Деградация нефти ассоциацией аэробных углеводородокисляющих микроорганизмов в различных типах почв тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Павликова, Татьяна Алексеевна

• Павликова, Татьяна Алексеевна
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Павликова, Татьяна Алексеевна

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Проблема нефтяного загрязнения окружающей среды и ее влияние нефти на почвенный микробоценоз.

1.1.1. Модифицирующее действие нефти на основные свойства почвы.

1.1.2. Специфичность действия углеводородов нефти на почвенный микробоценоз.

1.1.3. Способы рекультивации нефтезагрязненных почв.

1.2. Экологическая и морфолого-биохимическая характеристика уг-леводородокисляющих микроорганизмов.

1.2.1. Распространение микроорганизмов - деструкторов углеводородов нефти.

1.2.2. Морфологические и биохимические особенности углеводо-родокисляющих микроорганизмов.

1.3. - Химические аспекты деградации нефти аэробными углеводоро- • докисляющими микроорганизмами.

1.4. Биоремедиация нефтезагрязненных почв.

1.4.1. Проблема выживания интродуцированных микроорганизмов - деструкторов нефти.

1.4.2. Роль микробных биопрепаратов в биоремедиации почвенных экосистем, загрязненных нефтью.

Глава 2. Объекты, методы и условия проведения эксперимента

2.1. Объекты и условия проведения эксперимента.

2.2. Выделение, идентификация и изучение активных штаммов углево-дородокисляющих микроорганизмов.

2.3. Методика изучения микробиологического воздействия на химический состав нефти.

2.3.1. Методика изучения трансформации углеводородов микроорганизмами.

2.3.2. Газохроматографический анализ нефти.

2.4. Методика приготовления комплексного микробного биопрепарата на основе выделенных углеводородокисляющих штаммов микроорга-нимов.

2.5. Изучение приживаемости углеводородокисляющих штаммов микроорганизмов в компосте и почве.

2.6. Изучение микробных ценозов нефтезагрязненных почв.

2.7. Определение остаточного содержания нефти в почве.

2.7.1. Экстракция нефтепродуктов и их очистка.

2.7.2. ИК-спектрометрический анализ экстрактов.

2.8. Изучение влияния нефти на фитотоксичность нефтезагрязненных почв.

2.9. Использование электронно-вычислительной техники и методы статистической обработки результатов.

Глава 3. Результаты исследований

3.1. Выделение и отбор штаммов микроорганизмов, активно усваивающих углеводороды нефти.

3.2. Морфологические и физиолого-биохимические особенности выделенных углеводородокисляющих штаммов микроорганизмов.

3.2.1. Диагностика выделенных углеводородокисляющих бактерий рода Pseudomonas putida и Rhodococcus ruber.

3.2.2. Диагностика выделенных углеводородокисляющих мик-ромицетов рода Trichoderma citrinoviride, Metarrhizium anisoplia и Aspergillus carneus.

3.3. Исследование роста выделенных углеводородокисляющих микроорганизмов

3.3.1. Влияние температуры на рост углеводородокисляющих микроорганизмов.

3.3.2. Влияние аэрации на динамику роста микроорганизмов.

3.3.3. Особенности развития выделенных микроорганизмов на различных источниках углеводородов.

3.4. Химические механизмы трансформации углеводородов нефти выделенными бактериями и микромицетами.

3.5. Конструирование микробного консорциума для биопрепарата, разрушающего нефть.

3.5.1. Особенности инокуляции углеводородокисляющих микроорганизмов.

3.6 Изучение влияния нефти на динамику численности почвенных микроорганизмов в условиях лабораторного опыта.

3.6.1. Изменение общей численности гетеротрофных бактерий и почвенных микромицетов в нефтезагрязненной почве.

3.6.2. Динамика численности углеводородокисляющих микроорганизмов в нефтезагрязненной почве.

3.7. Особенности микробоценозов нефтезагрязненных почв.

3.8. Исследование степени деградации нефти в почве.

3.9. Сравнительное изучение микробиологических препаратов на основе углеводородокисляющих штаммов микроорганизмов.

3.10. Биологический тест на фитотоксичность почвы, загрязненной нефтью.

Выводы.

Список используемой литературы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Деградация нефти ассоциацией аэробных углеводородокисляющих микроорганизмов в различных типах почв»

Актуальность проблемы

Многочисленные нарушения экологического равновесия в природе, в конечном счете, приводят к экологическим катаклизмам. Следствием безудержного и неконтролируемого внедрения человека в биосферу оказывается загрязнение почвы и водоемов вредными веществами.

