Условно-патогенная микрофлора в птицехозяйствах и диагностика эшерихиоза птиц на основе тест-системы иммуноферментного анализа тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Вершняк, Татьяна Викторовна

• Вершняк, Татьяна Викторовна
• кандидат биологических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Вершняк, Татьяна Викторовна

1. ВВЕДЕНИЕ.

1.1. Актуальность темы. ф 1.2. Цель и задачи исследований.

1.3. Научная новизна.

1.4. Практическое значимость работы.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Особенности эпизоотической ситуации в птицехозяйствах.

2.2. Роль условно-патогенной микрофлоры в заболевании птицы.

2.3. Клинико-эпизоотические особенности течения инфекционного процесса при смешанных инфекциях.

2.4. Диагностика эшерихиоза птиц при смешанных инфекциях.

2.5. Применение пробиотиков в птицеводстве.

2.6. Иммуноферментный анализ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Условно-патогенная микрофлора в птицехозяйствах и диагностика эшерихиоза птиц на основе тест-системы иммуноферментного анализа»

1.1. Актуальность темы

В связи с ухудшением экологической ситуации и ряда других причин в последнее время наблюдается снижение уровня природной резистентности организма птицы. Следствием этого является развитие бактериальных инфекций, обусловленных условно-патогенной микрофлорой.

В настоящее время птицеводческие хозяйства наибольшие убытки несут от следующих инфекций: колибактериоз, сальмонеллез, респираторный микоплазмоз и различных вирозов [58, 86, 136, 141, 175,].

Большой экономический ущерб наносят и болезни, вызванные условно-патогенной микрофлорой такой, как Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter, Yersinia, Serratia, Hafnia, Pseudomonas и некоторыми другими [4, 17, 32, 90, 93, 105]. В большей степени отмечается смешанное течение инфекции, вызванное двумя и больше возбудителями. Смешанные инфекции трудно диагностируются и наносят значительный экономический ущерб хозяйствам [13, 24, 47]. Harry Е.Н. [262], Волошин В.Г. [58] доказали, что наибольший убыток наносят болезни, вызванные условно-патогенными микробами, которые при многократном пассировании через организм повышают свою вирулентность. При снижении естественной резистентности организма особую опасность представляют эшерихии [56, 63]. Опытами установлено, что в 78,9% случаев эшерихиоз проходит в смешанной форме с участием двух и более возбудителей, например эшерихиоз и стрептококкоз, эшерихиоз и стафилококкоз, эшерихиоз и псевдомоноз, эшерихиоз и микоплазмоз, эшерихиоз и клебсиеллез и другие вариации [4, 21, 44, 58, 244, 254].

К настоящему времени точно не установлено, в какой ассоциации чаще протекает эшерихиоз; не разработаны рациональные схемы бактериологического исследования патологического материала и средства эффективной профилактики и лечения этих ассоциаций.

Быстрый и точный диагноз инфекционных болезней является решающим условием организации необходимых мер борьбы с ними. Хотя традиционные методы лабораторной диагностики достаточно специфичны и чувствительны, они часто трудоёмки, сложны, а иногда и недоступны для некоторых Я лабораторий. В последние годы разработаны новые простые и быстрые методы диагностики инфекций. Ускоренные методы постановки диагноза обладают рядом преимуществ по сравнению с традиционными методами серологической диагностики. Быстрота и простота проведения тестов делают их удобными для исследования динамики инфекции в очагах заболевания, а полученная информация может служить ориентиром для принятия соответствующих мер по предупреждению инфекций и их распространению [15, 17, 35, 36, 40, 49, 90, 92].

Большинство исследователей считают, что диагностику эшерихиоза нельзя основывать только по клиническому проявлению болезни, так как инфекционный процесс при эшерихиозе может протекать у одних животных латентно, в форме скрытого носительства, а у других клинические признаки не Ф являются характерными только для данной болезни [49, 70, 71, 94, 239, 260, 265]. Поэтому при диагностике эшерихиоза рекомендуют использовать бактериологические и серологические методы лабораторных исследований.

Таким образом, создание тест-систем для ускоренной диагностики ^ эшерихиоза на сегодняшний день является важной и актуальной задачей.

1.2.Цель и задачи исследования.

Основной целью настоящей работы являлось изучение эпизоотической ситуации относительно эшерихиоза птиц в птицехозяйствах, выделение условно-патогенной микрофлоры и определение её чувствительности к антибиотикам, разработка диагностики на основе сконструированной тест-системы имму но ферментного анализа (ИФА) и изучение его диагностической эффективности.

Для достижения цели решались следующие задачи:

1.2.1. Провести анализ изолятов условно-патогенной микрофлоры в птицехозяйствах.

1.2.2. Осуществить микробиологический мониторинг при выводе цыплят и динамику накопления условно-патогенной микрофлоры в воздухе выводных инкубаторов.

1.2.3. Определить антибиотико-резистентность патогенных для птицы микроорганизмов.

1.2.4. Разработать тест-систему на основе иммуноферментного анализа для диагностики эшерихиоза птиц.

1.2.4.1. Охарактеризовать антигенную структуру E.coli различных сероваров.

1.2.4.2. Выделить термостабильный энтеротоксин E.coli и испытать его в качестве антигена при постановке ИФА.

1.2.4.3. Отработать оптимальные условия постановки ИФА при исследовании антиэшерихиозных сывороток.

1.2.5. Испытать разработанную тест-систему ИФА при исследовании анти-эшерихиозных сывороток.

1.3.Научная новизна.

Осуществлен анализ выделенной условно-патогенной микрофлоры в птицехозяйствах разной технологической направленности. Показана тенденция роста инфицирования птицы E.coli, а также малоизученными патогенами: Ps. aeruginosa, Kl. pneumonia и др.

В процессе работы был изучен мониторинг при выводе цыплят, выявлена корреляция между увеличением процента вывода цыплят и количеством микрофлоры в выводных инкубаторах.

Впервые в РФ разработана тест-система ИФА для диагностики эшерихиоза на основе энтеротоксина E.coli.

1.4.Практическое значение полученных результатов.

Проведен анализ условно-патогенной микрофлоры, которая может предопределять патологию смешанных инфекций в птицехозяйствах.

Микробиологический мониторинг вывода цыплят показал, что заболеваемость птицы вызывается одними и теми же ассоциациями. Рекомендуется использовать с целью оценки и прогноза эпизоотической ситуации относительно бактериальных заболеваний птицы.

Определена антибиотико-резистентность патогенных для птицы микроорганизмов.

Разработаны и утверждены государственным департаментом ветеринарной медицины Украины "Методические рекомендации по диагностике и профилактике колибактериоза сельскохозяйственных птиц".

Материалы научно-исследовательской диссертационной работы включены в курс лекционно-практических занятий факультета ветеринарной медицины Сумского НАУ.

Разработана тест-система ИФА, предназначенная для диагностики эшерихиоза птиц при смешанных инфекциях.

Создан "Набор для выявления антиэшерихиозных антител в сыворотках птиц методом иммуноферментного анализа "КАЭ - С". Материалы работы использованы при составлении нормативной документации (НД). НД на набор представлена к утверждению в общепринятом порядке.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Вершняк, Татьяна Викторовна

5. ВЫВОДЫ.

5.1.Проведены комплексные исследования и анализ эпизоотологического обследования 11 птицехозяйств и установлено, что в этих хозяйствах широко циркулирует условно-патогенная микрофлора, которая может предопределить патологию смешанного течения эшерихиоза с другими инфекциями.

5.2.Проведенный анализ позволяет утверждать, что в условиях интенсивного птицеводства условно-патогенная микрофлора, выделенная из воздуха выводных инкубаторов, трупов цыплят, объектов внешней среды идентична и играет существенную роль в патологии птицы разного возраста.

5.3.Установлено, что смешанная инфекция птиц является причиной внезапных, спонтанных вспышек эпизоотий в птицехозяйствах. При проведении бактериологических исследований было изолировано 1600 культур энтеробактерий, среди которых вид E.coli составил 34%.

5.4.Воздушная среда птичников и инкубаторов содействует аэрогенному инфицированию птицы и осеменению скорлупы инкубируемых яиц. Возникает замкнутая цепь, где циркулируют одинаковые серовары условно-патогенных микроорганизмов и при снижении резистентности птицы вызывают вспышки инфекционных заболеваний.

5.5.При изучении чувствительности изолированных культур микроорганизмов к антибиотикам установили, что они проявляли резистентность к препаратам, которые широко применялись в хозяйствах с лечебно-профилактической целью. В связи с этим антибиотики оказывались слабо эффективными (в 97% случаев), за исключением левомицетина и байтрила (100%-ная чувствительность).

5.6.Проведенными экспериментальными исследованиями установлено, что при применении пробиотиков Кормо-токс, Биофлор, Био Плюс 2Б, Авигард повышается сохранность птицы на 27.5%, ежесуточный привес у цыплят был на 5,0 - 6,5г больше, чем в контроле и через 30 дней разница средней массы составила 150-195г.

5.7.На основе инактивированного корпускулярного антигена E.coli сероварианта 078 разработаны компоненты и схема постановки непрямого ИФА, предназначенные для диагностики эшерихиоза птиц.

5.8.Разработана тест-система ИФА на основе антигена термостабильного энтеротоксина без выделения чистых культур, предназначенная для диагностики эшерихиоза птиц.

5.9.Показано, что разработанная тест-система характеризуется специфичностью, чувствительностью и воспроизводимостью результатов. При сравнительной оценке методов ИФА и РИГА для определения эшерихиозных антител более эффективным был метод ИФА, коэффициент корреляции равен: г = 0.86, Р< 0.01.

5.10.Технология получения реагентов и методика проведения ИФА положены в основу разработанной тест-системы и создан "Набор для серологической иммуноферментной диагностики эшерихиоза птиц "КАЭ - С". НД на набор представлен к утверждению в общепринятом порядке.

2.7. Заключение.

Смешанные инфекции птиц в последнее время привлекают особенно пристальное внимание учёных при попытках выяснить причины внезапных, спонтанных вспышек эпизоотий в птицехозяйствах. В связи с тем, что данные инфекции в птицеводстве чаще всего протекают с атипичными клиническими признаками или бессимптомно, диагностика их часто затруднена.

