Экспресс-детекция и выявление генов факторов патогенности бактериальных возбудителей острых кишечных инфекций тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Орлова, Клавдия Александровна

  • Орлова, Клавдия Александровна
  • кандидат биологических науккандидат биологических наук
  • 2004, Москва
  • Специальность ВАК РФ03.00.07
  • Количество страниц 145
Орлова, Клавдия Александровна. Экспресс-детекция и выявление генов факторов патогенности бактериальных возбудителей острых кишечных инфекций: дис. кандидат биологических наук: 03.00.07 - Микробиология. Москва. 2004. 145 с.

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Орлова, Клавдия Александровна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Характеристика бактерий - возбудителей острых кишечных инфекций.

1.2. Факторы патогенности бактериальных возбудителей острых кишечных инфекций и их генетическая детерминация.

1.3. Молекулярно-биологические методы идентификации бактериальных возбудителей ОКИ.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Методы взятия и транспортировки проб.

2.2. Методики выделения ДНК в процессе подготовки к проведению ПЦР.

2.3. Проведение ГШР-амплификации фрагментов генома энтеробактерий.

2.4. Регистрация результатов.

2.5. Учет результатов.

2.6. Анализ плазмидного состава энтеробактерий.

2.7. Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований и их обсуждение.

3. 1. Разработка ПЦР тест-системы для экспресс-детекции шигелл и энтероинвазивных эшерихий.

3.2. Апробация и оптимизация к проведению практических исследований экспериментальных вариантов ПЦР тест-систем для детекции бактериальных возбудителей ОКИ: сальмонелл, кампилобактеров, йерсиний.

3.3. Изучение распространенности генов факторов патогенности бактериальных возбудителей ОКИ с использованием метода ПЦР.

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Микробиология», 03.00.07 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспресс-детекция и выявление генов факторов патогенности бактериальных возбудителей острых кишечных инфекций»

Актуальность темы

В настоящее время острые кишечные инфекции продолжают оставаться серьезной проблемой для здравоохранения многих стран, в том числе и России. В последние годы из-за снижения уровня жизни и ухудшения экологической ситуации в нашей стране отмечается рост заболеваемости острыми кишечными инфекциями, в особенности шигеллезом (Черкасов Б.Л., 1997; Сергевнин В.И.,1999).

Согласно официальным данным службы Госсанэпиднадзора, по России в 80% случаев кишечных заболеваний не выявляется этиологический агент. Несовершенство методической лабораторной базы ЛПУ приводит к тому, что диагностика ОКИ во многих случаях поздняя, а число диагностических ошибок достигает 12,2-14,7% и остается стабильным (Ющук Н.Д., 2000; Покровский В.И. и др. 2002). В связи с этим важной задачей является разработка новых ускоренных, прямых, высокочувствительных и специфичных методов диагностики, обеспечивающих раннее выявление возбудителя и изучение его биологических свойств.

Всем этим требованиям соответствуют диагностические системы, базирующиеся на ПЦР-технологии: продолжительность анализа 6-7 часов, чувствительность до 10-100 бактерий в образце, при удачном подборе праймеров практически 100% специфичность, возможность анализировать до 100-200 и более образцов за день.

Быстрое, своевременное определение возбудителя, источника инфекции, круга инфицированных лиц является важным условием оперативного контроля над эпидемиологической ситуацией, целенаправленного государственного санитарно-эпидемиологического надзора за сырьем и пищевыми продуктами, оценки эффективности комплекса противоэпидемических мероприятий и назначения адекватной этиотропной терапии.

Цель работы:

Разработка ПЦР тест-системы для выявления бактерий рода Shigella и энтероинвазивных E.coli, совершенствование диагностики острых кишечных инфекций применением ПЦР-детекции наиболее распространенных бактериальных возбудителей диарейных инфекций.

Задачи исследования:

1. Разработать ПЦР тест-систему для детекции бактерий рода Shigella и энтероинвазивных Е. coli в клиническом материале, продуктах питания, объектах внешней среды.

2. Оптимизировать отечественные экспериментальные ПЦР тест-системы, выявляющие бактерии рода Salmonella, для внедрения в практическую медицину.

3. Оценить целесообразность комплексного ПЦР-исследования клинического материала на наличие распространенных бактериальных возбудителей острых кишечных инфекций.

4. Изучить распространенность генов факторов патогенности в клинических изолятах шигелл, сальмонелл и эшерихий.

Научная новизна исследований

Подобраны оригинальные праймеры, позволяющие проводить эффективный высококачественный синтез консервативного участка оперона инвазивности шигелл и энтероинвазивных эшерихий. На базе данных праймеров разработана отечественная тест-система для детекции бактерий рода Shigella и энтероинвазивных Е. coli в клиническом материале, продуктах питания и объектах внешней среды.

Получены новые данные, характеризующие степень патогенности клинических изолятов шигелл, сальмонелл, эшерихий, выделенных в Волго-Вятском регионе. Показано широкое распространение генетических детерминант инвазивности (33,0%), токсигенности (22,6%) и подвижности

11,4%) микроорганизмов. Из генов токсигенности выявлен ген шигоподобного токсина 1. У штаммов Е. coli 0127 выявлены генетические структуры, сходные с генами адгезии tcpA V. cholerae и V. eltor. Основные положения, выносимые на защиту

1. ПЦР тест-система, разработанная на основе оригинальных праймеров, специфичных к оперону инвазивности, позволяет с высокой чувствительностью и специфичностью проводить выявление шигелл и энтероинвазивных эшерихий в клиническом материале от больных ОКИ.

2. Применение в клинических исследованиях и санитарно-эпидемиологических мероприятиях ПЦР-детекции шигелл и сальмонелл позволяет более чем в 2 раза увеличить эффективность выявления указанных инфекционных агентов.

3. Экспериментальные отечественные ПЦР тест-системы для изучения патогенных свойств энтеробактерий позволяют получать новую, объективную информацию о наличии генетических детерминант факторов патогенности в клинических изолятах Shigella, Salmonella, E.coli.

4. Комплексное ПЦР-исследование на наличие бактерий родов Shigella, Salmonella, Campylobacter и Yersinia enterocolitica на стадии первичного анализа клинического материала от больных ОКИ позволяет в увеличить выявление этиологического фактора и проследить циркуляцию труднокультивируемых возбудителей ОКИ.

Практическая значимость

Созданная в ходе настоящей работы ПЦР тест-система для детекции шигелл и энтероинвазивных эшерихий в 2,5 раза эффективнее выявляет инфекционный агент в клиническом материале по сравнению с бактериологическим методом, сокращает время проведения анализа до одного рабочего дня.

Апробированные и в ряде случаев оптимизированные экспериментальные тест-системы для выявления бактерий родов Shigella, Salmonella, Campylobacter и Yersinia enterocolitica позволяют увеличить выявляемость этиологического фактора ОКИ более чем в 2 раза. При проведении комплексного ПЦР-исследования клинического материала возбудитель ОКИ был выявлен методом ПЦР в 37% случаев, бактериологическим методом - в 16%.

Использование метода ПЦР для характеристики патогенных свойств клинических изолятов энтеробактерий позволило получить объективную научную информацию о циркуляции эпидемически значимых штаммов микроорганизмов в регионе. В 33% исследованных штаммов энтеробактерий выявлен оперон инвазивности, в 22,6% - ген шигоподобного токсина 1, и в 11,4% - ген белка фимбрий Н7, все культуры шигелл, выделенные от больных ОКИ, имеют оперон инвазивности. Выявление гена шиготоксина 1 в клинических изолятах S. flexneri 2а коррелирует с тяжелым проявлением заболевания.

