Влияние 13-цис-ретиновой кислоты на пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов крыс тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат биологических наук Жучков, Сергей Александрович

• Жучков, Сергей Александрович
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Жучков, Сергей Александрович

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Строение интерфолликулярного эпидермиса.

1.1.1. Кератиноциты.

1.1.2. Меланоциты.

1.1.3. Клетки Лангерганса.

1.1.4. Клетки Меркеля.

1.1.5. Клетки Гринстейна.

1.1.6. Лимфоциты.

1.1.7. Эпидермальная пролиферативная единица.

1.2. Ретиноиды, их метаболизм и влияние на морфогенез кератино-цитов интерфолликулярного эпидермиса.

1.2.1. Фармакологические свойства ретиноидов.

1.2.2. Влияние ретиноидов на морфогенез кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы.

2.1.1. Животные.

2.1.2. Субстанция.

2.2. Методы.

2.2.1. Морфологические и морфометрические методы исследований.

2.2.2. Иммуноморфологические методы исследований.

2.2.3. Методы обработки цифровых изображений, увеличение.

2.3. Статистическая обработка экспериментального материала.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Изучение состояния популяции кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса у интактных крыс.

3.1.1. Гистологическое и морфометрическое исследование интерфолликулярного эпидермиса.

3.1.2. Иммуногистологическое исследование пролифера-тивной активности кератиноцитов.

3.1.3. Иммуногистологическое исследование процессов дифференцировки кератиноцитов.

3.2. Изучение состояния популяции кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса при накожном нанесении растворов 13цРК.

3.2.1. Гистологическое и морфометрическое исследование интерфолликулярного эпидермиса животных опытных групп.

3.2.2. Иммуногистологическое исследование пролифера-тивной активности кератиноцитов при накожном нанесении

13цРК

3.2.3. Иммуногистологическое исследование процессов дифференцировки кератиноцитов при накожном нанесении

13цРК

3.3. Изучение состояния популяции кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса после прекращения накожного нанесения растворов 13цРК.

3.3.1. Гистологическое и морфометрическое исследование интерфолликулярного эпидермиса у животных контрольных и опытных групп.

3.3.2. Иммуногистологическое исследование пролифера-тивной активности кератиноцитов после прекращения нанесения растворов 13цРК.

3.3.3. Изучение процессов дифференцировки кератиноцитов после прекращения нанесения растворов 13цРК.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ ДАННЫХ.

4.1. Циркадные ритмы в популяции кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса крыс-самцов Вистар.

4.2. Отдельные аспекты влияния и возможный механизм действия

13цРК на интерфолликулярный эпидермис крыс-самцов Вистар.

4.3. Длительность полученных эффектов после окончания накожных аппликаций 13цРК.

4.4. Дозозависимость воздействия 13цРК на интерфолликулярный эпидермис крыс.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние 13-цис-ретиновой кислоты на пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов крыс»

Актуальность проблемы

Эпидермис представляет собой постоянно обновляющуюся-систему клеток (с преобладанием кератиноцитов), в которой одновременно протекают процессы пролиферации, дифференцировки и апоптоза, поддерживающие динамическое равновесие и играющие важную роль в сохранении целостности эпителиального пласта (M.Haftek, 2002). В основе многих заболеваний кожи лежит нарушение одного или нескольких процессов морфогенеза кератиноцитов. Например, при псориазе увеличивается пролифе-ративная активность клеток, что вместе с уменьшением уровня их дифференцировки и апоптотической гибели приводит к появлению» псориатиче-ских папул и бляшек (А.И. Новиков, А.В. Кононов, В.А. Охлопков и* др., 2003; Г.М. Цветкова, В.В. Мордовцева, A.M. Вавилов, 2003; И.А.Казанцева, 2004; В.И. Прохоренков, Т.Г. Рукша, JI.JL Петрова и др., 2005).

Известно большое количество химических веществ как естественного (ростовые факторы, интерлейкины, кейлоны, гормоны и др.), так и искусственного происхождения (ретиноиды, цитостатические препараты, мети-лурацил и др.) которые могут изменять процессы гистогенеза и цитогенеза в коже. Понимание протекающих в эпидермисе процессов морфогенеза представляется важным, поскольку это может пролить свет на возможность модифицирования с помощью лекарственных препаратов в условиях патологии морфогенеза кожных структур в желаемом направлении.

Витамин А и его производные являются естественными регуляторами гистогенеза эпителиальных тканей, а синтетические производные витамина А (ретиноиды) применяются< для. лечения «кожных заболеваний, протекающих с нарушением морфогенетических процессов в эпидермисе. В связи с этим было решено использовать в качестве модификатора морфогенеза 13-цис-ретиноевую кислоту (13цРК), которая образуется в организме из ретинола (Ю:И. Афанасьев, В.И. Ноздрин, Ю.Т. Волков, 1990; G. Siegenthaler, J.H. Saurat, М. Ропес, 1990; М. Maden, М. Hind, 2003).

