Биологические особенности коллекционых образцов стевии (Stevia rebaudiana Dertoni) и создание исходного селекционного материала тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.05, кандидат сельскохозяйственных наук Дубянский, Марк Маркович

• Дубянский, Марк Маркович
• кандидат сельскохозяйственных наук
• 1999

Оглавление диссертации кандидат сельскохозяйственных наук Дубянский, Марк Маркович

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Материалы исследования. °°

2.2. Методы исследования

ГЛАВА 3. ОНТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗВИТИЕ СТЕШИ.

5.1. Особенности формирования листового аппарата и репродуктивных органов стевии. o.e. Этапы органогенеза стевии.

ГЛАВА 4. СОЗДАНИЕ ИСХОДНЫХ ФОРМ СТЕВИИ И ПОДДЕРЖАНИЕ

С0РТ00БРАЗЦ0В В ИСКУССТВЕННЫХ УСЛОВИЯХ.

4.1. Получение нового исходного материала стевии и его характеристика.

4.2. Влияние температурного фактора на длительное хранение стевии в культуре in vitro.

4.3. Влияние субстрата и удобрений на рост и развитие стевии в условиях закрытого грунта.

ГЛАВА 5. ОТБОР РАСТЕНИЙ ПО РЕЗУЛЬТАТАМ РОСТА И РАЗВИТИЯ

В ПОЛЕВЫХ УСЛОВИЯХ.

5.1. Характеристика коллекционных образцов.

5.2. Отбор лучших сортообразцов с применением статистических исследований.

ВЫВОДЫ.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биологические особенности коллекционых образцов стевии (Stevia rebaudiana Dertoni) и создание исходного селекционного материала»

Стевия - источник низкокалорийных сладких веществ сте-зиозида, ребаудиозидов, дулькозидов и стевиолбиозида, которые б 150-400 раз слаще сахарозы. Это тропическое растение с соответствующими требованиями к среде обитания. Для него необходимы высокие и стабильные температура и влажность, короткий световой день, определенный состав почвы. В условиях центральных областей России стевия может возделываться только по однолетнему циклу. Это и определяет специфику ее возделывания .

При интродукции и разведении стевии было выявлено, что эта культура характеризуется неустойчивым индуцированием жизнеспособных семян, их невысокой всхожестью. Отсутствие районированных сортов стевии, адаптированных к условиям умеренного климата замедляет распространение и внедрение в сельскохозяйственное производство этой культуры. Неприспособленность растения к умеренному климату обусловливает необходимость селекционной работы по созданию сортов стевии, адаптированных к климатическим зонам Российской Федерации. Наряду с высокой продуктивностью зеленой массы при максимальном содержании гликозидов будущие сорта стевии должны быть устойчивыми к неблагоприятным климатическим факторам среды, защищенными от вредителей и болезней, приспособленными к механизированному возделыванию.

Поэтому изучение особенностей онтогенетического развития стевии в условиях умеренного климата, разработка методов получения нового исходного материала и его использование для создания высокопродуктивных сортов, пригодных для возделывания в России, является актуальным.

Цель диссертационной работы: Изучить этапы онтогенетического роста и развития различных генисточников стевии в условиях ЦЧР и выделить формы с ценными хозяйственно-полезными признаками.

Задачи исследований.

1. Изучить особенности формирования вегетативных и генеративных органов стевии.

2. Разработать метод создания растений с повышенной плоидностью и получить триплоидные и тетраплоидные формы стевии.

3.Установить сроки длительного хранения растений стевии в условиях in vitro.

4. Выбрать оптимальный субстрат для выращивания рассады стевии.

5. Выявить и оценить набор хозяйственно-полезных признаков, сопряженных с увеличением продуктивности растений.

6. Провести статистическую обработку показателей хозяйственно- полезных признаков с применением квартильного анализа.

7. Отобрать группы коллекционных образцов наиболее адаптированных к влажным и засушливым вегетационным периодам.

Новизна работы. В результате исследований впервые разработаны: схема органогенеза стевии в условиях умеренного климата; метод перевода растений на более высокий уровень плоидности путем колхицинирования in vitro, позволивший по

- о ~ лучить триплоидные и тетраплоидные формы стевии; условия длительного хранения стевии в культуре in vitro, позволившие сохранять беспересадочно растения в течение 240 дней, Впервые разработан статистический метод отбора лучших коллекционных образцов стевии для различных климатических зон.

