Биодеградация углеводородов нефти психротрофными микроорганизмами-деструкторами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Нечаева, Ирина Александровна

• Нечаева, Ирина Александровна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Нечаева, Ирина Александровна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ б

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. НЕФТЬ КАК ИСТОЧНИК ЗАГРЯЗНЕНИЙ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Глава 2. ДЕГРАДАЦИЯ НЕФТИ

2.1. АБИОТИЧЕСКАЯ ДЕСТРУКЦИЯ НЕФТИ

2.2. МИКРОБНАЯ УТИЛИЗАЦИЯ УГЛЕВОДОРОДОВ НЕФТИ

2.2.1. МЕТАБОЛИЗМ АЛИФАТИЧЕСКИХ УГЛЕВОДОРОДОВ

2.2.1.1. Окисление линейных углеводородов

2.2.1.2. Окисление циклических углеводородов

2.2.2. МЕТАБОЛИЗМ АРОМАТИЧЕСКИХ УГЛЕВОДОРОДОВ 25 2.2.2.1 .Окисление моноароматических углеводородов 26 2.2.2.2. Окисление полиароматических углеводородов

2.2.3. МЕТАБОЛИЗМ АСФАЛЬТЕНОВ

2.2.4.БИОДЕГРАДАЦИЯ УГЛЕВОДОРОДОВ НЕФТИ В ЭКСТРЕМАЛЬНЫХ 37 ПРИРОДНЫХ УСЛОВИЯХ

2.2.4.1 .При пониженных температурах

2.2.4.2.При повышенных температурах

2.2.4.3.В кислой и щелочной среде

2.2.4.4.В условиях повышенного содержания соли

Глава 3. МЕТОДЫ БИОРЕМЕДИАЦИИ ТЕРРИТОРИЙ, ЗАГРЯЗНЁННЫХ 50 НЕФТЬЮ И НЕФТЕПРОДУКТАМИ

3.1. СТИМУЛЯЦИЯ АБОРИГЕННОЙ МИКРОФЛОРЫ

3.2. ИНТРОДУКЦИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ-ДЕСТРУКТОРОВ

3.3. БИОПРЕПАРАТЫ: ПРИНЦИПЫ ИХ РАЗРАБОТКИ И ПРИМЕНЕНИЯ

3.3.1. РАЗРАБОТКА БИОПРЕПАРАТОВ

3.3.2. ПРИМЕНЕНИЕ БИОПРЕПАРАТОВ

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Бактериальные штаммы

2.2. Питательные среды, источники углерода и энергии, антибиотики

2.3. Сорбент

2.4. Условия культивирования

2.5. Определение эмульгирующей активности

2.6. Измерение индекса эмульгирования

2.7. Определение поверхностного натяжения

2.8. Определение степени деструкции нефти

2.9. Флуориметрический метод измерения массовой доли нефтепродуктов в почве

2.10. Определение фракционного состава остаточной нефти в пробах

2.11. Определение степени адсорбции нефти

2.12. Выделение тотальной ДНК микроорганизмов

2.13. Полимеразная цепная реакция

2.14. Рестрикционный анализ амплифицированной рибосомальной ДНК (метод 74 ARDRA)

2.15. RAPD (randomly amplified polymorphic DNA) анализ

2.16. Разделение амплифицированных фрагментов ДНК

2.17. Определение влагоёмкости почвы

2.18. Определение рН почвы

2.19. Приготовление модельных почвенных систем

2.20. Внесение инокулята в почву

2.21. Отбор проб

2.22. Мониторинг штаммов-деструкторов в процессе деградации нефти в почве

2.23. Условия полевого эксперимента

2.24. Условия проведения ферментаций

2.25. Световая микроскопия

2.26. Электронно-микроскопические методы

2.27. Статистическая обработка результатов 78 3.РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1. ВЫБОР И ХАРАКТЕРИСТИКА АКТИВНЫХ ПСИХРОТРОФНЫХ 79 МИКРООРГАНИЗМОВ-ДЕСТРУКТОРОВ УГЛЕВОДОРОДОВ НЕФТИ

3.1.1. Характеристика штаммов-деструкторов углеводородов нефти

3.1.2. Изучение взаимодействия микроорганизмов-деструкторов с нефтью с 85 помощью световой и электронной микроскопии

3.1.3. Идентификация и генотипирование штаммов-деструкторов нефти

3.1.4. Биодеструкция нефти исследованными микроорганизмами

3.1.5. Изменение фракционного состава нефти после биодеградации

3.2. СОСТАВЛЕНИЕ И ОТБОР АССОЦИАЦИЙ МИКРООРГАНИЗМОВ, 93 СПОСОБНЫХ К ДЕГРАДАЦИИ УГЛЕВОДОРОДОВ НЕФТИ ПРИ ПОНИЖЕННОЙ ТЕМПЕРАТУРЕ

3.2.1. Подбор ассоциации штаммов-деструкторов эмпирическим путём

3.2.2. Селекция ассоциации пггаммов-деструкторов в жидкой минеральной среде и 93 адсорбция нефти биодеградабельным сорбентом

3.2.3. Эффективность деградации нефти отселектированной и эмпирически 98 составленной ассоциацией и её адсорбции сорбентом

3.3. СТИМУЛЯЦИЯ МИКРОБНОЙ ДЕСТРУКЦИИ НЕФТИ В ПОЧВЕ ПУТЁМ 100 ВНЕСЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОЙ АССОЦИАЦИИ И МИНЕРАЛЬНОГО УДОБРЕНИЯ В ЛАБОРАТОРНЫХ УСЛОВИЯХ

3.3.1. Динамика общей численности микроорганизмов и бактерий-деструкторов 101 нефти в модельной почве

3.3.2. Мониторинг интродуцированных штаммов-деструкторов углеводородов нефти

3.3.3. Динамика убыли нефти в почве

3.4. БИОРЕМЕДИАЦИЯ ПОЧВЫ, ЗАГРЯЗНЁННОЙ НЕФТЬЮ, В УСЛОВИЯХ 105 ПОЛЕВОГО ЭКСПЕРИМЕНТА

3.4.1. Изменение динамики численности микробной популяции в почве 105 •

3.4.2. Мониторинг интродуцированной микробной ассоциации

3.4.3. Убыль нефти

3.5. ПОЛЕВЫЕ ИСПЫТАНИЯ ОПЫТНОГО ОБРАЗЦА БИОПРЕПАРАТА ДЛЯ 110 ОЧИСТКИ ПОЧВ ОТ ЗАГРЯЗНЕНИЙ НЕФТЬЮ И НЕФТЕПРОДУКТАМИ

3.6. ДЕПОНИРОВАНИЕ ШТАММОВ, ИЗУЧЕНИЕ ИХ ПАТОГЕННОСТИ, 112 ПАТЕНТОВАНИЕ АССОЦИАЦИИ И БИОПРЕПАРАТА ДЛЯ ОЧИСТКИ ПОЧВ

ОТ ЗАГРЯЗНЕНИЙ НЕФТЬЮ И НЕФТЕПРОДУКТАМИ

3.6.1. Депонирование штаммов

3.6.2. Изучение патогенности микроорганизмов

3.6.3. Патентование ассоциации и биопрепарата для очистки почв от загрязнений 113 нефтью и нефтепродуктами

4. ОБСУЖДЕНИЕ

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биодеградация углеводородов нефти психротрофными микроорганизмами-деструкторами»

Среди многочисленных вредных веществ антропогенного происхождения, попадающих в окружающую среду, нефтепродуктам принадлежит одно из первых мест. По степени вредного влияния на экосистемы нефть, нефтепродукты и нефтесодержащие промышленные отходы занимают второе место после радиоактивного загрязнения (Черняховский и др., 2004). Работа автотранспорта и предприятий нефтеперерабатывающей и нефтехимической промышленности, газообразные выбросы и сточные воды промышленных предприятий, многочисленные разливы нефти и нефтепродуктов в результате аварий трубопроводов и нефтеналивных судов (танкеров), аварий и пожаров на нефтехранилищах и нефтеперегонных заводах приводят к загрязнению воздуха, воды и почвы значительными количествами сырой нефти и продуктов её переработки и создают серьёзную угрозу экологии регионов России (Ревелль и Ревелль, 1995).

В России большинство месторождений нефти расположено в северных регионах европейской части страны и Западной Сибири. Поэтому именно в регионах с холодным климатом часто происходит загрязнение нефтью наземных и водных экосистем. Потери нефти и нефтепродуктов в нашей стране при добыче, транспортировке, переработке и хранении, по официальным данным, оцениваются в 8-9 млн. тонн в год. Большая протяженность магистральных нефтепроводов (более 50 тыс км), объем 1 транспортированной по ним нефти (1,2 млрд м в год) являются причиной различных аварий, количество которых достигает 70000 в год. В местах освоения нефтегазовых месторождений в западносибирском регионе выявлено свыше 800 тыс га нефтезагрязненных земель. Если оценивать потери нефти в 1,5% от добычи, то они превысят 5 млн т ежегодно, а по мнению специалистов «Гринпис» аварийные потери нефти в России превышают 25 млн т ежегодно. Один грамм нефти делает непригодной для биоты 100 л воды, тонна нефти загрязняет 12 кв. км водной поверхности, а один литр нефти лишает кислорода 40 тыс л воды. При концентрации нефти в воде 0,1-0,01 мг/л икринки рыб погибают за несколько суток (Булатов и др., 1997).

Попадание нефти и её компонентов в окружающую среду вызывает изменение физических, химических и биологических свойств и характеристик природной среды обитания, нарушает ход естественных биохимических процессов. При трансформации углеводородов нефти могут образоваться стойкие к микробиологическому расщеплению и ещё более токсичные соединения, обладающие канцерогенными и мутагенными свойствами (Ревелль и Ревелль, 1995; Корте и др., 1997).

