Болезни предстательной железы, дифференциальная диагностика и прогнозирование исхода тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.23, кандидат наук Пульбере, Сергей Александрович

• Пульбере, Сергей Александрович
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Пульбере, Сергей Александрович

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О ПАТОГЕНЕЗЕ И ДИАГНОСТИКЕ ОПУХОЛЕЙ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1 Распространенность рака предстательной железы

1.2 Классификация рака предстательной железы

1.3 Атипическая гиперплазия предстательной железы

1.4 Методы диагностики рака предстательной железы

1.5 Биопсия предстательной железы

1.6 Иммуногистохимическое исследование

1.7 Ангиогенез при раке предстательной железы

1.8 Фактор роста эндотелия сосудов и его рецепторы РЬТ-1 и КОЛ

1.9 Воздействие УЕвР на клетки иммунной системы

1.10 Пролиферация белка Кл-67

1.11 Матриксные металлопротеиназы (ММР)

1.12 Тканевые ингибиторы металлопротеаз

ГЛАВА 2. ПРОГРАММА, БАЗА, КОНТИНГЕНТ, МАТЕРИАЛ И МЕДОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Характеристики больных, включенных в исследование

2.2 Морфологическая верификация

2.3 Иммуногистохимическое исследование УЕвР, РЬТ-1 и ЫЖ

2.3.1 Исследование уровней продукции мРНК (3-актина, УБвР, РЬТ-1 и КОЯ методом совмещенной обратной транскрипции иполимеразной цепной реакции

2.3.2 Проведение обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции

2.4 Культивирование клеток

2.5 Иммуногистохимическое исследование металлопротеаз ММР-1, ММР-7,

ингибитора Т1МР 2 и теломерсвязывающего белкового фактора ТЯР1

2.5.1 Выделение общей клеточной РНК

2.5.2 Обратная транскрипция и полимеразная цепная реакция

2.6 Иммуногистохимическое исследование уровня пролиферации Кл-67, продукции метталлопротеазы-9 и ингибитора Т1МР-1

2.6.1 Методика исследования

2.6.2 Системы оценки продукции иммуногистохимических маркеров

2.7 Прогнозирование исхода болезней предстательной железы

2.8 Статистическая обработка полученных результатов исследования

ГЛАВА 3. КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДУЕМЫХ БОЛЬНЫХ

3.1 Клиническая характеристика больных с заболеваниями предстательной железы

3.1.1 Анамнез

3.1.2 Возраст

3.1.3 Сопутствующие заболевания

3.1.4 Жалобы

3.1.5 Лабораторные методы обследования

3.1.6 Пальцевое ректальное исследование

3.1.7 Трансректальное ультразвуковое исследование

3.1.8 Простат-специфический антиген и его фракции

3.1.9 Магнито-резонансная томография

3.2 Биопсия предстательной железы

3.2.1 Пациенты с хроническим простатитом

3.2.2 Пациенты с доброкачественной гиперплазией предстательной железы

3.2.3 Пациенты с доброкачественной гиперплазией предстательной железы и ПИН тяжелой степени

3.2.4 Пациенты с верифицированным РПЖ

3.2.5 Гистологическая характеристика опухолей простаты

3.3 Осложнения биопсии предстательной железы

ГЛАВА 4. ИССЛЕДОВАНИЕ ФАКТОРОВ НЕОАНГИОГЕНЕЗА

4.1 Исследование уровней продукции сосудистого фактора роста и рецепторов к нему FLT-1 и KDR

4.2 Оценка уровней продукции VEGF и рецепторов FLT-1 и KDR в клеточных линиях гормоночувствительного, LNCaP, и гормонорезистентного, DU 145, рака предстательной железы

4.2.1 Исследование продукции ММР-1 у пациентов с заболеваниями предстательной железы

4.2.2 Исследование продукции ММР-7 у пациентов с заболеваниями предстательной железы

4.2.3 Исследование продукции TIMP-2 у пациентов с заболеваниями предстательной железы

4.2.4 Исследование продукции TRF1 у пациентов с заболеваниями предстательной железы

4.3 Экспрессия Ki-67

4.4 Распределение коллагена IV

4.5 Продукция матриксной металлопротеиназы-9

4.6 Распределение TIMP-1 у пациентов с доброкачественными опухолями и аденокарциноме простаты

ГЛАВА 5. ОБОСНОВАНИЕ АЛГОРИТМА ВЕДЕНИЯ ПАЦИЕНТОВ С БОЛЕЗНЯМИ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

ГЛАВА 6. ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ У ПАЦИЕНТОВ С ХП, ДГПЖ, ДГПЖ+ПИН И РПЖ

6.1 Прогнозирование течения заболевания у больных хроническим простатитом

6.2 Прогнозирование течения заболевания у больных доброкачественной гиперплазией предстательной железы

6.3 Прогнозирование течения заболевания у больных доброкачественной гиперплазией предстательной железы и выявленной простатической

интраэпителиальной неоплазии

6.4 Прогнозирование течения заболевания и развития гормонорезистентности у пациентов с аденокарциномой предстательной железы

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Болезни предстательной железы, дифференциальная диагностика и прогнозирование исхода»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы

Болезни предстательной железы являются одной из самых серьезных медицинских проблем среди мужского населения. Хронический простатит, доброкачественная гиперплазия и рак предстательной железы негативно влияют на состояние здоровья и продолжительность жизни мужчин [Кульчавеня Е.В., 2010]. По данным различных авторов, заболеваемость хроническим простатитом в Российской Федерации колеблется от 8 до 35% [Аполихин О.И., 2014]. ХП в 28% случаев становится причиной обращений мужчин к урологу; у 57% пациентов хронический простатит сочетается с доброкачественной гиперплазией [Fibbi В., 2010; Bastian P.J., 2010]. Это самое частое заболевание урологического профиля у мужчин до 50 лет и третье по частоте — у мужчин старше 50 лет после доброкачественной гиперплазии и рака предстательной железы. Гистологические признаки ДГПЖ отмечаются у 50% мужчин в возрасте 60 лет и в 90% случаев к 80 годам. По данным М.А. Devies (2011), очаги злокачественного перерождения предстательной железы без клинического проявления выявляются у 20-30% мужчин старше 50 и у 80% мужчин старше 80 лет.

На сегодняшний день новообразованиям предстательной железы придается большое внимание, как одной из наиболее актуальных проблем современной онкологии. В США и ряде стран Европы РПЖ лидирует в структуре онкологической заболеваемости у мужчин. В России в 2014 году зафиксировано более 29 тысяч новых случаев злокачественного новообразования предстательной железы, при этом прирост заболеваемости составил 8,68%. Несмотря на постоянные попытки улучшения диагностики данного новообразования и внедрение в обследование пациентов различных фракций простат-специфического антигена, применения магнито-резонансной томографии диагностики поздних стадий и смертность от рака предстательной железы в России остаются высокими [Аполихин О.И., 2014]. Так, в 2013 году от данного

нообразования в Российской Федерации умерли около 11 тысяч больных. Так как у большинства пациентов изначально диагностируют местнораспространенные (38,5%) и метастатические (23,2%) формы опухоли, смертность на первом году с момента установления диагноза, составляет 27,5% [Каприн А.Д., 2014]. Таким образом, одной из приорететных задач остается выявление этого новообразования на стадии локализованного процесса. Основная проблема ранней диагностики -это достоверная дифференциальная диагностика злокачественных новообразований с доброкачественными, предраковыми и воспалительными заболеваниями предстательной железы. Также, частое сочетание вышеуказанных процессов в предстательной железе снижает чувствительность, специфичность и диагностическую точность рутинных методов обследования мужчин, таких как простат-специфический антиген и его фракции, пальцевое ректальное обследование простаты, трансректального ультразвукового исследования и, как заключительного этапа, мультифокальной биопсии предстательной железы.

Внедрение и развитие различных методов иммунногистохимических исследований дополняет рутинные методы диагностики опухолей предстательной железы новыми факторами, базирующимися на результатах мультифокальной биопсии предстательной железы. Продолжается поиск диагностически значимых молекулярных маркеров при аденокарциноме предстательной железы,, обладающих высокой информативностью с целью уменьшения количества биопсий предстательной железы и, следовательно, уменьшения частоты осложнений после них, а также проводятся исследования, доказывающие развитие и прогрессирование рака предстательной железы при участии различных факторов роста.

Процесс образования новых кровеносных сосудов в органе наблюдается в здоровой и пораженной воспалительным и опухолевым процессом предстательной железе. В физиологических условиях процессы ангиогенеза протекают с умеренной интенсивностью и активизируются только в случае регенерации повреждённых тканей, канализации тромбов, ликвидации воспалительных очагов, образования рубца и других восстановительных

процессов. При этом клетки эндотелия сосудов выделяют активные субстанции, которые обладают функцией паракринных нейромедиаторов роста клеток и в случае аденокарциномы простаты способствуют прогрессированию онкологического процесса [WestphalF., 1993].

В настоящее время многочисленные исследования указывают на то, что доминирующим фактором опухолевой трансформации является неоангиогенез и высказывается предположение о 2-х этапном развитии онкопроцесса. Первоначально при генетическом предрасположении под влиянием канцерогенов или различных факторов зарождается опухоль, которая на ранних стадиях лишена сосудов, поэтому питание новообразования осуществляется посредством диффузии. Питание опухоли посредством диффузии возможно только лишь при

о

размерах не более 0,1-0,2 см и только в случае формирования новой сосудистой сети новообразование активно прогрессирует. Происходит прорастание опухоли в соседние ткани и метастазирование. Следовательно, вторая стадия - это формирование новых сосудов и прогрессия опухолевого роста. Стенка сосудов состоит из двух основных типов клеток: клеток эндотелия и клеток, формирующих стенку. Возникновение и созревание новых сосудов представляют собой крайне сложные и скоординированные процессы, требующие последовательной активации целой серии рецепторов и множества лигандов, тонко отрегулированного баланса между множеством стимулирующих и ингибирующих сигналов. В ходе ангиогенеза эндотелиоциты выходят из свойственного им состояния покоя, при этом скорость удвоения их популяции увеличивается более чем в сотню раз и начинают делиться, образуя эндотелиальную «почку», которая прорывает базальную мембрану и внедряется в соединительную ткань. Активацию эндотелиальных клеток и обеспечивают факторы роста, которые образуются в опухоли и в самих эндотелиальных клетках, а также компоненты внеклеточного матрикса. Иннактивация этих факторов возвращает эндотелиальные клетки в состояние покоя [Dvorak H.F., 2002].

Ряд факторов участвует в опухолевом ангиогенезе и одним из важных является фактор роста эндотелия сосудов (VEGF). Связываясь после секреции опухолью с рецепторами на близлежащих эндотелиацитах, VEGF стимулирует рост новых сосудов. Существует два различных, но структурно сходных рецептора VEGF на поверхности эндотелиальных клеток сосудов - рецептор FLT-1 (VEGFR 1 типа) и рецептор KDR (VEGFR 2 типа). Рецептор KDR опосредствует пролиферацию клеток эндотелия сосудов, a FLT-1 связан с дифференцировкой эндотелиоцитов и формированием капилляра. По мере прогрессирования опухолевого ангиогенеза, новые капилляры, сохраняющие признаки незрелости даже по мере своего роста, под влиянием VEGF прорастают в опухоль и поддерживают ее рост и развитие, а, следовательно, прогрессирование онкопроцесса и метастазирование.

Метастазирование на ранних или поздних стадиях зависит от степени васкуляризации опухоли [Bergers G., 2003]. При метастазировании гематогенным путем опухолевым клеткам необходимо прикрепиться к эндотелиальным клеткам, мигрировать в просвет сосуда, выжить в циркулирующей крови, фиксироваться в какой-либо отдаленной ткани и образовать там колонию. Высокоангиогенные первичные опухоли с большой внутриопухолевой плотностью сосудов обладают большей способностью сформировать в отдаленном органе ангиогенный клон, который при благоприятных условиях формирует метастаз [Bhavsar Т., 2013]. Несмотря на многочисленные исследования, на сегодняшний момент нет четких критериев, выявляющих злокачественные опухоли с высоким потенциалом к метастазированию, поскольку показатель инвазивного роста и метастазирования злокачественных клеток характеризуются их способностью деградировать составляющие межклеточного матрикса - базальные мембраны и межтканевую строму, состоящую из различных структурных белковых компонентов: коллагенов, эластинов и др. Разрушение базальной мембраны и продвижение по межклеточному матриксу связаны с секрецией протеалитических ферментов. Металлопротеиназы преимущественно секретируется клетками в форме не активных ферментов, в обычных условиях в тканях обнаруживаются

незначительные количества металлопротеиназ. В случае их активации происходит протеолитическое разложение окружающих клетку белков [Березин А.Е., 2011]. В физиологических условиях существуют различные биологические механизмы по предотвращению протеолиза тканей, вызванного активацией металлопротеаз, такие как секреция клетками стромы тканевых ингибиторов металлопротеаз или TIMP. Это белки, способные опосредованно нековалентными комплексами со многими членами семейства матриксных металлопротеаз инактивировать их [Аполихин О.И., 2014].

