Влияние озонированного кардиоплегического раствора на функциональный элемент миокарда тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.03, кандидат медицинских наук Никольский, Александр Викторович

• Никольский, Александр Викторович
• кандидат медицинских наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Никольский, Александр Викторович

Введение

Глава 1 ИЗМЕНЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО ЭЛЕМЕНТА МИОКАРДА ПРИ ДЛИТЕЛЬНОМ ИСКУССТВЕННОМ КРОВООБРАЩЕНИИ С КАРДИОПЛЕГИЕЙ И СПОСОБЫ ИХ

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1 Краткий очерк развития метода искусственного кровообращения и кардиоплегии

1.2 Изменения гемодинамики и гемомикроцйркуляции при искусственном кровообращении и кардиоплегии

1.2.1 Компоненты функционального элемента миокарда

1.2.2 Патогенез гипоксических нарушений в миокарде в условиях кардиоплегии

1.3 Характеристика кардиоплегических растворов и методов проведения кардиоплегии

1.3.1 Средства, повышающие устойчивость миокарда к ишемии

1.4 Некоторые аспекты биологического действия озона и его антигипоксический эффект

Глава 2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Подготовка животных к эксперименту и воспроизведение моделей

2.2 Методика проведения искусственного кровообращения и кардиоплегии

2.3 Общая характеристика экспериментального материала

2.4 Методы исследования

2.4.1 Биохимические методы исследования

2.4.2 Морфологические методы исследования

2.4.3 Гистохимические методы исследования

2.4.4 Статистические методы исследования

Глава 3 СТРУКТУРА И МЕТАБОЛИЗМ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО ЭЛЕМЕНТА МИОКАРДА ПРИ ХИРУРГИЧЕСКОМ ВМЕШАТЕЛЬСТВЕ В УСЛОВИЯХ ЭНДОТРАХЕАЛЬНОГО ЭФИРНО-КИСЛОРОДНОГО НАРКОЗА

Резюме

Глава 4 ИЗМЕНЕНИЯ МЕТАБОЛИЗМА И СТРУКТУРЫ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО ЭЛЕМЕНТА МИОКАРДА ПРИ ЗАЩИТЕ СЕРДЦА ОТ ИШЕМИИ КАРДИОПЛЕГИЧЕСКИМ РАСТВОРОМ ДЕРИНГА

4.1 Структура и метаболизм функционального элемента миокарда через 90 минут ишемии сердца 63 Резюме

4.2 Структура и метаболизм функционального элемента миокарда через 2 часа постишемического периода 82 Резюме

Глава 5 ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ЗАЩИТЫ СЕРДЦА ОТ ИШЕМИИ ОЗОНИРОВАННЫМ К АР ДИОПЛЕГИЧЕСКИМ РАСТВОРОМ ДЕРИНГА

5.1 Структура и метаболизм функционального элемента миокарда через 90 минут ишемии

Резюме

5.2 Структура и метаболизм функционального элемента миокарда через 2 часа постишемического периода после 90 минутной ишемии с использованием озонированного кардиоплегического раствора Деринга 121 Резюме 137 ЗАКЛЮЧЕНИЕ 140 Выводы 150 Список литературы

Список условных обозначений и сокращений АД — артериальное давление

АТФ, АДФ, АМФ - аденозинтри-, ди-,монофосфорная кислота

АИК — аппарат искусственного кровообращения

Г-6-фДГ - глюкозо-6-фосфат дегидрогеназа

Г-6-ф — глюкозо-6-фосфат

ИК - искусственное кровообращение

КМЦ - кардиомиоцит

КПР - кардиоплегический раствор

КФ - креатин фосфат

ЛДГ - лактатдегидрогеназа

МЦ - микроциркуляция

МЦР - микроциркуляторное русло

НАДН-ДГ - никотинамидадениндинуклеотид восстановленная дегидрогеназа

НАДФ - никотинамидадениндинуклеотид фосфат

ОВФ - окислительно-восстановительные ферменты

ПИП - постишемический период

СДГ - сукцинатдегидрогеназа

СПР - саркоплазматический ретикулум

ФЭМ — функциональный элемент миокарда

ЭКН - эфирно-кислородный наркоз а- ГФДГ - а- глицерофосфатдегидрогеназа

О - диаметр кардиомиоцитов с1 - диаметр капилляров

Я - радиус диффузии

8 - площадь ядер кардиомиоцитов

V - объем капиллярного русла

N - число функционирующих капилляров

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние озонированного кардиоплегического раствора на функциональный элемент миокарда»

Актуальность проблемы.

В настоящее время в мире ежегодно выполняется более шестисот тысяч операций на сердце с применением кардиоплегии.

Развитие острой сердечной недостаточности у кардиохирургических больных в послеоперационном периоде в большинстве случаев связано с гипоксическими и ишемическими повреждениями миокарда на интраоперационном этапе. (И.И. Дементьева 2006, Л. А. Бокерия, В. М. Авалиани, В. Ю. Мерзляко 2008.). Для предупреждения этих осложнений в настоящее время используется фармакохолодовая кардоплегия в сочетании с локальной гипотермией сердца.

Однако количество осложнений, связанных с гипоксическим повреждением миокарда остается достаточно большим. Частота развития послеоперационных осложнений у пациентов оперированных с ИК составляет по данным Б.В. Шабалкина 2005 , В.М. Авалиани 2008, Л.А. Бокерия 2008 от 22 до 36%. Это побудило нас поставить основной целью работы - изучение влияния озона, являющегося антигипоксантом, в составе кардиоплегического раствора на предупреждение гипоксических нарушений метаболизма и связанных с ними структурных повреждений миокарда при ишемии и в раннем послеоперационном периоде.

Поскольку анализ любого патологического процесса в органе становится возможным и ценным, лишь при гибком представлении о структуре и функциональных связях с организмом этого органа. Важным моментом в понимании развития ишемической альтерации сердца, является изучение структурнофункционального элемента миокарда (ФЭМ).

Согласно концепции А.М.Чернуха (1984), в анатомическом отношении функциональный элемент миокарда состоит из гемоциркуляторной единицы, лимфатического капилляра, специализированных клеток паренхимы, нейрогуморальных образований. Все это погружено в неструктурированный гель и укреплено соединительнотканным каркасом. На уровне ФЭМ осуществляется единство кровоснабжения, метаболизма и функции данного органа. Такая единица обладает всеми качествами для функционирования: в ней воплощаются в миниатюре характеристики целой системы. Цель и основные задачи исследования.

Целью настоящего исследования явилось изучение влияния озонированного кардиоплегического раствора Деринга на метаболизм и структуру ФЭМ у собак при проведении кардиоплегии и в раннем постишемическом периоде.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. Исследовать светооптические, электронномикроскопические, морфометрические и энзимогистохимические характеристики функционального элемента миокарда после проведения торакотомии и перикардиотомии в условиях эфирно-кислородного наркоза.

2. Изучить влияние кардиоплегического раствора на изменения метаболизма и структуры ФЭМ во время 90 минутной ишемии и спустя 2 часа в постишемическом периоде.

3. Определить влияние озона в составе кардиоплегического раствора на изменения метаболизма и структуры ФЭМ во время 90 минутной ишемии и спустя 2 часа постишемического периода.

4. Сопоставить изучаемые параметры с применением неозонированного и озонированного кардиоплегических растворов на одинаковых этапах исследования и на основании их анализа, оценить противогипоксическое действие озонированного кардиоплегического раствора на метаболизм и структуру ФЭМ.

Научная новизна.