Внедрение результатов работы

Подготовлена и прошла первый этап проверки в ГИСК им Л.А. Тарасевича документация (научно-производственный регламент, временная фармакопейная статья и инструкция по применению) на ПЦР тест-систему "Amply-Inv" для детекции бактерий рода Shigella и энтероинвазивных E.coli.

Подготовлено и опубликовано пособие для врачей «Принципы отбора, хранения и транспортировки биологических субстратов для проведения ПЦР-диагностики бактериальных и вирусных инфекций» (Н.Новгород, 2002).

Результаты, полученные при ПНР-исследовании клинического материала от больных ОКИ, проб продуктов питания, объектов внешней среды использовались лечебными учреждениями для подтверждения этиологии в диагностике ОКИ и проведения адекватной этиотропной терапии, а центрами ГСЭН - при проведении санитарно-эпидемиологических мероприятий, что подтверждено актами внедрения.

Апробация работы

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на научно-практической конференции «Генодиагностика инфекционных заболеваний» (Н. Новгород 2002), на научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения Елкина И.И. "Актуальные проблемы эпидемиологии инфекционных болезней" (Н.Новгород, 2003), на заседании Ученого совета и межлабораторного семинара Нижегородского НИИ эпидемиологии и микробиологии им. акад. РАМН И.Н. Блохиной.

По теме диссертации опубликовано 11 печатных работ

Похожие диссертационные работы по специальности «Микробиология», 03.00.07 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Орлова, Клавдия Александровна

ВЫВОДЫ

1. Разработана ранее неизвестная отечественная ПЦР тест-система для детекции бактерий рода Shigella и энтероинвазивных Е. coli, основанная на оригинальных праймерах к консервативному участку оперона инвазивности.

2. Обнаружено, что эффективность выявления бактерий родов Shigella и Salmonella методом ПЦР при исследовании клинического материала, смывов с объектов внешней среды и продуктов питания в 2,5 раза выше, чем при микробиологичеком анализе.

3. Показана целесообразность комплексного ПЦР-исследования клинического материала на наличие бактерий родов Shigella, Salmonella, Campylobacter и Yersinia enterocolytica, позволяющего быстро и одновременно анализировать большое количество образцов, обнаруживать труднокультивируемые формы возбудителей, повысить образцов, обнаруживать труднокультивируемые формы возбудителей, повысить эффективнось выявления этиологического фактора ОКИ более чем в 2 раза.

4. Выявлено присутствие генов инвазивности (33%) токсигенности (22,6%) и подвижности (11,4%) микроорганизмов в клинических изолятах энтеробактерий, выделенных в Н. Новгороде и в Волго-Вятском регионе. Токсигенные формы представлены штаммами E.coli и S.flexneri 2а, содержащими ген шигоподобного токсина 1 (22,6%). Впервые выявлено наличие у E.coli 0127 генетических структур, сходных с геном адгезии холерного вибриона.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Несмотря на свою изученность, бактериальные возбудители острых кишечых инфекций остаются объектами внимания ученых и практиков во всем мире. Ежегодно в структуре кишечных заболеваний в Российской Федерации до 80% случаев не выявляется этиологический агент. Об актуальности усовершенствования диагностики ОКИ свидетельствуют многочисленные публикации в отечественной и западной литературе.

Современное состояние лабораторной диагностики ОКИ не отвечает требованиям практического здравоохранения. Актуальной задачей становится внедрение новых диагностических методов, которые позволят увеличить выявляемость возбудителя в более ранние сроки и с меньшими финансовыми затратами.

Молекулярно-биологические методы уже вышли на тот этап научно-практической разработки, когда их можно с уверенностью предложить для внедрения в клиническую и эпидемиологическую практику.

Особенно наглядным в этом отношении может быть пример метода ПЦР, который позволяет в короткое время с большой эффективностью выявлять самый широкий спектр возбудителей.

Целью нашей работы являлась разработка и адаптация к практическому применению ПЦР тест-систем для детекции бактериальных возбудителей ОКИ, выявление методом ПЦР генов факторов патогенности клинических изолятов энтеробактерий.

В ходе настоящей работы нами совместно с сотрудниками Центрального НИИ эпидемиологии МЗ РФ была разработана ПЦР тест-система для детекции бактерий рода Shigella и энтероинвазивных эшерихий, значительно превосходящая по рабочим характеристикам тест-системы первого поколения. Разработанная тест-система основана на оригинальных праймерах, специфичных к консервативному участку оперона инвазивности шигелл, который является родовым признаком этих энтеробактерий. В данную тест-систему входят стандартные комплекты реактивов для подготовки проб к ПЦР и для выявления продукта амплификации методом электрофореза в агарозном геле. Для стадии ПЦР предусмотрены два варианта ее проведения: «буст»-ПЦР и стандартная одностадийная ПЦР, комплект для ПЦР включает две реакционных смеси: «нижняя реакционная смесь» - раствор праймеров и дезоксинуклеотидтрифосфатов (для «буст»-ПЦР-2 пары праймеров; для стандартного варианта - 1 пара); «верхняя реакционная смесь», состоящая из компонентов ПЦР-буфера, термостабильной ДНК-полимеразы, глицерина, красителя-маркера для электрофореза. Нижняя реакционная смесь заранее вносится в микропробирки и запечатывается легкоплавким воском. При такой комплектации тест-системы для постановки ПЦР достаточно внести в пробирку верхнюю реакционную смесь, вазелиновое масло и исследуемую пробу. Разделение компонентов рабочей смеси предотвращает низкотемпературный неспецифический синтез на стадии подготовки к ПЦР. В тест-системе предусмотрено использование ВКО с целью отслеживания ингибирования ПЦР. Для уменьшения вероятности контаминации и получения ложно-положительных результатов применяется урацилгликозилазная обработка ампликонов. При исследовании клинического материала от больных ОКИ разработанная ПЦР тест-система показала высокую специфичность и чувствительность. Эффективность выявления шигелл и энтероинвазивных эшерихий методом ПЦР была выше по сравнению с микробиологическим методом более чем в 2 раза. На разработанную ПЦР тест-систему составлена научно-техническая документация, которая прошла первый этап проверки в ГИСКе им. Л.А.Тарасевича.

Не менее актуальной проблемой является совершенствование методической базы органов ГСЭН в процессе мониторинга за ОКИ, улучшение контроля за сырьем и продуктами питания, выявление источника инфекции и своевременное проведение санитарно-эпидемиологических мероприятий во время групповых вспышек заболеваемости ОКИ. Сальмонеллез занимает одно из ведущих мест в структуре заболеваний ОКИ и экспресс-детекция сальмонелл является не менее важной задачей. Использование метода ПЦР для решения проблем эпидемиологии не нашло пока практического применения в РФ, но экспериментальные ПЦР тест-системы для детекции сальмонелл прошли этап научной разработки. Поэтому вторая задача нашей работы носила методический характер и заключалась в апробации и адаптации к требованиям практической медицины двух отечественных экспериментальных тест-систем для детекции бактерий рода Salmonella.

В рамках решения этой задачи мы провели сравнительные испытания на клиническом материале экспериментальных ПЦР тест-систем для выявления сальмонелл разработки ГУ МНИИЭМ РАМН им. Г.Ф. Гамалеи (Москва) и ЦНИИЭ МЗ РФ (Москва).

