Сравнительная характеристика амперометрических холинэстеразных сенсоров на основе углеродистых материалов для детектирования остаточных количеств пестицидов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.16, кандидат химических наук Гоголь, Эллина Владимировна

• Гоголь, Эллина Владимировна
• кандидат химических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат химических наук Гоголь, Эллина Владимировна

СПИСОК УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ И СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. Токсикологическая характеристика химических средств защиты растений и их количественное определение.

1.1. Пестициды: общая характеристика.

1.1.1. Терминология и классификация.

1.1.2. Инсектициды.

1.1.3. Механизм ингибирования холинэстеразы фосфорорганическими и карбаминатными пестицидами.

1.2. Методы определения карбаминатных и фосфорорганических пестицидов.

1.2.1. Физико-химические методы.

1.2.2. Биохимические методы.

1.3. Принципы конструирования холинэстеразных биосенсоров.

1.3.1. Иммобилизация холинэстераз.

1.3.2. Организация амперометрического сигнала.

Глава 2. Экспериментальная часть.

2.1. Материалы и реагенты.

2.2. Приборы и методы эксперимента.

Глава 3. Общая характеристика амперометрических биосенсоров на основе углеродистых материалов.

3.1. Характеристики формирования аналитического сигнала на электродах из различных углеродистых материалов.

3.2. Условия функционирования биосенсоров на основе углеродных электродов.

3.2.1. Биосенсоры на основе эпоксидно-углеродных композиций.

3.2.2. Биосенсоры на основе печатных электродов с нафионовым покрытием.

Глава 4. Оптимизация условий определения токсикантов антихолинэстеразного действия.

4.1. Влияние органического растворителя.

4.2. Модельные растворы пестицидов.

4.2.1. Тонкопленочные печатные электроды.

4.2.2. Влияние условий иммобилизации фермента.

4.2.3. Биосенсоры на основе объемных электродов из эпоксидно-графитовой композиции.

4.3. Ингибирующее действие фторидов.

4.3.1. Тонкослойные печатные биосенсоры.

4.3.2. Объемные эпоксидно-графитовые электроды.

4.4. Анализ реальных объектов окружающей среды.

4.4.1. Определение остаточных количеств пестицидов в образцах растительного материала.

4.4.2. Анализ остаточного содержания пестицидов в экстрактах из груши и перца.

4.4.3. Сравнительная характеристика печатных биосенсоров (межлабораторный эксперимент).

ВЫВОДЫ.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ БИБЛИОГРАФИЧЕСКИХ ИСТОЧНИКОВ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сравнительная характеристика амперометрических холинэстеразных сенсоров на основе углеродистых материалов для детектирования остаточных количеств пестицидов»

Растущий поток загрязняющих веществ, поступающих в окружающую среду, предъявляет все более жесткие требования к эколого-аналитическому контролю их остаточных количеств. Это связано как с постоянным расширением числа токсикантов, в том числе образующихся вторично в окружающей среде в результате превращения первичных загрязнителей, так и с углублением наших представлений о токсическом действии загрязняющих веществ и отдаленных последствиях загрязнения. Как следствие, ужесточаются гигиенические нормативы присутствия экотоксикантов в воде, почве и продуктах питания. Не менее важен и другой аспект этой проблемы - усложнение химического анализа приводит к постоянно растущему разрыву между временем пробоотбора и временем фактического получения информации о состоянии окружающей среды. Это повышает риск поступления токсических веществ в питьевые воды и продукты питания, ограничивает оперативное управление экологической ситуацией в целом.

Решение указанных проблем состоит в развитии методов биохимической диагностики, ориентированных на оценку токсического эффекта наиболее опасных загрязнителей. Перспективным направлением развития таких методов является сочетание ферментов, отличающихся высокой чувствительностью к экотоксинам - специфическим ингибиторам, и средств автоматизированного контроля - химических сенсоров. Благодаря количественной оценке токсического эффекта появляется возможность не только повысить информативность биохимического мониторинга, но и решать некоторые задачи экотоксикологии (экологическое нормирование, моделирование токсикации организма на молекулярном уровне, установление механизма метаболической трансформации и т.д.).

Холинэстеразы являются одними из наиболее исследованных ферментов, используемых в ферментативных методах контроля окружающей среды. Это связано с уникально широким кругом ингибиторов холинэстераз, в числе которых пестициды, поверхностно-активные вещества, соли тяжелых металлов. Однако примеры практического использования холинэстераз весьма ограничены. Это связано с проблемами стабилизации фермента при хранении и применении, сложности интерпретации отклика и необходимостью реактивации ингибированного фермента после каждого определения. Попытки упростить процедуру измерения путем создания одноразовых сенсоров на основе технологий микропечати не продвинулись дальше пилотных образцов, поскольку воспроизводимость отклика биосенсоров в производимой серии и быстрая инактиавация холинэстераз в процессе хранения не позволяют получить надежного и воспроизводимого сигнала в присутствии токсикантов в объектах окружающей среды.

Внедрение средств биохимической диагностики в практику экологического мониторинга требует в первую очередь решить вопросы надежности аппаратурного оснащения, сопряжения биологического компонента и средства измерения. В этой связи настоящая работа, посвященная развитию теоретических и практических основ конструирования холинэстеразных биосенсоров и их применения для определения пестицидов в объектах окружающей среды, является актуальной.

Вышесказанное определяет цель настоящей работы, которая состоит в создании и сравнительной характеристике новых биосенсоров на основе углеродистых материалов и современных модифицирующих материалов для определения остаточных количеств фосфорорганических и карбаминатных пестицидов в объектах окружающей среды.

Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи:

- исследовать различные углеродистые материалы и способы получения сенсоров на их основе с целью снижения рабочего потенциала и повышения воспроизводимости сигнала;

- изучить формирование амперометрического отклика биосенсора, стабильность иммобилизованной холинэстеразы и аналитические характеристики определения фосфорорганических и карбаминатных пестицидов;

- установить механизм влияния модифицирующего слоя нафиона на операционные и аналитические характеристики биосенсоров, определить рабочие условия нанесения модифицирующего покрытия;

- провести сравнительные испытания амперометрических сенсоров в стационарном и проточно-инжекционном режиме для определения фосфорорганических пестицидов;

- изучить влияние органических растворителей и обратимых эффекторов на отклик биосенсоров и его чувствительность к фосфорорганическим пестицидам

- оценить эффективность применения биосенсоров в экспресс-оценке остаточных количеств пестицидов в растительной продукции, в том числе в рамках межлабораторного эксперимента с участием Центра фитофармации Перпиньянского университета (Перпиньян, Франция).