1. Впервые исследовано противоишемическое влияние озона в составе кардиоплегического раствора на метаболизм и структуру кардиомиоцитов и эндотелиоцитов миокарда. Проведен сравнительный морфометрический анализ показателей микроциркуляторного русла при использование стандартного и озонированного кардиоплегических растворов.

2. Выявлено, что защита миокарда от 90 минутной ишемии раствором Деринга недостаточна. Изменения метаболизма и микроциркуляции приводят к деструкции клеточных структур в эндотелиальных клетках и кардиомиоцитах.

3. Через 2 часа постишемического периода не происходит полного восстановления микроциркуляторного русла, метаболизма и структуры кардиомиоцитов и эндотелиоцитов, лишь частично компенсируются изменения миокарда после 90 минутной ишемии на фоне стандартной кардиоплегии.

4. Озон в составе кардиоплегического раствора оказывает выраженный мембраностабилизирующий и противогипоксический эффект на функциональный элемента миокарда в период 90 минутной тотальной ишемии сердца.

5. В работе доказано, что использование озона в составе кардиоплегического раствора на интраоперационном этапе способствует более быстрому и полному восстановлению структуры миокарда во время реперфузии, снижая альтерацию микроциркуляторного русла и клеточного компонента миокарда в постишемическом периоде.

Практическая значимость.

На основании полученных в работе данных, выдвигается положение о повышении устойчивости миокарда к ишемии за счет введения в состав кардиоплегического раствора озона, в качестве антигипоксанта. Озонированная кардиоплегия предупреждает истощение компенсаторноприспособительных реакций в миокарде при ишемии, что позволяет рекомендовать использовать данную технологию защиты сердечной мышцы при проведении операций на «открытом сердце».

Рассмотрение функционального элемента миокарда с позиций системного анализа имеет значение как для физиологии, гистологии, так и патологической физиологии и патологической анатомии, расширяя представления о взаимосвязи компонентов ФЭМ и активном участии каждого из них в процессе развития общепатологических изменений.

Данные работы о механизмах формирования изменений в ФЭМ при кардиоплегии и возможности их предупреждения с помощью озонированного кардиоплегического раствора используются в педагогическом процессе профильных кафедр Нижегородской медицинской академии и Института ФСБ РФ.

Апробация работы.

Основные положения работы доложены и обсуждены на: 6-ой и 7-ой Всероссийских научно-практических конференциях с международным участием «Озон в биологии и медицине» (Н.Новгород, 2005, 2007), Всероссийской научно-практической конференции ассоциации анестезиологов-реаниматологов Юга России (Геленджик, 2004), 3-ей Украинско-русской научно-практической конференции «Озон в биологии и медицине» (Севастополь, 2006), 1-ой научно-практической конференции Азиатско-европейского союза озонотерапевтов «Озон в биологии и медицине» (Большое Болдино, Нижегородская обл., 2006), XIII ежегодной сессии НЦССХ им. А.Н.Бакулева РАМН с Всероссийской конференцией молодых ученых (Москва, 2009). I 8

Основные положения, выносимые на защиту

1. Применение КПР Деринга во время 90 минутной ишемии с ИК не предупреждает нарушения, метаболизма и структуры ФЭМ.

2. Возобновление коронарного кровотока в течении 2-х часов после 90 минут ишемии с применением КПР не приводит к полному восстановлению метаболизма и структуры ФЭМ.

3. Введение озона в состав КПР уменьшает напряжение компенсаторно-приспособительных реакций в ФЭМ, предотвращая их срыв и декомпенсацию во время 90 минутной ишемии.

4. Адаптационные реакции, развившиеся при введении озонированного КПР в период 90 минутной ишемии миокарда сохраняются и в постишемическом периоде, обеспечивая более быстрое и полное восстановление метаболизма и структуры миокарда.

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Никольский, Александр Викторович

Выводы:

1. Защита миокарда кардиоплегическим раствором при 90 минутной ишемии сопровождается повреждением микроциркуляторного русла и нарушением метаболизма, что приводит к необратимым структурным изменениям клеточных структур и интерстиции сердца.

2. Несмотря на восстановление коронарного кровотока после кардиоплегии раствором Деринга, через 2 часа постишемического периода сохраняются нарушения микроциркуляторного русла, низкая активность ферментов дыхательной цепи, что усугубляет структурные повреждения функционального элемента миокарда.

3. Озонированный кардиоплегический раствор, применяемый при 90 минутной ишемии сердца, уменьшает альтерацию микроциркуляторного русла, предупреждает нарушения метаболизма и вследствие этого, предотвращает развитие необратимых структурных изменений в миокарде.

4. Сформировавшиеся при защите сердца озонированным кардиоплегическим раствором компенсаторно-приспособительные реакции продолжают функционировать и в постишемическом периоде, сопровождаются восстановлением морфометрических показателей микроциркуляторного русла, высокой активностью энзимов, способствуют более быстрому и полному восстановлению структуры миокарда во время реперфузии.

Заключение

Развитие острой сердечной недостаточности у кардиохирургических больных в послеоперационном периоде в большинстве случаев связано с гипоксическими и ишемическими повреждениями миокарда на интраоперационном этапе. Для предупреждения этих осложнений в настоящее время используется фармакохолодовая кардоплегия в сочетании с локальной гипотермией сердца.

Однако количество осложнений, связанных с гипоксическим повреждением миокарда остается достаточно большим. Это побудило нас поставить основной целью работы - изучение влияния озона, являющегося антигипоксантом, в составе кардиоплегического раствора, на предупреждение нарушений метаболизма и связанных с ними структурных повреждений функционального элемента миокарда при ишемии и в раннем послеоперационном периоде.

Понятия микроциркуляции, метаболизма и структуры тесно связаны в функциональном элементе миокарда, как прямой, так и обратной зависимостью. Так, нарушения микроциркуляции приводят к изменению метаболизма, а это в свою очередь к повреждению структуры клеток. Структурные повреждения приводят к нарушению микроциркуляции. Поэтому, если ишемическая альтерация сильно выражена, то восстановление артериального кровотока не приводит к восстановлению функции органа подвергшегося ишемии.

На первом этапе экспериментов было изучено влияние неозонированного кардиоплегического раствора на метаболизм и структуру функционального элемента миокарда при тотальной ишемии сердца до 90 минут и через 2 часа постишемического периода.

Через 90 минут ишемии в микроциркуляторном русле функционального элемента миокарда наблюдались явления малокровия, плазматизации сосудов. Особенно выраженные нарушения отмечались в субэндокардиальном слое.

Установлено, что 90 минутная ишемия приводила к изменению метаболизма эндотелиоцитов. В среднем по миокарду активность всех ферментов эндотелиоцитов была достоверно ниже таковых при эфирно-кислородном наркозе. Особенно низкие показатели отмечались у Г-бф-ДГ (фермента пентозфосфатного шунта), и ЛДГ (энзима гликолиза), что свидетельствовало о незавершенном переходе метаболизма эндотелиоцитов на путь анаэробного обмена.

Нарушения метаболизма приводили к повреждению структуры эндотелия капиллярного русла: при электронной микроскопии границы базальной мембраны эндотелия становились размытыми, а на некоторых участках полностью стирались. Люминальная поверхность эндотелиальных клеток была бугристой с участками выпячиваний плазмолеммы. В клетках капилляров отмечался перинуклеарный отек, просветление цитоплазмы, разрушение крист в митохондриях. Пиноцитозная активность в эндотелиоцитах капилляров была низкой.

В перикапиллярном пространстве наблюдался выраженный отек, обнаруживались единичные эритроциты.

