Роль растворимых факторов, продуцируемых клетками тонкого кишечника мыши, в регуляции гемо-, иммуно- и энтеропоэза тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Темчура, Владимир Викторович

• Темчура, Владимир Викторович
• кандидат биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Темчура, Владимир Викторович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1.

1.1 Стволовая клетка кишечного эпителия.

1.2 Цитокинопосредованная регуляция пролиферации и диференцировки клеток кишечного эпителия.

1.3 Экспрессия генов и продукция цитокинов клетками кишечного эпителия.

ГЛАВА 2.

2.1 Кишечник как орган внетимического развития Т-лимфоцитов. Лимфопоэтические предшественники в кишечном эпителии.

2.2 Регуляция ИЭК процессов созревания и дифференцировки Т-клеток.

ГЛАВА 3.

3.1 Особенности местного иммунитета и состав лимфоидной популяции кишечника.

3.2 Участие ИЭК в процессах местного иммунитета.

ГЛАВА 4. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

ГЛАВА 5. ГУМОРАЛЬНОЕ ВЛИЯНИЕ ИЭК МЫШИ НА ПРОЛИФЕРАТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ КЛЕТОК КРИПТ. 5.1. Влияние кондиционных сред ИЭК на пролиферативную активность клеток крипт.

5.2 Продукция ГМ-КСФ ИЭК мыши.

5.3 Отмена воздействий кондиционных сред ИЭК на пролиферативную активность клеток крипт блокирующими антителами к ГМ-КСФ.

Влияние рмГМ-КСФ на включение меченого тимидина клетками крипт in vitro.

ГЛАВА 6. ГУМОРАЛЬНОЕ ВЛИЯНИЕ ИЭК НА ПРОЛИФЕРАТИВНУЮ ИКОЛОНИЕОБРАЗУЮЩУЮ АКТИВНОСТЬ СКК.

6.1 Функциональная оценка гемопоэтической колониеобразующей активности клеток эпителия тонкого кишечника мыши.

6.2 Влияние КС от ИЭК на пролиферативную и колониеобразующую активность КОЕс-8 и на морфологические параметры гемопоэтическх колоний в метилцеллюлозе.

Глава7. ГУМОРАЛЬНОЕ ВЛИЯНИЕ ИЭК НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК.

7.1 Влияние КС от ИЭК на показатели гуморального иммунного ответа.

7.2 Влияние КС от ИЭК на спонтанную и митогенстимулированную пролиферативную активность спленоцитов.

ГЛАВА 8. ОБСУЖДЕНИЕ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль растворимых факторов, продуцируемых клетками тонкого кишечника мыши, в регуляции гемо-, иммуно- и энтеропоэза»

Эпителиальные клетки тонкого кишечника находятся в постоянном контакте с множеством чужеродных антигенов, поступающих с пищей и относятся к так называемым биологическим барьерам, основной задачей которых является поддержание гомеостаза организма. Необходимая для этого целостность эпителия обеспечивается интенсивными процессами клеточной регенерации, изучение механизмов регуляции которых относятся к разряду наиболее интенсивно разрабатываемых научных направлений.

Изучение процессов клеточного деления и дифференцировки, происходящих в регенеративной зоне кишечника (криптах), показало их структурное сходство с процессами кроветворения, протекающими в гемопоэтических органах. Было показано наличие стволовых клеток (СК) кишечника, которые обладают теми же свойствами, что и стволовые кроветворные клетки (СКК): это недифференцированные клетки способные к миграции, пролиферации, самоподцержанию и к дифференцирвке в по меньшей мере пять фенотипически и функционально различных клеточных популяций. [20, 107]. Но в отличие от СКК механизмы, лежащие в основе регуляции коммитирования и пролиферативной активности СК кишечника, а, следовательно, и общей регенерации кишечного эпителия являются менее изученными.

Работами отечественных авторов было показано участие клеток иммунной системы в регуляции восстановительных процессов в слизистом эпителии [1, 9, 119]. В этой связи предполагалось, что иммунным клеткам принадлежит роль «носителей регенерационной информации» [1], однако вопрос о механизмах передачи данной информации и ее биологической природе остается открытым [9]. В то же время многочисленными работами последнего десятилетия на различных клеточных линиях было показано, что в роли гуморальных регуляторов процессов дифференцировки, созревания, функционирования, миграции и гибели интестинальных эпителиальных клеток (ИЭК) активно выступают ряд цитокинов и ростовых факторов гемопоэза [37, 49, 62, 70, 71, 86, 105, 115, 116] ИЭК не только несут на своей поверхности рецепторы к цитокинам и отвечают на их активацию изменением клеточных функций, но и сами являются продуцентами широкого спектра цитокинов [35, 44, 58, 62, 100,102,108, 131].

Продукция клетками кишечного эпителия гемо- и иммунорегуляторных молекул согласуется с эволюционной ролью кишечника в процессах кроветворения: у позвоночных он является филогенетически первым локализованным органом гемопоэза [10]. Однако несмотря на эволюционное обособление кроветворных органов, кишечный эпителий млекопитающих не утратил своей взаимосвязи с процессами созревания и дифференцировки гемопоэтических клеток. В настоящее время показано, что кишечный эпителий является местом внетимического развития лимфоцитов и содержит пул Т-клеточных предшественников, которые способны восстановить популяцию интраэпителиальных лимфоцитов (ИЭЛ) при трансплантации летально облученным животным [53, 54]. При этом считается, что продукцию основных геморегуляторных факторов для роста и дифференцировки предшественников лимфопоэза обеспечивают именно ИЭК [16, 93].