Таким образом, до настоящего времени вопросы молекулярных механизмов инвазивного роста аденокарциномы предстательной железы и роли в них матриксных металлопротеиназ, их ингибиторов остаются малоизученными. В настоящей работе с помощью различных иммуногистохимических методик мы провели исследование продукции сосудистого фактора роста эндотелиоцитов (VEGF), рецепторов KDR и FLT-1, маркера пролиферации Ki-67, коллагена IV -основного компонента базальной мембраны желез, матриксных металлопротениназ 1, 7 и 9 типов, ингибиторов металлопротеаз TIMP-1 и TIMP-2, теломерсвязывающего белкового фактора TRIF-1 в неизмененных клетках секреторного эпителия при доброкачественной гиперплазии предстательной железы и хроническом простатите, при интраэпителиальной неоплазии и атипических клетках аденокарциномы простаты различных градаций по шкале Глисона с целью изучения молекулярных механизмов инвазивного роста рака предстательной железы.

Степень научной разработанности темы Комплексный характер исследования обусловил привлечение нескольких групп источников, на фоне которых сформулированы выводы и основные научные положения диссертации.

Проблеме дифференциальной диагностики РГОК с использованием рутинных методов обследования, таких как пальцевое ректальное исследование, ТРУЗИ, определение уровня ПСА и его фракций, магнито-резонансная томография (МРТ), а также информативности первичных биопсий простаты

посвящены исследования российских специалистов Велиева Е.И., Каприна А.Д., Петрова С.Б., Пушкаря Д.Ю., Черенкова К.Г. Кроме того, в них отражены сложности выявления аденокарциномы предстательной железы на стадии локализованного процесса, особенно при ее сочетании с ДГПЖ и ХП. Результаты оценки диагностической и прогностической эффективности того или иного молекулярного маркера при опухолях различных локализаций, в том числе и предстательной железы, приводятся в работах российских исследователей Кушлинского Н.Е., Хвостовой Е.П., Лисицкой К.В.

Среди диссертационных исследований последних лет, посвященных дифференциальной диагностике заболеваний предстательной железы, можно назвать работы Попкова В.М., Шибаева А.Н., Измайлова Р.И. В большинстве из них раскрываются вопросы, посвященные верификации новообразований предстательной железы на стадии локализованного процесса.

В настоящее время актуальной проблемой урологии, имеющей прикладное, социальное и экономическое значение, является не усовершенствование способов применения каждого маркера в отдельности, а разработка эффективного комплекса доступных маркеров болезней предстательной железы, способного достаточно точно отразить характеристики воспалительного, доброкачественного и злокачественного процессов, выделить контингента риска рака предстательной железы, уменьшить число биопсий предстательной железы, тем самым снизив затраты на обследование и лечение, прогнозировать и улучшить исход заболевания. Все вышесказанное определило актуальность и выбор темы исследования.

Цель исследования

Повышение эффективности диагностики и улучшение исходов заболеваний предстательной железы.

Задачи исследования

1. Оценить диагностическую ценность общепринятых методов обследования пациентов с воспалительными, доброкачественными, предраковыми и злокачественными заболеваниями предстательной железы;

2. Оценить информативность исследования продукции фактора роста эндотелия сосудов человека (УЕОБ) и рецепторов к нему (К1Ж, РЬТ-1), изолированно и в соотношении друг с другом, у пациентов изучаемой когорты;

3. Расширить представления о роли матриксных металлопротеиназ в патогенезе воспалительных, доброкачественных, предраковых и злокачественных заболеваний предстательной железы;

4. Изучить особенности продукции теломерсвязывающего белкового фактора ТКПМ, распределение коллагена IV, пролиферативную активность белка Кл-67 и их диагностическое значение у пациентов с различными заболеваниями предстательной железы;

5. Изучить особенности продукции ингибиторов металлопротеиназ Т1МР-1 и Т1МР-2 и их диагностическое значение у пациентов изучаемой когорты;

6. Изучить зависимость продукции металлопротеиназы 9 типа от ингибитора Т1МР-1 у пациентов с различными заболеваниями предстательной железы;

7. Уточнить критерии оценки гистологического материала после биопсии предстательной железы;

8. Выявить прогностические критерии развития гормонорезистентности аденокарциномы предстательной железы;

9. Разработать алгоритм введения пациентов с болезнями предстательной железы.

Научная новизна исследования

На основе концептуального осмысления результатов инструментальных,

лабораторных и иммунногистохимических исследований расширены представления о патогенезе ХП, ДГПЖ, простатической интраэпителиальной неоплазии (ПИН) и аденокарциномы предстательной железы. Впервые определена взаимосвязь между металлопротеиназой 9 типа (ММР-9) и ее ингибитором Т1МР-1 у пациентов с доброкачественными и злокачественными новообразованиями предстательной железы.

Сформулирована и доказана гипотеза о возможности использования в качестве дополнительных критериев верификации и прогнозирования течения болезней предстательной железы таких маркеров, как соотношение рецепторов пролиферации и рецепторов дифференцировки капилляров К1ЖуТЪТ-1, уровни продукции ММР-9 и Т1МР-1, белок пролиферации К1-67 и показатель распределения коллагена IV.

Получены приоритетные данные о продукции рецепторов пролиферации КОК и рецепторов дифференцировки капилляров БЫМ в биоптатах пациентов с различными болезнями предстательной железы. В результате интегральной оценки уровней продукции Л^ЕОР и рецепторов к нему (К1Ж, БЫМ), металлопротеиназ 1, 7 и 9 типов, ингибиторов металлопротеиназ Т1МР-1 и Т1МР-2, теломерсвязывающего белкового фактора ТКПМ, белка Кл-67 и показателя распределения коллагена IV предложены диагностические критерии воспалительных, доброкачественных и злокачественных болезней предстательной железы. Впервые определены диагностическая и прогностическая ценность вышеуказанных иммуногистохимических показателей у пациентов с верифицированной ПИН.

Разработан и научно обоснован алгоритм введения пациентов с болезнями предстательной железы.

Теоретическая и практическая значимость работы

Внедрение в клиническую урологию результатов анализа уровней продукции VEGF и рецепторов к нему (К1Ж, РЬТ-1), взаимосвязи металлопротеиназ и их ингибиторов, роли теломерсвязывающего белкового фактора ТШР-1, белка Кл-67 и диагностической ценности показателя распределения коллагена IV позволяют расширить возможности верификации и дифференцировки воспалительных, доброкачественных, предраковых и злокачественных новообразований предстательной железы, а на основе алгоритмированного подхода, в сочетании с применяемыми в настоящее время рутинными методами (пальцевое ректальное исследование, ТРУЗИ, определение уровня ПСА в сыворотке крови) способствуют повышению эффективности

дифференциальной диагностики болезней предстательной железы при первичной биопсии, снижению кратности мультифокальных биопсий предстательной железы и осложнений после них.

Установлено, что гормонорезистентность при РПЖ ассоциирована с повышением в 1,6 раз пролиферативных процессов в эндотелиоцитах, снижением в 2 раза продукции \AEGF, снижением в 1,7 раз продукции ММР 9 типа, снижением в 2,5 и более раз продукции ингибитора металлопротеиназ Т1МР-1 и увеличением в 1,6 раз продукции теломерсвязывающего белкового фактора ТМР-1 (р<0,05).

Разработана и внедрена в практическое здравоохранение диагностическая шкала оценки соотношения КОК/РЬТ-1, позволяющая отнести пациента в категоршо «ХП», «ДГПЖ», «ПИН» и «РПЖ».

Основные положения, выносимые на защиту

1. Диагностическую ценность рутинного комплексного обследования

пациентов с болезнями предстательной железы определяют возможности метода определения простат-специфического антигена (чувствительность 83,1%), обладающего низкой специфичностью (20,8%), магнито-резонансной томографии (чувствительность - 74,1%; специфичность - 72,3%) и последующей первичной биопсии (ложноотрицательные результаты - 23,4%). Неиспользованным резервом повышения эффективности диагностики и улучшения исходов болезней предстательной железы является внедрение в клиническую практику комплекса диагностических иммуногистохимических маркеров, таких как соотношение уровня продукции рецепторов пролиферации и рецепторов дифференцировки эндотелиоцитов (КОК/РЬТ-1), белок Кл-67; распределение коллагеновых волокон вокруг клеток; матриксная металлопротеиназа 9 типа и ее ингибитор Т1МР-1, который позволяет увеличить точность диагностики до 95%.

2. Методом дифференциальной диагностики болезней предстательной железы с информативностью 95% является исследование соотношения уровня продукции рецепторов пролиферации и рецепторов дифференцировки эндотелиоцитов Ю1Ж/РЬТ-1, значение которого имеет линейную зависимость от

интенсивности процессов неоангиогенеза. Разработанная диагностическая шкала позволяет разграничить болезни предстательной железы: 2,36-2,55 - хронический простатит; 2,56-2,7 - доброкачественная гиперплазия предстательной железы; 2,85,0 - простатическая интраэпителиальная неоплазия; 5,1 и более - рак предстательной железы.

3. Наблюдаемое при хроническом простатите увеличение продукции металлопротеиназ 1 и 7 типов и теломерсвязывающего белкового фактора ТШР-1 не имеет клинического значения. Доброкачественная гиперплазия предстательной железы характеризуется высокой продукцией матриксной металлопротеиназы 9 типа (интенсивность 3 балла) при отсутствии пролиферативной активности секреторного клеточного слоя (Кл-67 менее 3,24+0,61%) и деградации коллагена IV базальных мембран, что связано с компенсаторным повышением активности ингибитора матриксных металлопротеиназ ТТМР-1 (интенсивность 3 балла). Наличие очагов простатической интраэпителиальной неоплазии ассоциируется с увеличением интенсивности неоангиогенеза, что выражается в росте соотношения уровня продукции КХЖ/РЬТ-1. Увеличение этого показателя по диагностической шкале более 2,7 позволяет выделить среди пациентов с доброкачественной гиперплазией предстательной железы группы риска, требующие динамического наблюдения, независимо от результатов биопсии.

4. При аденокарциноме предстательной железы по мере нарастания неопластических изменений достоверно увеличивается показатель продукции белка Кь-67, отражающий пролиферативную активность секреторного клеточного слоя (с 5,3+1,1% до 17,2+9,4%); с увеличением числа Глисона более 3-й градации коллагеновые волокна вокруг опухолевых клеток полностью исчезают, что является достоверным критерием разграничения доброкачественных и злокачественных опухолей предстательной железы (р<0,05). Продукция матриксной металлопротеиназы 9 типа в аденокарциномах значительно снижена, и разрушение коллагена IV базальной мембраны железистых структур и стромы происходит за счет прогрессивного (до интенсивности в 0,8+0,4 балла по мере нарастания анапластических изменений) снижения выработки ингибитора

матриксных металлопротеиназ Т1МР-1 (р<0,05). В качестве скринингового маркера рака предстательной железы может быть использован метод определения соотношения уровня продукции К1Ж/РЬТ-1, при увеличении этого показателя по диагностической шкале выше 5,0 пациент входит в группу высокого риска (чувствительность - 94,7%; специфичность - 89,3%).

