // J. Thromb. Haemost. - 2009. - Vol. 7. - P. 200205.

23. Suzuki-Inoue, K. Activation and inhibitory mechanisms of blood platelets / Suzuki-Inoue K. // Nihon. Rinsho. - 2014. - Vol. 72. - P. 1212-1217.

24. The direct thrombin inhibitors (argatroban, bivalirudin and lepirudin) and the indirect Xa-inhibitor (danaparoid) increase fibrin network porosity and thus facilitate fibrinolysis / He S., Blombâck M., Bark N., Johnsson H., Wallén N.H. // Thromb. Haemost. - 2010. - Vol. 103. - P. 1076-1084.

25. The IL-6-soluble IL-6Ralpha autocrine loop of endothelial activation as an intermediate between acute and chronic inflammation: an experimental model involving thrombin / Marin V., Montero-Julian F.A., Grès S., et al. // J. Immunol. - 2001. - Vol. 167. - P. 3435-3442.

26. Martins-Green, M. Chemokines and their receptors are key players in the orchestra that regulates wound healing / Martins-Green M., Petreaca M., Wang L. // Adv. Wound Care. - 2013. - Vol. 2. - P. 327-347.

27. Sahni, A. Binding of basic fibroblast growth factor to fibrinogen and fibrin / Sahni A., Odrljin T., Francis C.W. // J. Biol. Chem. - 1998. - Vol. 273. -P. 7554-7559.

28. Increased plasminogen activator inhibitor-1 in keloid fibroblasts may account for their elevated collagen accumulation in fibrin gel cultures / Tuan T.L.,

Wu H., Huang E.Y., Chong S.S., Laug W., Messadi D., Kelly P., Le A. // Am. J. Pathol. - 2003. - Vol. 162. - P. 1579-1589.

29. The effect of thrombocytopenia on dermal wound healing / Szpaderska A.M., Egozi E.I., Gamelli R.L., DiPietro L.A. // J. Invest. Dermatol. -2003. - Vol. 120. - P. 1130-1137.

30. Mirastschijski, U. Skin wound healing: repair biology, wound and scar treatment / Mirastschijski U., Jokuszies A., Vogt P.M. // In: Rodriguez E., Losee J., Neligan P.C., editors. Plastic Surgery: Volume 3: Craniofacial, Head and Neck Surgery and Pediatric Plastic Surgery, 3rd ed. - Philadelphia: Elsevier, 2012. - P. 268-296.

31. Roberts, H.R. Overview of the coagulation reactions / Roberts H.R., Tabares A.H. // In: High K.A., Roberts H.R., editor. Molecular basis of thrombosis and hemostasis. New York: Marcel Dekker, 1995. - P. 35-50.

32. Transactivation of vascular endothelial growth factor receptor-2 (VEGFR2) by interleukin-8 (IL-8/CXCL8) is required for IL-8/CXCL8-induced endothelial permeability / Petreaca M.L., Yao M., Liu Y., Defea K., Martins-Green M. // Mol. Biol. Cell. - 2007. - Vol. 18. - P. 5014-5023.

33. Schraufstatter, I.U. IL-8 activates endothelial cell CXCR1 and CXCR2 through Rho and Rac signaling pathways / Schraufstatter I.U., Chung J., Burger M. // Am. J. Physiol. Lung. Cell. Mol. Physiol. - 2001. - Vol. 280. - P. 1094-1103.

34. Nathan, C. Neutrophils and immunity: challenges and opportunities / Nathan C. // Nat. Rev. Immunol. - 2006. - Vol. 6. - P. 173-182.

35. Caspase-8 is activated by cathepsin D initiating neutrophil apoptosis during the resolution of inflammation / Conus S., Perozzo R., Reinheckel T., Peters C., Scapozza L., Yousefi S., Simon H.U. // J. Ex. Med. - 2008. - Vol. 205. - P. 685-698.

36. Wound-healing defect of CD18 (-/-) mice due to a decrease in TGF-beta1 and myofibroblast differentiation / Peters T., Sindrilaru A., Hinz B., Hinrichs R., Menke A., Al-Azzeh E.A., Holzwarth K., Oreshkova T., Wang H., Kess D.,

Walzog B., Sulyok S., Sunderkotter C., Friedrich W., Wlaschek M., Krieg T., Scharffetter-Kochanek K. // EMBO J. - 2005. - Vol. 24. - P. 3400-3410.

37. Simpson, D.M. The neutrophilic leukocyte in wound repair: a study with antineutrophil serum / Simpson D.M., Ross R. // J. Clin. Invest. - 1972. -Vol. 51. - P. 2009-2023.

38. Gillitzer, R. Chemokines in cutaneous wound healing / Gillitzer R., Goebeler M. // J. Leukoc. Biol. - 2001. - Vol. 69. - P. 513-521.

39. Modulation of JE/MCP-1 expression in dermal wound repair / DiPietro L.A., Polverini P.J., Rahbe S.M., Kovacs E.J. // Am. J. Pathol. - 1995. -Vol. 146. - P. 868-875.

40. Keratinocyte-derived chemotactic cytokines: expressional modulation by nitric oxide in vitro and during cutaneous wound repair in vivo / Wetzler C., Kampfer H., Pfeilschifter J., Frank S. // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2000.

- Vol. 274. - P. 689-696.