ПЦР тест-система ГУ МНИИЭМ РАМН им. Г.Ф. Гамалеи относится к тест-системам первого поколения и отличается сложной комплектацией реактивов (6 пробирок), многоэтапной программой амплификации (5 этапов) и длительностью анализа (26 час.). Для получения интерпретируемого результата и повышения эффективности синтеза специфического фрагмента ДНК требуется культивирование пробы в накопительной среде, что существенно увеличивает продолжительность исследования. Тем не менее чувствительность этой тест-системы была достаточно высокой (1000 кл/мл), и эффективность выявления сальмонелл по сравнению с микробиологическим методом выше в 2 раза. На этапе проверки специфичности первой ПЦР тест-системы мы оптимизировали программу амплификации, что позволило сократить время проведения ПЦР и улучшить качество результата: «горячий старт» сократили с 10 до 4 минут, процесс проводили при температуре отжига праймеров 57° С. Кроме этого, на 25% уменьшили количество вносимых в реакционную смесь праймеров, что улучшило качество электрофореграммы.

В процессе работы мы провели сравнительные испытания различных способов подготовки клинического материала к проведению ПЦР: кипячение на водяной бане, ферментативный лизис с фенольно-хлороформной депротеинизацией и неферментативный лизис нитрозогуанидинтиоцианатом с последующей сорбцией ДНК на сорбенте. Последний из указанных методов был более технологичным, позволял существенно сократить стадию пробоподготовки, получить наиболее чистый препарат ДНК и не содержал токсичных веществ.

ПЦР тест-система «Ампли-сенс-Salmonella species 250» ЦНИИЭ МЗ РФ относится к тест-системам нового поколения. Достоинства этой тест-системы заключаются в стандартизации всех этапов ПЦР-анализа, что является существенным для применения в практических лабораториях. Удобная комплектация тест-системы (2 пробирки), простая программа амплификации фрагмента ДНК (3 этапа), универсальный набор для обработки проб и непродолжительность анализа (6-8 час) позволяли получать стабильный результат при исследовании смывов с объектов внешней среды и продуктов питания. Чувствительность данной тест-системы в 2 раза превышала чувствительность тест-системы первого поколения и составила 500 кл/мл, а эффективность выявления сальмонелл по сравнению с бактериологическим методом была достоверно выше более чем в 2 раза.

Проведенные исследования показали преимущества ПЦР тест-системы «Ампли-сенс-Salmonella species 250» по рабочим характеристикам по сравнению с тест-системой ГУ МНИИЭМ РАМН им. Г.Ф. Гамалеи. Простота, технологичность, и стабильность делает ПЦР тест-систему «Ампли-сенс-Salmonella species 250» доступной для ПЦР-лабораторий лечебных учреждений и центров ГСЭН.

Разработанные в 2003 г. ЦНИИЭ МЗ РФ ПЦР тест-системы для детекции кампилобактеров и йерсиний предоставили нам возможность решения задачи комплексного ПЦР-исследования клинического материала на наиболее значимые и распространенные бактериальные возбудители ОКИ. Внедрение комплексного ПЦР-иссследования в диагностике позволит увеличить выявляемость этиологического фактора ОКИ и усовершенствовать лабораторную диагностику диарейных заболеваний. Такой подход становится особенно актуальным при необходимости обследовать большое количество заболевших или контактных при групповых вспышках кишечных заболеваний.

ПЦР тест-системы для детекции бактерий родов Shigella, Salmonella, Campylobacter и Yersinia enterocolytica укомплектованы по одной схеме. Это позволило проводить исследования в стандартных условиях: использовать единый метод обработки проб, общую схему приготовления рабочей реакционной смеси, только две программы амплификации, что упростило проведение анализа и снизило его себестоимость, сократило продолжительность работ.

Полученные результаты исследования клинического материала свидетельствуют о более высокой эффективности комплексной ПЦР-детекции бактериальных возбудителей ОКИ по сравнению с микробиологическим методом. Методом ПЦР этиологический фактор установлен в 37% случаев, при микробиологическом исследовании - в 16%. Статистическая обработка показала, что выявляемость этиологического фактора ОКИ методом ПЦР достоверно выше более чем в 2 раза по сравнению с бактериологическим методом.

Использование разработанных в РФ и исследованных в нашей работе ПЦР тест-систем для детекции бактериальных возбудителей ОКИ увеличивает выявляемость инфекционного агента в 2,5 раза по сравнению с классическими методами, сокращает время исследования до 1 рабочего дня и позволяет анализировать одновременно большое количество образцов. И метод ПЦР, и разработанные тест-системы являются стандартными и могут применяться в любой клинической лаборатории, оборудованной соответствующей стандартной аппаратурой.

Внедрение метода ПЦР в практическую медицину позволит ускорить детекцию возбудителя ОКИ, особенно в первые дни заболевания, и увеличит вероятность выявления инфекционного агента при проведении санитарно-эпидемиологических мероприятий, при обследовании контактных лиц и бактерионосителей во время групповых вспышек ОКИ. В современных экономических условиях, когда микробиологические исследования, особенно на труднокультивируемые микроорганизмы, зачастую превышают стоимость ПЦР, целесообразным является комплексный ПЦР-анализ и при спорадических заболеваниях.

Внедрение ПЦР-исследования на кампилобактеры и йерсинии позволит практическому здравоохранению решить проблему с диагностикой диарейных заболеваний, вызываемых этими возбудителями и получить новые данные о циркуляции данных микроорганизмов. Нельзя не согласиться с мнением Б.Л. Черкасского, утверждающего, что низкая заболеваемость в РФ кампилобактериозом и йерсиниозом связана с недостаточной лабораторной диагностикой этих инфекций.

Поскольку изучение биологических характеристик патогенных микроорганизмов является фундаментальной задачей микробиологии и научной информации по этой проблеме недостаточно, мы провели ПЦР-исследование клинических изолятов энтеробактерий на наличие генов факторов патогенности с использованием отечественных ПЦР тест-систем.

Полученные в ходе многолетних исследований результаты свидетельствуют о распространенности в клинических изолятах энтеробактерий генов инвазивности (33%), токсигенности (22,6%) и подвижности (11,4%) микроорганизмов. Штаммы, имеющие ген шигоподобного токсина 1, выявлены в 22,6% изолятов энтеробактерий, при этом на первом этапе работы было выявлено больше токсигенных эшерихий (5,8%), а на последнем этапе ген VT1 чаще выявлялся у шигелл (16,5%).

Особо следует отметить выявление у штаммов E.coli 0127 генетических детерминант, имеющих гомологию с геном адгезии V.cholerae tcpA. Информации по данному факту нами не обнаружено.

Проведенные в нашей работе исследования патогенных свойств клинических штаммов эитеробактерий позволили получить ценную информацию о присутствии генов факторов патогенности в изученных изолятах и высветили ряд научных и практических проблем, связанных с изучением биологических свойств бактериальных возбудителей ОКИ.

Применение молекулярно-биологических методов, в том числе и метода ПЦР представляются нам перспективными в таких областях как:

1. в качестве оперативного скринингового теста для диагностики широко распространенных бактериальных возбудителей;

2. как основной прямой тест для выявления труднокультивируемых микроорганизмов;

3. как дополнительный тест к бактериологическому исследованию для характеристики патогенных свойств возбудителей.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Орлова, Клавдия Александровна, 2004 год

1. Аксенов М.Ю., Гинцбург А.Л. Диагностика инфекционных заболеваний с помощью метода ПЦР // Мол. ген. микроб, и вирус. 1993. - №4. -С.3-8.

