Влияние цитопротективной терапии тизолем на процессы регенерации миелоидной ткани и эпителия тощей кишки при воздействии ионизирующего излучения тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.16, кандидат медицинских наук Гребнев, Дмитрий Юрьевич

• Гребнев, Дмитрий Юрьевич
• кандидат медицинских наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Гребнев, Дмитрий Юрьевич

ВВЕДЕНИЕ.б

ГЛАВА I, О ВЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.I»

1.1.0 химической природе и свойствах препарата тнэолъ.II

1-2, Фармакодинамические н фармакокннетнческне свойства тизоля. И

1.3. Влияние экстремальных воздействий на состояние регенераторных процессов.„,,,.

1.4. Современные представления о механизмах восстановлен л я тканей после воздействия ионизирующего излучения.

1.5. Изменение процессов клеточного обновления, возникающие в системе гемопоэла н в системе желудочио - кишечного тракта после воздействий ионизирующего излучения.

1.6. Основные аспекты терапии острой лучевой болезни.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние цитопротективной терапии тизолем на процессы регенерации миелоидной ткани и эпителия тощей кишки при воздействии ионизирующего излучения»

Актуальность проблемы. Раскрытие новых механизмов регенерации тканей в экстремальных условиях позволяет определить и внедрить новые принципы патогенетической терапии, вести поиск новых активных факторов, влияющих на эти процессы, С этой целью используются биологически активные вещества, влияющие на митогенную активность, обладающие свойством адаптогенов, интолротскторов и др. (Горизонтов П.Д., 1976, Меерсон Ф.3,+ 1986, Ястребов АЛ. 2005).

Однако в настоящее время остается актуальной проблема восстановления регенерации тканей в условиях воздействия экстремальных факторов, а ее успешное решение во многом зависит от поиска новых активных препаратов, способных усиливать тканевую регенерацию.

В этом отношении наше внимание привлек аквакомилекс глицеросолъвата титана (тизоль), Препарат тиюль рекомендован МЗ РФ (Р 001667/01 - 2002) в качестве лекарственного средства для местного применения как обладающий противовоспалительным действием, что послужило толчком для активного внедрения тнзоля в клиническую практику и внесения в государственный реестр лекарственных средств МЗ РФ (Ларионов Л.П.Г Емельянова И.В., 2003). Химическая формула тнзоля: ТЮ(*(С jfftOjV(CjHgOjho*(Нмолекулярная масса 2054.

Тизоль был разработай и выпускается предприятием «(ОЛИМП» (.«Общество лабораторных исследований медицинских препаратов», г, Екатеринбург; Емельянова ИВ, Лопатина ГЛ, Филатова Е.А, 1988).

На основании ранее проведенных экспериментальных исследований установлено. что тизоль обладает радиопротекторным, противовоспалительным, бактерицидным, амапьгеэируюшнм действием, а также проводниковой активностью при применении в комплексе с другими лекарственными препаратами

Знаменский В.В., Берзнн С .А,, Герасимов В,Б„ Ларионов Л.П., 2003г.). Препарат тнэоль потенцирует действие противовоспалительных препаратов (Костина О.А., Федорова Н.П., 2003 г.), препаратов обладающих антимикробным действием (Спсктор С.И., Зобнина Г.А., 2003 г.).

Тизоль не токсичен и не является потенциальным аллергеном. Выявлено, что при парентеральном введении тизоль депонируется в клетках паренхиматозных органов, а также в клетках быстро обновляющихся тканей {мнелоидная ткань, эпителий кишечника). Через 2 недели содержание тнюля н орган маме (на основании исследования количества титана) соответствует значениям нормы, что свидетельствует о быстром выведении препарата из орган и зма {Ларионов ЛЛ, 1989 г,)г

Было показано также, что тизоль оказывает выраженный радиопротекторный эффект в случае парентерального введения препарата до радиационного облучения экспериментальным животным. Между тем парентеральное введение препарата тизоль в клинической практике пока не используется, вследствие отсутствия экспериментальных данных о его влиянии на органы и системы как а физиологических условиях, так и при патологических процессах, а также воздействии экстремальных факторов.

Известно, что результирующая клеточного обновления, дающая основание для оценки регенерации ткани, определяется учетом пролиферации клеток и программированной клеточной гибели (апоптоза), В этом отношении нельзя было исключить, что тизоль мог оказаться активным по отношению к обоим процессам.

Можно было предположить также, что действие препарата тизоль на регенерацию тканей могло быть усилено совместным использованием цитопротек-тнвных препаратов, действие которых направлено на генетический аппарат клетки (деринат, лейкоген и др.). Между тем. такая комбинация тнзоля со стимуляторами клеточной пролиферации не исследовалась, в то время как сочетан нос действие могло оказаться весьма благоприятным на исход клеточной репарации в условиях воздействия экстремальных факторов.

Среди экстремальных факторов наше внимание было сосредоточено на действии ионизирующего излучения, поскольку его повреждающее действие распространяется преимущественно на быстрообиовляющнеся ткани, которые нуждаются в поддержал ни высокого регенераторного потенциала.

Все изложенное выше и явилось основанием для постановки основной цели и задач настоящего исследования.

Цель исследования. Изучить действие препарата тнзоль при его парентеральном введении в физиологических условиях и в условиях воздействия ионизирующего излучения.

Задачи исследования:

1. Исследовать действие различных доз тизоля на регенераторную н мутагенную активность эпителия кишечника, а также изучить состояние кроветворения н регенерацию эпителия кишечника в физиологических условиях в различные сроки после парентерального введения тизоля.

2. Выяснить особенноста течения регенераторных процессов, мутагенную активность а мнелоидной ткани и в эпителии тонкого кишечника после воздействия различных доз ионизирующего излучения и введения тизоля.

3. Оценить возможность использования ирн постлучевом воздействии препарата дерннат для усиления цнтопротективного действия тизоля.

4. Охарактеризовать цитолротеюивное действие сочетанного парентерального введения тизоля и дерниата при воздействии ионизирующего игтучення.

5. Дать сравнительную характеристику механизму цнтопротектнвного действии тизоля и дерниата в условиях воздействия ионизирующего излучения.

Научная новизна. В настоящей работе впервые выявлено, что при парентеральном введении препарат тнзоль оказывает выраженное антиапоптогенное действие на радиочувствительные ткани (миелондная ткань, эпителий тощей кншкн). Показано, что снижение artonroia при терапии тизолем имеет дозоза-вненмый характер.

Антиаполтогенное действие тизоля усиливается после комбинированного введения цктопротскторз тнзоль и препарата дерни вт.

На фоне терапии тнзолсм, деринатом и комплексной терапии тизолсм и деринатом отмечено снижение мутагенной активности. Однако при комбинированном введении препаратов снижение мутагенной активности в эпителии тощей кишки было достоверно более значимым.

Теоретическая и практическая значимость работы. В эксперименте показано терапевтическое действие на радиочувствительные ткани (миелоидная ткань и эпителий тощей кншкн) на фойе терапии пнтопротектором тнзоль и комплексной терапии тнзолем и деринатом. При этом наиболее предпочтительным является использование комплексной терапии, поскольку помимо анти-апоптогенного действия здесь имело место, более выраженное снижение мутагенной активности.

Обоснована возможность комбинированного введения цитопротектора обладающего анттшлолтогсшшм действием и препарата стимулирующего регенерацию для терапии постлучевого синдрома, предшествующей интенсивной химиотерапии .

Апробации работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на:

1. Научно - практической конференции «Человек и здоровье: применение биокорректоров», г. Москва, 2005 г.

2. Научной конференции молодых ученых «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины», г, Санкт - Петербург, 2006 г,

3. IX Всероссийской научно - практической конференции «Человек и его здоровьем, г. Санкт - Петербург, 2006 г.

4. 61 научной конференции студентов и молодых ученых «Актуальные вопросы современной медицинской науки и здравоохранения», г. Екатеринбург, 2006 г.

5. X Российский онкологический конгресс, г. Москва, 2006 г.

Публикации, По теме диссертации опубликовано 8 работ

На защиту выноси) сн следующие положений:

1. Тизоль при парентеральном введении в условиях воздействия ионизирующего излучения оказывает антнапотгго генное действие, стимулирует процессы клеточного обновления. Антнапогггогенное действие тизоля имеет дозо-завненмый характер, о чем свидетельствует снижение выраженности апоптоза при увеличении дозы вводимого препарата.

2. Тнэоль при парентеральном введении в условиях воздействия нонизн-рующего излучения снижает индуцированную мутагенную активность,

3. Комплексное использование тизоля и репаранта деринат в условиях постлучевого повреждения оказывает наиболее существенный цитопротекгнвныи эффект. При этом цнтопротективиое действие дерината реализуется через стимуляцию мнтотической активности и снижение индуцированного мутагенеза, в то время как тнзояь обладает преимущественным действием на снижение апоп-тоэд.

Объем н структура диссертации. Диссертация изложена на 208 станицах текста, набранного иа компьютере в текстовом редакторе MS Word 2000, содержит 99 таблиц, 11 рисунков. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, двух глав собственных исследований, общего заключения, выводов и списка литературы, включающего 86 работ на русском языке н 146 на иностранных языках.

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Гребнев, Дмитрий Юрьевич

ВЫВОДЫ

1. Тнзоль при парентеральном введении в физиологических условиях оказывает стимулирующее действие на эрнтропоэз. Это действие реализуется за счет повышения мнтотической активности элементов пролнфератнвного пула. На пролнферативную активность эпителия кишечника тизоль не влияет.

2. Тнзоль при парентеральном введении в условиях воздействия ионизирующего излучения оказывает антиапоитогенное действие, снижает мутагенную активность, стимулирует процессы клеточного обновления. Антнапонтогеннос действие тизоля имеет дозозавненмый характер, о чем свидетельствует снижение выраженности апоптоза при увеличении дозы вводимого ттрспарата.

3. Выявленное при парентеральном введении тнзоля антнапоптогенное действие, снижение индуцированного мутагенеза, повышение скорости клеточного обновления позволяют охарактеризовать аквакомнлекс глнцеросольвата титана (тнзоль) как препарат, обладающий цитопротсктивным действием.