Применение современных методов идентификации микроорганизмов позволяет объективно определить спектр выделяемой микрофлоры от животных и птицы, а также из разных объектов внешней среды. Для точной диагностики смешанных инфекций нужно использовать разные методы исследования с учетом особенностей возбудителей, которые входят в состав паразитоценоза.

Необходимость более полного выявления больных животных на всех стадиях инфекционного процесса привела к разработке новых иммунологических методов, способных выявлять минимальные количества антител (AT), достигающих нанограмм.

Разрабатываемые в последние годы иммуноферментные методы позволяют выявлять в биологических жидкостях как антитела, так и антигены, не требуют дорогостоящего оборудования и позволяют проводить визуальную оценку реакции. Имеющиеся на вооружении ветеринарных специалистов методы серодиагностики этих инфекций не позволяют с достаточной точностью решить эту задачу.

В связи с необходимостью разработки эффективных средств диагностики эшерихиоза, необходимо выявление наиболее специфических антигенов этого возбудителя и изучение их иммунологических свойств.

Основной целью настоящей работы являлось изучение эпизоотической ситуации относительно эшерихиоза птиц в птицехозяйствах, динамики накопления условно-патогенной микрофлоры, разработка рациональной схемы диагностики на основе сконструированной тест-системы иммуноферментного анализа (ИФА) и изучение его диагностической эффективности.

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Материалы и методы.

Исследования проводились в 1997-2000гг. на базе Сумского Национального аграрного университета, птицеводческих совхозах Сумской области, в 2000-2003гг. во Всероссийском научно-исследовательском и технологическом институте биологической промышленности, г.Щёлково, Российской Федерации, в соответствии с плановой научно-исследовательской тематикой «Комплексная разработка диагностикумов и вакцин против вирусных и бактериальных болезней животных» (РК 01.200.1.12.689).

3.1.1. Эпизоотологические исследования включали изучение источников возбудителей инфекции, механизм передачи и развитие патогенных микроорганизмов в организме цыплят в условиях групповой профилактики бактериальных инфекций. При этом выясняли степень распространения, динамику гибели и значение факторов передачи инфекций.

3.1.2. Объектами исследований были эмбрионы и цыплята породы леггорн, кросса "Беларусь-9" от одно- до 60-дневного возраста, которые содержались в типичных условиях птицехозяйств.

3.1.3. Выделение микроорганизмов из эмбрионов, трупов птицы, патматериала, отобранного на санитарной бойне, изучение их культурально-морфологических, биохимических и патогенных свойств проводили по стандартным методикам [99, 106, 113, 118, 123, 124, 125, 143, 144, 202]. Выделение энтеропатогенных культур эшерихий проводили путем высева материала на дифференциально-диагностические среды (Эндо, Левина и другие). Выросшие и изолированные колонии (не меньше четырех) пересевали на МПА, выдерживали в термостате при 37°С в течение 24 часов. После этого часть пробирок использовали для приготовления мазков, посевов на дифференциально-диагностические среды и заражения лабораторных животных, а другие для изготовления автоклавированного антигена, если кипяченый антиген не агглютинировался поливалентными колисыворотками.

3.1.4. Посевы проводили из костного, головного мозга, сердца, печени, желчного пузыря и других органов на простые и элективные питательные среды. Посевы инкубировали 24 часа при 37 С. Пересев материала проводили на среды Эндо, 0,3%-й МПА, МПБ, бульон Хоттингера, среды Кларка, Козера, Симмонса.

3.1.5. Идентификацию выделенных культур осуществляли в соответствии с требованиями, изложенными в "Кратком определителе бактерий Берги" (1980) [118].

Типизацию и идентификацию выделенных культур бактерий сальмонеллезной группы проводили методом последовательного обогащения. Материал, отобранный сразу после забоя птицы, размещали в колбе, которая содержала среду в соотношении 1:5 и помещали в термостат. Через 18-24 часа выращивания проводили высевы в бактериологические чашки с дифференциально-диагностическими средами (висмутсульфитный агар, селенитовый бульон, магниевая среда). После 16-тичасовой выдержки в термостате при 37 С из обогащенных сред проводили пересев на чашки с висмут-сульфитным агаром и помещали в термостат. Засеянные чашки просматривали через 16, 24 и 48 часов культивирования.

3.1.6. Морфологические свойства выделенных культур изучали в мазках, окрашенных по Граму, подвижность определяли в полужидком агаре (0,250,3% концентрации). Изучение культуральных и биохимических свойств проводили, используя питательные среды с углеводами и многоатомными спиртами, которые содержат индикатор Андреде, а также на средах Кларка, Олькельницького, цитратно-амонийная среда, среда с мочевиной, среда Христинсена. Типичные культуры исследовали с агглютинирующими комплексными сыворотками. Культуры, у которых были положительные реакции, в дальнейшем исследовали с монорецепторными аглютинирующими сыворотками.

3.1.7. Серологическую типизацию культур эшерихий осуществляли с целью установления эпизоотических сероваров.

Для приготовления антигенов каждую предназначенную для типизации суточную культуру смывали стерильным физраствором, суспензию бактерий доводили физиологическим раствором до 3-4 млрд. микробных тел в 1см3 (по стандарту мутности), кипятили на водяной бане в течение 60 минут. Затем взвеси охлаждали, центрифугировали при 3000 - 4000 об/мин в течение 15 минут. Потом на чистое, обезжиренное предметное стекло наносили по капле каждой комплексной сыворотки, разведенной физраствором 1:5 и добавляли по капле антиген, ингредиенты тщательным образом смешивали. Учет реакции проводили не позже трех минут при легком покачивании стекла.

Для определения кокковой микрофлоры проводили разведение материала. При этом в стерильные пробирки помещали 1г исследуемого материала и добавляли 10 см3 стерильного физраствора, тщательным образом перемешивали содержимое, встряхивали и делали серийное разведение от 1:10 до 1:1 000000. После оседания взвешенных частиц из верхнего слоя жидкости отбирали пробы и высевали на чашки Петри с 5% -ным кровяным МПА. Учет колоний проводили после инкубации в термостате в течение 48 часов при 37°С. Для идентификации стрептококков полученные колонии пересевали на молочную среду с 0,002% содержанием метиленового синего.

3.1.8. Буферные смеси и другие реактивы:

• забуференный физиологический раствор (ЗФР), рН 7.3: 72 мл 0,2 М Na2HP04 х 12 Н20, 28 мл 0,2 М NaH2P04 х 2 Н20 и 9г NaCl доводили дистиллированной водой до 1 л в мерной колбе;

• забуференный физиологический раствор с добавлением 0,05% Твина-20 (ЗФРТ);

• фосфатный буфер, 0.1М: рН 6.2: 18,5 мл 0,2М Na2HP04 и 81,5 мл 0,2М NaH2P04 доводят дистиллированной водой до 200 мл, при необходимости доводят рН до нужной величины Н3Р04 или NaOH;

• рН 8.0: 94,7 мл 0,2М Na2HP04 и 5,3 мл 0,2М NaH2P04 доводят дистиллированной водой до 200 мл, при необходимости доводят рН до нужной величины Н3Р04 или NaOH;

• карбонат-бикарбонатный буфер, 0.2М, рН 9.8: 22 мл 0,2М Na2C03 и 50 мл 0,2М ЫаНСОз разбавляют дистиллированной водой до 200 мл;

• цитратно-фосфатный буфер (ЦФБ) 0.05М, рН 5.0: 9.7 мл 0.1М лимонной кислоты хН20 + 10.3 мл 0,2М Na2HP04x2H20 разбавляют водой до 1000 мл;

• 10х буфер для переноса = 10х Трис-глициновый буфер: 0.25 М Трис, 1.92 М глицин, рН 8.3, фирмы "Serva".

• Из него готовят " Товбин буфер " (0.025 М Трис, 0.192 М глицин, 20% метанол) 10-кратным разбавлением с добавлением 20% метанола (100 мл 10х буфер для переноса + 200 мл метанола + 700 мл Н20).

• 10х буфер для электрофореза = 10х ДСН-Трис-глициновый буфер: 0.25 М

• Трис, 1.92 М глицин, 1% ДСН, рН 8.3, фирмы "Merck".

Из него готовят буфер для электрофореза (0.025 М Трис, 0.192 М глицин, 0.1% ДСН) 10-кратным разведением: 50 мл 10х ДСН-Трис-глицин буфер довести до 500 мл дистиллированной водой. Раствор мономеров (АА/Бис) (хранится при +4°С,в темноте) (30% Т, 2,7% С): 146 г акриламида (АА) + 4 г бисакриламида (Бис)—► до 500 мл Н20 диет.;

• 4х буфер разделяющего геля (+4° С): 1,5 М Трис-HCl, рН 8.8:

Трис-основной.36,3 г

Н20 диет.100 мл

НС1 1М.до рН 8,8

Н20 диет.до 200 мл

• 4х буфер концентрирующего геля (+4° С): 0,5М Трис-HCl, рН -6.8: Трис-основной.6 г

Н20 диет.50 мл

НС1 1М.до рН 6.8

Н20 диет.до 100мл

• Лизирующий буфер: 2х буфер для образцов (ОД25М Трис, 4% ДСН, 10% ДТТ, 20% глицерин, 0.001% бромфенолового синего, рН 6.8):

0,5МТрис-НС 1 ,рН6,8.2,5мл

Дитиотрейтол (ДТТ).1 г

Глицерин.2 мл

НгО диет.до 10мл

• Буфер для иммуноблота (ЗО мМ Трис-HCl, 150 мМ NaCl, 0.05% Твин-20, 0.5мг/мл овальбумин, рН 8.0):

ЗМТрис-НС 1.2 мл

Твин-20.100 мкл

Овальбумин.1 00 мг

Н20 диет.до200мл

• хромогенный субстрат ортофенилендиамин (ОФД): 10 мг ОФД растворяют в 25 мл ЦФБ с рН 5,0 и добавляют 50 мкл 3% Н202, готовится непосредственно перед использованием;

• хромогенный субстрат диаминобензидин (ДАБ): 10 мг диаминобензидина растворяют в 10 мл Трис 3 мМ, рН 8.0 и добавляют 50 мкл 3% Н202;

• 1N раствор серной кислоты;

• 3% перекись водорода;

• 10% додецил сульфат натрия (ДСН);

• 10% персульфат аммония (ПСА);

• Краситель для гелей:

- 0.3% Кумасси R250 в смеси Н20 : спирт : ледяная уксусная кислота в соотношении 5:3:1. Кумасси растворяют в спирте на мешалке в течение 15 минут. Затем добавляют воду и уксусную кислоту. Фильтруют.