Другая важная функция барьерных органов заключается в презентации антигенных воздействий - информации, необходимой для адекватного взаимодействия организма с внешней средой [4]. ИЭК реализуют эту функцию являясь АГ-презентирующими клетками, продуцируя иммунорегуляторные цитокины и меняя уровень их продукции в ответ на различные регуляторные стимулы.

Таким образом очевидно, что эпителиальные клетки тонкого кишечника вовлечены в универсальную систему цитокиновой регуляции клеточных функций. Предполагается, что ИЭК способны не только аутокринно регулировать процессы собственной дифференцировки, созревания и функционирования, но и оказывать паракринное модулирующее влияние на процессы гемопоэза и на функциональную активность близлежащих компонентов иммунной системы слизистых оболочек.

В то же время в литературе практически отсутствуют данные по влиянию молекул, продуцируемых нативными ИЭК, на пролиферативные процессы в кишечном эпителии, гемопоэтическую активность СКК и функциональную активность иммунокомпетентных клеток. В этой связи представляется актуальным изучение молекулярных основ взаимодействия ИЭК с клеточными компонентами гематопоэтической и иммунной систем, а так же роли продуцируемых ИЭК растворимых факторов в процессах пролиферации, происходящих в регенеративной зоне крипт.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ Целью данной работы было исследование гуморальных механизмов влияния нативных ИЭК мыши на функциональную активность клеток эпителия тонкого кишечника крипт, СКК и иммунокомпетентных клеток.

В соответствии с целью работы были поставлены следующие задачи:

1.Изучить влияние кондиционной среды от интестинальных эпителиальных клеток на пролиферативную активность клеток крипт тонкого кишечника.

2.Изучить продукцию ИФН-7 и ГМ-КСФ интестинальными эпителиальными клетками нормального кишечника мыши.

3.Изучить гемопоэтическую колониеобразующую активность клеток эпителия крипт тонкого кишечника мыши.

4.Изучить влияние кондиционной среды на колониеобразующую и пролиферативную активность стволовых кроветворных клеток.

5.Изучить влияние кондиционной среды от интестинальных эпителиальных клеток на процессы антителогенеза и пролиферативной активности иммунорегуляторных клеток.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ

Впервые было показано, что клетки эпителия нормального кишечника мыши являются продуцентами ГМ-КСФ.

Была установлена роль ГМ-КСФ в процессах регуляции пролиферативных процессов в регенеративной зоне кишечного эпителия (криптах). Показано, что влияние ГМ-КСФ на пролиферативную активность клеток крипт зависит от концентрации этого медиатора.

Была продемонстрирована способность ИЭК оказывать гуморальное влияние на пролиферативную и колониеобразующую активность КОЕс-8 и доказана роль ГМ-КСФ в реализации данного влияния. Так же впервые показано наличие в кишечном эпителии гемопоэтических предшественников, обладающих колониеобразующей активностью.

На модели первичного IgM ответа на Т-зависимый АГ было показано ингибирующее влияние КС от ИЭК на процесс антителогенеза в селезенке мыши, опосредованное фактором(ами) с молекулярной массой ниже 10 кДа. Установлено, что КС от ИЭК подавляет пролиферативный ответ митогенстимулированных клеток селезенки.

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ

Полученные результаты раскрывают новые аспекты регуляторных межклеточных и межсистемных взаимодействий, позволяют обнаружить более тонкую взаимосвязь таких процессов, как гемопоэз и кишечная регенерация. Формируют дополнительные представления о гемо- и иммунорегуляторной роли клеток кишечного эпителия и о вовлеченности этих клеток в универсальную систему цитокиновой регуляции клеточных функций. Эти данные дают возможность найти новые подходы к регуляции местного иммунитета и регенеративных процессов слизистых оболочек кишечника при различных патологиях.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ 1 .Интестинальные эпителиальные клетки нормального кишечника мыши являются продуцентами ГМ-КСФ, который оказывает регулируляторное влияние на функциональную активность клеток крипт и СКК. 2.Растворимые факторы, продуцируемые интестинальными эпителиальными клетками мыши, обладают иммуномодулирующей активностью.

АПРОБАЦИЯ МАТЕРИАЛОВ ДИССЕРТАЦИИ.

Материалы диссертации доложены и обсуждены на : 1. 5-й отчетной сессии ИКИ СО РАМН. (Новосибирск 2000г.); 2. Семинаре лаборатории регуляции иммунопоэза ИКИ СО РАМН (Новосибирск, 2000); 3. Семинарах группы молекулярной иммунологии лаборатории регуляции иммунопоэза ИКИ СО РАМН (Новосибирск, 2000, 2001); 4. 24th Meeting of the European Study Group for Cell Proliferation (Leipzig, Germany, 2001); 5. Семинаре ИКИ CO РАМН (Новосибирск, 2001).

