Взаимодействие поверхностных рецепторов клетки с различными иммобилизованными и свободными лигандами определяет структуру актинового цитоскелета тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат биологических наук Арэ, Александра Феликсовна

• Арэ, Александра Феликсовна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Арэ, Александра Феликсовна

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Организация актинового цитоскелета в культивируемых клетках.

2.1.1. Основные типы актиновых структур.

2.1.2. Роль актин-связывающих белков в формировании актиновых структур.

2.1.3. Формирование актиновых структур in vivo в процессе распластывания клетки на субстрате.

2.2. Реорганизация актинового цитоскелета под действием внешних факторов.

2.3. Малые ГТФазы Rho, Rac и Cdc42 и их роль в регуляции структуры актинового цитоскелета.

2.4. Комплексы адгезии. Связь актиновых структур с сигнальными молекулами.

2.5. Неопластическая трансформация как фактор, вызывающий реорганизацию актинового цитоскелета.

2.6. Транскрипционный фактор NF-кВ. Участие в процессах адгезии.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.1. Клетки и клеточные культуры.

3.2. Материалы.

3.3. Подготовка субстратов.

3.4. Изучение адгезии клеток на различных субстратах.

3.5. Изучение влияния различных иммобилизованных лигандов на структуру актинового цитоскелета.

3.6. Конъюгация моноклональных антител с флуорохромом.

3.7. Иммунофлуоресценция.

3.8. Приготовление цитозоля фибробластов и клеток линии А431.

3.9. Аффинная хроматография на колонках с иммобилизованным F-актином.

3.10. Электрофорез и идентификация белков.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ

4.1. Различия в морфологии и организации актинового цитоскелета в клетках А-431, распластанных на разных лигандах.

4.1.1. Адгезия клеток А-431 на субстратах, покрытых разными лигандами.

4.1.2. Специфичность адгезии клеток А-431 на субстрате, покрытом антителами к рецептору ЭФР.

4.1.3. Различия в морфологии и организации актинового цитоскелета в клетках А-431, распластанных на разных лигандах.

4.2. Различия в морфологии и организации актинового цитоскелета в нормальных, иммортализованных и трансформированных фибробластах, распластанных на разных лигандах.

4.3. Различия в морфологии и организации актинового цитоскелета в целомоцитах полихеты Arenicola marina, распластанных на разных лигандах.

4.4. Распределение F-актина в клетках А-431, находящихся на ранних стадиях распластывания на разных субстратах.

4.5. Распределение актин-связывающих белков в клетках А-431, распластанных на разных иммобилизованных лигандах.

4.5.1. Структура актинового цитоскелета в клетках А-431, распластанных на иммобилизованном конканавалине А.

4.5.2. Распределение винкулина, талина, а-актинина и спектрина в клетках А-431, распластанных на разных субстратах.

4.6. Влияние активаторов малых ГТФаз на структуру актинового цитоскелета.

4.6.1. Влияние культивирования в бессывороточной среде на структуру актинового цитоскелета в клетках А-431 и фибробластах крысы.

4.6.2. Ранний ответ клеток на действие ЭФР, LPA и ВК.

4.6.3. Последовательные стадии реорганизации системы микрофиламентов под действием ЭФР, LPA и ВК в клетках, распластанных на разных субстратах.

4.6.4. Зависимость распределение винкулина от действия LPA и ВК.

4.6.5. Распределение Р-актина в клетках А-431 на разных стадиях распластывания и его перераспределение под действием ЭФР, LP А и ВК.

4.7. Зависимость распределения транскрипционного фактора NF-кВ в цитоплазме нормальных и трансформированных фибробластов крысы от состояния актинового цитоскелета.

4.7.1. Распределение p65/RelA в цитоплазме нормальных фибробластов.

4.7.2. Перераспределение p65/RelA в ElA+cHa-Ras-трансформированных фибробластах при распластывании их на фибронектине.

4.7.3. Разборка актинового цитоскелета под действием цитохалазина D сопровождается перераспределением p65/RelA в цитоплазме.

4.7.4. p65/RelA концентрируется у ведущего края ламеллы в ElA+cHa-Ras-трансформированных фибробластах, распластанных на ламинине 2/4.

4.7.5. Распределение p65/RelA в клетках А-431.

4.7.6. Взаимодействие p65/RelA с фибриллярным актином in vitro.

5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

6. ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Взаимодействие поверхностных рецепторов клетки с различными иммобилизованными и свободными лигандами определяет структуру актинового цитоскелета»

Одной из центральных проблем клеточной биологии является изучение механизмов передачи сигнала с поверхности клетки в ядро. Источники таких сигналов - ростовые факторы, гормоны и элементы внеклеточного матрикса (ВКМ) - взаимодействуют с поверхностными рецепторами (на основании чего их объединяют под общим названием «лиганды») и регулируют клеточные процессы, включая пролиферацию, дифференцировку, подвижность, эндо- и экзоцитоз и другие. Образование лиганд/рецепторных комплексов активирует каскады сигнальных молекул и вызывает реорганизацию цитоскелета (Sastry and Horwitz, 1993; Keely et al., 1998). Взаимоотношение между этими двумя процессами до настоящего момента остается неясным. В то же время, имеется ряд данных, указывающих на существование связи между реорганизацией цитоскелета и проведением сигнала. В частности, показано, что разрушение цитоскелета прекращает или нарушает клеточный ответ (Puck, Krystosek, 1992). Ряд активированных сигнальных молекул непосредственно связывается с цитоскелетом (Yamada, Geiger, 1997). Белки цитоскелета и сигнальные молекулы имеют общие домены, предназначенные для белок-белковых взаимодействий (Mayer, Baltimore, 1993). Эти взаимодействия могут изменять конформацию белков цитоскелета и приводить к его пространственной реорганизации. Можно предполагать, что реорганизация является специфической реакцией цитоскелета на сигналы, поступающие в клетку от разных лиганд/рецепторных комплексов. К настоящему времени в литературе накоплено много данных, свидетельствующих о том, что действие разных лигандов на клетку вызывает перестройку актинового цитоскелета. Однако, все эти данные были получены на разных клеточных линиях , и в разных условиях, что не позволяет выявить какие-либо закономерности в реакции актинового цитоскелета. В частности, до настоящего времени остается неясным, сопровождается ли образование конкретного лиганд-рецепторного комплекса специфическим изменением структуры актинового цитоскелета.

