Влияние озонированного физиологического раствора на вирулентность синегнойных бактерий (экспериментальное исследование) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Кувакина, Нина Аркадьевна

• Кувакина, Нина Аркадьевна
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кувакина, Нина Аркадьевна

ВВЕДЕНИЕ---------------------------------------------.

ГЛАВА [ ПРЕДПОСЫЛКИ ПРИМЕНЕНИЯ ОЗОНА ПРИ СИНЕГНОЙНОЙ

ИНФЕКЦИИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).—t. 1 Современные особенности и пфешт ори ожогах, Сннсгтойнм икфощия..

1.2. Эпидемиологическое значение бактерий родя Pseudomomu , (

1.3. Факторы латогснностн бактерий рода Pse-udotttonas.

1 4. Сонрсмснмис методы tepamtH синлиойной инфекции

ГЛАВА И. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ-.-.„

ГЛАВА Ш ВЛ НЯ1II IE ОЗОН!IPOBAI 1НОГО Ф113НОЛОГИЧ ЕСКОГО РАСТВОРА НА ПАТОГЕННЫЕ СВОЙСТВА СИИЕГНОЙНЫХ БАКТЕРИЙ.

3.1. Биологические свойства с ииег ионных бактерий

3.2. Исследование ростовых свойств госпитальных статной пых бшкриЛ после воздействия ОФР.

3.3. Исследование адгемнных свойств гоепкталытх снисгнойиых бактерий в уежмох модЛсшн на ни* (ион про ванною фииюяогичсекого раствора -.-,.-—.

3.4. 11сс ледоваиие плаэмнлиого соспшл «пипийиш бактерий.

3.5. Исследование спектров белков наружной мембраны н мкклеточных бедид.-.

3.6. Фаго11НтабелД|Носп> госпитальных спнепюйиих биктернб

ГЛАВА IV ВЛИЯНИЕ ОЗОНИРОВАННОГО ФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО РАСТВОРА НА ТЕЧЕНИЕ СИНЕГНОЙНОЙ ИНФЕКЦИИ У

ОБОЖЖЕННЫХ ЖИВОТНЫХ7S

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние озонированного физиологического раствора на вирулентность синегнойных бактерий (экспериментальное исследование)»

Проблема гнойной инфекции u современной комбустиолоши иисп особую значимость Ожоговые стационары традиционно относят К ЧИСЛУ медицинских учреждений, где высока вероятность возникновения ннутри больничных инфекций В настоящее время. несмотря На наличие огромного арсенала антимикробных препаратов, г оси шальная инфекция остается серье той клинической н экономической проблемой, намного осложняющей течение ожоговой болезни, увеличивающей длительность стационарного лечении и повышающей число неблагоприятных исходов.

Наиболее грозным инфекционным осложнением у пациентов с ожогами. особенно обширными и глубокими, считается сепсис Ожоговый сепсис следует рассматривать как гснсролйКМНйОе осложнение, pumuKCti на фоне термической травмы <Алексеев A.A., Крутиков М.Г., Еронкнна А.Г.,1998) Ссрьсщую опасность представляет ранни!) сепсис, характеризующийся молниеносным развитием. тяжелим течением и крайне высокой летальностью (Вазнна U P. it соавт. 1993, 1995, 2000) По данным ННИИТО (Вазннл IIP н соавт., 2002К в течение последнего десятилетия 20 вена основной Причиной смерти тяжелообоскжвннпых, У которых термическая травма с остров ож лап ас ь развитием тяжелого и крайне тяжелого шока, остается генерализованная инфекция, (ff» случаев которой составляет ранний сепсис Многие авторы указывают на то, что сепсис ранних периодов ожоговой болезни итывжтся, как правило, грамотрнщпелыюй микрофлорой и наиболее часто еннегиойиой палочкой <Алексеев А.А-. 1993. Ватина И Р н соавт, 1993,1995,2000. Пыласва СЛ., 1986; Gang R е1 al, 1999)

Устойчивость еннегнойной палочки во внешней среде, непритязательность к щи ¡ui ню, природная резистентность к антибактериальным препаратам определяют вероятность широкого распространения ее в больничной среде it формирования госпитальных штаммов, что превращает ожоговый стационар е "эпидемиологический очаг" еннегнойной ннфешин

Колонизации ожоговой мкрхшш иисокомфулснтпыын ГОСПКПШ-ними штаммами синсгнойных бактерий с множественной лекаретпинюн ус-hhI'iiiiuvii-hi к aimiLkiKic|>)iû-'iLiiuM препаратам л антисептикам может происходить в самые ранние сроки после гримы Вцнжепш иммуиоеупрсесня у тяжелообожженных способствует активизации ннфекцмн и быстрой ее ге-нералнншш,

В связи с этим, госпитальная сннегнойная инфекция преде га аляст еерь-сшук» лечебную il ж идсыимогнческуда проблему

Такая ситуация требует агплиюго поиска эффективных средств и «с-годов борьбы с госпитальной микрофлорой в клинике термической трапмы

0 последние годы разрабатываются и внедряются новые технологии лечения ибо-жжениих, способные подавлять афсеснтихп, н уменьшать вирулентность госпитальной микрофлоры. По данным яикркурн, w послед-мне годы накоплен большой теоретический и практический материал, свиле-гсльсщукиний о положительных эффектах метола оэонотсрапин в комплексном лечении ряля заболеваний Этот hé гол 1шшсл боя« широкое применение при терапии гнойно-се птнчссии осложнений в хирургии, н в частности, о комбуетпологи и, благодаря не только бактерицидному действию озона, но и за счет его способности активизировать различные системы жинкдеятелыю-ста организма. Вопрос о целесообразности цепольюиаиня озона и озонированных инфузнониых растворов при термической травме отражен в публикациях последних лет

В частности, при внутривенных иифузнях озонированною фншо.лнп-ческого раствора с целью лечения ожоювой баюм был выявлен детоксика-иноиный эффект (Бслрннов ГЛ. и солвт., 1998: Костина O.S. с солвг., 1999). нммуиоыодулируюищЛ эффект (Верхнее В Л и солвт , 1999). отмечалась коррекция мнкроцнркуляцпн, гемореояогнк и гамокоюиитрвини при ожоговом шоке {Мнрошин СИ и coairr. 1995). Ряд алторол е успехом неполное»-ли бактерицидные лозы оэонн ро вон пых pACTMpOt н пмообр* inoro оэоиа как для местного лечения ожоговых ран (Гречко EÏ.II,, 1999; Спиридонова Tí',.

1994}, так н для комплексной ошптерим ранены* нифяшЙ, включающей нну грнвснныс ннфузин омиирояаниого физиологического раствора, обкалывание piUI lï'J lui (Ж moi ОрОЛНОЙ ППОЮЙ СМеСЬЮ, ПрОМЫВОНИС ран ОЗОНИрОООН-нымн растворами антисептиков н орошение ран окиюкислородной смесью (Перстягин С П. н соанг, 2003г.). Применяются различные концентрации озона и ратные временные экспозиции

До настоящего времени не правил ил ось исследований по влиянию не бактерицидных концентраций озона в озонированном фи »политическом растворе, применяемы* для парентеральной оэоиотеропии нщфекимопных осложнений при ожоговой болезни, из патогенные свойства гемокультур высоковирулентной госпитальной микрофлоры, a также на развитие н течение нифекщгрщн»!о процесса. Это послужило основой для выполнения работы, целью которой стало определение действия оммироаоимосо фнцюяогнчееко-го раствора на патогенные свойства Pseudomonas aeruginosa н опенка влияния нпренгеральной омиотерапни на течение синсгнойной ннфекннн я ранние сроки после термической травмы. Были поставлены следу win не задачи:

1. Изучить влияние озонированного физиологического раствора на ростовые слоиста снисгнойных бактерий.

2. Определил, действие озонированного физиологического распора ил ряд факторов ютогсиностн аикптйпм* бактерий

3. Исследовать действие озонированного физиологического раствора на фаюцигайелыюсти еннепюйных бактерий.

4. Определи», влияние системною воздействия озонированного фн 'политического раствора на течение скнелюИпоЙ инфекции в жеперименте на животные с ожогом

Работа выполнялась на Gate ФГУ чгННИИТО Ростдрава» в Российском ожоговом центре под руководством д м.н. профессора С П. Перетяни« и отделе бактериологии, юглшкмом * м.и. с,не- СИ, Пыл веной Исследоваmit jio onpeatneamo miwwgiiw u 6aimuH npo+nJwfi faurcpuil numumeuu coftHcciHt» c corpyjBiHKtMir rpynau reHOCidetcMaTitKii .ntfwpnTopH» uo.itrKyiiiip-iio-reHCTHiecHX McitvtoB luuîopn » imit»eiaiitoiuiJdMii uîiii.iL-funjmMii H LO-TpyjMHKaMW JinSopOTOpmi Miurpo6i»oJKirmi n jMmecfMut ftKginHl <W"yH «HHI1H3M hh. Ak.ui'mmkj II II lLioxHHoii» PocuoipcSiLajîopa. pa&tta hb.ihimc« i[>jiûi mchtom ttouiuotchoft kmu HHHHTO «Boccratio-BirTCJiiiHoc h pcïonc-ipyKTHiiniK JieteiUK THBTCflux TcpMH'icctiiix aapfDKHHfii» uaii^ip 001- ai. AOfûBop № 025-027.003 llay'mau U0I1H MIB il (MllIIIMlKril. ■WùlYHCIIIlUK pwy.lbTBTO» vctbhpkicho mhiuim OTOfnfponaMiKn'0 i^ihhojionhkkoro pacTBopa puiiu KOHUctrrpamiit tia ituhTapu naiorcHuocni rociurraiiuiux CMterifotiHUX fiant c-pllfl B mkikphmwm m buab.1C1IO CHHXCICHC № IlAietHIlHOClit, poctobofl CIIOCihV noctii. yMflMMewHe <|iarommi6e.itb»ioetii. nojîy>«hw iwrawc jminibH: 06 iriMene-hhh ilib3mii4>ioro coctbbj urrammon rocmnuuiux ciiiknwhiim.x cakil-phill & ÛTBCT Ha itcraTiLBHOc iicileTBHC osoHa

3kcnq}]imcmtan:hho oôochuiwiiij bcumo*hocti. napeincpomiiioro itcno;i i»iob3-hiih 03ûMit|>0bahh(H"o pacrsopa aia chiuccihim MtpyiKKTHCictH ctowiioimiax 6oKKpnft h caep*n«ntiii potMtnu mii^citnmi y ïkhbcitiimx c oxoro«.

