Функциональная гетерогенность стволовых кроветворных клеток: выявление методами колониеобразования in vitro тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Цырлова, Анна Ильинична

• Цырлова, Анна Ильинична
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Цырлова, Анна Ильинична

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Стволовая кроветворная клетка: проблемы теории и разработка методов изучения.

1.2. Использование пСКК в клинике: проблемы и перспективы.

1.3. Иммунная регенерация и иммунотерапия после трансплантации пСКК

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Глава 3. ИССЛЕДОВАНИЕ ЧИСЛА И ПРОЛИФЕ

РАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ ПОЛИПОТЕНТНЫХ

СТВОЛОВЫХ КРОВЕТВОРНЫХ КЛЕТОК В

МОДЕЛИ НА МЫШАХ

3.1. Разработка методов изучения пролиферации пСКК (в модели на мышах)

3.2. Измерение продолжительности клеточного цикла КОЕппх

3.3.Изучение числа и пролиферации КОЕгшх при воздействии химиотерапии

3.4. Влияние пролиферативной активности КОЕггйх на их репопулирующую способность в длительных культурах кроветворения

Глава 4. ИЗУЧЕНИЕ ПРОЛИФЕРАТИВНОЙ И

РЕПОПУЛИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПСКК ИЗ

РАЗЛИЧНЫХ КРОВЕТВОРНЫХ ИСТОЧНИКОВ

ЧЕЛОВЕКА В НОРМЕ И ПРИ ПАТОЛОГИИ

4.1. Разработка метода: пролиферативная активность СБ34+ клеток пуповинной крови

4.2. Культивирование С034-позитивный клеток из пуповинной крови с ростовыми факторами: изучение пролиферативной и репопулирующей активности в динамике

СПИСОК СОКРАЩЕНИИ

БОЕ-Э

ГМ-КСФ

ИЛ-3,

КОЕ-ГМ

КОЕ-ГЭММ

КОЕ-ВПП

КОЕс МКПК

ПВМ-КС пСКК

ФГА-КС

ФСК Эро Ага С

5-флуороурацил бурстообразующие клетки колониестимулирующий фактор гранулоцитов макрофагов интерлейкины 3, колониеобразующие единицы колониеобразующие единицы гранулоцитов макрофагов колониеобразующие единицы гранулоцитов, эритроцитов колониеобразующие единицы с высоким пролифера-тивным потециалом колониеобразующие единицы в селезенках мобилизированные клетки периферической крови

ПОКЕвид митоген-кондиционированная среда полипотентные стволовые кроветворные клетки фитогемагглютинин-кондициониро ванная среда фактор стволовых клеток эритропоэтин цитозинарабинозид бис-хлорнитрозомочевина соЬЫез1:оп агеа»-формирующие клетки

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Функциональная гетерогенность стволовых кроветворных клеток: выявление методами колониеобразования in vitro»

АТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ

Изучение проблем регуляции процессами пролиферации и дифференцировки стволовых кроветворных клеток имеет фундаментальное значение не только для развития теоретических основ кроветворения, но и для решения практических задач иммунологии и онкологии (Воробьев, Бриллиант, 1979; Козлов и др., 1982; Гольдберг и др., 1983; Чертков, Гуревич, 1984; Бутенко, 1985; Петров и др., 1991). Одной из важнейших задач современной иммунологии является изучение механизмов дифференцировки кроветворных предшественников в функционально зрелые иммунокомпетентные клетки.

Изучение иммунной системы и основных реакций иммунитета долгое время развивалось параллельно и независимо учению о стволовой кроветворной клетке (СКК). Удивительно, но только единичные работы (Журавкин и др., 1978; Козлов и др., 1982; Васильев, 1985; Цырлова, 1991) касаются изучения связи между иммунной и кроветворной системами. В этих исследованиях показано, что факторы, изменяющие пролиферацию СКК, влияют на характер и проявление гуморального иммунитета при ответе на стандартные антигены.

Только в последние годы, благодаря развитию методов аллотрансплантации костного мозга и необходимости предотвращения и лечения развивающейся при этом реакции «трансплантат против хозяина» (вУН), произошло заметное сближение науки о СКК с проблемами иммунитета. Разрабатываются методы клеточной терапии, основанные на выделении и размножении клеток, обогащенных стволовыми элементами ¡п tro, с последующей их дифференцировкой в иммунокомпе-тентные лимфоциты, Т-хелперы (Th), цитотоксические лимфоциты (CTL), натуральные киллеры (NK), дендритные клетки. Это, в свою очередь, способствовало появлению новой волны интереса к проблемам дифференцировки клеток иммунной системы и методов ее регуляции (2000). Особенностью ведущихся в настоящее время исследований является пристальное внимание, уделяемое начальным этапам процесса, а именно: ранним стадиям пролиферации и дифференцировки Т- и В-клеток из стволовых предшественников (Gluckman е. а., 1988; Bruger е. а., 1995; Demirex е. а., 1995, 1996; Alcorn е. а., 1996; Moore, 1997; Gordon and Blacke, 1998; Habibian e. a., 1998). Иммунная система человека и животных, представляющая собой комплексную многокомпонентную сеть взаимодействующих специализированных элементов, долгое время рассматривалась лишь на уровне ее эффекторного звена. Тем не менее, в последние годы изучение полипотентных стволовых кроветворных клеток (ПСКК) и их роли в формировании иммунного ответа начинает привлекать все большее внимание ученых и клиницистов.

Использование в клинической практике иммунодепрес-сантов, гормональных препаратов, дозированного облучения, лечебных сывороток, вакцин и т. п. делает чрезвычайно актуальным не только изучение изменений функциональной активности ПСКК при таких воздействиях, но и разработку эффективных методов контроля их пролиферации, дифференцировки и самоподдержания.

В последнее время широко разрабатываются препараты, применение которых могло бы стимулировать регенерацию кроветворной и иммунной системы после курсов облучения и химиотерапии, на основе факторов, регулирующих как функциональную активность иммунокомпетентных клеток, так и дифференцировку и пролиферацию гемопоэтических предшественников. Пролиферация полипотентных стволовых кроветворных клеток является главной мишенью стимулирующих кроветворение воздействий, таким образом, изучение проли-феративной активности ПСКК имеет огромное научное значение.

Нужно отметить, что в последние годы ряду авторов удалось акцентировать значение пролиферативной активности СКК для приживления трансплантата (Peters е. а., 1995; Alcorn е. а., 1996; Conneally е. а., 1997; Nilsson е. а., 1997; Gothot е. а., 1998), для их размножения в культуре (ex vivo expansion) при иммунизации и старении (Козлов и др., 1991; Tsyrlova, 1991; Le Haan е. а., 1997), развитии злокачественных и аутоиммунных заболеваний в моделях на мышах AKR и NZB (Цырлова и соавт., 1987; Цырлова, Лисуков и др., 1987; Хал-дояниди, Лисуков, 1990; Лисуков, 1991; Лисуков с соавт., 1991; Orlovskaya е. а., 1991). Однако, все вышеперечисленные выводы о пролиферативной активности СКК были сделаны либо на основе косвенных данных (Nilsson е. а., 1997), либо при изучении пролиферации КОЕс методом тимидинового самоубийства (Цырлова и др., 1987; Козлов и др., 1998), данный метод исследования связан с трансплантацией гемопоэтических клеток в организм облученных реципиентов, что при наличии известных вариаций, присущих методам «самоубийства» требует большого количества животных. Метод весьма трудоемок и требует специальных условий для содержания и облучения мышей, вследствие чего не является удобным для рутинной кинетики стволовых клеток в различных моделях. Кроме того, исследования кинетики СКК человека данным методом вообще не представляется возможным.

Трансплантация костного мозга, ПСКК из периферической и плацентарной крови является составной частью комплексной терапии при онкологических, лимфопролифера-тивных, аутоиммунных заболеваниях, радиационном поражении.