Теоретическое и практическое значение работы: выявленные биологические особенности стевии позволяют понять закономерности роста и развития растений в условиях умеренного ¡шмата, что имеет важное значение для проведения селекционных работ. Отработанный метод колхицинирования позволяет получать новый исходный материал с повышенной плоидностью, что предполагает увеличение продуктивности. Разработанный статистический метод выделения селекционного материала дал возможность отбирать коллекционные образцы для разных климатических зон.

На защиту выносятся следующие положения:

- Стевия, как и все цветковые растения, в онтогенезе проходит 12 этапов органогенеза, но они имеют специфическую для нее продолжительность.

- На воздействие мутагенного вещества колхицина стевия реагирует образованием полиплоидных и миксоплоидных растений.

- Наиболее важными сортообразующими показателями из числа изученных являются высота растения и сухой вес листьев.

- Применением статистических исследований удается усовершенствовать отбор лучших сортообразцов.

- Оптимальным субстратом для выращивания рассады стевии является смесь песка, чернозема и гидрогеля.

Апробация работы: Основные положения работы доложены на следующих конференциях. На научно-практической конференции в Рамони в 1996 г, (Воронежская область, Рамонский район., ВНИ-ИСС), на втором международном симпозиуме "Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования", в 1997 г. в Пущино; на Межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов в Воронеже в 1997 г.; на четвертой международной конференции "Регуляторы роста и развития растений" в Москве в 1997 г.; на втором делегатском съезде Русского ботанического общества в Санкт-Петербурге в 1998 г.; на третьем международном симпозиуме "Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования", в 1999 г. в Пущино.

Реализация результатов исследований. По материалам исследований опубликовано 6 статей.

Заключение диссертации по теме «Селекция и семеноводство», Дубянский, Марк Маркович

- 138 -ВЫВОДЫ

1. Впервые установлена продолжительность этапов органогенеза стевии в процессе онтогенетического развития в условиях ЦЧР РФ, общий ход которого подчиняется закономерностям развития поликарпических растений с побегами, развивающимися по монокарпическому типу.

2. Выявлено, что период перехода от вергинильного к генеративному развитию определяется фотопериодической реакцией. Укорочение дня до 16 часов вызывает закладку и формирование генеративных органов.

3. Определены морфогенетические изменения в онтогенезе стевии, сопровождающие формирование листового аппарата и репродуктивных органов.

4. Разработана методика перевода стевии на более высокий уровень плоидности с оптимальной концентрацией колхицина 0,005 %, при времени экспозиции 48 часов. С использованием этой методики получены триплоидные и тетраплоидные растения.

5. Показано, что культивируемый генетический материал при длительном хранении стевии в культуре in vitro можно содержать до пяти месяцев без обновления в условиях пониженной температуры (+6°С).

6. Изучены несколько видов субстрата и выявлен оптимальный состав субстрата для сохранения, поддержания и размножения стевии в условиях закрытого грунта. Показано, что для эффективной вегетации стевии в условиях закрытого грунта благоприятны подкормки полным минеральным удобрением с добавкой микроэлементов.

- 139

7. Изучены морфологические особенности 25 сортообразцов в полевых условиях и установлено, что при отборе лучших из них наиболее важными признаками являются сухая масса листьев и высота растений. С учетом погодных условий предстоящего вегетационного периода большое значение имеют варьирующие признаки: количество боковых побегов первого порядка и площадь листьев.

3. Выделены коллекционные образцы наиболее адаптированные к условиям засушливого, жаркого вегетационного периода (К 2, 11, 17, 28) и обладающие высокими показателями продуктивности в годы с влажным и относительно холодным вегетационным периодом образцы N 3, 4, 19 и 27.

- 140

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

1. Для перевода растений стевии на более высокий уровень плоидности следует использовать концентрацию колхицина 0,005 %, при времени экспозиции 48 часов.

2. Генетический материал стевии можно хранить до 5 месяцев в культуре in vitro при использовании пониженной температуры (+ 6°С.).

3. Выращивание рассады стевии следует производить на субстрате, состоящем из песка, чернозема и гидрогеля (1:1:500 мг/л).

4. Для получения сильной, мощной рассады стевии необходимо использовать подкормки полным минеральным удобрением с добавкой микроэлементов.

5. Рекомендовать для селекционной работы по созданию материала,устойчивого к засушливым условиям сортообразцы коллекции ВНИИСС NN 2, 11, 17, 28. Сортообразцы NN 3, 4, 19, 27 использовать при создании сортов для регионов с холодным и влажным вегетационным периодом.

