Биологические свойства бактериоцинов фитопатогенных ксантомонад - возбудителей бактериозов растений тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Садомов, Владимир Эдуардович

• Садомов, Владимир Эдуардович
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Садомов, Владимир Эдуардович

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы.

Состояние вопроса.

Цель работы.

Научная новизна.

Теоретическое и практическое значение.^

1.0Б30Р ЛИТЕРАТУРЫ

1.¡.Характеристика отдельных фитопатогенов Xanthomonas campestris.

1.1.1. Род Xanthomonas (Bergey's Mannul of Determinative Bateriology, 1986).

1.1.2. Свойства отдельных патоваров вида X. Campestris.

1.1.2.1. Xanthomonas campestris pv.campestris.

1.1.2.2. Xanthomonas campestris pv. phaseoli.

1.1.2.3. Xanthomonas campestris pv. carotae.

1.1.2.4. Xanthomonas campestris pv. beticola.

1.1.2.5. Xanthomonas campestris pv. begoniae.

1.1.2.6. Xanthomonas campestris pv. juglandis.

1.1.2.7. Xanthomonas campestris pv. malvacearum.

1.1.2.8. Xanthomonas campestris pv. pelargonii.

1.1.2.9. Xanthomonas campestris pv. vesicatoria.

1.1.3. Ксантомонады — возбудители бактериальных болезней растений.

1.1.4. Методы борьбы с возбудителями бактериальных болезней растений.

1.2. Бактериоцины и их применение в растениеводстве.

1.2.1. Типы бактериоцинов.

1.2.2. Макромолекулярные бактериоцины.

1.2.2.1. Дефектные бактериофаги.

1.2.2.2. Бактериоцины R-типа Pseudomonas aeruginosa.

1.2.3. Бактериоцины фитопатогенных микроорганизмов.

1.2.4. Применение бактериоцинов в растениеводстве.

1.2.4.1. Контроль бактериозов с помощью интактных микроорганизмов, продуцирующих бактериоцины.

1.2.4.2. Контроль бактериозов растений, осуществляемый с помощью препаратов очищенных бактериоцинов.

2. МАТЕРИАЛЫ и МЕТОДЫ

2.1. Бактерии

2.2. Бактериальные и эукариотические вирусы.

2.3. Питательные среды.

2.4. Получение и очистка R-пиоцинов псевдомонад.

2.5. Выделение макромолекулярных бактериоцинов из клеток патоваров X. campestris.

2.6. Определение чувствительности ксантомонад к бактериоцинам методом спот-тестирования.

2.7. Флуориметрия.

2.8. Электроориентационная спектроскопия систем бактериоцин-микроорганизм.

2.9. Изучение электрофоретической подвижности клеток, обработанных бактериоцинами.

2.10. Анализ редуцирующей активности ксантомонад в системах бактериоцин-клетка-янус зеленый.

2.11. Выделение нуклеиновых кислот дефектных ксантомонадных фагов и анализ их свойств.

2.12.Электронная микроскопия.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1. Изучение чувствительности патоваров X. campestris к R-пиоцинам отдельных представителей рода Pseudomonas.

3:1.1. Выделение очищенных препаратов пиоцинов.

3.1.2. Исследование спектров антимикробного действия К-пиоцинов по отношению к патоварам X. сатрев^в.

3.1.3. Ингибирование роста X. сатревШв ру. сатревМв X. сатревЫэ ру. сатревМэ пиоцином К 1670.

3.1.4. Электронно-микроскопическое исследование взаимодействия между пиоцином Ы1670 и клеткой X. сатрез^э ру. сатрев^в.

3.1.5. Изучение чувствительности ксантомонад к псевдомонадным фагам.

3.1.6. Флуориметрия суспензий АНС-ксантомонада-бактериоцин.

3.1.7. Электро-ориентационный анализ бактериальных суспензий, обработанных фагами и бактериоцинами.

3.1.8. Определение электрокинетического (ЭКП) потенциала микроорганизмов.

3.1.9. Оценка подвижности микроорганизмов, обработанных пиоцинами и фагами.

3.1.10. Исследование влияния пиоцина Ш670 на способность клеток Х-сатрев^я ру. сатрев^в редуцировать янус зеленый.

3.2. Выделение и частичная характеристика надмолекулярных бактериоцинов фитопатогенных представителей X. сатреэМв.

3.2.1. Дефектные фаги патовара X. сатреБМэ ру. рЬавеоН.

3.2.1.1. Морфология дефектных фагов Ххатрев^в ру. рЬаэеоН.

3.2.1.2. Антимикробная активность частиц РЬХ-1 по отношению к патоварам X. сатревМэ.

3.2.1.3.Электронно-микроскопическое изучение взаимодействия частиц РЬХ-1 с клетками патоваров X. сатрев^в.

3.2.1.4. Флуориметрия систем АНС-ксантомонада-РЬХ-1.

3.2.1.5. Электроориентационная спектроскопия препаратов ксантомонада-дефектный фаг.

3.2.1.6. Исследование влияния дефектного фага РЛХ-1 на дыхательную активность ксантомонад.

3.2.1.7. Изучение нуклеиновой кислоты дефектного фага РЬХ-1.

3.2.2. Выделение и частичная характеристика бактериоцина Х.сатреэЫв ру. ре!а

§опп.

3.2.2.1. Морфология и размеры макромолекулярного бактериоцина X. сатревМв ру. ре1а

§01Ш.

3.2.2.2. Антимикробная активность ксантоцина СР1 по отношению к патоварам X. сатревМв. Микробиологические тесты.

