Влияние фотодинамического воздействия и его отдельных составляющих на морфофизиологические и биохимические показатели Drosophila melanogaster тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.01, кандидат биологических наук Колтаков, Алексей Михайлович

• Колтаков, Алексей Михайлович
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Колтаков, Алексей Михайлович

Введение.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. ф 1.1 Общая характеристика фотобиологических реакций, инициируемых видимым светом.

1.2 Деструктивные фотобиологические реакции. Фотосенсибилизированные процессы. Фотодинамическое действие видимого света.

1.3 Активные формы кислорода.

1.4 Фотодинамическое повреждение биомолекул клетки.

1.4.1 Повреждения белков.

1.4.2 Повреждения липидов.

1.4.3 Повреждения нуклеиновых кислот.

1.5. Прямое фотодинамическое повреждение клеточных органелл.

1.5.1. Повреждения ядра и наследственного аппарата.

• 1.6. Летальные и ингибирующие эффекты ФД воздействия на культивируемые клетки и на одноклеточные организмы.

1.7. Деструктивные ФД процессы в тканях и органах многоклеточных организмов. Летальные эффекты ФД воздействия на сложные многоклеточные организмы.

1.8. Метод ФДТ и его клиническое применение.

1.9. Влияние ФД действия на процессы реализации наследственной информации.

2.МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1 Объекты исследования. 2.2. Характеристика применяемого воздействия и дозиметрия.

2.3.Методы исследования.

2.3.1. Измерение морфофизиологических признаков.

2.3.2. Определение общего содержания РНК.,.

2.4. Методы статистической обработки результатов.

3.РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1 Влияние ФДД на показатель выживаемости/смертности особей Drosophila melanogaster.

3.2 Влияние темнового воздействия ФС «Фотогем» и облучения красным светом (633±15 нм) на выживаемость Drosophila melanogaster.

3.3 Половые различия выживаемости особей Drosophila melanogaster, подвергнутых ФДД.

3.4 Влияние ФДД на показатели плодовитости Drosophila melanogaster.

3.5 Влияние темнового воздействия фотосенсибилизатора «Фотогем» на плодовитость Drosophila melanogaster.

3.6 Влияние облучения красным светом (633±15 нм) на плодовитость Drosophila melanogaster.

3.7 Влияние ФДД на соотношение полов в потомстве первого поколения Drosophila melanogaster.

3.8 Влияние отдельных компонентов ФДД на соотношение полов в потомстве первого поколения Drosophila melanogaster.

3.9 Влияние ФДД на массу тела (F] - особей) Drosophila melanogaster.

3.10 Влияние темнового воздействия ФС «Фотогем» на массу тела (Fj — особей) имаго Drosophila melanogaster.

3.11 Влияние облучения красным светом (633±15нм) на массу тела (Fj -особей) имаго Drosophila melanogaster.

-3.12 Влияние ФДД на содержание РНК в теле Drosophila melanogaster

4.0БСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

5. ВЫВОДЫ. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние фотодинамического воздействия и его отдельных составляющих на морфофизиологические и биохимические показатели Drosophila melanogaster»

Актуальность темы исследования:

Фотодинамические (ФД) процессы являются разновидностью фотобиологических процессов, протекающих с участием молекул фотосенсибилизатора (ФС). В ходе этих реакций происходит поглощение света молекулами хромофора-сенсибилизатора с последующей генерацией активного синглетного кислорода ('Ог), повреждающего биологические структуры (Конев, Волотовский, 1979). ФД процессы достаточно широко распространены в природе (Румбаль, 2000). Некоторые патологические состояния человека, например, различные виды порфирии и фотодерматозов, связаны с повышением уровня ФД процессов в организме из-за нарушений метаболизма или вредных внешних воздействий ( Идельсон, 1980).

Значение изучения закономерностей ФД процессов связано также с тем, что в клинической ' практике в последнее время прлучили широкое распространение методы направленного фотодинамического повреждения клеток, объединяемые под названием фотодинамическая терапия - ФДТ (Румбаль, 2000; Плужников и др., 2002). ФДТ является современным эффективным щадящим методом лечения злокачестренных опухолей различной локализации (Странадко и др., 2002), а также широко применяется для терапии ряда неонкологических заболеваний, например, гнойных, длительно незаживающих ран, трофических язв, псориаза, ревматоидного артрита и др. (Гейниц и др., 2002). Кроме того, ФД воздействие, лежащее в основе ФДТ, является базовым механизмом для метода флуоресцентной диагностики, также широко применяемой в клинической практике (Кулаев, Альмяшев, 1999; Велыиер и др., 1999; Шикунова и др., 2002). ФДТ является фотохимиотерапией, т.к. лечебный эффект осуществляется за счет повреждающего ФД действия на неопластические клетки двух основных компонентов - светового излучения и фотосенсибилизатора (ФС), которые при взаимодействии инициируют свободно-радикальные фотохимические реакции, вызывающие деструкцию клеток (Пасс, 1993). Основным результатом и целью применения ФДТ является интерфазная гибель клеток патологических очагов или их репродуктивная гибель.

Следовательно, среди всех возможных биологических эффектов фотодинамического действия (ФДД) основное практическое значение приобретает изучение его деструктивно-ингибирующего влияния на основные морфофизиологические показатели объекта. Такое изучение даёт возможность более глубокого понимания механизмов ФДД, закономерностей его влияния на основные показатели на разных уровнях организации. Важное значение для возможной оптимизации схем и методов ФДТ имеет оценка удельного веса каждого из двух компонентов ФДТ в конечном биологическом эффекте. Актуальной проблемой представлялось также изучение фотоповреждающих (ФП) эффектов ФДТ с использованием доступного и хорошо изученного в генетическом отношении объекта — Drosophila melanogaster. Предполагается, что именно эти его особенности позволят в сравнительно короткие сроки исследовать механизмы и закономерности действия ФДТ ца разных уровнях организации живого.