Научная новизна работы заключаются в том, что:

- впервые установлена возможность селективного определения сигнала биосенсора (тока окисления тиохолина) на основе углеродистых материалов и снижения рабочего потенциала окисления в присутствии модифицирующего слоя нафиона без использования медиаторов электронного переноса;

- впервые показано, что нанесение модифицирующего слоя ионообменного полимера между основным материалом электрода и иммобилизованным ферментом не только стабилизирует отклик биосенсора, но и повышает чувствительность и селективность определения фосфорорганических пестицидов;

- установлено активирующее влияние ацетонитрила на нативную и иммобилизованную холинэстеразу и на этой основе достигнуто снижение пределов обнаружения фосфорорганических пестицидов в водно-органических экстрактах из зерна;

- определены пути повышения чувствительности и селективности определения пестицидов за счет регулирования удельной активности и толщины ферментсодержащего слоя для биосенсоров на основе печатных углеродных электродов и за счет нестационарного режима массопереноса реагентов в ферментсодержащем слое и сорбционного предконцентрирования на материале мембраны в проточно-инжекционном режиме. Практическая значимость работы состоит в том, что:

- разработаны простые в производстве и удобные в использовании амперометрические биосенсоры на основе планарных углеродных электродов, изготовляемых методом микропечати, позволяющие детектировать присутствие фосфорорганических и карбаминатных пестицидов в воде и растительных экстрактах на уровне нормативов ПДК;

- предложены упрощенные методики ферментативного определения остаточных количеств пестицидов из растительных экстрактов без удаления органического растворителя;

- разработаны и апробированы конструкции проточных ячеек для проточно-инжекционного определения пестицидов.

Положения, выносимые на защиту:

- сравнительная характеристика операционных и аналитических характеристик биосенсоров на основе печатных и объемных электродов из углеродистых материалов, выявление экспериментальных факторов (состав ферментсодержащего слоя, материал электрода, режим массопереноса в мембрану), определяющих чувствительность и селективность определения ингибиторов;

- механизм влияния стабилизирующего слоя нафиона, стабилизирующего отклик биосенсора и повышающий чувствительность и селективность определения остаточных количеств пестицидов;

- влияние органического растворителя на активность нативной и иммобилизованной холинэстеразы и возможность прямого определения остаточных количеств пестицидов в экстрактах без удаления растворителя

- сравнительная оценка результатов контроля реальных объектов окружающей среды с помощью разработанных биосенсоров и стандартных методов хроматографического анализа, метрологическая характеристика биосенсоров в межлабораторном эксперименте.

Апробация работы. Результаты исследований докладывались на итоговой научной конференции Казанского государственного университета (1999 г.), 2 Всероссийском симпозиуме по проточному анализу (Москва, 1999), Международном конгрессе по аналитической химии (Москва, 1997), 3 международном симпозиуме INCO Copernicus "Применение биосенсоров для определения загрязнителей в полевых условиях" (Коимбра,

1998), 7 Международном симпозиуме по электроаналитической химии ESEAC-98 (Коимбра, 1998), 4 Франко-испанском семинаре по биосенсорам (Монпелье, Франция,

1999), 5 Франко-испанском семинаре (Вик, Испания, 2000).

Основные результаты изложены в 2 статьях и 5 тезисах докладов.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 173 страницах машинописного текста, включает 49 рисунков и 16 таблиц. Состоит из Введения, 4 глав, Выводов, Списка использованных библиографических источников, включающего 229 ссылок на отечественные и зарубежные работы, и Приложения.

Заключение диссертации по теме «Экология», Гоголь, Эллина Владимировна

ВЫВОДЫ

1. Использование углеродистых композиций для изготовления сенсоров и модификация их поверхности нафионом позволяют улучшить операционные и аналитические характеристики амперометрических холинэстеразных биосенсоров для определения остаточных количеств фосфорорганических (хлорпирифос, трихлорфон, кумафос) и карбаминатных (метиокарб) пестицидов по сравнению с аналогичными биосенсорами на основе металлических электродов.

2. Нанесение нафиона на поверхность печатных планарных электродов стабилизирует отклик биосенсоров, увеличивает время их жизни до 6 месяцев и снижает мешающее влияние ионов - эффекторов фермента за счет электростатического торможения их переноса к поверхности сенсора. Чувствительность определения фосфорорганически и карбаминатных пестицидов в 1.5-2 раза выше, а предел обнаружения - в в 2-5 раз ниже, чем для биосенсоров на основе немодифицированных электродов.

3. Иммобилизация холинэстеразы в парах глутарового альдегида позволяет получить сверхтонкие ферментсодержащие пленки, не создающие диффузионного торможения переноса компонентов реакции к поверхности сенсора. В результате расширяется диапазон определяемых концентраций и увеличивается чувствительность определения ингибиторов по сравнению с толстослойными мембранами, получаемыми путем кросс-сшивки раствором глутарового альдегида. Увеличение удельной активности фермента снижает чувствительность определения необратимых ингибиторов.

4. В проточно-инжекционных условиях чувствительность определения пестицидов с помощью иммобилизованной холинэстеразы повышается за счет сорбционного предконцентрирования ингибиторов. Действие обратимых эффекторов снижается в результате нестационарных условий их переноса в ферментсодержащую мембрану.

5. Ацетон и этанол в концентрации до 25 % снижают, а ацетонитрил в концентрации до 20 % увеличивает активность нативной и иммобилизованной холинэстеразы. Оценка

144 ингибирующего действия ацетонитрильиых экстрактов из зерна пшеницы, ячменя, риса позволяет определять фосфорорганические пестициды на уровне установленных норм.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Гоголь, Эллина Владимировна, 2000 год

1. Биосенсоры: основы и приложения./ Под ред. Тернера Э, Карубэ И, Уилсона Дж.- М.: Мир, 1992,-615 с.

2. Богдановская В.А, Гаврилова Е.Ф., Тарасевич М.Р. Влияние состояния углеродных сорбентов на активность иммобилизованных фенолоксидаз.// Электрохимия,- 1986.- Т.22.-№ 6.- С.742-746.

3. Бресткин А.П., Кузнецова Л.П., Никольская Е.Б. Влияние природы субстрата, этанола и фосфатного буфера на торможение бутирилхолинэстеразного гидролиза обратимыми ингибиторами.// Укр.биохим.журн.-1991,- Т.63.- № 5.- С.51-57.

4. Будников Г.К., Каргина О.Ю, Абдуллин И.Ф. Переносчики электронов в электрохимических методах анализа.// Журн.анал.химии.- 1989.- Т.44.- № 10.- С.1733-1752.

5. Будников Г.К., Медянцева Э.П., Бабкина С.С, Волков A.B. Влияние ионов металлов на каталитическую активность иммобилизованной холинэстеразы.// Журн.анал.химии.-1989.- Т.44.- № 12,- С.2253-2257.

6. Будников Г.К., Евтюгин Г.А., Ризаева Е.П., Иванов А.Н., Латыпова В.З. Сравнительная оценка электрохимических биосенсоров для определения ингибиторов загрязнителей окружающей среды.// Журн.аналит.химии.- 1999.- Т.54.- №9.- С.973-982.

