Выяснение механизмов антифибротического действия мезенхимных стромальных клеток тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.04, кандидат наук Басалова Наталия Андреевна

• Басалова Наталия Андреевна
• кандидат наук
• 2022

Оглавление диссертации кандидат наук Басалова Наталия Андреевна

Содержание

Список сокращений

Введение

1. Актуальность и степень разработанности темы исследования

2. Цель работы

3. Задачи исследования

4. Объект и предмет исследования

5. Научная новизна

6. Теоретическая и практическая значимость

7. Методология исследования

8. Достоверность

9. Апробация работы

10. Публикации

11. Личный вклад автора в проведение исследования

12. Положения, выносимые на защиту

Обзор литературы

1. Фиброз

2. Процессы фенотипической пластичности в фиброзе

3. Фиброз лёгких человека и подходы к его моделированию т уыо

4. Роль МСК и секретируемых ими растворимых факторов в регуляции фиброза

Материалы и методы

1. Культуры клеток

2. Получение и фракционирование кондиционированной среды МСК человека

3. Характеристика внеклеточных везикул, секретируемых МСК человека

4. Моделирование лёгочного фиброза у мышей

5. МРТ-сканирование

6. Бронхоальвеолярный лаваж

7. Гистологический анализ тканей легких мышей

8. Иммуногистохимический анализ тканей легких мышей

9. Клеточные модели фиброза

10. Иммунофлуоресцентный анализ

11. Модель контракции коллагенового диска

12. Оценка уровня мРНК с помощью количественной ПЦР в реальном времени

13. Высокопроизводительное секвенирование РНК ВВ-МСК

14. Оценка уровня микроРНК с помощью количественной ПЦР в реальном времени

15. Трансфекция ВВ-МСК

16. Статистический анализ

Результаты

Глава 1. Оценка паракринной активности МСК

Глава 2. Оценка влияния компонентов секретома МСК на разрешение фиброза лёгких мышей, индуцированного блеомицином

Глава 3. Оценка влияния ВВ-МСК на процессы дифференцировки фибробластов в миофибробласты и дедифференцировки миофибробластов

Глава 4. Оценка влияния микроРНК в составе ВВ-МСК на процессы

трансдифференцировки фибробластов и миофибробластов2

Глава 5. Оценка влияния микроРНК 29с и 129 в составе ВВ-МСК на разрешение фиброза лёгких мышей, индуцированного блеомицином

Обсуждение

Заключение

Выводы

Список литературы

Список сокращений

Angpt1 - ангиопоэтин 1 типа (angiopoetin-1)

BDNF - нейротрофический фактор мозга (brain-derived neurotrophic factor)

CSF-1 - колониестимулирующий фактор - 1 (colony stimulating factor 1)

EGF - эпидермальный фактор роста (epidermal growth factor)

FAP - белок активации фибробластов альфа (fibroblast activated protein

alpha)

GDNF - глиальный нейротрофический фактор (glial cell-derived neurotrophic factor)

HGF - фактор роста гепатоцитов (hepatocyte growth factor)

HB-EGF-гепаринсвязывающий-эпидермальный фактор роста

IFN у - интерферон гамма (Interferon gammа)

IGF - инсулиноподобный фактор роста (insulin-like growth factor)

IL - интерлейкины (interleukin)

iNOS или NOS2-индуцируемая NO-синтаза (nitric oxide synthases)

KGF - фактор роста кератиноцитов (keratinocyte growth factors)

МСР-1 - моноцитарный хемотаксический белок (monocyte chemotactic protein)

MMR - макрофагальный маннозный рецептор (macrophage mannose receptor)

NGF - фактор роста нервов (nerve growth factor)

NK - натуральные киллеры (natural killer cells)

NTA - анализ траектории наночастиц (nanoparticle tracking analysis)

PAI-1 - ингибитор активатора плазминогена 1 (plasminogen activator PDGFa - тромбоцитарный фактор роста a (platelet derived growth factor

a)

qRT-PCR - количественная ПЦР «в реальном времени» (quantitative real-time PCR)

SCF - фактор стволовых клеток (stem cell factor)

SDF-1a - фактор стромальных клеток-1a (stromal cell-derived factor-1)

TGFp - трансформирующий фактор роста бета (transforming growth factor beta)

Th - Т-хелперы (T helper cells)

TIMP - тканевый ингибитор металлопротеиназ (tissue inhibitor of metalloproteinase)

TLR - Толл-подобный рецептор (Toll-like receptor)

TNF a - фактор некроза опухолей альфа (tumor necrosis factor a)

VEGF - фактор роста эндотелия сосудов (vascular endothelial growth factor)

aSMA - a-гладкомышечный актин, альфа-актин (a-smooth muscle actin)

PFGF - основной фактор роста фибробластов

(basic fibroblast growth factor)

БАЛ - бронхоальвеолярный лаваж

ВВ - внеклеточные везикулы (extracellular vesicles, EV)

ВКМ - внеклеточный матрикс (extracellular matrix, ECM)

дцДНК - двухцепочечная ДНК (double stranded (ds) DNA)

КС-МСК - кондиционированная среда МСК (MSC conditioned medium, CM-MSC)

ММП - матриксные металлопротеиназы (matrix metalloproteinases, MMP)

мРНК - матричная РНК (mRNA)

МСК - мезенхимные стромальные клетки (mesenchymal stromal cells,

MSC)

МСК-КМ - костномозговые мезенхимные стромальные клетки (bone marrow derived mesenchymal stromal cells, BM^SC)

РФ - растворимые факторы (soluble factors, SF)

ФБС - фетальная бычья сыворотка (fetal bovine serum, FBS)

ЭМП - эпителиально-мезенхимный переход (epithelial-mesenchymal transition, EMT)

ЭндоМП - эндотелиально-мезенхимный переход (endhothelial-mesenchymal transition, EndoMT)

Введение

1. Актуальность и степень разработанности темы исследования

Восстановление структуры и функции ткани после повреждения происходит в результате регенеративных комплексных процессов. При возникновении хронического воспалительного процесса результатом репаративной регенерации у млекопитающих зачастую является развитие фиброза. Несмотря на то, что процессы, характерные для фиброза, являются неотъемлемыми этапами восстановления нормальной ткани, репарация может трансформироваться в прогрессирующий фибропролиферативный ответ при обширном повреждении ткани или в случае хронического воздействия повреждающих агентов.

Фиброз представляет собой избыточное отложение белков внеклеточного матрикса (ВКМ), прежде всего фибронектина и коллагена, приводящее к формированию рубцовой ткани. В конечном счете, фиброз может приводить к дисфункции органов и гибели организма, что наблюдается в ходе таких фиброз-ассоциированных заболеваний, как поражения печени и почек, склеродермия, идиопатический лёгочный фиброз. Кроме того, очаги фиброзной ткани могут являться нишей для инвазии опухолевых клеток и последующей неконтролируемой пролиферации.

Основными эффекторными клетками фиброгенеза, ответственными за синтез и ремоделирование ВКМ, являются миофибробласты и их основные предшественники - фибробласты, циркулирующие в крови фиброциты, эндотелиальные и эпителиальные клетки. В ходе нормально протекающей репарации активность фибробластов находится под контролем иммунной системы, и избыточное количество миофибробластов элиминируется в ходе апоптоза [101, 114]. Другим механизмом, отвечающим за контроль количества миофибробластов, является ингибирование

дифференцировки/трансдифференцировки клеток-предшественников или

индукция дедифференцировки миофибробластов [95].

8

Развитие прогрессирующего фиброза сопровождается нарушением регуляторной функции иммунной системы, а также неспособностью клеток микроокружения регулировать дифференцировку фибробластов и дедифференцировку миофибробластов [58, 77]. Однако взаимодействие индукторов и регуляторов этих нарушений мало изучено, поэтому исследование механизмов подавления или реверсии фиброза на данном этапе развития науки является очень актуальным.

Важными регуляторами фиброза, препятствующими развитию патологического фибропролиферативного сценария, могут служить мультипотентные мезенхимные стромальные клетки (МСК) [75, 121, 132, 168, 172, 174].

На сегодняшний день на экспериментальных моделях показано,

что антифибротический эффект МСК в основном опосредуется их специфической секреторной активностью [17, 85, 106, 141, 173, 189]. Так, МСК способствуют разрушению избыточного ВКМ посредством секреции множества матриксных металлопротеиназ, а также подавляют фиброгенез за счет действия паракринных факторов и регуляторных некодирующих РНК, например, микроРНК, переносимых в составе внеклеточных везикул (ВВ-МСК) [47, 168, 202]. В ряде работ показано, что именно микроРНК, в т.ч. в составе ВВ-МСК, являются регулятором дифференцировки различных типов клеток, включая предшественники миофибробластов [17, 20, 32, 80, 126, 190]. Однако на данный момент не установлены ключевые молекулярные медиаторы, опосредующие антифибротические свойства секретома МСК.

Перспективной моделью изучения механизмов регуляции фиброза,

особенно в связи с пандемией вируса 8ЛЯ8-СоУ-2, является фиброзирование

лёгочной ткани. Основной структурной единицей при фиброзе в лёгких

является фибротический фокус - сложная структура, состоящая из

миофибробластного ядра и активного фибротического фронта. [91]. В свою

очередь миофибробластное ядро представляет собой отложения неправильно

9

уложенных коллагенов I, III, IV, V и VI, а также фибронектина (в т.ч. EDA-фибронектина), синтезированных миофибробластами. Основным маркёром миофибробластов являются стресс-фибриллы, сформированные а-гладкомышечным актином, а также повышенная способность к контракции ВКМ. По периферии миофибробластической зоны располагаются зоны с активно пролиферирующими и инвазивными фибробластами, за счёт которых происходит расширение зоны фиброза [90, 91]. В нашем исследовании была использована хорошо отработанная экспериментальная модель блеомицин-индуцированного фиброза легких, которая представляется весьма удобной для выяснения роли МСК в регуляции фибротического микроокружения, в частности, для уточнения вклада отдельных компонентов секретома МСК в антифибротические эффекты этих клеток. Полученные данные помогут найти эффективные способы стимуляции разрешения фиброза.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Выяснение механизмов антифибротического действия мезенхимных стромальных клеток»

2. Цель работы

Целью данной работы является выяснение механизмов антифибротического действия секретома мезенхимных стромальных клеток.