Процесс естественного восстановления загрязненной окружающей среды является очень длительным. Ауторемедиация нефтезагрязненных почв при уровне загрязнения 5 г/кг длится от 2 до 30 лет и более. В северных регионах скорость этих процессов еще ниже. В связи с этим, последствия загрязнений нефтью там сказываются многие десятилетия, поскольку период деструкции нефти и её производных в условиях севера составляет минимум 50 лет (Оборин и др., 1988).

В России эта экологическая проблема имеет особое значение вследствие масштабов загрязнения, при которых экскавация почв и их восстановление ex situ (вне места загрязнения) невозможны. Основную роль в ремедиации in situ (на месте загрязнения) играет биологический фактор — активность микроорганизмов, участвующих в процессах утилизации и трансформации углеводородов нефти. Микробиологичекие методы являются неотъемлемым компонентом современной биотехнологии очистки окружающей среды от нефти и нефтепродуктов. Биоремедиация обеспечивает экономически выгодную, высокоспецифичную очистку, приводящую к уменьшению концентрации как отдельного загрязнителя, так и смеси поллютантов. Препятствиями в достижении этой цели являются низкая температура, повышенная концентрация соли, низкое содержание питательных веществ, отсутствие или низкая деградативная активность природных микробных популяций. Короткий летний период — основной лимитирующий фактор при биоремедиации в северных регионах. Поэтому в настоящее время большое внимание уделяется изучению процессов биоремедиации в регионах с холодным климатом. При разработке стратегий биоремедиации загрязненных территорий и акваторий необходимо учитывать существование аборигенных нефтеокисляющих микроорганизмов с разным сродством в отношении различных фракций нефти и возможность активации их метаболизма за счёт добавления биогенных элементов (источников азота, фосфора и калия). Внесение эффективных микроорганизмов-деструкторов углеводородов нефти в почву совершенно необходимо в северных районах, где тёплый период года непродолжителен и природная микрофлора не успевает адаптироваться к изменяющимся условиям окружающей среды. Штаммы родов Acinetobacter, Alcaligenes, Arthrobacter, Burkholderia, Brevibacterium, Corynebacterium, Micrococcus, Mycobacterium, Nocardia, Pseudomonas, Rhodococcus, Serratia, Bacillus и некоторые другие бактерии обладают значительным деградативным потенциалом; показано, что они способны утилизировать устойчивые загрязнители и ксенобиотики. Эти микроорганизмы часто выделяют из нефтезагрязненных мест, культивируют и используют для очистки при разливах нефти. Необходимость очистки загрязненных почв и морских акваторий предполагает изучение разнообразия микроорганизмов данной среды обитания, способностей отдельных микроорганизмов и их ассоциаций к деградации различных поллютантов в присутствии повышенного содержания соли (Ventosa et al., 1998; Van Hamme et al., 2003). В последнее время в биоремедиации используют микробные ассоциации, состоящие из двух и более штаммов, поскольку интродукция монокультуры углеводородокисляющих микроорганизмов в нефтезагрязнённую среду не может полностью решить проблему очистки.

Разработка и совершенствование технологий биоремедиации, особенно почв, загрязнённых нефтью и нефтепродуктами, является областью прикладных исследований. Наиболее широкое распространение получили методы биоремедиации, основанные на активации аборигенной микробной популяции (биостимуляция) за счёт применения ряда агротехнических мероприятий (рыхление почвы, увлажнение, внесение удобрений), а также интродукции в место загрязнения специально отобранных микроорганизмов, активно утилизирующих загрязнитель (биоаугментация), что значительно ускоряет процессы восстановления почв (Градова и др., 2003).

В настоящее время большинство проводимых исследований посвящено влиянию нефтезагрязнения на изменение состава природных популяций микроорганизмов различных экологических ниш (Prince et al., 1997; Delille et al., 2002; Margesin et al., 2003; 2007). Работ, посвященных селекции микроорганизмов, способных к деструкции нефти и нефтепродуктов при низких положительных температурах, крайне мало. В связи с этим особенно актуально исследование психротрофных микроорганизмов-деструкторов нефти и нефтепродуктов.

Целью данной работы являлось создание ассоциации активных психротрофных микроорганизмов-деструкторов углеводородов нефти как основы биопрепарата для биоремедиации нефтезагрязнённых почв и определение её эффективности в лабораторных и полевых условиях. Для выполнения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

1. Выбор и характеристика активных психротрофных микроорганизмов-деструкторов углеводородов нефти.

2. Составление микробных ассоциаций на основании комбинирования свойств микроорганизмов (психротрофность, галотолерантность, эмульгирующая способность), а также путём селекции в условиях периодического культивирования с нефтью в качестве субстрата.

3. Определение эффективности деградации нефти ассоциациями в жидкой среде и её адсорбции растительным сорбентом.

4. Разработка метода мониторинга интродуцировапных в почву штаммов-деструкторов, с использованием культурально-морфологических признаков, маркеров антибиотикорезистентности и метода геномных фингерпринтов.

5. Исследование процессов деструкции нефти и численности микробных популяций в почве в лабораторных и полевых условиях.

6. Разработка опытного образца биопрепарата и проведение полевых испытаний по очистке почв от нефтяных загрязнений.

Научная новизна

Получена микробная ассоциация как основа биопрепарата для биоремедиации почв, загрязненных нефтью и нефтепродуктами. Впервые в её составе использованы психротрофные, галотолерантные микроорганизмы-деструкторы углеводородов нефти родов Rhodococcus и Pseudomonas, продуцирующие биоэмульгаторы. Кроме того, впервые в ассоциации для деструкции нефти присутствуют конъюгативные плазмиды биодеградации. Таким образом, они являются потенциальными донорами катаболических плазмид, которые за счёт горизонтального переноса могут расширять деградативный потенциал аборигенных почвенных микроорганизмов и ускорять биодеградацию углеводородов.

С помощью двух различных подходов - эмпирического на основании физиологических и метаболических характеристик штаммов и селекции микроорганизмов-деструкторов при периодическом культивировании с нефтью при пониженной температуре — составлены две микробные ассоциации, состоящие из четырёх штаммов, причём три из них являются одинаковыми для каждой ассоциации: Rhodococcus sp. Х5, Rhodococcus sp. S67, Pseudomonas sp. 142NF(pNF142). При периодическом культивировании в минеральной среде с добавлением нефти в качестве источника углерода и энергии при 4-6°С показана более высокая степень деструкции нефти отселектированной ассоциацией по сравнению с эмпирически составленной ассоциацией.

Разработан метод мониторинга интродуцированных в почву штаммов-деструкторов родов Rhodococcus и Pseudomonas. На основании культурально-морфологических признаков, маркеров антибиотикорезистентности и с использованием метода геномных фингерпринтов впервые удалось проследить за судьбой интродуцированных микроорганизмов-деструкторов нефти в открытой окружающей среде и показать их выживаемость и конкурентоспособность.

При проведении полевого эксперимента температура почвы изменялась в диапазоне от 0°С до 23°С, но несмотря на это численность интродуцированной микробной ассоциации оставалась на достаточно высоком уровне. Таким образом, тот факт, что интродуцированные микроорганизмы являются психротрофными (с диапазоном роста 2-32°С) привело к тому, что они выжили в почве в зимний период времени и процесс деградации нефти происходил даже в этот период времени, только с меньшей скоростью.

Научно-практическая значимость работы

На основании скрининга коллекции микроорганизмов лаборатории биологии плазмид ИБФМ им. Г.К. Скрябина РАН, способных к деградации различных углеводородов, отобраны и охарактеризованы активные психротрофные штаммы-деструкторы нефти и нефтепродуктов и на их основе составлена ассоциация как основа биопрепарата.

В условиях лабораторных и полевых экспериментов показана высокая эффективность применения созданной микробной ассоциации для очистки почвы от нефти и разработаны практические рекомендации по применению метода in situ для биоремедиации почв. В полевом эксперименте продемонстрирована способность микробной ассоциации к деградации нефти в широком температурном диапазоне. С помощью разработанного метода мониторинга впервые удалось проследить за судьбой интродуцированных микроорганизмов-деструкторов нефти в открытой окружающей среде.

При ликвидации нефтезагрязнений с водных поверхностей целесообразно сначала использовать плавучий и биодеградабельный сорбент, который способен адсорбировать до 95% нефти в течение 1 часа. Ассоциация психротрофных микроорганизмов может быть использована для деградации остаточного количества нефтепродуктов на водной поверхности после адсорбции нефти сорбентом.

Получен патент РФ №2312891 «Ассоциация штаммов бактерий, продуцирующих биоэмульгаторы, для деградации нефти и нефтепродуктов в почвах, пресной и морской воде». Подана заявка №2007125403 на изобретение «Биопрепарат для очистки почв от загрязнений нефтью и нефтепродуктами, способ его получения и применения».

Эффективность опытного образца биопрепарата доказана в полевых испытаниях по очистке грунта от загрязнений смесью нефтепродуктов в Тульской области на протяжении осенне-зимнего периода.

Полученные в работе результаты по изучению био деградации нефти психротрофными микроорганизмами-деструкторами и их ассоциациями в модельных почвенных системах и открытой окружающей среде создают предпосылки для дальнейших более детальных исследований особенностей биодеградации углеводородов нефти при низких температурах.