7. Варфоломеев С.Д., Гуревич К.Г. Биокинетика. Практический курс. М.: Фаир-Пресс, 1999.-720 с.

8. Евтюгин Г.А, Будников Г.К., Галяметдинов Ю.Г., Сунцов Е.В. Амперометрическое определение эфиров тиохолина в присутствии бутирилхолинэстеразы.// Журн.аналит. химии,- 1996.- Т.51.- №4.- С.424-427.

9. Евтюгин Г.А, Стойкова Е.Е, Искандеров Р.Р, Никольская Е.Б, Будников Г.К. Электрохимическая пробоподготовка в ферментативном определении ингибиторов холинэсте-раз.// Журн.аналит. хим.- 1997.- Т.52.- №1.- С.6-10.

10. Евтюгин Г.А., Стойкова Е.Е., Никольская Е.Б., Будников Г.К. Влияние ионов металлов на колориметрическое определение необратимых ингибиторов холинэстеразы.// Журн. анал.химии.- 1997.- Т.52,- № 2,- С.188-192.

11. Евтюгин Г.А., Муслинкина JI.A., Будников Г.К., Казакова Э.Х. Потенциометрический холинэстеразный биосенсор с мембраной, модифицированной калике-4.резорци-нолареном.// Журн.аналит.химии.- 1999.- Т.54.- №9.- С.973-982.

12. Клисенко М.А., Письменная М.В. Хроматоферментный метод определения остаточных количеств фосфорорганических пестицидов в продуктах питания и объектах окружающей среды.// Журн.анал.химии.- 1988,- Т.43,- № 2.- С.354-359.

13. Кузнецова Л.П., Никольская Е.Б. Влияние солевого состава среды и этанола на холинэстеразный гидролиз некоторых субстратов.// Укр.биохим.журн,- 1988.- Т.60.- № 4,- С.35-40.

14. Кулис Ю.Ю. Аналитических системы на основе иммобилизованных ферментов. Вильнюс: Мокслас, 1981,- 200 с.

15. Кулис Ю.Ю., Виджюнайте P.A. Определение ароматических аминов с использованием ферментных электродов.// ЖАХ.- 1983,- Т.38,- Вып.З.- С.484-487.

16. Майстренко В.Н., Хамитов Р.З., Будников Г.К. Эколого-аналитический мониторинг супертоксикантов. М.: Химия, 1996.- 319 с.

17. В.Маршалл Основные опасности химических производств. М.Мир, 1989,- 671 с.

18. Медянцева Э.П., Будников Г.К., Бабкина С.С. Ферментный электрод на основе иммобилизованной холинэстеразы.// Журн.анал.химии.- 1990.- Т.45.- № 7.- С.1386-1389.

19. Мельников H.H. Пестициды. Химия, технология и применение. М.: Химия, 1987.-712 с.

20. Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. М.: Госхимкомиссия при МСХ СССР, 1977, ч.8.-192 с.

21. Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. М.: Госхимкомиссия при МСХ СССР, 1979, ч.9,- 289 с.

22. Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. М.: Госхимкомиссия при МСХ СССР, 1980, ч.Ю.-117 с.

23. Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. М.: Госхимкомиссия при МСХ СССР, 1981, ч.11.- 306 с.

24. Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. М.: Госхимкомиссия при МСХ СССР, 1982, ч.12,- 301 с.

25. Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. М.: Госхимкомиссия при МСХ СССР, 1983, ч.13.- 262 с.

26. Методы определения микроколичеств пестицидов./ Под ред. Клисенко М.А.- М.: Колос, 1977,- 367 с.

27. Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде./ Под ред. Клисенко М.А.- М.: Колос, 1983.- 304 с.

28. Методы определения микроколичеств пестицидов./ Под ред. Клисенко М.А.- М.: Колос, 1984.-256 с.

29. Никольская Е.Б. Применение ферментов для изучения состава некоторых гидроксо-комплексов.// Журн.анал.химии.- 1983.- Т.38.-№ 1.- С.5-11.

30. Никольская Е.Б., Бузланова М.М., Ягодина О.В, Перышкова O.E., Годовиков И.Н. Константы ингибирования как критерий чистоты биологически активных соединений ингибиторов ферментативных реакций.//Докл.АН СССР.- 1989.- Т.309.- № 1.- С.144-147.

31. Никольская Е.Б., Евтюгин Г.А. Применение холинэстераз в аналитической химии.// Журн.анал.химии.- 1992.- Т.47.- № 8.- С.1358-1377.

32. Никольская Е.Б., Евтюгин Г.А., Шеховцова Т.Н. Проблемы и перспективы применения ферментов в анализе объектов окружающей среды.// Журн.анал.химии,- 1994.- Т.49.- № 5,- С.452-461.

33. Никольская Е.Б., Евтюгин Г.А., Искандеров P.P., Латыпова В.З. Потенциометрические сенсоры для определения ингибиторов холинэстераз.// Журн.аналит.химии.- 1996.- Т.51.-№5.- С.561-565.

34. Никольская Е.Б., Юринская В.Е., Дидина С.Е., Шерстобитов А.О. Влияние ионов таллия и цинка на активность иммобилизованной холинэстеразы // Вестник С.-Пб. ун-та. 1997. - Сер.4. - № 1. - С.79-85.

35. Никольская Е.Б., Моралев С.Н. Кинетические методы идентификации ингибитров ферментативных реакций.//Докл АН РФ.-1997.- Т.354,- № 6,- С.780-782.

36. О'Брайен Р. Токсичные эфиры кислот фосфора. М.: Мир, 1964.- С.93-138.

37. Овчинников Ю.А. Основы биоорганической химии. М.: Просвещение, 1987. 815 с.

38. Оксенгендлер Г.И. Яды и противоядия. Л.: Химия, 1982.- 182 с.

39. Перес-Бендито П., Сильва М. Кинетические методы в аналитической химии. М.: Мир, 1991.-395 с.

40. Разумас В.Й., Ясайтис Ю.Ю., Кулис Ю.Ю. Амперометрические ферментные электроды на основе углеродистых материалов./ ВИНИТИ.- Вильнюс, 1984.

41. Резник B.C., Аникиенко К.А., Курочкин В.К., Акамсин В.Д., Галяметдинова И.В., Бычи-хин Е.А. Новый класс ингибиторов холинэстераз: тетраалкилаамониевые производные 6-метилурацила и аллоксазина.// Докл.АН РФ.-1998.- Т.362.- № 1.- С.68-70.

42. Розенгарт В.И., Шерстобитов O.E. Избирательная токсичность фосфорорганических ин-сектоакарицидов. Л.: Наука, 1974.- 174 с.

43. Справочник по пестицидам: Гигиена применения и токсикология./ Сост. Седокур Л.К., под ред. Павлова A.B.- 3-е изд., испр. и доп.- Киев: Урожай, 1986.- 432 с.

44. Страйер Л. Биохимия. М.: Мир, 1984. Т.1.- 232 с.