- 0,1% раствор амидочерного в смеси изопропанол - уксусная к-та (25%-10%);

- коммерческая тест-система для количественного определения IgG- и IgA-антител к E.coli в сыворотках крови (E.coli 078 ELISA, DAKO, Дания);

- антитела диагностические против иммуноглобулинов кролика, меченные пероксидазой хрена, изготовленные НИИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи (ФС 423618-98);

- антитела диагностические против иммуноглобулинов кур, меченные пероксидазой хрена, изготовленные НИИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи (ФС 423618-98).

3.1.9. Антигены.

В качестве исходного эшерихиозного антигена использовали суспензии микробных клеток Escherichia coli (сероварианты 078, 08 и 02), полученные из 2-х - суточных агаровых культур, выращенных на агаре Хоттингера при +37°С и инактивированных при +56°С в течение 24 часов, дважды отмытых от среды забуференным физиологическим раствором (ЗФР) с последующим центрифугированием (4000 об/мин., 15 мин.).

Суспензии эшерихиозных антигенов для ИФА готовили в ЗФР (рН 7,3) путем доведения оптической плотности (ОП) от 0,01 до 0,50 о.е. мутности на фотоэлектроколориметре (КФК-2-УХЛ-4,2) при длине волны 540 нм в кювете 10 мм.

Выделение токсина из кулътуральной жидкости. Инокулировали 2мл стерильного бульона E.coli, выделенной после тестирования. Инокулированную культуру энергично встряхивали при 37°С в течение 1824ч. Это обеспечивало достаточный рост культуры (минимум ОП540 в кювете 1см) от 0.5 до 1.0 о.е. мутности при 10-кратном разведении. После инкубации проводили центрифугирование при 900g в течение 30 минут при 4°С и использовали надосадок после фильтрации (фильтр 0.2-0.45 |im) с низким белок-связывающим свойством в качестве образца.

3.1.10. Определение активности конъюгатов антивидовых иммуноглобулинов (,анти-Ig G-кур )ферментом пероксидазой хрена (ПХ).

Рабочее разведение полученного конъюгата определяли титрованием с гомологичным (Ig G-кур) и гетерологичным (Ig-кролика) иммуноглобулинами, адсорбированными в лунках полистироловых планшет.

Готовили разведение конъюгата (исходя из концентрации ПХ в полученном конъюгате) до концентрации 400, 300, 200, 100 и 50 нг/мл в ЗФР.

Результаты ферментативной реакции учитывали после инкубации в течение 30 минут при 37°С и отмывки ЗФРТ и учитывали по величине ОП490 окрашенного продукта, полученного в результате взаимодействия фермента с хромогенным субстратом - ОФД.

За рабочее разведение конъюгата принимали такое разведение, при котором ОП49о в реакции с положительным антигеном составляла 1.2 - 1.4, с отрицательным - 0.02 - 0.05 о.е.

3.1.11. Постановка непрямого метода ИФА для диагностики эшерихиоза

Для отработки условий постановки ИФА опыты проводили по следующей схеме: в качестве твердофазного носителя использовали 96-луночные полистироловые плашки (Dynatech, США). Для сенсибилизации иммунологических плашек в лунки вносили суспензии клеток Escherichia coli различных сероваров (02; 08; 078) разведенных до рабочей концентрации, в объеме 0,1 мл. Условия адсорбции антигенов были подобраны в опытах. Не связавшийся с поверхностью полистирола антиген отмывали 3-х кратно ЗФРТ. После термической обработки в течение 15 минут при 65°С (для фиксации антигена) планшеты можно хранить не менее 6 месяцев (срок наблюдения) при 4°С. для количественного определения антител в испытуемых сыворотках каждую из них титровали методом двукратных разведении в ЗФРТ на эшерихиозном антигене, либо вносили на антиген в одном разведении в тройной повторности и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. Стандартно отмывали. добавляли по 0,1 мл антивидовых пероксидазных конъюгатов в рабочем разведении в ЗФРТ и инкубировали 1 час при комнатной температуре. после стандартной отмывки в лунки добавляли по 0,1 мл субстратной смеси.

Реакцию останавливали после 15-30 минутной инкубации при комнатной температуре добавлением 0,05 мл IN H2SO4. Регистрацию цветной реакции, возникающей в результате взаимодействия фермента с субстратом, проводили инструментально на вертикальном фотометре Micro ELISA Auto Reader MR580 (Dynatech, США) при длине волны 490 нм. Результаты реакции выражали в единицах иммуноферментного анализа (ЕД ИФА). Данный показатель рассчитывали по формуле, предложенной в документах ВОЗ [122]:

ЕД ИФА= ^х,00,

ОП,, где ОПх — средняя оптическая плотность лунок с исследуемым образцом;

ОП0 — средняя оптическая плотность лунок с отрицательной контрольной сывороткой.

За положительную реакцию принимали значения ЕД ИФА не менее 200 плюс удвоенное среднее квадратическое отклонение (ИФА+2а). В нашем случае этот показатель равняется 244.

В дальнейших опытах по исследованию сывороток из хозяйств применяли ИФА с подобранными условиями.

3.1.12. Полиакриламидный гельэлектрофорез (ПААГЭ) с додецил сульфатом натрия (ДСН):

Электрофорез в полиакриламидном геле (ПААГ), содержащем 0,1 % ДСН, проводили по методу Laemmli U.K. [267] в вертикальной камере SE400 фирмы "Hoefer Scientific Instruments" (США). Концентрирование полос проводили при силе тока 45 мА / 2 стекла, при переходе на разделяющий гель силу тока повышали до 60 мА / 2 стекла. Длительность электрофореза составляла 50-60 мин.

Полученные электрофореграммы фиксировали 20 мин в 20% ТХУ при комнатной температуре, затем окрашивали раствором Кумасси R-250 в течение ночи при комнатной температуре.

Молекулярную массу белков определяли путем сравнения со смесью молекулярных маркеров, подвергнутых гидролизу как и опытные образцы, фирмы "Merck" (мол. массы от 12 до 78 кД). Для определения молекулярных масс белковых полос были определены коэффициенты относительной подвижности Rf:

Длина пробега образца, мм

Rf=

Длина геля после фиксации,

По значению коэффициента относительной подвижности для стандартных образцов был построен калибровочный график зависимости величины Rf от значений десятичного логарифма молекулярной массы. Исходя из значений коэффициентов относительной подвижности для исследуемых белков, их молекулярные массы были определены по калибровочным графикам.

3.1.13. Иммуноблот-анализ

Перенос белков на нитроцеллюлозную мембрану после разделения в геле проводили на аппарате "Semi-phor ТЕ-70" в "Товбин буфере" при постоянном токе 100 мА в течение часа. После переноса мембраны промывали в буфере для б лота и оставляли в нем на забивку на 20 минут. Затем мембраны погружали в раствор сыворотки в рабочем разведении в том же буфере. Инкубировали с сыворотками ночь при комнатной температуре на мешалке. Отмывали 2-3 раза t в блокирующем буфере и погружали в раствор конъюгата в рабочем разведении. Инкубацию с конъюгатом проводили 1.5 ч при комнатной температуре. Стандартно отмывали и погружали мембрану на 10-15 мин. в раствор субстрата (диаминобензидина). Результат реакции учитывали по появлению полос коричневого цвета, соответствующих местоположению разделенных белков. Реакцию останавливали, промывая мембрану дистиллированной водой.

Молекулярные массы окрашенных полос определяли по калибровочным графикам, исходя из значений коэффициентов относительной подвижности, как описано выше.

3.1.14. Результаты исследований обрабатывали статистически по

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Вершняк, Татьяна Викторовна, 2003 год

1. Алешкин В., Феклисова Л., Борисова И. Иммуноглобулиновые препараты для профилактики и лечения инфекционных заболеваний. // Врач. — 1997, —№6. —С. 16—17.

2. Алексеев Ф. Ф. К вопросу неспецифической профилактики колисептицемии кур. // Ветеринария, 1991, №6 С. 35.

3. Аллахвердиева И.И., Григорьева Н. А., Муцмахер Д. М. Микроклимат птичников и яичная продуктивность кур в конце продуктивного периода. Тр. Азерб. СХИ, серия «Ветеринария», 1981, вып.5 С.36-38.

4. Андреев Е.В. Ассоциированное воздействие на организм вируса и условно-патогенных бактерий // Ветеринария. 1984. -№7. - с.25-27.

5. Андрейчин М.А., Гебеш В.В., Гнатюк М.С. Энтеросорбция: достижения, проблемы, перспективы. // Врачеб. дело. — 1991. — №9. — С. 12—19.

6. Андрейчин М.А, Ивахив О.Л. Энтеросорбция в комплексном лечении инфекционных больных. // Клин, медицина. — 1994. — Т. 72, №6. — С. 11—14.

7. Андрейчин М.А., Копча В. С., leaxie О.Л. Пщвищення ефективност1 лжування хворих на rocTpi кишков1 шфекц11 за допомогою ентеросорбент1в i сшпбору. // 1нфекцшш хвороби. — 1995. — №1. — С. 12—16.

8. Андрейчин М.А., Луцук ОС., Андрейчин С.М., Копча B.C. Ентеросорбцшне лжування хворих на rocTpi кишков1 шфекци та хрошчш колгги з д1ареею. // Лжарська справа. — 1996. — №7—9. — С. 147—151.

9. Андреева О. С. О роли патогенных серотипов кишечной палочки при заболевании молодняка с/х животных. // Материалы Всесоюз. конф. по болезням молодняка с/х животных и птиц М., 1984.- С. 54-56.

10. Андрюнин Ю. И. Ветеринарно-санитарная защита ферм и методы дезинфекции.// Ветеринария, 1989, №11- с. 8-12

11. Андрюнин Ю. И., Дукаценко В. Г. Дезинфекция в животноводческих комлексах.// Ветеринария, 1991, №10 С. 42-46.

12. Анапенко В. М. Смешанные инфекции с/х животных. Киев, «Урожай», 1990.-172.

13. Анапенко В. М. Ассоциированные инфекции птиц в иммуноморфологическом аспекте. // Межвуз. сб. науч. трудов, Харьков, 1991 — С. 30-31.