3.2.2.3. Изучение взаимодействия ксантоцина СР1 с чувствительными ксантомонадами на основе биофизических методов.

3.2.2.4. Изучение серологического родства между К-пиоцинами и ксантоцином СР1.

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биологические свойства бактериоцинов фитопатогенных ксантомонад - возбудителей бактериозов растений»

Актуальность проблемы.

Интерес к исследованию явления бактериоциногении как одной из форм проявления антагонизма между микроорганизмами обусловлен задачами научного и практического характера:

1. Изучение бактериоциногении необходимо для понимания закономерностей борьбы между бактериями на уровне штаммов и видов за преобладание в той или иной экологической нише.

2. В сфере таксономических вопросов бактериоциногения служит выявлению филогенетического родства между микроорганизмами.

3. Одна из фундаментальных задач молекулярной биологии — изучение эволюционной связи между фагами и макромолекулярными бакте-риоцинами.

4. Бактериоцины наряду с фагами могут быть использованы в качестве удобных инструментов идентификации бактерий.

5. В последнее время растёт число сторонников идеи об использовании бактериоцинов для контроля инфекционных заболеваний человека и бактериозов растений.

Состояние вопроса.

Все известные к настоящему времени патовары ХапШотопаБ сат-ревйТБ (около 140 форм ) являются возбудителями бактериозов растений, многие из которых — экономически значимые культуры. На сегодня ещё не решена проблема разработки экспрессс-методов идентификации ксантомо7 над. Представляет интерес выяснение перспектив применения бактериоци-нов для типирования патоваров X. campestris. Другой актуальный аспект— оценка возможностей использования препаратов бактериоцинов в качестве средств защиты растений от ксантомонадных бактериозов. Бактериоцино-гения ксантомонад — практически неисследованная область микробиологии. Отсюда очевидна необходимость проведения поиска ксантомонадных бактериоцинов и изучения их свойств.

К настоящему времени из всех известных надмолекулярных бактериоцинов наиболее исследованными являются пиоцины R-типа Pseudomonas aeruginosa. Данные ДНК-ДНК гибридизации свидетельствуют о близком родстве между представителями родов Pseudomonas и Xantho-monas. В связи с этим резонна постановка вопроса о чувствительности ксантомонад к псевдомонадным пиоцинам R-типа и о дальнейшем практическом применении данных бактериоцинов в растениеводстве.

Цель работы.

Изучение способности патоваров X. campestris продуцировать мак-ромолекулярные бактериоцины и анализ чувствительности фитопатоген-ных ксантомонад к R-пиоцинам псевдомонад.

Для реализации цели в исследовании были поставлены следующие задачи:

1. Изучить бактериоциногенность патоваров X. campestris (12 форм) на основе обработки клеточных суспензий индуцирующим агентом — ми-томицином С.

2. Провести исследование свойств выделенных надмолекулярных бактериоцинов ксантомонад. 8

3. Изучить антимикробную активность псевдомонадных R-пиоцинов по отношению к патоварам X. campestris с применением традиционных и новых методических подходов.

4. Оценить перспективы практического использования псевдомонадных и ксантомонадных макромолекулярных бактериоцинов в идентификации патоваров X. campestris и в контроле бактериозов растений.

Научная новизна.

Впервые представлены доказательства антимикробного действия R-пиоцинов псевдомонад по отношению к отдельным патоварам X. campestris. Выделены и частично охарактеризованы два ранее не описанных макромолекулярных бактериоцина, продуцируемых клетками X. campestris pv. phaseoli и X. campestris pv. pelargonii.

Теоретическое и практическое значение.

Чувствительность ксантомонад к псевдомонадным бактериоцинам подтверждает заключение о филогенетическом родстве представителей родов Pseudomonas и Xanthomonas.

Селективное антимикробное действие псевдомонадных и ксантомонадных бактериоцинов на патовары X. campestris даёт основание для вывода о реальной возможности разработки схем бактериоцинотипирования фи-топатогенных представителей Xanthomonas.

В работе аргументирована перспективность применения R-пиоцинов и ксантоцина в качестве средств защиты растений от ксантомонадных бактериозов. 9

1.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Цель настоящего литературного обзора — освещение предпосылок диссертационной работы и аргументация целесообразности поставленных задач. Первая часть обзора посвящена описанию отдельных фитопатоген-ных форм X. campestris, использованных нами в исследовании. Во второй части рассмотрено явление бактериоциногении, изложена известная на сегодня информация о надмолекулярных бактериоцинах и проанализирован предшествующий опыт применения антимикробных агентов белковой природы в растениеводстве.

1.1.Характеристика отдельных фитопатогенов Xanthomonas campestris.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Садомов, Владимир Эдуардович

ВЫВОДЫ

1. Надмолекулярные бактериоцины R-типа, продуцируемые клетками Pseudomonas aeruginosa, Ps. putida и Ps. stutzeri, обладают антимикробной активностью по отношению к отдельным патоварам фитопатогена Xanthomonas campestris.

2. Корреляция данных микробиологического спот-тестирования, флуориметрии и электронной микроскопии служит доказательством активного характера взаимодействия R-пиоцинов с клетками ксантомонад.

3. В исследовании систем бактериоцин-клетка впервые применены методы электроориентационного анализа. В результате показано, что в обработанных пиоцинами ксантомонадах изменяется электрокинетический потенциал и нарушаются барьерные функции клеточных мембран.

4. Взаимодействие R-пиоцинов с клетками патоваров X. campestris сопровождается угнетением дыхательной активности микроорганизмов и нарушением функционирования их двигательного аппарата.