САМОСТОЯТЕЛЬНОСТЬ ВЫПОЛНЕННОЙ РАБОТЫ.

Результаты, представленные в данной работе, получены лично автором на базе лаборатории регуляции иммунопоэза. Большую признательность автор выражает научному руководителю работы к.м.н. С.В. Сенникову за подробное обсуждение полученных результатов, а так же сотрудникам группы молекулярной иммунологии за благожелательное отношение в ходе выполнения работы: С.В. Крысову, А.Н Силкову, В.В. Темчура, Д.Х. Курамшину, Л.В. Гришиной и А.П. Хабаровой.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Темчура, Владимир Викторович

ВЫВОДЫ:

1. Интестинальные эпителиальные клетки нормального кишечника мыши являются продуцентами ГМ-КСФ, и не продуцируют ИФН-7, что определялось по содержанию данных факторов в кондиционных средах от первичных клеточных культур.

2. ГМ-КСФ, содержащийся в кондиционных средах от интестинальных эпителиальных клеткок мыши, в зависимости от концентрации оказывает оппозитное влияние на пролиферативную активность клеток крипт in vitro, что указывает на участие данного цитокина в регуляции регенерации эпителия тонкого кишечника.

3. Эпителий тонкого кишечника мыши содержит популяцию клеток-предшественников гемопоэза, обладающих способностью к образованию селезеночных гемопоэтических колоний на 8-е сутки.

4. ГМ-КСФ, содержащийся в кондиционных средах от интестинальных эпителиальных клеткок мыши, оказывает стимулирующее влияние на функциональную активность СКК, о чем свидетельствует увеличение колониеобразующей способности КОЕс-8 и их процентного содержания в S-фазе клеточного цикла.

5. Кондиционные среды от интестинальных эпителиальных клеток стимулируют формирование КОЕ-Э и БОЕ-Э в экспериментах с культивированием гемопоэтических клеток в полутвердой среде in vitro.

6. Интестинальные эпителиальные клетки мыши продуцируют растворимые компонент(ы) с м.в ниже 10 кДа, которые оказывают влияние на выраженность гуморального иммунного ответа, снижая количество первичных IgM АОК селезенки в ответ на Т-зависимый антиген ЭБ in vivo.

7. Интестинальные эпителиальные клетки мыши продуцируют растворимые факторы, которые оказывают влияние на пролиферативные процессы в кишечном эпителии, функциональную активность СКК и иммунокомпетентных клеток. Что свидетельствует о их регуляторной роли в функционировании данных клеток.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

Проведенная оценка влияний КС от ИЭК мыши на пролиферативную активность клеток крипт, функциональную активность СКК, а так же на ряд параметров иммунной системы показала наличие регуляторных воздействий, опосредованных растворимыми молекулами, продуцируемыми клетками кишечного эпителия.

Показано, что ИЭК мыши продуцируют ГМ-КСФ, который оказывает регуляторное влияние на пролиферативную активность клеток эпителия тонкого кишечника крипт in vitro, что было доказано инактивацией биологической активности данного цитокина блокирующими AT. Было установлено, что высокие дозы ГМ-КСФ приводят к подавлению пролиферации, в то время как низкие дозы стимулируют ее. Этот дозовый эффект ГМ-КСФ на клетки крипт воспроизводился в экспериментах с использованием рмГМ-КСФ. Полученные нами данные указывают на активное участие ГМ-КСФ в процессах регуляции регенеративных процессов в эпителии тонкого кишечника.

В экспериментах на клетках костного мозга было показано, что ГМ-КСФ, содержащийся в КС от ИЭК и ее фракциях оказывает дозозависимый стимулирующий эффект как на пролиферативную, так и на колониеобразующую активность КОЕс-8. Предварительная культивация костномозговых предшественников гемопоэза в присутствии КС меняла % соотношение основных типов гемопоэтических колоний в пользу КОЕ-Э и БОЕ-Э.

Так же было показано, что тотальная популяция клеток эпителия тонкого кишечника содержит КОЕс-8. Эти результаты свидетельствуют о том, что продукция ГМ-КСФ ИЭК может играть важную роль в поддержании адекватного микроокружения для СКК, находящихся в кишечном эпителии.

Установлено ингибирующее влияние КС от ИЭК на формирование клона IgM АОК в модели первичного иммунного ответа на Т-зависимый антиген (ЭБ) in vivo. Данный эффект опосредован молекулярными продуктами от 10 кДа и ниже.

Кроме того, КС от ИЭК вызывала снижение спонтанной и митогенстимулированной активности спленоцитов. Причем, если в случае с ЛПС 055 и ЛПС 0111 стимулированной пролиферацией это снижение было в среднем на 40% и было достоверно выше не стимулированного контроля, то в случае с КонА - стимулированными спленоцитами наблюдалась достоверная отмена эффекта митогена. Полученные эффекты не могли быть опосредованы ИФН-у, поскольку нами было показано отсутствие детектируемых концентраций данного цитокина в КС от ИЭК.