Апробация работы

Материалы диссертации были представлены на 9-10-й школах-конференциях молодых ученых «Биология - наука 21-го века» (Пущино, 2005-2006), 2-ой Всероссийской научно-технической интернет-конференции «Современные проблемы экологии и безопасности» (Тула, 2006), Российской школе-конференции молодых ученых «Экотоксикология-современные биоаналитические системы, методы и технологии» (Тула -Пущино, 2006), I Всероссийской научно-практической конференции «Питательные среды и методы культивирования клеток для биологии, медицины и биоиндустрии: фундаментальные и прикладные аспекты» (Пущино, 2007), международных съездах и конференциях: 2nd-4th International Conference on «Science and Business» (Pushchino, 20052007), 8th International Семинар-Презентация инновационных научно-технических проектов «Biotechnology - 2005» (Pushchino, 2005), 13th International Biodeterioration and Biodegradation Symposium (Madrid, 2005), International Conference on Alpine and Polar Microbiology (Insbruck, 2006), International Conference on Environmental Biotechnology (Leipzig, 2006), 4Ш Moscow International Congress «Biotechnology: State of the Art and Prospects of Development» (Moscow, 2007), Thirtieth Arctic and Marine Oil Spill Technical Seminar (Edmonton, Canada, 2007), International Conference on Contamination Soil (Milan, Italy, 2008), III Международная конференция «Микробное разнообразие: состояние, стратегия сохранения, биотехнологический потенциал» (Пермь, 2008).

Публикации

По материалам диссертации опубликована 23 работы, в том числе 6 статей (из них 4 по списку ВАК), патент РФ №2312891, заявка на получение патента РФ на изобретение и 15 тезисов.

Структура и объем диссертации

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Нечаева, Ирина Александровна

ВЫВОДЫ

1. На основании скрининга коллекции микроорганизмов лаборатории биологии плазмид, способных к деградации различных углеводородов, отобраны активные психротрофные штаммы-деструкторы нефти и нефтепродуктов и на их основе составлена ассоциация, состоящая из Rhodococcus sp. Х5, Rhodococcus sp. S67, Pseudomonas sp. 142NF(pNF142) и Pseudomonasputida BS3701(pBSl 141, pBSl 142).

2. Впервые в составе ассоциации, как основы биопрепарата, использованы психротрофные, галотолерантные микроорганизмы-деструкторы углеводородов нефти родов Rhodococcus и Pseudomonas, продуцирующие биоэмульгаторы, кроме того, псевдомонады несут в своём составе конъюгативные плазмиды биодеградации.

3. По характеру первичного взаимодействия микроорганизмов с нефтяными каплями родококки и псевдомонады различаются - родококки проникают во внутрь нефтяной капли, а псевдомонады локализуются на её поверхности. Структурной особенностью взаимодействия нефти с микроорганизмами является образование экзоцеллюлярных плёнок полисахаридной природы.

4. С помощью разработанного метода мониторинга впервые удалось проследить за судьбой интродуцированных микроорганизмов-деструкторов нефти в почве в открытой окружающей среде и показать их конкурентоспособность. Доля интродуцированных штаммов составляла до 78% от общей численности почвенных микроорганизмов-деструкторов. В полевом эксперименте в течение 12 месяцев продемонстрирована способность микробной ассоциации к деградации нефти в широком температурном диапазоне, при этом степень очистки почвы составила 49%.

5. Получен патент РФ №2312891 «Ассоциация штаммов бактерий, продуцирующих биоэмульгаторы, для деградации нефти и нефтепродуктов в почвах, пресной и морской воде». Подана заявка №2007125403 на изобретение «Биопрепарат для очистки почв от загрязнений нефтью и нефтепродуктами, способ его получения и применения». Эффективность опытного образца биопрепарата продемонстрирована в полевых испытаниях в Тульской области. Степень очистки почвы от нефтепродуктов составила 99,6% за один месяц.

136

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Нечаева, Ирина Александровна, 2009 год

1. Алексеева Т.П., Бурмистрова Т.Н., Терещенко H.H., Стахина Л.Д., Панова И.И. Перспективы использования торфа для очистки нефтезагрязненных почв // Биотехнология. 2000. № 1. С. 58-64.

2. Ананько Г.Г., Пугачёв В.Г., Тотменина О.Д., Репин В.Е. Устойчивость нефтеокисляющих микроорганизмов к низким температурам // Биотехнология. 2005. № 5. С. 63-69.

3. Андреева И.С., Емельянова Е.К., Загребельный С.Н., Олькин С.Е., Резникова И.К., Репин В.Е. Психротолерантные штаммы-нефтедеструкторы для биремедиации почв и водной среды // Биотехнология. 2006. № 1. С. 43-52.

4. Арчегова И.Б. Рекомендации по рекультивации земель на Крайнем Севере / И.Б. Арчегова, Т.В. Евдокимова, Н.С. Котелина и др. // Рекультивация земель на Севере. Сыктывкар, 1997. Вып. 1. С. 34.

5. Барышникова Л.М., Грищенков В.Г., Аринбасаров М.У., Шкидченко А.Н., Воронин A.M. Биодеградация нефтепродуктов штаммами-деструкторами и их ассоциациями в жидкой среде // Прикл. биохимия и микробиология. 2001. Т. 37. №5. С. 542-548.

6. Белоусова Н.И., Барышникова Л.М., Шкидченко А.Н. Отбор микроорганизмов, способных к деструкции нефти и нефтепродуктов при пониженных температурах // Прикл. бихимияи микробиология. 2002. Т.38. № 5. С. 513-517.

7. Белоусова Н.И., Шкидченко А.Н. Деструкция нефтепродуктов различной степени конденсации микроорганизмами при пониженных температурах // Прикл. биохимия и микробиология. 2004. Т. 40. №3. С. 312-316.

8. Биотехнология защиты окружающей среды. Учебное пособие / Понаморёва О.Н., Решетилов А.Н., Решетилова Т.А., Шкидченко А.Н., Кошелева И.А., Иванова Е.С., Блохин И.В. Изд-во ТулГУ Тула, 2006. - 114 с.

9. Ю.Богомолов А.И., Гайле A.A., Громова В.В. и др. Химия нефти и газа: Учебное пособие для вузов. СПб: Химия, 1995. - 448 с.

10. Борзенков И.А., Милехина Е.И., Готоева М.Т., Розанова Е.П., Беляев С.С. Свойства углеводородокисляющих бактерий, изолированных из нефтяных месторождений Татарстана, Западной Сибири, Вьетнама//Микробиология. 2006. Т.75. №1. С.82-89.

11. Бузмаков С.А., Ладыгин И.В. К влиянию нефтепромыслов на растительный иживотный мир Камского Предуралья: Тез. докл. межгос. научн. конф. / Пермь. 1993. Ч. 1 С. 201-205.

12. Булатов А.И., Макаренко П.П., Шеметов В.Ю. Охрана окружающей среды в нефтегазовой промышленности. М.: Недра, 1997. 483 с.

13. Растительность земного шара: Эколого-физиологическая характеристика. Тундры, луга, степи, внетропические пустыни: Пер. с нем./Вальтер Г.; Ред. Т.А. Работнов. М.: Прогресс, 1975.- 428с.

14. Вадюнина А.Ф., Корчагина З.А. Методы определения физических свойств почв и грунтов. М.: Высшая школа, 1961.

15. Бельков В.В. Биоремедиация: принципы, проблемы, подходы // Биотехнология. 1995. № 3-4. С. 20-27.

16. Габбасова И.М., Сулейманов P.P., Бойко Т.Ф. Галимзянова Н.Ф. Использование биогенных добавок совместно с биопрепаратом «Деворойл» для рекультивации нефтезагрязненных почв // Биотехнология. 2002. №2. С. 57-65.

17. Гайнутдинов М.З., Самосова С.М., Артемьева Т.И., Гилязов М.Ю., Храмов И.Т., Гайсин И.А., Фильченкова В.И., Жеребцова А.К. Рекультивация нефтезагрязненных земель лесостепной зоны Татарии // Восст. нефтезагр. почв. экое. М.: Наука, 1988. С. 177-197.

18. Головлёв E.JI. Экологическая стратегия бактерий: специфика проблемы // Микробиология. 2001. Т. 70. № 4. с. 437-443.

19. Градова Н.Б., Горнова И.Б., Эддауди Р., Салина Р.Н. Использование бактерий рода Azotobacter при биоремедиации нефтезагрязненных почв // Прикл. биохим. и микробиол. 2003. Т. 39. № 3. С. 318-321.

20. Грищенков В.Г., Шишмаков Д.А., Кошелева И.А., Воронин A.M. Рост бактерий-деструкторов нафталина и салицилата при пониженных температурах // Прикл. биохим. и микробиол. 2003. Т. 39. № 3. С. 322-328.

21. Демидиенко А.Я., Демурджан В.М. Пути восстановления нефтезагрязненных почв черноземной зоны Украины/ А.Я. Демиденко, В.М. Демурджан// Восст. нефтезагр. почв. экое. М.: Наука, 1988. С. 197-206.

22. Деткова E.H., Пушева М.А. Энергетический метаболизм галофильных и алкалофильных ацетогенных бактерий // Прикл. биохим. и микробиол. 2006. Т. 75. № 1.С. 5-17.

23. Дмитриев В.В., Файзутдинова Р.Н., Офицеров E.H., Фихте Б.А. Реиммобилизация чужеродных гидролаз у дрожжей в смешанных популяциях // Микробиология. 1993. Т.62. Вып. 5. С. 944-949.

24. Другов Ю.С., Родин A.A. Экологические анализы при разливах нефти и нефтепродуктов. Практическое руководство. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2007. - 270 с.

25. Жуков Д.В., Мурыгина В.П., Калюжный C.B. Механизмы деградации углеводородов нефти микроорганизмами // Прикл. биохим. и микробиол. 2006. Т. 126. № 3. С. 285-296.

26. Звягинцева И.С., Суровцева Э.Г., Поглазова М.Н., Ивойлов B.C., Беляев С.С. Деградация нефтяных масел нокардиоподобными бактериями // Прикл. биохим. и микробиол. 2001а. Т. 70. № 3. С. 321-328.