В последние десятилетия проведены многочисленные исследования по изучению фенотипической характеризации СКК и их функциональных свойств, разработаны способы забора, криоконсервирования и трансплантации клеток, ведутся клинические испытания по изучению эффективности новых методов, основанных на применении клеточной терапии и генно-инженерного подхода, при лечении онкологических и аутоиммунных заболеваний. Тем не менее, практически все новые направления, связанные с применением СКК в клинике, на сегодняшний день не лишены серьезных недостатков, что, несомненно, связано, в том числе с недостаточной разработкой методов изучения пролиферации пСКК.

Основной трудностью работы по выделению и изучению пСКК всегда было и остается отсутствие четких морфологических критериев в сочетании с низкой частотой встречаемости этих клеток среди кроветворных элементов.

Мы разделяем мнение ряда авторов (Schofield, 1978; Govdou and Blackett, 1998) о том, что пролиферация СКК может быть адекватно оценена в процессе исследования проли-феративной активности колониеобразующих единиц (КОЕ) in vivo (КОЕс) или in vitro (KOEmix). Существенным моментом, однако, является разделение между полипотентными СКК (пСКК) и их коммитированными потомками. Так, если полипо-тентность КОЕс, колоногенность которых выявляется в селезенке облученных реципиентов in vitro, доказана в целом ряде публикаций (Till, McCulloch, 1961; Lord е. а., 1979, 1993; Plo-emachev е. а., 1991), то статей, посвященных разработке соответствующего метода исследования таких клеток in vitro, существует весьма мало.

Применение методов колониеобразования для изучения пСКК «in vitro», а также методов «самоубийства клетки» с помощью цитотоксических препаратов (Vassort е. а., 1973; Preislev, Epstein, 1981; Lord е. а. 1993; Blair, Thomas, 1998) безусловно способствовало развитию исследований по изучению пролиферации стволовых клеток и пониманию значения пролиферативного процесса в последующей судьбе таких клеток при химио- и радиотерапии, развитии опухолей и гемобла-стозов, аутоиммунных и аллергических процессов, а также трансплантации СКК.

Однако использование различных экспериментальных условий, в сочетании с разногласиями относительно типологии изучаемых полоний, не позволяет адекватно оценить опубликованные разными авторами данные экспериментальных и особенно клинических исследований (Lewis, Rowling, 1996; Rich, 1997).

Все вышесказанное обуславливает актуальность данной работы, направленной на отработку стандартизированных методов изучения пролиферации пСКК мышей и человека in vitro. Мы убеждены, что развитие данных методов является основанием не только для изучения пролиферации пСКК в экспериментальных моделях, но и приобретает решающую роль в разработке новых критериев диагностики и прогноза клинических состояний, связанных с гемопоэтическим стрессом.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

В соответствии с вышеизложенным, целью настоящего исследования является исследование количества, пролифера-тивной и колониеобразующей активности стволовых кроветворных клеток разной степени зрелости при нормальном и активированном гемопоэзе у человека и экспериментальных животных на основе стандартизированных методов in vitro.

Для осуществления данной цели были поставлены следующие задачи:

1. Выявить оптимальные условия культивирования для оценки количества, пролиферативной и колониеобразующей функций стволовых кроветворных клеток.

2. Изучить зависимость колониеобразующей и репопулирую-щей способности от пролиферативной активности стволовых кроветворных клеток.

3. Оценить количество и функциональную активность пСКК из разных кроветворных источников человека: костного мозга, пуповинной крови, мобилизированной периферической крови.

4. Исследовать особенности пролиферации пСКК экспериментальных животных и человека в жидких культурах с ростовыми факторами.

5. Изучить влияние цитотоксической химиотерапии на количество и функциональную активность СКК в экспериментальных моделях и при раке молочной железы.

НАУЧНАЯ И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РАБОТЫ

Предлагаемый в работе метод изучения функциональных характеристик пСКК in vitro отличается простотой применения, воспроизводимостью результатов и может быть рекомендован для мониторинга поведения стволовых клеток как в экспериментальных условиях, так и в клинике.

Использование стандартизованного подхода позволило впервые провести сравнение количества и функциональных свойств пСКК человека из различных кроветворных источников (костного мозга, пуповинной и мобилизованной крови) в условиях нормального и активированного гемопоэза.

Практическое значение работы состоит в том, что данный метод может быть рекомендован для оценки как пролифера-тивного статуса пСКК пациента, так и качества трансплантата при трансплантации костного мозга. Другой областью применения метода может являться исследование влияний различных ингибиторов и стимуляторов пролиферации пСКК.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ В ЗАЩИТУ

1. Для сравнения пролиферативной активности пСКК из различных кроветворных источников с последующим анализом функциональных последствий необходимы стандартизова-ные методы исследования количества таких клеток и их кинетики в сопоставимых временных и культуральных условиях.

2. Стандартизованный метод изучения пСКК in vitro, базирующийся на функции колониеобразования в метилцеллю-лозе с использованием S-фазоспецифического цитостатика, может быть эффективно использован для изучения сходных популяций ранних полипотентных предшественников из кроветворных источников как экспериментальных животных, так и человека.

3. При размножении клеток мышей и человека ex vivo в культуре с ростовыми факторами возрастает пролиферация пСКК, что сопровождается утратой клетками их репопулирующего потенциала.

4. Уровень пролиферации пСКК из костного мозга онкологических больных, подвергшихся химиотерапии, а также пСКК, мобилизованных в периферическую кровь для трансплантации, является повышенным.

5. Результаты, полученные при изучении кинетики пСКК в экспериментальных моделях, позволяют сделать вывод о необходимости использования методов контроля пролифе-ративной и репопулирующей функций кроветворных предшественников в клинике, а также о важности разработки средств их регуляции (ингибиторов пролиферации пСКК).

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Апробация работы состоялась на расширенном семинаре лаборатории регуляции иммунопоэза ИКИ СО РАМН 20 декабря

1999 г.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Цырлова, Анна Ильинична

ВЫВОДЫ

1. Предлагаемый в работе метод in vitro, базирующийся на функции колониеобразования в стандартизованных культу-ральных условиях с использованием S-фазоспецифического цитостатика, является адекватным для изучения популяций ранних полипотентных предшественников из различных кроветворных источников как лабораторных животных, так и человека.

2. Предложенная комбинация методов позволяет изучать про-лиферативную активность как покоящихся и медленно ripo-лиферирующих пСКК, так и кинетику ее активации в моделях химиотерапии, размножения клеток ex vivo т. п. Практическое значение работы состоит в том, что метод может быть рекомендован для оценки как пролиферативного статуса пСКК пациента, так и качества трансплантата.

3. Больные, подвергавшиеся противоопухолевой цитотоксиче-ской терапии, демонстрируют повышенную пролифератив-ную активность полипотентных колониеобразующих клеток КОЕ-ГЭММ из костного мозга (40-80% в S-фазе), по сравнению с КОЕ-ГЭММ из нормального костного мозга (0-20% в S-фазе).

4. Пролиферативная активность полипотентных стволовых предшественников из пуповинной крови при доношенной беременности является низкой. Стимуляция таких клеток при помощи ростовых факторов при размножении ex vivo приводит к активации пролиферации, что сопровождается возрастанием числа клоногенных предшественников, и па

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Вопрос о зависимости функциональных свойств пСКК от их пролиферативной активности нуждается в пристальном изучении.

Для сравнения пролиферативной активности пСКК из различных кроветворных источников с последующим анализом функциональных последствий необходимы стандартные методы исследования количества таких клеток и их кинетики в сопоставимых временных и культуральных условиях. Такие методы должны отличаться простотой и доступностью для использования в клинических лабораториях.

Использование стандартизированного методического подхода, основанного на методе колониеобразования in vitro, позволило впервые провести сравнение количества и функциональных свойств пСКК человека из различных кроветворных источников (костного мозга, пуповинной и мобилизованной крови) и экспериментальных животных (разных линий мышей) в условиях нормального активированного гемопоэза.

