Совершенствование метода цитологической диагностики опухолей молочной железы у собак тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.02, кандидат биологических наук Герасименко, Ирина Иосифовна

• Герасименко, Ирина Иосифовна
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Герасименко, Ирина Иосифовна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Распространение н. клинические особенности опухоли молочной железы у< собак.

1.21 Морфологические исследования - основа постановки диагноза.

1.31 Определение степени распространенности опухолевого процесса.

1.4. Этиология и патогенез рака молочной железы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Совершенствование метода цитологической диагностики опухолей молочной железы у собак»

Актуальность темы исследования. Среди злокачественных новообразований животных, особенно, собак рак молочной железы,является одной из наиболее распространенных патологий. Плохой прогноз и высокая смертность больных раком молочной железы животных определяется поздней его диагностикой и отсутствием онкологической* настороженности при выявлении фоновых процессов. Ежегодный прирост заболеваемости животных от рака молочной железы, опережающий эти показатели по сравнению с другими опухолями, выдвигает проблему борьбы с этим заболеванием на ведущее место. Вследствие высокой частоты поражения молочной железы, заболевание чаще наблюдается у самок. Наибольшее число патологий молочной железы, по мнению некоторых авторов, приходится на возраст 6-9 лет. Раннее выявление злокачественного новообразования, предраковых изменений, а также групп животных повышенного риска с применением цитологического метода исследования позволит снизить выявление запущенных форм рака молочной железы у животных.

В последние годы у ветеринарных врачей все чаще возникают трудности дифференциальной диагностики рака и других заболеваний молочной железы у собак. Для правильного выбора метода лечения, более необходимой становится морфологическая верификация диагноза, поэтому усилия ветеринарных врачей должны быть направлены на совершенствование методов, позволяющих получить материал для гистологического и цитологического исследования

За последние годы наблюдается рост заболеваемости собак раком молочной железы, поэтому объяснимо пристальное внимание к этой проблеме. Тем не менее, более половины хозяев обращаются с запущенными формами заболевания у своих питомцев, что объясняется двумя причинами: ветеринарной и социально-психологической. Последняя из них заключается в простом неверии в лечение, страхе перед неудачной операцией и, как следствие, позднем обращении к специалисту. Поэтому основной задачей, наряду с поисками путей первичной профилактики- является исследование процесса канцерогенеза в зависимости от пола и возраста и разработка способа раннего выявления рака молочной железы у собак.

Цитологический метод дает возможность отслеживать изменения на: клеточном: уровне, которые могут привести к возникновению рака молочной железы, следить за течением патологического процесса в: предоперационном, операционном и послеоперационном периодах. Данный метод позволяет исследовать выделения из соска, пунктаты опухоли, соскобы и мазки- отпечатки с разреза: опухоли* а также соскобы и пунктаты из послеоперационных рубцов или лимфатических узлов.

Цель исследования: усовершенствовать метод цитологического исследования опухолей молочной1 железы у собак.

Задачи исследования:

1. Изучить структуру и распространение-патологии молочной железы у собак в Ростовской области.

2. Выяснить диагностическую ценность. ш сопоставимость различных методов цитологического исследования новообразований молочной' железы у собак

3. Определить преимущества и недостатки различных методов цитологического, исследования;

4. Установить основные цитологические особенности различных клинико-морфологических форм рака молочной железы у собак.

5. Выяснить основные цитологические особенности диагностики метастатических поражений лимфатических узлов:

6. Выяснить диагностическую ценность метода комплексной цитологической диагностики опухолей молочной железы у собак.

Научная новизна работы. В результате проведенной работы предложен метод комплексного цитологического исследования опухолей молочной железы у собак, который включает в себя микроскопирование мазков-отпечатков с эрозированной поверхности; исследование выделений из соска; пунктатов, полученных методом тонкоигольной биопсии до операции; исследование мазков-отпечатков во время проведения операции; микроскопирование соскобов из послеоперационных рубцов; исследование пунктатов лимфатических узлов. Впервые в ветеринарной практике изучена цитологическая картина клинико-морфологических форм рака молочной железы- у собак, установлены дифференциально-диагностические особенности различных инфильтративных процессов в молочной железе.

Теоретическая и практическая значимость. Полученные на большом цитологическом материале результаты позволяют рекомендовать комплексный метод цитологического исследования- больного животного для внедрения в практику, так как он позволяет точно ставить диагноз. С использованием комплексного метода описаны цитологические картины при доброкачественных процессах, воспалительных болезнях, раке молочной железы и метастазах у собак. Использование комплекса цитологических методов позволяет распознавать злокачественное новообразование на ранних стадиях развития, дает возможность для своевременного оперативного, лучевого лечения и гормонотерапии. Осуществление цитологического контроля с оценкой результатов лечения позволяет констатировать изменения в молочной железе в динамике, а также улучшать прогноз заболеваний. Результаты исследований могут быть использованы в ветеринарных клиниках, а также при написании учебных пособий в области клинической цитологии.

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы доложены и одобрены на заседаниях ученого совета ГНУ СКЗНИВИ; на Всероссийской научно-практической конференции «Проблемы, задачи и пути научного обеспечения, приоритетного национального проекта «Развитие АПК»» (г.Новочеркасск, 2008), на VIII. Всероссийской научно-практической конференции- «Современные проблемы и перспективы развития» (г.Саратов,

2008), на XVI Московском международном конгрессе по болезням мелких домашних животных (г. Москва, 2008).

Внедрение результатов исследований. Разработанные практические предложения используются в практической работе городских станций по борьбе с больными животными Ростовской области, в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий на кафедре внутренних незаразных болезней Донского государственного аграрного университета. По результатам исследований опубликованы методические рекомендации.

Публикации. По материалам представленной к защите диссертации опубликовано 14 научных работ, в том числе 1 из списка изданий, рекомендованных ВАК.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

Изучение цитологической картины позволяет установить различные клинико-морфологические формы рака молочной железы собак.

Комплексный цитологический метод исследования молочной железы позволяет увеличить информативность, достоверность и практическое значение цитологического исследования патологий молочной железьг собак.

Структура и-объем работы. Диссертация изложена на 149 страницах компьютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, предложений для практики и списка^ литературы, включающего 229 источников, в том числе 135 на иностранных языках. Диссертация содержит 9 таблиц и иллюстрирована 83 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Патология, онкология и морфология животных», Герасименко, Ирина Иосифовна

4. ВЫВОДЫ

1. У собак в условиях Ростовской области доброкачественные дис-плазии составляют 51,0%, доброкачественные опухоли - 20,5%, рак - 20,5%, метастатические опухоли - 7,0%, саркомы - 0,5% от всех патологий молочной железы.

2. Пик заболеваемости раком молочной железы у собак приходится на 8-10 - лет (29,1%), в возрасте 12-15 лет происходит резкое снижение заболеваемости (6,0%), у животных старше 15 лет рак молочной железы встречается только у 1,7%.

3. При постановке диагноза на доброкачественные опухоли молочной железы информативность метода цитологического исследования выделений из соска составила 66,6 %, метода тонкоигольной биопсии 91,6 %, ин-траоперационного цитологического метода 85,2 %, комплексного цитологического метода исследования 99,6 %.

4. При постановке диагноза на рак молочной железы информативность метода цитологического исследования выделений из соска составила 79,2 %, метода тонкоигольной биопсии 75 %, интраоперационного цитологического метода 99,5 %, комплексного цитологического метода исследования 100 %.

5. В зависимости от степени дифференцировки клеток паренхимы опухоли, в цитологической практике целесообразно различать: низкодиффе-ренцированные, умереннодифференцированные, высокодифференцирован-ные и недифференцированные раки молочной железы у собак.

6. На основании особенностей клеточных структур, распределения клеток в препарате, характера структур клеточных групп и межклеточного вещества целесообразно выделять солидные, фиброзные, скиррозные, медуллярные, папиллярные, дольковые, слизистые, апокринные раки, а также саркомы.

7. Рекомендованный комплексный метод цитологического исследования с обязательным установлением клинико-морфологических форм рака позволяет увеличить информативность и достоверность метода комплексного исследования при постановке диагноза на злокачественные заболевания до 100%, что позволяет проводить раннее выявление рак молочной железы, назначать адекватное лечение и улучшать прогноз при злокачественных заболеваниях молочной железы у собак.

5.ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Представленные цитологические особенности различных форм рака позволяют при цитологической диагностике и постановке диагноза указывать на клинико-морфологическую форму рака с указанием степени диффе-ренцировки.