14. Анапенко В. М. Ассоциированные инфекции и иммуностимуляция в условиях откормочных хозяйств. Новое в учении о заразных болезнях (вирусных, бактериальных, зоопарапзитарных). // Материалы 3-го съезда паразитоценологов.-Киев, 1994-С. 151-160.

15. Антитела. Методы. 1 т. // Под ред. Д.Кэтти.- М.: Мир, 1991.-287с.

16. Аринкин А.В. Коррекция иммуного ответа у цыплят, заражённых смешанной инвазией. // Ветеринария, №1 1997, с.30.

17. Аржаков В. Н. Чувствительность к антибиотикам патогенных штаммов Е. coli, выделенных из различных птицеводческих хозяйств. -Сборник науч. работ Сиб. НИВИ -т. Инфекционные болезни животных , 1989, в. 34.-С. 105-110

18. Артемьева С. А. Колибактериоз птиц. М.: Колос, 1997.-95 с.

19. Артемьева С. А. Бактериоциногения кишечной палочки и пастерелл. // Птицеводство, 1980, №11-С. 45.

20. Артемьева С. А. Смешанная инфекция пастереллёза и колибактериоза. // Птицеводство, 1986, №8-С. 45-46.

21. Артемьева С. А. Современные методы профилактики коли и паратифозных инфекций птиц Сб. тр. Всесоюз. НИВИ, 1987, В. 11/22/-С. 5055.

22. Аруин Л.И., Капуллер Л.Л., Исаков В. А. Морфологическая диагностика болезней желудка и кишечника. М.: Триада X, 1998. - 496с.

23. Атамась В. А., Масленникова С. И. Ассоциированное течение болезней бактериальной этиологии. // Ветеринария, 1985, №3.-С. 37-39.

24. Ахмедова А. Г. Биология бактерий группы кишечной палочки, выделенной от птиц. // Материалы науч.- произ. конф., Самарканд, 1987.С. 37

25. Ашмарин И. П., Воробьёв А. А. Статистические методы в микробиологических исследованиях JL: Медгиз., 1962.-179 с.

26. Бабина М.П. Коррекция имунного статуса и повышение продуктивности цыплят-бройлеров пробиотиками. // Актуал. пробл. интенсив, развития животноводства Горки. - 1998. - с.294-299.

27. Байдевлятов А.Б. Справочник по болезням сельскохозяйственных птиц,- Киев, "Урожай", 1980.-С.136.

28. Байдевлятов А.Б., Герман В В., Киприч В В. Система ветеринарно-санитарных мероприятий в промышленном и племенном животноводстве. -Киев: "Урожай", 1987,- 222 с.

29. Байдевлятов А.Б. Пути повышения жизнеспособности птицы в промышленном птицеводстве Научно-техн. бюл. УНИИП, 1990, №6, С. 3842.

30. Байдевлятов А.Б. , Бессарабов Б.Ф., Ольховик Л.А. Справочник по болезням с/х. птицы-Киев:"Урожай",1992.-200 с.

31. Байдевлятов А.Б., Фотина Т.И. Дезинфекция птичников при ассоциированных бактериозах. // Материалы межгос. конф. по научным и прикладным проблемам паразитоценологии.- Киев-Харьков-Луганск,1992-С.34.

32. Байдевлятов А.Б. Сравнительная характеристика дезинфекционных средств при ассоциированных бактериозах. // Материалы lV-ro Съезда паразитоценологов Украины.- Харьков, 1995.-С.153.

33. Бактериальный эндотоксикоз /Шенкман Б.З., Андрейчин М.А., Степанов С.А., Богомолова Н.В./ — Саратов: Изд-во Сарат. ун-та, 1991. — 240 с.

34. Белая ОФ. Клинико-патологические, иммунологические и диагностические аспекты циркуляции в организме антигенов и токсинов энтеробактерий как факторов патогенности возбудителей при острых кишечных заболеваниях: Дисс. д-ра мед. наук.- 1994.- 426 с.

35. Белая Ю.А. Реакция коагглютинации — чувствительный экспресс метод индикации антигенов и токсинов возбудителей кишечных и других заболеваний. // Новое в практике лаб. иссл. Горький.- 1987.-С. 66-70.

36. Бессарабов Б.Ф. Ветеринарно-санитарные мероприятия по профилактике болезней птиц.— М: Россельхозиздат.,1990,- 187 с.

37. Бессарабов Б.Ф., Байдевлятов А.Б. Рецептурный справочник по болезням птиц Сумы: МКИПП "Мрия",1992. - 304 с.

38. Блюгер А.Ф., Векслер Х.М., Новицкий И.Н. Клиническая иммунология кишечных инфекций. — Рига: Звайгзне, 1980. — 214 с.

39. Богомаз В.М., Дынник О.Б. Серологическая диагностика инфицированности Helicobacter pylori методом иммуноферментного анализа. // Украшський медичний часопис №5 -IX/X - 2001 -с. 108-110.

40. Богосьян А.А. Скрытые очаги инфекции в помещениях для птиц и новые способы их обеззараживания. // Тезисы 5-й межгос.межвуз. науч.конференции Санкт-Петербург, 1993 -С. 10-16.

41. Болезни птицы / Пер. с анг.О.В.Мищихи, О.А.Покорной М.: Агропромиздат, 1985. - 349с.

42. Бондар И.О. Ерготрошки в профшактищ та терапи хвороб птищ. // В1сник Сумського Державного аграрного ушверситету.- Суми, 2000. с.28-32.

43. Борисов А.Е. Респираторные инфекции телят при ассоциированном течении. // Материалы межгосуд. конф. по научным и практ. проблемам паразитоценологии- Киев Харьков - Луганск, 1993-С. 17-18.

44. Бочаров Д.А. Дезинфекция на птицефермах Птицеводство, 1989, №6, С. 29-31

45. Бродов А.Е., Малеев В.Д., Машилов В.П. Осложнения у больных пищевыми токсикоинфекциями и сальмонеллезами. // Клин, медицина. — 1996. — №1. —С. 36—38.

46. Бродов А.Е., Ющук Н.Д., Кареткина Т.Н. Трудности дифференциальной диагностики между рядом инфекционных заболеваний и пищевыми токсикоинфекциями. // Клин, медицина. — 1989. — №7. — С. 131— 135.

47. Бродов А.Е., Ющук Н.Д., Малеев В. В. Клинико-патогенетические особенности инфекционно-токсического шока у больных острыми кишечными инфекциями. // Эпидемиология и инфекционные болезни. — 1997. — №2. — С. 22—26

48. Бродянский Ю.М., Чайко Н.А. Улучшение методов бактериальных и серологических исследований при кишечных инфекциях. // Острые кишечные инфекции.-JI.- 1982,-вып. 6.- С. 124-132.

49. Бублик В.Н., Борисов А.Е. Роль паразитоценологии при промышленном содержании животных. // Материалы межгосуд. науч. конф. -Харьков, 1995,-С. 348-351.

50. Бурханова Х.К. Химиотерапия и специфические средства при колибактериозе и пуллорозе-тифе цыплят. // Передовой науч.- технич. опыт в птицеводство.—Загорск, 1980, №2,- С. 32—34.

51. Бусол В. А. Теоретические и практические аспекты управления эпизоотическим процессом при хронических инфекционных болезнях. // Материалы международ, науч. конф Харьков, 1995 - С. 16-20.

52. Васильев В. С., Комар В. И., Цыркунов В. М. Практика инфекциониста. — М.: Высш. шк., 1993. — 495 с.

53. Войно-Ясенецкий М.В. Биология и патология инфекционных процессов. — JL: Медицина, 1981. — 207 с.

54. Використання ентеросорбенив у комплексному лшуванш хворих на rocTpi кишков1 шфекцш: Метод. Рекомендацш. /Склали Андрейчин М.А., Гебеш В.В., 1вах1в О.Л./ — Тернопшь, 1992. — 18с.

55. Волинецъ Л., Колганов О., Потоцький М. Симптоми, патоморфолопя та бактерюлопя хрошчного асощйованого кол1бактерюзу курей. // Ветеринарна медицина Украши, №12 1999 - с.20.

56. Волков Г.К., Саввинова М.С. Загрязненность воздуха в многоэтажных птичниках. // Ветеринария, 1990, №7 С.20-22.

57. Волошин В.Г. Особенности течения и патологоанатомические изменения при смешанных бактериозах птиц в условиях Сумской области. // Материалы науч. конф Сумы, 1998 - С.36-37.

58. Воробьев С.И., Михайлова В.Е. Профилактика инфекционных болезней в условиях инкубаториев Птицеводство, 1988,№7 - С.42-43.

59. Воробьев С.И. Санация птицеводческих помещений.-Птицеводство, 1989, №12.- С. 16-17.

60. Воскобойников В.А. Организация ветеринарных мероприятий.-Москва, Агропромиздат, 1993,- 216с.

61. Воскобойников В.А. Профилактика болезней птиц в птицеводческих хозяйствах. Киев: "Урожай", 1993 - с.86-92.

62. Гебеш В.В. Современные эфферентные методы в лечении больных острыми кишечными инфекциями // Кишечные инфекции. — Киев, 1991. — Вып. 22. — С.46—50.

63. Герман В.Е., Соколенко Н.Т. Санитарно-бактериологическая характеристика птицеводческих помещений. // Ветеринария, 1985, №9 С. 34.

64. Гнатюк М.С., Ивахив О.А., Сорока Н. Е. Энтеросорбция в комплексном лечении больных пищевыми токсикоинфекциями. // Съезд врачей-инфекционистов (Суздаль/сентябрь 1992 г.). — М., 1992. — Т.1. — С. 382—385.

65. Горковая А.Г. Дезинфекция птичников при интенсивном птицеводстве. // РЖ "Ветеринария", 1978, №5.- С.3-5.

66. Грачева Н.М., Щетинина КН. Клиническая химиотерапия инфекционных болезней. — JL: Медицина, 1991. — 256 с.

67. Григорьев А.В., Бондаренко В.М., Абрамов В.А. Разработка и клиническая оценка пробиотика "Бифидумбактерин форте". // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. — 1997. — №3. — С. 92— 96.

68. Грошева Г.А. Колибактериоз и меры борьбы с ним в птицеводческих хозяйствах промышленного типа Труды ВИЭВ, 1979, т.49-С. 123.

