Исходный материал для селекции томата с комплексной устойчивостью к абиотическим и биотическим стрессорам Нечерноземной зоны, полученный на основе методов молекулярного анализа и гаметной селекции тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.05, кандидат сельскохозяйственных наук Пинчук, Елена Владимировна

• Пинчук, Елена Владимировна
• кандидат сельскохозяйственных наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат сельскохозяйственных наук Пинчук, Елена Владимировна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Характеристика потосистемы.

1.1.1. Краткая характеристика растения-хозяина - Lycopersicon esculentum L.

1.1.2. Характеристика патогена.

1.1.2.1. Биологические особенности.

1.1.2.2. Пути распространения вируса.

1.1.2.3. Особенности патологического процесса в системе «вирус - растение-хозяин - среда».

1.1.2.4. Симптомы поражения вирусом табачной мозаики.

1.1.2.5. Штаммовый состав вируса табачной мозаики.

1.1.3. Проблема устойчивости растений к патогенам.

1.1.3.1. Взаимоотношения растения и паразита.

1.1.3.2. Защитные системы растений.

1.1.3.2.1. Ингибиторы.

1.1.3.2.2. Локальная устойчивость.

1.1.3.2.3. Системная устойчивость.

1.1.3.3. Генетический контроль устойчивости к ВТМ у томата.

1.2. Молекулярные маркеры.

1.3. Гаметная селекция на устойчивость к стрессовым факторам.

1.4. Характеристика фитофтороза и устойчивости томата к данному заболеванию.

2. УСЛОВИЯ, МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Условия проведения исследований.

2.1.1. Погодные условия вегетационных периодов 2003-2005 гг.

2.2. Материал исследований.

2.3. Методика исследований.

2.3.1. Оценка устойчивости к ВТМ на искусственном инфекционном фоне.

2.3.2. Молекулярное маркирование признака устойчивости к ВТМ у селекционных и коллекционных образцов томата.

2.3.3. Оценка образцов томата по комплексу признаков на естественном инфекционном фоне.

2.3.4. Оценка холодостойкости.

2.3.5. Анализ наследуемости признака устойчивости к ВТМ.

2.3.6. Анализ характера расщепления гибридов F2.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Отбор форм томата, устойчивых к ВТМ, на основе картирования генов

Тт-2 и Тт-2 . Анализ эффектов генов устойчивости к ВТМ.

3.2. Оценка устойчивости коллекционных и селекционных образцов томата при моделировании искусственных стрессов.

3.2.1. Оценка вирусоустойчивости маркерных образцов томата с относительной устойчивостью к холоду и расе То Ph. infestans DB.

3.2.2. Оценка холодостойкости спорофита маркерных и селекционных образцов томата, отобранных на естественном инфекционном фоне ВТМ и Ph. infestans DB.

3.2.3. Оценка стрессоустойчивости маркерных и селекционных образцов томата при моделировании низкотемпературного стресса и эпифитотии ВТМ.

3.3.Оценка вирусоустойчивых коллекционных образцов по комплексу признаков.

3.3.1. Устойчивость коллекционных образцов томата к наиболее распространённым вирусам.

3.3.2. Оценка коллекционных образцов томата на устойчивость к фитофторозу

3.3.3. Холодостойкость коллекционных образцов томата по микрогаметофиту

3.3.4. Холодостойкость коллекционных образцов томата по спорофиту.

3.3.5. Оценка скороспелости и урожайности коллекционных образцов томата.91 3.4. Оценка стрессоустойчивости и продуктивности гибридов Fi

3.4.1. Наследование признака устойчивости к ВТМ гибридами F]

Холодостойкость по спорофиту родительских форм и гибридов Fi томата

Фитофтороустойчивость родительских форм и гибридов Fi

3.4.4. Скороспелость и урожайность родительских форм и гибридов Fi

3.5. Оценка стрессоустойчивости гибридного потомства F2.

3.5.1. Оценка вирусоустойчивости гибридного потомства F2 на искусственном инфекционном фоне.

3.5.2. Характер проявления признаков стрессоустойчивости в потомстве F

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исходный материал для селекции томата с комплексной устойчивостью к абиотическим и биотическим стрессорам Нечерноземной зоны, полученный на основе методов молекулярного анализа и гаметной селекции»

Томат по занимаемым площадям и доле в валовом объёме урожая является, наряду с капустой и морковью, ведущей овощной культурой Российской Федерации (Дятликович, Дудоров, 1998). Основными стрессовыми факторами, экономически ограничивающими урожайность томата в Нечернозёмной зоне, считаются недостаточная теплообеспеченность и фитопатогены, наиболее вредоносна из которых фитофтора (Phytophthora infestans DB.). Нарастает также вредоносность вирусных инфекций.