3. Задачи исследования

1. Выделить и охарактеризовать основные фракции секретома МСК человека.

2. Исследовать антифибротические эффекты основных фракций секретома МСК на in vivo модели блеомицин-индуцируемого фиброза лёгких у мышей.

3. Исследовать антифибротические эффекты основных фракций секретома МСК на in vitro моделях TGFp-индуцируемой трансдифференцировки фибробластов в миофибробласты и дедифференцировки миофибробластов.

4. Проанализировать РНК в составе внеклеточных везикул, секретируемых МСК, методом высокопроизводительного РНК-секвенирования.

5. Оценить вклад отобранных микроРНК, секретируемых МСК в составе

внеклеточных везикул, в антифибротические эффекты секретома МСК.

10

4. Объект и предмет исследования

Объектом исследования данной диссертационной работы является секретом мезенхимных стромальных клеток (МСК) и его влияние на дифференцировку миофибробластов и их предшественников в блеомицин-индуцированной модели фиброза лёгких у мышей. Предметом исследования в диссертации являются компоненты секретома МСК, везикулярная и вневезикулярная фракции, и их роль в прогрессировании фибротических заболеваний.

5. Научная новизна

Ключевая научная идея данной работы заключается в гипотезе, что МСК путем секреции внеклеточных везикул со специфическим составом некодирующих РНК, регулирующих дифференцировку фибробластов в миофибробласты и дедифференцировку миофибробластов, способны не только ингибировать развитие фиброза, но и эффективно способствовать его разрешению, позволяя восстановить нормальную структуру и функцию поврежденной ткани.

6. Теоретическая и практическая значимость

Полученные в данной работе результаты расширяют понимание физиологической роли МСК в регуляции фиброза. Материал диссертационной работы раскрывает механизмы про- и антифибротических эффектов МСК, которые наблюдаются в экспериментальных и клинических исследованиях. Полученные результаты могут стать основой для дальнейшего углубленного изучения механизмов участия МСК в развитии фибротического поражения тканей, а также для разработки новых подходов к лечению тяжелых фибротизирующих заболеваний с помощью методов регенеративной медицины, включая направление "клеточной терапии без клеток", основанное на использовании компонентов клеточного секретома в качестве терапевтических средств.

7. Методология исследования

Приведённые в данной диссертационной работе исследования основываются на современных методологических приемах научного познания. Методология основывается на анализе литературных данных и степени разработанности данной темы, постановке цели и задач исследования исходя из известных функций секретома МСК в репаративных процессах, планировании экспериментов на основании как классических, так и современных методов, применяемых в биологической науке.

В основе данной диссертационной работы лежат методы клеточной биологии и биохимии. Несомненным преимуществом данной работы также является использование новейших методов молекулярной биологии и бионформатики.

Значительная часть работы выполнена на in vitro моделях с применением таких методов как метод клеточных культур, иммуноцитохимическое мечение, трансфекция, фракционирование, выделение РНК, полимеразная цепная реакция в реальном времени, вестерн-блоттинг. Немаловажной частью работы является постановка модели in vivo (блеомицин-индуцированной модели фиброза лёгких на мышах), с последующим анализом полученного материала путём гистохимического окрашивания и иммуногистохимического мечения, иммуноферментного анализа. Полученные в ходе работы гисто-и цитологические препараты были оценены методами световой и флуоресцентной микроскопии. Анализ данных проводился с помощью релевантных методов статистической обработки данных. Полностью методология и методы, используемые при выполнении данной работы, отражены в разделе «Материалы и методы».

8. Достоверность

Научные результаты диссертационной работы обладают высокой степенью достоверности. Для достижения этого автором работы был проведён глубокий анализ научной отечественной и зарубежной литературы, позволивший сформировать первоначальные гипотезы. Для проверки гипотез были проведены серии независимых научных экспериментов, включающие в себя повторы экспериментальных точек или необходимое число экспериментальных животных. Полученные данные были обработаны с помощью статистического анализа с использованием адекватных критериев, что позволило грамотно интерпретировать результаты.

9. Апробация работы

Основные результаты работы были представлены на IX Международном конгрессе "Биотехнология: Состояние и перспективы развития", Россия, 2017, The second international conference "Cell technologies at the edge: from research to practice" (CTERP) "Translational research in cell therapy", Россия, 2018; Международной научной конференции Ломоносов-2018, Россия, 2018; International Congress Biotechnology: State of the art and perspectives., Москва, 2019; Regulatory RNAs, Германия, 2019;The International Student Congress Of (bio)Medical Sciences (ISCOMS) Нидерланды, 2018; Международной конференции Tissue Engineering and Regenerative Medicine International Society (TERMIS-EU) 2019; Греция, 2019; The 27th ESGCT Annual Congress 2019, Испания, 2019; IV Национальном конгрессе по регенеративной медицине, Россия, 2019; EMBL-IBEC Winter Conference 2020, Испания, 2020; VII Молодежной Школе-конференции по молекулярной и клеточной биологии ИНЦ РАН, Россия, 2020; VII Троицкой конференции с международным участием "Медицинская физика" (ТКМФ-7), Россия, 2020, The 28th ESGCT Virtual Congress 2021, online, The International Society for Extracellular Vesicles Annual Meeting 2021, online, 2021.

Доклады с результатами работы, посвящёнными изучению секретома МСК, в т.ч. в регуляции фибротических процессах, дважды признавались лучшими (2018 и 2019) в секции «Регенеративная медицина» на XXV и XXVI Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых "Ломоносов".

10. Публикации

По материалам работы опубликовано 26 печатных работ, в том числе 6 статей и 13 публикаций в реферируемых сборниках тезисов, индексируемых Scopus и Web of Science. На основании полученных результатов опубликован патент Российской Федерации (патентная заявка № 2020137359 от 13.11.2020, одобрено получение патента 26.11.2021).

Во всех опубликованных работах вклад автора является определяющим. Автор принимал активное участие в постановке научных задач, проведении экспериментальных исследований, анализе и статистической обработке полученных результатов. Теоретическое исследование роли МСК и секретома МСК в регуляции репарации, а также подходы к стандартизации образцов секретома МСК для преклинических исследований и дальнейшего клинического использования были опубликованы в статьях в соавторстве с Сагарадзе Г.Д. и др. [172, 174]. Влияние секретома МСК и его отдельных компонентов на процессы, ассоциированные с репарацией и регенерацией тканей, а также прогрессиованием фиброза, было исследовано как на моделях in vitro [17], так и in vivo [173]. Механизмы прогрессирования фиброза и дифференцировки миофибробластов и их различных клеточных предшественников были исследованы в работах совместно с Еремичевым Р.Ю. [58] и Григорьевой О.А. [83]. Автором была проведена значительная работа над текстом статей и подготовкой иллюстративного материала. Также автор диссертации принимал непосредственное участие в представлении публикаций в редакции журналов и переписке с редакторами и рецензентами.

Со степенью личного вклада соискателя в опубликованные работы более подробно можно ознакомиться в разделе «Список литературы».

11. Личный вклад автора в проведение исследования

Автору диссертационного исследования принадлежит основная роль в формулировке целей и задач исследования, подготовке и проведении экспериментов, статистической обработке данных, подготовке тезисов, публикаций и патентной заявки по теме исследования.

12. Положения, выносимые на защиту

1. В секретоме МСК человека определяются различные РНК, включая микроРНК, переносимые в составе внеклеточных везикул, и растворимые факторы вневезикулярной фракции, которые могут участвовать в регуляции фиброза путем влияния на дифференцировку фибробластов в миофибробласты и дедифференцировку миофибробластов.

2. Внеклеточные везикулы, секретируемые МСК, но не вневезикулярные компоненты секретома МСК, оказывают антифибротический эффект на in vivo модели блеомицин-индуцируемого фиброза лёгких у мышей.

3. Внеклеточные везикулы, секретируемые МСК, как ингибируют дифференцировку фибробластов в миофибробласты, индуцированную TGFP, так и стимулируют дедифференцировку миофибробластов в фибробласты на моделях in vitro.

4. микроРНК-21, микроРНК-29с и микроРНК-129 в составе внеклеточных везикул, секретируемых МСК, опосредуют влияние секретома МСК на процесс дифференцировки фибробластов в миофибробласты.

5. микроРНК-29с и микроРНК-129 в составе внеклеточных везикул, секретируемых МСК, вносят значимый вклад в антифибротический эффект секретома МСК на in vivo модели блеомицин-индуцируемого фиброза лёгких у мышей.

Обзор литературы

1. Фиброз

Восстановление исходной структуры и функции ткани после повреждения - сложный комплексный процесс, участниками которого являются различные типы клеток и продуцируемые ими биологически активные вещества. Процессы репарации происходят в определенной последовательности и могут быть условно разделены на этапы (фазы), которые могут перекрываться между собой (рис.1) [56]:

I фаза - фаза воспаления (1-5-й день);

II фаза - фаза пролиферации или репарации (4-14-й день);

III фаза - фаза ремоделирования (от 15 суток до 6 месяцев).

Рис. 1 Динамика процессов репарации (адаптировано из статьи Enoch, 2007).

1.1 Фаза воспаления

Неотъемлемой частью любого повреждения является нарушение целостности кровеносных сосудов. Возникающая вазодилатация и

кратковременное увеличение проницаемости сосудистой стенки способствуют экстравазации компонентов крови: белков плазмы, форменных элементов крови, в зону повреждения. Затем следует вазоконстрикция, и тромбоциты вместе с эндотелием активируют коагуляционный каскад. Путём агрегации и разрушения тромбоцитов образуется временный тромб, состоящий из фибронектина, коллагена, тромбина и являющийся базой для миграции клеток воспаления [210] . В это же время происходит выделение в окружающие ткани таких провоспалительных медиаторов как тромбоцитарный фактор роста (PDGFa), инсулиноподобный фактор роста (IGF), трансформирующей фактор роста бета (TGFß), эпидермальный фактор роста (EGF), которые запускают воспалительный ответ, привлекая и активируя фибробласты и моноциты. Выделение таких сигнальных факторов как фактор некроза опухолей (TNF а), интерлейкин-1 (IL-1) или TGFß стимулирует привлечение нейтрофилов и лимфоцитов к сайту повреждения [2].

