Трансплантация стволовых клеток эктодермального происхождения при ожогах роговицы в эксперименте тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.08, кандидат медицинских наук Николаева, Лейла Рауфовна

• Николаева, Лейла Рауфовна
• кандидат медицинских наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Николаева, Лейла Рауфовна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Современные аспекты патогенеза ожоговой болезни глаз.

1.2. Современные методы терапии ожогов глаз.

1.3. Лимбальная клеточная недостаточность - роль в патогенезе ожоговой болезни глаз.

1.4. Стволовые клетки: современные аспекты трансплантологии.

ГЛАВА II. ХАРАКТЕРИСТИКА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО МАТЕРИАЛА И МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Характеристика трансплантационного материала.

2.2. Характеристика экспериментального материала.

2.3. Разработка методики и дозы трансплантации.

2.4. Характеристика методов исследования.

ГЛАВА III. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Динамика клинического течения тяжелого ожога роговицы при трансплантации СКЭП.

3.2. Морфологическое исследование течения репаративного процесса в ожоговой роговице после трансплантации СКЭП.

3.3. Верификация трансплантированных СКЭП в роговице кролика.

ГЛАВА IV. ОБУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4.1. Обсуждение результатов клинических исследований.

4.2. Обсуждение результатов морфологического исследования.

4.3. Обсуждение результатов иммуногистохимических исследований.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Трансплантация стволовых клеток эктодермального происхождения при ожогах роговицы в эксперименте»

Актуальность проблемы: Ожоги глаз представляют серьезную медицинскую и социальную проблему. Анализ литературных данных свидетельствует, что доля ожоговых повреждений составляет до 38,4% от всех травм глаза и отличается большим количеством неблагоприятных исходов - более 40% пострадавших становятся впоследствии инвалидами 1-2 групп по зрению [17, 54, 113, 155, 156]. Удельный вес ожоговой травмы глаз значительно возрос в последние годы в связи с учащением военных конфликтов, ухудшением криминогенной обстановки, катастрофами, повышением бытового травматизма. Представляя собой достаточно тяжелую патологию, ожоги глаз могут возникнуть в результате различных геологических, геофизических, гидрологических явлений (пожары, заморозки, землетрясения и т.д.); стать следствием аварий и взрывов на промышленных объектах, произойти при транспортных авариях, возгорании нефтепродуктов, авариях коммунальных систем, что приводит к комбинированному характеру поражения [37, 48, 113].

Механизмы патологического процесса и реакций организма при ожогах глаз настолько сложны и разнообразны, что применяемые средства консервативной терапии далеко не всегда купируют развитие активного ожогового процесса. Традиционные методы лечения основаны на этиопатогенетическом подходе, и включают обычно проведение дезинтоксикационной, противовоспалительной, стимулирующей терапии, профилактику и борьбу с инфекционными осложнениями, использование иммунотерапии. Тем не менее, совокупность взаимодействия физиологических и биохимических преобразований при ожогах глаз приводит к нарушению репаративно-регенераторных процессов в роговице, что, в свою очередь, является причиной возникновения рецидивирующих эрозий, длительно незаживающих язв роговицы, а впоследствии - грубых, интенсивно васкуляризованных бельм [361].

На современном этапе развития офтальмохирургии наиболее перспективной операцией при лечении такого рода дегенераций роговицы, позволяющих обеспечить не только лечебный, но и функциональный результаты, является кератопластика. К сожалению, успех кератопластики достигается далеко не всегда, так как после операции часто наблюдается пониженная регенеративная способность и замедленное приживление трансплантата вследствие нарушения микроциркуляции собственной поврежденной ткани и развития в организме иммунологического конфликта; наблюдается образование передних синехий и, как следствие, вторичной глаукомы. Эти осложнения приводят к помутнению и отторжению трансплантата. По данным литературы, болезнь трансплантата с исходом в помутнение после кератопластики развивается в 53-82% случаев, а при рекератопластике этот показатель колеблется в пределах от 32 до 87% [44, 57, 133, 207, 278, 380, 427, 429].

Анализ данных литературы показывает, что, несмотря на разнообразие применяемых терапевтических и хирургических методов лечения, нередко не удается добиться стабильной эпителизации роговицы. Поэтому проблема поиска новых эффективных способов стимуляции регенерации роговицы остается крайне актуальной [31, 80, 169, 207] .

В последнее время внимание исследователей привлечено к поиску возможностей восстановления структуры тканевых дефектов с помощью методов клеточных технологий. В современной медицине трансплантология занимает одно из приоритетных направлений. С появлением новых знаний в области молекулярной и клеточной биологии стало возможным развитие передовых технологий выращивания соматических и стволовых клеток человека (СК) , генной модификации и имплантации генов из выращенных in vitro линий клеток в организм животных и человека. Стала развиваться новая область микрохирургии - трансплантация соматических и стволовых клеток [5, 146, 161, 202] .

Все специализированные клетки взрослого организма происходят из стволовых клеток. Все нормальные органы и ткани человека сохраняют «реликты» зародышевой ткани в виде микровкраплений СК. Стволовые клетки - это орган экстренной репарации в случае аварийных, массивных повреждений ткани (травмы, вирусы, химические, тепловые повреждения) . В долгосрочном плане СК - это аппарат клеточного гомеостаза, основанного на постоянном самообновлении клеток, смены устаревших, отработанных клеток с целью защиты от болезней (накопления аномальных клеток) и преждевременного старения. Дисбаланс активности самообновления клонов СК в паренхиме органов является первопричиной многих патологий на клеточном уровне [160]. Линии СК характеризуются выраженной биохимической гетерогенностью, широким профилем цитокинов, ростовых факторов, а также репертуаром химической дифференцировки [264]. Пересадки СК, ускоряя самообновление клеток, способствуют элиминации патологически измененных клеток из организма, способны к альтернативной дифференцировке и встраиванию в ткани реципиента.

Особый интерес в использовании СК при лечении различных заболеваний представляет возможность стимуляции пролиферативного потенциала собственных запасов стволовых пространств.

В настоящее время доказана роль лимбальной зоны глаза в качестве хранилища пула СК, ответственных за регенерацию и самообновление роговицы в течение всей жизни. Установлено, что эти клетки располагаются в базальном слое лимбального эпителия и обладают всеми свойствами стволовых [255, 259, 358, 385]. Согласно теории Thoft et al., потеря эпителиальных клеток роговицы восполняется за счет новых эпителиальных клеток, являющихся производными лимбальных стволовых клеток [410]. Однако некоторые патологические состояния или травмы ведут к частичной или полной лимбальной клеточной недостаточности (JIKH) , что является причиной нарушения нормального механизма замещения роговичного эпителия.

Согласно последним литературным данным JIKH принадлежит одна из ведущих ролей в патогенезе длительно незаживающих ожоговых дефектов роговицы [244,

301]. Клинические проявления JIKH сводятся к аномальной коньюнктивально-корнеальной регенерации с периферической неоваскуляризацией, наличием хронического дефекта эпителия, выраженного стромального воспаления и коньюнктивизации роговицы, когда прилежащий конъюнктивальный эпителий начинает наползать на строму роговицы. В таких случаях, по мнению большинства авторов, традиционное лечение не дает удовлетворительных результатов [420].

Для борьбы с J1KH, возникающей при ожогах глаз, на сегодняшний день используются трансплантация лимба и цитотерапия культивированными лимбальными стволовыми клетками. Однако эти методики обладают рядом существенных недостатков. Так, при аутолимбальной трансплантации парный глаз, с которого берется участок лимба, подвергается достаточному риску. Существует также проблема невозможности иссечения достаточно большого участка лимба, и несогласие многих пациентов на такого рода процедуру. При аллотрансплантации возникает проблема поиска донорского материала, а высокая частота отторжения создает необходимость проведения длительной иммуносупрессии и повторных оперативных вмешательств. Технология проведения цитотерапии, несмотря на достаточно позитивные результаты, отличается крайней сложностью культивирования лимбальных клеток и требует крупных финансовых вложений.

Таким образом, проблема борьбы с JIKH при ожогах роговицы, на сегодняшний день, непосредственно зависит от поиска новых доступных ресурсов клеточной терапии, применение которых позволит восстановить нормальное течение репаративных процессов в ожоговой роговице и добиться удовлетворительных функциональных результатов, а также уменьшит риск возникновения болезни трансплантата на глазах с острым дефицитом лимбальных стволовых клеток.

В связи с вышеизложенным возникла идея о возможности применения трансплантации СК в лечении ожоговых дефектов роговицы.

Цель работы: изучение влияния трансплантации стволовых клеток эктодермального происхождения на репарацию роговицы при экспериментальном ожоге.

Задачи:

1. Выработать дозу и разработать методику трансплантации культивированных in vitro СКЭП при ожогах роговицы в эксперименте.

2. Провести клиническую оценку эффективности трансплантации СКЭП на модели ожогового дефекта роговицы.

3. Изучить морфо-функциональные особенности процесса регенерации ожогового дефекта роговицы кролика после трансплантации СКЭП.

4. Провести иммуногистохимические исследования глаз кроликов с целью верификации трансплантированных СКЭП.

5. Оценить перспективы применения разработанного метода в клинике.

Научная новизна и практическая значимость работы:

Впервые в офтальмологии разработаны и апробированы доза и метод трансплантации культуры СКЭП на модели тяжелого щелочного ожога роговицы кролика.

Впервые в офтальмологии изучено влияние трансплантации СКЭП на течение репаративного процесса при экспериментальных ожогах глаз. Клинически и морфологически установлено, что СКЭП способствует ускорению регенерации дефектов переднего эпителия, стромы и эндотелия роговицы кролика.

Иммуногистохимическими исследованиями доказана выживаемость СКЭП человека в глазу кролика в течение 14 дней, их способность к миграции в область повреждения и стимулированию репаративных процессов.

Впервые в офтальмологии изучено влияние трансплантации СКЭП на течение лимбальной клеточной недостаточности, возникающей на фоне тяжелого щелочного ожога глаз. Установлено усиление пролиферативной активности в лимбальной области и нивелирование клинических проявлений JIKH под воздействием культивированных СКЭП.

Принимая во внимание возможность постоянно располагать запасом донорского материала,-,, поддерживая t. рост СКЭП в культуре, а также эффективность и простую методику трансплантации, предложенный способ лечения может найти применение в клинической практике при заболеваниях переднего отрезка глаза, сопровождающихся развитием симптомокомплекса лимбальной клеточной недостаточности.

Положения, выносимые на защиту:

1. Разработан новый способ стимуляции репаративной регенерации роговицы в эксперименте методом трансплантации культивированных стволовых клеток эктодермального происхождения: отработаны доза и технология введения.

2. Проведенная клиническая оценка влияния трансплантации СКЭП при ожоговых дефектах роговицы показала высокую эффективность разработанного метода.

3. Результаты проведенных морфологических исследований доказали, что применение СКЭП ускоряет процессы восстановления дефектов роговицы, препятствует развитию осложнений, улучшает анатомические исходы.

4. Эффективность трансплантации СКЭП при ожогах роговицы связана со стимуляцией пролиферативного потенциала стволовых клеток лимбальной зоны пораженного глаза.

Основные положения работы доложены и обсуждены на: научно-практической конференции «Лечение посттравматической патологии заднего отрезка глаза у пострадавших в экстремальных ситуациях», Москва, 2004г.; Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Новые технологии в лечении заболеваний роговицы», Москва, 2004г.; научно-практической конференции «Регенеративная медицина и трансплантация тканей в офтальмологии», Москва, 2005г.; ежегодной Всероссийской конференции «Стволовые клетки и перспектива их использования в здравоохранении», Москва, 2005г.; VIII Съезде офтальмологов России, Москва, 2005г.; Российской научной конференции с международным участием «Новое в экспериментально-морфологическом изучении глаза», Оренбург, 2005г.; II Международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность», Москва, 2005г.

По теме диссертации опубликовано 10 работ, из них 3 в центральной офтальмологической печати. Получено положительное решение от 15.12.2005. о выдаче патента «Способ лечения дефектов роговицы» по заявке № 2004117591. от 10.06.2004.

Объем и структура работы:

Работа изложена на 245 страницах машинописного текста, иллюстрирована 14 таблицами и 4 6 рисунками, которые включают 34 фотографии и 12 графиков. Список использованной литературы содержит 444 источника, из них 230 отечественных и 214 иностранных.

Заключение диссертации по теме «Глазные болезни», Николаева, Лейла Рауфовна

178 ВЫВОДЫ

1. Разработана методика трансплантации стволовых клеток эктодермального происхождения на экспериментальной модели тяжелого щелочного ожога роговицы.

2. Доказана эффективность трансплантации СКЭП при ожогах роговицы в эксперименте.

3. Установлено, что трансплантация СКЭП способствует стимуляции репаративных процессов в ожоговой роговице, что клинически проявляется в ускорении восстановления дефектов переднего эпителия и стромы, уменьшении частоты образования глубоких дефектов роговицы, снижении степени выраженности воспалительной реакции и васкуляризации, формировании помутнения роговицы меньшей интенсивности и площади.

4. На основании морфологических исследований выявлено положительное влияние трансплантации на ткань роговицы, что проявлялось в активной пролиферации и миграции фибробластов и лимбальных эпителиоцитов, перестройке межклеточного вещества стромы, дифференцировке эпителиоцитов переднего эпителия, торможении миграции лейкоцитов, восстановлении прочных эпителиально-стромальных взаимоотношений.

5. На основании анализа иммуногистохимических исследований доказана способность культивированных СКЭП выживать в роговице кролика в течение 14 дней после трансплантации, мигрировать в зону ожогового повреждения роговицы.

6. Эффективность трансплантации СКЭП при экспериментальных ожогах роговицы объясняется активацией неспецифических механизмов клеточной терапии, сочетающих выделение различных факторов роста и ключевых метаболитов с модуляцией процессов пролиферации и дифференцировки собственных стволовых клеток лимбальной зоны.

7. Положительные результаты методики трансплантации СКЭП при экспериментальных ожогах роговицы дают основание предположить целесообразность дальнейших исследований по применению данного метода в клинической практике.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Высокая частота ожогов органа зрения, многообразие клинических проявлений, тяжесть осложнений и исходов обуславливают актуальность проблемы лечения данного вида травмы.