В результате 85-летней селекционной работы в лаборатории селекции и семеноводства паслёновых культур ВНИИССОК получен ряд раносозреваю-щих, устойчивых к пониженным положительным температурам сортов и гибридных форм томатов для открытого грунта Нечернозёмной зоны, которые обладают толерантностью и к Ph. infestans DB. (Скворцова, Гуркина, 2000). Ал-патьев А.В. (1970, 1971) и Анфиногенов Г.В. (1971) отмечали, что понижение степени поражаемости вирусом табачной мозаики (ВТМ) у потомств отборов устойчивых к вирусу форм в значительной мере наследуется. Недавние исследования, тем не менее, показали присутствие вируса табачной мозаики в селекционном материале томата из плёночных (степень распространения - 5,3337,5%) и остеклённой (степень распространения - до 100%) теплиц (Лахматова и др., 2000). Вредоносность вирусной инфекции выражалась в значимом снижении массы больных плодов (на 25% и выше) (Лахматова и др., 2000), снижении содержания минеральных веществ (марганца, меди, цинка - до 50%) (Bergman, Boyle, 1962), сухого вещества и витамина С в плодах (Лахматова и др., 2000). Под влиянием вируса снижается активность ауксинов, определяемая в экстрактах из листьев томата (Pavillard, 1952). Всё это свидетельствует о подавлении реакций неспецифической устойчивости в результате инфицирования ВТМ. А растения с общим пониженным потенциалом устойчивости легче подвергаются абиотическим и биотическим стрессам.

Профилактические меры защиты от вирусных инфекций при степени распространения заболеваний 30-100% обычно малоэффективны (Александров,

Боос, 1961; Сухов, 1965; Власов, 1967). Они должны в обязательном порядке дополнять генетический контроль заболеваний, который обеспечивают толерантные и устойчивые сорта (Вавилов, 1937; Рыжкова, 1941). Возделывание невосприимчивых сортов издавна считалось наиболее эффективным, надёжным и дешёвым способом сохранения урожая. По мнению Балашовой Н.Н., Пивова-рова В.Ф. (1999), оно приобретает особую ценность в связи с решением актуальнейшей проблемы сегодняшнего дня - охраны окружающей среды, снижения пестицидной нагрузки. Однако односторонний подход к отбору только лишь с позиции максимальной устойчивости или максимальной продуктивности нередко не учитывает интегративной реакции растений на факторы среды (Балашова, Пивоваров, 1999). Взаимосвязь между устойчивостью к патогенам и к абиотическим факторам внешней среды позволяет проводить отбор на комплексную устойчивость, в результате которого получают адаптивные образцы (Балашова, 1986). Следовательно, отбор материала с комплексной устойчивостью к пониженным положительным температурам и патогенам (фитофторозу и ВТМ) должен быть перспективен.

Адаптивный потенциал растений контролируется набором генов, среди которых базисные гены устойчивости не всегда занимают ведущие позиции и проявляются в фенотипе исключительно в стрессовых ситуациях. Фенотапиче-ское проявление этих генов возможно с помощью моделирования стрессов в климокамерах и на искусственных инфекционных фонах. Но смоделировать природную нерегулируемую ситуацию практически невозможно. Поэтому сорта и гибриды, полученные на искусственно смоделированном инфекционном фоне, часто имеют пониженный адаптивный потенциал.

Решение проблемы возможно путём использования при создании исходного материала, помимо традиционной селекции, методов молекулярного анализа (в частности ДНК-маркерования признака устойчивости) и гаметной селекции.

ДНК-маркеры — фрагменты ДНК, соответствующие нуклеотидным последовательностям, которые входят в структуру агрономически важного гена или сцеплены с ним. ДНК-маркеры позволяют решать следующие задачи:

• разграничивать специфическую и неспецифическую устойчивость и исследовать взаимодействие соответствующих локусов;

• определять расовую специфичность отдельных генов и оценивать взаимодействие между генами устойчивости к патогенам, развитием растений и окружающей средой;

• их появление нейтрально по отношению к фенотипу, не является тка-неспецифичным, их можно обнаружить на любой стадии развития растений.

Важное преимущество молекулярного маркирования признака устойчивости к патогенам состоит в том, что устойчивость хозяина можно спрогнозировать в отсутствии патогена, избежав, таким образом, испытания на искусственном инфекционном фоне. Тем самым не только ускоряется процесс селекции на устойчивость, но и повышается его биобезопасность.

Вот почему использование молекулярных маркеров, тесно сцепленных с генами устойчивости, позволяет проводить эффективный отбор устойчивых растений на самых ранних стадиях онтогенеза. Такие методы, получившие название MAS-технологий, активно используются рядом иностранных селекционных и семеноводческих компаний для сортовой идентификации и правовой защиты. Достоверность при этом гарантируется надёжностью маркирования конкретного признака уникальной системой ДНК-маркеров и технологий, разработанных для каждого конкретного случая (Хавкин, 1997; Ежова и др., 2002).

Гаметная селекция, как известно, представляет собой селекцию генотипов в половом поколении жизненного цикла растений. На ранних этапах репродуктивного развития возможен отбор генотипов, наиболее приспособленных к условиям внешней среды. Целенаправленное выведение наиболее адаптивных форм ещё на репродуктивных стадиях развития может способствовать ускорению селекционного процесса (Mulkahy, 1974; Жученко, 1980). Проведённые многочисленные исследования в ряде научных учреждений привели к выводу, что создание сортов, сочетающих в себе высокую потенциальную продуктивность и экологическую устойчивость, принципиально возможно (Степанов и др., 1995). Так, отбор по пыльце на холодостойкость внедрён в селекционную практику лаборатории селекции и семноводства столовых корнеплодов ВНИИССОК. Получен патент на сорт репы японской Снегурочка, выведенный с использованием методов селекции по микрогаметофиту. Срок создания этого сорта сократился в 2 раза по сравнению с традиционной технологией (Балашова и др., 2005). Таким образом, использование методов пыльцевой оценки на устойчивость к нерегулируемым факторам среды даёт возможность создавать адаптивные к этим факторам среды формы сельскохозяйственных культур и в более короткие сроки (Беспалько, 1999).

