Возрастные особенности регуляторного действия пептидов при пигментной дегенерации сетчатки (экспериментально-клиническое исследование) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.53, доктор медицинских наук Трофимова, Светлана Владиславовна

• Трофимова, Светлана Владиславовна
• доктор медицинских наук
• 2003

Оглавление диссертации доктор медицинских наук Трофимова, Светлана Владиславовна

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Возрастные особенности сетчатки

1.2. Современные тенденции в лечении ППАС.

1.3. Биологические эффекты пептидных биорегуляторов

1.4. Результаты экспериментального и клинического изучения пептидных биорегуляторов в офтальмологии

Глава 2. Объекты и методы исследования.

2.1. Объем и общая характеристика экспериментальных исследований.

2.1.1. Материалы экспериментального исследования на полипотентной эмбриональной ткани шпорцевых лягушек Xenopus Laevis.

2.1.2. Материалы экспериментального исследования на клеточной культуре сетчатки и пигментного эпителия крыс Wistar

2.1.3. Материалы экспериментального исследования в органотипической культуре сетчатки глаза эмбриона цыпленка и крыс Wistar разного возраста.

2.1.4. Материалы экспериментального исследования на крысах Campbell.

2.1.5. Материалы экспериментального исследования на старых крысах Campbell.

2.2. Объем и общая характеристика клинических исследований.

2.3. Методы статистической обработки результатов исследований.

Глава 3. Результаты экспериментальных исследований.

3.1.1. Исследование индукционной активности пептидных препаратов в отношении полипотентных эмбриональных клеток.

3.1.2. Результаты исследования индукционной активности ретиналамина в отношении полипотентных эмбриональных клеток

3.1.3. Результаты исследования индукционной активности эпиталона в отношении полипотентных эмбриональных клеток.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Возрастные особенности регуляторного действия пептидов при пигментной дегенерации сетчатки (экспериментально-клиническое исследование)»

Актуальность проблемы.

Старение - неизбежный процесс, характеризующийся нарушением физиологических функций и снижением адаптационных возможностей. Демографические изменения, которые произошли в последнее десятилетие, заставили все экономически развитые страны обратить более пристальное внимание на проблемы геронтологии и гериатрии. Согласно расчетам, основанным на долгосрочных прогнозах ООН динамики населения мира, численность людей старше 60 лет в 2000 г. составила 610 млн. человек, а к 2005 г. - превысит 1 млрд., что составит 15% от всего населения [Carey J.R., Judge D.S., 2001]. Поэтому решение вопросов, связанных со старением населения и возможностью продления периода трудоспособного возраста, занимает ведущее место в этих странах [Васина Г.В. и соавт., 1997; Пирожков С.И., 1998; Alho J.M., 1997].

Известно, что более 75% информации из внешнего мира человек получает с помощью органа зрения. Утрата или резкое снижение зрительных функций делает человека нетрудоспособным вне зависимости от возраста и физического состояния. У людей старше 65 лет сенсорные нарушения увеличиваются пропорционально возрасту и отрицательным образом влияют на качестве жизни пожилых людей [Игнатьев А.Н., 2002]. Причины возникновения слабовидения и слепоты разнообразны, но одно из первых мест занимает поражение сетчатой оболочки глаза [Даниличев В.Ф., 2000; Нероев В.В., 2000]. По данным ВОЗ 1999 г., в наступающем столетии дистрофические поражения сетчатки наряду с онкологическими заболеваниями, окажутся ведущей причиной, приводящей к инвалидности [Максимов И.Б., 2001].

Учитывая высокий удельный вес ретинальных дистрофий в структуре офтальмологической патологии и демографический скачок, который произошел в последнее десятилетие, можно предполагать значительное возрастание частоты инволюционных заболеваний сетчатки в последующие годы. Кроме того, для пожилых и старых людей характерно одновременное развитие 3-5 и более заболеваний, предраспологающих к множественным физическим, психическим и социальным проблемам. Поэтому потребность в лекарственных средствах в этом возрасте резко возрастает. Однако развивающийся в России с невиданной скоростью рынок препаратов не всегда может удовлетворить потребности в лекарственных средствах людей старшей возрастной группы [Астраханцева JI.3., 1972; Экономическая оценка эффективности лекарственной терапии (фармакоэкономический анализ), 2000; Донцов В.И. и соавт., 2002]. Кроме того, отсутствие достаточно эффективных способов лечения дистрофических заболеваний сетчатки делает эту проблему наиболее актуальной как для офтальмологии, так и для гериатрии [Офтальмогериатрия, 1982; Friedman N. J., 1998; Carr R.E., 1999; Kanski J J., 2001]. В последние годы во всем мире отмечается рост заболеваемости пигментной периферической абиотрофией сетчатки (ППАС), что объясняется, во-первых, улучшением качества диагностики и, во-вторых, постарением населения за счет увеличения средней продолжительности жизни. Таким образом, из года в год возрастает количество больных ППАС пожилого и старческого возраста [Boughman J.А. et al., 1980; Hu Dan Wing H., 1987; Humphris P. et al., 1990; PucehB., 1991; BersonE.L., 1993].

Повышение эффективности лечения больных ППАС продолжает оставаться одной из актуальных задач современной офтальмологии. В первую очередь, это связано с недостатком средств патогенетической терапии и невозможностью решения проблемы оперативным способом [Даниличев В.Ф., Максимов И.Б., 1994; Нероев В.В., Танковский В.Э., 2000; Астахов Ю.С. и соавт., 2001; Даниличев В.Ф., 2000; Friedman N.J., 1998]. Большую проблему пигментная дегенерация сетчатки представляет у людей пожилого и старческого возраста. Сопутствующие соматические заболевания (сахарный диабет, ангиосклероз, гипертония и др.) у лиц данной возрастной группы приводят к дополнительным изменениям на глазном дне, снижению зрительных функций и, как следствие, к еще большему снижению и без того ограниченных адаптационных возможностей. Поэтому сохранение остаточных зрительных функций у пациентов пожилого и старческого возраста является крайне важной задачей как для офтальмологии, так и для гериатрии. Таким образом, актуальным остается разработка и изучение лекарственных препаратов, способных сохранить или восстановить структурную и функциональную специализацию клеток сетчатки, как средство патогенетического лечения ППАС.

Среди физиологически активных веществ большой интерес представляют пептидные биорегуляторы, обладающие тканеспецифическим действием [Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., 1983; 1996; Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., 2001]. Особый интерес представляют пептидные биорегуляторы - ретиналамин и эпиталон. Ретиналамин -комплекс полипептидов с молекулярной массой 1-10 кДа, выделенных из сетчатки молодых животных [Хавинсон В.Х. и соавт., 1988; 1997]. Ретиналамин обладает тканеспецифическим действием на сетчатку глаза, оказывает стимулирующее действие на фоторецепторы и клеточные элементы сетчатки, способствует улучшению функционального взаимодействия пигментного эпителия и наружных сегментов фоторецепторов при дистрофических изменениях, ускоряет восстановление световой чувствительности сетчатки. Препарат нормализует проницаемость сосудов, уменьшает проявления воспалительной реакции, стимулирует репаративные процессы при заболеваниях и травмах сетчатки глаза. Ретиналамин применяют у больных при центральных и периферических наследственных тапеторетинальных абиотрофиях, диабетической ретинопатии, вторичных посттравматических и поствоспалительных центральных дистрофиях сетчатки, пигментной дегенерации сетчатки различного генеза [ГармаеваА. Ш., 1991; Даниличев В.Ф. и соавт., 1991, 1992; Журавлева JI.B., 1994; Максимов И.Б., 1996]. Препарат разрешен для медицинского применения приказом МЗ РФ № 212 от 01.06.1999 (per. № 99.212.7). Ретиналамин изготавливается ООО «Самсон-Мед». Метод получения пептидного биорегулятора исключает возможность присутствия в препаратах жизнеспособных вирусов или функционально активных протоонкогенов [Рыжак Г.А. и соавт., 2003]. Следует подчеркнуть отсутствие каких-либо токсических или аллергических реакций за весь период (более 10 лет) изучения и применения ретиналамина у пациентов [Максимов И.Б. и соавт., 1997; Кузник Б.И. и соавт., 1998; Максимов И.Б., Анисимова Г.В., 2001].

Тетрапептид эпиталон (Ala-Glu-Asp-Gly) получен путем целенаправленного химического синтеза [Хавинсон В.Х. и соавт., 1997; Хавинсон В.Х., 2001]. Основанием для конструирования пептида послужил аминокислотный анализ ретиналамина. Для синтеза пептида были взяты 4 аминокислоты, присутствующие в ретиналамине в наибольшей концентрации. Следует подчеркнуть, что состав пептидов, сконструированных на основании аминокислотных анализов лекарственных препаратов, выделенных из эпифиза мозга (эпиталамин) и из сетчатки (ретиналамин), оказался полностью идентичным. Этот факт указывает на наличие общих механизмов регуляции метаболизма в клетках эпифиза и сетчатки, что обусловлено развитием их из единого эмбрионального листка - нейроэктодермы [Forseil J.et al., 2001]. Кроме того, доказано, что секреторные клетки эпифиза - пинеалоциты -структурно и функционально сходны с фоторецепторными клетками сетчатки. Однако у высших позвоночных и человека пинеалоциты утратили свою способность непосредственно реагировать на световые раздражители. Их механизм реагирования выражается в секреции двух гуморальных регуляторов - мелатонина и серотонина - в зависимости от времени суток [Хэм А., Кормак Д., 1983; Vivien-Roels В. et al., 1981; Whte МР., Fisher L.J., 1989; Tosini G., 2000; Savaskan E. et al., 2002]. В свою очередь, суточный ритм обновления наружных сегментов фоторецепторов - палочек и колбочек (палочки - на восходе, колбочки - на закате) - также свидетельствует о функциональной общности клеток эпифиза и сетчатки [Marmor M.F., Wolfensberger T.J., 1998]. Введение эпиталона старым обезьянам привело к восстановлению исходно сниженного уровня мелатонина в крови до уровня молодых животных [Гончарова Н.Д. и соавт., 2001]. Сравнительное изучение биологической активности комплексных полипептидных препаратов и синтетических пептидов показало ряд сходных эффектов при их воздействии на различные органы и ткани организма в норме и патологии [Морозов В.Г. и соавт., 2000; Хавинсон В.Х., Малинин В.В., 2002].

В связи с этим изучение механизмов действия пептидных биорегуляторов при пигментной дегенерации сетчатки является актуальной теоретической и практической задачей.

Цель исследования: экспериментальное и клиническое изучение возрастных особенностей регуляторного действия пептидных биорегуляторов на гистогенез и функции сетчатки глаза.

Основные задачи исследования

1. Изучить индукционную активность ретиналамина и эпиталона в отношении полипотентных клеток эктодермы ранней гаструлы Xenopus Laevis.

2. Изучить пролиферативную активность ретиналамина и эпиталона в отношении клеточных культур сетчатки и пигментного эпителия крыс Wistar.

3. Изучить влияние ретиналамина и эпиталона на рост органотипических культур тканей эмбриона цыпленка и крыс Wistar разного возраста.

4. Изучить влияние эпиталона на течение наследственной пигментной дистрофии сетчатки у крыс Campbell.

5. Разработать оптимальную схему введения эпиталона в экспериментальной модели пигментной дистрофии сетчатки у крыс Campbell.

6. Изучить влияние эпиталона на процессы свободнорадикального окисления у старых крыс Campbell.

7. Изучить влияние ретиналамина на течение пигментной дистрофии сетчатки у лиц пожилого и старческого возраста.

8. Изучить влияние ретиналамина на систему антиоксидантной защиты у лиц пожилого и старческого возраста с различными заболеваниями сетчатки.

Научная новизна работы

Выявлена нейральная индукционная активность пептидных биорегуляторов (ретиналамина и эпиталона) на полипотентные клетки эктодермы ранней гаструлы Xenopus Laevis. Впервые показана способность тетрапептида эпиталона индуцировать эмбриональную дифференцировку.

Впервые показана способность пептидных биорегуляторов (ретиналамина, эпиталона) вызывать активную пролиферацию клеток культуры сетчатки и пигментного эпителия крыс Wistar. Обнаружен стимулирующий эффект пептидных биорегуляторов (ретиналамина, эпиталона) на рост органотипических культур тканей животных в зависимости от концентрации и возраста.