5. Алгоритм ведения пациентов с болезнями предстательной железы, наряду с рутинными методами обследования, должен включать комплекс диагностических иммуногистохимических методик, таких как определение соотношения КХЖ/тТ-1 с оценкой его по предложенной диагностической шкале, уровень продукции белка Кл-67; оценка распределения коллагеновых волокон вокруг клеток; уровни продукции металлопротеиназы 9 типа и ингибитора матриксных металлопротеиназ Т1МР-1. Внедрение предложенного алгоритмированного подхода позволяет увеличить эффективность диагностики болезней предстательной железы до 95%, выделить контингенты риска предраковых заболеваний и рака предстательной железы, уменьшить кратность необоснованных повторных биопсий и повторных госпитализаций, снизить риск осложнений, повысить выявляемость рака предстательной железы на стадии локализованного процесса, улучшить исходы болезней предстательной железы и качество жизни больных.

Апробация работы, внедрение результатов исследования и личный

вклад автора

Основные положения диссертации доложены, обсуждены и одобрены на V конгрессе Российского общества онкоурологов (Москва, 2010); II Международной студенческой научной конференции с участием молодых ученых "Клинические и теоретические аспекты современной медицины" (Москва, 2010); Московском обществе урологов (Москва, 2011); XII конгрессе Российского общества урологов (Москва, 2012); XI Всемирном конгрессе «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва, 2012); XIV конгрессе Российского общества урологов (Москва, 2014); совместном заседании кафедры урологии и оперативной нефрологии с курсом

онкоурологии РУДН и сотрудников урологических отделений ГКБ №29 и ГКБ №64 (май, 2015).

Алгоритм ведения пациентов с болезнями предстательной железы с использованием ИГХ маркеров внедрен в практику работы урологического отделения ГБУЗ ГКБ №29 им. Н.Э Баумана ДЗ г. Москвы.

Результаты исследования внедрены в клиническую практику и учебный процесс вузов на додипломном и последипломном этапах в виде методических рекомендаций для студентов и врачей «Современные методы диагностики заболеваний предстательной железы».

Все научные положения, представленные в работе, автором получены лично. Автором лично были обследованы и прокурированы все пациенты, давшие согласие на участие в исследовании.

По теме диссертации опубликовано 39 печатных работ, из них 15 - в изданиях, рекомендуемых ВАК РФ.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 266 листах машинописного текста, состоит из введения, 6 глав, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций и указателя литературы, включающего в себя 87 отечественных источников и 153 зарубежных источника. Работа иллюстрирована 78 рисунками и 18 таблицами.

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О ПАТОГЕНЕЗЕ И ДИАГНОСТИКЕ ОПУХОЛЕЙ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ (ОБЗОР

ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1 Распространенность рака предстательной железы

Наиболее актуальными проблемами в современной урологии на сегодняшний день являются раннее выявление, точная дифференциальная диагностика и последующее лечение болезней предстательной железы. Также, одним из особо важных вопросов является рак предстательной железы — новообразование, которое в отчетах национальных медицинских комитетов всегда занимает высокие позиции [Каприн А.Д., 2014].

По статистике, в США и Европе ежегодно умирают около 100 тысяч мужчин в возрасте до 75 лет только от этого вида злокачественных опухолей, а в странах Западной Европы и США рак предстательной железы занимает третью часть от всех злокачественных раковых заболеваний у мужчин [Ahmedin J., 2011; Ecke Т.Н., 2012; Esserman L.J., 2013]. Так, в статистических отчетах сказано, что в 2012 году у 255 тысяч мужчин в Соединенных Штатах Америки и у 241 тысяч мужчин в Европе впервые обнаружен рак предстательной железы, который и стал причиной смерти около 26 тысяч мужчин в США и более 72 тысяч мужчин в Европе в 2012 году. Научно доказано, что риск развития клинически значимого рака предстательной железы у американских мужчин в течение жизни составляет приблизительно 12%, а смертность от него у 3% мужчин [European Urology, 2014; Аляев Ю.Г., 2015].

Рак предстательной железы в России находится на 4-м месте после рака желудка, легкого и кожи [Аксель Е.М., 2012]. Количество вновь обнаруженных случаев достигло 11,9 тысяч, также наблюдается увеличение абсолютного числа заболевших в 2012 г. (по сравнению с 2002 г.), что составило 108%. Число

пациентов, страдающих раком предстательной железы, состоящих на учете в специализированных учреждениях, достигло 48,9 тыс. (34,5 на 100 тыс. населения) [Murphy D.G., 2014]. Таким образом, ежегодно в мире умирает от рака предстательной железы более 210 тысяч мужчин, в России более 7 тысяч. Смертность от рака предстательной железы находится на 5-м месте у мужчин до 70 лет и на 4-м - у мужчин 70 лет и старше. Высокий летальный исход при этом заболевании связан главным образом с развитием без выраженной симптоматики и прогрессированием опухолевого процесса [European Union, 2010; Ledesma М.С., 2011; Чиссов В.И., 2011].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Пульбере, Сергей Александрович, 2015 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абдуллин, И. И. Лапароскопическая радикальная простатэктомия у пациентов после трансуретральной резекции предстательной железы [Текст] / И. И. Абдуллин // Медицинский вестник Башкортостана. - 2013. - С. 434-476.

2. Авдошин, В. П. Прогностическое значение экспрессии иммуногистохимических маркеров К1 67, ММР 9 и коллагена IV у больных папиллярным уротелиальным раком мочевого пузыря [Текст] / В. П. Авдошин, И. И. Бабиченко, Е. В. Котельникова // Онкоурология. - 2011. - №3. - С. 66-70.

3. Амбулаторно-поликлиническая онкология : руководство для врачей [Текст] / Ш. X. Ганцев, В. В. Старинский, И. Р. Рахматуллина, Л. Н. Кудряшова, Р. 3. Султанов, Д. Д. Сакаева. - 2-е изд., перераб. и доп. - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2014.-С 265-304.

4. Анализ уронефрологической заболеваемости и смертности в Российской Федерации за десятилетний период (2002-2012 гг.) по данным официальной статистики [Текст] / О. И. Аполихин, А. В. Сивков, Н. Г. Москалева, Т. В. Солнцева, В. А. Комарова // Экспериментальная и клиническая урология. -2014.-№2.-С. 4-12.

5. Березин, А. Е. Регуляторы активности матриксных металлопротеиназ как новые биологические маркеры кардиоваскулярного ремоделирования: обзор литературы [Текст] / А. Е. Березин // УкраТнський медичний часопис. - 2011. -№ 1. - С. 36-43.

6. Брахитерапия у пациентов после трансуретральной резекции предстательной железы [Текст] / А. В. Зырянов, О. В. Журавлев, А. А. Баженов, А. В. Пономарев, Д. В. Тевс, А. В. Машковцев, Р. Ю. Коваленко, О. К. Узбеков // Уральский медицинский журнал. - 2012. - № 3. - С. 53-55.

7. Влияние степени дифференцировки рака предстательной железы на отдаленные результаты лечения [Текст] / С. А. Иванов, А. Д. Каприн,

С. В. Фастовец, В. В. Сосновский // Вестник Российского Университета Дружбы Народов. - 2010. - С 34-87. - (Медицина).

8. Возрастные особенности заболеваемости мужчин болезнями мочеполовой системы [Текст] / И. А. Камаев, Ф. А. Севрюков, Ю. А. Елина, О. Ю. Малинина, М. Н. Гриб, Е. А. Переверзенцев //Медицинский альманах. -2011.-№4(17). -С. 21-23.

9. Герштейн, Е. С. Клинические перспективы исследования ассоциированных с опухолью протеаз и их тканевых ингибиторов у онкологических больных [Текст] / Е. С. Герштейн, Н. Е. Кушлинский // Вестник Российской академии медицинских наук. - 2013. - № 5. - С. 16-27.

10. Герштейн, Е. С. Факторы роста, их рецепторы и нижележащие сигнальные белки: от эксперимента к клинике [Текст] / Е. С. Герштейн, Н. Е. Кушлинский // Успехи молекулярной онкологии. - 2014. - № 1. - С. 27-35.

11. Глушаков, Р. И. Роль тиреоидных гормонов в регуляции ангиогенеза, клеточной пролиферации и миграции [Текст] / Р. И. Глушаков, С. Н. Прошин, Н. И. Тапильская // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. - 2011. -№ 4. - С. 26-33.

12. Горбунова, Е. Н. Ультразвуковой критерий толщины периферической зоны простаты как метод предоперационного прогнозирования рака простаты и простатических интраэпителиальных неоплазий [Текст] / Е. Н. Горбунова, В. Н. Крупин // Медицинский вестник Башкортостана. - 2011. - С 40-56.

13. Горбунова, Е. Н. Хроническое воспаление и фиброз как факторы риска простатических интраэпителиальных неоплазий и рака предстательной железы [Текст] / Е. Н. Горбунова, Д. А. Давыдова, В. Н. Крупин // Современные технологии в медицине. - 2011. - С. 39-65.

14. Гориловский, Л. М. Доброкачественная гиперплазия предстательной железы - актуальная проблема гериатрической урологии [Текст] / Л. М. Гориловский, М. Б. Зингеренко // Consilium medicum. - 2003. - Т. 5. - №12. -С. 732-735.

15. Громов, А. Факторы, снижающие эффективность ультразвуковой диагностики рака предстательной железы [Текст] / А. Громов // Материалы 3-й Всероссийской научной конференции с участием стран СНГ "Актуальные вопросы лечения онкоурологических заболеваний". - М. - 1999. - С. 69-70.

16. Дадашев, Э. О. Зоновая продукция ПСА и оценка ее роли в диагностике локализованного рака предстательной железы [Текст] / Э. О. Дадашев, Д. В. Фурашов, И. В. Селюжицкий // Материалы 3-й Всероссийской научной конференции с участием стран СНГ "Актуальные вопросы лечения онкоурологических заболеваний". - М. - 1999. - С. 70-71.

17. Диагностика местного рецидива рака простаты после радикальной простатэктомии: нативная эндоректальная МРТ и эндоректальная МРТ с динамическим контрастированием [Текст] / П. В. Глыбочко, Ю. Г. Аляев, С. К. Терновой, Н. А. Григорьев, Е. А. Безруков, С. П. Морозов, Э. JI. Лачинов, Г. А. Мартиросян // Медицинский вестник Башкортостана. - 2013. - С 116-139.

18. Динамика патологических процессов у пациентов с заболеваниями предстательной железы, тактика ведения [Текст] / Е. Н. Горбунова, Д. А. Давыдова, В. Н. Крупин, А. А. Артифексова // Современные технологии в медицине. - 2011. - С. 26-78.

19. Доброкачественные образования предстательной железы, имитирующие аденокарциному [Текст] / М. В. Ковылина, Е. А. Прилепская, А. В. Говоров, В. В. Дьяков, К. Б. Колонтарев, А. О. Васильев, А. В. Сидоренков, П. И. Раснер, А. В. Глотов, Д. Ю. Пушкарь, В. Г. Никитаев, А. Н. Проничев // Урология. - 2014.- № 6. - С. 51-56.

20. Долгов, Ю. А. Статистическое моделирование [Текст] : учебник для вузов / Ю. А. Долгов. - Тирасполь : РИО ПГУ, 2011. - С. 183-192.

21. Елина, Ю. А. Медико-социальная характеристика больных с заболеваниями предстательной железы и организационные основы профилактики: автореф. дис. ... канд. мед. наук : 14.02.02 / Елина Юлия Александровна. - Нижний Новгород, 2012. - 24 с.

22. Заболевания предстательной железы. Диагностическая модель и метод классификации состояний [Текст] / И. М. Антонян, М. Л. Угрюмов, А. И. Зеленский, В. А. Горячая, В. Ю. Белов, Т. А. Налбандян, Ф.Г. Мошель // Научные ведомости белгородского государственного университета. - 2014. -С. 38-59. - (Медицина).

23. Злокачественные новообразования в России в 2010 году (заболеваемость и смертность) / Под ред. В. И. Чиссова, В. В. Старинского, Г. В. Петровой. - М. : ФГУ «МНИОИ им. П.А. Герцена Росмедтехнологий», 2011.

- 256 с.

24. Злокачественные новообразования в России в 2011 году (заболеваемость и смертность) / Под ред. В. И. Чиссова, В. В. Старинского, Г. В. Петровой. - М. : ФГУ «МНИОИ им. П.А. Герцена» Минздрава России, 2013.

- 289 с.

25. Злокачественные новообразования в России в 2012 году (заболеваемость и смертность) / Под ред. А. Д. Каприна, В. В. Старинского, Г. В. Петровой. - М. : [б.и.], - 2014. - С. 10-125.