69. Грошева Г.А. Колисептицемия птиц и методы ее диагностики. // Ветеринария, 1989, №4.-С.65-66.

70. Данилова А.К. Определение патогенности серологических типов кишечной палочки на куриных эмбрионах Труды ВГНКИ, 1987, т. 14, С. 133— 142.

71. Данилова А.К. Эффективность применения элеутерококка на курах. // Сб. науч. трудов Донского СХИ, 1989, т. 15, вып 2.-С.31-34.

72. Демченко А.В., Збудчак А.В., Макарчук В.И. К вопросу распространения и диагностики смешанных инфекций птиц в хозяйствах Одесской области. // Инфекционные и инвазионные болезни с.-х. животных и птиц. Одесса.- 1983.- с. 20-23.

73. Дмитриев А.Ф. Санитарно-бактериологическая оценка воздуха помещений. // Ветеринария, 1989, N7- С.26-28.

74. Донник Н. Профилактика болезней птиц. Киев: "Урожай", 1994.173с.

75. Дробчак В., Шеремета В. 1нтернет: hobi можливосп для ветеринарно1 науки та практики // Ветеринарна медицина Украши, №11 — 2002 -с.42-46.

76. Дудницкий И.А., Деркачев П.П., Гришин В В. Дезинфицирующие средства. // Ветеринария, 1989, №2 С. 5-7.

77. Дудницкий И.А. Контроль качества дезинфекции. // Ветеринария, 1991, №9- С. 21-25

78. Евдокимов М.И. О колибактериозе. // Птицеводство, 1980, №7.-С. 42-43

79. Евдокимова Е.С., Сапронова Л.Г., Дурдыев Д.Д. Распространение и носительство энтеропатогенных типов кишечной палочки у птиц. // Ветеринария, 1986, №9.-С.34-36.

80. Егоров В.Т., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., Гаврилова Е.М. Теория и практика иммуноферментного анализа.- М.: Мир, 1991. 456 с.

81. Ежов В.И. Действие антибактериальных препаратов на возбудителя колисептицемии птиц. // Ветеринария, 1980, №12 С.33-34.

82. Ежов В.И. Антибиотикоустойчивость штаммов эшерихий, выделенных при колисептицемии птиц. Труды ВИЭВ, 1992, т.63 - С.46-48.

83. Еремеев М.Н. Гемолитическая активность энтеропатогенных кишечных палочек. // Ветеринария, 1977, №2 С.46-47.

84. Журкин А.Т., Макарова Т.В., Ставицкая Е.Л. Особенности современного течения дизентерии в Санкт-Петербурге. // Клин, медицина. — 1996. —№9.—С. 32—33.

85. Заволока А.А., Смолянинов В.К, Руденко А.Ф., Луи Роже. Экономическая эффективность профилактических противоэпизоотических мероприятий при Ньюкаслской болезни птиц. // Интенсификация птицеводства: межвуз.сб. науч. трудов Харьков, 1991, С. 73-77.

86. Закомырдин А.А. Ветеринарно-санитарные мероприятия в промышленном птицеводстве.-Колос, Москва, 1981, 271 с.

87. Зон Г.А. Изучение биологических свойств эпизоотических культур эшерихий. // Ветеринария: Республ.межвед.темат.сб.науч.трудов. Киев, 1987, вып.58.- С.14-16.

88. Зон Г.А., Котина Т.Н. Санитарная оценка продуктов птицеводства при ассоциированном эшерихиозе и эймериозе. // Материалы IV-й межгосуд. конф.- Киев Харьков - Луганск, 1990.-С. 110.

89. Зыкин Л.Ф., Хащев З.Ю. Усовершенствование лабораторной диагностики кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза. // Ветеринария. -2001.-№5.-С. 22-24.

90. Зубик Т.М., Иванов КС., Казанцев А.П., Лесников А.Л. Дифференциальная диагностика инфекционных заболеваний.— Л.: Медицина, 1991.—376с.

91. Ибрагимов А.А. Клинико-анатомическая характеристика колисептицемии птиц. // Материалы Всес. конф. по патанатомии.- Ленинград, 1983. С.220-224.

92. Иванов А.И. Острые кишечные инфекции. — Л.: Медицина, 1982. — 182с.

93. Иванов К.С., Иванов А. И. Диагностика острых диарейных инфекций. И Клин, медицина. — 1992. — №7—8. — С. 64—69.

94. Ieaxie О.Л., Луцук О.С., Копча B.C. Ентеросорбщйна терашя при гострих кишкових шфекщях. // 1нфекцшш хвороби. — 1997. — №2. — С. 39— 42.

95. Ибрагимов А.А. Патоморфология при колибактериозе цыплят.-Меры профилактики и диагностики бактериозов с/х. животных- Ашхабат, 1993- С.89-91.

96. Илюшечкин Ю.П. Паразитоценоз кокцидий и кишечной палочки в организме цыплят. // Ветеринария, 1983, №.2 С. 28-30.

97. Кадымов Р. А., Дунамалиев Г.Э., Агеев Э.М., Бачиров М.З. Ассоциированное течение некоторых болезней бактериальной этиологии. // Материалы межгосуд. конф Киев - Харьков - Луганск, 1993-С.49-50.

98. Кармолиев Р.Х. Современные биохимические методы исследования в ветеринарии и зоотехнии.- М.: Колос, 1971.- 288с.ил.

99. Карпов В.П. Справочник ветеринарного врача птицеводческого предприятия. -М.: Колос, 1982.

100. Каталог фирмы Bayer, Германия. 2001.

101. Киприч В.В., Бабкин Б.Ф. Организация ветеринарно-санитарных мероприятий в птицеводческих хозяйствах.- Харьков, 1990.-С. 16-20.

102. Ктрич ВВ., Трускова Т.Ю. Д1агностика бактер1альних шфекцш у птищ. // Вюник СНАУ. 2000 - с.21-27.

103. Кирпиченок В.А. Справочник по ветеринарной дезинфекции М., 1991.- 136 с.

104. Клецов М.А. Совершенствование ветеринарно-санитарной защиты на птицефабриках Сумского района Сумской области. // Труды Сумского СХИ. 1993.- С.28-31.

105. Клиническая лабораторная диагностика: Справочное издание / И.П.Кондрахин, Н.В.Курилов, А.Г.Малахов / М.: Агропромиздат, 1985. -287с.

106. Ковалёв В.Ф., Волков И.В. Резистентность эшерихий и сальмонелл к применяемым антибиотикам. // Ветеринария, №7 1989. - с.30.

107. Кожемяка Н.В. Колибактериоз // Птицеводство.- 1991.- №4 с.2627.

108. Кожемяка Н.В. Санитарные меры основа профилактики заразных болезней в птицеводческих хозяйствах. // Ветеринария, 1990, №12.

109. Колганов О.В., Волинець Л.К. Einepixii та мшоплазми в етюлош ресшраторних хвороб курей та Тх профшактика. // Вюник Сумського Державного аграрного ушверситету.- Суми, 2000. с.69-71.

110. Коровин P. H. Заразные болезни птиц и разработка мер профилактики.// Ветеринария. -1991.- №6.- с.3-6.

111. Коровин Р.Н., Зеленский В.П., Грошева Г.А. Лабораторная диагностика болезней птиц / Справочник. М.: Агропромиздат., 1989. - 256с.

112. Коровин Р.Н., Урбан В.П. , Богосъян А. А. Бактериальная загрязненность.//Ветеринария, 1993, №2-С. 14-16.

113. Кот А.П. О микробной загрязненности воздуха птичников. // Ветеринария 1986, №4 - С. 26-29.

114. Крамарев С.О. Лжування гострих кишкових шфекцш у дггей. // Журн. практического врача. — 1997. — №3. — С. 32—34.

115. Краснобаев Е.А. Смешанные вирусные и вирус-бактериальные кишечные инфекции на свинокомплексе. // Материалы международ, науч. конф. Харьков, 1995. -С.71-76.

116. Краткий определитель бактерий Берги /под ред.Дж. Хоулта/.-М., Мир, 1980, 444 с.

117. Крятов О.В., Крятова Р.Е. Сучасш технологи виробництва продукцп тваринництва, ix недолши та переваги. // Материалы науч.конфер.СНАУ, Сумы, 2002.

118. Кудрявцев Ф.С., Зеленский В.Н., Малыгин М.М. Профилактика болезней птиц Ленинград, Колос, 1991, 119 с.

119. Курбанова М. А, Изучение микробных культур, выделенных из патматериала от птицы, павшей от паратифа и колибактериоза. //Ученые записки Азербайджанского СХИ им. С.Агамала-Оглы, 1989, №1, С.32-34.

120. Кэрстак Э. Успехи в разработке иммуноферментных методов: получение реагентов, планирование эксперимента и интерпретация результатов. // Бюллетень ВОЗ.- 1985. №4. - С. 125-126.

121. Лабораторная диагностика. Часть 2. Микробиологические и паразитологичесие исследования. М., Воениздат. - 1985.

122. Лабораторные исследования в ветеринарии / под ред. Антонова

123. B.Я., Блинова П.Н. -М., Колос, 1986, 637 с.

124. Лабораторные исследования в ветеринарии. Бактериальные исследования. М., 1986. - с.128-130.

125. Лебедев А.К. , Борисенкова А.II., Мухамедиян А.А. Смешанное течение пастереллёза и колибактериоза у кур. // Ветеринария, 1973, №121. C. 5 8-60.

126. Леесмент О.В. Усовершенствование методов диагностики и мероприятия по борьбе с пуллорозом-тифом птиц. Автореф.дис. на соискание ученой степени канд.наук.-Тарту, 1992,- 17 с.

127. Литвин В.П. Принципы диагностики заболеваний в крупных хозяйствах. // Теоретические и практические вопросы ветеринарии. Киев, Урожай, 1982.-С. 16-20.

128. Литвин Б.П. Паразитоценозы свиней в племенных хозяйствах Украины. // Межгосуд. конф. по науч. и прикл. проблемам паразитоценологии Киев - Харьков - Луганск, 1993- С.57.

129. Литвин Б.П., Поживин А.И., Яцышин А.И. Закономерности течения эпизоотического процесса при смешанных (ассоциированных) болезнях телят и поросят. // Межгосуд. науч. конф. Харьков, 1995. - С.645-648.

130. Лобзин Ю.В., Огарков П.И., Сиволодский Е.П. и др. Дизентерия и другие кишечные диарейные инфекции. М., 1999 - 138с.