В настоящее время среди различных техногенных нарушений природы одним из наиболее серьезных и трудно устраняемых является нефтезагряз-нение. Нефть и ее компоненты (ароматические, нафтеновые и парафиновые углеводороды) являются одними из самых опасных загрязнителей, попадающих в почву в процессах добычи, транспортировки, переработки и хранения. Хронические разливы нефти приводят к быстрой и полной деградации ландшафтов (Израэль, Ровинский 1986; Amadi et al., 1993).

Для ускорения процесса самоочищения почв от нефти используются все природные резервы экосистемы, в том числе и биологические. Микробиологические методы очистки почв способны дополнять различные технологии, а в определенных ситуациях не имеют аналогов (Walker, 1985; Пиков-ский, 1993; Н.А. Киреева и др., 2001).

Значительный вклад в процесс биологического разрушения нефти вносят углеводородокисляющие микроорганизмы, являющиеся постоянным компонентом почвенных биоценозов. Микроорганизмы способны использовать углеводороды нефти в качестве единственного источника углерода и доводить процесс трансформации органического вещества до полной минерализации. В результате биохимических процессов природные загрязнители превращаются в углекислый газ, воду, и другие экологически нейтральные соединения (Гузев, Корнелли 1981; Walker, 1985; Славина, Середина, 1992).

В настоящее время интенсивно разрабатываются и применяются методы микробиологической очистки природных сред от нефтяного загрязнения, основанные на использовании чистых или смешанных культур углеводоро-докисляющих микроорганизмов в сочетании с различными веществами, стимулирующими их активность. Эффективность этих методов может быть значительно повышена путем изменения соответствующих физико-химических условий среды и внесением ассоциации специально подобранных штаммов микроорганизмов, обладающих выраженными углеводородо-кисляющими свойствами. (Славина, Середина, 1992; Сидоров и др., 1997). Одним из важных условий микробиологической очистки нефтезагрязнений является способность различных групп микроорганизмов (бактерий, актино-мицетов, дрожжевых грибов и микромицетов) совместно «бороться» с загрязнением, а также обладать высокой иннокулятивной жизнеспособностью (Звягинцев и др., 2001).

За рубежом в последнее время широкое развитие получили биореме-диационные технологии на основе комплексных микробиологических препаратов. В отечественной же практике реальные методы по использованию комплексных микробиологических препаратов для очистки окружающей среды от углеводородного загрязнения упоминаются очень редко (Сидоров и др., 1997). Надеемся, что результаты изучения физиологии и экологии ассоциаций углеводородокисляющих микроорганизмов и разработка методов их успешной интродукции в природные экосистемы позволят в дальнейшем развить экологическую биотехнологию в нашей стране.

Цель и задачи исследования. Целью работы было изучение действия сырой нефти на почвенную микробиоту; выделение ассоциации аэробных микроорганизмов, активно утилизирующих углеводороды нефти и изучение их способности к биоремедиации нефтезагрязненных почв.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

• Выявить, выделить и культивировать в чистой культуре микроорганизмы, способные к потреблению углеводородов нефти.

• Отобрать штаммы микроорганизмов-деструкторов с наибольшей глубиной окисления углеводородов нефти.

• Установить таксономическую принадлежность и фцзиолого -биохимические особенности микроорганизмов-деструкторов нефти.

• Исследовать действие сырой нефти Харьягинского и Сугмутского мест о-рождений на почвенную микрофлору.

• Разработать комплексный микробный биопрепарат, способный к деград-ции углеводородов нефти.

• Изучить особенности микробоценозов нефтезагрязненных почв.

Научная новизна работы

Из загрязненных нефтью почв выделены бактериальные штаммы и штаммы микромицетов, использующие углеводороды, входящие в состав сырой нефти в качестве единственного источника углерода. Полученные культуры идентифицированы, изучены и отнесены к видам iRodococcus ruber PS-02., Pseuchmanas putida SP-203, Trichoderma ciirmovirkie VS-89, Metarrhizium aniscpliae AF-78, AspergMus carneus SU-TM-03. Выявлена высокая деструктивная способность микромицетов Trichoderma citrinovu'ide VS-89 и Metarrhizium arrisopliae AF-78, что ранее в литературе не отмечено. Установлено, что ассоциация углеводородо-кисляющих микроорганизмов обладает высокой иннокулятивной способностью. Показана высокая активность углеводородокисляющих микроорганизмов в деструкции сырой нефти и ее легких фракций (нормальных алканов) при относительно низких температурах (8-15°С). Изучены микробоценозы нефтезагрязненных почв. Выявлена роль углеводородокисляющих штаммов микроорганизмов в деградации нефти на песке.