Гаметофитный отбор устойчивых к пониженным температурам образцов томата в сочетании с молекулярным маркированием признака устойчивости к ВТМ у фитофтороустойчивых образцов значительно (в 2 и более раз) ускорит процесс создания сортов и гибридов томата с комплексной устойчивостью к абиотическим и биотическим стрессам.

Целью настоящей работы является создание исходного материала для селекции томата с комплексной устойчивостью к абиотическим (пониженные положительные температуры) и биотическим (ВТМ и фитофтороз) стрессорам на основе методов молекулярного анализа и гаметной селекции.

Для достижения цели ставятся следующие задачи:

1. Идентификация стрессоустойчивости селекционного и коллекционного материала: а) с помощью молекулярных маркеров устойчивости; б) при моделировании искусственных стрессов; в) на фоне естественных стрессов.

2. Отбор форм с комплексной стрессоустойчивостью.

3. Изучение наследования гибридным потомством признаков устойчивости к стрессам.

Научная новизна работы заключается в разработке элементов системы ускоренной оценки комплексной стрессоустойчивости растений томата, которые включают RAPD-маркирование генов устойчивости к ВТМ, анализ эффектов генов устойчивости при моделировании искусственных стрессов, оценку холодостойкости образцов по микрогаметофиту и спорофиту. Кроме того, показано положительное влияние низкотемпературного стрессора на стадии прорастания семян на устойчивость растений томата к ВТМ.

Определена надёжность защитных эффектов гена Тт-2 , контролирующего устойчивость томата к ВТМ на тканевом уровне, после воздействия низких положительных температур. Изучен характер наследования комплексной стрессоустойчивости в различных комбинациях скрещиваний с участием вирусо-устойчивых образцов с генами Тт-22 и Тт-1.

Практическая значимость работы заключается в отоборе 11 форм томата с комплексом признаков устойчивости к абиотическим и биотическим стрессорам Нечернозёмной зоны России для использования их в качестве исходного материала в селекции.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Характеристика патосистемы

Заключение диссертации по теме «Селекция и семеноводство», Пинчук, Елена Владимировна

ВЫВОДЫ

1. Элементы системы ускоренной (1,5-2 года) оценки комплексной стрессо-устойчивости растений томата, включающие RAPD-маркирование генов устойчивости к ВТМ, анализ эффектов генов устойчивости при моделировании искусственных стрессов, оценку холодостойкости по микрогаметофиту (пыльца) и спорофиту (семена и сеянцы) позволили выделить 11 сортообраз-цов - источников комплексной устойчивости к основным стрессорам Нечернозёмной зоны России.

2. RAPD-маркирование является важным звеном в изучении эффектов генов устойчивости к ВТМ у томата при моделировании искусственных стрессов (пониженные положительные температуры, искусственный инфекционный фон).

3. Эффективный при заражении диким штаммом ВТМ ген Тт-2 снижает свои защитные свойства при воздействии на растения-хозяева пониженных положительных температур на ранних стадиях онтогенеза.

4. Доминирование и сверхдоминирование по признаку вирусоустойчивости у гибридов Fi, наблюдается во всех комбинациях скрещиваний, где в качестве

• 11 материнской формы используется Craigella (Тт-2 /Тт-2 ), при этом выявлено существенное влияние отцовских форм на степень изменения длины стебля под влиянием вирусной инфекции (h = 68,5%).

5. По комплексной стрессоустойчивости (устойчивость к ВТМ, пониженным положительным температурам и фитофторозу) интерес представляют комбинации скрещиваний вирусоустойчивых образцов с адаптированным для открытого грунта Нечернозёмной зоны России сортом Дубок: Craigella (Тт-22/Тт-22) х Дубок, Craigella (Tm-l/Tm-l) х Дубок, из которых во втором поколении выделены наиболее ценные генотипы для дальнейшей селекционной работы.

6. Низкотемпературное воздействие на ранних стадиях онтогенеза (при проращивании семян) способствует повышению устойчивости большинства образцов томата к ВТМ; к увеличению продуктивности и повышению относительной устойчивости гибридных растений Fi к фитофторозу (особенно у восприимчивых образцов).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для Нечернозёмной зоны России рекомендуются 11 сортообразцов - источников комплексной устойчивости к основным стрессовым факторам: 9 образцов, обладающие устойчивостью к пониженным положительным температурам, ВТМ и относительной устойчивостью фитофторозу (Оттава 30, № 845, № 5173, Mobaci, Fj Красная стрела, Craigella (7m-22/Тт-2\ Мо 387, Мо 409, Мо 137), и 2 образца, обладающие устойчивостью к ВТМ и пониженным положительным температурам - № 4987 (Линия 50) и Craigella (Tm-1/Tm-l).

123

Список литературы диссертационного исследования кандидат сельскохозяйственных наук Пинчук, Елена Владимировна, 2005 год

1.Авдеев Ю.И. Селекция томатов.- Кишинёв: Штиинца, 1982.- 282с.

2. Авдеев Ю.И., Щербинин Б.Н. Устойчивость томатов к ВТМ // Сельскохозяйственная биология.- 1978, т. XIII, № 5. С. 726-729.

3. Александров С.В., Боос Г.В. Оценка сортов томатов на устойчивость к стрику // Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции, 1961, t.XXXIV, вып.2.- С. 115-120.