131. Луцук О.С., Андрейчин С. М., Копча B.C. Cnoci6 мюцевого лпсування колтв. // 1нфекцшш хвороби. — 1995. — №2. — С. 37—39.

132. Лысюк В.В. Ассоциированные инфекции и возможности ветеринарной медицины в откормочном комплексе. // Межгосуд. конференция по паразитоценологии. Киев - Харьков - Луганск, 1993. - С. 58.

133. Лысюк В.В., Апатенко В.М. Ассоциированные инфекции и иммуностимуляция в условиях откормочного хозяйства //Новое в учении о заразных болезнях вирусных, бактериальных, зоопаразитарных //Материалы 3-го съезда паразитоценологов. Киев, 1994 - С. 151-160.

134. Лядова Е., Лазничкова К., Соботкина Я. Результаты применения некоторых лабораторных методик при кишечных инфекциях. // Острые кишечные инфекции.- Л.-1982.-вып. 6.- С. 137-143.

135. Ляшенко Ю.И., Иванов А.И. Смешанные инфекции. — Л.: Медицина, 1989.— 240 с.

136. Маловастый К. С. Применение полиен-1 при колибактериозе цыплят. // В1сник Сумського Державного аграрного ушверситету.- Суми, 2000.- с.84-85.

137. Материалы XX Всемирного птицеводческого Конгресса, 2-5 сентября, 1996.

138. Mamepicuiu XIII зЧзду Украшського наукового товариства мжробюлопв, ешдемюлопв та паразитолопв 1м.Д.К.Заболотнього. К., 1996.

139. Материалы научной конференции СНАУ // Тезисы. Сумы -2002.

140. Методика определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий /утверждена ГУ МСХ СССР/ М., 1983, 10 с.

141. Методические рекомендации по проведению бактериологических исследований при пищевых отравлениях. М., Минздрав РФ, 1999.

142. Методические указания по бактериологической диагностике1./смешанной кишечной инфекции молодняка животных, вызываемой патогенными энтеробактериями. №13-7-2/1759 от 11.10.99 -утв.В.В.Селиверстов, Минсельхозпрод России.

143. Методические указания по определению чувствительности к антибиотикам возбудителей инфекционных болезней с.х. животных/ М., 1972,ч-4 с.

144. Методы исследований в иммунологии / Под ред.И.Мерковитса, Б.Перниса. М.: Мир, - 1981. - с.428-467.

145. Мшанко О.О. Профшактика зм1шанних форм бактерюз1в // Bicmnc Сумського Державного аграрного ушверситету.- Суми, 2000. с.88-90.

146. Митюшников В.И., Кравченко Н.А. Микроклимат птичника и его влияние на резистентность и продуктивность кур.- Птицеводство, 1983, №4. -С.24-26.

147. Мясо птицы. Методы отбора образцов. Органолептические методы оценки качества. ГОСТ 7702.2-74.

148. Мясо птицы. Методы химического и микроскопического анализа свежести мяса. ГОСТ 7702.1-74.

149. Нго Т. Т., Ленхофф Г. М. Иммуноферментный анализ антител. // Иммуноферментный анализ.- М.: Мир, 1989 С. 172-190.

150. Никитенко А. И., Заика А.А. Нитрофурановые препараты при колибактериозе животных. // Ветеринария, 1984, №4. С. 14-16.

151. Николаева Л.Г., Белая Ю.А., Быстрова С.М. и др. Обнаружение бактериальных антигенов с помощью реакции коагглютинации у больных острыми кишечными инфекциями. Кишечные инфекции. // Респ. межвед. сб., Киев, 1991.-С. 65-66.

152. Новикова А. Ф. Изучение ассоциированного течения пуллороза-тифа и колибактериоза.— Передовой науч.производ. опыт в животноводстве, 1985, №1 С.14-17.

153. Ольховик Л.А., Зубова Т.И. О контроле птицеводческих хозяйств на пуллороз-тиф. // Болезни птиц при интенсивных методах ведения отрасли: Межвуз.сб. науч. трудов,-Харьковский СХИ-Харьков, 1986.-С.39-42.

154. Осколков B.C. Свойства изолятов кишечной палочки, выделенных от птиц. // Ветеринария, 1972, №2 С.43-44.

155. Острые кишечные инфекции, вызванные условно-патогенными микроорганизмами / Е.П. Бернасовская, В.Н. Бычковский, С.И. Бидненко / — Киев: «Здоров'я», 1984. — 152 с.

156. Панасюк Д.И Учение о паразитоценозах и ассоциативных заболеваниях. // Тезисы докл. 11-й Всесоюз.съезда паразитоценологов — Киев, 1985.-С.259-261.

157. Панасюк Д.И. Особенности этиологии и меры борьбы при смешанных болезнях птиц // Ветеринария. -1991. №5. - с.38-41.

158. Паткар 1.1., Дашлов О.О., Педан В.А. Результати використання байтрилу i ав1гарду для профилактики бактер1альних хвороб птищ. // Вюник Сумського Державного аграрного ушверситету.- Сумм, 2000. с.96-99.

159. Паникар И.И., Решетило А.И. Особенности патогенеза, эпизоотологии и диагностики вирусных болезней птиц- Профилактика наиболее опасных вирусных болезней птиц.— Кишинев, 1991.- С. 16-20

160. Паникар ИИ, Тютченко Ю.Н., Решетило А.И. Особенности диагностики вирусного гепатита утят, протекающего в ассоциации с бактериальными и вирусными болезнями. // Интенсификация птицеводства: Межвуз.сб. науч. трудов.— Харьков, 1993.- С.83-87.

161. Паникар И.И, Корявець В.П. Байтрил у лжуванш бактерюз1в птищ. // Тваринництво Украши, 1995, №2. С. 14-16.

162. Петков Г., Байков Д., Руссак Г. Вьезможност за обеззаразиване на вэздуха при промышлено отлегидане на птицы. // Вет.мед.науки, 1991,т.24, №3- С.67-72.

163. Петров А.И. Дезинфекция бактерицидными пенами // Кролиководство и звероводство, 1985, №6.-С. 19-21.

164. Погребняк Л.И. Ассоциативное течение инфекционных болезней в свиноводческих комплексах. // Межгосуд. конф. по науч. и прикл. проблемам паразитоценологии.— Киев Харьков - Луганск, 1993. С.72-73.

165. Покровский В.И., Малеев В.В. Пищевые токсикоинфекции. // Инфекционные болезни: Руководство для врачей / Под ред. В.И. Покровского./

166. М. Медицина, 1996. — С. 144—154.

167. Покровский В.И., Ющук Н.Д. Бактериальная дизентерия. — М. Медицина, 1994. — 256 с.

168. Поляков А.А. Руководство по ветеринарной санитарии — М., Агропромиздат, 1986,— 318 с. 144 .

169. Поляков И.В. Практическое пособие по медицинской статистике.- Л., 1975.- 127с.

170. Поспелова В., Грачева Н., Ханина Г. Эубиотики — эффективное средство нормализации микрофлоры — и вклад МНИИЭМ в их разработку. // Врач.— 1997. — №4. — С. 30—32.

171. Постовит В.А. Пищевые токсикоинфекции. — Л.: Медицина, 1984.280 с.

172. Правила ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясопродуктов. 2000.

173. Прискока В.А. Определение состояния иммунной реактивности. // Материалы международ.науч.конф.—Харьков, 1995,-С.430—431 .

174. Прискока В.А, Достоевський П.П., Борзяк А.Т. Паразитоценози як етюлопчний фактор зм1шаних шфекцш.— Ктв, 1995, -20 с.

175. Прямухина Н.С., Семина Н.А. Дифференциация кишечных эшерихиозов. //Микробиология, эпидемиология и иммунобиология. — 1991.2.—С. 81—87.

176. Радчук Н.А., Грампанис В.Э. Роль аэрогенного заражения в распространении бактериозов птиц. // Ветеринария, 1982, №2. С.50-52.

177. Радчук Н.А. Профилактика и лечение бактериозов птиц в условиях птицефабрик. // Материалы науч. произвол, конф.— Харьков, 1990, С.37-41.

178. Ребенко Г.1. Кол1бактерюз телят. // Материалы научной конференции СНАУ. Тезисы. Сумы -2002. - с.59 - 60.

179. Резвых А.Г. Колисептицемия.— Птицеводство, 1980, №2 С.4850.

180. Руководство по инфекционным болезням с атласом инфекционной патологии. / Под ред. Лобзина Ю.В., Козлова С.С., Ускова А.Н./ 2000 - 138с.

181. Рыженко В.П., Манченко В.М. Влияние ассоциированных инфекций на эпизоотический процесс. // Материалы междунар. конф.— Харьков, 1995. С.37-40.

182. Савов Д. Микробная загрязненность воздуха в бройлерном помещении.— Науч. труды Казан, вет. института.— Казань, 1993, т. 131. С.41-43.

183. Серебряков B.C. Изучение действия некоторых антибиотиков на возбудителей бактериозов птиц.- Уч.записки Азербайджан СХИ, 1990, С.36-39.

184. Серебрякова А.Г. Профилактика колибактериоза птиц в ЗОСП:- Сб. науч. трудов ЗОСП, 1989, т.З.- С.70-72.

185. Синицин В. Перспективи розвитку 1ммуноферментного методу д1агностики шфекцшних хвороб тварин. // Ветеринарна медицина Украши, №2 1996 - с.18-19.

186. Скутарь И.Г. Химиотерапия и профилактика бактериальных инфекций птиц. // Труды ВНИТИП, Загорск, 1989.- С.6-8. 157.

187. Скутарь И.Г. Экология, иммунное состояние и профилактика инфекционных болезней животных. // IV-я межгосуд. конф.— Киев Харьков -Луганск, 1993.-С.98.

188. Скрыпник Б.Г., Бабкин А.Ф., Красников Г.А. Изучение причин гибели молодняка крупного рогатого скота на откормочном комплексе. // Материалы межгосуд. конф. по науч. и прикл. проблемам паразитоценологии.— Киев Харьков - Луганск, 1993- С.98.

189. Скрипченко Г.С., Пономаренко А.К. Новий метод тдвищення ефективност1 1мунобюлопчних препарат1в. // Материалы международной конфер.— Харьков, 1995. С.665-666.