Широкий арсенал существующих на сегодняшний день современных методов консервативного лечения ожогов глаз позволяет значительно снизить процент осложнений и увеличить число благоприятных исходов. Однако, несмотря на большое количество предложенных терапевтических средств борьбы с ожоговыми дефектами, их эффективность часто оказывается недостаточной, и возникает необходимость оперативного вмешательства во избежание функциональной и анатомической гибели глаза (Гундорова Р.А. с соавт., 1968-2005; Ченцова Е.В., 1996; Мороз З.И., 2005; Каспаров А.А., 1990; Макаров П.В., 2005; Waldock А., 2000; Williams К.А., 1993). Поскольку при ожогах глаз, как правило, страдает роговица и процесс нередко заканчивается образованием бельма, то в проведении кератопластики нуждается большинство таких больных (Краснов М.М. с соавт., 1984; Мороз З.И. с соавт., 1992; Дронов М.М., 1997; Paton D., 1980). Анализ данных литературы свидетельствует, что успех кератопластики достигается далеко не всегда, а помутнение, некроз и отторжение трансплантата являются частыми спутниками ожоговой болезни. При кератопластике по поводу аваскулярных бельм частота отторжения трансплантата достигает 2,3-35% случаев, а при васкуляризованных бельмах - до 50-65% (Ченцова Е.В., 1996) .

В основе важных компонентов патогенетического механизма ожоговой болезни лежат нарушения процессов трофики и регенерации, что, в свою очередь, приводит к неудовлетворительным функциональным результатам (Кашкин К.П., 1998; Майчук Ю.Ф., 1990). Возникающие после ожога многоплановые изменения метаболизма тканей глаза, накопление токсических продуктов, вторичный супрессорный иммунодефицит способствуют преобладанию патологических видов регенерации (Мирошник Д.М., 1994; Баева А.Г., 1985).

При эрозиях и язвах роговицы глубокие патологические изменения, возникающие на клеточном и субклеточном уровне, затрагивают, прежде всего, эпителиально-стромальные слои, что приводит к нарушению процессов диффузии и осмоса, отеку стромы, угнетению синтеза фибробластов и замедляет восстановление целостности и прозрачности. Длительно существующий воспалительный процесс препятствует формированию прочных стромально-эпителиальных взаимоотношений и, как следствие, полной эпителизации ожоговой роговицы. Кератопластика в таких случаях оказывается неудачной, и требуется проведение все новых повторных оперативных вмешательств.

Таким образом, поиск новых эффективных средств, способствующих стимуляции регенерации роговицы, а также снижению риска возникновения болезни трансплантата, остается крайне актуальным. Большие возможности для достижения цели в этом направлении открывает регенеративная медицина.

В последние годы внимание исследователей, занимающихся этой проблемой, привлечено к разработке методов, позволяющих осуществить стимуляцию собственных ресурсов организма. Именно такими "ресурсами" в организме являются стволовые клетки.

Все нормальные органы и ткани человека сохраняют "реликты" зародышевой ткани в виде микровкраплений стволовых клеток. СК ответственны за экстренную репарацию в случае аварийных, массивных повреждений тканей (Репин B.C., Ржанинова А. А., Шаменков Д.А., 2002). СК способны заместить утраченные клеточные клоны в организме больного, простимулировать "задавленные" в связи с патологией клеточные клоны хозяина, либо секретировать биологически активные вещества различных механизмов действия, которые помогают скорригировать нарушенные заболеванием функции (Васильев Н.В. с соавт., 1996). Своевременное обновление клеточного состава органов, контролируемое зпигеномными сигналами и запасом СК, является важнейшим условием поддержания здоровья и долголетия многоклеточного организма. Без СК невозможно достичь избавления организма от аномальных, устаревших и отработанных клеток. Большинство органов человека и млекопитающих используют СК для постоянного тщательно контролируемого самообновления дифференцированных клеток, обеспечивающих важнейшие функции (Репин B.C., Ржанинова А.А., Шаменков Д.А., 2002) .

Последние несколько лет в зарубежной литературе все чаще появляются данные о превалирующей роли частичной или полной лимбальной клеточной недостаточности в патогенезе длительно незаживающих дегенераций роговицы (Pfister R.R., 1994). Доказано, что ожоги глаз относятся к состояниям, характеризующимся истощением собственных стволовых клеток лимба и влекущим развитие дегенерации роговицы с выраженным роговичным синдромом (Chen J.J. et al., 1991; Huang A.J. et al., 1991). При этом нарушается нормальный процесс восстановления роговичного дефекта за счет миграции и пролиферации стволовых клеток лимбальной зоны (Cotsarelis G. et al., 1989; Pellegrini G. et al., i999).

Клиническими проявлениями JIKH является наличие хронического дефекта роговицы, выраженного стромального воспаления, аномальная конъюнктивально-корнеальная регенерация с периферической неоваскуляризацией, конъюнктивизация роговицы, выражающаяся в появлении бокаловидных клеток в цитологических отпечатках с роговицы. В результате развивается помутнение роговицы, снижается острота зрения, появляется васкуляризация, нарушается течение процесса эпителизации (Tseng S.C. et al., 1984).

В таких случаях прогноз успешности известных методов лечения, по мнению ряда авторов, минимален, и адекватным логически обоснованным хирургическим вмешательством является лимбальная трансплантация или цитотерапия культивированными лимбальными эпителиальными прогениторными клетками (Nishiwaki-Dantas М.С. et al., 2001).

Однако недостатками такого рода оперативных вмешательств является риск, которому подвергается парный глаз, при аутолимбальной трансплантации, а также проблема поиска донорского материала и высокая частота отторжения при аллотрансплантации, что создает необходимость проведения длительной иммуносупрессии, а в случае неудачи - повторных оперативных вмешательств. К сожалению, несмотря на достаточно позитивные результаты цитотерапии, методика культивирования лимбальных клеток также является технически крайне сложной и требует крупных финансовых затрат.

Таким образом, одной из наиболее актуальных проблем в борьбе с ЛКН при ожогах роговицы является поиск новых доступных ресурсов для клеточной терапии. Применение этих методов позволит восстановить нормальное течение репаративных процессов и добиться удовлетворительных функциональных результатов, а также уменьшит риск возникновения болезни трансплантата на глазах с острым дефицитом лимбальных стволовых клеток.

На основе вышеизложенных литературных данных у нас возникла идея о возможности применения трансплантации СК в лечении ожоговых дефектов роговицы.

Целью работы явилось изучение влияния трансплантации стволовых клеток эктодермального происхождения на репарацию роговицы при экспериментальном ожоге.

Достижение цели осуществлялось путем решения следующих задач:

1. Выработать дозу и разработать методику трансплантации культивированных in vitro СКЭП при ожогах роговицы в эксперименте.

2. Провести клиническую оценку эффективности трансплантации СКЭП на модели ожогового дефекта роговицы.

3. Изучить морфо-функциональные особенности процесса регенерации ожогового дефекта роговицы кролика после трансплантации СКЭП.

4. Провести иммуногистохимические исследования глаз кроликов с целью верификации трансплантированных СКЭП.

5. Оценить перспективы применения разработанного метода в клинике.

Источником донорского материала служила ткань переднего мозга 7-12- недельных эмбрионов человека (полученных в результате медицинского аборта). Клетки мозга диссоциировали и высевали в концентрации 2х106 кл/мл в ростовую среду NPBM (Neural Progenitor Basal Medium, "Clonetics"). В среду добавляли стандартный набор факторов роста: фактор роста фибробластов человека, фактор выживания нервных клеток человека, эпидермальный фактор роста и гентамицин/амфотерин ("Clonetics"). Клетки культивировали во флаконах в виде суспензии плотностью 2х105 кл/мл среды в течение 7-14 суток.

Перед трансплантацией суспензию клеток тщательно отмывали от культуральной среды, подсчитывали количество жизнеспособных клеток при окрашивании трипановым синим и йодидом пропидия (как правило, не ниже 95 %) и суспензировали в минимальном количестве физиологического раствора.

В ходе нашего исследования были проведены 3 серии эксперимента на 100 половозрелых кроликах (200 глаз) породы Шиншилла.

I серия. Отработка дозы и метода трансплантации.

II серия. Изучение влияния трансплантации СКЭП на течение репаративного процесса в ожоговой роговице.

III серия. Исследовалась способность трансплантированных СКЭП выживать в тканях реципиента.

Нами использовалась экспериментальная модель тяжелого щелочного ожога роговицы, которую воспроизводили с помощью диска из стерильной хлопчатобумажной ткани диаметром 7 мм, пропитанного 10% раствором NaOH, время экспозиции 40 секунд (J.Obenberger, 1975).

В I серии эксперимента на 30 глазах взрослых кроликов массой 2-2,5 кг отрабатывалась доза клеточного трансплантата.

Трансплантация производилась в виде однократной субконъюнктивальной инъекции суспензии СКЭП в области верхнего лимба. Выбор области верхнего лимба в нашем эксперименте был основан на исследованиях Pellegrini et al. о наибольшей клоногенной способности лимбальных клеток в этой зоне.

Животные были разделены на 3 подгруппы по 5 кроликов (10 глаз) каждая с различной концентрацией вводимого трансплантата.

После моделирования тяжелого щелочного ожога роговицы в опытные глаза 1-ой подгруппы вводили суспензию СКЭП в концентрации 200 тыс. клеток в 0,2 мл физиологического раствора, 2-ой подгруппы - 300 тыс. клеток в 0,2 мл физиологического раствора, 3-ей подгруппы - 500 тыс. клеток в 0,2 мл физиологического раствора.

Наилучшие клинические проявления течения репаративного процесса в ожоговой роговице были получены во 2-ой подгруппе, - при трансплантационной дозе 300 тыс. клеток в 0,2 мл физиологического раствора - где наблюдалось снижение степени выраженности воспалительной реакции на ожоговую травму роговицы, ускорение процессов эпителизации и восстановления стромального дефекта роговицы. В 1-ой подгруппе - при трансплантационной дозе 200 тыс. клеток в 0,2 мл физиологического раствора - наблюдалась менее интенсивная регенерация роговицы, по сравнению со 2-ой подгруппой. В 3-ей подгруппе глаз - с концентрацией трансплантата 500 тыс. клеток в 0,2 мл физиологического раствора - была отмечена выраженная смешанная инъекция конъюнктивальных сосудов - реактивное воспаление тканей глаза.

Таким образом, полученные данные показали, что оптимальной трансплантационной дозой СКЭП при ожогах роговицы является концентрация 300 тыс. клеток в 0,2 мл физиологического раствора.

II серия эксперимента проведена на 75 кроликах (150 глаз). Сразу после нанесения ожога на опытных глазах была произведена трансплантация СКЭП по разработанной нами методике. В парные контрольные глаза тем же способом вводили физиологический раствор.

С целью профилактики развития вторичной инфекции на всех глазах проводили местную противоинфекционную терапию в виде инстилляций антибиотиков (0,25% раствор левомицетина 3 раза в день).

Наблюдение за состоянием глаз животных осуществляли с помощью фокального и бокового освещения для общего осмотра переднего отрезка глаз и биомикроскопии щелевой лампой "Karl Zeiss-Iena" и "Opton SL-30" (Германия) с флюоресцеиновой пробой и фоторегистрацией.

Клиническую оценку состояния глаз животных проводили на 1, 3, 7, 14, 22, 30 и 60 сутки по следующим признакам:

- степень выраженности воспалительной реакции (Е.В. Ченцова, 1996);

- диаметр дефекта эпителия (измеряли калиброметром по горизонтальному и вертикальному меридиану после окраски флюоресцеином и высчитывали среднюю величину) (Е.В. Ченцова, 1996);

- площадь и глубина дефекта стромы (Wenworth J.S., 1993);

- интенсивность помутнения роговицы (шкала Войно -Ясенецкого);

- степень неоваскуляризации роговицы (измеряли длину сосудов от лимба к центру роговицы) (Е.В. Ченцова, 1996).

Параллельно с клиническими наблюдениями в эксперименте исследовали динамику морфологических изменений на 1, 3, 7, 14, 22, 30 и 60 сутки наблюдения с применением стандартных методов окраски гистологических препаратов.

Исходя из полученных клинических данных, трансплантированные субконъюнктивально культивированные СКЭП в дозе 300 тыс. клеток при экспериментальном ожоге роговицы не вызывают каких-либо аллергических реакций или реакций иммунного отторжения без проведения иммуносупрессии.

Изучение динамики степени воспалительной реакции выявило значительные отличия в контрольной и опытной группе. Уже к 7 суткам после трансплантации этот параметр был значительно ниже в опытной группе (3 балла в 12% случаев) по сравнению с контрольной (3 балла в 56% случаев). Такая тенденция к снижению степени выраженности воспалительной реакции в опытной группе прослеживалось на протяжении всего эксперимента. К 30 суткам эксперимента отмечалось полное купирование воспалительных процессов в опыте, тогда как в контрольной группе к этому сроку выявлялась воспалительная реакция в 2 балла и лишь к 60 суткам она снижалась до 1 балла.

Клинические исследования динамики заживления ожогового дефекта роговицы показали, что трансплантация СКЭП в опытной группе способствовала уменьшению частоты формирования глубоких дефектов роговицы по сравнению с контролем. Так к 7 суткам эксперимента перфорация роговицы (из них б случаев с выпадением внутренних оболочек) наблюдалась на 13,3% контрольных глаз, а к 14 суткам наблюдения этот показатель возрос до 18,8%. В опытной же группе глаз в течение всего срока наблюдения случаев с перфорацией выявлено не было. Глубокие дефекты стромы в виде десцеметоцеле в опытной группе встречались в среднем в 2,4 раза реже в сравнении с контролем. Площадь стромальных дефектов в контрольной группе на протяжении всего срока наблюдения также значительно превышала размеры дефектов в опытной группе.

Заживление ожогового дефекта роговицы после трансплантации происходило гораздо активнее. Так, уже к 30 суткам после трансплантации в опытной группе в 89,3% случаев наблюдалась полная эпителизация роговой оболочки, тогда как на 30,7% контрольных глаз к этому сроку сохранялся дефект стромы, а в 20% случаев -эрозия роговицы. К концу эксперимента отмечалось закрытие эпителиального дефекта на всех опытных глазах, в то время как в контрольной группе в 12% случаев все еще сохранялась персистирующая эрозия роговицы.

Влияние трансплантации СКЭП наблюдалось также при исследовании степени выраженности неоваскуляризации роговицы. Через 2 недели после проведения трансплантации длина новообразованных сосудов в большинстве опытных глаз (70%) составляла до 4 мм, тогда как в контрольной группе этот параметр достигал б мм. На 30 сутки в опытной группе наблюдалось снижение степени васкуляризации до 1 балла в среднем, что сохранялось до конца эксперимента. В контроле к этому сроку степень неоваскуляризации составляла 3 балла в среднем.

Анализ полученных данных выявил, что трансплантация приводит к формированию помутнения меньшей степени интенсивности по шкале Войно-Ясенецкого. В контрольной группе к 60 суткам наблюдения помутнение роговицы соответствовало 10 баллам, а в опытной - 7 баллам в среднем. При этом в опытной группе помутнение ограничивалось зоной ожогового повреждения, а в большинстве контрольных глаз выходило за зону поражения на 1-2 мм.

