Совершенствование технологии промышленного производства и обеспечение качества лечебной сыворотки крови свиней тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат наук Глушенкова Юлия Александровна

• Глушенкова Юлия Александровна
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Глушенкова Юлия Александровна

2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1 Биологическая характеристика возбудителя рожи свиней

2.1.1 Открытие ЕгуБ1ре1о1Ьпх гИшюра^ае

2.1.2 Распространение рожи свиней

2.1.3 Систематическое положение

2.1.4 Строение микробной клетки Егув1ре1о1Иг1х гИшюра^ае

2.1.5 Морфологические и тинкториальные свойства

2.1.6 Культуральные свойства

2.1.7 Биохимические свойства

2.1.8 Антигенная структура

2.1.9 Устойчивость

2.1.10 Активность и специфичность штаммов возбудителя рожи свиней

2.1.11 Эпизоотологические данные

2.2 Клинические признаки

2.3 Иммунитет

2.4 Лечение рожи свиней

2.4. Средства и методы профилактики рожи свиней

2.4.1 Вакцины

2.4.2 Гипериммунная противорожистая сыворотка

2.5 Технологические аспекты производства гипериммунных сывороток крови животных

2.6 Системы обеспечения качества лечебных и иммунологических препаратов 40 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

3.1 Материалы

3.1.1 Штаммы микроорганизмов

3.1.2. Контроль штаммов бактерий рожи свиней

3.1.3. Средства терапии

3.1.4. Реактивы

3.1.5. Лабораторная посуда

3.1.6. Лабораторное оборудование

3.1.7. Реакторы

3.2 Методы

3.2.1 Приготовление перевара Хоттингера (ПХ)

3.2.2 Приготовление бульона Хоттингера

3.2.3 Изготовление и контроль главного и рабочего банков бактерий рожи свиней

3.2.4 Изготовление посевного материала (ПМ)

3.2.5 Культивирование микроорганизмов

3.2.6 Приготовление рожистого антигена

3.2.7 Отбор и подготовка животных-доноров к эксплуатации

3.2.8 Схема гипериммунизации волов-продуцентов

3.2.9 Схема обработки крови

3.2.10 Электрофорез гипериммунных сывороток крови в полиакриламидном геле

3.2.11 Контроль превентивной активности гипериммунной сыворотки против рожи свиней

3.2.12 Железосодержащий препарат (ЖСП)

3.2.13 Определение цитохромов

3.2.14 Иммуномодулирующее средство (ИМС) «Иммунофарм»

3.2.15 Статистика

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

4 СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ ПРОИЗВОДСТВА И ОБЕСПЕЧЕНИЯ КАЧЕСТВА СЫВОРОТКИ ПРОТИВ РОЖИ СВИНЕЙ

4.1. Оптимизация и стандартизация технологии производства гидролизатных питательных сред

4.2 Совершенствование и стандартизация технологии производства и обеспечение качества антигена против рожи свиней

4.2.1 Характеристика и паспортизация штаммов для изготовления и контроля активности рожистого антигена

4.2.2 Совершенствование и оптимизация технологических процессов культивирования бактерий рожи свиней

4.2.3 Влияние железосодержащего препарата «Пептофер» на эффективность культивирования бактерий рожи свиней

4.2.4 Масштабирование производства и обеспечение качества антигена бактерий рожи свиней

4.3 Совершенствование технологии производства и обеспечение качества сыворотки против рожи свиней

4.4 Система обеспечения качества серийного производства сыворотки против рожи свиней

4.5 Технико-экономическое обоснование инноваций в технологии производства и обеспечения качества сыворотки против рожи свиней

4.6 Лечебная и профилактическая эффективность сыворотки против рожи свиней

5 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

6 ВЫВОДЫ

7 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

8 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

9 ПРИЛОЖЕНИЯ

УСЛОВНЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

АА - аминный азот БА - бактериальный антиген БХ - бульон Хоттингера ПХ - перевар Хоттингера ВИ - вода для инъекций ВО - вода очищенная

ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения ВП - волы продуценты СК

ВГНКИ - Всероссийский Государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов Д - доза заражения

ИБП - иммунобиологические препараты

ККТ - критические контрольные точки

ММ - микробиологический метод

НД - нормативная документация

ПМ - посевной материал

ПС - питательная среда

ГПС - гидролизная питательная среда

СК- сыворотка крови

РП - регламент производства

СМК- система менеджмента качества

СТО - стандарт организации

ТП- технологические процессы

ТУ - технологические условия

УФ - ультрафильтрация

ФБР - фосфатно-буферный раствор

ЭФ - метод электрофореза

GMP - Good manufacturing practice (надлежащая производственная практика)

GLP - Good Laboratory Practice (надлежащая лабораторная практика)

LD50/см3- 50% - ная летальная доза

M.S. -Master Seed (главный посевной материал)

W.S. -Working Seed (рабочий посевной материал)

P.S. - Production Seed (производственный посевной материал)

S.L.S -Seed Lot System (система посевных материалов

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Совершенствование технологии промышленного производства и обеспечение качества лечебной сыворотки крови свиней»

1 ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Рожа свиней - это септическое антропозоонозное заболевание, особенно молодняка, которое характеризуется лихорадкой, септицемией и воспалительной эритемой кожи, а при хроническом течении -эндокардитом и артритами. Рожу свиней (РС) считают наиболее распространенным заболеванием весьма опасным для поросят, которое регистрируется практически в России, европейских странах, а также в Японии, Корее, США, Канаде и прочих государствах, причиняя значительный ущерб свиноводству, который слагается из убытков от гибели, вынужденного убоя и расходов, связанных с введением ограничений, лечением и массовой иммунизацией животных [5, 9, 18, 103, 108].

Возбудитель рожи (Erysipelothrix rhusiopathiae, E. insidiosa) относится к повсеместно встречаемым бактериям. Он обнаруживается в организме клинически здоровых свиней в миндалинах, кишечнике, желчном пузыре, у грызунов и насекомоядных, рыбах, клещах, а также выделен из различных органических субстратов (речного ила, городских сточных вод) и многих других источников) [4, 10].

Для профилактики и лечения РС предложен широкий спектр химиотерапевтических (ХТП) и иммунобиологических (ИБП) препаратов, а также лечебных сывороток крови (СК), которые достаточно эффективны, не утратили своей значимости и востребованы практикой. Это обусловлено тем, что, несмотря на активную профилактику болезни с помощью живых и инактивированных вакцин рожа свиней постоянно регистрируется в свиноводческих хозяйствах РФ и зарубежных стран. Отмечено также, что технология изготовления СК является чрезвычайно трудоемкой, сложной, и не соответствует требованиям международных стандартов, что послужило основанием для совершенствования и стандартизации средств и методов для получения более эффективного препарата. В последние годы рядом авторов предложена усовершенствованная технология получения гипериммунной СК против РС на волах-продуцентах (ВП), которая

запатентована, но не внедрена в производство. Поэтому исследования, направленные на разработку и совершенствование технологии серийного производства и обеспечения качества лечебного препарата, для профилактики и лечения являются весьма актуальными и востребованными практикой [14, 18, 49, 119].

При разработке и внедрении в практику более эффективной технологии производства сыворотки против РС на ВП возник целый ряд научных и технологических проблем, которые решались в данной работе.

Степень разработанности проблемы. Проблеммам производства и контроля, качества гипериммунных СК, предназначенных для профилактики и лечения заболеваний сельскохозяйственных животных бактериальной этиологии посвящено большое количество работ отчественных и зарубежных авторов [90, 91, 92, 100, 137, 157]

В настоящее время биологическая промышленность изготавливает около 16 видов моновалентных и поливалентных СК, в том числе против РС, технология производства этих препаратов несовершенна, а также не отвечает требованиям международных и отечественных стандартов. Для повышения качества и эффективности производства гипериммунных сыворотк крови животных рекомендуется использовать современное оборудование и оптимальные технологические решения при получении антигена, оптимизации процессов подготовки и иммунизации животных-доноров с учетом требований «Системы обеспечения качества», правил GMP и ГОСТ Р 52249-09. Необходимо также учитывать требования практики в более активных СК против РС и обязательно применять в производстве «Систему посевных материалов» - Seed Lot System [1, 8, 74, 88, 126, 136].

Проектный подход при изготовлении гипериммунных сывороток, в том числе против РС, не приобрел широкого применения на практике, поэтому исследования, направленные на изучение потребностей, метаболизма и более эффективного размножения микроорганизма, а также поиска иммуномодулирующих средств, повышающих активность целевого продукта,

являются актуальными и востребованными. При реализации указанных целей предусматривается решение широкого спектра научных и технологических задач, в том числе повышение активности, эффективности и экономичности производства лечебных сывороток, как на отечественном, так и международном рынках. Поэтому разработка и внедрение в производство этих инноваций является первостепенной задачей биопредприятия при производстве сыворотки против рожи свиней

Цель и задачи исследований. Цель работы - усовершенствование технологии промышленного производства, и обеспечение качества и эффективности гипериммунной СК против рожи свиней.