Основным критерием адекватности метода являлась корреляция результатов, полученных при использовании методов колониеобразования in vitro, с ранее полученным методом эк-зоколоний (КОЕс) данными, что является доказательством высокой вероятности оценки одной и той же субпопуляции пСКК. Предлагаемый в работе метод отличается простотой применения, воспроизводимостью результатов, адекватно отражает функциональные и кинетические характеристики пСКК и может быть рекомендован для мониторинга поведения ство

92 ловых клеток как в экспериментальных условиях, так и в клинике.

Практическое значение работы состоит в том, что метод может быть рекомендован при трансплантации костного мозга для оценки как пролиферативного статуса пСКК пациента, так и качества трансплантата.

Было показано, что эффективность приживления костномозгового трансплантата зависит не только от активности и количества иммунокомпетентных клеток, но и от функционального состояния пСКК. Таким образом, наличие методов контроля/коррекции функциональной активности пСКК в условиях сингенной и аллогенной трансплантации костного мозга должно сыграть огромную роль в развитии этого важного направления онкологии и иммунологии.

Другой областью применения метода могут являться исследования влияния ингибиторов и стимуляторов пролиферации пСКК. От понимания основных закономерностей проли-феративно-дифференцировочного процесса пСКК зависят также возможности его направленной регуляции и, следовательно, перспективы усовершенствований в области иммунотерапии, трансплантации стволовых клеток и генной терапии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Цырлова, Анна Ильинична, 2000 год

1. Акоев И. Г., Мотлох Н. Н. Биофизический анализ предпато-логических и предлейкозных состояний. - М.: Наука, 1984. - 288 с.

2. Антипенко Е. Н. Восстановление кроветворения у собак, перенесших острую лучевую болезнь // Радиология. 1963. -Т. 3, № 2. - С. 211-215.

3. Бутенко 3. А. О роли стволовых клеток в механизме лейко-зогенеза // Стволовые клетки и опухолевый рост / Под редакцией В. Г. Пинчук, 3. А. Бутенко. Киев: Наукова Думка, 1985. - С. 5-12.

4. Бутенко 3. А. Стволовые клетки и опухолевый рост. Киев: Наукова Думка, 1985. - 179 с.

5. Васильев Н. В. Очерки о роли кроветворной ткани в антите-лообразовании. Томск: ТГУ, 1985. - 302 с.

6. Воробьев А. И., Бриллиант М. Д. Патогенез гемобластозов // Руководство по гематологии. М.: Медицина, 1979. - С. 120-131.

7. Гольдберг Е. Д., Дыгай А. М., Карпова Г. В. Роль лимфоцитов в регуляции гемопоэза. Томск: ТГУ, 1983. - 160 с.

8. Гольдберг Е. Д., Карпова Г. В., Новицкий и др. Характеристика кроветворения у бестимусных мышей // Бюлл. экспе-рим. биологии и медицины. 1977. - № 4. - С. 463-465.

9. Громыхина Н. Ю., Повещенко А. Ф., Козлов В. А. Влияние простагландина Е2 на гемопоэтические клетки костногомозга и селезенки // Гематология и трансфузиология. -1986. № 11. - С. 34-37.

10. Журавкин И. Н., Козлов В. А. Полипотентные стволовые кроветворные клетки в условиях продолжительной стимуляции эритропоэза // Физиология и патология соединительной ткани. Новосибирск, 1980. - Т. 1. - С. 42-43.

11. Журавкин И. Н., Козлов В. А., Лозовой В. П. Влияние острой и хронической гипоксии на формирование гуморального иммунного ответа у мышей // Кровообращение в условиях высокогорной и экспериментальной гипоксии: Тез. докл. Душанбе, 1978. - С. 112-114.

12. Журавкин И. Н., Лозовой В. П., Козлов В. А. Антитело-образующая способность клеток селезенки мышей после ги-поксической гипоксии и введения эритропоэтина // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. 1978. - № 5. - С. 564567.

13. Кашлакова Н. В., Лисуков И. А., Цырлова И. Г. и др. Супрессивный эффект бластных клеток селезенки AKR мышей на антителообразование in vivo и пролиферацию лимфоцитов in vitro // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. -1988. Т. 108, № 2. - С. 184-186.

14. Козлов В. А. Гуморально-клеточные уровни регуляции основных этапов иммуногенеза: Автореф. дисс. докт. мед. наук. М., 1980. - 40 с.

15. Козлов В. А., Журавкин И. Н., Цырлова И. Г. Стволовая кроветворная клетка и иммунный ответ. Новосибирск: Наука, 1982. - 222 с.

16. Лисуков И. А. Нарушение эритроидной дифференцировки стволовых кроветворных клеток при лейкозогенезе // Новое в биологии и медицине. Новосибирск, 1991. - С. 118.

17. Лисуков И. А., Цырлова И. Г., Козлов В. А. Влияние анд-рогенов на развитие лейкоза у мышей линии AKR Л Экспериментальная онкология. 1986. - Т. 8, № 1. - С. 71-74.

18. Манько В. М. Анализ субпопуляций лимфоцитов и механизмов их влияния на дифференцировку кроветворных клеток // Успехи современной биологи. 1981. - Т. 92, № 1. -С. 81-99.

19. Петров Р. В., Хаитов Р. М., Манько В. М. и др. Контроль и регуляция иммунного ответа.-Л.: Медицина, 1991. 312с.

20. Петров Р. В., Хаитов Р. М., Сидорович И. Г. и др. Су-прессорные клетки мозга человека // Доклады АН СССР. -1984. Т. 274, № 1. - С. 207-210.

21. Санин А. В. Возможная роль стволовых кроветворных клеток и клеток-предшественников эритропоэза в индукции лейкоза Раушера у мышей при микоплазма-вирусной инфекции // Стволовые клетки и опухолевый рост. Киев: Науко-ва Думка, 1985. - С. 37-40.

22. Старостин В. И. Органные и тканевые основы кроветворения: Автореф. дисс. докт. биол. наук. М., 1986. - 53 с.

23. Фриденштейн Л. Я.,Лурия Е. А. Микроокружение лимфо-идных органов как фактор иммунитета // Иммуногенез и клеточная дифференцировки. М.: Наука, 1978. - С. 159175.

24. Халдояниди С. К., Лисуков И. А. Ранние эритроидные предшественники в периферической крови больных лимфо-саркомой // Актуальные проблемы биологии и медицины. -Новосибирск, 1990. С. 99.

25. Халдояниди С. К., Павленок В. Ю., Черных Е. Р. и др. Влияние иммунорегуляторных факторов на колониеобра-зующую способность костного мозга при гемобластозах // Тез. I съезда иммунологов России. Новосибирск, 1992. -С. 519.

26. Цырлова И. Г., Лисуков И. А. Лейкогенез как следствие нарушений пролиферации и дифференцировки полипотент-ных стволовых кроветворных клеток // Иммунологическиеаспекты лимфопролиферативных заболеваний. Новосибирск: Наука, 1978. - С. 25-32.

27. Цырлова И. Г., Лисуков И. А., Гайдуль К. В. и др. Изменение пролиферации и дифференцировки стволовых кроветворных клеток у мышей AKR в процессе развития лейкоза // Гематология и трансфузиология. 1987. - Т. 32, № 6. - С. 41-43.

28. Цырлова И. Г., Лисуков И. А., Чеглякова В. В. и др. Влияние эритропоэстимулирующих воздействий на развитие лейкоза мышей линии AKR // Бюлл. СО АМН СССР. — 1987. № 4. - С. 84-87.

29. Чертков И. Л. Родоначальная клетка кроветворной системы // Нормальное кроветворение и его регуляция. — М.: Медицина, 1976. С. 40-97.

30. Чертков И. Л., Гуревич О. А. Стволовая кроветворная клетка и ее микроокружение. М.: Медицина, 1984. - 240 с.

31. Чертков И. Л., Фриденштейн А. Я. Клеточные основы кроветворения. М.: Медицина, 1977. - 274 с.

32. Шкловская Е. В. Увеличение количества гемопоэтиче-ских предшественников in vitro в норме и при иммунопатологических состояниях: Автореф. дисс. канд. мед. наук. -Новосибирск, 1995. 21 с.