Качественным изменениям микроциркуляторного русла через 90 минут ишемии соответствовали количественные морфометрические показатели: снижалось число функционирующих капилляров и уменьшался объем капиллярного русла. Диаметр капилляров достоверно увеличивался по сравнению с эфирно-кислородным наркозом, что можно объяснить потерей тонуса сосудистой стенки при использовании неозонированного кардиоплегического раствора Деринга.

Через 90 минут ишемии с использованием неозонированного кардиоплегического раствора радиус диффузии капилляров увеличивался в прямой зависимости от уменьшения числа капилляров на единицу площади ткани миокарда.

Под влиянием гипоксии происходила перестройка метаболизма кардиомиоцитов. Активность ферментов гликолиза и дыхательной цепи: ЛДГ и НАДН-ДГ определялась, как низкая по всем слоям при использовании неозонированного кардиоплегического раствора Деринга в период ишемии.

Анализ субстратов в миокарде показал повышение содержания глюкозы, глюкозо-6-фосфата и лактата. Соответственно снижались концентрации гликогена, пирувата, креатин фосфата, свидетельствующие о переходе на анаэробный путь метаболизма и снижении активности метаболических реакций вцелом, что в свою очередь приводило к значительному падению содержания АТФ.

На уровне световой микроскопии в кардиомиоцитах отмечалась извилистость мышечных волокон, их пересокращения и реже - разрывы по 7, - дискам, наблюдалась выраженная неравномерность окраски цитоплазмы. Встречались изменения со стороны ядер кардиомиоцитов: полиморфность, кариопикноз, перинуклеарный отек.

При электронно-микроскопическом исследовании, определялось нарушение ультроструктуры клеточных компонентов, пересокращения и разрывы миофибрилл, кариопикноз, принуклеарный отек, в митохондриях гомогенизация крист и разрывы наружной мембраны.

Морфометрические исследования кардиомиоцитов показали: достоверное увеличение площади ядер и диаметра ¡слеток миокарда относительно периода с эфирно-кислородным наркозом.

В группе с использованием неозонированного кардиоплегического раствора Деринга через 2 часа постишемического периода активность всех ферментов эндотелиоцитов относительно этапа 90 минутной ишемии возрастала: достоверно повышалась активность фермента гликолиза (ЛДГ) и энзима пентозофосфатного шунта - Г-бф-ДГ, наименьшее повышение активности отмечалось у НАДН-ДГ.

В сравнении с данными серии при эфирно-кислородном наркозе активность фермента дыхательной цепи (НАДН-ДГ) и цикла Кребса (СДГ) была достоверно ниже, показатели ЛДГ и а-ГФДГ достоверно не отличались.

На основании полученных результатов можно заключить, что эндотелиоциты в постишемическом периоде не восстанавливали в полной мере аэробный метаболизм, в них активно продолжался анаэробный гликолиз.

Через 2 часа постишемического периода также не наблюдалось полного восстановления ишемических повреждений структуры эндотелия: сохранялся внутриклеточный отек, большинство митохондрий имели деформированные и частично разрушенные кристы, цитоплазма имела участки просветления. Внутренняя поверхность микрососудов была неровной, истонченной, определялись зоны разряжения базальной мембраны. Перикапиллярно определялось отложение PAS субстанции. В части капилляров определялись сладжи.

В перикапиллярном пространстве незначительно уменьшался отек относительно предыдущего этапа исследований. Диффузно в интерстиции определялись хлопьевидные образования аналогичные таковым в просвете капилляров.

Морфометрические показатели в сравнении с периодом 90 минутной ишемии отражали процессы восстановления в структуре микроциркуляторного русла: повышалось количество функционирующих капилляров, уменьшался средний диаметр капилляров по всем слоям миокарда. Однако, по сравнению с серией при эфирно-кислородном наркозе число капилляров оставалось достоверно меньшим в среднем по миокарду на 27,5%.

Радиус диффузии уменьшался относительно предыдущей серии, но оставался достоверно больше чем при эфирно-кислородном наркозе.

При исследовании активности ферментов кардиомиоцитов, через 2 часа постишемического периода наблюдались процессы как анаэробного так и аэробного метаболизма, активность энзимов возрастала по сравнению с серией 90 мин ишемии миокарда, но была достоверно ниже показателей при эфирно-кислородном наркозе. Низкой оставалась активность НАДН-ДГ фермента дыхательной цепи. Необходимо отметить, что в целом процессы потребления преобладали над синтезом в кардиомиоцитах, подтверждением служит достоверное снижение концентраций макроэргов в миокарде: достоверное уменьшение содержания АТФ и креатин фосфата, пирувата в сравнении с эфирно-кислородным наркозом. Об активации аэробного пути метаболизма в кардиомиоцитах свидетельствовало увеличение содержания креатин фосфата и пирувата, снижение содержания глюкозо-6-фосфата и лактата относительно предыдущей серии опытов.

По данным морфометрии площадь ядер и диаметр кардиомиоцитов уменьшались относительно предыдущей серии опытов, что можно объяснить уменьшением внутриклеточного отека.

Несмотря на улучшение морфометрических показателей кардиомиоцитов, через 2 часа постишемического периода на фоне метаболических нарушений в клетках миокарда прогрессировали структурные повреждения. При световой микроскопии выявлялись альтеративные изменения по типу гиалиновокапельной дистрофии, утрата отдельными клетками поперечной исчерченности, особенно выраженные нарушения цитоархитектоники наблюдались в субэндокардиальном слое, как наиболее ишемичном.

При ультраструктурном анализе кардиомиоцитов сохранялись зоны лизиса и пересокращения миофибрилл, разрывы по Ъ- дискам.

Наблюдались конгломераты митохондрий и выраженные изменения подавляющего большинства из них: просветление матрикса, разрушение части крист иногда с разрывами наружной оболочки. В клетках определялось расширение цистерн саркоплазматического ретикулума.

Таким образом использование неозонированного кардиоплегического раствора при 90 минутной ишемии миокарда выявило перенапряжение и срыв компенсаторно- приспособительных механизмов в функциональном элементе миокарда, проявляющиеся в изменениях метаболизма эндотелиоцитов и кардиомиоцитов и приводящих к структурным изменениям в них. Данные отклонения лишь частично восстанавливались через 2 часа постишемического периода, а некоторые из них были необратимыми и даже усугублялись.

На следующем этапе экспериментов было изучено влияние озона в составе кардиоплегического раствора на метаболизм и структуру функционального элемента миокарда при тотальной ишемии сердца до 90 минут и спустя 2 часа постишемического периода.

Через 90 минут ишемии с применением озонированного кардиоплегического раствора Деринга определялось мембранопротективное действие озона выражающееся в увеличении числа функционирующих капилляров функционального элемента миокарда и поддержании тонуса их стенки. Количество выявленных капилляров при использовании для кардиоплегии озонированного раствора Деринга, в среднем по миокарду было на 36 % больше, чем в контрольной серии.

Диаметр определяемых капилляров через 90 минут ишемии с озонированным раствором Деринга был достоверно меньше, чем при использовании неозонированного раствора Деринга.

Уменьшался также и радиус диффузии капилляров в опытной серии.

Состояние перикапиллярного пространства во многом определялось количественно-качественными изменениями микроциркуляторного русла.

Так в опытной серии ультраструктурные изменения капилляров и их базальных мембран приводили к увеличению проницаемости капиллярной стенки и, как следствию, к накоплению в интерстиции отечной жидкости с белком и отдельными эритроцитами. Использование озона, как антигипоксанта с мембранопротекторными свойствами, значительно снижало транссудацию, явления периваскулярного отека уменьшались. Пиноцитозная активность повышалась, особенно на базальной поверхности эндотелиоцитов.