27. Звягинцева И.С., Поглазова М.Н., Готоева М.Т., Беляев С.С. Влияние солёности среды на деструкцию нефтяных масел нокардиоподобными бактериями // Прикл. биохим. и микробиол. 20016. Т. 70. № 6. С. 759-764.

28. Зимон А.Д., Лещенко Н.Ф. Коллоидная химия. М.: Агар, 2001. 320 с.

29. Ившина И.Б., Пшеничков P.A., Оборонин A.A. Пропанокисляющие родококки. -Свердловск: УНЦ АН СССР, 1987. 125 с.

30. Изъюрова А.И. Скорость распада нефтепродуктов в воде и почве // Гигиена и санитария. 1950. № 9. С. 9-15.

31. Исмаилов Н.М. Микробиология и ферментативная активность нефтезагрязненных почв//Восст. нефтезагр. почв. экое. М.: Наука, 1988. С. 42-57.

32. Калюжный C.B. Биотехнология защиты окружающей среды: единство биокаталитических и инженерных подходов // Известия академии наук. Серия химическая. 2001. №10. С. 1735-1742.

33. Кашнер Д. Жизнь микробов в экстремальных условиях. М.: Мир, 1981. - 520 с.

34. Кобзев E.H. Биодеструкция нефти и нефтепродуктов микробными ассоциациями в модельных системах. Дис. канд. биол. наук. 2003. Оболенск. 179 с.

35. Козлова Г.М., Медведева Г.А., Мейсель М.Н., Рылкин С.С., Шульга A.B. Непосредственное обнаружение прохождения н-парафина через клеточную стенку дрожжей // Микробиология. 1973. Т. 42. № 5. С. 937 939.

36. Коронелли Т.В. Микробиологическая деградация углеводородов и ее экологические последствия // Биологические науки. 1982в. №3. С. 5-12.

37. Коронелли Т.В. 1984. Липиды микобактерий и родственных микроорганизмов. М.:1. Из-во МГУ. 413 с.

38. Коронелли Т.В., Дермичева С.Г., Коротаева Е.В. Выживаемость углеводородокисляющих бактерий в условиях полного голодания // Микробиология. 19886. Т. 57. № 2. С. 298 302.

39. Коронелли Т.В., Дермичева С.Г., Ильинский В.В., Комарова Т.И., Поршнева О.В. Видовая структура углеводородокисляющих бактериоценозов водных экосистем разных климатических зон // Микробиология. 1994. Т. 63. № 5. С. 917-923.

40. Коронелли Т.В. Принципы и методы интенсификации биологического разрушения углеводородов в окружающей среде // Прикл. биохим. и микробиол. 1996. Т. 32. № 6. С. 579-585.

41. Корте Ф., Бахадир М., Клайн В., Лай Я. П., Парлар Г., Шойнерт И. Экологическая химия. Основы и концепции. М.: Мир, 1997, с. 396.

42. Кочетков В.В. Плазмиды биодеградации нафталина у бактерий рода Pseudomonas. II Дисс. канд. биол. наук. Пущино, 1985.

43. Красильников H.A., Степанова Л.Н., Коронелли Т.В., Дуда В.И. О новом виде парафинокисляющих микобактерий // Микробиология. 1971. Т. 40. № 6. С. 1040 -1045.

44. Кузнецов А.Е., Градова Н.Б. Научные основы экобиотехнологии / Учебное пособие для студентов. М.: Мир, 2006. - 504 с.

45. Кузнецов В.Д., Зайцева Т.А., Вакуленко Л.В., Филиппова С.Н. Streptomyces albiaxalis sp. nov. : новый деструктор углеводородов нефти тером- и галотолерантного вида Streptomyces //Микробиология. 1992. Т. 61. С. 62-67.

46. Куличевская Й.С., Милёхина Е.И., Борзенков И.А., Звягинцева И.С., Беляев С.С. Окисление углеводородов нефти экстремально галофильными архебактериями // Микробиология. 1992. Т. 60. С. 596-601.

47. Логинов О.Н., Нуртдинова Л.А., Бойко Т.Ф., Четвериков С.П., Силищев H.H. Оценка эффективности нового биопрепарата Ленойл для ремедиации нефтезагрязненных почв // Биотехнология. 2004. № 1. С. 77-82.

48. Малахов A.A., Гирич И.Е., Нечитайло Т.Ю., Карасева Э.В. Роль нефтеокисляющей микрофлоры в биоремедиации почв и почвогрунтов, загрязненных нефтью. Экология 2000: Эстафета поколений. I Международная школа-семинар по экологии. 2000. С. 23 24.

49. Маркарова М. Опыт применения биопрепарата «Универсал» для рекультивации нефтезагрязненных земель // Вестник Института биологии Коми НЦТУрО РАН. 2004. Вып. 84.

50. Оборин A.A., Калачникова И.Г., Масливец Т.А., Базенкова Е.И., Плещева О.В., Оглоблина А.И. // Восстановление нефтезагрязнённых почвенных экосистем. — М.: Наука, 1988. С. 140-159.

51. Петров A.A. Углеводороды нефти. М.: Наука, 1984. - 264 с.

52. Плешакова Е.В., Позднякова H.H., Турковская О.В. Получение нефтеокисляющего биопрепарата путём стимуляции аборигенной углеводородокисляющей микрофлоры // Прикл. биохим. и микробиол. 2005. Т. 41. № 6. С. 634-639.

53. Пиковская Ю.И. Природные и техногенные потоки углеводородов в окружающей среде. -М.: Изд-во МГУ, 1993.

54. ПНД Ф 16.1.21-98. Количественный химический анализ почв. Методика выполнения измерений массовой доли нефтепродуктов в пробах почв на анализаторе жидкости «Флюорат-02». М., 1998.

55. Практикум по микробиологии: Учеб. Пособие для студ. высш. учеб. заведений / Под ред. Нетрусова А.И. М.: Издательский центр «Академия», 2005. - 608 с.

56. Пырченкова И.А., Гафаров А.Б., Пунтус И.Ф., Филонов А.Е., Воронин A.M. Выбор и характеристика активных психротрофных микроорганизмов-деструкторов нефти // Прикл. биохимия и микробиология. 2006. Т. 42. №3. С. 298-305.

57. Ревелль П., Ревелль Ч. Среда нашего обитания. Загрязнение воды и воздуха. М.: Мир, 1995, с. 296.

58. Скрябин Г.К., Головлёва JI.A. Использование микроорганизмов в органическом синтезе. М.: Наука, 1976. - 336 с.

59. Стабникова Е.В., Селезнева М.В., Дульгенов А.Н., Иванов В.М. Применение препарата "Лестран" для очистки почвы от углеводородов нефти // Прикл. биохим. и микробиол. 1996. Т. 32. № 2. С. 219-223.

60. Стадницкий Г.В. Экология: Учеб. Пособие / Г.В. Стадницкий, А.И. Радионов. М.: Высш. шк., 1988. 272 с.

61. Степаненко Б.Н. Курс органической химии: Учеб. пособие/ Б.Н. Степаненко. М.: Высш. шк., 1974.440 с.

62. Суровцева Э.Г., Ивойлов B.C., Беляев С.С. Разрушение ароматической фракции нефти ассоциацией грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов // Микробиология. 1997. Т. 66. № 1. С. 78-83.

63. Фомченков В.М., Холоденко В.П., Ирхина И.А., Петрунина Т.А. Влияние загрязнения водной среды нефтью и нефтепродуктами на барьерные свойства цитоплазматических мембран бактериальных клеток // Микробиология. 1998. Т. 67. № 3. С. 333-337.

64. Штина Э.А., Некрасова К. А. Водоросли загрязненных нефтью почв: состояние вопроса и задачи исследования / Э.А. Штина, К.А. Некрасова // Восст. нефтезагр. почв. экое. М.: Наука, 1988. С. 57-81.

65. Ягафарова Г.Г., Скворцова И.И. Новый нефтеокисляющий штамм бактерий Rhodoccocus erythropolis // Прикл. биохим. и микробиол. 1996. Т. 32. № 2. С. 224227.

66. Ягафарова Г.Г., Сафаров А.Х., Ильина Е.Г., Ягафаров И.Р., Барахнина В.Б., Сухаревич М.Э. Влияние продуктов окисления керогенов сланцев на биодеструкцию нефти и нефтепродуктов в почве и воде // Прикл. биохим. и микробиол. 2002. Т. 38. № 5. С. 518-522.

67. Aislabie J., McLeod M., Fraser R. Potential for biodégradation of hydrocarbons in soil from the Ross Dependency, Antarctica // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1998. V. 49. P. 210-214.

68. Aislabie J., Foght J., Saul D. Aromatic hydrocarbon-degrading bacteria from soil near Scott Base, Antarctica // Polar. Biol. 2000. V. 23. P. 183-188.

69. Alexander В., Leach S., Ingledew W.J. The relationship between chemiosmotic parameters and sensitivity to anions and organic acids in the acidophile Thiobacillus ferrooxidans. J. Gen. Microbiol. 1987. V. 133. P. 1171-1179

70. Alva V. A., Peyton В. M. Phenol and catechol biodégradation by the haloalkaliphile Halomonas campisalis: influence of pH and salinity // Environ Sci. Technol. 2003. V. 37. №19. P. 4397-402.

71. Atlas R.M. Microbial degradation of petroleum hydrocarbons. An environmental perspective // Microbiol. Reviews. 1981. №45. P. 180-209.

72. Atlas R.M. Bioremediation of petroleum pollutants // International Biodeterioration and Biodégradation. 1995. P. 317-327.