Таким образом, полученные клинические данные свидетельствуют о положительном влиянии трансплантации СКЭП на течение репаративного процесса при экспериментальных ожогах глаз. Результаты исследования свидетельствуют, что трансплантация СКЭП способствует развитию менее выраженной воспалительной реакции и степени васкуляризации, ускорению регенерации эпителиального и стромального дефектов роговицы, уменьшению частоты образования глубоких дефектов роговицы, формированию помутнения роговицы меньшей степени интенсивности и площади в опытной группе в сравнении с контрольной.

Морфологические исследования динамики состояния тканей роговицы производились по следующим параметрам:

- количество слоев переднего эпителия и степень его дифференцировки;

- архитектоника волокнистых компонентов стромы и ее клеточный состав;

- толщина роговицы;

- прорастание кровеносных сосудов и их диаметр;

- степень разреженности заднего эпителия роговицы.

Анализ данных морфологического исследования выявил значительные колебания толщины роговой оболочки в группе контроля по сравнению с опытом (р<0,05). К 7 суткам эксперимента отмечалось выраженное истончение роговицы в контрольной группе за счет деструкции ее тканей после ожога, чего не наблюдалось в опыте. На 14 сутки наблюдалось значительное изъязвление роговицы в контроле до 8,3 ± 19,68 мкм, а также отмечались случаи с полным отсутствием всех слоев роговицы в области повреждения. В опытной группе на этом же сроке толщина роговицы соответствовала норме. К 22 суткам в контроле наблюдалась тенденция к постепенному восстановлению толщины роговицы с сохранением воспалительного отека стромальной ткани и разволокнения ее пластин. В опыте на этом сроке отмечалось утолщение роговой оболочки за счет усиленного митотического деления фибробластов. К i концу эксперимента в контроле наблюдалось утолщение роговицы до 500 ± 20,47 мкм в среднем, в то время как в опыте ее толщина приближалась к норме.

Положительным воздействием трансплантации на ткань роговицы объясняется параллельное увеличение количества фибробластов и толщины роговицы в опыте. При исследовании динамики изменения количества фибробластов в центральной оптической области значительное увеличение их числа в опытной группе отмечено к 14 суткам после трансплантации с максимальным пиком к 22 суткам эксперимента. В контроле максимальное возрастание их числа на единицу площади также приходилось на 22 сутки, однако этот параметр был в два раза меньше, чем в опытной группе к этому же сроку наблюдения(р<0,05).

В парацентральной области роговицы в опыте наблюдалось 3 пика выраженной митотической активности фибробластов на 1, 7 и 22 сутки после трансплантации с периодами их миграции к центру роговицы. Контрольная группа отличалась незначительным увеличением количества фибробластов к 22 и 30 суткам и постепенным снижением этого показателя к 60 суткам в парацентральной зоне роговицы.

Эффект трансплантации СКЭП проявлялся в более активном восстановлении переднего и заднего эпителия в опытной группе по сравнению с контрольной. Так, в контроле отмечалась выраженная тенденция к 'десквамации новообразованного эпителия на протяжении всего срока наблюдения. К концу эксперимента контрольная группа глаз характеризовалась неполной эпителизацией в 3 слоя недифференцированных эпителиоцитов, тогда как в опыте наблюдалось полное восстановление переднего эпителия роговицы на всех глазах с признаками дифференцировки. Восстановление заднего эпителия в опытной группе наблюдалось к 7 суткам после трансплантации, тогда как в контроле начиналось лишь к 30 суткам эксперимента.

В опытной группе трансплантация способствовала активному торможению миграции лейкоцитов, чего не наблюдалось в контроле, где в строме преобладали выраженные литические процессы.

На протяжении всего срока наблюдения в контрольной группе отмечалась активная васкуляризация роговицы, характеризующаяся образованием большого количества крупных кровеносных сосудов, чего не наблюдалось в опытной группе.

Трансплантация способствовала значительному увеличению слоистости эпителиоцитов лимбальной области в опытной группе на 7-е сутки наблюдения, что обеспечило активную эпителизацию области повреждения в последующие сроки до конца эксперимента. В контрольной же группе глаз восстановление эпителиального пласта происходило только к 60 суткам эксперимента.

Прозрачность собственного вещества роговицы обеспечивается биохимическими составляющими аморфного компонента стромы, определенным соотношением типов коллагена, а также упорядоченным его расположением. В опытной группе к 60 суткам после трансплантации СКЭП наблюдалось восстановление параллельного расположения коллагеновых волокон стромы роговицы, тогда как в контрольной группе глаз к концу эксперимента плотные пучки коллагеновых волокон распределялись в разных направлениях, нарушая пластинчатое строение роговицы.

Восстановление переднего эпителия с полной адгезией эпителиального пласта возможно только при отсутствии воспалительного процесса в строме. В случае продолжающейся воспалительной реакции происходит десквамация новообразованного эпителия. Формированию базальной мембраны после травм способствует параллельное расположение переднего эпителия и коллагеновых волокон собственного вещества роговицы. Незаконченная эпителизация в контрольной группе к 60 суткам наблюдения свидетельствует о несформированных эпителиально-стромальных контактах и неполном купировании воспалительных процессов в этот период. В опытной группе, в отличие от контрольной, к концу эксперимента наблюдалось восстановление прочных эпителиально-стромальных взаимоотношений, обусловленных формированием нормальной архитектоники волокнистых компонентов межклеточного вещества.

Реиннервация после повреждения, в том числе и после ожогов, имеет значительное влияние на процессы восстановления и дифференцировки эпителиальной и соединительной ткани роговицы. Врастание нервных волокон в регенерат обеспечивает нервную связь регенерата с организмом, а это означает обеспечение трофической и функциональной регуляции восстановительных процессов (Беляев B.C., 1992). Учитывая присущее стволовым клеткам нейротрофическое действие, а также интенсивность течения репаративных процессов в опытной группе, мы предполагаем, что трансплантация СКЭП способствует также стимуляции реиннервации в ожоговой роговице.

При регенераторных процессах в роговице все ткани создают друг для друга своеобразное микроокружение, осуществляя при этом активное взаимодействие. Так, в регенерации переднего эпителия принимает участие собственное вещество роговицы, при этом большое значение имеет биохимический состав экстрацеллюлярного матрикса. Гидратация аморфного компонента и волнообразность волокнистого остова межклеточного вещества роговицы препятствует образованию эпителиально-стромальных контактов и способствует отслоению переднего эпителия. Скорость образования переднего эпителия, выполняющего барьерную и защитную функцию, влияет на дальнейшие процессы восстановления стромы. Реиннервация поврежденной области в отдаленном периоде осуществляет контроль количества слоев переднего эпителия и дифференцировку эпителиоцитов.

Таким образом, анализ морфологических данных свидетельствует, что трансплантация СКЭП способствует сокращению сроков восстановления дефектов переднего эпителия, стромы роговицы и эндотелия, развитию менее выраженной васкуляризации и воспалительной реакции, восстановлению прочных эпителиально-стромальных взаимоотношений, выраженной пролиферативной активности в лимбальной зоне. Продуктивная стадия воспаления, выраженная в пролиферации и миграции фибробластов, перестройке межклеточного вещества стромы, дифференцировке эпителиоцитов переднего эпителия, на протяжении эксперимента в опытной группе также происходила заметно активнее и быстрее в сравнении с группой контроля.

Учитывая простоту и неинвазивность трансплантации суспензии СКЭП в субконъюнктивальное пространство, данный метод может быть применим в широкой клинической практике.

В III серии эксперимента на 10 кроликах (20 глаз) изучалось поведение культивированных СКЭП при трансплантации в субконъюнктивальное пространство, а также исследовалась их способность выживать в тканях реципиента. Для дальнейшей визуализации в гистологических препаратах перед трансплантацией клетки окрашивали ядерным люминесцентным красителем бизбензимидом (Hoechst 33342, "Sigma").

Результаты иммуногистохимического исследования, проведенного на 7 и 14 сутки, показали, что в глазах всех экспериментальных животных находились трансплантаты культивированных СКЭП человека. На 7 сутки отмечалась наибольшая концентрация трансплантированных СКЭП в месте введения. К 14 суткам клетки мигрировали из субконъюнктивального пространства по направлению к центру роговицы. Двойная иммуногистохимическая окраска с использованием антител к ядрам клеток человека и нестину человека показала, что среди трансплантированных сохраняются истинно СК.

Таким образом, проведенные иммуногистохимические исследования позволяют сделать вывод о выживаемости культивированных СКЭП человека в роговице кролика в течение 14 дней после трансплантации и об их миграции в зону ожогового повреждения роговицы.

Положительное влияние трансплантации СКЭП в опытной группе, на наш взгляд, обусловлено включением неспецифических механизмов (Васильев Н.В. с соавт., 1998), основанных на модуляции процессов регенерации, пролиферации и дифференцировки.- Активная клеточная пролиферация тесно связана с эмбриоспецифическими ростовыми факторами, цитокинами и другими ключевыми метаболитами и биологически активными веществами, продуцируемыми трансплантированными клетками. При этом компенсация нарушенных функций осуществляется как за счет улучшения трофики, так и стимуляцией регенераторного потенциала собственных стволовых клеток лимбальной зоны пораженного глаза путем способности СК к селективному выбору, переработке и распознаванию сигналов микроокружения. Таким комплексным взаимодействием введенных СКЭП и собственных лимбальных СК, по нашему мнению, объясняется продолжительный эффект трансплантации на протяжении всего эксперимента и нивелирование симптомов лимбальной клеточной недостаточности. Трансплантация СКЭП при ожогах помогает добиться стабилизации ожоговой болезни и сделать возможной проведение успешной последующей кератопластики, избегая развития болезни трансплантата.

Таким образом, анализ данных клинических, морфологических и иммуногистохимических исследований показал эффективность трансплантации СКЭП при экспериментальных ожогах роговицы и целесообразность дальнейшего изучения данного вопроса.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Николаева, Лейла Рауфовна, 2006 год

1. Абрамова И.А., Черныш В.Ф., Бойко Э.В., Румакин В.П. Морфопатогенез амниотической мембраны после ее трансплантации в ходе конъюнктивальной пластики в эксперименте. // Вестник офтальмол. -2004. №3. - С.41-43.

2. Акберова С.И. Ингибиция неоваскуляризации и ангиогенеза эмоксипином в эксперименте и клинике. // VI Съезд офтальмологов России: Тез. докл. М., 1994.- С.288.

3. Алиев А.Д., Мухаммед-Нур Н.А., Давудова А.Н., Гойтиева Н.А., Тидулаева А.П. Перманентная перфузия конъюнктивальной полости при лечении ожогов глаза и их осложнений. // Ожоги глаз и их последствия: Материалы науч.-практич. конф. М., 1997.- С. 2728.

4. Андреев Ю.В. Фотохимическая деструкция новообразованных сосудов роговицы (в эксперименте): Автореферат дисс. . канд. мед. наук. М., 1993. -23 С.

5. Арутюнова И.Р. Трансплантация культивированных in vitro фетальных клеток эндотелия роговицы человека в эксперименте. // Дисс. . канд. мед. наук. М., 2001. - 142 С.

6. Архангельский В.Н. Практическое руководство по патолого-гистологической технике для офтальмологов. Москва: Медгиз, 1957. 111 С.

7. Баева А.Г. Регенерация и система иммуногенеза. М., Медицина. - 1985. - 255 С.

8. Вагатурия Т. Г. Анализ осложнений ожоговой болезни глаза. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.- практ. конф. М., 1997. - С.3-4.

9. Багдаш К. С. Патогенетическое обоснование применения ингибиторов протеаз в лечении термических ожогов глаза. Дис. . канд. мед. наук. -М., 1985 181 С.

10. Багров С.Н. Источники регенерации роговой оболочки глаза. // Военно-мед. журнал. 1998. -Т.1. - С. 231-233.

11. Басова Г.Г., Злобина А.С., Горкер Н.Е. и соавт. Эксперименальные данные о поглощающих свойствах биологических вкладышей, применяемых в лечении химических ожогов глаз. // Офтальмол. журн.-1987.-№3.-С.179-180.

12. Батманов Ю.Е., Егорова К.С., Колесникова JI.H. Применение свежего амниона в лечении заболеваний роговицы. // Вестник офтальмол. 1990. - Т. 106, №5. - С. 17-19.

13. Безуглый Б.С. Препарат прополиса прополикс, вкомплексном лечении травматических и ожоговыхповреждений глаз. Дис. . канд. мед. наук. -Запорожье, 1981. 195с.

14. Беленький К.Р., Богданов B.C., Войшвилло Р.Ф. Результаты лечения ожогов глаз III степени аутокровью и аутоплазмой на гепарине. / / Повреждения органа зрения продуктами нефти, химии и др. факторами. Сборник научных трудов. Уфа, 1975.- С.104-109.

15. Беляев B.C. Дифференцирование тканей роговицы (роль нервного фактора). // Вестник офтальмол. -1992. N'2. - С.27-32.

16. Беляева О. Б. К механизму лечебного действия биологического покрытия роговицы амнионом при тяжелых ожогах глаз. // Пластическая хирургия придаточного аппарата глаза и орбиты: Мат.науч.-практ.конф. М.,1996. - С.115 - 116.

17. Бирич Т.В. Ожоги глаз. Минск, 1979.- 144 с.

18. Богданов Б.С. К вопросу о лечении и профилактике химических ожогов органа зрения: Мат. конференции офтальмологов. Уфа, 1972,- С.155-157.

19. Бойко А.В., Ченцова Е.В. Хондрокератопластика в лечении васкуляризованных послеожоговых бельм роговицы. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989.-С.63-64.

20. Бордюгова Г.Г. Вопросы патогенеза и обоснование адекватной регуляции ожогового процесса в глазу. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989. - С.4-6.

21. Бордюгова Г.Г. Выбор рациональных схем кортикостероидной терапии при отторжении трансплантата роговицы. // Вестник офтальмол. -1978. № 3. - С. 44-45.

22. Бордюгова Г.Г. Эффективность микрохирургическойsреконструкции переднего отдела глаза в реабилитации больных с бельмами. // IV Всероссийск. съезд офтальмологов: Тез. докл. М.,1982. - С.70-71.

23. Бордюгова Г.Г., Поволочко Л.И., Травкин А. Г. Применение антиоксидантов при лечении химических ожогов роговицы и при кератопластике. // Научные труды Иркутского мед. института. 1977.- Вып.140.-С .13-17.

24. Бордюгова Г.Г., Травкин А. Г. Современная тактика лечения особо тяжелых ожогов глаз. // VI Всесоюзный съезд офтальмол.: Тез. докл. М., 1985. - Т.4. - С.20-24.