Трудности изучения данной проблемы обусловлены высокой естественной динамичностью актинового цитоскелета, присущей ему способностью перестраиваться в ответ на разнообразные воздействия. В частности, неопластическая трансформация приводит к значительным изменениям в состоянии актиновых филаментов (Bershadsky, Vasiliev, 1988). В последние годы важную роль в регуляции структуры актинового цитоскелета отводят членам Rho-семейства малых ГТФаз (Hall, 1994; Machesky and Hall, 1996), которые сами являются онкогенами или критическими участниками Ras-зависимых сигнальных путей, ведущих к трансформации (Zohn, 1998). Кроме того, поскольку на клетки как в составе ткани, так и в условиях культуры, одновременно действует множество разнообразных лигандов, трудно вычленить результат действия только одного из них. В связи с этим возникает необходимость использования упрощенной и, в то же время, приближенной к естественным условиям животного организма модели, позволяющей вести наблюдение за результатом конкретного лиганд/рецепторного взаимодействия. В качестве такой модели может быть предложен естественный процесс адгезии клетки на субстрате, но в условиях, когда клетка прикрепляется и распластывается только на определенном иммобилизованном лиганде. Этот подход дает возможность изучать реакцию системы микрофиламентов на активацию конкретных поверхностных рецепторов клетки, в том числе рецепторов, в норме не участвующих в адгезии. К таковым следует отнести рецепторы инсулина ,тромбина, эпидермального, тромбоцитарного, фибробластного и других факторов роста, для которых показано взаимодействие с системой микрофиламентов (Carlsson et al., 1979, Mellstrom et al., 1983, Bochus and Stiles, 1984, Paves et al, 1990, Vouret-Craviari et al., 1998). С помощью такого подхода представлялось возможным установить степень зависимости организации актинового цитоскелета от действия на клетку различных иммобилизованных и свободных лигандов и выяснить, в какой степени распределение в клетке некоторых сигнальных молекул может быть связано с преобразованием актиновых структур.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1 Организация актинового цитоскелета в культивируемых клетках

Цитоскелет представляет собой сеть микрофиламентов, микротрубочек и промежуточных филаментов, образованных полимерами трех основных белков: актина, тубулина и одного из нескольких видов белков промежуточных филаментов, соответственно. В настоящей работе рассматриваются только преобразования системы актиновых филаментов.

Состояние цитоскелета клеток, находящихся в составе ткани многоклеточного организма, зависит от сложной комбинации биологически активных молекул, взаимодействующих с поверхностными рецепторами. В культивируемых клетках цитоскелет формируется в процессе распластывания на субстрате и может зависеть от природы субстрата, от состава питательной среды, плотности культуры и факторов сыворотки крови. Таким образом, хотя клетки в культуре представляют собой упрощенную модель их естественного состояния в животном организме, цитоскелет этих клеток также находится под воздействием сложного комплекса факторов и постоянно изменяется. Эту динамичность необходимо иметь в виду при оценке влияния биологически активных молекул на структуру цитоскелета и при сравнительном анализе изменений в его структуре в различных типах клеток.

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Арэ, Александра Феликсовна

6. ВЫВОДЫ

1. Установлено, что пространственная организация актинового цитоскелета, формирующегося в процессе распластывания клеток А-431 на иммобилизованных фибронектине, ламинине или антителах к эпидермальному фактору роста, специфична для каждого иммобилизованного лиганда.

2. Характерные особенности пространственной организации актинового цитоскелета, формирующейся под влиянием различных имобилизованных лигандов, в клетках линии А-431, в нормальных, иммсртлизованных и трансформированных фибробластах крысы, а также в целомоцитах полихеты Arenicola marina определяются типом лиганда, а не происхождением клеток.

3. Свободные лиганды, активирующие малые ГТФазы Rho, Rac и Cdc42, при взаимодействии с клетками, распластанными на различных иммобилизованных лигандах, вызывают реорганизацию актинового цитоскелета, которая, независимо от типа свободного лиганда, начинается с разборки существующих актиновых структур и заканчивается восстановлением системы микрофиламентов. Характер организации восстановленного актинового цитоскелета является результатом совместного действия иммобилизованного и свободного лиганда.

4. Впервые показано, что субъединица p65/RelA транскрипционного фактора NF-кВ взаимодействует с фибриллярным актином и солокализуется с актин-содержащими структурами в цитоплазме нормальных фибробластов. Восстановление структуры актинового цитоскелета в трансформированных фибробластах под действием иммобилизованных лигандов сопровождается восстановлением распределения p65/RelA в цитоплазме, характерного для нормальных клеток.

5. Характер распределения NF-кВ в цитоплазме трансформированных фибробластов, распластанных на субстратах, покрытых разными лигандами, зависит от типа иммобилизованного лиганда.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Арэ, Александра Феликсовна, 2000 год

1. Арэ А.Ф., Пинаев Т.П. (1996). Особенности пространственной организации актинового цитоскелета и распределения актин-связывающих белков в клетках А-431, распластанных на разных субстратах. Цитология. 38(2): 178.

2. Арэ А.Ф., Поспелова Т.В., Пинаев, Т.П. (1999). Распределение транскрипционного фактора NF-кВ в нормальных и трансформированных фибробластах крысы, распластанных на разных субстратах. Цитология. 41(3/4): 258.

3. Галкин В.Э., Туроверова Л.В., Константинова И.М., Пинаев Г.П. (1998). Взаимодействие просом с фибриллярным актином. Цитология. 40(2/3): 618-626.

4. Дариева З.А., Поспелов В.А., Поспелова Т.В. (1999). Транскрипционый фактор NF-KB/RelA конститутивно активирован и локализован в ядре клеток трансформантов ElA+cHa-ras. Цитология. 41(7): 622-627.

5. Исаева В.В., Коренбаум Е.С. (1989). Защитные функции целомоцитов и иммунитет иглокожих. Биология моря. 6: 3-14.

6. Никольский Н.Н., Соркин А.Д., Сорокин А.Б. (1987). Эпидермальный фактор роста. Наука, Ленинград, 200с.

7. Одинцова Н.А., Нестеров A.M., Корчагина Д.А. (1992). Ростовой фактор из тканей морского моллюска Mytilus edulis. Цитология. 34(2): 94-100.

8. Ровенский Ю.А. (1998). Клеточные и молекулярные механизмы опухолевой инвазии. Биохимия. 63(9): 1204-1221.

9. Сорокин А.Б., Нестеров A.M., Соркин А.Д., Игнатова Т.Н., Галактионов К.И., Кудрявцева Н.В. (1989). Получение и характеристика моноклональных антител к наружному домену рецептора ЭФР эпидермоидной карциномы человека А431. Цитология. 31(5): 549-555.

10. Хребтукова И.А., Никольская А.Н., Соркин А.Д., Сорокин А.Б., Пинаев Т.П. (1989). Кэпинг рецепторов к эпидермальному фактору роста и участие цитоскелета в этом процессе у клеток А431. Цитология. 31(10): 1211-1220.

11. Aepfelbacher, М. (1995). ADP-ribosylation of Rho enchances adhesion of U937 cells to fibronectin via the alpha 5 beta 1 integrin receptor. FEBS Lett. 363: 78-80.

