Технология получения стрессоустойчивого исходного материала томата на основе методов гаметной селекции и молекулярного анализа тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.05, кандидат сельскохозяйственных наук Ведадеваге Сунила Прадипа Кумари

• Ведадеваге Сунила Прадипа Кумари
• кандидат сельскохозяйственных наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат сельскохозяйственных наук Ведадеваге Сунила Прадипа Кумари

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Характеристика томата как интродуцированной культуры для Российской Федерации и Республики Шри-Ланка.

1. 1. 1 .История интродукции, регионы возделывания.

1.1.2. Ботаническая и биологическая характеристики.

1.2. Основные стрессовые факторы для томата.

1.2.1. Абиотические стрессоры томата в Нечернозёмной зоне России и в горной зоне Республики Шри-Ланка.

1.2.2. Биотические стрессоры томата в горной зоне Республики Шри-Ланка и в Нечернозёмной зоне России.

1.3. Генетический контроль устойчивости томата к основным биотическим стрессорам.

1.3.1. Генетический контроль устойчивости к ВТМ.

1.3.2. Генетический контроль устойчивости к Phytophthora infestans (Mont) de Вагу.

1.4. Проблемы получения исходного материала с комплексной устойчивостью к стрессам.

1.5. Молекулярное маркирование в селекции.

1.6. Гаметная селекция на устойчивость к стрессам.

1.7. Характеристика коллекции маркерных мутантов томата как инструмента для генетических исследований.■.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Материал исследований.

2.2. Методика исследований.

2.2.1. Оценка устойчивости к ВТМ на искусственном инфекционном фоне.

2.2.2. Диагностика растительного материала на содержание фитовирусов.

2.2.3. cDNA-AFLP анализ.

2.2.4. Оценка на естественном инфекционном фоне.

2.2.5. Оценка холодостойкости спорофита.

2.2.6. Оценка холодостойкости микрогаметофита.

2.3. Анализ наследования признаков стрессоустойчивости.

2.4. Анализ сохранения комплекса хозяйственно ценных признаков. у гибридного потомства Fi - F3.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Исследование эффективности генов устойчивости к абиотическому (холод) и биотическим (ВТМ, Ph. infestans, Alternaria solani) стрессорам. Отбор образцов с комплексной устойчивостью к стрессам.

3.1.1. Исследование экспрессии генов устойчивости к холоду у восприимчивого и устойчивого генотипов с помощью cDNA-AFLP.

3.2. Изучение влияния холодового стресса на стадии прорастания семени на сохранение/изменение селекционно ценных характеристик исходного материала томата.

3.2.1.Влияние холодового стресса на морфологические параметры сеянца.

3.2.2. Влияние холодового стресса на функциональные характеристики пыльцы.

3.2.3. Влияние холодового стресса на проявление устойчивости к вирусу таба чной мозаики.

3.2.4. Влияние холодового стресса на устойчивость к грибным заболеваниям в закрытом грунте.

3.2.5. Влияние холодового стресса на продуктивность растений и качество плодов.

4. СОХРАНЕНИЕ ПРИЗНАКОВ УСТОЙЧИВОСТИ К АБИОТИЧЕСИМ (ХОЛОД) И БИОТИЧЕСКИМ (ВТМ) СТРЕССАМ В ПОТОМСТВЕ F, - F3.

4.1. Оценка стрессоустойчивости и продуктивности гибридов Fi.

4.1.1. Оценка холодостойкости спорофита.

4.1.2. Оценка холодостойкости микрогаметофита.

4.1.3. Оценка устойчивости к вирусу табачной мозаики.

4.1.4. Оценка фитофтороустойчивости.

4.1.5. Оценка урожайности.

4.2. Оценка стрессоустойчивости и продуктивности гибридов F2.

4.2.1. Оценка холодостойкости спорофита.

4.2.2. Оценка холодостойкости микрогаметофита.

4.2.3. Оценка устойчивости к вирусу табачной мозаики.

4.2.4. Оценка фитофтороустойчивости.

4.2.5. Оценка урожайности.

4.3. Оценка стрессоустойчивости и продуктивности гибридов F3.

4.3.1. Оценка холодостойкости спорофита.

4.3.2. Оценка холодостойкости микрогаметофита.

4.3.3. Оценка устойчивости к вирусу табачной мозаики.

4.3.4. Оценка фитофтороустойчивости и устойчивости к серой гнили.

4.3.5. Оценка урожайности.

4.4. Анализ сохранения признаков устойчивости гибридным потомством F! - F3.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Технология получения стрессоустойчивого исходного материала томата на основе методов гаметной селекции и молекулярного анализа»

Томат занимает первое место в мире среди овощных культур по возделываемым площадям в открытом и защищенном грунте - 4 млн га. Больше всего площадей томата в Китае - 974 тыс.га (ежегодное производство - 25 млн тонн), далее следуют Индия - 520 тыс.га (7,4 млн тонн), Турция -225 тыс. га (9 млн тонн), Египет - 180 тыс. га (6,3 млн тонн), США - 177 тыс. га (12 млн тонн). Россия стоит на 6-ом месте по площади (142 тыс. га) и на 11-ом по производству томата в год (1,82 млн тонн). В Республике Шри-Ланка ежегодно производится около 90 тыс. тонн плодов томата, урожайность составляет 91,7 ц/га (FAO, 2005).

Томат имеет важное народнохозяйственное значение как культура для функционального питания: при невысокой калорийности - 160-200 ккал/кг (Курганская и др., 2006) он содержит 4-8% сухого вещества, в котором сахара занимают 1,5-6% от общей массы плодов, белки - 0,6-1,1%, органические кислоты - 0,5%, крахмал - 0,07-0,35, минеральные вещества -0,6%; а также - каротиноиды, витамины В| , В2 , Вз , В5 , фолиевую и аскорбиновую кислоты (Пивоваров и др., 2002). Современная медицина рекомендует плоды томата в качестве лечебно диетического средства больным с нарушением обмена веществ, при пониженной кислотности желудочного сока, заболеваниях печени, сердечно-сосудистой системы и особенно в тех случаях, когда имеются нарушения процесса обмена калия в организме. Имеющейся в плодах холин понижает содержание холестерина в крови, предупреждает жировое перерождение печени, повышает иммунные свойства организма, способствует образованию гемоглобина (Мамедов и др., 2002).