4. Цитопротсктивнос действие тнзоля опосредуется преимущественным влиянием на снижение величины апоптоза. Одним из механизмов такого действия может быть образование в цитоплазме клетки тнтансодержащего цитохрома - с, который не способен образовывать полноценную апоптосому, вследствие чего нарушается активация каспаз, имеющих решающее значение в индукции апоптоза.

5. Препарат деринат в условиях радиационного повреждения оказывает стимулирующее действие на эрнтрогюэз, гранулоцнтопоээ, регенераторные процессы в эпителии тощей кншкн; снижает индуцированный мутагенез.

6. Комплексное использование тнзоля и репаранта деринат в условиях постлучсво-то повреждения оказывает наиболее существенный цитоггротекговный эффект, При этом цитопротсктивнос действие дернната реализуется через стимуляцию мнтотической активности и снижение индуцированного мутагенеза, в то время как тнзоль обладает преимущественным действием на снижение апоптоза.

ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В последние годы наметился существенный интерес к использованию ме-таллокомплексных препаратов для стимуляции регенераторных процессов. Среди известных в настоящее время металлокомплексных препаратов по своей биологической активности обращает на себя внимание аквакомплекс глнцеро-сольвата титана. Тнзоль был разработан и выпускается предприятием «ОЛИМП» («Общество лабораторных исследований медицинских препаратов», г. Екатеринбург; Емельянова И.В., Лопатима Г.П., Филатова Е.А. 1988).

В ироведеных экспериментальных исследованиях была изучена фармако-кннетика н фарнвкодинамика препарата при парентеральном введении подопытным животным. Эти исследования показали, что уже через суткн после введения в организме экспериментальных животных определялось около 48 % тизоля, причем он депонировался а следующих органах: желудок, тонкий кишечник. легкие, печень, почки, костный мозг. Через 2 недели содержание титана в организме приближается к контрольным цифрам. Таким образом, проведенные ранее исследования свидетельствуют о том, что препарат тнзоль быстро выводится из организма. Поставленные эксперименты по изучению токсического действия, а также иа предмет аллергнзнрующнх свойств препарата показали, что тиэоль не обладает токсическим действием (относится к четвертому классу опасности, согласно ГОСТу 12.097.76) и не является потенциальным аллергеном.

Проведенные экспериментальные исследования выявили, что тнзоль оказывает радиопротекторное действие при энтсральном введении экспериментальным животным до радиационного облучения (Знаменский В,В„ Щсголсва Р.А. 2004 г.), Также было показано, что препарат оказывает, а тахже усиливает действие противовоспалительных (Соколова Л.А., Костина О.А., 2003 г.; тнзоль рекомендован МЗ РФ (Р 001667/01 - 2002 в качестве лекарственного средства

ДЛЯ местного применения как обладающий противовоспалительным действием), протнвом икробных препаратов (Евстигнеева Н.П., Герасимова Н,М„ 2003 г), обладает проводниковой активностью при применении в комплексе с другими лекарственными препаратами (Ронь Г И., Еловикова Т.М., 2003 г.).

В клинической практике использование тизоля находит применение в основном в качестве аппликаций на пораженные участки тканей, где он используется как препарат обладающий противовоспалительным действием и как проводник лекарственных препаратов.

Таким образом, несмотря на проведенные ранее исследования тизоля, использование препарата при парентеральном введении было невозможно, поскольку отсутствовали экспериментальные данные о его действии на ткани, органы и системы органов как в физиологических условиях, так и в условиях воздействия экстремального фактора, Также оставался не изученным механизм действия препарата.

Поскольку тизоль относится к металлокомплексньгм препаратам, предполагалось, что парентеральное введение тнэоля в условиях воздействия повреждающего фактора, как и ряда других металлокомплеясных соединений, может способствовать увеличению скорости клеточного обновления, а также снижению индуцированного мутагенеза. Известно, что клеточное обновление определяется соотношением двух разнонаправленных процессов: митотнческого деления клетки и генетически программированной гибели клетки (апоптоэ). Современные данные о влиянии мсгзллокомплексных соединений на апоптоз крайне скудны. В этом свете представлялось интересным изучение действия тизоля не только на пролиферацию клеток, но и на выраженность апоптоза и мутагенную активность.

Влияние тизоля на регенерацию могло быть усилено препаратами, действие которых направлено на генетический аппарат клетки (деринат, лейкоген и др.).

Ранее не исследовалось при парентеральном введении в условиях воздействия экстремального фактора комбинированное введение тизоля с препаратом, оказывающим выраженное стимулирующее действие.

Среди экстремальных воздействий особое вн имение заслуживает нон тирующее излучение, поскольку его действие распространяется преимущественно на быстрообновляющнеся ткани, которые в свою очередь нуждаются в поддержании высокого регенераторного потенциала.

Учитывая этот факт, а также данные фармакокинегнкн и фармакодннамн-ки препарата тизоль, нами исследовались ткани с высокой скоростью клеточного обновления - костный мозг и эпителий слизистой оболочки тошей кншкн. Изучалось действие тнзоля как в физиологических условиях, так н в условиях воздействия ионизирующего излучения. Изучение процессов регенерации при действии на организм экстремальных факторов позволяет обнаружить дополнительные данные, с учетом которых можно дать более полную характеристику действия изучаемых препаратов.

Помимо действия аквакомплекса глинеросольвата титана (тизоль) исследовалось действие препарата оказывающего выраженное стимулирующее действие на мнтотнчеекое деление клеток (деринат), а также комбинированное использование тнзоля и дерината.

Производилась оценка процессов клеточного обновления (митоз и апоптоз), Количественная оценка данного процесса определялась как соотношение процессов пролиферации и элиминации клеток, Также определялось количественного содержание клеток в указанных тканях (по данным миелограммы и средней клеточностн крипты), С цепью цнтогеиетической оценки качества клеток в изучаемой популяции производился анализ микроядерного теста, уровня патологических митозов, характеризующих мутационный процесс в ткани.

Проведенные нами исследования позволили установить влияние цитопро-текторной терапии тизолем на процессы регенерации мнелоидной ткани и эпителия кишечника после воздействия ионизирующего излучения.

Изучение вышеуказанных показателей, производилось после парентерального введения раствора глнцеросольаата титана в средней терапевтической дозе (тнзоль - 2,5 г/кг), раствора дезокснрибоиуклеата назрия (деринат- 7 м к г/кг), а также нх комбинированного введения, с целью терапии пост лучевых нарушений вызванных воздействием ионизирующего излучения в дозах 0.5 н 3 Гр.

В физиологических условиях на седьмые сутки после введения препарата тнзоль выявлено его стимулирующее действие на эритрондиый росток (Эр.эл.: 30,88 ± 3,72 %, + 26,0 %, р<0,05 по сравнению с контролем}, отмечено увеличение пролнферативной активности элементов данного ростка (МИ: + 65,4 р<0,05), В гранулоцитарном ростке костного мозга и в эпителии тощей кишки значимого изменения остальных анализируемых показателей отмечено не было.

С целью изучения действия тизоля в условиях воздействия экстремального фактора были проведены исследования по изучению действия ИИ на интактных животных (контрольная подгруппа).

На первые сутки после воздействия ИИ. в контрольной подгруппе отмечено угнетение пролнферативной активности, повышение уровня апоптоза и мутагенной активности. При этом в костном мозге прн облучении 0,5 Гр выявлен лнмфоиитарный пик, снижение содержания эритроидиых н гран у ло иитарн ых элементов. В периферической крови выявлены лимфопения, ретикулоцнтоз и гранулоцитоз, что свидетельствует о стресс реакции в этой ткани (Горизонтов ПД, 1983: Юшков Б.Г., 2004).

Прн облучении подопытных крыс дозой 3 Гр не отмечено лнмфоинтэрного пика в костном мозге, что свидетельствует о преобладании специфического действия ионизирующего излучения над стресс-реакцией системы крови. Опустошение костного мозга и увеличение содержания ретикулоцнтов н гранулоцнтов в периферической крови было выражено в большей степени, чем прн облучении дозой 0,5 Гр. Содержание эритроидиых элементов было снижено на 72,0 %, а гранулоцнтарных элементов на 52,8 % по сравнению с группой контроля.

Следует отметить, что эрнтрондный росток в целом проявил большую радиочувствительность, чем гранулоиитарный, что было покатано н в других ранее выполненных работах (Жербнн Е.А., Чухлоанн А.Б., 1989).

В тощей кишке в это время также отмечено угнетение пролнфератнвной активности (МИ 4,67±0,36 - 44,5 %, fK0,05), увеличение апоптоза (АИ 11,60±1,00 %, +■ 204.4 %, р<0,05) и мутагенной активности (ИМ 13,23 % ±1,46, + 109,3 %, р<0,05), снижение клеточностн крипты (СКК 48.83±2,50,- 33,4%, р<0,05).

К 7 суткам в обоих изучаемых дифферонах произошло естественное восстановление м итоги ческой активности, но не отмечено восстановления общей численности элементов после облучения дозой 3 Гр. Иная картина наблюдалась в эпителии слизистой тощей кишки. Здесь произошло восстановление не только пролнфератнвной активности, но и клеточностн крнпты. Однако апоптоз (АИ 4,29±0,98 + 32,8 %, р<0.05) и уровень мутагенной активности (ПМ 8,58±0,96 %, + 83,0 %, р<0,05) оставались повышенными.

В ходе дальнейших исследований по изучению цитопратектнвного действия тизоля в условиях воздействия ИИ было выявлено выраженное его анти-апоптогенное действие. Так на первые сутки после воздействия ИИ снижение апоптоза отмечено в эрнтрондном и гранулоцитарном дифферонах (3 Гр: АИ 4,21±0,41 - 36,3 %, р<0,05 н 4,54±0,32К», - 15,6 %. р<0,05 соответственно), а также в эпителии тощей кишки (3 Гр: АИ 8,71 ±0,42 %, - 24,9 %, р<0,05). Выраженный антиапоптогенный эффект нашел свое подтверждение и дополнение в гистологических препаратах тонкого кишечника, окрашенных Annex in-V FITC н акридиновым оранжевым с использованием флуоресцентной микроскопии. После того, как был выявлен антиапоптогенный эффект тизоля, решено было изучить действие различных доз препарата. С этой целью парентерально вводились следующие дозы препарата тнзоль: минимальная терапевтическая доза -0,1 г/кг, средняя терапевтическая доза 1,0 г/кг. В первом случае значимого влияния на апоггтоз выявлено не было, однако после введения дозы 1,0 г/кг вновь установлено ангианоптогениое действие (3 Гр: АИ 1139±0,99 %, -15,6 %, р<0,05) Полученные данные с а ндетельствуют, что антналоггго генное действие тизоля носит дозозавненмый характер, то есть с увеличением дозы вводимого препарата уменьшается выраженность апоптоза.