12. Allen, E.W., Jones, G.E., Pollard, J.W, Ridley, A.J. (1997). Rho, Rac and Cdc42 regulate actin organization and cell adhesion in macrophages. J. Cell Sci. 110:707-720.

13. Amano, M., Mukai, H., Ono, Y., Chihara, K., Matsui, T. (1996). Identification of a putative target for Rho as the serine-threonine kinase protein kinase N. Science. 271: 648-650.

14. Are, A., Pinaev, G., Lindberg, U. (1994). The EGF effect on actin microfilaments organization in A431 cells attached to substrates coated with various ligands. Abst. of 41-th Int. Congress of the European Tissue Culture Soc., Verona, Italy, p.82.

15. Are, A., Pinaev, G., Lindberg, U. (1995). The rapid actin cytoskeletonreorganization induced by EGF is different for A431 cells spread onthvarious substrates. Abstr. of 10 European Cytoskeletal Forum, Stockholm, Sweden, p. 15.

16. Are, A.F.,Galkin, V.E., Pospelova, T.V., Pinaev, G.P. (2000). The p65/RelA subunit of NF-кВ interacts with actin-containing structures. Exp. Cell Res. In press.

17. Ash, J.F., Louvard, D., Singer, S.J. (1977). Antibody-induced linkages of plasma membrane proteins to intracellular actomyosin-containing filaments in cultured fibroblasts. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 74: 5584-5588.

18. Aspenstrom, P., Lindberg, U., Hall, A. (1996). Two GTPases, Cdc42 and Rac, bind directly to a protein implicated in the immunodeficiency disorder Wiskott-Aldrich syndrome. Curr. Biol. 6: 70-75.

19. Ayalon, O., Geiger, B. (1997). Cyclic changes in the organization of cell adhesions and the associated cytoskeleton, induced by stimulation of tyrosine phosphorilation in bovine aortic endothelial cells. J. Cell Sci. 110: 547-556.

20. Azuma, Т., Witke, W., Stossel, T.P., Hartwig, J.H., Kwiatkowski, DJ. (1998). Gelsolin is downstream effector of rac for fibroblast motility. EMBO J.17: 1362-1370.

21. Baeuerle, P.A., Baltimore, D. (1988). Activation of DNA-binding activity in an apparently cytoplasmic precursor of the NF-kappa В transcription factor. Cell. 53:211-217.

22. Baldwin, A.S. (1996). The NF-kappa В and I kappa В proteins: new discoveries and insights. Annu. Rev. Immunol. 14: 649-683.

23. Bartles, J.R., Wierda, A., Zheng, L. (1996). Identification and characterization of espin, an actin-binding protein localized to the F-actin-rich junctional plaques of Sertoli cell ectoplasmic specializations. J. Cell Sci. 109: 1229-1239.

24. Bashour, A.-M., Fullerton, A.T., Hart, M.J., Bloom, G.S. (1997). IQGAP1, a Rac- and Cdc42-binding protein, directly binds and cross-links microfilaments. J. Cell Biol. 137: 1555-1566.

25. Bayley, S.T., Mymryk, J.S. (1994). Adenovirus E1A protein and transformation. Int. J. Oncol. 5: 425-444.

26. Bearer, E.L. (1991). Direct observation of actin filament severing by gelsolin and binding by gCap39 and CapZ. J. Cell Biol. 115: 1629-1638.

27. Behrens, J., Von, K.J., Kuhl, M., Bruhn,L., Wedlich, R., Grosschedl, R., Birchmeier, W. (1996). Functional interaction of beta-catenin with the transcription factor LEF-1. Nature. 382: 638-642.

28. Bennett, V., Gilligan, D.M. (1993). The spectrin-based membrane skeleton and micron-scale organization of the plasma membrane. Annu. Rev. Cell Biol. 9: 27-66.

29. Benoliel, A.-M., Kahn-Perles, В., Imbert, J., Verrando, P. (1997). Insulin stimulates haptotactic migration of human epidermal keratinocytes through activation of NF-kappa В transcription factor. I. Cell Sci. 110: 2089-2097.

30. Bershadsky, A.D., Tint, I.S., Neyfakh, A.A., Vasiliev, J.M. (1985). Focal contacts of normal and RSV-transformed quail cells. Exp. Cell Res. 158: 433-444.

31. Bershadsky, A.D., Vasiliev, I.M. (1988). Cytoskeleton. New York: Plenum Press. 298.

32. Bockus, В J., Stiles, C.D. (1984). Regulation of cytoskeletal architecture by platelet-derived growth factor, insulin and epidermal growth factor. Exp. Cell Res. 153: 186-197.

33. Boonstra J, Rijken P, Humbel B, Cremers F, Verkleij A, van Bergen en Henegouwen P. (1995). The epidermal growth factor. Cell Biol. Internat. 19: 413-430.

34. Bourguignon, L.Y.W., Bourguignon, G.J. (1984). Capping and the cytoskeleton. Int. Rev. Cyt. 87: 195-224.

35. Bradford, M.M. (1976). A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal. Biochem. 72: 248-254.

36. Bretscher, A. (1989). Rapid phosphorylation and reorganization of ezrin and spectrin accompany morphological changes induced in А-431 cells by epidermal growth factor. J. Cell Biol. 108: 921-930.

37. Bretcher, M.S. (1992). Cells can use their transferrin receptors for locomotion. EMBO J. 11:383-389.

38. Bretscher, M.S., Aguado-Velasco, C. (1998). EGF induces recycling membrane to form ruffles. Curr. Biol. 8: 721-724.

39. Brown, E.J. (1997). Adhesive interactions in the immune system. Trends Cell Biol. 7:285-295.

40. Burbelo, P.D., Drechsel, D., Hall, A. (1995). A conserved binding motif defines numerous candidate target proteins for both Cdc42 and Rac GTPases. J. Biol. Chem. 270: 29071-29074.

41. Burridge, K., Turner, C.E., Romer, L.H. (1992). Tyrosine phosphorylation of paxillin and ppl25FAK accompanies cell adhesion to extracellular matrix: a role in cytoskeletal assembly. J. Cell Biol. 119: 893-903.

42. Cantarero, L.A., Butler J.E., Osborne J.W. (1980). The adsorptive characteristics of proteins for polystyrene and their significance in solid-phase immunoassays. Anal. Biochem. 105: 375-382.

43. Carlsson, L., Markey, F., Blikstad, I., Persson, Т., Lindberg, U. (1979). Reorganization of actin in platelets stimulated by trombin as measured de the Dnase I inhibition assay. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 76: 6376-6380.

44. Carlsson, L., Nystrom, L.E., Lindberg, U., Kannan, K.K., Cid-Dresdner, H., Lovgren, S. (1976). Crystallization of a non-muscle actin. J. Mol. Biol. 105: 353-366.