Несмотря на высокую экологическую пластичность (Жученко, 1973), томат подвержен абиотическим и биотическим стрессорам, свойственным зонам рискованного земледелия России (Нечернозёмной зоне и др.) и горной зоне Республики Шри-Ланка (основной регион возделывания томата в этой стране), которые могут вызывать значительные потери урожая (30-100%).

Создание адаптированных к комплексу стрессовых факторов сортов и гибридов томата сохраняет свою актуальность и в настоящее время. Но сочетание в одном генотипе комплекса хозяйственно ценных признаков основная проблема традиционной селекции. Решить эту трудную задачу возможно, разработав новую технологию селекции, включающую современные методы молекулярного анализа, гаметной селекции, и используя биоресурсы томата, собранные в морфологически маркированных генетических коллекциях.

Цель исследований:

Создание технологии получения стрессоустойчивого исходного материала томата, на базе молекулярно-генетического анализа и гаметной селекции.

Задачи исследований:

1. Изучение устойчивости томата к абиотическому (холод) и биотическому (ВТМ, Ph. infestans, Alternaria solani Sor.) стрессорам с помощью молекулярно-генетического анализа и гаметной селекции.

2. Отбор генотипов с комплексной стрессоустойчивостью к стрессам, и использование их в скрещиваниях.

3. Изучение сохранения признаков устойчивости к стрессорам в гибридном потомстве Fi - F3.

Научная новизна:

Установлено, что холодовой стресс на ранних стадиях спорофита воздействие на семена температурой 10°С в течение 2-х недель) не влияет на морфологические показатели надземной части сеянца, но оказывает значимое влияние на длину корешка, что позволяет проводить отбор холодостойких генотипов по данному показателю.

Впервые показано, что гены устойчивости томата к ВТМ - Тт-1 и Тт-2а по-разному реагируют на холодовой стресс на ранних стадиях спорофита: ген Тт-2а теряет свою эффективность, в то время, как защитный эффект гена Тт-1 сохраняется.

Выявлено, что низкотемпературный стресс на стадии микрогаметофита значительно ухудшает функциональные характеристики пыльцы у гибридного потомства F\- F3.

С использованием генотипов разного географического происхождения показано, что растения томата могут адаптироваться к любой эконише при наличии генов устойчивости к абиотическим стрессорам (повышенным/пониженным температурам) и индукции температурного стресса на ранних стадиях онтогенеза.

Практическая значимость:

Разработана селекционная технология на базе молекулярногенетического анализа и селекции по микрогаметофиту, с помощью которой получено 7 образцов исходного материала томата с комплексной устойчивостью к абиотическому (холод), биотическим (Ph. infestans, Alternaria solani Sor.) стрессам, высокой продуктивностью и жизнеспособностью пыльцы: Craigella Tm-l/Tm-1, Mobaci (коллекция лаборатории гаметных и молекулярных методов селекции ВНИИССОК), №5173, (коллекция ВНИИР им. Н.И. Вавилова), Тилина, Ражита (интродуцированы из Республики Шри- Ланка), Glossy 389 (из Таиланда), Дубок (лаб. селекции и семеноводства пасленовых культур ВНИИССОК). Образцы Craigella Tm-1/Tm-l, №5173, Mobaci, Mo 409, Mo 463 обладают к тому же устойчивостью к ВТМ.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Холодовой стресс на ранних стадиях онтогенеза оказывает влияние на рост корешка у сеянца томата и эффективность гена Тт-2а устойчивости к ВТМ при сохранении основных морфо-биологических и функциональных параметров растения, включая эффективную защиту гена Тт-1 устойчивости к ВТМ и функциональные характеристики пыльцы.

2. Технология получения исходного материала томата с комплексной устойчивостью к стрессам, разработанная на базе молекулярно-генетического анализа и селекции по микрогаметофиту, с помощью которой получено 7 образцов с комплексной устойчивостью к абиотическим и биотическим стрессам и высокой жизнеспособностью пыльцы.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Селекция и семеноводство», Ведадеваге Сунила Прадипа Кумари

ВЫВОДЫ

1. Анализ 26 образцов томата с предполагаемой устойчивостью к стрессам показал, что холодовой стресс в период прорастания семени не оказывает влияния на морфологические характеристики надземной части сеянца, но влияет на длину корешка сеянцев. Установленная закономерность позволяет использовать длину корешка сеянцев как тестерный показатель при селекции по спорофиту.

2. Оценка устойчивости исходного материала и гибридного потомства томата при моделировании искусственных стрессов выявила, что холодовой стресс в период прорастания семени значительно снижает эффективность гена Тт-2а устойчивости томата к ВТМ, в то время, как эффективность гена Тт-1 сохраняется.

3. Источниками устойчивости к абиотическим (холод), биотическим (Ph. infestans DB, Alternaria solani Sor.) стрессам и продуктивности с высокой жизнеспособностью пыльцы являются: образцы из коллекции ВНИИР им. Н.И. Вавилова: Craigella Tm-1/Tm-l, №5173, Mobaci\ образцы, интродуцированные нами из Республики Шри-Ланка: Тилипа, Ражита; образец селекции лаборатории паслёновых культур ВНИИССОК - Дубок, образец из коллекции маркерных мутантов томата лаборатории молекулярных и гаметных методов селекции ВНИИССОК - Мо463.

4. В результате исследования исходного материала (22 образцов) и гибридного потомства (4 комбинации скрещивания) установлено, что холодовой стресс на стадии семени вызывает повышение продуктивности устойчивых к стрессам генотипов.

5. Холодовой стресс на стадии микрогаметофита, значительно ухудшает функциональные характеристики пыльцы у гибридного потомства F3 Craigella (Тт-1/Тт-1) х Дубок, Craigella (Тт-2а/Тт-2а) х Дубок, Craigella (Тт-2а/Тт-2а) х Талалихин 186 (за исключением, F3 Craigella (Тт-1/Тт-1) х Талалихин 186).