Практическая значимость

На основе ассоциации выделенных аборигенных штаммов-деструкторов углеводородов нефти разработан комплексный биопрепарат, показавший высокую активность в окислении сырой нефти Сугмутского и Харьягинского месторождений и позволяющий в течение 4 месяцев снизить токсичность почвы, загрязненной сырой нефтью, до уровня, не препятствующего росту растений. Результаты проведенных исследований являются основой для разработки технологии получения новых биопрепаратов, используя аборигенные штаммы углеводородокисляющих микроорганизмов g для очистки почв, загрязненных сырой нефтью в широком температурном диапазоне (t=15-28°C).

Работа выполнена в условиях лабораторного опыта, заложенного на кафедре микробиологии Московской сельскохозяйственной академии им. К.А. Тимирязева (г. Москва) в 2001-2004 гг.

Автор выражает искреннюю благодарность своему научному руководителю — д.с-х.н., профессору Сидоренко О.Д. за ценные консультации и советы при выполнении данной работы;

- также выражает признательность сотрудникам лаборатории газовой / хроматографии НИИ газа и нефти (г.Москва) м.н.с. Назаровой Е.С и др; заведующему кафедрой органической химии МСХА (г. Москва) д.х.н., профессору Князеву В.Н. за предоставленную возможность провести необходимые газохроматографические и спектрометрические исследования;

- сотрудникам лаборатории нефтяной микробиологии Института микробиологии РАН (г.Москва) к.б.н. Милехиной Е.И. и др. за методическую поддержку и ценные консультации;

- заведующему лабораторией химии нефти НИИ нефти им. Крылова (г. Москва), к.тех.н. Ошмяну К.Д. за предоставленные образцы нефти;

- сотруднику кафедры микологии МГУ им. Ломоносова к.б.н. Александровой А.В. за помощь и ценные консультации в определении видовой принадлежности микромицетов;

- также сотрудникам кафедры микробиологии МСХА им. К.А. Тимирязева.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Павликова, Татьяна Алексеевна

ВЫВОДЫ

1. Выделены микроорганизмы, усваивающие углеводороды нефти в качестве единственного источника углерода. Данные микроорганизмы изучены и идентифицированы: Pseudomonas putida SP-203, Rhodococcus ruber PS-02, Trichoderma citrinoviride VS-89, Metarrhizium anisopliae AF-78, Aspergillus carneus SU-TM-03. Являясь психроактивными, они могут быть использованы при очистке нефтезагрязненных почв в районах с непродолжительным теплым периодом.

2. Разработан оригинальный способ культивирования углеводородокисляющих микроорганизмов на компосте высокого нагрева в качестве органического субстрата. На основе выделенных штаммов микроорганизмов создан биопрепарат для борьбы с нефтезагрязнениями, на который оформляется патент Российской Федерации.

3. Результаты газохроматографического анализа и ИК-спектроскопии служат показателями изменения фракционного состава нефти при культивировании микроорганизмов на модифицированных питательных средах с добавлением нефти. Газохроматографический анализ подтверждают высокую углеводородокисляющую активность выделенной ассоциации (более 50% н-алканов за 10 дней культивирования).

4. Модифицирован и впервые использован метод Н.Г. Холодного при изучении динамики формирования структуры микробного ценоза, плотности обрастания и распределения доминирующих микроорганизмов в различных типах нефтезагрязненных почв.

5. Выделенные микроорганизмы-деструкторы, участвующие в коме-таболическом разложении сырой нефти, существенно снижают токсичность почв и способствуют не только прорастанию семян, но и росту тест-растений (кресс-салата и пшеницы).

6. Результаты эксперимента по очистке почв биопрепаратом показывают высокую активность микроорганизмов по отношению к углеводородам нефти (до 85% от начального содержания в почве). Разработанный биопрепарат может быть рекомендован как один из эффективных при очистке почв для ускоренной деструкции нефти и восстановления ее биологической активности.

7. Предложенная стратегия рекультивации нефтезагрязненных почв базируется на усилении биологической активности почв путем внесения ассоциации культур микроорганизмов-деструкторов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Павликова, Татьяна Алексеевна, 2004 год

1. Андресенко М.Я., Рунов В.И. Углеводородокисляющие бактерии и лучистые грибы, выделенные из нефтеносных почв Узбекистана, как продуценты биомассы и биологически активных веществ//Микробиологическая промышленность. — 1973. №1. — С. 23-27.

2. Аристовская Т.В. Микробиология подзолистых почв. М: Наука, 1965. —168 с.

3. Артемьева Т.Н., Гилязов М.Ю., Фильченкова В.И. и др. Экологический мониторинг почв, нарушенных при нефтедобыче и методы рекультивации. Казань: 1988. -С. 9-10.