К настоящему времени исследования, посвященные изучению» воздействия ретиноидов на гистоструктуру эпидермиса, относительно немногочисленны. В России в, последние три десятилетия наиболее последовательно в этой области работали на кафедре гистологии Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова (Ю.И. Афанасьев, В.И. Ноздрищ 1983 и др.); а позднее - на фармацевтическом научно-производственном предприятии "Ретиноиды" (К.С. Гузев, В.И. Ноздрин, 2003; В.И. Ноздрин, В.М. Земсков, Ю.Т. Волков, 2004; В.И. Ноздрин, В.И. Альбанова, JI.H. Сазыкина, 2005; В.И. Ноздрин, Т.А. Белоусова; В.И. Альбанова, О.И. Лаврик, 2006 и др.). Следует отметить, что аналогичные-зарубежные исследования посвящены в основном изучению воздействия на эпидермис полностью • транс-ретиноевой кислоты, хотя в последние годы наметилось активное изучение свойств и 13цРК. Полученные авторами данные (К.А. Tadini, L.R. Gaspar, P.M. Maia Campos, 2006; M. Schroeder, G.G. Zouboulis, 2007) вполне согласуются с результатами отечественных исследований. Для объективизации морфологических аспектов дерматотропной фармакологической активности ретиноидов применяются морфометрические методы исследований с использованием компьютерных технологий. Так, были выявлены определенные закономерности реакции эпидермиса на аппликации препаратов, содержащих 13цРК, в виде увеличения толщины кожного эпителия, снижения уровня кератинизации, тенденции к «омоложению» клеточной популяции при непродолжительном (ежедневном в течение двух недель) нанесении (В.И. Ноздрин, А.С. Кинзирский, Т.А. Белоусова и др., 2004). Но механизмы возникновения данных изменений оставались неясными. Bs более ранних экспериментах, выполненных с использованием тимидиновой метки, подсчетом митотического индекса, определением плоидности и применением гистохимических методик, показано, что в условиях воздействия ретинои-дов на кожу увеличивается пролиферативная активность кератиноцитов, изменяется плоидность их ядер и содержание в цитоплазме сульфгидриль-ных групп и гликозаминогликанов (В.И. Ноздрин, М.З. Бахшинян, Н.Я. Артюхина, 1977, 1982; Е.М. Каралова, А.В. Петросян и др., 1988). Однако трактовка этих данных носила в значительной степени предположительный характер. Кроме того, не проводилось изучение длительности существования полученных эффектов после окончания нанесения препаратов. Знание особенностей изменения гистоструктуры и морфометрических параметров эпидермиса в условиях воздействия ретиноидов определяет необходимость объективной, более информативной, выполненной с применением иммуно-морфологических методов исследований оценки дерматотропной активности ретиноидов в отношении пролиферации дифференцировки.

До настоящего времени влияние ретиноидов на пролиферативную активность и дифференцировку клеток нормального эпидермиса изучалось, главным образом, в условиях культуры ткани (G .J. Fisher и J .J. Voorhees, 1996; A. Lokshin, Н. Zhang et al., 1999). Результаты этих исследований не отражают в полной мере процессы, происходящие в тканях, так как в клеточных культурах отсутствуют регуляторные влияния со стороны нервной, эндокринной, иммунной и др. систем. В литературе мы не встретили исследований, посвященных влиянию ретиноидов на клеточную популяцию кератиноцитов здоровых животных in vivo в свете оценки их цитогенеза, в том числе, выполненных с использованием иммуноморфологических методик. Также не удалось найти исследований по изучению состояния популяции кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса после окончания нанесения препаратов, содержащих 13цРК.

В связи с этим, изучение морфогенетических процессов в эпидермисе в норме и при воздействии на кожу биологически активных форм витамина А представляется актуальным. Учитывая, что многослойный плоский ороговевающий эпителий кожи является полидифферонной тканью, ведущая роль в которой принадлежит дифферону кератиноцитов (основному компоненту эпидермальной пролиферативной единицы), изучение гистоге-нетических процессов внутри этой клеточной популяции является целесообразным, так как может послужить более глубокому пониманию процессов, лежащих в основе регенерации эпидермиса, а также механизмов местного действия ретиноидов.

Цель и задачи исследования

Целью настоящего исследования^явилось изучение пролиферации и дифференцировки кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса у крыс при накожном нанесении растворов 13-цис-ретиноевой кислоты.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить структурно-функциональные аспекты пролиферации и дифференцировки кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса у ин-тактных крыс-самцов.

2. Изучить структурно-функциональные аспекты пролиферации и дифференцировки кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса при накожном? нанесении 13-цис-ретиноевой кислоты в виде растворов разных концентраций.

3. Изучить структурно-функциональные аспекты пролиферации и дифференцировки кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса после прекращения нанесения растворов 13-цис-ретиноевой кислоты.