IIpaKIH'ICCKDC UMItHHf Jlu.iy-jL'iinije jaHHhic o chidkchiih Biipy.-mmujx e «oite i h roctiiLiajiJ.in.ix tu-■■ci Hûfniux SaKicpiiil noj bjuishhcm oiomtpoiUHiwro if'Hiaia.'ïorH'ieckoru pat-inopu worjt (m>cijh£MTto ocnobanitcm m» bkjikiiehhji cuomrtcpamm b komiuicxc Mcp no npa^HJiaKTiiKC h amchmio 1 c m qpm hkïboii h oii cmicnioiinolt lUHjieiimtH Ha paHHiix cTajiux oKoroflo« 60.1mm.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Кувакина, Нина Аркадьевна

ВЫВОДЫ

1 Озонированный фняшнгочюаЯ раствор в условиях in vitro угнетает ростовые свойства госпитальных сниегиойиых бактерии Наибольшие изменения определяются в ЛЛГ-фазе и выражаются в удлинении се времени на IJ0 ч-2.30 ч.

2 Озонированный физиологический раствор снижает адтезнвность и повышает фшззиитобелыюсть госпитальных ешкпюйиых бактерий, ио не ока* зывает влияния на спектры белков наружной мембраны и внеклеточных белков Степень выраженности обнаруженных изменений пропорциональна копией грации owiin в озонированном физиологическом растворе Миксн-мольное влияние на факторы патогениостн еннепюйных бактерий оказывает озонированный физиологический раствор с кончен грацией озона 1000 мкг/л.

3. Воздействие ira госпитальные шгаммы Pseudontonas aeruginoui озона, используемого в пиле озонированного физиологического раствора, сопровождается фенотшшческими изменениями, приводящими к снижению их вирулентны* свойств

4. Выявленное в экспериментах от VÍtfO УМЯНЧОНЮ количества КОний плазмнд у одной трети штаммов свидетельствует о негативном влиянии озонированного физиологического раствора на внсхромосомныс генетические элементы иссвдомонад - R-плазмзиы

5. Выявлено, что госпитальные сюктиойиые бактерии, подвергнутые прямому действию озонированного физиологического раствора, теряют способность противостоять фагоцитозу, индекс завершенности фагоцитоза возрастает в со тин раз. а парентеральное введение озонированного филологического раствора животным с термической травмой значительно стимулирует фагоцитарную активность нейтрофнлов крови.

6. Введение экспериментальным животным с ожогом и еиисгэюЙноН инфекцией озонированного физиологическою раствора с концентрацией «юна

1000 миг л ограничивает днссныинащпа возбудителя, что свидетельствует о мании развитии инфекции.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящее время. несмотря на наличие 01р<шног0 арсенала антимикробны \ препаратов, ПХВКШЫИИ инфекция остается серьезной клиттеекой и экономической проблемой, намного осложняющей течение ожоговой болели!, увеличивающей длительность стационарного лечения и повышающей чнело неблагоприятных исходов* Аэолов В В и соаяг., 2004. Апсксеев А.А, и соавт, 1998; Ванша И.Р.и соавт., 2ООО. Крутико* М.Г. 2005. Воик1ш1 Ь е а , 1995; СюПт Л' О ев, 1993; ОауоиЬ 1995;СгеспГн:1<1 Е е.а.ч 1997; ек-жуаМ еа .199Н)

Ожоговая рана в значительно большей степени подвержена ннфекцин, чем раны при других видах травм и зачастую она станется источником ни-вянгвной т лгрп,' н г кшлн н о и мнфекнмн Серьезную опасность представляет сепсис ранних периодов ожоговой болезни, наиболее часто вызываемый сн-негнойной палочкой, характеризующийся молниеносным развитием, тяжелым течением и крайне высокой летальностью (Алексеев А Д , 1993; Ваши» И Р н соавт., 1995, 2000, Оал£ Я. « а!, 1999} Г1о данным ННИИТО (Вазина И Р, и соовт,. 2002), в течение последнего десятилетия основной причиной смерти тяжелообожженниых. у которых термическая травма сопровождалась развитием тяжелого и крайне тяжелено шока, остается генерализованная инфекция, а случаев которой составляет ранний сепсис

Устойчивость сниегиойиой палочки во внешней среде. непр<ггязатель-носп. к питанию, наличие мощных факторов вирулс»гтности, природная резистентность к антибактериальным препаратам определяют широту распространения се в больничной среде и формирования госпитальных штаммом, что превращает ожоювый стационар в "эпидемиологический очаг" еннег* 1юйиой инфекции {Аюлоа В В. и соавт. 1996; Рулнов В.А. 2002;Сндоренко С В., 2003; КотоЬГе 0,0, еа. 2003; Ы Т.г.са , 2003) Очевидная нерешезт-ностъ проблемы борьбы с госпитальной еннегиойиой инфекцией с помощью хнмнотерапентпчсских препаратов побуждает к попеку других методов и средств

В носледиие ГОДЫ разрабатываются и внедряют« новые технологии лечения обожженных, способные подавлять агрессивность и уменьшать вирулентность госпитальной микрофлоры В этом шине возрастает интерес к озоиотерапзпз Обладая высоким окислительным потенциалом, озон проявляет бактерицидные, вирииидные. фунпшнлные свойства Технология системного использования о юна в растяоренном визе с ПОМОЩЬЮ носителя ■ фпно-логического раствора существенно расширяет спектр его лечебных возможностей за с><ет оптимизации нарушенного кислородного гомсостаза организма, что позволяет использовать метол не только для местного лечения ожоговых ран, но и для комплексной крапин ожоговой болонн и ее осложнений, втом числе иифекшюнных (Бокрииов ГА. и еоавт.1998; Верхнее В А. и соаят.,1999; Вилков С.А. и соавт., 2004; Гречко В,И.1999; Костина О.В. с со-авт. 1999. Мнрошии С И н соавт., 1996;Носенко В.М., 2004; Персгятмн С П. и соавт., 2003, Спиридонова Т.Г., 1994).

Однако, микробиологические аспекты использования опп остаются малоизученнымн и по-прежнему касаются лшпь оценки бактерицидного действия озонированных растворов или озозго-воздушной смеси при местном лечении ожоговых ран До настоящего времени не проводилось исследований по влиянию иебактсрицндных концентраций озона в озонированном физиологическом растворе (ОФР). применяемых для паретгтершгьной озоиоте-рапни. на патогенные свойства гемокультур высоковирулентной госпитальной микрофлоры, а также на развитие и течение инфекцноино!о процесса

Цель исследования: определение действия озонированного физиологического раствора на патогенные свойства Pseudomonas aeruginosa и оценка влияния пярезгтерольной озоиотерапин на течение сннсгнойноН инфекции в ранние сроки после термической травмы,

Залами исследовании:

I Изучи i к кличи ne озонированного фн июлопсчоедоо раствора na ростовые свойства синегнойных бактерий

2. Определить действие озонированного физиологическою раствора на ряд факторов пакнеилоези еннетиойных бактерий.

3. Исследовать действие озонированного физиологического раствора на фагоцитабельность синегнойных бактерий.

4. Определить влияние системного BOUeftCTMU оммрииюгоСинологического раствора на течение синегиойион инфекции в эксперименте на животных с ожогом.

Для решения поставленных задач выполнены эксперименты in vitro и in vivo с применением ОФР е тремя концентрациями озона: 200 мкг/д, 600 мкг/л и L000 мкг'л

В экспериментах in vitro использованы 9 гемокультур P. aeruginosa, выделенных от пациентов с ожоговым сепсисом, лечившихся в Российском Ожоговом центре ННИИТО в период с (997-2003 гт и стандартный штамм Р aeruginosa "Тесаков" из Государственной коллекции ГИСК им. ЛА. Тарасс-hii4ii- V микроорганизмов да и после воздействия ОФР изучали, культураш,-име свойства, ферментативную акнвиость с помоапью тест-систем (Lachema,Чехия); чувствительность к а1гтиб|готнкам лиско-лиффузиоиным метолом; ростовые свойства фотометрическим методом с помощью автоматического микробиологического анализатора iEMS Reader "Labsystems" и программы »Микробы, адгезивную способность по B.II. Бриллнс и соаит (1986); фагошггабельноегь бактерий определяли по НЗФ методом З.Ё. Мату-сис и С.И. Пылаевой (1972). Белки наружной мембраны изучаемых штаммов исследовали по Weber и Osbom (1969); внеклеточные белки по ßavu и Omiten» < 1992). плашндные профили no Kado. Liu ( 1981) и суммарную пдазмид-иую ДНК (заявка на изобретение №2006109988 от 23.03 06 ).

Эксперименты m vivo проведены на 145 обожженных мышах с глубоким контактным ожогом обшей шгошлдью 20% поверхности тела У 50 жнваших определяли фагоцит арную активность иейтрофщюв иерифери ческой кропи «осле трехкратного (через сутки. двое и трое после ожога) внутри-брюшинного введения OD? разных концентрации У 95 животных оценивали влияние ОФР на теченне генерализованной еинсгноинон инфекции. Для ин-дукшш инвазнвиого шип генерализованной инфекции использовали аовесь стандартного штамма Pseudomonas aeruginosa чТесаков», которую вводили подструппо i» 0-1 мл <50 млн. МТ). трехкратно, через сутки, двое и трое после ожога Растворы вводили внутрибрюшииио в тс же сроки: животным контрольной группы - но 0,2 мп стерильного физиологического расглора, а животным опытной группы по M мл ОФР е концентрацией озона 1000 мктУд.

Легальность оценивали на 7 сутки. Выживших мышей забивали Всех мышеи вскрывали с соблюдением правил асептики, проводили гнетоморфо-логические и бактериологические исследования внутренних органов: сердца, легкш. печени, почек, селезенки

Озонированный физиологический раствор получали из стандартного расгаора хлорида натрия изотонического 0,9% для ииьекциИ (изготовитель ОАО «Красфарма-. г Красноярск) с ПОМОЩЬЮ аппарата озонотерапнн с деструктором озона ЛОТ-Н-01 -Арз-01 (ТУ 4444-001-0751351 #-97), код OK -005(01Ш); 944464; сертификат соответствия № РОСС RU,ME 34 ВОЮЮ, срок действия по 14.06.2008. №5319253.