2. Для квалифицированной своевременной помощи животным с различными патологиями молочной железы предлагается использовать метод комплексной цитологической диагностики.

3. Материалы исследования могут использоваться в учебном процессе при трактовке различных форм злокачественных новообразований молочной железы.

5. Заключение

Возникновению и развитию рака молочной железы предшествуют структурные изменения эпителиального слоя, который морфологически характеризуется как пролиферация, дисплазия и преинвазивный рак. Изучению этих предраковых процессов на клеточном уровне посвящены многие исследования, результаты которых в значительной степени отличаются друг от друга. Цитологически, при пролиферативных процессах и дисплазиях, в эпителии молочной железы появляются клетки с признаками атипии. В зависимости от глубины поражения различают простую пролиферацию, выраженную пролиферацию, пролиферацию эпителия по типу предрака, а также дис-плазию легкой, средней и тяжелой степени. Или слабую, умеренную и выраженную дисплазии. Преинвазивный рак характеризуется изменениями в эпителиальных клетках, свойственных инвазивному раку. Цитологическое определение предракового поражения эпителия молочной железы основывается на степени атипии клеток, находящихся в препарате, а также критериев злокачественности клеток (И.И. Лазарев с соавт., 2001).

В* настоящее время рак молочной железы рассматривается, как хроническое заболевание и подходы к нему несколько изменились.

Не подлежит сомнению, что прогресс в лечении рака молочной железы лежит, прежде всего, в своевременности диагностики, так как результаты терапии его определяются, главным образом, степенью местного и регионарного распространения опухолевого процесса. Это стало особенно очевидно после новых методик лучевого лечения, новейших схем дополнительной хи-мио- и гормонотерапии, иммунотерапии этих опухолей.

Поэтому, основной задачей наряду с поисками путей первичной профилактики, является раннее выявление рака молочной железы у со-бак.Преинвазивные и инвазивные формы рака имеют тесную патогенетическую и гистогенетическую связь с предшествующими и существующими предраковыми изменениями (дисгормональными гиперплазиями, фиброаде-номатозом и т.п.).

Если учесть, что в настоящее время в ветеринарные клиники поступает лишь 10-20% собак, больных раком молочной железы 1 стадии, обнаружение начальных форм его имеет огромное значение в проблеме ранней диагностики, что является существенным сдвигом в сторону более своевременного выявления и успешного лечения этих опухолей. Плохой же прогноз и высокая смертность обычно определяются поздней ее диагностикой и отсутствием онкологической настороженности при выявлении фоновых процессов.

В связи с этим, большое значение приобретает четкая дифференциальная диагностика клинических и морфологических проявлений доброкачественных и злокачественных вариантов предраковых состояний, а также выделение и описание характерных признаков возникновения и начала развития злокачественных опухолей.

Потенциально опасными по трансформированию в злокачественные опухоли в настоящее время, бесспорно, являются дисгормональные гиперплазии (фиброаденомы, диффузные фиброаденоматозы). Фиброаденома' превращается в рак в 18-51%.случаев.

Своевременное выявление характерных клинических, гистологических цитологических признаков злокачественных новообразований, с проведением профилактического адекватного лечебного воздействия предупреждает возможность возникновения рака молочной железы у собак.

Известно, что быстрая и качественная диагностика обеспечивает успех в лечении заболеваний молочной железы животных. Во всем мире продолжается разработка эффективных и экономичных диагностических методов, средств и оборудования, в том числе и в цитологии. Цитологическое исследование биологических жидкостей (выпотных, кистозных и других) имеет большую диагностическую ценность, так как позволяет определить характер процесса (воспалительный, доброкачественный, злокачественный), иногда сделать предположение о локализации первичного очага опухолевого поражения (З.Ф: Климанова, З.В. Гольберт,2002). Очень важна дифференциальная диагностика опухолей по клеточному составу серозных жидкостей с использованием классических цитологических методик и современных иммуноци-тохимических подходов (В.А. Липова, В.А. Котов, 2003). Клеточный состав выпотов при метастазах рака молочной железы чрезвычайно разнообразен вследствие многообразия гистологических форм опухолей.

При метастазах в жидкости могут содержаться крупные изолированные опухолевые клетки, которые складываются в комплексы, в редких случаях выпоты содержат мелкие клетки, лежащие разобщенно и цепочками. В; ряде случаев используется иммуноцитохимия. Клетки рака дают положительную реакцию с НЕА-125, Sam-2yl0, Leu-M-1, CD-I5, MLF-DR, CA-15, Cathepsin D (В.А. Котов, В.А. Липова, 2003).

Рак молочной железы является системным заболеванием, уже на ранних стадиях связанным с нарушениями состояния иммунной системы. Прогрессирующий рост опухоли сопряжен с нарастанием сдвигов клеточно-опосредованного и гуморального, иммунитета, с превалированием иммуноде-прессирующих механизмов: с активацией клеток - супрессоров, повышением уровня блокирующих факторов в сыворотке крови, угнетением эндокринной функции тимуса, усилением глюкокортикоидной функции коркового вещества надпочечников (Дж.ПлейферД998).

Информативность метода во многом зависит от правильной методики получения материала и учета данных комплексного обследования больного. Тонкоигольная аспирационная; биопсия (ТАБ) при диагностике рака, молочной железы является достаточно высоко достоверным^ и эффективным' методом исследования. Этот метод имеет ряд преимуществ по сравнению с биопсией. Пункция может быть проведена в амбулаторных условиях, не травматична и не дает осложнений. Материал для цитологического исследования может быть получен неоднократно, обработка его достаточно проста. Этот метод объективен, достоверен, легко доступен.

Возможности цитологической-диагностики заболеваний молочной железы при интраоперационной экспресс - диагностике в настоящее время являются большим подспорьем клиницистам при хирургическом лечении.

Происходит не только дополнительное исследование больного животного, уточнение диагноза в случае его предположения, но и постановка диагноза, когда он не был выставлен в результате неполного набора цитологических критериев для установления патологического процесса.

Таким образом, результаты цитологического исследования соскобов во время срочного интраоперационного исследования, срочного гистологического исследования, а также окончательного гистологического диагноза дают клиницисту весь комплекс морфологического исследования и выбора дальнейшей тактики ведения больного животного.

Основное значение приобретает четкая дифференциальная диагностика клинических и морфологических проявлений доброкачественных и предопу-холевых процессов в молочной железе, а также выделение и описание характерных признаков возникновения и начала развития злокачественных изменений в молочной железе собак. Своевременное выявление характерных клинических, гистологических и цитологических признаков новообразования с проведением профилактического- адекватного лечебного воздействия предупреждает возможность возникновения рака молочной железы.

Большую актуальность имеет проблема ранней диагностики злокачественных новообразований молочной железы, особенно начальные этапы развития, когда еще можно вылечить больное животное. Возникновение и развитие рака молочной железы имеет свои возрастные особенности. Возраст создает определенный риск в возникновении рака молочной железы(В. Мае Malvón е. А.,2000).

Факторы риска заболеваемости раком у собак с пролиферативными процессами в молочных железах различны в зависимости от возраста, когда изменения начинаются на клеточном уровне, и исход заболевания зависит от иммунологического, психологического и этиологического статуса. (W.D. Dupont, D.L. Page, 2003)

Важным аспектом лечения рака молочной железы является обычно проводимое удаление регионарных лимфатических узлов. Имеются разные мнения о роли регионарных лимфатических узлов при развитии рака молочных желез. С помощью исследования активности лимфоцитов in vitro (торможение миграции лейкоцитов в присутствии ассоциированных с опухолью антигенов и др.) показано, что функциональная активность лимфоцитов регионарных лимфатических узлов без метастазов значительно выше, чем клеток периферической крови (H.H. Александров с соавт., 2001). Это различие особенно выражено в реакциях на опухолевые антигены. На основании этого R. Ellies и соавторы (2003) рекомендуют при I стадии рака молочной железы проводить лишь мастэктомию без удаления регионарных лимфатических узлов.

Поиск информативных маркеров рака молочной железы пока не завершается разработкой метода ранней специфической диагностики заболевания. Однако определение некоторых из них в пораженных тканях гистохимическими методами позволяет выявить даже единичную опухолевую клетку, что невозможно* при. применении обычных исследований. Для каждой больной собаки, можно подобрать индивидуально комплекс маркеров, который позволил бы объективизировать оценку эффективности лечения, своевременно сигнализировал бы о развитии рецидивов и метастазов (Гриневич Ю.А., Каменец Л.Я., Билынский Б.Т., Лобода В. И., 2000).