45. Тонкопий В.Д., Куценко С.А., Загребин А.О., Шерстнева Л.А. Теоретическое и экспериментальное обоснование разработки новых методов биоиндикации антихолинэстеразных соединений в водной среде.// Журн.эколог.химии.- 1993.- № 2.- С.133-137.

46. Тривен М. Иммобилизованные ферменты. М.: Мир, 1983.- 218 с.

47. Фершт Э. Структура и механизм действия ферментов. М.: Мир, 1980.- 432 с.

48. Яковлев В.А., Волкова Р.И. Кинетика взаимодействия холинэстеразы с необратимыми ингибиторами.// Докл АН СССР.- 1959,- Т.128.- № 4.- С.843-846.

49. Яковлев В.А. Кинетика ферментативного катализа. М.: Наука, 1965. 248 с.

50. Adams R.N. Electrochemistry at solid Electrodes./ Marcel Dekker, INC.- New York.- 1969.-P.19.

51. Aldridge W.N. Some properties of specific cholinesterase with particular reference to the mechanism of inhibition by diethyl-p-nitrophenyl thiophosphate (E605) and analogues.// BiochemJ.- 1950.- V.46.- P.451-460.

52. Alles G., Hawes R.C. Cholinesterases in the blood of man.// J.Biol.Chem.- 1940.- V.133.- № 3.- P.375-390.

53. Ayyagari M.S., Kamtekar S., Pande R., Marx K.A., Kumar J., Tripathy S.K., Kaplan D.L. Biosensors for pesticide detection based on alkaline phosphatase-catalyzed chemilumines-cence.// Mat.Sci.Eng. C-Bio.- 1995,- V.2.- N 4.- P.191-196.

54. Bachmann T.T., Schmid R.D. A disposable multielectrode biosensor for rapide simultaneous detection of the insecticides paraoxon and carbofuran at high resolution.// Anal.Chim.Acta.-1999,- V.401.- P.95-103.

55. Basanta R., Nunez A., Lopez E., Fernandez M., Diaz-Fierros F. Measurement of cholinesterase activity inhibition for the detection of organophosphorus and carbamate pesticides in water.// InternJ.Environmental Studies.- 1995.-V.48.- P.211-219.

56. Bauman E.K., Goodson L.H., Guilbault G.G., Kramer D.N. Preparation of immobilized cholinesterase for use in analytical chemistry.// Anal.Chem.- 1965.- V.37.- №11,- 1378-1381.

57. Bender M.L., Stoops J.K. Titration of the active sites of acetylcholinesterase.// J.Amer. Chem.Soc. 1965. - V.87. - № 7. - P.1622-1623.

58. Berck B., Iwata Y., Gunther F. Worker environment research: rapid field method for estimation organophosphorus insecticides residues on citrus foliage and in grove soil.// J.Agricult.Food.Chem.-1981.- V.29.- №2,- P.209-216.

59. Bernabei M, Cremisini C, Mascini M, Palleschi G. Determination of organophosphorus and carbamic pesticides with a choline and acetylcholine electrochemical biosensor.// Anal. Letters. -1991,- V.24.- № 8.- P.1317-1332.

60. Bernabei M, Chiavarini C, Mascini M, Palleschi G. Anticholinesterase activity measurement by a choline biosensor application in water analysis.//Biosens. Bioelectron.- 1993.- №.8.- P. 265-271.

61. Bhatia S.K, Cooney M.J, Shriver-Lake L.C, Fare T.L, Ligler F.S. Immobilization of acetylcholinesterase on solid surfaces: chemistry and activity studies.// Sensors Actuators B.- 1991.-№3.-P.311-317.

62. Bhattacharya S, Alsen C, Kruse H, Valentin P. Detection of organophosphate insecticide by an immobilized-enzyme systeme.// Environ. Sci.Technol.-1981,- V.15.- №11.- P.1352-1355.

63. Blaicher G, Pfannhauser W, H.Woidich// Chromatographia.- 1980,- V.13.- P.438.

64. Bougherra M.L. Les poisons du tiers-monde./ La Découverte.- 1985.

65. Bouillie bordelaise.// Comptes rendus du colloque commemoratif du centenaire de la bouillie bordelaise.- 1985.-BCPC Pub, 2A Kidderminster Road, Croydon CRO 2UE (UK).- V. 1,2.

66. Bushway R.J, Fan Z. Complementation of GC-AED and ELISA for the determination of diazi-non and chlorpyrifos in fruits and vegetables.// J.Food.Protection.- 1998.- V.61.- №6.- P.708-711.

67. Budnikov H.C, Evtugyn G.A. Electrochemical biosensors for inhibitor determination: selectivity and sensitivity control.// Electroanalysis.- 1996.- V.8.- № 8-9.- P.817-820.

68. Bull. QMS.//1986.- V.64.- P. 177.

69. Budnikov H.C., Medjantsewa E.P., Babkina S.S. An enzyme amperometric sensor for toxicant determination.// J.Electroanal.Chem.- 1991.- V.310.- №1-2,- P.49-55.

70. Budnikov H.C., Evtugyn G.A. Electrochemical biosensors for inhibitor determination: selectivity and sensitivity control.// Electroanalysis.- 1996.- V.8.- № 8-9,- P.817-820.

71. Cagnini A., Palchetti I., Mascini M., Turner A.P.F. Ruthenized screen-printed choline oxidase-based biosensors for measurement of anticholinesterase activity.// Microchim.Acta.- 1995.-V.121.- P.155-166.

72. Cagnini A., Palchetti I., Lionti I., Mascini M., Turner A.P.F. Disposable ruthenized screen-printed biosensors for pesticides monitoring.// Sensors Actuators B.- 1995.- V.24-25.- P.85-89.

73. Campanella L., Achilli M., Sammartino M.P., Tomassetti M. Butyrylcholine enzyme sensor for determining organophosphorus inhibitors.// Biochem.Bioenergetics.-1991.- V.26.- P.237-249.

74. Campanelle L., De Luca S., Sammartino M.P., Tomassetti M. A new organic phase enzyme electrode for the analysis of organophosphorus pesticides and carbamates.// Anal.Chim.Acta.-1999.- V.385.- P.59-71.

75. Cholinesterase-Hemmtest. Screening Test zur Bestimmung von Cholinesterase hemmenden Organophosphat- und Carbamat-Pestiziden in Wasser. / Boehringer Mannheim GmbH, Mannheim. Cat.№ 1293460.

76. Clark L.C.Jr., Lyons C. Electrode systems for continuous monitoring in cradiovascular surgery.//Ann.N. Y.Acad. Sei.- 1962.- V.102.- P.29-45.

77. Corbett J.R. The biochemical mode of action of pesticides./ Acad.Press.- 1974.- P. 107.

78. Coulet P.R. What is biosensor?// Biosensor: Principle and Applications.- Blum L.J., Coulet P.R. Editors.-1991.- Marcel Dekker.- Inc. New York.- P. 1 -6.