Основные положения диссертации, выносимые на,защиту

1. Клеточный цикл кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса интактных крыс-самцов имеет суточные колебания. Днем (в 12-13 ч) доля покоящихся клеток (Go -период) составляет 30;56±0,46%, делящихся -14,71±0,46%, полиплоидизирующихся - 54,73±0,47%. В'предутренние часы (3^4 ч) покоящихся кератиноцитов - 52,93±0,46%, делящихся -26,66±0,63%, полиплоидизирующихся - 21,41±0,47%.

2. Аппликации растворов 13цРК приводят к увеличению количества делящихся клеток на фоне снижения числа покоящихся (G0) и полиплоидных клеток, что способствует накоплению в эпидермисе низкодифференци-рованных кератиноцитов. Наряду с кератолитическим действием 13цРК это обусловливает «омоложение» популяции кератиноцитов росткового слоя эпидермиса.

3. Этот эффект сохраняется на протяжении 2 недель после отмены 13цРК; его снижение было отмечено только через 5 недель.

Научная новизна

Впервые разработан способ оценки пролиферации и дифференцировки кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса с использованием моноклональных антител.

Впервые с помощью иммуноморфологических методов охарактеризованы суточные ритмы в эпидермисе крыс с использованием объективных параметров: индексов PCNA, Ki-67, индекса полиплоидизации.

Впервые с помощью моноклональных антител проанализировано состояние популяции кератиноцитов* интерфолликулярного эпидермиса при местном воздействии 13цРК. В условиях ежедневных накожных аппликаций растворов 13цРК происходит активация пролиферативных процессов, проявляющаяся в увеличении количества делящихся клеток, что на фоне снижения числа покоящихся и полиплоидных клеток приводит к накоплению в эпидермисе низкодифференцированных кератиноцитов.

Охарактеризована динамика структурных, морфометрических и им-муноморфологических показателей популяции кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса в различные сроки после окончания накожных аппликаций 13цРК и установлено, что эффект от воздействия 13цРК является в значительной степени устойчивым, так как ряд характеризующих его параметров отличается от таковых у животных контрольных групп на протяжении 5 недель после окончания аппликаций.

Теоретическая и практическая ценность работы

В результате проведенных исследований выявлены основные характеристики цитогенеза кератиноцитов - интерфолликулярного эпидермиса у крыс-самцов Вистар в норме, изученные с помощью иммуноморфологиче-ских методик с использованием моноклональных антител (МКА) к Ki-67, PCNA (proliferation cell nuclear antigen - ядерный антиген пролиферирую-щих клеток), цитокератину 10. Установлено, что клеточный цикл кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса крыс-самцов имеет суточные колебания. Определено процентное соотношение покоящихся (Go), делящихся и полиплоидных кератиноцитов в дневное и ночное время. Установлено что в предутренние часы (3-4 ч) в популяции кератиноцитов больше делящихся и покоящихся клеток и меньше клеток полиплоидных.

Установлены структурные и иммуноморфологические проявления воздействия' 13цРК на популяцию кератиноцитов. Ежедневные, в течение двух недель аппликации растворов Л ЗцРК вызывают утолщение клеточного эпидермиса, увеличение доли делящихся клеток, снижение представительства клеток покоящихся и полиплоидных и накопление в эпидермисе низко-дифференцированных клеток. Обнаруженный эффект в сочетании с известным кератолитическим действием 13цРК приводит к «омоложению» популяции кератиноцитов росткового слоя эпидермиса.

При экспериментальном исследовании состояния популяции кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса после отмены препаратов, содержащих 13цРК, было установлено, что эффект от применения 13цРК носит пролонгированный характер, снижаясь только через 5 недель после окончания нанесения растворов 13цРК. Темпы возвращения пролифератив-ной активности кератиноцитов'к показателям интактных животных оказались более медленными при использовании раствора с меньшей концентрацией 13цРК (0,025%), что объясняется, по-видимому, большей сохранностью в этих условиях камбиального резерва кератиноцитов.

Полученные данные расширяют представление о механизме действия 13цРК на интерфолликулярный эпидермис. Они учтены при выборе концентрации действующего вещества в составе лекарственных форм; и в обосновании терапии кожных заболеваний растворами, содержащими* 13цРК.

Количественные критерии оценки процессов пролиферации и диф-ференцировки применительно к эпидермису, полученные с применением иммуноморфологических методов, могут оказаться полезным «инструментом» для объективной оценки состояния кожного эпителия.

Внедрение

Результаты исследований использованы при составлении нормативно-технической документации на новое лекарственное средство с 13цРК -Ретасол® (раздел «Специфическая активность»); номер государственной регистрации № 001836/01- 2002. Препарат разрешен для наружного применения и выпускается на производственных мощностях ЗАО"Ретиноиды". Получен патент на изобретение № 2197235 «Раствор для лечения заболеваний кожи, способ его получения и способ лечения заболеваний кожи» с приоритетом от 05.04.2002 г.