Для выполнения поставленной цели выполнялись следующие задачи:

- разработать технологические схемы серийного производства исходных материалов и гипериммунной сыворотки против РС;

- оптимизировать условия культивирования бактерий РС;

- оценить воздействие и эффективность железосодержащего препарата «Пептофер» на интенсивность размножения бактерий рожи свиней стационарным и периодическим способами;

- масштабировать методы и процессы изготовлния бактериального антигена;

- обосновать возможность и перспективность применения иммуномодулирующего средства «Иммунофарм» для повышения активности сыворотки против РС;

- оптимизировать схему гипериммунизации и эксплуатации волов -продуцентов;

- экономически обосновать замену свиней - на волов-продуцентов при изготовлении сыворотки против РС;

- реализовать на практике систему обеспечения качества и экономичности производства гипериммунной сыворотки против РС.

Практическое решение данных задач позволит разработать и реализовать на предприятии эффективную схему получения гипериммунной сыворотки против РС с максимальными титрами специфических антител.

Научная новизна. Научно - обоснован единый подход к разработке и совершенствованию процессов производства и обеспечения качества сыворотки против РС в соответствии с требованиями стандартов серии ИСО 9000, правил GMP и ГОСТ 52249-2009.

- Оптимизированы и стандартизированы технологические процессы изготовления и контроля качества исходных материалов.

- Определены оптимальные технологические параметры стационарного и периодического культивирования, позволяющего существенно интенсифицировать процессы размножения, сократить время, повысить уровень накопления и жизнеспособность рожистых бактерий.

- Научно - обосновано применение железосодержащего препарата «Пептофер» для интенсификации процессов размножения и повышения уровня накопления рожистых бактерий.

- Впервые для повышения эффективности процессов подготовки, гипериммунизации и эксплуатации волов - продуцентов предложен препарат «Иммунофарм», обеспечивающий стимуляцию процессов антителообразования и повышения активности сыворотки против РС.

- Усовершенствованы и оптимизированы процессы производства и система обеспечения качества сыворотки против РС.

Практическая значимость работы.

- Усовершенствована и улучшена экономическая составляющая технологии производства активной сыворотки для профилактики и лечения РС.

- Отработаны условия периодического культивирования, наиболее подходящие для рожистых бактерий и требования к качеству антигена для гипериммунизации животных-продуцентов.

- Доказано стимулирующее влияние железосодержащего препарата «Пептофер» на интенсивность размораживания и уровень накопления рожистых бактерий стационарным и периодическим способами.

- Реализовано масштабирование процессов культивирования рожистых бактерий и определены требования к качеству антигена для гипериммунизации животных-продуцентов.

- Экономически обоснована и экспериментально проверена замена свиней на волов-продуцентов, предназначенных для получения сыворотки против РС.

- Определена схема и эффективность применения иммуномодулирующего препарата «Иммунофарм» для повышения активности сыворотки против РС.

- Внедрены в производство «Система обеспечения качества» лечебной сыворотки против РС и «Система посевных материалов» (Seed Lot System) в соответствии с требованиями стандартов ГОСТ ИСО 9001-2011, правил GLP, GMP и ГОСТ 52249-2009.

- Реализуется на практике «Система управления качеством» с использованием статистических методов контроля и соответствия активности лечебного препарата стандартным показателям технологических процессов производства сыворотки против рожи свиней.

- Для практического использования разработаны и внесены в НТД изменения в технологические процессы производства и методы контроля качества сыворотки против РС.

Экономический эффект от внесенных преложений и разработанных инноваций составил 3348233 рублей.

Положения диссертации, выносимые на защиту:

- схема подготовки и контроля посевных материалов для производства бактериального антигена;

- параметры технологических процессов при периодическом культивировании рожистых бактерий;

- применение железосодержащего препарата «Пептофер» для повышения накопления рожистых бактерий при производстве антигена РС;

- усовершенствование схемы подготовки, гипериммунизации и эксплуатации животных - продуцентов с использованием препарата «Иммунофарм» при производстве сыворотки против РС;

- система обеспечения качества с применением статистических методов контроля исходного сырья, полуфабриката и готовой продукции и постоянный мониторинг показателей технологических процессов, и их коррекция при серийном производстве сыворотки против РС;

- экономическая эффективность технологических инноваций при производстве сыворотки против РС.

Внедрение результатов. Усовершенствованные технологические решения реализованы на «Армавирской биофабрике» при изготовлении и контроле исходных материалов, оптимизации условий периодического культивирования рожистых бактерий с использованием железосодержащего препарата «Пептофер», подготовке стандартного по активности антигена и совершенствования схемы подготовки, гипериммунизации и эксплуатации волов-продуцентов с применением препарата «Иммунофарм». Внедрение в практику указанных инноваций позволяет повысить активность и стандартность промышленных серий сыворотки против РС и их эффективность для профилактики и лечения заболевания животных. С учетом полученных результатов и требований GMP разработаны и подготовлены к утверждению изменения и дополнения в «Промышленный регламент на производство сыворотки против рожи свиней -ПР 00482849-012-14» и Технические условия - «Сыворотка против рожи свиней -СТО 00484849-0006-2006».

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на Международной научно-практической конференции, посвященной 95-летию ФКП «Армавирской биофабрики» - Россия, Армавир, 2016;

Публикации научных исследований. По материалам данной диссертационной работы опубликованы 7 научных работ, в том числе 6 в изданиях, рекомендованных ВАК Министерства образования и науки РФ.

Структура и объект диссертации. Диссертация изложена на 182 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, предложений для практики, списка литературы и приложения.

Диссертация иллюстрирована 38 таблицами и 11 рисунками. Список использованной литературы содержит 277 источников, в том числе 84 иностранных авторов.

Личный вклад соискателя. Диссертационная работа выполнена автором самостоятельно. Автором лично сформулирована проблема, цели и задачи исследований и схема их реализации в условия производства.

Лично автор участвовала в работе по поддержанию и контролю штаммов бактерий рожи свиней, получению и стандартизации антигена стационарным и периодическим способами, оптимизации схемы подготовки, гипериммунизации и эксплуатации волов-продуцентов, а также в процессе изготовления и контроля качества сыворотки против рожи свиней.

При решении этих задач автор участвовала в работе «Отдела контроля качества» и «Системы обеспечения качества», что позволило освоить методы контроля качества исходного сырья и образцов СК и антигена, проводила валидацию технологических процессов производства на всех этапах технологического цикла и стабилизировать изготовление сыворотки против РС.

Отдельные этапы работы проводились совместно со специалистами ВНИТИБП и ВГНКИ. Все материалы диссертации проанализированы и обобщены лично автором. Вклад в работу других авторов отражены в публикациях по теме диссертации.

Благодарность. Автор выражает искреннюю благодарность научным руководителям: доктору биологических наук Е.В. Сусскому и кандидату ветеринарных наук Е.Э. Школьникову, заведующей отделом ВНИТИБП, доктору

биологических наук Т.А. Скотниковой, заместителю дииректора ФКП «Армавирская биофабрика» С.Н. Ярцеву, начальнику ОБТК ФКП «Армавирская биофабрика» И.М. Васильевой.

2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

В настоящее время работы по обеспечению продовольствием и биологической защиты людей и животных в стране являются основной задачей АПК, что приводит к необходимости проведения научных изысканий, направленных на решение данных проблем [2,42, 48].

Научное обеспечение приоритетного национального проекта «Развитие АПК» и реализацию приоритета «Ускоренное развитие животноводства» должны включать разработку и создание нового поколения средств для лечения и профилактики инфекционных болезней животных, средств обеспечения устойчивого ветеринарного благополучия промышленного животноводства, биологической безопасности получаемой продукции [52, 118, 139].

Свиноводство в нашей стране является одним из основных источников производства мяса и жира животного происхождения. На фоне специфических условий и, в частности, в связи с концентрацией большого количества свиней на ограниченных производственных площадях возрастает роль организации предупреждения массовых заболеваний животных и экономических затрат, связанных с ними.

Устойчивое развитие свиноводства - развитие отрасли животноводства, которое способствует удовлетворению нужд нынешнего поколения, таким образом, используя природные ресурсы, чтобы последующие поколения смогли удовлетворять их потребности, и при этом сохранять природный баланс, не причиняя вред экологии.

2.1 Биологическая характеристика возбудителя рожи свиней

2.1.1 Открытие Егу81ре1оШпх гЬшшра1Мае

Данное заболевание открыли независимо друг от друга Пастер (1882), Леффлер (1886), выделив возбудителя от павшей свиньи. У людей болезнь

впервые описал Розенбах (1884), выделивший культуру эризипелотриксов из кожи больного человека и трижды прививший ее себе. Данное заболевание Розенбах назвал ползучей эритемой Бейкера или эризипелоидом. Идентичность обоих микроорганизмов установил Г.Д. Вилявин (1955) [6, 138].

2.1.2 Распространение рожи свиней

Рожа свиней - септическое антропозоонозное инфекционное, широко распространенное в мире, заболевание, поражающее свиней преимущественно в возрасте от 3 до 12 месяцев [133]. Особенно неблагополучны по этой инфекции страны Центральной, Южной и Юго-Восточной Европы, реже страны Скандинавского полуострова. Рожа наблюдается также в странах Азии и отмечена в Австрии [194].