26. Значение магнитно-резонансной томографии в диагностике и оценке распространенности при раке предстательной железы [Текст] / М. Г. Тухбатуллин, М. М. Насруллаев, М. Н. Насруллаев, А. Р. Абашев // Практическая медицина.. -2012. - С. 34-59.

27. Измайлов, Р. И. Оптимизация лечения больных доброкачественной гиперплазией предстательной железы больших размеров : автореф. дис. ... канд. мед. наук : 14.01.23 / Измайлов Ринат Ильясович. - Саратов, 2010. - 20 с.

28. Изучение белка <^-1 при раке простаты в образцах тканей, в культивируемых клетках и в сыворотке крови больных [Текст] / К. В. Лисицкая, Л. С. Еремина, А. В. Иванов, М. А. Ковалева, В. Е. Охриц, И. Ю. Торопыгин, Л. И. Ковалев, С. С. Шишкин // Биомедицинская химия. - 2011. - Т. 57, - № 4. - С. 392-401.

29. Изучение белков сЦ-1, хроматогранина а и Ьс1-2 у больных с раком простаты и доброкачественной гиперплазией предстательной железы [Текст] /

В. Е. Охриц, О. Б. Лоран, Е. И. Велиев, К. В. Лисицкая, Л. С. Еремина, М. А. Ковалева, Л. И. Ковалев, С. С. Шишкин, А. X. Обейд // Медицинский вестник Башкортостана. - 2014. - Т. 6, - № 2. - С. 44-90.

30. Изучение химиопрофилактических эффектов селена на комбинированной модели канцерогенеза предстательной железы [Текст] / Я. Г. Муразов, В. Г. Беспалов, А. В. Панченко, О. Ф. Чепик // Профилактическая и клиническая медицина. - 2011. - № 3 (40). - С. 115-118.

31. Инцидентальный рак простаты: распространенность и подходы к лечению [Текст] / Л. В. Марисов, А. 3. Винаров, Ю. Г. Аляев, Г. А. Мартиросян // Медицинский вестник Башкортостана. - 2013. - С. 205-301.

32. Исследование знаний пациентов по выявлению рака простаты [Текст] / П. И. Раснер, Д. Ю. Пушкарь, А. Ю. Цуканов, Ю. А. Куприянов, А. А. Калашян // Урология. - 2010. - № 2. - С. 48.

33. Исследование уровня повреждений ДНК в лимфоцитах периферической крови больных раком простаты [Текст] / Н. Ю. Воробьева, М. М. Антощина, И. И. Пелевина, А. Н. Осипов, В. К. Боженко // Вестник Российского научного центра рентгенорадиологии Минздрава России. - 2012. - С. 37-48.

34. Качество жизни пациентов старше 70 лет, перенесших радикальное1 оперативное лечение по поводу рака простаты [Текст] / А. В. Бормотин, И. А. Рева, В. В. Дьяков, А. Н. Берников, Д. Ю. Пушкарь // Онкоурология. - 2014. -№1.-С. 58-63.

35. Клинические рекомендации по диагностике и лечению больных раком предстательной железы [Текст] / Б. Я. Алексеев, А. Д. Каприн, В. Б. Матвеев, Д. А. Носов, К. М. Нюшко, А. В. Петровский, П. В. Свиридов // Общероссийский союз общественных объединений ассоциация онкологов России. - 2013. - С. 307608.

36. Клиническое стадирование рака предстательной железы при ее первичной биопсии [Текст] / С. Б. Петров, С. А. Ракул, А. В. Живов, Р. А. Елоев, А. Ю. Плеханов, П. В. Харченко // Онкоурология. - 2010. - № 2. - С. 45-48.

37. Комбинирование трансуретральной резекции и ЫАл-аблации простаты при лечении локализованного рака [Текст] / В. М. Попков, Р. Н. Фомкин, Б, И. Блюмберг, Т. В. Шатылко, Л. Н. Седова, Э. П. Абрамова // Саратовский научно-медицинский журнал. - 2014. - С. 56-76.

38. Котляров, П. М. Лучевая диагностика рака предстательной железы [Текст] / П. М. Котляров // Российский онкологический журнал. - 2008. - № 2. - С. 49-53.

39. Кульчавеня, Е. В. Простатит. Диагностика и лечение [Текст] / Е. В. Кульчавеня, А. Н. Неймарк. - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2010. - 250 с.

40. Кушлинский, Н. Е. Матриксные металлопротеиназы и компоненты системы активации плазминогена в патогенезе и клиническом течении рака толстой кишки [Текст] / Н. Е. Кушлинский, Е. С. Герштейн // Патогенез. - 2013. -Т. 11, № 3. - С. 4-12.

41. Кушлинский, Н. Е. Молекулярные и клеточные маркеры пролиферации, дифференцировки, метастазирования и неоангиогенеза при раке предстательной железы [Текст] / Н. Е. Кушлинский // Избранные главы гериатрической урологии / Под ред. Л. М. Гориловского. - М. : Ньюдиамед, 2000. -С. 227-273.

42. Кушлинский, Н. Е. Рак предстательной железы [Текст] / Н. Е. Кушлинский, Ю. Н. Соловьев, М. Ф. Трапезникова. - М.: Изд-во РАМН. -2002. - 427 с.

43. Лисицкая, К. В. Изучение полиморфизма отдельных регуляторных белков, функционирующих в эпителиальных и мышечных клетках человека в норме и при раке простаты [Текст] / К. В. Лисицкая // Институт биохимии им. А.Н. Баха Российской Академии Наук. - М. : - 2010. - С. 59-71.

44. Лопаткин, Н. А. Доброкачественная гиперплазия предстательной железы [Текст] / Н. А. Лопаткин. - М. : [б.и.], 1999. - 216 с.

45. Мазо, Е. Б. Простатическая интраэпителиальная неоплазия [Текст] / Е. Б. Мазо, В. В. Мешков. - М. : ГЭОТАР МЕДИЦИНА, -2001.-80 с.

46. Марисов, Л. В. Диагностика и лечение инцидентального рака простаты [Текст] / Л. В. Марисов, А. 3. Винаров // Урология. - 2014. - № 3. - С. 8285.

47. Матвеев, Б. П. Рак предстательной железы [Текст] / Б. П. Матвеев, Б. В. Бухаркин, В. Б. Матвеев. - М. : [б.и.], 1999. - 153 с.

48. Матвеев, Б. П. Эпидемиология рака предстательной железы [Текст] / Б. П. Матвеев // Клиническая онкоурология: Руководство для врачей. - М. : Медицина, 2003. - С. 435-440.

49. Матвеев, Б. П. Клиническая онкоурология [Текст] / Б. П. Матвеев. — М. : АБВ-пресс, 2011. - С. 110-123.

50. Математическое моделирование послеоперационного течения рака простаты [Текст] / Н. А. Демченко, И. В. Лукьянов, И. Р. Аюпов, Ю. П. Лисовец // Медицинский вестник Башкортостана. - 2011. - С. 167-244.

51. Метелев, В. В. Лучевая терапия локализованного и местно-распространенного рака простаты: современные возможности повышения эффективности дистанционной радиотерапии [Текст] / В. В. Метелев // Тюменский медицинский журнал. - 2011. - № 34. - С. 69.

52. Многоэтапный скрининг рака предстательной железы [Текст] / К. Г. Пасевич, В. Г. Черенков, А. Б. Петров, М. М. Строженков // Вестник, новгородского государственного университета им. Ярослава Мудрого. - 2012. -№ 66. - С. 56-77.

53. Носов, А. К. Гормонорезистентный рак предстательной железы [Текст] / А. К. Носов, Н. А. Воробьев // Практическая онкология. - 2008. - Т. 9, №2.-С. 104-116.

54. Онкоурология: национальное руководство [Текст] / Под ред.

B. И. Чиссова, Б. Я. Алексеева, И. Г. Русакова. - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2012. -

C. 87-98.

55. Опухоли мочевыделительной системы и мужских половых органов. Морфологическая диагностика и генетика [Текст] : Руководство для врачей / Ю. Ю. Андреева, Н. В. Данилова, Л. В. Москвина, Л. Э. Завалишина,

Т. В. Кекеева, П. Г. Мальков, Г. А. Франк. - М.: Практическая медицина, 2012. - С. 110-154.

56. Опыт применения бисфосфонатов при прогрессировании местнораспространенного рака простаты [Текст] / П. В. Глыбочко, Ю. Г. Аляев, А. 3. Винаров, Ю. Л. Демидко // Медицинский вестник Башкортостана. - 2011. - С. 185-196.

57. Повещенко А. Ф. Механизмы и факторы ангиогенеза [Текст] /

A. Ф. Повещенко, В. И. Коненков // Успехи физиологических наук. - 2010. - Т. 41, № 2. - С. 68-89.

58. Попков, В. М. Возможности прогнозирования рецидива рака простаты после ЫШ-аблации с помощью математического моделирования [Текст] /

B. М. Попков, Р. Н. Фомкин, Б. И. Блюмберг // Саратовский научно-медицинский журнал. -2013. - С. 57-89.

59. Попков, В. М. Заболевания предстательной железы: клинико-диагностические, терапевтические и прогностические критерии заболеваний предстательной железы : автореф. дис. ... док. мед. наук : 14.01.23 / Попков Владимир Михайлович. - Саратов, 2012. - 45 с.

60. Попков, В. М. Лечение больных с местно-распространенным и диссеминированным раком предстательной железы (обзор) [Текст] / В. М. Попков, Т. Д. Ким // Бюллетень медицинских интернет-конференций. -2014.-Т. 4, № 1.-С. 38-41.

61. Попков, В. М. Прогнозирование результата патогистологического исследования простаты с помощью искусственной нейронной сети [Текст] / В. М. Попков, Т. В. Шатылко, Р. Н. Фомкин // Саратовский научно-медицинский журнал. - 2014. - С. 203-266.

62. Попков, В. М. Прогностические факторы в оценке эффективности результатов лечения больных локализованным раком простаты с помощью ЫАд-аблации [Текст] / В. М. Попков, Р. Н. Фомкин, Б. И. Блюмберг // Саратовский научно-медицинский журнал. - 2013. - С. 17-28.

63. Пушкарь, Д. Ю. Простат-специфический антиген и биопсия предстательной железы [Текст] / Д. Ю. Пушкарь. - М. : Медпресс-информ, 2003. -160 с.

64. Радикальная простатэктомия [Текст] / Р. Кирби, Ф. Монторси, П. Гонтеро, Дж. А, Смита; пер. с англ. / Под ред. Д. Ю. Пушкаря. - [б.и.] - 2011. -С. 166-225.

65. Разработка диагностической тест-системы для ранней неинвазивной диагностики рака простаты, основанной на количественной детекции мрнк гена РСАЗ в осадке мочи методом от-пцр в режиме реального времени [Текст] / К. А. Павлов, А. Н. Шкопоров, Е. В. Хохлова, А. А. Корчагина, А. В. Сидоренков, М. Э. Григорьев, Д. Ю. Пушкарь, В. П. Чехонин // Вестник Российской академии медицинских наук. - 2013. - № 5. - С. 45-51.

66. Роль молекулярно-генетических маркеров в скрининге РПЖ: обзор литературы [Текст] / О. И. Аполихин, А. В. Сивков, С. Е. Северин, Н. Г. Кешишев, О. В. Шкабко, Г. А. Ковченко // Экспериментальная и клиническая урология. - 2012. - № 3. - С. 45-48.

67. Российская тест-система РСАЗ: первые результаты [Текст] / А. В. Сидоренков, А. В. Говоров, Д. Ю. Пушкарь, К. А. Павлов, А. Н. Шкопоров, Е. В. Хохлова, А. А. Корчагина, М. Э. Григорьев, В. П. Чехонин // Экспериментальная и клиническая урология. - 2014. - № 2. - С. 44-49.

68. Русаков, И. Г. Биопсия предстательной железы [Текст] / И. Г. Русаков, Г. А. Франк, С. О. Степанов [и др.]. - М. : МНИОИ им. П.А. Герцена, 2002. - 20 с.

69. Саркома предстательной железы: случай из практики [Текст] / Е. О. Стаховский, Ю. В. Витрук, О. И. Яцина, О. М. Гаврилюк, М. С. Кротевич // Хирургия Украины. - 2011. - №3 (39). - С. 95-99.