4. Алёхина Н.Д., Клюйнова А.И. Температура среды и адаптивные изменения свойств ферментов ассимиляции у растений // Вестник МГУ, 1988, сер. 16, № 3.-С.3-15.

5. Алпатъев А.В., Анфиногенов Г.В. Наследование устойчивости к вирусу табачной мозаики у линий помидоров // Доклады ВАСХНИЛ.- Москва: Колос, 1970, № 1. С.13-14.

6. Алпатъев А.В. Селекция овощных культур на скороспелость и холодостойкость / Сб.: Генетика сельскому хозяйству.- М., 1965.- С.529-534.

7. Алътшулер В.Е., Поляков А. Генетика. Москва: Колос, 1970. - 128 с.

8. Анфиногенов Г.В. Биологическое обоснование шкалы устойчивости помидоров к вирусу табачной мозаики // Вестник сельскохозяйственной науки.-М.: Колос, 1970, №5. С. 90-93.

9. Анфиногенов Г.В. Разработка методов селекции помидоров на устойчивость к вирусу табачной мозаики. Москва, 1971. - 18 с.

10. Балашова Н.Н. Фитофтороустойчивость рода Lycopersicon Tourn. и методы использования ее в селекции томата.- Кишинев: Штиинца, 1979.- 166 с.

11. Балашова Н.Н., Король М.М., Тимина О.О., Рущук B.C. Генетические основы селекции овощных культур на устойчивость к ВТМ.- Кишинёв: Штиинца, 1983.- 113 с.

12. Балашова Н.Н., Пивоваров В.Ф. Стратегические задачи в селекции сельскохозяйственных растений на устойчивость к фитопатогенам / Сб. Международный симпозиум по селекции и семеноводству овощных культур.- М., 1999.-С.58-78.

13. Балашова Н.Н., Простакова Ж.Г., Юрку А.И., Бронштейн А.И. Генетические основы селекции сельскохозяйственных культур в Молдавии.- Кишинёв, 1986.-С. 14-26.

14. Бобейко В.А., Кинтя П.К. Спирасолановые гликозиды.- Кишинев: Шти-инца, 1991.- С. 80.

15. Боуден Ф. Вирусы и вирусные болезни растений М., 1952.

16. И .Вавилов Н.И. Иммунитет растений к вирусным заболеваниям / Тр. Всесоюзного совещания по изучению ультрамикробов и фильтрующихся вирусов, 1937.-С. 137-156.1..Baewioe Н.И. Селекция как наука: Избранные произведения.- JL, 1967, Т.1.-С. 328-342.

17. Вавилов Н.И. Учение об иммунитете растений к инфекционным заболеваниям / Сб.: Теоретические основы селекции растений.- Л.: Сельхозгиз, 1935, тЛ.-С. 1-100.

18. Ващенко С.Ф., Чекунова З.И, Гавршова Н.И. Овощеводство защищён-ного грунта.- М.: Колос, 1974.- 352 с.31 .Вердеревская Т.Д. О факторах иммунитета томата к ВТМ: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук.- Кишинёв, 1963.- 20 с.

19. Виноградова В.В. Оценка холодостойкости овощных и тыквенных культур / С.: Диагностика устойчивости растений к стрессовым воздействиям.- Л., 1988.- С.75-84.

20. ЪЪ.Виноградова Н.И., Ибрагимов Н.А. Вирусные заболевания томатов / Сб.: Садоводство, овощеводство, лесоводство, 1971, т.91.- С. 54-61.

21. ЪА.Власов Ю.И., Абдукаргшова А. Азот и стрик помидоров // Защита растений, 1966, №7.-54 с.

22. Власов Ю.И. Профилактика вирусных болезней.- JL, 1967.- 92 с.3в.Власов Ю.И., Редько Т.А., Лытаева Г.К. Вирусные болезни овощных и бахчевых культур.- Д., 1973.- С. 3-4.

23. Ъ1.Вовк A.M. II Труды Института генетики АН СССР, 1961, т. 28.- С. 269276.

24. Гешеле Э.Э. Основы фитопатологической оценки в селекции растений. -М.: Колос, 1978.-206 с.

25. Гнутова Р.В. Иммунологические исследования в фитовирусологии.- М.: Наука, 1985.- 184 с.

26. Годнее Т.Н., Ходасевич Э.В. К вопросу о биосинтезе пигментов у некоторых вечнозелёных растений при отрицательных температурах/Сб.: Доклады АН СССР, 1965.- Т. 160, № 5.- С. 1206-1208.41 .Гольдин М.И. II Доклады АН СССР, 1939.- Т. 25, № 7.- С. 632-634.

27. А2.Голубинский И.Н. Биология прорастания пыльцы. Киев, 1974. -368с.43 .Гуршна Л.К. Расовый состав возбудителя фитофтороза томата для Московской области / Сб.: Селекция и семеноводство овощных культур в XXI веке.- М., 2000. -Т.1.- С.211-214.

28. Гусев A.M. Целебные овощные растения. М.: Издательство МСХА, 1991.- 240 с.45Дашкеева КН., Попушой И.С., Базелюк Ф.М., Варгина Г.Б. Вирусные болезни овощных растений в Молдавии. — Кишинёв, 1976.- 48 с.

29. Квасников Б.В., Игнатова С.И., Горшкова Н.С., Сухов КС. и др. Методика селекции сортов и гибридов томата, устойчивых к вирусу табачной мозаики в связи с его вариабельностью. М., 1984.- 28с.