С большими надеждами связаны исследования по разработке методов специфической и неспецифической, активной и пассивной иммунотерапии. Данные литературы последних лет подтвердили положение,, выдвинутое. Ж. Матэ о том, что иммунотерапия может быть эффективна для больных собак, у которых удалена основная масса опухолевых клеток. Применение неспецифической активной иммунотерапии у больных раком молочной железы позволяет не только улучшить непосредственные результаты лечения,.но и увеличить продолжительность безрецидивного периода и выживаемость больных животных, подвергшихся'радикальному лечению. Это является основанием для более широкого использования и рационального комбинирования средств, повышающих функциональную активность им-ммунной системы.(Г.К. Закенфельд,2002).

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Материал и методы исследований

Работа выполнена' в лаборатории функциональной диагностики болезней сельскохозяйственных животных ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадемии, на базе ветлечебниц г. Ростова-на-Дону, г. Шахты и г. Таганрога.

В работе использованы статистические данные о поступлении собак с опухолями молочных желез, начиная с января.2003 года по 2007 год, регистрируемые в амбулаторных журналах.

Клинико-зкспериментальная часть выполнялась с середины 2003 г. На всех животных были оформлены истории болезни, отражающие клинический статус каждого больного1 животного, данные лабораторных исследований, сведения о клиническом-течении опухолевой болезни, отдаленные результаты лечения, а также дальнейшую судьбу каждого больного животного.

В историю болезни- заносились сведения, о породе, возрасте, поле, анамнестические данные условий содержания, кормления и др., о начале появления и характере дальнейшего проявления опухолевого роста, о предшествующих болезнях, перенесенных животными.

Особое внимание обращалось на сведения о возможных нарушениях полового цикла, о количестве щенностей, о наличии ложной, беременности; устанавливалось время появления опухолей в связи с щенением и лактацией.

При клиническом осмотре больных животных проводилось общее исследование: определение температуры, частоты пульса, дыхания, учитывалось наличие, снижение или отсутствие аппетита. Определялась локализация опухоли, ее величина, форма, консистенция, связь с окружающей тканью. Устанавливалось наличие первичной-множественности опухоли, метастазов, рецидивов.

Гематологические исследования проводились по общепринятой методике.

Для уточнения и дифференциации опухолей проводились цитологические и патоморфологические исследования в лаборатории ГНУ СКЗНИВИ.

Объектом цитологического исследования служили пунктаты из опухо лей и опухолевидных образований молочных желез; пунктаты регионарных лимфатических узлов; выделения из сосков; соскобы с эрозированных и язвенных поверхностей соска, околососковой зоны: и других участков органа; отпечатки с удаленной,ткани молочной железы и лимфатических узлов.

Диагностическая пункция молочной железы проводилась иглами диаметром не более 1 мм. Для аспирации материалов использовались шприцы емкостью 20 мл. Во всех случаях при пунктировании, больные животные надежно фиксировались. При больших размерах опухоли (5 см и более в диаметре) и различной ее плотности; получались два или три пунктата из разных участков. Выделения, из соска, были получены путем легкого- надавливания! пальцами на область соска и околососковотзоны, а затем;на: ткань молочной; железы с последовательным; переходом от одного сектора к другому. Во всех случаях мазки готовились как из первой капли; так и из всех последующих. Если выделения были обильные и капли различны по цвету, то они помещались на разные стекла, при этом особое внимание акцентировалось на кровянистые и сукровичные выделения;

Отпечатки; и соскобы с эрозий и язв готовились после того, как с поверхности патологического очага осторожно удалялись гноевидные массы, корочки, некротический налет. Отпечатки получались путем прикосновения предметным стеклом к изъязвленному участку. Соскоб был получен путем осторожного поскабливания патологической поверхности деревянным шпателем или краем покровного стекла. Если появлялись капли крови, то получение соскоба прекращалось.

Отпечатки и соскобы с ткани удаленного патологического очага готовились сразу же после операции, путем прижатия; предметного стекла к поверхности свежего разреза; или при поскабливании, ткани покровным предметным стеклом или скальпелем.

Из пунктатов, выделений из сосков, соскобов и отпечатков готовились тонкие мазки. Если полученный пунктат представлял собой жидкость, то она центрифугировалась и мазки готовились из осадка.

Отпечатки с поверхностей опухолей и мазки из пунктатов готовились в первый день приема животных. Полученные отпечатки и мазки высушивались на воздухе, фиксировались и окрашивались. В работе использовались основные методы окраски цитологических препаратов: окраска по Романов-скому-Гимзе и гематоксилин - эозином для мазков; Сухие мазки фиксировались в метиловом спирте 5минут или в смеси Никифорова 15 минут. Затем стекла погружались в рабочий раствор готового красителя Романовского-Гимзе на 15-20 минут, после чего препараты промывались.дистиллированной водой и высушивались. При окраске гематоксилин - эозином мазки фиксировались в смеси равных частей эфира и 96% спирта или в 96% спирте 7-10 минут. Препараты окрашивались в гематоксилине 5 минут, и промывались в проточной воде. 1-2: минуты. Затем стекла окрашивались 1 минуту в 0,3% спиртовом растворе эозина и промывались в проточной воде 1-2 минуты и • высушивались. Еотовые. препараты просматривались под. микроскопом с иммерсионной системой (увеличение 7x90) по 2-5 отпечатков из одной? опухоли.

Цитограммы сопоставлялись с результатами исследований гистологических препаратов. При цитологическом заключении, учитывалась клиническая картина заболевания* и макроскопический характер пунктатов;

В' части случаев было проведено вскрытие трупов павших или умерщвленных больных животных с целью уточнения клинического диагноза, установления наличия или отсутствия метастазов и сопутствующих изменений со стороны отдельных органов.

В случаях хирургического лечения проводилось описание операции: наркоз, местное обезболивание, оперативный доступ и оперативный прием, исход оперативного вмешательства.

Сразу после операции на молочной железе и доставки материала в лабораторию с ткани' удаленного патологического очага готовились соскобы предметным стеклом или скальпелем с поверхности свежего разреза, и мазки- отпечатки либо путем прижатия предметного стекла к поверхности патологического очага, либо путем соскоба с участка ткани другим предметным стеклом или скальпелем.

Материал для срочного цитологического исследования получался с разреза оперативно удаленной ткани, осадка смыва с операционной раны, инструментария, во время операции или после операции. Готовились мазки, мазки- отпечатки» или соскобы. Срочная диагностика по соскобам и мазкам-отпечаткам методом комплексного' макроскопического и цитологического исследования осуществлялась на операционном материале в сочетании с макроскопическим изучением опухоли, разрезанной на несколько пластин из участков, наиболее полно характеризующих патологический процесс или подозрительных- в отношении малигнизации. Острием скальпеля брался соскоб; из которого готовились мазки или брались мазки-отпечатки на предметные стекла. Мазки фиксировались и окрашивались по Романовскому-Гимзе или гематоксилин - эозином. Параллельно проводилось срочное гистологическое исследование.

Взятие материала на срочное цитологическое исследование проводилось одновременно со срочным гистологическим исследованием. Иногда материал брался из 2-3 участков, которые соответственно маркировался, окрашивался по Романовскому - Гимзе или гематоксилин - эозином. Затем проводилось микроскопическое исследование.

Параллельно готовились гистологические препараты. Гистологический метод позволяет определить наличие и установить степень инвазии злокачественного процесса, а цитологический метод позволяет увидеть ранние изменения на клеточном уровне, а также установить степень дифференцировки злокачественного процесса. Таким образом, обе морфологические службы дают более полную информацию о патологическом процессе в молочной железе и помогают в выборе адекватной тактики лечения. После проводки гистологического материала (фиксации, уплотнения, заливки в парафин, резки на микротоме, окраски и заключения в среды) выставляется окончательный гистологический диагноз после срочного исследования, что верифицирует и цитологическое заключение. Расхождение в диагнозах весьма невелико и составляет около 0, 6% от общего количества исследований за год.

2.2. Распространение патологий молочной железы у собак.