45. Chan, A.Y., Raft, S., Bailly, M., Wyckoff, J.B., Segall, J.E., Condeelis, J.S. (1998). EGF stimulates an increase in actin nucleation and filament number at the leading edge of the lamellipod in mammary adenocarcinoma cells. J. Cell Sci. Ill: 199-211.

46. Chen, Q., Kinch, M.S., Lin, Т.Н., Burridge, K., Juliano, R.L. (1994) Integrin-mediated cell adhesion activates mitogen-activated protein kinases. J. Biol. Chem. 269: 26602-26605.

47. Chinkers, M., McKanna, J.A., Cohen, S. (1979). Rapid induction of morphological changes in human carcinoma cells A-431 by epidermal growth factor. J. Cell Biol. 83:260-265.

48. Chinkers, M., McKanna, J.A., Cohen, S. (1981). Rapid rounding of human epidermoid carcinoma cells А-431 induced by epidermal growth factor. J. Cell Biol. 88:422-429.

49. Chrzanowska-Wodnicka, M., Burridge, K. (1996). Rho-stimulated contractility drives the formation of stress fibers and focal adhesion. J. Cell Biol. 133: 1403-1415.

50. Coso, O.A., Chiariello, M., Yu, J.C., Teramoto, H., Crespo, P., Xu, N., Miki, Т., Gutkind, J.S. (1995). The small GTP-binding proteins Racl and Cdc42Hs regulate the activity of the JNK/SAPK signaling pathway. Cell. 81:1137-1146.

51. Craig, S.W., Johnson, R.P. (1996) Assembly of focal adhesion: progress, paradigms, and portents. Curr. Opin. Cell Biol. 8, 74-85.

52. Cramer, L.P., Siebert, M., Mitchison, T.J. (1997). J. Cell Biol. 136: 12871305.

53. Crepieux, P., Kwon, H., Leclerc, N., Spencer, W., Richard, S., Hiscott, J. (1997). I kappa В alpha physically interacts with a sytoskeleton-associated protein through its signal response domain. Mol. Cell Biol. 17: 7375-7385.

54. Dartsch, P.C., Ritter, M., Haussinger, D., Lang, F. (1994). Cytoskeletal reorganization in NIH 3T3 fibroblasts expressing the ras oncogen. Eur. J. Cell Biol. 63: 316-325.

55. Dillner L, Dickerson K, Manthorpe M, Ruoslahti E, Engvall E. (1988). The neurite-promoting domain of human laminin promotes attachment and induces characteristic morphology in non-neuronal cells. Exp. Cell Res. 177: 186-198.

56. Dogic, D., Rousselle, P., Aumailley, M. (1998). Cell adhesion to laminin 1 or 5 induces isoform-specific clustering of integrins and other focal adhesion components. J. Cell Sci. Ill: 793-802.

57. Dubreuil, R.R. (1991). Structure and evolution of the actin crosslinking proteins. BioEssays. 13: 219-226.

58. Eck, S.L., Perkins, N.D., Carr, D.P., Nabel, G.J. (1993). Inhibition of phorbol ester-induced cellular adhesion by copetitive binding of NF-kappa В in vivo. Mol. Cell Biol. 13: 6530-6536.

59. Engel, J. (1989). EGF-like domeins in extracellular proteins lokalized signals for growth and differentiation. FEBS Lett. 251: 1-7.

60. Evans, M.D., Steele, J.G. (1997). Multiple attachment mechanisms of corneal epithelial cells to a polymer cells can attach in the absence of exogenous adhesion proteins through a mechanism that requires microtubules. Exp.CellRes. 233: 88-98.

61. Ferletta, M., Ekblom, P. (1999). Identification of laminin-10/11 as a strong cell adhesive complex for a normal and malignant human epithelial cell line. J. Cell Sci. 112: 1-10.

62. Fischer, D., Brown-Ludi, M., Schulthess, Т., Chiquet-Ehrismann, R. (1997). Concerted action of tenascin-C domains in cell adhesion, anti-adhesion and promotion of neurite outgrowth. J. Cell Sci. 110: 1513-1522.

63. Fukami, K., Furuhashi, K., Inagaki, M., Endo, Т., Hatano, S., Takenawa, T. (1992). Requirement of phosphatidylinositol 4,5-biphosphate for alpha-actinin function. Nature. 359: 150-152.

64. Geiger, В., Ginsberg, D., Solomon, D., Volberg, T. (1990). The molecular basis for the assembly and modulation of adherens-type junction. Cell Differ. Dev. 32: 343-353.

65. Geiger, В., Yehuda-Levenberg, S., Bershadsky, A.D. (1995) Molecular interactions in the submembrane plaque of cell-cell and cell-matrix adhesions. ActaAnat. 154:46-62.

66. Gimona, M., Vandekerckhove, J., Goethals, M., Herzog, M., Lando, Z., Small, J.V. (1994). Beta-actin specific monoclonal antibody. Cell Motil. Cytoskelet. 27: 108-116.

67. Gimond, C., Mercier, I., Weber, I., Aumailley, M. (1996). Adhesion complexes formed by OVCAR-4 cells on laminin 1 differ from those observed on fibronectin. Cell Adhes. Comm. 3: 527-539.

68. Graf, J., Iwamoto, Y., Sasaki, M., Martin, G.R., Kleinman, H.K., Robey, F.A., Yamada, Y. (1987a). Identification of an amino acid sequence inlaminin mediating cell attachment, chemotaxis, and receptor binding. Cell 48: 989-996.

69. Graf, J., Ogle, R.C., Robey, F.A., Sasak, M., Martin, G.R., Yamada, Y., Kleinman, H.K. (1987b). A pentapeptide from the laminin B1 chain mediates cell adhesion and binds the 67 000 laminin receptor. Biochemistry 26: 6896-6900.

70. Grinnell, F. (1978). Cellular adhesiveness and extracellular substrata. Int. Rev. Cyt. 53: 65-144.

71. Haigler, H., Ash, J.F., Singer, S.J., Cohen, S. (1978). Visualization by fluorescence of the binding and internalization of epidermal growth factor in human carcinoma cells A-431. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 75: 33173321.

72. Hall, A. (1992). Ras-related GTPases and the cytoskeleton. Mol. Biol. Cell. 3: 475-479.

73. Hall, A. (1994). Small GTP-binding proteins and the regulation of the actin cytoskeleton. Annu. Rev. Cell Biol. 10: 31-54.

74. Hart, M.J., Callow, M.G., Souza, В., Polakis, P. (1996). IQGAP1, a calmodulin-binding protein with a rasGAP-related domain, is a potential effector for cdc42Hs. EMBO J. 15: 2997-3005.