6. Комплексной стрессоустойчивостью (к ВТМ, пониженным положительным температурам, фитофторозу) и хорошим качеством плодов, которые сохраняются до третьего поколения, обладает гибридная комбинация Craigella {Tm-l/Tm-l) х Дубок, но она является низкоурожайной.

7. Интерес для практической селекции представляют комбинации Craigella (Tm-l/Tm-l) х Талалихин 186 и Craigella (Тт-2а/Тт-2а) х Дубок, сохраняющие продуктивность и стрессоустойчивость.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Для получения исходного материала томата, обладающего комплексной устойчивостью к абиотическим и биотическим стрессам, предлагается новая селекционная технология, базирующаяся на методах молекулярно-генетического анализа и гаметной селекции. С помощью данной технологии получено 7 образцов томата с комплексной устойчивостью к основным стрессовым факторам (холод, Ph. infestans, Alternaria solani Sor.), высокой продуктивностью и жизнеспособностью пыльцы из источников разного происхождения для использования в качестве исходного материала: Craigella Tm-1/Tm-l, №5173, Mobaci (коллекция ВНИИР им. Н.И. Вавилова), Тилипа, Ражшпа (интродуцированы из республики Шри Ланки), Glossy 389 (интродуцирован из Таиланда), Дубок (лаб. селекции и семеноводства пасленовых культур ВНИИССОК). Образцы Craigella Tm-1/Tm-l, №5173, Mobaci, Mo 409, Mo 463 обладают устойчивостью к ВТМ.

100

Список литературы диссертационного исследования кандидат сельскохозяйственных наук Ведадеваге Сунила Прадипа Кумари, 2007 год

1. Авдеев, А.В. Селекция томатов/ А.В. Авдеев. - Кишинёв: Штиинца, 1982. -282с.

2. Акишин, Д.В. Защита томата от фитофтороза /Д.В. Акишин // Роль науки в повышении устойчивости функционирования АПК Тамбовской области.- Мичурин.- 2004. Т. 2. - С. 83-87.

3. Алпатьев, А.В. К вопросу об эволюции томата вида Lycopersicon esculentum Mill. /А.В. Алпатьев //Биология растений. М.: Изд-во Колос.-1981.- Т. 16.-№ 1.-С. 61-65.

4. Алпатьев, А.В. Помидоры /А.В. Алпатьев. М.: Колос, 1981. - 304 с.

5. Атлас-справочник. Всё о странах мира. - Санкт-Петербург: СЭКО. -«КРИСТАЛЛ». - М.: «ОНИКС», 2006. - С. 228.

6. Балашова, Н.Н. /Н.Н. Балашова, Морозова Н.А., Простакова Ж.Г., Дараков О.Б., Мелиян Л.Г., Бронштейн А.И., Лазу М.Н., Юрку А.И. // Известия АН РМ: Биологические и химические науки. 2004.- № 2. - С. 3-11.

7. Балашова, Н.Н. Генетические основы селекции овощных культур на устойчивость к ВТМ / Н. Н. Балашова, М. М. Король, О.О.Тимина, B.C. Рущук.-Кишинёв: Штиинца, 1983.- 113 с.

8. Балашова, Н.Н. Генетические основы селекции сельскохозяйственных культур в Молдавии / Н.Н. Балашова, Ж. Г. Простакова, А.И. Юрку, А.И. Бронштейн.- Кишинёв, 1986.- С. 14-26.

9. П.Балашова, Н.Н. Фитофтороустойчивость рода Lycopersicon Tourn. и методы использования ее в селекции томата / Н.Н. Балашова. Кишинев: Штиинца, 1979.- 166 с.

10. Балина, Н.В. Действие обезвоживания и повышенной температуры на микроспоро- и гаметогенез растений // Автореф.дисс.канд.биол.наук.-1977.- 18с.

11. Бочарникова, Н.И. Мутантные формы томатов / Н.И. Бочарникова, В.М.Козлова. Кишинев: Штиинца, 1992.- 62с.

12. Н.Брежнев, Д.Д. Использование гетерозиса у томата/ Д.Д. Брежнев // Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции. JI. - 1949. - №28. -С 2-14.

13. Брежнев, Д.Д. Современная классификация рода Lycorpersicon Tourn. / Д.Д. Брежнев // Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции. -1954.-Т. 31.-№ 1. С.25-37.

14. Бровко, Г.Ф. Научные и практические основы выращивания овощных культур в зимних теплицах Дальнего Востока /Г.Ф.Бровко. Владивосток. -2003.-С. 114-172.

15. Вавилов, Н.И. Роль Евразии и Нового Света в происхождении культурных растений /Н.И. Вавилов // Проблемы селекции: Избранные труды. 1960. -Т. 2.-519с.

16. Ващенко, С.Ф. Овощеводство защищенного грунта /С.Ф. Ващенко, 3. И. Чекунова, Н.И. Гаврилова. М.: Колос, 1974.- 352с.

17. Гаметная и зиготная селекция растений /Ред. А.А. Жученко.- Институт экологической генетики АН МССР. Кишинёв: Штиинца, 1987. - 206 с.

18. Гаранько, И.Б. Исходный материал для различных направленный селекции томата / И.Б. Гаранько // Научно-технический бюллетень ВИР.-1992.-№228.-С. 12-14.

19. Голубинский, И.Н. Биология прорастания пыльцы / И.Н. Голубинский. -Киев: Наукова думка, 1974. -368с.

20. Гостимский, С.А. Использование молекулярных маркеров для анализа генома растений / С.А. Гостимский, З.Г. Кокаева, В.К. Боброва // Генетика. 1999. -№35. - С. 1538-1543.

21. Гуркина, J1.K. Расовый состав возбудителя фитофтороза томата для Московской области / JI.K. Гуркина // Селекция и семеноводство овощных культур в XXI веке. 2000. -Т.1. - С.211-214.

22. Дорохов, Д.Б. Быстрая технология RAPD-анализа генотипов луков. / Д.Б. Дорохов, М.Н. Лаптева // Сельскохозяйственная биология. 1997. - №5. -С.22-28.

