Синтез олиголактозаминов-лигандов галектинов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.10, кандидат наук Северов, Вячеслав Викторович

• Северов, Вячеслав Викторович
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Северов, Вячеслав Викторович

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ 3

ЧАСТЫ. ВВЕДЕНИЕ 5

ЧАСТЬ 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 7

2.1. Олиголактозамин (0а1р1-401сКАс)п и изолактозамин (Оа1(51-ЗС1сМАс) в составе гликанов человека 7

2.1.1. Олиголактозаминовые цепи эритроцитов 7

2.1.2. Муцины, межклеточный матрикс 12

2.1.3. Олиголактозаминовые цепи иммунных клеток 13

2.1.4. Олиголактозамины молока 19

2.1.5. Изменение гликанов поверхности клеток при онкотрансформации 21

2.1.6. Заключение 22

2.2. Методы синтеза олиго-Л^-ацетиллактозаминсодержащих олигосахаридов 23

2.2.1. Химические методы синтеза 23

2.2.2. Ферментативные методы синтеза 32 ЧАСТЬ 3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ 37

3.1. Синтез олиголактозаминов 37

3.2. Синтез флуоресцеин-меченых полиакриламидных гликоконъюгатов 71

3.3. Изучение углеводной специфичности галектинов в составе клеточной мембраны 72

ЧАСТЬ 4. ВЫВОДЫ 78

ЧАСТЬ 5. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 79

5.1. Синтез олиголактозаминов 79

5.2. Синтез флуоресцеин-меченых полиакриламидных гликоконъюгатов 112

5.3. Изучение углеводной специфичности галектинов в составе клеточной

112

мембраны

ЧАСТЬ 6. СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 114

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

All — аллил Asn - аспарагин

C2GnT - кор-2-р1-6-Аг-ацетилглюкозаминтрансфераза

Сег - церамид

С1Ас - хлорацетил

Coll - коллидин

DC — дендритные клетки

DMM - диметилмалеоил

Fluo - флуоресцеин

Fmoc - флуоренилметоксикарбонил

Fuc - фукоза

Gal — галактоза

GalNAc - JV-ацетилгалактозамин Glc - глюкоза

GlcNAc (GN) - TV-ацетилглкжозамин GnTV - А^-ацетилглюкозаминтрансфераза V

HMO - олигосахариды грудного молока (human milk oligosaccharides) ICAM-3 - intercellular adhesion molecule 3 Lac - лактоза (Gaipi -4Glc)

LacNAc (LN) - N-ацетиллактозамин (Gaipi-4GlcNAc)

Lea - трисахарид Льюис a (Galpl-3[Fucal-4]GlcNAc)

Leb - тетрасахарид Льюис b (Fucal -2Gaipi-3[Fuca 1-4]GlcNAc)

Lec - дисахарид Льюис с (Gaipi-3GlcNAc)

Lev - левулиноил

Lex - трисахарид Льюис x (Gaipi-4[Fucal-3]GlcNAc)

Ley - тетрасахарид Льюис у (Fucal-2Gaipi-4[Fucal-3]GlcNAc)

LNnT - лакто-№-неотетраоза (Galpl-4GlcNAcpi-3Galpl-4Glc)

LNT - лакто-Ы-тетраоза (Gaipi-3GlcNAcpl-3Galpl-4Glc)

Lut - лутидин

Мап-манноза

МНС - главный комплекс гистосовместимости (major histocompatibility complex) Neu5Ac - /V-ацетилнейраминовая кислота NIS - N-йодсукцинимид

NK - натуральные киллеры (natural killer) PAA - полиакриламид Phth - фталоил

PSGL-1 - P-selectin glycoprotein ligand-1 Py — пиридин

sLea - тетрасахарид сиалил Льюис a (Neu5Aca2-3Gaipi-3[Fucal-4]GlcNAc)

sLec - трисахарид сиалил Льюис с (Neu5Aca2-3Gaipi-3GlcNAc)

sLex - тетрасахарид сиалил Льюис х (Neu5Aca2-3Gaipi-4[Fucal-3]GlcNAc)

TBDPS - тире/м-бутилдифенилсилил

ТСА - трихлорацетил

TCR - Т-клеточный рецептор (T-cell receptor)

Tf — трифторметансульфонил

THF - тетрагидрофуран

ТММ - тетраметилмочевина

TMSEt - (З-(тримстилсилил)этил

Тгос — 2,2,2-трихлорэтоксикарбонил

Ts - л-толуолсульфонил

UDP - уридиндифосфат

UTP - уридинтрифосфат

ДМСО - диметилсульфоксид

КССВ - константа спин-спинового взаимодействия

ТСХ - тонкослойная хроматография

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Синтез олиголактозаминов-лигандов галектинов»

ЧАСТЬ 1 ВВЕДЕНИЕ

Олиголактозаминовые и полилактозаминовые фрагменты - характерные структурные элементы гликопротеинов и гликолипидов [1, 2]. Олигосахариды, содержащие родственный лактозамину (Galpl-4GlcNAc) фрагмент Galpl-3GlcNAc (Lec), присутствуют в составе гликоконъюгатов клеток млекопитающих эндодермального происхождения (см. Обзор литературы). Одной из функций олиголактозаминовых цепей является специфическое взаимодействие с галектинами [3].

Галектины - семейство Р-галактозидсвязывающих лектинов. Актуальность детального изучения углеводной специфичности галектинов обусловлена их участием во многих биологических процессах, таких как клеточная адгезия, пролиферация и апоптоз [4—7]. Для исследования специфичности галектинов ранее использовались различные методические подходы [8—10], основным выводом этих исследований является то, что галектины узнают олиголактозаминовые цепи и Еес-содержащие гликаны. В настоящее время известно 15 галектинов (у человека) [11]. Для всех них определена углеводная специфичность, однако требуются дополнительные исследования, так как в опубликованных работах нет полного согласия. Кроме того, полученные результаты не дают представления о том, как клеточное окружение влияет на специфичность галектинов и насколько адекватно моделирование взаимодействия в условиях in vitro соответствует поведению галектина в составе живой клетки.

Для дальнейшего изучения углеводной специфичности галектинов необходимо наличие их потенциальных лигандов — олигосахаридов и соответствующих молекулярных зондов. Олиголактозамины и Ьес-содержащие олигосахариды не могут быть выделены из природных источников в количествах, достаточных для фундаментальных исследований в области гликобиологии, по причине гетерогенности углеводной части природных гликоконъюгатов и, как следствие, сложности их выделения в индивидуальном состоянии. Поэтому актуальна задача разработки эффективных химических путей их синтеза.

Целью данной работы являлся синтез следующих олигосахаридов в виде спейсер-гликозидов:

- двух линейных дилактозаминов, со связью pi-З и pi-б между лактозаминовыми фрагментами;

- разветвленного и линейного трилактозаминов;

- агалакто-аналогов олиголактозаминов;

- дисахарида Lec, тетрасахарида Lec-Lec и его агалакто-аналога;

- двух тетрасахаридов, в которых Ьес комбинируется с лактозаминовым фрагментом.

Кроме того, предполагалось синтезировать гликоконъюгаты этих олигосахаридов для цитофлуориметрических исследований, а именно флуоресцеин-меченые полиакриламидные гликополимеры для изучения углеводной специфичности галектинов в составе клеточной мембраны.

Работа выполнена в Лаборатории углеводов ИБХ РАН и является частью комплексного исследования по синтезу и изучению биологических свойств углеводных цепей.

ЧАСТЬ 2

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Обзор состоит из двух глав. Первая глава посвящена структуре олиголактозаминов в составе гликанов человека. Во второй главе обобщены результаты по синтезу олиголактозаминовых и Ьес-содержащих олигосахаридов; рассмотрены как химические, так и ферментативные подходы к синтезу.

2.1. Олиголактозамин (Са1р1-4С1сКАс)п и изолактозамин (Galpl-ЗGIcNAc) в составе гликанов человека

2.1.1. Олиголактозаминовые цепи эритроцитов

Углеводные цепи эритроцитов являются наиболее изученными гликанами мембраны эукариотических клеток. Они входят в состав как гликопротеинов, так и гликолипидов, и образуют на поверхности клетки отрицательно заряженный барьер толщиной 10-15 нм, препятствующий спонтанной агрегации эритроцитов, их адгезии к эндотелию, и защищающий от бактериальной инвазии [12]. На поверхности эритроцитов находятся более 250 известных антигенов, которые объединены в 33 системы групп крови. Из них наибольшее клинически важное значение имеет система АВН. Структура ее антигенных детерминант показана на Рисунке 1.

2Оа1р 26а,Р

Риса1/' Риса1'/ Риса1^

Н-антиген А-антиген В-антиген

Рисунок 1. Углеводные детерминанты системы групп крови АВН.

Антигенные детерминанты Н, А и В могут быть представлены на четырех коровых структурах: ОафЬЗСШАсР (тип 1), Са1р1-4С1сКАср (тип 2), Са1р1-ЗОа1МАса (тип 3) и СафЬЗОаШАср (тип 4).

На поверхности эритроцитов 75% АВН антигенных детерминант принадлежит гликопротеинам, а оставшиеся 25% - гликолипидам, представленными как гликолипидами размера 5-18 моносахаридных остатков, так и более длинными, т.н. мегагликолипидами (2060 остатков) [13]. Структура некоторых АВН-активных гликолипидов показана на Рисунке 2 [13-16].

Нд

Аа

Аь

Риса1-2Эа1Р 1-4асМср|-Ь

Рисга1-^3а1[? 1-461сМАср|1

0а1р1-401сМАсН1 -30а!(31 -4С1ср1 -Сег

Са1ЫАса1-

Риса1'

Са!р

1-4а1с№ср 1 -ЗСа1р1 -4С1ср1 -Сег

Са№Аса1~

РисаЧ-

2ЕЁЕ

1 -401сЫАсН1 -3|0а1р1 -401сМАср|1 -ЗСа1р1 -4С1ср1 -Сег

Ас

За1р1-401с№ср 1 -36а1р1 -461ср 1 -Сег

А"

6а1МАса1-

Риса!'

1-4б1сЫАсф

6а1МАса1-

Риса1"

(За1р 1-4С1сМАср|1 -з|аа1р1-401сМАср|1

\

9ба1р1-461сМАср)1 -Зваф 1 -4&ср 1 -Сег

в>

ПяЫ-^

1 -4в1сМ Аср 1 -Зваф 1 -4в1ср 1 -Сег

Риса!'—"

В|У

^За!р 1 -461с№ср|1 -36а!р 1 -4в1ср 1 -Сег

ву

Са1а1-

Риса1'

2|Эа1р1-4С^Аср|\

6а1а1-Риса1-

а!£

1 -461сМАср|1 -ЗКЗаф! -461сМАср|1

-401сЫАср|1 -гра1р1-401сЫАср|1 -ЗвафТ -4в1ср1 -Сег

Рисунок 2. Структура коротких АВН-активных гликолипидов. Зеленым обведены лактозаминовые фрагменты, синим - антигенные детерминанты А, В и Н, Сег - церамид.

Как видно из Рисунка 2, коровой структурой данных гликолипидов является лактоза, к которой присоединены линейные или разветвленные олиголактозамины, на концах которых находятся соответствующие антигенные детерминанты.

Общая структура мегагликолипидов эритроцитов представлена на Рисунке 3. Основу структуры составляет разветвленный олиголактозамин, в котором в среднем каждый второй остаток галактозы является точкой ветвления [17]. Для О-эритроцитов количество II-антигенных детерминант и незамещенных терминальных галактозных остатков в среднем равно 3.8 и 1.8 соответственно [18], причем с ростом размера молекулы мегагликолипида количество незамещенных галактозных остатков растет.

Рисунок 3. Структура мегагликолипидов эритроцитов.