79. Davis T.J., Malaney G.W. Acetylcholinesterase inhibition a new parameter of water pollution.// Water Sewage Works.- 1967.- V.l 14.- № 7.- P.272-274.

80. Dehlawi M.S., Eldefrawi A.T, Eldefrawi M.E., Anis N.A., Valdes J.J. Choline derivatives and sodium fluoride protect acetylcholinesterase against irreversible inhibition and aging by DFP and paraoxon.// J.Biochem.Toxicol.- 1994,- V.9.- № 5,- P.261-268.

81. Deltaméthrine.// Monographie Roussel-UCLAF.-1982.- 102, route de Noisy 93230 Romain-ville.

82. Deng Q., Dong S.J. The effect of substrate and solvent properties on the response of an organic phase tyrosinase electrode.// J.Electroanal.Chem.- 1997.- V.435.- № 1 -2.- P. 11 -15.

83. Diehl-Faxon J., Ghindilis A.L., Atanasov P., Wilkins E. Direct electron transfer based tri-enzyme electrode for monitoring of organophosphorus pesticides.// Sensors Actuators B.-1996.- V.36.- № 1-3,- P.448-457.

84. Dumschat C, Muller H., Stein K., Schwedt G. Pesticide sensitive ISFET based on enzyme inhibition.// Anal.Chim. Acta.-1991.- V.252.- № 1-2.- P.7-10.

85. Durand P., David A., Thomas D. An enzyme electrode for acetylcholine.// Biochim. Biophys.Acta.- 1978,- V.527.- P.277-281.

86. Durand P., Thomas D. Use of immobilized enzyme coupled with an electrochemical sensor for the detection of organophosphate and carbamate pesticides.// JEPTO.- 1984.- №5.- P.51-57.

87. Du Tingfa, Zhou Shiguang, Tang Mousheng A new micro-detection tube for cholinesterase inhibition in water.// Environ.Pollut.- 1989.-V.57.- № 3.- P.217-222.

88. Dzyadevich S.V., Schul'ga A.A., Soldatkin A.P., Nyamsi Hendji A.-M., Jaffrezic-Renault N., Martelet C. Conductometric biosensors based on cholinesterases for sensitive detection of pesticides.// Electroanalysis.- 1994.- V.6.- P.752-758.

89. Ellman G.L., Courtney K.D., Andres V., Featherstone R.M. A new and rapid colorimetric determination of acetylcholinesterase activity.// Biochem. Pharmacol. 1961.- V.7.- № 1.- P.88-95.

90. El Yamani H., Tran-Minh C., Abdul M., Dupont M. Automatic unit for measurement of toxicity of river water.// J.Fr.Hydrol.- 1987.- V.18.- № 1.- P.67-75.

91. El Yamani H., Tran-Minh C., Abdul M.A., Chavanne D. Automated system for pesticide detection.// Sensors Actuators.- 1988,- V.15.- P.193-198.

92. Everett W.R., Rechnitz G.A. Mediated bioelectrocatalytic determination of organophosphorous pesticides with a tyrosinase-based oxygen biosensor.// Anal.Chem.- 1998.- V.70.- № 4.-P.807-810.

93. Evtugyn G.A., Budnikov H.C., Nikolskaya E.B. Influence of surface-active compounds on the response and sensitivity of cholinesterase biosensors for inhibitor determination.// Analyst.-1996.- V.121.- №12.- P.1991-1915.

94. Evtugyn G.A., Rizaeva E.P., Stepanova N. Ju., Petrov A.M. Preliminary testing of waste and sewage waters based on Cholinesterase biosensor.// Environ.Radiology.Applied.Ecology.-1997.- V.3.- №1.- P.7-12.

95. Evtugyn G.A., Rizaeva E.P., Stoikova E.E., Budnikov H.C. The application of Cholinesterase Potentiometrie biosensor for preliminary screening of the toxicity of waste waters.// Elec-troanalysis.-1997.- V.9.- №14,- P.l 124-1128.

96. Evtugyn G.A., Budnikov H.C., Nikolskaya E.B. Sensitivity and selectivity of electrochemical enzyme sensors for inhibitor determination.// Talanta.- 1998.- V.46.- №5.- P.465-484.

97. Evtugyn G.A., Ivanov A.N., Gogol E.V., Marty J.L., Budnikov H.C. Amperometric flow-through biosensor for the determination of Cholinesterase inhibitors.// Anal.Chim.Acta.- 1999.-V.385.- №1-3.- P.13-21.

98. Fernandez-Band B., Linares P., Luque de Castro M.D., Valcarcel M. Flow-through sensor for the direct determination of pesticide mixtures without chromatographic separation.// Anal.Chem.-1991,-V.63.-P. 1672-1675.

99. Fest C., Schmidt K.-J. The chemistry of organophosphorus pesticides.// Springer-Verlag. -1973.- Berlin Heidelberg New York.

100. Fournier J. Chimie des pesticides./ Agence de Cooperation Culturelle et Technique.- 13, quai André Citroën 75015 Paris.- Cultures et Techniques.- 23, rue recteur Schmitt 44072 Nantes CEDEX 3.- 1988.

101. Ghindilis A.L., Morzunova T.G., Barmin A.V., Kurochkin I.N. Potentiometrie biosensors for cholinesterases inhibitor analysis based on mediatorless bioelectrocatalysis.// Bio-sens.Bioelectron.- 1996,- V.ll.- № 9.- P.873-880.

102. Giang A.P., Hall S.A. Enzymatic determination of organic phosphorus insecticides.// Anal.Chem.-1951.- V.23.-№ 12,- P.1830-1834.

103. Gillespie A.M., Walters S.M. Rapid clean-up of fat extracts for organophosphorus pesticide residue determination using Ci8 solid-phase extraction cartridges.// Anal.Chim.Acta.- 1991.-V.245.- P.259-265.

104. Gilson M.K., Straatsma T.P., MacCammon J.A., Ripoll D.R., Faerman C.H., Axelsen P.H., Silman I., Sussman J.L. Open "back door" in a molecular dynamics simulation of acetylcholinesterase.// Science.- 1994,- V.263.- P.1276-1278.

105. Goodson J.H., Jacobs W.B., Davis A.W. An immobilized cholinesterase product for use in the rapid detection of enzyme inhibitors in air and water.// Anal.Biochem.- 1973.- V.5L- № 2.-P.362-367.

106. Goodson L.H., Jacobs W.B. Monitoring of air and water for enzyme inhibitors.// Methods Enzymol.- 1976.- V.44.- P.647-658.

107. Grass R., Scheller F., Shao M.J., Lui C.C. Electrochemical determination of cholinesterase activity using a thik-film metallized platinum electrode.// Anal.Lett.- 1989.- Vol.22.- N 5.-P.1159-1169.

108. Guilbault G.G., Kramer D.N., Cannon P.L. Electrochemical determination of organophosphorous compounds.//Anal.Chem.- 1962.- V.34.- P. 1437-1442.