Цели и задачи исследования:

Целью настоящей диссертации является изучение влияния комплексного ФД воздействия и его отдельных компонентов на ряд морфофизиологических и биохимических показателей Drosophila melanogaster, определение возможности использования данного биологического вида в качестве модельного тест - объекта для сравнительной оценки эффективности различных фотосенсибилизаторов и вариантов сочетаний компонентов ФДД. Для реализации поставленной цели были решены следующие основные задачи:

1. Изучение комплексного ФД действия и действия его отдельных компонентов в дозах, входящих в диапазон используемых в клинической практике на организм Drosophila melanogaster с использованием критерия выживаемости (жизнеспособности) и на показатель плодовитости экспериментальных особей.

2. Исследования результатов ФД действия и действия его отдельных компонентов на соотношение полов в потомстве подвергнутых воздействию особей и их массу тела.

3. Изучение влияния ФД действия на общее содержание РНК в теле имаго Drosophila melanogaster.

4. Сравнение биологической эффективности отдельных компонентов ФДД и их сочетанного действия, выраженной в величинах изменения выбранных критериев анализа.

5. Оценка влияния половых различий экспериментальных особей Drosophila melanogaster на степень проявления изучаемых в работе признаков выживаемости, массы тела (Fi - особей), общего содержания РНК под влиянием ФДД и его отдельных компонентов.

Научная новизна:

Предложена методика оценки биологической эффективности ФД воздействия на организменном и молекулярно - генетическом уровне ррганизации путем изучения его влияния на ряд морфофизиологических и биохимических признаков Drosophila melanogaster. Произведено сравнение роли каждого отдельного компонента ФДД в реализации конечного биологического эффекта. Установлено влияние половой принадлежности экспериментальных особей на степень резистентности к повреждающему (ингибирующему) ФД воздействию. Установлено влияние деструктивного ФД действия на процессы размножения, передачи и реализации наследственной информации у многоклеточного эукариотического организма.

Впервые изучено:

1. Дозовые зависимости влияния ФДД с ФС «Фотогем» и его отдельных компонентов на показатель выживаемости (жизнеспособности) Drosophila melanogaster.

2. Влияние различных доз ФДД, а также красного света (633±15 нм, 0,3 л

Вт/см ) и темнового действия разных концентраций фотосенсибилизатора «Фотогем» на показатели плодовитости, соотношения полов особей в потомстве подвергнутых ФД действия родительских форм и средней массы тела Fj — особей имаго Drosophila melanogaster.

3. Действие разных степеней ФДД на общее содержания РНК в теле особей имаго избранного модельного объекта.

4. Взаимосвязь между величинами изменения указанных морфофизиологических и биохимических показателей Drosophila melanogaster при различных дозировках ФДД и соответствующими значениями выживаемости этого модельного объекта.

5. Влияние половой принадлежности экспериментальных особей Drosophila melanogaster на степень их естественной резистентности к повреждающему ФД действию.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. ФД действие с фотосенсибилизатором «Фотогем» приводит к снижению выживаемости особей Drosophila melanogaster при применении концентраций ФС в трофическом субстрате 5,2 мг/мл и более в сочетании с экспозиционными дозами облучения красным светом 36,0 Дж/см2 и более. Повышение дозы ФДД, связанное с увеличением численного значения одного или обоих его компонентов сопровождается усилением летального эффекта.

2. ФДД оказывает угнетающий эффект на морфофизиологические показатели как относящиеся непосредственно к подвергнутым экспериментальному влиянию особей дрозофилы, например, плодовитость, так и характеризующие их потомство, такие как соотнощение полов, масса тела имаго. Конкретная величина изменения указанных показателей зависит от дозы ФД воздействия.

3. ФДД приводит к снижению общего содержания РНК в теле особей Drosophila melanogaster при применении концентрации «Фотогема» в трофическом субстрате 11,5 мг/мл и более и экспозиционнрй дозы облучения 36,0 Дж/см и более.

4. Половая принадлежность экспериментальных цсобей Drosophila melanogaster влияет на их устойчивость к деструктивно — ингибирующему влиянию ФДД, т.е. на величины изменения основных морфофизиологических и биохимических показателей. При этом резистентность самок модельного объекта к повреждающему ФДД во всех случаях выше, рем у самцов, что выражается в меньшем снижении указанных показателей у женских особей в сравнении с мужскими при идентичных дозах ФДД.

5. Совместное, комплексное действие компонентов ФДД приводит к значительно более выраженному уменьшению основных морфофизиологических показателей Drosophila melanogaster: выживаемости, плодовитости, средней массы тела потомства, чем их отдельное влияние.

6. Различные варианты сочетания компонентов ФДД могут оказывать одинаковое ингибирующее действие на морфофизиологические показатели, если они вызывают идентичные изменения выживаемости. Величина деструктивных изменений морфофизиологических показателей у дрозофилы зависит только от количества первичных повреждающих ФД реакций в биообъекте.

Практическая значимость работы:

Предложенная методика изучения влияния ФДД на ряд морфофизиологических и биохимических параметров избранного модельного объекта — Drosophila melanogaster может успешно применяться для сравнения терапевтической эффективности различных ФС перед их клинической апробацией, а также различных режимов и способов проведения сеансов ФДТ, например, разных вариантов сочетаний основных компонентов ФД воздействия. Данная тест — система может способствовать уточнению методики клинического применения метода ФДТ.

Полученные в работе данные могут использоваться в учебном процессе в

ВУЗах при изучении радиобиологии неионизирующих излучений, фотобиологии у студентов биологических, экологических и сельскохозяйственных специальностей.

Предложенные методы ФД действия на насекомых могут быть использованы в сельском хозяйстве в качестве физико - химического способа борьбы с вредителями культурных растений.

Публикации работы:

Основные результаты; исследования, представленные в диссертационной работе, изложены в 8 публикациях.