33. Ярилин А. А., Мирошниченко И. В., Шарова Н. И. Взаимодействие клеток костного мозга, несущих «антиген стволовых клеток» и лишенных его в процессе селезеночного колониеобразования // Иммунология. 1985. - № 6. - С. 4952.

34. Akashl K., Traver D., Miyamoto T. A clonogenic common myeloid progenitor that gives rise to all myeloid lineages // Nature. 2000. - Vol. 404.

35. Audet J., Zandstra P. W., Eaves C-J., et al. Advances in hematopoietic stem cell culture // Curr. Opin. Biotechnol. -1998. Vol. 9. P. 149.

36. Bacigalupo A., Frassoni F., Van Lint M. T. Bone varrow or peripheral blood as a source of stem cells for allogeneic transplantats // Curr. Opin. Hematol. 2000. - Vol. 7(6). - P. 343347.

37. Becker A. J., McCulloch E. A., Siminovitch L., et al. The effect of differing demands for blood cell production on DNA synthesis by hemopoietic colony-forming of mice // Blood. -1965. No 26. - P. 296.

38. Bekkum D. W. van. Characterization of the mulripotential stem cell // In: Baum S. J., Ledney G. D. (eds). Experimental hemotology today. New York: Springer, 1977. - P. 3.

39. Bensinger W. I., Appelbaum F. R., Rowley S., et al. Factors that influence collection and engraftment of autologous peripheral blood stem cells // J. Clin. Oncol. 1995. - No 13. - P.t2547-2555.

40. Bertolini F., Lazzari L., Lauri E., et al. Cord blood plasmamediated ex vivo expansion of hematopoietic progenitor cells // Bone Marrow Transplant. 1994. - No 14. - P. 347-353.

41. Bhatia M., Bonnet D., Kapp U., et al. Quantitative analysis reveals expansion of human hematopoietic repopulating cells after short-term ex vivo cultire // J. Exp. Med. 1997. - Vol. 186. - P. 619-624.

42. Bhatia M., Wang J.C.Y., Kapp U., et al. Purification of primitive human hematopoietic cells capable of repopulating immunodeficienct mice // Proc. Natl. Acad. Sci. USA/ 1997. -Vol. 94. -. P. 5320.

43. Blair A., Thomas D. The proliferative status of haematopoietic progenitor cells in the developing murine liver and adult bone marrow // J. Anat. 1 998. - Vol. 1 93. - P. 443-447.

44. Bradford G. B., Williams B., Rossi R., et al. Quiescence, cycling, and turnove in the primitive hematopoietic stem cell compartment // Exp. Hematol. 1997. - No 25. - P. 445-453.

45. Bradley T. R., Hodgson G. S. Detection of primitive macrophage progenitor cells in mouse bone marrow // Blood. 1965. - No 54. - P. 1446.

46. Brandt J., Briddell R. A., Srour E. F., et al. Role of c-kit li-gand in the expansion of human hematopoietic progenitor cells // Blood. 1992. - No 79. - P. 634-641.

47. Brandt J., Srour E. F., van Berien K., et al. Cytokine-dependent longOterm culture of highly enriched precursors of hematopoietic progenitor cells from human bone marrow // J. Clin. Invest. 1990. - No 86. - P. 932-941.

48. Brecher G., Nebed S., Yee M., et al. Pluripotent stem cells with normal or reduced self-renewal survive lethal irradiation // Exp. Hematol. 1988. - Vol. 16. - P. 627.

49. Breems D. A., Blokland E. A. W., Heben S., et al. Frequency analysis of human primitive haematopoietic stem cell subsets using a cobblestone area forming cell assay // Leukemia. -1994. Vol. 8, No 7 (July). - P. 1095-1 104.

50. Breems D. A., Blokland E. A. W., Siebel K. E., et al. Stroma-contact prevents loss of hematopoietic stem cell quality during ex vivo expansion of CD34+ mobilized peripheral blood stem cells // Blood. 1998. - No 91. - P. 111-117.

51. Breems D. A., van Hennik P. B., Kusadasi N., et al. Individual stem cell quality in leukapheresis products is related to the number of mobilized stem cells // Blood. 1996. - No 87. - P. 5370-5378.

52. Broxmeyer H. E., Hangos G., Cooper S., et al. Growth characteristics and expansion of human umbilical cord blood and estimation of its potential for transplantation in adults // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. - No 89. - P. 4109-41 13.

53. Brugger W., Heimfeld S., Berenson R. J., et al. Reconstitution of hematopoiesis after high-dose chemotherapy by autolo-dous progenitor cells genearted ex vivo // N. Engl. J. Med. -1995. No 333. - P. 283-287.

54. Brugger W., Scheding S., Heimfeld S., et al. Ex vivo expan-ted peripheral blood CD34+ cells mediate hematopoietic recovery in cancer patients after high-dose VP16, ifosfamide, carboplatin and epirubicin // Blodd. 1994. - Vol. 84. P. 395a.

55. Cheng J., Baumhueter S., Cacalano G., et al. Hematopoietic defects in mice lacking the sialomucin CD34 // Blood. 1996. - Vol. 87. - P. 479.

56. Chklovskaya E. V., Khaldoyanidi S. K., Orlovskaya I. F., et al. The stimelation of in vitro myelopoiesis by the bone marrow inhibitor of stem cell proliferation // Immunology. 1997. -Vol. 5. - P. 33-35.

57. Civin CI., Banguenigo M. L., Strauss L.C., et al. Antigenic analysis of hematopoiesis. VE Flow cytometric characterization of My 10-positive progenitor cells in normal bone marrow // Exp. Hematol. 1987. - Vol. 15. - P. 10.

58. Civin CI., Strauss L.C., Brovall C. Antigenic analysis of hematopoiesis. III. A hematopoietic progenitor cell surface antigen defined by a monoclonal antibody raised against KG-la cells // J. Immunol. 1984. - Vol. 133. - P. 157.

59. Civin CI., Trischamann T., Kadan N. S., et al. Highly purified CD34-positive cells reconstitute hematopoiesis // J. Clin. Oncol. 1996. - Vol. 14. - P. 2224.

60. Conneally E., Eaves C. J., Humphries R. K. Efficient retro-viral-mediated to human cord blood stem cells with in vivo re-populating potential // Blood. 1998. - Vol. 91. - P. 34873493.

61. Cornetta K., Srour E. F., Moore A., et al. Retroviral gene transfer in autologous bone marrow transplantation for adult acute leukemia // Hum. Gene. Ther. 1996. - Vol. 7. - P. 1323-1329.

62. Dao M. A., Hamman C. H., Koch D. B., et al. FLT3 ligand preserves the ability CD34+ progenitors to sustain long-term hematopoiesis in immune-deficient mice after ex vivo retrovi-ral-mediated transplantation // Blood. 1997. - Vol. 89. - P. 446-456.

63. Dexter T. M. Introduction to the haemopoietic system // Cancer Surv. 1990. - Vol. 9. - P. 1-5.

64. Dexter T. Stromal cell associated haemopoiesis // J. Cell. Physiol. 1982. - Suppl 1. - P. 87.

65. Dexter T. M., Allen T. D., Lajtha L. G. Conditions controlling the proliferation of haemopoietic stem cells in vitro // J. Cell Physiol. 1977. - Vol. 91. - P. 335.

66. Dexter T. M., Allen T. D., Lajtha L. G., et al. Stimulation of differentiation and proliferation of hemopoietic cells in vitro // J. Cell. Physiol. 1973. - Vol. 82. - P. 461-473.

67. Dexter T. M., Wright E. G., Krizsa F., et al. Regulation of haemopoietic stem cell proliferation in long term bone marrow cultires // Biomedicine/ 1977. - Vol. 27. - P. 344.