23. Доспехов, Б.А. Методика полевого опыта /Б.А. Доспехов М.:Колос, 1985. -415 с.

24. Дьяков, Ю.Т. Общая и молекулярная фитопатология / Ю.Т. Дьяков, O.JI. Озерецковская, В.Г. Джавахия, С.Ф. Багирова М.: Издательство Общества фитопатологов, 2001. - 302с.

25. Дьяков, Ю.Т. Фитопатогенные вирусы /Ю.Т. Дьяков М.:Изд-во Моск.ун-та, 1984.- 128 с.

26. Жученко, А.А. Гаметный отбор на устойчивость к температурному фактору у томатов / А.А. Жученко, А.Н. Кравченко, Н.Н. Балашова и др. // Генетические основы селекции сельскохозяйственных культур в Молдавии. Кишинев: Штиинца. - 1986. - С.4-14.

27. Жученко, А.А. Генетика томатов / А.А. Жученко. Кишинёв: Штиинца, 1973.-663 с.

28. Жученко, А.А. Развитие мужской генеративной сферы у растений / А.А. Жученко, А.Н. Кравченко, А.И. Суружиу // Тезисы Всесоюзного симпозиума: Симферополь. 1983. - С. 31-32.

29. Жученко, А.А. Рекомбинация в эволюции и селекции / А.А. Жученко, А.Б. Король. Кишинёв: Штиинца, 1985. - 325с.

30. Жученко, А.А. Экологическая генетика культурных растений / А.А. Жученко. Кишинёв: Штиинца, 1980. -420с.

31. Иванюк, В.Г. Взаимосвязь устойчивость томатов к альтернариозу и абиотическим факторам среды / В.Г. Иванюк // Сб. Экологическая генетика растений и животных.- Кишинёв: Штиинца. 1987. - С.128-135.

32. Квасников, Б.В. Методика селекции сортов и гибридов томата, устойчивых к вирусу табачной мозаики в связи с его вариабельностью / Б.В. Квасников, С.И. Игнатова, Н.С. Горшкова, К.С. Сухов и др. Москва, 1984.-28с.

33. Коваль, B.C. Использование гаметного отбора в селекции на адаптивность / B.C. Коваль, Н.Н. Макарова// Сб.: Задачи селекции и пути их решения в Сибири,- 1983.-С.227-231.

34. Коваль, B.C. Повышение результативности искусственного отбора при селекции самоопылителей / B.C. Коваль, С.Ф. Коваль // Сектор генетических основ селекции растений ИЦиГ СОР АН. Новосибирск. -№5. - 1998. - С.35-42.

35. Козлова, В.М Селекция томата на холодостойкость по спорофиту и микрогаметофиту/ В.М. Козлова, Н.Н. Балашова // Доклады РАСХН. -2000.-№3.-С. 7-12.

36. Козлова, В.М. Жизнеспособность пыльцы маркерных форм томата / В.М. Козлова // Научные труды по селекции и семеноводству (к 75-летию ВНИИССОК). 1995. - М.: ВНИИССОК. - Т. 1. - С. 261-263.

37. Кочиева, Е.З. RAPD маркеры генома картофеля: Клонирование и использование для определения межвидовых и межсортовых различий /

38. Е.З. Кочиева, А.С. Оганисян, А.П. Рысков // Молекулярная биология.1999.-Т. 33. -N5.-C. 893-897.

39. Кочиева, Е.З. Молекулярное маркирование сортов баклажанов (Solanum melongena L.) / Е.З. Кочиева // Сельскохозяйственная биотехнология.2000.-Т. 1. С. 17-24.

40. Кочиева, Е.З. Молекулярный анализ RAPD-маркеров генома картофеля / Е.З. Кочиева, А.С. Оганисян // Сельскохозяйственная биотехнология. -2000. Т. 1. - С. 24-32.

41. Кравченко, А.Н. Методы гаметной и зиготной селекции томатов / А.Н. Кравченко, В.А. Лях, Л.Г. Тодераш и др. Кишинёв: Штиинца, 1988. -152с.

42. Кравченко, А.Н. Особенности элиминации гамет у растений /А.Н. Кравченко // Селекция и семеноводство овощных культур в XXI веке. -М.: ВНИИССОК. 2000. - Т. 1. - С. 282-283.

43. Крутилин, А.С. Физиология овощных и бахчевых культур / А.С. Крутилин // Физиология сельскохозяйственных растений.- М.: Изд-во МГУ, 1951. -Т. 18.-С. 320-343.

44. Курганская, Н.В. Томат / Н.В. Курганская, Л.И. Романова.- М.: Изд-во Алейрон, 2006. 80с.

45. Лях, В.А./В.А. Лях// Известия АН МССР: Серия биологических и химических наук. 1984. - № 6. - С. 38-41.

46. Лях, В.А. Методы отбора ценных генотипов на уровне пыльцы / В.А. Лях, А.И. Сорока, Л.Ю. Мищенко и др. // Методические указания по гаметной селекции сельскохозяйственных растений. М.: ВНИИССОК. - 2001. -С.149-195.

47. Лях, В.А. Эффективность микрогаметного отбора на устойчивость кукурузы к температурному фактору / В.А. Лях, А.И. Сорока // Сельскохозяйственная биология. 1993. - N 3. - С.38-44.

48. Маковей, М. Д. Применение метода пыльцевой оценки в селекции тепличного томата на устойчивость к стрессовым абиотическим факторам / М. Д. Маковей // Дис. канд. с.-х. наук. М. - 1992. - 198 с.

49. Мамедов, М.И. Селекция томата, перца и баклажана на адаптивность / М.И.Мамедов, В.Ф. Пивоваров, О.Н. Пышная.- М.: 2002. 370 с.

50. Маниатис, Т. Молекулярное клонирование / Т. Маниатис, Э. Фрич, Дж. Сэмбрук.- М.: Мир, 1984. 479 с.

51. Матвеев, В.П. Овощеводство / В.П. Матвеев, М.И. Рубцов.- М.: Колос, 1978.-С. 292-314.