Выявлено ретинопротекторное действие эпиталона и разработана оптимальная схема введения пептида на экспериментальной модели пигментной дистрофии сетчатки у крыс Campbell. Обнаружено антиоксидантное действие эпиталона в отношении процессов свободнорадикального окисления у старых крыс Campbell.

Установлена эффективность применения ретиналамина у лиц пожилого и старческого возраста с пигментной дистрофией сетчатки. Показано, что геропротекторный эффект ретиналамина связан с его антиоксидантными свойствами.

Практическая ценность работы

В экспериментальной модели пигментной дистрофии сетчатки у крыс Campbell выявленные свойства эпиталона позволяют рекомендовать пептид для клинического изучения в качестве ретинопротектора и антиоксиданта у лиц разного возраста с пигментной дистрофией сетчатки. Результаты изучения механизмов действия эпиталона включены в научно-техническую документацию, представленную в Фармакологический Государственный комитет МЗ РФ (04.06.2002) для получения разрешения на клинические испытания.

Разработан новый подход в лечении пигментной дистрофии сетчатки у лиц пожилого и старческого возраста, основанный на применении ретиналамина, обладающего ретинопротекторными и антиоксидантными свойствами.

Результаты исследований используются в практической деятельности Санкт-Петербургского Института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН, Санкт-Петербургского научно-практического центра медико-социальной экспертизы, протезирования и реабилитации инвалидов им. Г.А. Альбрехта, Санкт-Петербургского НИИ фтизиопульмонологии МЗ РФ, Санкт-Петербургской Государственной медицинской академии им. И.И. Мечникова МЗ РФ.

Материалы диссертации реализованы в монографии, научном издании и пособии для врачей, утвержденном МЗ РФ.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Основой ретинопротекторного действия пептидных биорегуляторов (ретиналамина, эпиталона) является способность пептидов запускать нейральную дифференцировку, их высокая пролиферативная активность в культуральной ткани сетчатки и пигментного эпителия, а также стимулирующий эффект пептидов на рост органотипических культур тканей животных.

2. Выявлено ретинопротекторное, антиоксидантное действие эпиталона и разработана оптимальная схема введения пептида в экспериментальной модели пигментной дистрофии сетчатки у крыс Campbell.

3. Эффективность ретиналамина в лечении больных пожилого и старческого возраста с пигментной дистрофией сетчатки достигается за счет повышения функциональной активности сетчатки, что проявляется в улучшении результатов визометрии, периметрии, данных электрофизиологического исследования сетчатки.

4. Геропротекторный эффект ретиналамина у больных пожилого и старческого возраста с различными ретинальными заболеваниями достигается за счет его антиоксидантных свойств.

Апробация работы

Основные результаты исследований и положения диссертационной работы, выносимые на защиту, были представлены и доложены на следующих научных конференциях, симпозиумах, съездах и конгрессах: VII Съезде офтальмологов России (Москва, 2000); Межобластной научно-практической конференции офтальмологов (Череповец, 2000);

IV Международном съезде «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения» (Великий Новгород, 2000); научной конференции офтальмологов с международным участием, посвященной 125-летию со дня рождения акад. Филатова (Одесса, 2000); VI, VII Международных научно-практических конференциях «Пожилой больной. Качество жизни» (Москва, 2000; 2001);

V научной конференции с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (2001); конференции «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины - 2002» (Санкт-Петербург, 2002); Всероссийской научной конференции, посвященной 110-летию кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Военно-медицинской академии и 100-летию со дня рождения академика АМН СССР Г.Е. Владимирова (Санкт-Петербург, 2002); Всероссийской конференции «Достижения науки - практическому здравоохранению» (Москва, 2002); II Европейском конгрессе по биогеронтологии (Санкт-Петербург, 2000); конференции "Free radicals and antioxidants in the development and functions of the central nervous system: from fetus to aging" (Санкт-Петербург, 2001); XIII Европейском конгрессе по офтальмологии (Турция, 2001); XVII Всемирном конгрессе Международной ассоциации геронтологии (Канада, 2001); IV Международном симпозиуме по офтальмофармакологии (Испания, 2002); Валенсийском форуме по геронтологии (Испания, 2002); XXXV Всегреческом офтальмологическом конгрессе (Греция, 2002); XXXV Северо-Западном офтальмологическом t 1

V' ^ Ч t г" - ** # конгрессе (Финляндия, 2002); VIII Международном конгрессе по офтальмотоксикологии (Германия, 2002); XV Международном конгрессе по вопросам изучения зрения (Швейцария, 2002); III Европейском конгрессе по биогеронтологии (Италия, 2002); I конференции по вопросам исследования зрения Сингапурского офтальмологического общества (Сингапур, 2003).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 40 научных работ, в том числе монография, научное издание и пособие для врачей.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 212 страницах машинописного текста, включает 31 таблицу и 23 рисунка, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 2 глав собственных исследований, заключения, выводов и приложения. Список литературы содержит 303 работы (174 отечественных и 129 зарубежных).

Заключение диссертации по теме «Геронтология и гериатрия», Трофимова, Светлана Владиславовна

ВЫВОДЫ

1. При исследовании влияния пептидных биорегуляторов (ретиналамина, эпиталона) на клетки полипотентной ткани эктодермы ранней гаструлы Хепорив Ьает было установлено, что препараты обладают нейральной индукционной активностью. Воздействие ретиналамина на полипотентную ткань запускает нейральную дифференцировку, включая мозг, сетчатку и пигментный эпителий. В полипотентной ткани под воздействием комплексного пептидного препарата, выделенного из сетчатки -ретиналамина - развивается дифференцировка тканей, идентичных тканям, из которых выделен биорегулятор. Короткий синтетический пептид эпиталон также обладает индукционной активностью. Эпиталон запускает дифференцировку только нейральной ткани.

2. Пептидные биорегуляторы (ретиналамин, эпиталон) обладают способностью в определенной концентрации тканеспецифически вызывать активную пролиферацию клеток культуры сетчатки и пигментного эпителия крыс Wistar. Пролиферация не подавляет процесс поддержания тканеспецифической дифференцировки, т.е. два механизма работают синхронно, и клетки в процессе культивирования не теряют признаков дифференцированной ткани.

3. Пептидные биорегуляторы (ретиналамин, эпиталон) обладают выраженным стимулирующим действием в отношении эксплантатов ткани сетчатки животных (тканей эмбриона цыпленка и крыс ^У^аг разного возраста). Эффективная концентрация обоих препаратов оказалась одинаковой - 20 нг/мл. Однако стимулирующий эффект эпиталона оказался выше, чем ретиналамина в 3,5 раза в культуре тканей сетчатки эмбриона цыпленка и в 2 раза - в культуре тканей сетчатки крыс Wistar. При культивировании фрагментов старых тканей зоны роста под действием пептидных препаратов были меньше, чем при культивировании молодых тканей.

4. При изучении действия эпиталона в экспериментальной модели пигментной дистрофии сетчатки у крыс Campbell установлено, что пептид обладает ретинопротекторным действием за счет увеличения срока функциональной активности и сохранения морфологической структуры сетчатки крыс. Введение эпиталона двум поколениям крыс (родителям и потомству) способствует удлинению периода сохранности сетчатки у потомства почти в 2 раза по сравнению с контролем и усиливает ретинопротекторное действие пептида на 30% по сравнению с введением препарата только одному поколению крыс Campbell.

5. При изучении свободнорадикального окисления было показано, что в сыворотке крови крыс Wistar (24 мес.) процесс генерации АФК происходит более интенсивно, чем у крыс Campbell того же возраста, в то время как в мозговой ткани наблюдается обратная картина. При введении эпиталона крысам Campbell наблюдается снижение генерации АФК, образования продуктов ПОЛ и уровня пероксидации белков в мозговой ткани. У крыс Wistar более выраженные изменения происходят в антиоксидантных системах мозга, что выражается в повышении ОАА и АРАД. Эпиталон не оказывает влияния на свободнорадикальные процессы в сыворотке крови крыс Campbell. У крыс Wistar введение эпиталона приводит к значительному повышению генерации АФК и снижению ОАА. Эпиталон снижает интенсивность перекисных процессов в сыворотке крови, печени и мозге крыс. Наиболее эффективное антиоксидантное действие эпиталон оказывает в отношении мозговой ткани.

6. При изучении влияния ретиналамина на течение пигментной дистрофии сетчатки у лиц пожилого и старческого возраста были выявлены ретинопротекторный и геропротекторный эффекты препарата. Субъективно все пациенты отмечали улучшение ориентации, самочувствия и повышение адаптационной активности, что удалось достичь за счет повышения зрительных функций (улучшение результатов визометрии, периметрии) вследствие увеличения функциональной активности сетчатки по данным ЭФИ и коррекции системы антиоксидантной защиты.

7. Применение ретиналамина при различных заболеваниях сетчатки позволяет устранить дисбаланс в прооксидантной и антиоксидантной системах у пациентов пожилого и старческого возраста.

8. При применении ретиналамина у пациентов побочных реакций, осложнений или лекарственной зависимости выявлено не было, даже у лиц с неблагоприятным аллергологическим анамнезом. Препарат хорошо переносился больными и был совместим со всеми лекарственными препаратами, используемыми в комплексном лечении сопутствующих соматических заболеваний.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РАБОТЫ

Выявленные в экспериментальной модели пигментной дистрофии сетчатки у крыс Campbell свойства эпиталона позволяют рекомендовать пептид для клинического изучения в качестве ретинопротектора и антиоксиданта у лиц разного возраста с пигментной дистрофией сетчатки. Результаты изучения механизмов действия эпиталона включены в научно-техническую документацию, представленную в Фармакологический Государственный комитет МЗ РФ (04.06.2002) для получения разрешения на клинические испытания.

Разработан новый подход в лечении пигментной дистрофии сетчатки у лиц пожилого и старческого возраста, основанный на применении ретиналамина, обладающего ретинопротекторными и антиоксидантными свойствами.

Результаты исследований используются в практической деятельности Санкт-Петербургского Института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН, Санкт-Петербургского научно-практического центра медико-социальной экспертизы, протезирования и реабилитации инвалидов им. Г.А. Альбрехта, Санкт-Петербургского НИИ фтизио-пульмонологии МЗ РФ, Санкт-Петербургской Государственной медицинской академии им. И.И. Мечникова МЗ РФ.

Материалы диссертации реализованы в монографии, научном издании и пособии для врачей, утвержденном МЗ РФ.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Увеличение доли лиц пенсионного возраста в общей численности населения является характерным демографическим показателем всех экономически развитых стран. Поэтому важнейшей задачей геронтологии является не только увеличение продолжительности жизни, но и повышение качества жизни пожилых людей и продление периода трудоспособного возраста [Сидоренко A.B., Эндрюс Г.Р., 2000; Пушкова Э.С., 2001; Сафарова Г.Л., 2002]. Изменения в тканях глаза, развивающиеся при старении, подчиняются общим законам старения организма. При этом утрата или резкое снижение зрительных функций наиболее отрицательно влияют на качество жизни людей пожилого и старческого возрата, делая их беспомощными даже при относительно удовлетворительном физическом состоянии [Офтальмогериатрия, 1982; Южаков A.M., 2000; Игнатьев А.Н., 2002]. В свою очередь, сопутствующие соматические заболевания (гипертония, атеросклероз, сахарный диабет и др.) у лиц данной возрастной группы могут приводить к дополнительным изменениям на глазном дне и, как следствие, к еще большему снижению остроты зрения. Поэтому сохранение остаточных зрительных функций у пациентов пожилого и старческого возраста является крайне важной задачей как для офтальмологии, так и для гериатрии.

Известно, что в пожилом возраста любое заболевание сопряжено с нарушением функций всех регуляторных систем организма, поэтому лечение стареющего организма требует комплексного подхода [Фролысис В.В., Мурадян Х.К., 1992; Коркушко О.В. и соавт, 2002]. В настоящее время существуют различные подходы к разработке геропротекторных препаратов. Значительную их часть представляют антиоксиданты, иммуномодуляторы, антидиабетические препараты. Однако ни один из них не является ретинопротектором. Следовательно, именно системный характер процессов старения определяет необходимость разработки лекарственных препаратов для офтальмогериатрии, обладающих широким спектром биологического действия.