Апробация работы:

Основные результаты исследований были доложены и обсуждены на Межрегиональной научно - практической конференции «Река Ока - третье тысячелетие» (Калуга, 2001 г.), на второй международной конференции «Неионизирующие электромагнитные излучения в биологии и медицине (БИО

- ЭМИ 2002)» (Калуга, 2002), на научно - практической конференции российских ученых «Актуальные аспекты лазерной медицины» (Москва -Калуга, 2002г.), на третьей международной конференции «Электромагнитные излучения в биологии (БИО - ЭМИ 2005)» (Калуга, 2005), на открытой научно

- практической университетской конференции преподавателей КГПУ им. К.Э. Циолковского (Калуга, 2006). Приведённые в диссертации результаты обсуждались на заседании теоретического семинара по вопросам радиобиологии неионизирующих излучений (1999 - 2005). Диссертация апробирована на расширенном заседании кафедры общей биологии КГПУ им. К.Э. Циолковского (2005 г.).

Структура и объем работы:

Диссертация изложена на 150 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов . и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы, содержащего 208 названий (в том числе 74 иностранных), приложения. Работа включает 31 рисунок и 9 таблиц.

Заключение диссертации по теме «Радиобиология», Колтаков, Алексей Михайлович

ВЫВОДЫ:

1. Фотодинамическое действие снижает выживаемость Drosophila melanogaster.

При этом гибель 50% (LD50) экспериментальных особей наблюдалась при сочетании концентрации фотосенсибилизатора «Фотогем» в трофическом

Г) субстрате 11,5 мг/мл и дозы облучения (А = 633 ± 15 нм) 150,0 Дж/см, а абсолютный летальный эффект при сочетании концентрации «Фотогема» 26,2

WW О мг/мл и дозы облучения красным светом 114,0 Дж/см .

2. Drosophila melanogaster может использоваться как удобный и доступный тест - объект для оценки деструктивного эффекта разных доз, режимов и способов фотодинамического действия (ФДД), сравнения эффективности различных фотосенсибилизаторов благодаря тому, что согласно установленным дозовым зависимостям значительная смертность у дрозофилы возникает при использовании доз облучения и концентраций сенсибилизатора в диапазоне (36 - 350 Дж/см2), сходном с используемым в клинической практике.

3. Выживаемость особей Drosophila melanogaster в определенном диапазоне доз фотодинамического действия, вызывающем снижение общей выживаемости до 70,3% - 22,9% от контрольного уровня, зависит от их половой принадлежности. При этом выживаемость самок при равных дозах воздействия всегда выше. Таким образом, можно сделать определенные предположения о механизме влияния фотодинамического действия, и о том какие половые различия обеспечивают большую резистентность самок к его повреждающему эффекту.

4. Фотодинамическое действие на Drosophila melanogaster угнетающе влияет на ряд морфофизиологических показателей их потомков в первом поколении - Fi — особей - численность популяции, массу тела, соотношение полов. Степень угнетения каждого из данных показателей пропорциональна дозе фотодинамического действия. Данные факты демонстрируют, что фотодинамическое действие оказывает влияние на органы и структуры, ответственные за передачу и реализацию наследственной информации. Это может способствовать уточнению его механизмов и свидетельствует о наличии у него отдаленных последствий и необходимости их изучения.

5. Фотодинамическое действие приводит к дозозависимому снижению общего содержания РНК в теле Drosophila melanogaster, предшествующего по времени угнетению морфофизиологических показателей. Это позволяет предположить, что одним из его последствий у дрозофилы является фотодинамическая деструкция молекул РНК, содержащихся в цитоплазме и снижение общего биосинтеза белка. Таким образом, биохимические показатели могут быть удобным индикатором степени деструктивного влияния фотодинамического действия.

6. Отдельные компоненты фотодинамического действия - темновое влияние фотосенсибилизатора в концентрациях более 42,0 мг/мл и облучение красным ф светом (Л = 633 ± 15 нм) в экспозиционных дозах более 200 Дж/см2 оказывают слабое угнетающее влияние только на показатели плодовитости и массы тела Drosophila melanogaster, но не оказывают действия на выживаемость и соотношение полов среди Fi - особей.

7. Совместное, комплексное влияние компонентов фотодинамического действия приводит к значительно более выраженному угнетению морфофизиологических показателей Drosophila melanogaster, чем их отдельное воздействие. Это свидетельствует о том, что снижение исследуемых показателей дрозофилы в экспериментах с использованием комплексного действия указанных компонентов обусловлено именно фотодинамическими процессами.

• ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ:

1. Предложенная методика с применением Drosophila melanogaster в качестве модельного объекта может быть использована для изучения и сравнения биологической эффективности различных ФС, режимов облучения и способов проведения сеансов ФДТ.

2. Полученные данные могут быть использованы в учебных курсах «Основы фотобиологии», «Основы радиобиологии», «Сельскохозяйственная радиология», «Генетика» и спец. курсах и практикумах при обучении по специальностям «Биология» и «Радиобиология». 3. Использованная методика может применяться в качестве физико-химического метода борьбы с насекомыми - вредителями сельского хозяйства.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Колтаков, Алексей Михайлович, 2006 год

1. Алесенко А.В., Пальмина Н.П. Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии.- М.: Наука, 1982. С. 84 — 100.

2. Алёшина Т.Е. Индуцированные низкоинтенсивным импульсным лазерным излучением (А,=890 нм) морфофизиологические и биохимические изменения в процессе развития организма: Автореф. дис. канд. биол. наук.-Калуга, 2001.- 23 с.

3. Арсланов Т.А. Оценка эффективности неионизирующего излучения крайне высоких частот на уровне некоторых биологических характеристик Drosophila melanogaster. Автореф. дис. канд. биол. наук.- Калуга, 2004. 24 с.

4. Беленикина Н.С. Исследование механизмов деструктивного и регуляторного действия оптического излучения на дрожжевые клетки. Автореф. дис. канд. биол. наук, М.: 1994.- 21 с.

5. Белишева Н.К., Мавринская Л.Ф., Свечникова Л.И. Цитогенетический эффект облучения личинок Drosophila melanogaster // Сб. Биологическое действие лазерного облучения.- Куйбышев: Изд-во КГУ. 1984.- С. 3-8.

6. Белов А.Д. Радиобиология. М.: Колос, 1999. 384 с.

7. Белоус Т.А., Франк Г.А., Соколов В.В. Морфологические изменения начального рака желудка при фотодинамической терапии // Российский• онкологический журнал.- 1997.- № 5.- С. 26-30.