75. Hartwig, J.H., Kwiatkowski, D.J. (1991). Actin-binding proteins. Curr. Opin. Cell Biol. 3: 87-97.

76. Hedberg, K.M., Bengtsson, Т., Safiejko-Mroczka, В., Bell, P.B., Lindroth, M. (1993). PDGF and neomycin induce similar changes in the actin cytoskeleton in human fibroblasts. Cell Motil. Cytoskelet. 24: 139-149.

77. Herman, I.M. (1993). Actin isoforms. Curr. Opin. Cell Biol. 5: 48-55.

78. Hill, M.A., Schedlich, L., Gunning, P. (1994). Serum-induced signal transduction determines the peripheral location of beta-actin mRNA within the cell. J. Cell Biol. 126: 1221-1230.

79. Hoock, T.C., Newcomb, P.M., Herman, I.M. (1991). Beta-actin and its mRNA are localized at the plasma membrane and the regions of movingcytoplasm during the cellular response to injury. J. Cell Biol. 112: 653664.

80. Hotchin, N.A., Hall, A. (1995). The assembly of integrin adhesion complexes requires both extracellular matrix and intracellular rho/rac GTPases. J. Cell Biol. 131: 1857-1865.

81. Hunter, T. (1997). Oncoprotein networks. Cell. 88: 333-346.

82. Hynes, R.O. (1992). Integrins: versatility, modulation, and signaling in cell adhesion. Cell. 69: 11-25.

83. Ishizaki, Т., Maekawa, M., Fujisawa, K., Okawa, K., Iwamatsu, A. (1996). The small GTP-binding protein Rho binds to and activates a 160 kDa Ser/Thr protein kinase homologous to myotonic dystrophy kinase. EMBO J. 15: 1885-1893.

84. Ishizaki, Т., Naito, M., Fujisawa, K., Maekawa, M., Watanabe, N., Saito, Y., Narumiya, S. (1997). pl60 ROCK, a Rho-associated coiled-coil forming protein kinase, works downstream of Rho and induces focal adhesion. FEBS Lett. 404: 118-124.

85. Iwamoto, Y., Robey, F.A., Graf, J., Sasaki, M., Kleinman, H.K., Yamada, Y., Martin, G.R. (19870. YIGSR, a synthetic laminin pentapeptide, inhibits experimental metastasis formation. Science. 238:1132-1134.

86. Izzard, C.S., Lochner, L.R. (1980). Formation of cell-to-substrate contacts during fibroblast motility: an interference-reflexion study. J. Cell Sci. 42: 81-116.

87. Izzard, C.S., Radinsky, R., Culp, L.A. (1986). Substratum contacts and cytoskeletal reorganization of BALB/c 3T3 cells on a cell-binding fragment and heparin-binding fragments of plasma fibronectin. Exp. Cell Res. 165: 320-336.

88. Janmey, P.A. (1994). Phosphoinositides and calcium as regulators of cellular actin assembly and disassembly. Annu. Rev. Physiol. 56: 169-191.

89. Janmey, P.A. (1998). The cytoskeleton and cell signalling:component localization and mechanical coupling. Physiological Reviews. 78: 763-781.

90. Jockusch, B.M., Hinssen, H. (1996). Nonmuscle motility and the actin-based cytoskeleton. Comprehensive Human Physiology. 1:225-243.

91. Joneson, Т., McDonough, M., Bar-Sagi, D., Van Aelst, L. (1996) RAC regulation of actin polymerization and proliferation by a pathway distinct from Jun kinase. Science. 274: 1374-1376.

92. Juliano, R.L., Haskill, S. (1993). Signal transduction from extracellular matrix. J. Cell Biol. 120: 577-585.

93. Juliano, R.L., Varner, J.A. (1993). Adhesion molecules in cancer: the role of integrins. Curr. Opin. Cell Biol. 5: 812-818.

94. Kadowaki, Т., Koyasu, S., Nishida, E., Sakai, H., Takaku, F., Yahara, I., Kasuga, M. (1986). Insulin-like growth factors, insulin, and epidermal growth factor cause rapid cytoskeletal reorganization in KB cells. J. Biol. Chem. 261: 16141-16147.

95. Karin, M. (1994). Signal transduction from the cell surface to the nucleus through the phosphorilation of transcription factors. Curr. Opin. Cell Biol. 6:415-424.

96. Katsumoto, Т., Kurimura, T. (1988). Ultrastructural localization of concanavalin A receptors in the plasma membrane: association with underlying actin filaments. Biol Cell. 62: 1-10.

97. Keely, P., Parise, L., Juliano, R. (1998). Integrins and GTPases in tumour cell growth, motility and invasion. Trends Cell Biol. 8: 101-106.

98. Khosravi-Far, R., Solski, P.A., Clark, G.F., Kinch, M.S., Der, C.J. (1995). Activation of Rac 1, RhoA and mitogen-activated protein kinases is required for Ras transformation. Mol. Cell Biol. 15:6443-6453.

99. Khrebtukova, I.A., Kwiatkowska, K., Gudkova, DA., Sorokin, A.B., Pinaev, G.P. (19910. The role of microfilaments in the capping of epidermal growth factor receptor in A-431 cells. Exp. Cell Res. 194: 4855.

100. Kimura, K., Ito, M., Amano, M., Chihara, K., Fukata, Y. (1996). Regulation of myosin phosphatase by Rho and Rho-associated kinase (Rho-kinase). Science. 273: 245-248.

101. Kozma, R., Ahmed, S., Best, A., Lim, L. (1995). The Ras-related protein Cdc42Hs and bradykinin promote formation of peripheral actin microspikes and filopodia in Swiss 3T3 fibroblasts. Mol. Cell Biol. 15: 1942-1952.

102. Laemmli, U.K. (1970). Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 227: 680-685.

103. Lamarche, N., Tapon, N., Stowers, L., Burbelo, P.D., Aspenstrom, P. (1996). Rac and Cdc42 induce actin polymerization and G1 cell cycle progression independently of p65PAK and the JNK/SAPK MAP kinase cascade. Cell. 87: 519-529.

104. Lamb, J.A., Allen, P.G., Tuan, B.Y., Janmey, P.A. (1993). Modulation of gelsolin function. Activation at low pH overrides Ca2+ requirement. J. Biol. Chem. 268: 8999-9004.

105. Lassing, I., Lindberg, U. (1985). Specific interaction between phosphatidylinositol 4,5-biphosphate and profilactin. Nature. 314: 472474.

106. Leung, Т., Manser, E., Tan, L., Lim, L. (1995). A novel serine/threonine kinase binding the Ras-related RhoA GTPase which translocates die kinase to peripheral membranes. J. Biol. Chem. 270: 29051-29054.

107. Leung, Т., Chen, X.Q., Manser, E., Lim, L. (1996). The pl60 RhoA-binding kinase ROK alpha is a member of a kinase family and is involved in the reorganization of the cytoskeleton. Mol. Cell Biol. 16: 5313-5327.