В последние десятилетия благодаря открытию пептидов и их многочисленных регуляторных функций сформировалось новое направление в профилактической и клинической медицине -биорегулирующая терапия. Известно, что в процессе старения в центральных органах иммунной и эндокринной систем происходит значительное снижение синтеза пептидов, что приводит к нарушению пептидной регуляции гомеостаза [Яковлев Г.М. и соавт., 1991; Хавинсон В.Х. и соавт., 2001]. Поэтому попытка замедления процессов старения путем восстановления пептидной саморегуляции организма с помощью экзогенного введения регуляторных пептидов является логически и патогенетически обоснованной и перспективной. Биорегулирующая терапия использует новый класс препаратов, способных восстанавливать функциональные нарушения и препятствовать развитию патологических процессов в тех органах и тканях, из которых они выделены. Впервые тканеспецифические пептиды, регулирующие межклеточные взаимодействия и клеточный гомеостаз, были выделены В.Г. Морозовым и В.Х. Хавинсоном в 1971 г. [Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., 1973; 1983]. Такие комплексы регуляторных пептидов получили название цитомединов. В эксперименте на животных было доказано их геропротекторное воздействие: увеличение средней и максимальной продолжительности жизни, торможение канцерогенеза, уменьшение частоты злокачественных новообразований, нормализация метаболизма и иммунитета [Анисимов В.Н., Хавинсон В.Х., 1991; Анисимов А.Н. и соавт., 2000]. Многочисленные клинические исследования показали, что пептидные биорегуляторы тканеспецифически стимулируют регенерацию тканей, восстанавливают иммунитет, нормализуют функции эндокринной и центральной нервной системы [Анисимов и соавт., 1993; Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., 2001; Хавинсон В.Х., Малинин В.В., 2002]. Многолетний опыт использования цитомединов в клинической практике показал высокую эффективность данного класса веществ в различных областях медицины, в том числе в офтальмологии. Ведущим пептидным биорегулятором в офтальмологии, разрешенным к медицинскому применению Минздравом РФ, является ретиналамин. Активное изучение ретиналамина началось с 1985 г., когда он впервые был выделен. Ретиналамин представляет собой комплекс пептидов, выделенных из сетчатки глаза животных. Обладая ярко выраженными ретинопротекторными свойствами, препарат применяется при различных заболеваниях сетчатки, в том числе и при ППАС [Даниличев В.Ф. и соавт., 1992; Даниличев В.Ф., Максимов И.Б., 1994; Максимов И.Б., 1996; Воскресенская Л.К. и соавт., 1998].

Среди пептидных биорегуляторов имеется большое количество лекарственных препаратов с неидентифицированным составом. Значительная их часть представляет собой экстракты из тех или иных тканей и органов. К числу таких соединений можно отнести ФиБС и взвесь плаценты, выделенные в тридцатые годы В.П. Филатовым [Кашинцева Л.Т., 1998]. Однако в последние годы как физиологи, так и медики стали проявлять все больший интерес к регуляторным пептидам, полученным синтетическим путем в соответствии с аминокислотной последовательностью природных пептидов [Ашмарин И.П., Каразеева Е.П., 1999; Иванов В.Т., Берлин Ю.А., 2000]. Перспективность данного направления очевидна - применение веществ с идентифицированной структурой позволит более глубоко изучить механизм их действия и создать на их основе высокоэффективные лекарственные препараты.

В Санкт-Петербургском Институте биорегуляции и геронтологии путем целенаправленного химического синтеза был сконструирован тетрапептид эпиталон (Ак-СИи-Азр-СНу). Основанием для конструирования пептида послужил аминокислотный анализ ретинапамина. Для синтеза пептида были взяты 4 аминокислоты, присутствующие в ретиналамине в наибольшей концентрации. После ВЭЖХ-очистки на обращенной фазе содержание пептида составляло не менее 98-99%, а его структура была подтверждена данными аминокислотного анализа и протонно-магнитного резонанса. Следует подчеркнуть, что состав пептидов, сконструированных на основании аминокислотного анализа комплексных лекарственных препаратов, выделенных из эпифиза мозга (эпиталамина) и из сетчатки (ретинапамина), оказался идентичным. Этот факт указывает на наличие общих механизмов регуляции метаболизма в клетках эпифиза и сетчатки, что обусловлено развитием их из единого эмбрионального листка -нейроэктодермы.

Сравнительное изучение биологической активности комплексных полипептидных препаратов и синтетических пептидов показало ряд сходных эффектов при их воздействии на различные органы и ткани организма в норме и патологии, что позволило более целенаправленно подойти к поставленным цели и задачам исследования [Морозов В.Г. и соавт., 2000; Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., 2001; Хавинсон В.Х., Малинин В.В., 2002].

Впервые было изучено регуляторное действие ретиналамина и эпиталона на гистогенез и функции сетчатки глаза и обоснована целесообразность применения ретиналамина в качестве геро- и ретинопротектора у пациентов пожилого и старческого возраста с патологией сетчатки. Необходимая информация о биологических свойствах (с раскрытием некоторых механизмов действия) используемых пептидных препаратов была заимствована из опубликованных результатов экспериментальных и клинических исследований [Хавинсон В.Х. и соавт., 1980, 1988; Днепровская А.И. и соавт., 1988; Харинцева C.B., 1991; Васильева JI.A. 1992; Даниличев и соавт., 1991, 1992; Журавлева JI.B., 1992, 1994; Максимов И.Б., 1996; Максимов И.Б., Анисимова Г.В., 2001; Анисимов В.Н. и соавт., 1993; Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., 2001; Хавинсон В.Х., Малинин В.В., 2002].

Для достижения поставленной цели и решения задач работы были проведены экспериментальные и клинические исследования.

Экспериментальный раздел

Экспериментальный раздел работы состоял из 5 частей.

В первой части эксперимента оценивали индукционную активность пептидов (ретиналамина, эпиталона). Контрольным пептидом являлся тетрапептид ливаген (Lys-Glu-Asp-Ala). В качестве тест-системы (полипотентной ткани, способной под воздействием того или иного индуцирующего агента к определенной дифференцировке) использовали эктодерму ранней гаструлы шпорцевой лягушки Xenopus Laevis. Все пептиды (ретиналамин, эпиталон и ливаген) были изучены в разных концентрациях: 2, 10, 20, 50, 100, 200 нг/мл, причем каждая концентрация - на 40 культурах и 20 культурах - в качестве контроля. Оценку результатов исследований проводили с помощью морфологических и иммуногистохимических методов.

Анализ полученных результатов показывает, что все пептиды обладают индукционной активностью. В полипотентной ткани под воздействием пептидного регулятора ретиналамина происходит дифференцировка тканей, соответствующих тканям, из которых выделен препарат, то есть запускается нейральная дифференцировка, включая мозг, сетчатку и пигментный эпителий. Эпиталон запускает дифференцировку нейральной, а ливаген - мезодермальной тканей. Таким образом, если раньше было известно о тканевой специфичности пептидов на уровне дифференцированных клеточных культур, то работы с полипотентными тканями показали способность коротких пептидов, состоящих всего из нескольких аминокислот, запускать дифференцировку ткани в нормальной развивающейся эмбриональной ткани, что открывает совершенно новое направление исследований.

Во второй части эксперимента для оценки пролиферативной активности пептидных препаратов (ретиналамина и эпиталона) в качестве экспериментального объекта использовали первичные клеточные культуры сетчатки и пигментного эпителия крыс Wistar. Пептидные препараты ретиналамин и эпиталон были изучены в разных концентрациях: 2, 10, 20, 50, 100, 200 нг/мл. Для определения митогенной активности исследуемых пептидов в культуре клеток сетчатки и пигментного эпителия применяли метод спектрофотометрического определения количества живых клеток в суспензии.

Анализ результатов воздействия исследуемых пептидов на культуры клеток сетчатки и пигментного эпителия показал статистически достоверную зависимость митогенной активности клеток от концентрации ретиналамина и эпиталона. Установлено, что клетки пигментного эпителия пролиферируют несколько активнее, чем клетки сетчатки. Митогенная активность клеток пигментного эпителия и сетчатки при воздействии ретиналамина в течение последующих трех недель от начала эксперимента оказалась максимальной при одних и тех же концентрациях - 50 нг/мл и 100 нг/мл. При воздействии на клеточные культуры эпиталоном в течение этого же времени наиболее активная пролиферация клеток наблюдалась при более низких концентрациях - 2 и 10 нг/ мл. Полученные данные указывают Fia выраженную способность исследуемых пептидных препаратов - ретиналамина и эпиталона - в определенной концентрации тканеспецифически вызывать активную пролиферацию клеток культуры сетчатки и пигментного эпителия. Необходимо указать на многофункциональную способность пептидных препаратов контролировать пролиферативную активность клеток соответствующей ткани и запускать процесс дифференцировки в полипотентной ткани. Более того, запускается не просто дифференцировка, а каскад взаимно связанных дифференцировок, как, например, тканей глаза (Лопашов Г.В., Земчихина В.Н., 2000). Возможно, пептидный сигнал изменяет функциональную активность генома, индуцируя экспрессию генов, участвующих в процессе дифференцировки тканей глаза. По-видимому, характер воздействия пептидных препаратов зависит от функционального состояния и степени дифференцировки клеток, а значит и от состояния их мембранно-рецепторного комплекса. При воздействии на дифференцированные клетки взрослого организма в кратковременной культуре наблюдается пролиферативная активность клеток, однако при этом поддерживается и их тканевая специфичность. Необходимо подчеркнуть, что процесс пролиферации не подавляет механизм поддержания тканеспецифической дифференцировки, т.е. два механизма работают синхронно, и клетки в процессе культивирования не теряют признаков дифференцированной ткани.

В третьей части экспериментального исследования было изучено влияние ретиналамина и эпиталона на рост органотипической культуры сетчатки глаза эмбриона цыпленка и крыс Wistar разного возраста (молодых - 3 нед. и старых - 24 мес.). С этой целью было использовано 200 эксплантатов сетчатки глаза эмбриона цыпленка и 400 эксплантатов сетчаиси крыс >У1з1аг. В культуральную среду добавляли пептиды в концентрациях 0,5, 1, 2, 10, 20, 100 нг/мл. Рост нервных элементов или выселяющихся клеток в зоне роста в культуре ткани исследовали прижизненно с помощью светового фазово-контрастного микроскопирования. Для количественной оценки влияния тестируемых веществ на рост фрагментов тканей применяли морфометрический метод. Интенсивность роста эксплантатов оценивали по величине ИП, который рассчитывается как отношение площади всего эксплантата, включая периферическую зону роста, к исходной площади фрагмента эксплантируемой ткани (т.е. площади центральной зоны). Значения ИП выражали в процентах, показатель ИП в контроле был принят за 100%.

Список литературы диссертационного исследования доктор медицинских наук Трофимова, Светлана Владиславовна, 2003 год

1. Анисимов В.Н. Эволюция концепций в геронтологии: достижения и перспективы/ В.Н. Анисимов // Успехи геронтол. 1999. - Т. 2. - С. 32-53.

2. Анисимов В.Н. Влияние мелатонина и эпиталамина на активность системы антиоксидантной системы у крыс/ В.Н Анисимов, A.B. Арутюнян, В.Х. Хавинсон // Докл. РАН. 1997а. - Т. 352. - С. 831833.

3. Анисимов В.Н. Влияние мелатонина на продолжительность жизни и перекисное окисление липидов у Drosophila melanogaster/ В.Н. Анисимов, С.В. Мыльников, Т.И. Опарина, В.Х. Хавинсон // Докл. РАН. 19976. - Т. 352 - С. 704-707.

4. Анисимов В.Н. Мелатонин и эпиталамин угнетают процесс свободнорадикального окисления у крыс/ В.Н. Анисимов, В.М. Прокопенко, В.Х. Хавинсон // Докл. РАН. 1995. - Т. 343. - С. 557559.

5. Анисимов В.Н. Влияние пептидных биорегуляторов и мелатонина на показатели биологического возраста и продолжительность жизни у мышей/ В.Н. Анисимов, В.Х. Хавинсон, Н.Ю. Заварзина и др. // Успехи геронтол. 2000. - вып. 4 - С. 88-96.