Список литературы диссертационного исследования кандидат сельскохозяйственных наук Дубянский, Марк Маркович, 1999 год

1. Алексеев В.П. Медовая трава коа-хэ// Бюллетень ВНШ чая и субтропических культур.- N 1.- 1956.

2. Анишин С.Л. Влияние площади питания стевии на урожай сухого листа в Западной лесостепи Украины // Введение в культуру стевии. Киев : ВНИС., 1990. - С. 63 - 66.

3. Антонов В.И. Оптимальные сроки зеленого черенкования стевии в условиях защищенного грунта7/ Введение в культуру стевии .- Киев : ВНИС, 1990.- С. 44 49.

4. Баранов Е.С. Полиплоидия сахарной свеклы.- М.: Наука,- 1963.- 300 с.

5. Безлер Н.В. Физиологически активные вещества и адаптация стевии в ЦЧЗ // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования : Тез. докл. II Междунар. симпозиума. Пущино. - 1997.- Т. 2. - С. 27-28.

6. Белоус В.Е., Олейник Н.А., Бердышев Р.Г., Анишин С.Л. Развитие зародышей стевии в естественных и искусственных условиях // Введение в культуру стевии.- Киев : ВНИС, 1990.- С. 92-96.

7. Бойко Л.А. Биологические основы интродукции растений.- Л.: Наука,- 1969.- С.150.

8. Бреславец Л.П.Полиплоидия в природе и опыте / М.-из-дво АН СССР.- 1963.- 357 с.

9. Вавилов Н.М. Происхождение и география культурных растений.- Л.: Наука.- 1987.- 300 с.

10. Вас1лькевич СЛ., Хасяневич АЛ., Адамчык Г.Г., Бя-рузчавец Л.Г. Фитобиологические исследования 31еу1а геЬаисИ-апа ВегЬот як натуральнача подсаложвалмпка // Вес. АН БССР.- Сер.биол.н. 1991. - N 3. - С. 114 - 117.

11. Верзилина Н.Д. ,Камаева Г.М. Морфолого-анатомические особенности стевии в условиях ЦЧЗ // Труды межд.конф. по анатомии и морфологии раст.- С-Петербург.-1997,- С.24-25.

12. Гинс М.С., Коненков П.Ф., Гинс В.К., Чернядьев И. И. влияние ультрафиолета, белого цвета и цитокининовых фиторе-гуляторов на биосинтез амаранта и фотосинтетических пигментов у проростков амаранта // Прикладная биохимия и микробиология.- 1998.- N 1.

13. Горбатенко Л.Е.,Дзюба 0.0. Использование стевии при консервирований плодов и овощей // Новые и нетрадиционныерастения и перспективы их практического использования : Тез. докл. II Междунар. симп. Пущино. - 1997.- С. 867 - 868.

14. Гресь Е.И., Ковальчук М.И., Шендрин E.H., Карилюк Б.Г. Изучение действия подкормок на отрастание корнеотпрыс-ковых побегов стевии // Введение в культуру стевии. Киев : ВНИС. -1991. - С. 20 - 23.

15. Гублер Е.В., Генкин A.A. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях.- М.: Медицина, 1975.- 141 с.

16. Гужов Ю.Л. Что такое мутагенез и полиплоидия.- М.: Колос,1967.- 158 с.

17. Дубянский М.М., Жужжалова Т.П. Органогенез стевии // Проблемы ботаники на рубеже 20-21 в.в.: Тез. докл. 2(Х) съезда Русского бот. общ.- С- Петербург.- 1998.- С. 285.

18. Дубянский М.М., Евлакова E.G., Корниенко A.B. Изуче ние коллекционных номеров стевии за 1995-1996 гг. // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования : Тез. докл. II Междунар. симп. Пущино.-1997.- С. 439.

19. Дэсолень Т.Л., Гинс В.К., Кононков П.Ф. Изучение влияния амаранта на работу изолированного сердца крыс // Пища, экология и человек РФ.- М.- 1995.- С.17.

20. Ефремов Д.П., Коровайко H.H., Кулаева О.Н. Влияние теплового шока и карголина-2 на рост проростков ячменя и содержание в них фитогормонов // Доклады РАН.- Т.323, N2.-0. 362 365.

21. Жуковский П.П. Ботаника.- М.: Высшая школа, 1964.305 с.