108. Li, C.-C.H., Korner, M., Ferris, D.K., Chen, E., Dai, R.-M., Longo, D.L.1994). NF-kappa B/Rel family members are physically associated phosphoproteins. Biochem. J. 303: 499-506.

109. Li, J., Lin, M.-L., Wiepz, G.J., Guadarrama, A.G., Bertics, P.J. (1999). Integrin-mediated migration of murine B82L fibroblasts is dependent on the expression of an intact epidermal growth factor receptor. J. Biol. Chem. 274:11209-11219.

110. Li, Y., Ndubuca, C., Rubin, C.S. (1996). A kinase anchor protein 75 targets regulatory (RII) subunits of cAMP-dependent protein kinase II to the cortical actin cytoskeleton in non-neuronal cells. J. Biol. Chem. 271: 16862-16869.

111. Lim, L., Manser, E., Leung, Т., Hall, C. (1996). Regulation of phosphorylation pathways by p21 GTPases. The p21 Ras-related Rho subfamily and its role in phosphorylation signalling pathways. Eur. J. Biochem. 242: 171-185.

112. Liou, H.-C., Baltimore, D. (1993). Regulation of the NF-kappa B/rel transcription factor and I kappa В inhibitor system. Curr. Opin. Cell Biol. 5: 477-487.

113. Lux, S.E., John, K.M., Bennet, V. (1990). Analysis of cDNA for human erythrocyte ankyrin indicates a repeated structure with homology to tissue-differentiation and cell-cycle control proteins. Nature. 344: 36-42.

114. Machesky, L.M., Hall, A. (1996). Rho: a connection between membrane receptor signalling and the cytoskeleton. Trends Cell. Biol. 6: 304-310.

115. Machesky, L.M., Hall, A. (1997). Role of actin polymerization and adhesion to extracellular matrix in Rac- and Rho-induced cytoskeletal reorganization. J. Cell Biol. 138: 913-926.

116. Mackay, D.J.G., Hall, A. (1998). Mo GTPases. J. Biol. Chem. 273: 20685-20688.

117. Madaule, P., Furuyashiki, Т., Reid, Т., Ishizaki, Т., Watanabe, G. (1995). A novel partner for the GTP-bound forms of rho and rac. FEBS Lett. 377: 243-48.

118. Marinovich, M., Viviani, В., Corsini, E., Ghilardi, F., Galli, C.L. (1996). NF-kappa В activation by triphenyltin triggers apoptosis in HL-60 cells. Exp. Cell Res. 226: 98-104.

119. Matsudaira, P. (1991). Modular organization of actin crosslinking proteins. Trends Biochem. Sci. 16: 87-92.

120. Matsudaira, P. (1994). Actin crosslinking proteins at the leading edge. Semin. Cell Biol. 5: 165-174.

121. Matsudaira, P., Janmey, P. (1988). Pieces in the actin-severing protein puzzle. Cell. 54: 139-140.

122. Matsui, Т., Amano, M., Yamamoto, Т., Chihara, K., Nakafuku, M. (1996). Rho-associated kinase, a novel serine/threonine kinase, as a putative target for small GTP binding protein Rho. EMBO J. 15: 2208-2216.

123. Mayer, B.J., Baltimore, D. (1993). Signalling through SH2 and SH3 domains. Trends Cell Biol. 3: 8-13.

124. McGarvey, M.L., Baron-Van Evercooren, A., Kleinman, H.K., Dubois-Dalcq, M. (1984). Synthesis and effects of basement membrane components in cultured rat Schwann cells. Dev. Biol. 105: 18-28.

125. McNamee, C.J., Pennington, S.R., Sheterline, P. (1995). Cell cycle-dependent morphological changes in the actin cytoskeleton induced by agents which elevate cyclic AMP. Cell Biol. Int. 19: 769-775.

126. McWhirter, J.R., Wang, J.Y. (1993). An actin-binding function contributes to transformation by the Bcr-Abl oncoprotein of Philadelphia chromosome-positive human leukemias. EMBO J. 12: 1533-1546.

127. Mellstrom, K., Hoglund, A.-S., Nister, M., Heldin, C.-H., Westermark, В., Lindberg, U. (1983). The effect of platelet-derived growth factor on morphology and motility of human glial cells. J. Muse. Res. Cell Motil. 4: 589-609.

128. Miller, K.G., Alberts, B.M. (1989). F-actin affinity chromatography: Technique for isolating previously unidentified actin-binding proteins. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 86: 4808-4812.

129. Minden, A., Lin, A., Claret, F.X., Abo, A., Karin, M. (1995). Selective activation of the JNK signaling cascade and c-Jun transcriptional activity by the small GTPases Rac and Cdc42Hs. Cell. 81: 1147-1157.

130. Miyamoto, S., Teramoto, H., Coso, O.A., Gutkind, J.S., Burbelo, P.D., Akiyama, S.K., Yamada, K.M. (1995) Inegrin function: molecular hierarchies of cytoskeletal and signaling molecules. J. Cell Biol. 131: 791805.

131. Moran, E., Zerler, В., Harrison, T.M., Mathews, M.B. (1986). Identification of separate domains in the adenovirus El A gene for immortalization activity and the activation of virus early genes. Mol. Cell Biol. 6: 3470-3480.

132. Moro, L., Venturino, M., Bozzo, C., Silengo, L., Atruda, F., Beguinot, L., Tarone, G., Defilippi, P. (1998). Integrins induce activation of EGFreceptor: role in MAP kinase induction and adhesion-dependent cell survival. EMBO J. 17: 6622-6632.

133. Mucai,H., Toshimori, M., Shibata, H., Takanaga, H., Kitagawa, M., Miyahara, M., Shimakawa, M., Ono, Y. (1997). Interaction of PKN with alpha-actinin. J. Biol. Chem. 272: 4740-4746.

134. Mullins, R.D., Heuser, J.A., Pollard, T.D. 1998. The interaction of Arp2/3 complex with actin: nucleation, high affinity pointed end capping, and formation of branching networks of filaments. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 95: 6181-6186.

135. Nachmias, V.T. (1993). Small actin-binding proteins: the beta-thymosin family. Curr. Opin. Cell Biol. 5: 56-62.

136. Narayanan, R., Higgins, K.A., Perez, J.R., Coleman, T.A., Rozen, C.A. (1993). Evidence for differential function of the p50 and p65 subunits of NF-kappa В with a cell adhesion model. Mol. Cell Biol. 13: 3802-3810.

137. Naumann, M., Scheidereit, C. (1994). Activation of NF-kappa В in vivo is regulated by multiple phosphorylations. EMBO J., 13, 4597-4607.

138. Nobes, C.D., Hall, A. (1995). Rho, rac, and cdc42 GTPases regulate the assembly of multimolecular focal complexes associated with actin stress fibers, lamellipodia, and filopodia. Cell. 81: 53-62.