30. Коваль B.C., Макарова Н.Н. Использование гаметного отбора в селекции на адаптивность / Сб.: Задачи селекции и пути их решения в Сибири, 2000.- С.227-231.

31. Козлова В.М. Использование идентифицированной генетической коллекции мутантных форм томата для создания исходного материала по признаку холодостойкости: Дис. . канд. с.-х. наук.- М., 1999.

32. Кравченко А.Н., Лях В.А., Тодераш Л.Г. и др. Методы гаметной и зиготной селекции томатов.- Кишинёв: Штиинца, 1988.- 152с.

33. Кравченко А.Н., Салтанович Т.И., Маковей М.Д., Беженарь В.В. Возможность гаметной селекции томата на устойчивость к осыпанию репродуктивных органов / Сб.: Онтогенетнка высших растений.- Кишинёв: Штиинца, 1989.- С.172.

34. Кравченко В.А., Ковбасенко В.М. Диагностика устойчивости томата к фитофторозу // Овощеводство и бахчеводство, 1987.- Вып.32.- 50с.

35. Кравченко В.А. Создание сортов и гетерозисных гибридов томата, устойчивых к неблагоприятным условиям / НТБ ВИР, 1992.- Вып.228.- С. 60-65.

36. Круг Г. Овощеводство: Учебник.- М.: Колос, 2000.-576с. 1 Х.Кудрявцев В.А. Отношение томатов к интенсивности света в различные фазы формирования репродуктивных органов / Доклады АН СССР, 1955.- Т. 102, №5.-С. 1035-1038.

37. Ладыгина М.Е., Рубин Б.А., Таймла Э.А. и др. Физиолого-биохомические методы вирусного патогенеза у растений // Штаммы вирусов растений.- Владивосток, 1977.- С.20-30.

38. Лисовская Т.П. Гаметный и зиготный отбор генотипов расщепляющейся популяции томатов в условиях засухи / Сб.: Гаметная и зиготная селекция растений.- Кишинёв: Штиинца, 1987.- С.36-40.

39. Литтл Т.М., Дж.Хиллз Ф. Сельскохозяйственное опытное дело. Планирование и анализ.- М.: Колос, 1981.- 320с.

40. Лях В.А. Устойчивость микрогаметофитов к пониженной температуре у некоторых диких видов Licopersicon Tourn. II Известия АН МССР.- 1986, №4.-С.38-42.

41. S3.Лях В.А., Жученко А.А., Кравченко А.Н. Физиолого-генетические основы интенсификации сельскохозяйственного процесса.- Саратов, 1984.- С.158-160.

42. Лях В.А., Сорока А.И. Эффективность микрогаметофитного отбора на устойчивость кукурузы к температурному фактору // Сельскохозяйственная биология. 1995, №3.- С.38-44.

43. Малиновский В.И. Механизмы устойчивости сверхчувствительных растений табака к вирусу табачной мозаики: Автореф. дис. . докт. биол. наук. Владивосток, 1998.-47с.

44. Мамедов М.И. Научное обоснование и разработка методов селекции сортов и гетерозисных гибридов Fj паслёновых культур на адаптивность (томат, перц, баклажан): Дис. . докт. с.-х. наук.- М., 2002.- 500с.

45. Матвеев В.П., Рубцов М.И. Овощеводство: Учебник.- М.: Колос, 1978.-424с.

46. Биохимический метод оценки сортов и гибридов томата на устойчивость к ВТМ: Методические указания.- Д.: Пушкин, 1984.- 11с.91 .Методические указания по гаметной селекции сельскохозяйственных растений. М., 2001.- 391с.

47. Методические указания по оценке и селекционному отбору томатов на устойчивость к фитофторозу.- М., 1970.-10с.9Ъ.Методические указания по селекции и семеноводству овощных культур, возделываемых в защищенном грунте (томаты, перец). М., 1979.- 84с.

48. Методические указания по селекции сортов и гибридов томата для открытого и защищенного грунта. — М., 1986.- 112с.

49. Методические указания по селекции сортов и гибридов перца, баклажана для открытого и защищённого грунта. М., 1997. — С.37-38.

50. Молдаван М.Я. Вирусные болезни табака и меры борьбы с ними. Кишинёв: Штиинца, 1979. - 228 с.

51. Москвоведение. География Москвы и Московской области.- М.: Эко-прос, 1996.-304с.

52. Мэтьюз Р. Вирусы растений.- М.: Мир, 1973.- 600с.

53. Настенко Н.В., Шмакова Н.А., Балашова Н.Н., Кушнерёва В.П. Селекция огурца на устойчивость к корневым гнилям / Сб.: Селекция и семеноводство овощных культур.- М.: ВНИИССОК, 1995.- Т.2.- С.31-40.

54. Палкин М.В. Использование мужского гаметофита в селекции на устойчивость арбуза к корневым гнилям / Сб.: Современное состояние и перспективы развития селекции и семеноводства овощных культур.- М., 2005.-Т.1.- С.364-366.

55. ЮЪ.Паугиева З.П. Практикум по цитологии растений.- 1988.

56. Пивоваров В.Ф. Методы оценки и селекции овощных культур на устойчивость к экологическим и биологическим стрессам / Сб.: Селекция овощных культур, 1994.- Вып. 34.- С.5.

57. Пивоваров В.Ф., Добруцкая Е.Г., Балашова Н.Н. Экологическая селекция сельскохозяйственных растений.- М., 1994,- С.43.