4. Артемьева Т.И., Штина Э.А. Экологические последствия загрязнения почв нефтью// Бактериальный фильтр Земли: Тез. докл. семинара, 30-31 мая 1985 г.-Пермь, 1985.-Т.1.-С. 28-29.

5. Билай В.И., Коваль Э.З. Аспергиллы. — Киев: Наукова думка, 1988. — С. 175-176. \

6. Билай В.И., Коваль Э.З. Рост грибов на углеводородах нефти. — Киев: Наук. думка, 1980. -С.79-100.

7. Борзенков И.А., Ибатуллин Р.Р., Милехина Е.И., и др. Использование микроорганизмов при ликвидации нефтяных загрязнений почв //Интродукция микроорганизмов в окружающую среду. Тезисы докл. конф. 17-19 мая 1994.-С. 14-15.

8. Борзенков И.А., Милехина Е.И., Беляев С.С., Иванова М.В. Консорциуммикроорганизмов, используемый для очистки почвенных и солоновато-водных экосистем от загрязнения нефтепродуктами: Патент №2023686 РФ //Б.И. 1994. №22. С. 136.

9. Бусыгин Е.А. Влияние концентрации нефти на активную альгофлору, отражающую состояние почвы // Микроорганизмы в сельском хозяйстве. Тез. докл. 3 Всес. науч. конф., Москва, 23-25 декабря 1986. М.: МГУ. -1986.-С. 124-125.

10. Виноградский С.Н. Микробиология почвы. Проблемы и методы. М: Изд. АН СССР, 1952. - с. 115.

11. Глазовская М.А. Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. -М.: Наука, 1988. 254 с.

12. Глазовская М.А. Способность природной среды к самоочищению //Природа. 1979. - №3. - С. 71-79.

13. Глязов М.Ю. Изменение некоторых агрохимических свойств выщелоченного чернозема при загрязнении его нефтью //Агрохимия, 1980. — Т. 12. -С. 72-75.

14. Гузев B.C., Волде М.И., Куличевская И.С. и др. Влияние масляной кислоты на физиологическую активность углеводородокисляющих родококков //Микробиология. 2001.- Т. 70, №3. - С. 313-320.

15. Гузев B.C., Голышкин П.Н. Пролонгированная катаболитическая репрессия и проблемы интродукции микроорганизмов в почву //Микробиология.- 1994.- Т.66.- № 4.- С. 565-572.

16. Гузев B.C., Левин С.В., Звягинцев Д.Г. Диагностические признаки различных уровней загрязнения почвы нефтью //Почвоведение. 1998. -№1., С. 72-78.

17. Гусев М.В., Коронелли Т.В. Микробиологическое разрушение нефтяного загрязнения //Изв. АН СССР. 1981. - Сер. биол., №6. = С. 835-844.

18. Давыдова М.Н., Мухитова Ф.К., Ибатуллин P.P. Анаэробная трансформация нефти под действием экстрактов клеток Desulfovibrio desulfuricans //Микробиология. 1998.- Т.67, №2.- С.202-203.

19. Евдокимова Г. А., Месяц СП., Мозгова Н.П. Пути биодеградации нефти в водоемах высоких широт /Тез. докл. конф. «Интродукция микроорганизмов в окружающую среду» М.: ПНЦ РАН, 1994. - С. 33-34.

20. Звягинцев И.С., Поглазова М.Н., Готоева М.Т., Суровцева Э.Г. и др. Влияние солености среды на деструкцию нефтяных масел нокардие-формными бактериями //Миробиология. — 2001.-Т. 70, №6.- С. 759-754.

21. Зякун А.М., Кошелева И.А., Захарченко В.Н. и др. Использование отно13 12шений С /С для определения микробного окисления углеводородов //Микробиология. 2003.- Т.72, №5.- С. 666-671.

22. Иванова А.Е. Углеводородокисляющие и сульфатвосстанавливающие бактерии высокотемпературных нефтяных пластов /Автореф. дисс. канд. биол. наук. Москва, 1998.

23. Израэль Ю.А., Ровинский ФЛ. Комплексный фоновый мониторинг в СССР // Комплексный глобальный мониторинг состояния биосферы. Тр. III Междунар. симп., 14-19 окт. 1985. -Ташкент, 1986. С. 89-105.

24. Исмаилов Н.М. Биодеградация нефтяных углеводородов в почве, иноку-лированной дрожжами //Микробиология. 1985, Т. 54. - №5. - с. 835-841.

25. Исмаилов Н.М. Влияние нефтяного загрязнения на круговорот азота в почве //Микробиология, 1983. Т. 52. - №6. - С. 1003-1007.

26. Исмаилов Н.М. Микробиология и ферментативная активность нефтезагрязненных почв. Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. /Под ред. М.А. Глазовской. М.: Наука, 1988. - С. 42-56.