Концентрацию растворенного в физиологическом растворе озона определяли с помощью оптического анализатор* концентрации озона в жидкой среде ИКОЖ-5 (№29705-05 в Государственном реестре средств измерений)

Статистическую обработку полученных данных проводили Tía персональном компьютере с помощью пикета программ "Stalistica" (StatSofl-Russia,t998), При статистическом анализе выполняли парные групповые сравнения с использованием критериев Стьюлеита и Фишера Результаты считали достоверными при р<0,05.

Изучение ростовых свойств синегнойиы* бактерий после воздействия ОФР с концентрациями озона 200 миг/л, 600 няг/л, 1000 мкг'л пока ил о лозо-зависимын эффект действия озона. Чем iujuK концентрация озона в физиологическом растворе, тем ниже была скорость размножения микроорганизмов и тем медленнее нарастала оптическая плотность взвесей бактерии Максимальное утнетммиее действие на рост оказывал ОФР с насыщающей концентрацией озона 1000 мкзм'л. Анализ ростовых кривых показал значительные изменения отдельны* фаз роста, наибольшие ич которых определялись в адапташюную фазу (ЛАГ-фиау). У микроорганизмов. взятых в эксперимент до озонирования. ЛАГ-фаэа составляла в среднем 5 '(асов. После контакта бакссрнЛ с ОФР с koiuich грацией озона 200 мкг/л ЛАГ-фаза удднншзась до б часов 50 мни., яри действии ОФР с концентрацией оюиа 600 мкп'л до ? ч, 20 мни, при действии ОФР с концентрацией озона 1000 мкп'л - до 7 ч 30 мин. Вполне закономерно, что синсгнойныс палочки, несмотря на чрезвычайную их устойчивость во внешней среде отреагировали на озон как на ок-сидятнвный стресс н изменили свои внутренний метаболизм Кислородные радикалы в первую очередь повреждают мембранные лил иды, белкн и ДНК < Naltashmia К с а ,Е 9%;Sior/ О. е а. 1998}. Молекулярные основы токсичности кислорода не п run не ясны, Для объяснения его действия предлагаются различные гипотезы В частности, существует предположение, что токсичное действие обусловлено окислением чувствительных к кислороду SM - групп различных белков, в то м числе и SJH • групп ферментов, таких как коэнзим А, фосфоди зстераза (фермент принимающий участие в метаболизме п-ЛМФ) или SH - групп ферментов, входящих в состав дыхательной пепи мнкрорга-нн'змов и т. д. »Афиногенов Г.Е и соавт .19871 При избытке кислорода н в среде, и в клетках могут накапливаться продукты неполного восстановления кислорода перекись водорода и суперожсидный радикал, характеризуюшиИ-ся высокой реакционной способностью Если парциальное давление кислорода становится «критическим», то бактерии «включают» заннгтные фермен-татзевные системы: катапазу. пероксидазу. сунсроксидднсмутозу, катялнзнруюшме реакции разрушения токсичных продуктов кислородного четибо-.1111411 Oxy-R-белок грамотрица i ельн их бактерий - необходимый ком поиск i отпета «та океидитивный стрессор, одновременно в&яяется сенсором РФК и транскрипционным активатором, включающим жспрессню этих фермечгтов (Баснакьян H.A., 2003). Однако ирн значительном мили ни стрессора наступает декомпенсация ферментных систем, в клетках накапливается II; О;, и в результате происходит лополнитсльное повреждение клетки и снижение их жииксносйбзихггн (Ждаи-Пушкниа В Д. Capí.* Махмуд Киты, 1983; Комо-нельисв И Г., Видякниа Е.В., Костяев А А ,2005),

Деятельность озонированных мнкрооргантмов в ЛАГ-фазу в первую очередь была направлена на активащно реиаратнвных процессов, та счет чего возникла иеобходз1мость и увеличении времени для сизгтеза ферментов, необходимых для адаптации бактерии к условиям тггання В то же время действие неблагоприятных факторов на микробные клетки приводит образца* и ню роста нгибирукчиих соедииеннЛ (Рошнна Е-К-. Петров Л.Н., 1997; Фсо-филова Е П. J 992). что также сззособствовало езтижению ростовых свойств синегнойных бактерий

Полученные нами результаты согласуются с исследованиями Родомаил Г, В. и соавт,(1999), Зинченко ВД и соавт,(2003), которые также отметили изменение ростовых кривых микроорганизмов под действием озонированных растворов

Биологические свойства Р aentgmosa до и после воздействия на них зп vitro ОФР с концентрациями озона 200 мкг/л. 600 ыхг/л и 5000 мкг/л оставались без изменения В то же время прзг опенке роста на 5 % кровяном агаре у грет л штаммов визуально отмечалось уменьшение зоны гемолиза после применения максимальной концентрации о urna в ФР 1000 мкг/л. Возможно, тто связано с антибактериальным действием озона. в результате которого произошло угнетение wccnpeccini гена, ответственного и выработку гемолизина, поскольку доказано, что субнигнбируюшис концентрации некоторых антибактериальных средств подавляют каскад реакций, связанных с снегемой "quorum sensing" (подавление экспрессии гаи сер R) п синтезом факторов минеи ноет и (подавление экспрессии гена pie R, ответственного за синтез гемолизин» Р aeraginosaK Чернуха М Ю и соавт ,2005),

Анализ а1ггибнотнко1рамм выявил, что у 7 штаммов из 10 под лепет-пнем ОФР с максимальной концентрацией етона 1000 мкг/л происходило i«-мененне чувствительности к наиболее часто применяемым при еннегэюйнон ннфскнии антибиотикам групп нефалоепорииов и фторхинолонов.

Расширение спектра чувствительное™ к антибиотикам очевидно связано с повреждением озоном биомембран бактериальных клеток, в результате чего происходят ее выраженные структурные изменения и нарушается барьерная функция ( Коиев С.В., Матус В.А„1992; Конооеяьиев Н Г„ Видя-кзшп Е В , Костяев А Л ,2005: Mudd I, Freeman В А , 1977), за счет этого, по -видимому, упрощается проникновение антибиотика внутрь.

В исядедоваииях Жадиюва КМ и соавт. (2000) охарактеризована микрофлора гнойных ран после обработки озоиом и повиарюдом при идентификации культур никаких отклонений в биохимической активности не установлено. в го же время показано, что под воздействием озона у антибиотике^ резисте1гтных штаммов восстанавливается чувствительность к антибиотиком Факт снижения антибнотигарезистснгоосТМ микрофлоры пол воздействием озона отмечают Аксенова С В. н соавт. (2000), Муравьев А.В.(1990), Позднякова Б.Я и соавт.(2005), Родоман Г В и соавт (1999).

Одним и» маркеров патогеяности микроорганизмов является их адгезивная способность. Адгезия бактерий служит пусковым моментом в развитии инфекционного процесса. В процессе ллгезнн между бактериальной к эу-кариогнческой клеткой происходи] «диалог.*, каждый из участников которого по<воему отвечает на сигналы itapruepa Микроорганизмы не только механически закрепляются в новой экологической типе с помощью ллгеэннов, но н начинают адекватную новым условиям перестройку метаболизма, что в свою очередь ведет к экспрессии ряда генов вирулентности В клетках макроорганизма высвобождаются особые вещества - церамзгды, стимулирующим cm i ici ряда питокшюв 4 IL-t.lL-6.IL-*), последствием активации которых является миграция фагоцитов в субингелнииж СЛОН, Таким образом, адгезия служит сигналом к запуску инфекционного процесса - каскада сложных реакции как у бактерий, гак и у макрооргаинзма (Езспчук Ю.В. 1985; Сидоренко СВ., 2001). Возможность влияния на процессы адгезии и последую-utcil колони lamm всегда представляла научный и практический интерес (Афиногенов Г.Е, и соавт., 1987. 2005; Бримие В и и соавт., 1990. Наумки-на A.A. и соавт., 1997; Павлова Н.Е, 1999; Павлова И Б. Леиченко Е.М., 2002).

Иселедоваиия адгезивной способности P.aeruginosa - одного из важных факторов гатогениости показали, тго культуры имели высокий it средний исходный индекс адгсзнвностн (ПА). Концентрация озона в ФР в 200 мкт/д разнонаправленно влияла на микробные клетки у одних штаммов снижала, а у других - стимулировала их ад1езивную способность После контакта микроорганизмов с озонированным физиологическим раствором с концентрацией озона 600 мкГ'Л н 1000 мкг/л у всех штаммов снижался уровень НАМ и более половины шгацмоа переходили из разряда высоко- и средне-адгезивных в разряд иеадгезивных Максимальное но эффективности и продолжительности действие оказывал ОФР с насыщающей коннстрацнсй озона 1000 мкг'л.

Снижение и утрата адгезивной способности синспюйных бактерий стали результатом окислительного взаимодействия озона и структур, участвующих в адгезии -тонких шггеп инлниов - иол нпелтидов, входящих в состав пилей, а также гликолниопротеида слизи (Мороз А.Ф .1988; Сидоренко C.B., 2001.2003. Ranipfaal Ft., I9&5). В структуре молекул адгезинов могли проитой-тв конфорыашимшые химические изменения, нарушающие процессы прикрепления и дальнейшего взаимодействия микробных клеток и клеток мак-роорпиигшв,

Патогснность и вирулентность определяются генетическими детерминантами бактериальной клетки Висхромосомиые элементы ДНК щпоплазмы микробной клетки, гак называемые плазмнды выполняю i метаболические функции и контролируют вирулентные свойства микроорганизмов, в том числе определяют резистентность бактерий к мпмбйкпрнаяышм препаратам. Показало, что среди причин появления и распространения ангнбиотико-устойчивых мюфОорпнюш» в клинических условиях ведущее место принадлежит илазмидам резистентности - R- илазмидам (Аннснмоаа Л А ,1983, БоронинАМ ,1987; Габисония Т.Г. и соавт.1992, Лсваиова £ Ф и соаы , ¡991). Плазмнлный тип устойчивости характеризуется резистеятиостмо одновременно к нескольким лекарственным препаратам, и такая резястсит-поегь способна передаваться ирн коииоганин и гранедукцин от одних микробов к другим, в том числе от иеттосеюшх к патогенным (Нехов А,П,. 1986: Иокровскзгй В.И и соавт 19991 Это создает постоянную угрозу возникновения резистентных штаммов болезнетворных бактерий С помощью щ|азмид возможна передача свсйЬств токсичности и других признаков, определяющих характер течения иатолоппгеекмо процесса, что имеет особое значение при внутри больничном обссмененнн ран резистентными и вирулентными штаммами микроорганизмов

В связи с ТП1М становится необходимым гюнек средств, которые бы обладали способностью элиминировать плпзмнды лекарственной устойчивости или необратимо нарушать функции бактериальной хромосомы, подавлять генетический перенос R - плазмнл, ннактианровать ферменты, разрушающие или модифицирующие антибиотики, повышать проницаемость клеточных мембран; препятствовать селекшнг резистентных вариантов в микробных популяциях. Успешное решение этой задачи имеет важное практическое значение для повышения эффективности ряда химнотерапевтнческнх препаратов и. прежде всего, антибиотиков, находящихся в первом ряду в арсенале средств борьбы с раневой инфекцией (Папашин С.М,1Й4) Известно, что нлазмиды могут элиминироваться тюл влиянием ультрафиолетового облучения, акридиновых красителей, солей тяжелых металлов и др (Лсваиова Г-Ф. и соавт., 1991, Мараку ша Б. И. н соавт , 2005; Пяткин К.Д и соавт., 1980).