Первые сведения о роже свиней в России относятся к 1883 г. В 1962 г. в 123 свиноводческих хозяйствах острая септическая форма рожи регистрировалась в 91,9%, подострая - в 11% случаев [132]. В 1965 г. выявлено 6945 неблагополучных пунктов по роже свиней, где заболело 201900 животных, из которых пало и вынужденно убито 60500 голов [6]. В настоящее время рожа в стране распространена повсеместно. Её регистрируют в виде спорадических случаев или энзоотических вспышек [133,201, 202, 238].

По материалам официальных отчетов ветеринарных служб РФ показано, что по наличию выявленных неблагополучных пунктов и уровню летальности рожи свиней занимает 7 место среди 14 наиболее распространенных инфекционных болезней свиней. По проценту к общему количеству прививок рожа свиней занимает второе место (после чумы свиней) и составляет 23,3%. Несмотря на наличие в РФ высокоэффективных средств профилактики ежегодное количество вновь регистрируемых неблагополучных хозяйств уменьшается незначительно. Отмечают годы, когда число неблагополучных хозяйств и процент заболеваемости резко увеличиваются, что объясняется многообразием путем

заноса возбудителя, склонностью к стационарному течению болезни, наличием широко распространенного бактерионосительства [132, 133].

2.1.3 Систематическое положение

Возбудителя рожи свиней относят к подсемейству Salmoninae, отдел Firmicutes, роду Erysipelothrix представленному видом Erysipelothrix rhusiopathiae [46, 143]. В 1987 г. Такахаши с соавторами описали второй вид - Erysipelothrix tonsillarum, отличающийся от первого лишь степенью гомологии ДНК [265].

2.1.4 Строение микробной клетки Егуз1ре1оШпх гЬшшра1Мае

Грамположительные бактерии Erysipelothrix rhusiopathiae имеют несложно организованную, но мощную клеточную стенку. В состав клеточной стенки входят до 95% гликопротеидов, 2-5% липидов, полисахариды и тейхоевые кислоты. Основным компонентом клеточной стенки является пептидогликан (муреин) толщиной примерно в 40 слоев, который составляет 30-70% сухой массы клеточной стенки. Пептидогликан представлен полимерными молекулами, повторяющихся дисахаридных групп ^ацетилглюкозамина и ^ацетилмурановой кислоты.

Цитоплазматическая мембрана - физический, осмотический и метаболический барьер между внутренним содержимым бактериальной клетки и внешней.

Цитоплазматическая мембрана состоит из трех слоев: двух слоев белка, между которыми располагаются фосфолипиды (рис. 1 ).

Цитоплазма включает в себя все органеллы и включения необходимые для жизнедеятельности микробной клетки: рибосомы, полирибосомы, замкнутая кольцевая молекула ДНК, плазмиды, мезосому и т.д. [147]

Рис.1. Клеточная стенка бактерии рожи.

Таким образом, бактерии рожи свиней представляют собой одноклеточные организмы, состоящие из клеточной стенки, цитоплазматической мембраны и цитоплазмы, которая содержит ядерное вещество и различные органеллы и включения.

2.1.5 Морфологические и тинкториальные свойства

Бактерии рожи свиней представляют собой тонкие прямые или слегка изогнутые неподвижные палочки, размером 0,2-0,3^0,5-1,5 мкм, не образующие спор и капсул. В старых культурах Е. гЬшюра1Ыае образует длинные извилистые нити и клубки [66, 79]. Микроб хорошо окрашивается анилиновыми красителями, грамположителен. Е. гЬшюра1Ыае убиквитарным микроорганизмам в зависимости

от условий обитания имеющих неодинаковые морфологические, вирулентные, антигенные и иммуногенные свойства [264].

2.1.6 Культуральные свойства

Микроб не требователен к питательным средам. Хемоорганотроф растет в аэробных и анаэробных условиях, лучше в атмосфере с пониженным давлением кислорода и содержащей 5-10% СО2. Оптимальные условия для роста: температура 36-38оС и рН 7,4-7,8; добавление 0,5% глюкозы и 5-10% лошадиной сыворотки стимулируют рост бактерий рожи [154, 157, 160].

При культивировании E. rhusiopathiae на МПБ наблюдается слабое помутнение бульона без образования пристеночного кольца и пленки, при встряхивании пробирки хорошо заметны «муаровые волны», создаваемые агрегацией микробов. Через 42-72 часа роста среда просветляется, на дне пробирки образуется осадок микробов, который при встряхивании поднимается в виде облачка.

На МПА возбудитель растет в виде мелких росинчатых прозрачных колоний. При септицемии бактерий, формируют колонии S-формы - гладкие округлые формы колонии. При хроническом течении болезни образуются колонии R-формы - круглые, сероватые, шероховатые с волокнистой неровной поверхностью и отходящими от края корнеобразными отростками. Рост на агаре с кровью сопровождается узкой зоной гемолиза вокруг колоний бактерий рожи.

В качестве селективной среды используют МПА с 0,1% раствором кристалловиолетта и 1% азида натрия (среда Сент-Иваньи).

В столбике желатина при посеве уколом от серовато-белого стержня отходят нежные горизонтальные бахромчатые отростки, напоминающие по виду ершик для мытья посуды [16].

В последнее время для культивирования бактерий рожи успешно применяют среды на основе ферментализата биомассы микроорганизмов [ 53, 58].

2.1.7 Биохимические свойства

E. rhusiopathiae относят к оксидазоотрицательным микроорганизмам. Бактерии рожи свиней при культивировании в средах Гисса выделяют сероводород, желатин не разжижают, не образуют индол и каталазу, не редуцируют нитраты; большинство штаммов разлагают, с образованием кислоты без газа, лактозу, глюкозу, галактозу, левулезу, редко - ксилозу, арабинозу, мальтозу и рамнозу, но не ферментируют сахарозу, манит, дульцит, глицерин, салицин [159, 160, 212].

2.1.8 Антигенная структура

Антигенная структура бактерий E. rhusiopathiae была расшифрована методом сравнения с химической структурой антигенных детерминант других грамположительных бактерий и результатам исследования их биологических свойств, однако, полной антигенной формулы пока еще не выявлено. По-видимому, эта формула связана со строением бактериальной клетки и определяется набором белков и полисахаридов, входящих в состав пептидогликанового слоя и тейхоевых кислот клеточной стенки, структурой цитоплазматической мембраны; ферментами типа нейраминидазы и гиалуронидазы.

Все эти структурные компоненты возбудителя обладают антигенностью и играют различную роль в индикации иммунного ответа [69, 102, 216, 223, 224, 232, 241, 242, 245].

В качестве иммуногена наиболее достоверно предполагается пептидогликан клеточной стенки [25, 199, 209]. По химическому составу это гликопротеин. Он термостабилен, разрушается под действием трипсина и мурамидазы, устойчив к действию липазы и РНКазы.

Антигенная изменчивость возбудителя рожи дает им возможность избежать губительного действия механизмов специфического иммунитета, играющего

одновременно роль мощного селективного фактора и тем самым способствующего накоплению в природе мутантов бактерий с измененной антигенной структурой. В то же время, возможность антигенной изменчивости циркулирующих в природе эпизоотических штаммов возбудителя требует постоянного контроля идентичности их в отношении производственных штаммов, используемых для изготовления средств специфической профилактики.

Согласно работам разных исследователей становится ясно, что все бактерии рожи имеют общий видоспецифический антиген и типоспецифический антиген, характерный только для определенного сероварианта. Штаммы, не имеющие типоспецифического антигена, серологически не типируются, и в таком случае их относят к типу N [51,86, 101, 205].

Общий видовой компонент выявляется во всех серологических реакциях (РА, РДП, иммуноэлектрофорез), а для обнаружения типоспецифических компонентов антигена используется реакция диффузионной преципитации [86, 211].

2.1.9 Устойчивость

Возбудитель рожи свиней обладает высокой устойчивостью во внешней среде в трупах животных и может сохраняться в течение 3-4 месяцев, в почвах -8 месяцев, в навозной жиже - до 290 дней, в воде - 86-108 дней. В бульонных культурах, запаянных в пипетки, микробные клетки могут сохранять жизнеспособность в течение 10-35 лет [132, 133].

Однако рожистая палочка очень чувствительна к нагреванию. Прямые солнечные лучи убивают ее через 10-12 дней, нагревание при 70оС убивает их за 2-5 мин, температура 100оС убивает их в несколько секунд [134].

Бактерии рожи чувствительны к пенициллину, эритромицину, тетрациклину и дезрастворам, включая растворы 2-3 % едкого натрия и 2% формальдегида, 10%-ного хлорной извести, 3% лизола, 3% фенола и другие химиопрепараты в общепринятых концентрациях [134, 154].

2.1.10 Активность и специфичность штаммов возбудителя рожи свиней

Эффективность противорожистых биопрепаратов во многом зависит от иммунобиологических и антигенных свойств штаммов, используемых для их изготовления. Микробиолог Е.С. Станиславский говорил о том, что сведения о локализации антигенов и изучение наиболее активных компонентов микробной клетки должны способствовать решению вопроса об изготовлении эффективных вакцин. В.Д. Беляков, Р.Х. Яфаев отмечали, что наибольшую ценность представляют типоспецифические антигены. Важно найти специфические компоненты микроорганизмов, обладающие выраженными антигенными свойствами, способные вызывать энергичное формирование антител.

Еще в 1939 г. А.И. Похил обратил внимание на антигенное различие бактерий рожи и установил, что не все штаммы одинаково агглютинируются сывороткой, полученной при гипериммунизации кроликов [120,131].