В период с 2003 по 2007 годы было проведено 29210 цитологических исследований у 5655 больных собак с различными заболеваниями молочной железы в возрасте от 2 до 16 лет, из них комплексному цитологическому исследованию подвергнуто 367 животных. Из них рак молочной железы был выявлен у 1010 собаки, что составило 17,8% от всех инфильтративных заболеваний молочной железы, доброкачественные дисплазии были выставлены у 2885 больных животных, что составило 51%. Доброкачественные опухоли встречались чаще, чем злокачественные. Они наблюдались у 1160 собак, что от общего числа заболеваний молочной железы у собак составило 20,5%. Воспалительные процессы были обнаружены у 175 животных (3,1%), метастатические опухоли встречались только у 398 животных (7%), а саркомы -у 27 животных, что составило 0,5% от общего количества (табл.1).

Вместе с тем, диагностическая значимость материала, полученного различными методами исследования, неодинакова: Как видно из таблицы, наибольшее число диагнозов было-поставлено по пунктатам. Распределение материала, полученного различными способами, представлено в таблице 1 и на диаграмме (рис.2).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Герасименко, Ирина Иосифовна, 2008 год

1. Андреев, Г.М. Рецидивы новообразований во влагалищах у собак / Г.М. Андреев, B.C. Пономарев, Т.В. Пономарева, M.F. Андреев // Ветеринария, 2000 №7 С. 55.2: Аллен, В.Э. Полный; курс акушерства и гинекологии собак / В.Э. Аллеи М.: Аквариум, 1999. - 446 с.

2. Аничков, H.H. Морфология заживления ран /Н.Н.Аничков, К.Г. Волкова, В.Г. Гаршин — М.: Медгиз, 1951. 123 с.

3. Анников, В.В. Случай лейкоза у собак в городе Саратове. Материалы III Международной конференции "Актуальные проблемы вет. медицины мелких домашних животных на Северном Кавказе"./Анников, В.В. Рыхлова A.C.//Персиановский, 2000, с. 20 21.

4. Апатенко^ В.М; Иммунодефицит у животных / В.М. Апатенко // Ветеринария. 1982. - №5. - С. 29 - 30;

5. Арзуманян, F.A. Цитологическая диагностика предраковых заболеваний и рака*молочной железы) с учетом некоторых гистологических критериев (патоцитоморфологические и гистологические параллели). Автореферат докторской диссертации.,Ереван, 1967.

6. Аркадьева, Т.В. Пути улучшения ранней выявляемости рака молочной железы (опыт Краснодарского; городского онкологического диспансера). Современная онкология, т. Г/№2, 1999.

7. Афонский, С.И; Биохимия животных: учебник / С.И. Афонский. Изд. 3-е, иерераб. и доп. - М.: Высшая школа, 1970. - 612 с.

8. Баранов, С.В. Диагностика опухолей у собак. Ветеринария, 1991, №6, с. 66-68.

9. Баранов, А.Е. Здоровье вашей собаки / Е.А. Баранов. М.: РИМЭКС, 1993.-180 с.1.. Барбер, Хыо Р.К. Иммунобиология для практических врачей? / Хью, Р.К. Барбер М.: Медицина, 1980. - 352 с.

10. Баранов, C.B. Распространение опухолей у собак и кошек. Ветеринария, 1991, №1, С.65.

11. Белов, А.Д. Болезни собак / А.Д. Белов, Е.П. Данилов, И.И. Дикур. -Изд. 2-е М.: Колос, 1995.- 386 с.

12. Белов, А.Д. Болезни собак / А.Д. Белов, Е.П. Данилов, И.И. Дикур. -М.: Агропромиздат, 1990. 290 с.

13. Бернет, Ф.М. Целостность организма и иммунитет / Ф.М. Бернет. М.: Мир, 1964.-184 с.

14. Братюха, С.И.Болезни ваших питомцев / С.И. Братюха, И.С. Нагорный, И.П. Ревенко Киев: Альтерпресс, 1995. - 335 с.

15. Бочаров, H.A. Частная патология и терапия внутренних незаразных болезней домашних животных / А.Н. Бочаров. М.: СЕЛЬХОЗИЗДАТ, 1978. — 279 с.

16. Блох, М.Л. Диагностические возможности пунктатов опухолей молочной железы на разный стадиях опухолевого процесса. В кн. «Цитологическая диагностика новообразований», М., 1969, с. 33-34.

17. Бухарова, Н.К. Опыт применения фторафура в терапии спонтанных опухолей домашних животных. Актуальные вопросы онкологии и радиологии. Алма-Ата, 1975, с.216-218.

18. Бычков, М.Б. Тонотекан ингибитор тоноизомеразы 1- новый противоопухолевый препарат. Современная онкология, т.1 /№1, 1999, с. 1 - 8.

19. Васильева, Е.А. Клиническая биохимия сельскохозяйственных животных /Е.А.Васильева. -М.: Россельхозиздат, 1971.-126 с.

20. Васильев, Ю.М. Социальное поведение нормальных клеток и антисоциальное поведение опухолевых клеток: Клетки строят ткань. Соросовский обозревательный журнал. 1997, №5, с. 20 25.

21. Веревкина, Т.С., Зубова H.H. Материалы к статистике опухолей собак и кошек. Тр. АМН СССР. Вопросы онкологии, 1952, 5.

22. Вихерт, А.М. Опухоли мягких тканей. Микроскопическая диагностика. Изд. "Медицина", М., 1969, с. 172.

23. Гаркави, JI.X. Антистрессорные реакции и активационная терапия. Реакция активации как путь к здоровью через процессы самоорганизации. М., "Имедис", 1998, с. 650.

24. Гарин, A.M. Некоторые новые возможности химиотерапии злокачественных опухолей. // Вестник АМН СССР, 1974, № 4.

25. Голубева, В.А. Использование метода цитологического исследования в диагностике опухолей молочных желез собак. Материалы VI-й Всесоюзной конференции по патологической анатомии животных. Тарту, т.1, 1977, с. 357359.

26. Голубева, В.А. Рак молочных желез собак (гистогенез, морфология и лечебный патоморфоз), автореферат кандидатской диссертации. М., 1979.

27. Голубева, В.А. Рак молочных желез собак (клиническая картина, морфология, прогноз). Ветеринария №2/88.

28. Григорашвили, З.Г. Материалы по изучению спонтанных опухолей у собак. Тбилиси, 1968, с21.

29. Данилевская, Н.В. Справочник ветеринарного терапевта / Н.В. Данилевская, A.B. Коробов, C.B. Старченков, Г.Г. Щербаков. СПб., 2000. - 384 с.

30. Делберг, Дж. К. Домашний ветеринарный справочник для владельцев собак / Дж.К. Делберг, Д.М. Гиффин. -М.: Центрополиграф, 2002. 572 с.

31. Дементьева, Н.П. Комбинированная химиотерапия, включающая адри-абластин, при распространенном раке молочной железы. "Вопросы онкологии", 1981, т. 27, №5.

32. Домосканов, И.В. Удаление опухолей молочных желез у собак. Ветеринария, № Ю, 2000, с. 54-56.

33. Домосканов, И.В. Рецидивы и осложнения после удаления молочных желез у собак. Ветеринария XII - 53, 2000.

34. Елесеев, А.Н. Болезни собак / А.Н. Елесеев. М.: Росагропромиздат, 1998. - 169 с.

35. Ефимов, Г.А. Проблемы онкологического больного. Волгоград, 1998, 125с.

36. Зайчик, А.Ш. Основы общей патологии / А.Ш. Зайчик, Л.П. Чурилов. -СПб., ЭЛБИ-СПб., 1999. 605 с.

37. Зверев, A.A. Профилактика послеродового мастита / A.A. Зверев // Мед. сестра. 1990. - № 5. - С. 70-73.

38. Зверева, Г.В. Борьба с маститами коров в промышленных животноводческих комплексах / Г.В. Зверева // Тезисы докладов Всесоюзной школы молодых ученых и специалистов. М., 1983. - С. 15-17.

39. Земсков, В.М. Фагоцитоз: физиологические и молекулярные аспекты / В.М. Земсков //Успехи современной биологии. 1984. - Т. 98, №2. - С. 219 -235.

40. Зильбер, A.A. Вирусо-генетическая теория происхождения рака. М. 1968.-.С 47-49.

41. Золотаревская В.Б., Зальцман И.Н. и др. Морфологическая диагностика ранних форм рака молочной железы. "Архив патологии", 1975, т. 37, № 1, с. 31-38.

42. Зоммер, Р.Т., Опухоли молочных желез у собак. "Российская охотничья газета", 1 апреля 1998-.12с.

43. Зубко, В.Н. Все о вашей собаке / В.Н. Зубко. М.: Эра, 1992. - 180 с.

44. Игнатова, Г.Л. Иммунология. — / Г.Л. Игнатова, И.Г. Сидорович. М.: Медицина, 2000. - 430 с.