109. Guilbault G.G., Sadar M.H., Zimmer M. Analytical applications of the phosphatase system. Determination of bismuth, beryllium and pesticides.// Anal.Chim.Acta.- 1969.- V.44.- P.361-367.

110. Guilbault G.G., Sadar M.H., Kuan S.S. Casey D. Enzymatic methods of analysis. Trace analysis of various pesticides with insect cholinesterases.// Anal.Chim.Acta.- 1970.- V.52.- № 1,-P. 1770-1774.

111. Giinther A., Bilitewski U. Characterisation of inhibitors of acetylcholinesterase by an automated amperometric flow-injection system.// Anal.Chim.Acta.- 1995.- V.300.- P.l 17-125.

112. Hall E.A.H.// Biosensors.- Bryant J.A, Kennedy J.F. Editors.- 1990,- ISBN.- Buckingem.

113. Harel M., Schalk I, Ehret-Sabatier L, Bouet F, Goeldner M, Hirth C, Axelsen P.H, Sil-man I, Sussman J.L. Quaternary ligand binding to aromatic residues in the active gorge of acetylcholinesterase.// Proc.Natl.Acad.Sci USA.- 1993.- V.90.- P.9031-9035.

114. Harel M, Sussman J.L, Krejci E, Bon S, Chanal P, Massoulie J, Silman I, Conversion of acetylchlolinesterase to butyrylcholinesterase: modelling and mutagenesis.// Proc.Natl. Acad. Sei. USA.- 1992,- V.89.- P.10827-10831.

115. Hartley I.C, Hart J.P. Amperometric measurement of organophosphate pesticides using a screen-printed disposable sensor nad biosensor based on cobalt phtalocyanine.//Anal.Proc.-1994,-V.31.- P.333-337.

116. Hassel F. A. The chemistry of pesticides./ Verlag Chemie.- 1982.- P.97.

117. Holan G, Smith D.R.J.// Experientia.-1986.- №42,- P.558.

118. Hollinghaus J .G.II Pestic.Biochem.Physiol.- 1987.- №27.- P.61.

119. Imato T, Ishibashi N. Potentiometrie butyrylcholine sensor for organiophosphate pesticides.//Biosens.Bioelectron.- 1995.- V.10.- P.435-441.

120. Index phytosanitaire ACTA. 35e edition.// Association de Coordination Technique Agricole.- 1999.-149, rue de Bercy 75595 Paris CEDEX 12.

121. L'Industrie mondiale de phytosanitaire.// DAFSA.- 1983.- 7, rue Bergère 75009 Paris.

122. InQuest OP/Carbamate Screen, Ohmicron, Newtown, PA, USA.

123. Ivanov A.N., Evtugyn G.A, Gyurcsânyi R.E, Tôth K, Budnikov H.C. Cholinesterase based electrochemical sensors for pesticide determination.// Anal.Chim.Acta.- 2000.-V.404.-P.55.

124. Jdanova A.S., Poyard S., Soldatkin A.P., Jaffrezic-Renault N., Martelet C. Conductometric urea sensor. Use additional membranes for the improvement of its analytical characteristics.// Anal.Chim.Acta.- 1996.- V.321.- P.35-40.

125. Jensen F.S., Viby-Mogensen J. Anaesthesia and abnormal plasma cholineseterase./ "Cho-linesterases, structure, function, mechanism, genetics and cell biology" .Proc. 3rd Intern. Meeting on Cholinesterases (Ed. Massouliu J.).-1991.- P.336-338.

126. Khayyami M., Perez Pita M.T., Garcia N.P., Johansson G., Danielsson B., Larsson P.-O. Development of an amperometric biosensor based on acetylcholine esterase covalently bound to a new support material.// Talanta.- 1998.- V.45.- P.557-563.

127. Kierstan M.P.J., Coughlan M.P. Immobilization of cells and enzymes by gel entrapment.// Immobilized cells and enzymes: a practical approach.- Woodward J. Editor.- 1985,- IRL Press.-P.39-74.

128. Kobatake E., Niimi T., Haruyama Y., Aizawa M. Biosensing of benzene derivatives in environment by luminescent Esherichia coli.// Biosens.Bioelectron.- 1995.- V.10.- № 6-7.- P.601-606.

129. Koput J. Spectre de micro-ondes.// J.Mol.Spectroscopy.- 1986.- V.l 15.- P.131.

130. Kuhr R.J., Dorough H.W. Carbamate insecticides: chemistry, biochemistry and toxicology./ CRC Press.- 1976.

131. Kulys J.J, D'Costa J. Printed amperometric sensor based on TCNQ and cholinesterase.// Biosens.Bioelectron.-1991.-V.6.- P.109-115.

132. Kutner W, Wang J, L'her M, Buck R.P. Analytical aspects of chemically modified electrodes: classification, critical evaluation and recommendations (IUPAC Recommendations 1998).//Pure.Appl.Chem.- 1998.- V.70.- № 6.- P.1301-1318.

133. La Rosa C., Pariente F., Hernandez L, Lorenzo E. Determination of organophosphorus and carbamic pesticides with an acetylcholinesterase amperometric biosensor using 4-aminophenyl acetate as susbtrate.//Anal.Chim. Acta.- 1994.- V.295.- P.273-282.

134. Leon-Gonzalez M.E, Townshend A. Flow-injection determination of paraoxon by inhibition of immobilized acetylcholinesterase.// Anal.Chim.Acta.- 1990,- V.236.- P.267-272.

135. Leon-Gonzalez M.E, Townshend A. Determination of organophosphorus and carbamate pesticide standards by liquid chromatography with detection by inhibition of immobilized acetylcholinesterase.// J.Chromatogh.-1991.- V.539.- P.47-54.

136. Leuzinger W, Baker A.L.// Proceeding of Nat.Acad.Sci.- 1967.-Washington.- V.57.- P.446.

137. Linares P, Castro L, Valcarel M. Integrated reaction and photometric detection with enzymes immobilized in the flow cell of a flow injection system.// Anal.Chim.Acta.- 1990.-V.230.- P.199-302.

138. Liu, D.H, Yin A.F, Chen K, Ge K, Nie L.H., Yao S.Z. Determination of trace-level of mercury(II) based on the inhibition of urease using saw/impedance enzyme transducer.// Anal.Letters.- 1995.- V.28.- № 8,- P.1323-1337.

139. Lorelle V. Phytoma Défense des cultures./ 380,- 1985.- P.5.

140. Manuel of pesticide residue analysis.// DFG.- Pesticide commission.- Thier H-P., Zeumer H. Editors.- 1987.- VCH, Weinheim.- V.l.

141. Marco M.P., Barcelo D. Environmental applications of analytical biosensors.// Measur.Sci Technol.- 1996.- V.7.- № 11.- P. 1547-1562.