Таким образом, в нашей работе было установлено, что ИЭК нормального кишечника мыши за счет продукции ими ГМ-КСФ могут влиять как на регенеративные процессы в кишечном эпителии, так и на функциональное состояние пула СКК. Кроме того, ИЭК продуцируют растворимые факторы, оказывающие влияние на формирование иммунного ответа путем подавления митогенстимулированной пролиферативной активности различных субпопуляций иммунокомпетентных клеток и снижая процессы антителогенеза.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Темчура, Владимир Викторович, 2002 год

1. Бабаева А.Г. Регенерация и система иммуногенеза. М., 1985.- С.256.

2. Беляков И.М. Иммунная система слизистых. //.Иммунология,- 1997.- № 4.- с.7-12.

3. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Шахов В.А. Методы культуры тканей в гематологии. Томск: Изд-во ТГУ, 1992. -С. 160.

4. Кононов А.В. Местный иммунитет и регенерация слизистых оболочек при хроническом воспалении (биопсийное исследование). -Омск. 1993. -320с.

5. Крысов С.В., Курамшин Д.Х., Силков С.А., Сенников С.В., Козлов В.А. Использование электрохемилюминесцентного метода для количественного определения цитокинов в различных средах.// Клиническая лабораторная диагностика.-2000.-N.12.-С.39-43.

6. Крысов С.В. Продукция цитокинов эритроидными ядросодержащими клетками фетальной печени человека. Дисс. канд. биол. наук.- Новосибирск, 2001. 119 стр.

7. Пинегин Б.В., Карсонова М.И. лектрохемилюминесценция -новый этап в иммунодиагностике // Иммунология.-1997.-N.5.-С.58-60.

8. Труфакин В.А., Шмаков А.Н. Иммунная система и ее регуляторная роль в процессах пролиферации и дифференцировки в организме.// Вестн. Акад. Мед. Наук СССР. -1991.- № 12.- С. 23-28

9. Хрущев Г.К. Эволюция кроветворных органов позвоночных./ Лимфоидная ткань в восстановительных и защитных процессах. Наука, 1966.-С.7-24.

10. Цирлова И.Г. Влияние стероидных гормонов на отдельные этапы иммунного ответа. Автореф. канд. дисс.- Новосибирск, 1977.- 20с.

11. Чертиков И.Л., Гуревич О.А. Стволовая кроветворная клетка и ее микроокружение.-М.: Медицина, 1984,240 с.

12. Awane М, Andres PG, Li DJ, Reinecker НС. NF-kappa B-inducing kinase is a common mediator of IL-17-, TNF-alpha-, and IL-1 beta-induced chemokine promoter activation in intestinal epithelial cells.//J. Immunol.- 1999.- Vol. 162.-No.9.- pp. 5337-5344

13. Baliga BS, Borowitz SM, Barnard JA. Modulation of EGF-receptors by phorbol ester in small intestinal crypt cells.//Biochem. Int.- 1990.- Vol. 20.-No.l.- pp.161-168.

14. Beagley K.W., Husband A.J. Intraepithelial lymphocytes: origens, distribution, and function.// Critical Reviews in Immunology.- 1998.- Vol. 18.-pp.237-254.

15. Beagley K.W., Fujihashi K., Lagoo A.S, Lagoo-Deenadaylan S., Black C.A., Murray A.M., Sharmanov A.T., Yamamoto M., McGhee J.R., Elson C.O.

16. Differences in intraepithelial lymphocyte T cell subsets isolated from murine small versus large intestine.// J. Immunol. 1995. - Vol. 154. - No. 11. - pp. 5611-5619.

17. Bienenstock J., Befus A.D. Mucosal immunology.// Immunology.- 1980. -Vol.41, -pp.249-270.

18. Bland, P.W., Whiting C.V. Induction of MHC class II gene products in rat intestinal epithelium during graft-versus-host disease and effects on the immune function of the epithelium.// Immunology.- 1992.- Vol.75.- pp. 366-371.

19. Booth C., Potten C.P. Gut instincts: thoughts on intestinal epithelial stem cells.// J. Clin. Invest. -2000. -Vol. 105. -No. 11. pp. 1493-1499.

20. Brandtzaeg P. Basic mechanisms of mucosal immunity a major adaptive defense system. //The Immunologist.- 1995.- Vol.3.- № 3.- pp. 89-96.

21. Brandtzaeg P, Baekkevold E.S., Farsad I.N., Jahnsen F.L., Johansen F.-E., Nilsen E.M., Yamanaka T. Regional specialization in mucosal immune system: what happens in the microcompartmens?// Immunol. Today.- 1999.- Vol.20.-No.3.- pp. 141-150.

22. Brandtzaeg P, Fastard I.N., Haraldsen G. Regional specialization in mucosal immune system: primed cells do not always home along the same track. // Immunol. Today.- 1999.-Vol.20.- No.6.- pp.267-277.

23. Calvert R, Pothier P.Migration of fetal intestinal intervillous cells in neonatal mice.//Anat. Rec.- I990.-Vol. 227.-pp. 199-206.

24. Casola A, Estes MK, Crawford SE, Ogra PL, Ernst PB, Garofalo RP, Crowe SE. Rotavirus infection of cultured intestinal epithelial cells induces secretion of CXC and CC chemokines.//Gastroenterology.-1998. -Vol.114.- No.5.- pp.947955.