6. Анисимов В.Н. Роль пептидов эпифиза в регуляции гомеостаза: двадцатилетний опыт исследования/ В.Н. Анисимов, В.Х. Хавинсон,

7. B.Г. Морозов // Успехи соврем, биологии. 1993. - Т. 113, № 6. - С. 652-762.

8. Арутюнян A.B. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма/ A.B. Арутюнян, Е.Е. Дубинина, H.H. Зыбина // Методические рекомендации. СПб.: ИКФ «Фолиант», 2000. - 104 с.

9. Арьев A.J1. Состояние и пути развития геронтологии (гериатрии)/ А.Л. Арьев // Сбор. науч. труд., посвященных 15-летию кафедры гериатрии СПбМАПО «Актуальные проблемы гериатрии». 2001.1. C. 25.р v

10. Справочное пособие/ Ю.С. Астахов, Г.В. Ангелопуло, O.A. Джалиашвили СПб.: СпецЛит, 2001. - 204 с.

11. Астахов Ю.С. Лазеркоагуляция сетчатки при лечении диабетической ретинопатии/ Ю.С. Астахов, Ф.Е. Шадричев, А.Б. Лисочкина // Клин, офтальм. 2000. - № 1. - С. 15-18.

12. Астраханцева Л.З. Гериатрическая фармакология/ Л.З. Астраханцева М.: Медицина, 1972. - 278 с.

13. Ашмарин И.П. Регуляторные пептиды, происхождение и иерархия/ И.П. Ашмарин // Журн. эволюционной биохимии и физиологии. -1982.-Т. 18,№ 1.-С. 3-10.

14. Ашмарин И.П. Перспективы практического применения и некоторые фундаментальные исследования малых регуляторных пептидов/ И.П. Ашмарин // Вопр. мед. химии. 1984. - Т. 30, вып. 3. - С. 2-7.

15. Ашмарин И.П. Регуляторные пептиды сильного и быстрого действия // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1988. - Вып. 3. - С. 3-8 .

16. Ашмарин И.П. Нейропептиды/ И.П. Ашмарин, Е.П. Каразаева // Биохимия мозга. СПб.: Изд-во СПбГУ., 1999. - С. 232-266.

17. Ашмарин И.П. Нейропептиды в синаптической передаче/ И.П. Ашмарин, М.А. Каменская // Физиология человека и животных / ВИНИТИ. -М. 1988. - Т. 34. - 184 с.

18. Ашмарин И.П. Каскадные однонаправленные регуляторные процессы, осуществляемые короткоживущими пептидами (тиролиберин)/ И.П. Ашмарин, А.П. Кулашев, С.А. Чепурнов // Физиол. журн. СССР. -1989. Т. 75, № 5. - С. 627-632.

19. Ашмарин И.П. Регуляторные пептиды. Функционально-непрерывная совокупность/ И.П. Ашмарин, М.Ф. Обухова // Биохимия. 1986. - Т.> 51,№4.-С. 531-545.1 Wt

20. Басинский С.Н. Эффективность прямой реваскуляризации хориоидеи при лечении атеросклеротических макулодистрофий/ С.Н. Басинский, В.Н. Красногорская, Е.В. Соломина // Вестн. офтальм. 1997. - Т. 113,№4.-С. 35-37.

21. Безуглый Б.С. Лечение центральных склеротических хориоретинальных дистрофий с применением нового мембраностабилизирующего препарата тиотриазолина/ Б.С. Безуглый, Е.В. Буянова, Л.Э. Саржевская // Офтальм. журн. 1996. - № 2. - С. 117-119.

22. Бродский В.Я. Ритм синтеза белка в культурах гепатоцитов крыс разного возраста. Норма и действие пептида ливагена/ В.Я. Бродский, В.Х. Хавинсон, Ю.А. Золотарёв и др. //Изв. АН, сер. биол. 2001.-№5.- С. 517-521

23. Васильева Л.А. Применение ретилина для лечения пигментной периферической абиотрофии сетчатки: Автореф. дис. . канд. мед. наук/ Л.А. Васильева СПб. - 1992. - 20 с.

24. Васина Г.В. Прогноз численности населения Российской Федерации до 2010 года/ Г.В. Васина, C.B. Вуколова, С.А. Никитина // Вопр. статистики. 1997, № 10 - 32 с.

25. Владимиров Ю.А. Оценка антиокислительной и антирадикальной активности веществ и биологических объектов/ Ю.А. Владимиров, М.П. Шерстнев, Т.К. Азимбаев // Биофизика. 1992. - Т. 37. - С. 1042-1047.

26. Водовозов А.М. Идиопатический макулярный отек, отверстстие макулы, отслойка сетчатки, ретинальный фиброз как осложненияинволюционного витреоретинального синдрома // Вестн. офтальм. -1994.-Т. 2,№2.-С. 33-35.

27. Возрастные особенности органа зрения в норме и при патологии / Сборник статей / Под ред. проф. Е.И. Ковалевского. М., 1973. - 171с.

28. Волков В.В. Клиническое исследование глаз с помощью приборов/

29. B.В. Волков, А.И. Горбань, O.A. Джалиашвили Л.: Медицина, 1971. -328 с.

30. Волков В.В. Клиническая визо- и рефрактометрия/ В.В. Волков, А.И. Горбань, O.A. Джалиашвили Л.: Медицина, 1976. - 215 с.

31. Воскресенская Л.К. Влияние ретилина на реактивность кровеносного русла глаза при ионизирующем облучении/ Л.К. Воскресенская, О.Ю. Максимук, В.В. Ряднова // Тез. докл. науч. конф. Одесса, 1998. - С.238-239.

32. Газиев А.И. Диетические антиоксиданты увеличивают продолжительность жизни мышей, снижают частоту мутаций и увеличивают экспрессию защитных генов/ А.И. Газиев, Т.Е. Ушакова, А.Я. Подлуцкая и др. // Успехи геронтол. 1997. - Т. 1. - С. 80-84.

33. Гармаева А.Ш. Применение ретилина для лечения диабетической ретинопатии // Регуляторные пептиды в норме и патологии (цитомедины): Сб. науч. работ / Под ред. Б.И. Кузника; Читан, гос. мед. ин-т. Чита, 1991. - С.72-73.

34. Гериатрия в лекциях. Архив журнала «Клиническая геронтология» 1995-2000 г. М.: Ньюдиамед, 2002. - 404 с.

35. Голубева О.Н., Лопашов Г.В. // Доклады АН. 1996. - Т. 348, № 4.1. C. 560-563.

36. Гончарова Н.Д. Регулирующее влияние эпиталона на продукцию мелатонина и кортизола у старых обезьян/ Н.Д. Гончарова, В.Х. Хавинсон, Ю.А. Лапин // Бюлл. экспер. биол. и мед. 2001. - Т. 36, №11.-С. 466-468.4181

37. Гомазков O.A. Функциональная биохимия регуляторных пептидов/ O.A. Гомазков М.: ВО «Наука», 1992. - 160 с.

38. Гомеостаз / Под ред. П.Г. Горизонтова. М.: Медицина, 1981. - 576 с.

39. Даниличев В.Ф. Терапия препаратом сетчатки при пигментной периферической абиотрофии сетчатки/ В.Ф. Даниличев, JI.A. Васильева // Пептидные биорегуляторы-цитомедины. СПб., 1992. -С. 49.

40. Даниличев В.Ф. Травмы и заболевания глаз: Применение ферментов и пептидных биорегуляторов/ В.Ф. Даниличев, И.Б. Максимов Минск: Наука и техника, 1994. - 223 с.

41. Даниличев В.Ф. Лечение периферической пигментной тапеторетинальной абиотрофии/ В.Ф. Даниличев, В.Х. Хавинсон, Л.А. Васильева // Офтальм. журнал. 1992. - №3. - С. 174-178.

42. Донцов В.И. Фундаментальные механизмы геропрофилактики/ В.Н. Крутько, A.A. Подколзин М.: Биоинформсервис, 2002. - 464 с.

43. Думбова Н.Е. Современные данные о структуре и функции пигментного эпителия сетчатки/ Н.Е. Думбова, Н.И. Нестерук // Офтальм. журнал. -1991.-№ 4. С. 243-246.

44. Дятлов Р.В. Сравнение антиоксидантных свойств мелатонина, эпиталамина и глутатиона методом люминолзависимойхемилюминесценции in vitro/ P.B. Дятлов, И.Е. Красовская, Т.В. Ехвалова и др. // Докл. РАН. 1997. - Т. 3 56. - С. 129-131.

45. Егорова Э.В. Новые формы организации высококвалифицированной офтальмологической помощи в филиалах ГУ МНТК/ Э.В. Егорова, В.В. Ильин, З.И. Кромская // Офтальмохирург. 1999. - № 3. - С. 813.

46. Ермилов В.В. Роль локального амилоидоза тканей дна глаза в патогенезе сенильной макулопатии/ В.В. Ермилов, A.M. Водовозов // Вест, офтальм. 1995. - т. 111, № 4. - С. 24-27.

47. Ермилов В.В. Старческий локальный изолированный амилоидоз глаза как проявление возрастной патологии/ В.В. Ермилов, О.В. Трофименко // Успехи геронтол. 1998. - Т.2. - С. 117-119.

48. Ершов A.B. Радиоавтографическое исследование постнатальной пролиферации клеток ретинального пигментного эпителия у крыс Campbell с наследственной дистрофией сетчатки/ A.B. Ершов, О.Г. Строева // Онтогенез. 1987. - Т. 18, № 1. - С. 73-78.

49. Жабоедов Г.Д. // Метод, реком./ Г.Д. Жабоедов, Г.С. Бондарева -Киев, 1986.

50. Журавлева JI.B. Препарат сетчатки в лечении центральных инволюционных дистрофий сетчатки/ Л.В. Журавлева // Тез. докл. науч. симпоз. "Пептидные биорегуляторы-цитомедины" / Воен.-мед. акад. им. С.М. Кирова. СПб., 1992. - С. 60-61.

51. Журавлева Л.В. Новые биорегуляторы в лечении центральных инволюционных дистрофий сетчатки/ Л.В. Журавлева // Вопросы офтальмологии: Тез. докл. Всероссийской конф. по офтальмологии. Самара, 1994. - С. 49-50.

52. Зезюлин П.Н. Эпиталон: геропротекторное действие на эндокринную и иммунную системы/ П.Н. Зезюлин СПб, 2003. - 53 с.4r ? % f1. M4, \tr

53. Зозуля Т.А. Применение пептидных биорегуляторов в комплексном лечении огнестрельных повреждений глаз/ Т.А. Зозуля, И.Б. Максимов // Актуальные проблемы военной и экстремальной медицины: Сб. науч. работ. Москва, 1997. - С. 57-58.

54. Зозуля Т.А. Применение пептидных биорегуляторов в комплексном лечении огнестрельных повреждений глаз: Автореф. дис. . канд. мед. наук/ Т.А. Зозуля М., 1998. - 21 с.

55. Иванов В.Т. Молекулярная биология в 2000 году: прогнозы, реальность и снова прогнозы/ В.Т. Иванов, Ю.А. Берлин // Биоорган, химия. 2000. - Т. 26, № 10. - С. 752-755.

56. Игнатьев А.Н. Заболевания глаз в пожилом возрасте/ А.Н. Игнатьев -СПб.: «Издательство «Диля», 2002. 160 с.

57. Кацнельсон J1.A. Классификация атеросклеротических и наследственных дистрофий хориоидеи и сетчатки/ JI.A. Кацнельсон // Вест, офтальм. 1973. - № 6. - С. 14-20.

58. Кацнельсон Л.Ф. Сосудистые заболевания глаза/ Л.Ф. Кацнельсон, Т.И. Форофонова, А.Я. Бунин М.: Медицина, 1990. - 272 с.

59. Кашинцева Л.Т. Лечение больных с диабетическими изменениями глазного дна: Метод, реком. / Одес. НИИ глазных болезней и тканевой терапии/ Л.Т. Кашинцева, Е.А. Грузина, И.Р. Салдан и др. -Одесса, 1988. 30 с.

60. Клебанов Г.И. Антиоксидантная активность сыворотки крови/ Г.И. Клебанов, Ю.О. Теселкин, И.В. Бабенкова и др. // Вест. РАМН. -1999.-№2.-С. 15-22.

61. Коркушко О.В. Лечение взвесью плаценты в профилактике преждевременного старения человека/ О.В. Коркушко, Е.Г. Калиновская, C.B. Литовченко, Н.В. Кочубей // Тканевая терапия по Филатову. Одесса, 1977. - С. 127-129.