41. Martin, P. Inflammatory cells during wound repair: the good, the bad and the ugly / Martin P., Leibovich S.J. // Trends Cell. Biol. - 2005. - Vol. 15. - P. 599-607.

42. Novak, M.L. Phenotypic transitions of macrophages orchestrate tissue repair / Novak M.L., Koh T.J. // Am. J. Pathol. - 2013. - Vol. 183. - P. 1352-1363.

43. Eming, A. Inflammation in wound repair: molecular and cellular mechanisms / Eming S.A., Krieg T., Davidson J.M. // J. Invest. Dermatol. - 2007.

- Vol. 127. - P. 514-525.

44. Accelerated wound closure in mice deficient for interleukin-10 / Eming S.A., Werner S., Bugnon P., Wickenhauser C., Siewe L., Utermohlen O., Davidson J.M., Krieg T., Roers A. // Am. J. Pathol. - 2007. - Vol. 170. - P. 188-202.

45. Macrophage activation dysfunction in impaired wound healing: a potential therapeutic target / Miao M., Yuan B., Mani R., Lu S. // Int. J. Low Extrem. Wounds. - 2013. - Vol. 12. - P. 239-241.

46. Sindrilaru, A. Disclosure of the culprits: macrophages-versatile regulators of wound healing / Sindrilaru A., Scharffetter-Kochanek K. // Adv. Wound Care (New Rochelle). - 2013. - Vol. 2. - P. 357-368.

47. Vascular endothelial growth factor promotes macrophage apoptosis through stimulation of tumor necrosis factor superfamily member 14 (TNFSF14/LIGHT) / Petreaca M.L., Yao M., Ware C., and Martins-Green M.M. // Wound Repair Regen. - 2008. - Vol. 16. - P. 602-614.

48. DiPietro, L.A. Wound healing: the role of the macrophage and other immune cells / DiPietro L.A. // Shock. - 1995. - Vol. 4. - P. 233-240.

49. Leibovich, S.J. The role of the macrophage in wound repair. A study with hydrocortisone and antimacrophage serum / Leibovich S.J., Ross R. // Am. J. Pathol. - 1975. - Vol. 78. - P. 71-100.

50. Wound healing in the PU.1 null mouse-tissue repair is not dependent on inflammatory cells / Martin P., D'Souza D., Martin J., Grose R., Cooper L., Maki R., McKercher S.R. // Curr. Biol. - 2003. - Vol. 13. - P. 1122-1128.

51. Mast cells modulate the inflammatory but not the proliferative response in healing wounds / Egozi E.I., Ferreira A.M., Burns A.L., Gamelli R.L., Dipietro L.A. // Wound Repair Regen. - 2003. - Vol. 11. - P. 46-54.

52. Macrophage dysfunction impairs resolution of inflammation in the wounds of diabetic mice / Khanna S., Biswas S., Shang Y., Collard E., Azad A., Kauh C., Bhasker V., Gordillo G.M., Sen C.K., Roy S. // PLoS One. - 2010. - Vol. 5: e9539.

53. Permissive environment in postnatal wounds induced by adenoviral-mediated overexpression of the anti-inflammatory cytokine interleukin-10 prevents scar formation / Gordon A., Kozin E.D., Keswani S.G., Vaikunth S.S., Katz A.B., Zoltick P.W., Favata M., Radu A.P., Soslowsky L.J., Herlyn M., Crombleholme T.M. // Wound Repair Regen. - 2008. - Vol. 16. - P. 70-79.

54. Ski, a modulator of wound healing and scar formation in the rat skin and rabbit ear / Li P., Liu P., Xiong R.P., Chen X.Y., Zhao Y., Lu W.P., Liu X., Ning Y.L.,Yang N., Zhou Y.G. // J. Pathol. - 2011. - Vol. 223. - P. 659-671.

55. Spite, M. Novel lipid mediators promote resolution of acute inflammation: impact of aspirin and statins / Spite M., Serhan C.N. // Circ. Res. - 2010. -Vol. 107. - P. 1170-1184.

56. Ectopic localization of matrix metalloproteinase-9 in chronic cutaneous wounds / Mirastschijski U., Impola U., Jahkola T., Karlsmark T., AGren M.S., Saarialho-Kere U. // Hum. Pathol. - 2002. - Vol. 33. - P. 355-364.

57. Yager, D.R. The proteolytic environment of chronic wounds / Yager D.R., Nwomeh B.C. // Wound Repair Regen. - 1999. - Vol. 7. - P. 433-441.

58. Enoch, S. ABC of wound healing. Non-surgical and drug treatments / Enoch S., Grey J.E., Harding K.G. // BMJ. - 2006. - Vol. 332. - P. 900-903.

59. A potent, selective inhibitor of matrix metalloproteinase-3 for the topical treatment of chronic dermal ulcers / Fray M.J., Dickinson R.P., Huggins J.P., Occleston N.L. // J. Med. Chem. - 2003. - Vol. 46. - P. 3514-3525.

60. Pathophysiological role of skin mast cells in wound healing after scald injury: study with mast cell-deficient W/W (V) mice / Shiota N., Nishikori Y., Ka-kizoe E., Shimoura K., Niibayashi T., Shimbori C., Tanaka T., Okunishi H. // Int. Arch. Allergy Immunol. - 2010. - Vol. 151. - P. 80-88.