142. Martorell D., Cespedes F., Martinez-Fabregas E., Alegret S. Amperometric determination of pesticides using a biosensor based on a polishable graphite-epoxy biocomposite.// Anal.Chim. Acta.- 1994.- V.290.- № 3.- P.343-348.

143. Marty J.-L., Mionetto N., Rouillon R. Entrapped enzymes in photocrosslinlable gel for enzyme electrodes.//Anal.Lett.- 1992.- №8.- P.1389-1398.

144. Marty J.-L., Sode K., Karube I. Biosensors for the detection of organophosphate and carbamate insecticides.// Electroanal.- 1992.- V.4.- P.249-252.

145. Mascini M., Ianello M., Palleschi G. Enzyme electrodes with improved mecanical and analytical characteristics obtained by binding enzymes to nylon nets.// Anal.Chim.Acta.- 1983.-V.146.- P.135-148.

146. Matsumura F. Toxicology of insecticides./ Plenum Press.- 1975.- P.141.

147. McCosker P.J. Babesiosis/ ed. Ristic M., Kreier J.P.- Academic Press, NY.-1981.- P.l-24.

148. Mendez J.H., Martinez R.C., Martin J.S.// Anal.Chem.- 1986.- V.58.- P.1969.

149. Méthodes multirésidus de determination par chromathographie en phase gazeuse de résidus de pesticides (aliments non gras)./ Norme européenne EN 12393-2: 1998.- Ed. Ass.Franç.Norm. (AFNOR).- Tout Europe.- 1999.

150. Mionetto N., Rouillon R., Marty J.-L. Inhibition of acetylcholinesterase by organophosphorus and carbamate compounds. Studies on free and immobilized enzymes.// Zeitschrift.Wasser.Abwasser.Forschung.- 1992.- V.25.- P.171-174.

151. Mionetto N., Marty J.-L., Karube I. Acetylcholinesterase in organic solvents for the detection of pesticides. Biosensor application. // Biosens.Bioelectron.- 1994.- V.9.- P.463-470.

152. Mizutani F., Tsuda K. Amperometric determination of cholinesterase with use of an immobilized enzyme electrode.// Anal.Chim.Acta.- 1982,- V.139.- P.359-362.

153. Morelis R.M., Coulet P.R. Highly sensitive biosensor for choline and acetylcholine determination with fast immobilization of bi-enzyme system on a disposable membrane.// Anal.Chim.Acta.-1991,- V.231.- P.27.

154. Mortensen M.L. Pediatric Clinics of North America.- 1986.- V.33.- P.421.

155. Mostafa F.I.Y., Karns J.S., Mulbry W.W. An enzyme based assay for differential determination of coumaphos and potasan in cattle dips.// J.Environ.Sci.Health.-1999.- V. B34.- №2,-P. 193-205.

156. Mulchandani A., Pan S., Chen W. Fiber-optic enzyme biosensor for direct determination of organophosphate nerve agents.// Biotechnol.Prog.- 1999.- Vol.15.- N 1.- P. 1304.

157. Ngen-Ngwainbi J., Foley P.H., Kuan S.S., Guilbault G.G. Parathion antibodies on piezoelectric crystals.// J.Americ.Chem.Soc.- 1986.- V.108.- P.5444-5447.

158. Nikolskaya E.B., Evtugyn G.A., Budnikov H.C. Development and application of potenti-ometric and amperometric cholinesterase electrodes for environmental analysis.// Current Separations.- 1993.- V.12.- №2.- P. 122.

159. Nunes G.S., Skladal P., Yamanaka H., Barcelo D. Determination of carbamate residues in crop samples by cholinesterase-based biosensors and chromatographic techniques.// Anal.Chim. Acta.- 1998.- V.362.- № 1.- P.59-68.

160. Nwosu T.N., Palleschi G., Mascini M. Comparative studies of immobilized enzyme electrodes based on the inhibitory effect of nicotine on choline oxidase and acetylcholinesterase.// Anal.Letters.-1992.- V.25.- №5.- P.821-835.

161. Palchetti I., Cagnini A., Del Carlo M., Coppi C., Mascini M., Turner A.P.F. Determination of anticholinesterase pesticides in real samples using a disposable biosensor .// Anal.Chim.Acta.- 1997.- V.337.- P.315-321.

162. Palleschi G., Lavagnini M.G., Moscone D., Pilloton R., D'Ottavio D., Evangelisti M.E. Determination of serum cholinesterase activity and dibucaine numbers by an amperometric choline sensor.//Biosens.Bioelectron.- 1990.- V.5.- P.27-35.

163. Rapport annuel de l'UIPP (Union des industries de la protection des plantes)/ 1986.

164. Recueil de normes d'agropharmacie AFNOR.// Chimie, eau, techniques agricoles, forêts.-1983.-Tout Europe.- 92080 Paris La Défense CEDEX 07.

165. Rehak M., Snejdarkova M., Hianik T. Acetylcholine minisensor based on metal-supported lipid bilayers for determination of environmental pollutants.// Electroanalysis.- 1997.- V.9.- № 14,-P. 1072-1077.

166. Ripoll D.R., Faerman C., Axelsen P.H., Silman I., Sussman J.L. An electrostatic mechanism for substrate guidance down the aromatic gorge of acetylcholinesterase.// Biochem.-1993.-V.90.-P.5128-5132.

167. Rippeth J.J., Gibson T.D., Hart J.P., Hartley I.C., Nelson G. Flow-injection detector incorporating a screen-printed disposable amperometric biosensor for monitoring organophosphate pesticides.//Analyst.- 1997.- V.122.- P.1425-1429.

168. Ristori C., Del Carlo C., Martini M., Barabaro A., Ancarani A. Potentiometric detection of pesticides in water samples.// Anal.Chim.Acta.- 1996.- V.325.- P.151-160.

169. Rogers K., Foley M., Alter S., Koga P., Eldefrawi M. Light addressable potentiometric biosensor or the detection of anticholinesterases.// Anal.Letters.-1991.- V.24.- № 2.- P.191-198.

170. Rogers K.R., Williams L.R. Biosensors for environmental monitoring: a regulatory perspective.// Trends in Anal.Chem.- 1995.- V.14.- № 7.- P.289-294.

171. Rogers K.R., Gerlach C.L. Environmental biosensors. A status report.// Environ. Sci Tech-nol.- 1996.- V.30.- № 1.- P.486A-491A.

172. Sadar M.H., Kuan S.S., and Guilbault G.G. Trace analysis of pesticides using cholinester-ase from human serum, rat liver, electric eel, bean leaf beetle, and white fringe beetle.// Anal.Chem.-1970.-V.42.- № 14.- P.1770-1774.

173. Satoh I. Colorimetric biosensing of heavy metal ions with the reactor containing the immobilized apoenzyme.// Ann.N.Y.Acad.Sci.-1990.- V.613.- № 10.- P.401-404.

174. Satoh I. An apoenzyme thermister microanalysis for zinc(2+) ions with use of an immobilized alkaline phophatase reactor in a flow system.// Biosens.Bioelectron.- 1991.- V.6.- №4.-P.275-279.