52. Методика ВНИИ картофельного хозяйства им. А.Г. Лорха / Инструкция по применению иммуноферментного диагностического набора для определения вирусов картофеля. Коренёво, 2006 -7с.

53. Методические указания по гаметной селекции сельскохозяйственных растений (методология, результаты и перспективы) / Н.Н. Балашова, Е.Г. Козарь.- М.: ВНИИССОК, 2001. 386с.

54. Методические указания по оценке и селекционному отбору томатов на устойчивость к фитофторозу / М.:ВНИИССОК, 1970. Юс.

55. Методические указания по селекции и семеноводству овощных культур, возделываемых в защищённом грунте (томаты, перец). М., - 1979. - 84с.

56. Методические указания по селекции сортов и гибридов томата для открытого и защищённого грунта. М., - 1986. - 112с.

57. Мищенко, Л.Ю. Влияние отбора по конкурентоспособности пыльцы на соотношение по скороспелости потомства гибридов льна масличного/ Л.Ю. Мищенко, В.А. Лях // Цитология и генетика. 1998. - № 4. - С. 3136.

58. Молдаван, М.Я. Вирусные болезни табака и меры борьбы с ними /М.Я. Молдаван. Кишинёв: Штиинца, 1979. - 228 с.

59. Мотова, М.В. Оценка генетической устойчивости томата к вирусу мозаики томата / М.В. Мотова, А.Е. Цыпленков // Вестник Защиты растений. 2005. - №3. - С. 55-58.

60. Мощков, Б.С. Выращивание растений на искусственном освещении / Б.С. Мощков.- М.: Колос. 1966. - 263с.

61. Мэтьюз Р. Вирусы растений / Р. Мэтьюз М.: Мир, 1973.- 600с.

62. Пивоваров, В.Ф. Экологическая селекция сельскохозяйственных растений / В.Ф. Пивоваров, Е.Г. Добруцкая, Н.Н. Балашова М.: ВНИИССОК, 1994.-248 с.

63. Пивоваров, В.Ф. Экологическая селекция томата / В.Ф. Пивоваров, М.Х. Арамов. М.: ВНИИССОК, 1997. - 232 с.

64. Пивоваров, В.Ф. Паслёновые культуры: томат, перец, баклажан, физалис / В.Ф. Пивоваров, М.И. Мамедов, Н.И. Бочарникова. М.: ВНИИССОК, 1998.-293 с.

65. Пивоваров, В.Ф. Частная селекция пасленовых культур / В.Ф. Пивоваров, Р.В. Скворцова, И.Ю. Кондратьева. М.: ВНИИССОК, 2002. - 285 с.

66. Потокина, Е.К. Современные методы геномного анализа в исследованиях генетики количественных признаков у растений / Е.К. Потокина, Ю.В. Чесноков // Сельскохозяйственная биология. 2005. - №3.- С.3-18.

67. Простакова, Ж.Г. Реакция на токсин как тест-система оценки устойчивости сои к фузариозу / Ж.Г. Простакова, А.И. Бронштейн, Н.Н. Балашова // Сельскохозяйственная биология. 1993. - № 3. - С.32-37.

68. Самсонова, JI.H. Диагностика вирусных и фитоплазменных болезней овощных культур и картофеля / Л.Н.Самсонова, А.Е. Цыпленков, Т.А. Якуткина. С-Пб., 2001. - 48 с.

69. Скворцова, Р.В. Результаты работ по селекции томата на устойчивость к фитофторозу / Р.В. Скворцова, Л.К. Гуркина // Селекция на устойчивость к основным заболеваниям овощных культур. М.- 1984. - С.72-84.

70. Скворцова, Р.В. Селекционные аспекты резистентности томата к фитофторозу / Р.В. Скворцова // Селекция и семеноводство овощных и бахчевых культур. М,- 2000. - С. 192-196.

71. Скворцова, Р.В. Селекция томата для Нечернозёмной зоны России: сорта томата для Нечернозёмной зоны России / Р.В. Скворцова, Л.К. Гуркина // Селекция и семеноводство овощных культур в XXI веке. М. - 2000. - Т.2. - С.188-192.

72. Слепцова, Т.Г. Горизонтальная устойчивость томатов к фитофторозу в системе общей адаптивности / Т.Г. Слепцова, Н.Н. Балашова // Сельскохозяйственная биология.- 1995. № 9. - 42-47.

73. Смирнова, B.C. Диагностика холодостойкости образцов культурного томата: Методические указания / B.C. Смирнова, И.Б. Гаранько Л.: ВИР, 1990.-22с.

74. Супрунова, Т.П. Идентификация вариабельности генома томата с помощью маркеров на основе ДНК / Т.П. Супрунова Автореф. дисс. канд с.-х. наук - М.: ВНИИССОК, 1997. - 27с. - Илл.

75. Тепличный практикум: Томаты // Дайджест журнала «Мир теплиц». М., 2002.- 136 с.

76. Удовенко, Г.В. Общие требования к методам и принципам диагностики устойчивости растений к стрессовым воздействиям.- JI., 1988.- С.5-10.

77. Фортэ, А.В. Технология RAPD анализа генотипов яблони: Методические указания / А.В. Фортэ, Д.Б. Дорохов и др. Мичуринск: Изд-во ГНУ, 2002. - 26 с.

78. Шатило, В.И. Использование маркерной коллекции мутантов томата для выявления механизмов устойчивости к вирусам / В.И. Шатило, Н.И. Бочарникова, В.П. Музыкантов, Н.Н. Балашова // Генетические коллекции овощных растений. Санкт-Петербург.- 1999. - С.5-17.

79. Шкаликов, В.А. Защита растений от болезней: Учебник / В.А. Шкаликов, О.О. Белошапкина, Д.Д. Букреев. М.: Колос, 2003. - 255с.

80. Шкаликов, В.А. Индуцированный иммунитет в защите растений от болезней / В.А. Шкаликов, П.С. Хохлов, Д.А. Орехов // Плодородие.-2001.-№4.-С. 22-24.