Для правильной оценки биологических свойств штаммов рожи свиней большое значение имели исследования P.S.Watts (1940), N. Atkinsona (1941), которые на основании результатов реакции агглютинации, преципитации и связывания комплемента, впервые подразделили возбудителя на два основных сероварианта А и В.

K. Dedie [209] занимался исследованием серовариантов бактерий рожи, базируясь на антигенах, полученных солянокислой вытяжкой. Эти сероварианты были обозначены им как А, В и N. Общим видовым серотипом является антиген N. Сероварианты А и отличаются своими гаптенами. Болезнь вызывают преимущественно серовариант А (на 95%), реже серовариант В и очень редко серотип N.

В настоящее время для изготовления живых противорожистых вакцин применяют вакцинный штамм ВР-2 и второй матрикс Конева.

Штамм ВР-2 бактерий рожи свиней, был выделен В. Виноградником в 1931 г. из трупа свиньи, павшей от данного заболевания [51, 101].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Глушенкова Юлия Александровна, 2018 год

- 200 с.

89. Медведев, А.П. Получение белковых гидролизатов из мяса волов -продуцентов гипериммунных сывороток / А.П. Медведев, Т.С. Воронова, Т.В. Фроленко, И.П. Кулешова // Ученые записки / Витебской ГАВМ. - Витебск, 2002. - Т.38, ч. 1. - С. 91-92.

90. Медведев, А.П. Противобактериальные гипериммунные сыворотки / А.П. Медведев, А.А. Вербицкий. - Витебск: ГАВМ, 2001. - 121 с.

91. Медведев, А.П. Противобактериальные лечебно-профилактические сыворотки: монография /А.П. Медведев. - Витебск: УО Витебская ГАВМ, 2007.

- 379 с.

92. Медведев, А.П. Совершенствование режима эксплуатации волов-продуцентов сыворотки против сальмонеллеза животных / А.П. Медведев // Профилактика и меры борьбы с болезнями молодняка с. -х. животных. - Витебск, 1990. - С. 50-51.

93. Медицинская микробиология /под ред. В.И. Покровского, О.К. Поздеева. -М.: ГЭОТАР Медицина, 1999. - 1182 с.

94. Меркулов, В.П. Сухая вакцина против рожи свиней из второго матрикса Конева / В.П. Меркулов, А.Б. Эпштейн // Труды / ВГНКИ.- М .,1962. - Т.11. - С. 103-107.

95. Митин, С.С. Сравнительная оценка различных схем гипериммунизации лошадей при получении сыворотки против рожи свиней / С.С. Митин, Л.И. Павлова, А.И. Кретинина, Л.А. Петрова // Тезисы докл. научно. -произв. конф., посвящен. 100-летию Курской биофабрики. - Курск, 1996. - С. 210-211.

96. Михайленко, А.А. Профилактическая иммунология / А.А. Михайленко, Г.А. Базанов, В.И. Покровский, В.И. Коненков. - М., 2004. - 447 с.

97. Мониторинг и измерение процессов по ИСО 9000:2000. - М.: Трек, 2001. -24 с.

98. МУ 64-04-001-2002. Производство лекарственных средств. Валидация. Основные положения. - 6 с.

99. Надлежащая практика производства биологических препаратов / Комитет экспертов ВОЗ по стандартизации биологических препаратов. Сер. Техн. докл. № 771. - Женева: ВОЗ, 1991. - С. 41-53

100. Никитин, В.Д. Организация сывороточного производства / В.Д. Никитин // Руководство по вакцинному и сывороточному делу. - М.: Медицина, 1978. - С. 256-262.

101. Никифорова, И.М. Биологические свойства штаммов рожи свиней, используемых для изготовления живых противорожистых вакцин / И.М. Никифорова, О.Б. Дьяконов, Л.А. Подлесных // Труды / ВГНКИ ветпрепаратов. -М., 1967. - Т. 13. - С. 218-221.

102. Олейник, А.В. Серовариантная принадлежность бактерий Erysipelothrix rhusiopathiae: автореф. дис. ... канд. биол. наук :16.00.03 / Олейник Алексей Владимирович. - М., 2002. -20 с.

103. Осидзе, Д.Ф. Инфекционные болезни животных / Д.Ф. Осидзе. - М.: Агропромиздат, 1987. - 288 с.

104. ОСТ 44-510-98 Правила производства и контроля качества лекарственных средств по GMP. - М.: ИИЦ МЗ РФ, 1999.

105. Остерман, Л.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот / Л.А. Остерман. - М.: Наука, 1981. - 375 с.

106. Падерин, Ю.П. Оптимизация условий культивирования Е. гИшюра^ае УЯ-2М / Ю.П. Падерин, В.В. Гусев // Научные основы производства вет. биол. препаратов. - Щёлково, 2000. - С. 172-174.

107. Панин, А.Н. Получение преципитирующих сывороток к эталонным штаммам эризипелотриксов / А.Н. Панин, А.В. Олейник // Разработка и освоение производства нового поколения лекарственных средств для животных и их применение в ветеринарной практике: тез. докл. Всерос. науч. конф. -Ставрополь, 2000. - С.32.

108. Панин, А.Н. Состояние и перспективы профилактики рожистой инфекции / А.Н. Панин, Р.В. Душук // Состояние, проблемы и перспективы развития ветеринарной науки в России. - М., 1999. - Т. 1. - С. 216-219

109. Пат. 2077882 РФ, МКИ А61К 31/115. Иммуномодулирующее средство / Ласкавый В.Н., Рыбин В.В.- № 99114193/14; заявл. 21.11.1995; опубл. 27.04.1997, Бюл. № 12.

110. Пат. 2146134 РФ, МКИ А61 К 31/115. Антивирусный препарат для инъекций / Ласкавый В.Н., Рыбин В.В. - № 95119203/14; заявл. 29.06.1995. опубл. 10.03.2000, Бюл. №7.

111. Патент 2169582 РФ, МПК 7 А61К39/395 Способ получения гипериммунной сыворотки против рожи свиней. / Школьников Е.Э., Коломнина

Г.Ф., Лукьянова Е.М. [и др.]. - № 99103391/13; заявл. 18.02.1999; опубл. 27.06.2001.

112. Перт, С.Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток: пер. с англ. / С.Дж. Перт. - М.: Мир, 1978. - 331 с.

113. Петров, Р.В. Иммунология / Р.В. Петров. - М.: Медицина, 1987. - 365 с.

114. Питательная среда из некондиционного мяса для культивирования микроорганизмов / И.В. Соболева, А.В. Устимов, С.С. Ушаков, А.П. Медведев // Исследования молодых ученых в решении проблем животноводства: материалы III Междунар. научно-практ. конф. - Витебск, 2003. - С. 217-218.

115. Подлесных, Л.А. Вакцины против рожи свиней из штамма ВР-2 / Л.А. Подлесных, Л.И. Тихонов, Н.А. Шаповалова // Состояние, проблемы и перспективы развития вет. наук в России. - М., 1999. - Т. 1. - С. 234.

116. Подлесных, Л.А. Изучение иммунобиологических свойств штаммов возбудителя рожи свиней с целью совершенствования биопрепаратов: автореф. дис. ...канд. вет. наук:16.00.03 / Подлесных Лилия Антоновн. - Витебск, 1978. -25 с.

117. Подлесных, Л.А. Изучение некоторых маркеров вакцинных и эпизоотических штаммов возбудителя рожи свиней / Л.А. Подлесных, О.Б. Дьяконов // Труды / ГНКИ ветпрепаратов МСХ СССР. - М., 1974. - Т. 20. - С. 179-183.

118. Подлесных, Л.А. Усовершенствование метода изготовления и контроля инактивированной противорожистой вакцины / Л.А. Подлесных, Р.В. Душук // Сборник науч. тр. / ВГНКИ. - М., 1994. - Т. 55. - С. 68-75.

119. Полушин, Р.В. Рожа свиней. Практические рекомендации / Р.В. Полушин, С.В. Старченков, М.М. Широкобокова. - СПб., 2000. - 22 с.

120. Похил, А.И. Культуральные, биохимические и биологические свойства бацилл рожи свиней / А.И. Похил // Ветеринарна справа. - 1939. - № 3-6. - С. 5864.

121. ПР 00482849-012-14 Промышленный регламент на производство «Сыворотки против рожи свиней.

122. Правила производства лекарственных средств GMP Европейского сообщества. - М.: Асинком, 1997. - 113 с.

123. Практическое руководство по биологической безопасности в лабораторных условиях. - Женева: ВОЗ, 2004. - 190 с

124. Принципы ХАССП. Безопасность продуктов питания и медицинского оборудования. - М.: Стандарты и качество, 2006. - 221 с.

125. Проектный подход в создании инновационных биотехнологических препаратов / Г.А. Скотникова, Л.А. Неминущая, Н.К. Еремец [и др.] // Вестник Казанского технологического ун-та. - 2012. - Т. 15, № 4. - С. 82-86.

126. Производство лекарственных средств по GMP. - М.: Медицинский бизнес, 2005. - 344 с

127. Пронин, А.В. Иммуномодуляция и вакцинопрофилактика: опыт применения препарата фоспренил / А.В. Пронин// Российский вет. журнал. -2005. -№ 1.- С. 38-42.