Инфильтрирующие нейтрофилы через активацию толл-подобных рецепторов (TLRs) играют немаловажную роль во врожденном иммунном ответе и уничтожении патогенов путём фагоцитоза и их последующей внутриклеточной инактивации активными формами кислорода, протеолитическими ферментами и антимикробными белками [88]. При ответе на провоспалительные стимулы нейтрофилы также способны дегранулировать и формировать нейтрофильные ловушки, состоящие из фрагментов ДНК и ассоциированных с ними белков, что позволяет нейтрофилам участвовать и во внеклеточном уничтожении патогенов [144].

При выделении таких хемоаттрактантов как матрикины, моноцитарный хемотаксический белок-1 (МСР-1) и интерферон гамма (IFN у), к месту повреждения мигрируют моноциты и дифференцируются в провоспалительные макрофаги М1 типа, синтезирующие TGF ß, IL-1 и 12, TNFa, NO и активные формы кислорода. Маркёрами макрофагов M1 фенотипа в тканях считаются рецептор IL2, CD80 и CD25 [136]. Через связывание

интегриновых рецепторов с белками внеклеточного матрикса (ВКМ) и при воздействии IL-4, 10 и TGFß происходит переключение макрофагов в стороны репаративных антивоспалительных макрофагов М2 типа. Для этих клеток характерными маркёрами являются макрофагальный маннозный рецептор (MMR, CD206), рецепторы SR-A, CD163. Для макрофагов М2 описана способность к активному фагоцитозу, протеолизу белков внеклеточного матрикса (ВКМ) с помощью матриксных металлопротеаз (MMP), а также продукция EGF, PDGFa, колониестимулирующего фактора 1 (CSF-1), TGF ß и сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF) [224]. Совокупность этих факторов запускает ангиогенез и формирование грануляционной ткани, т.е. способствует началу следующей фазы ранозаживления [23].

1.2 Фаза пролиферации

Фаза пролиферации заключается в контракции раны, восстановлении полноценной сосудистой сети в ходе процесса, называемого ангиогенезом и образовании «зернистой» грануляционной ткани. На гистологическом уровне в этот период в ткани можно выявить мигрирующие фибробласты, миофибробласты, ремоделирующие ВКМ, и петли тонкостенных незрелых капилляров в рыхлом матриксе [54].

Восстановление кровеносных сосудов в месте повреждения происходит, прежде всего, за счет ответвления новых сосудов от уже существующих в ткани (ангиогенеза). Формирование новых капилляров начинается с активации одной из краевых клеток эндотелиального монослоя, которая становится лидирующей или «концевой» («tip cell») и мигрирует по вновь сформированному матриксу. Выбор лидирующей клетки происходит благодаря взаимодействию VEGF, Notch, Dll4 или Jaggedl со специфичными рецепторами, экспрессированными на мембране эндотелия. Соседние с лидирующей эндотелиальные клетки пролиферируют и мигрируют следом в ответ на воздействие таких факторов как Notch, Wnt, фактор роста фибробластов (FGF) и PDGF, а затем формируют просвет нового капилляра.

Только те капилляры, в которых есть нормальный кровоток, стабилизируются и созревают благодаря контакту с перицитами и некоторыми другими периваскулярными стромальными клетками, такими как мезенхимные стромальные клетки (МСК), и воздействию РЭОБ, ангиопоэтина-1 (Ап§р1-1) и эфрина В2 [177, 180]. Новообразованные неперфузированные сосуды дестабилизируются и деградируют [50, 54, 66].

В ходе фазы пролиферации в очаге воспаления также происходит накопление фибробластов в результате их миграции и деления. Основными хемотаксическими факторами для фибробластов являются БОБ, PDGFa, 1Ь1, синтезируемые преимущественно тромбоцитами и макрофагами [23]. Фибробласты под воздействием TGFp и других провоспалительных факторов способны трансдифференцироваться в миофибробласты, обладающие высокой контрактильной (сократительной) способностью, направленной на сокращение площади раны, и синтезирующие на данной стадии заживления раны белки временного ВКМ - БЭА-фибронектин, гиалуроновую кислоту, и, позднее, коллаген и протеогликаны [21, 90, 95]. Повышенная экспрессия TGFp стимулирует миофибробласты к гиперсекреции компонентов ВКМ, ингибирует синтез ММР и усиливает производство тканевых ингибиторов металлопротеиназ (ТГМРб), увеличивает образование клеточных контактов различного типа, что может приводить к развитию патологического фиброза [17, 45, 58, 90, 217].

Таким образом, фаза пролиферации заканчивается формированием грануляционной ткани. Она характеризуется высокой численностью нейтрофилов, макрофагов, фибробластов, миофибробластов, мигрирующим эпителием, плотной сетью незрелых капилляров и слабо организованными пучками внеклеточного матрикса [166]

1.3 Фаза ремоделирования

Ремоделирование - последняя фаза репаративной регенерации, происходящая примерно с 15 дня до 1 года после травмы. Окончательное

19

заживление места повреждения происходит через взаимодействие между миофибробластами и окружающим внеклеточным матриксом [56]. Формирование грануляционной ткани прекращается через активацию механизмов программируемой гибели клеток.

Ключевой особенностью данной фазы является депонирование коллагена в виде правильно организованной структурированной сети. Первоначально незрелый матрикс состоит в основном из фибрина и EDA-фибронектина, которые затем замещаются гликозаминогликанами, протеогликанами, тканеспецифичными коллагенами и другими белками, синтезируемыми миофибробластами. В ходе 3 стадии незрелый матрикс заменяется более структурированным, состоящим преимущественно из коллагена I типа [166]. Равновесие между ММП и их тканевыми ингибиторами, регулируется в том числе и МСК и играет важную роль в формировании правильно структурированного матрикса [85, 121].

В конечном счете, грануляционная ткань превращается в рубец, который в норме состоит из преимущественно неактивных фибробластов, плотно упакованного коллагена, фрагментов эластичной ткани и других компонентов внеклеточного матрикса.

1.4 Фиброз как патологический процесс

Структура и функция тканей и органов могут быть нарушены при воздействии различных повреждающих агентов, таких как механические травмы, вирусная инфекция, химическое воздействие, аллергические и иммунные реакции. В ходе процесса репарации происходит элиминация поврежденных или мертвых клеток, а затем замещение их здоровыми функциональными клетками. Исходом репаративной регенерации может быть частичное или полное восстановление утраченной функции ткани или органа. Однако в организме взрослого млекопитающего в большинстве случаев

восстановление после повреждения происходит с формированием фиброзной ткани [23, 54, 77].

Хронические процессы повреждения приводят к формированию микроокружения, поддерживающего и постоянно активирующего клетки, обеспечивающие процессы репарации [149]. Итогом является состояние, называемое патологическим прогрессирующим фиброзом - это процесс, характеризующийся активным синтезом белков ВКМ (коллагена, фибронектина) и разрастанием соединительной ткани в любых паренхиматозных органах (включая сердце, печень, костный мозг, почки, легкие) и некоторых других тканях, таких как кишечник, глаз или кожа [19, 77, 91]. Постоянный фибропролиферативный процесс приводит к постепенному замещению функциональной ткани пораженного органа, и как следствие, утрате специфических функций органа вплоть до полной дисфункции (например, при лёгочной недостаточности при фиброзе лёгких) и летальному исходу [219]. Важно отметить, что развитие фиброзной ткани по данным многочисленных исследований является нишей для развития различного вида опухолей [128, 145] . Поэтому согласно современной статистике, более 50% летальных случаев во всём мире связаны с фибротическими заболеваниями, и эта цифра только увеличивается [212].

Одним из основных деструктивных факторов фиброза является избыточный синтез белков ВКМ миофибробластами [95]. В норме после восстановления достаточной целостности ткани, миофибробласты, находящиеся под контролем иммунной системы, гибнут в результате апоптоза. Однако при формировании в участке повреждения фиброгенного микроокружения такие клетки не погибают, а сохраняются, что приводит к прогрессивному патологическому нарушению структуры ткани и замещении ее рубцовой [193, 221].

Так, при фиброзе тканей различных органов - лёгких, сердца, печени,

поджелудочной железы, молочной железы - основной морфофункциональной

21

единицей являются фибробластические фокусы (фибротические фокусы,

fibrotic foci) [18, 46, 86, 130, 205]. Развитие фибротического фокуса

начинается с появления в ткани миофибробластов, которые обычно

располагаются близко к поврежденной базальной мембране эпителия [117].

Непролиферирующие, активно экспрессирующие альфа-гладкомышечный

актин (альфа-актин, aSMA) миофибробласты начинают активно синтезировать

белки ВКМ, и постепенно оказываются погружёнными внутрь зоны

новосинтезированного матрикса, богатого фибронектином с дополнительным

доменом A (фибронектин EDA) проколлагеном I, коллагенами I и III, IV, VI

типа, гиалуроновой кислотой, периостином, тенасцином C, версиканом,

фибулином [8, 17, 91]. За счёт изменения состава матрикса, а также за счёт

непосредственного увеличения секреции TGFP, доступность TGFP для его

рецепторов на клетке локально увеличивается в зоне фибробластического

фокуса [107, 111]. Через активацию TGFP сигнального пути происходит

подавление экспрессии микроРНК-29 - одного из основных негативных

регуляторов экспрессии белков ВКМ [39, 73]. Важно отметить, что такие

компоненты ВКМ, как неупорядоченно уложенные коллагены,

гликозаминогликаны, протеогликаны способны увеличивать жёсткость

матрикса [200]. В ряде работ показано, что увеличение жёсткости матрикса

также является стимулом для трансдифференцировки клеток в

миофибробласты и поддержания стромального миофибробластного фенотипа

[70, 88, с. 44][69, 87, с. 44]. Таким образом, миофибробласты, окруженные

внеклеточным матриксом, составляют ядро фибробластического фокуса,

способного к самоподдержанию и активации новых клеток. Второй

немаловажной частью фибробластического фокуса является фронт

активированных пролиферирующих фибробластов по периферии ядра. Такие

фибробласты, во-первых, способствуют увеличению площади

фибробластического фокуса за счёт контакта с матриксом ядра и постоянной

трансдифференцировке в миофибробласты. Во-вторых, за счёт высокой

миграторной активности, опосредованной экспрессией рецептора к

22

гиалуроновой кислоте CD44, металлопротеиназами MMP2 и 9, сериновой протеазе белок активации фибробластов альфа (fibroblast activation protein alpha, FAPa) способны инвазировать в ткани и тем самым увеличивать площадь пораженной ткани и количество фибробластических фокусов [1, 32].