62. Коркушко О.В. Изменения барорефлекторной регуляции сердечнососудистой системы при старении/ О.В. Коркушко, В.Б. Шатило, О.Н. Гарина // Украинский кардиол. журн. -1994, вып. 5, № 6. - С. 10-14.

63. Коркушко О.В. Гериатрия в терапевтической практике/ О.В. Коркушко, Д.Ф. Чеботарев, Е.Г, Калиновская Киев, 1993. - 840 с.

64. Коркушко О.В. Результаты 30-месячного применения пептидных регуляторов тималина и эпиталамина у людей с проявлениями ускоренного старения организма/ О.В. Коркушко, Д.Ф. Чеботарев,

65. B.Б. Шатило // Геронтологические аспекты пептидной регуляции функций организма: Матер. Междунар. симпозиума. СПб, 1996.1. C. 49-50.

66. Коркушко О.В. Пептидные препараты тимуса и эпифиза в профилактике ускоренного старения/ О.В. Коркушко, В.Х. Хавинсон, Г.М. Бутенко, В.Б. Шатило СПб.: «Наука», 2002. - 202 с.

67. Костюк В.А. Простой и чувствительный метод определения супероксидисмутазы, основанный на реакции окисления квецетина/ В.А. Костюк, А.И. Потапович, Ж.В. Ковалева // Вопросы мед. химии. 1990. - Т. 36, № 2. - С. 88-91.

68. Краснов M.JI. Руководство по глазной хирургии/ M.JI. Краснов, B.C. Беляев М.: Медицина, 1988. - 221 с.

69. Кузник Б.И. Цитомедины (25-летний опыт экспериментальных и клинических исследований)/ Б.И. Кузник, В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон СПб.: Наука, 1998. - 310 с.

70. Культура нервной ткани // Под ред. Ю.М. Жаботинского. М, «Медицина», 1977. - 184 с.

71. Лаврова М.Е. Региональная система эпидемиологического мониторинга офтальмологической патологии у лиц пожилого и старческого возраста/ М.Е. Лаврова, А.А. Тихомиров // Тез. докл. VII Съезда офтальм. России М., 2000. - часть 2. - 248-249.

72. Лапин И.П. Плацебо и терапия/ И.П. Лапин СПб.: Лань, 2000.-224с.

73. Лихницкая И.И. Академик З.Г. Френкель и становление геронтологии в России/И.И. Лихницкая, Р.Ш. Бахтияров // Успехи геронтол. 1997. -Т. 1.-С. 16-19.

74. Логай И.М. Этапы развития тканевой терапии по методу академика В.П. Филатова/ И.М. Логай, Е.П. Соловьева, Е.П. Сотникова // Тез. докл. науч. конф. офтальмологов, посвященой 90-летию акад. И.О. Пучковской. Одесса, 1998, с. 211-213.

75. Лопашов Г.В. Основные факторы и периоды индукционных процессов в развитии/ Г.В. Лопашов, В.Н. Земчихина // Усп. соврем, биологии. 2000. - Т. 120, № 6. - С. 540-549.

76. Максимов И.Б. Перспективы применения цитомединов в офтальмологии/ И.Б. Максимов // Регуляторные пептиды в норме и патологии (цитомедины): Сб. науч. работ / Под ред. Б.И. Кузника. -Читан, гос. мед. ин-т. Чита, 1991. - С. 81-82.

77. Максимов И.Б. Комплексная пептидная коррекция при микрохирургическом лечении травм глаз и их последствий: Автореф. дис. док. мед. наук / И.Б. Максимов Москва, 1996а. - 42 с.

78. Максимов И.Б. Состояние и перспективы использования пептидных биорегуляторов в офтальмологии/ И.Б. Максимов // Тез. докл. науч. симпоз. Теронтологические аспекты пептидной регуляции функций организма". СПб., 19966. - С. 55-56.

79. Максимов И.Б. Инволюционные центральные хориоретинальные дистрофии: применение пептидных биорегуляторов в комплексном лечении/ И.Б. Максимов, Г.В. Анисимова СПб.: ИКФ "Фолиант", 2001.-88 с.

80. Мелентьев A.C. Гериатрические аспекты внутренных болезней/ A.C. Мелентьев, B.C. Гасилин, К.И. Гусев и др. М., 1995. - 394 с.

81. Морозов В.Г. Влияние веществ, выделенных из гипоталамуса, на иммуногенез и морфологический состав крови/ В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон // Эксперим. хирургия и анестезиология. 1973. - № 1. -С. 19-22.

82. Морозов В.Г. Выделение из костного мозга, лимфоцитов и тимуса полипептидов, регулирующих процессы межклеточной кооперации в системе иммунитета/ В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон // Докл. АН СССР 1981а. - Т. 261, № 1. - С. 235-239.

83. Морозов В.Г. Молекулярные механизмы биорегуляции генетической активности и клеточного метаболизма/ В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон // Тез. докл. XVIII Всесоюз. съезда терапевтов. М.: «Медицина», 19816. Т. 1.-С. 78-80.

84. Морозов В.Г. Новый класс биологических регуляторов многоклеточных систем цитомедины/ В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон // Успехи соврем, биологии. - 1983. - Т. 96, вып. 3. - С. 339-346.

85. Морозов В.Г. Роль клеточных медиаторов (цитомединов) в регуляции генетической активности/ В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон // Изв. АН СССР, сер. биол. 1985. -№ 4. - С. 581-587.

86. Морозов В.Г. Пептидные биорегуляторы (25-летний опыт экспериментального и клинического изучения)/ В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон СПб.: Наука, 1996а. - 74 с.

87. Морозов В.Г. Достижения и перспективы в области биорегуляции и геронтологии/ В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон // Матер. Между нар. симпозиума «Геронтологическе аспекты пептидной регуляции функций организма». СПб: «Наука», 19966. - С. 7-9.

88. Морозов В.Г. Пептидные биорегуляторы в профилактике и лечении возрастной патологии/ В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон // Успехи геронтологии. 1997, - вып. 1. - С. 74-79.

89. Морозов В.Г. Пептидные тимомиметики/ В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон, В.В. Малинин СПб.: «Наука», 2000. - 158 с.

90. Морозов В.И. Фармакотерапия глазных болезней: Справочник. / Изд. 4-е, перераб. и доп./ В.И. Морозов, A.A. Яковлев М.: Медицина, 2001.-472 с.

91. Мошетова Л.К. Подготовка офтальмологических кадров в Российской Федерации/ Л.К. Мошетова // Тез. докл. VII Съезда офтальм. России -М., 2000. часть 2. - С. 233-235.

92. Мошетова Л.К. Гепарин в комплексном лечении центральной старческой хориоретинальной дистрофии/ Л.К. Мошетова, Э.Ф. Нескреба, Н.К. Федосова // Старение и глаз. М., 1976. - С. 83-85.

93. Наследственные и врожденные заболевания сетчатки и зрительного нерва / Под ред. А.М. Шамшиновой. М.: Медицина, 2001. - 528 с.

94. Нероев В.В. Новые аспекты проблемы патологии сетчатки и зрительного нерва // Вест, офтальм. 2000. - № 6. - С. 14-16.

95. Нероев В.В. Основные направления лечения тромбозов вен сетчатки/ В.В. Нероев, В.Э. Танковский // Русский офтальм. жур. 2000. - Т. 1, № 1. - С. 22-26.

96. Ю8.Новохатский A.C. Пигментная дистрофия сетчатки/ A.C. Новохатский Киев: Здоров'я, 1986. - 88 с.

97. Офтальмогериатрия / Под ред. H.A. Пучковской; АМН СССР. М.: Медицина, 1982. - 304 с.

98. Петров Р.В. Миелопептиды/ Р.В. Петров, A.A. Михайлова, Л.А. Фомина, Р.Н. Степаненко-М.: Наука., 2000. 181 с.

99. Пинаев Г.П. Методы культивирования клеток/ Г.П. Пинаев Л., 1988. -68 с.

100. Пирожков С.И. Старение населения: демографические аспекты/ С.И. Пирожков, Г.Л. Сафарова // Успехи геронтол. 1998. - т.2. - С. 24-32.

101. Поворознюк В.В. Влияние тималина на состояние костной ткани/ В.В. Поворознюк, И.Д. Кошмура // Застосування reponpoTeicropiB для попередження прискореного старшня. Киев, 1996. С. 129-130.

102. Поздеев Н.В. Биосинтез мелатонина в эпифизе в раннем постнательном онтогенезе у здоровых и больных наследственной дегенерацией сетчатки крыс/ Н.В. Поздеев, Р.Н. Этингоф // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1997. - Т. 123. - С. 131-135.

103. Починок Т.В. Экспресс-метод определения антирадикальной активности лекарственных веществ/ Т.В. Починок, М.Л. Тараховский, В.А. Портягина и др. // Хим.-фарм. журн. 1985. - № 5. - С. 565-569.

104. Практическая гериатрия (избранные клинические и организационные аспекты) / Под ред. Л.Б. Лазебника. М, 2002. - 555 с.

105. Прокопенко В.М. Применение хемилюминометрии при угрозе прерывания беременности поздних сроков/ В.М. Прокопенко, Н.Г. Кошелева, Т.П. Вошева и др. // Акушер, и гинекол. 1999. - № 4. - С. 44-45.

106. Пушкова Э.С. Социальная геронтология взгляд на современное развитие в России/ Э.С. Пушкова // Клинич. геронтол. - 2001а. - № 34. - С. 3-7.

107. Пушкова Э.С. Современные возможные направления развития социальной геронтологии/ Э.С. Пушкова // Успехи геронтол. 20016. -Вып. 7.-С. 110-114.

108. Рудакова A.B. овременная фармакотерапия: доказательства эффективности/ A.B. Рудакова, П.Ф. Хвещук СПб.: Воен.-мед. акад. им. С.М. Кирова, 2002. - 256 с.

109. Ш.Рунион Р. Справочник по непараметрической статистике: современный подход: пер. с англ./ Р. Рунион- М.: Финансы и статистика, 1982. -198 с.

110. Рыбников В.Ю. Пептидная регуляция функций мозга/ В.Ю. Рыбников, Н.Г. Закуцкий СПб., 2000. - 24 с.

111. Рыжак Г.А. Безопасность пептидных биорегуляторов природного происхождения/ Г.А. Рыжак СПб.: издательство «Бояныч», 2002. -40 с.

112. Рыжак Г.А. Изучение белковых компонентов пептидных регуляторов природного происхождения/ Г.А. Рыжак, П.А. Некрасов, О.И. Киселев, В.Х. Хавинсон // Бюлл. экспер. биол. и мед. 2003. - Т. 135, № 1.-С. 62-65.

113. Савко В.В. Эффективность мареполимиэла при лечении центральной дистрофии сетчатки/ В.В. Савко, Е.П. Сотникова, Н.И. Нарицына, Н.В. Коновалова и др. // Офтальм. журн. 1996. - № 5-6. - С. 302-304.

114. Сафарова Г.Л. Демографические аспекты старения населения России/ Сафарова Г.Л. // Успехи геронтол. 1997. - Вып. 1. - С. 20-24.

115. Сафарова Г.Л. Демографические закономерности старения населения: Автореф. дис. док. биол. наук/ Сафарова Г.Л. СПб, 2002. - 42 с.

116. Сергиенко В.И. Математическая статистика в клинических исследованиях/ В.И. Сергиенко, И.Б. Бондарева М.: ГЭОТАР-МЕД. -2001.-256 с.

117. Сидоренко A.B. ООН возглавляет программу исследований старения в XXI столетий/ A.B. Сидоренко, Г.Р. Эндрюс // Успехи геронтол. -2000.-Вып. 4.-С. 7-13.

118. Современная офтальмология: руководство для врачей / Под ред. В.Ф.Даниличева. СПб.: Издательство "Питер", 2000. - 672 с.

119. Стальная И.Д. Определение содержания диеновых конъюгатов и шиффовых оснований/ И.Д. Стальная // Современные методы биохимии. М.: Медицина, 1974. - 76 с.

120. Терапевтическая офтальмология / Под ред. M.J1. Краснова, Н.Б.Шульпиной. М.: Медицина, 1985. - 360 с.