128. Раскин, Б.М. Питательные среды: состояние и перспективы разработок / Б.М. Раскин // Разработка и стандартизация бактериологических питательных сред: сб. тр. - М., 1980.- С. 3-9.

129. Рахманов, А.М. Профилактика инфекционных болезней свиней в России / А.М. Рахманов, Н.А. Яременко // Современные вопр. патологии с. -х. животных: Междунар. научно-практ. конф. - Минск, 2003. - С.243.

130. Рахманов, В.А. Использование гидролизатов из куриных эмбрионов в качестве основы питательных сред для изготовления вакцины против рожи свиней / В.А. Рахманов, В.В. Доценко, В.И. Шестаков [и др.] // Передовой научно-производственный опыт в биологической промышленности. - М., 1979. -№ 11. -С. 3-5.

131. Рогожин, П.С. Биологические свойства эпизоотических и эталонных штаммов рожи / П.С. Рогожин // Сборник науч. тр. / УзНИВИ. - 1973. - Вып. 21. - С. 176-177.

132. Рожа свиней // Инфекционная патология животных / под ред. А.Я. Самуйленко. - М., 2009. - Т.3. - С. 620-649.

133. Рожа свиней // Инфекционные болезни животных / под ред. А.А. Сидорчука. - М.: КолосС, 2007. - С. 168-174.

134. Рожа свиней. Меры борьбы и профилактики. Методические указания. - М.: МСХ, 1993. - 11 с.

135. Рубан, Е.А. Промышленная технология производства противобактерийных препаратов / Е.А. Рубан, Н.В. Мельник, Е.А. Непоклонов [и др.]; под ред. А.Я. Самуйленко. - М.: ИКЦ «Академкнига», 2006. - 267 с.

136. Руководство по вакцинному и сывороточному делу / под ред. П.Н. Бургасова. - М.: Медицина, 1978. - 440 с.

137. Русанов, В.М. Лечебные препараты крови / В.М. Русанов, И. Левин. - М.: ИД Медпрактика, 2004. - 284 с.

138. Рягузов, В.С. Эризипелоиды / В.С. Рягузов // Ветеринарная микробиология. - М., 1982. - С.198-203.

139. Самуйленко, А.Я. Усовершенствование технологии изготовления сыворотки против рожи свиней //. Самуйленко А.Я. Избранные труды. - М., 2013. - С. 357-359.

140. Свиткин, М.З. Процессный подход при внедрении системы менеджмента качества в организации / М.З. Свиткин // Стандарты и качество. - 2002. - № 3.-С. 74-77.

141. Семенов, Л.В. Активность сыворотки против рожи свиней, полученной гипериммунизацией волов / Л.В. Семенов // Ветеринария. - 2002. - № 4. - С. 1921.

142. Сидоров, М.А. Иммунный статус и инфекционные болезни новорожденных телят и поросят / М.А. Сидоров, Ю.Н Федоров, О.М. Савич // Ветеринария. - 2006. - № 1. - С. 3-6.

143. Сидоров, М.А. Определитель зоопатогенных микроорганизмов. Справочник / М.А. Сидоров, Д.И. Скородумов, В.Б. Федотов. - М.: Колос, 1995. -319 с.

144. Синицын, В.А. Сравнительная характеристика напряженности гуморального иммунитета у свиней, вакцинированных разными вакцинами против рожи свиней / В.А. Синицын, А.Ф. Ображей, Н.Г. Остапец, О.Я. Трясоруб // Общая эпизоотология: иммунология, экология и методологические проблемы : материалы. Междунар. науч. конф. - Харьков, 1995. - С. 534-536.

145. Система анализа рисков и определения критических контрольных точек. НАССР // ХАССР. Государственные стандарты США и России. - М.: Изд-во стандартов, 2002. - 594 с.

146. Система менеджмента ХАССП для обеспечения качества иммунобиологических ветеринарных препаратов / Т.А. Скотниковва, Л.А. Неминущая, Л.С. Люлькова [и др.] // Ветеринария и кормление.- 2012. - № - 6. -С. 10-12.

147. Скалинский, Е.И. Ультраструктура возбудителя рожи свиней / Е.И. Скалинский, А.А. Шахбанов // Доклады ВАСХНИЛ. - 1970. - № 8. - С. 36-37.

148. Скворцов, В.Н. Антимикробная активность и лечебная эффективность энрофлоксацина при бактериальных болезнях свиней / В.Н. Скворцов // Материалы. I съезда фармакологов. - М., 2007. - С. 557-561.

149. СП 1.2.731-99 Безопасность работы с микроорганизмами III и IV групп патогенности и гельминтами. Санитарные правила. - М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора МЗ РФ, 1999. - 107 с.

150. СП 3.3.2. 1288-03. Надлежащая практика производства медицинских и иммунобиологических препаратов. - М., 2003

151. СП 3.3.2.1248-03 МЗ РФ Условия транспортирования и хранения медицинских иммунобиологических препаратов. Санитарно -эпидемиологические правила. - М., 2003. - 19 с.

152. СП 332015-94 Производство и контроль медицинских иммунобиологических препаратов для обеспечения качества. Санитарные правила. - М., 1994. - 48 с.

153. СТО 00482849-0006-2006 Сыворотка против рожи свиней. Технические условия

154. Сусский, Е.В. Совершенствование технологии промышленного производства и обеспечение качества поливалентных сывороток крови животных: дисс....докт. биол. наук: 03.01.06 / Сусский Евгений Владимирович -Щелково, 2014.- 438 с..

155. Сусский, Е.В. Оптимизация технологических процессов производства лечебных и иммунобиологических препаратов против рожи свиней / Е.В. Сусский, В.Т. Ночевный, А.А. Раевский, И.В. Бобровская // Ветеринарный врач. - 2012. - №5. - С. 24-28.

156. Сусский, Е.В. Сывороточные и вакцинные препараты для профилактики и терапии инфекционных заболеваний животных: монография / Е.В. Сусский, П.А. Красочко, А.П. Медведев, А.А. Вербицкий. - Армавир, 2013. - 383 с

157. Телишевская, Л.Я. Белковые гидролизаты. Получение, состав, применение / Л.Я. Телишевская. - М., 2000. - 295 с.

158. Телишевская, Л.Я. Влияние пептидов из белковых панкреатических гидролизатов на рост микроорганизмов / Л.Я. Телишевская, Н.Н. Максимюк, З.Ф. Богаутдинов // Труды / ВГНКИ. - М., 1995. - Т.58. - С. 3-10.

159. Телишевская, Л.Я. Идентификация культуры Erysipelothrix insidiosa методом определения аргининдезаминазной активности / Л.Я. Телишевская, Ф.С. Шуляк // ЖМЭИ. - 1975. - № 1. - С. 144-145.

160. Телишевская, Л.Я. Питание и метаболизм патогенных микроорганизмов / Л.Я. Телишевская, Н.К. Букова, А.А. Комаров, В.Т. Ночевный. - М.: Научная библиотека, 2016. - 156 с.

161. Телишевская, Л.Я. Характеристика пептидов, выделенных из биологически активных фракций панкреатического гидролизата мяса / Л.Я. Телишевская, А.А. Комаров, Н.Н. Максимюк //Доклады РАСХН - 1994. - № 5. - С. 28-40.

162. Тихонов, И.В. Биотехнология: учебник / И.В. Тихонов, Е.А. Рубан, Т.Н. Грязнева [и др.]; под ред. Е.С. Воронина. - СПб.: ГИОРД, 2005. - 782 с.

163. Токарик, Э.Ф. Развитие систем менеджмента качества производства лекарственных средств для ветеринарии. /Э.Ф. Токарик, Н.К. Еремец, Т.А. Скотникова [и др.] // Инновационные подходы к решению современных проблем вет. медицины: материалы. Междунар. научно-практ. конф. / Урал НИВИ -юбилейный 2015 г // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. - 2015. - № 2. - С. 357 - 359.

164. Трусова, Л.И. Потребность Erysipelathrix insidiosa в некоторых минеральных элементах / Л.И. Трусова, Л.Я. Телешевская // Труды / ВГНКИ. -М., 1974. - Т.20. - С. 247-250.

165. Управление рисками в производстве иммунобиологических препаратов / Т.А. Скотникова, Л.А. Неминущая, Л.С. Люлькова [и др.] // Ветеринарная медицина. - 2010. - № 5-6. - С. 16-18.

166. Урбан, В.П. Болезни молодняка в промышленном животноводстве / В.П. Урбан, В.П. Найманов. - М., 1984. - С. 55-57.

167. Фармацевтическая разработка: концепция и практические рекомендации. Научно-практическое руководство для фармацевтической отрасли / под ред. С.Н. Быковского, И.А. Василенко, Н.Б. Детидовой [и др.]. - М.: Перо, 2015. - 472 с.

168. Федоров, Ю.Н. Иммунитет у подсвинков после введения иммунной сыворотки против рожи / Ю.Н. Федоров, Н.А. Лахотина // Сборник науч. тр. / ВИЭВ. - М., 1977. - Т.45. - С. 78-81.