175. Schmid R.D., Karube I. Biosensors and bioelectronics.// Biotechnol., Rehm H.J., Reed G. Editors, VCH Verlag, Weiheim.- 1988.- V.6b.- P.317-365.

176. Schumacher M., Camp S., Maulet Y., Newton M., MacPhee-Quigley K., Taylor P. Primary structure of Torpedo Californica acetylcholinesterase, deduced from cDNA sequences.// Nature.- 1986.- V.319.- P.407-409.

177. Simon D., Helliwell S., Robards K. Analytical chemistry of chlorpyrifos and diuron in aquatic ecosystems.// Anal.Chim.Acta.- 1998.- V.360.- P. 1-16.

178. Skladal P. Determination of organophosphate and carbamate pesticides using a cobalt phtalocyanine-midified carbon paste electrode and a cholinesterase enzyme membrane.// Anal.Chim.Acta.-1991.- V.252.- P.ll-15.

179. Skladal P., Mascini M. Sensitive detection of pesticides using amperometric sensors based on cobalt phtalocyanin-modified composite electrodes and immobilized cholinesterases.// Biosens. Bioelectron.- 1992,- V.7.- № 5.- P.335-343.

180. Skladal P. Detection of organophosphate and carbamate pesticides using disposable biosensors on chemically modified electrodes and immobilized cholinesterase.// Anal.Chim.Acta.-1992.- V.269.- P.281-287.

181. Skladal P, Pavlik M, Fiala M. Pesticide biosensor based on coimmobilized acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase.// Anal.Letters.- 1994.- V.27.- № 1.- P.29-40.

182. Skladal P, Fiala M, Krejci J. Detection of pesticides in the environment using biosensors based on cholinesterases.// Inter.J.Environ.Anal.Chem.- 1996.- V.65.- P.139-148.

183. Skladal P, Krejci J. Performance of the amperometric biosensor with immobilized butyrylcholinesterase in organic solvents.// Coll.Czecjoslloovak.Chem.Commun.- 1996.- V.61.- № 7.-P.985-991.

184. Skladal P. Biosensors based on cholinesterase for detection of pesticides.// Food Tech-nol.Biotechnol.- 1996.-V.34.-№ 1.-P.43-49.

185. Skladal P, Nunes G.S, Yamanaka H, Riberio M.L. Detection of carbamate pesticides in vegetables samples using cholinesterase-based biosensor.// Electroanalysis.- 1997,- V.9.- № 14.- P.1083-1087.

186. Sounders B.C., Holmes-Siedle A.G, Stark B.P. Peroxidase. The properties and uses of a versatile enzyme and of some related catalysts. London: Butterworths, 1964.- 271 p.

187. Spear R.C, Poppendorf W.J, Spencer W.F, Milby T.N.// J.Occup.Med. -1977.- V.19.-P.411.

188. Stanley Ch. New approaches to immunoassays and biosensors.// World Biotech. Rept.-1988.- P.291-299.

189. Starodub N.F, Kanjuk N.I, Kukla A.L, Shirshov Yu.M. Multi-enzymatic electrochemical sensopr: field measurements and their optimization.// Anal.Chim.Acta.- 1999.- Vol.385.-P.461-466.

190. Stedman E, Stedman E, Easson L.H. Cholinesterase. An enzyme present in the blood-serum of the horse.// Biochem.J.- 1932,- V.26.- № 8.- P.2056-2066.

191. Su Y.S, Cagnini A, Mascini M. Screen-printed biosensor alkaline-phosphatase based for environmental applications.// Chem.Amalityczna.- 1995.- V.40.- № 4.- P.579-585.

192. Sussman J.L., Harel M., Frolow F, Oefher C., Goldman A., Toker L, Silman I. Atomic structure of acetylcholinesterase from Torpedo californica: A prototypic acetylcholine-binding protein.// Science.-1991.- V.253.- P.872-879.

193. Tran-Minh C. Immobilized enzyme probes for determing inhibitors.// Ion-Selec.Electrode Rev.- 1985.- V.7.-P.41-75.

194. Tran-Minh C., Pandey P.C., Kumaran S. Studies on acetylcholine sensor and its analytical application based on the inhibition of Cholinesterase.// Biosens.Bioelectron.- 1990.- V.5.-P.461-471.

195. Trevan M.D. Immobilized Enzymes./An Introduction and Applications in Biotechnology.-Ed. J.Wiley and Sons.- 1980.- Chichester.

196. Turdean G, Peter I., Popescu I.C., Oniciu L. An acetylcholinesterase amperometric microbiosensor for the detection of dipterex.// Rev.Roumane de Chimie.- 1997.- V.42.- № 9.- P.879-883.

197. Turner A.P.F. New trends in biosensor development./ NATO Advanced Research Workshop Kiev (Vorzel), July 6-9. 77 p.

198. Turner A.P.F. Current trends in biosensor research and developement.// Sensors Actuators.-1989.-V.17.- P.433-450.

199. Uris L. Trinité.// Laffont R.- S.A.- 1977.

200. U.S. EPA Pesticide Industry Sales and Usage: 1992 and 1993 Market Estimates.// Office of pesticide programms.- Washington, DC.-1984.

201. Villatte F., Marcel V., S.Estrada-Mondaca, Fournier D. Engineering sensitive acetylcholinesterase for detection of organophosphate and carbamate insecticides.// Biosens. Bioe-lectron.- 1998.- V.13.- № 2.- P.157-164.

202. Vlasov Y., Bratov A., Levichev S., Tarantov Y. Enzyme semiconductor sensor based on butyrylcholinesterase.// Sensors Actuators B.-1991.- V.l 1.- P.283-286.

203. Wallace K.B., Kemp J.R. Species specificity in the chemical mecanisms of organophospho-rus anticholinesterase activity.// Chem.Research.Toxicol.-1991.- V.4.- №1.- P.41-49.

204. Walters S.M. Clean-up techniques for pesticides in fatty foods.// Anal.Chim.Acta.- 1990.-V.236.- P.77-82.

205. Weintraub H.J.R., Hopfinger A.J. Molecular and quantum pharmacology./ Ed. Bergmann E., Pullman B., D. Reidel Pub.- 1974,- P.131.

206. Wiles R., Davies K., Campbell C. Overexposed: Organophosphate Insecticides in Children's Food./ Environmental Working Group.- 1998.- Washington, DC.

207. White S.F., Turner A.P.F., Schmid R.D., Bilitewski U., Bradley J. Investigations of platinized and rhodinized carbon electrodes for use in glucose sensors.// Electroanalysis.-1994.- V.6.- № 8,- P.625-632.

208. Wolfbeis O.S., Koller E. Fiber optic detection of pesticides in drinking water.// Biosensors: Fundamentals, Technologies and applications.- Scheller F., Schmid R.D. Editors, GBF Monographs.- 1992.-V.17.- P.221-224.