Изучение илазмидного состава показало никни R- плвзмпд у вест исследованных сшгегнойных бактерии. Хотк un данным Г&бнсоИШ Т.Г и со-лвт(1992) только 20 % ОПИКШ еинсгноИной палочки» выделенной от пациентов с ожогамз1, содержали плазыидз* резистснтзюсгн. Таким образом, в рабою нсподыоваин госпитальные иуаызгрсэистеитные штаммы Pseudomonas aeruginosa, тп »логическое значение которых в структуре ВБИ по данным эпидемиологических исследований последних лег возрастает, как у «рослых пашкитотц так и у детей (Козлов PC. 2000; Giamnrcllos - Bonrboulis Е J. е. а, l998;Pong А ел ,2004) Все штаммы содержали наиболее распространенную для Р aeruginosa R- шзазмнду с молекулярной массой и 40 МД, и более половины ■ вторую представительную илазмиду с величиной в 60 МД.

ВсчдеВствие ОФР с конпеитроизмыи озози 600 мкгУл и 1000 ьекг/л не элеминнровлло плазмиды. но приводило к моднфикационным изменениям микроорганизмов У трети культур рсгзтегрттровадось увеличение числа Копий платил и возрастание суммарного количества гтлпзмилной ДНК в среднем с 15% до 27%. Увеличение копнйиости нлазмид и возрастание обшето количества пллзмидиой ДНК свидетельствовали о негативном влиянии ОФР-на бактерии, поскольку обычзю число копий каждой ила тмили удерживается на строго определенном уровне, специфичном для этой плазмиды Процесс келейности плазм ид регулируется определенными генами, которые под влиянием стрессовых факторов могут утрачивать контроль за этим процессом (Пехов А.П.198б;Г1окровскнй В,И и соавт. 1999). Можно предположить. что копированные R-плазмиды будут неполноценными для осуществления своих основных функций, а нерегулируемый процесс копнйиости их приведет в конечном итоге к серьезным чутацззям Lienen

Процесс роста и размножения микроорганизмов неразрывно связан с синтезом их продуктов жизнедеятельности. В последние ГОДУ в связи со значительными достижениями в области геиочикзт и протсомнки интерес бактс-рмолотое к изучению клеточных белков продолжает возрастать (Cordwell S. ел. 1999, Mann М,. 1999; Washburn М.Р. Vates J.R. 2000).

Обнаружение гена само по себе еще не означает, что он экспрессируег-см в любом случае, в то же время обнаружение колируемого i сном продукта н онределснне его количества, кок пролило, должны учитываться при харак-терпел нее свойств клетки По характеру белковой экспрессии можно уловить изменения. ведущие к патогенное™. ипнбкошнреякмтнеш и т,д. (Егоров А.М п соавт., 2001)

Показано, что основная часть экэобелков выходит в стационароиой фазе роста, но шипи микроорганизмы могут секретнровать экэобелкн по всему ростовому циклу (Дегтсва Г К,. 1999) На синтез белков могут оказывоть влияние различные факторы Среди них наиболее известны физические (температурные, радиационные и т.п.). физико-химические (рН. pOj, pCO-, биологические (бактериофаги, бактериальные токсины ит п ),

У опытных штаммов синсгнойных культур до и после взаимодействия с ОФР с концентрацией озона 1000 мкг/л изучены белки наружной мембраны и внеклеточные белки, которые lUIMTCi не только уникальной шгаммовой характеристикой, но н обладают токсическими свойствами и играют значительную роль в патогенезе многих заболеваний бактериальной природы.

Анализ нрогсннограмм белков наружной мембраны изучаемых пеев-домоиад подтверждал их гоемггвлыюе происхождение Внутри 2 групп штаммов, выделенных в разное время (с 1997 по 2001 гг.), выявлены культуры. имеющие одинаковый рисунок расположения белковых фракций. Это позволяет характеризовать эти штаммы как гоепшальные Г Дегтева Г К, 1999)

Сравнение здектрофореграмм обработанных и необработанных ОФР культур не показало различии в спектрах белков наружной мембраны и внеклеточных белков. Это свидетельствует о наличии мощных адаптационных механизмов у госпитальных синсгнойных бактерий, благодаря которым они сохранили способность выживать в неблагоприятных условиях, что особенно важно для сохранения патогеииости к вида в цепом.

Способность противостоять фагоцитозу у исеиломоиад связана с секрецией слизи н интотокешю*, обладающих аггтифагоиитариой активностью.

Фаг отпированные палочки, будут чаши шейный и от воздействия ипаип-мов HuMvitHoii системы н лекаре тленных препаратов, не только аыивно размножаются, но и проходят избирательную селекшио пол слабым во действием клеточных протеаз и гндродаз, дают более устойчивые L-формы бактерий Все это способствует быстрому изменению нх чувствителиюстн к азгтпбио-тнкам - феномену, отмеченному ири ожоговой болезни н раневом сепсисе (Тепляков ВТ и соавт 1990}

При изучении фагоиитабслыюс™ еннегиойимх палочек после их обработки ОФР выявлено, что озонированные микробы в большей степени поддаются фагоцитарному нзз.ятню ней грофилаын периферической крови, чем пеозоиированние, ИЗФ исходных штаммов бил равен 2,6- При сравнении фагоитгтпбелыюстн получено достоверное увеличение ИЗФ в зависимости от концентрации озона после воздействия ОФР с насыщающей концентрацией озона 200 ыкг/л ИЗФ составил 61 Ед, применение ОФР с концентрацией озона 600 мг/л увеличило его до 106 Ед, а испопиитаиие максимальной иасы-шаюшеи концентрации озона в ОФР в 1000 мкг'л - привело к возрастанию ИЗФ до 661 Ед. ОФР с концентрацией озона 1000 ыкг/л оказывал самое сильное действие на микробные клетки, в результате чего более половины из исследуемых штаммов сииегиойной палочки практически, пшнихгтмо уничтожались нейтрофилами

После взатюдсйствня бактерий с озоном происходили их качественные изменения, которые выражались в модификации химического состава слизи, в результате чего микроорганизмы, по-видимому, становились более уязвимы для фагоцитоза.

Литературные данные свидетельствуют о том, что при системном применении ОФР оказывает влияние н на клетки макроор(анизма (Болтов В Ф , Мирошин СИ , 1995: Васильев ИТ и соавт 1995; Касумьяи С.А. и соавт 1995;Качалннв Т.С и соавт ,1993; Роломан Г В и соавт. 1999; И Hallm,l995; Bocci V е а, 1990; DnsJtoll КЕ el all 1993), таким образом логично предположить. что фагопитабелыюсть попавших а организм бактерий может завн

ICI I. Ol 1ПМСИ0НИЯ аКТИВНОсТН НСНфофиЛой HC рнфсрИЧССКоН крови По мнению Г В Родоамна (1999) антибактериальное действие огона может Сыть реа-лнэовано как путем прямого окислительного эффекта по отношению к микроорганизмам, тик и опосредованно, через микроорганизм путем стимуляции клеточного и гуморального звеньев иммунитета

Проведены исследования фагоцитарной активности нентрофнлов кропи, полученной от обожженных мышей на фоне трехкратного виутрнбрю-шннного введения ОФР с насыщающими концентрациями озона 200 мкг'л, 600 мкгУл и 1000 мкг л в отношении стандартного штамма сниегноннон палочки,

В результате выявлено достоверное повышение ИЗФ у мышей опытных групп, которое было прямо пропорционально увеличению концентрации отона в ОФР. У Н1гтакгиых животных ИЗФ был равен 1,8 ед. В группе животных с ожогом без применения ОФР ИЗФ составил 0,7 Ед Парентеральное введение ОФР с насыщающей концентрацией отона 200 мкг. л приводило к увеличению ИЗФ до 1,1 ЕД, 600 мшУл - до 1,5 Ед Максимальный эффект наблюдали в группе животных с введением ОФР с насыщающей концентрацией озона 1000 мкг/д, ири этом уровень ИЗФ у животных был 1.7 Ед

Максимальный эффект наблюдали в Группе животных с введением ОФР с насыщающей концентрацией озона 1000 мкп'л,

Парентеральное введение ОФР животным значительно стимулирует фагоцитарную активность нентрофнлов крови при тсрмическоИ травме, таким образом, активация фагоцитоза синегнойиой палочки под влиянием озона зависит от его воэдейспнгя как на бактериальную метку, так и нентрофи-лы

Экснернментально-клпиическими нсслсдоввинямп доказано, что ош-нированнып физиологический раствор при местном применении способен снижать бактериальную обееченеиноет* инфицированных «мшмнх ран и ускорять реларатнвные процессы (Дмитриев ВЛ-. 2002; Перетятин С.П. и со-авт,. 2004; Стручков Л Л H соавт, 2004), а при пвреитерадыюм введении оказывать многокомпонсн гное воздействие на нарушенный при ожоговой болезни гомеосзал организма ( Всрхнев В А. и «мин., 2<Ш, Горбунов СЛ. н соавт., 2004; Ермакова А И и соавт, 2001; Ксигторшикова К М и соавт., 2003. Костина Q.B. и соавт. 1999, Костина О.В и соавгт., 2003; Носенко В.М., 2004. Персгягин С.П., 1999; Перетягин С.П и соавт,, 2004).