5. Клетки Xanthomonas campestris pv. phaseoli способны продуцировать индуцибельный дефектный бактериофаг PLX-1, проявляющий антибактериальную активность по отношению к ряду других патоваров данного вида. При взаимодействии частиц PLX-1 с чувствительной клеткой ДНК фага не инъецируется в микроорганизм. Сходство генома фага и ДНК его клетки-продуцента по ГЦ-составу даёт основание предполагать, что частицы PLX-1 содержат бактериальную нуклеиновую кислоту.

6. Фитопатоген X. campestris pv. pelargonii способен продуцировать надмолекулярный бактериоцин, ксантоцин СР1, который имеет морфологическое сходство с сокращающимися хвостовыми отростками бактериофагов. Ксантоцин СР1 угнетает рост отдельных патоваров X. campestris, что подтверждается результатами микробиологических и биофизических экс

105 периментов. Показано, что между ксантоцином СР1 и Я-пиоцинами нет серологического родства.

7. Представлено обоснование целесообразности дальнейшей разработки схемы идентификации патоваров X. сатрезйтБ на основе их чувствительности к определённым сочетаниям псевдомонадных и ксантомонадных бактериоцинов.

106

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Рассмотрим возможные пути практического использования полученных в диссертационной работе результатов.

Селективное действие псевдомонадных пиоцинов по отношению к определённым патоварам X. campestris вызывает интерес с точки зрения использования данных бактериоцинов в идентификации различных штаммов ксантомонад. Из таблиц 5 и 6 следует, что каждому из патоваров свойственна чувствительность к определённому сочетанию пиоцинов. Однако, необходимо ещё раз отметить, что приведёнными в таблицах формами не исчерпывается всё многообразие штаммов X. campestris, включающее к настоящему времени около 140 патоваров [142]. Для разработки схем пиоци-нотипирования ксантомонад необходимо проведение исследований как с другими патоварами, так и с новыми бактериоцинами. Целесообразно использовать для этой цели и «собственные» бактериоцины X. campestris. Формулируя идею о пиоцинотипировании ксантомонад, мы ориентируемся и на предшествующий опыт других исследователей. Так, в работе Steensma [131] опубликована схема идентификации различных видов и штаммов рода Bacillus с помощью определенных PBSX-бактериоцинов. Другой яркий пример — работа Borst, De Jong [44], в которой обосновано применение псевдомонадных бактериоцинов для типирования нейссерий. Авторы разработали схему, согласно которой 39 штаммов Neisseria gonorrhoae идентифицируются по чувствительности к сочетанию из 8-ми пиоцинов Р. aeruginosa [44].

Обсуждая вопрос о перспективах использования бактериоцинов в типировании фитопатогенных ксантомонад, мы не принижаем значимости других способов идентификации. Разумеется, ПЦР-диагностика и ДНК-ДНК гибридизация являются высокочувствительными и многообещающи

107 ми методами данного направления. Однако, нужно учитывать, что их реализация требует применения довольно дорогостоящего оборудования. Пока это доступно лишь специализированным лабораториям. Предлагаемый нами метод отличается простотой и не требует больших материальных затрат. Кроме того, пиоцинотипирование можно считать экспресс-методом. При осуществлении идентификации ксантомонад с помощью определенного набора пиоцинов можно использовать репликатор, в отдельные ячейки которого вносятся бактериоцины. Далее проводится спот-тестирование анализируемого патовара посредством репликатора.

Таким образом, полученные в диссертационной работе результаты позволяют сделать заключение о реальности разработки, схемы типирова-ния патоваров X. сатрезйтэ по их чувствительности к псевдомонадным и ксантомонадным бактериоцинам.

Целесообразно отметить ещё одно направление практического применения бактериоцинов в растениеводстве. К настоящему времени достаточно аргументировано использование микробов-антагонистов при их интродукции в искусственные и естественные биоценозы с целью угнетения развития фитопатогенов [6]. Предварительное изучение взаимодействия тех или иных бактериоцинов с возбудителями бактериозов значительно облегчит скрининг подходящих для таких целей бактерий. На наш взгляд, в таких исследованиях будет плодотворным применение методических подходов, описанных в диссертационной работе.

Рассмотрим ещё один аспект использования бактериоцинов в растениеводстве. Мы считаем перспективным применение псевдомонадных Я-пиоцинов для предпосевной обработки семян, поражённых фитопатоген-ными ксантомонадами. Дефектный фаг РЬХ-1 для таких целей неудобен в связи с его быстрой инактивацией инородным материалом. Ксантоцин СР1, по нашему мнению, можно применять для контроля отдельных ксантомо

108 надных бактериозов. Этот бактериоцин, как и R-пиоции, сохраняет антимикробную активность продолжительное время даже в неочищенных лиза-тах. Наша точка зрения аргументирована следующими соображениями. Во-первых, пиоцины не уступают антибиотикам и химическим агентам по части эффективности антимикробного действия. Во-вторых, фитопатогенные микроорганизмы довольно быстро приобретают устойчивость к антибиотикам в результате генетической трансмиссии R-плазмид [103]. Применение комбинаций (сочетаний) пиоцинов с различной рецепторной специфичностью практически исключает вероятность возникновения в популяциях X. campestris бактериоциноустойчивых форм. В-третьих, получение препаратов пиоцинов не сопряжено с большими материальными затратами. Культуры P. aeruginosa неприхотливы в отношении ростовых потребностей.

Процедура выращивания концентрированных (109—5-109 кл/мл) суспензий псевдомонад и их обработка индуцирующим агентом не сопряжены с технологическими трудностями.