190. Смирнов A.M., Бубнов В.Д. Характеристика факторов периферической защиты в птичниках. // Интенсификация птицеводства: Межвуз. сб. науч. трудов.— Харьков, 1991- С. 107-109.

191. Собко А.И., Синицын А.П. Общая эпизоотология, иммунологические, экологические и методологические проблемы. // Международ, науч. конф-Харьков, 1995 -С. 12-14.

192. Соколов Б.Д. Вакцинопрофклактика в птицеводстве. // Международ, науч. конф.— Харьков, 1995,-С. 438-440.

193. Соколов БД., Андреева H.JI. О классификации эрготропиков. // Тезисы докл. 2-й межвуз.науч.-практич. конф. "Новые фарм. средства в ветеринарии". -1990 -с.56

194. Старчеус А.П. Современные методы диагностики инфекционных болезней животных. // Международ, науч. конф.—Харьков,1995, С. 358-361.

195. Стешов Ф.Ф. Сравнительная оценка методов обнаружения кишечной палочки при контроле качества дезинфекции. // Лабораторное дело, 1997, №12. С.743-745.

196. Сытдыков А.К. Вопросы специфической профилактики колибактериоза. // Ветеринария, 1984 , №10 .- С.28-30.

197. Сюрин В.Н., Аликаев В.А., Сосов Р.Ф. Стрессы и вирусоносительство. // Птицеводство, 1973, №5 С.91-96.

198. Сюрин В.Н., Фомина Н.В., Белоусова Р.В. Ветеринарная вирусология.— М.,1984, Колос,- 376 с.

199. Терешин KM. Интенсификация птицеводства и его проблемы. // Интенсификация птицеводства: Межвуз. сб. науч. трудов.— Харьков, 1987. -С. 5-13.

200. Технологические инструкции по убою, обработке и хранению мяса птицы. 1991.

201. Третьяков А.Д., Оленина В.И., Тихонова О.Г. Методика определения энтеропатогенности микроорганизмов. //Ветеринария, 1989, №2—С.48-49.

202. Урбан В.П. Проблемы эпизоотологии в промышленном птицеводстве. Система мероприятий по обеспечению эпизоотического благополучия и рентабельности птицеводческих предприятий. // Тезисы докл. науч.- производ. конф Ломоносов, 1985, часть 1- С. 17-20.

203. Федорова З.П. Серологическая характеристика кишечной палочки, выделенной от птицы и из воздуха птичников. // Передовой научно-производ. опыт — в производство, 1992, №2 С. 14—16.

204. Фёдорова З.П., Ещенко И.Д., Погребняк Л.Л., Лучин А.И. Микрофлора воздуха в птичнике // Ветеринария. 1984. - №1 - с.24-25.

205. Фотта Г.А. Мжробюлопчний мошторинг курчат на виводь // Материалы научной конференции СНАУ. Тезисы. Сумы -2002. - с.61 - 62.

206. Фотта Т.1. Етюлопя кишково1 форми einepixio3y. // Вюник Сумського Державного аграрного ушверситету.- Суми, 2000. с. 130-131.

207. Фотина Т.И., Зон Г.А., Фотин А.И, Миланко А.А. Ветеринарно-санитарная экспертиза тушек птицы при эшерихиозе. // Межвуз. сб. науч. трудов.—Харьков, 1991.-С.79-83.

208. Фомина Т.И., БайдевлятовА.Б. Санитарно-бактериологическая характеристика воздушной среды инкубаториев. // Конф. по птицеводству.— Борки Симферополь, 1992.— С. 116-117.

209. Фотта T.I. Удосконалення системи заход1в по профилактищ einepixio3a та пулорозу-тифу птищ. // Матер1али наук. конф. Сумського СГ1.— Сумы, 1995.-С.48.

210. Хазенсон А.В., Чайка Н.А. Иммунологические основы диагностики и эпидемиологического анализа кишечных инфекций. — Д.: Медицина, 1987. —112с.

211. Хапцев З.Ю. Усовершенствование лабораторной диагностики кишечного иерсиниоза сельскохозяйственных животных: Автореф. дис. канд. вет. наук СГАУ. -Саратов, 2000. 23 с.

212. Цимбал А.Д., Станислав В.И. Микробная ассоциация в помете кур. // Межгосуд. конф. по паразитоценологии.— Киев-Харьков-Луганск, 1993,-СИИЗ.

213. Цинзерлинг А.В. Современные инфекции: Патанатомия и вопросы патогенеза: Руководство. — СПб.: СОТИС, 1993. — 363 с.

214. Часнык Н.Г., Волошин В.Г., Клецов М.А. Особенности профилактики и меры борьбы со смешанными инфекциями птиц в хозяйствах Сумской области. // Материалы науч.конф. Сумского СХИ.— Сумы, 1995,— С.136-137.

215. Чернуха В.К., Люлин П.В. Видовой состав возбудителей и совершенствование мер борьбы с эймеризом индеек // Интенсификация птицеводства: Межвуз. сб. науч. трудов.— Харьков, 1991. С.62-69.

216. Чибисова В А., Селютина Д.Ф., Горелов В.Н., Драновская ЕА., Скавронская А.Г. Выделение и очистка антигенов бруцелл, синтезированных клетками Escherichia coli К12. // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология.-1992.-№3-4.-С. 12-17.

217. Чикунова Л.1. Бактер1альна забруднешсть пов1тря при промисловому вирощуванш бройлер1в. // Ветеринар1я, 1989, Кшв, В.№50. С. 77-79.

218. Шаблий В.Я. Справочник по ветеринарной санитарии.— М., Колос, 1986, 186 с.

219. Шаблий В.Я. Экономические проблемы повышения ветеринарно— санитарного качества продуктов животноводства. // Материалы международ, науч. конф.— Харьков, 1995. С. 544-547.

220. Шалыгина Н.Б. О роли микробных токсических субстанций в патогенезе острых кишечных инфекций. // Арх. патология. — 1991. — Т. 53, №6. С.3-6.

221. Шарапов Т.А. Дифференциация энтеропатогенных и непатогенных кишечных палочек в культурах тканей. // Микробиология, эпидемиология и иммунология, 1986, №10. С .29-33.

222. Шахмарданов М.З., Земскова А.Н., Исаева И.П., Аучшев В.И. Поливалентный пиобактериофаг в лечении острых кишечных инфекций. // Рос. мед. журн. — 1997. — №1. —С. 54—55.

223. Шубин В.А. Патоморфологические изменения при колисептицемии цыплят. // Ветеринария, 1992, №1.- С.48-51.

224. Шувалова Е.П., Осипова Г.И., Кроткова М.Р. Актуальные вопросы дизентерии и дисбактериоза. // Эпидемиология и инфекционные болезни. — 1997. —№1. —С. 44—48.

225. Эрготропики: регуляторы обмена веществ и использования кормов сельскохозяйственными животными, /пер. с нем. Хеннинг А., Бокер X., Флаховски Г. и др./- М.: Агропромиздат. 1986. - 344с.

226. Ященко Н.Ф. Современные методы дезинфекции при эпизоотиях. // Материалы междун^род. конф.— Харьков, 1995. С. 582-585.

227. Ярных Б.С. Санитарная микробиология и дезинфекция объектов животноводства. //Сб. статей-М.,1981/1982/.-С. 159-161.Труды ВНИИВС.

228. Andreychyn M., Lucuk O., Andreychyn S, Kopcha V. Loka absorba terapio de diarea sindromo. // Medicina internacia revuo- 1990- Vol. 16a, №1. P. 61-62.

229. Andreychyn M., Lutsuk O., Andreychyn S. Enterosorption Effectiveness in Acute and Chronic Colitis/ // 7th International Congress for Infectious Diseases. — (June 10—13, 1996): Abstracts. — Hong Kong, 1996. — P. 114.

230. Andreychyn M., Lutsuk O., Ivakhiv O. Experience of acute intestinal infections and chronic colitis enterosorbents therapy. // 6th International Congress for Infectious Diseases (April 26—30, 1994). — Prague, Czech Republic, 1994. — S. 107.

231. Asav A., Zivkovic J., Polianec D. Totalna raskuzba u klaonici peradi. 11 Veterinaria, 1990. -G. 19, Sv. 1-224-229.

232. Bamba H., Tawa H. Sanitasation of a chicken house contaminated with patogenic microbe. // Res. Bull. Aichi-Ken. Agr. Res. Center Negarute Aichi, 1995, p. 41 5-419.

233. Beer K., Methiling W., Mehlorn G., Erwerth W. Untersuchunge zur Wirksamkeit der prophilaktischen leeninung und Desinfection von Oberflechen in Kalfer- und Schweinestallon. // Mh.Veter Med., 1990, Yg.35, H.3.-S.84-90.

234. Bettilhelm K.A. A. Study of Escherichi coli, isolated from chronic urinary infection. //J. Med. microbial., 1989, v.2, c.3, p. 225-236.

235. Botton E.J. The Genus Yersinia. A handbook of the biology of bacteria ecophysiology, isolation, identification, applications 1992 - vol.III.- P. 2863-2887.

236. Brodendorp E., Durling H. Untersuchungen zur bakteriellen Kotamination von Oberflechen einer Geflugel-productionsanslage unter besonderer Berucksichtiegung der Serviesperiode. 11 Mh. Veter- Med., 1994. Jg.33., H.2.-S.41-42.

237. Chattopadhyay U. K., Rathore R. S., Pal D., Das M. S. Enterotoxigenicity of human and animal isolates of Campylobacter jejuni in ligated rat ileal loops. // J. Diarrhoeal Dis Res. — 1991. — Vol. 9, №1. — P. 20—22.

238. Close D. Patogenicity of E.coli strains for chick embryos. // Journal of bakteriologv, 1989, v.91,&4,p.l410.

239. Doyle M.P. Pathogenic Escherichia coli, Yersinia enterocolitica and Vibrio parahaemolyticus. // Lancet. — 1990. — №8723. — P. 1111—1115.

240. Drobnica L., Parrakova E. The function of bakterial fimbriae. // Arch.immunol.exp.immunol, 1987, v. 16. 52, p. 173.

241. El-AssadF.G. A laboratory system for evaluating poultry transport crate disinfection. // Maryland Univ. College Park. De pt.of Agricultural Engineering, 1992, 278 leaves.