45. Ищенко, В.Е. Гистотопографическое изучение процентного содержания и локализации хроматиноположительных клеток в раковых опухолях молочных желез. // Вопросы онкогенетики. Материалы республиканской научной конференции, "Здоровье", Киев, 1975, с. 47 51.

46. Калашник, Ф.Ф. Опухоли наружных половых органов у собак. Тезисы 1-й региональной конференции "Актуальные проблемы вет. медицины мелких домашних животных на Северном Кавказе", Персиановка, 1998, с.99 -101.

47. Калашник, Ф.Ф. Применение препарата АСД-Ф-2 при опухолях у домашних животных. (Там же, см. выше, с. 101 102).

48. Калашник, Ф.Ф. Цитологическая диагностика опухолей у домашних животных. Рекомендация для ветеринарных специалистов. Персиановка, 1986, с.10.

49. Карнецкая, H.JI. О встречаемости некоторых опухолей кожи у собак в Санкт-Петербурге. Материалы 2-й региональной конференции "Актуальные проблемы ветеринарной медицины мелких домашних животных на Северном Кавказе", п. Персиановский, 1999, с. 65-66.

50. Карпов, В.А. Акушерство и гинекология мелких домашних животных / В.А. Карпов. М.: Росагропромиздат, 1990. - 288 с.

51. Карпуть, И.М. Аутоиммунные заболевания животных / И.М. Карпуть. Минск: Сельхознаука, 1989. - 194 с.

52. Карпуть, И.М. Иммунология и иммунопатология болезней молодняка / И.М. Карпуть. Минск: Ураджай, 1993. - 287 с.

53. Кашин, А.Н. Оказание хирургической помощи собакам /А. Кашин, Н. Левченко // Ветеринария. 1994. - № 3. - С. 50-54.

54. Кватер, Е.И. Гормональная диагностика и терапия в акушерстве и гинекологии / Е.И. Кватер. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Медгиз, 1961. - 359 с

55. Колб, В.Г. Клиническая биохимия: пособие для врачей-лаборантов / ВТ. Колб, B.C. Камышников Минск: Беларусь, 1976. - 311 с.

56. Коляков, Я.Е. Ветеринарная иммунология / Я.Е. Коляков. М.: Агро-промиздат, 1986. - 272 с.

57. Кондрахин, И.П. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии / И.П. Кондрахин, Н.В. Курилов, А.Г. Малахов и др. М.: Агропромиз-дат, 1985. - 287 с.

58. Кондрахин, И.П. Клинико-лабораторные методы исследования животных / И.П. Кондрахин, И.Д. Шпильман. М., 1983.

59. Кононский, А.И. Биохимия животных : учеб. пособие для вузов / А.И. Кононский. Киев: Вища школа, 1980. - 432 с.

60. Коржуев, П.А. Гемоглобин / П.А. Коржуев. М.: Наука, 1964. - 16 с.

61. Корячкин, В.А. Синдром эндогенной интоксикации / В.А. Корячкин // Интенсивная терапия угрожающих состояний: сб.науч.тр. СПб., 2002. - С. 86 - 100.

62. Костюченко, A.JI. Интенсивная терапия послеоперационной раневой инфекции и сепсиса / A.JI. Костюченко, А.Н. Вельских, А.Н. Тулупов. -СПб.: Б.и, 2000.-445 с.

63. Корсун, А.Н. Диагностика и лечение опухолевых заболеваний мелких домашних животных. Тезисы региональной конференции по актуальным проблемам вет. медицины мелких домашних животных. Краснодар, 2001, с. 28-30.

64. Краевский, H.A. Сравнительные аспекты опухолей у собак. Проблемы экспериментальной онкологии и лейкозов человека и животных. М., "Колос", 1979, с. 107-113.

65. Крюков, Д.А. Влияние рациона животного на иммунный статус организма. Тезисы региональной конференции по актуальным проблемам вет. медицины мелких домашних животных. Краснодар, 2001, с.31-40.

66. Кудрявцев, A.A. Клиническая гематология животных / A.A. Кудрявцев, Л.А. Кудрявцева. М.: Колос, - 1974. - 399 с.

67. Кудряшов, A.A. Патологическая анатомия и патогенез инфекционных болезней собак и кошек / A.A. Кудряшов. СПб., 1999. - С. 175.

68. Кудряшов, A.A. Структура причин падежа собак в Санкт-Петербурге по данным за 21 год / A.A. Кудряшов, В.Н. Миронов // Ветеринария. 1994. -№.9.-С. 49-51.

69. Кузьмин, A.A. Советы Айболита, или здоровье вашей собаки. Справочник практического врача по болезням собак / A.A. Кузьмин. Харьков: Паритет ЛТД, 1995. - 320 с.

70. Куприянова, П.И. Эффективность оперативного лечения рака молочной железы у собак. Материалы девятого международного ветеринарного конгресса. 12-14 апреля 2001, М., Россия, с. 253-254.

71. Лазарева, Д.Н. Стимуляторы иммунитета / Д.Н. Лазарева, Е.К. Алехин. М.: Медицина, 1985. - 161 с.

72. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М.: Высшая школа, 1980. - 291 с.

73. Ланская, Н.В. Дисфункция молочной железы: диагностика и стабилизация функционального гомеостаза препаратами растительного происхождения: автореф. дис. канд. биолог, наук. / Н.В. Ланская. Орёл, 2001. - 22с.

74. Лебедев, A.B. Незаразные болезни собак и кошек /A.B. Лебедев, С.В. Старченков, С.Н. Хохрин, Г.Г. Щербаков. СПб.: ГИОРД, 2000. - 296 с.

75. Летягин, В.П. Рак молочной железы. / В.П. Летягин, К.П. Латионов, И.В. Высоцкая, В.А. Котов // М., 1996. 217с.

76. Липницкий, С.С. Справочник по болезням домашних и экзотических животных / С.С. Липницкий. Минск: Ураджай, 1996. - 269 с.

77. Любас, Д. Переливание крови у кошек и собак / Д. Любас // Фокус. -1996.-Т. 6, №4.-С. 3-10.

78. Любашенко, С.Я. Болезни собак / С.Я. Любашенко. М., Колос, 1974.

79. Майоров, А.И. Болезни собак / А.И. Майоров. М.: Колос, 2001. - 472 с.

80. Мартынов, А.И. Интенсивная терапия / А.И. Мартынов. М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1999.-639 с.

81. Сюрин, В.Н. Методы лабораторной диагностики болезней животных: справ. / В.Н. Сюрин, A.B. Белоусова, Б.В. Соловьев, Н.В. Фомина. М.: Аг-ропромиздат, 1996. - 351 с.

82. Мельник, А.Н. Цитоморфологическая диагностика опухолей. Киев, "Здоровье", 1983, с. 4- 111.

83. Микинс, Дж. JI. Нарушения защитных механизмов организма-хозяина. Иммунологические аспекты инфекционных заболеваний / Дж. JI. Микинс, Н. В. Кристоу. М.: Мир, 1982. - 173 с.

84. Митин, В.Н. От мумий к ракетам и далее к противораковой терапии. /Н.Г. Козловская, В.Ф. Хохлов, В.Н. Кулаков, Н.В. Данилевская // Материалы девятого Московского международного конгресса 12-14 апреля 2001, М., Россия, с. 268-269.

85. Мозгов, И.Е. Фармакорегуляция физиологических процессов у животных / И.Е. Мозгов // Ветеринария. 1979. - № 6. - С. 25 - 26.

86. Моисеенко, В.М. Диагностика рака молочной железы // Вопросы онкологии. 1966, №1, с. 15-22.

87. Морозова, С.М. К гистологической характеристике спонтанных опухолей домашних животных / С.М. Морозова, И.В. Скородумова // Ветеринария, 1966, № 11, с. 66-69.

88. Непомнящая, С.М. Рак молочной железы на фоне фиброаденом. В кн. "Новые методы интенсивной терапии онкологических больных" /С.М.Не-помнящая , Т.В.Зубкова , О.А.Попович М., 2000, с. 142-144.

89. Ниманд, Х.Г., Болезни собак : практическое рук. для ветер, врачей / Х.Г. Ниманд, П.Ф. Сутер М.: Аквариум, - 1999. - 816 с.

90. Осипов, Н.Е. Диагностика и лечение трансмиссивной саркомы собаки / Н.Е. Осипов, В.А. Голубева // Ветеринария, № 6, С. 1976.