68. Dick J.E. Normal and leukemic human stem cells assayed in SCID mice // Semin. Immunol. 1996. - Vol. 4. - P. 197-206.

69. Dick J.E., Bhatia M., Gan O., et al. Assay of human stem cells by repopulation of NOD/SCID mice // Stwm cells. 1997. -Vol. 15(suppl 1).-P. 199-203.

70. Dresch C., Kedir N. El., Metral J., et al. Cytosine arabino-side as a suicide agent for human colony forming cells // Exp. Hematol. 1983. - Vol. 11, No 3. 0 P. 187-192.

71. Eaves C. J., Eaves A. C. Regulation of hemopoietic progenitor cell proliferation // Behring Inst. Mitt. 1988. - No 83. - P. 85-92.

72. Emerson S. G. Ex vivo of hematopoietic precursors, progenitors and stem cells: the next generation of cellular therapeutics // Blood. 1996. - Vol. 87. - P. 3082-3088.

73. Gardner R. V., Lerner C., Astle C. M., et al. Assesing permanent damage to primitive hematopoietic stem cells after chemotherapy using the competitive repopulation assay // Cancer Chemother. Pharmacol. 1993. - Vol. 23. - P. 450-454.

74. Gluckman E., Broxmeyer H. E., Auerbach A. D., et al. Hematopoietic reconstitution in a patient with Fanconi's anemia by means of umbilical cord blood from an HLA-identical sibling // N. Engj. J. Med. 1989. - Vol. 321. - P. 1 174-1 178.

75. Goodell M. A. CD34+ or CD34": Does it Really Matter? // Blood. 1999. - Vol. 94, No 8 (October 15). - P. 2545-2547.

76. Gordon M. Y., Blackett N. M. Reconstruction of the hematopoietic system after stem cell transplantation // Cell Transplant. 1998. - Vol. 7, No 4. - P. 339-344.

77. Gothot A., Pyatt R., McMahel J., et al. Functional heterogeneity of human CD34+ cells isolated in subcorpatments of the Go/Gi phase of the cell cycle // Blood. 1997. - Vol. 90. - P. 4384-4393.

78. Greenberger J., Sakakeeny M., Parker L. In vitro proliferation of hematopoietic stem cells in long-term marrow cultures: principles in mouse applied to man // Exp. Hematol. 1979. -Vol. 7. - P. 135.

79. Habibian H. K., Peters S. O., Hsieh C. C., et al. The fluctuating phenotype of the lymphohematopoietic stem cell cycle transit // J. Exp. Med. 1998. - Vol. 188. - P. 393-398.

80. Haneline L. S., Marshall K. P., Clapp D. W. The Highest Concentration of Primitive Hematopoietic Progenitor Cells in Cord Blood Is Found in Extremely Premature Infants // Pediatric Research. 1996.

81. Harris R. A., Hogarth P. M., Wadeson L. J., et al. An antigenic difference between cells forming early and late haematopoietic spleen colonies (CFU-S) // Nature. 1984. - Vol. 307. - P. 638.

82. Harrison D. E., Astle C. M., Stone M. Numbers and functions of transplantable primitive immunohematopoietic stemcells // J. of Immunology. 1989. - Vol. 142, No 11. - P. 3833-3840.

83. Harrison D. E., Lerner C. P. Most primitive hematopoietic stem cells are stimulated to cycle rapidly after treatment with 5-fluoroiracil // Blood. 1991. - Vol. 78. - P. 1237.

84. Heimfeld S., Fei R., Tsui J., et al. Ex-vivo expansion of human bone marrow and cord blood CD34+ progenitor cells // Blood. 1993. - Vol. 82. - P. 17a.

85. Hodgson G. S., Bradley T. R. In vivo kinetic status of hematopoietic stem and progenitor cells as inferred from labeling with bromodeoxyuridine // Exp. Hematol. 1984. - Vol. 12. - P. 683.

86. Hodgson G. S., Bradley T. R. Properties of haematopoietic stem cells surviving 5-fluorouracol treatment: evidence for a pre-CFY-S cells? // Nature. 1979. - Vol. 281. - P. 381.

87. Humeau L., Namilawa R., Bardin F., et al. Ex vivo manipulations alter the reconstitution potential of mobilized human CD34+ peripheral blood progenitors // Leukemia. 1999. -Vol. 13 (3). - P. 438-452.

88. Humphries R. K., Eaves A. C., Eaves C. J. Characterization of a primitive erythropoietic progenitor found in mouse marrowbefore and after several weeks in culture // Blood. 1979. -Vol. 53. - P. 746.

89. Iscove N. N., Shaw A. R., Keller G. Net increase of pluri-potential hematopoietic precursors in suspension cultures in response to IL-1 and IL-3 // J. Immunol. 1989. - Vol. 142. - P. 2332-2337.

90. Johnson G. R. Colony formation in agar by adult bone marrow multipotential hemopoietic cells // J. Cell Physiol. 1980. - Vol. 103. - P. 371.

91. Kessinger A., Armitage J. O. The evolving role of autologous peripheral stem cell transplantation following high-dose therapy for malignancies // Blood. 1991. - Vol. 77. - P. 211213.

92. Kessinger A., Armitage J. O., Smith D. M., et al. High-dose therapy and autologous marrow peripheral blood stem cell transplantation for patients with lymphoma // Blood. 1989. -Vol. 74. - P. 1260.

93. Kincade P. W., Moore M. A. S., Schlegel R. A. B-lymphocyte differentiation from fetal liver stem cells in 89Sr-treated mice // J/ Immunol. 1975. - Vol. 115, No 5. - P. 1217-1222.

94. Kondo M., Weissman I. L., Akashi K. Identification of clonogenic common lymphoid in mouse bone marrow // Cell. -1997. Vol. 91. - P. 661-672.

95. Kozlov V. A., Zhuravkin I. N., Coleman R. M. Alterations in the levels of stem cells (CFU-S) and plaque-forming cells (PFC) in mice during chronic phenylhidrazine-induced hemolytic anemia // J. Exp. Zool. 1990. - Vol. 211, No 3. - P. 357-360.

96. Lahiri S. K., Keizer H. J., van Putten L. M. The efficiencu of the assay for haemopoietic colony forming cells // Cell Tissue Kinet. 1970. - Vol. 3. - P. 355.

97. Lajtha L. G. On the concept of the cell cycle // J. Cell. Comp. Physiol. 1963. - Vol 62, suppl. 1. - P. 143.

98. Lansdorp P. M., Dragovska W., Mayani H. Ontogeny-related in proliferative potential of human hematopoietic cells // J. Exp. Med. 1993. - Vol. 178. - P. 787-791.

99. Lansdorp P. M., Dragovska W., Thomas T. E., et al. Agerelated decline in proliferative potential of purified stem cell candidates // Blood Cells. 1994. - No 20. - P. 376.

100. Lapidot T., Pllumio F., Doedens M., et al. Cytokine stimulation of multilineage hematopoiesis from immune human cells engrafted in SCID mice // Science. 1992. - Vol. 255. - P. 1137-1141.

101. Larochelle A., Vormoor J., Hanenberg H., et al. Identification of primitive human hematopoietic cells capable of re-populating NOD/SCID mouse bone marrow: Implications for gene therapy // Nature Med. 1996. - Vol. 2. P. 1329-1337.

102. Lisukov I., Chernykh H., Khaldoyanidi S., et al. Suppressive B cell factor effect on hematopoietic precursor cell proliferation // VIII International conference of the International Society of Differentiation, 1994. Hiroshima, Japan. - P. 232.

103. Lisukov I., Khaldojanidi S., Kovinev I., et al. XIth Meeting of the International Society of Haematology. -1991.- Basel. -Switzerland. P. 372.

104. Little M.-T., Storb R. The future of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation: minimixing pain, maximizing gain // J. of Clin. Investigation. 2000. - Vol. 105, No 12. - P. 1679.

105. Lord B. I., Dexter T. M., Clements J. M., et al. Macrophage inflammatory protein protests multipotent haematopoietic cells from the cytotoxic effects of hydroxyurea in vivo // Blood. -1992. Vol. 79. - P. 2605-2609.