Основным гликопротеином мембраны эритроцитов является транспортер анионов Band 3 [19]. Его N-гликаны имеют следующие структурные особенности:

- являются двух- (основные компоненты) или трехантенными (минорные компоненты) комплексного типа, построенными на основе коровой структуры Manal-6(Manal-3)[±GlcNAcpl-4]Man(3l-4GlcNAcpl-4(Fucal-6)GlcNAc-Asn;

- олиголактозаминовые цепи, присоединенные к Мапа1-6-антенне, состоят из 10—12 лактозаминовых блоков и имеют три точки ветвления;

- олиголактозаминовые цепи, присоединенные к Мапа1-3-антенне, состоят из 5-6 лактозаминовых блоков и имеют 1—2 точки ветвления;

- цепи, образованные разветвлением основной цепи, состоят из одного лактозаминового блока;

- терминальные галактозные остатки могут содержать al-2-связанную фукозу (для Band 3 из эритроцитов группы крови О), а также а2-3- или а2-6- связанную сиаловую кислоту.

Таким образом, N-гликаны Band 3 содержат антигены АВН, а также сиаловую кислоту, придающую поверхности эритроцита слабоотрицательный заряд (препятствующий агрегации эритроцитов). Сиалилированные олиголактозамины также присутствуют на гликолипидах мембраны эритроцитов (Рисунок 4) [20-22].

Fucctl -2Gaipi -4G!cN Ас(31 -Fuca1-2(GalNAca1 -3)Gaipi -4GlcN Ac01 -Fucal -2(Gala1 -3)Galp1 -4GlcN Acp1 -

№и5Аса2-40а1Р1 -461сМАсН1 -акза1Р1 -4С1сЫАсГ|1 -36а1р1 -401сР1 -Сег

Оа1р1-461сМАср|1\^

|ба1р1-401сМАсрН -36а1р1 -461ср1 -Сег

№и5Аса2-з|ба1р1-4а1сМАср11/

Риса1-^ва1р

1-4С1сЫАср|1

№и5Аса2-з10а1Р1-4С1сМАср11

\ /!

^За1Р1 -401сМАс(1}1 -ЗСа1р1 -4С1ср1 -Сег

|ба1р1-4С^Ас^1 -ЗваЩ 1 -4С1ср1 -Сег

Ыеи5Аса2-^За1р1-4С1сМАср|1

Рисунок 4. Сиалилированные гликолипиды мембраны эритроцитов. Зеленым обведены лактозаминовые фрагменты, синим — антигенные детерминанты системы групп крови АВН.

Таким образом, как гликолипиды, так и гликопротеины мембраны эритроцитов содержат разветвленные олиголактозамины, несущие детерминанты групп крови АВН, а также остаток сиаловой кислоты. Как было показано [23-25], разветвленные олиголактозамины являются антигенами для 1-антител, аллоантигеном для данной структуры являются линейные р1-3-замещенные олиголактозамины (¡-антигены). Эритроциты пуповинной крови и новорожденных богаты ¿-антигеном и практически не проявляют I-антигенность [26, 27], причем в течение первых лет жизни ребенка Ьантигенность идет на убыль, тогда как 1-антигенность возрастает. Хотя ¡-антиген является маркером зародышевых тканей, он коэкспрессируется с 1-антигеном на зрелых лимфоцитах [28]. Существует редкий (1 из 10 тыс.) фенотип людей, имеющих дефицит 1-антигена, но не полное его отсутствие [29]. Углеводные цепи пуповинных, а также ¡-эритроцитов, в среднем, короче цепей зрелых I-активных эритроцитов из-за отсутствия ветвления, и состоят из 6-15 моносахаридных остатков; среднее число разветвлений на молекулу равно 0.7 [26].

В эритроцитах отсутствует галактозилтрансфераза, синтезирующая р1-3-связь между остатком галактозы и А^-ацетилглюкозамина, однако на мембране эритроцитов найдены гликолипиды, содержащие фрагмент Ьес, а также его фукозилированные производные: Ьеа (Са1р1-3[Риса1-4]С1сКАс) и Ьеь (Тиса1-2Са1р1-3[Риса1-4]С1сКАс) [30, 31]. Подобные гликолипиды, содержащие дисахарид типа 1, были найдены в плазме крови [31, 32], откуда они адсорбируются на поверхность эритроцитов.

Хотя к АВН-антигенам применяется термин "антигены групп крови", они составляют основные аллогенетические антигенные детерминанты большинства типов эпителиальных клеток, а также найдены в первичных сенсорных нейронах. Более того, филогенетические исследования показали, что данные структуры появляются эволюционно раньше в эктодермальной и эндодермальной тканях, чем в мезенхимальных гематопоэтических тканях, в том числе в эритроцитах [30, 33-35]. Поэтому используется расширенный термин "histo-blood group antigens".

Исследование гликолипидов мекония, основу которого составляют клетки желудочно-кишечного эпителия [36], показало, что основными компонентами являются соединения, представленные на Рисунке 5 [37—39].

(ь Fuca)n Gaipi-3GlcNAcp 1 -3Galp1 -4Glcpt -Cer

(t Fucct)n Gaipi-4GlcNAcp 1 -3 3alp1-3GlcNAcp 1 -3Galp1 -4Glcp1 -Cer

£Fuca)n

Gaipi-4GlcNAcp|K^

Gaipi-4GlcNAcpi

°|Galp1-3GlcNAcp|l -3Gaipi -4Glcpi -Cer

Neu5Aca2-3|Galp1 -3GlcNAcp|l -3Galp1 -4Glcp1 -Cer

Neu5Aca2-6Gaipi -3GlcNAcpi -3Gaipi -4Glcpi -Cer

Рисунок 5. Гликолипиды желудочно-кишечного эпителия. Красным обведены фрагменты Ьес, зеленым - лактозаминовые фрагменты.

Как видно из рисунка, коровой частью гликолипидов мекония является Ьеср1-3'Ьас, а дальнейшее удлинение углеводной части происходит за счет добавления лактозаминовых блоков [38]. Показано [40], что ткани эмбриональной эндодермы распознаются антителами к Ье°р1-3'Ьас, также авторами сделан вывод, что "исчезновение" данной антигенной активности дифференцированных клеток является результатом маскировки тетрасахарида дополнительными углеводными (олиголактозаминовыми) цепями. Также с помощью моноклональных антител было показано, что эпителиальные муцины кишечника характеризуются экспрессией АВН антигенных детерминант исключительно типа I (то есть на

основе Ьес) [41, 42]. АВН детерминанты типа 1 экспрессируются на эндодермальных тканях, таких как выстилающий эпителий и железистый эпителий [42].

Таким образом, на тканях эктодермального и мезодермального происхождения экспрессируются олигосахариды исключительно с цепями типа 2 (ЬасНАс), тогда как ткани эндодермального происхождения экспрессируют углеводы, содержащие тип 1 (Ьес). При этом фрагмент Ьес находится как в коровой части, так и в периферической иммунореактивной части молекулы, а внутренние цепи построены на основе ТУ-ацеталлактозамина. Данная закономерность наблюдается как в случае гликолипидов, так и в случае гликопротеинов [30, 38].

2.1.2. Муцины, межклеточный матрикс

По химической природе муцины - это О-связанные высокогликозилированные гликопротеины (Рисунок 6). Их молекулярный вес составляет 5х105 3ХЮ7 Да, из которых 50-80% массы принадлежит углеводным цепям. О-гликаны муцинов состоят из 1—20 углеводных остатков. Рост углеводной цепи происходит за счет добавления лактозаминов типа 1 или 2, которые могут терминироваться антигенными детерминантами АВН, структурами Ьеа, Ье1', Ьсх (Оа1р1-4[Риса1-3]С1сКАс), Ьеу (Риса1-2Са1р1-4[Риса1-3]01сКАс), а также зЬеа (Меи5Аса2-ЗСа1р1-3[Риса1-4]01с^с) и 5Ьех (Ъ1еи5Аса2-30а1р1-4[Риса1-3]01сМАс). Углеводные цепи муцинов меняются в зависимости от клеточной линии, их экспрессирующей, локализации ткани и стадии развития организма. Терминальные структуры муцинов очень гетерогенны и сильно различаются даже у разных индивидуумов.

Межклеточный матрикс состоит из множества компонентов, включая ламинин и фибронектин. Ламинин - основной неколлагеновый компонент базальной мембраны [43] и содержит 12-27% по массе углеводных цепей [44]. Гликаны ламинина являются ди-, три- и тетраантенными КГ-цепями, несущими длинные линейные олиголактозаминовые цепи. Углеводные цепи ламинина сильно гетерогенны [45]. Фибронектин — адгезивный гликопротеин, присутствует в плазме крови, базальной мембране. Представляет собой гетеродимер, субъединицы которого соединены двумя дисульфидными связями [43]. Фибронектин также содержит гетерогенные Ы-гликаны полилактозаминового типа, а также гликозаминогликаны и О-гликаны [46, 47].

А

Мис2

В

МиС2

мис!

Мое БАС О

Мис5В

Гель- \

образующие \ мущшы \

Гель-необрлчу-ющне м>-цшпд

ШТ""»«»

_л

Мис1

, Сигнальная " последовательность

г Б домен ^ =АМОР

= Су®-богатый домен Ц г ЕС? = О-глнк.шы [] = Траисмембрашшй домен

о

¡»Цнстенновыпучел ~ БЕА домен

мономер

«•я« у^ад*

Нвдогенсшпьшамщцй домен

ИГ да ¡мер • '

в-

Ч у

1

—

мультнмср

I

«У

у

5к

Рисунок 6. Структура муцинов. (А) Схематическое изображение секретируемых муцинов и муцинов клеточной поверхности; (В) Гель-образующие, секретируемые и мембрано-связанные муцины; (С) Схематическое изображение мультимерной сборки гель-образующих секретируемых муцинов [48].

2.1.3. Олиголактозаминовые цепи иммунных клеток

Особенностью углеводных цепей гликопротеинов поверхности иммунных клеток является то, что их строение зависит от стадии созревания клеток, их дифференциации и активации; гликаны играют ключевую роль в нормальном функционировании иммунной системы [49, 50] за счет взаимодействия с лектинами, в частности, галектинами. Галектины связывают между собой гликаны поверхностных гликопротеинов, что приводит к передаче тех или иных сигналов. Изменение углеводных цепей гликопротеинов меняет эффект, вызываемый галектинами [51]. В отличие от олиголактозаминов поверхности эритроцитов, которые имеют тенденцию к разветвлению (1-антигены), поверхностные олиголактозамины иммунных клеток как правило линейны и различаются длиной олиголактозаминового скелета, терминальными структурами (например наличие или отсутствие остатка сиаловой кислоты), и фукозилированием внутренних лактозаминовых дисахаридов.

Как правило, поверхностные белки иммунных клеток сильно гликозилированы и имеют несколько гликоформ. Так, во всех ядерных гематопоэтических клетках экспрессируется антиген дифференциации С045, он является одним из наиболее часто встречающихся гликопротеинов поверхности лимфоцитов [52]. Он имеет несколько гликоформ, из которых 5 экспрессируются лимфоцитами на разных стадиях клеточного развития. Внеклеточные домены СБ45 имеют как О-, так и К-гликаны. Строение СБ45 представлено на Рисунке 7.

CD45-RABC

Alternatively spliced region (O-glycans)

(N-g!ycans)

Transmembrane

Phosphatase

Cytoskelaon binding

Рисунок 7. Строение CD45 ([52]).

Legend

— O-glycans

—« /V-glycans

Q Fibrcnectin-like repeats

в Cysteine-rtah region

В Alternatively spliced region

Щ Phosphatase domain

Щ Cytoskeletcn binding domain

f Cytoskeletal linkage

Структура О-гликанов CD45 регулирует восприимчивость Т-лимфоцитов к галектин-1-опосредованному апоптозу. В незрелых Т-лимфоцитах экспрессируется Kop-2-Pl-6-iV-ацетилглюкозаминтрансфераза (C2GnT), синтезирующая трисахарид кора 2, который является основанием для удлиннения в линейные олиго-Л^-ацетиллактозамины. В тимусе происходит селекция лимфоцитов: удаляются аутореактивные Т-клетки; одним из механизмов селекции является галектин-1-опосредованный апоптоз. Галектин-1 распознает построенные на коре 2 олиголактозаминовые цепи CD45 и кластеризует и сегрегирует CD45 от CD7 и CD43 [51—53]. По другим данным, галектин-1 способствует созданию комплекса, содержащего CD45 и CD3 [54, 55]. Кластеризация CD45 приводит к апоптозу клетки.