91. Островский, Н.С. Диагностика саркоматозных опухолей методом отпечатков. Ветеринария, № 5, 1953, С. 45.

92. Париков, В.А. К вопросу о классификации патологического процесса в молочной железе / В.А. Париков, Г.Н. Кузьмин, В.И. Слободяник // Материалы межвуз. конф. Воронеж, 2000. - С. 196-197.

93. Петрова, C.B. Иммуногистохимическая диагностика опухолей человека. / C.B. Петрова, А.П. Киясова. Казань, 1998.

94. Петрова, A.C. Руководство по цитологической диагностике опухолей человека. / C.B. Петрова, М.П. Птахова М., "Медицина, 1976.

95. Пономарьков, В.И. Опухоли у собак. Охота и охотничье хозяйство, 1985, №8, с. 17.

96. Пономарьков, В.И. Спонтанные опухоли-собак. Автореф. канд. дисс., М., 1986, с. 28.

97. Полянцев, Н.И. Ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных / Н.И. Полянцев, В.В. Подберезный. Ростов н/Д.: Феникс, 2001. -480 с.

98. Райхлин, Н.Т. Ультраструктура опухолей* человека. Руководство для диагностики /Н.Т. Райхлин, Г. Давид, К. Лапиш. М. Медицина, 1981.

99. Райхлин, Н.Г. Вопросы онкологии. 1984, № 30, с. 114-119.

100. Райхлин, Н.Г. Опухолевая клетка. В кн.: Общая патология человека. Руководство. М., Медицина, Издание 1, 1990, т.2, с. 327-335.

101. Рыхлов, A.C. Характер новообразований у собак в городе Саратове. /A.C. Рыхлов, В.В. Анников // Материалы III Международной конференции "Актуальные проблемы вет. медицины мелких домашних животных на Северном Кавказе", Персиановка, 2000, с. 60-62.

102. Самойлова, И. Иммунодефицит кошек. "Ветеринарная газета", № 4, 1999.

103. Самошкин, И.Б. Предоперационная анестезия при травмах у собак. / И.Б. Самошкин, Е.А. Воронцова//Ветеринария, 1988, № 10, с. 26.

104. Семенов, A.A. Природные противоопухолевые соединения. Изд. "Наука", Сибирское отделение, Новосибирск, 1979.

105. Сергеев, С.И. Комплексная диагностика рака молочной железы. /С.И. Сергеев, П.В. Власов, И.М. Островская. М., "Медицина", 1978.

106. Серов, В.В. Иммунопатология почек. / В.В. Серов, И.Б. Самошкин, Е.А. Воронцова. М., "Медицина", с. 173.

107. Скородумова, И.В. Гистоморфология опухолей молочной железы у плотоядных. /И.В. Скородумова, С.М. Морозова // Ветеринария, № 1, 1969.

108. Скородумова, И.В. Анализ спонтанных опухолей мелких домашних животных. /И.В. Скородумова, С.М. Морозова // Ветеринария, № 8, 1974.

109. Соколова, В.К. К вопросу о цитологических изменениях при химиотерапии рака молочной железы /В.К. Соколова, В.Д. Жукова. В кн.: "Цитологическая диагностика новообразований", М., 1969, с. 32-33.

110. Старостина, Г. Единоборство с раком у собак. Газета "Птичий рынок", 1997, с. 22.

111. Стуков, А.Н. Полихимиотерапия опухолей и терапевтический синергизм. //Вопросы онкологии, 1979, т. 25, № 9.

112. Сметник, В.П. Неоперативная гинекология / В.П. Сметник, Л.Г. Ту-милович. СПб.: Сотис, 1995. - 261 с.

113. Соколов, В.Д. Клиническая фармакология с терапией собак и кошек / В.Д. Соколов. СПб., 1994. - 196 с.

114. Сонин, П.Ф. Лабораторная диагностика болезней у животных : учеб. пособие / П.Ф. Сонин // Ленингр. ветер, ин-т. 2-е изд., доп. - Л.: 1989. - 73 с.

115. Степаненко, М.В. Методика кормления собак / М.В. Степаненко // Материалы междунар. науч.-практич. конф. Троицк, 2000. - С. 4-5. - Вып. 3.

116. Студенцов, А.П. Болезни вымени коров / А.П. Студенцов. М.: Сель-хозиздат, 1952.

117. Студенцов, А.П. Ветеринарное акушерство, гинекология и биотехника размножения / А.П. Студенцов. М.: Колос, 2000. - 495 с.

118. Тарасов, С.А. Опухоли собак по секционным данным. / С.А. Тарасов, С.Ф. Сахаров //Вопросы онкологии, т. 14, 12, 1968.

119. Тарасов, С.А. Патоморфология опухолей и лейкозов у животных: лекция для студентов и слушателей. ФПК. Л., 1990, с. 37.

120. Терехов, П.Ф. Спонтанные злокачественные новообразования домашних животных. Автореферат докторской диссертации. М., 1972.

121. Терехов, П.Ф. Злокачественные новообразования домашних животных. Методическое пособие для студентов ветеринарного факультета и ветврачей. М., 1980, с. 19.

122. Терехов, П.Ф. Ветеринарная клиническая онкология. М., "Колос", 1983.

123. Тиняков, Г.Г. Цитологический анализ опухолевых и нормальных тканей крупного рогатого скота. /Г.Г. Тиняков, А.И. Похомова // Цитология и генетика, т. 3, № 4,1969, с. 291-296.

124. Трояновский, С.М. Промежуточные филаменты в норме и патологии. ИНТ ВИНИТИ сер /С.М. Трояновский, Г.М. Банников // "Общие проблемы физико-химической биологии", 1989, с. 187.

125. Федоров, Ю.Н. Иммунодефициты домашних животных / Ю.Н. Федоров, О.А Верховский. М.: Медпрактика, 1996. - 95 с.

126. Федюк, В.И. Справочник по болезням собак и кошек : справочник / В.И. Федюк, И.Д. Александров, Т.Н. Дерезина, С.Н. Карташов. Ростов н/Д.: Феникс, 2000. - 324 с.

127. Хрусталев, С.А. Сравнительное онкологическое изучение спонтанных гемобластов у собак. Вестник АМН СССР, 5, 1978.

128. Шиллер-Волкова, Н.Н. и др. Цитологическая диагностика злокачественных новообразований. Атлас, М., 1964.

129. Яременко, К.В. Природные средства против рака. Издательский дом "Нева", Санкт-Петербург, Издательство "Олма-Пресс", Москва, 1999.

130. Alle, К.М. Cichin D1 protein is overexpressed in hyplasia and intraductal carcinoma of the breast. / K.M. Alle, S M. Henshall, A.S. Feld, R.L. Sutherland //Clin. Cancer Res. 1998; 4; 847 854.

131. Baker, E. Cutaneous lymphosarkoma in the clog. Canine Practice. 1978, 5: 49-51.

132. Bancroft, A. Stevens. Theory and practice of histological techniques. // Churchill Livinstone, 1990, p. 726.

133. Barnes, D.An immunohistochernical evaluation of c-erbB-2 expression in human breast carcinoma. / D. Barnes, G. Lammie, R. Millis, W. Gullik //Br. J. Cancer, 1988, 58: 448 452.

134. Bartkova, J. Cyclin Dt protein expression and fancion in human breast cancer. / J. Bartkova, J. Lukas, H. Muller, D. Lutzhoft //Jnt. J, 1994; 57; 353 -361.

135. Bartkova, J. Abnonnal patterns of D-type cyclin expression and G1 regilation in human head and neck cancer. /J. Bartkova, J. Lukas, H. Muller, M. Straus, B. Gusterson, J. Barten//Cancer Res. 1995, 55: 949-956.

136. Beam, Bigler, Practicum der Hundeklinik, Blackwell Wissenschafts-Verlag. Berlin, 1994, c 342.

137. Bonney, C.E. Papillomatosis of conjnnctiva and adnexa in dogs. J. Amer. vet. med. assoc., 1980, 176: 48-51.

138. Bosari, S. Microvessel quantification and prognosis in invasive breast carcinoma. /S. Bosari, A.K.C. Lee // Hum. Pathol. 1992; 23: 755-761.

139. Brodey, R.S. Canine Mammary gland neoplasms. / R.S. Brodey, M.H. Goldschmidt, J.R. Roszel //J. Am. Animal Hosp. Assoc. 1983, 19, 61-90.

140. Cancel, W.G. Novel protein kinases expression in human breast cancer. Jutl. / W.G. Cancel, R.G. Craven, T.M. Weiner, E.T. Lin //J. Cancer, 1993, 54: 571 -577.