Апробация работы

Основные материалы работы были доложены и обсуждены: на Всероссийской научной конференции «Морфологические основы гистогенеза и регенерации тканей» (С-Петербург, апрель 2001 г.), на «Первом российском конгрессе дерматовенерологов» (С-Петербург, сентябрь 2003 г.), на Всероссийской конференции «Новые лекарственные препараты в. дерматовенерологической практике» (Москва, ноябрь 2003 г.), на трех Всероссийских конференциях «Бабухинские чтения в Орле» (июнь 2005, июнь 2006, март 2007 гг.), на Всероссийском научном совещании анатомов, гистологов и эмбриологов «Актуальные проблемы учения о тканях» (С-Петербург, апрель 2006 г.), на-VII Конгрессе Международной ассоциации морфологов (Орел, сентябрь 2006 г.), на трех Всероссийских съездах «Человек и лекарство» (апрель 2003, апрель 2006, апрель 2007 гг.)

Публикации

По теме диссертации опубликовано 19 работ, из них в журналах по списку ВАК - 4.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 120 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, заключения и выводов. Работа иллюстрирована 13 таблицами и 59 рисунками. Указатель литературы включает 118'источников, в том числе - 55 отечественных и 63 зарубежных.

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Жучков, Сергей Александрович

выводы

1 Клеточный цикл кератиноцитов крыс-самцов Вистар имеет суточные колебания. Днем в популяции кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса интактных животных преобладают покоящиеся (Go-период) и полиплоидизирующиеся клетки, в то время как в предутренние часы доминируют покоящиеся и делящиеся кератиноциты.

2. Аппликации растворов, содержащих 13-цис-ретиноевую кислоту, вызывают увеличение количества делящихся клеток на фоне снижения числа покоящихся и полиплоидных клеток. Это способствует накоплению в эпидермисе низкодифференцированных кератиноцитов, что проявляется увеличением толщины пласта клеток, не синтезирующих цитокератин 10.

3. Эффект от применения 13-цис-ретиноевой кислоты (усиление про-лиферативной активности, снижение количества покоящихся и полиплоидных клеток) носит пролонгированный характер, уменьшаясь только к пятой неделе после отмены воздействия субстанции.

4. Дозозависимость эффекта от воздействия 13-цис-ретиноевой кислоты на интерфолликулярный эпидермис у крыс проявляется изменением соотношения количества делящихся, дифференцирующихся и покоящихся кератиноцитов, отражающим усиление пролиферативной и синтетической активности клеток.

5. Полученные данные использованы при разработке нормативной документации (раздел «Специфическая активность») на новое лекарственное средство «Ретасол®». Препарат запатентован, разрешен к клиническому применению и выведен на Российский фармакологический рынок.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для достижения эффектов усиления пролиферации и снижения дифференцировки кератиноцитов интерфолликулярного эпидермиса, препараты, содержащие 13цРК, целесообразно назначать пациентам 1 раз в сутки, в позднее вечернее или ночное время.

2. Для оценки дерматотропной активности новых лекарственных средств целесообразно применять иммуноморфологические методы исследований с последующей количественной оценкой.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Жучков, Сергей Александрович, 2007 год

1. Алексеев А.Г., Жучков С.А. Методические подходы к оценке воздействия депигментирующих средств // Мат. 6-й Всероссийской научн. конф. Бабухинские чтения в Орле. 28-29 марта 2007г. - М.: Изд. ЗАО «Ретиноиды», 2007а. - Вып 25. - С. 37-39.

2. Алексеев А.Г., Жучков С.А. Способ оценки содержания меланина в эпидермисе // Мат. 6-й Всероссийской научн. конф. Бабухинские чтения в Орле. 28-29 марта 2007г.- М.: Изд. ЗАО «Ретиноиды», 20076. -Вып 25. С. 75-76.

3. Альбанова В.И., Сазыкина Л.Н. Опыт применения ретиноевой мази в лечении обычных угрей // Вест. дерм, и венер.,2000. №4. - С. 46-47.

4. Аруин Л.И., Бабаева А.Г., Гельфланд В.Б. и др. Структурные основы адаптации и компенсации нарушенных функций: Руководство/АМН СССР. М.: Медицина, 1987. - 448 с.

5. Архапчев Ю.П. Исследование фармакокинетики и стабильности ретиноидов. Автореф. дисс. докт. фармацевт, наук. Купавна, 2000. - 43 с.

6. Афанасьев Ю.И., Ноздрин В.И., Волков Ю.Т., Никифоров С.А. Витамин А — регулирующий фактор процессов гистогенеза // Усп. соврем, биол., 1990. Т.110., № 3(6). - С.410-418.

7. Афанасьев Ю.И., Ноздрин В.И., Михайлов О.И. Популяционно-клеточные аспекты механизма действия витамина А // Усп. совр. биол., 1983. Т. 95, № 3. - С. 358-372.