25. Chang, C.H., and Flavell R.A. Class II transactivator regulates the expression of multiple genes involved in antigen presentation.// J. Exp. Med.- 1995.- Vol. 181.-pp. 765-767

26. Chen K, Nezu R, Wasa M, Sando K, Kamata S, Takagi Y, Okada A. Insulinlike growth factor-1 modulation of intestinal epithelial cell restitution.// JPEN J. Parenter Enteral. Nutr.- 1999.- Vol. 23.- Suppl. 5.- pp.89-92.

27. Chen Y., Inobe J.-I., Weiner H.L. Induction of oral tolerance to myelin basic protein in CD8-depleted mice: both CD4+ and CD8+ cells mediated active cuppression.//J. Immunol. -1995. Vol. 155. - pp.910-916.

28. Christ AD, Colgan SP, Balk SP, Blumberg RS. Human intestinal epithelial cell lines produce factor(s) that inhibit CD3-mediated T-lymphocyte proliferation.// Immunol. Lett.- 1997.- Vol. 58.- No.3.- pp.159-165

29. Ciacci C, Podolsky DK. Regulation of transforming growth factor expression in rat intestinal epithelial cell lines.// J. Clin. Invest.-1991.- Vol. 87.- No.6.- pp.2216-2221.

30. Ciacci C., Mahida Y.R., Dignass A., Koizumi M., Podolsky D.K. Functional interleukin-2 receptors on intestinal epithelial cells. // J. Clin. Invest. 1993.-Vol. 92.-No. l.-pp. 527-532

31. Cunningham A.J., Szenberg A. Further improvement in the plaque technique for detecting single antibody forming cells.// Immunol.- 1968.- Vol.14.- pp. 599-600.

32. Dignass AU, Podolsky DK. Cytokine modulation of intestinal epithelial cell restitution: central role of transforming growth factor beta.// Gastroenterology.-1993.- Vol. 105.-No. 5.-pp. 1323-1332

33. Dignass AU., Podolsky DK. Interleukin 2 modulates intestinal epithelial cell function in vitro.// Experemental Cell Research.- 1996.-Vol 225.-pp 422-429.

34. Ernst P.B., Befiis A.D., Bienenstock J. Leukocytes in intestinal epithelium: an unusual immunologic compartment.// Immunol.Today.- 1985.- No.6. -pp. 33-37

35. Ferguson A., Parrott D.M.V. The effect of antigen deprivation on thymus -dependent and thymus-independent lymphocytes in the small intestine of the mouse.// Clin. Exp. Immunol.-1972.- Vol.12.- pp.477-488.

36. Ferguson A. Intraepitelial lymphocytes of small intestine.// Gut. 1977. - Vol. 18. - pp.921-937.

37. Fichtelius K.E. The gut epithelium a first-level lymphoid organ?// Exp.Cell.Res., - 1967.- Vol. 49.- pp. 87-92.

38. Friedman A., Weiner H.L. Induction of anergy or active supression following oral tolerance is determined by antigen dosage. // Proc. Natl. Acad. Sci USA. -1994. Vol. 91. - pp.6688-6692.

39. Fujihashi K., Kweon M-N., Kiyono H„ VanCott J.L., van Ginkel F.W., Yamamoto M., McGhee J.R. A T cell/B cell/epithelial cell internet for mucosal inflammation and immunity.// Springer Semin. Immunopathol.-1997.- Vol. 18.-pp. 477-494

40. Fusunyan RD, Quinn JJ, Ohno Y, MacDermott RP, Sanderson IR. Butyrate enhances interleukin (IL)-8 secretion by intestinal epithelial cells in response to IL-1 beta and lipopolysaccharide.//Pediatr. Res.- 1998.-Vol.43.-No.l.-pp.84-90

41. Godfrey D.I., Zlotnik A. Phenotypic and functional characterization of c-kit expression during intrathymic T cell development.// J. Immunol.- 1992.- Vol. 149.-pp. 2281-2285.

42. Goke M, Kanai M, Podolsky DK. Intestinal fibroblasts regulate intestinal epithelial cell proliferation via hepatocyte growth factor.// Am. J. Physiol.-1998.- Vol. 274.- No. 5, part 1.- pp.809-818

43. Goodrich ME, McGee DW. Regulation of mucosal В cell immunoglobulin secretion by intestinal epithelial cell-derived cytokines.// Cytokine.- 1998.-Vol.10.- No 12.- pp. 948-955

44. Goodrich ME, McGee DW Effect of intestinal epithelial cell cytokines on mucosal B-cell IgA secretion: enhancing effect of epithelial-derived IL-6 but not TGF-beta on IgA+ В cells.// Immunol. Lett.- 1999.- Vol.67.- No.l.- pp.1114

45. Gordon JI, Hermiston ML. Differentiation and self-renewal in the mouse gastrointestinal epithelium.// Current Opinion in Cell Biology.- 1994. Vol. 6.-No.6.- pp.795-803.

46. Hamad M, Whetsell M, Wang J, Klein Ж. T cell progenitors in the murine small intestine.// Dev. Сотр. Immunol.- 1997.- Vol.21.- No.5.- pp.435-442.

47. Hamad M. Preferential repopulation of the small intestine by gut-derived T cell precursors in the murine system.// Cytobios.- 1999.- Vol. 97.- pp.35-44.