61. Gallant-Behm, C.L. The mast cell stabilizer ketotifen prevents development of excessive skin wound contraction and fibrosis in red Duroc pigs / Gal-lant-Behm C.L., Hildebrand K.A., Hart D.A. // Wound Repair Regen. - 2008. -Vol. 16. - P. 226-233.

62. Noli, C. The mast cell in wound healing / Noli C., Miolo A. // Vet. Dermatol. - 2001. - Vol. 12. - P. 303-313.

63. Functional overlap between two classes of matrix-degrading proteases in wound healing / Lund L.R., R0mer J., Bugge T.H., Nielsen B.S., Frandsen T.L., Degen J.L., Stephens R.W., Dan0 K. // EMBO J. - 1999. - Vol. 18. - P. 46454656.

64. Matrix metalloproteinase inhibition delays wound healing and blocks latent transforming growth factor-^! promoted myofibroblast formation and func-

tion / Mirastschijski U., Schnabel R., Claes J., Schneider W., Agren M.S., Haaks-ma C., Tomasek J.J. // Wound Repair Regen. - 2010. - Vol. 18. - P. 223-234.

65. Sternlicht, M.D. How matrix metalloproteinases regulate cell behavior / Sternlicht M.D., Werb Z. // Annu. Rev. Cell. Dev. Biol. - 2001. - Vol. 17. - P. 463-516.

66. Cysteine cathepsins: cellular roadmap to different functions / Brix K., Dunkhorst A., Mayer K., Jordans S. // Biochimie. - 2008. - Vol. 90. - P. 194-207.

67. Gurtner, G.C. Wound healing: normal and abnormal. In: Thorne C.H., Bartlett S.P., Beasley R.W., Aston S.J., Gurtner G.C., Spear S.L., editors // Grabb and Smith's Plastic Surgery, 6th ed. - Philadelphia: Lippincott Williams & Wil-kins, 2006. - P. 15-22.

68. Johnson, K.E. Vascular Endothelial Growth Factor and Angiogenesis in the Regulation of Cutaneous Wound Repair / Johnson K.E., Wilgus T.A. // Adv. Wound Care (New Rochelle). - 2014. - Vol. 3. - P. 647-661.

69. HOXA9 regulates angiogenesis in human hypertrophic scars: induction of VEGF secretion by epidermal stem cells / Cao P.F., Xu Y.B., Tang J.M., Yang R.H., Liu X.S. // Int. J. Clin. Exp. Pathol. - 2014. - Vol. 7. - P. 2998-3007.

70. Inhibition of angiogenesis in human endothelial cell using VEGF specific nanobody / Kazemi-Lomedasht F., Behdani M., Bagheri K.P., Habibi-Anbouhi M., Abolhassani M., Arezumand R., Shahbazzadeh D., Mirzahoseini H. // Mol. Immunol. - 2015. - Vol. 65. - P. 58-67.

71. Therapeutic efficacy of a novel non-peptide avß3 integrin antagonist for pathological retinal angiogenesis in mice / Li Y.J., Li X.H., Wang L.F., Kuang X., Hang Z.X., Deng Y., Du J.R. // Exp. Eye Res. - 2014. - Vol. 129. - P. 119126.

72. Mienaltowski, M.J. Structure, physiology, and biochemistry of collagens / Mienaltowski M.J., Birk D.E. // Adv. Exp. Med. Biol. - 2014. - Vol. 802. -P. 5-29.

73. Collagen VII plays a dual role in wound healing / Nystrom A., Velati

D., Mittapalli V.R., Fritsch A., Kern J.S., Bruckner-Tuderman L. // J. Clin. Invest. - 2013. - Vol. 123. - P. 3498-3509.

74. Myofibroblasts and mechano-regulation of connective tissue remodeling / Tomasek J.J., Gabbiani G., Hinz B., Chaponnier C., Brown R.A. // Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. - 2002. - Vol. 3. - P. 349-363.

75. Desmoulière, A. Tissue repair, contraction, and the myofibroblast / Desmoulière A., Chaponnier C., Gabbiani G. // Wound Repair Regen. - 2005. -Vol. 13. - P. 7-12.

76. The cxc chemokine cCAF stimulates differentiation of fibroblasts into myofibroblasts and accelerates wound closure / Feugate J.E., Li Q., Wong L., and Martins-Green M. // J. Cell. Biol. - 2002. - Vol. 156. - P. 161-172.

77. The fibronectin-derived antiadhesive peptides suppress the myofibro-blastic conversion of rat hepatic stellate cells / Kato R., Kamiya S., Ueki M., Yaji-ma H., Ishii T., Nakamura H., Katayama T., Fukai F. // Exp. Cell. Res. - 2001. -Vol. 265. - P. 54-63.

78. Fibroblasts and myofibroblasts in wound healing / Darby I.A., Laverdet B., Bonté F., Desmoulière A. // Clin. Cosmet. Investig. Dermatol. - 2014. - Vol. 7. - P. 301-311.

79. Force generation and protease gene expression in organotypic co-cultures of fibroblasts and keratinocytes / Wall I.B., Bhadal N., Broad S., Whawell S.A., Mudera V., Lewis M.P. // J. Tissue Eng. Regen. Med. - 2009. - Vol. 3. - P. 647-650.

80. Cellular events and biomarkers of wound healing / Shah J.M., Omar

E., Pai D.R., Sood S. // Indian J. Plast. Surg. - 2012. - Vol. 45. - P. 220-228.