В зрелых Т-лимфоцитах экспрессия C2GnT уменьшается, но увеличивается экспрессия а2-3-сиалилтрансферазы I, которая сиалилирует кор 1. На трисахарид Neu5Aca2-3Galpl-3GalNAc- не действует C2GnT, и, таким образом, образование олиголактозаминов не происходит. В итоге зрелые Т-лимфоциты устойчивы к галектин-1-опосредованному апоптозу. При активации CD4+ и CD8+ Т-лимфоцитов экспрессия C2GnT увеличивается, что позволяет элиминировать лимфоциты на завершающей стадии иммунного ответа [52]. У

активированных лимфоцитов, во время дифференциации в С08+ клетки памяти, опять увеличивается содержание трисахарида Неи5Аса2-ЗСа1р1-ЗОа1КАс- за счет повышенной экспрессии а2-3-сиалилтрансферазы I, а те эффекторные СР8+ Т-клетки, что содержат олиголактозамины на коре 2, апоптируют [56]. Олиголактозаминовые цепи О-гликанов СЭ45 при этом декорируются остатком СаШАс, что дополнительно уменьшает пролиферацию эффекторных Т-клеток и продукцию ими воспалительных цитокинов, а также может вызвать апоптоз [52].

При ВИЧ-инфекции даже у пока еще незараженных СЭ4+ Т-клеток наблюдается повышенная экспрессия О-гликанов на коре 2, что делает их подверженными галектин-1-опосредованному апоптозу и является одним из механизмов снижения иммунитета [52].

И-гликаны С045 являются в основном комплексными ди-, три- и тетраантенными, содержащими короткие линейные олиголактозамины, а также маннозобогатые цепи [57] (Таблица 1). Они не связываются с галектином-1 [58], однако их терминальное сиалилирование мешает галектину-1 связываться с О-гликанами [52, 59]. Соответственно, №и5Аса2-6-терминированные И-цепи обычно присутствуют на зрелых тимоцитах и отсутствуют на незрелых.

Таблица 1.1М-цепи гликопротеина С045. и = 01сЫАсР1-4(±Риса1-6)01сЫАср1-А5п

Структура 1Ч-гликана

Молярное содержание гликана в общем пуле Ы-гликанов белка С045, %

(№и5Аса2-6)

0-2

Оа1р1-4б1сЫАсй1\

0а1В1-401сМАсН1

2Мапа1\

Са1р1 -4(31сЖ1Аср 1 -2Мапа1

6(3) /3(6)

Мапр1-4П

7.2

(№и5Аса2-6)0.,

0а1р1-4б1с№сН1\д ,/2

0а1р1-401сЫАсй1

Мапа1-

Са1р1-401сЫАср|К1 /2

ч6(3) ,3(6)

Мапр1-4П

Мапа1

аа1р1-401с№ср|1

17.8

^а1р1-401сЫАср!1-3)1., (№и5Аса2-6)0.,

Оа131-4б1сМАср|1\д ,/2

6а1р1-401сМАср|1

Мапа1>

Са1р1 -401сМАср|1

,/2

ч6(3) ,3(6)

Мапр1-4П

Мапа1'

0а1р1-401сМАср1

15.1

(№и5Аса2-6)0.,

0а1Р1-461сЫАсН1 -2Мапа1ч

Оа1В1 -401сЫАсН1ч.^

6а1рМ01с1х|АсВ1

Мапа1

|||мапр1-4П

21.6

(№и5Аса2-6)0_.

ва1Р1-401сЫАс(3|1 -гМапа^

6(3)

Оа1р1 -401сМАср|1\л /3(6) Риса/ /

Мапр1-4В

0а1р1-401сМАср|1

4.7

(Ыеи5Аса2-6)0.;

0а1Р1-401сМАср|1 -2Мапа1\

Са1р1-4б1сМАср1-2Мапа1

3Мапр1-4П

18.6

Юа1р1-4С1сМАср1-3)

(№и5Аса2-6)0.;

0а1р1-401сЫАсР|1 -2Мапа1\

Са1р1-4С1сМАср1-2Мапа1

з|^Мапр1-4Р

1.5

(№и5Аса2-6)0

1-2

Са1р1-401сМАср|1 -2Мапа1

01сЫАср1 6 4

дМапр1-4П

2.6

(№и5Аса2-6)(

0-2

С1сМАср1

0а1р1-4С1сЫАср|1 -2Мапа1 ^ ^

1аа1р1-4бк*]Аср|1^ хзМапР1"4Р

_ 2Мапа1.

0а1р1-401сЫАср|1^

1.1

Мапа1\ м

Мапа1

(Меи5Аса2-6)0.. 6а1р1-4в1сЫАср 1 -2Мапа1

0Мапа1\ /3 х6

/

1.4

(№и5Аса2-6)0_,

Мапа1\

М

Мапа1

/

3Мапа1\

Мапа1

дМапр1-4В

0.9

Галектин-3 также вызывает апоптоз Т-лимфоцитов, кластеризуя С045, но, в отличие от галектина-1, он образует небольшие кластеры, содержащие только СБ45. Подверженность галектин-3-опосредованному апоптозу регулируется присутствием разветвленных М-гликанов СБ45 [52].

Углеводные цепи лимфоцитов также взаимодействуют с селектинами, за счет чего происходит роллинг лимфоцитов [60]. Лиганды для L-селектина экспрессируются HEV-клетками вторичных лимфоидных органов: GlyCAM-1, CD34, MAdCAM-1, Sgp200 и др. [61]. Данные гликопротеины содержат О-гликаны, представляющие собой линейные олиголактозамины на коре 2, терминированные б-О-сульфо-sLe*. Основным лигандом для Р-селектина является гликопротеин PSGL-1 (P-selectin glycoprotein ligand-1); для Е-селектина -CD34, CD43 и CD44. PSGL-1 имеет О-гликаны, в которых кор 2 наращивается линейными олиголактозаминами разной длины (иногда внутренние глюкозаминовые остатки al-3-фукозилированы), последние терминированы тетрасахаридом sLex [60]. Аналогично, для CD43 было показано [62], что его О-гликаны также содержат линейные олиголактозамины, которые строятся на коре 2, и их присутствие зависит от экспрессии C2GnT; около 50% олиголактозаминовых цепей терминированы тетрасахаридом sLex. Олиголактозамины CD34 терминированы б-О-сульфо-sLe* [61].

Дендритные клетки (DC) — наиболее активные антиген-презентирующие клетки в организме [63]. После захвата антигена незрелые DC мигрируют во вторичные лимфоидные органы к покоящимся Т-лимфоцитам. Во время миграции DC становятся зрелыми, при этом изменяется профиль поверхностных молекул: увеличивается количество линейных олиголактозаминов, а также а2-3/а2-8-олигосиалилированных структур, что увеличивает связывание галектинов и сиглеков.

На поверхности покоящихся Т-лимфоцитов экспрессирован адгезивный гликопротеин ICAM-3 (intercellular adhesion molecule 3, CD50), который взаимодействует с лектином зрелых дендритных клеток DC-SIGN, что необходимо для DC-опосредованной пролиферации Т-клеток [64]. Также ICAM-3 Т-лимфоцитов может связываться с интегринами CDlla/CD18 (LFA-1) и CDlld/CD18, что тоже инициирует иммунный ответ, причем, как было показано [65], удаление N-гликанов значительно уменьшает данное связывание. ICAM-3 содержит около шести N-гликанов, хотя имеет 15 сайтов N-гликозилирования, они в основном являются три- и тетраантенными комплексного типа [66]. Особенностью N-цепей является то, что они терминированы структурами Lec либо sLec (Neu5Aca2-3Gaipi-3GlcNAc). После обработки нейраминидазой были определены структуры, данные в Таблице 2 [67]. Похожие высокомолекулярные сиалилированные и нейтральные N-цепи комплексного типа, терминированные Lec (помимо LacNAc и Lex) также были обнаружены на адгезивных молекулах лейкоцитов (Leu-CAM, leukocyte cell adhesion molecules) CD11/CD18 [68].

Таблица 2. Ы-цепи 1САМ-3 (после обработки нейраминидазой). Я = С1сКАср1-

4(±Риса1-6)01сКАср1-Азп. 1 к, I, ш, п <5.

Структура Ы-гликана

Молярное содержание гликана в общем пуле КГ-гликанов белка 1САМ-3, %

Galpl-3GlcNAcp]1-3

Gaipi-4GlcNAcp|1 -2Mana1\

Galp1-4GlcNAcgi\4

Gaipi-4GlcNAcpi

Manal

3Manp1-4R

23.8

Gaipi-3GlcNAcpi-3

(Gaipi-4GlcNAcp1-3)¡

i Galpl -4GlcNAcP 1 -3)

Gaipi-4GlcNAcpi-2Manct1

Gaipi -4GlcNAcH1\/|

Gaipi-4GlcNAcpi

Manal

\

°Manpi-4R

32.4

Galpl -3GlcNAcp 1 -3

Galpl -4GlcNAcp|1 \R ,/2

Galpl-4GlcNAcp|1

Mana1>

iGaipi-4GlcNAcp|l\/|

gManpi-4R

Gaipi-4GlcNAcp|l

,/2

Manal

10.9

Gaipi-3GlcNAcH1-3

Galpl-4GlcNAcp 1-3)

¿Gaipi-4GlcNAcp|l-3)

(Gaipi -4GlcNAcp¡1 -3)n

GaiP1-4GlcNAcH1\6 ■/2

Galpl-4GlcNAcPÍ1

Manal >

Gaipi-4GlcNAcp¡1\¿

gManp1-4R

Galpl-4GlcNAcp1

Manal

17.8

(Manal-2),

Manal^

Manal

/

gManalx^

Manat

gManp1-4R

6.0

Если олиголактозаминовые цепи на О-гликанах предпочтительно строятся на коре 2, то на М-гликанах они чаще всего наращиваются на тетраантенной структуре, содержащей мотив Оа1р1-4С1сКАср1-6(Са1р1-4С1сКАсР1-2)Мапа1-6. При этом, как было показано [69], примерно с одинаковой скоростью идет построение обеих ветвей а1-6-связанной маннозы. Активация Т-клеток требует кластеризации критического количества Т-клеточных рецепторов (ТСЯ) в сайте презентации антигенов. ТСЯ-комплекс сильно гликозилирован, каждая его субъединица имеет несколько М-гликанов комплексного типа. При экспрессии впТУ, И-цепи ТСИ.

модифицируются Са1р1-401сНАср1-6Мапа1-б-антеиной, за счет чего на Ы-гликанах. растут линейные олиголактозаминовые цепи [70]. С ними связываются галектины [51, 71-73], что стерически мешает кластеризации ТС11 и увеличивает их количество, необходимое для активации Т-клетки. Дисрегуляция впТУ увеличивает спонтанную кластеризацию ТСЯ, что может приводить к аутоиммунным поражениям, таким как рассеянный склероз. Пептид-МНС-комплекс предотвращает связывание галектинов с ТСИ, позволяя последним кластеризоваться и активировать Т-клетку [71].

Обнаружено, что кислые и нейтральные тетраантенные М-гликаны являются основными углеводными структурами гранулоцитов (Рисунок 8) [74, 75].