8. Афанасьев Ю.И., Ноздрин В.И., Михайлов О.И. и др. Функции витамина А // Усп. совр. биол., 1986. Т. 101, № 2. - С. 215-228.

9. Бабаева А.Г. Иммунологические механизмы регуляции восстановительных процессов. -М.: Медицина, 1972. 150с.

10. Бабаева А.Г. Регенерация и система иммуногенеза. М.: Медицина, 1985. - 255с.

11. Бродский В.Я., Урываева И.В. Клеточная полиплоидия. Пролиферация и дифференцировка. М.: Наука, 1981г. -259с.

12. Волков Ю.Т., Гузев К.С., Масюлис А.В.-К. и др. Специфическая активность мази с 13-цис-ретиноевой кислотой (13цРК) // Альманах «Ретиноиды». М.: Изд-во ФНПП «Ретиноиды», 1997. - вып. 4. - С. 9-14.

13. Гетлинг З.М. Современные данные о тонком строении эпидермиса нормальной кожи человека. М. 1969. - С. 353-361.

14. Горпинич И.В., Ноздрин В.И. Стволовые клетки волосяного фолликула // Мат. 6-й Всероссийской научн. конф. Бабухинские чтения в Орле. 5-7 июня 2006г.- М.: Изд. ЗАО «Ретиноиды», 2006. Вып 24. -С. 95-99.

15. Горпинич И.В., Жучков С.А. Идентификация фаз цикла роста волос у крыс // Мат. 6-й Всероссийской научн. конф. Бабухинские чтения в Орле. 28 29 марта 2007г.- М.: Изд. ЗАО «Ретиноиды», 2007 - Вып 25. -С. 79-81.

16. Гузев К.С., Ноздрин В.И. Новые отечественные лекарственные средства с ретиноидами. М.: Изд-во ФНПП «Ретиноиды», 2003. - 112с.

17. Доронин Ю.К., Голиченков В.А. Временной модуль онтогенеза. М.: Изд. Московского университета, 2006. 116с.

18. Душейко А.А. Витамин А: обмен и функции Киев: Наук, думка, 1989.-288с.

19. Казанцева И.А. Апоптоз и его роль в патологии кожи // Российский журнал кожных и венерологических болезней. 2004. - №4. -С. 17-22.

20. Капитца Х.Г. Первые шаги в микроскопии. Изд 2-ое, переработанное. Йена: Карл Цейсс, 1997. - 44с.

21. Каралова Е.М., Петросян А.В., Аброян Л.О., Ноздрин В.И., Ма-гакян Ю.А. Синтез и содержание ДНК в ядрах клеток эпидермиса кожи мышей в процессе их дифференцировки и специализации // Бюл. эксперимент. биол. и мед. 1988. -№11. -С. 604-606.

22. Кошевенко Ю.Н. Витилиго. Клиника, этиология, патогенез, лечение реабилитация, профилактика. М.: «Косметика и медицина», 2002. -644с.

23. Кубанова А.А., Кисина В.И., Блатун JI.A. и др. Рациональная фармакотерапия заболеваний кожи и инфекций, передаваемых половым путем. Руководство для практикующих врачей. / Под общей ред. А.А. Кубано-вой, В.И. Кисиной. М.:«Литтерра», 2005. - 882с.

24. Кузнецов C.JL, Горячкина В.Л., Цомартова Д.А. Структура и функции эпидермиса и дермы (лекция для врачей-дерматологов) // Альманах «Ретиноиды». М.: Изд. ЗАО «Ретиноиды», 2006. - вып. 23. - С. 5-34.

25. Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники. Д.: Медицина, 1969.-423с.

26. Михайлов И.Н. Структура и функции эпидермиса. М.: Медицина, 1979.-240с.

27. Мяделец О.Д., Адаскевич В.П. Морфофункциональная дерматология. М.: Медлит, 2006. - 752с.

28. Мяделец О.Д., Антилевский А.А., Фомченко Ю.Ф. и др. Изменения клеток Лангерганса эпидермиса при некоторых дерматозах // Матер, научн. конф. Морфологические основы гистогенеза и регенерации тканей. -С-Пб.: Изд-во ВМА, 2001. С. 59-60.

29. Новиков А.И., Кононов А.В., Охлопков В.А., Правдина О.В., Братухина Г.Д., Городилов Р.В. Иммунохимические исследования при псориазе. // Вестник дерматологии и венерологии. 2003. - №3. - С. 26-31.

30. Ноздрин В.И. Морфофункциональные проявления реактивных изменений эпителиально-, миелоидно- и лимфоидноклеточных популяций при введении в организм производных ретиноевой кислоты: Автореф. дисс. д-ра мед.н. Москва, 1989. - 48 с.

31. Ноздрин В.И., Альбанова В.И., Сазыкина JI.H. Морфогенетиче-ский подход к лечению угрей ретиноидами. М., изд. ФНПП «Ретиноиды», 2005.- 151с.