81. Takehara, K. Growth regulation of skin fibroblasts / K. Takehara // J. Dermatol. Sci. - 2000. - Vol. 24. - S70-77.

82. Werner, S. Keratinocyte-fibroblast interactions in wound healing / Werner S., Krieg T., Smola H. // J. Invest. Dermatol. - 2007. - Vol. 127. - P. 9981008.

83. Regulation of migratory activity of human keratinocytes by topography of multiscale collagen-containing nanofibrous matrices / Fu X., Xu M., Liu J., Qi Y., Li S., Wang H. // Biomaterials. - 2014. - Vol. 35. - P. 1496-1506.

84. Stevens, L.J. A secreted MMP is required for reepithelialization during wound healing / L.J. Stevens, A. Page-McCaw // Mol. Biol. Cell. - 2012. -Vol. 23. - P. 1068-1079.

85. Pro-collagenase-1 (matrix metalloproteinase-1) binds the al-pha(2)beta(1) integrin upon release from keratinocytes migrating on type I collagen / Dumin J.A., Dickeson S.K., Stricker T.P., Bhattacharyya-Pakrasi M., Roby J.D., Santoro S.A., Parks W.C. // J. Biol. Chem. - 2001. - Vol. 276. - P. 2936829374.

86. Matrix metalloproteinase inhibitor GM 6001 attenuates keratinocyte migration, contraction and myofibroblast formation in skin wounds / Mirastschijski U., Haaksma C.J., Tomasek J.J., Agren M.S. // Exp. Cell. Res. - 2004. - Vol. 299. - P. 465-475.

87. Matrix metalloproteinase inhibitor BB-3103 unlike the serine protein-ase inhibitor aprotinin abrogates epidermal healing of human skin wounds ex vivo / Mirastschijski U., Impola U., Karsdal M.A., Saarialho-Kere U., Agren M.S. // J. Invest. Dermatol. 2002. - Vol. 118. - P. 55-64.

88. Skin wound healing in MMP2-deficient and MMP2/plasminogen double-deficient mice / Frassing S., R0n0 B., Hald A., R0mer J., Lund L.R. // Exp. Dermatol. - 2010. - Vol. 19. - e234-240.

89. Profibrinolytic effects of metalloproteinases during skin wound healing in the absence of plasminogen / Green K.A., Almholt K., Ploug M., R0n0 B., Castellino F.J., Johnsen M., Bugge T.H., R0mer J., Lund L.R. // J. Invest. Dermatol. - 2008. - Vol. 128. - P. 2092-2101.

90. The importance of both fibroblasts and keratinocytes in a bilayered living cellular construct used in wound healing / Wojtowicz A.M., Oliveira S., Carlson M.W., Zawadzka A., Rousseau C.F., Baksh D. // Wound Repair Regen. -2014. - Vol. 22. - P. 246-255.

91. Steed, D.L. Clinical evaluation of recombinant human platelet-derived growth factor for the treatment of lower extremity ulcers / Steed D.L. // Plast. Reconstr. Surg. - 2006. - Vol. 117. - S143-149.

92. Increased vascularity detected by digital subtraction angiography after VEGF gene transfer to human lower limb artery: a randomized, placebo-controlled, double-blinded phase II study / Mäkinen K., Manninen H., Hedman M., Matsi P., Mussalo H., Alhava E., Ylä-Herttuala S. // Mol. Ther. - 2002. - Vol. 6. -P. 127-133.

93. Current understanding of molecular and cellular mechanisms in fibroplasia and angiogenesis during acute wound healing / Greaves N.S., Ashcroft K.J., Baguneid M., Bayat A. // J. Dermatol. Sci. - 2013. - Vol. 72. - P. 206-217.

94. The safety and efficacy of EGF-based cream for the prevention of radiotherapy-induced skin injury: results from a multicenter observational study / Kang H.C., Ahn S.D., Choi D.H., Kang M.K., Chung W.K., Wu H.G. // Radiat. Oncol. J. - 2014. - Vol. 32. - P. 156-162.

95. Efficacy of topical application of beta urogastrone (recombinant human epidermal growth factor) in Wagner's Grade 1 and 2 diabetic foot ulcers: Comparative analysis of 50 patients / Singla S., Garg R., Kumar A., Gill C. // J. Nat. Sci. Biol. Med. - 2014. - Vol. 5. - P. 273-277.

96. Clinical application of growth factors and cytokines in wound healing / Barrientos S., Brem H., Stojadinovic O., Tomic-Canic M. // Wound Repair Regen. - 2014. - Vol. 22. - P. 569-578.

97. Toriseva, M. Proteinases in cutaneous wound healing / Toriseva M., Kahari V.M. // Cell. Mol. Life. Sci. - 2009. - Vol. 66. - P. 203-224.

98. Lau, Y.K. Overexpression of lysyl oxidase to increase matrix cross-linking and improve tissue strength in dermal wound healing / Lau Y.K., Gobin A.M., West J.L. // Ann. Biomed. Eng. - 2006. - Vol. 34. - P. 1239-1246.

99. Gurtner, G.C. Wound healing: normal and abnormal / G.C. Gurtner, V.W. Wong // In: Thorne C.H., Gurtner G.C., Chung K., Gosain A., Mehrara B.,

Rubin P., Spear S.L., editors. - Grabb and Smith's Plastic Surgery, 7th ed. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins, 2013. - P. 13-19.