*Fuca1

I

_3

Нейтральные N-гликаны гранулоцитов

±Fucal I

3

(|Galp1-4GlcNAcp|l -3)m-|Gaipi-4GlcNAc[jK6

(|Gaipi-4GlcNAcp|1 -3)n-]Galp1-4GlcNAcp|1 /3

,/2

Mana1N

±Fuca1"

;Gaipi -4GlcNAcp[1 -3)„

/Gaipi-4GlcNAcp|KA

- /Galp1-4GlcNAcpi

(|Gaipi-4GlcNAcp|l-3); --3-

Manal'

Fucal

gManpi -4GlcNAcpi -4GlcNAc-Asn

3 I

±Fuca1

±Fucal

m+n+o+p>6

Среднее число остатков Fuc = 4.5

Кислые N-гликаны гранулоцитов sLexpi -3^Gaipi-4GlcNAcpjl -3)?-|Galp1-4GlcNAcp|l\6

dGaipi-4GlcNAcPj1 -3).jGaipi-4GlcNAcp|1

,/2

Mana"b

Neu5Ac(x2-6(|Gaipi -4GlcNAcp|1 -3)9-|Galp1-4GlcNAcp|l\4

Manal'

Fucal

^Manpi -4GlcNAcp1 -4GlcNAc-Asn

dGalp1-4GlcNAcP|1 -3)4-|Galp1-4GlcNAcp|l

3

I

Fucal

Рисунок 8. Структура основных N-гликанов гранулоцитов.

2.1.4. Олиголактозамины молока

Углеводные цепи присутствуют в грудном молоке как в свободном виде, так и в составе гликопротеинов. Концентрация свободных олигосахаридов грудного молока (НМО) составляет 5-10 г/л [76, 77] и уменьшается в течение лактации. Концентрация в начале в 5-10 раз выше, чем в поздней лактации. Молоко остальных млекопитающих, за исключением слонов, содержит значительно меньше свободных углеводов [78]. В Таблице 3 для сравнения приведены количества некоторых олигосахаридов в грудном и коровьем молоке [79].

В грудном молоке содержится более 200 свободных олигосахаридов длиной 3-22 углеводных остатка [77]. Их разнообразие сильно варьируется у индивидуумов [80]. Большинство олигосахаридов молока построено по единому принципу. Основной углеводный скелет является линейным или разветвленным олиголактозамином, может содержать также фрагменты Ьес. Данные цепи могут декорироваться фукозой с образованием связей Риса1-2ва1 или Риса1-3/4С1сЫАс, а также сиаловой кислотой (№и5Аса2-3/60а1). За некоторыми исключениями на восстанавливающем конце содержится лактоза [81]. В составе молока были обнаружеЕШ и более длинные углеводные цепи массой 2-8 кДа [82, 83], их структуру точно определить не удалось из-за сильной гетерогенности, однако для них показано, что общий принцип построения сохраняется.

Таблица 3. Содержание олигосахаридов в грудном и коровьем молоке.

Компонент Содержание в молоке, г/л

Человек Корова

JIaKTO-N-тетраоза 0.5-1.5 Следы

Лакто-1Ч-фукопентаоза I 1.2-1.7 -

Лакто-ГЧ-фукопентаоза II 0.3-1.0 -

Лакто-1Ч-фукопентаоза III 0.01-0.2 -

Лакто-И-дифукопентаоза I 0.1-0.2 -

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Северов, Вячеслав Викторович, 2015 год

СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Р. Хыоз. Гликопротеины// Мир —Москва - 1985.

2. О. Renkonen. Enzymatic in vitro synthesis of I-Branches of Mammalian Polylactosamines: Generation of Scaffolds for Multiple Selectin-Binding Saccharide Determinants// Cell. Mol. Life Sci. - 2000 - Vol. 57 - pp. 1423-1439.

3. F.-T. Liu. Regulatory Roles of Galectins in the Immune Response// Int. Arch. Allergy Immunol. - 2005 - Vol. 136 - pp. 385-400.

4. N. L. Perillo, M. E. Marcus, L. G. Baum. Galectins: Versatile Modulators of Cell Adhesion, Cell Proliferation, and Cell Death// J. Mol. Med. - 1998 - Vol. 76 - pp. 402-412.

5. D. K. Hsu, R.-Y. Yang, F.-T. Liu. Galectins in Apoptosis// Methods Enzymol. - 2006 - Vol. 417-pp. 256-273.

6. R. C. Hughes. Galectins as Modulators of Cell Adhesion// Biochimie - 2001 - Vol. 83 - pp. 667-676.

7. F.-T. Liu, R. J. Patterson, J. L. Wang. Intracellular Functions of Galectins// Biochim. Biophys. Acta - 2002 - Vol. 1572 - pp. 263-273.

8. T. Mega, H. Oku, S. Hase. Characterization of Carbohydrate-Binding Specificity of Concanavalin A by Competitive Binding of Pyridylamino Sugar Chains// J. Biochem. (Tokyo) - 1992 - Vol. Ill - pp. 396^100.

9. K. Shimura, Y. Arata, N. Uchiyama, J. Hirabayashi, K.-i. Kasai. Determination of the Affinity Constants of Recombinant Human Galectin-1 and -3 for Simple Saccharides by Capillary Affinophoresis// J. Chromatogr. В Biomed. Sci. Appl. - 2002 - Vol. 768 - pp. 199-210.

10. S. R. Stowell, M. Dias-Baruffi, L. Penttila, O. Renkonen, A. K. Nyame, R. D. Cummings. Human Galectin-1 Recognition of Poly-iV-Acetyllactosamine and Chimeric Polysaccharides// Glycobiology - 2004 - Vol. 14 - pp. 157-167.

11. В. Д. Якушина, О. А. Васильева, H. В. Рязанцева, В. В. Новицкий, О. Е. Чечина, Т. С. Прохоренко, Е. Г. Старикова. Роль Галектина-I в Регуляции Гомеостаза Т-Лимфоцитов// Бюл. Сиб. Мед. - 2011 - № 6 - с. 93-99.

12. М. Е. Reid, N. Mohandas. Red Blood Cell Blood Group Antigens: Structure and Function// Semin. Hematol. - 2004 - Vol. 41 - pp. 93-117.

13. P. Hanfland, M. Kordowicz, H. Niermann, H. Egge, U. Dabrowski, J. Peter-Katalinic, J. Dabrowski. Purification and Structures of Branched Blood-Group-B-Active Glycosphingolipids from Human Erythrocyte Membranes// Eur. J. Biochem. - 1984 - Vol. 145 - pp. 531-542.

14. S.-i. Hakomori, K. Stellner, K. Watanabe. Four Antigenic Variants of Blood Group A Glycolipid: Examples of Highly Complex, Branched Chain Glycolipid of Animal Cell Membrane// Biochem. Biophys. Res. Commun. -1972 - Vol. 49 - pp. 1061-1068.

15. H. Clausen, S. B. Levery, E. Nudelman, M. Baldwin, S.-i. Hakomori. Further Characterization of Type 2 and Type 3 Chain Blood Group A Glycosphingolipids from Human Erythrocyte Membranes// Biochemistry - 1986 - Vol. 25 - pp. 7075-7085.

16. K. Watanabe, R. A. Laine, S.-i. Hakomori. On Neutral Fucoglycolipids Having Long, Branched Carbohydrate Chains: H-Active and I-Active Glycosphingolipids of Human Erythrocyte Membranes// Biochemistry - 1975 - Vol. 14 - pp. 2725-2733.

17. E. Zdebska, R. Krauze, J. Koscielak. Structure and Blood-Group I Activity of Poly(glycosyl)ceramides// Carbohydr. Res. - 1983 - Vol. 120 - pp. 113-130.

18. J. Koscielak, H. Miller-Podraza, R. Krauze, A. Piasek. Isolation and Characterization of Poly(glycosyl)ceramides (Megaloglycolipids) with A, H and I Blood-Group Activities// Eur. J. Biochem. - 1976 - Vol. 71 - pp. 9-18.

19. M. Fukuda, A. Dell, J. E. Oates, M. N. Fukuda. Structure of Branched Lactosaminoglycan, the Carbohydrate Moiety of Band 3 Isolated from Adult Human Erythrocytes// J. Biol. Chem. - 1984 - Vol. 259 - pp. 8260-8273.

20. Y. Kushi, M. Shimizu, K. Watanabe, T. Kasama, S. Watarai, T. Ariga, S. Handa. Characterization of Blood Group ABO(H)-Active Gangliosides in Type AB Erythrocytes and Structural Analysis of Type A-Active Ganglioside Variants in Type A Human Erythrocytes// Biochim. Biophys. Acta. - 2001 - Vol. 1525 - pp. 58-69.

21. K. Watanabe, M. Powell, S.-i. Hakomori. Isolation and Characterization of a Novel Fucoganglioside of Human Erythrocyte Membranes// J. Biol. Chem. — 1978 — Vol. 253 - pp. 8962-8967.

22. K. Watanabe, M. E. Powell, S.-i. Hakomori. Isolation and Characterization of Gangliosides with a New Sialosyl Linkage and Core Structures// J. Biol. Chem. — 1979 — Vol. 254 — pp. 8223-8229.

23. K. Watanabe, S.-i. Hakomori, R. A. Childs, T. Feizi. Characterization of a Blood Group I-active Ganglioside. Structural Requirements for I and i Specificities// J. Biol. Chem. — 1979 -V. 254-pp. 3221-3228.

24. T. Feizi, E. A. Kabat. Immunochemical Studies on Blood Groups// J. Exp. Med. - 1972 - V. 135-pp. 1247-1258.

25. T. Feizi, R. A. Childs, S.-i. Hakomori, M. E. Powell. Blood-Group-Ii-Active Gangliosides of Human Erythrocyte Membranes// Biochem. J. - 1978 - Vol. 173 - pp. 245-254.

26. J. Koscielak, E. Zdebska, Z. Wilczynska, H. Miller-Podraza, W. Dzierzkowa-Brordej. Immunochemistry of Ii-Active Glycosphingolipids of Erythrocytes// Eur. J. Biochem. - 1979 -Vol. 96-pp. 331-337.

27. T. Feizi. Carbohydrate Differentiation Antigens// Trends Biochem. Sci. - 1981 - Vol. 6 - pp. 333-335.

28. T. Feizi, R. A. Childs. Carbohydrate Structures of Glycoproteins and Glycolipids as Differentiation Antigens, Tumor-Associated Antigens and Components of Receptor Systems// Trends Biochem. Sci. - 1985 - Vol. 10 - pp. 24-29.

29. A. Gardas, J. Koscielak. I-Active Antigen of Human Erythrocyte Membrane// Vox Sang -1974 - Vol. 26 - pp. 227-237.

30. H. Clausen, S.-i. Hakornori. ABH and Related Histo-Blood Group Antigens; Immunochemical Differences in Carrier Isotypes and Their Distribution// Vox Sang - 1989 -Vol. 56-pp. 1-20.

31. P. Hanfland, M. Kordowicz, J. Peter-Katalinic, G. Pfannschmidt, R. J. Crawford, H. A. Graham, H. Egge. Immunochemistry of the Lewis Blood-Group System: Isolation and Structures of Lewis C Active and Related Glycosphingolipids from the Plasma of Blood-Group O Le(a-b-) Nonsecretors// Arch. Biochem. Biophys. - 1986 - Vol. 246 - pp. 655-672.

32. R. Kannagi, S. B. Levery, S.-i. Hakomori. Lea-active Heptaglycosylceramide, a Hybrid of Type 1 and Type 2 Chain, and the Pattern of Glycolipids with Lea, Leb, X (Lex), and Y (Ley) Determinants in Human Blood Cell Membranes (Ghosts)// J. Biol. Chem. - 1985 - Vol. 260 -pp. 6410-6415.

33. R. Oriol, J. L. Pendu, R. Mollicone. Genetics of ABO, H, Lewis, X and Related Antigens// Vox Sang - 1986 - Vol. 51 -pp. 161-171.

34. E. Dabelsteen, P. Vedtofte, S. Hakomori, W. W. Young. Carbohydrate Chains Specific for Blood Group Antigens in Differentiation of Human Oral Epithelium// J. Invest. Derm. — 1982

- Vol. 79 - pp. 3-7.