Введение озона в состав кардиоплегического раствора, по сравнению с контролем повышало активность энзимов в цитоплазме клеток капилляров. Функция энзимов пентозофосфатного шунта (Г-6-фДГ) и гликолиза (ЛДГ) повышалась почти вдвое, что отражало адаптацию клеток к анаэробным условиям метаболизма в условиях 90 минутной ишемии.

Активная метаболическая адаптация защищала эндотелиоциты от структурных повреждений, в период ишемии: люминальная поверхность эндотелиальных клеток имела единичные выросты, определялся умеренный отек клеток капилляров. Базальная мембрана была неоднородна по толщине, но определялась непрерывной.

Применение озонированного кардиоплегического раствора Деринга для перфузии миокарда в период 90 минутной ишемии вызывало ряд метаболических эффектов в кардиомиоцитах, которые заключались в активации процессов утилизации глюкозы и глюкозо-6-фосфата по пути гликолиза и пентозофосфатного шунта, увеличении содержания высокоэнергетических фосфатов и снижении уровня ацидоза, а также перестройке метаболизма кардиомиоцитов направленной на усиление утилизации сукцината. В целом активность всех ферментов миокарда в опытной серии была достоверно выше, чем в серии с неозонированным кардиоплегическим раствором.

Исследование содержания субстратов в миокарде показало падение содержания лактата, глюкозы, гликогена и креатина и отражало перестройку метаболизма клеток миокарда на анаэробный путь энергетического обмена на фоне применения озонированного кардиоплегического раствора.

Вышеуказанные метаболические изменения приводили к сохранению структуры кардиомиоцитов: отсутствовали пересокращения, расслоения, разволокнения и лизис миофибрилл, просветления матрикса и гомогенизация крист митохондрий, разрывы их наружной мембраны, конденсация в маргинальной зоне хроматина и перинуклеарный отек.

Относительно контрольной серии в кардиомиоцитах уменьшалась площадь ядер и диаметр клеток, что связано со снижением внутриклеточного отека.

Через 2 часа постишемического периода с использованием озонированного кардиоплегического раствора в микроциркуляторном русле не наблюдалось прогрессирование альтеративных изменений, восстанавливалась структура микроциркуляторного русла: отсутствовали сладжи, микротромбы, явления малокровия и плазматизация сосудов, в капиллярах дифференцировались едйничные свободнолежащие эритроциты.

Количественные морфометрические показатели миокарда находились в корелляционной зависимости от структурных и метаболических изменений эндотелия и микроциркуляторного русла: количество капилляров через 2 часа постишемического периода с озонированным кардиоплегическим раствором превышало показатели контрольной группы, а в интрамуральном слое достигало значений при эфирно-кислородном наркозе.

Также в опытной серии отмечалось уменьшение диаметра капилляров по всем слоям миокарда, что определялось сохранением тонуса микроциркуляторного русла.

Радиус диффузии капилляров изменялся прямопропорционально количеству открытых капилляров и достоверно уменьшался относительно контрольной серии.

Через 2 часа постишемического периода достоверно относительно контрольной группы возрастала активность ферментов гликолиза (ЛДГ), цикла трикарбоновых кислот (СДГ) и дыхательной цепи (НАДН-ДГ). Показатели активности ферментов аэробного метаболизма эндотелиоцитов повышались до уровня таковых при эфирно-кислородном наркозе. Таким образом, в клетках капилляров миокарда наблюдался переход на аэробный путь энергетического обмена.

При электронной микроскопии структура эндотелия через 2 часа постишемического периода приближалась к таковой при эфирно-кислородном наркозе. Наружная мембрана эндотелиоцитов образовывала небольшие выросты в просвет капилляра, в большинстве микрососудов фиксировался активный пиноцитоз. Базальная мембрана была неровной и на некоторых участках истончена.

По данным световой микроскопии отек перикапиллярного пространства в серии с озонированным кардиоплегическим раствором был менее выражен по сравнению с контрольной, в просвете капилляров определялись эритроциты без видимых изменений.

Анализ активности ферментов кардиомиоцитов через 2 часа постишемического периода показал достоверное повышение активности энзимов дыхательной цепи (НАДН-ДГ) и пентозофосфатного шунта (Г-бф-ДГ), что свидетельствовало об активации аэробного метаболизма в кардиомиоцитах.

Активность энзимов функционального элемента миокарда проявлялись в количественном соотношении энергетических субстратов в постишемическом периоде, так в серии с озонированным кардиоплегическим раствором Деринга достоверно повышались концентрации глюкозо-6-фосфата, АТФ, АМФ и креатин фосфата, пирувата относительно контрольной серии.

При электронномикроскопическом исследовании в серии с озонированным раствором Деринга значительно реже определялись конгломераты митохондрий с фрагментированными кристами, не встречались митохондрии с нарушением целостности наружной оболочки, а также фокусы лизиса миофибрилл кардиомиоцитов.

Морфометрические показатели кардиомиоцитов отражали снижение внутриклеточного отека и как следствие этого - уменьшение диаметра клеток относительно контрольного периода исследований.

Таким образом, комплексное изучение состояния миокарда с позиции системного анализа и с привлечением энзимогистохимических, морфологических методов исследования показало, что использование озонированного кардиоплегического раствора на уровне функционального элемента миокарда вызывало изменения, лежащие в пределах компенсаторно-приспособительных реакций, а возникавшие отклонения имели обратимый характер.

Результаты применения озонированного кардиоплегического раствора для защиты миокарда при выключении сердца из кровообращения убедительно показали эффективность избранного направления повышения устойчивости миокарда к ишемии. В работе доказано, что использование озона в составе кардиоплегического раствора на интраоперационном этапе способствует более быстрому и полному восстановлению структуры миокарда после 90 минутной ишемии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Никольский, Александр Викторович, 2010 год

1. Абрамова, Ж. И. Человек и противоокислительные вещества / Ж. И. Абрамова, Г. И. Оксегендлер Л.: Наука, 1985 - 230 с.

2. Автандилов, Г. Г. Медицинская морфометрия: руководство / Г. Г. Автандилов-М.: Медицина, 1990.-384 с.

3. Автандилов, Г. Г. Стереометрическое исследование системы «мышечное волокно-капилляр» сердца человека в функциональном аспекте / Автандилов Г. Г, Гевоядян Т.А. // Арх. анат. 1980. - № 7. - С. 33-37.

4. Адамян, А. А. Кровоостанавливающие свойства газообразного озона / А. А. Адамян, Ю. П. Кашперский, В. А Жуков // Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1995. - С. 13-14.

5. Алехина, С. П. Эффективность озонотерагши при облитерирующем атеросклерозе артерий нижних конечностей: дис. . канд.мед.наук./ Алехина С. П.—.Н.Новгород, 1999.— С. 145.

6. Аносов, И. П. Морфофункциональная перестройка микроциркуляторного русла мышцы у белой крысы в постнатальном онтогенезе: Автореф.дис. .канд.биол.наук.- М.,1987.-19 с.

7. Артюхин, А. А. Озонотерапия хронических уретритов / А. А. Артюхин и др. // Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1995. - С. 4950.

8. Баззаев, Т. В. Озонотерапия гнойных заболеваний легких и плевры / Т. В. Баззаев, С. А. Руделев // Озон и методы эфферентной терапии в медицине: тез. докл. III Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1998. - С. 63.

9. Барышникова, Н. А. //Кровоснабжение, метаболизм и функция органов при реконструктивных операциях / Н. А. Барышникова, Э. М. Коган. Ереван, 1984.-С. 511-513.