Z.BZaraora ci al. (2001) на модели септического шока у крыс оценивали профилактический эффект озона, ito в сочетании с антибиотиками цефотак-снмом, цефтаэндимом, левофлоксэшшом и нииераниллнном'тлзобактамом и отметили, что в группах опытных животных выживаемость была выше, в сравнении с группами, леченными только антибиотиками Озон способствовал увеличению активности антибактериальных npeitapaTOa. за счет '«го, по мнению авторов, и был досшгнут ютпвпешый результат

Учитывая полученные нами результаты экснсрныигтов in vitro, представилось интересным определить способность одного озонированного физиологического раствора, применяемого парентерально, ил шт. ica развитие синегнойной инфекции из первичного очага

У животных с ожогом и синегнойной инфекцией на фоне введении ОФР оценивали легальность в контрольной и ОПЫТНОЙ группах. Достоверных изменений легальности не наблюдалось, зарепктрнрована лишь тенденция \ р = 0.2) к се ензгжению.

Вместе с тем, у животных на фоне введения ОФР выявлено достоверное снижение обсемененности внутренних органов как у погибших к 7 суткам животных, так и у переживших йог срок, бактериологические исследования показали что P.aeruginosa выделялась у 100 % погибших животных контрольной группы и у 78,5 % погибших животных опытной группы <рс0.05) Среди животных, доживших да 7 суток синсгнойная палочка высевалась у 56 % животных контрольной труппы и лишь у 19 % животных опыт-нон группы (р<0.05). Результаты эксперимента показали, что у животных с термической травмой. осложненной гос ни Галиной еннегнойной инфекцией парен I сральнос внесение ОФР дает больше шансов на выжшганые

Очпнщо, что эффект сдерживания рммтм смнелюПноЛ инфекции был связан с изменением биологических свойств Р. леш^точл «Тесаков» под влиянием системною введения ОФР. С целью проверки чтого предположения у вариантов культур Р легищпииа «Тесаков» выделенных из внутренних ореанов экспериментальных животных без введения н е введением ОФР, а также варианта до эксперимента сравнивались азтгибнптзткограмчы и биохимические свойства,

Системное воздействие ОФР с концентрацией озона 1000 мкг/л приводило к нарушению метаболизма микробной клетки. Исследование основных ферментативных свойств Р астатом «Тесаков» показало нестабильность семи признаков из 28 анализируемых Анализ актибнотикограммы выявил увеличение зон задержки роста культуры практически возле всех дисков с аттпзеевдомоиадиыми лзпибиотнкамн. за исключением нефоперажив и ни-профлокстшина. и что особенно важно, в отношении азтрсонама, нетзглмннн-на и цефтрнаксона штамм становился вместо умеренно - устойчивого - чувствительным расширение спектра чувствительности к антибиотикам стало результатом изменений, происходящих в клеточной стенке микроба под действием озона, за счет чего, по - видимому, упростилось проннкноветпзе антибиотика внутрь Определено, что де1(стге неблагоприятных факторов из микробные клетки приводит к изменениям мембран, синтезу протекторных соединений ( углеводов, аминокислот и др.) и специальных белков ( Андреев В.С. и соавт. 1991. Боснакьяи Н А. и соавт. 1996; Басиакьхн И.АЛПЗ; Ро-щииа Е.К., Петров Л .Н., 1997. Феофилова Е.П.1992}.

Сонос1анля1 полученные данные, можно включить. что максимальной эффективностью гп уз&о н ш утуо обладал ОФР с насыщающей кониситрашт-ей озозга 1000 и кг/л Прямое воздействие ОФР т уз&о на госпитальные штаммы синегнойных бактерий приводило к снижению ростовых свойств, утрате адгезивной способности, увеличению фагоцтггобсльности, модификашинным изменениям иллзчид Иод действием системного влияния ОФР in vivo Р aeruginosa изменяла ферментативную активность п чувствительность к антибактериальным препаратам

Таким образом, действие озона, используемого в визе ОФР на госпитальные штаммы Р aeruginosa как in vitro так н m vivo, сопровождается снижением у них патогенных и вирулентных свойств, что СМЮТсльст вует о серьезных фенотиннческнх изменениях

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кувакина, Нина Аркадьевна, 2007 год

1. Аюлов В В., Жсгалов В.А. Перстятн С П. Российская ожоговая служба на современном »taue проблемы и возможности их решения // Ma-терналы VII Вссрос. иауч практ конф. но нробл. термических поражений1. Челябинск, 1999.-С.З-6

2. Аюлов В В., Попова М М . Жеталов В.А и др Эпидемиология ожогов и состояние помошн пострадавшим в России )! Ннжсгорол мед журк.-2004.-Прш1. «Комбустнология*.- С. 27-29

3. Аюлов В В., Пыласва С,И. Гординская НА. и др. Эпидемиологическая характеристика внутригоспиталыюй инфекции и основные принципы ее профилактики в Республиканском ожоговом центре Ч Травматология и ортопедия России -1996.- №1 С-5-9.

4. Алексеев Л,А, Ожоговый сепсис: диагностика, профилактика, лечение: Аятореф дне. д-ра мел мук M ,1993. - 40 с,

5. Алексеев A.A., Крутиков М.Г., Еропкина А.Г. Ожоговый сепсис как ослож1гение ожоговой болезни Н Тез. докл. Между И ар. конф. «Раны и раневая инфекция*.- М„ 1998,- С- ¡96-198.

6. Алексеев A.A., Крутиков M Г. Яковлев В.П Аитабактсрнальиая гералня в комплексном лечении и профилактике инфекционных осложнений при ожогах H Рус. мед жури 1997.-T.5Jfe24,-C.I6t0-l6l6.

7. Алексеев ЛА, Лавров В А Ожоговая сентикотокссмия: этиология, патогенез, кликни, лечение // Рос мед жури l99S.-ífel -С.41 -44

8. Андреев ВС, Богряннеаа ГА. Осипов Г.А. и др 'Экскреция и лк-тнваиия регуляторов стрсесустойчнвосги микроорганизмов при различных внешних воздействиях на культуру II Биотехнология -1991.-Jfe6.-C-28 -32.

9. Анненкова Л А Сравнительное изучение и классификация плаз-мид резне ich. нос тн Pseudomonas aeruginosa: Автореф. Д1К. канл биол. на-ук-М,1983.-)7с.

10. Афиногенов Г.Е., Блинов H Г1 Аитнсетгтнкн в хирургии,-ЛМедицина, 1987.- 144с.

11. Ахмедов M Г Эффективность внутрнсосуднстой лазеротерапии а коррекции нарушений системы гемостаза при комбинированных термо-механнческнх повреждениях: Автореф дне кянд мед. наук. H Новгород, 1999 - 20 с.

12. Болтав В.Ф,. Мирошни С И. Состояние функциональной активности нейтрофнлышх лейкоцитов в раневом отделяемом на фойе озонотсралин

13. Н Озон н биологам и мелнштне I Нее рос науч ирлкт коиф с междузтлр участием.- Н.Новгород. I995.-C.9-10

14. Бондареико В,М Факторы navoKHROCTR бактерий и их роль и развитии инфекционного пронезгсса // Жури микробно.з энндсмиол и нммуно-бнод,- 1999,- NtS- C.J4-39

15. Борисов Л Б Медиан искан микробиология, вирусология, нммуно-лапа -М МИЛ, 2002.-735 с.

16. Воронин Л, М- Пдаэмилы реитегемзносш н бнолегрллапии бактерий рола PseudonMHKis Лвторсф. лис д-pa биол наук М , 1987,-3?с,

17. Воронин A.M.» Аннсимова Л А. Плазчнды Pscudomonos aeruginosa И Аитибиощки -1984 № • С.676-695.

18. Боярзшов Г. А., Верхнее В.А., Васин Н И н др Применение непрямого электрохимическою окисления в лечении ожозоиой токсемии и септи-котоксечии // Вести интенсив, терапии 199К.-№3- С 36-37.

19. Бояринон Г.А„ Соколов В,В Озонированное искусственное кровообращение И Новгород: Нзд-во «Покровка». 1999.-317с.

20. Бояринон II.А., Верхнее В А., Гажссва Т П н др Применение ксе-иосслоенкн с целые детокенпшм и иммуиокоррекннн при термической травме Н Анестелзологил и реаниматология -1996,- №3,- С.70-71,

21. Брнлдис ВН. Брилннс ТА , Тюваевл Р Ф и др. О возможности влияния на ингадгенио микроорганизмов Н Антибиотики и колонизационная резистентность: Тр, НИН антибиотиков- М, 1990 Выи 19.-СЛ87

22. Вулынии В И , Глухое А,А .Мознуров И И Лечение ран Воронеж: Нзд-во Воронеж Гос.узз-тв. 1998 - 248 с

23. Булыннн В.H , Ермакова А. И., Глухой А.А„ Мошуров ИЛ. Отюно-терання хирургического сепсиса УУ Own в биологии и медицине ti В серое иауч практ коиф. с межлуиар. участием ■ II Новгород, 1995 -С.31-32.

24. Вазииа ПР. Бугров С Н Основные причины смерти обожженных D восьмидесятые и девяностые голы 20 века И Тез межлуи конф «Актуальные проблемы термической тровмы»-СПб, 2000-* С. 40-4 L

25. Ватина И Р. Бугров СИ, Пыдасва С И Пневмонии одна in основных причин счерти обожженных ■' Нкжегород мел жури -2004.-Прид-»Комбустнологияю- С. 67*68.

26. Вазииа И.Р., Буигуев Ю.П , Сосни Е Ю. н др Ранний сепсис тяжелое осложнение острого периода ожоговой болезни У/ Межрстнон. неуч, ■ прокт. коиф., посвяш ХХ-летию обр» Краснодар, ожог центра ■ Краснодар. 1993-С.11-13.

27. Вашна ИР , Верещагина ЕС Сепсис как причина смерти тяже-лообожженых детеЛ И Восьмая науч конф. по проба «Ожоги»: Тетлокл,-СП6.Д995.- С.41-42.

28. Вазииа И.Р., Верещагина Е.С., Иылаева С И и др Сепсис у обож-женых н вопросы его патогенеза У/ Мсждуилр кошр «Коыбустнолотя на рубеже веков»,- М„ 2000 * С,43-44

29. Вазииа И.Р. Сосин Е.Ю, Бутиуев Ю.И Особенности сепсиса у обожженных в настоящее время U Вести. хирургии им Грекова-1995-Т lS5Jfrl2 'C.6Ä-6S

30. Васильев И.Т. Марков И И,, Мумладзе Р.Б, и др. Антибактериальное и имыунокоррегируютиее действие озоиотерапии при перитоните У/ Вест.хнрурснн им. Грекова -1995 -1.154, №3.-С.56-60.