25. Бордюгова Г.Г., Юровская Н.Н., Тазетдинова Н.Р. Прогностическое значение иммунорегуляторного индекса ОКТ4/ОКТ8 при тяжелых ожогах глаз. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989.- С.12-13.

26. Брикман И.В., Ибадова С.И., Котелянский В.Э. Фибронектин. Новый класс лекарственных веществ в лечении эпителиальных дефектов роговицы. // Патофизиология и биохимия глаза. Сборник научных работ. М., 1986.- С.88-92.

27. Бугаев B.C., Миронов Н.В., Миронов И.Н., Сухих Г. Т. Новые аспекты комплексной терапиипаркинсонизма. // Кремлев. медицина. 1998. - N3. - С.24-29.

28. Ваничкин А. А. Применение иммуномодуляторов миелопида и тималина в комплексном лечении больных с ожогами глаз. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов.-М.,1989.- С.28-29.

29. Ваничкин А.А., Легеза Г.В., Дмитриев С.К. Нарушение иммунного статуса у больных в раннем периоде ожоговой болезни глаз. // Офтальмол.журн. -1987.- №3.- С.148-152.

30. Варданян И. Р. Клинико-иммунологическая характеристика и лечение больных с ожогами и послеожоговыми бельмами роговицы. Дис. . канд. мед. наук. - М., 2000. - 301 С.

31. Василевич А.И., Чвялева К.И. Современные методы лечения ожогов глаз у детей. // Всесоюзная конференция по актуальным вопросам детской офтальмологии: Тезисы докладов. М., 1983.-С.191.

32. Верба А.А. Анализ лечения и исходов химических ожогов глаз у детей. // Актуальные вопросы офтальмологии: Тез. докл. науч.-практич.конф. офтальмологов. Владивосток, 197 7.- С.61-62.

33. Войно-Ясенецкий В.В. Тканевая несовместимость и пути ее преодоления. М., Медицина. - 1971.-160 С.

34. Волков В. В. О звеньях патогенеза ожоговой болезни глаз. // Новое в лечении ожогах глаз: Тез. докл. симпоз. с участием иностранных специалистов -М.,1989. С. 3-4.

35. Волков В. В. Современные боевые повреждения органа зрения и организация офтальмологической помощи при них. // VIII Съезд офтальмологов России: Тез. докл. М., 2005. - С.524-527.

36. Волков В.В., Хавинсон В.Х., Пасхина М.Н. и др. Иммунологическая диагностика и прогнозирование приживления кератотрансплантатов. // Вестник офтальмол. 1986. - Т. 102. - №5 - С. 27-31.

37. Гилязева З.А. Применение нового препарата «Керакол» при ожогах роговой оболочки. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989.- С.49.

38. Гогина Н.Д. Метод повторных орошений в комплексе лечебных мероприятий при ожогах глаз: Материалы IV респ. конф. офтальмологов БССР. -Минск, 1975. С.121-123.

39. Гольфельд Н.Г., Федотов В. Г. Поверхностнаяпослойная кератопластика при ожогах глаз III IVстепени и тяжелых заболеваниях роговой оболочки. // IV Всероссийск. съезд отальмологов: Тез. докл М., 1982. - С. 325-326.

40. Горбачева О.А. Влияние оксида азота в газовом потоке на состояние тканей и структур глазного яблока и экспериментальное обоснованиеиспользования его для лечения ожоговой травмы глаз. // Дис. . канд. мед. наук. М., 2002. - 169 С.

41. Горгиладзе Т.К., Адамова Н.А. Ускорение заживления роговичных эпителиальных дефектов под действием фибронектина. // Огнестрельная травма органа зрения: Тезисы докладов научной конференции. Ленинград, 1989. - С.60-61.

42. Горгиладзе Т.У., Кочкарева О.И., Соколова Э.Н. Программированный анализ основных причин неудач при сквозной кератопластике. // Офтальмол. журн. -1986. № 2. - С. 92-96.

43. Горгиладзе Т.У., Шульгина Н.С., Митов Т.В. Цитотоксические антитела HLA специфичности при пересадке роговицы. // Офтальмол. журн. 1985. -№6. - С. 351-353.

44. Груша О.В., Чередниченко Л. П. Способ лечения химических ожогов роговой оболочки в условиях биологической защиты. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. симпозиума с участием иностранных специалистов. М., 1989.- С.39-41.

45. Гундорова Р.А. О показаниях к хирургическому вмешательству при ожоговой травме глаз. // Новое в лечении ожогов глаз. Тез. докл. симпозиума с участием иностр. специалистов. М.,1989. - С.50-51.

46. Гундорова Р. А. Смещение акцентов в этиологии ожоговой болезни. // Ожоги глаз и их последствия: Материалы науч.-практ. конференции. М., 1997. -С.З.

47. Гундорова Р. А. Ургентная помощь при травмах глаз. 1-й этап реабилитации. // Метод, рекоменд. -М., 1988. 13 С.

48. Гундорова Р. А., Бордюгова Г. Г., Дризе J1.A. Современные принципы лечения тяжелых ожогов глаз. // Современные средства первой помощи и методы лечения ожоговой болезни: Тез. докл. конференции. -М., 1986.- С.326-328.

49. Гундорова Р.А., Бордюгова Г.Г., Тазетдинова Н.Р. Тактика хирургического лечения больных с послеожоговыми изменениями век, конъюнктивы и роговицы. // Вестник офтальмол. 1987.- Т.103. -№5.- С.14-17.

50. Гундорова Р.А., Бордюгова Г.Г., Травкин А.Г., Гахраманов Ф.С., Тазетдтнова Н.Р. // Ожоговая травма глаз.- М., 1989. 200 С.

51. Гундорова Р.А., Бордюгова Г.Г., Травкин А.Г. и др. Патогенетически ориентированное консервативное и хирургическое лечение ожоговой травмы глаз. // Метод, реком. М., 1986. - С.12.

52. Гундорова Р.А., Бордюгова Г.Г., Южаков A.M. Лечение и профилактика осложнений ожогов органа зрения. // Метод, рекоменд. М., 1982. - 11 С.

53. Гундорова Р.А., Майчук Ю.Ф., Катаев М.Г., Макаров П.В. Показания к конъюнктивальной пластике при дефектах роговицы различного генеза // Актуальные проблемы современной офтальмологии: Сборник науч. трудов. Саратов, - 1996. - С. 3234.

54. Гундорова Р.А., Малаев А.А., Южаков A.M. Травмы глаза М.: Медицина, 1986. - 363 С.

55. Гундорова Р.А., Ченцова Е.В., Романова И.Ю. Влияние нового адгезивного препарата на восстановительные процессы в роговице при моделированных эрозиях. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997. -С.32-33.

56. Гусева О.Г., Леус К.Ф. Изменение активности кислой фосфатазы роговицы в динамике химического ожога глаза. // Офтальмол.журн. 1988.- №7.-С.421-424.

57. Гусева О.Г., Логай И.М., Якименко С. А. Мембранотропные препараты в лечении ожогов глаз. // Новое в лечении ожогов глаз. Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989.- С.27-28.

58. Гыцу Ф.И., Дмитриц М.Е. Офтальмоирригатор 73. // Офтальмол. журн. - 1975. - № 1. - С.60.

59. Гюльалиева Д.Т., Адигезалов Ф.Н. Растительные препараты в комплексном лечении ожогов глаз. // Материалы VI Всесоюзного съезда офтальмологов. -М., 1985. Т.4. - С.40-42.

60. Джалиашвили О. А. Еще раз к вопросу о ранней некрэктомии с последующей кератопластикой при термических ожогах роговицы. // Повреждения органа зрения. Сборник научных трудов. Алма-Ата, 1986.-С.59-63.

61. Дик Г.М. Состояние сетчатки и зрительного нерва у больных с химическими ожогами переднего отделаглаза. 11 Новое в лечении ожогов глаз. Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М., 1989. - С. 1011.

62. Жаботинская Н.В. Маннит в лечении ожогов глаз. // Труды V Съезда офтальмологов УССР.- Кипе, 1973.-С.265-266.

63. Жданова Л.В. О применении алкалоида соланина для лечения термического ожога роговицы. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. -М., 1997. С.29-30.

64. Зайцева Н.С., Илуридзе С. А., Гундорова Р. А., Бордюгова Г. Г. Иммунологические критерии прогноза кератопластики при бельмах различной этиологии. // Вестник офтальмологии. 1983. - № 3. - С.47-49.

65. Заславская JI.A., Малеева Н.В. О применении кислородно-белкового витаминного коктейля в лечении заболеваний глаз. // Проблемы клинической офтальмологии. Алма-Ата, 1977. - С. 342-243.

66. Захаренко О.М. Диагностика и лечение вторичных иммунодефицитов у больных ожоговой болезнью. // Современные средства первой помощи и методы лечения ожоговой болезни: Тез. III Всесоюзн. конф. М., 1989. - С. 198-200.

67. Захарова И.А., Грязнов В.Н., Володина Г. А., Соловьев А. И. Гелевые сорбенты в реабилитации больных с непроникающими ранениями и ожогами роговицы. // Материалы VI Съезда офтальмологов России. М., 1994.- С.296.

68. Захарова И.А., Махмутов В.Ю., Найдюк Д.О. Интерфероновый статус при ожогах глаз. // Лечениепосттравматической патологии заднего отдела глаза у пострадавших в экстремальных ситуациях. Тезисы докладов науч.-практ. конф. М., 2004. - С.75-76.

69. Зеленская М.В., Бабич Г.А., Киваев А.А. Опыт применения мягких контактных линз в лечении свежих ожогов глаз и их последствий. // Вестник офтальмол. 1986. - №2. - С.31-33.

70. Игнатов Р.К. Значение антигенов HLA системы для приживления роговичного аллотрансплантата на почве ожоговых бельм. // Тез. докл. межд. конф. по кератопластике и кератопротезированию Одесса, 1978. - С. 48-49.

71. Игнатьева Г.А. Иммунная система и патология. // Пат. физиол. и экспер. терапия 1998. - № 1. - С. 35-42.

72. Илуридзе С.Л., Тазетдинова Н.Р. Изменения клеточного иммунитета при ожогах глаз. // Новое в лечении ожогов глаз. Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989. - С.15.

73. Исаева Р.Т. Морфофункциональная характеристика репаративных процессов в роговице и возможности их фармакологической регуляции. // Дисс. . канд. мед. наук. М., 1989. - 154 С.

74. Калинич Н.И. Новые стимуляторы репаративной регенерации роговицы в лечении заболеваний переднего отрезка глаза. // Автореферат дисс. канд. мед. наук. М., 2000.- 24 С.

75. Капитонов Ю.А. Коррекция протеолиза роговицы в ранние сроки после химического ожога. // Дис. канд. мед. наук. М., 2001. - 254 С.

76. Капитонов Ю.А., Ченцова Е.В., Чеснокова Н.Б. Локальная регуляция протеолиза в роговице после щелочного ожога. // Ожоги глаз и их последствия. Мат. науч.-практ. конф. М., 1997. - С.16-19.

77. Каспаров А.А., Аладинская И.В. Комбинированное применение циклоспорина при сквозной кератопластике. // Актуальные вопросы офтальмологии: Мат. науч. практ. конф. - М., 1997. - С.146-147.

78. Каспаров А.А., Ермаков Н.В., Раппопорт Ю.М. Эндотелий трансплантата донора после сквозной кератопластики. // Вестник офтальмол. 1990. - Т. 106. - № 5. - С. 12-17.

79. Каспаров А.А., Розинова В.Н., Наим Ю.Ю. Глазной банк и ургентная кератопластика при тяжелых поражениях роговицы. // Повреждения глаз приэкспериментальных ситуациях: Материалы науч,-практ. конф. М., 1995. - С. 95-96.

80. Катаев М.Г., Фролов-Багреев М.Н. Технические особенности свободной пластики сводов при симблефароне. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989. -С.60-61.

81. Князева Г. Б. Структурная организация роговицы глаза при денервации глаза в эксперименте. // Автореф. . дисс. . канд. биол. наук. Новосибирск, 1998. - 28 С.

82. Козлова Н.Ф., Семенова Г.С. Применение тканевой терапии и мягких гидрофильных линз в комплексном лечении ожогов глаз. // Применение тканевых препаратов в медицине: Тезисы докладов республиканской научной конференции. Одесса, 1983.- С.100-101.

83. Козьмова Т. С. Тимоген в комплексном лечении ожогов глаз (клинико-эксперимент. исследование). // Автореф. . дисс. . канд. мед. наук. М., 1991. -24 С.

84. Колесников О.Ю. Масляная вытяжка прополиса в лечении экспериментальных химических ожогов глаз. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997.- С.30-31.

85. Колесникова A.M., Никулина Н.Б., Моисеева Г.А. Лечение химических поражений глаз. // Физиология и патология механизмов адаптации органа зрения. -Владивосток, 1983.- Т.4.- С.31-33.

86. Копаева В. Г. Современные аспекты сквозной субтотальной кератопластики. // Дисс. . д-ра. мед. наук. М., 1982. - 435 С.

87. Копаева В.Г., Андреев Ю.В. Эффективность сквозной кератопластики на ожоговых бельмах при фотохимической деструкции новообразованных сосудов в трансплантате. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997. - С.50-51.

88. Копциовская Р.С. Лечение ожогов глаз фибринной пленкой из донорской крови. // IV съезд офтальмологов УССР: Тез. докл. Киев, 1964. - С. 133.

89. Кострюков Б.М., Ковалева В.М. Гипербарическая оксигенация в комплексной терапии ожоговой травмы глаз. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989.- С.47-49.

90. Краснов М.М., Каспаров А.А., Оганесянц В.А. Применение мягких контактных линз при различныхзаболеваниях роговицы. // Вестник офтальмол. -1985. №6. - С. 39-41.

91. Краснов М.М., Каспаров А.А. , Юдина Ю.В., Оганесянц В. А. Опыт применения солкосерила в лечении заболеваний роговицы. // Вестник офтальмол. 1982. - №4. - С.64-67.

92. Куренков В.В. Руководство по эксимерной хирургии роговицы. М., 2002. - 382 С.

93. Кушнир В.Н., Слепова О. С. Первый опыт применения препарата имунофан при лечении ожогов глаз. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997. - С.24-25.

94. Лазаренко В. И. К методике оказания первой помощи с применением местной гипотермии при химических ожогах глаз. // Криотерапия в офтальмологии. Красноярск, 1988. - С.151-156.

95. Лазаренко В.И., Сычев Г.М., Лубенец Е.Б. Модификация экстраокулярного трансмембранного диализа для лечения ожогов глаз. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. М., 1989. - С.37-38.

96. Ларина З.Т. Морфология нервного аппарата склеры и роговицы при глаукоме. // Дисс. . канд. мед. наук. М., 1955. - 82 С.