70. Севрюков, Ф. А. Использование биполярной трансуретральной энуклеации для лечения доброкачественной гиперплазии простаты больших размеров [Текст] / Ф. А. Севрюков // Современные технологии в медицине. - 2012. - № 3. - С. 33-37.

71. Севргоков, Ф. А. Комплексное изучение качества жизни больных с доброкачественной гиперплазией предстательной железы [Текст] / Ф. А. Севрюков // Проблемы стандартизации в Здравоохранении. - 2012. - № 3-4. -С. 54-55.

72. Современные подходы к молекулярной характеристике опухолей простаты [Текст] / Е.П. Хвостова, В.О. Пустыльняк, А.И. Корбут,

A. А. Отпущенников, Л. Ф. Гуляева, И. Н. Крылова // Бюллетень ВосточноСибирского Научного Центра со РАМН. - 2012. - № 3. - С. 45-67.

73. Соков, Д. Г. Влияние агонистов лютеинизирующего гормона рилизинг-гормона на уровень тестостерона и качество жизни у больных местнораспространенным и генерализованным раком предстательной железы [Текст] / Д. Г. Соков, И. Г. Русаков // Российский онкологический журнал. - 2011. - С. 33-36.

74. Соловьев, Ю. Н. Патология предстательной железы [Текст] / 10. Н. Соловьев, И. А. Казанцева // Рак предстательной железы / Под ред. Е. Н. Кушлинского, Ю. Н. Соловьева, М. Ф. Трапезниковой. - М. : Изд. РАМН, 2002.-Гл. 3.-С.ЗЗ-56.

75. Состояние некоторых звеньев гормонального гомеостаза у больных раком простаты [Текст] / М. Б. Козлова, Е. М. Франциянц, А. Н. Шевченко,, Д. А. Швырев, С. Г. Селезнев, А. В. Фаенсон, С. И. Гончаров, Ю. А. Погорелова // Фундаментальные исследования. -2014.-№7.-С. 102-153.

76. Спринджук, М. В. Ангиогенез / М. В. Спринджук // Морфология. -2010.-Т. IV, №3.-С. 4-13.

77. Сравнительный анализ данных клинико-лабораторных и лучевых методов диагностики при раке предстательной железы с учетом гистоморфологической градации опухоли по шкале глисона [Текст] / П. В. Глыбочко, Т. Г. Хмара, В. М. Попков, М. Л. Чехонацкая, Г. Н. Маслякова,

B. Н. Приезжева, А. Н. Понукалин // Саратовский научно-медицинский журнал. -2010.-С. 29-45.

78. Сравнительная оценка послеоперационных осложнений после однократной и поворной Ыйд-аблаций локализованного рака простаты [Текст] / Р. Н. Фомкин, В. М. Попков, Б. И. Блгомберг, Т. В. Шатылко // Медицинский вестник Башкортостана. - 2013. - С.45-103.

79. Урология. Российские клинические рекомендации [Текст] / Под ред. Ю. Г. Аляева, П. В. Глыбочко, Д. Ю. Пушкарь. - М. : ГЭОТАР Медиа, 2015. -С 19-64.

80. Факторы прогноза биохимического рецидива локализованного и местнораспространенного рака простаты после радикальной простатэктомии [Текст] / В. А. Черняев, В. Б. Матвеев, М. И. Волкова [и др.]. // Онкоурология. -2012.-№4.-С. 58-64.

81. Федорина, Т. А. Особенности диагностики рака простаты по биопсийному материалу [Текст] / Т. А. Федорина, С. В. Полетаева // Саратовский научно-медицинский журнал. - 2013. - С. 255-276.

82. Харченко, В. П. Рак предстательной железы - методики, семиотика, задачи и проблемы лучевой диагностики [Текст] / В. П. Харченко, П. М. Котляров // Медицинская визуализация. - 2002. - № 3. - С. 4-10.

83. Чепуров, А. К. Стадирование рака предстательной железы с использованием трехмерной эхографии с мультипланарной реконструкцией изображения и ЗБ-эхоангиографией [Текст] / А. К. Чепуров, В. В. Соловьев, Е. А. Пронкин // Андрология и генитальная хирургия. - 2009. - № 2. - С. 65-69.

84. Шатылко, Т. В. Серая зона рза: статистико-математический анализ с применением метода искусственных нейронных сетей [Текст] / Шатылко Т.В., Седов Д.С. // Бюллетень медицинских интернет-конференций // - 2014. - Т. 4. -

№4.-С. 417-423. !;

1

85. Шибаев, А. Н. Клиническое значение фактора роста эндотелия сосудов при раке и доброкачественной гиперплазии предстательной железы : автореф. дис. ... канд. мед. наук: 14.00.40 / Шибаев Андрей Николаевич. - М., 2003.-32 с.

86. Эндоскопические методы лечения обструктивных осложнений брахитерапии [Текст] / А. Г. Мартов, Д. А. Абдуллаев, А. С. Андронов, Д. О. Джалилов // Медицинский вестник Башкортостана. - 2013. - С. 32-58.

87. Ягодина, Р. И. Оценка современных технологий лечения гормонорефрактерного рака предстательной железы (по данным мировой практики) [Текст] / Р. И. Ягодина, JI. К. Когон // Научные ведомости Белгородского государственного университета. - 2013. - Т. 22. - № 11-2 (154). -С. 4-15. - (Медицина. Фармация).

88. 18F-choline РЕТ/СТ physiological distribution and pitfalls in image interpretation: experience in 80 patients with prostate cancer [Text] / O. Schillaci, F. Calabria, M. Tavolozza [et al.] //Nucl. Med. Commun. - 2010. - Vol. 31. - P. 39-45.

89. A potential autocrine role for vascular endothelial growth factor in prostate cancer [Text] / M. W. Jackson, J. S. Roberts, S. E. Heckford [et al.] // Cancer. Res. -2002. - Vol. 62. - P. 854-859.

90. A systematic review and meta-analysis of bone metabolism in prostate adenocarcinoma [Text] / A. Serpa Neto, M. Tobias-Machado, M. A. Esteves [et al.] // BMC Urol. -2010. - P. 10-19.

91. Abrahamsson, P.-A. Potential benefits of intermittent androgen suppression therapy in the treatment of prostate cancer: a systematic review of the literature [Text] / P.-A. Abrahamsson //Eur. Urol. - 2010. - Vol. 57. - P. 49-59.

92. Additional analysis of the secondary end point of biochemical recurrence rate in a phase 3 trial (CS21) comparing degarelix 80 mg versus leuprolide in prostate cancer patients segmented by baseline characteristics [Text] / B. Tombal, K. Miller, L. Boccon-Gibod [et al.] // Eur. Urol. - 2010. - Vol. 57. - P. 836-842.

93. Adipocyte-derived microvesicles are associated with multiple angiogenic factors and induce angiogenesis in vivo and in vitro [Text] / N. Aoki, R. Yokoyama, N. Asai [et al.] // Endocrinology. - 2010. - Vol. 151, № 6. - P. 2567-2576.

94. An IKKalpha-E2Fl-BMIl cascade activated by infiltrating В cells controls prostate regeneration and tumor recurrence [Text] / M. Ammirante, A. I. Kuraishy,

S. Shalapour, A. Strasner, C. Ramirez-Sanchez, W. Zhang, A. Shabaik, M. Karin // Genes Dev. - 2013. - Vol. 27. - P. 1435-1440.

95. Androgen receptor expression is associated with prostate cancer-specifi c survival in castrate patients with metastatic disease. [Text] / M. J. Donovan, I. Osman,

F. M. Khan, Y. Vengrenyuk, P. Capodieci, M. Koscuiszka [et al.] // BJU Int. - 2010. -Vol. 105. 462-467.

96. Angiogenesis and vascular growth factor receptor expression in malignant melanoma [Text] / E.Y. Lin, M. Piepkorn, R. Garcia, D. Byrd, R. Tsou, F. Isik // Plastic and reconstructive surgery. - 1999. - Vol. 104. - P. 1666-1674.

97. Angiogenesis-inflammation cross-talk: Vascular endothelial growth factor is secreted by activated T cells and induced Thl polarisation [Text] / F. Mor, J. F. Guintana, R. Cohen [et al.] // The Journal of Immunology. - 2004. - Vol. 172. - P. 4618-4623.

98. Atala, A. Re: akt-mediated phosphorylation of Bmil modulates its oncogenic potential, e3 ligase activity, and DNA damage repair activity in mouse prostate cancer [Text] / J. Urol. - 2013. - P. 771.

99. Bergers G. Tumorigenesis and the angiogenic switch [Text] / G. Bergers, L. E. Benjamin //Nat. Rev. Cancer. - 2003. - Vol.3. - P. 401-410.

100. Bhavsar, T. Diagnosis of Prostate Cancer: Are We Up to Age? [Text] / T. Bhavsar, P. McCue, R. Birbe // Semin. Oncol. - 2013. - Vol. 40, № 3. - P. 259-275.

101. Radical Prostatectomy versus Watchful Waiting in Early Prostate Cancer [Text] / A. Bill-Axelson, L. Holmberg, M. Ruutu, H. Garmo, J. R. Stark, C. Busch, S. Nordling, M. Haggman, S.-O. Andersson, S. Bratell, A. Spangberg, J. Palmgren,

G. Steineck, H.-O. Adami, J.-E. Johansson // N. Engl. J. Med. - 2005. - № 352(19). - P. 19771984.

102. Bmi-1 is a crucial regulator of prostate stem cell self-renewal and malignant transformation [Text] / R. U. Lukacs, S. Memarzadeh, H. Wu, O. N Witte // Cell Stem Cell. - 2010. - Vol. 7. - P. 682-693.

103. Bono, A. V. Strategy in negative prostate biopsy [Text] / A. V. Bono // Third International Galucian Urological Meeting, Krakow, Media Co-worker. - 2000. -P. 2-5.

104. Börgermann, C. Problems, objective, and substance of early detection of prostate cancer [Text] / C. Börgermann, H. Loertzer, P. Hammerer // Urology. A. -2010.-Vol. 49. - P. 181-189.

105. Boyle, P. Incidence of prostate cancer will double by the year 2030: arguments [Text] / P. Boyle, P. Maisonneuve, P. Napalkov // Europ. J. Urol. - 1996. -Vol. 29. - P. 3-9.

106. Brown adipose tissue: is it affected by intermittent hypoxia? [Text] / M. D. Martinez, C. Z. Fiori, D. Baronio [et al.] // Lipids Health Dis. - 2010. - Vol. 9. -P. 121.

107. Buchan, N. C. Intermittent versus continuous androgen suppression therapy: do we have consensus yet? [Text] / N. C. Buchan, S. L. Goldenberg // Curr. Oncol.-2010.-P. 67-74.

108. Buonerba, C. Docetaxel rechallenge in castration-resistant prostate cancer: scientific legitimacy of common clinical practice [Text] / C. Buonerba, G. Palmieri, G. Di Lorenzo // Eur. Urol. - 2010. - Vol. 58 (4). - P. 636-637.

109. Cancer-associated changes in the expression of TMPRSS2-ERG, PCA3, and SPINK1 in histologically benign tissue from cancerous vs noncancerous prostatectomy specimens [Text] / R. M. Vaananen, H. Lilja, L. Kauko, P. Helo, H. Kekki, A. M. Cronin, A. J. Vickers, M. Nurmi, K. Alanen, A. Bjartell, K. Pettersson // Urology. - 2014. - Vol. 83, № 2. - P. 511.

110. Cancer statistics, 2010 [Text] / A. Jemal, R. Siegel, J. Xu, E. Ward //CA: A Cancer Journal for Clinicians. - 2010. - Vol. 60, № 5. - P. 277-300.

111. Castration-resistant prostate cancer: current and emerging treatment strategies [Text] / G. Di Lorenzo, C. Buonerba, R. Autorino [et al.] // Drugs. - 2010. -Vol. 70.-P. 983-1000.

112. Chappell, B. Technical considerations when obtaining and interpreting prostatic biopsies from men with suspicion of early prostate cancer: Part I [Text] / B. Chappell, J. McLoughlin // J. BJU Int. - 2005. - Vol. 95. - P. 1135-1140.

113. Charles, T. P. F. Urinary PCA3 urine in patients with a first negative prostate biopsy: 5-year follow-up [Text] / T. P. F. Charles, P. Cedex // Eur. Urol. -2014.-Vol. 13.-E. 347.