242. Engstroem B. Salmonella control in poultry. // Statens Veterinae-madicinska Anstalt, 1994, p.97, p.97-104.

243. Engvall A. Cleaning and disinfection of poultry houses. // Statens Veterinae-medicinska Anstalt, 1994, p. 155-159.

244. Evans D.G., Evans D.J. New surface-associated heat-labile colonization factor antigen (CFA/II) produced by enterotoxigenic E.coli of serogroups Об and 08. Inf. and Immunity 21, 1978, p.638-647.

245. Evans D.G., Evans D.J., Du Pont H.L. Virulence factors of enterotoxigenic E.coli. Journ.of Inf. Diseases 136, 1977, p. 118-123.

246. Fauchere J.-L., Kervella M., Rosenau A. Adhesion to HeLa cells of Campylobacter jejuni and E. coli outer membrene components. // Res. Microbiol. — 1989. — Vol. 140, №6. — P. 379—392.

247. Foucault M. Laboratory-sized poultry cage disinfection system. // Paper-American Society of Agricultural Engineers, 1992, N.92, 4054, 13 pp.

248. Flandrios J.P. Esherichia coli. Infectologie, 1993. №44 - p.34-37.

249. Froyman R. Epidemiology of respiratory infections. // Intern. Hatchery Practice. -1989. Vol.3, №5. - p.5-11.

250. Giambrone J.J. Controlling poultry deseases: a look at where we are headed // Poultry Dig. 1988. - Vol.47, №560. - p.464-474.

251. Glantz P. Serotypes of Escherichia coli associated with coli bacillosis in neonatal animals. // Ann. N. Y.Acad.Sci., 1990, v.2, p.67-79.

252. Goren E. Colibacillise biv plumtoce. // Tiydschr. Guse L. Microbial protoplasts, spheroplasts and L-forms.— Baltimore, 1990, 163.p.

253. Gross R.J. and Rowe B. Escerichia coli diarrhoea. // J.Hug. Camb.,95, 1985, p.531-550.

254. Hart C. A. Diagnosis of enteric Escherichia coli infections. // Med. Lab. Sci. — 1992. — Vol. 49, №3. — P. 203.

255. Harry E.H. E.coli and how you can control it. // Worlds Poultry Sci. J., 1994, v.24, c.2, p.141-146.

256. Harry E.H. A study of 119 outbreaks of colisepticoemia in broilerflocks. // Vet.Rec., 1994, vol.76, C.16, p.443-445.

257. Hashim N.H., Reda l.M. Coli-Bacillosis in chicks in Saudi Arabia. 11 Trop.Anim.Health and Prod., 1980, v. 12, C.l, p.15-16.

258. Henrigsen S.P. Serotypes of a collection of mucoid gram-negative rods. // Acta path, microbiol., Scand., 1986, v.26,p.424-435.

259. Hines J., Nachamkin I. Effective Use of the Clinical Microbiology Laboratory for Diagnosing Diarrheal Diseases. // Clin. Infect. Dis. — 1996. — Vol. 23,.— P. 1292—1301.

260. Hyden M.J. Salmonella and other pathogenic bacteria in storage // Feed compounder. 1989. - Vol.9, №4. - p.50-52.

261. Kelly W.R. Nettojage, desinfection des poulaillers; les principales operations a effectuer. //L.Agricultuer, 1989, 450; 55, 61-65.

262. Keusch G. Т., Jacewicz M, Mobassaleh M, Donohue-Rolfe A. Shiga toxin: intestinal cell receptors and pathophysiology of enterotoxic effects. //Rev. Infect. Dis. — 1991. —Vol. 13, Suppl. 4. — P. 304—310.

263. Kremerv V. Somatic and capsular antigens of gram-negative bacteria. // Comp.Biochem., 1987, v.26 A, p. 105.

264. Kubicek A., Dvorak P., Ivanska J. Pregivani bacterii na posinkovanem a hlinikovem materialu. // Veter.Med., 1989, r.24, c.l 1.

265. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4.1 I Nature 1970.- vol.277.- P. 680-685.

266. Levine MM Escerichia coli that Cause Diarrhea: Enterotoxigenic, Enteropathogenic, Enteroinvasive, Enterohemorrhagic, and Enteroadherent.

267. Manfrela G., Bertuzzi S. Controllo microbiologico del incubatio // Riv. Avicolt. 1989. - vol.58, №10. - p.23-32.

268. McGuirre E. Epidemiology and genetics of R — factors. // Ann. N.Y. Ac.Sci., 1990, v.182, p.141-152.

269. Meger R.C., Rhoades H.E. Episootological investigations of colibacillosis in turkeys. // Avian Diseases, 1992, v.21, C.4, p.514-530.

270. Methods for examinating Poultry Biologies and for Identifying and guantifying Avian Pathogens. // Nat. Acad. Sci., Washington, D.C. 1971. - p.66-99.

271. McQuitty J.В. Air quality in confinement animal housing. Jg. there cause for concern. //Agr Forestry Bull., 1985, 8, 32-38.

272. Miclos L. Medsinorodna spolpraca v zivotnom prosteredy. // Uroda, 1982, r.40, c.2, S.59-60.

273. Mintz E. D., Cartter M. L., HadlerJ. L. Dose-response effect in an outbreak of Salmonella enteritidis. // Epidemiol. Infect. — 1994. — Vol.112, №1. — P. 13—23.

274. Mitra Amal K., Engleberg N. Cary, Glass Roger I., Chowdhury Mridul K. Fatal dysentery in rural Bangladesh. // J. Diarrhoeal Dis. Res. — 1990. — Vol. 8, №1—2. —P. 12—17.

275. Mittermayer H. Durch Antibiotika bedingte Diarrhoen. // Wien. med. Wschr. — 1989. — Bd. 139, №9. — S. 202—206.

276. Miwa T. Studies of entorobakterial lipopolisacharides. // J. Immunol., 1990, v. 76, p.377- 385.

277. Morita M. Treatment of colibacteriosis and other serious infections. // New England Journal of Medicine, 1995, v.263, p.207-221.

278. Mousa S., Soliman A., Bayonimi A.H., Sokkar I.N. The role played by free flying birds in the transmission of avian pathogens. // Assiat veter.med.J. -1988. Vol.20, №39. -p.179-185.

279. Nockels C.F. Vitamin needs increase during stress, desease. // Poultry Dig. 1989. - Vol.48, №567. - p.218-226.

280. Novotny A. Relationship of structure and biological activity of bacterial endotoxins. //Naturwissenschaften, 1991, Bd.58, H.8. S. 397-398.

281. O^donell K.W., Kaufman F. Evaluation of the R-B-system from identification of Enterobacteriaceae. // Arch.J.clin.path., 1987 v.53, C.2, p. 145-148.

282. Ogawa H., Nakamura A., Sakasahi R. Pathogenic properties of Escherichia coli. // Japan. J.Med.Sci.Biol., 1989, v.21, p.333-334.

283. Okamoto К., Nomura Т., Fujii Y., and Yamanaka H. Contribution of the Disulfide Bond of the A Subunit to the Action of Escherichia coli Heat-Labile Enterotoxin // J. Bacterid., March 1998, p. 1368-1374, Vol.180, No.6.

284. Oxvad M, Masolchem D. Controll alle colibscillosi aviarie. // Clin.veter., 1992, v. 102., C4.p.259-269.

285. Poeppel M. Fattening of young poultry: Diseases must be prevented and diagnosed and treated early. // Detch. Geflugelwirtschaft und Sweineproduction, 1992, v.44(35), p.1003-1008.

286. Reddy A.R.M., Reddy P.R. Factors contributing to immunosupression in chicken. // Poultry Adviser. 1988. - Vol.21 - p.53-56.

287. Ritchie B.W., Dreesen D.W. Awian zoonoses: Proven and potential disease. Pt 2. Viral, fungal and miscellanious diseases. Compendium of continuing. // Educat. Practicing Veter. 1988. - Vol.10 - p.688-691.

288. Sarma R., Murata J. Further studies on enteropatogenic E.coli associated with diaerhocal diseases. // Japan. J. Med. Sci. Biol., 1990, v.27,C.l , p. 7-10.

289. Sarma D.K., Sambval D.S. Drug susceptibility of Escherichia coli from domestic fowl. // Zbl.Veterinarmed., 1991, v.28, p.333.

290. Sathanakrishnan В., Sankaranrayanan V. Rice water solution in diarrhoeal dehydration. // Indian J. Pediat. — 1985. — Vol. 52. — P. 479—482.

291. Schufman E. Escherichia coli in newborn lambs. // Brit.Vet.J.,1988, p.127, p.214-219.

292. Scherrod P.S., Bruce V.R. Serological typing of bacteria. // Acta path.microb.Scand.,1993, v.62, p.28-32.

293. Sharma V.P. Drug susceptibility of Escherichia coli from domestic fowl. // Zhl. Veterinarmed, 1991 V.28. - p.333-335.

294. Shoeiv N.K., Sayed A.N., Sotony S.A., Abdel-Ghaffar S.K. Response of broiler chicks to probiotic (profiner) supplementation. Assint.Vet.Med.J. - Vol.36 - 1996. - p.104-114.

295. Smith H. W. The transmissible nature of the genetic factors in bacteriosis that control production. // J.gen.Micribiol., 1994, v. 52, p.319-322.

296. Stahlberg Т.Н., Granfors K., Pekkola-Heino K. Immunoblotting analysis of human IgG, IgM and IgA response to chromosomally coded antigens of Y. enterocolitica ОЗ. // Acta path, microbiol. immunol. scand.-Sect.C.- 1987.- vol.95.- P.71-79.

297. Stewart L.E. Septicemia in poultry. // Indian Veter. J., 1995, v.56, p.629-633.

298. Tesh V.L., O'Brien A.D. The pathogenic mechanisms of Shiga toxin and Shiga-like toxins: MicroReview. // Mol. Microbiol. —1991. — Vol.5 №8. — P.1817—1822.

299. Towbin H., Staehelin Т., Gordon J. Electrophoretic transfer of proteins from poliacrylamide gels to nitrocellulose sheets: Procedure and some applications. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1979.- vol.76.- No.9.- P. 4350-4354.

300. Vaschim N.H. De lirnination de la notion des bacteries. // Ann.Inst. Pasteur, 1990, v.99; p.859-874.

301. Weber В., Mans J. Serologiache Untersuchungen der O-Antigene von E.coli. // St.Berlin, Wachr., 1991, v.84; p.441-443.