22. Жученко A.A. Роль рекомбинаций во введении в культуру новых видов растений // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования : Тез. докл. Ii Междунар. симп. Пущино.- 1997.- С. 5 - 14.

23. Зволинский В.П. Продовольствие и стабильность общества //Международная академия информации ассоциированный член ООН.- М., Нью-Йорк, 1995.- С. 97 116.

24. Знаменская В.В., Жужжалова Т.П., Евлакова E.G. // Вегетативное размножение Stevia rebaudiana Bertoni в культуре изолированных тканей // Информационный листок .- N 5. -Воронеж : ЦНТИ, 1997. 2 с.

25. Зубенко В.Ф. Научное обеспечение новой отрасли агропромышленного комплекса /7 Введение в культуру стевии -источника низкокалорийного заменителя сахара .- Киев : ВНИС.- 1990.- С. 3 5.

26. Зубенко В.Ф. Новый природный заменитель сахара // Вестник с.-х. наук. 1990. -N 3. - С. 93 - 96.

27. Зубенко В.Ф., Роговский C.B., Чудновский В.Д. Стимулирование фитогормонами приживаемости черенков стевии и рост рассады // Доклады ВАСХНИЛ . 1991. -N 2. - С. 16 -18.

28. Зубенко В.Ф., Роговский C.B., Педос В.П. Возбудители болезней стевии и оценка пораженности растений // Введение в культуру стевии.- Киев : ВНИС.- 1990. С. 67 - 73.

29. Зубенко В.Ф., Гресь Е.й., Ковальчук М.И., Чудновский Б.Д. // Определение оптимальной густоты насаждения стевии в условиях лесостепи УССР.- Вестник с.-х.науки.- M.- N 12. 1990. - С. 131 - 134.

30. Зубенко В.Ф., Ильенко И.И., Чудновский Б.Д. Введение в культуру стевии источник низкокалорийного заменителя сахара.- Киев : ВНМС. - 1990. - 150 с.

31. Зубенко В.Ф., Коваль чу к М.И., Гресь Е.И., Чудновский Б.Д. Хранение корневищ стевии при размножении зелеными черенками.- Доклады ВАСХНИЛ . М. - N 6. -1991. - С. 201. ОО

32. Зубенко В.Ф. Корневая система стевии при вегетативном размножении / Сахарная свекла.- N 10. 1995.- С.21-22.

33. Из зеленой кладовой / Наука и жизнь.- N 8.- 1980.-С.143-144.

34. Ильенко И.И., Яворская Т.К., Бех Н.С., Скульская Т.А.Продуктивность самоклональных вариантов стевии и качественный состав фитотерпеновых гликозидов в ее листьях // Введение в культуру стевии.- Киев : ВНИС. -1990.- С.79-86.

35. Илюхина М.К.,1ужжалова Т.П. Применение биологически активных веществ в борьбе с корневыми гнилями стевии //Новые и нетрадиц. растен. и персп. их исп.- 1 Межд. симп.: Тез. докл., Пущино.- 1995.- С. 612-613.

36. Исаева И.С. Биологический контроль за плодовыми растениями.- М.- 1975.

37. Карниловская Е.Д., Цапко Е.В., Федюк Е.А., Петру-щенко Л.Н. Исследование мутагенной активности сахара // Введение в культуру стевии.-Киев:ВНИС.-1990.- С.125-130.

38. Кефели В.И. Фотоморфогенез., фотосинтез и рост как основа продуктивности растений .// Пущино ОНТИ ПНЦ АН.-1991.- 133 с.

39. Кирилов Л. Медоносна трава от семейство сложноцвет-ки // Природа.Издание Болгарската Академия на науките.- София.- 1959.- К.З

40. Кисничан Л.П., Мику В.Е. Способы размножения стевии // Второй межд.симпозиум "Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования".- Материалы симпозиума. -Т. 5.- 1997.- С.694-696.

41. Кляченко В.И., Борисюк В.А. Физико-химические особенности ассимиляционного аппарата различных генотипов стевии /./Введение в культуру стевии.- Киев: ВНИС.- 1990.-С.110-111.

42. Ковальчук М.И., Гресь Е.И., КарплюкО.Г., Шендрин E.H. Применение нитроаммофоски для выращивания рассады стевии из зеленых черенков // Введение в культуру стевии.- Киев: ВНИС.- 1990.- С.50-57.

43. Кольцов Н.К. К методике искусственного вызывания полиплоидии колхицином.- Доклад АН СССР.- 23.- N 5.-1939.-С.481-484.