114. Chomczynski, P. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction [Text] / P. Chomczynski, N. Sacchi // Anal. Biochem. - 1987. - Vol. 162. - P. 156-159.

115. Chronic inflammation in the pathogenesis of benign prostatic hyperplasia [Text] / B. Fibbi, G. Penna, A. Morelli [et al.] // Int. J. Androl. - 2010. - Vol. 33 (3). - P. 475-488.

116. Circulatory miR-628-5p is downregulated in prostate cancer patients [Text] /A. Srivastava, H. Goldberger, A. Dimtchev, C. Marian, O. Soldin, X. Li, S. P. Collins, S. Suy, D. Kumar // Tumour Biol. - 2014. - Vol. 35. - P. 4867-4873.

117. Clinical evaluation of the PCA3 assay in guiding initial biopsy decisions [Text] / A. De la Taille, J. Irani, M. Graefen, F. Chun, T. de Reijke, P. Kil // J. Urol. -2011.-Vol. 185.-P. 2119-2125.

118. Clinical outcome of patients with docetaxel-resistant hormonerefractory prostate cancer treated with second-line cyclophosphamide-based metronomic chemotherapy [Text] / T. Nelius, T. Klatte, W. de Riese [et al.] // Med. Oncol. - 2010. -Vol. 27 (2). - P. 363-367.

119. Clinical significance of tissue inhibitor of metalloproteinase expression in gastric carcinoma [Text] / K. Mimori, M. Mori, T. Shiraishi, T. Fujie, K. Baba, M. Haraguchi [et al.] // Br. J. Cancer. - 1997. - Vol. 76. - P. 531-536.

120. Clinical utility of the PCA3 urine assay in European men scheduled for repeat biopsy [Text] / A. Haese, A. de la Taille, H. van Poppel, M. Marberger, A. Stenzl, P. F. Mulders, H. Huland, C. C. Abbou, M. Remzi, M. Tinzl, S. Feyerabend, A. B. Stillebroer, M. P. van Gils, J. A. Schalken // Eur. Urol. - 2008. - Vol. 54. - P. 1081-1088.

121. Clinical utility of the prostate cancer gene 3 (PCA3) urine assay in Japanese men undergoing prostate biopsy [Text] / A. Ochiai, K. Okihara, K. Kamoi, T. Oikawa, T. Shimazui, S. Murayama // BJU. Inter. - 2013. - Vol. 111. - P. 928-933.

122. Combining urinary detection of TMPRSS2: ERG and PCA3 with serum PSA to predict diagnosis of prostate cancer [Text] / S. S. Salami, F. Schmidt, B. Laxman, M. M. Regan, D. S. Rickman, D. Scherr, G. Bueti, J. Siddiqui, S. A. Tomlins, J. T. Wei, A. M. Chinnaiyan, M. A. Rubin, M. G. Sanda // Urol. Oncol. - 2011. - Vol. 31, №5.-P. 566-571.

123. Comparison of digital rectal examination and serum prostate specific antigen in the early detection of prostate cancer: results of a multicenter clinical trial of 6,630 men [Text] / W. J. Catalona, J. P. Richie, F. R. Ahmann [et al.] // J. Urol. - 1994. -Vol. 151.-P. 83-90.

124. Critical assessment of preoperative urinary prostate cancer antigen 3 on the accuracy of prostate cancer staging [Text] / M. Auprich, F. K. Chun, J. F. Ward, K. Pummer, R. Babaian, H. Augustin // Eur. Urol. - 2011. - Vol. 59. - P. 96-105.

125. Denosumab compared with zoledronic acid for the treatment of bone metastases in patients with advanced breast cancer: a randomized, double-blind study [Text] / A. T. Stopeck, A. Lipton, J. J. Body [et al.] // J. Clin. Oncol. - 2010. - P. 189289.

126. Denosumab versus zoledronic acid for treatment of bone metastases in men with castrationresistant prostate cancer: a randomised, doubleblind study [Text] / K. Fizazi, M. Carduc, M. Smith [et al.] // Lancet. - 2011. - Vol. 377. - P. 813-974.

127. Detection of local, regional, and distant recurrence in patients with PSA relapse after external-beam radiotherapy using (11) C-choline positron emission tomography [Text] / A. J. Breeuwsma, J. Pruim, A. C. van den Bergh [et al.] // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. - 2010. - Vol. 77. - P. 160-164.

128. Digital rectal examination for detecting prostate cancer at prostate-specific antigen levels of 4 ng/ml or less [Text] / G. F. Carvalhal, D. S. Smith, D. E. Mager [et al.] //J. Urol. - 1999. - Vol. 61. - P. 835-839.

129. Dijkstra, S. Clinical use of novel urine and blood based prostate cancer biomarkers: A review [Text] / S. Dijkstra, P. F. Mulders, J. A. Schalken // Clin. Biochemistry. - 2013. - Vol. 29. - P. 9120.

130. Do high radiation doses in locally advanced prostate cancer patients treated with 103Pd implant plus external beam irradiation cause increased urinary, rectal, and sexual morbidity [Text] / N. N. Stone, J. A. Cesaretti, B. Rosenstein [et al.] // Brachytherapy. - 2010. - P. 774-890.

131. Dose escalation for prostate cancer radiotherapy: predictors of long term biochemical tumor control and distant metastases-free survival outcomes [Text] / M. J. Zelefsky, X. Pei, J. F. Chou [et al.] / Eur. Urol. - 2011. - Vol. 60 (6). - P. 11331139.

132. Duration of first off-treatment interval is prognostic for time to castration resistance and death in men with biochemical relapse of prostate cancer treated on a prospective trial of intermittent androgen deprivation [Text] / E. Y. Yu, R. Gulati, D. Telesca [et al.] // J. Clin. Oncol. - 2010. - Vol. 28. - P. 2668-2673.

133. Dvorak, H. F. Vascular permeability factor/vascular endothelial growth factor: a critical cytokine in tumour angiogenesis and a potential target for diagnosis and therapy [Text] /H. F. Dvorak// J. Clin. Oncol. - 2002. - Vol. 20. - P. 4368-4380.

134. Early intervention with phosphodiesterase-5 inhibitors after prostate brachytherapy improves subsequent erectile function [Text] / G Pahlajani, R. Raina, J. S. Jones [et al.] // BJU Int. - 2010. - Vol. 12. - P. 542-783.

135. Efficacy of carboplatin-taxane combinations in the management of castration-resistant prostate cancer: a pooled analysis of seven prospective clinical trials [Text] / M. M. Regan, E. K. O'Donnell, W. K. Kelly [et al.] //Ann. Oncol. - 2010. - Vol. 21 (2).-P. 312-318.

136. Elevated Bmi-1 expression is associated with dysplastic cell transformation during oral carcinogenesis and is required for cancer cell replication and survival, Br. [Text] / M. K. Kang, R. H. Kim, S. J. Kim, F. K. Tip, K. H. Shin, G. P. Dimri, R. Christensen, T. Han, N. H. Park // J. Cancer. - 2011. - Vol. 96. - P. 126-133.

137. Elevated tissue inhibitor of metalloproteinase 1 RNA in colorectal cancer stroma correlates with lymph node and distant metastases [Text] / Z. S. Zeng, A. M. Cohen, Z. F. Zhang, W. Stetler-Stevenson, J. G. Guillem // Clin. Cancer Res. - 1995. -Vol. 1. - P. 899-906.

138. Emotional consequences of persistently elevated PSA with negative prostate biopsies [Text] / J. G. Scott, E. K. Shaw, A. Friedman, J. M. Ferrante //Am. J. Cancer Prev. - 2013. -Vol. 1,№ l.-P. 4-8.

139. Esserman, L. J. Overdiagnosis and overtreatment in cancer an opportunity for improvement [Text] / L. J. Esserman, I. M. Thompson, B. Reid // JAMA. - 2013. -Vol. 310, №8. -P. 797-798.

140. European Urology. - 2014. - Vol. 66 (6). - P. 1024-1103.

141. Evaluation of the serum testosterone to prostate-specific antigen ratio as a predictor of prostate cancer risk [Text] / J. Morote, J. Planas, C. Ramirez, E. Gomez [et al.] // BJU Int. - 2010. - P. 105.

142. External validation of an artificial neural network and two nomograms for prostate cancer detection [Text] / T. H. Ecke, S. Hallmann, S. Koch [et al.] // ISRN Urol. -2012.-Vol. 2012.-P. 64-81.

143. Faris, J. E. Metabolic sequelae associated with androgen deprivation therapy for prostate cancer [Text] / J. E. Faris, M. R. Smith // Curr. Opin. Endocrinol. Diabetes Obes. - 2010. - Vol. 17. - P. 240-246.

144. Ferguson, R. S. Prostatic neoplasms: their diagnosis by needle puncture and aspiration [Text] / R. S. Ferguson // Am. J. Surg. - 1930. - Vol. 9. - P. 507-551.

145. Ferrara, N. The biology of VEGF and its receptors [Text] / N. Ferrara, H-P. Gerber, J. LeCouter//Nature medicine. - 2003. - Vol. 6. - P. 669-676.

146. Ferrara, N. Timeline: VEGF and the quest for tumour angiogenesis factors [Text] / N. Ferrara // Nat. Rev. Cancer. - 2002. - Vol. 2. - P. 795-803.

147. Functional interaction between telomere protein TPP1 and telomerase [Text] / A. J. Zaug, E. R. Podell, J. Nandakumar, T. R. Cech // Genes Dev. - 2010. - Vol. 24.-P. 613-622.

148. Gleason, D. F. Classification of prostatic carcinomas [Text] / D. F. Gleason // Cancer Chemother. Rep. - 1996. - Vol. 50, № 3. - P. 125-128.

149. Global Cancer Statistics [Text] / J. Ahmedin, B. Freddie, M. C. Melissa [et al.] // Cancer J Clin. - 2011. - Vol. 61. - P. 69-90.

150. Global burden of cancers attributable to infections in 2008: a review and synthetic analysis [Text] / C, Martel, J. Ferlay, S. Franceschi [et al.] // The Lancet Oncology. - 2012. - Vol. 13. - P. 607-615.

151. Goldner, G. Is the Roach formula predictive for biochemical outcome in prostate cancer patients with minimal residual disease undergoing local radiotherapy after radical prostatectomy? [Text] / G. Goldner, J. Dimopoulos, R. Potter // Radiother Oncol. - 2010. - Vol. 94. - P. 324-327.

152. Haggstrom, S. Vascular endothelial growth factor content in metastasizing and nonmetastasizing Dunning prostatic adenocarcinoma [Text] / S. Haggstrom, A. Bergh, J. E. Damber // Prostate. - 2000. - Vol. 15. - P. 42-50.

153. Guidelines on Prostate Cancer [Text] / A. Heidenreich, M. Bolla, S. Joniau [et al.] // European Association of Urology. - 2008. - № 53(1). - P. 68-80.

154. Immunohistochemical study of apoptosis — related bcl-2 protein and its correlation with proliferation indices (Ki-67, PCNA), tumor suppression genes (p53, pRb), the oncogene c-erb-B2, sex steroid hormone receptors and other clinico-pathological features, in normal, hyperplastic and neoplastic endometrium [Text] / A. Mitselou, E. Ioachim, E. Kitsou [et al.] // In vivo. - 2003. - Vol. 17. - P. 469-478.

155. IMPACT Study Investigators. Sipuleucel-T immunotherapy for castration-resistant prostate cancer [Text] / P. W. Kantoff, C. S. Higano, N. D. Shore [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2010. - Vol. 363. - P. 411-422.

156. Initial prostate biopsy: Development and internal validation of a biopsy-specific nomogram based on the prostate cancer antigen 3 assay [Text] / J. Hansen, M. Auprich, S. A. Ahyai, A. de la Taille, H. van Poppel, M. Marberger, A. Stenzl, P. F. Mulders, H. Huland, M. Fisch // Eur. Urol. - 2013. - Vol. 63. - P. 201-209.

157. Intense focal expression of vascular endothelial growth factor mRNA in human intracranial neoplasms: Association with regions of necrosis [Text] /

F. Westphal, M. Phillips H. S., M. Armanini, D. Stavrou, N. Ferrara // Int. J. Oncol. -1993. -P. 913-919.

158. Intermittent androgen suppression for rising PSA level after radiotherapy [Text] / J. M. Crook, C. J. O'Callaghan, G. Duncan [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2012. -Vol. 367 (10).-P. 895-903.