2. Безруков В.М., Шипулин Г.А., Федоров Н.А., Шобухова Т.С., Филимонова И.Н., Постникова Т.М., Блоха В.В., Эльберт Е.В. Полимеразная цепная реакция в диагностике бактериальных инфекций // Клин.лаб. диагностика 1996. - №1. - С.20-23.

3. Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности и гельминтами. Санитарные правила. М: Федеральный центр ГСЭН МЗ РФ.-1999.-107с.

4. Белохвостов А.С. Полимеразная цепная реакция и лигазные реакции, принципы, традиционные методики и нововведения // Мол. генетика. -1995.- №2.-С. 21-26.

5. Блохина И.Н., Бруснигина Н.Ф., Скобло Л.Е., Мазепа В.Н., Барышева Н.Н. Применение метода молекулярной гибридизации для изучения энтеротоксигенных свойств сальмонелл // Журн. микробиол. 1990. -№6-С.20-23.

6. Блохина И.Н., Леванова Г.Ф., Антонов А.С. Систематика бактерий (с основами геносистематики). Н.Новгород. 1992. - 170с.

7. Бондаренко В.М. Факторы патогенности бактерий и их роль в развитии инфекционного процесса // Журн. микробиол. 1999. - №5. - С.34-39.

8. Бондаренко В.М., Шахмарданов М.З. Современнные представления о молекулярно-биологических основах патогенеза шигеллезов // Журн. микробиол. 1998. - №6. - С.88-92.

9. Боровой В.Н., Терехов В.И., Шпонько Ю.Б. Генодиагностика патогенных эшерихий в Краснодарском крае. // Сб. Генодиагностика инф. забол. Москва. 2002. - С.323-324.

10. Ю.Бухарин О.В. Биомедицинские аспекты персистенции бактерий // Журн. микробиол. 1994. - (Прил.) - С.4-12.

11. П.Бухарин О.В. Персистенция бактериальных патогенов как результат отношений в системе паразит-хозяин // Журн. микробиол. 1997. - №4. - С.3-9.

12. Бухарин О.В., Каган Ю.Д., Бурмистрова A.JI. Сальмонеллы и сальмонеллезы. Екатеринбург. 2000. - 163с.

13. Вертиев Ю.В. Бактериальные токсины: биологическая сущность и происхождение//Журн. микробиол. 1996.- №3.-С.43-46.

14. Воробьев А.А., Бондаренко В.М. Роль микробиологии в снижении инфекционной заболеваемости // Эпидем. и инфек. бол. 1997. - №4. -С.7-11.

15. Гинцбург А.Л., Зигангирова Н.А., Романова Ю.М. Современное состояние и перспективы молекулярно-генетических методов в решении задач медицинской микробиологии // Журн. микробиол. 1999. - №5. -С.22-26.

16. Гинцбург А.Л., Романова Ю.М. Некультивируемые формы бактерий и их роль в сохранении сапронозов во внешней среде // Журн. микробиол. -1997.- №3. С. 116-121.

17. Гинцбург А.Л., Романова Ю.М., Алексеева Н.В., Ковалев Ю.Н., Аляпкина Ю.С., Чегаева Е.В. Мезанизм действия и природа факторов, индуцирующих образование некультивируемых форм Salmonella tiphymurium // Журн. микробиол. 1999. - №6. - С.3-8.

18. Гущин А.Е., Гладышев Е.В., Шипулин Г.А. Использование урацил-ДНК-гликозилазы (УДГ) для снижения риска контаминации продуктами ПЦР // Сб. "Генодиагностика инф. забол". Москва. 2002. - С. 404-408.

19. Домарадская Т.И., Езепчук Ю.В. Пептидные термостабильные токсины энтеробактерий (генетический контроль, структура, механизмы действия, тестирование) // Мол. генетика. 1993. - №1. - С.3-8.

20. Домарадская Т.И., Езепчук Ю.В., Мотин B.JL, Микулькис А.В., Коробко

21. B.Г. Определение термостабильного и термолабильного энтеротоксинов в штаммах Escherichia coli генетическими, биологическими и иммуносерологическими методами // Мол. генетика. 1992. - №9-10.1. C.11-13.

22. Домарадский И.В. Некоторые проблемы адаптации патогенных бактерий к окружающей среде // Журн. микробиол. 1997. - №4. -С.29-34.

23. Дубинина И.Г., Щербо С.Н., Макаров В.Б. Метод ПЦР в лабораторной практике // Клин. лаб. диагностика. 1997. - №7. - С.5-9.

24. Езепчук Ю.В. Патогенность как функция биомолекул. Москва. "Медицина". 1985. - 235с.24.3айнуллин Л.И., Ахмадеев P.M., Алимов A.M. Дифференциация штаммов сальмонелл методом RAPD ПЦР // Сб. «Генодиагностика инф. забол.". Москва. - 2002. - С. 337-338.

25. Ильина Т.С. Структурная организация и механизмы перемещений генных кассет, кодирующих резистентность к антибиотикам и факторы вирулентности бактерий // Мол. генетика. 2001. - №3. - С.3-12.

26. Куракин Е.С., Катков В.П. Плазмидный анализ штаммов Shigella flexneri, обусловивших вспышку в стационаре психоневрологического профиля // Журн. микробиол. 1996. - №6. - С.69-70.

27. Леванова Г.Ф., Парфенова О.В., Кашников С.Ю. Молекулярно-биологические способы идентификации и дифференциации бактерий // Методические рекомендации. Москва. 1995.

28. Ломовцев А.Э., Каминский Г.Д. Анализ клонального распределения штаммов Shigella flexneri, циркулирующих в Тульской области, на основе определения их плазмидного профиля // Журн. микробиол. -1996. №6. - С.67-69.

29. Мазепа В.Н., Бруснигина Н.Ф., Скобло Л.Е., Барышева Н.Н. Изучение распространения энтеротоксигенных энтеробактерий с помощью зондов разной степени очистки // В кн. "Регуляция биологических систем". Н. Новгород-1991.-С. 10-13.

30. Малов В.А. Клинико-патогенетическое значение интоксикации у больных острыми кишечными заболеваниями. Автореферат дис. д.м.н-Москва. 1992.

31. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование. М., Мир 1984 - 479с.

32. Медицинская микробиология. Под ред. Покровский В.И., Поздеев O.K.// Москва. ГЭОТАР МЕДИЦИНА. - 1998.- 1200с.

33. Медицинские лабораторные технологии. Под ред. проф. А.И. Карпищенко // «Интермедика» Санкт-Петербург. - 1998. - 2т. - с. 680.

34. Методические указания МЗ СССР по микробиологической диагностике заболеваний, вызванных энтеробактериями // Москва. 1984.

35. Министерство здравоохранения СССР, приказ 22 апреля 1985г. №535 "Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений".

36. Пак С.Г., Турьянов М.Х., Пальцев М.П. Сальмонеллез. М., Медицина. -1988.-304 с.

37. Петровская В.Г., Бондаренко В.М. Общие принципы генетического контроля патогенности бактерий // Журн. микробиол. 1994. - №3. -С.106-110.

38. Петровская В.Г., Бондаренко В.М. Роль хромосомы и ее взаимодействие с внехромосомными детерминантами в процессе генетического контроля патогенности бактерий // Мол. генетика. 1994. - №5. - С.3-8.

39. Подколзин А.Т., Яцышина С.Б., Свистунова Т.С., и др. Изучение чувствительности и специфичности диагностических ПЦР тест-систем для выявления микроорганизмов рода Salmonella // Сб. "Генодиагностика инф. забол." Москва. 2002. - С.240-244.