10. Белопухов, В. М. Озонотерапия краниалгий / В. М. Белопухов и др. //Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1995. - С. 80-81.

11. Бельков, А. В. Влияние пульсирующего и непульсирующего ИК при протезировании клапанов сердца на тканевой кровоток (клиническое исследование): дис. .канд. мед. наук / Бельков А. В. — Москва, 1986.- 197 с.

12. Беляев, А. Н. Эффективность внутрипортального введения озонированного физиологического раствора при механической желтухе в эксперименте / А. Н. Беляев и др. // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. 2003. - С. 30.

13. Берстон М. Гистохимия ферментов / Пер. с англ. — М.: Мир. — 1965.-464 с.

14. Бобков, Ю. Г. Методические подходы к изысканию новых аутопротекторов, обладающих антигипоксической активностью / Ю. Г. Бобков // Тез. докладов I Всесоюзного симпозиума «Фармакологическая коррекция кислородзависимых состояний». М., 1984. - С. 4-5.

15. Бобков, Ю. Г. Действие озона на энергетические резервы печени / Ю. Г. Бобков, Н. П. Лебкова, В. Л. Зайцев // Озон в биологии и медицине: тез.докл. I Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. -Н. Новгород, 1992. С. 17-18.

16. Богословский, Н. Н. Опыт применения озонотерапии в лечении язвенной болезни / Богословский Н. Н., Кацуба A.M., Багрий И.Н., Хлопотова М.А. //Тез. докл. Юбилейной научно-практической конференции врачей. Нижний Новгород, 1997. - С. 75.

17. Бокерия, Л. А. Эволюция искусственного кровообращения: от идеи до внедрения в практику (1812-1962) / Л. А. Бокерия, С. П. Глянцев, Д. Т. Логинов // Клин, физиол. кровообращения. 2004. — №2. - С. 17-30.

18. Бокерия, Л. А. Система непрерывного повышения качества в кардиохирургическом стационаре: из века XX в век XXI / Л. А. Бокерия., С. П. Глянцев, Е. Б. Милиевская. // Проблемы управления здравоохранением. -2004.-№5. -С. 12-23.

19. Бокерия, Л. А. Т. М. Дарбинян primus inter pares в отечественной анестезиологии и реаниматологии (К 80-летию со дня рождения) / Л.А. Бокерия, С.П. Глянцев // Анналы хирургии. - 2004. - №4. -С. 70-76.

20. Бокерия, Л.А. Очерки истории коронарной хирургии / Л.А. Бокерия., B.C. Работников, С.П. Глянцев, М.М Алшибая. М.: НЦССХ им. А.Н.Бакулева РАМН, 2002.

21. Бокерия, Л. А. Аортокоронарное шунтирование на рабртающем сердце / Л. А. Бокерия, В. М. Авалиани, В. Ю. Мерзляков. -М.: НЦССХ им. А. Н. Бакулева РАМН, 2008.'- 490с.

22. Бойко, Е. Л. Применение озонотерапии в профилактике гнойно-септических осложнений после самопроизвольных прерываний беременности у женщин / Е. Л. Бойко и др. // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. -2003. С. 148.

23. Бойко, Е. Л. Применение озона в лечении женщин после самопроизвольного прерывания беременности ранних сроков / Е. Л. Бойко и др. // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. — 2003. — С. 145.

24. Ботвин, М. А. Применение озона для профилактики воспалительных заболеваний после миомэктомии / М. А. Ботвин и др. // Озон в биологии и медицине: тез.докл. II Всерос. научно—практ. копф. с междунар. участием. — Н. Новгород, 1995. — С. 61.

25. Бояринов, Г. А. Влияние антигипоксантов на обратимость патологических изменений при кровопотере: автореф. дис. . д-ра мед. наук / Бояринов Г. А. — Казань, 1987. — 34 С.'

26. Бояринов, Г. А. Озонотерапия в комплексном лечении простатита / Г. А. Бояринов, С. Б. Житенев, В. В. Гуревич // Озон и методы эфферентной терапии в медицине, приложение. Реаниматология и интенсивная терапия. Анестезиология. 2000. - № 4 — С.83.

27. Бояринов, Г. А. Комплексная озонотерапия при операциях по поводу активного инфекционного эндокардита / Г. А. Бояринов и др. // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. 2003. -С. 158.

28. Бояринов, Г. А. Озонотерапия в комплексном лечении пневмоний у нейрохирургических больных / Г. А. Бояринов, М. Ю. Юрьев, С. Л. Лебедь // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. —2003. — С. 159.

29. Бунятян, A.A. Руководство по кардиоанестезиологии / А.А Бунятян;. под ред. A.A. Бунятяна, H.A. Трековой. М.: Мед. информ. аг-во, 2005. - 688 с.

30. Бураковский, В. И. Осложнения при операциях на открытом сердце/ В И. Бураковский и др. // Основы реаниматологии в кардиохирургии. -М.: Медицина, 1972. — 304 с.

31. Васильев, И. Т. Озонотерапия в неотложной хирургии / И. Т. Васильев и др. // Озон и методы эфферентной терапии в медицине: тез. докл. III Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1998.-С. 60

32. Вегеле, JI. С. Оптимизация лечения хронических гнойных ран при патологии опорно-двигательной системы / JI. С. Вегеле // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. 2003. -С. 196.

33. Векслер, Н.Ю. Применение гипохлорита натрия и озонированного физиологическо-го раствора в комплексной интенсивной терапии у больных инфекционным эндокардитом, дис. . канд.мед.наук/ Векслер Н.Ю. — М., 1998, —С.287.

34. Векслер, Н. Ю. Применение озонотерапии в коррекции эндотоксикоза у больных с осложненными формами острой пневмонии / Н. Ю. Векслер и др. // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. — 2003. — С. 255.

35. Векслер, Н.Ю. Комплексная детоксикация при коррекции хирургических эндотоксикозов /Н.Ю. Векслер, Г.А. Бояринов //Озон в биологии и медицине: материалы 6-й Всерос. науч.-практ. конф. (Н.Новгород, 21-23 сентября). Н.Новгород, 2005. - С. 233-235.

36. Вилков, С. А. Парентеральная озонотерапия в лечении пневмоний у тяжело обожженных / С. А. Вилков и др. // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. — 2003. С. 235.

37. Верхнев, В. А. Сравнительная характеристика бактерицидного действия озонированного физиологического раствора различной концентрации / В. А. Верхнев, М. И. Романова // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. 2003. — С. 18.

38. Вольф, А. Озон в медицине / А. Вольф; пер. с нем. -Гейдельберг: Медицина, 1979. 226 с.

39. Галетти, П. М. Основы и техника экстракорпорального кровообращения / П. М. Галетти, Г. А. . Бричер; пер. с англ. — М.: Медицина, 1966. 236 с.

40. Гиляревский, С. Р. Использование анализа эффективности лечения для принятия клинического решения в кардиологии / С. Р. Гиляревский, В. А. Орлов //Кардиология. 1997. - Т.9. - С. 70-80.

41. Гистология: учебник / под ред. Ю. И. Афанасьева, Н. А. Юриной. М.: Медицина, 2001. - С. 598-607.

42. Главинская, Т. А. Иммунный статус при озонотерапии больных нейродермитом / Т. А. Главинская, О. А. Иванова., В. Д. Комарова // Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. — Н. Новгород, 1995. — С. 85.

43. Глухов, А. А. Опыт применения озона при санациях брюшной полости / А. А. Глухов // Озон и методы эфферентной терапии в медицине: тез. докл. III Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1998.-С. 72.