159. Jackson, M. W. Vascular endothelial growth factor (VEGF) expression in prostate cancer and benign prostatic hyperplasia [Text] / M. W. Jackson, J. M. Bentel, W. D. Tilley // J. Urol. - 1997. - Vol. 157. - P. 2323-2338.

160. Lee, R. J. Osteoclast-targeted therapy for metastatic prostate cancer [Text] / R. J. Lee, M. R. Smith // Therapy. - 2008. - Vol. 5. - P. 63-72.

161. Locally recurrent prostate cancer after external beam radiation therapy: diagnostic performance of 1.5-T endorectal MR imaging and MR spectroscopic imaging for detection [Text] / A. C. Westphalen, F. V. Coakley, M. Roach 3rd [et al.] // Radiology. - 2010. 256. 485-492.

162. Ma, J. Upregulated TIMP-1 correlates with poor prognosis of laryngeal squamous cell carcinoma [Text] / Ma J. // Int. J. Clin. Exp. Pathol. - 2013. - Vol. 15 (1). - P. 246-254.

163. Matrix-embedded cells control osteoclast formation [Text] / J. Xiong, M. Onal, R. L. Jilka [et al.] //Nat. Med. - 2011. - P. 344-573.

164. Matrix metalloproteinases (MMPs) in oral diseases [Text] / T. Sorsa, L. Tjäderhane, T. Salo // Oral Dis. - 2004. - Vol. 10. - P. 311-318.

165. McMahon, G. VEGF receptor signaling in tumor angiogenesis [Text] /

G. McMahon // The Oncologist. - 2000. - Vol. 5 (11). - P. 3-10.

166. McNeal, J. E. The prostate gland: morphology and pathology [Text] / J. E. McNeal / Monogr. Urol. - 1983. - Vol. 4. - P. 3-33.

167. Merrimen, J. L. Multifocal high grade prostatic intraepithelial neoplasia is a significant risk factor for prostatic adenocarcinoma [Text] / J. L. Merrimen, G. Jones, D. Walker [et al.] // J. Urol. - 2009. - Vol. 182. - P. 485-490.

168. MicroRNA expressions associated with progression of prostate cancer cells to antiandrogen therapy resistance [Text] / R. Ottman, C. Nguyen, R. Lorch, R. Chakrabarti //Mol Cancer. - 2014. - Vol. 13 (1). - P. 13-11.

169. MiR-20a promotes prostate cancer invasion and migration through targeting ABL2 [Text] / X. F. Qiang, Z. W. Zhang, Q. Liu, N. Sun, L. L. Pan, J. Shen, T. Li, C.Yun, H. Li, L. H. Shi // J. Cell Biochem. - 2014. - Vol. 115. - P. 1269-1276.

170. Molecular control of angiopoietin signaling [Text] / H. Singh, T. A. Tahir, D. O. Alawo [et al.] //Biochem. Soc. Trans. - 2011. - Vol. 39, № 6. - P 1592-1596.

171. Multiparametric magnetic resonance imaging of the prostate can improve the predictive value of the urinary prostate cancer antigen 3 test in patients with elevated prostate-specific antigen levels and a previous negative biopsy [Text] / A. Sciarra, V. Panebianco, S. Cattarino, G. M. Busetto, E. De Berardinis, M. Ciccariello, V. Gentile, S. Salciccia // BJU Inter. - 2012. - Vol. 110, № 11. - P. 1661-1665.

172. Novel therapeutic strategies for metastatic prostate cancer in the post-docetaxel setting [Text] / O. Sartor, R. M. Michels, C. Massard [et al.] // Oncologist. -2011.-Vol. 16 (11).-P. 1487-1497.

173. Optimal approach for prostate cancer detection as initial biopsy: prospective randomized study comparing transperineal versus transrectal systematic 12-core biopsy [Text] / R. Hara, Y. Jo, T. Fujii, N. Kondo [et al.] // Urology. - 2008. - Vol. 71. -P. 191-195.

174. Optimal predictors of prostate cancer on repeat prostate biopsy: a prospective study of 1051 men [Text] / B. Djavan, A. Zlotta [et al.] // J. Urol. - 2000. -Vol. 163.-P. 1144-1149.

175. Optimizing use of PCA3 in initial prostate biopsy: External validation of a proposed nomogram and proposal for a new system to choose cut-off points in nomograms [Text] / J. Rubio-Briones, A. Borque, L. Esteban, E. Solsona, I. Iborra, A. Collado, J. Casanova // Eur. Urol. - 2014. - Vol. 13. - E. 347.

176. Outcome prediction for prostate cancer detection rate with artificial neural network (ANN) in daily routine [Text] / T. H. Ecke, P. Bartel, S. Hallmann [et al.] // Urol. Oncol. - 2012. - Vol. 30 (2). - P. 139-144.

177. Overall survival benefit of radium-223 chloride (Alpharadin) in the treatment of patients with symptomatic bone metastases in castration-resistant prostate cancer: A phase III randomized trial (ALSYMPCA) [Text] / C. Parker, D. Heinrich, J. M. O'Sullivan [et al.] // ECCO-ESMO. - 2011. - P. 234-238.

178. Pardo, A. MMP-1: the elder of the family [Text] / A. Pardo, M. Selman // Int. J. Biochem Cell Biol. - 2005. - Vol. 37. - P. 283-288.

179. PCA3: a molecular urine assay for predicting prostate biopsy outcome [Text] /1. L. Deras, S. M. Aubin, A. Blase [et al.] // J. Urol. - 2008. - Vol. 179 (4). - P. 1587-1592.

180. PCA3 molecular urine assay correlates with prostate cancer tumor volume: implication in selecting candidates for active surveillance [Text] / H. Nakanishi, J. Groskopf, H. A. Fritsche [et al.] //J. Urol. - 2008. - Vol. 179. - P. 1800-1804.

181. PDGF and bFGF modulate tube formation in adipose tissue-derived stem cells [Text] / S. Keerl, S. Gehmert, S. Gehmert [et al.] //Ann. Plast. Surg. - 2010. - Vol. 64, № 4. _ p. 487-490.

182. Perachino, M. Testosterone levels in patients with metastatic prostate cancer treated with luteinizing hormonereleasing hormone therapy: prognostic significance? [Text] / M. Perachino, V. Cavalli, F. Bravi // BJU Int. - 2010. - Vol. 105. -P. 648-651.

183. Phase I clinical trial of the CYP17 inhibitor abiraterone acetate demonstrating clinical activity in patients with castration-resistant prostate cancer who received prior ketoconazole therapy [Text] / C. J. Ryan, M. R. Smith, L. Fong [et al.] // J. Clin. Oncol. - 2010. - Vol. 28 (9). - P. 1481-1488.

184. Phase II multicenter study of abiraterone acetate plus prednisone therapy in patients with docetaxel-treated castration-resistant prostate cancer [Text] / D. C. Danila, M. J. Morris, J. S. de Bono [et al.] // J. Clin. Oncol. - 2010. - Vol. 28. - P. 1496-1501.

185. Phase III study of the efficacy and safety of zibotentan (ZD4054) in patients with bone metastatic castration-resistant prostate cancer (CRPC) [Text] / J.B.Nelson, K. Fizazi, K. Miller [et al.] // J. Clin. Oncol. - 2011. - Vol. 29, № 7. -P. 117.

186. Predicting prostate cancer risk through incorporation of prostate cancer gene 3 [Text] / D. P. Ankerst, J. Groskopf, J.R. Day, A. Blasé, H. Rittenhouse,

B. H. Pollock, C. Tangen, D. Parekh, R. J. Leach, I. Thompson // J Urol. - 2008. -Vol. 180.-P. 1303-1308.

187. Prediction of survival following first-line chemotherapy in men with castration-resistant metastatic prostate cancer [Text] / A. J. Armstrong, E. GarrettMayer, R. de Wit [et al.] // Clin Cancer Res. - 2010. - Vol. 16 (1). - P. 203-211.

188. Predictive value of PCA3 in urinary sediments in determining clinico-pathological characteristics of prostate cancer [Text] / D. Hessels, M. P. van Gils, O. van Hooij, S. A. Jannink, J. A. Witjes, G. W. Verhaegh // Prostate. - 2010. - Vol. 70. -P. 10-16.

189. Prednisone plus cabazitaxel or mitoxantrone for metastatic castration-resistant prostate cancer progressing after docetaxel treatment: a randomised open-label trial [Text] / J. S. Bono, S. Oudard, M. Ozguroglu [et al.] // Lancet. - 2010. - Vol. 376 (9747).-P. 1147-1154.

190. Prognostic parameters, complications, and oncologic and functional outcome of salvage radical prostatectomy for locally recurrent prostate cancer after 21 st-century radiotherapy [Text] / A. Heidenreich, S. Richter, D. Thlier, D. Pfister // Eur. Urol. - 2010. - Vol. 57. - P. 437-445.

191. Prospective multicentre evaluation of PCA3 and TMPRSS2-ERG gene fusions as diagnostic and prognostic urinary biomarkers for prostate cancer [Text] / G. H. Leyten, D. Hessels, S. A. Jannink, F. P. Smit, H. de Jong, E. B. Cornel, T. M. de Reijke, H. Vergunst, P. Kil, B. C. Knipscheer, I. M. van Oort, P. F. Mulders,

C. A. Hulsbergen-van de Kaa, J. A. Schalken // Eur. Urol. - 2014. - Vol. 65, № 3. - P. 534-542.

192. Prostate biopsy: indications and technique [Text] / B. R. Matlaga, L. A. Eskew, D. L. McCullough // J. Urol. - 2003. - Vol. 169. - P. 12-19.

193. Prostate cancer antigen 3 score accurately predicts tumour volume and might help in selecting prostate cancer patients for active surveillance [Text] /

G. Ploussard, X. Durand, E. Xylinas, S. Moutereau, C. Radulescu, A. Forgue // Eur. Urol. - 2011. - Vol. 59. - P. 422-429.

194. Prostate cancer antigen 3 test for prostate biopsy decision: a systematic review and meta analysis [Text] / Y. Luo, X. Gou, P. Huang, C. Mou // Chin. Med. J. -2014. - Vol. 127, № 9. - P. 1768-1774.

195. Prostate cancer detection in the "grey area" of prostate-specific antigen below 10 ng/ml: head-to-head comparison of the updated PCPT calculator and Chun's nomogram, two risk estimators incorporating prostate cancer antigen 3 [Text] / S. Perdona, V. Cavadas, G. Di Lorenzo, R. Damiano, G. Chiappetta, P. Del Prete, R. Franco, G. Azzarito, S. Scala, C. Arra, M. De Sio, R. Autorino // Eur. Urol. - 2011. -Vol. 59, № 1.-P. 81-87.

196. Prostate cancer foundation/department of defense prostate cancer clinical trials consortium. Antitumour activity of MDV3100 in castration-resistant prostate cancer: a phase 1-2 study [Text] / H. I. Scher, T. M. Beer, C. S. Higano [et al.] // Lancet. - 2010. - Vol. 375 (9724). - P. 1437-1446.

197. Prostate cancer gene 3 and multiparametric magnetic resonance can reduce unnecessary biopsies: decision curve analysis to evaluate predictive models [Text] / G. M. Busetto, E. De Berardinis, A. Sciarra, V. Panebianco, R. Giovannone, S. Rosato, P. D'Errigo, F. Di Silverio, V. Gentile, S. Salciccia // Urology. - 2013. - Vol. 82, № 6. -P. 1355-1360.

198. Prostate-cancer mortality at 11 years of follow-up [Text] / F. H. Schroder, J. Hugosson, M .J. Roobol, T. L. Tammela, S. Ciatto, V. Nelen // N. Engl. J. Med. -2012.-Vol. 366.-P. 981-990.

199. Prostate-specific membrane antigen expression as a predictor of prostate cancer progression [Text] / S. Perner, M. D. Hofer, R. Kim [et al.] // Human Pathology. -2007.-Vol. 38.-P. 696-701.