58. Пивоваров В.Ф., Мамедов М.И., Бочарникова Н.И. Паслёновые культуры: томат, перец, баклажан, физалис. М., 1998.

59. Попов Ф.А. Фитофтороз томатов // Защита растений.- 1994. №5.- С.25

60. Пугачёва И.Г. Совершенствование гаметной селекции томата на холодостойкость: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук. Белорусе, гос. с.-х. акад., Горки, 2002.

61. Руководство по апробации овощных культур и кормовых корнеплодов.- М.: Колос, 1982. С.10-17.

62. Савич И.М. Изопероксидазное состояние протопластов кукурузы как тест на холодостойкость // Сельскохозяйственная биология.- 1987. №5.- С.65-69.

63. Х.Сенин И.В. Особенности спорофитного и гаметофитного отбора на семенниках моркови: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук.- М., 1996.- 26с.

64. Смирнова B.C., Гаранько И.Б. Диагностика холодостойкости образцов культурного томата: Методические указания.- Д.: ВИР, 1990.- 22с.

65. Справочник агронома Нечернозёмной зоны.- М.: Агропромиздат, 1990.- 575с.

66. Справочник агронома по защите растений.- Кишинёв: Картя Молдове-няскэ, 1968.- 722с.

67. Степанов В.А., Бунин М.С., Балашова Н.Н. Отдельные элементы технологии селекции культивируемых форм репы по мужскому гаметофиту на устойчивость к холоду / Сб.: Научные труды по селекции и семеноводству, 1995.- Т.П.-С.86-96.

68. Супрунова Т.П. Идентификация вариабельности генома томата с помощью маркеров на основе ДНК: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук. М.: ВНИИССОК, 1997.-27с.

69. Сухов К.С., Вовк A.M. // Доклады АН СССР.- 1945.- Т.50.- С.485-488.

70. Сухов К.С., Никифорова Г.С. Физиологические условия, стимулирующие репродукцию вируса табачной мозаики в растительных клетках / Тр. Института генетики АН СССР.- 1950.- Т. 18.- С.237-246.

71. Сухов КС. Общая вирусология.- М., 1965.- 299с.

72. Тараканова И.Г., Довганюк А.И. Адаптация растений томата к загущению в ценозе и их роль в селекции / Сб.: Современное состояние и перспективы развития селекции и семеноводства овощных культур.- М., 2005.- С. 265267.

73. Тараканов Г.И., Доведар СЛ., Авакимова Л.Г. Генотип и среда в селекции томатов.-Л., 1978.-С.123-129.

74. Удовенко Г. В. Общие требования к методам и принципам диагностики устойчивости растений к стрессовым воздействиям.- Л., 1988,- С.5-10.

75. Удовенко Г.В., Гончарова Э.А. Влияние экспериментальных условий среды на структуру урожая сельскохозяйственных растений.- Л, 1982.- 144с.131 .Фотосинтез и биопродуктивность: методы определения. М.: ВО Агропромиздат, 1989.- С. 367-368.

76. Х'ШСавкин Э.Е. Молекулярные маркеры в растениеводстве // Сельскохозяйственная биология.- 1997. №5.- С.3-21.133Хохряков М.К., Доброзракова Т.Л., Степанов В.К., Летова М.Ф. Определитель болезней растений.- СПб.: Лань, 2003.- 592с.

77. Ширко В.Н. Методы исследования устойчивости к заболеваниям томатов и огурцов при селекции новых сортов / Сб.: Методика селекции и семеноводства овощных культур Д., 1964.

78. А2.Шмыкова Н.А., Агафонов А.Ф., Шкляр С.Н. Перспективы использования мужского гаметофита в селекции лука репчатого / Сб.: Научные труды ВНИИССОК.- М., 1995.- Т.71.- С.170-175.

79. A1 .Bawden. F.C., Roberts F.M. Phitosynthesis and predisposition of plants to infection with certain viruses // Ann.Appl.Biol., 1948.- 417p.

80. Beachy R.N., Zaitlin M„ Bruening G., Israel H.W. Virology.- 1976. № 73.-P.498-507.

81. Bergman E.L., Boyle J.S. Effect of tobacco mosaic virus on the mineral content of tomato leaves // Phytopathology, 1962. № 52.- P.956-057.

82. Brown P. Т.Н., Lange F.D., Kranz E., Lorz H. Analysis of single protoplaste RAPD technology// Mol. Gen. Genet., 1993.- V. 237.- P. 311-317.

83. Boyle J.S., Bergman E.L. Factors affecting incidence and severity of internal browning of tomato in deucedly tobacco mosaic virus // Phytopathology, 1967. № 57.- P.354-362.

84. Caron M., Lachance R.O. Une forme de bigarrure de la tomate // Phytopro-tection, 1978.- V.59. № 2.- P.76-84.

85. Chang W.N. The influence of temperature and relative humidity on onion pollen germination// Hort. Science, 1975.- V.10.- P. 162-163.

86. Cirulli M, Alexander L.J. Influence of temperature and of tobacco mosaic virus on resistance in a tomato breeding line derived from Lycopersicon peruvianum II Phytopathology, 1969. № 59.- P.l287-1297.

87. Clark A.F., Adams A.N. II General Virology, 1977.- V.34. №3.- P.475-483.

88. Demeke Т., Adams R.P., Chibbar R. Potential taxonomic use of random amplified polymorphic DNA (RAPD): A cese study in Brassica II Theor. Appl. Genet., 1992.-V. 84.-P. 990-994.