97. Легеза Г.В., Гусева О.Г., Хрусталева Е.А., Шишкова Г.И., Титаренко И.В. Ошибки в тактике лечения тяжелых ожогов глаз на ранних стадиях и их причины. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997.-С.23-24.

98. Леонидов Н.Б., Колесникова М.А., Селезнев Н.Г., Успенская С.И. Лечение химических ожогов глаз субконъюнктивальным введением бетамецила в эксперименте. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997. - С.22-23.

99. Либман Е.С., Кремкова Е.В., Иофан К. Л. Эпидемиология ожогов глаз и инвалидности вследствие ожоговой болезни. // Новое в лечении ожогов глаз:

100. Тез. докл. симпоз. с участием иностранных специалистов. М., 1989. - С.76-77.

101. Лунина С.Н., Марачева Н.М. О первичной некрэктомии в лечении тяжелых ожогов глаз. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. -М., 1997. С.45.

102. Майчук Ю.Ф., Базукина Л.П. Новые лекарственные средства в лечении рецидивирующей эрозии роговицы. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989. - С. 2425.

103. Макаров П. В. Кератопластика как профилактика перфорации роговицы при ожогах тяжелой степени. // Неотложная помощь, реабилитация и лечение осложнений при травмах органа зрения и чрезвычайных ситуациях: Мат. науч.-практ. конф. М., 2003. -С.35-37.

104. Макаров П.В. Осложнения тяжелой ожоговой травмы глаз: патогенез, анализ причин, профилактика и возможные пути оптимизации результатов лечения. // Дисс. . д-ра мед. наук. М., 2003. - 335 С.

105. Макаров П.В., Бордюгова Г.Г., Варданян И.Р. Кровавая блефарорафия в хирургическом лечении тяжелых ожогов глаз и их последствий. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997. - С.39.

106. Макаров П.В., Гундорова Р.А., Безнос О.В. Роль лимбальной конъюнктивы в заживлении дефектов эпителия роговицы разного генеза. // Актуальныевопросы офтальмологии: Мат. науч.-практ. конф. -М., 2000. 4.1. - С.82-83.

107. Макаров П.В., Гундорова Р. А. Тяжелая ожоговая травма глаз: комплексная лечебная тактика как метод профилактики осложнений и оптимизации результатов лечения. // VIII Съезд офтальмологов России: Тез. докл. М., 2005. - С543.

108. Макаров П.В., Гундорова Р. А., Дадашева З.Р. О кератопластике в хирургическом лечении ожоговой травмы глаз и ее последствий. // Вестник офтальмол. 2004. - №3.- С.14-16.

109. Макаров П.В., Гундорова Р.А., Терских В.В., Васильев А. В., Ходжабекян Г.В., Иванов А. А., Максимов И.В., Федоров Д.Н., Лапина. Л.А., Шинин

110. B.В. Изучение эффективности трансплантации культивированных аллогенных фибробластов в коллагеновом геле при лечении ожоговых дефектов роговицы в эксперименте. // Вестник офтальмол. -2004. №4. - С.27-29.

111. Максименко В.И., Атлер С.С., Калинин И. А., Усова И.А., Гаязов И.К. Продукты пчеловодства и рыжиковое масло в лечении химических ожогов глаз у птицеводов. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989.1. C.25-26.

112. Малаев А.А., Нероев В.В., Сарыгина О.И. Новое направление консервативного лечения посттравматической патологии. // Травмы глаз. Сборник науч. трудов МНИИ ГБ им. Гельмгольца. М., 1993.- С.73-76.

113. Манукян М.Е. Об эффективности лечения щелочных и кислотных ожогов роговицы этаноламином. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989.- С.4 4-45.

114. Мирошник Д.М. Применение нового природного биорегулятора липохромин в лечении тяжелых ожогов глаз (экспериментально-клинические исследования). // Автореф. . дисс. . канд. мед. наук. Одесса, 1994. - 15 С.

115. Мисюн Ф.А., Поромова И.Ю. Первый опыт применения аутотенонопластики при лечении ожогового поражения глаза. // Ожоги глаз и ихпоследствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997. -С.42-43.

116. Могилевцев В.В., Савицкая И. В. Лечебная кератопластика в лечении ожоговых бельм. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. -М., 1997. С.41.

117. Мороз 3. И. Хирургическое лечение бельм различной этиологии. // VIII Съезд офтальмологов России: Тез. докл. М., 2005. - С.452-453.

118. Мороз З.И., Тоцкая Т.Д., Ковшун Е.В. Кератопластика в лечении ожоговых бельм. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989.- С.55.

119. Морозов В.И., Яковлев А.А. Фармакотерапия глазных болезней М.: Медицина, 1998. - 333 С.

120. Мошетова Л.К., Гудова И.В., Александрова Т.М., Лагерева Т.И., Ширшова Е.В., Исламов З.С. Экстренная послойная поверхностная кератопластика при ожогах глаз. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989. С.57-58.

121. Мошетова Л.К., Слонимский Ю.Б., Эстрин Л. Г., Слонимский А.Ю. Клинические результаты кератопластики при прободении роговицы. // Офтальмология катастроф: Мат. симп. с участием иностранных специалистов. М., 1991. - С.99-100.

122. Мошетова Л.К., Овчарова Н.Г. и др. Морфологически ориентированное применение покрытия "Цитокол" в лечении ожогов глаз. // Актуальныевопросы офтальмологии: Тез. докл. науч.- практ. конф. М. - 2000. - 4.1. - С.83-84.

123. Мошетова JI.K., Овчарова Н.Г., Борисенко И.Ф., Вахова Е.С. Система этапности оказания экстренной помощи при ожогах глаз. // Тез. докл. науч.-практ. конф. Смоленск, 1990. - С.121-122.

124. Мусил Я. Основы биохимии патологических процессов. М., Медицина, 1985.- 432С.

125. Неделька А.Ф., Майчук Ю.Ф., Соловьева В.П., Неделька В. И. Глазные лекарственные пленки с апилаком в комплексном лечении ожогов роговицы. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов.- М.,1989.- С.48-49.

126. Новицкий И.Я. Место трансплантации амниотической оболочки в лечении заболеваний роговицы, сопровождающихся ее неоваскуляризацией. // Вестник офтальмол. 2003.- №6. - С.9-12.

127. Овсепян T.JI., Мурадян С.М., Вартанян А.Г. и др. Исходы ожоговых повреждений глаз при комплексном лечении с использованием фильтрата крови. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. М., 1989. -С.43-44.

128. Оганесян О.Г. Аутоконъюнктивальная пластика в ургентной хирургии дефектов роговицы. // Дисс. . канд. мед. наук. М., 2002. - 242 С.

129. Пак Н.В., Ченцова Е.В., Зуева М.В., Цапенко И.В., Петриашвили Г.Г., Полтавцева Р.А., Марей М.В., Сухих Г.Т. Трансплантация нейрональных стволовых клеток при экспериментальной ретинопатии. // Вестник офтальмол. 2004. - № 6. - С.21-24.

130. Пальцев М.А., Иванов А.А. Межклеточные взаимодействия. М., 1995.- 224 С.

131. Парамей В.Т., Островский Ю.М., Гогина Н.Д. и соавт. Эффективное лечение ожогов глаз (экспериментальные данные). // Материалы VI Всесоюзного съезда офтальмологов. М., 1985.-Т.4.- С.36-39.

132. Перетягина О. А., Легеза Г. В. Модификация органосохраняющей операции при особо тяжелых ожогах глаз. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989.- С.54.

133. Полтавцева Р. А., Ржанинова А.А., Ревищин А.В., Александрова М.А., Корочкин Л.И., Репин B.C., Репин

134. B.C., Сухих Г.Т. Развитие IN VITRO нейральных прогениторных клеток эмбрионов человека. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -2001.- Том 132. №9. - С.290-293.

135. Полунин Г.С., Шехтер А.Б., Иванов М.Н. Влия-ние предшественника простагландинов арахидоновой кислоты на течение термического ожога роговицы. // Вестник офтальмол. - 1983. - №2. - С.41-4 6.

136. Полякова Л.Я., Макаров П.В., Варданян И.Р., Ранджу Чавла. Структура ожоговой травмы глаз. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997.- С.4-5.

137. Пучковская Н.А., Шульгина Н.С., Минев М.Г. Иммунология глазной патологии. М. : Медицина, 1983.- 208 С.

138. Пучковская Н.А., Якименко С.А., Непомнящая В.М. Ожоги глаз. М., 2001.- 272 С.

139. Пятышина О.В., Бутюкова В.А., Соловьева Ю.В. Влияние опилонга на регенерацию роговицы при ожогах глаз в эксперименте. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997.1. C.28-29.

140. Ранджу Чавла, Хорошилова-Маслова И.П., Платовская Л. В. и др. Применение комплекса аллогенных цитокинов в терапии щелочного ожога (экспериментальное исследование). // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997. - С.21-22.

141. Репин B.C. Трансплантация клеток: новые реальности в медицине. // Трансплантация фетальных тканей и клеток: Сб. научн. статей. // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. М., 1998. - С. 1429.

142. Репин B.C., Ржанинова А.А., Шаменков Д.А. Эмбриональные стволовые клетки: фундаментальная биология и медицина. М., 2002. - 222 С.

143. Репин B.C., Сухих Г. Т. Медицинская клеточная биология. М. БЭБиМ., 1998. - 199 С.

144. Романова И.Ю. Применение адгелона при травматических поражениях роговой оболочки. // Дисс. . канд. мед. наук М., 2004.- 2 69 С.

145. Рунович А.А., Сухих Г.Т., Ермакова А.Н., Явербаум П.П., Просекин М.С., Курильский Д.К., Срекаловский Д. В. Гормоны фетальных такней человека. // Клинич. аспекты клеточной и тканевойтерапии: Мат. II Межрегион, науч.-практич.конф. -Омск, 2000.- С.63-65.

146. Сапоровский С. С. Коллагеновые покрытия в комплексном лечении химических ожогов глаз. // Офтальмол. журн. 1994. - №2. - С.75-79.

147. Сафарли-Баева Ш.Р. Об эффективности эвкалиптового препарата при лечении больных с ожогами глаз. // Сб. науч. работ 1 съезда офтальмологов Закавказья. Тбилиси, 197 6. - С.151-154.

148. Седой JI. А., Чуистова И.П., Бондарева Г.С., Соколюк A.M. Применение мягких контактных линз с лечебной целью при ранениях глаз. // VI Всесоюзный съезд офтальмол.: Тез. докл. М., 1985. - Т. 4. -С.106-107.

149. Серов В.В., Шехтер А.Б. Соединительная ткань. -М., Медицина. 1981. - 312 С.

150. Слепова О.С., Гундорова Р. А., Бордюгова Г. Г., Макаров П. В. и др. Иммунодиагностика при свежих ожогах глаз и их осложнениях. // Метод, реком. -М., 2000. 8 С.

151. Слонимский Ю.Б. Циклоспорин и аутокератопластика при тотальных ожоговых бельмах.

152. Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов.- М.,1989.- С.41-42.

153. Соловьев А.И. Применение гидрогелей в лечении ожогов роговицы. // Дисс. . канд. мед. наук. -М.,1997. 140 С.

154. Струк Х.Г., Кирмссе К., Тост М. К вопросу применения кортикостероидов при химических ожогах глаз. // Вестник офтальмол. 1986. - № 5. - С. 5055.

155. Сухарева Н.И. Послойная кератопластика с использованием неконсервированной донорской роговицы и с применением микрохирургической техники. // Автореф. дисс. . канд. мед. наук. М., 1986.- 21 С.

156. Сухих Г.Т. Медицинская эмбриология: от вещества и клеток к существу и личности (где проходит грань допустимых медицинских вмешательств). // Медицина, этика, религия и право. Мат. конф. М., 2000. -С.82-93.

157. Сухих Г. Т. Трансплантация фетальных клеток в медицине: настоящее и будущее. // Трансплантация фетальных тканей и клеток: Сб. науч. статей. // Вюлл. эксперим. биологии и медицины. М., 1998. -Прил.1 - С.3-13.

158. Сухих Г.Т., Богданова И.М., Малайцев В. В. Иммунологические аспекты клеточной терапии: Обзор. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. М., 1998. -125. N2. - С.124-129.

159. Сухих Г.Т., Малайцев В.В. Нейральная стволовая клетка: биология и перспективы нейротрансплантации. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. М., 2001. -131. №1. - С.244-255.

160. Сычев Г.М., Манькова T.J1., Похабов А.А. и др. Экстраокулярный трансмембранный диализ в лечении ожогов глаз. // Офтальмол. журн. 1987. - №3. -С.135.

161. Тазетдинова Н.Р. Клинико-иммунологическое обоснование патогенетически ориентированного медикаментозного и хирургического лечения ожоговой болезни глаз. // Дисс. . канд. мед. наук. М., -1989. - 182 С.

162. Таракановский А.В., Хомичук А.Ю. Влияние ранторина на регенерацию роговицы при термическом ожоге в эксперименте. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов.-М., 1989. С.17-19.

163. Тартаковская А.И. Патогенез, клиника и лечение тяжелых химических ожогов глаз. // Автореф. дисс. . д-ра мед. наук. М., 1969. - 32 С.

164. Титаренко И. В. Использование адсорбентов в лечении химических ожогов глаз // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч. практ. конф. - М., 1997. - С.26-27.

165. Травкин А.Г. Интрароговичное введение лекарственной пленки при послойной трансплантации роговицы на бельмах постожоговой этиологии. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989. - С.52-53.

166. Травкин А.Г., Шульгина Н.А. Оценка биохимических показателей у животных с щелочными ожогами глаз при лечении синтетическими и природными антиоксидантами. // VIII Съезд офтальмологов России: Тез. докл. М., 2005. -С.547.

167. Травкин А.Г. Хемилюминесценция, малоновый диальдегид, Т-В-лимфоциты периферической крови у больных после ожоговой травмы глаз. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М.,1989. - С.11-12.

168. Тринчук В.В., Лоза А.В., Перетягин О. А. Определение показаний к хирургическому лечению ожогов глаз. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М., 1989.-С.66-67.

169. Трояновский Р.Л., Монахов Б.В., Бржеский В.В., Куглеев А. А. Опыт васкуляризирующих операций при особо тяжелых ожогах глаз. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997. -С.43-44.

170. Уздин М.И., Винькова Г.А., Носаль Т. С., Лучинина Н.А. Хирургическое лечение тяжелых и особо тяжелых ожогов глаз. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. -М., 1989. С.56-57.

171. Ушаков Н.А. Гудаковский Ю.П., Муравьева Э.В. и др. Мягкие контактные линзы в лечении ожогов глаз легких и средней тяжести. // Офтальмол. журн. -1988. №7. - С.440-441.