8. Бердышев Г.Д., Голда Д.М., Зуй В.Д. Общая и молекулярная генетика.-Киев: Вища школа, 1984.- 239 с.

9. Блехман Г.И. Синтез белка в условиях стресса // Успехи современной биологии.- 1987-Т. 103.- Вып. З.-С. 340-350.

10. Блознелите Л., Пономарёв И.В. Эффективность фотодинамической терапии опухолей различной патологической структуры // Российский онкологический журнал.- 1997.-№4.- С. 18-21.

11. Брюсов П.Г., Матафонов В.А., Северцов А.Н. Фотодинамическая терапия при злокачественных опухолях // Вопросы онкологии.- 1994.- Т.Ю.-№№4-5-6.-С. 139-145. # 18. Вельшер JI.3., Стаханов M.JL, Виноградов А.В., Трутин А.И., Эскин

12. Владимиров Ю.А. Три гипотезы механизме действия красного (лазерного) света. // Эфферентная медицина./ Под ред. Чикина С.Л. М.: НИИ Физ. хим. медицины, 1994. - С. 23 - 35.

13. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах.- М.: Наука, 1972. 354 с.

14. Гаврилов Л.А., Гаврилова Н.С. Биология продолжительности жизни. 2-е изд. -М.: Наука.-1991.-280 с.

15. Гамалея Н.Ф., Михалкин И.А. Световая терапия опухолей с применением фотосенсибилизаторов // Экспериментальная онкология.- 1988.-№1.-Т10.- С. 9-16.

16. Гейниц А.В., Цыганова Г.И., Базантова J1.B,, Картусова JT.H. Актуальные проблемы лазерной медицины // Актуальные аспекты лазерной медицины. Материалы научно-практич. конф. Российских учёных Москва

17. Калуга, 3-5 октября 2002 года / Под ред. Гейница А.В., Цыгановой Г.И. Москва1. Калуга, 2002. С. 2-8.

18. Геодакян В.А. Дифференциальная смертность и норма реакции мужского и женского пола. Онтогенетическая и филогенетическая пластичность // Журн. общ. биологии. 1974. - Т.35. - №3. - С. 376 - 385.

19. Геодакян В.А. Эволюционная теория пола // Природа. 1991. - №8. - С. 60-69.

20. Геодакян В.А. Эволюционные хромосомы и эволюционный половой диморфизм // Изв. РАН. Сер. биол. 2000. - №2. - С. 133 - 148.

21. Гилберт С. Биология развития: в трёх томах / Пер. с англ.- М.: Мир,1993,- Т.1.-228 с.

22. Гилберт С. Биология развития: в трёх томах / Пер. с англ.- М.: Мир,1994, Т.2.-235 с.

23. Гладких С.П., Алексеев Ю.В., Полонский А.К. Молекулярно-биологические основы лазерной и фотодинамической терапии // Сб. Новые аспекты лазерной медицины и техники на пороге XXI века / научные труды ЛАН РФ № 5.- Москва-Калуга.- 2002.- С. 1-17.

24. Глинка М.И. Общая химия. Л.: Химия. - Ленингр.отд.- 1983. - 704

25. Грин Н., Стаут У., Тейлор Д. Биология: в 3-х тт. / Пер. с англ.- М.: Мир.- 1993. (Т.1-368 е., Т.2-325 е., Т.3-376 е.).

26. Гуринович Г.П., Лосев А.П. Применение порфиринов и хлоринов для исследования ФД действия оптического излучения / Под ред. А.Б. Рубина М.: Наука.- 1988.-231 с.

27. Даллакян Г.А. Рост популяции микроводорослей в условиях питательных сред, обогащённых синглетным кислородом // Известия Академии наук.- Серия биологическая.- №6.- 1998,- С. 751-754.

28. Дубинина Е.Е., Шугалей Н.В. Окислительная модификация белков // Успехи современной биологии.- 1993—Т.113-Вып. 1.-С. 71-82.

29. Детлаф Т.А. Безразмерные критерии времени развития зародышей, личинок и куколок дрозофилы и зародышей пчелы в таблицах нормального развития // Онтогенез.- 1995.- Т. 26.- №2.- С. 125-131.

30. Захаров С.Д., Иванов А.В. Светокислородный эффект в клетках и перспектива его применения в терапии опухолей // Квантовая электроника.-1999.- Т.29.- № 3.- С. 194-214. # 44. Захваткин Ю.А. Курс общей энтомологии. М.: Колос, 2001 376 с.

31. Иванов И.П. Влияние лазерного излучения на эмбриогенез дрозофилы // Кн. Биологическое действие лазерного излучения.- Куйбышев: КГУ.- 1984.-С. 19-22.

32. Идельсон Л.И. Лечение урокопропорфирии делагилом // Клиническая медицина.- 1980.- Т.58.- №5.- С. 61-72.

33. Измайлов Д.М. Колебательные изменения жизнеспособности и анализ механизмов старения популяции Drosophila melanogaster в ряду поколений в норме и после радиационного облучения. Автореф. дис. канд. биол. наук. — М.: 1993.-21 с.

34. Инге-Вечтомов С.Г. Генетика с основами селекции: Учеб. для биол. ® спец. ун-тов.- М.: Высш.шк., 1989.- 591 с.

35. Каплан М.А., Втюрин Б.М., Медведев B.C., Романко Ю.С., КлимановI

36. М.Е., Капинус В.Н. Опыт применения фотодинамической терапии в лечении первичного и рецидивного рака нижней губы // I Международная конференция

37. Лазерная и фотодинамическая терапия». Обнинск, 16-18 июня, 1999. Тезисы докладов. Под ред. Цыба А.Ф., Каплана М.А. Обнинск, 1999.- С. 27-28.

38. Каплан М.А., Мардынская В.П., Малыгина А.И., Бурмистрова Н.В.,

39. Каплан М.А., Романко Ю.А. ФДТ как новый радикальный метод лечения у больных с рецидивными опухолями «неудобной» локализации // Вопросы онкологии. 2000. - т.46. - №2. - С. 238.