106. Lord B. I., Lajtha L. G., Gidali J. Veasurement of the kinetic status of bone marrow precursor cells three cautionary tales // Cell. Tis. Kinet. - 1974. - No 7. - P. 507-515.

107. Lord B. I., Liu F.-L., Podja Z., et al. Inhibitor of haemopoietic CFU-S proliferation: Assays, production sources and regulatory mechanisms // Colloq. Inst. Natl. Sante Rech. Med. - 1987. - Vol. 162. - P. 227-240.

108. Lord B. I., Woolford L. B.Proliferation of spleen colony forming units (CFU-S8, CFU-Sn) and cells with marrow re-populating ability // Stem Cells. 1993. - Vol. 11. - P. 212217.

109. Lord B. I., Wright E. G. Sources of haemopoietic stem cell proliferation: stimulators and inhibitors // Blood Cells. 1980.- Vol. 6. P. 581-593.

110. Lord B. I., Wright E. G., Lajtha L. G. Actions of the haemopoietic stem cell proliferation inhibitor // Biochem. Pharmacol.- 1979. Vol. 28. - P. 1843-1848.

111. Lorimore S. A., Pragnell I. B., Eckmann L., et al. Synergistic interactions allow colony formation in vitro by murine hae-mopoietic stem cells // Exp. Hematol. 1990. - Vol. 18. - P. 248-256.

112. Lu L., Xiao M., Shen R. N., et al. Enrichment, characterization and responsiveness of single primitive CD34+h+ human umbilical cord blood hematopoietic with high proliferative and replating potential // Blood. 1993. - Vol. 81. - P. 41-48.

113. Magli M. C., Iscove N. N., Odartchenko N. Transient nature of early haemopoietic slkeen colonies // Nature, Lond. 1982. - Vol. 295. - P. 527.

114. Matrosova V. Y., Orlovskaya I. A., Kozlov V. A. The production of bone marrow factors regulating proliferation of hematopoietic stem cell in mice in different experimental models // Immunology. 1995. - No 2. - P. 33-36.

115. Mauch P., Neden S. Mobilization of primitive and late blood stem cell subpopulations in the mouse with cyclophosphamide and/or G-CSF // J. Cell. Physiol. 1992. - Vol. 16C (suppl): 66a.

116. Maximow A. Der Lymphozyt als gemeinsame Stammzelle der verschiedenen Blutelemente in der embryonale Entwicklungund im postferalen Leben der Sangetiere // Folia Haemat. (LPz). 1909. - Vol. 8, No 2. - P. 125-134.

117. Mayani H., Lansdorp P. N. Thy-1 expression is linked to functional properties of primitive hematopoietic progenitor cells from human umbilical cord blood // Blood. 1994. - Vol. 83. - P. 2410-2417.

118. Maze R., Moritz T., Williams D. A. Increased survival and multilineage hematopoetic protection from delayed and severe myelosuppressive efffects of a nitrosourea with recombinant interleukin-11 // Cancer Res. 1994. - Vol. 54. - P. 49474951.

119. McCulloch E. A. Stem cells in normal and leukemic hemopoiesis // Blood. 1983. - Vol. 62. - P. 1.

120. McNiece I., Bertoncello I., Kriegler A., et al. Colony-forming cells with high proliferative potential (HPP-CFC) // Int. J. Cell. Cloning. 1990. - Vol. 8. - P. 146.

121. McNiece I. K., Bradley T. R., Kriegler A. B, et al. Subpopulations of mouse bone marrow high-proliferative-potential colony-forming cells // Exp. Hematol. 1986. - Vol. 14. - P. 856.

122. McNiece I. K., Robinson B. E., Quesenberry P. J. Stimulation of murine colony-forming cells with high proliferative potential by the combination of GM-CSF and SCF-1 // Blood.1988. Vol. 72. - P. 191.

123. McNiece I. K., Stewart F. M., Deason D. M., et al. Detection of human CFC with a high proliferative potential // Blood.1989. Vol. 74. - P. 609-612.

124. Metcalf D. Stem cells, pre-progenitor cells and lineage-committed cells: are our dogmas correct // Ann. NY Acad. Sci. 1999. - Vol. 872. - P. 289-303.

125. Metcalf D. The molecular control of cell division, differentiation commitment and maturation in haemopoietic cells // Nature. 1989. - Vol. 339. - P. 27.

126. Metcalf D., Johnson G. R., Mandel T. E. Colony formation in agar by multipotential hemopoietic cells // J/ Cell Physiol. -1979. Vol. 98. - P. 401-420.

127. Metcalf D., Moore M. A. S. Hematopoietic Cells. North Holland Publishing Company, Amstrdam, 1971. - No 1. - P. 550.

128. Migliaccio G., Migliaccio A. R., Druzin M. L., et al. Long-term generation of colony-forming cells in liquid culture of CD34" cord blood cells in the presence of recombinant human stem cell factor // Blood. 1992. - Vol. 79. - P. 2620-2627.

129. Moen R. C. Directions in gene therapy // Blood Cells. -1991. -No 17. P. 407.

130. Monette F. C., Sigounas G. Factors affecting the proliferation and differentiation of clonogenic hematopoietic stem cells in vitro // Blood Cells. 1984. - Vol. 10. - P. 261-286.

131. Monette F. C., Stockel J. B. Blood-borne stem cells are immunologically distinct from those in other hematopoietic tissues // Exp. Hematol. 1980. - Vol. 8. - P. 89-95.

132. Monette F. C., Stockel J. B. Immunological evidence for murine hematopoietic stem cell subpopulations differing inself-reneval capacity // Stem Cells. 1981. - Vol. 1. - P. 3852.

133. Moore M. A. Hematopoietic reconstruction: New aproaches // Clin. Cancer Res. 1995. - No 1. - P. 3.

134. Moore M. A. S. Clinical implications of positive and negative hematopoietic cell regulators // Blood. 1991. - Vol. 78. -P. 1-19.

135. Moore M. A. S. Does stem cell exhaustion result from com-binibg hematopoietic growth factor with chemotherapy? It so, how do we prevent it? // Blood. 1992. - Vol. 80. - P. 3.

136. Moore M. A. S. Stem cell proliferation: ex vivo and in vivo observations // Stem Cells. 1997. - Vol. 15 (suppl 1).

137. Moore M. A. S., Dexter T. M. Stem cell regulation in con-tinious hematopoietic cell culture // Transplant. Proc. 1978. -Vol. 10. - P. 83-90.

138. Moore M. A. S., Hoskins I. Ex vivo expansion of cord blood derived stem cells and progenitors // Blood Cells. 1994. -Vol. 20. - P. 468-481.

139. Moore M. A. S., Metcalf D. Ontogeny of the haemopoetic system: yolk sac of in vivo and in vitro colony-forming cells in the developing mouse embryo // Brit. J. Haematol. 1970. -Vol. 18, No 3. - P. 279-295.

140. Moritz T., Keller D. C., Williams D. A. Human cord blood cells as targets for gene transfer: potential use in genetic therapies of severe combined immunodeficiency diseases // J. Exp. Med. 1993. - Vol. 178. - P. 529-536.

141. Morrison S. J., Weissman I. L. The long-term repopulating subset of hematopoietic stem cells is deterministic and isolat-able by phenotype // Immunity. 1994. - Vol. 1. - P. 661-673.

142. Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays // J. Immunol. Method 65. 1983. - P. 55-63.

143. Nakahata T., Ogawa M. Identification in culture of a class of hemopoietic colony-forming units with extensive capability to self-renew and generate multipotential hemopoietic colonies // Proc. Natn. Acad. Sci. USA. 1982. - Vol. 79. - P. 3843-3847.

144. Neben S., Donaldson D., Yetz-Aldape J., et al. Interleukin-11 synergized with IL-3 and steel factor but not IL-6 in proliferation of primitive murine hematopoietic stem ceels in vitro // Exp. Hematol. 1992. - Vol. 20. - P. 735a.