81. Agriculture Journal. Agriculture department of Sri Lanka. - 2002. - Vol.1. - № 40. -P.21-33.

82. Akkaya, M.S. Integration of simple sequence repeat DNA markers into a soybean linkage map / M.S. Akkaya, R.C. Shoemaker, J.E. Specht., A.A. Bhagwat, P.B. Cregan // Crop science. 1995. - №35. - P.1439-1445.

83. Alexander, L.J. Host-pathogen dynamics of tobacco mosaic virus on tomato: / L.J. Alexander // Phytopathology. 1963. - №61.- P.611 -617.

84. Annual Report of the Economics Division: HORDI Sri Lanka.- 2006. P.15-20.

85. Avrora, D.P. Systemic acquired resistance / D.P. Avrora, X. Dong // Annual review of phytopathology.- 2003.- Vol.42.- P. 185-209.

86. Bachem, C.W.B. Transcript imaging with с DNA-AFLP: A step-by-step protocol / C.W.B. Bachem, R.J.F.J. Oomen, R.G.F. Visser. //Plant Molecular Biology Report.- 1998.- Vol. -16.- P. 157-173.

87. Bawden, F.C. Photosynthesis and predisposition of plants to infection with certain viruses / F.C. Bawden, F.M. Roberts // Annals of Applied Biology. -1948.-417 p.

88. Beachy, R.N. / R.N. Beachy, M. Zaitlin, G. Bruening, H.W. Israel // Virology. 1976. - № 73. - P.498-507.

89. Bell, C. Assignment of 30 microsatellite loci to the linkage map of Arabidopsis / C. Bell, J.R. Ecker// Genomics. 1994. - №19. - P.137-144.

90. Black, W. A Proposal for an international nomenclature of Phytophthora infestans md of genes controlling immunity in Solanum demissum derivatives / W. Black, C. Mastenbrock, W.R. Mills, I.C. Peterson // Euphytica. 1953. -Vol. 2. - № 3. - P.173-179.

91. Cirulli, M. Influence of temperature and strain of tobacco mosaic virus on resistance in a tomato breeding line derived from Lycopersicon peruvianum / M. Cirulli, L.J. Alexander //Phytopathology. 1969. - №59. - P. 1287-1297.

92. Clark, A.F. General Virology / A.F. Clark, A.N. Adams. 1977. - Vol. 34. -№3. - P.475-483.

93. Clayberg, C.D. The Тт-2-nvlinkage / C.D. Clayberg // TGC Report. №9. -1959.-28p.

94. Cnops, G. Chromosome landing at the Arabidopsis TORNADOI locus using AFLP-based strategy / G. Cnops, B. den Boer, A. Gerats, M. Van Montagu, M. Van Lijsebettens // Mol. Gen. Genet. 1996. - №253. - P.32-41.

95. Cristiansen, M. N. Breeding plants for less donorable environments / M. N. Cristiansen, C.F. Levis // Wiley Interscience Publication. New York: Chichester, Toronto. - 1982. -P.250-265.

96. Devos, K.M. Genome relationships: The Grass model in current research / K.M. Devos, M.D. Gale // Plant Cell. 2000. - №12. - P.637-646.

97. Duirant, W.E. cDNA-AFLP reveals a striking overlap in race specific resistance and wound response gene expression profiles / W.E. Durrant, O. Rowland, P. Piedras, K. Hammond-Kosack, D.G. Jones // Plant Cell .- 2000.-Vol.12.- №6 P. 963-977.

98. European Handbook of Plant Diseases. Blackwell Scientific Publications Oxford, London, Edinburg, Boston, Palo Alto, Melburne. - 1988. - 583p.

99. Food and Agriculture Organization of the United Nations (FAO). -www.fao.org. 2005

100. Foolad, M.R. RAPD markers for constracting intraspecific tomato genetic maps / M.R. Foolad, R.A. Jones, R.L. Rodriguez // Plant Cell Reports.- 1993.-№12.- P.293-297.

101. Frova, C. Sporophytic and gametophytic components of thermo tolerance affected by pollen selection / C. Frova, P. Portaluppi, M. Villa, M. Sari Gorla // Journal of Heredity. 1995. - Vol. 86. - № 1. - P.50-54.

102. Goelet, P. Nucleotide Sequence of Tobacco Mosaic Virus RNA / P. Goelet, G.P.Lomonossoff, P. J. G. Butler, M. E. Akam, M. J. Gait, and J. Karn // High Wire Press-hosted journal. 1982. - №19. - Vol.79. - P. 5818-5822.

103. Gonzalez, L.C. The response to temperature of cabbage virus A infection in Nicotiana glutinosa / L.C. Gonzalez, G.S. Pound // Phytopathology. 1963. -№53.- P.l041-1045.

104. Gottschalk, W. Bibl. Genetica / W. Gottschalk. 1956. - № 17. - P. 1-109.

105. Guilley, H. / H. Guilley, G. Jonard, B. Kukla, E.E. Richards // Nucleic Acids Research. 1979. - №6. - P. 1287-1307.

106. Gusttafasson, A. Acta Agri. Scand / A. Gusttafasson, O. Tedin. 1954. - № 4. - 463 p.

107. Hall, T.J. Resistance at the Tm-2 locus in the tomato to tomato mosaic virus /T.J. Hall //Euphytica. 1980. -№29. - P. 189-197.

108. Hamamoto, H. Amino-acid changes in the putative replicase of tomato mosaic tobamovirus, that overcome resistance in Tm-1 tomato / H. Hamamoto,

109. Y. Watanabe, H. Kamada, Y. Okada // Journal General Virology. 1997. -№78. - P.461-464.

110. Hunter, T.R. / T.R. Hunter, T. Hunt, J. Knowland, D. Zimmern // Nature. -1976.-№260.-P.759-764.

111. Jones J.P. Analysis of quantitative traits in barley by the use of amplified fragment length polymorphisms / J.P. Jones, B. Harrow // Heredity.- 1998.-Vol.79.- P. 48-59.