73. Baird C. Polynuclear Aromatic Hydrocarbons (PAHs). In: Environmental chemistry. University of Western Ontario. W.N. Freeman and Company. New York. 1995. P. 272274.

74. Bakermans C. Genetic approaches to determining psychrotolerance mechanisms // 108-th General Meeting, ASM, Toronto, Canada. 2007. P. 56.

75. Balba M.T., Al-Daher R., Al-Awadhi N., Chino T., Tsuji H. Bioremediation of oil-contaminated desert soil: the Kuwaiti experience // Environ. Int. 1998. V. 24. P. 163-173

76. Barkay T., Navon-Veneria S., Ron E.Z., Rosenberg E. Enhancement of solubilisation and biodégradation of polyaromatic hydrocarbons by the bioemulsifier alas an // Appl. environ. Microbiol. 1999. V. 65. P. 2697-2702.

77. Bento F.M., Camargo F.A., Okeke B.C., Frankenberger W.T. Comparative bioremediation of soils contaminated with diesel oil by natural attenuation, biostimulation and bioaugmentation // Bioresour Technol. 2005. V. 96. №9. P. 1049-1055.

78. Bertrand J.-C., Bonin P., Goutx M., Gauthier M., Mille G. The potential application of biosurfactants in combatting hydrocarbon pollution in marine environments // Bioremediation: Scientific and Technological Issues. 1994. P. 53-56.

79. Braddock J.F., Ruth M.L., Walworth J.L., McCarthy K.A. Enhancement and inhibition of microbial activity in hydrocarbon-contaminated arctic soils: implications for nutrient-amended bioremediation//Environ. Sci. Technol. 1997. V. 31. P. 2078-2084.

80. Bragg J.R., Prince R.C., Wilkinson J.B., Atlas R.M. Bioremediation for shoreline cleanup in Alaska // Exxon research and engineering company, Florham Park, NJ. 1994.

81. Brakstad O.G., Bonaunet K., Nordtug T., Johansen O. Biotransformation and dissolution of petroleum hydrocarbons in natural flowing seawater at low temperature // Biodégradation. 2004. V. 15. P. 337-346.

82. Brakstad O.G., Bonaunet K. Biodégradation of petroleum hydrocarbons in seawater at low temperatures (0-5°C) and bacterial communities associated with degradation //

83. Biodégradation. 2006. V. 17. P. 71-82.

84. Carberry J.B., Wik J. Comparison of ex situ and in situ bioremediation of unsaturated soils contaminated by petroleum // J. Environ. Sci. Health A Tox. Hazard. Subst. Environ. Eng. 2001. V. 36. № 8. P. 1491-503.

85. Cerniglia C.E. Microbial Metabolism of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons // Laskin A (Ed) Advances in Applied Microbiology. Academic Press. New York. 1984. V. 30. P.31-37.

86. Chuvilin E.M., Naletova N.S., Miklyaeva E.C., Kozlova E.V. Factors affecting spreadibility and trasportation of oil in regions of frozen ground // Polar Rec. 2001. V. 37. P. 229-238.

87. Cirigliano M.C., Carman G.M. Isolation of bioemulsifier from Candida lipolitica // Appl. And Environ. Microbiol. 1984. P. 747-750.

88. Cooper D.G. and Goldenberg B. G. Surface-active agents from two Bacillus species // Appl. Environ. Microbiol. 1987. V.53. P. 224-229.

89. Coulon F., Pelletier E., Gourhant L., Delille D. Effects of nutrient and temperature on degradation of petroleum hydrocarbons in contaminated sub-Antarctic soil // Chemosphere. 2005. V. 58. P. 1439-1448.

90. Davies J.I. and Evans W.C. Oxidative metabolism of naphthalene by soil Pseudomonads: the ring-fission mechanism // Biochem. J. 1964. V.91. P.251 -261.

91. Delille D., Basseres A„ Dessommess A. Effectiveness of bioremediation for oil-pollutted Antarctic seawater // Polar Biol. 1998. V. 19. P. 237-241.

92. Delille D. Response of Antarctic soil bacrerial assemblages to contamination by diesel fuel and crude oil // Microb. Ecol. 2000. V. 40. P. 159-168.

93. Delille D., Delille D. Field observations on the variability of crude oil impact in indigenous hydrocarbon-degrading bacteria from sub-Antarctic intertidal sediments // Mar. Environ. Res. 2000. V. 49. P. 403-417.

94. Delille D., Delille B., Pelletier E. Effectiveness of bioremediation of crude oil contaminated subantarctic intertidal sediment: the microbial response // Microb. Ecol. 2002. V.44. № 2. P. 118-126.

95. Delille D., Coulon F., Pelletier E. Biostimulation of narural microbial assemblages in oil-amended vegetated and desert sub-antarctic soils // Microb. Ecol. 2004. V. 47. P. 407

96. Delille D., Pelletier E., Coulon F. The influence of temperature on bacterial assemblages during bioremediation of a diesel fuel contaminated subAntarctic soil // Cold Regions Science and Technology. 2007. V. 48. P. 74-83.

97. Delille D. and Coulon F. Comparative mesocosm study of biostimulation efficiency in two different oil-amended sub-Antarctic soils // Microb. Ecol. 2007. V. 9. P. 1-10.

98. Deppe U., Richnow H.H., Michaelis W., Antranikian G. Degradation of crude oil by an arctic microbial consortium // Extremophiles. 2005. V.9. №6. P.461-470.

99. Desai J.D., Desai A.J. Production of biosurfactants. 1993. P.65-97. In N.Kosaric (ed.), Biosurfactants: production, properties, applications. Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y.

100. Desai D.J., Banat I.M. Microbial production of surfactants and their commercial potential//Microbiology and molecular biology reviews. 1997. V.61. P.47-64.

101. Dombek P.E., Jonson L.K., Zimmrley S.T., Sadowsky M. J. // Appl. and Environ. Microbiol. 2000. V. 66. № 6. P. 2572-2577.

102. Dutta K.T. and Harayama S. Fate of crude oil by the combination of photooxidation and biodégradation//Environ. Sci. Technol. 2000. V. 34. P. 1500-1505.

103. Eriksson M., Ka J.O., Mohn W.W. Effects of low temperature and freeze-thaw cycles on hydrocarbon biodégradation in Arctic tundra soil // Appl. Environ. Microbiol. 2001. V. 67. P. 5107-5112.

104. Evans CGT, Herbert D, Tempest DW. The continuous cultivation of microorganisms: II. Construction of a chemostas // Methods Microbio. 1970. V.2. P. 277 327.

105. Fedorak P.M., Payzant J.D., Montgomery D.S., Westlake D.W.S. Microbial degradation of n-alkyl tetrahydrothiophenes found in petroleum // Appl. Environ. Microbiol. 1988. V. 54. P. 1243-1248.

106. Ferguson S.H., Franzmann P.D., Snape I., Revil A.T., Trefry M.G., Zappia L.R. Effects of tempersture on mineralisation of petroleum in contaminated Antarctic terrestrialsediments. //Chemosphere. 2003. V52. P. 975-987.

107. Filonov A.E., Puntus I.F., Karpov A.V., Gaiazov R.R., Kosheleva I.A., Boronin A.M. Growth and survial of Pseudomonas putida strains degrading naphthalene in soil model systems with different moisture levels // Process Biochem. 1999. V. 34. P. 303-308.

108. Forsyth J.V., Tsao Y.M., Blem R.D. Bioremediation: when is augmentation needed? // In Hinchee R.E. et al. (eds) Bioaugmentation for site remediation. Battelle Press, Columbus, OH. 1995. P. 1-14.

109. Francy D., Thomas J., Raymond R., Ward C. // J. Industrial Microbiol. 1991. V. 8. № 3. P. 237-246.

110. Frassinetti S., Setti L., Corti A., Farinelli P., Montevecchi P., Vallini G. Biodégradation of dibenzothiophene by a nodulating isolate of Rhizobium meliloti II Can. J. Microbiol. 1998. V. 48. P. 289-297.

111. Gallego J.L., Loredo J., Llamas J.F., Vázquez F., Sánchez J. Bioremediation of diesel-contaminated soils: evalution of potential in situ techniques by study of bacterial degradation//Biodégradation. 2001. V. 12. №5. P. 325-335.

112. Gerday C. and Glansdorff N. Physiology and biochemistry of extremophiles // ASM Press. Washington D.C. USA. 2007.

113. Gibson D.T., Koch J.R. and Kallio R.E. Oxidative degradation of aromatic hydrocarbons by microorganisms. I. Enzymatic formation of catechol from benzene // Biochemistry. 1968. V. 7. P. 2653-2661.

114. Gibson D.T., Subramanian V. Microbial degradation of aromatic hydrocarbons. In: Gibson D.T. (ed) Microbial degradation to organic compounds. Marcel Dekker Inc, New York, p. 181-252.

115. Goldstein R.M., Mallory L.M., Alexander M. Reasons for possible failure of inoculation to enhance biodégradation // Appl. And Environ. Microbiol. 1985. V. 50. P. 977-983.

116. Hambrick G.A., DeLaune R.D., Patrick W.H. Effect of estuarine sediment pH and oxidation-reduction potential on microbial hydrocarbon degradation // Appl. Environ. Microbiol. 1980. V. 40. P. 365-369

117. Hart S. In situ bioremediation: defining the limites // Environ. Sci. and Technol. 1996. V. 30. № 9. P. 398A-401A.

118. Heitkamp A.M., Freeman J.P., Miller D.W., Cerniglia E.C. Pyrene degradation by Mycobacterium sp.: identification of ring oxidation and ring fission products // Appl. Environ. Microbiol. 1988. V. 54. P. 2556-2565.