172. Федоров Н .А., Мовшев Б.Е., Недошивина Р.В., Корякина И. К. Ожоговая аутоинтоксикация. Пути иммунологического преодоления. М. : Медицина, 1985. - С.26-122.

173. Федоров С.Н. Использование антиоксидантов и дезинтоксикационных растворов в комплексе реанимационной терапии химических ожогов глаз 3-4 степени: Метод, рек. М., 1980. - 12 С.

174. Филатова И.А., Катаев М.Г. К вопросу о срочной кожной платсике век после ожога. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997. -С.46-47.

175. Фомина И.А. Применение фетальных клеток эпителия и кератобластов роговицы человека в эксперименте. // Дисс. . канд. мед. наук, М., 2001. -133 С.

176. Хамидова Г.К. Наш опыт лечения химических ожогов глаз. // Материалы VI Всесоюзного съезда офтальмологов. М., 1985. - Т.4.- С.125-127.

177. Харлап С.И. ГБО в клинической офтальмологии. // Автореф. дисс. . канд. мед. наук. М., 1980. - 22 С.

178. Хатминский Ю.Ф., Басова Г.Г. Физико-химическая оценка эффективности ионообменных вкладышей при лечении щелочных ожогов глаз. // Офтальмол.журн. -1992.- №1.- С.44-46.

179. Хатминский Ю.Ф., Вахрамеев В.Н., Салагаева Н.А. Первая помощь при ожогах глаз газобаллонными лакриматорами. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997. - С.34-35.

180. Ходжабекян Г.В. Трансплантация аллогенных культивированных клеток в лечении ожоговых дефектов роговицы в эксперименте. // Дисс. канд. мед. наук. М., 2003. - 192 С.

181. Хорошилова-Маслова И.П., Андреева Л.Д., Платовская Л.В., Кузнецова И.А. Клинико-гистологическое исследование энуклеированных глаз с контузионным разрывом роговицы после радиальной кератотомии. Вестник офтальмол. - 1998. - №4. -С.3-8.

182. Чаланова Р. И. Неотложная кератопластика с предварительной ферментативной некрэктомией при экспериментальном ожоге роговицы. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997. - С.40.

183. Чаланова Р.И. Показатели иммунологической реактивности организма при применении лечебной кератопластики в лечении ожоговой болезни глаз особо тяжелой степени. // Вестник офтальмол. -2004. №2. - С.11-15.

184. Ченцова Е.В. Система патогенетически обоснованного лечения ожоговой травмы глаз. // Дисс. . д-ра мед. наук. М.,199б. - 304 С.

185. Ченцова Е.В. Эмоксипин и фибронектин в лечении больных с ожогами глаз. // Тез. докл. науч.-практ. конф. "Диагностика и микрохирургия ранений глаза сегодня и завтра". М., 1991. - С. 129-130.

186. Ченцова Е.В., Романова И.Ю. Клиническая апробация нового низкомолекулярного сывороточного полипептида при ожоговых и посттравматических повреждениях роговицы. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997. -С.19-20.

187. Ченцова О.В., Бельфер И.М. Гипербарическая оксигенация в комплексном лечении тяжелых ожогов и травм глаза. // Новые методы диагностики и леченияповреждений органа зрения: Тез.докл. Калининград, 1987. - С.92-93.

188. Чередниченко Л. П., Яковлева Л.В., Кореняк Г.В. и др. Первая помощь при ожоговой травме роговицы и конъюнктивы. // Ожоги глаз и их последствия: Мат. науч.-практ. конф. М., 1997. - С.29.

189. Чередниченко М.Л., Чередниченко Л.П. Особенности сохранения и восстановления прозрачности в пораженных роговицах биологически активными веществами. // VIII Съезд офтальмологов России: Тез. докл. М., 2005. - С.486.

190. Черныш В.Ф. Эффективность лимбальной трансплантации в зрительной реабилитации пациентов с последствиями тяжелых ожогов глаз. // VIII Съезд офтальмологов России: Тез. докл. М., 2005. -С.486-487.

191. Черныш В.Ф., Бойко Э.В., Шишкин М.М. Лимбальная трансплантация в лечении и зрительной реабилитации пациентов с тяжелыми химическими ожогами глаз. // Вестник офтальмол. 2004. - №2. - С.8-11.

192. Чеснокова Н.Б. Протеолитические ферменты при травмах глаза: значение и пути регуляции. // Теоретические и клинические исследования как основа медикаментозного и хирургического лечения травм органа зрения: Тез. науч.-практ. конф. М., 2000.-С.30-32.

193. Чеснокова Н.Б. Роль протеолитических ферментов и их ингибиторов в патологии роговицы. // Автореф. дисс. . д-ра мед. наук. М., 1991. - 35 С.

194. Чеснокова Н.Б., Кузнецова Т.П., Сосулина Н.Е. Состояние системы протеазы-ингибиторы при щелочном ожоге роговицы. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов,- М., 1989.- С.13-14.

195. Чеснокова Н.Б., Сосулина Н.Е., Кузнецова Т.П. Ферменты слезы при лечении экспериментального щелочного ожога роговицы гордоксом. // Офтальмол. журн. 1990. - №6. - С.351-354.

196. Шульгина Н.А., Скрипка В.П., Салкова Е.А., Абдуллин Е.А. Эффективность крылонебно-орбитальных блокад с гистохромом в лечении дистрофий роговицы. // VIII Съезд офтальмологов России: Тез. докл. -М., 2005. С.487.

197. Шульгина Н.С. Изменение антигенных свойств роговичной ткани при ожогах глаз и значение изменений при кератопластике. / / Проблемы гомопластики и аллопластики. Киев, 1967.- С. 27 9280.

198. Якименко С.А., Плевинскис В.П., Андрушкова О.А. Фонофорез ЭНКАД в лечении ожогов глаз. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М., 1989. - С.34-35.

199. Яковлева JI.B. Корнеосорбция в хирургическом и консервативном лечении ожогов. // Автореф. . дисс. . канд. мед. наук. Ставрополь, 1995. - 20 С.

200. Яхина Н.М. Выбор метода консервации донорской роговицы для кератопластики при ожоговых бельмах. // Новое в лечении ожогов глаз: Тез. докл. с участием иностр. специалистов. М., 1989. - С. 5859.

201. Adler F.H. Physiology of the Eye. Clinical Application. 1992. - P.70-87.

202. Aleksandrova M.A., Saburina R.A., Poltavtseva R.A., Revishchin A.V., Korochkin L.I., Sukhikh G.T. Behavior of human neural progenitor cell transplanted to rat brain. // Developmental Brain Research. 2002. - V. 134. - P. 143-148.

203. Anderson D.J. Stem cells and pattern formation in the nervous system: The possible versus the actual. // Neuron. 2001. - V.30, P.19-35.

204. Anderson D.J., Gage F.H., Weissman I.L. Can stem cells cross lineage boundaries? // Nat.Med. -2001. V.7(4). - P.393-395.

205. Anderson D.F., Prabhasawat P., Alfonso E., Tseng S.C. Amniotic membrane transplantation after the primary surgical management of band keratopathy. // Cornea. 2001. - N. 20(4). -P. 354-361.

206. Appleton I. Wound repair: the role of cytokines and vasoactive mediators. // J. Roy Soc. Med. -1994. V.87. - P. 500-503.

207. Barrandon Y. The epidermal stem cell: an overview. // Dev.Biol. 1993. - V.4. - P.209-215.

208. Basti S., Mathur U. Unusual intermediate outcome in three cases of limbal autograft transplantation. // Ophthalmology. 1999. - V.106. - P.958-963.

209. Bishop V.L., Robinson L.P., Wechsler A.W., Billson F.A. Corneal graft survival: a retrospective Australian study. // Aust. NZ J. Ophthalmol. 1986. - V.14. - № 2. - P. 133-138.

210. Bjornson C.R., Rietze R.L., Reynolds B.A., Magli M.C., Vescovi A.L. Turning brain into blood: a hematopoietic fate adopted by adult neural stem cells in vivo. // Science. 1999. - V. 283. -P.534-537.

211. Bourdon M.A., Ruoslahti E. Tenascin mediates cell attachment through an RGD-dependent receptor. // J.Cell Biol. 1989. - V. 108. - P. 1149-1155.

212. Butler P.E., Lee W.P., Sims C.D., Randolph M.A. et al. Cell transplantation from limb allografts. // Plast. Reconstruct. Surg. 1998. - V.102. -P.161-168.

213. Cardoen L., Foets B. Limbal transplantation after chemical injuries of the eye. // Bull.Soc.Beige Ophthalmol., 1999 V.272, P. 105110.

214. Chen J.J., Tseng S.C. Abnormal corneal epithelial wound healing in partial-thickness removal of limbal epithelium. // Invest.

215. Ophthalmol. Vis. Sci. 1991. - V.32. - P. 22192233.

216. Chen W.Y., Mui M.M., Kao W.W., Lui C.Y., Tseng S.C. Conjunctival epithelial cells do not transdifferentiate in organotypic cultures:expression of K12 keratin is restricted to corneal epithelium. // Curr. Eye Res. 1994. -V.13. - P.765-778.

217. Cho B.J., Djalian A.R., Holland E.J. Tandem scanning confocal microscopic analysis of differences between epithelial healing in limbal stem cell deficiency and normal corneal reepithelization in rabbits. // Cornea. 1998. -V. 17. - P. 68-73.

218. Chuck R.S., Behrens A., McDonnell P.J. Microkeratome-based limbal harvester for limbal stem cell transplantation: preliminary stadies. // Am. J. Ophthalmol. 2001. - V.131(3). - P.377-378.

219. Clarke D.L., Johansson C.B., Wilbertz J., Veress В., Nilsson E., Karlstrom H., Lendahl U., Frisen J. Generalised potential of adult neuralstem cells. // Science. 2000. - V.288, P.1660-1663.

220. Clerke N.D., Bee J.A. Innervation of chick cornea analized in vitro. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1996. - V.37 (8). - P.1761-1771.

221. Cohen E.J. Use of autologous limbal epithelial cells cultured on amniotic membranes for unilateral stem cell deficiency. // Arch. Ophthalmol. 2001. - V.119. - P.123-124.

222. Copeland R.A., Char D.H. Limbal autograft reconstruction after conjunctival squamous cell carcinoma. // Am. J. Ophthalmol. 1990. - V.110. -P.412-415.

223. Coster D.J., Aggarwal R.K., Williams K.A. Surgical management of ocular surface disorders using conjunctival and stem cell allografts. // Br. J. Ophthalmol. 1995. - V.79. - P.977-982.

224. Cotsarelis G., Cheng S.Z., Dong G., Sun T.T., Lavker R.M. Existence of slow-cycling limbal epithelial basal cells that can be preferentially stimulated to proliferate: Implications on epithelial stem cells. // Cell. 1989. - V.57. -P.201-209.

225. Croasdale C.R., Schwartz G.S., Mailing J.V., Holland E.J. Keratolimbal allograft: recommendations for tissue procurement and preparation by eye banks and standard surgical technique. // Cornea. 1999. - V. 18. - P. 52-58.

226. Daniels J.Т., Dart J.К., Tuft S.J., Khaw P.T. Corneal stem cell in review. // Wound Rep. Regen. -2001. V.9(6). - P.483-494.

227. Danjo Y., Gipson I.K. Coordination of movement of epithelial cells at the leading edge during healing. // XII International Congress of Eye Research. Paris, 1998. - P. 252.

228. Davanger M., Evensen A. Role of the pericorneal structire in renewal of corneal epithelium. // Nature. 1971. - V.229. - P.560-561.

229. Daya S.M., Watson A., Sharpe J.R., Giledi 0., Rowe A., Martin R., James S.E. Outcomes and DNA analysis of ex vivo expanded stem cell allograft for ocular surface reconstruction. // Ophthalmology. 2005. -V.112(3). - P.470-477.

230. Dilly P.N. Structure and function of the tear film. // Lacrimal gland, Tear Film and Dry Eye Syndromes. Plenum Press, New York. - 1994.1. P.239-247.

231. Dobke M., Grzybowsky J., Zoltowska A., Danawska A. Autoimmune effect of thermal injuri. // The immune consequences of thermal injuri. Baltimore -London: Williams and Wilkins. - 1981. - P.150-179.

232. Donshik P.C., Berman M.B., Dohlman C.H. et al. Effect of topical corticosteroids on ulceration in alkali-burned corneas. // Arch. Ophthalmol. 1978. V.96 - P. 2117-2120.

233. Dormady S.P., Bashayn 0., Dougherty R. et al. Immortalized multipotential mesenchymal stem cellsin the hematopoietic microenvironment. // J. Hemotherapy. 2001. - V.10. - P.125-140.

234. Dua H.S. Stem cells of the ocular surface, scientific principles and clinical applications. // Br. J. Ophthalmol. 1995. - V.79. - P.968-969.

235. Dua H.S. The conjunctiva in corneal epithelial wound healing. // Br.J.Ophthalmol. 1998. - V.82. - P.1407-1411.

236. Dua H.S., Saini J.S., Azura-Blanco A., Gupta P. Limbal stem cell deficiency: concept, aetiology, clinical presentation, diagnosis and management. // Indian J. Ophthalmol. 2000. - V.48(2). - P.83-92.

237. Ebato В., Friend J., Thoft R.A., Comparison of limbal and peripheral human corneal epithelium in tissue culture. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -1988. V.29. - P.1533-1537.

238. Ellies P., Anderson D.F., Topuhami A., Tseng S.C. Limbal stem cell deficiency arising from systemic chemotherapy. // Br. J. Ophthalmol. -2001. V.85(3). - P.373-374.

239. Engelhardt G.H., Struck H. Antibody production in burns. // Res. Exp. Med. 1972. - N17. - P.186-188.

240. Espana E.M., Grueterich M., Romano A.C., Touhami A., Tseng S.C. Idiopathic limbal stem cell deficiency. // Ophthalmology. 2002. - V.109(ll). - P.2004-2010.

241. Espana E.M., Grueterich M., Ti S.E., Tseng S.C. Phenotypic study of a case receiving a keratolimbal allograft and amniotic membrane for total limbal stem cell deficiency. // Ophthalmology. 2003. -V.110 (3). - P.481-486.

242. Ferrari G., Cusella-De Angelis G., Coletta M., Paolucci E., Stornaiuolo A., Cossu G., Mavilio F. Muscle regeneration by bone marrow-derived myogenic progenitors. // Science. 1998. - V.279. - P.1528-1530.

243. Folkman J. The vascularization of tumors. // Scientific American. 1976. - V.243. - N5. -P.345-356.

244. Friend J., Kenyon K.R. Physiology of the conjunctiva: metabolism and biochemistry. // The Cornea. Scientific Foundation and Clonal Practice. Boston. - 1987. - P.16-38.