112. Jones, R.A. Pollen selection / R.A. Jones et al. // California Agriculture. -2000.-Vol.38.-№8.-P.26-27.

113. Kalloo, G. Genetic Improvement of Tomato / G. Kalloo. Berlin, 1991. -358p.

114. Khush, G.S. Genetic activity in a heterochromatic chromosome segment of the tomato / G.S. Khush, C.M. Rick, R.W. Robinson // Science.- 1964. V. 145. - P.l 432-1434.

115. Kikuta, K. Preliminary report on breeding tomatoes for resistance to tobacco mosaic virus / K. Kikuta, W.A. Frazier // Proceedings of Am. Soc. Hort. Science. -1947. №49. - P.256-262.

116. Kimmins, W.C. The effect of darkening on the susceptibility of French bean to tobacco necrosis virus / W.C. Kimmins // Can. Journal. Botany. 1967. -№45. - P.543-553.

117. Klein-Lankhorst, R. Isolation of molecular markers for tomato (L. esculentum) using random amplified polymorphic DNA (RAPD) / R. Klein-Lankhorst, A. Vermunt, R. Weide, T. Liharska, P. Zabel // Theoretical and Applied Genetics. -1991.-№83.-P. 108-114.

118. Kohler, E. Die Virusanfulligkeit der Blatter in Abhondigkein von ihrer Socuenz an Sprof. Versuche mit dem Tabakmosaik virus an Nicotiana glutinosa L. / E. Kohler // Biol. Zol. 1966. - Vol.85. - P. 1 -5.

119. Lanfermeijer, F.C. Cloning and characterization of the durable tomato• • • 2mosaic virus resistance gene Tm-2 from Lycopersicon esculentum / F.C.1.nfermeijer, J. Dijkhuis, M.J.G. Sturre // Plant Molecular Biology. 2003.-Vol.52. - P.l037-1049.

120. Logemann, J. Improved method for the isolation of RNA from plant tissues / J. Logemann, J. Schell, L. Willmitzer // Annals of Biochemistry. 1987.-Vol. 163.- P.l6-20.

121. Maisonneuve, B. Pollen selection in breeding tomato for adaptation to low temperature /В. Maisonneuve // Euphytica.- 1983.- T. 35. № 3.- P. 983 992.

122. Maluf, Relationship between fatty acid composition and low temperature seed germination in tomato / Maluf //Amer. Soc. Hortic. Science. 1982. -№107.-Vol.4.-P.620-623.

123. Mckenna, M.A. Pollen: Biology and Implicate / M.A. Mckenna, D.L. Mulcahy // Plant Breed. Proc. Symp. New York: Lake Garda. - 1983. -P.419-424.

124. Meskem, K. A high resolution map of the vicinity of the RI locus on chromosome V of potato based on RFLP and AFLP markers / K. Maksem, D. Leister, J. Peleman, M. Zabeau, F. Salamini, C. Gebhardt // Mol. Gen. Genet. -1995.-№249.-P. 74-81.

125. Meyers, B.C. The major resistance gene cluster in lettuce is highly duplicated and spans several mega bases / B.C. Meyers, D.B. Chin, K.A. Shen, S. Sivaramakrishan, D.O. Lavelle, Z. Zhang, R.W. Michelmore // Plant cell. -1998.-№10.-P. 1817-1832.

126. Motoyoshi, F. Expression of genetically controlled resistance to tobacco mosaic virus infection in isolated tomato leaf mesophyll protoplasts / F. Motoyoshi, N. Oshima // Journal General Virology. 1977. -Vol.34. - P.499-506.

127. Motoyoshi, F. Molecular characterization of heterochromatic regions around the Tm-2 locus in chromosome 9 of tomato / F. Motoyoshi, T. Ohmori, M. Murata // Symposium of Soc. Exp. Biology. 1996. - №50. - P.65-70.

128. Muckill, D.J. Level of polymorphism and genetic mapping of AFLP markers in rice / D.J. Mackill, Z. Zhang, E.D. Redona, P.M. Colowit // Genome. 1996. Vol.39. - P.969-977

129. Mulcahy, D.L. / D.L. Mulcahy // Science. 1979. - Vol. - №206. - P.20-24.

130. Mulcahy, D.L. Pollen: Biology and Implicate. / D.L. Mulcahy, G.B. Mulcahy // Plant Breed. Proc. Symp. New York: Lake Garda. - 1983.- P. 1517.

131. Mulcahy, D.L. Gametophytic self incompatibility or the more things change / D.L. Mulcahy, G.B. Mulcahy // Heredity.- 1982.- T. 54.- №1.- P. 138144.

132. Mullis, K.B. Methods in enzymology /. K.B. Mullis, F.A. Faloona // Academic press. New York. - 1987. - Vol. 155. - 335p.

133. Nishigushi, M. Resistance mechanisms of tobacco mosaic virus strains in tomato and tobacco / M. Nishigushi, F. Motoyoshi // Plant resistance to viruses. Chichester: John Wiley and Sons. - 1987. - P. 38-46.

134. Ohmori, T. Molecular characterization of the SCAR markers tightly linked to the Tm-2 locus of the genus Lycopersicon / T. Ohmori, M. Murata, F. Motoyoshi //Theoretical and Applied Genetics. -2000. № 101. -P. 64-69.

135. Ohmori, Т. Identification of RAPD-markers linked to the Tm-2 locus in tomato / T. Ohmori, M. Murata, F. Motoyoshi // Theoretical and Applied Genetics. 1995. - №90. - P.307-311.

136. Ohno, T. Single amino acid substitution in 30k protein of TMV defective in virus transport function / T. Ohno I/ Virology. 1984. - V. 131.- P.255-258.

137. Ottaviano, E. / E. Ottaviano, M. Sari Gorla // Theoretical and Applied Genetics. 1982. - Vol. 63. № 3. - P. 249-254.

138. Ottaviano, E. Genetics of angiosperm pollen / E. Ottaviano, D.L. Mulcahy // Advances in genetics. 1989. - № 26. - P. 1-64.

139. Pelham, J. Necrosis of Tm-2 /+ plants / J. Pelham // Report of the Tomato Genetics Cooperative. 1970. - №20. - P.36-40.