27. Исмаилов Н.М., Пиковский Ю.И. Биодинамика загрязненной нефтью почвы //Миграция загрязняющих веществ в почве и сопредельных средах. — Л., 1985.-С. 195-198.

28. Калачникова И.Г., Колесникова Н.М. Динамика микробных популяций в дерново-подзолистой почве при воздействии нефтяного загрязнения //Биодинам. Почв. Тез. докл. 3 Всес. Симп. Харку, 25-27 октября, 1988. -Таллин, 1988.- С.83.

29. Квасников Е.И., Клюшникова Т.М. Миьфоорганизмы — деструкторы нефти в водных бассейнах. — Киев: Наукова думка, 1981. -132 с.

30. Киреева Н.А. Микробиологические процессы в нефтезагрязненных почвах. Уфа: Изд-во БашГУ, 1995.- 171 с.

31. Киреева Н.А., Водопьянов В.В. Математическое моделирование биодеградации нефти в почве //Биотехнология. — 1996. №8. — С. 55-59.

32. Киреева Н.А., Водопьянова В.В., Новоселова Е.И. и др. Микробиологическая рекультивация нефтезагрязненных почв. — М.: ОАО «ВНИИОЭНГ», 2001. -3-39 с.

33. Киреева Н.А., Галимзянова Н.Ф. Влияние загрязнения почв нефтью и нефтепродуктами на численность и видовой состав микромицетов //Почвоведение. 1995, №2.- С. 211-216.

34. Киреева Н.А., Жданова Н.В., Горина Т.С. // Нефт. хоз-во. 1997.- №4.- С. 51-52.

35. Кожевин П.А. Микробные популяции в природе. М.: Изд-во МГУ, 1989, 175 с.

36. Комарова Т.И., Милько Е.С., Корнелли Т.В. Влияние серы на рост углеводородокисляющих бактерий разных родов //Микробиология. 2003.-Т.72, №2.- С.275-276.

37. Корнелии Т.В., Дермичева С.Г., Семененко М.Н. Родококки как природный сорбент углеводородов //Микробиология. — 1986.- Т.55, №4.- С. 683686.

38. Корнелли Т.В., Комарова Т.И., Поршнева О.В., Ткебучева Л.Ф. Внеклеточные метаболиты углеводородокисляющих бактерий как субстрат для развития сульфатредукции // Прикл. биохимия и микробиол. 2001. - Т. 37.-№5.-С. 549-553.

39. Корнелли Т.В.//Прикл. Биохим. и микробиол. 1996.- №6.- С. 579-585.

40. Куличевская И.С., Милехина Е.И., Борзенков И.А., и др. Окисление углеводородов нефти экстремально-галофильными архебактериями //Микробиология. 1991.- Т.60, №5.- С. 860-866.

41. Лысак JI.B., Лапыгина Е.В. Деструкция нефти монокультурами и природными ассоциациями почвенных бактерий //Вестник МГУ. Сер. 17, Почвоведение. - 1994. - №1. - С. 58-61.

42. Мавроди Д.В., Коваленко Н.П., Соколов С.Л. и др. Идентификация ключевых генов катаболизма нафталина в почвенной ДНК //Микробиология. 2003.- Т.72, №5.- С. 672-680.

43. Методы общей бактериологии /Под ред. Герхардта Ф. и др. М.: Мир, 1984. Т. 1.-С. 67-70.

44. Методы таксономического анализа // Методы почвенной микробиологии и биохимии / Под ред. Звягинцева Д.Г. М.: Изд-во МГУ, 1991.- С. 131-133.

45. Микроорганизмы и охрана почв /Под ред. Д.Г. Звягинцева.- М.: Изд-во МГУ, 1989.-С. 129-162.

46. Милехина Е.И., Сидоров Д.Г., Борзенков И.А. и др. Микробиологическая деструкция мазута в почве при использовании биопрепарата Деворойл //Прикл. биотехнология и микробиология. 1998. - Т. 34., №3. - С. 281286.

47. Мишустин Е.Н., Рунов Е.В. Успехи разработки приемов микробиологического диагностирования состояния почвы //Успехи современной микробиологии. Т. 44, вып. 2(5). - 1957. - С. 256-268.

48. Мукатанов А.Х., Ривкин П.Р. Влияние нефти на свойства почвы. Нефтяное хозяйство, 1980. - №4. - С. 53-54.

49. Назина Т.Н., Соколова Д.Ш., Григорян А.А. и др. Образование нефтевы-тесняющих соединений микроорганизмами из нефтяного месторождения Дацин (КНР) //Микробиология. 2003.- Т.72, №2.- С. 206-211.