119. Herrick J.B., Stuart-Keil K.G., Ghiorse W.C., Madsen E.L. Natural horizontal transfer of a naphtalene dioxygenase gene between bacteria native to a coal tar-cotaminated field site // Appl. Environ. Microbiol. 1997. V. 63. № 6. P. 2330-2337.

120. Hoff R. Bioremediation: an overview of its development and use for oil spill cleanup // Marine Pollution Bulletin. 1993. V. 26. №9. P. 476-481.

121. Huesemann M. H. Predictive model for estimating the extent of petroleum hydrocarbon biodégradation in contaminated soils // Environ. Sci. Technol. 1995. № 29. P. 7-18.

122. Jackson W.A., Pardue J.H. Potential for enhancement of biodégradation of crude oil in Louisiana salt marshes using nutrient amendments // Water Air Soil Pollut. 1997. V. 109. P. 343-355.

123. Kampfer P., Steiof M., Becker P.M. Characterization of chemoheterotrophic bacteria associated with the in situ bioremediation of waste oil contaminated site // Microbial Ecology. 1993. V. 26. № 2. P. 161-188.

124. Kato T., Haruki M., Imanaka T., Morikawa M., Kanaya S. Isolation and characterization of psychrotrophic bacteria from oil-reservoir water and oil sands // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2001. V. 55. P. 794-800.

125. Kazunga Ch. and Aitken D.M. Products from the incomplete metabolism of pyrene by polycyclic aromatic hydrocarbon-degrading bacteria // Appl. Environ. Microbiol. 2000. V. 66. P. 1919-1922.

126. Khan N.Y., Al-Ajmi D. Post-war imperatives for the sustainable management of the Gulf ecosystem // Environ. Int. 2001. V. 24. P. 239-248

127. King E., Ward M., Raney D. Two simple media for the demonstration of pyocyanin and fluorescin // J. Lab. Clin. Med. 1954. V. 44. № 2. P. 301-307.

128. Leahy J.G. and Colwell R.R. Microbial degradation of hydrocarbons in the environment // Microbial Reviews. 1990. V. 53. №3. P. 305-315.

129. Lee J.G. and Levy E.M. Enhancement of the natural biodégradation of condensate and crude oil on beaches of Atlantic Canada // Proceeding of 1989 oil spill conference. American Petroleum Institute, Washington DC. 1989. P. 479-486.

130. Lee K., Trembley G.H., Cobanli S.E. Bioremediation of oiled beach sediments: assessment of inorganic and organic fertilizers // Proceeding of 1995 International oil spill conference. American Petroleum Institute, Washington DC. 1995. P. 107-113.

131. Lee K. and Trembley G.H. Bioremediation: application of slow-release fertilizers on low energy shorelines // Proceeding of 2003 oil spill conference. American Petroleum Institute, Washington DC. 2003. P. 449-454.

132. Le Floch S., MerlinF.X., Guillerme M., Tozzolino P., Ballerini D., Dalmazzone C., Lundh T. Bioren: recent experiment on oil polluted shoreline in temperate climate // In: In-Situ and On-Site Bioremediation. 1997. V. 4. P. 411-417.

133. Le Floch S., MerlinF.X., Guillerme M., Dalmazzone C., Le Corre P. A field experimentation on bioremediation: Bioren. // Environ. Technol. 1999. V. 20. P. 897-907.

134. Lin Q., Mendelssohn I.A., Henry C.B., Roberts P.O., Walsh M.M., Overton E.B., Portier R.J. Effects of bioremediation on oil degradation in mineral and sandy salt marsh sediments // Environ. Tchnol. 2005. V. 20. P. 825-837.

135. Lufit J.H. Fine structure of capillary and endocapillary layer as revealed by ruthenium red // Feder. Proc. 1966. V.25. P.1773-1783.

136. Maneerat S. and Dikit P. Characterization of cell-associated bioemulsifier from Myroides sp. SMI, a marine bacterium // J. Sci. Technol. 2007. V. 29. №3. P. 769-779.

137. Marchesi J.R., Sato T., Weightman A.J. Design and evaluation of useful bacterium-specific PCR primers that amplify genes coding for bacterial 16S rRNA // Applied And Environ. Microbiol. 1998. V. 64, №2. P. 795-799.

138. Margesin R., Shinner F. Cold-adapted organisms, (eds). Springer, Berlin Heidelberg New York. 1999a.

139. Margesin R., Shinner F. Biological decontamination of oil spills in cold environments // J. Chem. Technol. Biotechnol. 1999b. V. 74. P. 381-389.

140. Margesin R. Potential of cold-adapted microorganisms for bioremediation of oil-polluted alpine soils // Int. Biodeter. Biodegr. 2000. V. 46. P. 3-10.

141. Margesin R. and Schinner F. Bioremediation (natural attenuation and biostimulation) of diesl-oil-contaminated soil in an alpine glacier skiing area // Appl. Environ. Microbiol. 2001. V. 67. № 7. P. 3127-3133.

142. Margesin R., Feller G., Gerday C., Russell NJ. Cold-adapted microorganisms: adaptation strategies and biotechnological potential. In: Bitton G (ed) The encyclopedia ofenvironmental microbiology. Wiley, New York. 2002. V. 2. P. 871-885.

143. Margesin R., Labbe D., Schinner F., Greer C., Whyte L. Characterization of hydrocarbon-degrading microbial populations in contaminated and pristine alpine soils // Appl. Environ. Microbiol. 2003. V. 69. № 3. P. 3085-3092.

144. Margesin R., Hammerle M., Tscherko D. Microbial activity and community composition during bioremediation of diesel-oil-contaminated soil: effects of hydrocarbon concentration, fertilizers, and incubation time // Microb. Ecol. 2007. V. 53. P. 259-269.

145. Margesin R., Schinner F., Marx J.C., Gerday C. Psychrophiles: from biodiversity to biotechnology // Eds. Springer Verlag, Berlin Heidelberg. 2008. P. 245-278.

146. Michaud L., Lo Giudice A., Saitta M., De Domenico M., Bruni V. The biodégradation efficiency on diesel oil by two psychrotrophic Antarctic marine bacteria during a two-month-long experiment // Mar. Pollut. Bull. 2004. V. 49. № 5-6. P. 405-409.

147. Marquez-Rocha F.J., Hernandez-Rodriguez V., Teresa Lamela M. Biodégradation of diesel oil in soil by a microbial consortium // Water, Air, and Soil Poll. 2001. V. 128. P. 313-320.

148. McFarland M.J., Qiu X.L., Sims J.L. Remediation of petroleum impacted soils in fungal compost bioreactors // Water Sci. Technol. 1992. V. 25. № 3. P. 197-206.

149. McMeekin, T. A., P. D. Nichols, S. D. Nichols. A. Juhasz, and P. D. Franzmann. Biology and biotechnological potential of halotolerant bacteria from Antarctic saline lakes //Experientia. 1993. V. 49. P. 1042-1046.

150. Mille G., Almallah M., Bianchi M., Wambeke F. van., Bertrand J.C. Effects of salinity on petroleum biodégradation // Fresenius J. Anal. Chem. 1991. V. 339. P. 788-791.

151. Mitra-Kirtly S., Mullins C.O., Elp J.V., GeorgJ.S., Chen J., Cramer P.S. Determination of the nitrogen chemical structures in petroleum asphaltenes using XANES spectroscopy //J. Am. Chem. Soc. 1993. V.115. P. 252-258.

152. Mishra S., Jyot J., Kuhad, R., and Lai B. Evaluation of inoculum addition to stimulate in situ bioremediation of oily sludge contaminated soil // Applied and Environmental Microbiology. 2001. V.67. P.1675-1682.

153. Mohn W.W., Stewart G.R. Limiting factors for hydrocarbon biodégradation at low temperature in Arctic soils // So.il Boilogy&Biochemistry. 2000. V. 32. P. 1161-1172.

154. Mohn W.W., Radziminski C.Z., Fortin M.C., Reimer K.J. On site bioremediation of hydrocarbons-contaminated Arctic tundra soils in inoculated biopiles // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2001. V. 57. P. 242-247.

155. Morgan P. and Watkinson R.J. Biodégradation of components of petroleum // In C. Ratledge (eds). Biochemistry of microbial degradation. Kluwer Academic Publisher, The

156. Netherlands. 1994. P. 1-31.

157. Morita R.Y. Psychrophilie bacteria // Bacterid. Rev. 1975. V. 39. P. 144-167.

158. Muller R., Antranikian G., Maloney S., Sharp R. Thermophilic degradation of environmental pollutants. In: Antranikian G. (eds) Biotechnology of extremophiles. 1998. Springer, Berlin Heidelberg New York, pp. 155-169

159. Murygina V., Arinbasarov M., Kalyuzhnyi S. Bioremediation of oil polluted aquatic systems and soils with novel preparation «Rhoder» // Biodégradation. 2000. V. 11. P. 385389.

160. Murygina V., Markarova M., Kalyuzhnyi S. Application preparation «Rhoder» for remediation of oil polluted polar marshy wetlands in Komi Republic // Environment International. 2005. V. 31. P. 163-166.

161. Nichols W.J. The U.S. Environmental Protect Agency: national oil and hazardous substances pollution contingency plan // Proceeding of 2001 oil spill conference. American Petroleum Institute, Washington DC. 2001. P. 1479-1483.

162. Oren A., Gurevich P., Azachi M., Hents Y. Microbial degradation of pollutants at high salt concentrations // Biodégradation. 1992. V. 3. P. 387-398.

163. Pineda-Fores G. and Mesta-Howard A.M. Petroleum asphaltenes: generated problematic and possible biodégradation mechanisms // Rev. Latinoam. Microbiol. 2001. V.43. №3. P. 143-150.