40. Козлов В.И. Взаимодействие лазерного излучения с биотканями // Кн. Применение низкоинтенсивных лазеров в клинической практике / Под ред. Скобелкина O.K.- М., 1997.- С. 24-35.

41. Конев С.В., Волотовский И.Д. Фотобиология животной клетки.- JL: Наука, 1979.-324 с.

42. Конев С.В., Волотовский И.Д. Фотобиология.- Минск: Изд-во БГУ. -1979.-276 с.

43. Красновский А.А. Механизм образования и роль синглетного кислорода в фотобиологических процессах// Кн. Молекулярные механизмы биологического действия оптического излучения / Под ред. Рубина А.Б. М.: Наука.- 1988.- 231 с.

44. Крепак О.М., Языкова М.Ю. Влияние лазерного облучения на рост культуры // Кн. Биологическое действие лазерного излучения.- Куйбышев, КГУ.- 1984.- С. 39.

45. Кузьмичёв В.Е. Изучение действия инфракрасного низкоинтенсивного # лазерного излучения на различные стадии онтогенеза Apis mellifera и Drosophilamelanogaster. Дис.канд. биол. наук.- Калуга, 1997. 150 с.

46. Кулинский В.И., Колесниченко Л.С. Структура, свойства, биологическая роль и регуляция глутатионпероксидазы // Успехи современной биологии.- 1993.- Т.111.- Вып. 1.- С. 107-123.

47. Кулинский В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита // Соросовскийобразовательный журнал.- 1999.- №1.- С. 2-8.

48. Лаптев В.П. Экспериментальное обоснование возможности применения соединений ряда порфина в фотодинамической терапии опухолей. Автореф. дис. канд. биол. наук.- М, 1991.- 23 с.

49. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высш школа.- 1990.- 352 с.

50. Лозовская Е.Л., Каплунский Г.Д., Сапежинский И.И. Супероксиддисмутазная активность и фотосенсибилизирующие свойства 2,5 — дигидроксибензолсульфоната//Биофизика. 1990. - 35. - №6. - С. 912-916.

51. Матвеева Н.П., Каплан М.А., Капинус В.Н., Романко Ю.С. Изменение лабораторных показателей в процессе фотодинамической терапии // Сб. I

52. Международной конференции «Лазерная и фотодинамическая терапия». Обнинск, 16-18 июня, 1999. Тезисы докладов. Под ред. Цыба А.Ф., Каплана М.А. Обнинск, 1999. С. 23 - 24.

53. Медведев Н.Н. Практическая генетика.- М.: Наука. — 1966.- 238 с.

54. Меерович И.Г. Фотодинамическая эффективность авидин-биотиновой системы, включающей биотинилированные антитела и производные фталоцианиновых ФС. Автореф. дис. канд. биол. наук.- М, 2001.- 19 с.

55. Миронов А.Ф. Фотосенсибилизаторы на основе порфиринов и родственных соединений // Итоги науки и техники. Серия «Современные проблемы лазерной физики».- Т.З.-М.: ВИНИТИ.- 1990.- С. 5-63.

56. Миронов А.Ф. Фотодинамическая терапия рака — новый эффективный метод диагностики и лечения злокачественных опухолей // Соросовский образовательный журнал.- № 8.- 1996.- С. 32-40.

57. Мыльников С.В. Динамика эмбриональной смертности в инбредных линиях дрозофилы // Онтогенез. 1991. — Т.22. — №1. — С. 93 - 95.

58. Ноздрачев А.Д., Поляков Е.Л., Лапицкий В.П., Осипов Б.С., Фомичёв Н.И. Анатомия беспозвоночных: пиявка, прудовик, дрозофила, таракан, рак. / Сер «Учебники для вузов. Специальная литература».- СПб.: Лань. 1999. -320с.

59. Объекты биологии развития. / Под ред. Детлаф Т.А. М.: Наука. 1975. -579 с.

60. Островский М.А., Фёдорович И.Б. Фотосенсибилизированное # окисление как механизм повреждающего действия света на сетчатку глаза //

61. Химическая физика.- 1996.- 15.- №1.- С.73-80.

62. Павлов А.Н. Воздействие электромагнитных излучений на жизнедеятельность: Учебное пособие. М.; Гелиос АРВ, 2002. — 354 с.

63. Пасс Х.И. Фотодинамическая терапия в онкологии: механизмы и клиническое применение // Физическая медицина.-1993.-T.3.-№3-4.-C. 5-22.

64. Печерских Е.В., Шитова JI.A., Якубовская Р.И., Деркачёва В.М.,

65. Плетнёв С.Д., Девятков Н.Д., Беляев В.П., Абдразинов М.Ш. Газовые лазеры в экспериментальной и клинической онкологии.- М.: Медицина.- 1978.-С. 72-75.

66. Полтораков А.П. Количественный анализ кривых выживания на основе теории рецепторов // Цитология. — 1997. Т.39. - №6. - С. 502 - 503.

67. Полтораков А.П. Анализ кривых выживания и гибели организмов с # помощью модели витальных рецепторов // Журн. общ. биологии. 1999. — Т.60.- №6. С. 596-621.

68. Полуэктова Е.Н. Митрофанов В.Г. Бурыченко Г.М. Дрозофила Drosophila melanogaster II Объекты биологии развития.- М: Наука.- 1975.- С. 128-146.

69. Посудин Ю.И., Лобода И.П., Лобода В.И. Фотодинамическая диагностика и терапия злокачественных опухолей // Клиническая хирургия.- № 5.- 1982.- С. 43-45.

70. Проблемы генетики в исследованиях на дрозофиле. — Новосибирск: Наука, 1977.-278 с.

71. Радиобиология. Биологическое действие ионизирующих излучений. / ® Итоги науки. Биологические науки. 1. Под ред. Кузина A.M. М.: Изд — во

72. Академии Наук СССР. 1957. - 435 с.

73. Разумовский С.Д. Кислород элементарные формы и свойства,- М.: Химия.- 1979.-304 с.