После получения данных об уровне апоптоза принципиально важным представлялся вопрос о влиянии препарата на уровень мутагенной активно* сти. Для этого производился подсчет мнкроядерного теста в костном мозге; подсчет числа патологических митозов в костном мозге и в эпителии тонкого кишечника.

Было установлено, что в физиологических условиях лполь не влияет на уровень мутагенной активности (также как и на уровень апоптоза).

После воздействия ИИ на фоне терапии тизолем установлено снижение мутагсииой активности в эрнтроидном ростке (0,5 Гр: МЯТ 8,17±1,49 %», - 38,9 %, р<0,05; ПМ 3 Гр 16т14±1,18 %, - 122 %, р<0,05), эпителии тонкого кишечника (3 Гр на I сут: ПМ 10,90±0,73 %, - J 7,6 %, р<0,05), в гранулоцнтарном ростке значимого снижения мутагенной активности не отмечено. После изучения влияния на мутагенную активность средней терапевтической дозы тизоля 2,5 г/кг (Л) были проведены исследования по изучению влияния меньших доз: средней терапевтической дозы - 1,0 г/кг (Т2) и минимальной терапевтической дозы - 0,1 г/кг (ТЗ). При этом не было выявлено значимого снижения мутагенной активности в изучаемых тканях.

Полученные результаты свидетельствуют о доэозаансимом действии тизоля на апоптоз и уровень патологических митозов (с увеличением дозы вводимого парентерально препарата увеличивается его терапевтическое действие), а также о тропности препарата к эрнтроидному ростку костного мозга.

Впервые выявленное антнапоптогенное действие требовало ответа на вопрос о механизме действия тизоля. Механизм антиацонтогенного действия тизоля, вероятно, заключается в том, что микроэлемент титан, входяншй в его состав может взаимодействовать е цитохромом с, содержащим в своей структуре химически близкородственный титану элемент - железо. Цитохром с является необходимым фактором для реализации каспаз-зависимого пути иидукцнн апоптоза. Под действием индукторов апоптоза через каналы в наружной мембране митохондрий интохром с выходит в цитоплазму, где связывается с белком APAF-I, Данный комплекс подвергается олнгомеризаинн с образованием апоптосомы, которая необходима для активации вначале инициирующих, а затем эффекторных каспаз (каслазы 9 и 3 соответственно), Мы предполагаем, что при выходе цнтохрома с из межмембранного пространства митохондрий в цитоплазму, вследствие резкого изменения рН, ослабевают связи атома железа с белком (аминокислотами гнети дни в положении 18 и метнонин в положении 80). А при накоплении в цитоплазме большого количества химически близкородственного. вероятно, возможна замена атома железа на атом титана а структуре цнтохрома с, что ннактивирует его как апоитогенный фактор.

В этом случае, нммортализация клетки является временной, так как экзогенный титан элиминируется из организма (через 24 часа после введения тизоля - на 52 Ларионов Л,П., 1989), а цнтохром с выходящий из митохондрий при продолжении действия индукторов апоптоза остается нктэктным и способным к взаимодействию с APAF-I и активации каспаз. Таким образом, клетка, в которой произошла индукция апоптоза, может получить дополнительное время на устранение генетической нестабильности (ферменты репарации инактивируют-ся только после активации каспаз). Однако если генетическая нестабильность будет сохраняться, программа апоптоза будет реализована,

С целью подтверждения гипотезы был проведен эксперимент- Анализировалось содержание свободного фотометрически-определяемого железа в растворе при инкубации смеси цитохрома с и тизоля в соотношении чистых веществ 1:300. Это согласно проведенным расчетам соответствует соолюшению цнтохрома (Шаронов Г.В, 2006) и тизоля (Ларионов Л .П., 1989) в цитоплазме клеток при введении последнего в дозе 2.5 г/кг. Инкубация проводилась при температуре 37С° в течение 24 часов. Кроме того, оценивалось содержание свободного железа в растворах цнтохрома с и тизоля.

Определение свободного железа производилось с использованием набора реагентов для определения концентрации железа в сыворотке н плазме крови колори метрически ч методом без депротеиннзаини «Iron Е-FL».

Были получены данные, свидетельствующие об увеличении свободного железа при инкубации цитохрома - с и глнцеросольвата титана, а также о перекрестной реакции реагента на железо с титаном, что дополнительно подчеркивает химическую близость обоих микроэлементов.

Проведенные исследования дают основания высказать соображения о механизме антнапоптогениого действия препарата через образование тнтансодер-жащего цитохрома с, который уже не способен приводить к активации каспаз и последующему развитию апоптоза,

Для оценки тканевой регенерации производилось определение количественного содержания клеток в изучаемых тканях при парентеральном введении тнзоля. С зтой целью в костном мозге производился подсчет миелограммы, в периферической крови подсчет ретикулоцнтов. гранулоцитов, лимфоцитов, а в кишечнике определялась средняя клеточность крипты

При значительном лучевом воздействии цитопротектнвное действие на эрнтрои отмечено уже в ранние сроки (Эр.эл. 3 Гр: 8,03±1,08 %, + 30,84 %, р<0,05). Увеличения общего содержания элементов гранулоцитарного ростка установлено не было. Следствием антнапоптогениого действия тизоля было увеличение содержания кристального эпителия, поскольку1 пролнферативная активность эпнтелноцнтов при этом не изменилась.

Подсчет МЯТ на первые сутки при дозе облучения 3 Гр был невозможен в силу значительной редукции клеточностн КМ, аналогичные результаты были получены н в других ранее проведенных исследованиях (Грнгоров Л- и др. 1981),

На седьмые сутки после воздействия ИИ, также как и в физиологических условиях, выявлено стимулирующее действие тизоля на эритропоэз (Эр.эл. 0,5 Гр: 19,98±1,47 %, + 19,75 %. р<0,05).

Таким образом, цнтопротектн аное действие тизоля при парентеральном введении в условиях воздействия ионизирующего излучения приводит к стимуляции эритропозза, нормализации показателей средней клеточности крипты в тонком кишечнике» снижению индуцированной ионизирующим излучением мутагенной активности в изучаемых тканях.

После выявленного цитопротективного действия препарата тнзоль вводимого парентерально в условиях воздействия ионизирующего излучения, было решено сравнить действие тизоля с одним из препаратов (деринат), с установленным действием на тканевую регенерацию.

Этот препарат используется в клинике для лечения радиационных поражений, нарушений гемопоэза. Тем не менее, оставалось не изученным действие дерината в условиях воздействия экстремального фактора на мутагенную активность, а также на апоптоз, являющегося одним из механизмов, определяющих состояние регенерации.

В отсутствии действия экстремального фактора на седьмые суткн после введения препарата деринат выявлена стимуляция эритропоэза и гранулочито-поэза, что заключалось в увеличении количества митозов, увеличении содержания эритроидных и гранулоцнтарных элементов указанных ростков в костном мозге (0,5 Гр; 34,5813,27 %. +41,1 V р<0.05 и 75.0517,03 %г +19,0 %, р<0,05 соответственно). Эти изменения нашли свое отражение в показателях периферической крови, где наблюдался ретикулоцитоз и увеличение содержания гранулоцитов. Также имело место увеличение пролиферации эпителия и клеточности крипты в слизистой оболочке тощей кншкн. В этом отношении наши данные соответствуют результатам выполненных ранее исследований (Каплина Э.Н., 2005). в которых показана способность дерината активировать тканевую регенерацию.

На апоптоз и мутагенную активность изучаемых тканей препарат в этом случае значимого действия не оказывал.

На первые сутки после воздействия НИ на фоне введения препарата дерннат выя мена стимуляция регенерации гранулоцитарного ростка в костном мозге и эпителия тощей кишки. Регенераторный ответ в данном случае обеспечен влиянием препарата на пролифсративную активность, а также выявленным снижением апоптоза в изучаемых тканях.

Следствием действия препарата на процессы регенерации было увеличение количества крннтального эпителия (0,5 Гр; СКК 68,14±4,I2, + 19,6 р<0,05). В то же время значимого увеличения содержания гранулоцнтов в костном мозге н, как следствие в периферической крови, отмечено не было.

Мутагенная активность в изучаемых тканях оценивалась по данным мнк-роядерного теста а костном мозге, а также количеству патологических митозов в костном мозге и в эпителии тошей кишки,

В ранние сроки было выявлено снижение мутагенной активности в костном мозге (0,5 Гр: МЯТ 9,2011,24. -31,2 р<0,05) н отсутствие значимого влияния на этот показатель в эпителии кишечника.

Иа седьмые сутки после воздействия ИИ выявлено увеличение количества митозов в гранулоцитарном и зритроидном дифферонах костного мозга; восстановление выраженности апоптоза в зритроидном ростке, в то время как в контрольной подгруппе он оставался повышенным, Следствием влияния препарата на регенерацию было увеличение общего содержания в костном мозге эритроидиых и гранулоцитарных элементов (0,5 Гр: 21,98±1,25 %, +31,7%, р<0,05 и 62,60±2,63 %, +20,3 %, р<0,05 соответственно). В периферической крови установлено восстановление содержания ретикулоцнтов и гранулоцнтов.

В эпителии тонкого кишечника также наблюдалось увеличение митотнческой активности крнптального эпителия, увеличение численности эпителия крипт (0.5 Гр: СКК 86,25+3,50, + 19,6 р<0,05).

На фоне проводимой терапии произошло восстановление мутагенной активности а костном мозге н в эпителии тонкого кишечника,

После получения экспериментальных данных о цнтопротсктнвном действии тиэоля и терапевтическом действии деркната представлял интерес их возможного комбинированного использования, поскольку тизоль действовал на регенерацию преимущественно через снижение апоптоза. а деринат преимущественно через увеличение митотической активности.

В отсутствии действия экстремального фактора прн комбинированном введении препаратов тизоля и дерината выявлено увеличение иролнфератнвной активности гемопоэтнчсскнх клеток костного мозга и эпителия тощей кншкн. Значимого изменения уровня апоптоза и мутагенной активности в изучаемых тканях не установлено.