139. Noda, M. (1993). Mechanisms of reversion. FASEB J. 7: 834-840.

140. Palladini, G., Finardi, G., Bellomo, G. (1996). Disruption of actin microfilament organization by cholesterol oxides in 73/73 endothelial cells. Exp. Cell Res. 223: 72-82.

141. Palombella, V.J., Rando, O.J., Goldberg, A.L., Maniatis, T. (1994). The ubiquitin-proteasome pathway is required for processing the NF-kappa B1 precursor protein and the activation of NF-kappa B. Cell. 78: 773-785.

142. Panayotou, G., End, P., Aumailley, M., Timpl, R., Engel, J. (1989). Domains of laminin with growth-factor activity. Cell. 56: 93-101.

143. Parsons, J.T. (1996) Integrin-mediated signaling regulation by protein-tyrosine kinases and small GTP-binding proteins. Curr. Opin. Cell Biol. 8: 146-152.

144. Paterson, H.F., Self, A.J., Garrett, M.D., Just, I., Actories, K., Hall, A. (1990). Microinj action of recombinant p21rho induces rapid changes in cell morphology. J. Cell Biol. Ill: 1001-1007.

145. Paves, H., Neuman, Т., Metsis, M., Saarma, M. (1990). Nerve growth factor-induced rapid reorganization of microfilaments in PC 12 cells: Possible roles of different second messenger systems. Exp. Cell Res. 186. 218-226.

146. Pawson, T. (1995). Protein modules and signalling networks. Nature. 373: 573-580.

147. Pinaev, G., Are, A., Burova, E., Lindberg, U. (1993). Specific attachment and spreading of A431 cells on substrate via EGF-receptors. Abst. of 40-th Int. Congress of the European Tissue Culture Soc., Rennes, France, W 2.16.

148. Prendergast, G.C., Gibbs, J.B. (1993). Pathways of ras function: connections to the cytoskeleton. Adv. Cancer Res. 62: 19-64.

149. Prendergast, G.C., Khosravi-Far, R., Solski, P.A., Kurzawa, H., Lebowitz, P.F., Der, C.J. (1995). Critical role of Rho in cell transformation by oncogenic Ras. Oncogene. 10:2289-2296.

150. Price, L.S., Leng, J., Schwartz, M.A., Bokoch, G.M. (1998). Activation of Rac and Cdc42 by integrins mediates cell spreading. Mol. Biol. Cell. 9: 1863-1871.

151. Puck, T.T., Krystosek, A. (1992). Role of the cytoskeleton in genome regulation and cancer. Int. Rev. Cyt. 132: 75-108.

152. Puius, Y.A., Mahoney, N.M., Almo, S.C. (1998). The modular structure of actin-regulatory proteins. Curr. Opin. Cell Biol. 10: 23-34.

153. Qiu, R., Chen, J., Kirin, D., McCormick, F., Symons, M. (1995). An essential role for Rac in Ras transformation. Nature. 374: 457-459.

154. Quilliam, L.A., Lambert, Q.T., Mickelson-Young, L.A., Westwick, J.K., Sparks, A.B., et al. (1996). Isolation of a NCK-associated kinase, PRK2, an SH3-binding protein and potential effector of Rho protein signalling. J. Biol. Chem. 271: 28772-28776.

155. Qwarnstrom, E.E., Ostberg, C.O., Turk, G.L., Richardson, C.A., Bomsztyk, K. (1994). Fibronectin attachment activates the NF-kappa В p50/p65 heterodimer in fibroblasts and smooth muscle cells. J. Biol. Chem. 269: 30765-30768.

156. Rao, C.N., Margulies, I.M., Tralka, T.S., Terranova V.P., Madri, J.A., Liotta, L.A. (1982). Isolation of a subunit of laminin and its role in molecular structure and tumor cell attachment. J. Biol. Chem. 257: 97409744.

157. Reid, Т., Furuyashiki, Т., Ishizaki, Т., Watanabe, G., Watanabe, N. (1996) Rhotekin, a new putative target for Rho bearing homology to a serine/threonine kinase, PKN, and rhophilin in the rho-binding domain. J. Biol. Chem. 271: 13556-13560.

158. Ren, X.-D., Kiosses, W.B., Schwartz, M.A. (1999). Regulation of the small GTP-binding protein Rho by cell adhesion and the cytoskeleton. EMBO J. 18: 578-585.

159. Rice, N.R., MacKichan, M.L., Israel, A. (1992). The precursor of NF-kappa В p50 has I kappa B-like functions. Cell. 71: 243-253.

160. Ridley, A.J., Hall, A. (1992). The small GTP-binding protein rho regulates the assembly of focal adhesions and actin stress fibers in responce to growth factors. Cell. 70: 389-399.

161. Ridley, A.J., Paterson, H.F., Johnston, C.L., Diekmann, D., Hall, A. (1992). The small GTP-binding protein rac regulates growth factor-induced membrane ruffling. Cell. 70: 401-410.

162. Roberts, B.E., Miller, J.S., Kimelman, D., Cepko, C.L., Lemischka, I.R., Mulligan, R.C. (1985). Individual adenovirus type 5 early region 1A gene products elisit distinct alterations of cellular morphology and gene expression. J. Virol. 56: 404-413.

163. Rosette, C., Karin, M. (1995). Cytoskeletal control of gene expression: depolymerization of microtubules activates NF-kappa B. J. Cell Biochem. 128: 1111-1119.

164. Ruley, H.E. (1990). Transforming collaborations between Ras and nuclear oncogene. Cancer Cells. 2: 258-268.

165. Sasaki, M., Kato, S., Kohno, K., Martin, G.R., Yamada, Y. (1987). Sequence of the cDNA encoding the laminin B1 chain reveals a multidomain protein containing cysteine-rich repeats. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 84: 935-939.

166. Sastry, S.K., Horwitz, A.F. (1993). Integrin cytoplasmic domains: mediators of cytoskeletal linkages and extra- and intracellular initiated transmembrane signaling. Curr. Opin. Cell Biol. 5: 819-831.

167. Schlessinger, J., Geiger, B. (1981). Epidermal growth factor induces redistribution of actin and alpha-actinin in human epidermal carcinoma cells. Exp. Cell Res. 134: 273-279.

168. Schmidt, A., Hall, M.N. (1998). Signaling to the actin cytoskeleton. Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 14: 305-338.

169. Schwartz, M.A. (1993). Signaling by integrins: implications for tumorigenesis. Cancer Res. 53: 1503-1506.

170. Sells, M.A., Knaus, U.G., Bagrodia, S., Ambrose, D.M., Bokoch, G.M., Chernoff, J. (1997). Human p21-activated kinase (Pakl) regulates actin organization in mammalian cells. Curr. Biol. 7: 202-210.