31. Ведерникова OJJ-, Верхнее RA, Агоинна E ll Результаты лечения больных с тяжелой термической травмой Л Материалы VII Всерос, науч. -Hp№t. коиф но пробл. термических поражений. Челябинск, 1999.-C.I2-I3.

32. Верхнее ВА. Ведерникова ОЛ, Васин H.H. и др Применение илатмофереза и озонированных растворов у больных с термической травмой Н Материалы 2 иауч иракт. коиф «Анестезиология и интенсивная терапия в неприспособленных условняхи.-Голниино, 1W9.- С.60,

33. Верхнее В А., Моисеева ЕЛ.Глухарева Ю.В. Комплексная терапия з i (лоток си кота у ожоговых больных // Между нор. конгр «Комбустнояо-пи на рубеже веков» • М., 2000,- С 69

34. Вилков С.А. Иыласва С И . Костина О.Н. и др. Парентеральная озонотерапия в лечении пневмоний у тяжслообожженных Нижегор. мед жури 2003 -Прил « OioHoTCpsnii*i.-C-23S.236

35. Горбунов С И Применение медицинского о таил для профилактики, лечении и интенсивной терапии гнойио-сеггтнчсскнх заболеваний и осложнений в хирургии и травматодопти у взрослых и детей: Автореф, днее. д-ра мед наук М , 2000 - 47 с.

36. Гречко В Н. Использование озона и озонированных растворов в лечении гнойных рай lt Материалы VII Вссроснауч практ.конф.по проба термических поражений- Челябинск, 1999.- С. 163*164.

37. Гречко В,Н, Комплексзии озонотерапия и иемлеиреитиый ыоно-хромаптзнрованный свет в лечении термической травмы Материалы VII Веерос Науч.- практ.конф.по нробл термических поражений -Челябинск, 1999,- С 164-165

38. Густав А,В., Котов С А , КЧигторптикова К,И. Потехина Ю.П. Озонотерапия в неврологии. Н.Новгород: Литера, 1999. ■ С, 5-50,

39. Дсггепа Г К,. Беляева Е.В., Ермолина Г Б Белов не системы бактерий. Роль в таксономии и эпидемиологической практике Монография II.Новгород- изд-во ИНГУ им Н И Лобачевского, |9W.-138e.

40. Дмитриев ВJI. Применение озона на догоспитальном и госпитальном этапах ддя улучшения результатов лечения ран, открытых переломов и ожогов конечностей: автореф. дне . канд мед наук Саранск, 2002 ■ 24 с

41. Долгушин ИЛ., Зурочкл Л В., Чукичсв A.B. Секреторные продукты иейтрофилов it иммунный ответ // Иммунология- l990-.te,}-C35-37.

42. Егорьев А-М,, Саэыкии IO.O,, Иванов В,И Развитие антимикробной химиотерапии и новые парадигмы // Клинич. микробиол. н антимик-робн терапия 200I.-T 3. Jfe2.-C 9«-103.

43. Еэепчук JO B. Патогенного. как функция биомолекул.■ М.: Медицина, 1985.-240 с.

44. Ермакова A ll, Глухой А А , Еенпснко В В. н др. Применение озона при лечении хирургической нифекцний Второй контр, Ассоциации хирургов um.H.II.Пирогова: Материалы конгр-СПб,- 1998,- С,35-36

45. Ефнменко Н-А , Гучсв Н А , Сидоренко С.В Инфекции в хирургии Фармакотерапия и профилактика И Смоленск, 2004 296 с

46. Жаигудвнова A. M Фчпомодификания крови шпкпинтсиснвным лазерным облучением в комплексной терлиингнойно-сегтпргескнх хирургических заболеваний Автореф днсс. каид мел наук.-Нальчик, 2001 -21 с.

47. Ждан-Пушкина В. Д. Сарья Махмуд Кыты Основы роста культур микроорганизмов,-ЛИад-ио ЛГУ, 19*3.- 1*7 с,6В Жуков НИ , Драгннскнй В Л . Алексеева Л.П. Оюниронанне волы в технологии водоподготоакн // Водоснабжение н санитарная техника.-2000.-tel.-C.2-4.

48. Журавлев В.А. Распутин П.Г., Цылнн А.В. и др Использование ксеногатой селеэеикм в комплексной термин тяжслообожженных // Материалы Между нар конф. « Мелнинна катастрофа М -1990,- С 2*3,

49. Зайцев В.Я. Разумовский С.Д Оэонндотсрапил Н Озон II методы эфферентной терапии в медицине. Материалы III Веерос науч -нракт. конф И,Новгород-1998,- С11-12,

50. Зуева Л П. Яфоев Р X Владимиров В Н и др Характеристика источников и путей распространения синегнойной инфек ш ш в травматологическом отделении /I Ж урн мнкробнол энидемиол и нммунобнол -1986 -Л'>2 -С, 59-63,

51. Иванова НИ Чувствительность к антибиотикам н бактериофагам штаммов РйсшЛопмммй асги^кпояа с различной антигенной структурой: Авто-реф, дкес, квид мед наук Горький, 1987.- 18с

52. Идов И Э Астккты применения озона в медицине II Анестезиоло-П1Я и реаниматология.-1997 -№1.-С.90-94

53. Илюхин В II Пссвдомонодиыс инфекции в патологии "кловека /,' Журн. микройиол шнлемиол и нммунобнол.-1995.-№2.-С. I 10-114

54. Калер Г,В, Физико-химический механизм взаимодействия озона с биологическими мембранами; Автореф. дне . ката бнол наук. Минск, 1986. -21с.

55. Калер Г В , Мельникова А М- Магу с В К , Коней СИ Взаимодействие оюш с мембранами Эрнгроиитов //Емшппкяк мембраны 1989-Т.б.Л 11-С 1164-1169,

56. Котлов P.C. Нозокомнвлытыс инфекции /' Антибактериальная терапия Практ. рук. t Под ред. Л-С- Страчуззекого и др. М,2000.-С.143-14б

57. Кончит Е Я Роль пгпербаричсекой окенгенаиии в интенсивной терапии хирургических инфекций1' Бю.т пгпербарич биологии и медицины.-2002.-T.l0jfel.-Cj 3-14.

58. Корту иона ГЛ., Крылов K.M., Тарелкнна МП н соавт Применение ксеноселетеикн у обожженных ff Материалы VII Всерос иауч практ. конф. по пробл. термических поражений Челябинск, 1999 - CT 21-122.

59. Й4 KocTiuea O B Состояние про- и антиокендантных систем организма при ожогах в условиях воздействия озоном и биоскалом С Аятореф дне каид, биод.наук.-Н.Новгород,-2001 -19с,

60. Костина OB, Перетяшн СП , Иванова IIЛ и еоовт Оценка зф-фскшвиостн применения озонированного физиологического раствора при лечении обожженных ff Материалы VII Всерос.науч. практ конф. по проба термических поражений Челябинск. 1999,- С-122-123.

61. Вб. Костнна О,В. Перстяпш С П, Снлоркина А.Н., Стручков А.А. Корришруюсдее действие озонированного физиологического раствора на уровень слюкош в крови обожженных ■■■ Нижегор мед жури 2003 •! рил ц Озонотераюдо.-С. 225,

62. Котовский А.Е , БычеккО В Д. Наумов Л,С. Профилактика госпитальной инфекции озоном Л'Мед помощь 199б.->й9.-С,27,

63. Крайни», ив Ультрафиолетовое облучение аутокрови в комплексной лечении обожженных Автореф лис кандмед. иаух.-Санкт-Петербург. 2001-25с.

64. Краснова М В, Афиногенов Г,Е- Исследование ВТ и» фармако-дннамических свойств антисептика иовнаргола // Клиническая мнкробнол. и аншмнкр химио тер, Тезисы VII Междун конф. «Антимикробная терапия» -Москва-2005,- С 37,

65. Крутиков М Г Ннфскштя у обожженных: этиология, патоген«, диагностика, профилактика и лечение: Автореф дне док г мед. наук Москва,>2005 -45с,

66. Кулэоев О.А.* Тютюма П,Н. Осложнения п летальность при локальных ожогах !! VI съезд травматологов н ортопедов России: Тез.докл-Н Новгород. 1997.-С. 102.

67. Куэтпт МИ, КостмучСнок Е.М Раны и ранее:« инфскшю М Медицина, 1990. - 592с.

68. Кусина Е В., Лунева И.О., Шуласва Н.М Опыт применения местной омютерапии у ожоговых больных // Нижегород мед журн.-2004,-Прнл.«Комбустнология» • С. 161

69. Лазарева Е Б .Спиридонова Т Г , Васина Т.А^ Смирнов С В. Сравнительное изучение бактерицидных свойств различных озонированных растворов И Озон в биологии и медицине: Материалы II Всерос Иауч -практ конф. с междуиар участием Н.Новгород. 1995.'С,9,

70. Леваиова Г Ф, Парфенова О.В., Кашников С Ю, Молскулярно-бпологичсскне способы идентификации и дифференциации бактерий Мез од

71. Лггтовченко П.П Диапюстика ГНОИЮ-ВОСПШНГГСЯЬИМХ ¡ЦШИШ, вызываемых псевдомонадами и лечение сннегноГпюй инфекции у обожженных Ahíореф лис канд.мед. наук -Киев, 1988.-24с.

72. Лунии В,В„ Попович М П , Ткачснко С Н Физическая химия озона /Под ред. чл.-кор. РАН нроф, В, В, Лунина М,; нзд-во МГУ, 1998, -480с.

73. Маракуша Б И , Темежннкова Н Д. Тартаковскин Н С. Выявление роли ллазмнл л спин кдл различных видов в вирулентности /V Молекулярная генетика, микробиология н в 11 рус о л оги я -2005 • №2 -С .17- 21

74. Матусис З.Е., Пыласва С П К методике определения индекса завершенности фагоиито» в Лаб. дело.- 19?2.-№4.С237-240.

75. Маянскнй A II Мггсробнилогия для врачей ■ И Новгород изд-во НГМА, 1999,- 393 с.

76. Мелехов НА, Мирошин СИ Применение растворов иервомура в комплексном лечении пюйных послеоперационных осложнений н местной гнойной инфскшпг "Вестник хирургии -1989, -Jk 7, С- 45-47,

77. S. Миролнтн СЛ. Мелехов НА, Мелехов Е.П. Сравнительная характеристика микробонидиой активности некоторых традиционных и современных антисептиков, применяемых в хиурптн И Хирургия -1990-Кгб,- C J942.