169. Федоров, Ю.Н. Характеристика иммунного статуса поросят в хозяйствах промышленного типа / Ю.Н. Федоров, О.А. Верховский, Б.Г. Орлянкин, Т.И. Алипер // Всерос. вет. конгресс: материалы секции «Проблемы инфекционной патологии свиней». - М., 2007. - С. 6.

170. Федоров, Ю.Н. Этиологическая структура и иммунопрофилактика желудочно-кишечных болезней телят / Ю.Н. Федоров, Н.А. Часто //Актуальные проблемы соврем. ветеринарии.: материалы международ. научно -практ. конф., посвящ. 65-летию вет. науки Кубани. - Краснодар, 2011. - Ч.2. - С. 303-309.

171. Федоров, Ю.Н., Иммунодефициты домашних животных / Ю.Н. Федоров, О.А. Верховский. - М., 1996. - 95 с.

172. Федотов, А.Е. Основы GMP. Производство лекарственных средств. - М.: Асинком, 2012. - 576 с.

173. ФЗ РФ № 184 О техническом регулировании: Федеральный закон РФ № 184 от 27 декабря. 2002г.

174. ФЗ РФ № 61 Федеральный закон Российской Федерации № 61 Об обращении лекарственных средств, Статья 12 [Федер. закон: принят Гос. Думой 24 марта 2010 г., одобрен Советом Федерации 31 марта 2010 г.]. -РГ. Федеральный выпуск № 5157. - С. 6-7.

175. Филиппова, Г.И. Использование иммуномодуляторов при изготовлении гипериммунных сывороток против рожи свиней / Г.И. Филиппова, М.В. Романова // Научные основы производства вет. биол. препаратов: тез. докл. Всерос. науч. конф. - Щёлково, 2000. - С. 187-189.

176. Фролов, А.П. Этиопатогенетические особенности развития некротической формы свиней, её прогнозирование и принципы комплексного лечения: автореф. дис. ... канд.мед.наук: 14.00.27 / Фролов Александр Петрович. - Иркутск, 2003. -20 с.

177. Хамагаева, И.С. Влияние Fe++ на метаболиизм пропионовокислых бактерий / И.С Хамагаева // Техника и технология пищевых производств. -2012.- № 3. - С. 1-7.

178. Хиггинс, И. Биотехнология. Принципы и применение: пер с англ. / под ред. И. Хиггинса, Д. Беста, Д. Джонса. - Мир, 1988 - 480 с.

179. Хъюз, М. Неорганическая химия биологических процессов / М. Хъюз. -М., 1983. - 416 с.

180. Черкасов, В.Л. Рожа (диагностика, лечение, профилактика) / В.Л. Черкасов. - М.: Московская медицинская академия, 1991.

181. Чистые помещения / пор ред. А.Е. Федотова. - М.: Асинком, 2003. - 576 с.

182. Шаталов, В.Ф. Изменение вирулентности возбудителя рожи при пассировании через животных / В.Ф. Шаталов, В.С. Шаталов // Диагностика и

лечебно-профилактические мероприятия при инфекционных и инвазионных заболеваниях сельскохозяйственных животных. - М., 1998. - С. 19-22.

183. Шептун, Н.Г. Гидролизаты из отходов сывороточного и глобулинового производства / Н.Г. Шептун, О.Ф. Фисенко, Л.И. Алейников, Л.Я. Телишевская // Сборник науч. тр. / ВГНКИ. - М., 1985. - С. 78 - 82.

184. Школьников, Е.Э. Антиген для иммунизации животных-продуцентов при производстве сыворотки против рожи свиней / Е.Э. Школьников, П.Ф. Коломнина, Е.М. Лукьянова, В.В. Меньшенин // Научные основы производства вет. биол. препаратов: тез. докл. Всерос. конф. - Щёлково, 2000. - С. 181-183.

185. Школьников, Е.Э. К вопросу получения концентрированных лечебных сывороток / Е.Э. Школьников, П.Ф. Коломнина, В.С. Солодков [и др.]. .//100 лет Курской биофабрикеи агробиологической промышленности России: тез докл. Всерос. науч. конф. - Курск, 1996. - С. 360-361.

186. Школьников, Е.Э. Разработка схемы гипериммунизации волов -продуцентов для изготовления сыворотки против рожи свиней / Е.Э. Школьников, П.Ф. Коломнина, В.В. Меньшенин [и др.] //. Научные основы производства вет. биол. препаратов: тез. докл. Всерос. конф. - Щёлково, 2000. -С.184-185.

187. Школьников, Е.Э. Усовершенствование питательной среды и условий культивирования бактерии рожи свиней / Е.Э. Школьников, А.Л. Самуйленко, В.И. Еремец [и др.] //. Диагностика, профилактика, и меры борьбы с особо опасными, экзотическими и зооантропонозными боезнями животных: Междунар. научно - практ. конф. - Покров, 2000. - С. 251-252.

188. Школьников, Е.Э. Усовершенствование технологии изготовления сыворотки против рожи свиней / Е.Э. Школьников, Г.Ф. Колошнина., А.Я. Самуйленко // Научные основы производства вет. биол. препаратов: материалы междунар. научно-практ. конф. - Щелково, 2006. - С. 150-155.

189. Щетинина, М. Грамотное сочетание систем качества по ISO 9000 и GMP в силах обеспечить безопасность продукции и эффективность бизнеса / М. Щетинина // Фармацевтический вестник. - 2005. - № 1. - С. 8-11.

190. Юрин, Д.В. Концентрация ципрофлоксацина в сыворотке крови поросят / Д.В. Юрин, В.Н. Скворцов // Новые фармакологические средства в ветеринарии: материалы. XVIII Междунар. научно - произв. конф. - СПб, 2007. - С. 46.

191. Юрков, Г.Г. Рожа свиней / Г.Г. Юрков // Эпизоотология с микробиологией. - М., 1981. - С. 271-275.

192. Ярцев, М.Я. Иммуногенные свойства сухой живой вакцины из штамма ВР-2 против рожи свиней / М.Я. Ярцев, В.П. Шишов, Р.В. Душук [и др.] // Научные основы производства вет. препаратов. - М., 1989. - С. 74-77.

193. Ярцев, М.Я. Разработка технологии производства живых сухих вакцин против пастереллеза птиц и рожи свиней / М.Я. Ярцев, И.А. Баснакъян, А.А. Раевский // ЖМЭИ. - 1993. - № 3. - С. 63-70.

194. Akkermans, J.P. Swine erysipelas: from yesterday to today / J.P. Akkermans // Tijdschr Diergeneeskd. - 1987. - Bd.12, N 8. - S. 451-460.

195. Ando, K. Maintenance and protective effect of 131 -l-labeled anti-swine erysipelas serum in blood of specilic- pathogen-free piglets / K. Ando, C. Nozaki, K. Hashimoto, S. Tanaka // Nath Inst Anim Health Q (Tokyo). - 1970. -Vol.10, N 3. - P. 143-150.

196. Bairey, M.. Erysipelas immunizing product review. / M Bairey, J.I. Vogel // Proc Annu Meet. U. S. Anim. Health Assoc. - 1973. - Vol.77. - P. 340-344.

197. Beckmann, R. Potency testing of erysipelas vaccines in mice. ELISA vs. challenge / R. Beckman, K. Gussler // ALTEX. -1994. -Vol.11, N 5. - P. 39 45.

198. Bodurova, Ts. Properties of the lyophilized anti-swine-erysipelas vaccine (VR2) / Ts. Bodurova // Vet. Med. Nauki. - 1973. - Vol.10, N 9. - P. 65-69.

199. Borrathybay, E. Role of surface protective antigen A in the pathogenesis of Erysipelothrix rhusiopathiae strain / E. Borrathybay, F.J. Gong, L. Zhang, W. Nazierbieke // J. Microbiol. Biotechnol. - 2015. - Vol.25, N 2. - P: 206-216.

200. Chin, J. CImmunoreactivity of fractionated antigens obtained from autoclaved extracts of an arthritoqenic isolate of Erysipelothrix rhusiopathiae / J.C. Chin, G.J. Eamens // Aust. Vet. J.- 1986.-Vol.63, N 11. - P. 355-359.

201. Chomel, B.B. Zoonoses / B.B Chomel // Encyclopedia of Microbiology (Third Ed.). - Acad. Pres, 2000. - P. 820-829.

202. Chomel, B.B. Zoonoses / B.B. Chomel // Biomedical Sciences. - 2014, Current as of 18 April 2016.

203. Cornelis, P. Iron uptake and Homeostatis in microorganisms / P. Cornelis, S.C. .Andrews. -N Y.: Acad. Pres, 2010. - 291 p.

204. Crookshank, E . Anthrax in swine / E Crookshank //J. Compar. Pathology and Therapeutics. - 1888. - Vol.1, N 4. - P. 221-234.

205. Cross, G. Serological classification / G. Cross // Australian Vet. J. - 1979. - N 55. - P. 77-81.

206. Da Silva, A.J. Bioreactor aeration conditions modulate growth and antigen expression during Erysipelothrix rhusiopathiae cultivation / A.J Da Silva, A. de Baptisla-Neto, M. de Carmo Cilento [et al.] //J. Microbiol. Biotechnol. - 2008 .Vol.79, N 1. - P. 23-31.