В будущем мы планируем апробировать на практике метод обработки семян пиоцинами и оценить эффективность этого способа в борьбе с ксантомонадными бактериозами растений.

Результаты настоящего исследования могут служить предпосылками в дальнейшей разработке антибактериальных препаратов псевдомонадных и ксантомонадных бактериоцинов для контроля бактериозов растений, вызываемых патоварами X. campestris.

109

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Садомов, Владимир Эдуардович, 2000 год

1. Адаме М. Бактериофаги / Пер. с англ. М.: Иностранная литература, 1961.-527 с.

2. Белътюкова К.И., Гвоздяк Р. И. Результаты использования некоторых антибиотиков в борьбе с бактериозами и другими болезнями сельскохозяйственных растений // Применение антибиотиков в растениеводстве -Ереван: Из-во АН Арм. ССР, 1961,- С. 38-49.

3. Ваксман З.А. Антибиотики. М.: Из-во АН СССР, 1946. - 109с.

4. Владимиров Ю.А., Добрецое Г.Е. Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран. М.: Наука, 1980. - 268 с.

5. ГолъдфарбД.М. Бактериофагия. М.: Медгиз, 1961. - 298 с.

6. Гукасян А.Б., Гродницкая И.Д. Интродукция микробов-антагонистов в лесные и искусственные биоценозы // Защита и карантин растений. 1998. - № 9. - С. 13.

7. Жтенков Е.А. Изомеризация аппарата адсорбции Т-чётных бактериофагов: Автореф. дис. .канд. биол. наук. М., 1984. - 16 с.

8. Жиленков Е.Я., Месянжинов В.В., Селиванов H.A. и др. Бактериофаг Т4 как модель для изучения кооперативных двигательных процессов // Докл. АН СССР. 1978. - Т. 238, №6. - С. 1471-1475.

9. Жиленков E.JI., Степанов A.B., Фомченков В.М. и др.Изучение начальных стадий взаимодействия умеренного фага ф04 с клеткой Pseudomonas aeruginosa//Микробиология. 1997. - №4. - С. 532-538.

10. М.Жиленков E.JI., Фомченкое В.М., Новиков И.А. и др. Экспресс-методы скрининга поверхностно-активных биоцидов //Биоповреждения в промышленности: Тез. докл. научн. практ. конф. 4.1.- Пенза, 1993.- С. 6-8.

11. Лабинская A.C. Микробиология с техникой микробиологических исследований. М.: Медицина, 1978. - С. 394.15 .Лакович Д. Основы флуоресцентной спектроскопии. М.: Мир, 1986.-С. 27.

12. Лебедев А.Д., Левчук Ю.Н., Ломакин A.B., Носкин В.А. Лазерная корреляционная спектроскопия в биологии. Киев: Наукова думка, 1987. -256 с.

13. Лурия С., Дарнелл Дж., Балтимор Д., Кэмпбелл Э. Общая вирусология. М.: Мир, 1981.-200 с.

14. Маниатис Е., Фрич Э., Сэмбрук Д. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование / Пер. с англ. М.: Мир, 1984. - 480 с.

15. Матвеева Е.В., Чумаевская М.А. Диагностика бактериального увядания сельскохозяйственных ратений и меры борьбы с ним.: Методические указания. М., 1986. - 20 с.

16. Матышевская М.С. Влияние фитопатогенных бактерий на фи-зиолого-биохимические свойства растений // Фитопатогенные бактерии. -Киев: Наукова думка, 1975. 236 с.

17. Мирошников А.И., Фомченкое В.М., Иванов А.Ю. Электрофизический анализ и разделение клеток. М.: Наука, 1986. - 184 с.1.l

18. Мишустин E.H., Трисвятский JI.А. Микробы и зерно. М.: Из-во АН СССР, 1963.

19. Мурас В.А., Гвоздяк Р.И., Житкевич Н.В., Азимцев А.Г. Чувствительность к антибиотикам гладких и шероховатых форм некоторых фи-топатогенных бактерий // Микробиол. журн. 1985. - Т. 47, № 5. - С.53-57.

20. Наумов H.A. Болезни сельскохозяйственных культур. М.: Наука, 1952.-310 с.

21. Овчаров К.Е. Физиологические основы всхожести семян. М.: Наука, 1969. - 280 с.

22. Ордин А.П. Влияние микрофлоры на всхожесть зерна пшеницы при хранении // Вопросы семеноводства, семеноведения и семенного дела: Сб. научн. трудов. Киев: Урожай, 1964. - Вып.2. - С. 334-338.

23. Пересыпкин В.Ф., Тютерев С.Л., Баталова Т.С. Болезни зерновых культур при интенсивных технологиях их возделывания. М.: Агро-промиздат, 1991. - 272 с.

24. Селиванов H.A., Жиленков ЕМ., Месяжинов В.В. и др. Изучение кооперативноти изменения положения хвостовых фибрилл бактериофага T4D // Докл. АН СССР. 1978. - Т.242, №4. - С.949-952.

25. Справочник по защите растений /Под. ред. Ю.Н. Фадеева. М.: Агропромиздат, 1985. - 415 с.

26. Фихман Б.А. Микробиологическая рефрактометрия. М.: Медицина, 1967. - 280 с.

27. Фомченков В.М. Исследование электроориентации и диэлектро-фореза клеток турбидиметрическим методом: Автореф. .канд. физ.-мат. Наук. Ин-т биофизики СО АН СССР, Пущино, 1982. - 17 с.