32. Ноздрин В.И., Барашкова С.А., Семченко В.В. Кожа и её производные. Омск-Орел: ОГМА, ЗАО «Ретиноиды», Омская областная типография, 2005 - 192с.

33. Ноздрин В.И, Белоусова Т.А., Альбанова В.И., Лаврик О.И. Гистофармакологические исследования кожи. М.: ЗАО «Ретиноиды», 2006г. - 376с.

34. Ноздрин В.И, Земсков В.М., Волков Ю.Т. Иммуноморфологи-ческие аспекты действия витамина А. М.: Ретиноиды, 2004. — 104с.

35. Ноздрин В.И., Мурников В.Т., Яцковский А.Н. К методике количественной микрофотометрии // Сист. Свойства тканевых организаций -Сб. М., Изд I ММИ, 1977. С. 173-176.

36. Ноздрин В.И., Яцковский А.Н., Гузев К.С. и др. Экспериментальное исследование специфической фармакологической активности мази Видестим // Альманах «Ретиноиды». М.: Изд. ФН1Ш «Ретиноиды», 2000. -Вып. 8.-С.11-16.

37. Персина И.С. Клетки Лангерганса структура, функция, роль в патологии. // Архив Патологии. - 1985. - т. 47. - С. 86-93.

38. Плецитый К.Д. Экспериментальный и клинический анализ им-мунорегуляторных свойств жирорастворимых витаминов в норме и патологии. Автореф. дис. докт. мед. наук. М., 1998. - 40с.

39. Прохоренков В.И., Рукша Т.Г., Петрова JI.JL, Салмина А.Б. Запрограммированная клеточная гибель кератиноцитов и её роль в патогенезе некоторых заболеваний кожи // Вестник дерматологии и венерологии. — 2005.-№4.-С. 4-7.

40. Сазыкина JI.H. Применение Ретасола® в терапии обыкновенных угрей с морфологическим и клинико-экспериментальным обоснованием: Дис. канд. мед. наук. М., 2004. - 154 с.

41. Санитарные правила по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев). Утверждены Главным государственным санитарным врачом СССР 06.04.1973 г. № 1045-73

42. Скрипкин Ю.К., Лезвинская Е.М. Кожа орган иммунной системы. // Вестник дерматол. - 1989. - №10. - С. 14-18.

43. Суханов А.Ф., Мяделец О.Д. Роль внутриэпидермальных макрофагов (клеток Лангерганса) в структурно-функциональной организации эпидермиса. // Архив анат. гист. эмбр. 1988. - №4. - С. 81-86.

44. Терских В.В., Васильев А.В., Воротеляк Е.А. Стволовые клетки: эволюция концепции. // Вестник дерматологии и венерологии. 2005. - №2. -С. 4-8.

45. Терских В.В., Васильев А.В., Воротеляк Е.А. Стволовые клетки и структура эпидермиса. // Вестник дерматологии и венерологии. — 2005 .— №3. С. 11-15.

46. Упоров А.В., Семиглазов В.Ф., Пожарисский К.М. Иммуногистохимическое изучение клеток рака молочной железы с использованием разных маркеров пролиферации. // Арх. патол. 2000. - Т. 62, №2. - С.26-30

47. Цветкова Г.М., Гетлинг З.М. Возрастные особенности ультраструктуры эпидермиса // В кн. Морфология кожи человека. J.E. Purkyne University, Brno Medical Faculty (J.Karasek, G.M.Cvetkova, eds), 1980. -C. 53-68.

48. Цветкова Г.М., Мордовцева B.B., Вавилов A.M., Мордовцев B.H. Патоморфология болезней кожи. Руководство для врачей. -М.: Медицина, 2003г. 496с.

49. Шубникова Е.А. Эпителиальные ткани. М.: Изд-во МГУ, 1996.-256с.

50. Эвтаназия экспериментальных животных (методические рекомендации по выведению животных из эксперимента). М.: Наука, 1985. -32с.

51. Эрнандес Е. Витамин А и кожа. Часть 1. тайна ретинола // Косметика и медицина. -2000. -№4. С. 21-33.

52. Юрина Н.А., Радостина А.И. Кожа и её производные. Развитие, строение, функции. М.: Изд-во РУДН, 1996. - 57с.

53. Allen T.D., Potten C.S. Fine-structural identification and organization of the epidermal proliferative unit // J Cell Sci. 1974. - V.15, No 2. -P. 291-319.

54. Cumberbatch M, Dearman R.J., Griffiths C.E., Kimber I. Epidermal Langerhans cell migration and sensitisation to chemical allergens // APMIS. — 2003.-V. Ill, No 7-8. P.797-804.

55. Eckert R.L., Rorke E.A. Molecular biology of keratinocyte differentiation // Environmental Health Perspectives. 1989. - V. 80 - P. 109-116.