171. Seth, A., Gonzales, F.A., Gupta, S., Raden, D.L., Davis, RJ. (1992). Signal transduction within the nucleus by mitogen-activated protein kinase. J. Biol. Chem. 267: 24796-24804.

172. Sharma, C.P., Ezzell, R.M., Arnaout, M.A. (1995) Direct interaction of filamin (ABP-280) with the beta 2-integrin subunit CD 18. J. Immunol. 154: 3461-3470.

173. Shelden, E. (1999). Major role for active extension in the formation of processes by ras-transformed fibroblasts. Cell Motil. Cytoskeleton. 42: 1226.

174. Singer, I.I., Kawka, D.W., Scott, S., Mumford, R.A., Lark, M.W. (1987). The fibronectin cell attachment sequence Arg-Gly-Asp-Ser promotes focal contact formation during early fibroblast attachment and spreading. J. Cell Biol. 104: 573-584.

175. Small, J.V., Rottner, K., Kaverina, I., Anderson, K.I. (1998). Assembling an actin cytoskeleton for cell attachment and movement. Biochim. Biophys. Acta, 1404: 271-281.

176. Sobue, K., Fugio, Y., Kanda, K. (1988). Tumor promoter induces reorganization of actin filaments and calspectin (fodrin or nonerythroid spectrin) in 3T3 cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 85: 482-486.

177. Symons, M., Derry, J.M., Karlak, В., Jiang, S., Lemahieu, V. (1996b) Wiskott-Aldrich syndrome protein, a novel effector for the GTPase CDC42Hs, is implicated in actin polymerization. Cell. 84: 723-34.

178. Takai, Y., Sasaki, Т., Tanaka, K., Nakanishi, H. (1995). Rho as a regulator of the cytoskeleton. Trends Biochem. 20: 227-231.

179. Tapon, N., Nagata, K., Lamarche, N., Hall, A. (1998). A new Rac target POSH is an SH3-containing scaffold protein involved in the JNK and NF-kappa В signaling pathways. EMBOJ. 17: 1395-1404.

180. Theriot, J.A. (1994). Regulation of the actin cytoskeleton in living cells. Sem. Cell Biol. 5: 193-199.

181. Towbin, H., Staehelin, Т., Gordon, J. (1979). Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 76: 4350-4354.

182. Tozer, E.C., Hughes, P.E., Loftus, J.C. (1996). Ligand binding and affinity modulation of integrins. Biochem. Cell Biol. 74:785-798.

183. Verma, I.M., Stevenson, J.K., Schwarz, E.M., Van Antwerp, D., Miyamoto, S. (1995). Rel/NF-kappa ВЯ kappa В family: intimate tales of association and dissociation. Genes Dev. 9: 2723-2735.

184. Vincent, S., Settleman, J. (1997). The PRK2 kinase is a potential effector target of both Rho and Rac GTPases and regulates actin cytoskeletal organization. Mol. Cell Biol. 17: 2247-2256.

185. Vouret-Craviari, V., Boquet, P., Pouyssegur, J., Van Obberghen-Schilling, E. (1998). Regulation of the actin cytoskeleton by thrombin in human endothelial cells: role of Rho proteins in endothelial barrier function. Mol. Biol. Cell. 9: 2639-2653.

186. Walmod, P.S., Skladchikova, G., Kawa, A., Berezin, V., Bock, E. (1999). Antiepileptic Teratogen Valproic Acid (VPA) modulates organization and dynamics of the actin cytoskeleton. Cell Motil Cytoskeleton. 42: 241-255.

187. Wang, Y.-L. (1984). Reorganization of actin filament bundles in living fibroblasts. J. Cell Biol. 99: 1478-1485.

188. Watanabe, G., Saito, Y., Madaule, P., Ishizaki, Т., Fujisawa, K. (1996). Protein kinase N (PKN) and PKN-related protein rhophilin as targets of small GTPase Rho. Science. 271: 645-648.

189. Watanabe, N., Madaule, P., Reid, Т., Ishizaki, Т., Watanabe, G. (1997). pl40mDia, a mammalian homolog of Drosophila diaphanous, is a target protein for Rho small GTPase and is a ligand for profilin. EMBO J. 16: 3044-3056.

190. Westermark, В., Magnusson, A., Heldin, C.-H. (1982). Effect of epidermal growth factor on membrane motility and cell locomotion in cultures of human clonal glioma cells. J. Neurosci. Res. 8: 491-507.

191. Wewer, U.M., Engvall, E. (1994). Laminins. Methods in Enzymology 245: 85-104.

192. Wiegant, F.A., Block, F.J., Defize, L.H., Linnemans, W.A., Verkley, A.J., Boonstra, J. (1986). Epidermal growth factor receptors associated to cytoskeletal elements of epidermoid carcinoma (A-431) cells. J. Cell Biol. 103: 87-94.

193. Witke, W., Hofinann, A., Koppel, В., Schleicher, M., Noegel, A.A. (1993). The Ca(2+)-binding domains in non-muscle type alpha-actinin: biochemical and genetic analysis. J. Cell Biol. 121: 599-606.

194. Woods, A., Couchman, J.R., Johansson, S., Hook, M. (1986). Adhesion and cytoskeletal organisation of fibroblasts in response to fibronectin fragments. EMBO J. 5: 665-670.

195. Xu, J., Zutter, M.M., Santoro, S.A., Clark, R.A.F. (1998). A three-dimensional collagen lattice activates NF-kappa В in human fibroblasts: role in integrin alpha2 gene expression and tissue remodeling. J. Cell Biol. 140: 709-719.

196. Yamada, K.M., Geiger, B. (1997). Molecular interactions in cell adhesion complexes. Curr. Opin. Cell Biol. 9: 76-85.

197. Yamada, K.M., Kennedy, D.W. (1984). Dualistic nature of adhesive protein function: fibronectin and its biologically active peptide fragments can autoinhibit fibronectin function. J. Cell Biol. 99: 29-36.

198. Yamada, K.M., Miyamoto, S. (1995). Integrin transmembrane signaling and cytoskeletal control. Curr. Opin. Cell Biol. 7: 681-689.

199. Yamada, K.M., Olden, K. (1978). Fibronectins adhesive glycoproteins of cell surface and blood. Nature. 275: 179-184.

200. Zhu, P., Xiong, W., Rodgers, G., Qwarnstrom, E. (1998). Regulation of interleukin 1 signalling through integrin binding and actin reorganization: disparate effect on NF-kappa В and stress kinase pathways. Biochem. J. 330: 975-981.

201. Zohn, I.M., Campbell, S.I., Khosravi-Far, R., Rossman, K.I., Der, C.J. (1998). Rho family proteins and Ras transformation: the RHOad less traveled gets congested. Oncogene. 17: 1415-1438.