145. Neben S., Redfearn W., Parra M., et al. Short- and long-term repopulation of lethally irradiated mice by bone marrow stem cells enriched on the basis of light scatter and Hoechst 33342 fluorescence // Exp. Hematol. 1991. - Vol. 19. - P. 958.

146. Nilsson S. K., Dooner M. S., Quesenberry P. J. Synchronized cell-cycle induction of engrafting long-term repopulating stem cells // Blood. 1997. - Vol. 90. - P. 4646-4650.

147. Ogawa M. Differentiation and proliferation of hematopoietic stem cells // Blood. 1993. - Vol. 81. - P. 2884.

148. Orlovskaya I. A., Khaldoyanidi S. R., Matrosova V. Y., et al. The effect of bone marrow stem cell proliferation on different haematopoietic precursors in NZB mice // Immunology. -1995. Vol. 6. - P. 30-33.

149. Orlovskaya I. A., Matrosova V. Y., Tsyrlova I. G., et al. The production of bone marrow factors regulating CFUs proliferation in NZB mice // Abstracts of «The Second International Symposium on Molecular Biology of Hematopoiesis», Austria, 1991. P. 35.

150. Osawa M., Hanada K., Hamada H., et al. Long-term lympho-hematopoietic reconstitution by a single CD34-low/negative hematopoietic stem cell // Science. 1996. - Vol. 273. - P. 242.

151. Pawliuk R., Eaves C., Humphries R. K. Evidence of both ontogeny and transplant dose-regulated expansion of hematopoietic stem cells in vivo // Blood. 1996. - Vol. 88. - P. 2852-2858.

152. Peter J. A statistical analysis of murine stem cell suicide techniques // Blood. 1980. - Vol. 56, No 6 (December). - P. 1000-1011.

153. Peters S. J., Kittler E. L. W., Ramshaw H. S., et al. Ex vivo expansion of murine marrow cells with interleukin-3 (IL-3), IL-6, IL-11, and cell factor leads to impaired engraftment in irradiated hosts // Blood. 1996. - Vol. 87. - P. 30-37.

154. Peters S. J., Kittler E. L. W., Ramshaw H. S., et al. In vitro expanded hematopoietic progenitor cells entering active cell cycling acquire an engraftment defect in irradiated hosts // Exp. Hematol. 1995. - Vol. 23. - P. 785.

155. Peters S. J., Kittler E. L. W., Ramshaw H. S., et al. Murine marrow cells expanded in culture with IL-3, IL-6, IL-11, and

156. SCF acquire an engraftment defect in normal hosts // Exp. Hematol. 1995. - Vol. 23. - P. 461-469.

157. Petzer A. L., Hogge D. E., Lansdorp P. M., et al. Self-renewal of primitive human hematopoietic cells (long-term-culture-initiating cells) in vitro and their expansion in defined medium // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - Vol. 93. - P. 1470-1474.

158. Phillips R. L., Ernst R. E., Brunk B., et al. The Genetic Program of Hematopoietic Stem Cells // Science. 2000. - Vol. 288, No 2. - P. 1635-1642.

159. Piacibello W., Sanavio F., Garetto L., et al. Extensive amplification and self-renewal to human primitive hematopoietic stem cells from cord blood // Blood. 1997,- Vol. 89. - P. 2544-2653.

160. Ploemacher R., Brons N. H. C. Isolation of hemopoietic stem cell subsets from murine bone marrow. I. Radioprotective ability of purified cell suspensions differing in the proportion of day-7 and dya-12 CFU-S // Exp. Hematol. 1988. - Vol. 16. -P. 21.

161. Ploemacher R., Brons N. H. C. Isolation of hemopoietic stem cell subsets from murine bone marrow. II. Evidence for an early precursor of day-12 CFU-S and cells associated with radioprotective ability // Exp. Hematol. 1988. - Vol. 16. - P.27.

162. Ploemacher R., Brons N. H. C. Separation of CFU-S from primitive cells responsible for reconstitution of the bone marrow hemopoietic stem cell compartment following irradiation: evidence for a pre-CFU-S cell // Exp. Hematol. 1989. - Vol. 17. - P. 263.

163. Ploemacher R., van der Sluijs J., Voerman J., et al. An in vitro limiting-dilution assay of long-term repopulating hematopoietic stem cells in the mouse // Blood. 1989. - Vol. 74. - P. 2755.

164. Pluznik D. H., Sachs L., Resnit'zky P. The mechanism of leukemogenesis by the Rauscher leukemia virus // J. Nat. Cancer Inst. Monogr. 1966. - Vol. 22, No 1. - P. 3-14.

165. Potten C. S.Protection of the Small Intestinal Clonogenic Stem Cells from Radiation-Induced Damage by Pretreatment with Interleukin 11 also Increases Murine Survival Time // Stem Cell. 1996. - Vol. 14. - P. 452-459.

166. Preisler H. D., Epstein J. A comparison of two vethods for determining the sensitivity of human myeloid colony forming units to cytosine arabinoside // Br. J. Haematol. 1981. -Vol.47. - P. 519-527.

167. Prem Veer Reddy G., Tiarks C. Y., Pang L., et al. Cell cycle analysis and synchronization of pluripotent hematopoietic progenitor stem cells // Blood. 1997. - Vol. 90. - P. 2293-2299.

168. Quesenbery P. J. Sinergistic hematopoietic growth factors // Intern. J. Cell Cloning. 1986. - Vol. 4. - P. 3-15.

169. Quesenbery P., Alberico T., Sing L. Studies on the regulation of hemopoiesis // Exp. Hematol. 1985. - Vol. 13. - P. 43-48.

170. Ramshaw H. S., Rao S. S., Crittenden R. B., et al. Engraft-ment of bone marrow cells into normal unprepared hosts: effects of 5-fluorouracil and cell cycle status // Blood. 1995. -Vol. 86. - P. 924-929.

171. Rich, Standardization of the CFU-GM Assay Using Hemato-poetic Growth Factors // J. Hematotherapy. 1997. - Vol. 6. -P. 191-192.

172. Rigden J. P., Cornetta K., Srour E. F., et al. Minimizing graft rejection in allogeneic T cell depleted bone marrow transplantation // Bone Marrow Transplant. 1996. - Vol. 18. - P. 913-919.

173. Ross E. A. M., Anderson N., Micklem H. S. Serial depletion and regeneration of the murine hematopoietic system // J. Exp. Med. 1982. - No 155. - P. 432-444.

174. Sachs L. The molecular control of blood cell development // Science. 1987. - Vol. 238. - P. 1374.

175. Santucci M. A., Lemoli R. M., Tura S. Peripheral blood mobilization of hematopoietic stem cells: cytokine-mediatedregulation of adhesive within the hematopoietic microenvironment // Acta Haematol. 1997. - Vol. 97. - P. 90-96.

176. Schneider J. G., Grown J. P., Wasserheit C., et al. Factors affecting the mobilization of primitive and committed hematopoietic progenitors into the peripheral blood of cancer patients // Bone Marrow Transplant. 1994. - Vol. 14. - P. 877-884.

177. Schofield K. P., Rushton G., Humphries M. J., et al. Influence of interleukin-3 and other growth factors on alpha-4-betal integrin-mediated adhesion and migration of human hematopoietic progenitors cells // Blood. 1997. - Vol. 90. - P. 18581866.

178. Schofield R. The relationship between the spleen colony-forming cells and the haemopoietic stem cell. A Hypothesis // Blood. 1978. - Vol. 4. - P. 7.

179. Shapiro F., Yao N.-J., Raptis G., et al. Optimization of conditions for ex vivo expansion of CD34+ cells from patients with stage IV breast cancer // Blood. 1994. - VOL 84. - P. 35673574.

180. Sheridan W. P., Begley C. G., Juttner C. A., et al. Effect of periopheral blood progenitor cells mobilized by filgrastim (G-CSF) on platelet recovery after high dose chemotherapy // Lancet. 1992. - Vol. 339. - P. 640-642.