121. Фрешни Р. Культуры животных клеток/ Р. Фрешни М., 1989. - 47 с.

122. Фролькис В.В. Экспериментальные пути продления жизни/ В.В. Фролькис, Х.К. Мурадян JL: Наука, 1988. - 248 с.

123. Фролькис В.В. Старение, эволюция и продление жизни/ В.В. Фролькис, Х.К. Мурадян Киев: Наукова думка, 1992. - 336 с.

124. Фукс Б.Б. Материалы к анализу патогенеза наследственных дистрофий сетчатки/ Б.Б. Фукс // Вестник АМН СССР. 1978. - № 10. - С.29-30.

125. Хавинсон В.Х. Пептидная регуляция старения/ В.Х. Хавинсон // Вестн. РАМН. 2001а. - С. 16 - 20.

126. Хавинсон В.Х. Тканеспецифическое действие пептидов/ В.Х. Хавинсон // Бюлл. экспер. биол. и мед. 20016. - Т. 132, № 8. - С. 228229.

127. Хавинсон В.Х. Тетрапептид, стимулирующий функцию сетчатой оболочки глаза, фармакологическое средство на его основе и способ его применения/ В.Х. Хавинсон Пат. РФ. № 2161982 от 20.01.2001.

128. Хавинсон В.Х. Синтетический пептид эпифиза увеличивает продолжительность жизни и угнетает развитие спонтанных опухолей у мышей/ В.Х. Хавинсон, В.Н. Анисимов // Докл. АН. 2000. - Т. 373, №4.-С. 567-569.

129. Хавинсон В.Х. Возрастная динамика регуляторных пептидов/ В.Х. Хавинсон, И.П. Ашмарин, В.В. Малинин // Наука долголетия. 2001. -№ 1.-С. 18-22.

130. Хавинсон В.Х. Влияние пептида ливагена на активацию хроматина в лимфоцитах лиц старческого возраста/ В.Х. Хавинсон, Т.А. Лежава, Дж.Г. Монаселидзе и др. // Бюлл. экспер. биол. и мед. 2002. - Т. 134, № 10.-С.451-455.

131. Хавинсон В.Х., Максимов И.Б. Применение ретилина для лечения заболеваний сетчатки глаз // Воен.-мед. журн. 1994. - № 7. - С. 62-63.

132. Хавинсон В.Х. Механизмы геропротекторного действия пептидов/ В.Х. Хавинсон, В.В. Малинин // Бюлл. экспер. биол. и мед. 2002. -Т. 133, № 1.-С. 4-10.

133. Хавинсон В.Х. Тканеспецифическое действие пептидов в культуре тканей крыс разного возраста/ В.Х. Хавинсон, В.В. Малинин, Н.И. Чалисова, Е.И. Григорьев // Успехи геронтол. 2002. - вып. 9. - С. 95100.

134. Хавинсон В.Х. Пептиды эпифиза и тимуса в регуляции старения/ В.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов СПб.: ИКФ «Фолиант», 2001. - 160 с.

135. Хавинсон В.Х. Способ получения вещества, стимулирующего функцию сетчатки глаза/ В.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов, Н.Д. Сидорова и др. А. с. 1436305 СССР, МКИ4 А 61 К 35/44. - № 3899333/28 - 14; Заяв. 21.05.85; Зарегистр. 08.07.88.

136. Хавинсон В.Х. Влияние тетрапептида эпифиза на состояние антиоксидантной защиты у Drosophila Melanogaster/ В.Х. Хавинсон, C.B. Мыльников // Бюлл. экспер. биол. и мед. 2000. - Т. 129, № 4. - С. 420-422.

137. Хавинсон В.Х. Влияние пептидов сетчатки на регенерацию нейрорецепторного аппарата глаза/ В.Х. Хавинсон, М.И. Разумовский, Н.В. Балашов и др. // Реактивность и регенерация таней: Тез. докл. науч. конф. JI, 1990.- С. 15.

138. Хавинсон В.Х. Средство, восстанавливающее функцию сетчатой оболочки глаза/ В.Х. Хавинсон, C.B. Серый, A.J1. Кожемякин, Р.И. Валиев Пат. 2073518 Рос. Федерации, МКИ6. - № 93030389/14; Заяв. 17.06.93; Опубл. 20.02.97.

139. Хараузов А.К. Изменение электроретинограммы крыс линии Кемпбелл при развитии наследственной дегенерации сетчатки/ А.К. Хараузов, Ю.Е. Шелепин, Н.В. Поздеев и др. // Физиолог, журн. им. И.М. Сеченова. 1996. - Т. 82, № 8-9. - С. 73-79.

140. Харинцева C.B. Применение ретилина при лечении тромбозов центральной вены сетчатки/ C.B. Харинцева // Цитомедины: Сб. науч. трудов. Вып. 2 / Под ред. Б.И. Ку ,ника ; Читан, гос. мед. ин-т. Чита, 1991.- С. 90.

141. Чеботарев Д.Ф. Атеросклероз и возраст/ Д.Ф. Чеботарев, О.В. Коркушко, Н.Б. Маньковский, А.Я. Минц JI, 1982. - 295 с.

142. Чалисова Н.И. Влияние полипептидных фракций тимуса на развитие органотипической культуры вилочковой железы и селезенки крысы/

143. Н.И. Чалисова, В.Х. Хавинсон, В.А. Пеннияйнен, Е.И. Григорьев // Цитология. 1999. - Т. 41, № 10. - С. 889-894.

144. Шадричев Ф.Е. Диабетическая ретинопатия/ Ф.Е. Шадричев, Ю.С. Астахов, О.Я. Крянева, А.Б. Лисочкина С.Пб.: СПбГМУ, 1998.- 48 с.

145. Шамшинова A.M. Клиническая физиология зрения: Сб. науч. трудов МНИИГБ им. Гельмгольца/ A.M. Шамшинова М.: АО «Русомед», 1993.-С. 57-83.

146. Шамшинова A.M. Функциональные метоцы исследований в офтальмологии/ A.M. Шамшинова, В.В. Волков М.: Медицина, 1999. -416 с.

147. Шамшинова A.M. Современная электроретинография в клинике глазных болезней/ A.M. Шамшинова, М.В. Зуева, И.В. Цапенко и др. // Рус. офтальм. журн. 2001. - Т. 2, № 1. - С. 30-35.

148. Шатаева Л.К. Пептидная саморегуляция живых систем (факты и гипотезы)/ Л.К. Шатаева, В.Х. Хавинсон, И.Ю. Ряднова СПб.: Наука, 2003.-222 с.

149. Шерешевская О.И. Старение глаз/ О.И. Шерешевская М.: Медицина, 1970.- 148 с.

150. Шлопак Т.В. Методические рекомендации по диагностике и лечению пигментной дистрофии сетчатки/ Т.В. Шлопак, Д.Б. Волошинов, Г.С. Бондарева Киев, 1977. - 11 с.

151. Шульпина Н.Б. Биомикроскопия глаза/ Н.Б. Шульпина М.: Медицина, 1974. - 216 с.

152. Шутак Т.С. Влияние эпиталамина на сердечно-сосудистую систему, углеводный и липидный обмен у больных инсулиннезависимым сахарным диабетом: Автореф. дис. . канд. мед. наук/ Т.С. Шутак -СПб., 1999. 22 с.

153. Экономическая оценка эффективности лекарственной терапии (фармакоэкономический анализ) / Под ред. П.А. Воробьева. 2000. -80 с.

154. Эмануэль Н.М. Антиоксиданты в пролонгировании жизни/ Н.М. Эмануэль // Биология старения / Отв. ред. В.В. Фролькис. Л.: Наука. - 1982. - С. 569-586.

155. Этингоф Р.Н. Наследственная дистрофия сетчатки: возможные причины болезни / Р.Н. Этингоф // Нейрохимия. 1989. - Т. 8, № 1. -С. 111-123.

156. Южаков A.M. Комплексное лечение больных сенильной центральной хориоретинальной дистрофией сетчатки с применением электромагнитного поля/ A.M. Южаков // Вестник офтальм. 2000. -№ 3. - С. 41-44.

157. Южаков A.M. Метод классической гомеопатии в офтальмологии/

158. A.M. Южаков, Л.О. Катанская, Т.А. Маликовская // Тез. докл. VII Съезда офтальм. России М., 2000а. - часть 2. - С. 338.

159. Южаков A.M. Состояние офтальмологической помощи в Российской Федерации/ A.M. Южаков, А.В. Хватова, А.Г. Травкин // Тез. докл. VII Съезда офтальм. России М., 20006. - часть 2. - 229-232.

160. Яковлев Г.М. Резистентность, стресс, регуляция/ Г.М. Яковлев, B.C. Новиков, В.Х. Хавинсон Л.: Наука. - 1990. - 238 с.

161. Яковлев Г.М. Перспективы биорегулирующей терапии/ Г.М. Яковлев,

162. B.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов, B.C. Новиков // Клин, медицина. -1991.-Т. 69, №3.-С. 85-90.

163. Aejmelaeus R. The total peroxyl radical scavenging capacity of human plasma and LDL: Effect of age and disease/ R. Aejmelaeus Helsinki: Natl. Public Health Inst., 1997. - 64 p.

164. Agostini A. Superoxide dismutase, catalase and glutathione peroxidase activities in maternal and fetal blood erythorocytes/ A. Agostini, G.G.

165. Gerli, L. Beretta, M. Branhci // J. Clin. Chem. Biochem. 1980. - Vol. 17. -P. 771-773.

166. Alho J.M. Scenarios, uncertainty forecasts of the World Population/ J.M. Alho // Journal of the Royal Statistical Society- 1997. N 160. - P. 71-85.

167. AH R.R. Gene therapy for inherited retinal degeneration/ R.R. Ali, M.B. Reichel, D.M. Hunt, S.S. Bhattacharya // Br. J. Ophthalmol. 1997. - N 81. -P. 795-801.

168. Ames B.N. Oxidants, antioxidants, and the degenerative diseases of aging/ B.N. Ames, M.K. Shigenege, T.M. Hogen // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1993. Vol. 90. - P. 7915-7921.

169. Anisimov V.N. Effect of pineal peptide preparation (epitalamin) on life span and pineal and serum melatonin level in old rats/ V.N. Anisimov, L.A. Bondarenko, V.Kh. Khavinson // Ann. of the N. Y. Acad, of Sci. 1992, Vol. 673. P. 53-57.

170. Anisimov V.N. Twenty years of study on effect of pineal preparation: epithalamin in experimental gerontology and oncology/ Anisimov, V.Kh. Khavinson, V.G. Morosov // Ann. of N.Y. Acad, of Sci. 1994.- Vol. 719. -P. 483-493.

171. Anisimov V.N. Pineal peptide preparation epithalami increases the lifespan of fruit flies, mice and rats/ V.N. Anisimov, S.V. Mylnicov, V.Kh. Khavinson // Ibid. 1998. - Vol. 103. - C. 123-132.

172. Arking R. Biology of aging. Observations and principles. 2nd edit. -Sunderland: Sinauer, 1998.-486 p.

173. Asashima M. Mesodermal induction in early Xenopus embryos by activin A (erythroid differentiation factor)/ M. Asashima, H. Nakano, K. Shimada, K. Kinoshita et al. // Roux Arch. Devel. Biol. 1990. - Vol. 198. - P. 330335.

174. Asashima M. Mesoderm induction during early amphibian development/ M. Asashima // Devel. Growth Differ. 1994. - Vol. 36. - P. 343-356.

175. Autunes F. On the antioxidant activity of melatonin/ F. Autunes, R.C. Barclay, K.U. Ingold // Free Radical. Biol. Med. 199. - Vol. 26. - P. 117128.

176. Bee W.H. Laser-Induced CNV in drug development experiences with the monkey model/ W.H. Bee, M. Wills // 8th Congress of the ISOT: Abstr. -Gemany, 2002. P. 47.

177. Bennett J. Adenovirus-mediated delivery of rhodopsin-promoted bcl-2 results in a delay in photoreceptor cell death in the rd/rd mouse/ J. Bennett, Y. Zeng, R. Bajwa, L. Klatt et all. // Gene Ther. 1998. - Vol. 5.- P. 11561164.

178. Bernstein S. Age-Related retinal gene expression changes and ARMD/ S. Bernstein, E.H. Smith Lois, I. Somilari Richard, Guo Yan // Abst. of Conference on "Aging retina and early degeneration" Boston, 2001. -P. 28.