50. Наплекова Н.Н. Анаэробное разложение целлюлозы микроорганизмами в почвах Зап. Сибири. — Новосибирск: Наука, 1974. — 249 с.

51. Определитель бактерий Берджи. В 2-х т.: Пер. с англ. / под ред. Дж. Хо-улта, Н. Крига, П. Снита, Дж. Стейли, С. Уилльямса М.: Мир, 1997. -432 с.

52. Пароменская JI.H., Гаранкина Н.Г., Моисеева И.Г. и др. Альгологический метод определения фитотоксичности почв //Почвоведение.- 2001.- №6.- С. 708-712.

53. Петров А.А. Углеводороды нефти. -М: Наука, 1984. -С.150-220.

54. Петухов В.Н., Фомченков В.Н.,Чугунов В.А. и др. Биотестирование почвы и воды, загрязненных нефтью и нефтепродуктами с помощью растений //Прикл. биохимия и микробиология. 2000. — Т.36, №6. — С. 652-655.

55. Пиковский Ю.И. , Калачникова И.Г., Оглоблина А.И. и др. Экспериментальные условия трансформации нефти в почвах // Миграция загрязняющих веществ в почвах и сопредельных средах. — JI. — 1985.- С. 191-195.

56. Пиковский Ю.И. Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М.: Наука, 1988.- С. 7-22

57. Пиковский Ю.И. Природные и техногенные потоки углеводородов в окружающей среде,- М: Изд-во МГУ, 1993.- 208 с.

58. Плотникова Е.Г., Алтынцева О.В., Комелева И.А. и др. Бактерии — деструкторы полициклических ароматических углеводородов, выделенные из почв и донных отложений района солеразработок //Микробиология. — 2001, Т. 70.-№1.-С. 61-69.

59. Поздеев O.K. Медицинская микробиология /Под ред. Акад. РАМН В.И. Покровского. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2001. - С.267-272.

60. Пономарева JI.B., Крунчак В.Т., Торгованова В.А. и др. Биоремидиация нефтезагрязненной почвы с использованием биопрепарата «Биосэт» и пе-роксида кальция //Биотехнология.- 1998№ 1С. 79-84.

61. Розанова Е.П., Беляев С.С., Иванов М.В. и др. Микробиологические методы повышения нефтеотдачи пластов. М.: ВНИИОЭНГ, 1987.- 44 с.

62. Рыбак В.К., Овчарова Е.П., Коваль Э.З. Микрофлора почвы, загрязненной нефтью // Микробиол. журнал, 1984. Т. 46. - №4. - С. 29-32.

63. Самосова С.М., Фильченкова В.И., Усачева Г.М. и др. К вопросу о роли микроорганизмов в разложении нефтяного загрязнения /Мат. Симпозиума «Микроорганизмы, как компонент биогеоценоза» / Под ред. Мишустина Е.Н. Алма-Ата.: Каз. ГУ, 1982. - С. 54-55.

64. Саттон Д., Фотергилл А., Ринальди М. Определитель патогенных и условно-патогенных грибов /Пер. с англ.- М.: Мир, 2001. 238 с.

65. Седых В.Н., Игнатьев Л.А., Семенюк М.В. Реакция растений на отходы бурения нефтяных скважин. Всхожесть семян и выживание сеянцев. Сообщение 1 //Сибирский экологический журнал. Новосибирск: Изд-во СО РАН- 1998.- Т.5, №1.- С.34-38.

66. Семенов А.Д., Страдомская А.Г., Павленко Д.Ф. ИК- спектрометрические методы определения нефтепродуктов в поверхностных водах. Сб. «Методы определения нефтепродуктов в поверхностных водах», JL, Гидроме-теоиздат, 1976, С. 47-55.

67. Сидоренко О.Д., Павликова Т.А. Деградация нефти ассоциацией углеводородокисляющих микроорганизмов //Доклады ТСХА. Вып. 275. М.: Изд-во МСХА, 2003. С. 265-272.

68. Сидоров Д.Т., Борзенков И.А., Иббатуллин P.P. и др. Полевой эксперимент по очистке почвы от нефтяного загрязнения с использованием углеводородокисляющих микроорганизмов //Прикл. биохимия и микробиология. 1997.- Т. 33, №5.- С. 497-502.

69. Скрябин Г.К., Головлева JI.A. Использование микроорганизмов в органическом синтезе. — М.:Наука, 1976. 235 с.

70. Славина Т.П., Середина В.П. и др. Биологическое состояние почв при загрязнении нефтью// Проблема экологии Томской обл. — Томск, 1992. — Т.2. -С. 66-67.

71. Смирнов В.В., Киприанова Е.А. Бактерии рода Pseudomonas Киев: Нау-кова думка, 1990. - 246 с.