56. Eckert R.L., Yaffe M.B., Crish J.F. et al. Involucrin structure and role in envelope assembly // J. Invest. Dermat. - 1993. - V.100, No 5. -P. 613-617

57. Endl E, Gerdes J. The Ki-67 protein: fascinating forms and an unknown function // Exp Cell Res. 2000. - V. 257, No 2. - P. 231-237.

58. Fartasch M., Bassukas I.D., Diepgen T.L. Structural relationship between epidermal lipid lamellae, lamellar bodies and desmosomes in human epidermis An ultrastructural study // Brit. J. dermatol. - 1993. - V. 128, No 1. -P. 1-9.

59. Fisher G.J., Voorhees JJ. Molecular mechanisms of retinoid actions in skin. // FASEB J. 1996. - V. 10, No 9. - P. 1002-13.

60. Fuchs E., Green H. Regulation of terminal differentiation of cultured human keratinocytes by vitamin A // Cell. 1981. - V. 25, No 3. -P. 617-625.

61. Ghazizadeh S., Taichman L.B. Organization of stem cells and their progeny in human epidermis // J Invest Dermatol. 2005. - V. 124, No 2. -P. 367-72.

62. Galand P. Degraef C. Cyclin/PCNA immunostaining as an alternative to tritiated thymidine pulse labeling for marking S phase cells in paraffin sections from animal and human tissues // Cell Tissue Kinet. 1989. - V. 22, No 5.-P. 383-392.

63. Haftek M. Stratum corneum // Ann. Dermatol. Venerol. 2002. - V. 129.-P. 117-122.

64. Heen M., Thiriar S., Noel J.C. Galand P. Ki-67 immunostaining of normal human epidermis: comparison with 3H-thymidine labeling and PCNA immunostaining //Dermatology.- 1998.-V. 197, No 2.-P. 123-126.

65. Heyman R.A., Mangelsdorf D.J., Dyck J.A. et al. 9-Cis retinoic Acid is a high affinity ligand for the retinoid receptor // Cell. 1992. -V.68. - P. 284287.

66. Jones P.H., Harper S., Watt F.M. Stem cell patterning and fate in human epidermis // Cell. 1995. - V80, No 1. - P. 83-93.

67. Kanitakis J. Anatomy, histology and immunohistochemistry of normal human skin // Eur J Dermatol. 2002. - V. 12, No 4. - P. 390-399.

68. Kopan R., Traska G., Fuchs E. Retinoids as important regulators of terminal differentiation: examination keratin expression in individual epidermal cells at various stages of keratinization // J. Cell Biol. 1987. - V. 105, No 1. -P. 427-440.

69. Korge В., Stadler R., Mischke D. Effect of retinoids on hyperprolif-eration-associated keratins K6 and K16 in cultured human keratinocytes: A quantitative analysis // J. Invest. Dermatol. 1990. - V. 95, No 4. - P. 450-455.

70. Lohnes D, Dierich A, Ghyselinnck N. et al. Retinoid receptors and binding proteins // J. Cell Sci. 1992. - Suppl. 6. - P. 69-76.

71. Lokshin A, Zhang H, Mayotte J, Lokshin M, Levitt ML. Early effects of retinoic acid on proliferation, differentiation and apoptosis in non-small cell lung cancer cell lines // Anticancer Res. 1999. - V.19, No 6B. - P. 52515254.

72. Lombardi Т., Hauser C., Budtz-Jorgensen E. Langerhans cells: structure, function and role in oral pathological conditions. // J Oral Pathol Med. 1993. - V. 22, No 5. - P. 193-202.

73. Maden M, Hind M. Retinoic acid, a regeneration-inducing molecule // Dev Dyn. 2003. - V. 226, No2. - P. 237-244.

74. Madison K.C., Howard EJ. Ceramides are transported through the Goldgi Apparatus in human keratinocytes in vitro // J. Invest. Dermatol. — 1996. -V.106, No5. P.1030-1035.

75. Marks R. The stratum corneum barrier: the final frontier // J. Nutr. -2004. V. 134, S. 8. - P. 2017-2021.

76. Marks R., Hill S., Barton S.P. The effect of an abrasive agent on normal skin and on photoaged skin in comparison with topical tretinoin // Br. J. Dermatol. 1990. - V. 123, No 4. - P. 457-466.

77. Merad M., Manz M.G., Karsunky H., et al. Langerhans cells renew in the skin throughout life under steady-state conditions. // Nat Immunol. — 2002. -V. 3,No 12.-P. 1135-1141.

78. The Merck Index. Twelth Edition. (An Encyclopedia of chemicals, drugs and biologicals ) // Merck and Co., 1996. P. 1046.

79. Moll I., Roessler M., Brandner J.M., Eispert A.C. et al. Human Merkel cells aspects of cell biology, distribution and functions // Eur. J. Cell Biol. - 2005. - V. 84, No 2-3. - P. 259-271.

80. Moll R., Werner W.F., Schiller D.L. The catalog of human cy-tokeratins: patterns of expression in normal epithelia, tumors and cultured cells // Cell. 1982.-V. 31, No l.-P. 11-24.