100. The healing of rat skin wounds / Levenson S.M., Geever E.F., Crowley L.V., Oates J.F. 3rd, Berard C.W., Rosen H. // Ann. Surg. - 1965. - Vol. 161. -P. 293-308.

101. Metalloproteinase inhibitors and wound healing: a novel enhancer of wound strength / Witte M.B., Thornton F.J., Kiyama T., Efron D.T., Schulz G.S., Moldawer L.L., Barbul A. // Surgery. - 1998. - Vol. 124. - P. 464-470.

102. Viera, M.H. Update on keloid management: clinical and basic science advances / Viera M.H., Vivas A.C., Berman B. // Adv. Wound Care (New Rochelle). - 2012. - Vol. 1. - P. 200-206.

103. Novel therapies for scar reduction and regenerative healing of skin wounds / Rhett J.M., Ghatnekar G.S., Palatinus J.A., O'Quinn M., Yost M.J., Gourdie R.G. // Trends Biotechnol. - 2008. - Vol. 26. - P. 173-180.

104. Differential expression of fibromodulin, a transforming growth factor-beta modulator, in fetal skin development and scarless repair / Soo C., Hu F.Y., Zhang X., Wang Y., Beanes S.R., Lorenz H.P., Hedrick M.H., Mackool R.J., Plaas A., Kim S.J., Longaker M.T., Freymiller E., Ting K. // Am. J. Pathol. - 2000. -Vol. 157. - P. 423-433.

105. A role for decorin in cutaneous wound healing and angiogenesis / Jä-rveläinen H., Puolakkainen P., Pakkanen S., Brown E.L., Höök M., Iozzo R.V., Sage E.H., Wight T.N. // Wound Repair Regen. - 2006. - Vol. 14. - P. 443-452.

106. Hunt, T.K. Wound healing and wound infection. What surgeons and anesthesiologists can do / Hunt T.K., Hopf H.W. // Surg. Clin. North. Am. -1997. - Vol. 77, No. 3. - P. 587-606.

107. Sheffield, P.J. Tissue oxygen measurements / Sheffield P.J. // In: Hunt T.K., Davis J.C., editors. Problem wounds: the role of oxygen. - New York: Elsevier, 1988. - P. 17-52.

108. Ruberg, R.L. Role of nutrition in wound healing / Ruberg R.L. // Surg. Clin. North. Am. - 1984. - Vol. 64(4). - P. 705-714.

109. The importance of dietary protein in healing pressure ulcers / Bres-low R.A., Hallfrisch J., Guy D.G., Crawley B., Goldberg A.P. // J. Am. Geriatr. Soc. - 1993. - Vol. 41(4). - P. 357-362.

110. MacKay, D. Nutritional support for wound healing / MacKay D., Miller A.L. // Altern. Med. Rev. - 2003. - Vol. 8(4). - P. 359-377.

111. Ehrlich, H.P. Inhibitory effects of vitamin E on collagen synthesis and wound repair / Ehrlich H.P., Tarver H., Hunt T.K. // Ann. Surg. - 1972. -Vol. 175(2). - P. 235-240.

112. Zone II flexor tendon repair: effects of vitamins A, E, beta-carotene / Greenwald D.P., Sharzer L.A., Padawer J., Levenson S.M., Seifter E. // J. Surg. Res. - 1990. - Vol. 49(1). - P. 98-102.

113. Raxofelast, a hydrophilic vitamin E-like antioxidant, stimulates wound healing in genetically diabetic mice / Galeano M., Torre V., Deodato B., et al. // Surgery. - 2001. - Vol. 129(4). - P. 467-477.

114. Global prevalence of diabetes: estimates for the year 2000 and projections for 2030 / Wild S., Roglic G., Green A., Sicree R., King H. // Diabetes Care. - 2004. - Vol. 27(5). - P. 1047-1053.

115. Causal pathways for incident lower-extremity ulcers in patients with diabetes from two settings / Reiber G.E., Vileikyte L., Boyko E.J., et al. // Diabetes Care. - 1999. - Vol. 22(1). - P. 157-162.

116. Brem, H. Cellular and molecular basis of wound healing in diabetes / Brem H., Tomic-Canic M. // J. Clin. Invest. - 2007. - Vol. 117, No. 5. - P. 12191222.

117. Hemoglobin A1c predicts healing rate in diabetic wounds / Christ-man A.L., Selvin E., Margolis D.J., Lazarus G.S., Garza L.A. // J. Invest. Dermatol. - 2011. - Vol. 131(10). - P. 2121-2127.

118. Peppa, M. Advanced glycoxidation products and impaired diabetic wound healing / Peppa M., Stavroulakis P., Raptis S.A. // Wound Repair Regen. - 2009. - Vol. 17(4). - P. 461-472.

119. Qualitative bacteriology and leg ulcer healing / Trengove N.J., Stacey M.C., McGechie D.F., Mata S. // J. Wound Care. - 1996. - Vol. 5(6). - P. 277-280.

120. Prevalence of mixed infections in the diabetic pedal wound. A retrospective review of 112 infections / Armstrong D.G., Liswood P.J., Todd W.F., Stickel W.J. // J. Am. Podiatr. Med. Assoc. - 1995. - Vol. 85, No. 10. - P. 533537.