44. Глухов, А. А. Озоновая санация брюшной полости при лечении гнойного перитонита / А. А. Глухов, И. П. Мошуров, В. П. Глянцев // Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно— практ.конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1995. - С. 35.

45. Глянцев, С.П. Пионер коронарной реваскуляризации в кардиохирургии / С.П. Глянцев, В.М. Седов, В.В. Предвечный // Медицинская газета. 1999. - №67 (1 сентября). - С. 15.— (О проф. В.И. Колесове).

46. Глянцев, С.П. Исторические предпосылки возникновения коронарной хирургии // Современные технологии хирургии ИБС. М.: АИР-АРТ, 2001. - С. 47 - 48.

47. Голованова, С. Ю. Синдром гипервязкости при гестозах и его коррекция медицинским озоном / С. Ю. Голованова и др. // Озон и методы эфферентной терапии в медицине, приложение. Реаниматология и интенсивная терапия. Анестезиология. 2000. - № 4. - С. 102.

48. Головинский И.В. Цит. По Брюхоненко С.С., Чечулину С.И. // Труды научно-химического фармацевтического института. М., 1928. С. 20.

49. Горбунов, С.Н. Применение медицинского озона при интенсивной терапии тяжелой травмы/ Горбунов С.Н. // Матер. 4-го Всерос. съезда анест. и реаним. Москва, 1994. - С. 146.

50. Гречканев, Г. О. Озонотерапия в акушерстве / Г. О. Гречканев, Т. С. Качалина // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. — 2003. С. 112.

51. Гречко, В. Н. Применение комплексной озоно- и фототерапии в хирургии / В. Н. Гречко // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. 2003. - С. 228.

52. Гречко, В. Н. Влияние комплексной озонотерапии на состояние микроциркуляции в области трофических язв у больных с синдромом диабетической стопы / В.Н. Гречко, А.Е. Леонтьев //Озон в биологии и медицине: материалы 6-й Всерос. науч.-практ. конф.

53. H.Новгород, 2005. С. 191-193.

54. Грошев, А. Н. Сферы клинического применения озонотерапии на современном этапе / А. Н. Грошев и др. // Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1995. - С. 48-49.

55. Давыдов, В. В. Содержание креатинфосфата при инфаркте миокарда у крыс, подвергнутых действию эмоционально-болевого стресса / В. В. Давыдов, В. П. Твердохлеб, В. С. Якушев // Пат. физиол. 1983. - №1.-С. 33-36.

56. Дементьева, И. И. Тромбоцитарное звено гемостаза при кардиохирургических операциях: пособие для врачей / И. И. Дементьева, М. А. Чарная, Ю. А. Морозов, В. Г. Гладышева. М., 2005. - 34 с.

57. Долина, О. А. Влияние общей анестезии и ее компонентов на свободно-радикальные процессы/ O.A. Долина, Ф.С. Галлеев // Анестезиология и реаниматология.— №5. — 2007 -С.71-75.

58. Дудов, П. Р. Применение перфторана после операций с искусственным кровообращением / П.Р. Дудов, С.Л. Горожанин, В.П. Воробьев, Е.В. Силинг //9-я сессия НЦССХ им. А.Н.Бакулева РАМН.- М., 2005 (15-17 мая). Т. 6. - № 3. - С. 109. ;

59. Душков, В. А. Озонотерапия как способ повышения качества жизни больных на программном гемодиализе. Поиск критериев эффективности озонотерапии / В. А. Душков и др. // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. 2003. - С. 274.

60. Ефименко, Н. А. Озонотерапия в хирургической клинике /H.A. Ефименко, Н.Е. Чернеховская М.: Рос. мед. академия последипл. образования, 2001. - 160 с.

61. Жданов, Г. П. Фармакохолодовая кардиоплегия при операциях на открытом сердце в условиях бесперфузионной гипотермии: дис. . канд. мед. наук / Жданов Г. П. Новосибирск, 2001. —181 с.

62. Журавлева, Т. Б. Методические правила количественной гистоэнзимологии/ Журавлева Т. Б., Клечиков В.З., Прочуханова P.A. // Архив патологии. 1972. - № 1. - С. 84 - 88.

63. Загвозкин, В. Н. К вопросу о взаимосвязи гемодинамики, транспорта и потребления кислорода во время искусственного кровообращения. Дис. Канд. Мед.паук.-М.- 1973,- 159с.

64. Зайцев, В. Я. Озонидотерапия / В. Я. Зайцев, С. Д. Разумовский // Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1998. - С. 11-12.

65. Зильбер, А. П. Клиническая физиология в анестезиологии и реаниматологии / А. П. Зильбер. М.: Медицина, 1984. - 480 с.

66. Змызгова, А. В. Клинические аспекты озонотерапии /A.B. Змызгова, В. А. Максимов Москва, 2003. — 287 с.

67. Зуев, В. М. Значение озонотерапии в комплексном лечении невынашивания беременности / В. М. Зуев и др. // Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1995. - С. 64.

68. Иванова, Т. Н. Некоторые стороны энергетического обмена крыс в условиях повышенного парциального давления кислорода/ ванова Т. Н., Рубель JI.H. // Эволюц. биохим. и физиол. 1965. - Т. 5. - С. 279 -287.

69. Ивашкин, В. Т. Всё ли мы знаем о лечебных возможностях антиоксидантов? / В. Т. Ивашкин, Н. Ю. Ивашкина, Ю. О. Шульпекова // РМЖ. 2000. - Т. 8. - № 4. - С. 43-45.

70. Иост, X. Физиология клетки / X. Иост; пер. с англ. М.: Медицина, 1975. - 864 с.

71. Казначеев, В. П. Клиническая патология транскапиллярного обмена / В. П. Казначеев, А. А. Дзизинский. М.: Медицина, 1975. - 205 с.

72. Караганов, Я. JI. Микроангиология / Я. JI. Караганов, Н. В. Кердиваренко, В. Н. Левин. Кишинев: Штиинца, 1982. - 247 с.

73. Караськов, А. М. Влияние длительности искусственного кровообращения на метаболические реакции/ A.M. Караськов и др. //V Всерос. съезд сердечно-сосудистых хирургов.— Новосибирск, 1999.— С.197.

74. Качалина, Т. С. Влияние озонотерапии на состояние свертывающей системы крови больных с ОПГ-гестозами / Т. С. Качалина и др. // Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. -Н. Новгород, 1995. С. 66.

75. Кендыш, И. Н. Регуляция углеводного обмена / И. Н. Кендыш.- М.: Медицина, 1985. 272 с.

76. Киселевич, В. Е. Результаты применения озона в комплексе анестезиолого-реанимационного пособия у кардиохирургических больных: автореф. дис. . докт. мед. наук /Киселевич Валентин Евгеньевич. -Н.Новгород, 2006. 40 с.

77. Козлов, В. И. Некоторые морфологические особенности эндотелия сосудов микроциркуляторного русла / В. И. Козлов // Арх. анат.- 1971. -№ 5. С. 45-56.

78. Козлов, В. И. Развитие системы микроциркуляции в онтогенезе / В. И. Козлов, С. А. Гурова // Успехи соврем, биол. 1989. - № 3 - С. 460475.

79. Козлов, И.А. Раннее прекращение ИВЛ (экстубация трахеи в операционной) у больных, оперированных с искусственным кровообращением / И.А Козлов, С.М. Маркин, И.Е. Пиляева, A.B. Алферов //Анест. и реаниматол.— 1995.— No 2.— с. 16-19.