48. Hasthorpe S, Akinci M, Bartelmez S. The kinetics of S phase entry by FMP2.1: effect of IL-3 and GM-CSF receptor expression and ligand affinity ./Ant. J. Ceil. Cloning. 1988.- Vol.6.- No.l. -pp.30-44.

49. Helmrath MA, Shin CE, Fox JW, Erwin CR, Warner BW. Adaptation after small bowel resection is attenuated by sialoadenectomy: the role for endogenous epidermal growth factor.//Surgery.- 1998.- Vol.124.- No.5.- pp.848-854.

50. Howie D., Spencer J., DeLord D., Pitzalis C., Wathen N.C., Dogan A., Akbar A., MacDonald T.T. Extrathymic T cell differentiation in the human intestine early in life.// J. Immunol.- 1998.- Vol. 161.- pp. 5862-5872.

51. Im S.-H., Barchan D., Fuchs S., Souroujon M.C. Suppression of ongoing experimental myasthenia by oral treatment with an acetylcholine receptor recombinant fragment.//.! Clin Invest. -1999. Vol. 104. - No. 12. - pp.17231730.

52. Jiang Y., McGee D.W. Regulation of human lymphocyte IL-4 secretion by intestinal epithelial cell-derived IL-7 and transforming growth factor-p. Clinical Immunology and Immunopatology, 1998, Vol. 88, No.3, p 287-296.

53. Juul SE, Joyce AE, Zhao Y, Ledbetter DJ. Why is erythropoietin present in human milk? Studies of erythropoietin receptors on enterocytes of human and rat neonates.// Pediatr. Res.- 1999.- Vol. 46.- No.3.- pp.263-268.

54. Kashiwakura I, Murakami M, Hayase Y, Takagi Y. Partial purification and characterization of a factor for the enhancement of colony formation in vitro by myeloid progenitor cells.// Chem. Pharm. Bull. (Tokyo).- 1992.- Vol. 40.-No.4.-pp.961-964.

55. Kasterlian D., Rigal D., Abello J., Revillard J.P. Expression, function and regulationof the intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) on humanintestinal epithelial cell lines.// Eur. J. Immunol.- 1991.- Vol. 21. pp. 24152420

56. Klein J.R., Mosley R.L. Phenotypic and cytotoxic characteristics of intraepitelial lymphocytes.// Mucosal Immunology: intraepithelial lymphocytes advances in host defence mechanisms./ Raven Press, New-York. - 1993. -pp.33-60

57. Ко ТС, Yu W, Sakai T, Sheng H, Shao J, Beauchamp RD, Thompson EA. TGF-betal effects on proliferation of rat intestinal epithelial cells are due to inhibition of cyclin D1 expression.// Oncogene.- 1998.- Vol. 26.- No.16.-pp 3445.3454.

58. Koyama SY, Podolsky DK. Differential expression of transforming growth factors alpha and beta in rat intestinal epithelial cells.// J. Clin. Invest.- 1989.-Vol. 83.-No.5.-pp. 1768-1773.

59. Landschulz KT, Noyes AN, Rogers O, Boyer SH. Erythropoietin receptors on murine erythroid colony-forming units: natural history.// Blood.- 1989. -Vol.73. -No.6.-pp. 1476-1486.

60. Lee SC, Liu W, Brosnan CF, Dickson DW.GM-CSF promotes proliferation of human fetal and adult microglia in primary cultures.//Glia.-1994.-Vol.l2.-No.4.-pp.309-318.

61. Lefrancois L., Puddington L. Extrathymic intestinal T-cell development: virtual reality?// Immunol. Today.- 1995.- Vol. 16.- No.l.- pp.16-21.

62. Li L, Rao JN, Bass BL, Wang JY. NF-kappaB activation and susceptibility to apoptosis after polyamine depletion in intestinal epithelial cells.// Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol.- 2001.- Vol. 280.- No. 5.- pp. 992-1004.

63. Liana T, Bell RG Characterization of an inhibitory factor derived from epithelial cells of the small intestine.//Reg. Immunol.- 1993.- Vol.5.- No.l.-pp. 18-27.

64. Mascarenhas JO, Goodrich ME, Eichelberger H, McGee DW. Polarized secretion of IL-6 by IEC-6 intestinal epithelial cells: differential effects of IL-1 beta and TNF-alpha.//Immunol. Invest.- 1996.-Vol.25.- No.4.-pp.333-340.

65. Mayeholer G., Whately R.J. Granular intraepithelial lymphocytes of the rat small intestine. I. Isolation, presence in T-lymphocyte -deficient rats and bone marrow origin.// Int. Arch. Allerg. Appl. Immunol.- 1983.- Vol.71.- pp. 317327.

66. Mayer P., Lam C., Obenaus H., Liehl E., Besemer J. Efficacy of recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor in rhesus monkeys.// Ann. N. Y. Acad. Sci.- 1987.- Vol. 511.- pp.17-29.

67. Mayer, L., Eisenhardt D., Salomon P., Bauer W., Pious R., Piccinini L. Expression of class II molecules on intestinal epithelial cells in humans.