На первые сутки после воздействия ИИ на фоне комплексной терапии отмечено увеличение пролиферативной активности, снижение апоптоза в гранулоцнтарном н эрнтроидном ростках костного мозга, а также снижение мутагенной активности н увеличение содержания элементов указанных ростков. При этом содержание эритроидных элементов (3 Гр: 9,63 ± 0.86 %) было достоверно больше, чем после введения тизоля и дерината {+ 19,9 %, р<0,05 и + 53,9 р<0,05 соответственно). Содержание гршулойЛЛрш элементов {3 Гр: 39,26 ± 2,52 %) на 20,1 % (р<0,05) превышало аналогичный показатель после введения дерината,

На мнтотнческую активность в тонком кишечнике значимого действия препараты не оказывали Увеличение кдсточности крипты в этом случае достигалось за счет антнапоптогенного действия, которое проявлялось при выраженной радиационной нагрузке. Показатель средней клеточное™ крипты после комбинированного введения препаратов на 12,7 % (3 Гр: р<0.05) превышал этот показатель после введения дерината.

Выявлено снижение индуцированной ионизирующим излучением мутагенной активное™, этот эффект отмечен как в костном мозге, так и в эпителии кишечника, Уровень патологических митозов эрнтроидного ростка (3 Гр: ПМ 13,18 ± 1,48 %) на 18,3 % (р<0,05) был достоверно ниже, чем после введения тизоля м на 21,1 % (р<0,05;) ниже, чем после введения дерниата. В гранулоцн-тарном ростке уровень патологических митозов иа 26,4 % (3 Гр: р<0,05) был ниже, чем после введения тизоля, В эпителии кишечника снижение мутагенной активности после комбинированного введения препаратов было статистически более выраженным, чем после введения тиэоля (3 Гр: ИМ - 22,9 %, р<0,05;) и дерниата (3 Гр: ЛМ -23,8 %, р<0,05;).

На седьмые сутки после воздействия ИИ, установлено стимулирующее действие на гранулонитопоэз и эрнтропоэз Общее содержание эрнтрондных элементов (3 Гр: (4.83±2,14 %) и гранулоцнтарных элементов {3 Гр; 52Д6±2,62 %) после комбинированного введения препаратов было достоверно больше, чем после введения дернната (+ 30,1 р<0,05 ) и тизоля (+ 19,9 р<0,05} соответственно.

Установлено снижение апоптоза в элементах эрнтрондного ростка костного мозга н в эпителии кишечника,

В изучаемых тканях выявлено снижение мутагенной активности. В грану-доцнтарном ростке отмечено более выраженное снижение индуцированной мутагенной активности но сравнению с лабораторными животными, которым вводился препарат тиэоль (3 Гр: ПМ - 39,8 %, р<0,05).

Уровень патологических митозов в эпителии кишечника на 19,5 % (3 Гр: р<0,05) ниже сравниваемого показателя после введения препарата тнзоль.

Указанные терапевтические эффекты наиболее существенно проявляются при значительной лучевой нагрузке (3 Гр).

Таким образом, при парентеральном введении впервые выявлено антн-апоггтогеиное действие на фоне терапии тизолем, а также при комбинированном введении тизоля и дерината. При этом в первом случае снижение апоптоза более значимое, чем на фоне комплексной терапии тизолсм и деринатом. В настоящей работе также впервые выявлено снижение мутагенной активности на фоне терапии тизолем, деринатом и при их комбинированном введении. Наиболее существенное снижение индуцированной мутагенной активности выявлено при комплексном использовании препаратов. Данный факт отмечен как в миелоидной ткани, так и в эпителии тощей кишки. На фоне комплексной цито-протективной тсрални установлено увеличение скорости клеточного обновления и, как следствие, увеличение количества клеточных элементов в изучаемых тканях, Указанные изменения при значительном лучевом воздействии (3 Гр) были выражены в большей степени, чем после терапии тнзолем или деринатом. Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что комплексное введение тизоля и дерината является наиболее предпочтительным для терапии лучевых повреждений.

На основании проведенных исследований терапевтическое действие препарата тнзоль при парентеральном введении после воздействия ионизирующего излучения представлено на рис. II, где также отражена возможность усиления его цитопротектнвного действия введением дерината.

Монтирующее нэлученне

Рис. 11. Цитопротекулииое действие препаратов таэолл л дерината

184

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Гребнев, Дмитрий Юрьевич, 2006 год

1. Апоптоз и пролиферация как альтернативные формы ответа Т-лнмфоцктов на стимуляцию Tcicct. / М.Ф. Ннконова, М.М, Лнтвнна, МП Варфоломеева, А.А. Ярилина // Иммунология,- 1999,- T.2I, С. 20-23.

2. Абросимов А.Ю. Радиационные повреждения и гибель клеток опухолей Текст. / А.Ю. Абросимов, В.М. Загребии, Е.Ф. Лушннков // Мед. Радиол. 1992.-Т.37,№ 11.-С. 35-37.

3. Актуальные проблемы патофизиологии {избранные лекции) Текст. / под ред. Б.Б. Мороза М.: Медицина, 2001. - 424с.

4. Аруин Л.И. Апоптоз при патологических процессах в органах пищеварения Текст. / Л.И Аруин // Клин. мед. 2000. - Т. 78, Jte 1, - С. 5 - 10.

5. Афанасьев Ю.И. Гистология Текст. / Ю.И. Афанасьев, Н.А, Юрнна, В.Ф Котовскнй; под ред. Ю.И. Афанасьева, Н.А. Юрииой М.: Медицина, 2001. 744с.

6. Барышников А.Ю, Программированная клеточная смерть (апоптоз) Текст. / А.Ю. Барышников. Ю-В. Шишкин // Росс, онкол. жури .- 3996, -№ 1.-С 58-61.

7. Белохвоетов А,С. Полнмсразная цепная реакция н лигазиые реакции, принципы, традиционные методики и нововведения Текст. / А,С. Белохвостое // Молекулярная генетика. Микробиология. Вирусология, 1995.-т.- с, 21-26,

8. Белушкинв Н.Н. Молекулярные основы патологии апоптоза Текст.) Н Н. Белушкина, С.Е Северин И Арх. пат, 2001, - Т.63, №1. - С. 51-60.

9. Бердышев Г Д. Генетически обусловленная гибель клеток. Ее механизмы и значение в многоклеточном организме {Текст. S Г.Д. Бердышев // Успехи совр. бнол, 1968. - Т.66, вып. 2 (5), - С.226- 246.

10. Горбачев В.В. Витамины, микро и макроэлементы (Текст.: Справочник / В.В, Горбачев, В.Н. Горбачен. - Книжный дом, 2002. - 87с.

11. Дудич Е-И. Изучение апоптоза раковых клеток, индуцированного а-фстопротсином Текст. / Е.И. Дудич, Л.Н. Ссменкова, И.В, Дудич // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2000. - Т. 130, №12. - С. 604-612.

12. Дыгзй A.M. К природе н биологической роли лнмфоцнтоза, развивающегося в кроветворной тканн костного мозга при его локальном облучении Текст. / A.M. Дыгай. Е.Д. Гольдберг, Е.В. Мелнк Гайказян // Радиобиология. - 1981. - Т. 21. № 6. - С. 873 - 878.

13. Жолннн А.В. Актуальные вопросы практической и теоретической медицины Текст. / А.В. Жолнии, РЛ. Носова, Л.Н. Василенко; под ред. А.В. Жолнина. Сб. Челябинского медицинского института, 1995. - Г4бс.

14. Зарецкая А.И. Электронно-микроскопический анализ апоптоза клеток рака прямой кишки до и после облучения (Текст. / А,И, Зарецкая // Арх, пат. 1988. - Т. 50, вып. 1, - С. 46- 52.

15. Иванов А.А. Роль методов клеточной и молекулярной биологии в патологии Текст. i А.А. Иванов. М.А. Пальцев // Архив патологии, 1998.

16. К проблеме «функциональной мозаичностн» костного мозга |Текст. / Г.П. Груздев, Е.Н. Щербова, А-А, Гордеева. Т,А, Иванова // Цитология. 1982. -Т. 24, № 10.-С. 1244-1248.

17. Квачева Ю.Е. Морфологические типы раднацноино индуцированной гибели клеток кроветворной ткани, ее биологическая суть и значимость на различных этапах развития острого радиационного поражения Текст.

18. ЮЛ Квачева // Рал. биологии. Радиоэкология 2002. - № 3. - С, 287292.

19. Квачева Ю.Е. Апо итоги ческая гибель клеток костного мозга в восстановительном периоде острой лучевой болезни и ее роль а патогенезе гематологического синдрома / Ю.Е. Квачева // Мед. радиол, и раднад. безопасность. 2002. - Т. 47, № 5. - С. 17- 22.

20. Кирэок С.С- Изменения Са, Mg- зависимого эндоиуклеолнза ДНК в изолированных ядрах лимфоцитов человека при лнмфолролнферативиых заболеваниях Текст. / С.С. Кнрзон, Н-Н. Ходырев, Т.Н. Ткачева // Бюл. зкепер, биол. -1990. №. - С. 543-546.

21. Кнрзон С.С. Внутриядерные характеристики мононуклеарных клеток периферической крови в норме и при хроническом лнмфолейкоэе /Текст. / С.С. Кнрэон, Л.М. Вавилова, Т.Н. Ткачева I/ Иммунология. -1994. -№4 -С, 34-36.

22. Коган Е.А. Морфологические и молекулярно биологические особенности процессов кератин изацин и апоптоза в плоскоклеточном раке легкого Текст. /Е.А. Коган, Д А. Угрюмое, Г.Д. Жах // Арх. пат. - 2002. - Т. 62, № 3, - С, 16 - 20.

23. Коган Е.А. Некроз. Лекции по обшей патологической анатомии Текст. / Е.А. Коган; иод ред. В,В. Серова, М.А, Падьцева. М.: Медицина. 1996. -78-90с.

24. Колобасва С.Н. Электронно-микроскопический анализ пострадиационной апоптической гибели тнмоцнтов и лимфоцитов периферической кровн |Текст. I C,H, Колобаева, Р.П. Степанов. Л.В. Щедрина // Радиобиология. 1988, - Т. 28* вып. 2, - С. 189 - 199.