40. Покровский В.В., Шипулин Г.А., Безруков В.М., и др. Методические рекомендации по проведению работ в диагностических лабораториях, использующих метод ПЦР. Москва. 1995. - 10 с.

41. Покровский В.И. Энтеробактерии. Москва. "Медицина". 1985. - 321с.

42. Покровский В.И., Малеев В.В. Актуальные проблемы инфекционной патологии//Эпид. и инфек. бол. 1999. - №2.- С. 17-20.

43. Покровский В.И., Онищенко Г.Г., Черкасский Б.Л. Актуальные направления совершенствования профилактики инфекционных болезней // Эпид. и инфек. бол. 2000. - №2 - С.4-8.

44. Покровский В.И., Онищенко Г.Г., Черкасский Б.Л. Инфекционные болезни в конце XX века и санитарно-эпидемиологическое благополучие в России в XXI веке // Журн. микробиол. 2002. - №3. -С. 16-23.

45. Покровский В.И., Черкасский Б.Л., Сальмонеллезы. Москва. АО "Медицинская газета". 1995. -С.286.

46. Попова Т.А., Сыпченко А.Я., Шишкина Л.И. Вспышка ОКИ, вызванных Е. coli 0157:Н7, в Тульской области // Эпид. и инфек. бол. 2000. - №3. -С. 19-21.

47. Ратинер Ю.А., Бондаренко В.М., Siitonen А. Энтерогеморрагические кишечные палочки и вызываемые ими заболевания // Журн. микробиол. 1998.-№5.-С.87-96.

48. Романова Ю.М. Плазмиды вирулентности бактерий рода Shigella // Мол. генетика. 1991. - №6 - С.3-9.

49. Романова Ю.М., Бошнаков Р.Х., Баскаков Т.В., Гинцбург А.Л. Механизмы активации патогенных бактерий в организме хозяина // Журн. микробиол. 2000. - №4. - С.7-11.

50. Романова Ю.М., Гинцбург А.Л. Есть ли сходство в механизмах образования "некультивируемых форм" у грамотрицательных бактерий и спор у бацилл? // Мол. генетика. 1993. - №6. - С.34-37.

51. Романова Ю.М., Гинцбург А.Л. Участие мобильных элементов в формировании свойств патогенных бактерий // Журн. микробиол. -1999.-№5.-С.22-29.

52. Рябченко Л.Е., Ряпис А.А. Рестрикционный анализ хромосомной ДНК штаммов S. enteritidis // Мол. генетика. 1993. - №6. - С.31-34.

53. Саики Р., ГиленстенУ., Эрлих Г. Полимеразная цепная реакция // Анализ генома. Методы. Под ред. Дейвиса К. М.: Мир. - 1990. -С. 176-190.

54. Сергевнин В.И. Методические подходы к расследованию вспышек ОКИ // Эпид. и инфек. бол. 1999. - №1. - С.27-28.

55. Сергевнин В.И. Этиологическая структура и экологическая классификация острых кишечных инфекций // Эпид. и инфек. бол. -1997.- №6 С.8-9.

56. Скобло Л.Е., Уланова Т.И., Мазепа В.Н., Бруснигина Н.Ф., Барышева Н.Н. Плазмиды бактерий семейства Enterobacteriaceae, несущие ген термолабильного энтеротоксина // В кн. "Биотехнология и генетика". -Н. Новгород. 1991. - С. 14-16.

57. Ставицкая Е.Л., Нарвская О.В., Мокроусов И.В., и др. Генотипирование S. flexneri 2а, выделенных от пациентов с острой дизентерией в Санкт-Петербурге // Журн. микробиол. 1998. - №3. - С.5-7.

58. Тимаков В.Д., Петровская В.Г., Бондаренко В.М. Биологические и генетические характеристики бактерий рода Shigella. Москва. 1980. -148с.

59. Чайка Н.А., Хазенсон Л.Б., Butzler J.M. и др. Кампилобактериоз. Москва. Медицина. 1988. - С.115-135.

60. Черкасский Б.Л. Современные особенности эпидемиологии кишечных инфекций в Российской Федерации // Эпид. и инфек. бол. 1997. - №5 -С.12-15.

61. Шагинян И.А. Геномный полиморфизм в решении фундаментальных и прикладных проблем микробиологии и эпидемиологии // Журн. микробиол. 1996. - №3. - С.21-24.

62. Шагинян И.А. Идентификация и типирование патогенных бактерий: современные подходы // Вест. РАМН. -2000. 1:22-8.

63. Шагинян И.А., Гинцбург A.JI. ПЦР-генетическое типирование патогенных микроорганизмов // Генетика. 1995. - Т.31. - №5. -С.600-609.

64. Шагинян И.А., Першина М.Ю. Генетические маркеры в эпидемиологии бактериальных инфекций // Журн. микробиол. 1997. - №4. - С.5-9.

65. Шагинян И.А., Романова Ю.М., Уткин В.В. и др. Изучение геномного полиморфизма штаммов Shigella flexneri, изолированных в разных географических регионах // Мол. генетика. 1993. - №1. - С.8-13.

66. Шагинян И.А. Роль и место молекулярно-генетических методов в эпидемиологическом анализе внутрибольничных инфекций // Лаб. диагностика. 2000. - Т.2. - №3. - С. 1-21.

67. Шахмарданов М.З. Инвазивные свойства возбудителя в патогенезе шигеллеза Флекснера 2а // Эпид. и инфек. бол. 2000. - №1. - С. 25-27.

68. Шмитт К.К., Мейсик К.С., О'Брайен А.Д. Бактериальные токсины: друзья или враги? // Клин, микробиол. и химиотер. 2000. - №2. - С.4-15.

69. Шувалова Е.И., Беляева Т.В., Осипова Г.И. Клинико-морфологические и иммунологические особенности дизентерии Флекснера // Эпид. и инфек. бол. №6 - 2002. - С. 18-23.

70. Ющук Н.Д., Бродов JI.E. Острые инфекционные диарейные болезни // Мед. газета 2000. - №31.

71. Ющук Н.Д., Розенблюм А.Ю., Пархоменко Ю.Г. и др. Клинико-морфологические особенности шигеллеза Флекснера у больных с отягощенным преморбидным фоном //Журн. микробиол. 2002. - №2. -С.26

72. Aabo S., Rasmussen O.F., Rossen L et al. Salmonella identification by the polymerase chain reaction // Molecular and Cellular probes. 1993. - Vol. 10.- №3 - P. 171-178.

73. A1-Hasani K., Adler В., Rajakumar K., Sakellaris H. Distribution and structural variation of the she pathogenicity island in enteric bacterial pathogens // Med. Microbiol. 2001. - Vol. 50. - №9. - P. 780-786.

74. Altwegg, Perschil I., Gruner E. Molecular biology detection and antibiotic sensitivities of Shigella spp. and enteroinvasive Escherichia coli (EIEC) in patients returning from the tropics // Schweiz Rundsch Med Prax. 1997. -Vol.86. - №9 - P. 348-351.

75. Bai S., Li X., Xia G. et al. Gena types of Shigella enterotoxins of S. flexneri 2a // Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi. 2000. - Vol. 21. - №4. - P. 280-282.

76. Bando S.Y., do Valle G.R., Martinez M.B., Trabulsi L.R., Moreira-Filho C.A. Characterization of enteroinvasive Escherichia coli and Shigella strains by RAPD analysis // FEMS Microbiol Lett. 1998. - Vol. 165. -№1. - P. 159-165.