Ещё одним фактором, влияющим на развитие фиброза, является нарушение ангиогенеза. Фактически, фиброз также характеризуется массовой гибелью эндотелиоцитов и нарушением восстановления полноценного микроциркуляторного русла, стабилизированного гладкомышечными клетками или перицитами. Одной из вероятных причин данного состояния может являться пониженный уровень синтеза ангиогенных молекул, таких как VEGF и ангиопоэтин [104, 105]. По мнению других исследователей, переход эндотелиальных клеток в клетки с мезенхимным фенотипом, называемый эндотелиально-мезенхимальным переходом (ЭндоМП), может быть дополнительным фактором, который способствует нарушению трофики тканей, а также является дополнительным источником миофибробластов [5, 19, 87]. В ряде исследований было показано, что эндотелиальные клетки могут приобретать мезенхимный фенотип в ответ на TGFP, что способствует ухудшению восстановления микроциркуляции и накоплению миофибробластов [157].

Долгое время формирование фибротической ткани считалось необратимым процессом. Однако в 1979 году, на основе клинических наблюдений за развитием цирроза печени, впервые была высказана теория о потенциальной обратимости фиброза [155]. Поэтому сегодня ведутся активные поиски как антифибротических, так и реверсирующих данный процесс агентов. В настоящее время ведутся исследования как системных подходов терапии, так и агентов, обладающих тканеспецифичным действием [51, 164, 218].

Долгое время наиболее перспективными считали препараты,

направленные на снижение воспалительного ответа в ткани или стимуляцию

деградации внеклеточного матрикса. Другим широко исследуемым подходом является поиск подходов к контролю численности клеток - ингибированию пролиферации фиброгенных клеток или активации их гибели [48]. Тем не менее, большинство протоколов лекарственной терапии на стадии клинических испытаний не показали необходимой эффективности [48, 77, 115].

Возможной причиной подобных неудач являются недостаточно изученные механизмы взаимодействия клеток друг с другом в составе ткани, претерпевающей ремоделирование. Необходимо отметить, что экспериментальные модели, позволяющие одновременно учитывать вклад нескольких процессов, вовлеченных в репарацию и фиброз, практически отсутствуют. Поэтому большинство успешных в условиях in vitro подходов к регуляции фиброза являются мономеханистическими, т.е. основанных на результатах исследований роли одного типа клеток или конкретной молекулы. Такой подход, к сожалению, не позволяет учитывать, что полученные результаты являются только одним звеном в комплексном процессе фиброгенеза [30, 164, 211]. Примером является лекарственный препарат под названием эверолимус (Everolimus) - ингибитор mTOR, регулирующий клеточный цикл и выживание клеток. Эверолимус показал успешные результаты в преклинических исследованиях. Однако в ходе клинических испытаний было установлено, что этот препарат оказался не только не эффективен в терапии идиопатического фиброза легких, но и напротив, способствовал более быстрой прогрессии заболевания [131].

Гистоморфологическое сходство течения фиброза в разных тканях, дает основания для поиска единого терапевтического механизма и разработки лекарств, которые будут эффективными для лечения фиброза независимо от его локализации [213]. Исходя из полученных данных, в качестве подхода для терапии фиброзных заболеваний была выдвинута клеточная терапия [176]. В частности, изучение и использование МСК в качестве агентов противофибротической защиты представляется переспективным подходом (рис. 2).

Рис. 2 Основные механизмы фиброзирования тканей и возможная роль МСК в данном процессе.

2. Процессы фенотипической пластичности в фиброзе

Центральным эффекторным звеном развития фиброза во всех тканях считаются миофибробласты. Изначально миофибробласты были описаны как клетки, обладающие морфологическими признаками фибробласта и

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Басалова Наталия Андреевна, 2022 год

Список литературы

1. Илькович М. М., Новикова Л. Н., Илькович Ю. М. Противоречия в представлениях об интерстициальных заболеваниях легких // Пульмонология. 2013. № 88 (8). C. 41-45.

2. Капустина В. А., Овчаренко С. И. Эволюция классификации интерстициальных заболеваний легких. Что нового дает пересмотр классификации 2012 г. // Пульмонология. 2013. № 3 (15).

3. Abdel Aziz M. T. [и др.]. Therapeutic potential of bone marrow-derived mesenchymal stem cells on experimental liver fibrosis // Clinical Biochemistry. 2007. № 12 (40). C. 893-899.

4. Abe R. [и др.]. Peripheral Blood Fibrocytes: Differentiation Pathway and Migration to Wound Sites // The Journal of Immunology. 2001. № 12 (166). C. 7556-7562.

5. Abu El-Asrar A. M. [и др.]. Myofibroblasts in proliferative diabetic retinopathy can originate from infiltrating fibrocytes and through endothelial-to-mesenchymal transition (EndoMT) // Experimental Eye Research. 2015. (132). C. 179-189.

6. Acharya P. S. [и др.]. Fibroblast activation protein: a serine protease expressed at the remodeling interface in idiopathic pulmonary fibrosis // Human Pathology. 2006. № 3 (37). C. 352-360.

7. Adamson I. Y., Bowden D. H. The pathogenesis of bleomycin-induced pulmonary fibrosis in mice // The American Journal of Pathology. 1974. № 2 (77). C. 185-197.

8. Andrews J. P. [и др.]. Keloids: The paradigm of skin fibrosis — Pathomechanisms and treatment // Matrix Biology. 2016. (51). C. 37-46.

9. Ankrum J. A., Ong J. F., Karp J. M. Mesenchymal stem cells: immune evasive, not immune privileged // Nature Biotechnology. 2014. № 3 (32). C. 252-260.

127

10. Apte M. V. [и др.]. Periacinar stellate shaped cells in rat pancreas: identification, isolation, and culture // Gut. 1998. № 1 (43). C. 128-133.

11. Arslan F. [и др.]. Mesenchymal stem cell-derived exosomes increase ATP levels, decrease oxidative stress and activate PI3K/Akt pathway to enhance myocardial viability and prevent adverse remodeling after myocardial ischemia/reperfusion injury // Stem Cell Research. 2013. № 3 (10). C. 301-312.

12. Atluri S., Manchikanti L., Hirsch J. A. Expanded Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells (UC-MSCs) as a Therapeutic Strategy in Managing Critically Ill COVID-19 Patients: The Case for Compassionate Use // Pain Physician. 2020. № 2 (23). C. E71-E83.

13. Averyanov A. [и др.]. First-in-human high-cumulative-dose stem cell therapy in idiopathic pulmonary fibrosis with rapid lung function decline // Stem Cells Translational Medicine. 2020. № 1 (9). C. 6-16.

14. B. Moore B. [и др.]. Animal Models of Fibrotic Lung Disease // American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 2013. № 2 (49). C. 167-179.

15. Baglio S. R. [и др.]. Human bone marrow- and adipose-mesenchymal stem cells secrete exosomes enriched in distinctive miRNA and tRNA species // Stem Cell Research & Therapy. 2015. № 1 (6). C. 127.

16. Barnes H. [и др.]. Silica-associated lung disease: An old-world exposure in modern industries // Respirology. 2019. № 12 (24). C. 1165-1175.

17. Basalova N. [и др.]. Secretome of Mesenchymal Stromal Cells Prevents Myofibroblasts Differentiation by Transferring Fibrosis-Associated microRNAs within Extracellular Vesicles // Cells. 2020. № 5 (9). C. 1-20. IF (WoS, Scopus) = 6.60 (1,25/1,05)*

* Здесь и далее: в скобках приведен объем собственных публикации автора в условных печатных листах и вклад автора в условных печатных листах.

18. Beltrami C. A. [h gp.]. Structural basis of end-stage failure in ischemic cardiomyopathy in humans. // Circulation. 1994. № 1 (89). C. 151-163.

19. Bhattacharyya S. [h gp.]. Fibronectin EDA Promotes Chronic Cutaneous Fibrosis Through Toll-Like Receptor Signaling // Science Translational Medicine. 2014. № 232 (6).

20. Bijkerk R. [h gp.]. MicroRNA-155 Functions as a Negative Regulator of RhoA Signaling in TGF-ß-induced Endothelial to Mesenchymal Transition // MicroRNA e. 2012. № 1 (1). C. 2-10.

21. Bochaton-Piallat M.-L., Gabbiani G., Hinz B. The myofibroblast in wound healing and fibrosis: answered and unanswered questions // F1000Research. 2016. (5). C. 752.

22. Bos S. [h gp.]. Survival in adult lung transplantation: where are we in 2020? // Current Opinion in Organ Transplantation. 2020. № 3 (25). C. 268-273.

23. Broughton G., Janis J. E., Attinger C. E. The Basic Science of Wound Healing: // Plastic and Reconstructive Surgery. 2006. № SUPPLEMENT (117). C. 12S-34S.

24. Caplan A. I. MSCs: The Sentinel and Safe-Guards of Injury: MSCs AS INJURY RESPONDERS // Journal of Cellular Physiology. 2016. № 7 (231). C. 1413-1416.

25. Cella L. [h gp.]. Modeling the risk of radiation-induced lung fibrosis: Irradiated heart tissue is as important as irradiated lung // Radiotherapy and Oncology. 2015. № 1 (117). C. 36-43.

26. Chang A. C. Y. [h gp.]. Notch Initiates the Endothelial-to-Mesenchymal Transition in the Atrioventricular Canal through Autocrine Activation of Soluble Guanylyl Cyclase // Developmental Cell. 2011. № 2 (21). C. 288-300.

27. Chang Y. S. [h gp.]. Mesenchymal Stem Cells for Bronchopulmonary Dysplasia: Phase 1 Dose-Escalation Clinical Trial // The Journal of Pediatrics. 2014. № 5 (164). C. 966-972.e6.

28. Chaudhary N. I., Schnapp A., Park J. E. Pharmacologic Differentiation of Inflammation and Fibrosis in the Rat Bleomycin Model // American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 2006. № 7 (173). C. 769-776.

29. Chen T. S. [h gp.]. Mesenchymal stem cell secretes microparticles enriched in pre-microRNAs // Nucleic Acids Research. 2010. № 1 (38). C. 215-224.