121. Schneider, M. Quantitative assessment of bacterial invasion of chronic ulcers. Statistical analysis / Schneider M., Vildozola C.W., Brooks S. // Am. J. Surg. - 1983. - Vol. 145(2). - P. 260-262.

122. Murphy, P.S. Advances in wound healing: a review of current wound healing products / Murphy P.S., Evans G.R. // Plast. Surg. Int. - 2012. - Vol. 2012. - P. 190436.

123. Warriner, R. Infection and the chronic wound: a focus on silver / Warriner R., Burrell R. // Adv. Skin. Wound Care. - 2005. - Vol. 18(Suppl 1). -P. 2-12.

124. Silver sulfadiazine for the treatment of partial-thickness burns and venous stasis ulcers / Miller A.C., Rashid R.M., Falzon L., Elamin E.M., Zehta-bchi S. // J. Am. Acad. Dermatol. - 2012. - Vol. 66, No. 5. - e159-165.

125. A randomized trial comparing cadexomer iodine and standard treatment in the out-patient management of chronic venous ulcers / Skog E., Arnesjo B., Troeng T., Gjores J.E., Bergljung L., Gundersen J., et al. // Br. J. Dermatol. -1983. - Vol. 109(1). - P. 77-83.

126. A randomized trial of cadexomer iodine in decubitus ulcers / Moberg S., Hoffman L., Grennert M.L., Holst A. // J. Am. Geriatr. Soc. - 1983. - Vol. 31(8). - P. 462-465.

127. Lipsky, B.A. Topical antimicrobial therapy for treating chronic wounds / Lipsky B.A., Hoey C. // Clin. Infect. Dis. - 2009. - Vol. 49, No. 10. -P. 1541-1549.

128. Draelos, Z.D. A comparison of postprocedural wound care treatments: do antibiotic-based ointments improve outcomes? / Draelos Z.D., Rizer R.L., Trookman N.S. // J. Am. Acad. Dermatol. - 2011. - Vol. 64(3 Suppl). -S23-29.

129. Taylor, S.C. Postprocedural wound-healing efficacy following removal of dermatosis papulosa nigra lesions in an African American population: a comparison of a skin protectant ointment and a topical antibiotic / Taylor S.C., Averyhart A.N., Heath C.R. // J. Am. Acad. Dermatol. - 2011. - Vol. 64(3 Suppl). - S30-35.

130. Langford, J.H. Topical antimicrobial prophylaxis in minor wounds / Langford J.H., Artemi P., Benrimoj S.I. // Ann. Pharmacother. - 1997. - Vol. 31(5). - P. 559-563.

131. Maddox, J.S. The natural history of streptococcal skin infection: prevention with topical antibiotics / Maddox J.S., Ware J.C., Dillon H.C. Jr. // J. Am. Acad. Dermatol. - 1985. - Vol. 13(2 Pt. 1). - P. 207-212.

132. Prospective study of wound infections in Mohs micrographic surgery using clean surgical technique in the absence of prophylactic antibiotics / Rogers H.D., Desciak E.B., Marcus R.P., Wang S., MacKay-Wiggan J., Eliezri Y.D. // J. Am. Acad. Dermatol. - 2010. - Vol. 63(5). - P. 842-851.

133. Use of topical antibiotics as prophylaxis in clean dermatologic procedures / Levender M.M., Davis S.A., Kwatra S.G., Williford P.M., Feldman S.R. // J. Am. Acad. Dermatol. - 2012. - Vol. 66(3). - P. 445-451.

134. Fibrin cuff lysis in chronic venous ulcers treated with a hydrocolloid dressing / Mulder G., Jones R., Cederholm-Williams S., Cherry G., Ryan T. // Int. J. Dermatol. - 1993. - Vol. 32(4). - P. 304-306.

135. Prete, P.E. Growth effects of Phaenicia sericata larval extracts on fibroblasts: mechanism for wound healing by maggot therapy / Prete P.E. // Life Sci. - 1997. - Vol. 60(8). - P. 505-510.

136. Maggots are useful in treating infected or necrotic wounds / Thomas S., Andrews A., Jones M., Church J. // BMJ. - 1999. - Vol. 318(7186). - P. 807808.

137. Ke, Q. Hypoxia-inducible factor-1 (HIF-1) / Ke Q., Costa M. // Mol. Pharmacol. - 2006. - Vol. 70(5). - P. 1469-1480.

138. Jones, V. Wound dressings / Jones V., Grey J.E., Harding K.G. // BMJ. - 2006. - Vol. 332(7544). - P. 777-780.

139. Barnett, S.E. The effects of calcium alginate on wound healing / Barnett S.E., Varley S.J. // Ann. R. Coll. Surg. Engl. - 1987. - Vol. 69, No. 4. -P. 153-155.

140. Mechanism of action of PROMOGRAN, a protease modulating matrix, for the treatment of diabetic foot ulcers / Cullen B., Smith R., McCulloch E., Silcock D., Morrison L. // Wound Repair Regen. - 2002. - Vol. 10(1). - P. 1625.

141. A prospective randomised open label study to evaluate the potential of a new silver alginate/carboxymethylcellulose antimicrobial wound dressing to promote wound healing / Beele H., Meuleneire F., Nahuys M., Percival S.L. // Int. Wound J. - 2010. - Vol. 7(4). - P. 262-270.