89. European Haudbook of Plant. Descases.- Oxford, Boston, Polo Alfo, Mel-burn, Blackwell Scientefie Publications.- 1989.- 583p.

90. Foolad M.R., Jones R.A., Rodriguez R.K. RAPD-markers for constructing intraspecific tomato genetic maps // Plant Cell Rep., 1995.- V.12.- P.293-297.

91. FoolandM.R., Subbiah P., Kramer C., Hargrove G., Lin G.Y. Genetic relationships among cold, salf and drought tolerance during sud germination in an interspecific cross of tomato // Euphytica, 2003.- V.130. №2.- P.199-206.

92. Fukuoka S., Hasaka K., Kamujima O. Use of random amplified polymorphic DNAs (RAPDs) for identification of rise accessions // J. Japn. Genet., 1992.-V.67.- P. 243-252.163020 L., Li H.-M. II Yichuan Hereditas (Beijing).- 2003.- V. 25. №3.-P.361-366.

93. Goelet P., Lomonossoff G.P., Butler P.J.G., Акат M.E., Gait M.J., Karn J. Proceedings ofNational Academy of Sciences USA.- 1982. №79.- P.5818-5822.

94. Hallig V.A., Jensen E. Tomat // Vaeksthusinfo, Kobenhavn, 1975.

95. Halterlein A. J., Clayberd C.D., Teare I. D. Influence of high temperature on pollen grain viability and pollen tube growth in the styles of Phaseolus vulgaris L. II J. Amer. Soc. Hort. Sci., 1980.- V.105.- P. 12-14.

96. Jiang X.-c., Ни J.-h., Liu H., Zhou H.-g., Luo H.-j.,Chen L.-b. Hunan shifan daxue ziran kexue xeubao // J. Natur. Sci Hunan Norm.- 2003. 26. №3.- P.83-85, 89.

97. Kausche G.A., Stuble H. Uber die Entstehung einer mit Rontgenstrehien in-duzierten. "Mutation" des Tabakmosaikvirus // Naturmissensch.- 1939.- V.27.-801 p.

98. Khush G.S. et al. Genetic activity in a heterochromatic chromosome segment of the tomato // Science, 1964.- V.145.- P. 1432-1434.lA.Kendrik J.B., Troxel A.W., Harding R.B. TMV concentration in availability // Physiopathology.- 1953.- V.43.- 477p.

99. Kikuta K., Frazier W.A. Preliminary report on breeding tomatoes for resistance to tobacco mosaic virus // Proceedings of Am.Soc.Hort.Science.- 1947. № 49.-P.256-262.

100. H6.Kimmins W.C. The effect of darkening on the susceptibility of French bean to tobacco necrosis virus // Can. J. Botany.- 1967. № 45.- P.543-553.

101. Kohler E. Die Virusanfulligkeit der Blatter in Abhondigkein von ihrer So-cuenz an Sprof. Versuche mit dem Tabakmosaik virus an Nicotiana glutinosa L. // Biol.Zol.- 1966.- B. 85.- P. 1-5.

102. Leobenstein G., Rabina S.,van Praagh T. Induced interferetce phenomena in virus infections. In "Viruses of Plants" // North Holland Publ.- 1968.- P.151-157.

103. Linskens H.F. Pollen as a tool of the plant breeder// Biol. Zbl.- 1987.-V.106. № 1.-P.3-11.mioyns J.M., Raison J.K. I I Plant Physiology.- 1979.- V.45. № 4.- P.368-389.

104. Luu D. Т., Heizmann P., Dumas C. Pollen- stigma adhesion in kale is not dependent on the self-(in) compatibility genotype // Plant Physiol.- 1997.- V.115. №3.- P.1221-1230.

105. Lyakh V.A., Soroca A.I. Influence of low temperature treatment of maizemicrogametophytes in F on the structure and cold tolerance of resulting populations // Maydica.- 1993.- V. 38. P. 67-71.

106. Maluf et al. Relationship between fatty acid composition and low-^ temperature seed germ ination in tomato // Amer. Soc. Hortic. Science.- 1982.1. V.102. №4.-P. 620-623.

107. Merett M.J. The respiration rate of tomato stem tissue infected by tomato aucuba mosaic virus // Ann. Botany.- 1960. № 24.- P.223-231.

108. Meshi Т., Motoyoshi F. et al. Mutations in the Tobacco Mosaic Virus 30-kD Protein Gene Overcome Tm-2 Resistance in Tomato // The Plant Cell., 1989.- V.I.-P.515-552.

109. Muztu D.L. Acorrelation between gametophytic and sporophytic characteristics in Zea mays L. // Science.- 1971. № 171.- P. 1155-1156.

110. Wie J., Zhou X. Effect of replacing the movement protein gene of Tobacco mosaic virus by of tomato mosaic virus // Virus Res., 2002. № 87 (1).- P.61-67.

111. Wilson J.B., Gallegly M.E. The interrelationship of potato and tomato races of Phytophthora infestans // Phytopathology.- 1955.- V. 45.- P. 473-476.

112. Mulcahy D.L. The Rise of the Angiosperms: a Genecogical Factors // Science.- 1979.- V.206. № 4414.- P.20-23.

113. Mulkahy В. II Nature.- 1974.- V.249. P.491.201 .Nishiguchi M. et al. Further investigation of a temperature sensitive strain of tobacco mosaic virus: its behaviour in tomato leaf epidermis // J.Gen.Virol., 1980.- V.46.- P.497-500.