28. Фомченков В.М., Денесюк А.И. Теоретическая модель высокочастотной релаксации электроориентации бактериальных клеток // Электронная обработка материалов. 1980, № 2 (92). - С. 65-70.112

29. Фомченков В.М., Иванов А.Ю., Мирошников А.И., Чугунов В. А. Электрофизический анализ повреждения внешней мембраны клеток Escherichia coli //Микробиология. 1990. - Т.59, вып. 1. - С. 19-25

30. Фомченков В.М., Мазаное А.Л., Чугунов В.А. и др. Изменение электрических характеристик бактериальных клеток при нарушении барьерной функции цитоплазматической мембраны // Микробиология. 1986. -Т.55, вып. 5. - С. 754-759.

31. Фомченков В.М., Мирошников А.И., Иванов А.Ю., Кувшинникова В. В. Диэлектрофоретическое поведение клеточных суспензий //Электронная обработка материалов. 1975, № 2 (62). - С. 60-64.

32. Abo-El-Dahab М.К., El-Goorani М.А. Antagonism among strains of Pseudomonas solanacearum //Phytopathology. 1969. - V/ 59. - P. 1005-1007.

33. Ackermann H.-W., Brochu G. Phage-like bacteriocins // Laskin A.I. and Lechevalier H.A. CRC Handbook of Microbiology. 2nd ed. -V. 2. - CRC Press, Boca Raton, Fla. - 1978. - P.691.

34. Ackermann H.-W., Dubow M.S. Viruses of Prokaryotes. // General properties of bacteriophages. CRC Press, Boca Raton, Fl. 1987. - V. 1. - P. 202.

35. Ackermann H.-W., Gauvrean L. Phages defectifs chez Chromobacte-rium // Zentralbl. Bacteriol. Parasitenkd. Infektionskr. Hyg. Abt. 1 Orig. Reihe A. 1972. - V. 221.-P. 196.

36. Bayer M.E. Adsorbtion of bacteriophages to adhesions between wall and membrane of Escherichia coli // J. Virol. 1968. - V. 2. - P.346-356.

37. Beckendorph S.K. Structure of the distal half of the bacteriophage T4 tail fiber//J. Mol. Biol. 1973. -V. 73.- P.37-53.

38. Bergey's Mannual of determinative bacteriology. 8th ed. - Baltimore: London: Williams and Wilkins Comp. - 1974. - 1268 p.

39. Birdsell D.C., Hathaway G.M., Rutberg L. Characterization of temperate Bacillus bacteriophage ф105 //J. Virol. 1969. - V. 4., №3. - P. 264 -270.113

40. Bradley D.E. Ultrastructure of bacteriophages and bacteriocins // Bacteriol. Rev. 1967. - V. 31. - P.230-314.

41. Bradley D.E. The adsorbtion of Pseudomonas aeruginosa pilus-dependent bacteriophages to a host mutant with non-contractile pili // Virology. -1974.-V. 58. P.149-163.

42. Bradley D.E., Dewar C.A. II J. Gen. Virol. 1967. - V. 1. - P.179.

43. Brenner S., Home R. W. A negative staining method for high resolution electron microscopy of viruses // Biochim. Boiphys. Acta. 1959. - V. 34. -P. 103-110.

44. Chatterjee A.K., Starr M.P. Transfer among Erwinia spp. and other enterobacteria of antibiotic resistance carried on R factors 11 J. Bacteriol. 1972. - V. 112.-P. 576-584.

45. Christofi N., Wilson M.I., Old D.C. Fimbriae and haemaglutinins in erwinias of the cerotovora group // J. Appl. Bacteriol. 1979. - V. 46. - P. 179183.

46. Cornil A.-V., Babes V. II Les bacteries. Paris.: Balliere. - 1886. -P.182-189.

47. Crowley C.F., De Boer S.H. Sensitivity of some Erwinia carotovora serogroups to macromolecular bacteriocins // Can. J. Microb. 1980. - V. 26, №9.-P. 1023-1028.

48. Cuppels D., Hanson R.S., Kelman A. Production of bacteriocin-like compounds by Pseudomonas solanacearum // Abstr. Ann. Meet. Am. Phytopathol. Soc.- 1975.-№ 155.114

49. Cuppels D., Hanson R.S., Kelman A. Isolation and characterization of a bacteriocin produced by Pseudomonas solanacearum //J. Gen. Microb. 1978. -V. 109.-P. 295-303.

50. De Ley J., Park I. W., Tijtgat R., Van Ermengem J. DNA homology and taxonomy of Pseudomonas and Xanthomonas // J. Gen. Microb.-1966. V. 42. - P. 43-56.

51. Dalrymple B., Mattick J.S. An analysis of the organization and evolution of tipe 4 fimbrial (Me Phe) subunit proteins // J. Mol. Biol. 1987. - V. 25. P.-261-269.

52. Echandi E. Biological control of bacterial cancer of tomato with bac-teriocins from corynebacterium michiganense // Cappels et al. Abstr. Ann. Meet. Am. Phytopathol. Soc. - 1975. - № 154.

53. Echandi E. Bacteriocin production by Corynebacterium michiganense // Phytopathology. 1976. - V. 66. - P. 430-432.

54. Elleman T.C. Pilins of Bateroides nodosus: Molecular basis of sero-typic variation and relationship to other bacterial pilins // Microb. Rev. 1980. -V. 52. - P. 233-247.

55. Endo F., Tsuyama H., Hakatani F. Studies on the productionof antibacterial agent by Erwinia carotovora and its properties // Ann. Phytopathol. Soc. Jap. 1975.-V. 41.-P. 40-48.

56. Engler G et al. Agrocin-84 sensitivity: a plasmid determined property in Agrobacterium tumefaciens // Mol. Gen. Genet. 1975, - V. 138. - P. 345-350.