142. Percival, S.L. Assessing the effect of an antimicrobial wound dressing on biofilms / Percival S.L., Bowler P., Woods E.J. // Wound Repair Regen. -2008. - Vol. 16(1). - P. 52-57.

143. Dziewulski, P. Acute management of facial burns. In: Jeschke MG, Kamolz L-P, Sjoberg F, Wolf SE, editors. // Handbook of burns. - Vol. 1: acute burn care, 1st edn. - New York: Springer, 2011. - P. 291-302.

144. The efficacy and safety of Dermagraft in improving the healing of chronic diabetic foot ulcers: results of a prospective randomized trial / Marston W.A., Hanft J., Norwood P., Pollak R. // Diabetes Care. - 2003. - Vol. 26(6). - P. 1701-1705.

145. Hanft, J.R. Healing of chronic foot ulcers in diabetic patients treated with a human fibroblast-derived dermis / Hanft J.R., Surprenant M.S. // J. Foot Ankle Surg. - 2002. - Vol. 41(5). - P. 291-299.

146. Blood flow changes in diabetic foot ulcers treated with dermal replacement therapy / Newton D.J., Khan F., Belch J.J., Mitchell M.R., Leese G.P. // J. Foot Ankle Surg. - 2002. - Vol. 41(4). - P. 233-237.

147. Langer, A. Systematic review of economic evaluations of human cell-derived wound care products for the treatment of venous leg and diabetic foot ulcers / Langer A., Rogowski W. // BMC Health Serv. Res. - 2009. - Vol. 9. - P. 115.

148. A clinical trial of Integra Template for diabetic foot ulcer treatment / Driver V.R., Lavery L.A., Reyzelman A.M., et al. // Wound Repair Regen. -2015. - Vol. 23(6). - P. 891-900.

149. Streubel, P.N. Use of negative-pressure wound therapy in orthopaedic trauma / Streubel P.N., Stinner D.J., Obremskey W.T. // J. Am. Acad. Orthop. Surg. - 2012. - Vol. 20(9). - P. 564-574.

150. Mechanisms and clinical applications of the vacuum-assisted closure (VAC) device: a review / Venturi M.L., Attinger C.E., Mesbahi A.N., Hess C.L., Graw K.S. // Am. J. Clin. Dermatol. - 2005. - Vol. 6(3). - P. 185-194.

151. Efficacy and safety of becaplermin (recombinant human platelet-derived growth factor-BB) in patients with nonhealing, lower extremity diabetic ulcers: a combined analysis of four randomized studies / Smiell J.M., Wieman T.J., Steed D.L., Perry B.H., Sampson A.R., Schwab B.H. // Wound Repair Regen. - 1999. - Vol. 7(5). - P. 335-346.

152. Growth factors and cytokines in wound healing / Barrientos S., Stojadinovic O., Golinko M.S., Brem H., Tomic-Canic M. // Wound Repair Regen. - 2008. - Vol. 16(5). - P. 585-601.

153. Insulin-like growth factor-1 promotes wound healing in estrogen-deprived mice: new insights into cutaneous IGF-1R/ERalpha cross talk / Emmer-

son E., Campbell L., Davies F.C., et al. // J. Invest. Dermatol. - 2012. - Vol. 132(12). - P. 2838-2848.

154. Topical insulin accelerates wound healing in diabetes by enhancing the AKT and ERK pathways: a double-blind placebo-controlled clinical trial / Lima M.H., Caricilli A.M., de Abreu L.L., et al. // PLoS One. - 2012. - Vol. 7(5). - e36974.

155. Transforming growth factor-beta1 fails to stimulate wound healing and impairs its signal transduction in an aged ischemic ulcer model: importance of oxygen and age / Wu L., Xia Y.P., Roth S.I., Gruskin E., Mustoe T.A. // Am. J. Pathol. - 1999. - Vol. 154(1). - P. 301-309.

156. Wu, S.C. Wound care: the role of advanced wound-healing technologies / Wu S.C., Marston W., Armstrong D.G. // J. Am. Podiatr. Med. Assoc. -2010. - Vol. 100(5). - P. 385-394.

157. Hyperbaric oxygen therapy for chronic wounds / Kranke P., Bennett M., Roeckl-Wiedmann I., Debus S. // Cochrane Database Syst. Rev. - 2004. -Vol. (2). - CD004123.

158. Treating the chronic wound: a practical approach to the care of non-healing wounds and wound care dressings / Fonder M.A., Lazarus G.S., Cowan D.A., Aronson-Cook B., Kohli A.R., Mamelak A.J. // J. Am. Acad. Dermatol. -2008. - Vol. 58(2). - P. 185-206.

159. Hyperbaric oxygen therapy facilitates healing of chronic foot ulcers in patients with diabetes / Londahl M., Katzman P., Nilsson A., Hammarlund C. // Diabetes Care. - 2010. - Vol. 33(5). - P. 998-1003.

160. A prospective, double-blind, randomized, controlled clinical trial comparing standard wound care with adjunctive hyperbaric oxygen therapy (HBOT) to standard wound care only for the treatment of chronic, non-healing ulcers of the lower limb in patients with diabetes mellitus: a study protocol / O'Reilly D., Linden R., Fedorko L., et al. // Trials. - 2011. - Vol. 12. - P. 69.

161. Nitric oxide-releasing nanoparticles accelerate wound healing by promoting fibroblast migration and collagen deposition / Han G., Nguyen L.N., Macherla C., et al. // Am. J. Pathol. - 2012. - Vol. 180(4). - P. 1465-1473.