35. T. Feizi. Demonstration by Monoclonal Antibodies that Carbohydrate Structures of Glycoproteins and Glycolipids are Onco-Delevopmental Antigens// Nature — 1985 — Vol. 314

- pp. 53-57.

36. J. T. Harries. Meconium in Health and Disease// Br. Med. Bull. - 1978 - Vol. 34 - pp. 75-78.

37. K.-A. Karlsson, G. Larson. Structural Characterization of Lactotetraosylceramide, a Novel Glycosphingolipid Isolated from Human Meconium// J. Biol. Chem. — 1979 — Vol. 254 - pp. 9311-9316.

38. K.-A. Karlsson, G. Larson. Molecular Characterization of Cell Surface Antigens of Fetal Tissue//J. Biol. Ciiem. - 1981 - Vol. 256 - pp. 3512-3524.

39. M. Iwamori, M. Noguchi, T. Yamamoto, M. Yago, S. Nozawa, Y. Nagai. Selective Terminal a2-3 and a2-6 Sialylation of Glycosphingolipids with Lacto-Series Type 1 and 2 Chains in Human Meconium// FEBS Lett. - 1988 - Vol. 233 - pp. 134-138.

40. H. C. Gooi, L. K. Williams, K. Uemura, E. F. Hounsell, R. A. J. Mcilhinney, T. Feizi. A Marker of Human Foetal Endoderm Defind by a Monoclonal Antibody Involves Type 1 Blood Group Chains// Mol. Immunol. - 1983 - Vol. 20 - pp. 607-613.

41. E. Dabelsteen, N. Graem, H. Clausen, S.-i. Hakomori. Structural Variations of Blood Group A Antigens in Human Normal Colon and Carcinomas// Cancer Res. - 1988 - Vol. 48 - pp. 181-187.

42. M. E. Breimer. Tissue Specificity of Glycosphingolipids as Expressed in Pancreas and Small Intestine of Blood Group A and B Human Individuals// Arch. Biochem. Biophys. - 1984 -Vol. 228-pp. 71-85.

43. T. L. Moser, J. J. Enghild, S. V. Pizzo, M. S. Stack. The Extracellular Matrix Proteins Laminin and Fibronectin Contain Binding Domains for Human Plasminogen and Tissue Plasminogen Activator// J. Biol. Chem. - 1993 - Vol. 268 - pp. 18917-18923.

44. V. Castronovo, F. Luyten, F. Brtule, M. E. Sobel. Identification of a 14-kDa Laminin Binding Protein (HLBP14) in Human Melanoma Cells That Is Identical to the 14-kDa Galactoside Binding Lectin// Arch. Biochem. Biophys. - 1992 - Vol. 297 - pp. 132-138.

45. J. W. Dean, S. Chandrasekaran, M. L. Tanzer. A Biological Role of the Carbohydrate Moieties of Laminin// J. Biol. Chem. - 1990 - Vol. 265 - pp. 12553-12562.

46. B. C. R. Zhu, R. A. Laine. Polylactosamine Glycosylation on Human Fetal Placental Fibronectin Weakens the Binding Affinity of Fibronectin to Gelatin// J. Biol. Chem. — 1985 — Vol. 260-pp. 4041-4045.

47. T. Krusius, M. Fukuda, A. Dell, E. Ruoslahti. Structure of the Carbohydrate Units of Human Amniotic Fluid Fibronectin// J. Biol. Chem. - 1985 - Vol. 260 - pp. 4110-4116.

48. A. P. Moran, A. Gupta, L. Joshi. Sweet-Talk: Role of Host Glycosylation in Bacterial Pathogenesis of the Gastrointestinal Tract// Gut - 2011 - Vol. 60 - pp. 1412-1425.

49. J. L. Johnson, M. B. Jones, S. O. Ryan, B. F. Cobb. The Regulatory Power of Glycans and their Binding Partners in Immunity// Trends Immunol. - 2013 - Vol. 34 - pp. 290-298.

50. W. Eichler. Characteristics of Two CD75-Related Cell-Surface Expressed Antigens of Human Lymphocytes// Mol. Immunol. - 2007 - Vol. 44 - pp. 2047-2055.

51. G. A. Rabinovich, D. O. Croci. Regulatory Circuits Mediated by Lectin-Glycan Interactions in Autoimmunity and Cancer// Immunity - 2012 - Vol. 36 - pp. 322-335.

52. L. A. Earl, L. G. Baum. CD45 Glycosylation Controls T-Cell Life and Death// Immunol. Cell Biol. - 2008 - Vol. 86 - pp. 608-615.

53. L. A. Earl, S. Bi, L. G. Baum. N- and 0-Glycans Modulate Galectin-1 Binding, CD45 Signaling, and T Cell Death// J. Biol. Chem. - 2010 - Vol. 285 - pp. 2232-2244.

54. C. F. Brewer, M. C. Miceli, L. G. Baum. Clusters, Bundles, Arrays and Lattices: Novel Mechanisms for Lectin-Saccharide-Mediated Cellular Interactions// Curr. Opin. Struct. Biol. - 2002 - Vol. 12 - pp. 616-623.

55. K. E. Pace, C. Lee, P. L. Stewart, L. G. Baum. Restricted Receptor Segregation into Membrane Microdomains Occurs on Human T Cells During Apoptosis Induced by Galectin-1// J. Immunol. -1999 - Vol. 163 - pp. 3801 -3811.

56. L. S. C. Kreisman, B. A. Cobb. Infection, Inflammation, and Host Carbohydrates: A Glyco-Evasion Hypothesis// Glycobiology - 2012 - Vol. 22 - pp. 1019-1030.

57. T. Sato, K. Furukawa, M. Autero, C. G. Gahmberg, A. Kobata. Structural Study of the Sugar Chains of Human Leukocyte Common Antigen CD45 // Biochemistry - 1993 - Vol. 32 -12694-12704.

58. M. Gal van, S. Tsuboi, M. Fukuda, L. G. Baum. Expression of a Specific Glycosyltransferase Enzyme Regulates T Cell Death Mediated by Galectin-1// J. Biol. Chem. - 2000 - Vol. 275 -pp. 16730-16737.

59. M. Amano, M. Galvan, J. He, L. G. Baum. The ST6Gal I Sialyltransferase Selectively Modifies Af-Glycans on CD45 to Negatively Regulate Galectin-l-induced CD45 Clustering, Phosphatase Modulation, and T Cell Death// J. Biol. Chem. - 2003 - Vol. 278 - pp. 7469-7475.

60. M. Sperandio. Selectins and Glycosyltransferases in Leukocyte Rolling in vivo// FEBS J. -2006 - Vol. 273 - pp. 4377-4389.

61. J.-C. Yeh, N. Hiraoka, B. Petryniak, J. Nakayama, L. G. Ellies, D. Rabuka, O. Hindsgaul, J. D. Marth, J. B. Lowe, M. Fukuda. Novel Sulfated Lymphocyte Homing Receptors and Their Control by a Core 1 Extension (31,3-iV-Acetylglucosaminyltransferase// Cell - 2001 - Vol. 105-pp. 957-969.

62. K. Maemura, M. Fukuda. Poly-jV-acetyllactosaminyl O-Glycans Attached to Leukosialin// J. Biol. Chem. - 1992 - Vol. 267 - pp. 24379-24386.

63. M. Bax, J. J. Garcia-Vallejo, J. Jang-Lee, S. J. North, T. J. Gilmartin, G. Hernández, P. R. Crocker, H. Leffler, S. R. Head, S. M. Haslam, A. Dell, Y. Kooyk. Dendritic Cell Maturation Results in Pronounced Changes in Glycan Expression Affecting Recognition by Siglecs and Galectins// J. Immunol. - 2007 - Vol. 179 - pp. 8216-8224.

64. T. B. H. Geijtenbeek, R. Torensma, S. J. Vliet, G. C. F. Duijnhoven, G. J. Adema, Y. Kooyk, C. G. Figdor. Identification of DC-SIGN, a Novel Dendritic Cell-Specific ICAM-3 Receptor that Supports Primary Immune Responses// Cell - 2000 - Vol. 100 - pp. 575-585.

65. R. C. Landis, A. McDowall, C. L. L. Holness, A. J. Littler, D. L. Simmons, N. Hogg. Involvement of the "I" Domain of LFA-1 in Selective Binding to Ligands ICAM-1 and ICAM-3// J. Cell Biol. - 1994 - Vol. 126 - pp. 529-537.

66. A. Toivanen, E. Ihanus, M. Mattila, H. U. Lutz, C. G. Gahmberg. Importance of Molecular Studies on Major Blood Groups—Intercellular Adhesion Molecule-4, a Blood Group Antigen Involved in Multiple Cellular Interactions// Biochim. Biophys. Acta - 2008 - Vol. 1780 - pp. 456-466.

67. O. Funatsu, T. Sato, P. Kotovuori, C. G. Gahmberg, M. Ikekita, K. Furukawa. Structural Study of N-linked Oligosaccharides of Human Intercellular Adhesion Molecule-3 (CD50)// Eur. J. Biochem. - 2001 - Vol. 268 - pp. 1020-1029.

68. M. Asada, K. Furukawa, C. Kantor, C. G. Gahmberg, A. Kobata. Structural Study of the Sugar Chains of Human Leukocyte Cell Adhesion Molecules CD11/CD18// Biochemistry -1991-Vol. 30 - pp. 1561-1571.

69. M. Ujita, J. McAuliffe, O. Hindsgaul, K. Sasaki, M. N. Fukuda, M. Fukuda. Poly-TV-acetyllactosamine Synthesis in Branched iV-Glycans Is Controlled by Complemental Branch Specificity of i-Extension Enzyme and |3l,4-Galactosyltransferase I// J. Biol. Chem. — 1999 -Vol. 274-pp. 16717-16726.

70. M. Demetriou, M. Granovsky, S. Quaggin, J. W. Dennis. Negative Regulation of T-Cell Activation and Autoimmunity by MgatS JV-Glycosylation// Nature - 2001 - Vol. 409 - pp. 733-739.

71. A. Grigorian, S. Torossian, M. Demetriou. T-Cell Growth, Cell Surface Organization, and the Galectin-Glycoprotein Lattice// Immunol. Rev. - 2009 - Vol. 230 - pp. 232-246.

72. E. M. Comelli, M. Sutton-Smith, Q. Yan, M. Amado, M. Panico, T. Gilmartin, T. Whisenant, C. M. Lanigan, S. R. Head, D. Goldberg, H. R. Morris, A. Dell, J. C. Paulson. Activation of Murine CD4+ and CD8+ T Lymphocytes Leads to Dramatic Remodeling of /V-Linked Glycans// J. Immunol. - 2006 - Vol. 177 - pp. 2431 -2440.

73. G. A. Rabinovich, M. A. Toscano, S. S. Jackson, G. R. Vasta. Functions of Cell Surface Galectin-Glycoprotein Lattices// Curr. Opin. Stuct. Biol. - 2007 - Vol. 17 - pp. 513-520.

74. E. Spooncer, M. Fukuda, J. C. Klock, J. E. Oates, A. Dell. Isolation and Characterization of Polyfucosylated Lactosaminoglycan from Human Granulocytes// J. Biol. Chem. - 1984 — Vol. 259-pp. 4792-4801.

75. M. Fukuda, E. Spooncer, J. E. Oates, A. Dell, J. C. Klock. Structure of Sialylated Fucosyl Lactosaminoglycan Isolated from Human Granulocytes// J. Biol. Chem. - 1984 - Vol. 259 -pp. 10925-10935.

76. R. Mehra, P. Kelly. Milk oligosaccharides: Structural and Technological Aspects// Int. Dairy J.-2006-Vol. 16-pp. 1334-1340.

77. N. S. Han, T.-J. Kim, Y.-C. Park, J. Kim, J.-H. Seo. Biotechnological Production of Human Milk Oligosaccharides// Biotechnol. Adv. - 2012 - Vol. 30 - pp. 1268-1278.