72. Солнцева Н.П., Пиковский Ю.И., Никифорова Е.М., и др. Проблемы загрязнения почв нефтью и нефтепродуктами: геохимия, экология, рекультивация //Докл. симпоз. VII делегатск. съезда Всес. общества почвоведов. Ташкент. 1985. - 4.6. - С. 246-254.

73. Спицина Д.Н. Сравнительное изучение физиологических особенностей активных штаммов углеводородокисляющих бактерий /Автореф. дис. канд. биол. наук.- Москва, 1982.

74. Станкевич Д.С. Использование углеводородокисляющей бактерии Pseudomonas для биоремидиации нефтезагрязненных почв /Автореф. дис. канд. биол. наук. -Москва, 2002.

75. Суржко Л.Ф., Финкелыитейн З.И., Баскунов В.П. и др. Утилизация нефти в почве и воде микробными клетками //Микробиология — 1995, Т. 64. -№3.-С. 393-398.

76. Суровцева Э.Т., Ивойлов B.C., Беляев С.С. Разрушение ароматической фракции нефти ассоциацией грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов //Микробиология., 1997ю Т. 66, №1. - С. 78-83.

77. Таранова Л.А., Грачевский В.В., Делеменчук Н.В. и др. Бактериальная деструкция катионных поверхностно активных веществ //Биотехнология. -1996.-№9.-С. 32-37.

78. Таранова Л.А., Жданова Е.Б. Влияние бактерий и дрожжей на биохимическое окисление нефти //Нефть и газ Зап. Сибири. Тез. докл. Междунар. аучно-техн. конф. 21-23 мая, Тюмень. 1996. - с.

79. Теппер Е.З. и др. Практикум по микробиологии. М.: Колос, 1979.- С. 164-165.

80. Факторы и механизмы регуляции развития бактериальных популяций. Сб. научн. тр., Свердловск, УрО АН СССР., 1990.- С. 74-100.

81. Финкельштейн З.И., Баскунов Б.П., Головлева Е.А. и др. Превращение флуорена бактериями рода Rhodococcus //Микробиология. -2003.- Т.72, №6.- С. 746-752.

82. Хазиев Ф.Х., Фатхиев Ф.Ф. Изменение биохимических процессов в почвах при нефтяном загрязнении; и активация разложения нефти //Агрохимия, 1981. —Т. 1. -№10.— С. 102-111.

83. Халимов Э.М., Левин С.В., Гузев B.C. Экологические и микробиологические аспекты повреждающего действия нефти на свойства почвы // Вестник Московского Университета, серия 17 «Почвоведение», 1996. — №2. — С. 59-64.

84. Хомякова Д.В. Состав углеводородокисляющих микроорганизмов нефтезагрязненных почв Усинского района Республики Коми / Автореф. дис. канд. биол. наук. — Москва, 2003.

85. Чугунов В.А., Ермоленко З.М., Жиглецова С.Н. и др. Создание и применение жидкого биопрепарата на основе ассоциации нефтеокисляющих бактерий //Прикладная биохимия и микробиология. 2000.- Т. 36.- №6.- С. 666-671.

86. Шлегель Г. Общая микробиология. М.: Наука, 1988. - С. 283-301.

87. Штина Э.А. и др. Особенности почвенной альгофлоры в условиях техногенного загрязнения // Почвоведение, 1985. №10. - С. 97-106.

88. Щеблыкин И.И., Битеева М.Б., Бирюков В.В., Янкевич М.И. Биовосстановление загрязненной нефтью почвы при ликвидации последствий аварии на магистральном нефтепроводе Лисичанск-Тихорецк //Охрана окружающей среды. 1995. - С. 19-28.

89. Эрнестова Л.С. Способ анализа нефтепродуктов в сыпучих материалах. Авт. Свид. №673914 от 25.07.79.,бюл. Изобр. №26.

90. Ягафарова Г.Г., Гамаулина Э.М., Барахнина В.Б., Ягафаров И.Р. и др. Новый нефтеокисляющий микромицет Fusarium spp Л Прикладная биотехнология и микробиология. 2001. - Т. 37. - №1. — С. 77-79.

91. Ягафарова Г.Г., Скворцова Н.Н. Новый нефтеокисляющий штамм бактерий Rhodococcus erytropolis 1339 D //Прикладн. микробиол. и биохимия. 1996, Т. 32. - №2. - С. 224-227.

92. Якушева О.И., Наумова Р.П. Биотехнология очистки сточных вод нефтехимического комплекса //Проблемы био- и медэкологии Респ. Татарстан. Казань: Экоцентр, 1998. Вып. 1., С. 168-188.