164. Plaza G.A., Ulfig K., Brigmon R.L. Surface active properties of bacterial strains isolated from petroleum hydrocarbon-bioremediated soil // Pol. Journal Microbiol. 2005. V. 52. №2. P. 161-167.

165. Prince R., Bragg J. Shoreline bioremediation following the Exxon Valdez oil spill in Alaska // Bioremed. J. 1997. V.l. P. 97-104.

166. Radwan S.S., Al-Awadhi H., Sorkhoh N.A., El-Nemr I.M. Rhizospheric hydrocarbon-utilizing microorganisms as potential contributors to phytoremediation for the oily Kuwaiti desert // Microbiol. Res. 1998. V. 153. P. 247-251

167. Radwan S.S., Al-Mailem D., EI-Nemr I., Salamah S. Enhanced remediation of hydrocarbon contaminated desert soil fertilized with organic carbons // Int. Biodeterior. Biodegrad. 2000. V. 46. P. 129-132

168. Reynolds M.D. and Friedell G.H. Further observations on tumor extracts causinghemolysis in vitro // Proc Soc Exp Biol Med. 1963. V.l 14. P.798-801.

169. Rhykerd R.L., Weaver R.W., Mclnnes K.J. Influence of salinity on bioremediation of oil in siol // Environ. Pollut. 1995. V. 90. P. 127-130.

170. Richmond S.A., Lindstrom J.E., Braddock J.F. Effects of chitin on microbial emulsification, mineralization potential, and toxicity of Bunker C oil // Mar. Pollut. Bull. 2001. V. 42. P. 773-779.

171. Rogel E. Theorical estimation of the solubility parameter distribution of asphaltenes, resins and oil from crude oils and related materials // Energ. Fuel. 1997. V. 11. P. 920-925.

172. Romano, I., B. Nicolaus, L. Lama, M. C. Manca, and A. Gambacorta. Characterization of a haloalkalophilic strictly aerobic bacterium, isolated from Pantelleria island // Syst. Appl. Microbiol. 1996. V. 19. P. 326-333.

173. Ron E.Z., Rosenberg E. High- and low-molecular-mass microbial surfactants // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2001. V. 52. P. 154-162.

174. Rouviere P.E. and Chen M.W. Isolation of Brachymonas petroleovorans CHX, a novel cyclohexane-degrading beta-proteobacterium // FEMS Microbiol Lett. 2003. V.227. №1. P.101-106.

175. Sambrook J., Fernley H., Maniatis T. Molecular Cloning: a Laboratory Manual. / 2nd ed. N.Y.: Cold Spring Harbor, 1989. P. 480.

176. Sanseverino J., Applegate B.M., King J.M.H., Sayler G.S. Plasmid-mediated mineralisation of naphtalene, phenanthrene and untracene // Appl. Environ. Microbiol. 1993. V. 59. P. 1931-1937.

177. Seklemenova E., Pavlova A., Kovacheva K. Biostimulation-based bioremediation of diesel fuel: field demonstration // Biodégradation. 2001. V.12. P. 311-316.

178. Sendstad E. Accelerated biodégradation of crude oil on Antarctic shorelines // Proceeding of the third arctic and marine oil spill program technical seminar, Ottawa, Canada. 1980. P. 1-8.

179. Schneider J., Grosser J.R., Jayasimhulu K., Xue W., Kinkle B., Warshawsky D. // Biodégradation of carbazole by Ralstonia sp. RJGII isolated from a hydrocarbon contaminated soil // Can. J. Microbiol. 2000. V. 46. P. 269-277.

180. Simon M., Autenrieth R.L., McDonald T.J., Bonner J.S. Evalution of bioaugmentation for remediation of petroleum in a wetland // Proceeding of 1999 International oil spill conference. American Petroleum Institute, Washington DC. 1999. P. 1279-1293.

181. Sims J.L., Sims R.N., Matthews J.E. Appoach to bioremediation of contaminated soil // Haz. Waste Haz. Matter. 1990. V. 7. P.l 17-149.

182. Shukla O.P. Biodégradation for environmental management // Everyman's Sci. 1990. V.25. №2. P. 46-50.

183. Shuttleworth K.L., Cerniglia C.E. Bacterial Degradation of Low Concentration of Phenanthtrene and Inhibition by Naphthalene // Microb. Ecol. 1996. V. 31. P. 305-317.

184. Sikkema J., De Bout J.A.M., Poolman B. Mechanisms of membrane toxicity of hydrocarbons // Microbiol. Rev .1995. V. 59. № 2. P. 201-222.

185. Siron R., Pelletier E„ Brochu C. Environmental factors influencing the biodégradation of petroleum hydrocarbons in cold seawater // Arch. Env. 1995. V.2. P.7-10.

186. Smith R.M. The physiology of aromatic hydrocarbon degrading bacteria // In C. Ratledge (eds). Biochemistry of microbial degradation. Kluvver Academic Publisher, The Netherlands. 1994. P. 365-367.

187. Soloway D.A., Nahir M., Billowits M.E., Whyte L.G. In situ bioremediation of diesel-contaminated soil in Canada Arctic territory // Polar Rec. 2001. V. 37. P. 267-272.

188. Sorkhoh N.A., Ibrahim A.S., Ghannoum M.A., Radwan S.S High-temperature hydrocarbon degradation by Bacillus strearothermophilis from oil-polluted Kuwait desert // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1993. V. 39. P. 123-126

189. Speight J.G. and Moschopedis S.E. On the molecular nature of petroleum asphaltenes // In Bunger J.W. and Li N.C. (eds). Chemistry of asphaltenes. American Chemical Society, Washington D.C. 1981. P. 1-15.

190. Stallwood B., Shears J., Williams P.A., Hugues K.A. Low temperature bioremediation of oil-contaminated soil using biostimulation and bioaugmentation with Psendomonas sp. from maritime Antarctica // J. Appl. Microbiol. 2005. V. 99. P. 794-802.

191. Stapleton R.D., Savage D.C., Sayler G.S., Stacey G. Biodégradation of aromatic hydrocarbons in a extremely acidic environment // Appl. Environ. Microbiol. 1998. V. 64. P. 4180-4184

192. Strausz P.O., Mojelsky W.T., Faraji F., Lown M.E., Peng P. Additional structural details on Athabasca asphaltene and their ramifications // Energ. Fuel. 1999. V.13. P. 207227.

193. Suni S., Kosunen A.-L., Hautala M., Pasila A., Romantschuk M. Use of a by-product of peat excavation, cotton grass fibre, as a sorbent for oil-spills // Mar. Pol. Bulletin. 2004. V. 49. P. 916-921.

194. Suni S., Koskinen K., Kauppi S., Boronin A., Filonov A., Kosheleva I., Gafarov A.,

195. Sokolov S., Romantschuk M. Biodégradation of oily cotton grass sorbents // Unitas Congress Centre. Helsinki. Feb. 9-11, 2005.

196. Sutherland J.B., Rafll F„ Khan A.A., Cerniglia C.E. Mechanisms of polycyclic aromatic hydrocarbon degradation // In: Microbial Transformation and Degradation of Toxic Organic Chemicals. Willey-Liss, Inc. 1995. P. 269-306.

197. Swannell R.P.J., Lee K., McDonagh M. Field evaluations of marine oil spill bioremediation// Microbiological Reviews. 1996. V.60. №2. P. 342-365.

198. Tam N.F., Guo C.L., Yau W.Y., Wong Y.S. Preliminary study on biodégradation of phenanthrene by bacteria isolated from mangrove sediments in Hong Kong // Mar Pollut Bull. 2002. V. 45. №1-12. P. 316-24.

199. Teas Ch., Kalligeros S., Zanikos F., Stournas S., Lois E., Anastopoulos G. Investigation of the effectiveness of absorbent materials in oil spill clean up // Desalination. 2001. V. 140. P. 259-264.

200. Thomassin-Lacroix E.J.M., Eriksson M., Reimer K.J., Mohn W.W. Biostimulation and bioaugmentation for on-site treatment of weathered diesel fuel in Arctic soil // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2002. V. 59. P. 551-556.

201. Thouand G., Bauda P., Oudot J., Kirsch G., Sutton C., Vidalie S. Laboratory evaluation of crude oil biodégradation with commercial or natural microbial inocula // Can. J. Microbiol. 1999. V.45. P.106-115.

202. Tiago I., Paula Chung A., Veryssimo An. Bacterial diversity in a nonsaline alkaline environment: heterotrophic aerobic populations // Appl. and Environ. Microbiol. 2004. V. 70. № 12. P. 7378-7387.

203. Top E.M., Moenne-Loccoz Y., Pembroke T., Thomas C.M. (eds) Phenotypic traits conferred by plasmids // The horizontal gene pool. Harwood Academic Publishers, Amsterdam, 2000. P. 199-208.

204. Tresse O., Lorrain M.-J., Rho D. Population dynamics of free-floating and attached bacteria in a styrene-degrading biotricking filter analyzed by denaturing gradient gel electrophoresis //Appl. Microbiol. Biotechnol. 2002. V. 59. P. 585-590.

205. Trolio R., Grice K., Fisher J.S., Alexander R., Kagi I.R. Alkylbiphenyls and alkyldiphenylmeyhanes as indicators of petroleum biodégradation // Org. Geochem. 1999. V. 30. P. 1241-1253.

206. Walworth J., Braddock J., Woolard C. Nutrient and temperature interactions in bioremediation of crytic soils // Cold regions Sci. Technol. 2001. V. 32. P. 85-91.

207. Ward D. M., Brock T. D. hydrocarbon degradation in hypersaline environments // Appl. Environ. Microbiol. 1978. V. 35. P. 353-359.