68. Differences between normal and inflammatory bowel disease.// Gastroenterology.-1991.- Vol.100.- pp. 3-12.

69. Mayer L. Oral tolerance: new approaches, new problems.// Clinical Immunology. 2000. - Vol. 94. - No. 1. - pp. 1-8.

70. McGee DW, Beagley KW, Aicher WK, McGhee JR. Transforming growth factor-beta enhances interleukin-6 secretion by intestinal epithelial cells.// Immunology.- 1992.- Vol.77.- No.l.- pp.7-12.

71. McGee DW, Bamberg T, Vitkus SJ, McGhee JR. A synergistic relationship between TNF-alpha, IL-1 beta, and TGF-beta 1 on IL-6 secretion by the IEC-6 intestinal epithelial cell line.// Immunology.- 1995.- Vol. 86.- No. 1.- pp.6-11.

72. McGee DW, Vitkus SJ. IL-4 enhances IEC-6 intestinal epithelial cell proliferation yet has no effect on IL-6 secretion.// Clin. Exp. Immunol.- 1996.-Vol.105.- No.2.- pp.274-277.

73. Metcalf D. The granulocyte-macrophage colony stimulating factor// Cell. -1985.-Vol.43.-No.l.- pp.5-6.

74. Meyer ТА, Noguchi Y, Ogle CK, Tiao G, Wang JJ, Fischer JE, Hasselgren PO. Endotoxin stimulates interleukin-6 production in intestinal epithelial cells. A synergistic effect with prostaglandin E2.// Arch. Surg.-1994.-Vol. 129.-No. 12.-pp. 1290-1295.

75. Meyer ТА, Tiao GM, James JH, Noguchi Y, Ogle CK, Fischer JE, Hasselgren PO. Nitric oxide inhibits LPS-induced IL-6 production in enterocytes.// J. Surg. Res.- 1995.- Vol.58.- No.6.- pp.570-575.

76. Miller A., Lider O., Weiner H.L. Antigen-driven bystander Suppression after oral administration of antigenes.// J. Exp. Med. 1991. - Vol. 174. - pp. 791798.

77. Mosley R.L, Klein J.R. A rapid method for isolating murine intestinal intraepithelial lymphocytes with high yield and purity.// J. Immunol. Meth.-1992.-Vol. 156.-pp. 19-26.

78. Murray A.M., Simm В., Beagley K.W. Cytokine gene expression in murine fetal intestine: potential for extathymic T cell development.// Cytokine.- 1998.-Vol. 10.- № 5.- pp. 337-345.

79. Nishimura S, Takahashi M, Ota S, Hirano M, Hiraishi H. Hepatocyte growth factor accelerates restitution of intestinal epithelial cells.// J Gastroenterol.-1998.-Vol.33.-No.2.-pp. 172-178.

80. Otto H.F. The intraepithelial lymphocytes of the intestine: morphological observations and immunologic aspects of intestinal enteropathy. // Curr. Top. Pathol. 1973. - Vol. 57. - pp.81-121.

81. Panja A.R., Blumberg S., Balk S.P., Mayer L. CDld is involved in T cell-intestinal epithelial cell interactions.// J. Exp. Med.- 1994.- Vol. 178.- p. 1115.

82. Panja A, Siden E, Mayer L. Synthesis and regulation of accessory/proinflammatory cytokines by intestinal epithelial cells.// Clin. Exp.Immunol.-1995 .-Vol. 100.-No.2.-pp.298-305.

83. Panja A., Goldberg S., Eckmann L., Krishen P., Mayer L. The Regulation and Functional Consequence of Proinflammatory Cytokine Binding on human intestinal epithelial cells.// J. Immunol. 1998. Vol.161. - pp.3675-3684.

84. Parikh AA, Moon MR, Kane CD, Salzman AL, Fischer JE, Hasselgren PO. Interleukin-6 production in human intestinal epithelial cells increases in association with the heat shock response// J. Surg. Res.- 1998.- Vol.77.-No.l.-pp.40-44.

85. Parikh AA, Salzman AL, Fischer JE, Szabo C, Hasselgren PO. Interleukin-1 beta and interferon-gamma regulate interleukin-6 production in cultured human intestinal epithelial cells.//Shock.- 1997.- Vol.8.- No.4.- pp.249-255.

86. Park JH, Vanderhoof JA, Blackwood D, Macdonald RG. Characterization of type I and type II insulin-like growth factor receptors in an intestinal epithelial cell line.// Endocrinology.- 1990.- Vol. 126.- No.6.- pp.2998-3005.

87. Peterson RL, Bozza MM, Dorner AJ. Interleukin-11 induces intestinal epithelial cell growth arrest through effects on retinoblastoma protein phosphorylation.// Am. J. Pathol. 1996.- Vol. 149.- No 3.- pp. 895-902.

88. Pottem C.S. Extreme sensivity of some intestinal crypt cells to X and у irradiation.// Nature.- 1977.- Vol.269.- pp.518-521.

89. Pottern C.S., Booth C., Pritchard D.M The intestinal epithelial stem cell: the mucosal governor.// Int. J Exp. Path.- 1997.- Vol. 78.- pp.219-243.

90. Puddington L., Olson S., Lefrancois L. Interaction between stem cell factor and c-Kit are required for intestinal immune system homeostasis.// Immunity.-1994.- No.l.- p.733.