78. Митрохип С Л Значение синегноПиой палочки в инфекционной патологии человека )! Инфекции н антимикробная химиотерапия.-2004.-Т.6.1. Jtó.-C.l- 4,

79. Муравьев A.B. Оэонотсрапия гнойных ран н трофических ятв: Ав-торсф. днсс . канд. мед наук.'-Ярославль.-1990 19 с

80. Наумкниа Е.В, Обгольц А А, , Рейс Б. А., Чсриыамж А .К Влияние сорбирующих материала» на гндрофобиость и йдгезнвмость гр* микроорганизмов U 'Зффсрстггная терапия -1997 Т.З. JfeL- С.26-28^

81. Носенко В.М , Чспзаков Е.В. Парентеральная оэонотсрапия в ком-бустиодогзтн Ч Нижегород мед журн-2004- Прнд, « Ко»1бустзюлогияк> -С,94-95,

82. И 9. Павлова ЛЬ Закономерности развития гюну.шшн бактерий и ок-ружаюакб среде {элепропноншцросноппчесное кскшнинс); Автореф, дисс д-ра бнап. наук- М.,1999.- 22 с,

83. Павлова HS., Лснченко ЕМ Электронно-микроскопическое исследование адгезивное гн бактерий Н Жури микробная, зпидемиоя. и нмму-нобиол,-2002 Jtfrl.-сз-б.

84. Павловичей С. А . Жнльникова В М., Захаров В.В , Якушева М.Ф Факторы естественного иммунитета при тяжелых механических н термических повреждениях ! В кн Факторы естественного иммунитета Куйбышев, 1983.-С .40-44.

85. Перетяги и С П Экспериментальное обоснование низкоиоточной ОЗОММСИСЯОрОДНОЙ терапии эилотонсккомв /.'Нижегородский мед жури. Приложение Озонотерання 2003, - С 34-35

86. Перстягин СП, Бояринов ГА , Зеленое ДМ и соавт Техника озонотсранин: Метод, рекомендации. H Новгород, 1991

87. Перстягин СЛ. Стручков A.A. Вилков CA и др. Озоногерапня в системе реабилитации тяжелообожжеиных ■■".' Няжнорол мед жури-2004 -Прнл. « Комбустиология»-С211-212,

88. Псхов А.П. Плазмцды бактерий -М Медицина. I9S6-223 с.

89. Плечев В В, Мурыссвд В М , Тнмсрбулотов В M il лр. Профилактика гнойно-септических осложнений в хнрургин.-М Триада X, 2003.-319 с.

90. Повстяной H t Экономика, организация лечения и исколи термических поражений I/ Материалы VII Всерос, иауч практ конф. по пробл. термических поражеиий.-ЧслябинскЛ999- С.26-27.

91. ПовстяноЙ H Е., Котниец Г П , Сосюра Т В. и др. Эффективность экстракорпорального подключения селезенки свиньи при ранних и поздних септических Состояниях у больных с ожогами Кднннч хирургия 1990 -№3.-С.9 -10.

92. Покровский В Н. Позлее« O K Медицинская микробиология,-М ГЭОТАР Мсдитишо, 1999,-1183 с.

93. Попова ILA. Оптимизация интенсивной терапии пндотоксикозов у ожоговых больных: Автореф дне каид.мелнаук .-Красноярск J 995.-23С

94. Пяткии IIД. Кривошеи» Ю,С Микробнааогия.-М «Медицина». 1980.-512 с,

95. Работнова ПЛ., Позмогова НИ, Баснакьян H.A. Хемостягнос и периодическое культивирование при изучении физиологии микроороннзmob1 Итоги науки и техники Сер «Микробиология».Т . ] Культивирование микроорганизмов -М : В M HIПИ. 19ЯI■ -С 3-54

96. Работнова И Л. Позмогова H.H. Хемостатиое культивирование и пинцирование роста микроорганизмов.-М.: Наука. 1979.-207с.

97. Роломан Г, В., Лаберко JI А . Обшмиский ВII н др Оэовотеранни в лечении больных с гнойио-воспалительными заболеваниями I/ Рос мед жури,-1999 Jfe4 - С.32-36.

98. Рощнна F. К , Петров ЛН, Выделение белка во внеклеточное пространство как неспеинфическая реакция Escherichia coli на Стресс И Микробиология- 1997 Т.66, №2 - C.179-1S4

99. Рудное В.А. Научно- обоснованные стандарты диагностики и интенсивной терапии больных е хирургическим сепсисом /I Материалы конф «Стандарты диагностики ir лечении в гнойной хирургии»,-M. 2ÖOI ■ С 206211.

100. Рудное В.А. Современное клиническое значение еннелюйной инфекции H возможности ее lepaiuiH у паннеитов отделений реанимации Инфекции и антимикробная терапия. '2002 -Т.б. С. 170-177.

101. Рыжало M H., Шукуров Ji.lll., Силе льникоя В.О. и лр Гемопсрфу-зня через кссноселезенку л комплексной терапии хирургического ожогового сепсиса ,'í Воеи.-мсд жури -1992.- J68.-C26-27.

102. Ы5.СлмоАлоио И.И , Васильева Eli , Павлова II Б, Туманя» МЛ Механизмы бактерицидного действия перекис» подиро/w -'Журн микробиол эпплсынол h нммуиобиол. ■ 1983. А& 12.С. 14-16

103. Саркнеов Л С , Сологуб В.К., Каем Р.П. н др. Современные проблемы ожоговой болезни // Клички, медицина-I9вб.-ЛЙ -С 14-16.

104. Септю А Н. Химические ванны как метод профилактики ожоговой ннфехцни при термических ожогах // Хирургия,-1982. I.-C.8&-82,

105. Сидоренко С В Инфекционный процесс как «диалог» между хозяином и паразитом // Клниич мнкроб1Гология и антимикробная тсрапття-2ÜQ1 ,-Т.З, №4 С-301-315.

106. Снлорснко СВ. Клиническое значение Pseudomonas aeruginosa // Клниич фармакология и терапия 2003 - №2,- С. 1-8

107. Спиридонова Т.Г. Локальная о юно кислородная терапия в комплексном лечении ожогов конечтюстей D Автореф, дне кал мед наук, Москва. 1994,20с,

108. Станиславский Е С. Колхср II И Сннспюйная инфекция.,-М„ 1978,-200 с.

109. Тепляков В.Г. Каем P H , Впорнн Б В а лр. Изучение особснно-стсЛ микроорганизмов u iiaroi снсэе сннсгиойною сепсиса it Бюл, экспсрнц Биологии и медицины -|990,->й5 -С',453-455

110. Тепляков В .Г., Каем Р.И., Вгюрин Б В. и др. Роль местного очага воспаления я pai um« синсгнойиого сепсиса(э кс пер и ментальное исследование) И Бюл. эксперты Биологии и мсднинны.-1991.-№3.-С.285-287.

111. Томас K.M. Репликация шгазмнл Плазмиды Методы: Пер с англ,- M : Мир, 1990 -С-19-61

112. Турсуиов B.C. Махмудов КХ, ТуГпгиев ДА, Целесообразность применения миелопида в комплексе лечения ожоговой болезнн1'/ Иммунология, -1992, -№б,С 42-43.

113. Ушакова Т А Нрименсние гннохлорита натрия в терапии ранней ожоговой токсемии Аотореф дне коидмед наук.-Москва„1994.-29е.

114. Феофилова ЕП. Трсгилоза, стресс и анабиоз Микробиология.-1992-T.6l.Jir5.-С 741-755

115. Филатов A.B. Коиопеш.нев Л.Г., Черных F„B Литим1ткробные свойства озонированных растворов И Нижегород мед журн.- 2003.-Прнл "Озонотнрапия»-С.20-21

116. Филимонов A.A., Толстое A.B., Королев В JO. и др. Анализ летальности у обожженных ■*■* Мсждуиар контр, «Комбустиология на рубеже веков« ML, 2000 - С, 34.

117. Хярди К. Плвэмиды M Мир. 1990 - 223с.

118. Altdoflí R , Jiicaj Z . Fe;го E, Bacterial (lora isolated in bwn patients И Alpe Adna Microbiol. J.-1993.-N 2, P.99-103,

119. Baltin H. Ozoneterapy iíi Oncology Á'12-th Ozone World Congress-Lillc{France), 1995.-V, 3-P 4M!

120. Bang R.L., Gang R К . Sanyal SC et al. Bum septicaemia' an analysis of 79 pattcnls It Bums. -1998.-VolJ24,N.4.-P.354-361.

121. Bassler В L, How bacteria iaHt lo each other refutation of gene expression by quorum sensing// CurrOpm Microbiol -IW-N 2.-P, 582-587171, Bender В С Sepsis// Clin-Gerialr.Med -1992 -VoLS.-N 4.-P.913-924.

122. Baubmd L.Chlihi AXhafiki N. ct al Zerouali 0\ Etude De Ln Mortalite Par Brulure A Propos dc 414 Cas Dc Dec« /Ann- Bums and Fire Dts-!995.-VelJt.-N 4 P 74-78,

123. Cardoso O. SousaJ.C. Leitoo R. et al. Carbupenem -hydrolysing bcia-lactamase from clinical isolate* of Pseudomonas aeruginosa in Portugal ft Aniim. icrob Chemodicr.-1999.-Vol.44 -P. 135

124. Clien J. Zhang Y . Xiao 0 el al A preliminary study of Bifidobacteria feeding on the prevention of bacterial translocation in severely burned rats /I Ann Bums and Fire Dis- I997.-Vol.l0.-N I P,72-76

125. AO Childs C . Edwards- Jones V., Headtcote D. ct a I Pallems of Staphylococcus aureus coJonuations, toxin production, immunity and illness tn burned children Si Bums -1994,- Vol,20, N6.-P.-514-522.

126. Cioffi W.G.Kun S H .Pruilt B.A. Cause of mortality in thermally injured pai ienU // US Inst. Of Surg Res -1993.-N 7.P.11.

127. Cooper R.A., llalas E, Molan P C 'Hie efficacy honey in inhibiting strains of Pseudomonas aeruginosa from infected bums //Bum Care Rchab.-2002 -Vol.23.N.6.-P.366-370.