74. Рубин А.Б., Фрайкин Г.Я. Первичные молекулярные механизмы фотобиологических процессов и деструктивное действие оптического излучения // Успехи современной биологии.- 1987.- Т. 103,- Вып. 3.- С. 323-340

75. Румбаль Я.В. Изучение эффективности фотодинамического действия сенсибилизаторов, используемых в ФДТ, на клеточных моделях: Автореф. дис. канд. биол. наук.- М, 2000.- 20 с.

76. A.В., Цыгановой Г.И. Москва-Калуга, 2002. С. 357 359.

77. Сатарова Н.А., Шапошникова С.В., Блехман Г.И. Влияние дефицита влаги на синтез пре-мРНК у проростков пшеницы // Физиология растений.-1986.- Т.ЗЗ.- №4.- С. 731.

78. Себрант Ю.В., Троянский М.П. Лазеры и живая ткань. М.: Знание.- 1972.- С. 3-30.

79. Сапежинский И.И. Сенсибилизированное фотоокисление белков и других веществ. Возможное значение этих процессов в фотобиологии. / Кн. Молекулярные механизмы биологического действия оптического излучения / Под ред. Рубина А.Б.- М.: Наука.- 1988. 231 с.

80. Синяков B.C., Хайдакова М.И. К вопросу о глубине проникновения релеевских волн, возбуждаемых в живых тканях. // Актуальные проблемы заболевания и выздоровления. -М.: 1983, С. 154 - 156.

81. Скобелкин O.K., Козлов В.И., Гейниц А.В., Дашлин Н.А., Дербенёв

82. B.А. Применение лазерных хирургических аппаратов «Ланцет» в медицинской практике / Пособие для врачей.- М.:1996.- С. 12-21.

83. Смирнов B.C. Квази-энергия и правило поверхности // Применение количественных методов в экологии. Сб. статей УНЦ АН СССР.- Свердловск.-1979.-С. 117-124.

84. Странадко Е.Ф. Первый опыт фото динамической терапии рака в России // Сб. Лазерная и магнитная терапия в экспериментальных и клинических исследованиях. Тез. Докладов Ч.1.- Обнинск.- 1993.- С. 69-71.

85. Странадко Е.Ф. Фотодинамическая терапия // Сб. Применение низкоинтенсивных лазеров в клинической практике / Под ред. Скобелкина O.K. -М.:- 1997.-С. 173-185.

86. Странадко Е.Ф. Механизм действия фотодинамической терапии // Российский онкологический журнал.- 2000.- №4.- С. 52-56.

87. Узденский А.Б., Жаворонкова А.А., Миронов А.Ф., Кузьмин С.Г. Исследование фотодинамического действия новых фотосенсибилизаторов наизолированную нервную клетку // Известия АН Сер. Биологическая.- 2000.-№2.- С. 230-238.

88. Ушаков Б.П. О классификации приспособлений животных и растений и о роли цитоэкологии в разработке проблем адаптации // Проблемы цитоэкологии животных. Сб. научн. тр. JL: Наука, Ленингр. отд., 1963. — С. 5 -21.

89. Фрайкин Г.Я., Рубин А.Б. Влияние ближнего ультрафиолетового света на микроорганизмы // Известия АН СССР. Сер. Биологическая.- 1980.-№3.- С. 370-380.

90. Файн С., Клейн Э. Биологическое действие излучения лазера. / Пер. с англ.- М.: Атомиздат.- 1968.- С. 42-42.

91. Филлипович Ю.Б., Егорова Т.А., Севастьянова Г.А. Практикум по общей биохимии.-М.: Просвещение.- 1982.- 311 с.

92. Филлипович Ю.Б. Основы биохимии. М.: Высш. школа.- 1985.-503с.

93. Черницкий Е.А., Воробей А.В. Сенсибилирируемые фотопревращения клеток // Успехи современной биологии.- 1986.- Т. 101.- Вып. 1.- С. 100-119.

94. Чернова Г. В., Каплан М. А., Арсланов Т.А Некоторые особенности реагирования модельных объектов на ЭМИ КВЧ ММ-диапазона // Изучение природы бассейна реки Оки. Тез. докл. межрегион, научн. практич. конф.

95. Река Ока-третье тысячелетие», Калуга, 21-25 мая 2001.- Калуга: Изд-во КГПУим. К.Э. Циолковского. -2001.- С. 214-218.

96. Чиссов В.И., Соколов В.В., Филоненко Е.В., Карпова Е.С., Телегина JI.B. //Российский онкологический журнал.- 1998,- №4.- С. 3-12.

97. Шуйский Н.Н. Теоретические основы и развитие лазерной терапии. / Кн. Биологическое действие лазерного излучения.- Куйбышев,-1984.- С. 137143.

98. Эндебера О.П. Оценка биологической эффективности инфракрасного низкоинтенсивного импульсного лазерного излучения на уровне характеристик приспособленности у Drosophila melanogaster. Автореф. дис.канд. биол. наук.-Обнинск, 1996.- 20 с.

99. Ярмоненко С.П. Радиобиология человека и животных. М.: Высшая школа. 2004. - 549 с.

100. Altschuler М., Moscarenhas J.P. Heat shock // Bact. Man. Meet., Cold Spring Harbor, 1982, P. 321.

101. Bellnier D. A., Dougherty Т. I. Membrane lysis in Chinese hamster ovary cells treated with hematoporphyrin derivative plus light // Photochem. and Photobiol., 1982.-36.- P. 43-47.

102. Ben Amotz A., Shaish A., Avron M. Mode of action of the massively accumulated P-carotine of Dunaliella bardawii in protecting the alga against damage by excess irradiation. // Plant. Physiol. - 1989. - 91, №3, - P. 1040 - 1043.

103. Ben-Gur E., Oetjen J., Holowitz B. Silicon phthalacyanine Pc 4 and red light canses apoptosis in HIV-infected cells // Photochem. and Photobiol., 1997.- 65.-№3.-P. 456-460.

104. Berg K., Ma L.W., Moan J. Lysosomes and microtubules as tagets for P.C. T. Program and Abstr. 24th Annu.Meet.mer. Soc. Photobiol., Atlanta., Ga., June 1520 1996 // Photochem. and Photobiol., 1996.- 63, spec. Issue.- P. 79.