207. Da Silva, A.J. Non-conventional induction strategies for production of subunit swine erysipelas vaccine antigen in E. coli fed-batch cultures / A.J. Da Silva., A.C. Horta [et al.] // Springerplus. - 2013. - Vol.17, N 2. - P.:322.

208. Dahms, H. Detection of Erysipelothrix rhusiopathiae specific antibodies in the serum of experimentally-infected swine by ELISA and immunoblotting / H. Dahms,

W.F. Schilow, G. Hagemann // Arch. Exp. Veterinarmed. - 1989. - Vol.43, N 6. - P. 907-916.

209. Dedie, K. Die Saureloslichen Antigene von Erysipelothrix rhusiopathiae / K. Dedie // Monatsschr Veterinaermed. - 1949. - N 4. - S. 7-10.

210. Eamens, G.J. Comparison of inoculation regimes for the experimental production of swine erysipelas arthritis. I. Clinical, pathological and bacteriological findings / G.J. Eamens., P.J. Nicholls //Aust. Vet. J. - 1989. - Vol.66, N 10. - P. 333.

211. Eamens, G.J.. Comparison of inoculation regimes for the experimental production of swine erysipelas arthritis. II Serological findings in a gel diffusion precipitin test and enzyme-linked immunosorbent assay / G.J. Eamens, J.C. Chin, P.J. Nicholls // Aust. Vet. J. - 1989. - Vol.66, N 7. -P. 216-220.

212. Erler, W. Serological, chemical and immunochemical studies on the swine erysipelas bacterium. 3. Further properties of the type-specific extract from strain R32E11 of type BI Erysipelothrix insidiosa / W. Erler // Arch. Exp. Veterinarmed. -1968. - Bd.22, N 6. -S. 1139-1154.

213. Frenyo, V. L. Changes in colostral and serum Ig G content in swine in reletion to time / V.L. Frenyo, G. Pethes T. Antal // Vet. Res. Commun. - 1980/1981. - Vol.4.

- P. 275-282.

214. Gavrilov, N. Multicausality in the pathology of commercial swine breedin / N. Gavrilov, V. Dobrev, K. Mermerski [et al.] // Vet. Med. Nauki. - 1987. - Vol.24, N 3.

- P. 8-l3.

215. Golota, Ja.A. Serum protein fractions in swine erysipelas / Ja.A. Golota, G.P. Borodai ,G.G. Kas'ian // Mikrobiol . Zh. - 1974. - Vol.36, N 6. - P. 767-770.

216. Groschup, M.H. Characterization of protective protein antigen of Erysipelothrix rhusiopathiae / M.H. Groschup, K. Cussler, R. Weiss, J. F. Timoney // Vet. Microbiol.

- 1991. - Vol. 30. - P. 73-75.

217. Haesebrouck, F. Efficacy of vaccines against bacterial diseases in swine: what can we expect / F. Haesebrouck, F. Pasmans, K. Chiers [et al.] // Article Veterinary Microbiology. - 2004. -Vol.100, N 3-4. - P. 255- 268.

218. Hashimoto, K. Behavior of 131l-labeled anti-swine erysipelas horse serum in the body of mice. / K.Hashimoto, S.Janaka, H. Sugawara // Nath. Inst. Anim. Health Q (Tokyo). 1972. -Vol.12, N 1. - P: 8-16.

219. Hassanein, R.. Pathogenicity for mice and swine of Erysipelothrix isolates from the tonsils of healthy cattle // R. Hassanein, T. Sawada, Y. Kataoka [et al.] // Vet. Microbiol. - 2003. - Vol.91, N 2-3. - P. 231-238.

220. Hutner, S.H. Some growh requirements of Erysipelothrix and Listeriella / S.H. Hutner // J. Bact. - 1942. - N 43. - P. 629-640.

221. Imada,Y.,Truncated surface protective antigen (SpaA) of Erysipelothrix rhusiopathiae serotype la elicits protection against challenge with serotypes la and 2b in pigs / Y. Imada, N. Goji., H. Ishikawa [et al.] // Infect. Immun. - 1999. - Vol.67, N 9. - P. 4376-4382.

222. Inoledew, W.J. The respiratory chains of Escherichia coli / W.J. Inoledew, R.K. Poole //Microbiol. Rev. - 1984. - Vol. 48, N 3. - P. 222-271.

223. Kalf, G.F. The antigenic components of Erysipelothrix rhusiopathiae / G.F. Kalf // Nature. - 1970. - Vol.102. - P. 39-47.

224. Kobayashi, S. Immunological characterization of protective antigens of Erysipelothrix rhusiopathiae / S. Kobayashi [et al.] // Epidemiol. Infect. - 1991. -Vol.35. - P. 73-87.

225. Kurosaki, Y. Distribution of Erysipelothrix rhusiopathiae in artric swine and serovars of isolates / Y. Kurosaki, M. Hiyama, T. Iwasak, A. Watanabe // J. Japan Vet. Med. Assoc. - 1984. - Vol.37, N5. - P. 392-306 3

226. Kurt, Skov Madsen. Management of disease control and epidemics in A1 in Denmark / Kurt Skov Madsen // Theriogenology. - 2005. - Vol.63, N 2. - P. 585- 594.

227. Kuscera, G. Erysipelothrix rhusiopathiae - stamme eines neuen Serotyps und ihre Bedeutung in der serodiagnostik der Rotlaufbacterien / G. Kuscera // Acta. Vet. Acad. Sci. Hung. - 1964. - Vol.14. - P. 293-298.

228. Kuscera, G. Proposal for standardization of the designation used for serotypes of Erysipelothrix rhusiopathiae / G. Kuscera // Int. J. Syst. Bacterial. - 1973. - N 23. - P. 184-188.

229. Makino, S. Direct and rapid detection of Erysipelothrix rhusiopathiae DNA in animals by PCR. /.S. Makino, Y. Okada, T. Maruyama [et al.] // J. Clin. Microbiol. -1994. - Vol.32, N 6. - P. 1526-1531.

230. Muller, H.E. Neuraminidase neutralizing and precipitating antibodies in commercial swine erysipelas antiserums / H.E. Muller, K.H. Bohm // Berl Munch tierarztl. Wochenschr. - 1977. - Bd.90, N 16. - S. 314-316.

231. Murase, N. Studies on the typing of Erysipelothrix rhusiopathiae. 1. Serological behaviors of Erysipelothrix rhusiopathiae isolated from pigs / N. Murase, K. Suzuki, T. Nakahara [et al.] // Japan J. Vet. Sci. - 1959. - Vol.21. - P. 113-121.

232. Nikolov, P. Untersuchungen uber die Antigenstruktur von E. Rhusiopathiae / P. Nikolov // Доклады Болг. АН. - 1962. - Т.15- 17. - С. 757-759.

233. Noguchi, M. Letection of plasmid DNA in Erysipelothrix rhusiopathiae from pigs with chronic swine erysipelas / M. Noguchi // Japan J. Vet. Med. Assoc. - 1993. -Vol.55, N 2. - P. 349-350.

234. Norring, V. Two new serotypes of Erysipelothrix rhusiopathiae / V. Norring // Nord. Vet. Med. - 1979. - N 31. - P. 462.

235. Obrazhei, A.F. The comparative characteristics of preparations for swine erysipelas immunoprophylaxis / A.F. Obrazhei // Ветеринарна медицина/ Укр. акад. аграр. наук. - Харьюв, 2011. - Вип. 95. - Р. 215-218

236. Ose, E.E. Evaluation of erysipelas vaccines / E.E. Ose // J. Am. Vet. Med. Assoc. - 1972 .- Vol.60, N 4. -P. 603-606.

237. Poole, G.M.. Erysipelas serum titration with sheep red blood cells passively sensitized with a cellular extract / G.M. Poole, F.T. Counter // Appl. Microbiol. -1973. - Vol.26, N 2. - P: 211-212.

238. Rile, T.V. 50 - Erysipeiothrix rhusiopathiae / T.V. Rile, C. J. Brooke, Q. Wang // Molecular Medical Microbiol. - 2002. - Vol.2. - P. 1057-1064.

239. Rosskopf-Streicher ,U. Potency testing of swine erysipelas vaccines by serology results of a prevalidation study/ U. Rosskopf-Streicher, S. Johannes, M. Wilhelm [et al.] // ALTEX. 1999. - Vol.16, N 3. - P. 123-128.

240. Rosskopf-Streicher, U. Quality control of inactivated erysipelas vaccines: results of an international collaborative study to establish a new regulatory test / U. RosskopfStreicher, S. Johannes, M.Wilhelm, K. Cussler // Vaccine. - 2001. - Vol.19, N 11-12. - P. 1477-1483.

241. Sato, H. Protective activity and antigens analyses of fractions of culture filtrates of Erysipelothrix rhusiopathiae / H. Sato [et al.] // Vet. Microbiol. - 1995. - Vol.45. -P. 163-172.

242. Sato, H. Use of the protective antigen of Erysipelothrix rhusiopathiae in the enzyme-linked immunosorbent assay and latex agglutination / H. Sato, Y. Yamazaki, K. Tsuchiya[et al.] // Zentralbl Veterinarmed, B. - 1998. - Vol.45, N 7. -P. 407-420.

243. Sawada, T. Antiserum against culture filtrate is cross-protective for varions serovars of Erysipelothrix rhusiopathiae / T. Sawada // Vet. Microbiol. - 1987. -Vol.4, N 1.