25. Коломийцева М-Г. Микроэлементы в медицине Текст. ! М,Г, Колоний* цева, Р,Д, Габовнч; под ред. М-Г, Коломийцева, М-; Медицина, 1970. -213с.

26. Колини Б-П. Мнтени действия онкогенов к опухолевых супрессоров: ключ к пониманию базовых механизмов канцерогенеза Текст. / Б.П, Копннн // Биохимия. 2000, - 65{ I). - С, 5-33.

27. Коршунов А.Г, ИммуногнстохнАшчсское изучение апоптоза в глиобла-стомах больших полушарий головного мозга Текст. / А.Г. Коршунов, Р.В, Сычева, А.В, Голанов // Арх, пет, 1998, - Т. 60, № З.-С, 23-27.

28. Лоиская И.А. Два различных типа апоптоза в тимоцнтах Текст. / И.А. Лонская. О.А, Чернова, В.М Чернов // Цитология, 2001. - Т.43. №3, - С. 244-249.

29. Лукьянова Н.Ю, Роль генов р53 и Ьс!-2 в апоптозе и лекарственной резистентности опухолей Текст. / Н.Ю. Лукьянова, Г.И. Кулик, В.Ф. Чехун // Вопр. онкол. 2000. - Т. 46. № 2. - С. 121 ^ 128.

30. Лучи некий Г.П. Химия титана Текст. / Г.П. Лучннский; под ред. Г.П. Лучннскнй, Мл Химия, 1971. - 78с,

31. Лянгуэова М.С. Дифференцированные клетки тератокарцнномы мыши линии F9 вступают в апоптоз при разрыве контакта с субстратом Текст) / Цитология. 2001. - Т,42, JfelO. - С. 955-962.

32. Мазурик В.К. Молекулярные механизмы главных радиобиологических последствий эффекта ионизирующей радиации на млекопитающих Текст. / В.К. Мазурик. В.Ф, Михайлов // Радиационная биология. Радиоэкология. 1999. - Т.4. №1. - С. 89-96.

33. Маянский Н.А. Апоптоз экссудатнвных нейтрофнлов человека Текст. / Н.А. Маянский, МП. Заславская. А,Н. Маянский // Иммунология. 2000. ■ТД№2 -С, N13.

34. Маянский Н.А. Субклеточное перераспределение Ьах и его слияние с митохондриями прн спонтанном апоптозе нейтрофнлов Текст. / Н,А, Маянский И Иммунология. 2001. - Т.22, Ш. - С. 29-31.

35. Маянский Н.А, Действие лнпополисахарндов УФ-облучения на регуляцию апоптоза нейтрофнлов человека Текст. / Н.А, Маянский // Иммунология. 2001. - Т.22. Ш. - С. 25-27.

36. Маянский Н,А. Состояние каепазы 3 при подавлении апоптоза нейтрофнлов гранулоцитарно-макрофагальиым КС Текст. t Н.А, Маянский И Иммунология- 2001. - Т.22, №2. С. 22-25,

37. Маянский Н,А. Каспаэозависимый механизм алоптоза нейтрофнлов: апоптогенный эффект туморонекротнческого фактора а Текст. / Н.А. Маянский It Иммунология. 2002. - Т-23, №1. - С. 15-18.

38. Михайлов В.М. Ультраструктурный н морфометри чески й анализ стадий апоптоза кардномноцитов мышей MDX Текст. / В,М. Михайлов, С,А, Комаров, В.К. Нилов Н Цитология. 2001. - Т.43, Ш - С. 729-735,

39. Модификация чувствительности к апоптозу клеток аецктной карциномы Эрлиха путем трансфекцни ДНК из тнмоцнтов Текст. / К.П. Хансон, Е.Н, Имянитов, B.C. Посохов, О.Г. Розенберг // Вопр, онкол. 1998. - Т.44, №6,-С, 701-703,

40. Мошникова А.Б. Диметилсуберимат как специфический индуктор апоптоза трансформированных клеточных культур Текст. / А.Б- Мошинкова. СЛ. Мошников. В Н. Афанасьев // Цитология. -2001. Т.43, №8. - С. 747753.

41. Новик А.А, Молскулярно-гснеткческий подход к диагностике злокачественных лнмфом Текст) / А.А. Новик. Белохвостов А.С. // Вопросы онкологии 1998. - Т.44, №3. - С- 274-279.

42. Общая химия. Биофизическая химия. Химия биогенных элементов Текст. / Ю,А. Ершов, В.А. Попков, А.С. Берлянд, А.З. Книжник; под ред. Ю.А. Ершов. М.: Высшая школа, 2002. - 215с.

43. Реймерс Н.Ф. Основные биологические понятия и термины Текст. / Н.Ф. Реймерс; под ред. Н-Ф- Реймерс. М.: Просвещение, 1988. - 278с,

44. Пальцев МЛ. Морфология повреждения. Лекции по общей патологической анатомии Текст. / М,А, Патьцев; пол ред. В.В. Серова. М.А. Паль-цева. М,; Медицина. 1996. - 20с.

45. Псвннпкнй Л.А. Программированная гибель клеток и апоптоз: значение для развития и функционирования иммунной системы Текст. I Л.А. Пенни цкий И Вести. РАМН. 1996. - №6. - С. 43-50.

46. Погорелов В. М- Морфология апоптоза при нормальном и патологическом гемоноэзс (Текст. 1 В.М. Погорелов, Г,И. Козннец // Гематол. н траисфу-знол. -1995. -Т.40, №5. -С. 17-25.

47. Пожарский К.М. Значение нммуногистохнмнческих методик для определения характера лечения и прогноза опухолевых заболеваний (Текст. / КМ, Пожарский, Е.Е, Леей май // Арх. пат. 2000. - № 5. - С. 3 - 11.

48. Потапиев М.П. Апоптоз клеток иммунной системы и его регуляция цнто-кинами Теист. / МЛ. Потапнев // Иммунология. 2002. - №4. - С. 237243.

49. Проблема пространственного распределения созревающих кроветворных клеточных элементов (Текст. / Г.П. Груздев, Н.А, Вялова. Л.А. Суворова.

50. Е.Н. Щербова // Пробл, гематологии и переливания крови. 1982. - Т. 27, № 9. - С. 54 - 57.

51. Райхлнн Н.Т Апоптоз и его роль в механизмах регуляции роста опухолевых клеток с множественной лекарственной устойчивостью Текст. / Н.Т. Райхлнн, Е.А, Смирнова, А.Г. Псрсвощнков И Арх. пат. 1996. - Т. 58, вып. 2,- С- 3-8.

52. Райхлнн Н.Т. Регуляция и проявления апоптоза в физиологических условиях и в опухолях Текст. / Н.Т. Райхлнн, А.Н- Райхлин // Borip. онкол. -2002. Т.48, Xs2. - С. 159-171.

53. Романснко A.M. Апоптоз и рак Текст. / A.M. Романеи ко // Арх. пат. -1996.-Т, 58. выи. 3.-С 18-23.

54. Семенов В.Н. Апоптоз и его роль в патогенезе критических состояний Текст. i В.Н, Семенов, И.И. Пасечник И Вестн. интенсив, тер. -2004. -Jfct. -С. 3-7.

55. Скулачев В.Н. Феноптоэ; запрограммированная смерть организма Текст. /В П. Скулачев И Биохимия, 1999. - Т. 64, вып. 12,-С- 1679 - 1988.

56. Справочник биохимика Текст. / Пер. с англ. В.Л. Друцы, О-Н. Королевой: под рел- Р. Доссон. Д. Эллиот, У. Эллиот, К. Джонс. М,; Мир, 2002. -237с.

57. Тронов В.А, Спонтанная гибель мононуклеарных клеток, полученных от здоровых доноров и больных системной красной волчанкой |Текст. / В.А. Тронов, Т.А. Никольская. М А. Конопляников И Цитология. 1999. - №5. -С. 400-404.

58. Уманский С Р. Апоптоз и его механизмы Текст. / С,Р. Уманский // Успехи соврем, бнол. 1982. - Т.93, - С, 139-148.

59. Уманский С.Р. Апоптоз; молекулярные и клеточные механизмы Текст. / С.Р. Уманский И Мол бнол 1996. - Т-30. вып. 3. - С, 487 - 502,

60. Уманский С,Р. Генетическая программа клеточной гибели: гипотеза и некоторые приложения (трансформация, канцерогенез, старение) Текст. / СР. Уманскнй И Успехи совр. биол, 1999, - Т. 93. № 1. - С. 139- 148.

61. Фнльчснков А.А, Апоптоз: краткая история, молекулярные механизмы, методы выявления и возможное значение в онкологии Текст. / А.А. Фнльчснков, Р.С. Стойка // Экспернм. онкол, 1995. - №18. - С. 435-448.

62. Фрнллянская И.И. Индукция апоптоза в клетках мышиной мнеломы NS0/1, трансформированной геном основного белка теплового шока Текст. / И.И. Фридлянекая. О.Н. Демидов, М.М. Булатова // Цитология, -2000. Т.42, №l l.-C. 1053-1058.

63. Хавинсон В.Х. Пептидные биорегуляторы ннгибируют апоптоз Текст. / В.Х. Хавинсон, И М. Кветиой Н Бюлл. экспернм. биол. и мед. 2000. -Т.130, №12. - С. 657-659.

64. Хансон К.П- Программированная клеточная смерть (апоптоз): молекулярные механизмы и роль в биологии и медицине Текст. / К.П. Хансон Н Вопр. медицинской химии. 1997. - Т.43, №5. - С. 402-416,

65. Целительная сила минералов, особых питательных веществ и микроэлементов Текст.; пер, с англ. / У. Сапцнной; под ред. П. Бергенер, Москва, 1998.- 156с.

66. Цыпленкова В.Г. Апоптоз {Текст. / В.Г. Цыплснкова, И-Н. Бескровна Н Арх. пат. 1996. - Т. 58. Т. 5- - С, 71 - 74.

67. Чумаков П.М. Функция гена р53; выбор между жизнью и смертью Текст. / П.М. Чумаков // Биохимия 2000. - Т.65, №1. - С. 34-47.