30. Chen X. [h gp.]. Inhibition of Wnt/p-catenin signaling suppresses bleomycin-induced pulmonary fibrosis by attenuating the expression of TGF-P1 and FGF-2 // Experimental and Molecular Pathology. 2016. № 1 (101). C. 22-30.

31. Chen Y. [h gp.]. Osteopontin promotes collagen I synthesis in hepatic stellate cells by miRNA-129-5p inhibition // Experimental Cell Research. 2018. № 2 (362). C. 343-348.

32. Cheng R. [h gp.]. MicroRNA-98 inhibits TGF-pi-induced differentiation and collagen production of cardiac fibroblasts by targeting TGFBR1 // Human Cell. 2017. № 3 (30). C. 192-200.

33. Choi D.-S. [h gp.]. Proteomics of extracellular vesicles: Exosomes and ectosomes: PROTEOMICS OF EXTRACELLULAR VESICLES // Mass Spectrometry Reviews. 2015. № 4 (34). C. 474-490.

34. Christensen P. J. [h gp.]. Induction of Lung Fibrosis in the Mouse by Intratracheal Instillation of Fluorescein Isothiocyanate Is Not T-Cell-Dependent // The American Journal of Pathology. 1999. № 5 (155). C. 1773-1779.

35. Chu M. [h gp.]. In Review. Nebulization Therapy for COVID-19 Pneumonia with Embryonic Mesenchymal Stem Cells-derived Exosomes. 2020.

36. Chung M. P. [h gp.]. Role of Repeated Lung Injury and Genetic Background in Bleomycin-Induced Fibrosis // American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 2003. № 3 (29). C. 375-380.

37. Claussen C. A., Long E. C. Nucleic Acid Recognition by Metal Complexes of Bleomycin // Chemical Reviews. 1999. № 9 (99). C. 2797-2816.

38. Cloer C. [h gp.]. Mesenchymal stromal cell-derived extracellular vesicles reduce lung inflammation and damage in nonclinical acute lung injury: Implications for COVID-19 // PLOS ONE. 2021. № 11 (16). C. e0259732.

39. Cushing L. [h gp.]. miR-29 Is a Major Regulator of Genes Associated with Pulmonary Fibrosis // American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 2011. № 2 (45). C. 287-294.

40. Cushing L., Kuang P., Lu J. The role of miR-29 in pulmonary fibrosis // Biochemistry and Cell Biology = Biochimie Et Biologie Cellulaire. 2015. № 2 (93). C. 109-118.

41. Dai W. [h gp.]. Allogeneic Mesenchymal Stem Cell Transplantation in Postinfarcted Rat Myocardium: Short- and Long-Term Effects // Circulation. 2005. № 2 (112). C. 214-223.

42. Dakhlallah D. [h gp.]. Epigenetic regulation of miR-17~92 contributes to the pathogenesis of pulmonary fibrosis // American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 2013. № 4 (187). C. 397-405.

43. Datta S. R. [h gp.]. 14-3-3 proteins and survival kinases cooperate to inactivate BAD by BH3 domain phosphorylation // Molecular Cell. 2000. № 1 (6). C. 41-51.

44. Degryse A. L. [h gp.]. Repetitive intratracheal bleomycin models several features of idiopathic pulmonary fibrosis // American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 2010. № 4 (299). C. L442-L452.

45. Desai V. D., Hsia H. C., Schwarzbauer J. E. Reversible Modulation of Myofibroblast Differentiation in Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells // PLoS ONE. 2014. № 1 (9). C. e86865.

46. Detlefsen S. [h gp.]. Pancreatic fibrosis associated with age and ductal papillary hyperplasia // Virchows Archiv. 2005. № 5 (447). C. 800-805.

47. Dinh P.-U. C. [h gp.]. Inhalation of lung spheroid cell secretome and exosomes promotes lung repair in pulmonary fibrosis // Nature Communications. 2020. № 1 (11). C. 1064.

48. Distler J. H. W. [h gp.]. Review: Frontiers of Antifibrotic Therapy in Systemic Sclerosis: ANTIFIBROTIC THERAPY IN SSc // Arthritis & Rheumatology. 2017. № 2 (69). C. 257-267.

49. Dugina V. [h gp.]. Focal adhesion features during myofibroblasts differentiation are controlled by intracellular and extracellular factors // Journal of Cell Science. 2001. № Pt 18 (114). C. 3285-3296.

50. Eble J., Niland S. The Extracellular Matrix of Blood Vessels // Current Pharmaceutical Design. 2009. № 12 (15). C. 1385-1400.

51. El Agha E. [h gp.]. Two-Way Conversion between Lipogenic and Myogenic Fibroblastic Phenotypes Marks the Progression and Resolution of Lung Fibrosis // Cell Stem Cell. 2017. № 2 (20). C. 261-273.e3.

52. EL Andaloussi S. [h gp.]. Extracellular vesicles: biology and emerging therapeutic opportunities // Nature Reviews Drug Discovery. 2013. № 5 (12). C. 347-357.

53. Eldred J. A. [h gp.]. MMP2 Activity is Critical for TGFp2-Induced Matrix Contraction—Implications for Fibrosis // Investigative Opthalmology & Visual Science. 2012. № 7 (53). C. 4085.

54. Eming S. A., Martin P., Tomic-Canic M. Wound repair and regeneration: Mechanisms, signaling, and translation // Science Translational Medicine. 2014. № 265 (6).

55. English K. [h gp.]. IFN-y and TNF-a differentially regulate immunomodulation by murine mesenchymal stem cells // Immunology Letters. 2007. № 2 (110). C. 91-100.

56. Enoch S., Leaper D. J. Basic science of wound healing // Surgery (Oxford). 2008. № 2 (26). C. 31-37.

57. Epstein Shochet G. [h gp.]. Fibroblast paracrine TNF-a signaling elevates integrin A5 expression in idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) // Respiratory Research. 2017. № 1 (18). C. 122.

58. Eremichev R. [h gp.]. Scar-Free Healing of Endometrium: Tissue-Specific Program of Stromal Cells and Its Induction by Soluble Factors Produced After Damage // Frontiers in Cell and Developmental Biology. 2021. (9). C. C. 1-17. IF (WoS, Scopus) = 6.684 (1,06/0,21).

59. Evanko S. P. [h gp.]. Hyaluronan Controls the Deposition of Fibronectin and Collagen and Modulates TGF-P1 Induction of Lung Myofibroblasts // Matrix Biology. 2015. (42). C. 74-92.

60. Falke L. L. [h gp.]. Diverse origins of the myofibroblast—implications for kidney fibrosis // Nature Reviews Nephrology. 2015. № 4 (11). C. 233-244.

61. Fang S. [h gp.]. Umbilical Cord-Derived Mesenchymal Stem Cell-Derived Exosomal MicroRNAs Suppress Myofibroblast Differentiation by Inhibiting the Transforming Growth Factor-p/SMAD2 Pathway During Wound Healing // Stem Cells Translational Medicine. 2016. № 10 (5). C. 1425-1439.

62. Fang S.-B. [h gp.]. Small extracellular vesicles derived from human MSCs prevent allergic airway inflammation via immunomodulation on pulmonary macrophages // Cell Death & Disease. 2020. № 6 (11). C. 409.

63. Fang Y. [h gp.]. miR-29c is downregulated in renal interstitial fibrosis in humans and rats and restored by HIF-a activation // American Journal of Physiology-Renal Physiology. 2013. № 10 (304). C. F1274-F1282.

64. Ferguson S. W. [h gp.]. The microRNA regulatory landscape of MSC-derived exosomes: a systems view // Scientific Reports. 2018. № 1 (8). C. 1419.

65. Fleischman R. W. [h gp.]. Bleomycin-induced interstitial pneumonia in dogs // Thorax. 1971. № 6 (26). C. 675-682.

66. Folkman J., D'Amore P. A. Blood Vessel Formation: What Is Its Molecular Basis? // Cell. 1996. № 7 (87). C. 1153-1155.

67. Follonier Castella L. [h gp.]. Regulation of myofibroblast activities: Calcium pulls some strings behind the scene // Experimental Cell Research. 2010. № 15 (316). C. 2390-2401.

68. François M. [h gp.]. Mesenchymal stromal cells cross-present soluble exogenous antigens as part of their antigen-presenting cell properties // Blood. 2009. № 13 (114). C. 2632-2638.

69. Fu Y. [h gp.]. Differential Regulation of Transforming Growth Factor p Signaling Pathways by Notch in Human Endothelial Cells // Journal of Biological Chemistry. 2009. № 29 (284). C. 19452-19462.

70. Fubini B., Hubbard A. Reactive oxygen species (ROS) and reactive nitrogen species (RNS) generation by silica in inflammation and fibrosis // Free Radical Biology and Medicine. 2003. № 12 (34). C. 1507-1516.

71. Gabbiani G. The biology of the myofibroblast // Kidney International. 1992. № 3 (41). C. 530-532.

72. Gabbiani G., Majno G. Dupuytren's Contracture: Fibroblast Contraction? 1972. № 1 (66). C. 16.

73. Gallant-Behm C. L. [h gp.]. A MicroRNA-29 Mimic (Remlarsen) Represses Extracellular Matrix Expression and Fibroplasia in the Skin // Journal of Investigative Dermatology. 2019. № 5 (139). C. 1073-1081.

74. Gallini R. [h gp.]. PDGF-A and PDGF-B induces cardiac fibrosis in transgenic mice // Experimental Cell Research. 2016. № 2 (349). C. 282-290.

75. Gatti S. [h gp.]. Microvesicles derived from human adult mesenchymal stem cells protect against ischaemia-reperfusion-induced acute and chronic kidney injury // Nephrology Dialysis Transplantation. 2011. № 5 (26). C. 1474-1483.

76. Gaurav R. [h gp.]. Bcl-2 Overexpression in Fibroblasts Promotes Persistent Fibrosis in a Normally Resolving Model of Pulmonary Fibrosis American Thoracic Society, 2019.C. A4024-A4024.

77. Ghosh A. K., Quaggin S. E., Vaughan D. E. Molecular basis of organ fibrosis: Potential therapeutic approaches // Experimental Biology and Medicine. 2013. № 5 (238). C. 461-481.