105. Berthianme F., Reiken S.R., Toner M., Tompkins R.G., Yarmush M. L. Anti-body targeted photolysis of bacteria in vivo // Biotechnology.-1994.- 12.- № 7, P. 703-706.

106. Bertoloni G., Lauro F.M., Cortella G., Merchat M. Photosensitizing activity of hematoporphyrin on staphylococcus aureus cells // Biotin Biophys. Acta.- 2000.-Jul.3.- 1475 (2).-P. 169-174.

107. Berus M.W., Bewley W., Sun C.H., Templin P. Free electron laser irradiation at 200 nm affects DNA synthesis in living cells // Proc. Nat. Acad. Aci. USA.- 1990.- 87.-№ 7.-P. 2810-2812.

108. Brandi G., Cattabeli F., Albano A., Cantoni O. Role of hydroxyl radicals in Escherichia coli killing induced by hydrogen peroxide // Free Radical Res. Commun. 1989. - 6, №1 - P.47 - 55.

109. Brun A., Sandberg S. Mechanisms of photosensitivity in porphyric patients with special emphasis on eritropoetic protoporphyria // J. Photochem. Photobiol., В.: Biol.- 1991.- 10.- P. 285-302.

110. Bulychev A.A., Vredenberg W.J. Enhancement of the light-triggered electrical response in plant cells following their de-energization with uncouplers // Physiol. Plant.- 1995.- 94.- №i. p. 64-70.

111. Cai Y. — S., Xu D., Mo X. Clinical, pathological and photochemical studies of laser injury of the retina // Health Phys. 1989. - 56, №5. p. 643 - 646.

112. Christian S., Gulliana M. New trends in photobiology (invited Review). Photosensitisation of mitochondria. Molecular and cellular aspects // J. Photochem. Photobiol.- B.:Biol.- 1990.- №5.- P. 133-150.

113. Cincotta L., Szeto D., Lampros E., Hasan Т., Cincotta A.H., Benzophenothiazine and benzoporphyrin derivative combination phototherapy effectivety eradicates large murine sarcomas // Photochem. and Photobiol.- 1996.-63.-№2.- P. 229-237.

114. Dahi T. A. Direct exposure of mammalian cells to pure exogenous singlet oxygen (*02) // Photochem. and Photobiol.- 1993.- 57.- № 2.- P. 248-254.

115. Daniell M.D., Hill J.S. A history of photodinamic therapy // Aust. N. Z. J. Surg.- 1991.-61.- P. 340-348.

116. Di Mascio P., Kaiser S., Sies H. Lycopene as the most efficient biological carotinoid singlet oxygen quencher // Arch. Biochem. and Biophys. 1989. — 274. -№2.-P. 532-538.

117. Duran N., Marcucci M.C, Gatti M. S. V., Leite L.C.C. Different lethal effects by enzyme — generated triplet indole-3-aldehyde in different Escherichia coli strains // J. Photochem. and Photobiol. B. 1990 4. - №4. - P. 371 - 378.

118. Evensen J. F. Moan I. Photodinamic action and chromosomal damage: a comparative study of hematoporphyrin derivative (HPD) with light and X-irradiation // J. Cancer. 1982.- 45.- P. 456-465.

119. Foote C.S. Definition of Type 1 and Type 2 photosensitized oxidation // Photochem. and Photobiol. 1991. - 54.- P. 659.

120. Gomer С J. DNA damage and repair in CHO cells following hematoporphyrin photoradiation//Cancer Lett.- 1980.- 11.- P. 161-167.

121. Hahn K.A., Panjehpour M., Li X. Fluence-dependent induction of micronuclei by aluminum phthalocyanine tetrasulfonate-mediated photodinamic• therapy // Photochem. and Photobiol.- 1996.- 63.- № 1.- P. 117-122.

122. Halliwell В., Aruoma О J. DNA damage by oxygen-derived species: its meckanism and measurement in mammalian systems // FEBS Lett.- 1991.- 281.- № 1-2.- P. 9-19.

123. Haseloff R. F., Ebert В., Roeder B. Generation of free radicals by photo excitation of pheophorbide a, haematoporphyrin and protoporphyrine. // J. Photochem. and Photobiol. 1989. 3. - №4. - P. 593 - 602.

124. He D., Taniuchi S., Sun C.H., Berus M.W., Cardiff R.D. The monoclonal antibody UCD/AB 6.01 conjugated to photosensitizers attaches to and photoinactivates epithelian tumor cells // Antibody, Immunoconjudgates and Radiopharm.- 1990.-3.-№ 3.-P. 199-211.

125. Henderson B.W., Donovan J.M. Release of prostoglandin E2 from cells by photodynamic treatment in vitro // Cancer Res.- 1989.- 49.- № 24.- PT.-l.- P. 68966900.

126. Kessel D. Sites of photosensitization dy derivatives of hematoporphurin // Photochem. Photobiol.- В.: Biol.- 1986.- 44.- P. 489 493.

127. Kessel D., Sun H.H. Enhansed responsiveness to photodynamic therapy-induced apoptosis after mitochondrial DNA depletion // Photochem. Photobiol.-1999.- Dec., 70 (6).- P. 937-940.

128. Kim C. S., Jung J. Inactivation of the respiratory chain in plant mitochondria by visible: The primary target for photodamage and endogenous photosensitizing chromophores // J. Photochem. and Photobiol.- В.- 1995.- 29, № 2-3.-P. 135-139.

129. Kochevar Irene E. Cytotoxicity and mutagenicity of excimer laser• radiation // Lasers. Surg, and Med. 1989. 9. - №5. - P. 440 - 445.

130. Korbelik M., Dougherty G.J. Photodynamic therapy mediated immune response against subcutaneous mouse tumors // Cancer Res. — 1999. 59. - №8. — P.1941 -1946.

131. Korutowski W., Girotti A. W. Singlet oxygen adducts of cholesterol: photogeneration and reductive turnover in membrane systems // Photochem. and Photobiol.- 1999.- Oct, 70 (4).- P. 484-489.