57. Erskine J.M., Lopateck L. In vitro and vivo interactions between Erwinia amylovara and related saprophytic bacteria // Can. J. Microbiol. 1975. -V. 21.-P. 35-41.

58. Foglesong M.A., Markovetz A.J. Morphology of Bacteriophage-like particles from Fusobacterium symbiosum // J. Bateriol. 1974. - V. 119, № 1. -P.325-329.115

59. Fredericq E., Oth A., Fontaine F. The ultraviolet spectrum of deoxyribonucleic acids and their constituents // J. Mol. Biol. 1961. - V. 3. - P. 11-17.

60. Fredericq P. Sur la pluratite des récepteurs d'antibiose de E. coli // C. R. Soc. Biol. 1946.-V. 140.-P. 1189-1190.

61. Fredericq P. On the nature of colicinogenic factors: a review // J. Theor. Biol. 1963. - V. 4. - P. 159-165.

62. Garrett C.M.E., Panagopoulos C.G., Crosse J.E. Comparison of plant pathogenic pseudomonads from fruit trees // J. Appl. Bacteriol. 1966. - V. 29. -P. 342-356.

63. Garro A.J., Marmur J. Defective bacteriophages // J. Cell Physiol. -1970.-V. 76. -P. 253.

64. Glagolev A.N., Skulachev V.P. //Nature. 1978. - V. 272. - P. 280.

65. Goodman R.N. In vitro and in vivo interactions between components of mixed bacterial cultures isolated from apple buds // Phytopatology. 1965. -V. 55.-P. 217-221.

66. Gratia A. Sur un remarquable example d'antagonisme entre deux souches de colibacille // C. R. Soc. Biol. 1925. - Y. 93. - P. 1040-1041.

67. Gratia A. Antagonisme microbien et «bacteriophagie» // Ann. Inst. Pasteur Paris. 1932. - V. 48. - P. 413-437.

68. Haag W.L., Vidaver A.K. Purification and characterisation of syringa-cin 4-A, a bacteriocin from Pseudomonas syringae 4-A // Antimicrob. Agents Chemother. 1974. - V. 6. - P. 76-83.

69. Haahtela K, Tarkka E., Korhonen T.K. Type 1 fimbria-mediated adhesion of enteric bacteria to grass roots // Appl. Environ. Microbiol. 1985. - V. 49.-P. 1182-1185.

70. Hamon Y. Contribution a l'etude des pyocines // Ann. Inst. Posteur. -1956.-V. 91.-P. 82-90.116

71. Hamon Y., Maresz J., Peron Y. Description de quelques épreuves permattant la distinction entre les phages létaux de lysogenie et les bacteriocines // C. R. Acad. Sei. Ser. D. 1968. - V. 267. - P.1118.

72. Hamon Y, Peron Y. Les propriétés antagonistes réciproques parmi les Erwinia. Discussion de la position toxonomique de ce genre // C. R. Acad. Sei. -1961.-V. 253.-P. 913-915.

73. Hamon Y., Peron Y. Les Bacteriocines, elements taxonomiques eventuels pour certains bacteries // C. R. Acad. Sei 1962. - V. 254. - P. 28682870.

74. Hantke K., Braun V. Fluorescence studies on the first steps of phage-host interactions // Virolog. 1974. - V. 58. - P.310-312.

75. Hardy K.G. Colicinogeny and related phenomena // Bacteriol. Rev. -1975. V. 39, № 4. - P.464-515.

76. Hayashi T., Baba T., Matsumoto H., Terawaki Y. Phage conversion of cytotoxin production in Pseudomonas aeruginosa // Molec. Microbiol. 1990. -V. 4, №10.-P. 1703-1711.

77. HildebrandD.C., Palleroni N.J.,Schroth M.N. Deoxyribonucleic acid relatedness of 24 xanthomonad strains representing 23 Xanthomonas campestris pathovars and Xanthomonas fragariae I I J. Appl. Bacteriol. 1990. - V. 68. - P. 263-269.

78. Hildebrand D.C., Schroth M.N. A new species of Erwinia causing the drippy nut disease of life oaks // Phytopathology. 1967. - V. 57. - P. 250-253.117

79. Hollow ay B. W., Krishnapillai V. Bacteriophages and bacteriocins I I Clarke P.H. and Richmond M.N. (ed) Genetics and biochemistry of Pseudomonas. London: John Wiley and sons. -1975. - P. 99-132.

80. Htay K, Kerr A. Biological control of crown gall: seed and root inoculation // Appl. Bacteriol. 1974. - V. 37. - P. 525-530.

81. Ito S., Kageyama M. Relationship between pyocins and a bacteriophage in Pseudomonas aeruginosa // J. Gen. Appl. Microbiol. 1970. - V.16. -P.231-240.

82. Ito S., Kageyama M., Egami F. Isolation and characterisation of pyocins of Pseudomonas aeruginosa // J. Gen. Appl. Microbiol. 1970. - V. 16. - P. 205-214.

83. Jacob F. Biosynthese induite et mode d'action d'une pyocine antibiotique de Pseudomonas pyocyanea // Ann. Inst. Pasteur Paris. 1954. - V. 86. -P. 149-160.

84. Jacob F., Lwoff A., Simonovich A., Wollman E. Definition de quelques termes relatifs à la lysogènie // Ann. Inst. Pasteur Paris. 1953. - V. 84. P.222.