141. Chang, F. The p53 tumor suppressor gene as a common cellular target in human carcinogenesis. /F. Chang, S. Syrjanen, K. Kurunen, K. Syrianen // Am.J. Gastrol, 1993; 329: 1318-1327.

142. Chao, Y. Overexpression of cyclin A but not S kp2 correlates with the tumor relapse of human hepatocllular carcinoma. /Y. Chao, Y. Shih, J. Chin, G. Chan // Cancer Res. 1998, 58: 985-990.

143. Cotchin, E. Comparative oncology: the veterinary contribution. Proc. Roy. Soc. Med., 1976, 69: 649 656.

144. Dobashi, Y. Active cyclin A-CDK2 complex, a possible critical factor for cell proliferation in human primaty lung carcinomas./Y. Dobashi, M. Shoji, S. Jiang, M. Kabyashi, Y. Kawakudo, T. Komeya // Am. J. Pathol. 1998, 153; 693 -972.

145. Erlandson, R.A. Diagnostic transmission electron microscope of tumors with clinicopathological, immunochemical and egtogenetic correlation. // Raven Press, 1995, p. 857.

146. Fidler, Y.J. The biological behavior of canine mammary neoplasms./ Y.J. Fidler, D.A. Abt, R.S. Brodey // J. Am. Vet. Assoc. 1967, 151: 1311-1118.

147. Fowber E.H. Biologic behavior of canine mammary neoplasms based on a histogenetic classification. / E.H. Fowber, G.P. Wilson, A. Koestner //Vet. Pathol. 1974;11:212-229.

148. Furihata, M. Determination of the prognostic significance of unscheduled cyclin A overexpression in patients with esophageal squamous cell carcinoma. / M. Furihata, T. Ishikawa, A. Inoue Clin. Cancer. Res., 1996; 2; 1781-1785.

149. Gamblin, R.M. Overexpression of h53 tumor suppressor protein in spontaneously arising neoplasm of dogs./ R.M. Gamblin, J.E. Sagartz, C.G. Conto //Am. J. Vet. Res 1997; 58: 857 863.

150. Gellett, C. Amplification and overexpression of cyclin D1 in breast cancer defected by immunohistochemical staining./ C. Gellett, V. Fantl, R. Smith, C. Fisher, J. Bartek, C. Dickson, D. Barnes, G. Peters // Am. J. Vet. Res 1999; 12: 357 363.

151. Hans-Otto, Schmidke, Practicum der Hundeklinik, Blackwell Wissenschafts-Verlag. Berlin, 1994, c. 647.

152. Harris, C.C. Clinical implication of p53* tumor suppressor gene. New Engl. / C.C. Harris, M. Hallstein //J. Med. 1993; 329; 1318-1327.

153. Hellman, E.Prognostic factors in canine mammary tumors: A multivariate study of consecutive cases. / E. Hellman,' R. Bergstrom, L. Holmberg //Vet. Pathol., 1993; 30; 20 27.

154. Houszka, M. Nowotwory zwierzat domowych. / M. Houszka, C. Kaszubkiewicz Med. Weter., 1969, 25. 1: 6 - 10.

155. Huuhtanen, R.I. Expression of ciclin A in soft tissue Sarcomas with tumor aggressiveness. / R.I. Huuhtanen, C.P. Blomgvist, T.O. Bohling, T.A. Wiklung, E.J. Tukiainen, M. Virolainen, B. Tribukait, L.C. Andersson Cancer Res. 1999, 59: 2885-2890.

156. Iglehart, Y.D. Ynreaced c-erbB-2 gene copies and expression in multiple stages of breast cancer. / Y.D. Iglehart, M.H. Kraus, B.C. Langton, G. Huper, B.J. Kerns, J.R. Marks Cancer Res., 1990, 50: 6701- 6707.

157. Inone, M. Immunohistochemical detection of p53 and c-myc protein in canine mammary tumors. / M. Inone, K. Shiramizu // J. Comp. Pathol. 1999; 120: 169 175.

158. Iugo, Nolte. Practicum der Hundeklisnik, Blackwell Wissenschafts-Verlag. Berlin, 1994, c. 648.

159. Iurgen, Arndt. Practicum der Hundeklinik, Blackwell Wissenschafts-Verlag. Berlin, 1994, c. 643.

160. Jacobs, C. Expression of pp60c-src protein tyrosine kinase in abult and fetal human tissue; High activities in some sarcomas and mammary carcinomas. / C. Jacobs, H. Rubsamen Cancer Res. 1983, 43: 1696 - 1702.

161. Jardines, L. Neu (c-erbb-2/HER-2) and the epidermal growth factor receptor (EIER)in breast cancer./ L. Jardines, M. Weiss, B. Fowble // Pathobiologi, 1993, 61:268-282.

162. Jiang, W. Amplication and expression of the human cyclin D gene in esophageal cancer./W. Jiang, S. Kalm, N. Tomita, Y. Zhang, S. Lu, G. Weinstein -Cancer Res., 1992; 52; 2980 2983.

163. Jiang, W., Zhang Y., Kahn S., Hpllstein M. Altered expression of the cyclin D1 and retinoblastoma genes in human esophageal cancer./ W. Jiang, Y. Zhang, S. Kahn, M. Hpllstein Proc.; Natt. Acad. Sci. USA., 1993; 90; 9026 - 9030.

164. Kalin, Suter Lott-Stols, 1985.

165. Kerns, B-J. M. c-erbB-2 expression in breast cancer detected by immunoblotting and immunohistochemistry. J. Histochem. / M. B-J. Kerns, J.C. Pence, G. Huper, R.B. Kinney, J.D. Iglehart Cytochem. 1990, 38: 1823-1830.

166. Keyomarsi, K. Redundant cyclin overexpression and gene amplification in breast cancer cells Natl. / K. Keyomarsi, A. Pardee, // Acad. Sci. USA, 1993, 90; 1112-1116.

167. Krocker W.I. Three thousand outopsies "Cornell Veterinarian", 1919, vol. 9, p. 142- 161.

168. Krook, L.A. Statistical investigation of carcinoma in the dog "Acta patilogia et microbiologica Scandinavica", 1954, vol. 35, №5, p. 407-422.

169. Kurzman, I.D., Gilbertson S.R. Prognostic Factors in canine mammary tumors. Semin. Vet. Med. Surg. (Small Anim) 1986; 1(1): 25-32.

170. Kushner, J. Aberrant expression of cyclin A and cyclin B1 proteins in oral caecinoma. J. Oral. / J. Kushner, G. Bradley, B. Young, R. Jordan //Pathol. 1999, 28; 77-81.

171. Kvacs, A.B. Tumours of domestic animals./ A.B. Kvacs, K. Somogyvari // Acta. Veter. Scient. Hing, 1968, 18, 4: 399 408.

172. Liotta, L.A. Principles of molecular of cancer: Cancer metastasis. In: De Vita V.T., Hellman S., Rosenberg S.A., eds. Cancer: Principles and Practice of Oncology, 4Th ed. Philadelphia, P.A.: JB Lippincott; 1993. 134-149.

173. Mayr, B. Cytogenetic alterations in eight mammary tumors and tumor-suppressor gene p53 mutation in one mammary tumor from dogs./ B. Mayr, A. Dressier, M. Reifinger, C. Feil // Am. J. Vet. Res. 1998; 59: 69 78.

174. Mendoza S.Status of the p53, RB and MDM2 genes in canine osteosarcoma. / S. Mendoza, T. Komishi, W. Dernell, S. Withrow, C. Miller Aniticancer Res. 1998; 18:4449-4453.

175. Michalides, R. Overexpression of cyclin Ds correlates with reccurrevce in a group of forty-seven operable squamous cell carcinomas of the head and neck. / R.

176. Michalides, N. van Veelen, A. Hard, B. Loftus, E. Wientjens, A. Balm Cancer Res., 1995; 55: 975 - 978.

177. Miller, W.R.Prognostic factors ABC of breast disease. / W.R. Miller, M.O. Ellis, J.R. Sainsbury, J.M. Dixon Br. Med. J., 1994; 309; 1573 - 1576.

178. Mcintosh G. Determination of the prognjstic value of ceclin D1 overexpression in breast cancer Oncogene, / G. Mcintosh, J. Anderson, I. Milton I.//Acad. Sci. USA, 1995; 11: 285-291.