68. Ярили к А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах Текст. // Иммунология. 1996, -№ 1.-С. 10-21,

69. Ярилин А.А, Апоптоз. Природа феномена и его роль в целостном организме Текст. / А. А. Ярилин Н Пат. Физнол. 1998. - № 2. - С, 38 - 48,

70. Ярилин А,А. Апоптоз, роль в патологии и значимость его опенки при клннико-иммунологическом обследовании больных Текст. / А,А. Ярилин, М Ф Никонова, А.А. Ярнлина // Медицинская иммунология. • 2000. -Т.2, Jfel.-C.7-I6,

71. Ярмоненко С.П. Радиобиология человека и животных Текст. / С,П, Ярмоленко, А.А. Вайнсон; под ред. СП. Ярмоненко. М.; Высш. шк, -2004. - 549с.

72. Ярыгнн Н.Е. Значение программированной гибели эндотелия в построении внутриорганного кровеносного русла в эмбриогенезе человека Текст. / Н.Е, Ярыгнн, А.В. Кораблев // Арх. пат,- 1995. Т. 57, вып. 6.1. С. 39 44.

73. Ястребов А.П. Регуляция гемопоэза при воздействии на организм экстремальных факторов Текст. / А.П. Ястребов, Б,Г. Юшков, В,Н. Большаков; под ред. Q.A, Пястолова. Свердловск: Уральский рабочий, 1988. - 152с,

74. Activation of the 55 kDa TNT receptor is necessary and sufficient for TNF -induced liver failure, hepatocyte apoptosis,, and nitrite release Text. / M, Leist, F. Gamier, S. JOg, A. WendeE // J. Immunol. 1995. - Vol. 154. - P, 1307 - 1316.

75. Afanasev V.N. Flow cytometry and biochemical analisis of DNA degradation charachtteristic of two types of death Text. / V.N. Afanasev. B.A. Кого], Yu. A. Manlsygin U FEBS Lett. 1986. - Vol.194. - P. 347-350.

76. Aggelopoulou E, Immunohislochemical dejection of p53 protein in HPV positive oral lesions Text. / E. Aggelopoulou, C. Troungos, N.Gotrtas f! Anticancer Res. 1998. - Vol.18. - P. 4511 - 4516.

77. Aihara M. The frequency of the apoptosis correlated with ihe prognosis of Gleason grade 3 adenocarcinoma of the prostata |Text. / M. Aihara, P.T.

78. Scardino, L.D. Truong // Cancer. 1995, - Vol.75. - P. 522 - 529.9|. Apoptosis and programmed cell death in immunity {Text. / J J. Cochen R,C Ducke, V.A. Fadok, K.S. Sellins // Ann. Rev. Immunol. 1992. - Vol. 10, - P. 267-293.

79. Apoptosis and the cell cycle in Xenopus laevis: РНЛ and PMA exposure of splcnocytes Text. / R. McMahan, R.O. Jonson, LJN. Ruben, R.H. Clothier It Immunol. Lett. - 1999. - Vol,70.- P. 179*183.

80. Arai T. Role of apoptosis in modulation of the growth of human colorectal and villous adenomas (Text) / T. Arai, J. Kino ft J. Path. 1995. - Vol.176, - P. 37 -44.

81. Arends MJ. The role of endonuclcasc Text. / MJ, Arends, R,G, Morris, A. Wyllie // Amer. J. Path. -1990. VoU 36, * P 593-608,

82. Barry M.A. Activation of programmed cell death (apoptosis) by cisplatin, other anticancer drugs, toxins and hyperthermia Text. / M.A. Barry, C.A, Behnke, A. Eastman // Biochem. Pharm. 1990. - Vol.40. - P. 2353 - 2362.

83. Battifora R Assessment of antigen damage in immunogistoehemistry Text. // Am. J. Clin. Pathol. 1991. - Vol.96. - P. 669 - 671.

84. Baxter G.D. Cell death by apoptosis in acute leukaemia Text. / G.D. Baxter, R.J, Collins, B.V. Harmon //J. Path, 1989, - Vol, 158, - P- 123- 129.

85. Beaulation J. The relation of programmed cell death to development and reproduction: comparative studies and an attempt at classification Text. / J. Beaulation, R A. Lockahm // hit Rev. Cyto L- 1982. Vol.79, - P. 215 - 235.

86. Bijl M- Serum amyloid P component binds to late apoptotic cells and mediates their uptake by monocyte-derivcd macrophages Text. / M. Bijl, G. HorsL, J. Bijzel //Arthritis and Rheum, 2003. - Vol.48. - Xsl. - P 248-254,

87. Blackstone N.W. The evolution of a mechanism of cell suicide Text. / N.W. Blackstone, D.R, Green // Bioessays. 1999, - Vol.21. №1, - P. 84-88,

88. Bortber C.D, The role of DNA fragmentation in apoptosis TextJ / C.D-Bonher, N,B.E, Adenburg, J. A, Cidlowski It Trends in Cell Bio, 1995, -VoL5.-P.21 «-26.

89. Brancolini C, Cut and die: proteolytic cascades regulating apoptosis Text. / C. Braricolini, C. Seheider // Adv. Clin, Path, 1997. - Vol.11 №3. - P, 177-189,

90. Bray S. The challenge of p53: linking biochemistry, biology, and patient management Text. / S. Bray. C. Schorl, P.A. Hall U Stem Cells, 1998, -Vol,87, - P, 248 - 260.

91. Bristow R.G, The role p53 gene as a modifier of intrinsic radiosensitivity; implications for radiotherapy Text. / R.G. Bristow, S. BencKimol, R.P. Hill // Radiotherapy, Oncology. 1996. - Vol.40. - P- 197 - 223.

92. Buja L.M. Apoptosis and necrosis; basic types and mechanism of cell death (Text. / L.M. Buja. M.L. Eigenbrodt. E.H. Eigenbrodt // Arch. Path. 1лЬ. Med. -1993,-Vol.117.-P. 1208- 1214.

93. Buttke T.M. Oxidative stress as mediator of apoptosis Text. / T.M. Buttke, PA. Sandstrem И Immunol. Today. 1994. - Vol,IS. - P, 7 - 10.

94. Carson D.A. Apoptosis and disease TextJ / D.A. Carson, J,M. Ribciro // Lancet. 1993. - Vol ,341, - P, 1251 - 1254.

95. Cans V.S, Apoptosis and schizophrenia; is the tumour suppressor gene, p53, a Candidate susceptibility gene? Text. / V.S, Catts, S,V, Cans H Schizophr Res. 2000. - Vol.41, >?3. - P. 405- 415.

96. Cochen J J. Activation events during thymic selection Text. / J J, Cochen // Semin. Immunol. 1992. - Vol,4, - P, 363-369.

97. Cochen J.J. Apoptosis Text. И Immunol. Today, 1993. - Vol 14. - P. 126 -130.

98. Cochen M, Should syndromes be defined phenotypically or moleculary? Resolution of the dilemma Text. / M. Cochen, Jr. Michael, R.E. Mac Lean И Amcr.J.Mcd-Gcnct. 1999. - Vol.86, - P. 203 - 204.

99. Columbano A- Cell death: current difficulties in discrining apoptosis from necrosis in the context of pathological processes in vivo Text. i A, Columbano //J, Cell. Biochem. 1995. Vol,58.-P. 181-190.

100. Cortical bci-1 protein expression and apoptotic regulation in schizophrenia Text. / L.F, Jarskog, J.H. Gitmore, E.S. Selinger, J.A Lieberman // Biol. Psychiat. 2000. - Vol.48, №7, - P. 641-650.

101. Cosulich S, Apoptosis; does stress Kill? Text. t S. Cosutich, P, Clarke il Curr. Biol. 1996. - Vol.6, № 12. - P.l 586-1588.

102. Cotter Т.О. Mechanism of apoptosis in T cells Text. / T,G. Cotter H Semin. Immunol. 1992. - Vol.4. - P. 399-405.

103. Cotter T.G. The induction of apoptosis by chcmoihcrapcutic agents occurs in ail phases of the cell cycle Text. / T.G. Cotter, J. M. Gtyrrn, F. Echeverci U Anticanccr Research. 1992. - Vol. 12. - P, 773 - 779,

104. Dcbatin К. M. APO - I - induced apoptosis of leukaemia cells from patients with adult T - cell leukaemia Text. / K.-M. Dcbatin, C.K. Goldmann, T.A. Waldmann // Blood - 1993. - Vol.81. - P. 2972 - 2977.

105. Dive С. Induction of apoptosis new targets for cancer chemotherapy Text. / C. Dive, C.F, Evans, A.D, Whetton it Semin. Cancer Biol. - 1994. - Vol.3. -P. 417-427.

106. Duvall E. Model cells lines from the study of apoptosis in vitro Text. / E. Duvall, A.H- WylEic // Immunol- Today. -1986, Vol.7. -P. 115-119.

107. El-Labban N.G, Apoptotic bodies and abnormally dividing epithelial cells in squamous cell carcinoma TextJ / N.G. El-Labban, E.Osorio-Hcncra // Histopathology, 1986. - Vol.10. - P. 921 - 931.

108. ELmen W. Accelerated En vitro apoptosis of lymphocytes from patients with systemic lupus erythema(osus (Texi| / W. EEmen, J. Niebtir, R. Kodcra // J, Immunol. 1995. - Vol.152. - P. 3685-3692.

109. English H-F. Relationship between DNA fragmentation and apoptosis in the programmed cell death in the rat prostate following castration Text. / H.F, English. N, Kyprianov, J.T. Isaacs H The Prostate, 1989. - Vol.15. - P. 233 -250,

110. Farber J.L. The role of calcium in cell death Text. // Life Sci. 1982. - Vol 29.-P. 1289- 1295,

111. Ferguson D.I. P. Uhrastructural observations on cell death by apoptosis in the «resting» human breast Text. / DJ.P Ferguson, TJ. Anderson // Virch- Arch. Path, Ana t- 1981, A393, № 2. - P. 193 - 203.

112. Fesus L.P. Apoptosis: Molecular mechanisms in programmed cell death Text. / L.P. Fesus, J .A. Davies. M. Piacenttni // Europ. J. Cell BioJ, 1991.- Vol.56. -P. 170-177.