44. Комисаренко Н.Ф.Деркач А. И., Коваль И. П., Бублик- "14:7

45. Н.П., Черменева Г.А., Котов А-Г., Зинченко В.В. Дитерпеновые гликозиды и фенил-пропаноиды листьев Stevia rebaudiana Ber-toni // Растительные ресурсы.- 1994.- Т. 30.- N 1-2.-С.53-64.

46. Комиссаров Г.Г., Апашева A.M. и др. Стимулирование прорастания семян амаранта пероксидом водорода и действием Ф магнитного поля // Новые и нетрадиционные растения. I Международный симпозиум,- Пущине.- 1995.- С.95-97.

47. Компьютерные информационные системы по генетическим ресурсам растений: Докл. I съезд Вавил. о-ва генетиков и селекционеров (ВОГИО).- Саратов, 20-25 декабря 1994г. / Швьз-тов И.А. /./ Генетика.- 1994.- С. 182.

48. Кононков П.Ф. Перспективность интродукции в решении проблемы продовольствия // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования. I Международный симпозиум.- Пущино.- 1995.- С.338-370.

49. Ксенз Л.И., Сичкар Л.А., Корчак В.В. Действие удобрений на продуктивность стевии.//'Введение в культуру сте-вии.-Киев:ВНЙС.-1990.- С.58-62).

50. Ксенз Л.И., Савенкова 0.В., Шишко Л.П. Выращивание рассады стевии на разных фонах удобрений // Введение в культуру стевии.-Киев: ВНЙС.- 1990.- С.36-43).

51. Корниенко А.В., Никульников И.М., Удовидченко Л.П., Безлер Н.В., Кураков В.И., Жужжалова Т.П., Знаменская В.В. Возделывание стевии // Сахарная свекла.- N 10.- 1995.-С.22~ 24.

52. Корнилова 0.В., Ладыгин В.Г., Семенова Г.А. Стевия продуцент низкокалорийных соединений - заменителей сахара

53. Второй межд.симпозиум "Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования".- Пущино.- Т.2.-1997.- С.53-55.

54. Кулаева О.Н. Новые направления в физиологии растений.- М. : Наука.- 1985.- С.62-84.

55. Куперман Ф.М., Дворянкин Ф.А., Ростовцева 3.П., Ржанова Е.И. Этапы формирования органов плодоношения злаков.- М.- 1955.- 254 с.

56. Куперман Ф.М. Морфофизиологические приемы исследования растений.- Вюлл.МОЙП.- Т.7.- Вып.6.-1952.

57. Куперман Ф.М. Морфология растений / М.: Высшая школа,- 1963.- 288 с.

58. Куперман Ф.М. Диагностика состояния озимых культур в осенне-зимне-весенний период / Социальное земледелие.- N 8.- 1959.- Сб.Экспериментальный морфогенез цветковых растений.- М.- 1972.

59. Лакин Г.Ф. Биометрия.- М.: Высшая школа.- 1980,291 с.

60. Лобов C.B. Синтез и выделение продуктов трансглико-зилирования стевиозида //Введение в культуру стевии.- Киев: ВНИС.- 1990.- С.109.

61. Лужков А.Н. Об экстремальном получении полиплоидных гамет / Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции. -Сер. 2.- N7.- С.127-150.- 1937.

62. Ляховкин А. Г., Лон Ч. Д., Ань М. Ф. и др. Медовая трава (Stevia rebaudiana Bertoni.) во Вьетнаме / Ханой. -1992. 29 с.

63. Магамедов З.Г. Способ оценки засухоустойчивостирастений// Фил. АН СССР.- Бюл. N 5.- 1993.

64. Мережко А.Ф. Проблема доноров в селекции растений // СПБ ВНИИ растениеводства.- 1994.- 127 с.

65. Методы цитологического анализа // Под ред.Р.Мел-лорс. Иностр. лит-ра.- М,- 1957.

66. Мицик В. Е., Шулыгина Л.М. Новые виды молочных продуктов с использованием стевиозида // Введение в культуру стевии.- К.- 1990.- С.131-137.

67. Мокроносов А.Т. Рост растений и его регуляция.- Кишинев: Штиинца.- 1985.- С.183-198.

68. Морфогенез растений // Моск.ун-т.- Т.2.- 1961.-С.158-162.

69. Морфогенез растений // Моск.ун-т.- Т.1.- 1961,-С.592-595.