140. Pelham, J. Resistance in tomato to tobacco mosaic virus / J. Pelham // Euphytica. 1966. -№15. - P.258-267.

141. Pelham, J. Strain-genotype interaction of tobacco mosaic virus in tomato / J. Pelham // Annals of Applied Biology. 1972. - №71. - P. 219-228.

142. Pfahler, P.L. Comparative effectiveness of pollen genotype selection in Higher Plants / P.L. Pfahler // Biology and Implications for Plant Breeding. -1983.-P.361-366.

143. Quiros, C.F. Use of RAPD markers in potato genetics: segregation in diploid and tetraploid families / C.F. Quiros, A. Caeda, A. Georgescu Hu // American Potato Journal. 1993. Vol. 70. - P. 35-40.

144. Robinson, R.W. / R.W. Robinson, C.M. Rick // Heredity. 1954. -№45. - P. 241-247.

145. Saliba-Colombani, V. Efficiency of RFLP, RAPD, and AFLP markers for the construction of an intraspecific map of the tomato genome / V. Saliba-Colombani, M. Causse, L. Gervais, J. Philouze // Genome. 2000. -№43. - P. 29-40.

146. Scarlat, A. / A. Scarlat // An.Univ.Bucuresti Biol. 1978. - Vol.27. -P.83-88.

147. Smith, O. Agri. Exper. Sta. / О. Smith. -Cornel.Univ.-1935. -№184. -P.3-16.

148. Takamatsu, N. / N. Takamatsu, Т. Ohno, Т. Meshi, Y. Okada // Nucleic Acids Research. 1983. - № 11. - P.3767-3778.

149. Tanksley, S.D. Evidence for extensive overlap of sporophytic gene expression in Lycopersicon esculentum / S.D. Tanksley, D. Zamir, C.M. Rick // Science.-1981,- Vol.213. P.453-455.

150. Tanksley, S.D. High density moleculer linkage maps of the tomato and potato genomes / S.D. Tanksley, M.C. Ganal, J.P. Prince // Genetics. 1992. №132. -P. 1141-1160.

151. Tanksley, S.D. Mapping polygenes / S.D. Tanksley // ANNU. Rev. Gent. 1993.-№27.-P. 205-233.

152. Tanksley, S.D. Use of molecular markers in breeding for soluble solids content in tomato / S.D. Tanksley, J. Hewitt // Theoretical Applied Genetics. -1988.-№75.-P. 811-823.

153. Vos, P. AFLP: a new technique for DNA fingerprinting / P. Vos, R. Hogers, M. Bleeker, M. Reijans, T. Van de Lee, M. Hones // Nucl. Acids Res. 1995. №23.-P. 4407-4414.

154. Watanabe, Y. Characterization of Tm-1 gene action on replication of common isolates and a resistance-breaking isolate of TMV / Y. Watanabe, N. Kishibayashi, F. Motoyoshi, Y. Okada // Virorlogy. 1984. - Vol.161. - P. 527532.

155. Weber, H. The Tomato mosaic vims 30 kDa movement protein interacts differentially with the resistance genes Tm-2 and Tm-T / H. Weber, S. Ohnesorge, M.V. Silber, A.J.P. Pfitzner // Archives of Virology. 2004. - P. 45-50.

156. Weber, H. Tm-2(2) resistance in tomato requires recognition of the carboxy terminus of the movement protein of tomato mosaic virus / H. Weber, A.J. Pfitzner. Molecular Plant Microbe Interaction. -1998. -№11.- P. 498-503.

157. Weber, J. L. Abundant class of human DNA polymorphism which can be typed using the polymerase chain reaction / J. L Weber, P.E. May // American Journal of Human Genetics. 1989. - Vol. 44. - P. 388-396.

158. Welsh, J. Fingerprinting genomes using PCR with arbitrary primers / J. Welsh, M. McClelland//Nucl. Acids Res. 1990.- Vol. 18.-P. 7213-7218.

159. Wicking, C. From linked markers to gene / C. Wicking, B. Williamson // Trends Genetics. -1991. №7. - P. 288-293.

160. Williams, J.G.K. DNA polymorphisms amplified by arbitrary primers are useful as genetic markers / J.G.K. Williams, A.R. Kubelik, K.J. Livak, J.A. Rafalski, S.V.Tingey//Nucleic Acids Research. 1990. - №18. -P.6531-6535.

161. Williamson, V.M. A PCR-based marker tightly linked to the nematode resistance gene M'in tomato / V.M. Williamson, J.Y .Ho, F.F. Wu, N. Miller, I. Kaloshian // Theoretical Applied Genetics. -1994. № 87. - P.757-763.

162. Wilson, J. B. The interrelationship of potato and tomato races of Phytophthora infestans/. B. Wilson, M.E. Gallegly // Phytopathology. 1955. -№45. - P. 473-476.

163. Work, K.M. The tomato Origin / K.M. Work. New York: Judd Publishing Co. - 1952. - 630p.

164. Xu, L.C. Application of Atomic Force Microscopy in the Study of Microbiologically Influenced Corrosion / L.C. Xu, K.Y. Chan, H. H. P. Fang, // Materials Characterization. 1997. -№ 48. - P. 195-203.

165. Young, N.D. Use of isogenic lines and simultaneous probing to identify of DNA markers tightly linked to the Tm-2a gene in tomato /. N.D. Young, D. Zamir, M.V. Ganal, S.D. Tanksley // Genetics. 1988. - №120. - P.579-585.

166. Zamir, D. Haploid selection for low temperature tolerance of tomato pollen / D. Zamir, S.D. Tanksley, C.M. Rick // Genetics. 1982. - Vol. 1. - P. 129-137.

167. Zamir, D. Low temperature effect on selective fertilization by pollen mixtures of wild and cultivated tomato species // D. Zamir, S.D.Tanksley, R.A.

168. Jones I I Theoretical and Applied Genetics. 1981. - Vol. 59. - №4. - P.235-238.

169. Zamir, D. Temperature effects on haploid selection of tomato microspores and pollen grains / D. Zamir, E. Vallejos // Biology and Implication for Plant Breeding.- 1983.- P.335-342.118