80. Колесова, О. Е. Озонотерапия разлитого перитонита / О. Е. Колесова и др. // Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1995. - С. 32.

81. Колесова, О. Е. Механизмы стимуляции секреции инсулина озоном / О. Е. Колесова, Т. М. Фролова, Т. Ю. Уханова //Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием.- Н. Новгород, 1995. С. 16-17.

82. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии. М.: Высшая школа, 1980. - 272 с.

83. Конторщикова, К. Н. Биохимические основы эффективности озонотерапии / К. Н. Конторщикова // Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1995.-С. 8.

84. Кораблев, М. В. Противогипоксические средства / М. В. Кораблев, П. И. Лукиенко. — Минск: Беларусь, 1976. — 196 с.

85. Королев, Б. А. Метаболизм и ультраструктура миокарда при защите сердца от ишемии озонированным кардиоплегическим раствором / Б. А. Королев и др. // Грудная хирургия. 1983. № 5. - С. 27 - 30.

86. Королев, Б. А. Фармакологическая коррекция центрального и периферического кровообращения при гипоксии / Б. А. Королев, И. Ф. Матюшин, Г. А. Бояринов // Актуальные вопросы фармакологии кровообращения: сб. науч. тр. конф. Горький, 1980. — С. 29.

87. Королев, Б. А. Первый опыт применения отечественного антигипоксического препарата гутимина для защиты миокарда от гипоксии в кардиохирургии / Б. А. Королев и др. // Тез. докл. II Всесоюзн. конф. сердечно-сосудистых хирургов. М., 1978. - С. 121-122.

88. Короткина, Р. Н. Влияние мексидола на мембрану тромбоцита при проведении гипотермической перфузии /Р.Н. Короткина, В.Г. Руднева,

89. A.Н. Коростелев, A.B. Ситников, A.B. Куприн, Л.С. Смирнов, A.A. Карелин //Тез. докл. 5-го Всерос. съезда по экстракорпоральным технологиям (25-28 мая). М., 2006. - С. 75-76.

90. Костина, О. В. Корригирующее действие озонированного физиологического раствора на уровень глюкозы в крови обожженных / О.

91. B. Костина и др. // Озон и методы эфферентной терапии в медицине, приложение. Реаниматология и интенсивная терапия. Анестезиология. -2000.-№4.-С. 225.

92. Кочетыгов, Н. И. Гемодинамика, артериовенозные анастомозы и кислородный режим организма при тяжелой кровопотере и ее инфузионной терапии / Н. И. Кочетыгов, П. К. Поздняков // Патол. физиология и эксперим. терапия. — 1981. № 4. - С. 32 - 37.

93. Кочетыгов, Н. И. Системная гемодинамика, микроциркуляция и транспорт кислорода при ожоговом шоке и его комплексном лечении / Н. И. Кочетыгов и др. // Пробл. гематологии. — 1983. — № 3. — С. 39 — 42.

94. Кравцов, А. А. Морфологические изменения почек при обструктивной нефропатии, обусловленные эндогенной интоксикацией: дис.канд. мед. наук / Кравцов А. А. Волгоград, 2006. - 132 с.

95. Криваткина, Е. В. Озонотерапия в практике врача-косметолога / Е. В. Криваткина, С. JT. Криваткин // Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. — Н. Новгород, 1995.-С. 89.

96. Криволуцкая, Н. П. Применение озонотерапии в гнойной хирургии / Н. П. Криволуцкая, В. В. Дудка // Озон и методы эфферентной терапии в медицине: тез. докл. III Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. — Н. Новгород, 1998. — С. 76.

97. Кричевская, А. А. Биохимические механизмы кислородной интоксикации / А. А. Кричевская, А. И. Лукаш, 3. Г. Броновицкая. -Ростов: Изд-во Ростовск. ун-та, 1980. 116 с.

98. Крог А. Анатомия и физиология капилляров. М.: Изд-во Мосздравотдела, 1927. — 85 с.

99. Кузьмичев, А. И. Опыт применения низких концентраций озона в дерматологии / А. И. Кузьмичев и др. // Озон и методы эфферентной терапии в медицине: тез. докл. III Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. — Н. Новгород, 1998. — С. 129-130.

100. Куприянов, В. В. Микроциркуляторное русло / В. В. Куприянов, Я. JI. Караганов, В. И. Козлов. М.: Медицина, 1975. - 214 с.

101. Куприянов, В. В. Изучение микроциркуляции в эксперименте и клинике: научный обзор / В. В. Куприянов, В. Н. Колмыкова. М., 1979. - С.10-15.

102. Лазорева, Е. Б. и соавт., Спиридонова Т. Г., Васина Т.А., Смирнов С. В. // Озон в биологии и медицине: тез. Докл. II Всерос. Научно-практю конфю с междунарю участиемю. Н.Новгород, 1995,- С.9.

103. Лебедева, Р.Н., Аббакумов В.В., Третьякова Е.С., Свирщевский Е.Б. // Анест. и реаниматол. 1984. - № 5. - С. 30 - 38.

104. Лебкова, Н. П. Ультраструктурные критерии детоксикационного действия озонотерапии / Н. П. Лебкова, В. Я. Зайцев, Л. Н. Зейтленок // Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1995. - С. 19.

105. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия / Пер с англ. М.: Мир, 1969. - 646 с.

106. Локшин, Л.С. Минимизированный экстракорпоральный контур (МЕСС) при операциях аорто-коронарного шунтирования /Л.С. Локшин, Б.В.Шабалкин, А.Г.Зацепина, А.Г.Яворовский, М.В.Задорожный,

107. М.А.Чарная, Ю.А.Морозов //Материалы 5-го Всерос. съезда по экстракорпоральным технологиям. М., 2006 (25-28 мая). - С. 21-23

108. Лубяко, A.A. Противоишемическая защита миокарда кардиоплегическими растворами: дис. . канд.биол.наук / Лубяко A.A. — М., 1986.— 189 с.

109. Луппа X. Основы гистохимии./ Пер. с англ. М.: Мир, 1980.344 с.

110. Макова, 3. С. Озонотерапия и иммунный статус у больных с анастомозитами после резекции желудка / 3. С. Макова, Н. А. Мизуров, В. Н. Григорьев //Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. — 2003. — С. 165

111. Максимов, В. И. Озон в комплексном лечении язвенной болезни двенадцатиперстной кишки / В. И. Максимов и др. // Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно—практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1995. - С.76.

112. Максютова, Л. Ф. Комбинированная иммунотерапия больных с ожоговой травмой / Л. Ф. Максютова и др. // Озон и методы эфферентной терапии в медицине, приложение. Реаниматология и интенсивная терапия. Анестезиология. 2000. -№4 - С. 131.

113. Мамыкина, В. М. Озонотерапия в клинике инфекционных заболеваний / В. М. Мамыкина и др. // Озон и методы эфферентной терапии в медицине, приложение. Реаниматология и интенсивная терапия. Анестезиология. 2000. - № 4 - С. 112.

114. Маргулис, М. С. Искусственное кровообращение и разработка методов, обеспечивающих адекватность при операциях на сердце. Экспериментально-клиническое исследование: дис. . д-ра мед. наук / Маргулис М. С. М., 1965. - 326 с.

115. Маркин, С.М. Ранняя активизация больных после операций с искусственным кровообращением: дис. . канд. мед. наук / Маркин С.М.—М., 1997.—С.128.

116. Масленников, О.В. Озонотерапия. Внутренние болезни: пособие /О.В. Масленников, К.Н Конторщикова.— Н.Новгород: Изд-во НГМА, 1999. — 55 с.