77. Barlow R.S., Hirst R.G., Norton R.E., Ashhurst-Smith C., Bettelheim K.A. A novel serotype of enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) as a major pathogen in an outbreak of infantile diarrhoea // J Med Microbiol. 1999.

78. Vol. 48.- №12.-P. 1123-1125.

79. Belanger S.D., Boissinot M., Menard C., Picard F.J., Bergeron M.G. Rapid detection of Shiga toxin-producing bacteria in feces by multiplex PCR with molecular beacons on the smart cycler // J. Clin. Microbiol. 2004. - Vol.40.- № 4. P. 1436-1440.

80. Beutin L., Strauch E., Fischer I. Isolation of Shigella sonnei lysogenic for a bacteriophage encoding gene for production of Shiga toxin // Lancet. 1999.- Vol.353. №9163.-P.1498.

81. Birnboim H.C., Doly J. // Nucleic. Acid. Res. 1979. - Vol. 7. - №6. -P.l 513-1523.

82. Boom R., Sol C., Salimans V. Rapid and simple method for purification of nucleic acid. // J. Clin. Microbiol. 1990 - Vol. 28. - №6. - P.495-503.

83. Carniel E., Guilvout I., Prentice M. Characterization of a large chromosomal " High Pathogenicity Island" in biotype IB Yersinia enterocolitica // J. Bact.- 1996.-Vol. 178.-P. 6743-6751.

84. Cheetham B.F., Katz M.E. A role for bacteriophages in the evolution and transfer of bacterial virulence determinants // Gene. 1995. - Vol. 165. -P.53-58.

85. Coimbra R.S., Grimont F., Grimont P.A. Identification of Shigella serotypes by restriction of amplified O-antigen gene cluster. // Res Microbiol. 1999. -Vol.150.-№8.- P. 543-553.

86. Coimbra R.S., Lenormand P., Grimont F., Bouvet P., Matsushita S., Grimont P.A. Molecular and phenotypic characterization of potentially new Shigella dysenteriae serotype.// J Clin Microbiol. 2001. - Vol.39. - № 2. - P. 618621.

87. David H. Pershing, Ed. PCR protocols for emerging infectious diseases // American society for microbiology. Washington, DC. 1996. - P.526.

88. Doran J.L., Collinson S.K., Burian J. et al. DNA-based diagnostic tests for Salmonella species targeting agfA, the structural gene for thin, aggregative fimbriae // J Clin Microbiol. 1993. - Vol. 31. - №9. - P. 2263-2273.

89. Donnenberg M.S., Welch R.A. Virulence determinants of uropathogenic Echerichia coli // Urinari Tract Infectious Molecular Pathogenesis and Clinical Management // Ed.H.Mobley, J. W. Warren. Washington. - P. 465496.

90. DuPont H.L., Enteropathogenic organisms: New etiological agents and concepts of disease // Med. Clin. North Am. 1997. - Vol. 62. - P. 945-949.

91. Eckhardt T. A rapid method for the identification of plasmid

92. Desoxiribonucleic acid in bacteria // Plasmid. J. 1978. - Vol. 21. - P. 584588.

93. Elliot S.J., Wainwright L.A., McDaniel Т.К. et.al. Structural analysis of locus enterocyte effacement genomic islands among enteropathogenic (EPEC) and enterohemorrhagic (ЕНЕС) E. coli // Mol. Microbiol. - 1998. -Vol. 28.-P. 1-4.

94. Elwell L.P., Shipley P.L. Plasmid-mediated factors associated with virulence of bacteria to animals // Annu. Rev. Microbiol. 1991. - Vol. 34. -P. 465-496.

95. Falkow S. The evolution of pathogenecity in Escherichia, Shigella, and Salmonella // Escherichia coli and Salmonella Cellular and Molecular Biology / (Ed.-in-chief) F.C. Neidhardt. Wachington. - 1999. - P. 27232729.

96. Finkelstein R.A., Ben Marchlewicz A., Donald R. et al. Isolation and characterization of a cholera related enterotoxin from Salmonella typhimurium // FEMS Microbiol. Lett. 1990. - Vol. 17. - P. 239-241.

97. Finkelstein R.A., Boesman-Finkelstein M., Holt P. et al. Vibrio cholerae hemaglutinin-lectin-pronase hydrolises fibronectin and ovomucin // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1993. - Vol. 80. - P. 1092-1095.

98. Foultier В., Troisfontaines P., Muller S. et al. Characterization of the ysa pathogenicity locus in the chromosome of Yersinia enterocolitica and phylogeny analysis of type III secretion systems // Mol Cell Probes. 1994. -Vol.8.-№4.-P. 285-290.

99. Friedrich M.J., Kinsey N.E., Vila J., Kadner R.J. Nucleotide sequence of a 13,9 kb segment of the 90 kb virulence plasmid of Salmonella typhimurium: the presence of the fimbrial biosynthetic genes // Mol. Microbiol. 1993. - Vol. 8. - P. 543-558.

100. Fukushima M., Kakinuma K., Kawaguchi R. Phylogenetic analysis of Salmonella, Shigella, and Escherichia coli strains on the basis of the gyrB gene sequence // J. Clin. Microbiol. 1998. - Vol. 32. - P. 3072-3078.

101. Gascon J., Vargas M., Quinto L. et al. Enteroaggregative Escherichia coli strains as a cause of traveler's diarrhea: a case-control study // J. Infect. Dis. -1998.-Vol. 177.-№5.-P. 1409-1412.

102. Gates R. Infectious disease secrets. Philadelfia. Hanley & Belfus. 1998.- P. 96.

103. Grant M.A., Weagant S.D., Feng P. Glutamate decarboxylase genes as a prescreening marker for detection of pathogenic Escherichia coli groups // Appl Environ Microbiol. 2001. - Vol. 67. - №7. - P. 3110-3114.

104. Groisman E.A., Ochman H. Cognate gene clusters govern invasion of host epithelial cells by Salmonella typhimurium and Shigella flexneri // EMBO J.- 1993. Vol. 142. - P. 3779-3787.

105. Haker J., Blum Oehler G., Muhldorfer I., Tschape H. Pathogenecity Islands of virulent bacteria: structure, function and impact on microbial evolution // Mol. Microbiol. 1997. - Vol. 23. - P. 1089-1097.

106. Houng H.S., Venkatesan M.M. Genetic analysis of Shigella sonnei form I antigen: identification of a novel IS630 as an essential element for the form I antigen expression. // Microb Pathog. 1998. - Vol. 25. - №4. - P. 165-173.

107. Hsu S.C., Tsen H.Y. PCR primers designed from malic acid dehydrogenase gene and their use for detection of Escherichia coli in water and milk samples // Int. J. Food Microbiol. 2001. - Vol.64. - № 1-2. - P. 111.

108. Hulton C.S., Higgins C.F., Sharp P.M. ERIC sequences: a novel family of Repetitive elements in the genomes of Escherichia coli, Salmonella typhimurium and other enterobacteria //Mol. Microbiol. 1991. - Vol. 35. -P. 825-834.

109. Ina K., Kusugami K., Ohta M. Bacterial hemorrhagic enterocolitis // J. Gastroenterol. 2003. -Vol.38. - №2. - P. 111-120.

110. Islam M.S., Hossain M.S., Hasan M.K. et al. Detection of Shigellae from stools of dysentery patients by culture and polymerase chain reaction techniques // J. Diarrhoeal. Dis. Res. 1998. - Vol. 14. - №4. - P. 248-251.