78. Gnecchi M. [h gp.]. Early Beneficial Effects of Bone Marrow-Derived Mesenchymal Stem Cells Overexpressing Akt on Cardiac Metabolism After Myocardial Infarction // Stem Cells. 2009. № 4 (27). C. 971-979.

79. Golchin A., Seyedjafari E., Ardeshirylajimi A. Mesenchymal Stem Cell Therapy for COVID-19: Present or Future // Stem Cell Reviews and Reports. 2020. № 3 (16). C. 427-433.

80. Gong M. [h gp.]. Mesenchymal stem cells release exosomes that transfer miRNAs to endothelial cells and promote angiogenesis // Oncotarget. 2017. № 28 (8). C. 45200-45212.

81. Graf K., Schaefer-Graf U. M. Is Smad3 the Key to Inflammation and Fibrosis in Hypertensive Heart Disease? // Hypertension. 2010. № 5 (55). C. 1088-1089.

82. Gressner A. M. Transdifferentiation of hepatic stellate cells (Ito cells) to myofibroblasts: a key event in hepatic fibrogenesis // Kidney International. Supplement. 1996. (54). C. S39-45.

83. Grigorieva O. A. [h gp.]. Mechanisms of Endothelial-to-Mesenchymal Transition Induction by Extracellular Matrix Components in Pulmonary Fibrosis // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. 2021. № 4 (171). C. 523-531. IF (WoS, Scopus) = 0.804 (0,562/0,24)

84. Guo J. [h gp.]. Lipopolysaccharide activated TLR4/NF-kB signaling pathway of fibroblasts from uterine fibroids // International Journal of Clinical and Experimental Pathology. 2015. № 9 (8). C. 10014-10025.

85. Harrell C. [h gp.]. Molecular Mechanisms Responsible for Therapeutic Potential of Mesenchymal Stem Cell-Derived Secretome // Cells. 2019. № 5 (8). C. 467.

86. Hasebe T. [h gp.]. p53 expression in tumor-stromal fibroblasts forming and not forming fibrotic foci in invasive ductal carcinoma of the breast // Modern Pathology. 2010. № 5 (23). C. 662-672.

87. Hashimoto N. [h gp.]. Endothelial-Mesenchymal Transition in Bleomycin-Induced Pulmonary Fibrosis // American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 2010. № 2 (43). C. 161-172.

88. Hayashi F., Means T. K., Luster A. D. Toll-like receptors stimulate human neutrophil function // Blood. 2003. № 7 (102). C. 2660-2669.

89. Hecht S. M. Bleomycin: New Perspectives on the Mechanism of Action // Journal of Natural Products. 2000. № 1 (63). C. 158-168.

90. Herrera J. [h gp.]. Registration of the extracellular matrix components constituting the fibroblastic focus in idiopathic pulmonary fibrosis // JCI Insight. 2019. № 1 (4). C. e125185.

91. Herrera J., Henke C. A., Bitterman P. B. Extracellular matrix as a driver of progressive fibrosis // Journal of Clinical Investigation. 2018. № 1 (128). C. 45-53.

92. Hilberg F. [h gp.]. Triple Angiokinase Inhibitor Nintedanib Directly Inhibits Tumor Cell Growth and Induces Tumor Shrinkage via Blocking Oncogenic Receptor Tyrosine Kinases // Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 2018. № 3 (364). C. 494-503.

93. Hinek A. Adhesion molecules and cell surface receptors in the heart transplant-associated arteriosclerosis // Folia Histochemica Et Cytobiologica. 1996. № 1 (34). C. 3-19.

94. Hinz B. [h gp.]. Maturation in Myofibroblasts^ // Molecular Biology of the Cell. 2003. (14). C. 12.

95. Hinz B. Formation and Function of the Myofibroblast during Tissue Repair // Journal of Investigative Dermatology. 2007. № 3 (127). C. 526-537.

96. Hofer H. R., Tuan R. S. Secreted trophic factors of mesenchymal stem cells support neurovascular and musculoskeletal therapies // Stem Cell Research & Therapy. 2016. № 1 (7). C. 131.

97. Hoogduijn M. J. [h gp.]. The immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells and their use for immunotherapy // International Immunopharmacology. 2010. № 12 (10). C. 1496-1500.

98. Hsu H.-S. [h gp.]. Involvement of ER stress, PI3K/AKT activation, and lung fibroblast proliferation in bleomycin-induced pulmonary fibrosis // Scientific Reports. 2017. № 1 (7). C. 14272.

99. Huang X. [h gp.]. Matrix Stiffness-Induced Myofibroblast Differentiation Is Mediated by Intrinsic Mechanotransduction // American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 2012. № 3 (47). C. 340-348.

100. Hubner R.-H. [h gp.]. Standardized quantification of pulmonary fibrosis in histological samples. // BioTechniques. 2008. № 4 (44). C. 507-11, 514-7.

101. Humphreys B. D. [h gp.]. Fate Tracing Reveals the Pericyte and Not Epithelial Origin of Myofibroblasts in Kidney Fibrosis // The American Journal of Pathology. 2010. № 1 (176). C. 85-97.

102. Jellema R. K. [h gp.]. Mesenchymal Stem Cells Induce T-Cell Tolerance and Protect the Preterm Brain after Global Hypoxia-Ischemia // PLoS ONE. 2013. № 8 (8). C. e73031.

103. Jin H. [h gp.]. Radiation-Induced Lung Fibrosis: Preclinical Animal Models and Therapeutic Strategies // Cancers. 2020. № 6 (12). C. 1561.

104. Johnson A., DiPietro L. A. Apoptosis and angiogenesis: an evolving mechanism for fibrosis // The FASEB Journal. 2013. № 10 (27). C. 3893-3901.

105. Johnstone R. M. [h gp.]. Vesicle formation during reticulocyte maturation. Association of plasma membrane activities with released vesicles (exosomes). // Journal of Biological Chemistry. 1987. № 19 (262). C. 9412-9420.

106. Kalinina N. [h gp.]. Characterization of secretomes provides evidence for adipose-derived mesenchymal stromal cells subtypes // Stem Cell Research & Therapy. 2015. № 1 (6). C. 221.

107. Kang J. S., Liu C., Derynck R. New regulatory mechanisms of TGF-P receptor function // Trends in Cell Biology. 2009. № 8 (19). C. 385-394.

108. Kanisicak O. [h gp.]. Genetic lineage tracing defines myofibroblast origin and function in the injured heart // Nature Communications. 2016. № 1 (7). C. 12260.

109. Kato K. [h gp.]. Impaired Myofibroblast Dedifferentiation Contributes to Nonresolving Fibrosis in Aging // American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 2020. № 5 (62). C. 633-644.

110. Kendall R. T., Feghali-Bostwick C. A. Fibroblasts in fibrosis: novel roles and mediators // Frontiers in Pharmacology. 2014. (5).

111. Khalil N. TGF-P: from latent to active // Microbes and Infection. 1999. № 15 (1). C. 1255-1263.

112. King T. E. [h gp.]. A Phase 3 Trial of Pirfenidone in Patients with Idiopathic Pulmonary Fibrosis // New England Journal of Medicine. 2014. № 22 (370). C. 2083-2092.

113. Kis K., Liu X., Hagood J. S. Myofibroblast differentiation and survival in fibrotic disease // Expert Reviews in Molecular Medicine. 2011. (13). C. e27.

114. Knudsen L., Ruppert C., Ochs M. Tissue remodelling in pulmonary fibrosis // Cell and Tissue Research. 2017. № 3 (367). C. 607-626.

115. Kolb M., Bonella F., Wollin L. Therapeutic targets in idiopathic pulmonary fibrosis // Respiratory Medicine. 2017. (131). C. 49-57.

116. Kolodsick J. E. [h gp.]. Protection from Fluorescein Isothiocyanate-Induced Fibrosis in IL-13-Deficient, but Not IL-4-Deficient, Mice Results from Impaired Collagen Synthesis by Fibroblasts // The Journal of Immunology. 2004. № 7 (172). C. 4068-4076.

117. Kuhn C., McDonald J. A. The roles of the myofibroblast in idiopathic pulmonary fibrosis. Ultrastructural and immunohistochemical features of sites of active extracellular matrix synthesis // The American Journal of Pathology. 1991. № 5 (138). C. 1257-1265.

118. Lai R. C. [h gp.]. Exosome secreted by MSC reduces myocardial ischemia/reperfusion injury // Stem Cell Research. 2010. № 3 (4). C. 214-222.

119. Landells L. J. [h gp.]. NICE guidance on pirfenidone for treating idiopathic pulmonary fibrosis // The Lancet Respiratory Medicine. 2013. № 3 (1). C. 191192.

120. Lee Y., EL Andaloussi S., Wood M. J. A. Exosomes and microvesicles: extracellular vesicles for genetic information transfer and gene therapy // Human Molecular Genetics. 2012. № R1 (21). C. R125-R134.

121. Lemos D. R., Duffield J. S. Tissue-resident mesenchymal stromal cells: Implications for tissue-specific antifibrotic therapies // Science Translational Medicine. 2018. № 426 (10). C. eaan5174.

122. Li C. X. [h gp.]. MicroRNA-21 preserves the fibrotic mechanical memory of mesenchymal stem cells // Nature Materials. 2017. № 3 (16). C. 379-389.

123. Li Y. [h gp.]. Severe lung fibrosis requires an invasive fibroblast phenotype regulated by hyaluronan and CD44 // Journal of Experimental Medicine. 2011. № 7 (208). C. 1459-1471.

124. Liguori T. T. A. [h gp.]. Fibroblast growth factor-2, but not the adipose tissue-derived stromal cells secretome, inhibits TGF-01-induced differentiation of human cardiac fibroblasts into myofibroblasts // Scientific Reports. 2018. № 1 (8). C. 16633.

125. Liu G. [h gp.]. miR-21 mediates fibrogenic activation of pulmonary fibroblasts and lung fibrosis // The Journal of Experimental Medicine. 2010. № 8 (207). C. 1589-1597.

126. Liu Z. [h gp.]. MicroRNA-146a modulates TGF-P 1-induced phenotypic differentiation in human dermal fibroblasts by targeting SMAD4 // Archives of Dermatological Research. 2012. № 3 (304). C. 195-202.