245. Frucht-Pery J., Siganos C.S., Solomon A. Limbal cell autograft transplantation for severe ocular surface disorders. // Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 1998. - V.236. - P.582-587.

246. Fujikawa L.S., Foster C.S., Gipson J.K., Colvin R.B. Basement membrane components in healing rabbit corneal epithelial wounds. Immunofluorescence and ultrastructiral studies. // J. Cell Biol. 1984. -V. 98. - N1. - P.128-138.

247. Funderburgh J.L., Funderburgh M.L., Long C.J., Tasheva E.S., Conrad G.W. Proteoglycan responce to corneal inflammation and wound healing. // XII International Congress of Eye Research. Paris, 1998. - P. 33.

248. Galli R., Borello U., Gritti A., Minasi M.G., Bjornson C.R., Coletta M., Mora M., De Angelis M.G., Fiocco R., Cossu G., Vescovi A.L. Skeletal myogenic potential of human and mouse neural stem cells. // Nat. Neurosci. 2000. - V.3. - P.986-991.

249. Gipson I.K. The epithelial basement membrane zone of the limbus. // Eye. 1989. - V.3. - P.132-140.

250. Glaso M., Sandvig K.U., Haaskjold E. Apoptosis in the rat corneal epithelium during regeneration. A transmission electron microscopic study. // APMIS. 1993. - V.101. - P.914-922.

251. Gomes J.A., dos-Santos M.S., Cunha M.C., Mascaro V.L., Barros J.N., de-Sousa L.B. Amniotic membrane transplantation for partial and total limbal stem cell deficiency. // Ophthalmology. -2003. -V.110(3). P.466-473.

252. Goodell M.A., Jackson K.A., Majka S.M., Mi T. et al. Stem cell plasticity in muscle and bone marrow. // Ann. N Y Acad. Sci. 2001. - V.938. -P.208-218.

253. Green H. The keratinocyte as differentiated cell type. // Harvey Lect. 1980. - V.74. - P.101-139.

254. Gris 0., Guell J.L., Lopez-Navidad A., Caballero F., Del-Campo Z. Application of the amniotic membrane in ocular surface pathology. // Ann. Translant. 1999. - V. 4(3-4). - P. 82-84.

255. Grueterich M., Tseng S.C. Human limbal progenitor cells expanded on intact amniotic membrane ex vivo. // Arch. Ophthalmol. 2002. -V. 120 (6). - P.783-790.

256. Hardten, Aquavella. Ophthalmology Times. 2004. - V.29. - No 15. - P. 10.

257. Hefton J.M., Amberson J.В., Biozer D.C., Weksler M, E. Loss of the HLA-DR expression by human epidermal cells after growth in culture // Lbid. 1984. - V. 83. - P.48-50.

258. Henderson T.R., Findlay I., Matthews P.L., Noble B.A. Identifying the origin of single corneal cells by DNA fingerprinting: part II-application to limbal allografting. // Cornea. 2001. - V.20(4). - P.404-407.

259. Holland E.J. Epithelial transplantation for severe ocular disease. // Trans. Am. Ophthalmol. Soc. ~ 1996. V. 94. - P.677-743.

260. Holland E.J., Djalilian A.R., Schwartz G.S. Management of aniridic keratopathy with keratolimbal allograft: a limbal stem cell transplantation technique. // Ophthalmology. -2003. V.110. - P.125-130.

261. Holland E.J., Schwartz G.S. The evolution of epithelial transplantation for severe ocular surface disease and a proposed classification system. // Cornea. 1996. - V. 15. - P. 549-556.

262. Huang A.J., Tseng S.C. Corneal epithelial wound healing in the absence of limbal epithelium. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1991. - V.32. -P.96-105.

263. Imai E., Ito T. Can bone marrow differentiate into renal cells? // Pediatr. Nephrol. 2002. -V. 17. - P.790-794.

264. James S.E., Rowe A., Ilari L., Daya S., Martin R. The potential for eye bank limbal rings to generate cultured corneal epithelial allografts. // Cornea. 2001. - V.20. - P.488-494.

265. Jenkins C., Tuft S., Lui C., Buckley R. Limbal transplantation in the management of chronic contact lens-associated epitheliopathy. // Eye. -1993. V.7. - P.629-633.

266. Jones M.A., Marfurt C.F. Sympathetic stimulation of corneal epithelial proliferation in wounded and nonwounded rat eyes. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1996. - V. 37(13). - P. 2535-2547.

267. Kenyon K.R., Tseng S.C. Limbal autograft transplantation for ocular surface disorders. // Ophthalmology. 1989. - V.96. - P.709-722.

268. Kim J.S., Kim J.С., Na B.K., Jeong J.M. et al. Amniotic membrane patching promotes healing and inhibits proteinase activity on wound healing following acute corneal alkali burn. // Exp. Eye Res. 2000. - V. 70. - P. 329-337.

269. Kim J.C., Tseng S.C. The effects on inhibition of corneal neovascularization after human amniotic membrane transplantation in severely damaged rabbit corneas. // Korean J. Ophthalmol. 1995. - V.9(l). - P.32-46.

270. Kim J.C., Tseng S.C. Transplantation of preserved human amniotic membrane for surface reconstruction in severely damaged rabbit corneas. // Cornea. 1995. - V.14(5). - P.473-484.

271. Kinoshita Sh., Sotozono Ch., Inatomi Т., Nacamura M. Keratinocyte growth factor accelerates corneal epithelial wound healing in vivo. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1995. - V. 36. -P. 1524-1529.

272. Koizumi N., Inatomi Т., Quantock A.J., Fullwood N. J., Dota A., Kinoshita S. Amniotic membrane as a substrate for cultivating limbal corneal epithelial cells for autologous transplantation in rabbits. // Cornea. 2000. - V.19(l). - P.65-71.

273. Kolega J., Manabe M., Sun T.-T. Basement membrane heterogeneity and variation in corneal epithelial differentiation. // Differentiation. -1989. V.42. - P.54-63.

274. Kopen G.C., Prockop D.J., Phinney D.G. Marrow stromal cells migrate throughout forebrain andcerebellum, and they differentiate into astrocytes after injection into neonatal mouse brains. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1999. - V.96. -P.10711-10716.

275. Korbling M., Katz R.L., Khanna A. et al., Hepatocytes and epithelial cells of donor origin in recipients of peripheral-blood cells. // N. Engl. J. Med. 2002. - V.346. - P. 770-772.

276. Korey M., Peyman G.A., Berkowitz R. The effect of hypertonic pointment on corneal alkali burns. // Ann. Ophthal.- 1977.- Vol.9 N.ll- P.1383-1390.

277. Koroma B.M., Yang J., Sundin O.H. The Pax-6 homeobox gene is expressed throughout the corneal and conjunctival epithelia. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1997. - V.38. - P.108-120.

278. Krause D.S., Theise N.D., Collector M.I. et al. Multi-organ, multi-lineage engraftment by a single bone-marrow-derived stem cells. // Cell. 2001. -V.105. - P.369-377.

279. Kruse F.E., Chen J.J., Tsai R.J., Tseng S.C. Conjunctival transdifferentiation is due to the incomplete removal of limbal basal epithelium. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1990. - V.31. -P.1903-1913.

280. Kuckelkorn R., Redbrake C., Reim M. et al. Tenonoplasty: a new surgical approach for the treatment of severe eye burns. // Ophthalmic Surg. Lasers 1997. - V. 28 - P. 105-110.

281. Lagasse E., Connors H., Al-Dhalimy M., Reitsma M., Dohse M., Osborne L., Wang X., Finegold M.,

282. Weissman I.L., Grompe M. Purified hematopoietic stem cells can differentiate into hepatocytes in vivo. // Nat. Med. 2000. - V.6. - P.1229-1234.

283. Lajtha L.G. Stem cell concepts. // Differentiation. 1979. - V.14. - P.23-34.

284. Lavker R.M., Miller S., Wilson C., Cotsarelis G., Wei Z.G., Yang J.S., Sun T.-T. Hair follicle stem cells: their location, role in hair cycle and involvement in skin tumor formation. // J. Invest. Dermatol. 1993. -V.101 (Suppl.). - P.16-26.

285. Lee S., Tseng S.C.G. Amniotic membrane transplantation for persistent epithelial defects with ulceration. // Am. J. Ophthalmol. 1997. -V.123. - P. 303-312.

286. Lehrer M.S., Sun T.T., Lavker R.M. Strategies of epithelial repair: Modulation of stem cell and transit amplifying cell proliferation. // J. Cell Sci. 1998. - V.lll. - P.2867-2875.

287. Li D.Q., Tseng S.C. Three patterns of cytokine expression potentially involved in epithelial-fibroblast interactions of human ocular surface. // J. Cell Physiol. 1995. - V.163. - P.61-79.

288. Lindberg К., Brown M.E., Chaves H.V., Kenyon K.R., Rheinwald J.G. In vitro propagation of human ocular surface epithelial cells for transplantation. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -1993. V.34. - P.2672-2679.

289. Linhart R.W. Burns of the eyes and eyelids. // Arch. Ophthalmol. 197 6. - V.18. - P.999-1001.

290. Lopez J.G., Chew S.J., Thompson H.W. et al. EGF cell surface receptor quantitation on ocular cell by an immunocytochemical flow cytometry technique. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1992. - V.33 (6). - P.2053-62.

291. Martin G.R. Isolation of pluripotent cell line from early mouse embryos cultured in the medium conditioned by teratocarcinima stem cells. // Proc. Natl. Acad. Sci. US 1981. - V.78. - P.7634-7638.

292. Meer K.M., Newton R.H. Organization of collagen fibrils in the corneal stroma in relation tomechanical properties and surgical practice. // XII International Congress of Eye Research. Paris, 1998. - P. 205.

293. Meller D., Pires R.T., Tseng S.C. Ex vivo preservation and expansion of human limbal epithelial stem cells on amniotic membrane cultures. // Br. J. Ophthalmol. 2002. - V.86(4). - P.463-471.

294. Meller D., Tseng S.C. Reconstruction of the conjunctival and corneal surface. Transplantation of amniotic membrane. // Ophthalmologe. 1998. -V.95(12). - P.805-813.

295. Meller D., Pires R.T., Mack R.J., Figueiredo F., Heiligenhaus A., Park W.C. Amniotic membrane transplantation for acute chemical or thermal burns. // Ophthalmology. 2000. - V.107(5). - P. 980-989.

296. Meredig W.E., Jentzen F., Hartmann F. Systemic side effects of topically applied corticosteroid medication. // Klin. Mbl. Augenheilk. 1980. - V. 176. - N. 6. - P.907-910.

297. Monaghan A.P., Davidson D.R., Sime C., Graham E., Baldock R., Bhattacharya S.S., Hill R.E. The Msh-like homeobox genes define domains in the developing vertebrate eye. 11 Development. 1991. - V.112. - P.1053-1061.

298. Morrison S.J. Stem cell potential: Can anything make anything? // Curr. Biol. 2001. - V.ll(l). -P.7-9.

299. Morrison S. J., Shah N.M., Anderson D.J. Regulatory mechanisms in stem cell biology. // Cell. 1997. - V. 88. - P.287-298.

300. Muller L.J., Pels L., Vrensen G.F. Ultrastructural organization of human corneal nerves. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1996. -V.37 (4) . - P.476-488.

301. Muller L.J., Vrensen G.F., Pels L., Cardozo B.N., Willekens B. Architecture of human corneal nerves. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1997. -V. 38 (5). - P. 985-994.

302. Muraine M., Salessy P., Watt L., Retout A., Brasseur G. Limbal autograft transplantation, eight consecutive cases. // J. Fr. Ophthalmol. 2000. -V.23 (2). - P.141-150.

303. Na B.K., Hwang J.H., Kim J.C. et al. Analysis of human amniotic membrane components as proteinase inhibitors for development of therapeutic agent of recalcitrant keratitis. // Trophoblast Research. -1999. V 13. - P. 453-466.

304. Nishida Т. Cornea. // Fundamentals of Cornea and External Disease. Mosby, St.Louis. - 1997. -P.3-27.

305. Nishiwaki-Dantas M.C., Dantas P.E., Reggi J.R. Ipsilateral limbal translocation for treatment of partial limbal deficiency secondary to ocular alkali burn. // Br. J. Ophthalmol. 2001. -V.85(9). - P.1031-1033.

306. Obenberger J. Paper strips and rings as simple tools for standartization of experimental eye injuries. // Ophthalmol. Res. 1975. - Vol.7. -P. 363-366.

307. Oficjalska-Mlynczak J., Zajac-Pytrus H., Nizankowska M.H., Marec J. et al. Limbal stem cell autograft transplantation for persistent epithelial corneal defect after chemical burn of the eye. // Klin. Oczna. 1998. -V. 100.(1). - P.41-43.

308. Orlic D., Kajstura J., Chimenti S. et al. Bone marrow cells regenerate infarcted myocardium. // Nature. 2001. - V.410. - P.701-705.

309. Oshimazaki J., Yang H.Y., Tsubota K. Amniotic membrane transplantation for ocular surface reconstruction in patients with chemical and thermal burns. // Ophthalmology. 1997. - V. 104. - N12. - P.2068-2076.

310. Parker A.V., Williams R.N., Paterson C.A. The effect of sodium citrate on the stimulation of polimorphonuclear leukocytes. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1985. - V.26. - N9. -P.1257-1261.

311. Parman I.P.,Gupta M.C.,Gard N. Corneal blindness-a public health problem. // Ind. J. Publ. Health. 1986.- V.30. - N 4. - P.193-196.

312. Paterson C.A. et al. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1979. - V.18. - N1. - P.67-70.

313. Paterson C.A., Pfister R.R., Levinson R.A. Aqueos humor ph changes after experimental alkali burns. // Am. J. Ophthalmol. 1975. - V.79. - N3.-P.414-419.

314. Pellegrini G., Golisano 0., Paterna P., Lambiase A., Bonini S., Rama P., De Luca M. Location and clonal analysis of stem cells and their differentiated progeny in the human ocular surface. // J. Cell Biol. 1999. - V.145. - P.769-782.

315. Pellegrini G., Traverso C.E., Franzi А.Т., Zingirian M., Cancedda R., De Luca M. Long-term restoration of damaged corneal surfaces with autologous cultivated human epithelium. // Lancet. 1997. - V.349. - P.990-993.

316. Pels E., van der Gaag R. HLA-A, В, С and HLA-DR antigens and dendritic cells in fresh and organ preserved corneas. // Cornea. 1984. - V.3.1. P.231-9.