81. Morris R.J., Fischer S.M., Slaga T.J. Evidence that the centrally and peripherally located cells in the murine epidermal proliferative unit are two distinct cell populations. // J Invest Dermatol. 1985. -V. 84, No 4. - P. 277-281.

82. Nakamura K., Saitoh A., Yasaka N., et al. Molecular mechanisms involved in the migration of epidermal dendritic cells in the skin // J Investig Dermatol Symp Proc. 1999. - V.4, No 2. - P. 169-172.

83. Nelson A.M., Gilliland K.L., Cong Z., Thiboutot D.M.13-cis Reti-noic acid induces apoptosis and cell cycle arrest in human SEB-1 sebocytes // J Invest Dermatol. -2006. V. 126, No 10.-P. 2178-2189.

84. Papini S., Cecchetti D., Campani D., et al. Isolation and clonal analysis of human epidermal keratinocyte stem cells in long-term culture // Stem Cells. -2003. -V.21, No 4. P. 481-494.

85. Pavlidou D, Vourekas A, Monastirli A, Kalavrizioti D, Tsambaos D, Drainas D. Isolation of ribonuclease P activity from human epidermis and its regulation by retinoids in vitro // Acta Derm Venereol. 2006. - V. 86, No 2. -P. 114-118.

86. Pavlovitch J.H., Rizk-Rabin M., Jaffray P., et al. Characteristics of homogeneously small keratinocytes from newborn rat skin: possible epidermal stem cells // Am J Physiol. 1991. - V. 261, No 6 Pt 1. - P. 964-972.

87. Parkinson E.K. Epidermal keratinocyte stem cells: their maintenance and regulation // Semin Cell Biol. 1992.- V. 3, No 6. - P. 435-444.

88. Potten C.S. The epidermal proliferative unit: the possible role of the central basal cell // Cell Tissue Kinet. 1974. - V.7, No 1. - P. 77-88.

89. Potten C.S., Booth C. Keratinocyte stem cells: a commentary // J Invest Dermatol. 2002. - V.l 19, No 4. - P. 888-899.

90. Potten C.S., Morris RJ. Epithelial stem cells in vivo // J Cell Sci Suppl. 1988. - V.10. -P. 45-62.

91. Raff M.C. Social controls on cell survival and cell death // Nature. -1992. V.356, No 6368. - P. 397-400.

92. Saurat J.H. // Retinoid Symp. Suppl. Retinoids today and tomorrow- Basel, Roche, 1992.- P. 2-5.

93. Scholzen T, Gerdes J. The Ki-67 protein: from the known and the unknown//J. Cell Physiol. 2000. - Vol. 182, No3.-P. 311-322.

94. Schroeder M, Zouboulis C.C. All-trans-retinoic acid and 13-cis-retinoic acid: pharmacokinetics and biological activity in different cell culture models of human keratinocytes // Horm Metab Res. 2007. - V. 39, No 2. -P. 136-40.

95. Siegenthaler G, Saurat JH, Ponec M. Retinol and retinal metabolism. Relationship to the state of differentiation of cultured human keratinocytes // Bio-chem. J. 1990. - V. 268, No 2. - P. 371-378.

96. Smith F.J.D. The molecular genetics of keratin disorders // Am. J. Clin. Dermatol. 2003. - Vol. 4, No 5. - P. 347-364.

97. Stoitzner P., Pfaller K., Stossel H., Romani N. A close-up view of migrating Langerhans cells in the skin. // J Invest Dermatol. -2002. Vol. 118, No l.-P. 117-125.

98. Tadini KA, Gaspar LR, Maia Campos PM. Epidermal effects of tretinoin and isotretinoin: influence of isomerism. // Pharmazie. 2006. -Vol. 61, No 5.-P. 453-456.

99. Tani H., Morris R., Kaur P. Enrichment for murine keratinocytes stem cells based on cell surface phenotype. // proc Nat Acad Sci USA. 2000. -V. 97.-P. 10960-10965.

100. Teunissen M.B. Dynamic nature and function of epidermal Langer-hans cells in vivo and in vitro: a review, with emphasis on human Langerhans cells // Histochem J. 1992. - V. 24, No 10. - P. 697-716.

101. Thaler M., K. Fukuyama, W.L. Epstein and K.A. Fisher. Comparative studies of keratins isolated from psoriasis and atopic dermatitis // J. Invest. Dermatol. 1980. -Vol. 75. - P. 158.

102. Tsamboas D., Orfanos C.E. Chemotherapy of psoriasis and other skin disorders with oral retinoids // The chemotherapy of psoriasis. Oxford: Pergamon press, 1984. - P. 287-306.

103. Wanner R, Henseleit-Walter U, Wittig B, Kolde G. Proliferation-dependent induction of apoptosis by the retinoid CD437 in p53-mutated keratino-cytes // J Mol Med. 2002. - V. 80, No l.-P. 61-67.