127. Lopatina T. [h gp.]. Platelet-derived growth factor regulates the secretion of extracellular vesicles by adipose mesenchymal stem cells and enhances their angiogenic potential // Cell Communication and Signaling. 2014. № 1 (12). C. 26.

128. Lopez-Novoa J. M., Nieto M. A. Inflammation and EMT: an alliance towards organ fibrosis and cancer progression // EMBO Molecular Medicine. 2009. № 6-7 (1). C. 303-314.

129. Maeda M. [h gp.]. Dysregulation of the immune system caused by silica and asbestos // Journal of Immunotoxicology. 2010. № 4 (7). C. 268-278.

130. Mak K. M. [h gp.]. Liver Fibrosis in Elderly Cadavers: Localization of Collagen Types I, III, and IV, a-Smooth Muscle Actin, and Elastic Fibers // The Anatomical Record: Advances in Integrative Anatomy and Evolutionary Biology. 2012. № 7 (295). C. 1159-1167.

131. Malouf M. A. [h gp.]. An investigator-driven study of everolimus in surgical lung biopsy confirmed idiopathic pulmonary fibrosis: Everolimus in IPF // Respirology. 2011. № 5 (16). C. 776-783.

132. Mansouri N. [h gp.]. Mesenchymal stromal cell exosomes prevent and revert experimental pulmonary fibrosis through modulation of monocyte phenotypes // JCI Insight. 2019. № 21 (4). C. e128060.

133. Mao Y.-Q. Autophagy: A new therapeutic target for liver fibrosis // World Journal of Hepatology. 2015. № 16 (7). C. 1982.

141

134. Mark S. C. van der, Hoek R. A. S., Hellemons M. E. Developments in lung transplantation over the past decade // European Respiratory Review. 2020. № 157 (29). C. 190132.

135. Martin F. T. [h gp.]. Potential role of mesenchymal stem cells (MSCs) in the breast tumour microenvironment: stimulation of epithelial to mesenchymal transition (EMT) // Breast Cancer Research and Treatment. 2010. № 2 (124). C. 317-326.

136. Martinez F. O., Gordon S. The M1 and M2 paradigm of macrophage activation: time for reassessment // F1000Prime Reports. 2014. (6).

137. Masszi A. [h gp.]. Integrity of Cell-Cell Contacts Is a Critical Regulator of TGF-01-Induced Epithelial-to-Myofibroblast Transition // The American Journal of Pathology. 2004. № 6 (165). C. 1955-1967.

138. Merino-González C. [h gp.]. Mesenchymal Stem Cell-Derived Extracellular Vesicles Promote Angiogenesis: Potencial Clinical Application // Frontiers in Physiology. 2016. (7).

139. Mias C. [h gp.]. Ex Vivo Pretreatment with Melatonin Improves Survival, Proangiogenic/Mitogenic Activity, and Efficiency of Mesenchymal Stem Cells Injected into Ischemic Kidney // STEM CELLS. 2008. № 7 (26). C. 1749-1757.

140. Moeller A. [h gp.]. The bleomycin animal model: A useful tool to investigate treatment options for idiopathic pulmonary fibrosis? // The International Journal of Biochemistry & Cell Biology. 2008. № 3 (40). C. 362-382.

141. Moghadasi S. [h gp.]. A paradigm shift in cell-free approach: the emerging role of MSCs-derived exosomes in regenerative medicine // Journal of Translational Medicine. 2021. № 1 (19). C. 302.

142. Montgomery R. L. [h gp.]. Micro RNA mimicry blocks pulmonary fibrosis // EMBO Molecular Medicine. 2014. № 10 (6). C. 1347-1356.

142

143. Nakayama K. H., Hou L., Huang N. F. Role of Extracellular Matrix Signaling Cues in Modulating Cell Fate Commitment for Cardiovascular Tissue Engineering // Advanced Healthcare Materials. 2014. № 5 (3). C. 628-641.

144. Nathan C. Neutrophils and immunity: challenges and opportunities // Nature Reviews Immunology. 2006. № 3 (6). C. 173-182.

145. Neglia J. P. [h gp.]. The Risk of Cancer among Patients with Cystic Fibrosis // New England Journal of Medicine. 1995. № 8 (332). C. 494-499.

146. Noble P. W. [h gp.]. Pirfenidone in patients with idiopathic pulmonary fibrosis (CAPACITY): two randomised trials // The Lancet. 2011. № 9779 (377). C. 1760-1769.

147. Noiseux N. [h gp.]. Mesenchymal stem cells overexpressing Akt dramatically repair infarcted myocardium and improve cardiac function despite infrequent cellular fusion or differentiation // Molecular Therapy. 2006. № 6 (14). C. 840850.

148. Olsson A.-K. [h gp.]. VEGF receptor signalling ? in control of vascular function // Nature Reviews Molecular Cell Biology. 2006. № 5 (7). C. 359-371.

149. Pakshir P., Hinz B. The big five in fibrosis: Macrophages, myofibroblasts, matrix, mechanics, and miscommunication // Matrix Biology. 2018. (68-69). C. 81-93.

150. Pang P. [h gp.]. Human vascular progenitor cells derived from renal arteries are endothelial-like and assist in the repair of injured renal capillary networks // Kidney International. 2017. № 1 (91). C. 129-143.

151. Park K.-S. [h gp.]. Enhancement of therapeutic potential of mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles // Stem Cell Research & Therapy. 2019. № 1 (10). C. 288.

152. Pauluhn J. [h gp.]. Rat model of lung fibrosis: comparison of functional, biochemical, and histopathological changes 4 months after single irradiation of the right hemithorax // Toxicology. 2001. № 3 (161). C. 153-163.

153. Peabody J. [h gp.]. Mucus matters: Ferrets demonstrate sustained fibrosis and mucociliary decrement following bleomycin-induced pulmonary fibrosis European Respiratory Society, 2018.C. PA4807.

154. Peng R. [h gp.]. Bleomycin Induces Molecular Changes Directly Relevant to Idiopathic Pulmonary Fibrosis: A Model for "Active" Disease // PLoS ONE. 2013. № 4 (8). C. e59348.

155. Pérez-Tamayo R. Cirrhosis of the liver: a reversible disease? // Pathology Annual. 1979. (14 Pt 2). C. 183-213.

156. Phinney D. G. [h gp.]. Mesenchymal stem cells use extracellular vesicles to outsource mitophagy and shuttle microRNAs // Nature Communications. 2015. № 1 (6). C. 8472.

157. Piera-Velazquez S., Mendoza F., Jimenez S. Endothelial to Mesenchymal Transition (EndoMT) in the Pathogenesis of Human Fibrotic Diseases // Journal of Clinical Medicine. 2016. № 4 (5). C. 45.

158. Piersma B., Bank R. A., Boersema M. Signaling in Fibrosis: TGF-ß, WNT, and YAP/TAZ Converge // Frontiers in Medicine. 2015. (2).

159. Pinto M. T. [h gp.]. Endothelial Mesenchymal Transition: Comparative Analysis of Different Induction Methods // Biological Procedures Online. 2016. № 1 (18). C. 10.

160. Popova E. N., Ponomarev A. B., Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University), Moscow, Russia Progressive pulmonary fibrosis during a pandemic: assessment of risk factors and modern approaches to treatment // Clinical review for general practice. 2021. № 1 (2). C. 6-11.

144

161. Powell D. W. [h gp.]. Myofibroblasts. I. Paracrine cells important in health and disease // American Journal of Physiology-Cell Physiology. 1999. № 1 (277). C. C1-C19.

162. Qiu G. [h gp.]. Functional proteins of mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles // Stem Cell Research & Therapy. 2019. № 1 (10). C. 359.

163. Rabani V. [h gp.]. Mesenchymal stem cell infusion therapy in a carbon tetrachloride-induced liver fibrosis model affects matrix metalloproteinase expression // Cell Biology International. 2010. № 6 (34). C. 601-605.

164. Rangarajan S. [h gp.]. Metformin reverses established lung fibrosis in a bleomycin model // Nature Medicine. 2018. № 8 (24). C. 1121-1127.

165. Rani S. [h gp.]. Mesenchymal Stem Cell-derived Extracellular Vesicles: Toward Cell-free Therapeutic Applications // Molecular Therapy. 2015. № 5 (23). C. 812-823.

166. Reinke J. M., Sorg H. Wound Repair and Regeneration // European Surgical Research. 2012. № 1 (49). C. 35-43.

167. Ren S. [h gp.]. LRP-6 is a coreceptor for multiple fibrogenic signaling pathways in pericytes and myofibroblasts that are inhibited by DKK-1 // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 2013. № 4 (110). C. 1440-1445.

168. Rockel J. S., Rabani R., Viswanathan S. Anti-fibrotic mechanisms of exogenously-expanded mesenchymal stromal cells for fibrotic diseases // Seminars in Cell & Developmental Biology. 2020. (101). C. 87-103.

169. Rubina K. [h gp.]. Adipose Stromal Cells Stimulate Angiogenesis via Promoting Progenitor Cell Differentiation, Secretion of Angiogenic Factors, and Enhancing Vessel Maturation // Tissue Engineering Part A. 2009. № 8 (15). C. 2039-2050.

170. Ryan J. M. [h gp.]. Interferon-y does not break, but promotes the immunosuppressive capacity of adult human mesenchymal stem cells // Clinical & Experimental Immunology. 2007. № 2 (149). C. 353-363.

171. Ryu B. [h gp.]. Anti-Inflammatory Effects of M-MSCs in DNCB-Induced Atopic Dermatitis Mice // Biomedicines. 2020. № 10 (8). C. 126-142

172. Sagaradze G. [h gp.]. Conditioned Medium from Human Mesenchymal Stromal Cells: Towards the Clinical Translation // International Journal of Molecular Sciences. 2019. № 7 (20). C. 1-16. IF (WoS, Scopus) = 5.542 (1/0,328).

173. Sagaradze G. [h gp.]. A magic kick for regeneration: role of mesenchymal stromal cell secretome in spermatogonial stem cell niche recovery // Stem Cell Research & Therapy. 2019. № 1 (10). C. 1-10. IF (Scopus) = 5.99 (0,625/0,27)

174. Sagaradze G. D. [h gp.]. Mesenchymal Stromal Cells as Critical Contributors to Tissue Regeneration // Frontiers in Cell and Developmental Biology. 2020. (8). C. 1-13. IF (Scopus) = 6.684 (0,8125/0,425)

175. Sahoo S. [h gp.]. Exosomes from human CD34(+) stem cells mediate their proangiogenic paracrine activity // Circulation Research. 2011. № 7 (109). C. 724728.