91. Radema SA, van Deventer SJ, Cerami A. Interleukin 1 beta is expressed predominantly by enterocytes in experimental colitis.// Gastroenterology.-1991.-Vol.100.-No.5, Part l.-ppl 180-1186.

92. Robertson SA, Sjoblom C, Jasper MJ, Norman RJ, Seamark RF. Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor promotes glucose transport and blastomere viability in murine preimplantation embryos.// Biol. Reprod. -2001.- Vol.64. -No.4. -pp.1206-1215.

93. Robijn RJ, Logtenberg T, Wiegman LJ, van Berge Henegouwen GP, Houwen RW, Koningsberger JC. Intestinal T lymphocytes.//Scand. J. Gastroenterol.-1995.- Suppl. 212.- pp.23-33.

94. Rollo EE, Kumar KP, Reich NC, Cohen J, Angel J, Greenberg HB, Sheth R, Anderson J, Oh B, Hempson SJ, Mackow ER, Shaw RD. The epithelial cell response to rotavirus infection.//J. Immunol.- 1999.- Vol.163.- No.8.- pp.44424452.

95. Ruemmele FM, Gurbindo C, Mansour AM, Marchand R, Levy E, Seidman EG. Effects of interferon gamma on growth, apoptosis, and MHC class II expression of immature rat intestinal crypt (IEC-6) cells. //J Cell Physiol.- 1998. Vol. 176.- No. 1.- pp. 120-126.

96. Ruemmele FM, Seidman EG. Cytokine-intestinal epithelial cell interactions: implications for immune mediated bowel disorders.//Chung Hua Min Kuo Hsiao Erh Ко I Hsueh Hui Tsa Chih.- 1998.- Vol. 39. No.l.-pp. 1-8.

97. Santos LM, Lider O, Audette J, Khoury SJ, Weiner HL Characterization of immunomodulatory properties and accessory cell function of small intestinal epithelial cells.//Cell.Immunol.-1990.-Vol. 127.-No. 1 .-pp.26-34.

98. Scammon R.E., Kittleson J. A. The growth of the gastrointestinal tract of the human fetus.// Proc. Soc. Exp. Biol. Med.- 1926.- Vol. 24.- pp303-310.

99. Shmakov AN, Panteleeva NG, Fedjanov AV, Trufakin VA. The role of lympho-epithelial interactions in the regulation of small intestinal epithelium proliferation.// Adv. Exp. Med. Biol.- 1995.- Vol. 371.- pp.265-269

100. Speekenbrink A.B.J., Parrott D.M.V. Modulation of in vitro thymidine incorporation into crypt cells from the murine small intestine.// Cell Tissue Kinet. 1987. - Vol. 20.- pp 135-144.

101. Spivak JL. The mechanism of action of erythropoietin.// Int. J. Cell. Cloning. -1986. Vol.4. -No.3. -pp. 139-166.

102. Stadnyk AW, Sisson GR, Waterhouse CC. IL-1 alpha is constitutively expressed in the rat intestinal epithelial cell line IEC-6.// Exp. Cell. Res.- 1995.-Vol. 220.-NO.2.- pp.298-303.

103. Stallmach A., Strober W., MacDonald T.T., Lochs H., Zeitz M. Introduction and modulation of gastrointestinal inflammation.// Immunol. Today.- 1998.-Vol.19.- No. 10.- pp.438-441.

104. Suemori S., Ciacci C., Podolsky D.K. Regulation of transforming growth factor expression in rat intestinal epithelial cell lines.// J. Clin. Invest. 1991.-Vol.87. - No.6. - pp.2216-2221.

105. Sydora B.C., Habu S., Taniguchi M. Intestinal intraepithelial lymphocytes preferentially repopulate the intestinal epithelium.// Int. Immunol. 1993. -Vol.5.-No.7.-pp.743-751.

106. Vancott J.L., Kweon M., Fujihashi K., Yamamoto M., Marinaro M., Kiyono H., McGhee J.R. Helper T susets and cytokines for mucosal immunity and tolerance.// Behring Inst. Mitt. -1997. No. 98. -pp.44-52.

107. Waterhouse CC, Stadnyk AW. Rapid expression of IL-lbeta by intestinal epithelial cells in vitro.//Cell Immunol.- 1999.- Vol.193.- No.l.- pp.1-8.

108. Weiner H.L. Oral tolerance: immune mechanisms and treatment of autoimmune diseases.// Immunol. Today.- 1997.- Vol.18.- No.7.-pp335-342.

109. Winesett MP, Ramsey GW, Barnard JA.Type II TGF(beta) receptor expression in intestinal cell lines and in the intestinal tract.// Carcinogenesis.-1996.-Vol. 17.- No.5.- pp.989-995.

110. Yamamoto M., Fujihashi K., Kawabata K., McGhee J.R., Beagley K.W., Kiyono H. A mucosal intranet: intestinal epithelial cells down-regulate intraepithelial, but not peripheral, T limphocytes.// J. Immunol.- 1998.- Vol. 160.- pp. 2188-2196.

111. Yu Y, Chadet K. Entamoeba histolytica stimulates interleukin 8 from human colonic epithelial cells without parasite-enterocyte contact.//Gastroenterology-1997.- Vol. 112.- No.5.- pp.1536-1547.