317. Pfister R.K. Chemical corneal burns. // Int. Ophthalmol. Clin. 1984. - V.24. - N2. - P.157-168.

318. Pfister R.K., Paterson C.A. Ascorbic acid in the treatment of alkali burn of the eye. //

319. Ophthalmology. 1980. - V. 87. - N10. - P.1050-1057 .

320. Pfister R.K., Paterson C.A., Hayes S.A. Effect of topical 10% ascorbate solution on established corneal ulcer after severe alkali burns. // Invest. Ophthalmol. 1982. - V. 22. - N3. - P.282-285.

321. Pfister R.R. Corneal stem cell disease: concepts, categorization and treatment by auto- and homotransplantation of limbal stem cells. // CLAO J. 1994. - V.20(1). - P.64-72.

322. Pfister R.R., Haddox J., Dodson R. Alkali-burned collagen produces a locomotory and metabolik stimulant to neutrophils. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1987. - V.28. - N2. - P.295-304.

323. Phan T.M., Foster C.S., Shaw C.D. et al. Topical fibronectin in an alkali burn model of corneal ulceration in rabbits. // Arch. Ophthalmol.- 1991. V.109. - P.414-419.

324. Pires R.T., Chokshi A., Tseng S.C. Amniotic membrane transplantation or conjunctival limbal autograft for limbal stem cell deficiency induced by 5-fluorouracil in glaucoma surgeries. // Cornea.- 2000. V.19(3). - P.284-287.

325. Poltavtseva R.A., Marey M.V, Aleksandrova M.A., Revishchin A.V., Korochkin L.I., Sukhikh G.T. Evaluation of progenitor cell cultures from human embryos for neurotransplatation. // Developmental Brain Research. 2002. - V.134. - P.149-154.

326. Prabhasawat P, Tseng SC. Impression cytology study of epithelial phenotype of ocular surfacereconstructed by preserved human amniotic membrane. // Arch. Ophthalmol. 1997. - V. 115. - P. 13601367.

327. Prabhasawat P., Kosrirukvongs P., Booranapong W., Vajaradul Y. Amniotic membrane transplantation for ocular surface reconsruction. // J. Med. Assoc. Thai. 2001. - V.84(5). - P.705-18.

328. Prince J.H. The rabbit in eye research. Springfield, Illinois. 1964.

329. Puangsricharern V., Tseng S.C. Cytologic evidence of corneal diseases with limbal stem cell deficiency. // Ophthalmology. 1995. - V.102 (10). - P.1476-1485.

330. Raff M.C., Barres B.A., Burne J.F., Coles H.S., Ishizaki Y., Jacobson M.D. Programmed cell death and the control of cell survival: lessons from the nervous system. // Science. 1993. - V.262.1. P.695-700.

331. Rangappa S., Fen C., Lee E.H., Wei E.S. Transformation of adult mesenchymal stem cells isolated from the fatty tissue into cardiomyocytes. // Ann. Thorac. Surg. 2003. - V.75. - P.775-779.

332. Rao S.K., Rajagopal R., Sitalakshmi G. et al. Limbal allografting from related live donors forcorneal surface reconstruction. // Ophthalmology. -1999. V. 106. - P.822-828.

333. Rao S.K., Rajagopal R., Sitalakshmi G. et al. Limbal autografting: comparison of results in the acute and chronic phases of ocular surface burns // Cornea. 1999. - V. 18. - P.164-171.

334. Reim M., Becker J., Genser C., Salla S. Assesment of conjunctival epithelium after severe burns and surgical reconstruction with tenon plasty by means of modified impression cytology procedure. // Cornea. 1998. - V. 17. - N4. - P. 365-370.

335. Rheiwald J.G., Green H. Serial cultivation of strains of human epidermal keratinocytes: the formation of keratinizing colonies from single cells. // Cell. 1975 - V.6. - P.331-343.

336. Robinson C.H. Indication, complication and prognosis for repeat penetrating keratoplasty. // Ophthalmic Surg. 1979. - V. 10. - N1. - P.27-34.

337. Rubartelli A., Cozzolino F., Talio M., Sitia R. A novel secretory pathway for enterleukin-lbeta, a protein lacking a signal sequence. // EMBO J. -1990. V.9. - P.1503-1510.

338. Saica S., Uenoyama K., Hiroi K. et al. Ascorbic acid phosphate ester and wound healing in rabbit corneal alkali burns: epithelial basement membrane and stroma. // Graefes. Arch. Clin Exp. Ophthalmol. 1993. - V. 231. - N4. - P. 221-227.

339. Samson C.M., Nduaguba C., Baltatzis S., Foster C.S. Limbal stem cell transplantation in chronicinflammatory eye disease. // Ophthalmology. 2002.- V.109(5) . P.862-868.

340. Schermer A., Galvin S., Sun T.T. Differentiation-related expression of a major 64K corneal keratin in vivo and in culture suggests limbal location of corneal epithelial stem cells. // J. Cell Biol. 1986. - V.103. - P.49-62.

341. Schofield R. The stem cell system. // Biomed. Pharmacother. 1983. - V.37. - P.375-380.

342. Schults G., Chegini N., Grant M., MacKay S. et al. Effects of growth factors on corneal wound healing. // Acta Ophthalmol. 1992. - V. 202. -P. 60-66.

343. Schwab I.R., Isseroff R.R. Bioengineered corneas: The promise and the challenge. // N. Engl. J. Med. 2000. - V.343. - P.136-138.

344. Schwab I.R., Reyes M., Isseroff R.R. Successful transplantation of bioengineered tissue replacements in patients with ocular surface disease. // Cornea. 2000. - V.19(4). - P.421-426.

345. Schwartz G.S., Holland E.J. Iatrogenic limbal stem cell deficiency. // Cornea. 1998. - V.17(l).- P.31-37.

346. Shamsuddin A.K., Nizankari V.S., Purnell D.M. Is the corneal posterior cell layer truly endothelial? // Ophthalmology. 1986. - V.93. -N10. -P.1298-1303.

347. Shinozaki M., Shoda A., Shimazaki J. Detection of basic fibroblast growth factor from amniotic membrane. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci 1995. -V. 36. - P.131-138.

348. Siegel G.M., Sun W., Salvi R., Campbell L.M., Sullivan S., Reidy J.J. Human corneal stem cells display functional neuronal properties. // Mol. Vis. 2003. - V.9. - P.159-163.

349. Simon M., Fellner P., El-Shabrawi Yo, Ardjomand N. Influence of donor storage time on cirneal allograft survival. // Ophthalmology. 2004. - V. 111. - P. 1534-1538.

350. Singh G., Foster C.S. Epidermal growth factor in alkali-burned corneal epithelial wound healing. // Am. J. Ophthalmol. 1987. - V. 103. - P.802-812.

351. Sippel K.C., Ma J.J., Foster C.S. Amniotic membrane surgery. // Curr. Opin. Ophthalmol. -2001. V. 12(4) . - P.269-281.

352. Sorsby A., Symons H.M. Amniotic membrane grafts in caustic burns of the eye. // Br. J. Ophthalmol.- 1946. V. 30. - P. 337-345.

353. Sotozono C., Kinoshita S., Kita M., Imanishi J. Expression of keratinocyte growth factor mRNA in ex vivo and in vitro specimens of human cornea and conjunctiva // Jpn. J. Ophthalmol. 1994. - V. 38.- P. 353-359.

354. Sotozono C., Kinoshita S., Kita M., Imanishi J. Paracrine role of keratinocyte growth factor in rabbit corneal epithelial cell growth. // Exp. Eye Res. 1994. - V.59. - P.385-391.

355. Spelsberg H., Reinhard Т., Henke L. et al. Penetrating limbo-keratoplasty for granular and lattice corneal dystrophy. Survival of donor limbal stem cells and intermediate-term clinical results. // Ophthalmology. 2004. - V. 111. - P. 1528-1533.

356. Stark W. Transplantation antigens and keratoplasty. // Microsurgery of anterior and posterior segments of the eye. 1981.- P.33-40.

357. Steven E., Wilson M.D. Molecular Cell Biology for the Refractive Corneal Surgeon: Programmed Cell Death and Wound Healing. // Refractive Surgery. . 1997. - V.13. - P.171-175.

358. Stoiber J., Muss W.H., Pohla-Gubo G., Ruckhofer J., Grabner G. Histopathology of human corneas after amniotic membrane and limbal stem cell transplantation for severe chemical burn. // Cornea. 2002. -V.21(5). - P.482-489.

359. Sundmacher R., Reinhard T. Central corneolimbal transplantation under systemic ciclosporin A cover for severe limbal stem cell insufficiency. // Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 1996. - V. 192 (suppl. 1). - P.47-54.

360. Sundmacher R., Reinhard T. Homologous lamellar central limbokeratoplasty in severe limbal stem cell deficiency. // Klin. Monatsbl. Augenheilkd. -1998. -V.213(4). P.254-255.

361. Sundmacher R., Reinhard Т., Althaus C. Homologous central limbo-keratoplasty in limbus stem cell damage. Retrospective study of 3 years' experience. // Ophthalmologe. 1997 . - V.94(12). -P.897-901.

362. Tenn P.F., Fujikawa L.S., Dweck M.D. et al. Fibronectin in alkali-burned rabbit cornea: enhancement of epithelial wound healing. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1985. - V. 26(Suppl.) -P.92.

363. Theng J.Т., Tan D.T. Combined penetrating keratoplasty and limbal allograft transplantation for severe ocular burns //Ophthalmic Surg. Lasers. 1997. - V. 28. - P. 765-768.

364. Thoft R.A., Friend J. The X,Y,Z hypothesis of corneal epithelial maintenance. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1983. - V.24. - P.1442-1443.

365. Thomson J., Itskovitz-Eldor J., Shapiro S.S. et al. Embryonic stem lines derived from humanblastocyst. // Science. 1998. - V.282 - P.1145-1147 .

366. Tiffany J.M. Composition and biophysical properties of the tear film: knowledge and uncertainty. // Lacrimal gland, Tear Film and Dry Eye Syndromes. Plenum Press, New York. - 1994. -P.231-238.

367. Toma J.G., Akhavan M., Fernandes K.J. et al. Isolation of adult multipotent stem cells from the dermis of mammalian skin. // Nature Cell. Biol. -2001. V.9. - P.778-784.

368. Tripathi B.J., Kwait Ph.S., Tripathi R.C. Corneal growth factors: a new generation of ophthalmic pharmaceuticals. // Cornea. 1990. - V. 9. - N1. - P.2-9.

369. Tripathi B.J., Tripathi R.C., Stefansson K., Adamis A., Molu ar M., Ememerson M. Neuroectodermal origin of corneal epithelium and keratocytes in human eyes. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -1985. V.26. - P.274.

370. Tsai R.J., Li L.L., Chen J.K. Reconstruction of damaged corneas by transplantation of autologous limbal epithelial cells. // N. Engl. J. Med. -2000. V.343. - P.86-93.

371. Tsai R.J., Tseng S.C. Human allograft limbal transplantation for corneal surface reconstruction. // Cornea. 1994. - V.13. - P.389-400.

372. Tseng S.C. Regulation and clinical implications of corneal epithelial stem cells. // Mol. Biol. Rep. 1996. - V.23. - P.47-58.

373. Tseng S.C., Hirst L.W., Farazdaghi M., Green W.R. Goblet cell density and vascularization during conjunctival transdifferentiation. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1984. - V.25. - P.1168-1176.

374. Tseng S.C., Li D.Q. Comparison of protein kinase С subtype expression between normal and aniridic human ocular surfaces: implications for limbal stem cell dysfunction in aniridia. // Cornea. 1996. -V.15(2). - P.168-178.

375. Tsubota К. Ocular surface management in corneal transplantation, a review. // Jpn. J. Ophthalmol.1999. V.43(6). - P.502-508.

376. Vail A., Gore S.M., Bradley B.A., Easty D.L. et al. Corneal transplantation in the United Kingdom and Republik of Ireland. // Br. J. Ophthalmol. -1993. Vol. 77. - N10. - P.650-656.

377. Wagoner M.D. Chemical injuries of the eye: current concepts in pathophysiology and therapy. // Surv.Ophthalmol. 1997. - V.41. - P.275-313.

378. Waldock A., Cook S.D. Corneal transplantation: how successful are we? // Br. J. Ophthalmol.2000. Vol. 8. - N8. - P.813-815.

379. Wei G., Schubiger G., Harder F. et al. Stem cell plasticity in Mammals. // Stem cells. 2000.- V.18. P.409-419.

380. Wei Z.G., Lin Т., Sun T.-T., Lavker R.M. Clonal analysis of the in vivo differentiation potential of keratinocytes. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci.- 1997. V.38. - P.753-761.

381. Wei Z.G., Sun Т.-Т., Lavker R.M. Rabbit conjunctival and corneal epithelial cells belong to two separate lineages: further evidence against the "transdifferentiation" theory. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1996. - V.37. - P.523-533.

382. Weinstein D.C., Hemmati-Brivanlou A. Neural induction. If Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 1999. -V.15. - P.411-433.

383. Wenkel H., Rummelt V., Naumann G.O. Autologous early transplantation of nasal mucosa after the most severe eye chemical burns. // Ophthalmologe. -1997. V.94. - P.104-108.

384. Wentworth J.S., Paterson C.A., Wells J.Т., Tilki N., Gray R.S., McCartney M.D. Collagen shields exacerbate ulceration of alkali-burned rabbit corneas. // Arch. Ophthalmol. 1993. -V.lll (3). - P.389-392.

385. Wilson S E., Walker J.W., Chwang E.L., He Y-G. Hepatocyte growth factor, keratinocyte growth factor, their receptors, fibroblast growth factor receptor-2, and the cells of the cornea. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1993. - V. 34. - P.2544-2561.

386. Wilson S.E., He Y.G., Lioyd S.A. EGF, EGF receptor, basic FGF, TGF-£1, and IL-la mRNA in human corneal epithelial cells and stromal fibroblasts. // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -1992. V.33. - P.1756-1765.

387. Woodbury D., Schwartz E.J., Prockop D.J., Black I.B. Adult rat and human bone marrow stromal cells differentiate into neurons. // J. Neurosci. Res.2000. V.61. - P.364-370.

388. Yamamoto K., Ladage P.M., Ren D.H., Li L., Petroll W.M., Jester J.V., Cavanagh H.D. Bcl-2 expression in the human cornea. // Exp. Eye Res.2001. V.73. - P.247-255.

389. Zhang X., Sun H., Tang X., Ji J., Li X., Sun J., Ma Z., Yuan J., Han Z.C. Comparison of cell-suspension and explant culture of rabbit limbal epithelial cells. // Exp. Eye Res. 2005. -V.80(2). - P.227-233.

390. Zieske J.D. Perpetuation of stem cells in the eye. // Eye. 1994. - V.8. - P.163-169.

391. Zuk R.A., Zhu M., Mizuno H. et al. Multilineage lines from adult adipose tissue: implications for cell based therapy. // Tissue Eng. 2001. - V.7 -P.211-228.