176. Sakaida I. [h gp.]. Transplantation of bone marrow cells reduces CCl 4 -induced liver fibrosis in mice // Hepatology. 2004. № 6 (40). C. 1304-1311.

177. Saunders W. B. [h gp.]. Coregulation of vascular tube stabilization by endothelial cell TIMP-2 and pericyte TIMP-3 // Journal of Cell Biology. 2006. № 1 (175). C. 179-191.

178. Scanlan M. J. [h gp.]. Molecular cloning of fibroblast activation protein alpha, a member of the serine protease family selectively expressed in stromal fibroblasts

of epithelial cancers. // Proceedings of the National Academy of Sciences. 1994. № 12 (91). C. 5657-5661.

179. Schmidt M. [h gp.]. Identification of Circulating Fibrocytes as Precursors of Bronchial Myofibroblasts in Asthma // The Journal of Immunology. 2003. № 1 (171). C. 380-389.

180. Schrimpf C. [h gp.]. Pericyte TIMP3 and ADAMTS1 Modulate Vascular Stability after Kidney Injury // Journal of the American Society of Nephrology. 2012. № 5 (23). C. 868-883.

181. Sengupta V. [h gp.]. Exosomes Derived from Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells as Treatment for Severe COVID-19 // Stem Cells and Development. 2020. № 12 (29). C. 747-754.

182. Shabbir A. [h gp.]. Mesenchymal Stem Cell Exosomes Induce Proliferation and Migration of Normal and Chronic Wound Fibroblasts, and Enhance Angiogenesis In Vitro // Stem Cells and Development. 2015. № 14 (24). C. 16351647.

183. Shentu T.-P. [h gp.]. Thy-1 dependent uptake of mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles blocks myofibroblastic differentiation // Scientific Reports. 2017. № 1 (7). C. 18052.

184. Sisa C. [h gp.]. Mesenchymal Stromal Cell Derived Extracellular Vesicles Reduce Hypoxia-Ischaemia Induced Perinatal Brain Injury // Frontiers in Physiology. 2019. (10). C. 282.

185. Snider G. L. [h gp.]. Chronic interstitial pulmonary fibrosis produced in hamsters by endotracheal bleomycin. Lung volumes, volume-pressure relations, carbon monoxide uptake, and arterial blood gas studied // The American Review of Respiratory Disease. 1978. № 2 (117). C. 289-297.

186. Steens J. [h gp.]. The vascular nature of lung-resident mesenchymal stem cells // Stem Cells Translational Medicine. 2021. № 1 (10). C. 128-143.

187. Strem B. M. [h gp.]. Multipotential differentiation of adipose tissue-derived stem cells // The Keio Journal of Medicine. 2005. № 3 (54). C. 132-141.

188. Stubbe JoAnne., Kozarich J. W. Mechanisms of bleomycin-induced DNA degradation // Chemical Reviews. 1987. № 5 (87). C. 1107-1136.

189. Tan C. Y. [h gp.]. Mesenchymal stem cell-derived exosomes promote hepatic regeneration in drug-induced liver injury models // Stem Cell Research & Therapy. 2014. № 3 (5). C. 76.

190. Tang O. [h gp.]. MiRNA-200b represses transforming growth factor-p1-induced EMT and fibronectin expression in kidney proximal tubular cells // American Journal of Physiology-Renal Physiology. 2013. № 10 (304). C. F1266-F1273.

191. Tang X.-D. [h gp.]. Mesenchymal Stem Cell Microvesicles Attenuate Acute Lung Injury in Mice Partly Mediated by Ang-1 mRNA // Stem Cells. 2017. № 7 (35). C. 1849-1859.

192. Tannenbaum J., Bennett B. T. Russell and Burch's 3Rs then and now: the need for clarity in definition and purpose // Journal of the American Association for Laboratory Animal Science: JAALAS. 2015. № 2 (54). C. 120-132.

193. Thannickal V. J. Evolving Concepts of Apoptosis in Idiopathic Pulmonary Fibrosis // Proceedings of the American Thoracic Society. 2006. № 4 (3). C. 350356.

194. Thrall R. S. [h gp.]. Bleomycin-induced pulmonary fibrosis in the rat: inhibition by indomethacin // The American Journal of Pathology. 1979. № 1 (95). C. 117-130.

195. Tillmanns J. [h gp.]. Fibroblast activation protein alpha expression identifies activated fibroblasts after myocardial infarction // Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 2015. (87). C. 194-203.

196. Umezawa H. [h gp.]. New antibiotics, bleomycin A and B // The Journal of Antibiotics. 1966. № 5 (19). C. 200-209.

197. Umezawa H. [h gp.]. Studies on bleomycin // Cancer. 1967. № 5 (20). C. 891-895.

198. Usuki J., Fukuda Y. Evolution of three patterns of intra-alveolar fibrosis produced by bleomycin in rats // Pathology International. 1995. № 8 (45). C. 552564.

199. Usunier B. [h gp.]. Management of Fibrosis: The Mesenchymal Stromal Cells Breakthrough // Stem Cells International. 2014. (2014). C. 1-26.

200. Venkatesan N. [h gp.]. Glycosyltransferases and Glycosaminoglycans in Bleomycin and Transforming Growth Factor-p1-Induced Pulmonary Fibrosis // American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 2014. № 3 (50). C. 583-594.

201. Verrecchia F., Mauviel A., Rossert J. Blocking Sp1 Transcription Factor Broadly Inhibits Extracellular Matrix Gene Expression In Vitro and In Vivo: Implications for the Treatment of Tissue Fibrosis // Journal of Investigative Dermatology. 2001. № 5 (116). C. 755-763.

202. Vizoso F. [h gp.]. Mesenchymal Stem Cell Secretome: Toward Cell-Free Therapeutic Strategies in Regenerative Medicine // International Journal of Molecular Sciences. 2017. № 9 (18). C. 1852.

203. Wall R. J., Shani M. Are animal models as good as we think? // Theriogenology. 2008. № 1 (69). C. 2-9.

204. Walraven M., Hinz B. Therapeutic approaches to control tissue repair and fibrosis: Extracellular matrix as a game changer // Matrix Biology. 2018. (71-72). C. 205-224.

205. Walsh S. L. F. [h gp.]. Relationship between fibroblastic foci profusion and high resolution CT morphology in fibrotic lung disease // BMC Medicine. 2015. № 1 (13). C. 241.

206. Wang X. [h gp.]. Mesenchymal stem cell-derived exosomes have altered microRNA profiles and induce osteogenic differentiation depending on the stage of differentiation // PLOS ONE. 2018. № 2 (13). C. e0193059.

207. Webber J. [h gp.]. Cancer Exosomes Trigger Fibroblast to Myofibroblast Differentiation // Cancer Research. 2010. № 23 (70). C. 9621-9630.

208. Weder B. [h gp.]. BCL2 Regulates Differentiation of Intestinal Fibroblasts // Inflammatory Bowel Diseases. 2018. № 9 (24). C. 1953-1966.

209. Weiss D. J. [h gp.]. A Placebo-Controlled, Randomized Trial of Mesenchymal Stem Cells in COPD // Chest. 2013. № 6 (143). C. 1590-1598.

210. Witte M. B., Barbul A. GENERAL PRINCIPLES OF WOUND HEALING // Surgical Clinics of North America. 1997. № 3 (77). C. 509-528.

211. Wuyts W. A. [h gp.]. Combination therapy: the future of management for idiopathic pulmonary fibrosis? // The Lancet. Respiratory Medicine. 2014. № 11 (2). C. 933-942.

212. Wynn T. A. Common and unique mechanisms regulate fibrosis in various fibroproliferative diseases // Journal of Clinical Investigation. 2007. № 3 (117). C. 524-529.

213. Wynn T. A., Ramalingam T. R. Mechanisms of fibrosis: therapeutic translation for fibrotic disease // Nature Medicine. 2012. № 7 (18). C. 1028-1040.

214. Xiao L. [h gp.]. MicroRNA-129-5p modulates epithelial-to-mesenchymal transition by targeting SIP1 and SOX4 during peritoneal dialysis // Laboratory Investigation. 2015. № 7 (95). C. 817-832.

215. Xin L. [h gp.]. Fibroblast Activation Protein-a as a Target in the Bench-to-Bedside Diagnosis and Treatment of Tumors: A Narrative Review // Frontiers in Oncology. 2021. (11). C. 648187.

216. Yanez-Mo M. [h gp.]. Biological properties of extracellular vesicles and their physiological functions // Journal of Extracellular Vesicles. 2015. № 1 (4). C. 27066.

217. Yang X. [h gp.]. Reversal of myofibroblast differentiation: A review // European Journal of Pharmacology. 2014. (734). C. 83-90.

218. Yoon Y., Friedman S., Lee Y. Antifibrotic Therapies: Where Are We Now? // Seminars in Liver Disease. 2016. № 01 (36). C. 087-098.

219. Zeisberg M., Kalluri R. Cellular Mechanisms of Tissue Fibrosis. 1. Common and organ-specific mechanisms associated with tissue fibrosis // American Journal of Physiology-Cell Physiology. 2013. № 3 (304). C. C216-C225.

220. Zha J. [h gp.]. Serine Phosphorylation of Death Agonist BAD in Response to Survival Factor Results in Binding to 14-3-3 Not BCL-XL // Cell. 1996. № 4 (87). C. 619-628.

221. Zhang H.-Y., Phan S. H. Inhibition of Myofibroblast Apoptosis by Transforming Growth Factor □ 1999. (21). C. 8.

222. Zheng G. [h gp.]. Treatment of acute respiratory distress syndrome with allogeneic adipose-derived mesenchymal stem cells: a randomized, placebo-controlled pilot study // Respiratory Research. 2014. № 1 (15). C. 39.

223. Zhou Q. [h gp.]. Preventing peritoneal membrane fibrosis in peritoneal dialysis patients // Kidney International. 2016. № 3 (90). C. 515-524.

224. Zimmermann H. W., Trautwein C., Tacke F. Functional Role of Monocytes and Macrophages for the Inflammatory Response in Acute Liver Injury // Frontiers in Physiology. 2012. (3).