70. Морфогенез растений // Труды совещания по морфогенезу растений 12-17 ноября 1959 г.йзд-во Моек,ун-та.- 1961.684 с.

71. Наконечная O.A. Влияние уровня освещенности на приживаемость и развитие пассированного материала // Введение в культуру стевии.- Киев: ВНИС.- 1990.- С.20-23.

72. Ничипорович И.М. Физиология фотосинтеза и продуктивность растения. -М.: Наука.- 1982.- 250 с.

73. Новые сорта, созданные методом химического мутагенеза. Отв.редактор Рапопорт И.А.- М.: Наука.- 1988.

74. Отчет о научно-исследовательской работе. Создать формы стевии нового сахароносного растения с высокой продуктивностью вегетативной массы, новым содержанием стевиозида и комплексной устойчивости к болезням и вредителям. - Рамонь.- 1995.

75. Подвигина О.А. Автореф.канд.дис.с.- Рамонь.- 1995.

76. Поликарпова Л.П. Хранение коллекций растений.- М.-Наука.- 1974.- 52 с.

77. Райфа Г. Анализ решений.- М.: Наука.- 1974.- 407 с.

78. Роговский C.B., Чудновский В.Д. Влияние эндогенных фитогормонов на приживаемость черенков стевии и последующий рост рассады и растений // Введение в культуру стевии.- Киев: ВНИС.- 1990.- С.24-32.

79. Савенкова 0.В., Корчак В.В. Определение оптимального режима полива при доращивании рассады стевии, полученной методом культуры ткани // Введение в культуру стевии Киев: ВНИС.-1990.- С. 33-35.

80. Сергеев Г.Е. Математике-статистическая обработка данных, получаемых лабораториями и пунктами диагностики и прогнозов // Прогноз развития вредителей сельскохозяйственных растений.- М.: Колос.- 1975.- С.186-213.

81. Серебряков И.Г. Морфология вегетативных органов высших растений.- М.- 1953.- С.35-49.

82. Смоляр В.И., Карниловская С.Д., Салий Н.С., Цинко Е.В., Лаврушенко Л.Ф., Гулюч М.П., Кришевич Л.П., Григоренко С.Н. Экспериментальное изучение низкокалорийного заменителя.- Киев: ВНИС.- 1990.- С.118-124.

83. Смоляр В.И., Салий Н.С., ЦапкоЕ.В., Лаврушенко Л.Ф., Григоренко С.Н. Медико-биологическое исследование листьев стевии // Введение в культуру стевии .- 1990.- Киев: ВНИС.- С.112-117.

84. Тарасенко н.Д. Генетические аспекты охраны генофон1. С-"!- Х01 да и интродукции и акклиматизации растений.- Новосибирск . -1995.- 20 с.

85. Телегина Т.Д., Гинс В.К. Действие видимого света с длинами волн, соответсвующими фрауппоферовым линиям магния // Новые нетрадиционные растения. Материалы I симпозиума.-М.: Пущино.- 1995.- С.43-46.

86. Удовидченко Д.П., Корниенко А.В., Жужжалова Т.П. Введение стевии в культуру в ЦЧЗ России // Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования. Материалы симпозиума.- М.: Пущино.- Т. 5,- 1997.-С.778-779

87. Успенский Н.А., Ведышева Р.Г. Органогенез основа подбора пар при межсортовых скрещиваниях кукурузы // Морфогенез растений. Труды совещания по морфогенезу растений. 12-17 ноября 1958 г.- йзд-во Моск.ун-та.- 1961,- С.369-372.

88. Химический мутагенез и проблемы селекции, ред.Рапопорт И.А.- М.: Наука.- 1991.

89. Цанова В.П., Сарджвеладзе Г.П., Каребава Л.Г. Исследования летучих соединений двулистника сладкого // Субтропические культуры (Махарадзе, Анчеули) N 3.- 1989.- С.73-79.

90. Чайлахян М.Л. Основные закономерности органогенеза высших растений.- М.- 1958.

91. Чернядьев И.И. Фотосинтез и цитокинины // Прикладная биохимия и микробиология.- Т.29.- N 5.- 1993.-С.644-674.

92. Чернядьев И.И. Фотосинтез растений в условиях водного стресса и протекторное влияние цитокининов // Прикладная биохимия и микробиология.- Т.33-. N 1.- 1997.- С.5-17.

93. Чудновский Б. Д.Запольский О.Ю. Способы выращивания рассады стевии из материала, полученного in vitro // Введение в культуру стевии низкокалорийного заменителя сахара .- Киев:ВНИС.- 1990.