111. Ito K., Watanabe H., Toyosato M., Kosaka Т., Mizuno K. Genetic analysis of Shigella pathogenesis and rapid detection method of Shigella virulencegene by the polymerase chain reaction // Nippon Rinsho. 1992. - Vol. 50. -P. 368-372.

112. Jackson M.P. Detection of Shiga toxin-producing Shigella dysenteriae type 1 and Escherichia coli by using polymerase chain reaction with incorporation of digoxigenin-ll-dUTP // J. Clin Microbiol. 1991. - Vol. 29.-№9.-P. 1910-1914.

113. James P. Nataro and James B. Kaper. Diarreagenic Echerichia coli. // Clin. Microbiol. Rev. 1998. -Vol. 11. - P. 142-201.

114. Kaplan B.S. Hemolytic uremic syndrome and thrombotic thrombocytopenic purpura//N.Y. 1992. - P. 54.

115. Kobayashi K., Seto K., Makino M. Detection of two Shiga-like toxins from Escherichia coli 0157:H7 isolates by the polymerase chain reaction method // Nippon Saikingaku Zasshi. 1990. - Vol. 45. - №3 - P. 649-652.

116. Kobayashi K. A simple and rapid confirmation method of the bacterial contamination using polymerase chain reaction // Kansenshogaku Zasshi. -1994. Vol. 68. - №4. - P. 495-499.

117. Kongmuang U., Luk J.M., Lindberg A.A. Comparison of three stool-processing methods for detection of Salmonella serogroups В, C2 and D by PCR. // J. Clin. Microbiol. 1994. - Vol. 32. - P. 3072-3074.

118. Lampel K.A., Jagow J.A., Trucksess M., Hill W.E. Polymerase chain reaction for detection of invasive Shigella flexneri in food // Appl. Environ. Microbiol. 1990.-Vol. 56.-№6.-P. 1536-1540.

119. Lan R., Lumb В., Ryan D et al. Molecular evolution of large virulence plasmid in Shigella clones and enteroinvsive Escherichia coli. // Infect. Immun. 2001. - Vol. 65. - P. 2685-2692.

120. Lindqvist R. Detection of Shigella spp. in food with a nested PCRmethod-sensitivity and performance compared with a conventional culture method // J. Appl. Microbiol. 1999. - Vol. 86. - №6. - P. 971-978.

121. Liu P.Y., Lau Y.J., Hu B.S., et al. Analysis of clonal relationships among isolates of Shigella sonnei by different molecular typing methods // J Clin Microbiol. 1995. - Vol. 33. -№7. - P. 1779-1783.

122. Ludwig A., Tengel C., Bauer S. et al. SlyA, a regulatory protein from Salmonella typhimurium, induces a haemolytic and pore-forming protein in Escherichia coli // Mol. Gen. Genet. 1995. - Vol. 249. - №5. - P. 474486.

123. Luo W., Wang S., Peng X. Identification of shiga-toxin producing bacteria by a new immuno-capture toxin gene PCR // J. Clin. Microbiol. 1998. -Vol. 28.-P. 543-548.

124. Luscher D., Altwegg M. Detection of shigellae, enteroinvasive and enterotoxigenic Escherichia coli using the polymerase chain reaction (PCR) in patients returning from tropical countries // Mol. Cell. Probes. 1994. -Vol. 8. - №4. - P. 285-290.

125. Luscher D., Graf Settah S., Altwegg M. Bacterial pathogens in diarrhea: demonstration of verotoxin-producing Escherichia coli using the polymerase chain reaction // Schweiz. Med. Wochenschr. 1992. - Vol. 122. -№50.- P. 1911-1918.

126. Mainil J. Shiga/verocytotoxins and Shiga/verotoxigenic Escherichia coli in animals // Vet. Res. 1999. - Vol. 30. - №2-3. - P. 235-257.

127. Mariani-Kurkdjian P., Bingen E. Hemolytic-uremic syndrome after verotoxin-producing Escherichia coli infection // Presse Med. 1995. - Vol. 24.-№2.-P. 99-101.

128. Marquart M.E., Picking W.L., Picking W.D. Structural analysis of invasion plasmid antigen D (IpaD) from Shigella flexneri // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1995. - Vol. 214. - №3. - P. 963-970.

129. Maurelli A.T., Blackmon В., Curtiss R. Loss of pigmentation in Shigella flexneri 2a is correlated with loss of virulence and virulence-associated plasmid // Infect Immun. 1994. - Vol. 43. - №1. - P. 397-401.

130. Mclver C.J., White P.A., Jones L.A. et al. Epidemic strains of Shigella sonnei biotype g carrying integrons // J Clin Microbiol. 2002. - Vol. 40. -№4.-P. 1538-1540.

131. McDaniel Т.К., Jarvis K.G., Donnenberg M.S., Kaper J.B. A genetic locus of enterocyte effacement concerved among diverse enterobacterial pathogens // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1995. - Vol. 95. -№5. - P.1664-1668.

132. Meng J., Zhao S., Doyle M.P., Mitchell S.E., Kresovich S. A multiplex PCR for identifying Shiga-like toxin-producing Escherichia coli 0157:H7// Lett. Appl. Microbiol. 1997. - Vol. 24. - №3. - P. 172-176.

133. Muller M., Kruse L., Tabrett A.M. et al. Detection of a single base exchange in PCR-amplified DNA fragments using agarose gel electrophoresis containing bisbensimide-PEG // Nucleic Acids Res. 1997. -Vol.25. - № 24. - P.5125-5126.

134. Nataro J.P., Seriwatana J., Fasano A. et al. Identification and cloning of a novel plasmid-encoded enterotoxin of enteroinvasive Escherichia coli and Shigella strains // Infect Immun. 1995. - Vol. 63. - №12. - P. 4721-4728.

135. Noriega F.R., Liao F.M., Formal S.B., Fasano A., Levine M.M. Prevalence of Shigella enterotoxin 1 among Shigella clinical isolates of diverse serotypes // J. Infect. Dis. 1995. - Vol. 172. - №5. - P. 1408-1410.

136. Olive D.M., P.Bean. Principes and application of methods for DNA-based typing of microbial organisms // J. Clin. Microbiol. 1999. - Vol. 37. - P. 1661-1669.

137. Oyofo B.A., Mohran Z.S., el-Etr S.H. et al. Detection of enterotoxigenic Escherichia coli, Shigella and Campylobacter spp. by multiplex PCR assay // J. Diarrhoeal. Dis. Res. 1996. - Vol. 14. - №3. - P. 207-210.

138. Parreira V.R., Gyles C.L. Shiga toxin genes in avian Escherichia coli \\ Mol. Microbiol. 1995. - Vol. 5. - P. 825-834.

139. Peng X., Luo W., Zhang J., Wang S., Lin S. Rapid detection of Shigella species in environmental sewage by an immunocapture PCR with universal primers // Appl. Environ. Microbiol. 2002. - Vol. 68. - №5. - P. 25802583.

140. Petrovskaya V.G., Bondarenko V.M., Nastichkin J.A. A chromosome map of Shigella flexneri with the loci related to pathogenicity // Мол. генетика. -1994.-№1.-С. 3-10.

141. Pierard D., Stevens D., Moriau L., Lior H., Lauwers S. Isolation and identification virulence factors of verocytotoxin-producing Escherichia coli in human stool samples // Clin Microbiol Infect. 1997. - Vol. 3. - №5. - P. 531-540.