179. Berson E.L. Retinitis pigmentosa. The Friedenwald lecture/ E.L. Berson // Invest. Ophthalm. Vis. Sci. 1985. - Vol. 34. - P. 1659-1676.

180. Berson E.L. Retinitis pigmentosa and allied diseases: some aspects of diagnosis, p athogenesis a nd m anagement, i n n ight v ision/ E .L. B erson / /

181. Current research and future directions. Washington: National Academy Press, 1987. P. 41-55.

182. Berson E.L. A randomized trial of vitamin A and vitamin E supplementation for retinitis pigmentosa/ E.L. Berson, B. Rosner, M.A. Sandberg // Arch. Ophthalmol., Vol. 111., 1993. P. 761-772.

183. Besharse J. Melatonin delays photoreceptor degeneration in therd/rd./ J. Besharse, D.A. Danis // Science. 1983. - Vol. 219. - P.1341-1344.

184. Bourne M.C. Heredity degeneration of the rat retina/ M.C. Bourne, D.A. Campbell, K. Tansley // Brit.J.Ophthalm.- 1938. Vol. 22. - P. 613-618.

185. Bressler N.M. Preventive ophthalmology: age-related macular degeneration/ N.M. Bressler, S.B. Bressler // Ophthalmology. 1995. -Vol. 102.- P. 1206-1211.

186. Bressler S.B. Age-related macular degeneration: drusen and geographic atrophy/ S.B. Bressler, N.M. Bressler, E.S. Gragoudas // Principles and Practice of Ophthalmology. 2nd ed. Philadelphia: Saunders.- 1999. P. 1982-1991.

187. Bressler N.M. Age-related macular degeneration/ N.M. Bressler, S.B. Bressler, S.L. Fine // Surv. Ophthalmol. 1988.- Vol. 32. - P. 375-413.

188. Browh K.T. The electroretinogram: its components and their origin. The Retina: Motphology, Function and Clinical Characteristics / University of California Press, Los-Angeles/ K.T. Browh 1969. - P. 319-378.

189. Birch D.G. Rod ERGs in retinitis pigmentosa and cone-rod degeneration/ D.G. Birch, G.E. Fish // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1987. - Vol. 28. -P. 140-150.

190. Birch D.G. Dependence of cone b-wave implicit time on rod amplitude in retinitis pigmentosa/ D.G. Birch, M.A. Sandberg // Vision. Res. 1987. -Vol. 27-P. 1105-1112.

191. Bornstein M.B. Patterns of development and response of cultured mammlian nerve tissue/ M.B. Bornstein // In: Metabolic compartmentation in the brain. / R. Balazs, J.E. Crenier (Ed.) London, 1973. - P. 267-283.

192. Boughman J.A. Population genetic studies of retinitis pigmentosa/ J.A. Boughman, P.P. Connely, W.E. Nance // Amer. J. Hum. Genetic. 1980. -Vol. 32, N 2. - P. 223-235.

193. Campbell M.J. Medical statistics: a commonsense approach. 3rd ed./ M.J. Campbell, D. Machin - Chichester.: John Wiley and Sons, 1999. - 203 p.

194. Carey J. Principles of biodemography wiyh special reference to human longevity/ J. Carey, D.S. Judge // Population. English selection. -2001, V. 13,N l.-P. 9-40.

195. Carr R.E. the generalized heredoretinal disorders/ R.E. Carr // Vitreoretinal Disease: The Essentials. New York: Thieme.- 1999. P. 307-332.

196. Cassone V.M. Melatonin's role in vertebrate circadian rhythms/ V.M. Cassone // Chronobiol Int.-V >98. Vol. 15, N 5. - P. 457-473.

197. Chertov O.Yu. Mesoderm inducing factor from bovine amniotic fluid: purification and N- terminal amino-acid sequences/ O.Yu. Chertov, A.L. Krasnosel'skii, M.E. Bogdanov, O.A. Hoperskaya // Biomed. Sci. -1990.-Vol. l.-P.499-506.

198. Cocburn D. Retinitis pigmentosa: A review of the tapeto-retinal dystrophies/ D. Cocburn // Amstr. J. Ophtomet.- 1985. Vol. 68. - P. 138143.

199. Converse C.A. Lipid metabolism in retinitis pigmentosa/ C.A. Converse, T. McLachlan, A.C. Bow // Prog. Clin. Biol. Res. 1987. - Vol. 247. - P. 93101.

200. Cousins Scott W. Role of aging and the susceptibility of mice to basal laminar deposit (BLD) formation/ Cousins W. Scott, Karl S. Csaky // Abst. of Conference on "Aging retina and early degeneration" Boston, 2001. -P. 25.

201. Cutler R. Human longevity and aging: possible role of reactive oxygen species/ R. Cutler // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1991. - Vol. 621. - P. 1-28.

202. Delori F. Janet Spectral characteristics of retinal autofluorescence in aging and of A2E in cultured RPE cells/ F. Delori, Goger G. Douglas, R. Sparrow // Abst. of Conference on "Aging retina and early degeneration" -Boston,2001.-P. 21.

203. Dilman V.M. Development, Aging and Disease. A New Rationale for an Intervention Strategy/ V.M. Dilman Chur: Harwood Academic Publ. -1994.-387 p.

204. Dilman V.M. Increase in life span of rats following polipeptide pineal extract treatment/ V.M. Dilman, V.N. Anisimov, M.N. Ostroumova et al. // Exp. Pathol. 1979. - Vol. 17. - P. 539-545.

205. Dowling J.E. Inherited retinal dystrophy in the rat/ J.E. Dowling, M.D. Sidman // J.Cell Biol. 1962. - Vol/14, N 1. - P. 73-109.

206. Dryja T.P. A point mutation of the rhodopsin gene in one form of retinitis pigmentosa/ T.P. Dryja, T.L. VcGee, E. Reichel // Nature. 1990. - Vol. 343. - P. 364-366.

207. Dubocovich M.L. Melatonin is a potent modulator of dopamine release in the retina/ M.L. Dubocovich // Nature. 1983. - Vol. 306. - P. 782-784.

208. Ehinger B. Transplantation of photoreceptors and of full thickness retina/ B. Ehinger // Abstracts of 10th World Conference of IRPA (International Retinitis Pigmentosa Association.). Lugano, 1998. - P. 16.

209. Farber D.B. Indentification of genes causing phtoreceptor degenerations leading to blindness/ D.B. Farber, M. Danciger // Curr.Opion. Neurobiol. -1997.-Vol. 7.-P. 666-673.

210. Finch C.E. Genetics of aging/ C.E. Finch, R.E. Tanzi // Science. 1997. -Vol. 278.-P. 407-411.

211. Fishman G.A. Acetazolamide for treatment of chronic macular edema in retinitis pigmentosa/ GA. Fishman, L.D. Gilbert, R.G. Fiscella // Arch. Ophthalmol. 1989. - Vol. 107. - P. 1445-1452.

212. Forsell J. Expression of pineal ultraviolet and green-like opsins in the pineal organ and retina of teleosts/ J. Forsell, P. Ekstrom, L.N. Flamarique, B. Holmqvist // J. Exp. Biol. 2001. - Vol. 204, N 14. - P. 2517-2525.

213. Foxman S.G. Classification of congenital and early onset retinitis pigmentosa/ S.G. Foxman, J.R. Heckenlively, J.B. Bateman // Arch. Ophthalmol. 1985. - Vol. 103.-P. 1502-1506.

214. Friedman N.J. The Massachusetts eye and ear infirmary illustrate, d manual of ophthalmology/ N.J. Friedman, R. Pineda, P.K. Kaiser // USA, Philadelphia 1998. -- 432 p.

215. Frasson M. Retinitis pigmentosa: rod photoreceptor rescue by a calcium-channel blocker in the rod mouse/ M. Frasson, J.A. Sahel, M. Fabre, M. Simonutti et all. // Nature Medicine. 1999. - Vol. 5. - P. 1183-1187.

216. Harman D. Aging and disease: extending functional life span / D. Harman // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1996. - Vol. 786. - P. 321-336.

217. Herzog E.D. Keeping an eye on retinal cloks/ E.D. Herzog, G.D. Block // Chronobiol. Int. 1999. - Vol. 16 - P. 229-247.

218. Hu Dan Wing H. Prevalence and mode inheritance of major genetic eye diseases in China/ H. Hu Dan Wing // J. Med. Genet. 1987. - Vol. 24, N 10.-P. 584-588.

219. Humphries P. Retinitis pigmentosa: genetic mapping in X-linked and autosomal forms of the disease/ P. Humphries, G.I. Farrar, P. Kenna // Clin. Genet. 1990. - Vol. 38, N 1. - P. 1-13,

220. Iuvone P.M. Functional interaction of melatonin receptors and D1 dopamine receptors in cultured chick retinal neurons/ P.M. Iuvone, J. Gan // J. Neurosci. 1995. - Vol. 15. - P. 2179-2185.

221. Johns D.R. Mt DNA Mutations and Ophthalmological disease/ D.R. Johns // Molecular genetics of ocular diseases. / Ed. J. L. Wiggs. Wiley Liss: New York. - 1994. - P. 201-217.

222. Justino L. C hanges i n t he r etinocortical e voked p otentials i n s ubjects 7 5 years of age and older/ L. Justino, H. Kergoat, M.J. Kergoat // Clin. Neurophysiol. 2001. - Vol. 112, N 7. - P. 1343-1348.

223. Kanski J.J. Systemic diseases and the eye/ J.J. Kanski // MOSBY 2001. - 249 p.

224. Karwatowski W. Preparation of Bruch's membrane and analysis of the agere) ated changes in the structural collagens/ W. Karwatowski, T. Jeffries, V. Dauance et al. // Ibid. 1995. - Vol.79. - P. 944-952.

225. Kaskow J.W. Changes in brain corticotropin-releasing factor messenger RNA expression in aged Fischer 344 rats/ J.W. Kaskow, A. Regmi, J.J. Mulchahey et al. // Brain Res. 1999. - Vol. 822, N 1-2. - P. 228-230.

226. Khavinson V.Kh. Tissue-spesific effect of the peptides/ V.Kh. Khavinson // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. 2001. - Vol. 132, N 2. -C. 807-808.

227. Khavinson V. Peptides and ageing / Neuroendocrinology Letters/ V. Khavinson Special Issue, 2002. - 144 p.

228. Khavinson V.Kh. Effect of epitalon on the lifespan increase in Drosophila meloanogaster/ V .Kh. Khavinson, D .M. Izmaylov, L .K. Obukhova, V .V. Malinin // Mech. Ageing Dev. 2000. Vol. 120. - P. 141-149.

229. Kornzweig A.L. The eye in old age/ A.L. Kornzweig // Amer. J. Ophtalmol. 1965. - V. 60, N 5.- P. 835-843.

230. Kumar-Singh R. Encapsidated adenovirus minichromosome-mediated delivery of genes to the retina: application to the rescue of photoreceptordegeneration/ R. Kumar-Singh, D.B. Farber // Human Molecular Genetics. 1998. - Vol. 7, N 12. - P. 1893-1990.

231. Kumar-Singh R., Farber D.B. Construction and use of enecapsidated adenovirus minichromosomes (gutted vectors) for gene delivery to photoreceptors/ R. Kumar-Singh, D.B. Farber // Methods in Enzymology2000.-Vol. 316, P. 734-743.

232. L'Able M.R. Automated assay of superoxide dismutase in blood/ M.R. L'Able, P.W. Fischer// Methods Enzymology. 1990. - Vol. 186. - P. 232237.

233. Lam B.L. Retinitis pigmentosa associated with a dominant mutation in cordon 46 of the peripherin/ RDS gene (Arginin-46-stop)/ B.L. Lam, K. Vandenburgh, V.C. Sheffield et all. // Amer. J. Ophthalmol. 1995. -Vol. 119.-P. 65-71.

234. Levine R. L. Determination of carbonil content in oxidatively modified proteins/ R. L. Levine, D. Gorland, C.N. Oliver, F. Fmici // Method in Enzymology. 1990. - Vol. 186. - P. 464-479.

235. Levi-Montalchini R. Nerve growth factor/ R. Levi-Montalchini, R. Angeletty // Physiol. Rev. 1982. - Vol. 48. - P. 534-569.