94. Шамсутдинов З.Ш., Мазин В.В., Козлов Н.Н. Концепция и методы формирования отраслевого генофонда кормовых культур // С.-х. биол.-Сер.Еиол.раст.- Т 3.- 1995.- С.32-41.

95. Экспериментальный морфогенез цветковых растений // Под ред.проф.Ф.М.Куперман.- йзд-во Моск. ун-та.- 1972.- 229 с.99 . Экспериментальный морфогенез /Под редакцией проф.Ф.М.Куперман.- йзд-во Моск. ун-та.- 1963.- С.296-306.

96. Ярмолюк Г.И.Рогова А.И. Микроспорогенез и развитие мужского гаметофита у стевии // Введение в культуру стевии,-Киев: ВНИС.- 1990.- С.97-101.

97. Ярмолюк Г.И., Белоус В.Е. Ботаническая и морфологическая характеристика стевии // Введение в культуру стевии. Киев: ВНИС.- 1990.- С.6-8.

98. Bergner А., Anery A and Blakeslee А. Chromosome deficienciece in Natura Stramonium indiced by colchieine treatment.- 194.- Amer J.Botan.- P. 676-682.

99. Blakeslee A. and Avery A. Methods of inducing chromosomedoubling in plants by treatment, with colchicine.-1937.- Science.- P. 86 - 408.

100. Darise M., Mizutani K., Kasai R., Tanuca 0., Kita-hata S., Ok.ada S., Ogawa S., Murakami F and Chen J.H. Enzymatic transglucosylation of rubusoside and the structure sweetness relationship of steviolbisglucosides // Agric. BioLChem.- 1984.-P. 48-2483.

101. Dermenh and Braun N."A. Citologlcal study of the effect of colchicine on plant tumors".- 1940.- Amer.J.Cancer. p.38-169-190.

102. Dobberstein Robert H., Ahmed M. S. Extraction, separation and recovery of diterpene glicosides from Stevia rebaudiana plants // United States Patent. 1982. - Nov. 30. - 14 p. Rebaudiana" Патент N 361697.- 1982.- N 4.- США.

103. Dupaigne P. Некоторые естественные сластители с сильной подслащивающей способностью // Plantes medicinales of phytotherapie.- 1974.- V. 7.- N 2.- P. 104-108.

104. Eigsti O.J. and Dustin P. Colchicine in agriculture, medicine, biology and chemistry.- 1957.- Jowa State College Press.

105. Eigsti and Taylor "The industion of poliploidy in Phlox by colchicine- Proc. Oklahoma Academy Sci.- p.22, 120-122.

106. Ferreira C.M., Handro W. Some morphogenetic responses in leaf explants of Stevia rebaudiana cultured in vitro" // Revista Brasileira Botanica. 1987. V. 10. - P. 113 - 117.

107. Ferreira C.M. and Handro Waiter. Productcion, mai-tenance and plant regeneration from ceil suspension cultures of Stevia rebaudiana (Bert.) Bert on i. // Plant. Cell. Reports. 1988. - N 7. - P. 123 - 126.

108. Forres, Kenneth C. Tissue culture techignes for ncot©cultural groups // Mew Jork: Zan Notrand Reinhold.-1989.- YII .- p.285.

109. Handro W, Ferreira C.M. Stevia rebaudiana Bertoni: Production of Natural Sweeteners // Med. and Arornat Plants . Berlin etc.- 1989.- P. 468-487.

110. Kamiya S.Konishi F. and Esaki S. Synthesis and taste of some analog's of stevioside // Agric. Biol. Chem.-1979.- 1863 p.

111. Kinghom A., Douglas, Soejarto Dioja D. Current status of stevioside as a sweetening' agent, for human use // Economic and Medicinal Plant Research.- 1985.- V.I.- 54 p.

112. Kinghorri A. D., Soejarto Dioja D. Sweetening agents of plant, origin // Critical Reviews in Plant. Sciences.- 1986.- N 4.- P.79-120.

113. Kobayashi M.Horikana S., Degrandi I.H., lieno J. and Mitsuhashi H. Dulcosides A and B, new diterpene glucosi-de from Stevia rebaudiana // Phytochemistry.- 1977.- P. 16-1405.

114. Kohola H., Kasai R.Yamasaki K. , Murakami K. and Tanaka 0. New sweet diterpene glucosides from Stevia rebaudiana // Phytochemistry.- 1976.- P.15-981.