181. Shibagaki T., Inoue T., Kubota N., et al. Fraction of pluri-potent hemopoietic stem cells in DNA synthesis varies with generation age // Inter. Society for Exp. Hematol. 1986. -Vol. 14. - P. 794-797.

182. Shpall E. J., Cagnoni P. J., Bearman S. I., et al. Peripheral blood stem cells for autografting // J/ Anat. 1998. - Vol. 193. p. 443.447.

183. Shpall E. J., LeMaistre C. F., Holland K., et al. A prospective randomized trial of buffy coat versus CD34-selected autologous bone marrow support in high-risk breasts receiving high-dose chemptherapy // Blood. 1997. - Vol. 90. - P. 4313.

184. Siminovitch L., McCulloch E. A., Till J. E. The distribution of colony-forming cells among spleen colonies // J. Cell. Comp. Physiol. 1963. - Vol. 62. - P. 327.

185. Spangrude G. J., Brooks D. M., Tumas D. B. Long-term repopulation of irradiated mice with limiting numbers of purified hematopoietic stem cells: In vivo expansion of stem cell phe-notype but not function // Blood. 1995. - Vol. 85. - P. 10061016.

186. Spangrude G. J., Heimfeld S., Weissman I. L. Purification and characterization of mouse hematopoietic stem cells // Science. 1988. - Vol. 241. - P. 58-62.

187. Srour E. F., Brandt J. E., Briddell R. A., et al. Long-term generation and expansion of human primitive hematopoieticprogenitor cells in vitro // Blood. 1993. - Vol. 81. - P. 661669.

188. Sutherland H., Eaves C., Lansdorp P., et al. Differential regulation of primitive human hematopoietic cells in long-term cultures maintained on genetically engineered murine stromal cells // Blood. 1991. - No 78. - P. 666.

189. Sutherland H. J., Eaves C. J., Lansdorp P. M., et al. Kinetics of committed and primitive blood progenitor mobilization after chemotherapy and growth factor treatment and their use in autotransplats // Blood. 1994. - Vol. 83. - P. 3808-3814.

190. Szilvassy S.J., Bass M. J., Van Zant G., et al. Organ-selective homing defines engraftment kinetics of murine hematopoietic stem cells and is compromised by ex vivo expansion // Blood. 1999. - Vol. 93. - P. 155 7-1566.

191. Szilvassy S., Lansdorp P., Humphrier R., et al. Isolation in a single step of a highly enriched murine hematopoietic stem cell population with competitive long-term repopulating ability // Blood. No 74. - P. 930.

192. Tanaka R., Katayama N., Ohishi K., et al. Accelerated Cell-Cycling of Hematopoietic Progenitor Cells by Growth Factors // Blood. 1995. - Vol. 86, No 1 (July). - P. 73-79.

193. Tejero C., Testa N. G., Hendry J. H. Decline in cycling of granulocyte-macrophage colony-forming cells with increasing age in mice // Exp. Hematol. 1989. - Vol. 17. - P. 66-67.

194. Terstappen L. W. M. M., Huang S., Safford D. M., et al. Sequential generations of hematopoietic colonies derived fromsingle nonlineage committed CD34+CD38 progenitor cells // Blood. Vol. 77. - P. 1218-1227.

195. Testa N. G., Hendry J. H., Molineux G. Long term bone marrow damage in experimental systhems and in patients after radiation or chemotherapy // Anticancer. Res. 1990. - No 5. -P. 101-110.

196. Till J. E., McCulloch E. A. A direct measurement of the radiation sensitivity of normal mouse bone marrow cells // Rad. Res. 1961. - No 15. - P. 213-222.

197. Traycoff C. M., Kosak S. T., Grigsby S, et al. Evaluation of ex vivo expansion potential of cord blood and bone marrow hematopoietic progenitor cells using cell tracking and limiting dilution analysis // Blood. 1995. - Vol. 85. - P. 2059-2068.

198. Traycoff C. M., Orazi A., Ladd A. C., et al. Proliferation-induced decline of primitive hematopoietic progenitor cell activity is coupled with an increase in apoptosis to ex vivo expanded CD34+ cells // Exp. Hematol. 1998. - Vol. 26. - P. 53-62.

199. Uchida N., Aguila H. L., Fleming W. H., et al. Rapid and sustained hematopoietic recovery in lethally irradiated mice transplanted with purified Thy-1. llo Lin-Sca-1+ hematopoietic stem cells // Blood. 1994. - Vol. 83. - P. 3758-3779.

200. Van der Loo J. C. M., Ploemacher R. E. Marrow- and spleenseeding efficiencies of all murine hematopoietic stem cell subsets are decreased by preincubation with hematopoietic growth factors // Blood. 1995. - Vol. 85. - P. 2598-2606.

201. Van Zant G. Studies of hematopoietic stem cells spared by 5-fluorouracil // J. Exp. Med. 1984. - Vol. 159. - P. 679.

202. Van Zant G., Scott-Micus K., Thompson B. P., et al. Stem cell quiescence/activation is reversible by serial transplantation and is independent of stromal cell genotype in mouse aggregation chimeras // Exp. Hematol. 1992. - Vol. 20. - P. 470-475.

203. Verfaille C. M. Direct contact between human primitive hematopoietic progenitors and bone marrow stroma is not required for long-term in vitro hematopoiesis // Blood. 1992. -Vol. 79. - P. 2821-2826.

204. Verfaille C. M. Regulation of human haematopoiesis by the bone marrow environment // Exp. Hematol. (Copenhagen). -1994. Vol. 22. - P. 714 (abstr.).

205. Visser J., Bauman J., Mulder A., et al. Isolation of murine pluripotent henatopoietic stem cells // J. Exp. Med. 1984. -Vol. 50. - P. 1576.

206. Visser J., Van Bekkum D. W. Purification of pluripotent hemopoietic stem cells: past and present // Leukemia Research. -1990. Vol. 14, No 5. - P. 481-489.

207. Vormoor J., Lapidot T., Pflumio F., et al. Immature human cord blood progenitors and proliferate to high levels in severe combined immunodeficient mice // Blood. 1994. - Vol. 83. -P. 2489.

208. Vose J. M., Anderson J. R., Kessinger A., et al. High-dose chemotherapy and autologous hematopoietic stem cell transplantation for aggressive non-Hodgkin's lymphoma // J. Clin. Oncol. 1993. - Vol. 11. - P. 1846.

209. Wagner J. E., Keman N. A., Steinbuch M., et al. Allogeneic sibling umbilical-cord-blood transplantation in children with malignant and non-malignant disease // Lancet. 1995. - Vol. 346. - P. 214.

210. Williams M. E., Quesenberry P. J. Hematopoietic growth factors // Hematol. Pathol. 1992. - Vol. 6. - P. 105.

211. Williams S. F., Lee W. J., Bender J. G., et al. Selection and expansion of peripheral blood CD34~ cells in autologous stem cell transplantation for breast cancer // Blood. 1996. - Vol. 87. - P. 1687-1691.

212. Wolpe D. D., Davatelis S. G., Sherry B., et al. Macrophages secrete a novel heparin-binding protein with inflammatory and neutrophil chemokinetic properties // J. Exp. Med. 1988. -Vol. 167. - P. 570-581.

213. Wright E. G., Ali A. M., Riches A. C., et al. Stimulation of haemopoietic stem cell proliferation: Characteristics of the stimulator producing cells // Leuk. Res. 1982. - No 6. - P. 531-539.

214. Wright E. G., Garland J. M., Lord B. I. Specific inhibition of haemopoietic stem cell proliferation: Characteristics of the inhibitor producing cells // Leuk. Res. 1980. - No 4. - P. 537545.

215. Wright E. G., Lorimore S. A., Lord B. I. Effect of haemopoietic stem cell proliferation regulators on early and late spleen colony-forming cells // Cell Tissue Kinet. 1985. - Vol. 18. - P. 193-199.

216. Wu A. M. A method for measuring the generation time and length of DHA syntesizing phase of clonogenic cells in a heterogenous population // Cell Tissue Kinet. 1981. - Vol. 14. - P. 39-52.