85. Kageyama M. Studies of a pyocin. I. Physical and chemical properties // J. Biochem. 1964. - V. 55. - P. 49-53.

86. Kageyama M., Egami F. On the purification and some properties of a pyocin, a bacteriocin produced by Pseudomonas aeruginosa // Life Sei. 1962. -V. 9.-P. 471-476.

87. Kageyama M, Ikeda K, Egami F. Studies of a pyocin. III. Biological properties of the pyocin // J. Biochem. 1964. - V. 55. - P. 59-64.

88. Kageyama M., Shinomiya T., Aihara Y., Kabayashi M. Câracterisa-tion of a bateriophage related to R-type pyocins // J. Virol. 1979. V. 32, №3. -P. 951-957.118

89. Kaziro F., Tanaka M. Studies of the mode of action of pyocin. I. Inhibition of macromolecular synthesis in sensitive cells // J. Biochem. 1965. - V. 57.-P. 689-695.

90. Kerr A. Biological control of crown gall: seed inoculation // J. Appl. Bacteriol. 1972. - V. 35. - P. 493-497.

91. Kerr A., Htay K. Biological control of crown gall through bacteriocin production // Physiol. Plant Pathol. 1974. - V. 4. - P. 37-44.

92. Labedan B., Letellier L. Energetics of the first steps of the phage infection // J. of Bioenergetics and Biomembranes. 1984. - V. 16, № 1. - P. 1-8.

93. Lacy G.N., Leary J. V. Transfer of antibiotic resistance plasmid RP1 into Pseudomonas phaseolicola in vitro and in planta // J. Gen. Microb. 1975. -V. 88. - P. 49-57.

94. Lai M., Panopoulos N.J., Shaffer S. Transmission of R plasmids among Xanthomonas spp. and other plant pathogenic bacteria // Phytopatology. -1977. V. 67, № 8. - P. 1044-1050.

95. Lazar I., Crosse J.E. Lysogeny, bactericinogeny and phage types in plum isolates of Pseudomonas morsprunorum Wormald // Rev. Roum. Biol. Ser. Bot. 1969. - V. 14. - P. 325-333.

96. Liew K.W., Alvarez A.M. Biological and morphological characterization of Xanthomonas campestris bacteriophages // Phytopathology. 1981. -V. 71, №3.-P. 269-276.

97. Matthews P. Bacteriocin activity in Pseudomonas morsprunorum and P. syringae // John Innes Inst. Ann. Rept. 1965. - V. 1964. - P35-36.119

98. Mclntyre J.L., Kuc J., Williams E.B. Protection of pear against fire blight by bacteria and bacterial sonicates // Phytopathology. 1973. - V. 63. - P. 872-877.

99. Moore L.W. Biological control of crcwn gall with an antagonistic Agrobacterium species // Hanson R, Kelman A. Production of bacteriocin-like compaunds by Pseudomonas salanacearum. Abstr. Ann. Meet. Am. Phytopa-thol. Soc.- 1975.-№155.

100. Morse S.A., Vanghan P., Jonson D., Iglevski B.N. Inhibition of Neisseria gonorrhoeae by a bateriocins from Pseudomonas aeruginosa // Antimicrob. Agents and chemotherapy. 1976. -.V. 10. - № 2. - P. 354-362.

101. Nelson G.A., Semeniuk G. An antagonistic variant of Corynebacte-rium insidiosum and some properties of the inhibitor // Phytopathology. 1964. -V. 54.-P. 330-335.

102. New P.B., Kerr. A. Biological control of crown gall: field measurements and glasshouse experiments // J. Appl. Bacteriol. 1972. - V. 35. - P. 279287.

103. Nomura M. Colicins and related bacteriocins // Annu. Rev. Microbiol. 1967. - V. 21. - P. 257.

104. Okabe N. Studies on Pseud, solanacearum. V. Antagonism among the strains of P. solanacearum // Rept. Fac. Agric. Shizuoka Univ. 1954. - V. 4. - P. 37-40.

105. Okabe N., Goto M. Bacteriophages of plant pathogens // Ann. Rev. Phytopathol. 1963. - V. 1. - P. 397-418.

106. Okamoto K., Mudd J. A., Mangan J et al. Properties of the defective phage of Bacillus subtilis // J. Mol. Biol. - 1968. - V. 34. - P. 413-428.

107. Ozaki M., Higashi F., Saito H. et al. Identity of megacin A with phospholipase A // Biken J. - 1966. - V. 9. - P. 201.120

108. Panopoulos N.J., Guimaraes W.V., Cho J.J., Schroth M.N. Conju-gative transfer of Pseudomonas aeruginosa R factors to plant pathogenic Pseudomonas spp. V. 9. -P. 201.IIPhytopathology. 1975. - V. 65. - P. 380-388.

109. Paters on A.C. Bacteriocinogeny and lysogeny in the genus Pseudomonas // J. Gen. Microbiol. 1965. - V. 39. - P. 295-303.

110. Plate C.A., Suit J.L., Jetten A.M., Luria S.E. Effects of colicin K on a mutant of Escherichia coli deficient in Ca , Mg activated adenosine triphosphatase // J. Biol. Chem. 1974. - V. 249. - P. 6138-6143.

111. Reanney D.C., Ackermann H.-W. Comparative biology and evolution of bacteriophages // Adv. Vir. Res. 1982. - V. 27. - P. 205-280.121 .Reeves P. The Bacteriocins 11 Bacteriol. Rev. 1965. - V. 29. - P.24.25.

112. Reeves P. The Bacteriocins. New York: Springer-Verlag, 1972.

113. Riggle J.H., Klos E.J. Relationship of Erwinia herbicola to Erwinia amylovora // Can. J. Bot. 1972. - V. 50. - P. 1077-1083.