115. Kruthe J. On the influence of colhicine upon the athers of Carthanius Tinctorius // 1942.- Z.- Proc. Nederl Akademy wet Amsterdam.- p.45-283-287.

116. Levan A. "Xetraploidy and octoploidy induced by colchicine in diploid Petunia" // 1939.- Hereditas.- P. 25-109-131.

117. Makapugay H.C. Nanayakkara N.P.D. and Kinghorn

118. A.D. Improved high performance liquid chromatographic separation of the Stevia rebaudiana sweet diterpene glicosidesusing linear- gradient elution // J. of Chrom.- 1984.- V. 283.- P. 390 395.

119. Neiriec B. liber Mixoploidie bei allium coeruleum // 1931.- Bill.- Snternat. Praga, 3(4), p.- 253-254.

120. Phillips K. S. Stevia : steps in developing a new sweetener // Newbure, Berkshire UK. 1989. - p. 1 - 43.106. Pernice B. Sulla carwicinesi e delia elicpitel a dell tndo-telio dei vasi dellamucoso della stomato .- 1889.- Sicilia Med.- p.1-265-79.

121. Russel E. Gordon, Biotechnology of hinger plants // Intercept.- 1988.- p.240.

122. Sasson A. Biotechnologies and development / Unesco. Techn. centre for agr. and rural cooper.- Paris.- 1988.361 p.

123. Shu Shizhen. Zhongguo nongye kexue // Sci. agr. sin. -1995.- V. 28. N 2.- P. 37-42.

124. Small Ernest. Crop diversification in Canada with particular reference to genetic resources // Can. J. Plant Sci.- 1995.- V. 75.- N 1.- P. 33-43.

125. Sullivan J.D. World and U.S. sugar outlook: 1986/87 crop year /7 The California Sugar- Beet.- 1986.- P. 15,16 18.

126. Surrdda Т. Выращивание культуры Stevia и задачи на- 1ЫЗ будущее. // Agriculture Tokio. 1983. V. 58. N. 1.

127. Sumida Т. Studies on Stevia rebaudiana Bertoni as a Mew Possible crop for sweetening Resource in Japan // J. Cent. Agric. Exp.stn. 1980. -V. 31.- P. 67 - 71.

128. Valio I. F. M. and Roche Rosely F. Effect of pho-toperiod on growth and flowering of Stevia rebaudiana Bertoni // Japan.- Jour. Crop. Sei. 1977. V. 46. - N 2. - P. 243-248.

129. Winkler H.- Uber die experimentelle Erzeugung von pflanzen mit abweichendem Chromosomenzahlen.- 1916.- Z.Bot.-p. 8-416-431.

130. Yamamoto N.S., Keimer A.M., Bracht E.S, Ishii F.S., Kemmelmeier M. Alvares and Bracht A. Effekt of steviol and its structural analogues on glucose production and oxygen uptake in rat renal tubules // Experimenta.- 1985.- 41p.

131. Yue-Ie Hsing, Wan-Fang Su and Wei-Chin Chang. Accumulation of stevioside and rebaudioside A in callus culture of Stevia" // Botanica bulletin of Academia Sinica 24. -1983.- P. 115-119.

132. Zilian B.P., SoniaM.C., Dietrich and Felippe G. M. Effect of photoperiod on Howering and steviosidae Content in plants of Stevia rebaudiana Bertoni // Japanese Journal of Crop Science 1980.- V. XXXXIX.- N 4.- P. 569-572.

133. Состав среды in vitro по Гамборгу В5: Макроэлементы В5 на 1 л:1. KN03 25 г1. Са012 1,13 г1. MgS04 ' 7Н20 2,5 г1. NH4)2SO4 1,34 г1. МаН2Р04 -Н20 1,5 г

134. На 1 л среды 100 мл маточного раствора

135. Микроэлементы В5 на 100 мл:1. KJ 75 мг1. Н3ВО3 300 мг1. MnS04 ' 4Н20 1200 мг1. ZnS04 '7Н20 200 мг1. Na2Mo04'2H20 25 мг1. CUSO4 *5Н20 2,5 мг1. СоС12 6Н20 - 2,5 мг

136. На 1 л среды 1 мл маточного раствора1. Витамины:

137. FeS04 • 7Н20 28 мг Тиамин - НС1 - 10 мг Перидоксин • НС1 - 1 мг Никотиновая кислота - 1 мг Meзо-инозит - 100 мг1. Сахароза 30 грН 5,5