236. Lewis H. Vitrectomy for diabetic macular traction and edema associated with posterior hyaloidal traction/ H. Lewis, G.H. Abramz, M.S. Blumenkranz,R.V. Campo//Ophthalmology. 1992.- Vol. 99, № 5. -P. 753-759.

237. Liang F. Melatonin delays photoreceptor degeneration in the rds/rds mous/

238. F. Liang, T.S. Aleman, Z. Yang, A.V. Cideciyan et all. // Neuro Report.2001.-Vol. 12, N5.-P. 1011-1014.

239. Litte H. Diabetic retinopathy/ H. Litte New York: Thieme, 1983. - 396 p.

240. Lopashov G.V. Inductive capacity of living eye tissues from adult frogs/

241. G.V. Lopashov, O.N. Golubeva, K.G. Zviadadze // Differentiation. 1997. -Vol. 61.-P. 237-242.

242. Lyness A.L. A clinical, phychophysical and electroretinographic survey of patients with autosomal dominant retinitis pigmentosa/ A.L. Lyness, W. Ernst, M.P. Quinlan et all. // Brit. J. Ophthalmol. 1985. - Vool. 69. -P. 326-339.

243. Macular and retinal diseases: recent advances in diagnosis and therapy / volume editors, P. Wiedemann, L. Kohen. 1997. - 99 p.

244. Macular photocoagulation study group: argon laser photocoagulation for senile macular degeneration // Arch. Ophthalmol., Vol. 100., 1982. P. 912-918.

245. Marchiafava P.L. Melatonin as antioxioxidant in retinal photoreceptors/ P.L. Marchiafava, B. Longoni // J. Pineal Res. 1999. - Vol. 26. - P. 184189.

246. Marmor M.F. The retinal pigment epithelium: function and disease/ M.F. Marmor, T.J. Wolfensberger New York: Oxford University Press. -1998.- 135 p.

247. Marshall J. Pathologic findings and putative mechanisms in retinitis pigmentosa/ J. Marshall, J.R. Heckenlively // Retinitis pigmentosa /' in Heckenlively J.R. (ed.). Philadelphia: J.B. Lippincott, 1988. - P. 37-67.

248. Maxwell S.R. Prospects for the use of antioxidant therapies/ S.R. Maxwell // Drugs. 1995. - Vol. 49. - P. 345-361.

249. Mayo J.C. Melatonin prevents apoptosis induced by 6-hydroxydopamine in neuronal cells: implicayions for Parkinson's disease/ J.C. Mayo, R.M. Sainz, H. Uria, I. Antolin et all. // Pineal Res. 1998. - Vol. 24. - P. 179192.

250. Miller J. New treatment strategies for macular degeneration/ J. Miller // Abst. of Conference on "Aging retina and early degeneration". Boston, 2001.- P. 9.

251. Morozov V.G. Natural and synthetic thymic peptides as therapeutics for immune dysfunction/ V.G. Morozov, V.Kh. Khavinson // Int. J. Immunopharmac. 1997. - Vol. 19, N 9/10. - P. 501-505.

252. Michaelson I.C. Histo-ophthalmoscopy: The use of ophthalmoscope in histology / In Bellows J.G. (ed.)/ I.C. Michaelson, L. Yanco // Contemporary Ophthalmology. Williams & Wilkins: Baltimore, 1972.

253. Nakazawa M. Arresting gene mutations in autosomal recessive retinitis pigmentosa/ M. Nakazawa, Y. Wada, M. Tamai // Arch Ophthalmol. -1998.- Vol. 116-P.498-501.

254. Neufeld A. Aging is risk factor for the loss of retinal ganglion cell/ A. Neufeld // Abst. of Conference on "Aging retina and early degeneration" Boston, 2001. - P. 23.

255. Nuttall S.L. Increased oxidative stress in ageing and age-related disease/ S.L. Nuttall, U. Martin, T. Hutchin et al. // Age & ageing. 1998. - Vol.27 (Suppl.l). - P. 34.

256. Orr W.C. Externsion of life-span by overex-presion of superoxide dismutase and in Drosophila melanogaster/ W.C. Orr, R.S. Sohal // Science. 1994. - Vol.263. - P. 1128-1130.

257. Pabst G. Review of methods and criteria for the evaluation of bioequivalence studies/ G. Pabst, H. Jaeger // Eur. J. clin. Pharmacol. -1990.-Vol. 38.-5-10.

258. Pappolla M.A. Melatonin prevents death of neuroblastoma cells exposed to the Alzheimer's amyloid peptide/ M.A. Pappolla, M. Sos, R.A. Omar // J. Neurosci. 1997. - Vol. 17. - P. 1683-1690.

259. Pauleikhoff D. Drusen as risk factors in age-related macular disease/ D. Pauleikhoff, M.J. Barondes, D. Minassian // Am. J. Ophthalmol. Vol. 109.-P. 38-43.

260. Phillips K.F. Power of the two one-sided tests procedure in bioequivalence/ K.F. Phillips I I J. Pharmacokinet. Biopharm. 1990. - Vol. 18, N. 2. - P. 137-144.

261. Pierpaoli W. Pineal control of aging: effect of melatonin and pineal grafting on aging mice/ W. Pierpaoli, W. Regelson // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. - 1994. - Vol. 91. - P. 787-791.

262. Pierrefiche G. Oxygen free radicals, melatonin and aging/ G. Pierrefiche, H. Laborit // Exp. Gerontol. 1995. - Vol. 30. - P. 213-227.

263. Porta M. Screening for diabetic retinopathy in Europe editorial/ M. Porta, E. Kohner // Diabet. Med. -1991. Vol. 8, № 3. - P. 197 - 198.

264. Pruett R.C. Retinitis pigmentosa: clinical observations and correlations/ R.C. Pruett // Trans. Amer. Ophthalmol. Soc. 1983. - Vol. 81. - P. 693735.

265. Prusiner S.B. Prion diseases/ S.B. Prusiner // Seminars in Virology. 1996. -Vol. 7.-P. 157-167.

266. Puech B. Epidemiology and prevalence of hereditary retinal dystrophies in the Northern France/ B. Puech, B. Kostrubiec, J.C. Hache // J. Fr. Ophthalmol. -1991. Vol. 14, N 3. - P. 153-164.

267. Reichel M.B. An immune response after intraocular administration of a p-galactosidase reporter gene slows retinal degeneration in theRD mouse/ M.B. Reichel, J. Bainbridge, D. Baker, A.J. Thrasher et al. // Br.J.Ophthalmol. 2001. - N 85. - P. 341-344.

268. Reiter RJ. The pineal gland and melatonin in relation to aging: A summary o f t he theories and o f the d ate/ R J. R eiter // E xp. Gerontol. -1995.-Vol. 30.-P. 199-212.

269. Reiter R.J. Antioxidants actions of melatonin/ R.J. Reiter // Adv. Pharmacol. 1997.-Vol. 38. -P. 103-117.

270. Reiter R.J. Oxidative damage in the central nervous system: protection by melatonin/ R.J. Reiter // Prog. Neurobiol. 1998. - Vol. 56, N. 3. - P. 359384.

271. Rodrigues MM. Retinitis pigmentosa: Immunohistochrmical and biochemical studies of the retina/ MM. Rodrigues, B. Wiggert, M.O.M. Tso et al. // Canad. J. Ophthalmol. 1986. - Vol. 21. - P. 79-83.

272. Sarks S.H. Agreeing and degeneration in the macular region. A clinico-pathological study/ S.H. Sarks // Brit. J. Ophthalmol. 1976. - V. 60, N 5. -P. 324-341.

273. Sarks J.P. Evolution of geographic atrophy of the retinal pigment epithelium/ J.P. Sarks, S.H. Sars, M.C. Killingsworth // Eye. -1998. Vol. 2.-P. 552-577.

274. Savaskan E. Distribution of melatonin MT1 receptor immunoreactivity in human retina/ E. Savaskan, A. Wirz-Justice, G. Oliveri et al. // The Jor. of Histochem. & Cytochem., 2002. Vol. 50, N 4. - P. 519-525.

275. Scholl H.P. Electrophysiology in the investigation of acquired retinal disorders/ H.P. Scholl, E. Zrenner // Surv. Ophthalmol. 2000. - Vol. 45, Nl.-P. 29-47.

276. Seiliger M. Retinal degeneration induced by visible light: protection of function/ M. Selliger, C. Grimm, A. Wenzel, E. Zrener et al. // 8th Congress of the ISOT: Abstr. Gemany, 2002 - P. 95.

277. Smith J.C. Identification of a potent Xenopus mesoderm-iducing factor as a homologue of activin AJ J.C. Smith, B.J.M. Price, K. van Nimmen, D. Huylebrook // Nature. 1990. - Vol. 345. - P. 729-731.

278. Stroinzler B.L. The chemiluminescence of riboflavin/ B.L. Stroinzler, C.S. Soup // Arch. Biochem. Biophys. 1953. - Vol. 47, Nl.-P. 8-15.

279. Tiedemann H. Neue Ergebniss zur Frage nach der chemischen Natur der Induktionesstoffe beim Organisatoreffekt Spemanns/

280. H. Tiedemann // Die Naturwissenschaften. 1959. -Vol. 22. - P. 613-623.

281. Tiedemann H. Activie-ruhg des mesodermalen Induktionsfaktors in Huehnermuskulatur durch Behandlung mit Phenol/ H. Tiedemann, U. Becker // Embryologia. 1961. - Vol. 6. - P. 185-203.

282. Tosini G. Melatonin circadian rhythm in the retina of mammals/ G. Tosini // Cronobiol. Int. 2000. - Vol. 17. - P. 599-612.

283. Ushima Y. Production and identification of dityrosine horseradish peroxidase-H202-tyrosine system/ Y. Ushima, M. Nakano, T. Goto // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1984. - Vol. 125, N 3. - P. 916-918.

284. Valgan A. Retinitis Pigmentosa: hope for improved diagnosis and treatments/ A. Valgan // Med. J. Am. 1988. - Vol. 149, N8. - P. 398-400.

285. Van der Pijl J.W. Effect of danaparoid sodium on hard exudates in diabetic retinopathy/ J.W. van der Pijl, F.J. van der Woude, W. Swart et al. // Lancet. 1997. - Vol. - 350, № 9093. - P. 1743 - 1745.

286. Van der Pijl J.W. Danaparoid sodium in diabetic retinopathy/ J.W. van der Pijl, F.J. van der Woude, P.H. Geelhoed-Duijvestijn et al. // Lancet .1998.- Vol. 351, № 9094 P. 1743-1744.

287. Vivien-Roels B. Immunogistochemical evidence for the presence of melatonin in the pineal gland, the retina and the Harderian gland/ B. Vivien-Roels, P. Pevet, M.P. Dubois, J. Arendt et al. // Cell Tissue Res.-1981.-Vol. 217.-P. 105-115.

288. Wegener A. Characteristics of drug-induced retinal degeneration in cats/ A. Wegener, F. Krotlinger, P. Andrews, M. Edingloh et al. // 8th Congress of the ISOT: Abstr. Gemany, 2002. - P. 45.

289. Westendorp R.G. Human Longevity at the cost of reproductive success/ R.G. Westendorp, T.B.L. Kirkwood // Nature. 1998. - Vol. 396. - P. 743-746.

290. White M.P. Effect of exogenous melatonin on circadian disc shedding in the albino rat retina/ M.P. White, L.J. Fisher // Vis.Res. 1989. - Vol. 29. -P. 167-179.

291. Wiechmann A.F. Melatonin: parallels in pineal gland and retina/ A.F. Wiechmann // Exp. Eye Res. 1986. - Vol. 42, N 6. - P. 507-527.

292. Wiedemann P. Macular and Retinal Diseases. Recent Advances in diagnosis and therapy/ P. Wiedemann, L. Kohen Leipzig, 1997.- 100 p.

293. О первичный О после I курса лечения О через 3 мес. после лечения1. Диагноз1. Жалобы

294. Офтальмологический анамнез:1. Зрительные функции:1. УК СЮ= УБ 0Б=1. ВГДСЮ= ВГД 0Б=

295. Офтальмологический статус ОБ: Офтальмологический статус ОБ:

296. Биомикроскопия 00: Биомикроскопия ОБ:

297. Глазное дно ОБ: Глазное дно ОБш т