128. CordweJI S„ Noavkcn* A.Vcrrills N. et al. The microbial proieome database an automated laboratory Catalogue for monitoring protein expression in bacteria // Electrophoresis.-.999.-N 2Q.-P.3580-35SS.

129. Dayoub A., Zcidan F , Radidy S. Infections on bums Experience Of Teaching Hospnal In Syria // Ann Medn Bums Clut>-l995 -Vot 8,N I P 126132.

130. Dertch E.A. The management of bums St New Engl. J.Med.- 1990 -Vot.323.-P. 1249-1253.

131. Dmioll К. E. Simpson I., Саяег J. et al Ozone inhalation stimulates expression of a neutrophil chemotactic protein maciophague mllammatoty protein 2 //Toxicol Appl - Pharmacol -1993. - V 119, Jfe 2. - P 306-309

132. Fukushima К , Glamotti L, Alexander W et al, The degree of bacterial translocation is a determinant factor for mortality after bum injury and is improved by prostaglandin analogs H Ann.Surg.-1992.-Vol.216 -Р.43Я-441.

133. Camelli R»L,. Li-fce He, Iju h, Macrophage supre»ion of granulocyte and macrophage growth following bum wound infection// J Of Trauma.-.994.-Vol.37, Jfc6.-P.888-892

134. Gang R.K. Bang R L. Sanyal S.C. et al. Pseudomonai aeruginosa sett-cacmia m burns// Bums -1999 -Vol 25, N 7,- P611-616,

135. Giamarellos BourbouhsEJ, Pefanis A, Grecka P el al. Interactions of ceftazidime and Amikacin on MultiTcsistant Pseudomonas aeruginosa Have TTiey Altered in the Six-Year Period from 1988 to 1994? II Clin. Drug. Invest1998--N 16,P. 167-171.

136. Gianiwla L.I., De Caro V,, Adragna E. Ët al A new delivery System of antibiotics in the treatment of bum wounds^1 Ann. of Bums and Fire Disastcrs -1999.-Vol. 12, N. I -P- 27-34.

137. Gibb A P,, Tnbuddhanu C„ Moore R A el al Nosocomial outbreak of carta pen em resistant Pseudomonas aeruginosa with a new bla (IMP) allele, bla ( IMP-7) ff Antimicrob. Agents Chcmotlier,- 2002-Vol.46,-P,255-258,

138. Govan J, De relie V Microbul pathogcnesis in cystic fibrostv mucoid Pscudoiiumas acruginosa and Bwkholderia cepacia Microbtol Rcv 1996-Vol 60 -F 539-574

139. Grecnficld E.„ McMunus A T lnfcctious complications: prévention and stratégies for thcir corttrol Nws// Clin. Nortli Am.-l997.-VoL32.N 2.P 297-309.

140. HiraVata Y-, Snkumai R-. Pootc K. el al Muttidrug efflux syslems play an important rôle in the ¡nvaxjvencss of Pscudonwnas aerxiginosa // J.Exp.Med-2002-Vol, 196 -P109-118,

141. Kado C. Liu S, Method of plaiimds détection H i. B*cteâol-l98L-Vol. 145.- P. 1365.

142. Klein D.G .Fritsch DE Amin S.G. Wound infections followingtrauma and burti injuries /1 Crit Care Nurs Clm. Nonli Am -1995 -Vol.7. N 4.-P627-642.

143. Kovacs K-. Patcrson D.L, Vu V.L. Antimicrobial therapy for Pseudomonas aeruginosa Skin and soft lient, ear. and eye infections; meningitis, antl clinical syndromes of febrile neutropenic and HIV patients if Infect Med.-1998 -Vol 15,-P 464-478

144. Lausova A. Ferlant P. Polck B, 'Five effect of different oxidative challenge on growth and stress protein induction in Escherichia coli Biología (Bratislava).- 1999.-P 649-660

145. Le Bourgeois M. Antibiotic therapy against Pseudomonas aeruginosa and olher gram-negative bacteria in cystic fibrosis it lieh Pediatr-2003 -Vol, 10, N.2.-P352-357

146. Lesseva M . Hadgitski O. Treatment of serious infectious complication* in burned patients With- Bmipcncm I Ci las tat in //Ann Burns Fire lJisaslers -1998 • Vol. ll.N 2.-P.74-80.

147. Levy I., Lcibovtci L. Drucker M. et al. A prospective study of Gramnegative bacleriemla in children // J Pediotr. Infect- Di»-19%-Vol 15 -P. J17-122

148. Li T.2L, Luo L., Xu Y В cl al Clinical Significance of the predominant bacterial strains on bum wound during early postbum stage /•' Zhonghua Shao Shong Za Zlu 2003.-Vol. 19,N 2.-P 71-74.

149. Uvennore D.M. Beta-Laciamases in laboratory and clinical nsistatis if Clin Microbiol Rev -1995,-Vol.8 -P,557-584.

150. Livennore D.M. Inlcrplcy of impermeability and chromosomal bcta-laetamase activity in unipenem-icsistant Pseudomonas aeruginosa .'/ Aniiinicrub Agent». Chemother -1992,-Vol 36 ^2046-2048

151. Mac Manus W F. Goodwin С W, Mason A D,et al Bum wound infection HI. Trauma -l9SI.-VoJ21, N 9.-P,753-757

152. Mann M. Quantitative proteomics? // Nal Biolcchnol 1999 -Vol. 17 -P.954-955.

153. Mudd I , Freeman В. A Read ion of ozone wilh biological membranes vBiochcm Eft Environ Pdl. Ann Artcr. Seience. 1977. - Vol. 7. - P. 97-133.

154. Nakae T. NaJtajima A„ Оно T et »1 Resistant to В lactam antibiotics in Pseudomonas aeruginosa due to interplay between the MexAB-OprM efflux pumpand В ■ lactam»« //Awimicrob, Agents Chemother,-1999--Vd. 43.-P.I30I-1303.

155. Nabaslnma К, Kananiuru К , Mizuno T. el al. A novel member of die cspA family of gene* that is induced by cold shock m Ecshertchia coll 0 1 Unci -1996.-Vol. 178.-P. 5788-5792.

156. Nasser S , Mabrouk A , Maher Л Colonization of bum uoiuuls in Ain Shams Univetsny Bum Unit// Burnt,-2003-.Vol.29.M 3.-P,229-233,

157. Nikaido H Prevention of drug access to bacterial targets permeability Ьдтсгч and active efflux // Science-1994 -Vol.264.-P.382-388

158. Nikauio H, N&aido К, Harayama S. Identification* and characteti«)-Hon ofponns in Pseudomonas aeruginosa ti J Biol Chem.-J991.-Vol. 266.-P.770-779.

159. Ono Y. Pseudomonas aeruginosa I/ Nippon Rinsho 2002.-Vol. 60-P.2I50-2IS5.

160. Ortlepp SЛ. An improved boiling method for the preparation of bacterial plasmhI and phage DNA H Gene Anal. Techn.-1989.-Vol.fi, N 5 P 93 -96

161. Pai H, Kim J-W et at. Carbapenem resistance mechanisms oi Pseudomonas aeruginosa clinical isolates // Antimicrob. Agen» Chemother* 2001 -Vol.45.-P.480-484

162. Ramplul R , Pier O B Role of Pseudomonas aeruginosa mucoid exo-polysncchande in adherence io tracheal cells U Infect and Immun.-1985.- Vol ,47, N I .-P.M.

163. Ransio U , Arturson G. Hakanson L . Venge P Neutrophil granulocyte function in burned patiente // Abstract book 5-ih International Congress of Bum Injuries, Stockholm, Sweden-1978.P.58.

164. Rcmcnsnyder J. Astrozjmkova S. Bell L el al Progress in a Moscow children bum unit: a Joint Russian- American collaboration И Bunts.-1995,-Vol.21. -N 5-P 323-335.

165. Ricliard P., Le F., Chamoux С. Pseudomonas aeruginosa outbreak m a bum unit role of antimicrobials in the emergence of multiply resistant strains U J. Infecí Dis 1994-VoL170.-PJ77-383,

166. Rodrigue A , Qucnitn Y . Lazdunski Л el al Two component system in Pseudomonas aeruginosa, why so many'' HTrends Microbiol,-2000,-N 8 -P.498-504.

167. S hen Ping et al Plasmids study of Pseudomonas maliophilla // Acta Genet. Sin--1992- Vol-19. N 4.-P. 355-3612.40 Sheridan ILL. Ryan CM, Vin L M. et al. Death in bum unit- sterile multiple organ failure// Bums-l99$.-VoL24,N4-P307-3t I

168. Siegman-lgni Y., Ravona R . Primcrman H et al Pseudomonas aeruginosa bactcnemia an analysts of 123 episodes, winch particular emphasis of the effect of antibiotic therapy // Int. J. Infect. Dis.-l99S.-N 2-P.21 1-215.

169. Stevens E.I. Ryan CM, Friedberg J.S. et al. Л quantitative model of invasive Pseudomonas Infection on bum mjuty // J. Burn Care Rehab.-1994-VoLl^N 1-P. 232-235.

170. Storz G , Tanagha LA, Fan SB el at. Bacterial defenses against oxidative stress ti Trends Genet.-1990.-Vol.6.-P. 363-368.

171. Vcntirt S. Ilaberal M . Allay C, Bacterial function of neutrophils in burned patients I)'Abstract book 5-th International Congress on Bum Injuries, Stockholm, Sweden.-1978.-P.59.

172. Wang W., Yuan K., Ni V. Sun Z- Micro ■ ecological investigation of bum wound infection .'7 Zhonghun Shoo Shang Za Zhi 2001.-Vol. 17, N 2.-P.S0-82.

173. Washburn M P., Yates J.R. Analysis of the microbial protcomc II Cur-tent Opinion. Microbiol 2000 -N 3,-292 -297

174. Weber К. Osbom V, Biol Chem.l969.-Val.244, N16.- P 4406

175. Whimack E. Sepsis /,' Mechanism of Microbial Disease. 2 cd. Scheelitcr M . Medoff G. Eiscnstci В J.- 1993 Ballimor - 973 p.

176. Winkler M. Elbe G , Müller F E, et al Epidemiologie stiubesof the microbial colonization of severely burned patients ff Zentralbl Bactcriol Microbiol llyg IB).-1987 -Vol 184,N 3.-P.304-320.

177. Woodford N. Palepou M.F, Rabun O S. et al Carbapcnemase- producing Pseudomonas aeruginosa in UK /I Lancet -1998,-Vol.352 -P 546-547.