93. Якушева О.И., Никонорова В.Н., Кияненко Г.В., и др. Особенности химического состава нефтешлама — отхода нефтехимического производства //Матер. VI междунар. конф. «Нефтехимия —2002». Нижнекамск,- 2002.-С. 271-276.

94. Amadi et al. A., Dickson A. A., Maate G.O. Remediation of oil polluted soils. J. Organic and inorganic nutrient supplements on the performans of Maize // Water, Air and Soil Pollut. 1993. - V.66, №1-2. - P. 59-76.

95. Atlas R.M. Biodegradation of hydrocarbons in the environment //Environmental biotechnology. 1988/ - ed. G.S. Omens Plenum. Press. - №1.- P. 211222.

96. Benka-Coker M.O., Ekundayo J. A. Application of evaluating the ability of microbes isolated from anoil spill to degrade oil // Environ. Monit. And assess -1997.-45.3-Н/259-272.

97. Bertrand J.C., Caumette P., Mille G., Gilewiez M., Denis M. Anaerobic biodegradation of hydrocarbons //Sci. Progr. (cr. Brit) -1989/ V.3., №2. - P. 6067.

98. Bliss P. J., Barnes D. Design basis for carbonaceous oxidation and nitrification in the activated sludge process // Process biochem. 1979. V. 14. - N.12. -P. 22-23.

99. Bossert J., Bartha R. The of petroleum in soil ecosystems / Petroleum Microbiology /et by R. M. Atlas)., -New York: McMillan Co, 1984. P. 434-476.

100. Brown Levis R. Oil - degrading microorganisms // Chem. Eng. Progr. -1987. - 83. -№10. - P. 35-40.

101. Cooneu J.J., Summers R.J. Hydrocarbon usting microorganisms in three fresh water ecosystem // Prog. Thind. Inter. Biodegradation Sump. - Appl. Sci. -London.- 1976.-P. 141-156.

102. Domsch K.H., Grams W., Anderson Т. H. Compendium of Soil Fungi.— London: Academic Press, 1980 890 p.

103. Fuhs G. Разложение углеводородов микроорганизмами // Микробиологический синтез. — 1965. №2. — Р. 110.

104. Gary J. Samuel's, Orlando Petini, Katrin Kuhes u. a. The Hypocrea schweinitzii complex and Trichoderma Sect. Longibrachiatum //Studies in My-colody.-2000, № 41.-P.50-52.

105. Gudin C., Syratt W.//Environ. Pollut.- 1975.- Vol. 8, № 2.-P.107-112.

106. Heimhard H.-J.//Umweltmagazin.- 1987.- Vol. 16, № 3.-P.18-20.

107. Klein J. Mikrobiologiche methoden zur Sanierung mineralolkontaminierten Boden // Mineralol. 1992. - V. 40. - B. 12-15.

108. McGill W.B. Soil restoration following oil spills //J. Canad. Petrol. Tech-nol.- 1977. V.16, #2. -p. 60-67.

109. Mitchell R., Fogel S., Chet H. Bacterial chemoreception: an important ecological phenomenon inhibited by hydrocarbons // Water Res. 1972. Vol. 6. — N.10.-P. 1137-1142.

110. Munoz F.M., Demmler G.J., Trevis W.R., et al. Trichoderma longibrachiatum infection in a pediatric patient with aplastic anemia / J. Clin. Microbiol. -№35.-P. 499-503.

111. Odu C.T.I. Oil degradation and microbiological change in Soils deliberately contaminated with petroleum hydrocarbons //Jnst. Petrol., 1977.- N.5.- P. 1-11.

112. Reymond R. L. // Develop. Industr. Microbiol. 1961. V. 2., P. 23-32

113. Rifai M.A. A revision of the genus Trichoderma /Mycol., Pap. 116. P. 155.

114. Song H.G., Bartha R. Effects of jet fuel spills on the microbial community of soil //Fhhl. Environ. Microbial. 1990. - №5. - P. 649-651.

115. Staff C.P. Mutant bacteria decontaminates spilled crude oil Site // Chem. Process. (USA). 1982. - V. 45, №14. - P. 96.

116. Stetzenbach L.D., Story S.P., Haldeman D.J., et al. . Hydrocarbon degrading bacteria isolated from hydrocarbon contaminated Sites at Johnson Atoll //

117. Abstr. 37 х" Annu. Meet. Ariz. Nev. Acad. Sci., Las Vegas. - 1993. - P. 29.

118. Tullock M. The genus Metarrhizium. /Trans. Br. Mycol., Soc. 66. P. 407411.

119. Walker J.D. // Mar. Technol. Soc. J.- 1985. Vol. 88, № 71 l.-P .134-151.