78. M. J. Gnoth, S. Rudioff, C. Kunz, R. K. H. Kinne. Investigations of the in vitro Transport of Human Milk Oligosaccharides by a Caco-2 Monolayer Using a Novel High Performance Liquid Chromatography-Mass Spectrometry Technique// J. Biol. Chem. - 2001 - Vol. 276 -pp. 34363-34370.

79. C. Kunz, S. Rudioff, W. Baier, N. Klein, S. Strobel. Oligosaccharides in Human Milk: Structural, Functional, and Metabolic Aspects// Annu. Rev. Nutr. - 2000 - Vol. 20 - pp. 699-722.

80. J. B. German, S. L. Freeman, C. B. Lebrilla, D. A. Mills. Human Milk Oligosaccharides: Evolution, Structures and Bioselectivity as Substrates for Intestinal Bacteria// Nestle Nutr. Workshop Ser. Pediatr. Program - 2008 - Vol. 62 - pp. 205-222.

81. C. Kunz, S. Rudloff. Biological Functions of Oligosaccharides in Human Milk// Acta Paediatr. - 1993 - Vol. 82 - pp. 903-912.

82. B. Stahl, S. Thurl, J. Zeng, M. Karas, F. Hillenkamp, M. Steup, G. Sawatzki. Oligosaccharides from Human Milk as Revealed by Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Mass Spectrometry// Analyt. Biochem. - 1994 - Vol. 223 — pp. 218-226.

83. B. Finke, B. Stahl, A. Pfenninger, M. Karas, H. Daniel, G. Sawatzki. Analysis of High-Molecular-Weight Oligosaccharides from Human Milk by Liquid Chromatography and MALDI-MS// Anal. Chem. - 1999 - Vol. 71 - pp. 3755-3762.

84. R. M. Hickey. The Role of Oligosaccharides from Human Milk and Other Sources in Prevention of Pathogen Adhesion// Int. Dairy J. -2012 - Vol. 22 - pp. 141-146.

85. D. S. Newburg, G. M. Ruiz-Palacios, A. L. Morrow. Human Milk Glycans Protect Infants Against Enteric Pathogens// Annu. Rev. Nutr. - 2005 - Vol. 25 - pp. 37-58.

86. R. J. Pieters. Intervention with Bacterial Adhesion by Multivalent Carbohydrates// Med. Res. Rev. - 2007 - Vol. 27 - pp. 796-816.

87. P. M. Drake, W. Cho, B. Li, A. Prakobphol, E. Johansen, N. L. Anderson, F. E. Regnier, B. W. Gibson, S. J. Fisher. Sweetening the Pot: Adding Glycosylation to the Biomarker Discovery Equation// Clin. Chem. - 2010 - Vol. 56 - pp. 223-236.

88. H. Ishida, A. Togayachi, T. Sakai, T. Iwai, T. Hiruma, T. Sato, R. Okubo, N. Inaba, T. Kudo, M. Gotoh, J. Shoda, N. Tanaka, H. Narimatsu. A novel pl,3-iV-Acetylglucosaminyltransferase (P3Gn-T8), which Synthesizes Poly-N-Acetyllactosamine, Is Dramatically Upregulated in Colon Cancer// FEBS Lett. - 2005 - Vol. 579 - pp. 71-78.

89. S. Tsuboi, S. Hatakeyama, C. Ohyama, M. Fukuda. Two Opposing Roles of O-Glycans in Tumor Metastasis// Trends Mol. Med. - 2012 - Vol. 18 - pp. 224-232.

90. K. Yamada, K. Kakehi. Recent Advances in the Analysis of Carbohydrates for Biomedical Use//J. Pharm. Biomed. Anal. - 2011 - Vol. 55 - pp. 702-727.

91. R. Naka, S. Kamoda, A. Ishizuka, M. Kinoshita, K. Kakehi. Analysis of Total N-Glycans in Cell Membrane Fractions of Cancer Cells Using a Combination of Serotonin Affinity Chromatography and Normal Phase Chromatography// J. Proteome Res. — 2006 — Vol. 5 -pp. 88-97.

92. M. M. Fuster, J. D. Esko. The Sweet and Sour of Cancer: Glycans as Novel Therapeutic Targets// Cancer - 2005 - Vol. 5 - pp. 526-542.

93. K. Murata, E. Miyoshi, M. Kameyama, O. Ishikawa, T. Kabuto, Y. Sasaki, M. Hiratsuka, H. Ohigashi, S. Ishiguro, S. Ito, H. Honda, F. Takemura, N. Taniguchi, S. Imaoka. Expression of jV-Acetylglucosaminyltransferase V in Colorectal Cancer Correlates with Metastasis and Poor Prognosis// Clin. Cancer Res. - 2000 - Vol. 6 - pp. 1772-1777.

94. W. K. F. Seelentag, W.-P. Li, S.-F. H. Schmitz, U. Metzger, P. Aeberhard, P. U. Heitz, J. Roth. Prognostic Value of pi,6-Branched Oligosaccharides in Human Colorectal Carcinoma// Cancer Res. - 1998 - Vol. 58 - pp. 5559-5564.

95. J. W. Dennis, M. Granovsky, C. E. Warren. Glycoprotein Glycosylation and Cancer Progression// Biochim. Biophys. Acta - 1999 - Vol. 1473 - pp. 21-34.

96. K. Shimodaira, J. Nakayama, N. Nakamura, O. Hasebe, T. Katsuyama, M. Fukuda. Carcinoma-Associated Expression of Core 2 P-l,6-A^-Acetylglucosaminyltransferase Gene in Human Colorectal Cancer: Role of O-Glycans in Tumor Progression// Cancer Res. — 1997 -Vol. 57-pp. 5201-5206.

97. E. Machida, J. Nakayama, J. Amano, M. Fukuda. Clinicopathological Significance of Core 2 pl,6-7V-Acetylglucosaminyltransferase Messenger RNA Expressed in the Pulmonary Adenocarcinoma Determined by in situ Hybridization// Cancer Res. - 2001 - Vol. 61 - pp. 2226-2231.

98. S. Hagisawa, C. Ohyama, T. Takahashi, M. Endoh, T. Moriya, J. Nakayama, Y. Arai, M. Fukuda. Expression of Core 2 pi,6-jV-Acetylglucosaminyltransferase Facilitates Prostate Cancer Progression//Glycobiology - 2005 - Vol. 15-pp. 1016-1024.

99. S. Hatakeyama, A. Kyan, H. Yamamoto, A. Okamoto, N. Sugiyama, Y. Suzuki, T. Yoneyama, Y. Hashimoto, T. Koie, S. Yamada, H. Saito, Y. Arai, M. Fukuda, C. Ohyama. Core 2 Ar-Acctylglucosaminyltransferase-l Expression Induces Aggressive Potential of Testicular Germ Cell Tumor// Int. J. Cancer-2010 - Vol. 127 - pp. 1052-1059.

100. O. Saitoh, W.-C. Wang, R. Lotan, M. Fukuda. Differential Glycosylation and Cell Surface Expression of Lysosomal Membrane Glycoproteins in Sublines of a Human Colon Cancer Exhibiting Distinct Metastatic Potential//J. Biol. Chem. - 1992 - Vol. 267 - pp. 5700-5711.

101. K. Yamashita, K. Totani, M. Kuroki, Y. Matsuoka, I. Ueda, A. Kobata. Structural Studies of the Carbohydrate Moieties of Carcinoembryonic Antigens// Cancer Res. - 1987 - Vol. 47 -pp. 3451-3459.

102. S. Tsuboi, M. Sutoh, S. Hatakeyama, N. Hiraoka, T. Habuchi, Y. Horikawa, Y. Hashimoto, T. Yoneyama, K. Mori, T. Koie, T. Nakamura, H. Saitoh, K. Yamaya, T. Funyu, M. Fukuda, C. Ohyama. A Novel Strategy for Evasion of NK Cell Immunity by Tumours Expressing Core 2 O-Glycans// EMBO J. - 2011 - Vol. 30 - pp. 3173-3185.

103. A. Engering, L. Kuhn, D. Fluitsma, E. Hoefsmit, J. Pieters. Differential Post-Translational Modification of CD63 Molecules During Maturation of Human Dendritic Cells// Eur. J. Biochem. - 2003 - Vol. 270 - pp. 2412-2420.

104. H. Hattori, K.-i. Uemura, H. Ishihara, H. Ogata. Glycolipid of Human Pancreatic Cancer; the Appearance of Neolacto-Series (Type 2 Chain) Glycolipid and the Presence of Incompatible Blood Group Antigen in Tumor Tissues// Biochim. Biophys. Acta - 1992 - Vol. 1125 - pp. 21-27.

105. E. H. Holmes. Characterization and Membrane Organization of pi—>3- and pi—>4-Galactosyltransferases from Human Colonic Adenocarcinoma Cell Lines Colo 205 and SW403: Basis for Preferential Synthesis of Type 1 Chain Lacto-Series Carbohydrate Structures// Arch. Biochem. Biophys. - 1989 - Vol. 270 - pp. 630-646.

106. A. V. Demchenko. Highlights in Organic Chemistry (Strategic Approach to the Chemical Synthesis of Oligosaccharides)// Lett. In Org. Chem. - 2005 - Vol. 2 - pp. 580-589.

107. S. H. Khan, R. A. O'Neill. Modern methods in carbohydrate synthesis// Harwood Academic Publishers - 1996.

108. J. Alais, A. Veyrieres. Block Synthesis of a Hexasaccharide Hapten of i Blood Group Antigen// Tetrahedron Lett. - 1983 - Vol. 24 - pp. 5223-5226.

109. J. Alais, A. Veyrieres. Synthesis of an Octasaccharide Fragment of the Polylactosamine Series bu a Blockwise Approach// Tetrahedron Lett. - 1987 - Vol. 28 - pp. 3345-3348.

110. J. Alais, A. Veyrieres. Syntheses of Linear Tetra-, Hexa-, and Octa-Saccharide Fragments of the i-Blood Group Active Poly-(A^-Acetyllactosamine) Series. Blockwise Methods for the

Synthesis of Repetitive Oligosaccharide Sequences// Carbohydr. Res. - 1990 - Vol. 207 - pp. 11-31.

111. J. C. McAuliffe, M. Fukuda, O. Hindsgaul. Expedient Synthesis of a Series of N-Acetyllactosamines// Bioorg. Med. Chem. Lett. - 1999 - Vol. 9 - pp. 2855-2858.

112. A. K. Misra, M. Fukuda, O. Hindsgaul. Efficient Synthesis of Lactosaminylated Core-2 O-glycans// Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2001 - Vol. 11 - pp. 2667-2669.

113. Y. Ito, T. Ogawa. An Efficient Approach to a Lactosamine Synthon for the Synthesis of I-Type Antigens// Agric. Biol. Chem. - 1986 - Vol. 50 - pp. 3227-3230.

114. Y. Matsuzaki, Y. Ito, T. Ogawa. Stereoselective Total Synthesis of the Blood Group I-Active Biantennary Neolacto-Glycodecaosyl Ceramide// Tetrahedron Lett. - 1992 - Vol. 33 - pp. 4025-4028.

115. K. Suzuki, H. Maeta, T. Matsumoto. An Improved Procedure for Metallocene-Promoted Glycosidation. Enhanced Reactivity by Employing l:2-Ratio of Cp2HfCl2-AgC1.4// Tetrahedron Lett. - 1989 - Vol. 30 - pp. 4853-4856.

116. Y. Matsuzaki, Y. Ito, T. Ogawa. Synthesis of Triantennary Blood Group I Antigens: M?o/ac/o-Glycopentadecaosyl Ceramide// Tetrahedron Lett. - 1992 - Vol. 33 - pp. 6343-6346.

117. Y. Matsuzaki, Y. Ito, Y. Nakahara, T. Ogawa. Synthesis of Branched Poly-JV-Acetyllactosamine Type Pentaantennary Pentacosasaccharide: Glycan Part of a Glycosyl Ceramide From Rabbit Erythrocyte Membrane// Tetrahedron Lett. - 1993 - Vol. 34 — pp. 1061-1064.