114. Nishiguchi M., Motoyoshi F. Resistance mechanisms of tobacco mosaic virus strains in tomato and tobacco / Evered, Harnett (eds). Plant resistance to viruses, J. Wiley and Sons, Chichester.- 1987.- P.38-46.

115. Ohno T. et al. Single amino acid substitution in 30k protein of TMV defective in virus transport function // Virology.- 1983.- V.131.- P.255-258.

116. Pelham J. Necrosis of Tm-22/+ plants // Report of the Tomato Genetics Cooperative.- 1970. № 20.- P.36-40.

117. Pelham J. Strain-genotype interaction of tobacco mosaic virus in tomato // Annals of Applied Biology.- 1972. №71.- P.219-228.

118. Pfahler P.L. Comparative effectiveness of pollen genotype selection in Higher Plants // Biology and Implications for Plant Breedings.- 1983.- P.361-366.

119. Procter C.H., Fry P.R. Seed transmission of tobacco mosaic virus in tomato // N.L.Z.Agric.Res.- 1965. № 8.- P.367-369.

120. Raison J.K., Orr G.R. II Plant Physiology.- 1986.- V.80. № 3.- P.638-646.211 .Rast A. Variability of tobacco mosaic virus in relation to control of tomato mosaic in glasshouse tomato crops by resistance breeding and cross protection, 1972.

121. A.Rudich J., Zamski E., Yael Regev Genotypic variation for sensitivity to High Temperature in the tomato: pollination and fruit-set. // Bot. Car., 1977,- V. 138. №4. p. 448-452.

122. Scarlat A. II An.Univ.Bucuresti Biol., 1978.- V.7.- P.83-88.2\%.Sehgal O.P., Krause G.F. Virology, 1968.- V.2.- P.966-971.

123. Singer В., Frenkel-Conret H. Mutagenicity of alkyl and nitro-alkyl compounds activing on tobacco mosaic virus and ita RNA // Virology.- 1969.- V.3. №3.-P.395-399.

124. Sobir, Ohmori Т., Murata M., Motoyoshi F. Molecular characterization of the SCAR markers tightly linked to the Tm-2 locus of the genus Lycopersicon II Theor.Appl.Genet., 2000.- V. 101.- P.64-69.

125. Takahaschi W.N. Respiration of virus-infected plant tissue and effect of light on virus multiplication // Amer.J.Bot., 1947.- V.34.- 496 p.

126. Takahashi Т., Hirai Т. Effect of tobacco mosaic virus infection on amino acid incorporation into isolated mitochondria from tobacco leaves // Phisiol. Planta-rum.- 1965. № 19.- P.888-889.

127. Takamatsu N., Ohno Т., Meshi Т., Okada Y. II Nucleic Acids Resear ch., 1983.- № 11.- P.3767-3778.

128. Taliansky S.D. et al. Plant virus-specific transport function // Virology.-1982.- V.122.- P.318-326.

129. Tanksley S.D., Zamir D., Rick C.M. Evidence for extensive overlap of sporophytic gene expression in Lycopersicon esculentum // Science.- 1981.-V.213.- P.453-455.

130. Tanksley S.D., Bemachi D. et al. Yield and Quality Evaluations on a Pair of Processing Tomato Lines Nearly Isogenic for the Tm-2(a) Gene for Resistance to the Tobacco Mosaic-Virus // Euphytica.- 1998.- V.99. Iss.2.- P.77-83.

131. Villaread R.L., Lai S.H., Wong S.H. Screening for heat tolerance in the genus Licopersicon II Hort. Sci.- 1978.- V.13. № 4.- P. 479-481.

132. Weathers L., Pound G. Host nutrition in relation to multiplication of tobacco mosaic virus in tobacco // Physiopathology.- 1954.- 74p.231 .Watanabe Y., Meshi Т., Okada Y. И FEBS Letters., 1984. №173.- P.247-250.

133. Watanabe Y., Kishibayashi N., Motoyoshi F., Okada Y. Characterization of Tm-1 gene action on replication of common isolates and a resistance-breaking isolate of TMV // Virorlogy.- 1987.- V.161.- P. 527-532.

134. Weber H., Ohnesorge S., Silber M.N., Phitzner A.J. The Tomato mosaic virus 30kDa movement protein interacts differentially with the resistance genes Tm-2 and Тт-22 II Arch. Virol., 2004.

135. Weber H., Phitzner A.J. Tm-22 resistance in tomato requires recognition of the carboxy terminus of the movement protein of tomato mosaic virus // Mol.Plant Microbe Interact., 1998. №11(6).- P.498-503.

136. Weber H., Schultze S., Phitzner A.J. The amino acid substitutions in tomato mosaic virus 30-kilodalton movement protein confer the ability to overcome the Tm-22 resistance gene in the tomato // G. Virol., 1993. № 67 (11).- P.6432-6438.

137. Williams J.G.K., Kubelik A.R., Livak К J., Rafalski J.A., Tingey S.V. DNA polimorphism amplified by arbitrary primers are use ful as genetic marcers // Nuck. Asiads. Res.- 1990.- V.18. № 22.- P.6531-6535.

138. Zamir D., Tanksley S.D., Jones R.A. II Theor. and Appl. Genet., 1981.- V. 59. №4.- P.235-238.

139. Zamir D., Vallejos E. Temperature effects on haploid selection of tomato microspores and pollen grains // Biol, and Implic. for Plant Breed.- 1983.- P.335-342.