162. Topically applied nitric oxide induces T-lymphocyte infiltration in human skin, but minimal inflammation / Mowbray M., Tan X., Wheatley P.S., Rossi A.G., Morris R.E., Weller R.B. // J. Invest. Dermatol. - 2008. - Vol. 128(2). - P. 352-360.

163. Scarless fetal skin wound healing update / Lo D.D., Zimmermann A.S., Nauta A., Longaker M.T., Lorenz H.P. // Birth Defects Res. C. Embryo. Today. - 2012. - Vol. 96(3). - P. 237-247.

164. Scarless fetal wound healing: a basic science review / Larson B.J., Longaker M.T., Lorenz H.P. // Plast. Reconstr. Surg. - 2010. - Vol. 126(4). - P. 1172-1180.

165. Wilgus, T.A. Regenerative healing in fetal skin: a review of the literature / Wilgus T.A. // Ostomy Wound Manage. - 2007. - Vol. 53(6). - P. 16-31 (quiz 2-3).

166. Skin shedding and tissue regeneration in African spiny mice (Acomys) / Seifert A.W., Kiama S.G., Seifert M.G., Goheen J.R., Palmer T.M., Maden M. // Nature. - 2012. - Vol. 489(7417). - P. 561-565.

167. Degen, K.E. Embryonic wound healing: a primer for engineering novel therapies for tissue repair / Degen K.E., Gourdie R.G. // Birth Defects Res. C. Embryo. Today. - 2012. - Vol. 96(3). - P. 258-270.

168. Badiavas, E.V. Treatment of chronic wounds with bone marrow-derived cells / Badiavas E.V., Falanga V. // Arch. Dermatol. - 2003. - Vol. 139(4). - P. 510-516.

169. Методические рекомендации по изучению специфической активности лекарственных средств для регенеративной медицины / А.М. Дыгай, Г.Н. Зюзьков, В.В. Жданов. - Руководство по доклиническому изучению лекарственных средств. Под ред. А.Н. Миронова. - М.: Гриф и К, 2012. - С. 776-787.

170. Методические рекомендации по изучению общетоксического действия лекарственных средств / Е.В. Арзамасцев, И.В. Березовская, О.В. Верстакова и др. - В кн. «Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств» под ред. А.Н. Миронова. - М.: Гриф и Ко, 2012. - С. 13-25.

171. Robustness of biological activity spectra predicting by computer program PASS for non-congeneric sets of chemical compounds / Poroikov V.V., Fil-imonov D.A., Borodina Yu. V., Lagunin A.A., Kos A. // Journal of Chemical Information and Computer Sciences. - 2000. - Vol. 40, №6. - Р. 1349-1355.

172. Wound repair and regeneration / Gartner G.C., Werner C., Barrandon V., Longaker M.T. // Nature. - 2008. - Vol. 453(7103). - P. 314-321.

173. Reitman, S. A colorimetric method for the determination of serum glutamic oxalacetic and glutamic pyruvic transaminases / S. Reitman, S. Frankel // Amer. J. Clin. Path. - 1957. - Vol. 28. - P. 56.

174. Bessey, O.A. A method for the rapid determination of alkaline phosphates with five cubic millimeters of serum / O.A. Bessey, O.H. Lowry, M.J. Brock // J. Biol. Chem. -1946. - Vol. 164. - P. 321.

175. Меньшиков, В.В. Лабораторные методы исследования в клинике. Справочник / В.В. Меньшиков. - М.: Медицина, 1987. - 368 с.

176. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю.А. Владимиров Ю.А. // Вестник РАМН. - 1998. - №7. - С. 43-51.

177. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. - М.: «Практика», 1999. - 467 с.

178. Filimonov, D.A. Chemoinformatics Approaches to Virtual Screening / Filimonov D.A., Poroikov V.V. // Alexandre Varnek and Alexander Tropsha, Eds. Cambridge (UK): RSC Publishing, 2008. - Р. 182.

179. Миронов, М.А. Токсикологическая характеристика оригинальных производных ^ацетил-6-аминогексановой кислоты / М.А. Миронов, Е.В. Блинова // Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. Медицинские науки. - 2018. - № 3. - С. 16-21.

180. Блинова, Е.В. Регенерация инфицированной кожной раны на фоне топического воздействия солями N-ацетил-б-аминогексановой кислоты / Е.В. Блинова, М.А. Миронов, Д.С. Блинов // Журнал научных статей Здоровье и образование в XXI веке. - 2018. - Т. 20, № 7. - С. 80-83.

181. A new group of compounds derived from 4-, 5-, б- and 7-aminoindoles with antimicrobial activity / I.S. Stepanenko, S.A. Yamashkin, Y.A. Kostina, A.A. Batarsheva, M.A. Mironov // Research Results in Pharmacology. -2018. - Vol. 4, No. 3. - P. 17-26.

182. Экспериментальное исследование ранозаживляющей активности новых производных N-ацетил-б-аминогексановой кислоты на моделях линейных и плоскостных ран / Е.В. Блинова, А.В. Абросимов, М.А. Миронов, М.Ф. Кельмяшкина // Вестник научный конференций. - 2018. - №6-2 (34). Перспективы развития науки и образования (Мат. Межд. Научно-практ. конф.). Часть. 2. - С. 132-133.