244. Sawada, T. Effect of cyclophosphamide and carragenan on resistance of mice to Erysipelothrix rhusiopathiae / T. Sawada // Vet. Microbiol. - 1987. - Vol.15, N 4. - P. 341-346.

245. Sawada, T. Immunogenicity of different fraction from droth culture of an attenuated strain of Erysipelothrix rhusiopathiae in mice and swine / T. Sawada, T. Takahashi , K. Seto. // Nihon Juigaku Zasshi.- 1987. - Vol.49, N 1. -P. 151-154.

246. Sawada, T. Mechanism of protection induced in mice against Erysipelothrix rhusiopathiae infection by treatment with porcine antiserum to the culture filtrate of an attenuated strain / T. Sawada // Vet. Microbiol. - 1987. - Vol.17, N 1. - P. 65-74.

247. Sawada, T. Protective effect of sera from swine immunized with different fractions from broth culture of an attenuated strain of Erysipelothrix rhusiopathiae / T. Sawada, E.Takahashi, Y. Tamura // Nihon Juigaku Zasshi. - 1987. -Vol.49, N 1. - P. 37-42.

248. Sawada, T. Response of growth agglutinating antibody and protection of pigs inoculated with swine erysipelas live vaccine / T. Sawada // Anal. Biochem. - 1979. -N 47. - P. 603-620.

249. Septicemic infection in lambs caused by the bacillus of swine erysipelas // J. Comparative Pathology and Therapeutics. - 1920. - Vol.33. - P. 212.

250. Shimizu, T. Serological surveillance for antibodies against erysipelothrix species in wild boar and deer in Japan / T. Shimizu, Ch. Okamoto, H. Aoki [et al.] // Japan. J. Vet. Res. - 2016. - Vol.64, N 1. - P. 91-94.

251. Shimoi, L. X. Ervsipelothrix rhusiopathiae YS-1 as a live vaccine vehicle lor heterologous protein expression and intranasal immunization of pigs / L.X. Shimoi., E.Ojshi ,T. Kitajima [et al.] // Infect. Immun. - 2002.- Vol.70, N 1. - P. 226-232.

252. Shuman, R.D. Experimental evaluation of culture and serum vaccination for the control of swine erysipelas. 1. Recapitulation of the swine erysipelas problem. / R.D.

Shuman, H.W. Schoening // J. Am. Vet. Med. Assoc. - 1953. - Vol.123, N 919. -P. 301-304.

253. Shuman, R.D. Experimental evaluation of culture and serum vaccination for the control of swine erysipelas. 4. Gilts vaccinated with culture and serum before breeding and its immunizing effect on their offspring / R.D. Shuman // J. Am. Vet. Med. Assoc. - 1953. - Vol.123, N 920. - P. 431-433.

254. Shuman, R.D. Experimental evaluation of culture and serum vaccination for the control of swine erysipelas. V. Vaccination of weanling pigs using a change in the dosage relationship of culture and serum / R.D. Shuman, F.L. Earl // J. Am. Vet. Med. Assoc. - 1954. - Vol.125, N 931. - P.306-311.

255. Stoew, I. Use of dried serum albumin as shield media in the preparation of lyophilized live vaccine against swine erysipeias / I. Stoew, M. Jotow., S. Simeonow, C. Christowa // Arch. Exp. Veterinarmed. - 1980. - Vol.34, N 1. - P. 59-61.

256. Stoll, L. Serotypen von Erysipelothrix rhusiopathiae / L. Stoll, A. Kast // Vet. Med. - 1970. - Bd.83, N 24. - S .84-85.

257. Stor, P. Experiences in the production of erysipelas serum from swine using erysipelas strains of various virulence in hyperimmunization / P. Stor // Arch. Exp. Veterinarmed. - 1965. - Bd.57, N 1. - S. 70-78.

258. Swine Erysipelas // J. Comparative Pathology and Therapeutics. - 1892. -Vol.5. -P. 179-181.

259. Tacu, D. Electroforetic and immunologic research on serum proteins of rabbits vaccinated or hyperimmunized against swine erysipelas / D. Tacu, L. Gocimian, T. Mindras, A. Tacu // Rev. Immunol. Ther. Antimicrob. - 1964. - N 28. - P. 271-275.

260. Tacu, D. Elektro-phoregram of the blood serum proteins from swine after anti-erysipelas vaccination and hyperimmunization with a view to obtaining hyperimmune

serum / D. Tacu, L. Gocimian, I. Isopescu, T. Mindras // Rev. Immunol. Ther. Antimicrob. - 1961. - N 25. - P. 274-277.

261. Takahachi, T. Gross protection in mice and swine immunized with strains of Erysipelothrix rhusiopathiae of various serotypes / T. Takahachi, M. Takigi // Amer. J. Vet. Res. - 1984. - Vol.15, N 10. - P. 2115-2118.

262. Takahachi, T. Pathogenecity of Erysipelothrix rhusiopathiae strains of serovars 1a, 3, 5, 6, 8, 11, 21 and type N isolated from slaughter pigs affected with chronic erysipelas / T. Takahachi // Japan. J. Vet. Sc. - 1985. - Vol.47, N 1. - P. 1-8.

263. Takahachi, T. Serotypes of Erysipelothrix rhusiopathiae strains isolated from slaughter pigs affected with chronic erysipelas / T. Takahachi, T. Sawada // Japan. J. Vet. Sc. - 1984. - Vol. 46, N 2. -146-153.

264. Takahashi, K. Serological and pathalogenic characterization of Erysipeiothrix rhusiopathiae isolates from tonsils of slaughter pigs in Indonesia / K. Takahashi, S. Zarkasie, M. Sumadi, M. Ogata // Vet. Microbiol.. - 1989. - Vol.21, N2. - P.165-175.

265. Takahashi, T. Enzymatic profiles of Erysipelothrix rhusiopathiae and Erysipelothrix tansillae / T. Takahashi, Y. Tamura , T. Sawada [et al.] // Res Vet Sci. -1989. - Vol.47, N 2. - P. 275-276.

266. Timoney Jf. Jr. Erysipelas arthritis in swine: lysosomal enzyme levels in synovial fluids / Jf. Jr. Timoney // Am. J. Vet. Res. - 1976. - Vol.37, N 3. - P. 295298.

267. Timoney, .Jf.Jr. Erysipelas arthritis in swine: concentrations of complement and third component of complement in synovia / Jf. Jr. Timoney // Am. J. Vet. Res. -1976. - Vol.37, N 1. - P:5-8.

268. To, H. Immunization with truncated recombinant protein SpaC of Erysipelothrix rhusiopathiae strain 715 serovar 18 confers protective immunity against challenge with

various serovars / H. To, S. Someno, S. Nagai [et al.] // Clin. Vaccine Immunol. -2010.- Vol.17, N 12. - P. 1991-1997.

269. Toshio,Takahashi. Correlation between adherence of Erysipeiothrix rhusiopathiae strains of serovar 1A to tissue culture cells originated from porcine kidney and their pathogenicity in mice and swine / Toshio Takahashi, Norio Hirayama, Takuo Sawada [et al.] // Vet. Microbiol. - 1987. - Vol.13, N 1. - P. 57-64.

270. Trautwein, G. Immunopathology and pathogenesis of chronic erysipelas polyarthritis of swine / G. Trautwein, D. Seidler, L.C. Schulz. [et al.] // Zeitschrift für Rheumatol. - 1976. -Bd.35, N 5-6. - S. 217-239.

271. Watarai, M. Comparison of etiological and immunological characteristic of two attenuated strains Erysipelothrix rhusiopathiae of serotypes 1a and 2 / M. Watarai // Japan J. Vet. Sc. - 1993. - Vol.55, N 2. - P. 595-600.

272. Wering, V.S. Iron requirements of heterotrophic bacteria / V.S. Wering, C.H. Werkman //Arch. Biochem. - 1943. - Vol.1, N 3 - P. 425-433.

273. Winkelmann, J. Immunopatholoqic aspects of chronic erysipelas polyarthritis in swine / J.Winkelmann, G. Trautwein, R.. Muller-Peddinghaus [et al.] // Zeitschrift für Rheumatol. - 1983. -Bd.42, N 3. -S. 91-100.

274. Wood, R.L. Serotypes of Erysipelothrix rhusiopathiae isolated from swine and soiland manure of swine Pens in the United States / R.L. Wood // Am. J. Vet. Res. -1979. - Vol.39. - P. 1833-1840.

275. Wood, R.L. Specificity in response of vaccinated swine and mice to challenge exposure with straing of Erysipelothrix rhusiopathiae of various serotypes / R.L. Wood // Am. J. Vet. Res. - 1979. - Vol.40. - P. 795-801.

276. Yamazaki,Y. Protective activity of the purified protein antigen of Erysipelothrix rhusiopathiae in pigs / Y. Yamazaki, H. Sato, H .Sakakura [et al.] // Zentralbl. Veterinarmed B.- 1999. - Vol.46, N 1. - P. 47-55.

277. Zimmerman, G. Ube rein Wachstumpeptid von Erysipelothrix rhusiopathiae / G. Zimmerman, K.H. Kludas // Arch. Exp. Veterinarmed. - 1956. - N 10. - S. 237-245.

9 ПРИЛОЖЕНИЯ