113. Franklin J.L, Elevated intracellular calcium blocks programmed neuronal death TextJ / J.L. Franklin, E.M, Johnson U Ann. N Y. Acad Sci. 1994. -Vol.747. - P. 195 - 204/

114. Gavrieli Y. Identification of programmed cell death in situ via specific labeling of nuclear DNA fragmentation Text} / Y. Gavrieli, Y. Sherman, S.A, Ben-Sasson //J. Cell Biol. 1992. - Vol.119. - P. 493-501.

115. Goldstein P. Apoptosis in vitro and in vivo Text. / P. Goldstein, D.M. Ojcius, JD.E. Yang //Immunol. Rev. 1991, - Vol. 121. - P. 29-65.

116. Gerschenson L-E, Apoptosis a different type of cell death Text. / L.E. Gerschenson, RJ. Rotello // FASEB J. - 1992. - Vol .6, - P. 2450 - 2455.

117. Grant H. Fas-Iigand: receptor or ligand Text. / H. Gram, O. Moile, B. Ptouvier // Eur, 1. Immunol. -1993. Vol.23. - P. 1623-1629.

118. Green D.R, Functional characterization of FasL on tumor cell escaping active specific immunotherapy (Text. / D.R, Green, R.P. Bissoimetle. L.M. Glynn // Semin. Immunol. -1992, Vol,4. - P. 379-388.

119. Griffith T.S. The role of Fas L- indused apoptosis in immune privilege, Text. / T.S. Griffith, T.A. Ferguson H Immunol. Today, 1997. - Vol, 18. - P, 240 ~ 244,

120. Groux H, Activation indused death by apoptosis in CD4+T cells from human immunodeficiency virus - infected asymptomatic individuals Text. / H, Groux, G. Torpier, D. Monte // J. exp, Med. - 1992. - Vol J 75. - P. - 331 -340.

121. Hall A.C. Review: The role of glutathione in the regulation of apoptosis Text. / A.C, Halt It Eur. J. Clin. Invest. 1999. - Vol.29, №3. - P. 238-245.

122. Halme M. Fas counter-attack the bcsl from of tumor defens? Text. / M, Halme, M.C. Peitsch, M, Irmler // Int. Immunol. - 1995. - Vol,7. - P. 13811386.

123. Hemandes-Caselles T. Apoptosis Text. / T. Hcrnandes-Caselles, O. Stutman // J, Immunol. 1993, - Vol Л 51, - P. 3999-4012.

124. Hockenbery D.M. The bcl 2 oncogen and apoptosis Text. / D.M Hockenbciy // Sem. Immunol. - 1992, - Vol .4, - P. 413 - 420.

125. Horton J. Apoptosis-specific protein (ASP) identified in apoptotic Xenopus thymus tumor cell Text. I J. Horton, A. Milner, T. Horton H Dev. Immunol. -1998. Vol.5, №4 - P. 333-348.

126. Horvitz R. Genetic control of programmed cell death in the nematode Caenorhabditis elegans Text. / R. Horvitz // Cancer Res, 1999. - Vol.59, suppl. — P. 1701-1706.

127. In vitro radiosensitivity of human leukemia cell lines Text. / R.R. Weichselhaum, J,S. Greenberger, A. Schmidt, A. Karpas, W.C. Moloney // Radiology . 1981. - Vol.139. - P. 485-487.

128. Inhibition of T cell apoptosis a mechanism for persistence in chronic inflammation Text. / M. Salmon, D. Pilling, NX Bonhwick. A.N. Akbar tt Immunologisl. - 1997. - Vol.5. - P. 87 - 92.

129. Intercellular induction apoptosis through modulation of endogenous survival factor concentration; a review Text. / S. Dormant), A, Schwicgcr, J. Hanusch, T. Haufel, I. Engelmann, G. Bauer // Anticancer Res. 1999, - Vol. 19, № la, -P. 87-103.

130. Kamata H. Redox regulation of cellular signaling Text. / H. Kamata, H. Hirata // Cell Signal. 1998. - Vol Л 33, №7. - P. 773-775,

131. Kaneko H. Preferential elimination of CD28+ T cell in SLE and the relation with activation induced apoptosis (Text. / H. Kaneko, K, Saito, H Hashimoto // Clin. cxp. Immunol. - Vol Л 06. - P. 218 - 229.

132. Kastan M B. The many substrates and functions of ATM Text. / M.B, Kastan, Lim Dae-sik // Nature Reviews Molecular Cell Biology. 2000, - 31, - P. 179186.

133. Kawabc Y. Programmed cell death and extrathymic reduction of Vp8-*- CD4+ T cell in mice tolerant to st. Aureus enterotoxin В Text. / Y. Kawabe, A.Ochi H Nature. -1991.-Vol.349. P. 245 - 248.

134. Kerr J.F.R. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide ranging implications in (issue kinetics Text. / J.F.R. Kerr. A.H. Wylltc, А К Curie II Brit. J. Cancer. 1972. - Vot.26. - P. 239-247.

135. King L.B. .'re rote of molecules that mediate ■ p->.;:.> , in T cell? selection Test) I LB. King, J.D Aihwell WCwr. Op in. Immunol 1993. - Vol ,5, - P. 368-373.

136. Kizaki H Fetal thymic organ cultures Text. t H. Kizaki, T. Tadakuma, C. Odaka IIJ Immunol. 19S9. - Vol.143 - P. 1790-1794.

137. Knox К.Л. FasL: Fas ratio a prognostic factor in breast carcinomas Text. I K.A. Knox, G.D. Johnson, I Cordon /I Int. Immunol. - 1993. - Vol.5. - P 1085-1091.

138. Kochx M. Apopiosis in ilic atctuma Text. I M. Koch* II Ancrioscicrosis, Ttomb and Vase Biol.- 1998. №18 -P 1510-1522,

139. Komblau S-M. The role of apoptosis in the pathogenesis, prognosis, and therapy of hematological malignancies TextJ t S.M. Komblau II Leukemia. -1998- Vol. 12, suppl.l. P. 41 -44,

140. Korsmayer S.J. Signalling for death of lymphoid cell Text) / S.J. Korsmayer// Immunol. Today 1992.-Vul.13 - P. 285

141. Krammcr I'.H CD95 (ЛРО l/FAS)- mediated apoptosis: live and let die Text. I P.H. Krammer II Adv. Immunol. - 1999. - Vol.1.-F. 163-210.

142. Kroemer □. The pharmacology of T cell apopiosis Text. / G. Kroemer И Adv. Immunol. 1995.-Vol.58.-P. 211 -296.

143. Kioemer Mitochondrial control of apopiosis |Text. I G. Kroemer N. ZamTani, S A. Susin//Immunol. Today 1997. Vol.18 - P.+1-51.

144. Kuan N K Apoptosis: programmed cell death Text. / N.K. Kuan Arch. Si iv. 1998.-Vol.133,№7. - P773-775.

145. Kumar S. Regulation of caspasc activation in apopiosis: implications in pathogenesis and treatment of disease lTc*t. ! S- Kumar II Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 1W9. - Vol.26.34,- P. 295-303.

146. Kyrtakis J.M. Proteinkinase cascades activated by stress and inflammatory cytokines Text. / J.M, Kyriakis, J. Avruch H Biossays. 1996. - Vol.18, №7,- 567-577.

147. La Ferla F.M. The Alzheymer's Ap peptide induces neurodegeneration and apoptotic eel death in transgertctie mice Text. / F.M. La Ferla, ВТ. Tinkle, С J, Bieberich И Nature Genetics. 1995. - Vol.9. - P. 21 - 30.

148. Leach A,P. Apoptosis: molecular mechanism for physiologic cell death Text. / A.P. Leach //Clin, Lab. Sci. 1998, - Vol. 11, №6 - P. 346-349.

149. Lee H. T cell apoptisis detected in situ Text. / H. Lee. M, Arsura, M. Wu // J. Exp. Med. -1995. V0LI8I. - P.l 169-1177.

150. Lenarilo M-G- Indication of apoptosis Text. / M.G. Lenarilo // Nature, 1991,- Vol.353,-P.858-861.

151. Lcvine A J, The role of the p53 tumour suppressor gene in tumorigenesis Text. / A.J. Lcvine, M.E. Репу, A, Chang It Brit. J, Cancer, - 1994. - Vol.69. -P. 409 - 416.

152. Liu YJ. Armexin V-aflinity assay: a review on an apoptosis detection system based on fosfatidiserine exposure (Text. / YJ. Liu, C.A. Janeway // J, Exp. Med -1990, Vol.172. - P. 1735-1739.

153. Liu Y.J. Thymic microenvironment. 3-D versus 2-I>? |Text. t YJ. Liu, D.Y. Mason, G.D. Johnson//Eur. J. Immunol, 1991. - Vol.21. - P. 1905-1910.

154. Lloh N, Use of flow cilomettk assay to quaniitate apoptosis in human lymphocytetes Text. / N. Lloh, S. Nagata // J. Biol. Chem. -1993. Vol.268. -P. 10932-10938,

155. Loeffler S- Increased apoptosis of neutrophils in a case of closapinc-induscd agranulocytosis a case report Text. / S. Loeffler, K, Fehsel, U, Henning // Pharmacopsychiatry. - 2003. - Vol-36, - P. 37-41.

156. Lotem J. Apoptosis in neuron cells Text. / J. Lotcm, L, Sachs it Blood, 1993. -Vol.82. - P. 1092-1096.

157. Lowe S.W. Intercellular Fas-ligand expression causes Fas-mediated apoptosis in human prostate cancer cells Text. / S.W. Lowe, E.M. Schmitt, S.W, Smith ft Nature. 1993. - Vol.362. - P 847-849.

158. Lymphoproliferation disorder in mice explained by defects in Fas antigen that mediates apoptosis Text. / R Watanabe Fukunaga, C.I. Brannan, N,G. Copel and tt Nature. - 1992. - Vol.356 ,- P. 314 - 317.

159. Majno G. Apoptosis, oncosis and necrosis Text. t G. Majno, I. Joris // Amcr, J. Path. 1995. - Vol.146. - P. 3-15.

160. McConkey DJ. Apoptosis molecular mechanism and biomedical implications Text. / D.J. McConkey, B. Zhivotovsky, S. Orrenius // Molec. Aspects Med - 1996.-Vol. 17.-P. 1 -110,

161. McDonelt TJ. Be. -2 immunoglobulin transgenic mice demonstrate extended В cell survival and follicular lymphoproliferation JText] / TJ. McDonell, N. Dcane, F.M, Piatt tt Cell. - 1989. - Vol.57. - P. 79 - 88.