118. T. Nakano, Y. Ito, T. Ogawa. Synthesis of Sulfated Glucuronyl Glycosphingolipids; Carbohydrate Epitopes of Neural Cell-Adhesion Molecules// Carbohydr. Res. - 1993 - Vol. 243 - pp. 43-69.

119. Z.-G. Wang, Y. Ito, Y. Nakahara, T. Ogawa. Experiments Directed Toward Stereocontrilled Synthesis of O-Linked Glycan which Contains Repeating Lactosamine Unit// Bioorg. Chem. Med. Lett. - 1994 - Vol. 4 - pp. 2805-2810.

120. Z.-G. Wang, X.-F. Zhang, Y. Ito, Y. Nakahara, T. Ogawa. Stereocontrolled Syntheses of O-glycans of Core Class 2 with a Linear Tetrameric Lactosamine Chain and with Three Lactosamine Branches// Carbohydr. Res. - 1996 - Vol. 295 - pp. 25-39.

121. R. K. Jain, B.-G. Huang, E. V. Chandrasekaran, K. L. Matta. Synthesis of 3-O-Sialyl and 6-0-Sulfo Derivatives of Dimeric Af-Acetyllactosamine as Specific Acceptors for a-L-Fucosyltransferases// Chem. Commun. - 1997 - № 1 - pp. 23-24.

122. Z.-G. Wang, J. D. Warren, V. Y. Dudkin, X. Zhang, U. Iserloh, M. Visser, M. Eckhardt, P. H. Seeberger, S. J. Danishefsky. A Highly Convergent Synthesis of an N-Linked Glycopeptide

Presenting the H-Type 2 Human Blood Group Determinant// Tetrahedron - 2006 - Vol. 62 -pp. 4954-4978.

123. H. Shimizu, Y. Ito, O. Kanie, T. Ogawa. Solid Phase Synthesis of Polylactosamine Oligosaccharide// Bioorg. Med. Chem. Lett. - 1996 - Vol. 6 - pp. 2841-2846.

124. M. R. E. Aly, E.-S. I. Ibrahim, E.-S. H. E. EI-Ashry, R. R. Schmidt. Synthesis of Lacto-iV-Neohexaose and Lacto-iV-Neooctaose Using the Dimethylmaleoyl Moiety as an Amino Protective Group// Eur. J. Org. Chem. - 2000 - № 2 - pp. 319-326.

125. A. A. Sherman, O. N. Yudina, Y. V. Mironov, E. V. Sukhova, A. S. Shashkov, V. M. Menshov, N. E. Nifantiev. Study of Glycosylation with Af-Trichloroacetyl-D-Glucosamine Derivatives in the Syntheses of the Spacer-Armed Pentasaccharides Sialyl Lacto-N-Neotetraose and Sialyl Lacto-N-Tetraose, Their Fragments, and Analogues// Carbohydr. Res.

- 2001 - Vol. 336 - pp. 13-46.

126. A. Ueki, Y. Takano, A. Kobayashi, Y. Nakahara, H. Hojo, Y. Nakahara. Solid-Phase Synthesis of Glycopeptide Carrying a Tetra-N-Acetyllactosamine-Containing Core 2 Decasaccharide// Tetrahedron - 2010 - Vol. 66 - pp. 1742-1759.

127. T. K.-K. Mong, C.-Y. Huang, C.-H. Wong. A New Reactivity-Based One-Pot Synthesis of N-Acetyllactosamine Oligomers//J. Org. Chem. - 2003 - Vol. 68 - pp. 2135-2142.

128. W. Dullenkopf, J. C. Castro-Palomino, L. Manzoni, R. R. Schmidt. N-Trichloroethoxycarbonyl-GIucosamine Derivatives as Glycosyl Donors// Carbohydr. Res. -1996 - Vol. 296 - pp. 135-147.

129. K.-K. T. Mong, C.-H. Wong. Reactivity-Based One-Pot Synthesis of a Lewis Y Carbohydrate Hapten: A Colon-Rectal Cancer Antigen Determinant// Angew. Chem. Int. Ed. - 2002 - Vol. 41 - pp. 4087-4090.

130. Z. Zhang, I. R. Ollmann, X.-S. Ye, R. Wischnat, T. Baasov, C.-H. Wong. Programmable One-Pot Oligosaccharide Synthesis//J. Am. Chem. Soc. - 1999 - Vol. 121 - pp. 734-753.

131. F. Burkhart, Z. Zhang, S. Wacowich-Sgarbi, C.-H. Wong. Synthesis of the Globo H Hexasaccharide Using the Programmable Reactivity-Based One-Pot Strategy// Angew. Chem.

- 2001 - Vol. 113 - pp. 1314-1317.

132. O. J. Plante, E. R. Palmacci, P. H. Seeberger. Automated Solid-Phase Synthesis of Oligosaccharides//Science - 2001 - Vol. 291 -pp. 1523-1527.

133. A. Toepfer, R. R. Schmidt. An Efficient Synthesis of the Lewis X (Lex) Antigen Family// Tetrahedron Lett. - 1992 - Vol. 33 - pp. 5161-5164.

134. K. C. Nicolaou, T. J. Caulfield, H. Kataoka, N. A. Stylianides. Total Synthesis of the Tumor-Associated Lex Family of Glycosphingolipids// J. Am. Chem. Soc. — 1990 - Vol. 112 - pp. 3693-3695.

135. K. C. Nicolaou, C. W. Hummel, Y. Iwabuchi. Total Synthesis of Sialyl Dimcric Lex// J. Am. Chem. Soc. - 1992 - Vol. 114 - pp. 3126-3128.

136. M. Iida, A. Endo, S. Fujita, M. Numata, Y. Matsuzaki, M. Sugimoto, S. Nunomura, T. Ogawa. A Total Synthesis of Glycononaosyl Ceramide with a Sialyl Dimeric Lex Sequence// Carbohydr. Res. - 1995 - Vol. 270 - pp. C15-C19.

137. M. Iida, A. Endo, S. Fujita, M. Numata, K. Suzuki, S. Nunomura, T. Ogawa. Total Synthesis of Glycononaosyl Ceramide with a Sialyl Dimeric Lex Sequence// Glycoconj. J. - 1996 - V. 13 - pp. 203-211.

138. R. Windmüller, R. R. Schmidt. Efficient Synthesis of Lactoneo Series Antigens H, Lewis X (Lex), and Lewis Y (Ley)// Tetrahedron Lett. - 1994 - Vol. 35 - pp. 7927-7930.

139. G. Hummel, R. R. Schmidt. A Versatile Synthesis of the Lactoneo-Series Antigens -Synthesis of Sialyl Dimer Lewis X and of Dimer Lewis Y// Tetrahedron Lett. - 1997 - Vol. 38-pp. 1173-1176.

140. A. V. Demchenko. 1,2-cis O-Glycosylation: Methods, Strategies, Principles// Curr. Org. Chem. - 2003 - Vol. 7 - pp. 35-79.

141. R. K. Jain, R. D. Locke, K. L. Matta. A Convenient Synthesis of Lacto-N-Biose I [ß-D-Gal/>-(1—»3)-ß-D-Glc/>NAc] Linked Oligosaccharides from Phenyl 0-(Tetra-0-Acetyl-ß-D-Galactopyranosyl)-(l-^3)-4,6-di-C-Acetyl-2-Deoxy-2-Phthalimido-l-Thio-ß-D-Glucopyranoside// Carbohydr. Res. - 1993 - Vol. 241 - pp. 165-176.

142. R. K. Jain, C. F. Piskorz, K. L. Matta. A Convenient Synthesis of /V-Acetyllactosamine-Linked Oligosaccharides from Phenyl 3,6,2',3',4',6'-Hexa-0-Acetyl-2-Deoxy-2-Phthalimido-l-Thio-ß-Lactopyranoside// Carbohydr. Res. - 1993 - Vol. 243 - pp. 385-391.

143. G. V. Reddy, R. K. Jain, R. D. Locke, K. L. Matta. Synthesis of Precursors for the Dimeric 3-0-S03Na Lewis X and Lewis A Structures// Carbohydr. Res. - 1996 - Vol. 280 - pp. 261-276.

144. Z. Tu, H.-W. Hsieh, C.-M. Tsai, C.-W. Hsu, S.-G. Wang, K.-J. Wu, K.-I. Lin, C.-H. Lin. Synthesis and Characterization of Sulfated Gal-ß-l,3/4-GlcNAc Disaccharides Through Consecutive Protection/Glycosylation Steps// Chem. Asian J. — 2013 — Vol. 8 — pp. 1536-1550.

145. S.-M. Chang, Z. Tu, H.-M. Jan, J.-F. Pan, C.-H. Lin. Rapid Synthesis of Oligomannosides with Orthogonally Protected Monosaccharides// Chem. Commun. - 2013 — Vol. 49 — pp. 4265-4267.

146. O. Blixt, N. Razi. Chemoenzymatic Synthesis of Glycan Libraries// Methods Enzimol. - 2006 -Vol. 415-pp. 137-153.

147. M. Moracci, A. Trincone, M. Rossi. Glycosynthases: New Enzymes for Oligosaccharide Synthesis//J. Mol. Catal. B: Enzym. - 2001 - Vol. 11 - pp. 155-163.

148. G. Perugino, A. Trincone, M. Rossi, M. Moracci. Oligosaccharide Synthesis by Glycosynthases// TRENDS Biotechnol. - 2004 - Vol. 22 - pp. 31-37.

149. T. Murata, H. Honda, T. Hattori, T. Usui. Enzymatic Synthesis of Poly-N-Acetyllactosamines as Potential Substrates for Endo-p-Galactosidase-Catalyzed Hydrolytic and Transglycosylation Reactions// Biochim. Biophys. Acta - 2005 - Vol. 1722 - pp. 60-68.

150. R. Niemela, L. Penttila, A. Seppo, J. Helin, A. Leppanen, J. Rabina, L. Uusitalo, H. Maaheimo, J. Taskinen, C. E. Costello, O. Renkonen. Enzyme-Assisted Synthesis of a Bivalent High-Affinity Dodecasaccharide Inhibitor of Mouse Gamete Adhesion. The Length of the Chains Carrying Distal al,3-Bonded Galactose Residues is Critical// FEBS Lett. - 1995

- Vol. 367 - pp. 67-72.

151. A. Seppo, L. Penttila, R. Niemela, H. Maaheimo, O. Renkonen. Enzymatic Synthesis of Octadecameric Saccharides of Multiply Branched Blood Group I-Type, Carrying Four Distal a 1,3-Galactose or pi,3-GlcNAc Residues// Biochemistry - 1995 - Vol. 34 - pp. 4655-4661.

152. A. Seppo, J. P. Turunen, L. Penttila, A. Keane, O. Renkonen, R. Renkonen. Synthesis of a Tetravalent Sialyl Lewis X Glycan, a High-Affinity Inhibitor of L-Selectin-Mediated Lymphocyte Binding to Endothelium// Glycobiology - 1996 - Vol. 6 - pp. 65-71.

153. A. Leppanen, L. Penttila, R. Niemela, J. Helin, A. Seppo, S. Lusa, O. Renkonen. Human Serum Contains a Novel pi,6-N-Acetylglucosaminyltransferase Activity That Is Involved in Midchain Branching of 01igo(/V-acetyllactosaminoglycans)// Biochemistry - 1991 - Vol. 30

- pp. 9287-9296.

154. J. Helin, L. Penttila, A. Leppanen, II. Maaheimo, S. Lauri, C. E. Costello, O. Renkonen. The pi,6-GlcNAc Transferase Activity Present in Hog Gastric Mucosal Microsomes Catalyses Site-Specific Branch Formation on a Long Polylactosamine Backbone// FEBS Lett. - 1997 -Vol. 412-pp. 637-642.