132. Laustriat G. Molecular mechanisms of photosensitizing // Biochemie.-1986.- 68.- P. 771-778.

133. Liang H., Do Т., Kasravi S., Aurasteh P., nguang A., Wang Z., Berns M.W. Chromosomes are target sites for photodinamic therapy as demonstrated bysubsellular laser microirradiation // J. Photochem. and Photobiol.- В.- 2000.- Feb, 54 (2-3).-P. 174-184.

134. Luna M.C., Ferrario A., Rucker N., Gomer C.J. Osolation snd initialcharacterization of photofrin mediated PDT resistant RIF tumor cell strains // Free Radic. Biol, and Med. 1990.- Supp.- № 1.- P. 81.

135. Midden W. R., Dahl T. A., Hartman P. E. Cytotoxicity but not mutagenecity in bacteria with exernally generated singlet oxygen // Spie Vol. 847. New directions in Photodynamic therapy. 1987. - P. 145 - 148.

136. Moan J., Waksvic H., Cristensen T. DNA singlet-strand breaks and sister chromatid exchanges induced by treatment with hematoporphyrin and light or by x• rays in human NHIK 3025 cells//Cancer Res.- 1980.-40.-P. 2915-2918.

137. Nir U., Ladan H., Malik Z., Nitzan Y. In vivo effects of porphurins on bacterial DNA // J. Photochem. Photobiol.- В.: Biol.- 1991.- 11.- P. 295-306.

138. Paiva M. В., Saxton R. E., Graeber L. P., Jongewoard N., Eshraghi A. A., Suh M.J., Paek W. H., Castro D. J. Improved photochemotherapy of malignant cells with daunomycin and the KTR laser // Laser Surg, and Med.- 1998.- 23.- №1.- P. 3339.

139. Pardue M. L., Scott M. P., Storti R. V., Lenguel J. A. Development and neurobiology of Drosophila. N.Y.:Plenumpress. 1980.- P. 31.

140. Peak J. G., Peak M. J. Induction of slowly developing alkali-ladile sites in human P3 cell DNA by UVA and blue and green-light photens: Action spectrum // J. Photochem. and Photobiol. - 1995. - 61.- №5.- P. 484-487.

141. Piette J. Biological conserquences associated with DNA oxidation mediated by singlet oxygen // J. Photochem. and Photobiol.- В.- Biol.- 11.- 1991.- P. 241-260.

142. Plartley J.A., Forrow S., Reszkak L., Lown J.W. Photosensitalisation by antracenedione anticancer agents // Int. J. Radiat. Biol. 1989 - 55. - №5. -P. 885 -886.

143. Pobler J.P. Photooxidation of cell membranes using eosin derivatives that locate in lipid or protein to study the role diffusible intermediates. // J. Photochem. and Photobiol.- 1989.-50.- №1.- P. 55-68.

144. Rafalowska U., Liu C.-J., Floyd R.A. Peroxidation induced changes in synaptosomal transport of dopamine and y-aminobutyric acid // Free Radic.Biol. and Med. 1990. - Suppl.№l. - P. 485 - 492.

145. Reveilland I., Niedzwiecki A., Bensch K., Fieming J.E. Expression of bovine superoxide dismutase in Drosophila melanogaster augments resistance to oxidative stress // Mol. and Cell Biol. 1991. - V. 11. - P. 632 - 640.

146. Rice L., Wainwright M., Phoenix D.A. Phothiazine photo sensitizers. III. Activity of methylene blue derivatives against pigmented melanoma cell lines // J. Chemother.-2000.-12.- №1.-P. 94 104.

147. Sandberg S., Romso I. Porphypin-sensitized photodynamic damage of isolated rat liver mitochondria // Biochem. Biophys. Acta.- 1980.- 593.- P. 187-195.

148. Schnitzhofer G. M., Krammer B. Photodynamic treatment and radiotherapy: combined effect on the colony-forming ability of V 79 Chinese hamster fibroblasts // Cancer Lett.- 1996.- Nov.- 12.- 108 (1).- P. 93.-99.

149. Takahama U., Sorata Y., Jan C. Y., Kimura M. Supression of photosensitized hemolysis by quercetin and promotion of the suppression by ascorbat• // Med., Biochem., and Chem. Aspects Free Radicals Res., Kyoto, 9-13 apr., 1988.

150. Vol. 1.- Amsterdam etc.- 1989.- P. 481-484.

151. Todd G.W. Water deficit and plant growth. V.3 N.Y.: Acad. Press. 1972. - P. 177.

152. Tseng M.T., Schuschke D. S., Reed M. W. R., Harty J. I., Wieman T. J., Fingar V. H. The influence of photodynamic therapy on the ultrastructure of the normal rat bladder // J. Photochem. and Photobiol.- 1991.- 59.- № 3-4.- P. 295-305.

153. Tudge S. H., Kaye A. H., Hill J. S. Modulation of light delivery in photodynamic therapy of brain tumors // J. Clin. Neurosci.- 1999.- 6.- № 3.- P. 227232.

154. Singlet molecular oxygen quenching by saturated and unsaturated fatty acids and by cholesterol // Photochem. and Photobiol.- 1989. 50. - №3. - P. 321 - 325.

155. Volden G., Christensen Т., Moan J. Photodynamic membrane damage of hematoporphyrin derivative treated HIK 3025 cells in vitro // Photochem. Photobiol.-1981.-3.- P. 105.

156. Warner W. G., Wei R. R., Kornhauser A. Oxidative damage to cellular DNA and RNA accompanying phototoxicity in vitro // Photochem. and Photobiol.-1994.- 59.- spec. Issue. P. 30-31.

157. Yamamoto К. K., Pellegrini M. Ribosome subunit to polysome ratios affect the synthetics of rRNA in Drosophila cells // Biochemistry. 29.- № 50.- P. 11029• 11032.

158. Young S., Bolton P., Dyson M., Harvey W., Diamatopoulos C. Macrophage responsiveness to light therapy // Lasers Surg, and Med. 1989, 9 №5. -P. 437-505.