208. Whyte L., Bourbonniere L., Greer Ch. Biodégradation of petroleum hydrocarbons by psychrotrophic Pseudomonas strains possesing both alkane (alk) and naphthalene (nah) catabolic pathways // Appl. and Environ. Microbiol. 1997. V.63. №9. P.3719-3723.

209. Whyte L., Hawari J., Zhou E., Bourbonniere L., Inniss W., Greer Ch. Biodégradation of variable-chain-length alkanes at low temperatures by a psychrotrophic Rhodococcus sp. // Appl. and Environ. Microbiol. 1998. V.64. №7. P.2578-2584.

210. Whyte L.G., Bourbonniere L., Bellerose C., Greer C.W. Bioremediation assessment of hydrocarbon-contaminated soils from the High Arctic // Bioremediation J. 1999. V. 3. P. 69-79.

211. Whyte L.G., Goalen B., Hawari J., Labbe D., Greer C.W., Nahir M. Bioremediation treatability assessment of hydrocarbon-contaminated soils from Eureka, Nunavut // Cold Regions Sci. Technol. 2001. V. 32. P. 121-132.

212. Wright A.L., Weaver R.W., Webb J.W. Oil bioremediation in salt marsh mesocosms as influenced by n and P fertilization, flooding, and season // Water Air Soil Pollut. 1997. V. 95. P. 179-191.

213. Van Hamme J.D. and Ward O.P. Volatile hydrocarbon biodégradation by a mixed-bacterial culture during growth on crude oil // J Ind Microbiol Biotechnol. 2001. V. 26. №6. P. 356-62.

214. Van Hamme J. D., Singh A., Ward P. Recent Advances in Petroleum Microbiology // Microbiol. Mol. Biol. Rev. 2003. V. 67. № 4. P. 503-549.

215. Ventosa A., Joaquhn J., Oren A. Degradation of phenol in synthetic and industrial wastewater by Rhodococcus erythropolis UPV-1 immobilized in an air-stirred reactor with clarifier // Microbiol. Mol. Biol. Rev. 1998. V. 62. № 2. P. 504-544.

216. Vogel T.M., Gribic-Galic D. Incorporation of oxygen from water into toluene and benzene during anaerobic fermentative transformation 11 Apl. Environ. Microbiol. 2002. V. 52. P. 200-202.

217. Yang L., Lai C.T., Shieh W.K. Biodégradation of dispersed diesel fuel under high saline conditions // Water Res. 2000. V.34. P. 3303-3314.

218. Ylihonko K., Hakala J., Niemi J., Lundell J., Mantsala P. Isolation and characterization of aclacinomycin A-non-producing Streptomyces galilaeus (ATCC 31615) mutants // Microbiology. 1994. V. 140. P. 1359-1365.

219. СВИДЕТЕЛЬСТВО о депонировании1. Кому.

220. Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН 142290. Пущино. Московская обл. проспект Науки, д. 5 /римя депозитора и наименование организации, адрес)1. Микроорганизм

221. Pseudomonas futiid*f-BS3962наименование микроорганизма и опознавательная ссылка, присвоенная депозитором номер, символ и т.д.)

222. Регистрационный номер, присвоенный ВКМ ВКМ В-2387 Р

223. Микроорганизм, поименованный в графе!, сопровождался Ходатайством о депонировании, включавшем:научное описание таксономическое определение научное описание и таксономическое определение справку о непатогенности

224. СВИДЕТЕЛЬСТВО о депонировании

225. Кому Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г'.К. Скрябина РАН 142290. Пущино. Московская обл. проспект Науки, д. 5имя депозитора и наименование организации, адрес)1. Микроорганизм

226. Pseudomonas puf 'tda BS3961наименование микроорганизма и опознавательная ссылка, присвоенная депозитором номер, символ и т.д.)

227. Регистрационный номер, присвоенный ВКМ ВКМ В-2380 Р

228. Микроорганизм, поименованный в графе 1, сопровождался Ходатайством о депонировании, включавшем:научное описаниетаксономическое определениенаучное описание и таксономическое определениесправку о непатогенности

229. Настоящим подтверждается, что микроорганизм, поименованный в графе 1, депонирован Всероссийской коллекцией микроорганизмов ЙБФМ им. Г.К.Скрябина РАН в связи с подачей заявки на оформление национального патента.1. Дата депонирования1. Акименко В.К.

230. Заместитель директората •''yii.

231. Доктор биол.наук, npofceS^ri,<:;V -; , . ss

232. ИНСТИТУТ БИОХИМИИ И ФИЗИОЛОГИИ МИКРООРГАНИЗМОВим. Г. К. Скрябина ♦142290 г.Пущино, Московской обл. просп. Науки 5, ИНН 5039000146, ОКПО 02699702, ОКОНХ95110,

233. Среднерусский банк Сбербанка РФ г.Москва, Серпуховское ОСБ 1554, р/с 4(6б38Ш340402000013. БИК 044552323, корр. счет ЗОЮШ090000000б323

234. ОАО МАКБ "Возрождение г.Пущино, р/с 40503 810704200140346, БИК 044525181, корр. счет 30101810900000000181 Телефон: [phone], факс: [phone]. INTERNET E-mail [e-mail]№ 12310лда№

235. СВИДЕТЕЛЬСТВО о- депонировании штамма

236. Кому: Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН лаборатория биологии плязмид

237. Россия, Московская обл., г. Пущине, 142290, пр. Науки, 5, ИБФМ им. Г.*К. Скрябина РАН

238. Микроорганизм: Rhodococcus sp. штамм S 67

239. Регистрационный номер, присвоенный ВКМ: ВКМ Ас-2533 Д

240. Микроорганизм, поименованный в графе i, сопровождался Ходатайством о депонировании, включавшем:научное описание и таксонономическоеопределение |представлено|справку о нелатогенности .нст|

241. Настоящим подтверждается, что микроорганизм, поименованный в графе 1, депонирован Всероссийской коллекцией микроорганизмов ИБФМ РАН. Депонирование проведено с целью патентования микроорганизма »Российской Федерации.

242. Дата депонирования: 27 февраля 2006 г.

243. Заместитель директа проф., доктор1. В.К. Акименко

244. ИНСТИТУТ БИОХИМИИ И ФИЗИОЛОГИИ МИКРООРГАНИЗМОВ им. Г. К. Скрябина142290 г.Пуншно, Московской обл.,лросп. Науки 5, ИНН 5039000146, ОКПО 02699702, ОКОНХ95110,

245. Среднерусский банк Сбербанка РФ г.Москва, Серпуховское ОСБ 1554. р/с4СГ5038Г0340402000013. БИК 044552323, корр. счет 30101810900000000323

246. ОАО МАКБ "Возрождение г Пущино, р/с40503810704200140346, БИК 044525181, корр. счег 30101810900000000181 Телефон: [phone], факс: (095) 956^33-70. INTERNET E-mail [e-mail]

247. Кому: Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН лаборатория биологии плазмид

248. Россия, Московская обл., г. Иу щи но, 142290, пр. Науки, 5, ИБФМ им. ПК. Скрябина РАН Микроорганизм: ЛкоАкоссш яр. штамм X 5 Регистрационный номер, присвоенный ВКМ: ВКМ Ас-2532 Д

249. Микроорганизм, поименованный в графе I, сопровождался Ходатайством о депонировании, включавшем:научное описание и таксонономическоеопределение ¡представлено!справку о непатогенности пет!

250. Настоящим подтверждается, что микроорганизм, поименованный в графе 1, депонирован Всероссийской коллекцией микроорганизмов ИБФМ РАН. Депонирование проведено с целью патентования микроорганизмав Российской Федерации.

251. Дата депонирования: 27 февраля 2006 г.12310на№1. СВИДЕТЕЛЬСТВОо. депонировании штамма

252. ГеЦFax (4867)759733 code from Moeccw-27 E-maJl:toxl(^onl!ne.jtKk.netf£z$tc0iirehь' диpeXropa no научной Зг/ДщЛ-ор м'сдиадвН:к§| наук,1. ЗАКЛЮЧЕНИЕо патогашостп штамма Ююйососсю ер. шталш Я 67 (ВКМ Ас2533Д) для теплокровных животных

253. Начальник лаборатории санбакконтролн Негрнй Н.В

254. ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ «НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ЦЕНТР ТОКСИКОЛОГИИ И ГИГИЕНИЧЕСКОЙ РЕГЛАМЕНТАЦИИ БИОПРЕПАРАТОВ» ФЕДЕРАЛЬНОГО МВДИКО-БИОЛОШЧЕСКОГО АГЕНТСТВА (ФГУ11 НИЦ ТПП ФМВА РОССИИ)

255. MJ2S3 РОССИЯ Моаисаая область Сгрпуговсий jm Ыс Дшдаа ул Леша 102А тЫфгв (4967) 75S7JJ (од xi Моавы-Я E-fnältoxicgonllnüloctnef

256. STATE FEDERAL ENTERPRISE FOR SCIENCE «RESEARCH CENTER FORTOX1COLOCY AND HYGIENIC REGULATION OF EIOPREPARATIONS* AT FEDERAL MEDICO-BIOLOGICAL AGENCY (SEES RCT& 1KB OF KMBA OF RF)1Rreiypai (4367)759738 code from Hoseow-27 Е-ш111ох1с@опШю.5|оск.пе1

257. Чк^п-елhPjfupeßrfima по научной11. Длднщси1. ЗАКЛЮЧЕНИЕо пэтогспиости штамма Pseudomonasputida BS3961 (BKM В-2380 D) для теплокровных ЖИВОТНЫХ"

258. Начальник лаборатории санбакконтроля Нсгрий H.B.1. ИЮШШЖАЖ #ВДШРАЩШШв bbbjbb к т вв-ч * W S1. S2 »1. В В В1. О ® ^ вв в вв