155. O. Renkonen, S. Topilla, L. Penttila, H. Salminen, J. Helin, H. Maaheimo, C. E. Costello, J. P. Turunen, R. Renkonen. Synthesis of a New Nanomolar Saccharide Inhibitor of Lymphocyte Adhesion: Different Polylactosamine Backbones Present Multiple Sialyl Lewis x Determinants to L-Selectin in High-Affinity Mode// Glycobiology - 1997 - Vol. 7 - pp. 453-461.

156. J. Rabina, J. Natunen, R. Niemela, H. Salminen, K. lives, O. Aitio, H. Maaheimo, J. Helin, O. Renkonen. Enzymatic Synthesis of Site-Specifically (al-3)-Fucosylated Polylactosamines Containing either a Sialyl Lewis x, a VIM-2, or a Sialylated and Internally Difucosylated Sequence// Carbohydr. Res. - 1998 - Vol. 305 - pp. 491-499.

157. A. Seppo, L. Penttila, A. Makkonen, A. Leppanen, R. Niemela, J. Jantti, J. Hclin, O. Renkonen. Wheat Germ Agglutinin Chromatography of GlcNAcpi-3(GlcNAc(il-6)Gal and GlcNAcpi-3(GlcNAcpi-6)Galpl-4GlcNAc, Obtained by in vitro Synthesis and by Partial Cleavage of Teratocarcinoma Poly-N-Acetyllactosaminoglycans// Biochem. Cell Biol. - 1990 - Vol. 68 - pp. 44-53.

158. H. Maaheimo, J. Rabina, O. Renkonen. and 13C NMR Analysis of the Pentasaccharide Gaip(l—>4)GlcNAcP(l—>3)[GlcNAcP(l—>6)]Gaip(l—>4)GIcNAc Synthesized by the Mid-Chain P-(l—>6)-D-iV-Acetylglucosaminyltranferase of Rat Serum// Carbohydr. Res. - 1997 -Vol. 297-pp. 145-151.

159. S. Toppila, R. Renkonen, L. Penttila, J. Natunen, H. Salminen, J. Helin, II. Maaheimo, O. Renkonen. Enzymatic Synthesis of a3'Sialylated and Multiply a3Fucosylated Biantennary Polylactosamines. A Bivalent [Sialyl diLex]-Saccharide Inhibited Lymphocyte-Endothelium Adhesion Organ-Selectively// Eur. J. Biochem. - 1999 - Vol. 261 - pp. 208-215.

160. K. M. Koeller, C.-H. Wong. Chemoenzymatic Synthesis of Sialyl-Trimeric-Lewis X// Chem. Eur. J. - 2000 - Vol. 6 - pp. 1243-1251.

161. T. Furuike, K. Yamada, T. Ohta, K. Monde, S.-I. Nishimura. An Efficient Synthesis of a Biantennary Sialooligosaccharide Analog Using a 1,6-Anhydro-p-Lactose Derivative as a Key Synthetic Block// Tetrahedron - 2003 - Vol. 59 - pp. 5105-5113.

162. A. Vilkman, R. Niemela, L. Penttila, J. Helin, A. Leppanen, A. Seppo, H. Maaheimo, S. Lusa, O. Renkonen. Elongation of Both Branches of Biantennary Backbones of 01igo-(N-Acetyllactosamino)Glycans by Human Serum (1—>3)-Af-Acetyl-P-D-Glucosaminyltransferase// Carbohydr. Res. - 1992 - Vol. 226 - pp. 155-174.

163. O. Renkonen. Enzymatic in vitro Synthesis of I-Branches of Mammalian Polylactosamines: Generation of Scaffolds for Multiple Selectin-Binding Saccharide Determinants// Cell. Moll. Life Sci. - 2000 - Vol. 57 - pp. 1423-1439.

164. U. Westerlind, P. Hagback, B. Tidback, L. Wiik, O. Blixt, N. Razi, T. Norberg. Synthesis of Deoxy and Acylamino Derivatives of Lactose and Use of these for Probing the Active Site of Neisseria meningitidis Af-Acetylglucosaminyltransferase// Carbohydr. Res. - 2005 - Vol. 340 -pp. 221-233.

165. M. Jezequel-Cuer, H. N'Guyen-Cong, D. Biou, G. Durand. Oligosaccharide Specificity of Normal Human Hepatocyte al-3 Fucosyltransferase// Biochin. Biophys. Acta - 1993 - Vol. 1157-pp. 252-258.

166. D. Vasiliu, N. Razi, Y. Zhang, N. Jacobsen, K. Allin, X. Liu, J. Hoffmann, O. Bohorov, O. Blixt. Large-Scale Chemoenzymatic Synthesis of Blood Group and Tumor-Associated Poly-N-Acetyllactosamine Antigens// Carbohydr. Res. - 2006 - Vol. 341 - pp. 1447-1457.

167. M. K. Spassova, W. G. Bornmann, G. Ragupathi, G. Sukenick, P. O. Livingston, S. J. Danishefsky. Synthesis of Selected Ley and KH-1 Analogues: A Medicinal Chemistry Approach to Vaccine Optimization// J. Org. Chem. - 2005 - Vol. 70 - pp. 3383-3395.

168. C. Auge, C. Mathieu, C. Merienne. The Use of an Immobilised Cyclic Multi-Enzyme System to Synthesise Branched Penta- and Hexa-Saccharides Associated with Blood-Group I Epitopes// Carbohydr. Res. - 1986 - Vol. 151 - pp. 147-156.

169. C. Auge, S. David, C. Mathieu, C. Gautheron. Synthesis with Immobilized Enzymes of two Trisaccharides, one of them Active as the Determinant of a Stage Antigen// Tetrahedron Lett. - 1984 - Vol. 25 - pp. 1467-1470.

170. C.-H. Wong, S. L. Haynie, G. M. Whitesides. Enzyme-Catalyzed Synthesis of N-Acetyllactosamine with in situ Regeneration of Uridine 5'-Diphosphate Glucose and Uridine 5'-Diphosphate Galactose//J. Org. Chem. - 1982 - Vol. 47 - pp. 5416-5418.

171. B. Sauerzapfe, K. Krenek, J. Schmiedel, W. W. Wakarchuk, H. Pelantova, V. Kren, L. Elling. Chemo-Enzymatic Synthesis of Poly-iV-Acetyllactosamine (poly-LacNAc) Structures and their Characterization for CGL2-Galectin-Mediated Binding of ECM Glycoproteins to Biomaterial Surfaces// Glycoconj. J. -2009 - Vol. 26 - pp. 141-159.

172. C. Rech, R. R. Rosencrantz, K. Krenek, H. Pelantova, P. Bojarovä, C. E. Römer, F.-G. Hanisch, V. Kren, L. Elling. Combinatorial One-Pot Synthesis of Poly-A^-acetyllactosamine Oligosaccharides with Leloir-Glycosyltransferases// Adv. Synth. Catal. - 2011 - Vol. 353 -pp. 2492-2500.

173. M. Bäström, M. Bengtsson, O. Blixt, T. Norberg. New Derivatives of Reducing Oligosaccharides and their Use in Enzymatic Reactions: Efficient Synthesis of Sialyl Lewis A and Sialyl Dimeric Lewis X Glycoconjugates// Carbohydr. Res. - 2000 - Vol. 328 - pp. 525-531.

174. O. Blixt, T. Norberg. Enzymatic Glycosylation of Reducing Oligosaccharides Linked to a Solid Phase or a Lipid via a Cleavable Squarate Linker// Carbohydr. Res. - 1999 - Vol. 319 -pp. 80-91.

175. O. Blixt, T. Norberg. Solid-Phase Enzymatic Synthesis of a Sialyl Lewis X Tetrasaccharide on a Sepharose Matrix//J. Org. Chem. - 1998 - Vol. 63 - pp. 2705-2710.

176. J. Banoub, D. R. Bundle. 1,2-Orthoacetate Intermediates in Silver Trifluoromethanesulphonate Promoted Koenigs-Knorr Synthesis of Disaccharide Glycosides// Can. J. Chem. - 1979 - Vol. 57 - pp. 2091-2097.

177. T. B. Windholz, D. B. R. Jonston. Trichlorcethoxycarbonyl: a Generally Applicable Protecting Group// Tetrahedron Lett. - 1967 - Vol. 8 - pp. 2555-2557.

178. О. Blixt, J. Brown, M. J. Schur, W. Wakarchuk, J. C. Paulson. Efficient Preparation of Natural and Synthetic Galactosides with a Recombinant /?-l,4-Galactosyltransferase-/UDP-4'-Gal Epimerase Fusion Protein// J. Org. Chem. - 2001 - Vol. 66 - pp. 2442-2448.

179. T. J. Curphey. Trifluoroacetylation of Amino Acids and Peptides by Ethyl Trifluoroacetate// J. Org. Chem. - 1979 - Vol. 44 - pp. 2805-2807.

180. P. J. Garegg, H. Hultberg, S. Wallin. A Novel, Reductive Ring-Opening of Carbohydrate Benzylidene Acetals// Carbohydr. Res. - 1982 - Vol. 108 - pp. 97-101.

181. B. Mukhopadhyay, R. A. Field. A Simple One-Pot Method for the Synthesis of Partially Protected Mono- and Disaccharide Building Blocks Using an Orthoesterification-Benzylation-Orthoester Rearrangement Approach// Carbohydr. Res. -2003 - Vol. 338 - pp. 2149-2152.

182. U. Ellervik, G. Magnusson. Glycosylation with iV-Troc-Protected Glycosyl Donors// Carbohydr. Res. - 1996 - Vol. 280 - pp. 251-260.

183. H. В. Бовин, Т. В. Землянухина, Ц. Н. Чагиашвили, А. Я. Хорлин. Искусственные антигены и аффинные сорбенты с групповой специфичностью Lea, Le' и Led// Хим. Прир. Соедин. - 1988 - №. 6 - стр. 777-785.

184. G. V. Pazynina, Т. V. Tyrtysh, N. V. Bovin. Synthesis of Histo Blood-Group Antigens A and В (Type 2), Xenoantigen Galal-3Gaipi-4GlcNAc and Related Type 2 Backbone Oligosaccharides as Haptens in Spacered Form// Mendeleev Commun. - 2002 - Vol. 12 - pp. 143-145.

185. H. Leffler, S. Carlsson, M. Hedlund, Y. Qian, F. Poirier. Introduction to Galectins// Glycoconj. J. - 2004 - Vol. 19 - pp. 433-440.

186. H. Leffler, S. H. Barondes. Specificity of Binding of Three Soluble Rat Lung Lectins to Substituted and Unsubstituted Mammalian P-Galactosides// J. Biol. Chem. — 1986 — Vol. 261 -pp. 10119-10126.

187. R. U. Lemieux, K. Bock, L. T. J. Delbaere, S. Koto, V. S. Rao. The Conformations of Oligosaccharides Related to the ABH and Lewis Human Blood Group Determinants// Can. J. Chem. - 1980 - Vol. 58 - pp. 631-653.

188. N. V. Bovin, E. Yu. Korchagina, Т. V. Zemlyanukhina, N. E. Byramova, О. E. Galanina, A. E. Zemlyakov, A. E. Ivanov, V. P. Zubov, L. V. Mochalova. Synthesis of Polymeric Neoglycoconjugates Based on TV-Substituted Polyacrylamide// Glycoconj. J. - 1993 - Vol. 10 -pp. 142-151.

189. E. M. Rapoport, S. Andre, О. V. Kurmyshkina, Т. V. Pochechueva, V. V. Severov, G. V. Pazynina, H.-J. Gabius, N. V. Bovin. Galectin-Loaded Cells as a Platform for the Profiling of

Lectin Specificity by Fluorescent Neoglycoconjugates: a Case Study on Galectins-1 and -3 and the Impact of Assay Setting// Glycobiology - 2008 - Vol. 18 - pp. 315-324. 190. Functional Glycomics Gateway, http://www.functionalglvcomics.org