117. Медведев, А. П. Изменение функций печени и почек при протезировании митрального клапана и осложненном течении послеоперационного периода: дис. . д-ра мед. наук / Медведев А. П. -М., 1981.-365 с.

118. Медведев, А. П. Применение озона в комплексном лечении инфекционного эндокардита / А. П. Медведев и др. // Озон и методы эфферентной терапии в медицине, приложение. Реаниматология и интенсивная терапия. Анестезиология. 2000. - №4 — С. 51.

119. Меркурьева, Р. В. Биохимическое исследование ферментных систем эндоплазматической сети, лизосом, митохондрий и цитозоля при экспериментальном воздействии озоном / Р. В. Меркурьева и др. М., 1981.-81 с.

120. Мусил, Я. Основы биохимии патологических процессов / Я. Мусил; пер. с чешек. М.: Медицина, 1985. - 432 с.

121. Мухина, И. В. Кардиотропное действие озонированного перфузионного раствора / И. В Мухина и др. // Озон и методы эфферентной терапии в медицине: тез. докл. III Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1998. — С. 23.

122. Мчедмешвили, Г. И. Микроциркуляция крови / Г. И. Мчедмешвили М.: Медицина, 1989.- С. 4—5.

123. Непомнящих, JI.M. Регенераторно-пластическаянедостаточность сердца: морфологические основы и молекулярные механизмы / Непомнящих JI.M., Лушникова Е.Л., Семенов Д.Е. М.: Издательство РАМН, 2003.-255 с.

124. Несветов, А. М. Послеоперационная печеночная недостаточность / А. М. Несветов // Структурно-функциональные основы патологических процессов. М., 1967. - С. 37-38.

125. Никольский, В. О. Влияние озона на морфометаболизм функционального элемента органов иммунитета при длительном искусственном кровообращении / В. О. Никольский и др. // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. 2003. - С. 9.

126. Виноградова, В.А. Линьков, А.Н. Котин, Ю.А. Шнейдер., В.Н. Головин, Э.А. Санникова, A.B. Наймушин, A.B. Петш, А.Г. Федотов. — Л., 1990. — 21 с.

127. Нурмагомаев, С. С. Коррекция гипоксии инозином при длительном искусственном кровообращении: автореф. дис. . канд. мед. наук / Нурмагомаев С. С. М., 1984. - 24 с.

128. Оркин, Ф. К. Осложнения при анестезии: в 2 т. / Ф. К. Оркин, Л. X. Куперман; пер. с англ. М.: Медицина, 1985. — Т. 2. — 416 с.

129. Осипов, В. П. Основы искусственного кровообращения / В. П. Осипов. М.: Медицина, 1976. - 320 с.

130. Островская, Р. У. Влияние оксибутирата натрия на содержание молочной и пировиноградной кислот в условиях гипоксии / Р. У. Островская, В. Ю. Островский, Е. А. Геселевич // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1969. - № 1. - С. 36-38.

131. Перетягин, С. П. О многофакторном механизме лечебного действия озона / С. П. Перетягин // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. — 2003. — С. 6.

132. Перетягин, С. П. Патофизиологическое обоснование озонотерапии постгеморрагического периода: автореф. дис. . д-ра мед. наук / Перетягин С. П. Казань. - 1991. - 30 с.

133. Перетягин, С. П. Экспериментальное обоснование низкопоточной озоно—кислородной терапии эндотоксикозов / С. П. Перетягин // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. — 2003. С. 34.

134. Петровский, Б. В. Основы гипербарической оксигенации / Б. В. Петровский, С. Н. Ефуни. М.: Медицина, 1976. — 344 с.

135. Пирс Э. Гистохимия теоретическая и прикладная. М.: Издательство иностранной литературы, 1962. - 426 с.

136. Покровский, А. А. Биохимические методы исследования в клинике / А. А. Покровский. М.: Медицина, 1969. - 389 с.

137. Потехина, Ю. П. Клинико-экспериментальное обоснование применения озонотерапии у больных компрессионно—ишемическими невропатиями: дис. . канд. мед. наук / Потехина. Ю. П. Н. Новгород, 1997.- 197 с.

138. Пупышев, А. Б. Сравнение влияния острой гипоксии на лизосомальный аппарат печени крыс на фоне адаптации к гипоксии и введения гутимина / А. Б. Пупышев, А.- Е. Малыгин, О. Р. Грек // Фармакол. и токсикол. 1979. -№ 3. - С. 294-298.

139. Пыргарь, Б. П. Применение озонированного физиологического раствора в комплексной интенсивной терапии септических состояний / Б. П. Пыргарь, В. И. Таку // Нижегородский медицинский журнал. Озоиотерапия, приложение. — 2003. —С. 188.

140. Разумовский, С. Д. Стабильность озона и озонидов в растворах и пути ее повышения / С. Д. Разумовский // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. — 2003. — С. 7.

141. Разумовский, С. Д. Озон и его реакции с органическими соединениями / С. Д. Разумовский, Г. Е. Зайков. — М.: Наука, 1974. 312 с.

142. Разумовский, С. Д. Динамическое моделирование физико-химических процессов в базовых манипуляциях озонотерапии / С. Д. Разумовский, В. Я. Зайцев // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. 2003. - С. 8.

143. Разумовский, С. Д. Растворы озона в субстратзамещающих перфторорганических жидкостях и их свойства / С. Д. Разумовский, В. В. Подмастерьев // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. — 2003. — С. 7.

144. Руднов, В. А. Озонированные растворы кристаллоидов в комплексе интенсивной терапии больных с сепсисом и септическим шоком / Руднов В. А., Идов И.Э., Николаев Э.К. //Мат. 4-го Всерос. съезда анест. и реаним. Москва, 1994.- С. 86-87.

145. Семенов, С. В. Озонотерапия в интенсивной терапии разлитого перитонита / С. В. Семенов, И. П. Казаков // Нижегородский медицинский журнал. Озонотерапия, приложение. — 2003. — С. 227.

146. Симбирцев, С. А. Изменения венозного давления и объема крови в организме при искусственном кровообращении (экспериментальное исследование): дис. . канд. мед. наук / Симбирцев С. А. Л., 1966.- 181 с.

147. Снопова, Л.Б. Кардиогемодинамика, метаболизм и ультраструктура миокарда при фармакологической и гипотермической защите сердца от ишемии. Автореферат дис. Канд. Мед. Наук. Казань.-1991.-23с.

148. Спиридонова, Т. Г. Метод локальной озоно—кислородной терапии ожогов конечностей / Т. Г. Спиридонова, Л. И. Герасимова // Озон в биологии и медицине: тез. докл. II Всерос. научно-практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород, 1995. - С. 47-48.

149. Стручков, П. В. Об использовании озонотерапии при лечении заболеваний органов дыхания / П. В. Стручков и др. // Озон и методы эфферентной терапии в медицине, приложение. Реаниматология и интенсивная терапия. Анестезиология. — 2000. — № 4 — С. 60.

150. Ступин, И. В. Патогенез, диагностика и фармакокоррекция гипоксии при операциях в условиях длительного искусственного кровообращения / И. В. Ступин, А. И. Новокшонов, А. И. Малашенков // Грудная хирургия. 1987. - № 5. - С. 8-14.

151. Полянская, Л. И. Микроциркуляция и способы её коррекции / Полянская Л. И. М.: Медицина, 2003. - С.242.

152. Тарасенко, В. С. Влияние плазмафереза на перекисное окисление липидов при панкреанекрозе / В. С. Тарасенко, В. Л. Аверкиев, Д. Б. Демин // Озон и методы эфферентной терапии в медицине,