114. Romantschuk M., Bamford D. The causal agent of halo blight in bean, Pseudomonas syringae pv. phaseolicola, attaches to stomata via its pili // Microb. Pathog. 1986. - V. 1. - P. 139-148/

115. Sawada H., Azegami M., Ishii S. Lytic enzyme produced by Pseudomonas aeruginosa concomitantly with bacteriophage PS 17. Purification, characterization and comparison with PRl-lysozyme // J. Biochem. 1981. - V. 89. -P. 275-284.

116. Schroth M.N., Thomson S.V., Hildebrand D.S., Moller W.J. Epidemiology and control of fire blight // Ann. Rev. Phytopathol. 1974. - V. 12. - P. 389-412.

117. Shinomiya T., Ina S. Genetic comparison of bacteriophage PS 17 and Pseudomonas aeruginosa R-type pyocin // J. Bacteriol. 1989. - V. 171, № 5. -2287-2292.121

118. Shinomiya T., Ohsum M, Kageyama M. Defective pyocin particles produced by some mutant strains of Pseudomonas aeruginosa // J. Bacteriol. -1975.-V. 124.-P. 1508-1521.

119. Shinomiya 71, Shiga S. Bactericidal activity of the tail of Pseudomonas aeruginosa bacteriophage PS 17 // J. Virol. 1979. - V. 32, № 3. - P.958-967.

120. Smidt M.L., Vidaver A.K. Bacteriocin production by Pseudomonas syringae PS W-l in plant tissue // Can. J. Microb. 1982. - V. 28. - P. 600-604.

121. Steensma H.Y., Robertson L.A., van Elsas J.D. The occurrence and taxonomic value of PBSX-like defective phages in the genus Bacillus // Antonie van Leeuwenhock. 1978. - V. 44. - P. 353-366.

122. Stemmer W.P.C., Sequeira L. Fimbriae of phytopathogenic and symbiotic bacteria//Phytopathology. 1987. - V. 77. - P. 1633-1639.

123. Stirm S., Bessler W., Fehmel F. et al. Isolation of spike-formed particles from bacteriophage Lysates It Virology. 1971. - V. 45. - P. 303.

124. Stirm S., Bessler W., Eehmel F. et al. Über eine Bakteriophagen-induzierte Colansäure-Depolymerase // Zentrabi. Bakteriol. Parasitenkd. Inf. Hyg. Abt. 1 Orig. Reiche A. 1974. - V. 226. - P. 26.

125. Stonier T. Agrobacterium tumifaciens Conn.II. Production of an antibiotic substance //J. Bacteriol. 1960. - V. 79. - P. 889-898.

126. Tagg J.R., Dajani A.S., Wannamaker L.W. Bacteriocins of grampositive bacteria // Bacteriol. Rev. 1976. - V. 40. - P. 722.

127. Takashi K., Yasuhiko O., Ishii Shin-ichi Isolation and characterization of pyocin R1 fibers // J. Biochem. 1982. - V. 91, №.3. - P. 825-835.

128. Uratani Y, Kageyama M. A fluorescent probe response to the interaction of pyocin R1 with sensitive cells // J. Biochem. 1977. - V. 81. - P. 333341.122

129. Van den Mooter M. and Swings J. Numerical analysis of 295 phe-notypic features of Xanthomonas strains and related strains and an improved taxonomy of the genus // Int. J. Syst Bacteriol. 1990. - V. 40. - P. 348-369.

130. Van Doom J., Boonekamp P.M., Oudega B. Partial characterization of fimbriae of Xanthomonas campestris pv. hyacinthi // Mol. Plant. Microbe Interact. 1994. -V.l.- P. 334-344.

131. Vauterin L., Swings J., Kerstens K. Grouping of Xanthomonas campestris pathovars by SDS-PAGE of proteins // Gen. Microbiol. 1991. - V. 137. -P. 1677-1687.

132. Vauterin L., Swings J., Kerstens K et al. Towards an improved taxonomy of Xanthomonas // Int. J. Syst. Bacteriol. 1990. - V. 40. - P. 312-316.

133. Vervliet G., Holsters M., Teuchy H. et al. Characterization of different plaqe-forming and defective temperate phages in Agrobaterium strains // J. Gen. Virol. 1975. - V. 26. - P. 33-48.

134. Vesper S.J. Production of pili (fimbriae) by Pseudomonas fluores-cens and correlation with attachment to corn roots // Appl. Env. Microb. 1987. -V. 53.-P. 1397-1405.

135. Vidaver A.K., Mathys M.L., Thomas M.E., Schuster M.L. Bacte-riocins of the phytopathogens Pseudomonas syringae, P. glycinea and P. phaseo-licola // Can. J. Microbiol. 1972. - V. 18. - P. 705-713.

136. Vidaver A.K., Schuster M.L. Characterization of Xanthomonas phaseoli bacteriophages // J. Virol. 1969. - V. 4, № 3. - P. 300-308.

137. Wrather J.A., Kuc J., Williams E.B. Protection of apple and pear fruit tissue against fireblight with nonpathogenic bacteria // Phytopathology. -1973.-V. 63.-P. 1075-1076.

138. Yokokura T., Kodaira S., IshiwaH., Sakurai T. Lysogeny in lactoba-cilli // J. Gen. Microb. 1974. - V. 84. - P. 277-284.123

139. Yokota S.I., Hayashi T., Matsumoto H. Identification of the lipopolysaccharide core region as the receptor site for a cytotoxin-converting phage ф CTX // J. Bateriol. 1994. - V. 176, № 17. - P. 5262-5269.