200. Prostate health index (phi) and prostate cancer antigen 3 (PCA3) significantly improve diagnostic accuracy in patients undergoing prostate biopsy [Text] / S. Perdona, D. Bruzzese, M. Ferro, R. Autorino, A. Marino, C. Mazzarella,

G. Perruolo, M. Longo, R. Spinelli, G. Di Lorenzo, A. Oliva, M. De Sio, R. Damiano, V. Altieri, D. Terracciano // Prostate. - 2013. - Vol. 73, № 3. - P. 227-235.

201. Prostate health index (PHI) is more accurate than PCA3 assay in the prediction of aggressive characteristics at initial prostate biopsy (PBX) [Text] / V. Scattoni, L. Villa, S. De Luca, U. Capitanio, F. Porpiglia, M. Lazzeri, M. Papotti, E. Bollito, G. Lughezzani, A. Larcher, G. Lista, G. M. Gadda, G. J. Guazzoni // Eur. Urol.-2014.-Vol. 13.-E. 347.

202. Prostatic artery embolization as a primary treatment for benign prostatic hyperplasia: preliminary results in two patients [Text] / F. C. Carnevale, A. A. Antunes, J. M. da Motta Leal Filho [et al.] // CardioVascular and Interventional Radiology. -2010. - Vol. 33, № 2. - P. 355-361.

203. Prostatic inflammation and prostate cancer [Text] / P. J. Bastian, P. Nuhn, T. C. Stadler [et al.] // Urologe. A. - 2010. - Vol. 49 (5). - P. 636-638.

204. Purification of a human prostate specific antigen [Text] / M. C Wang, L. A. Valenzuela, G.P. Murphy [et al.] // Invest. Urol. - 1979. - Vol. 17. - P. 159-163.

205. Rational Basis for the Combination of PC A3 and TMPRSS2:ERG Gene Fusion for Prostate Cancer Diagnosis [Text] / G. Robert, S. Jannink, F. Smit, T. Aalders, D. Hessels, R. Cremers, P. F. Mulders, J. A. Schalken // Prostate. - 2012. -Vol. 73, №2. - P. 113-120.

206. Role of targeted therapy in the treatment of advanced prostate cancer [Text] / K. Fizazi, C. N. Sternberg, J. M. Fitzpatrick [et al.] // BJU Int. - 2010. - Vol. 105. - P. 748-767.

207. Ronald, E. Men at Risk: Men at Risk the Dirty Little Secret Prostate Biopsies Really Do Spread Prostate Cancer Cells [Text] / E. Ronald, R.Wheeler / AuthorHouse, 2012. - 623 p.

208. Screening and prostate-cancer mortality in a randomized European study [Text] / F. H. Schröder, J. Hugosson, M. J. Roobol, T. L. J. Tammela, S. Ciatto, V. Nelen, M. Kwiatkowski, M. Lujan, H. Lilja [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2009. - Vol. 360,№13.-P. 1320-1328.

209. Screening for prostate cancer: a review of the evidence for the U.S. preventive services task force [Text] / Roger Chou [et al.] // In Annals of Internal Medicine.-2011.-Vol. 155, № 11. - P. 762-771.

210. Screening for prostate cancer decreases the risk of developing metastatic disease: findings from the European Randomized Study of Screening for Prostate Cancer (ERSPC) [Text] / F. H. Schroder, J. Hugosson, S. Carlsson, T. Tammela, L. Maattanen, A. Auvinen //Eur. Urol. - 2012. - Vol. 62. - P. 745-752.

211. Selenite triggers rapid transcriptional activation of p53, and p53-mediated apoptosis in prostate cancer cells: Implication for the treatment of early-stage prostate cancer [Text] / S. Sarveswaran, J. Liroff, Z. Zhou [et al.] // Int. J. Oncol. - 2010. - Vol. 36.-P. 1419-1428.

212. Selenium and vitamin E for prostate cancer: Post-SELECT (Selenium and Vitamin E Cancer Prevention Trial) status [Text] / M. C. Ledesma, B. Jung-Hynes, T. L. Schmit [et al.] // Mol. Med. - 2011. - Vol. 17. - P. 134-143.

213. Siddique, H. R. Role of BMI1, a stem cell factor, in cancer recurrence and chemoresistance: preclinical and clinical evidences [Text] / H. R. Siddique, M. Saleem // Stem Cells. - 2012. - Vol. 30. - P. 372-378.

214. Significant and sustained antitumor activity in post-docetaxel, castration-resistant prostate cancer with the CYP17 inhibitor abiraterone acetate [Text] / A. H. Reid, G. Attard, D. C. Danila [et al.] // J. Clin. Oncol. - 2010. - Vol. 28 (9). -P. 1489-1495.

215. Sledge, G.W. Vascular endothelial growth factor in breast cancer: biologic and therapeutic aspects [Text] / G.W. Sledge // Semin. Oncol. - 2002. - Vol. 29 (11). -P. 104-110.

216. Testosterone measurement in patients with prostate cancer [Text] / C. C. Schulman, J. Irani, J. Morote [et al.] // Eur. Urol. - 2010. - Vol. 58. - P. 65-74.

217. The interval from the last cycle of docetaxel-based chemotherapy to progression is associated with the efficacy of subsequent docetaxel in patients with prostate cancer [Text] / Y, Loriot, C, Massard, M, Gross-Goupil [et al.] // Eur. J. Cancer. - 2010. - Vol. 46. - P. 1770-1772.

218. The Melbourne Consensus Statement on the early detection of prostate cancer [Text] / D. G. Murphy, T. Ahlering, W. J. Catalona [et al.] // BJU Int. - 2014. -Vol. 113(2).-P. 186.188.

219. The relationship between prostatic intraepithelial neoplasia and prostate cancer: critical issues [Text] / M. J. Haggman, J. A. Macoska, K. J. Wojno [et al.] // J. Urol. - 1997. -Vol. 158. - P. 12-22.

220. The TMPRSS2:ERG rearrangement, erg expression, and prostate cancer outcomes: a cohort study and meta-analysis [Text] / A. Pettersson, R. E. Graff, S. R. Bauer, M. J. Pitt, R. T. Lis, E. C. Stack //Cancer epidemiology, biomarkers & prevention: a publication of the American Association for Cancer Research, cosponsored by the AmericanSociety of Preventive Oncology. - 2012. - Vol. 21 (9). P. 1497-1509.

221. The value of urinary prostate cancer gene 3 (PCA3) scores in predicting pathological features at radical prostatectomy [Text] / X. Durand, E. Xylinas, C. Radulescu, R. Haus-Cheymol, S. Moutereau, G. Ploussard // BJU Inter. - 2012. -Vol. 110.-P. 43-49.

222. Thompson, I. M. Prevalence of prostate cancer among men with a prostate-specific antigen level < 4.0 ng per milliliter [Text] / I. M. Thompson, D. K. Pauler, P. J. Goodman [et al.] // New Engl. J. Med. - 2004. - Vol. 350. - P. 39-46.

223. TIN2 binds TRF1 and TRF2 simultaneously and stabilizes the TRF2 complex on telomeres [Text] / J. Z. Ye, J. R. Donigian, M. van Overbeek, D. Loayza, Y. Luo, A. N. Krutchinsky, B. T. Chait, T. de Lange // J. Biol. Chem. - 2004. - Vol. 279. - P. 47264-47271.

224. Tissue inhibitor of metalloproteinase-1 is an independent predictor of prognosis in patients with non-small cell lung carcinoma who undergo resection with curative intent [Text] / V. Gouyer, M. Conti, P. Devos, F. Zerimech, M. C. Copin, E. Crème [et al.] // Cancer. - 2005. - Vol. 103. - P. 1676-1684.

225. TMPRSS2-ERG gene fusion prevalence and class are significantly different in prostate cancer of Caucasian, African-American and Japanese patients

[Text] / C. Magi-Galluzzi, T. Tsusuki, P. Elson, K. Simmerman, C. LaFargue, R. Esgueva // Prostate. - 2011. - Vol. 71. - P. 489-497.

226. Tomlins, S. A. Urine PCA3 and TMPRSS2:ERG using cancer-specific markers to detect cancer [Text] / S. A. Tomlins // Eur. Urol. - 2012. - Vol. 65, № 3. -P. 543-545.

227. Tumor tissue levels of tissue inhibitor of metalloproteinase-1 as a prognostic marker in primary breast cancer [Text] / A. S. Schroll, M. N. Holten-Andersen, H. A. Peters, M. P. Look, M. E. Meijer-van Gelder, J. G. Klijn [et al.] // Clin. Cancer Res. - 2004. - Vol. 10. - P. 2289-2298.

228. Twelve prostate biopsies detect significant cancer volumes [Text] / C. Brossner, G. Bayer, S. Madersbacher [et al.] // B.J.U. Int. - 2000. - Vol. 85 (96). - P. 705-707.

229. Update on AUA guideline on the management of benign prostatic hyperplasia [Text] / K. T. McVary, C. G. Roehrborn, A. L. Avins, M. J. Barry, R. F. Donnell, R. C. Bruskewitz [et al.] // J. Urol. - 2011. - Vol. 185 (5). - P. 1793-1803.

230. Urinary TMPRSS2:ERG and PCA3 in an Active Surveillance Cohort: Results from a Baseline Analysis in the Canary Prostate Active Surveillance Study for .the Canary Prostate Active Surveillance Study Investigators [Text] / D. W. Lin, L. F. Newcomb, E. C. Brown, J. D. Brooks, P. R. Carroll, Z. Feng, M. E. Gleave, R. S. Lance, M. G. Sanda, I. M. Thompson, J. T. Wei, P. S. Nelson // Clin. Cancer Res. - 2013. - Vol. 19. - P. 2442-2450.

231. Use of PCA3 in detecting prostate cancer in initial and repeat prostate biopsy patients [Text] / R. R. Goode, S. J. Marshall, M. Duff, E. Chevli, K. K. Chevli // Prostate. - 2013. - Vol. 73, № 1. - P. 48-53.

232. Using PSA to guide timing of androgen deprivation in patients with TO-4 N0-2 M0 prostate cancer not suitable for local curative treatment (EORTC 30891) [Text] / U. E. Studer, L. Collette, P. Whelan, [et al.] // Eur. Urol. - 2011. - Vol. 53. -P. 941-449.

233. Variability in prostate cancer gene 3 (PCA3) score on repeated measures over time. A first report [Text] / S. De Luca, R. Passera, S. Cappia, E. Bollito,

D. F. Randone, A. Milillo, M. Papotti, F. Porpiglia // Eur. Urol. - 2014. - Vol. 13. - E. 340.

234. Vascular endothelial growth factor and its correlation with angiogenesis and p53 expression in prostate cancer [Text] / D. Strohmeyer, C. Rössing, A. Bauerfeind [et al.] // Prostate. - 2000. - Vol. 45. - P. 216-224.

235. Vascular endothelial growth factor expression and capillary architecture in high-grade PIN and prostate cancer in untreated and androgen-ablated patients [Text] / R. Mazzucchelli, R. Montironi, A. Santinelli [et al.] // Prostate. - 2000. - Vol. 45. - P.72-79.

236. Vascular endothelial growth factor induces SHC association with vascular endothelial Cadherin: a potential feedback mechanism to control vascular endothelial growth factor receptor-2 signaling [Text] / A. Zanetti, M. G. Lampugnani, G. Balconi, F. Breviario, M. Corada, L. Lanfrancone [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. -2002). - Vol. 22 (4). - P. 617-22.

237. Vascular endothelial growth factor receptor-1 promotes migration and invasion in pancreatic carcinoma cell lines [Text] / J.S. Wey, F. Fan, M.J.Gray [et al.] // Cancer. - 2005. - Vol. 104. - P. 427-438.

238. Warmuth, M. Systematic review of the efficacy and safety of high-intensity focussed ultrasound for the primary and salvage treatment of prostate cancer [Text] / M. Warmuth, T. Johansson, P. Mad // Eur. Urol. - 2010. - Vol. 58. - P. 803-815.

239. William, C. Role of Telomeres and Telomerase in the Pathogenesis of Human Cancer [Text] / C. William, J. Hahn // Clin. Oncol. - 2003. - Vol. 21. - P. 20342204.

240. Yamaoka, M.Overcoming persistent dependency on androgen signaling after progression to castration-resistant prostate cancer [Text] / M. Yamaoka, T. Hara, M. Kusaka // Clin. Cancer Res. - 2010. - Vol. 16. - P. 4319-4324.