162. McNeill H. Apoptosis; Ras to the rescue in the fly eye Text. / H- McNeill, J. Dounward // Curr. Biol. 1999. - Vot.9, XsS. - P. 176-179,

163. Mechanism of cell death in hypoxia'reoxygenation injury Text. / P. Saikumar, Z. Dong, J M. Weinberg, M .A. Venkatachalam it Oncogene. 1998. - Vol.17. - P. 3341 - 3349.

164. S3. Meikrantz W. Apoptosis and cell cycle Text. / W. Meikrantz, R. Schlegel // J.

165. Я5. Mitochondria. glutathione: importance and transport Text] / J.C. Fcnnandez-Checa, N. Kaplotitz, C. (Jurela-Ruiz, д. Colell II Semin. Liver Dis. I», -Vol.29.№3.-P.23B-245.

166. Miyaima A. I lytokine signaling for proliferation. survival, and death in heinatopoetic cells (Text}/A. Miyaima. K-fto, T- Kinoshita ! '■'■ I Hcmatol. 1999. - Vol.69. №3 - P. 137- 146,

167. Moser В Silver stain for the detection of apoptosis at the light microscopy (Ten. / В Moser И Micr. An at 1945. - Vol .37. - P. 27-29

168. Nagata S. The Fas death factor Text! / S Nagali. P Goldstein H Science. -1995 Vol.367.-P 1149- 1456.

169. Nakamura S. Insufficient expression of Fas antigen on hcipcr T cell in Behcet's disease (Text. I S Nikimun, M, Sugita. H. Matoda H Brit. I Ophtalmology. 1996. - Vol.SO. - P. 174- 176.

170. Oltvai Z.N. Checkpoints of dueling di гопшз foil death wishes |Text. 1 Z.N. Oltvai, S.J. Korsineyer II Cell. .1994- Vol.79. - P. 1S9- 192

171. Onici Y. Apoptosis and diseases Text I I Y- Onici, H. Kizaki It Hum. Cell. -1994. Vol.7. - P. 27 - 32.

172. OrTenius S. Apoptosis: molecular mechanisms and implications fur human disease (Test. I S. Orrcnius III. lilt Med. 1995. - Vol.237, X?6. - P 259536.

173. Pellegrini M. A portrait of the Bel -2 protein family: life, death, and the whole picture T«d./M. Pellegrini, A. Strasser IIJ clin. Immunol. 1999.- Vol. [9. -P. 365-377.

174. Pender M.P. Activation induced apoptosis of autoreactive and allorcacrive T-lymphocytes in the target organ as a major mechanism of tolerance Text. I M .p .Pender II Immunol. Cel I. Biol - 1999 - Vol.77, №3. - P. 216-223.

175. Proteins phosphorylatcd during stress induced apoptosis are common targets for autoantibody production in patients with M l: Text. t X. Ute, M. Hottelet, P.H. Schur, P. AndersonH] exp. Med 1997.-Vol. 185. - P 843-654.

176. Puck J.M. X linked immunodeficiencies Text. / Ш. X Puck // Adv, Hum. Genet. - 1993. - Vol.21. - P 107 - 135.

177. Radiation induced apoptosis in human colorectal adenoma and carcinoma cell lines can occur in the absence of wild type p53 Text. / T.S.Bracey, J.C. Miller, A. Preece, C.Paraskeva // Oncogene. - 1995, - Vol.10, - P, 2391 -2396.

178. Rathmell J.C. The central effectors of cell death in the immune system Text. / J.C. Rathmell, C B. Thompson // Ann, Rev, Immunol 1999, - Vol.!7. - P. 781 -828.

179. Role of nuclease in apoptosis Text. / B. Zhyvotovsky, D.Wade, P, Nicotcra, S. Orrenius // Int. Arch. Allergy Immunol 1994, - Vol. 105. - P. 333 - 338.

180. Romero- Alvira D. The keys of oxidative stress in acquired immune deficiency syndrome apoptosis Text. ID. Romero-Alvira, E. Roche // Med,. Hypotheses. 1998. - Vol.51, №2 - P. 169-173.

181. Rowan S. Mechanism of apoptotic cell death {Text. / S, Rowan., D.E. Fischer ftLeukemia. 1997.- Vol.ll.-P.457-465,

182. Russel J.H. Activation induced apoptosis о Г nature T cell in the regulation of immune responses Text. / J.H. Russel // Curr, Opin. Immunol. - 1995, -Vot.7. - P. 382 - 388.

183. Saphier CJ. Altered apoptosis levels in hearts of human fetuses with Down syndrome Text. / С J. Saphier, J. Yeh // Amer. J. ObsteL Gynecol. 1998. -Vol. 179,-P, 962-965,

184. Samaf CE. Kinetic stadies on a murine sarcoma and analisis of apoptosis Text. / CE. Samaf, I D. Bowen // Brut. J. Cancer 1986. - Vol.54. - P. 989998.

185. Schmitl C,A. Apoptosis and therapy Text. / C.A. Schmitt, S W. Loue tf J, Pathol, 1999.-Vol, 187, №1. -P, 127-137.

186. Searle J. An electromicroscopie study of the mode of cell death induced by cancer chemolherapeutic agents in population of proliferating normal andneoplastic cell Text. / J, Scarle, T.A. Lawson, PJ. Abbott U J. Pathol. 19П -VOLI1S.-P. 129-138,

187. Scki M. Apoptosis of lymphocytes induced by glucocorticoids and relationshu 10 therapeutic efficacy in patients with systemic lupus erythematosus Text. t M. Seki, C. Ushivama, N. Seta H Arthritis and Rheum. -1M- Vol.4 I. №5 -P. 823-830,

188. Shetr C.J. The ARF/p53 pathway Text. / С J. Sherr, J.D, Weber // Curreit Opinion in Genetics & Development. 2000. - Vol.10. - P. 94-99.

189. Shiloh Y. ATM and ATR: networking cellular responses to DNA damap; Text. / Y. Shiloh // Current Opinion in Genetics & Development. 2001-VoJ.lL-P. 71-77.

190. Siege I R.M. The role of Fas and related death receptors in autoimmune and other disease states Text. / R.M. Siegel. T.A. Fleisher // J. Allergy Clia. Immunol. Vol.103. №5, - P. 729-738.

191. Silvcstris F. Enhancement of T cell apoptosis correlates with increased seruat levels of soluble Fas (CD95/APO-I) in active lupus Text. I F, Silvcstris, D. Grinello. M. Tucci // Jjtpus. 2003, - Vol, 12. Jfel. - P. 8-14.

192. Steller H. Mechanism and genes of cellular suicide Text. / H. Steller H Science, 1995 . - Vol.267. - P. 1145 - 1149.

193. Strasser A. Bel 2 transgene inhibit is T «II death and perturbs thymus self-censorship (Text. t A. Strasser, AW. Harris, S. Cory It Cell. - 1991. * Vol.67-P. 889 - 899.

194. Takashi R. Generalized lymphoprolifcraiion syndrome im mice causcd b\ a point mutation in the Fas ligand Text. / R. Takashi, M. Тапдка, СЛ. Brarnun // Cell. 1994. - Vol-76. - P. 969 - 976,

195. The earliest T lineage commited cells depend on 1L-7 for Bcl-2 expression and normal cell cycle progression (Text. / U. Von Frecden Jeffr)', N. Solvastn. M, Howard, R, Murray // Immunity. - 1997. - Vol.7. - P, 147 -154.

196. Thomberry N.A. Caspases: enemies within Text. / N.A. Thomberry, V. Lazebnik // Science, 1998. - Vol.281. - P. 1312 - 1316.

197. Troppmair J. Apoptosis regulation Raf, Bcl-2, and R-Ras Text. / J. Troppmair, U.R. Rapp // Recent Results Cancer Res. 1997. - Vol. 143. - P. 245-249.

198. Tnilson J,A. The effect of mutations on peptide models of ihe DNA binding helix of p53: evidence for a correlation between structure and tumorigencsis Text. / LA, Trulson, G,L. Millhauser H Biopolimers. 1999, - Vol.49. - P, 215-224.

199. Use of a flow cytometric assay to quantitate apoptosis in human lymphocytes Text. / T.W. McCloskcy, N. Oyaizu, M. Coronezi, S. Pahwa// Clin. Immunol. Immunopath. 1994. - Vol .71, - P. 14 - 18,

200. Van Engeland M, Annexin V affinity assay: a review on an apoptosis detection system based on phosphaiidylserine exposure Text. / M. Van Engeland, LJ.W. Nictad, F.C.S, Ramaekers И Cytometry. - 1998. - Vol.31. -P. 1-9.

201. Walker PR. Endonuclease activities and DNA degradation in apoptosis (Text) / P R. Walker, M. Sikorska // Biochim, Cell Biol, 1994 - Vol,72. -1 615-623.

202. Waterhouse NJ. Mitochondria and apoptosis: HQ or high security prisor? Text. / NJ. Walerhouse, D.R. Green Hi. Clin. Immunol. - 1999, - Vol. 19. -P. 378-387.

203. Weedon D. Apoptosis. Its nature and implications for dcrmatopathology Tex. / D Weedon, J. Scarl, J.F- Kerr// Am. J. Dcrmaiopathol. 1979, - Vol. 1. №2 -P. 133-144.

204. Winoto A. Cell death in the regulation of immune responses (Text) / A. Winoto // Curr. Opin. Immunol. 1997. - Vol,9, - P.365 - 370.

205. Wong B. Pathways leading to cell death in T eels Text. i B. Wong Y, Choir'/ Curr. Opin. Immunol. 1997. - Vol.9. - P. 358 - 364.

206. Wyltie A.H. Glucocorticoid induced thymocyte apoptosis is associated with endogenous endonuclease activation Text. / A.H. Wyllie // Cytol. - 1980.— Vol.68,-P, 251-306,

207. Zdzienicka M,2. Molecular processes and radiosensitivity Text. ! M.Z, Zdzienicka // Strahlenter Oncol, ■ 1997, Vol. 173, Ш. - P. 457-461.

208. Zhyvotovsky B. Multiple proteases are involved in thymocyte apoptosis Text. / A. Gahn, M. Ankercrone U Exp. Cell Res. 1995. - Vol.221. P 404 - 412.