179. Mc Intosh, G. G Determination of the prognistic value of cyclin D1 overexpression in beast cancer. / G.G. Mc Intosh, I.I. Anderson, I. Milton, M. Steward, A.H. Parr, M.D. Thomas, I.A. Henry, T.W. Lennard Oncogene 1995, 11:885- 891.

180. Moulton, J.E. Tumor of the mammary gland, pp. 518-552. In: Tumors in Domestic Animals, 3rd. (Moulton I.E. et), Univ. California Press, Berkeley). 1990.

181. Moll, R. Current Top Pathol.,, 1987, v.77, p.71-101. Ramaekezc F., Smedis F., Vooijs G. (In Current Persp. In Molecular and Cellural Oncology.) Ed. by Spandidos., YAY Press, London, 1992, p.285-318.

182. Moreno, Nogueira I.A. Tratamiento del cancer local y regional de mama//Quimioterapia, Rev.esp.oncol. 1980. 21(1).

183. Muthuswamy, S.K. Mammary tumors expressing the neu proto-oncogene possess elevated c-Src tirosine kinase activity. / S.K. Muthuswamy, P.M. Siegel, D.L. Dankort, M.A. Webster, W.I. Muller Mol.Cell.Biol. 1994, 14:735 - 743.

184. Nakopoulou L.L. Prognostic significance of the co-expression of p.53 and cerb B-2 protein in breast cancer. I. / L.L. Nakopoulou, A. Alexiadou, G.E. Theodoropoulos, A.C.H. Lazaris, A. Tzohou, A. Keramopoulos // Pathol., 1996; 179:31 -38.

185. Oyama, T. Frequent overexpression of the cyclin D1 oncogene in invasive lobular carcinoma of the breast. / T. Oyama, K. Kashiwabara, K. Yoshimoto, A. Arnold, F. Koerner Cancer Res., 1998., 58; 2876 - 2880.

186. Paterson, M.C. Correction between c-erbB-2 amplification and risk of recurrent disease in node-negative breast cancer. / M.C. Paterson, K.D. Dietrich, I. Danyluk Cancer Res. 1991, 51:556 - 567.

187. Pegoraro, R.I. Variation in c-erbB-2 protooncogene status in breast cancer tumors as detected by two different cDNA probes. Diag. Mol. / R.I. Pegoraro, P.A. Lanning, L. Rom Pathol. 1996, 5:181-186.

188. Pena, M.V. Elevated c-yes tyrosine kinase activity in premalignant lesion of the colon. / M.V. Pena, M.F. Melhem, A.I. Meisler, C.A. Cartwright Gastroeutherology 108: 1995. 117-124.

189. Peter, Suter. Practicum der Huudekbinik, Blackwell Wissenschatts Verlag, Berlin, 1994, c. 335.

190. Pastinejad, F. Regulation of the activity of a new inhibitor of angiogenesis by a cancer supressor gene. / F. Pastinejad, P.I. Polverini, N.P. Bouck Cell, 1989; 56: 345 - 355.

191. Rudolf, Gwalter, Practicum der Hundeklinik, Blackwell Wisseuschafts -Verlag. Berlin, 1994, c.365.

192. Sainsbury, I.R.Epidermal-growth-factor receptor status as predictor of early recurrence and death from breast cancer. / I.R. Sainsbury, I.R. Farndon, G.K. Needham, A.I. Malcolm, A.L. Harris Lancet!., 1987: 1398 -1402.

193. Sagartz, I.E. Tumor suppressor protein overexpression in osteogenic tumors of dogs. Vet. / I.E. Sagartz , W.L. Bodley, R.M. Gamblin, C.C. Couto Pathol., 1996, 33:213 -221.

194. Schneider, I. P-glycoprotein, HER-2/neu and mutant p53 expression in human gymcologic tumors. I. Natl. / I. Schneider, M. Rubio, M.I. Barbazan, F.I. Rodriguez-Escudero, B.R. Seizinger, I.S. Castresama Cancer Inst., 1994; 86; 850 - 855.

195. Silverstrin,i R. As an independent prognostic marker in lymph node-negative breast cancer patients. I.Natl. / R. Silverstrini, E. Benini, M.G. Daidone, S. Veneroni, P. Baracchi, V. Cappelletti, G. Di Fronzo Cancer Inst. 85; 1993; 965 -970.

196. Simpson I.Amplification of CCND1 and expression of its protein products, cyclin Dl in ductal carcinima in situ of the breast. / I. Simpson, D. Quan, F. O'Malley, T. Odom-Maryon, P. Clarke // Am. I. Pathol. 1997; 151; 161-168.

197. Singleton, T.P. Detection of c-erbB-2 activation in paraffin-embedded tissue by immunohistochemistry. Hum. / T.P. Singleton, G.A. Niehans, F. Gu., C.E. Litz, K. Hagen, D.T. Kiang, I.G. Strickler Pathol, 1991., 23: 1141-1150.

198. Slamon, D.I. Human breast cancer: correlation of relapse and survival with amplification of the HEP-21 neu oncogene. / D.I. Slamon, G.M. Clark, S.G. Wong, W.G. Levin, A. Ullrich Science 235: 1987; 177 - 182.

199. Srivastava, A. The prognostic significance of tumor vascularity in intermediate-thickness (0.76-4 mm thick) skin melanoma. / A. Srivastava, P. Laider, R.P. Davies Am. I. Pathol. 1998; 133: 419-423.

200. Sticker, A., Ueber den Krebs der Tiere-Archive für. "Chirurgie", 1902. Bd.65, S. 616-696.

201. Susanna, Arnold, Pructicum der Aundeklinik, Blackwell WissenschaftsVerlag. Berlin, 1994, c.654.

202. Teifke, I.P Immunohistochemical detection of p53 overexpression in paraffin waxembedded squamous cell carcinomas of cattle, horses, cats and dogs. / LP. Teifke, C.V. Lohz//I. Comp. Pathol, 1996; 114:205-210.

203. Van Leeuwen, I.S. P53 gene mutation in osteosarcomas in the dog. / I.S. Van Leeuwen, C.L Comelisse, W. Misdoip, S.A. Gaedegebuure, G.R Rutteman //Cancer Lett, 1997; 111:173 -178.

204. Veldhoen, N. Isolation of camine p53 cDNA and detailed characterization of the full length canine p53 protein. Oncogene, 1998; 16:1077 -1084.

205. Visscher, D.W. Correlation between p53 immunostaining pattern and gene sequence mutation in breast carcinoma. Diag. /D.W. Visscher, F.H. Sarkar, R.K Shimoyama, JD. Crissman //MoL Pathol, 1996; 5:187 -193.

206. Vogelstein, B. p53 function and dysfunction. / B. Vogelstein, KW. Kinzler Cell. 1992, 70:523-526.

207. Volm, M, A is associated with an unfavourable outcome in patients with non-small-cell lung carcinomas. / M Volm, R Koomagi, I. Mattem, G. Stammler Cyclin Br XCancer, 1997,75, 1774-1778.

208. Volm, M. Clinical implication of cyclin S, cyclin-dependent kinases, RB and E2F1 in squamous-cell lung carcinoma / M Volm, R Koomagi, W. Rittgen. // Lit I. Cancer 1998,79; 294 -299.

209. Volm, M. Prognosticvalue of ERBB-I, VEGF, cyclin A, FOS, IUN and MYC in patients with squamous cell lung carcinomas. /M Volm, W. Rittgan, P. Dring BrJ.Cancer, 1995; 77,663 -669.

210. Weidner, N. Tumor angiogenesis and metastasis Correction in invasive breast carcinoma. NEnge /N. Weidner, IP. Semple, W.R Welch III Med., 1991; 324:1-8.

211. Weidner, N. Tumor angiogenesis. A new significant and independent prognostic indicator in early-stage breast carcinoma. I.Nate. / N. Weidner, I. Folkman , F. Pozza Cancer Inst 1992; 84(24): 1875-1887.

212. Wolf, I.C. Immunohistochemical detection of p53 tumor suppressor gene protein in camine epithelial colorectal tumors. / IC. Wolf, PE. Ginn, B. Homer, ID. Kurtman // Vet Pathol, 1997.8: 394-4m.

213. Zang, S. Immunohistochemistiy of cyclin D1 in human breast cancer. / S. Zang, J. Caamano, F. Cooper, X Guo // Am. I.ClinPalhol., 1994; 102:695-698.

214. Zhao, Y.H. Expression of cellularves protein in mammalian tissue. / Y.H. Zhao, I.G. Kiuegar, M. Sudol Oncogene. 1990.5:1629-1635.