142. Pronk L.M., Sanderson K.E. Intervening sequences in rrl genes and fragmentation of 23 S rRNA in genera of the family Enterobacteriaceae // J. Bacterid.-2001.-Vol. 183.-№19.-P. 5782-5787.

143. Qadri F., Hossain S.A., Ciznar I. et al. Congo red binding and salt aggregation as indicators of virulence in Shigella species // J. Clin. Microbiol. 1988. - Vol. 26. - №7. - P. 1343-1348.

144. Read S.C., Clarke R.C., Martin A. et al. Polymerase chain reaction for detection of verocytotoxigenic Escherichia coli isolated from animal and food sources // Mol.Cell. Probes. 1992. - Vol. 6. - №2. - P. 153-161.

145. Rosqvist R., Hakansson S., Forsberg A., Wolf-Watz H. Functional conservation of the secretion and translocation machinery for virulence proteins of yersiniae, salmonellae and shigellae // EMBO J. 1995. - Vol. 14. -№17.-P. 4187-4195.

146. Sabat G., Rose P., Hickey W.J., Harkin J.M. Selective and sensitive method for PCR amplification of Escherichia coli 16S rRNA genes in soil. // Appl. Environ. Microbiol. 2000. - Vol. 66. - №2. - P. 844-849.

147. Sakai Т., Sasakawa C., Makino S., Kamata K., Yoshikawa M. Molecular cloning of a genetic determinant for Congo red binding ability which is essential for the virulence of Shigella flexneri // Infect. Immun. 1986. -Vol. 51.-№2.-P. 476-482.

148. Sasakawa C., Kamata K., Sakai T. et al. Virulence-associated genetic regions comprising 31 kilobases of the 230-kilobase plasmid in Shigella flexneri 2a // J. Bacterid. 1988. - Vol. 170. - №6. - P. 2480-2484.

149. Sasakawa C., Kamata K., Sakai T. et al. Molecular alteration of the 140-megadalton plasmid associated with loss of virulence and Congo red binding activity in Shigella flexneri // Infect. Immun. 1986. - Vol. 51. - №2. - P. 470-475.

150. Sasakawa C., Komatsu R., Tobe Т., et al. Eight genes in region 5 that from an operon are essential for invasion of Epithelial cells by Shigella flexneri 2a // J. Bacteriol. 1993. - Vol.175. - P. 2334-2346.

151. Schuch R., Maurelli A.T. Virulence plasmid instability in Shigella flexneri 2a is induced by virulence gene expression // Infect. Immun. 1997. - Vol. 65.-№9.-P. 3686-3692.

152. Sethabutr O., Venkatesan M., Murphy G.S. et al. Detection of Shigellae and enteroinvasive Escherichia coli by amplification of the invasion plasmid antigen H DNA sequence in patients with dysentery // J. Infect. Dis. 1993. -Vol. 167.-№2.-P. 458-461.

153. Sethabutr O., Venkatesan M., Yam S. et al. Detection of PCR products of the ipaH gene from Shigella and enteroinvasive Escherichia coli by enzyme linked immunosorbent assay // Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 2000. - Vol. 37. -№1. - P. 11-16.

154. Sharma K., Rishi P., Grewal J.S., Ram S., Tiwari R.P. Correlation between Congo red binding and contact haemolysin production in Shigella species // Microbios. 2001. - Vol. 106. - №413. - P. 31-38.

155. Small P.L., Falkow S. Development of DNA probe for the virulence plasmid of Shigella ssp. and enteroinvasive Escherichia coli // Microbiol. -1986. American Society for Microbiology, Washington D.C. - P. 121-124.

156. Spierings G., Ockhuijsen C., Hofstra H., Tommassen J. Polymerase chain reaction for the specific detection of Escherichia coli/Shigella // Res. Microbiol. 1993. - Vol. 144. - №7. - P. 557-564.

157. Szakal D., Gado I., Pal T. A colony blot immunoassay to detect enteroinvasive Escherichia coli and Shigella in water samples // J. Appl.

158. Microbiol. 2001. - Vol. 90. - №2. - P. 229-236.

159. Theron J., Morar D., Du Preez M. et al. A sensitive seminested PCR method for the detection of Shigella in spiked environmental water samples // Water Res. 2001. - Vol. 35. - №4. - P. 869-874.

160. Unkmeir A., Schmidt H. Structural analysis of phage-borne stx genes and their flanking sequences in shiga toxin-producing Escherichia coli and Shigella dysenteriae type 1 strains // Infect. Immun. 2000. - Vol. 68. - №9. -P. 4856-4864.

161. Vantarakis A., Komninou G., Venieri D., Papapetropoulou M. Development of a multiplex PCR detection of Salmonella spp. and Shigella spp. in mussels // Lett. Appl. Microbiol. 2000. - Vol. 31. - №2. - P. 105109.

162. Vargas M., Gascon J., Jimenez De Anta M.T., Vila J. Prevalence of Shigella enterotoxins 1 and 2 among Shigella strains isolated from patients with traveler's diarrhea. // J. Clin. Microbiol. 1999. - Vol. 37. - №11. - P. 3608-3611.

163. Villalobo E., Torres A. PCR for detection of Shigella spp. in mayonnaise // Appl. Environ. Microbiol. 1998. - Vol. 64. - №4. - P. 1242-1245.

164. Wang R.F., Cao W.W., Cerniglia C.E. A universal protocol for PCR detection of 13 species of foodborne pathogens in foods // Appl. Microbiol. -1997. Vol. 83. -№6. - P. 727-736.

165. Wang RF, Cao WW, Cerniglia CE. Phylogenetic analysis and identification of Shigella spp. by molecular probes // Mol Cell Probes. -1997. Vol. 11. - №6. - P. 427-432.

166. Watanabe H., Nakamura A., Timmis K.N. Structural analysis of the virulence plasmid of Shigella ssp. // Ibid. 1995. - Vol. 43. - P. 55.

167. Way J.S., Josephson K.L., Pillai S.D. et al. Specific detection of Salmonella spp. by multiplex polymerase chain reaction // Appl. Environ. Microbiol. 1993. - Vol. 59. - №5. - P. 1473-1479.

168. Wawer C., Ruggeberg H., Meyer G., Muyzer G. A simple and rapid electrophoresis method to detect sequence variation in PCR-amplified DNA fragments // Nucleic Acids Res. 1995. - Vol. 23. - №11. - P.4928-4929.

169. Xu J., Cheng В., Wu Y. A new diarrhea pathogen: entero-SLTs-producing and invasive Escherichia coli was over-looked as normal flora E. coli // Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi. 1994. - Vol. 15. - №6 - P. 333-338.

170. Yavzori M., Cohen D., Wasserlauf R. et al. Identification of Shigella species in stool specimens by DNA amplification of different loci of the Shigella virulence plasmid // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 1994. -Vol. 13. -№3 - P. 232-237.

171. Yavzori M., Uriel N., Porat N. et al. Development of molecular tests for rapid detection of enteropathogens // Harefuah. 2000. - Vol. 138. - №9. -P. 758-762, 805.

172. Ye L.Y, Lan F.H., Zhu Z.Y. et al. Detection of Shigella and enteroinvasive Escherichia coli using polymerase chain reaction // J. Diarrhoeal. Dis. Res. 1993. - Vol. 11. - №1. - P. 38-40.

173. Yokoigawa К., Hirasawa R., Ueno H. et al. Gene cloning and characterization of alanine racemases from Shigella dysenteriae, Shigella boydii, Shigella flexneri, and Shigella sonnei // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001. - Vol. 288. - P. 676-684.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.