Роль гипоксии и ишемии мозга в метаболизме амилоидного пептида и патогенезе болезни Альцгеймера тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, доктор биологических наук Наливаева, Наталия Николаевна

• Наливаева, Наталия Николаевна
• доктор биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации доктор биологических наук Наливаева, Наталия Николаевна

Условные обозначения и сокращения.

Введение.

Цели и задачи исследования.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Общие представления о болезни Альцгеймера.

1.2. Предшественник амилоидного пептида, его свойства и. функции.

1.3. Протеолитический процессинг предшественника. амилоидного пептида.

1.4. Свойства амилоидного пептида.

1.5. Выведение А(3 из организма и мозга.

1.6. Амилоид-деградирующие ферменты.

1.6.1. Неприлизин.

1.6.2. Эндотелин-конвертирующий фермент.

1.6.3. Инсулин-деградирующий ф ермент.

1.6.4. Плазмин.

1.6.5. Другие агенты.

1.7. Динамичность уровня содержания А(3.

1.8. Факторы, влияющие на баланс А(3.

1.8.1. Возраст.

1.8.2. Гипоксия и ишемия мозга.

1.8.3. Пренатальная гипоксия.

1.9. Современные подходы к лечению болезни Альцгеймера.

1.10. Обоснование целей и задач данного исследования.

Глава 2. Экспериментальные модели и методы исследования.

2.1. Материалы.

2.2. Модели гипоксии.

2.2.1. Модель пренатальной нормобарической гипоксии.

2.2.2. Модели острой гипоксии взрослых животных.

2.2.2.1. Модель нормобарической гипоксии.

2.2.2.2. Модель гипобарической гипоксии.

2.2.3. Модель гипоксии культивируемых нервных клеток.

2.3. Модель экспериментальной ишемии мозга крыс.

2.4. Метод культивирования нервных клеток.

2.4.1. Культивирование клеток нейробластомы человека.

2.4.2. Получение и культивирование первичных нейрональных. клеток из мозга новорожденных крыс.

2.4.3. Оценка выживаемости клеток в культуре с помощью. окрашивания трипановым голубым.

2.5. Выделение фракций растворимых и мембраносвязанных белков методом дифференциального центрифугирования.

2.6. Электрофорез в полиакриламидном геле.

2.7. Исследование уровня экспрессии белков с помощью метода. иммуноблотинга.

2.8. Методы анализа экспрессии белков с использованием. иммуноцитохимии и флуоресцентной конфокальной микроскопии.

2.9. Исследование уровня экспрессии белков на уровне мРНК помощью методов полимеразной цепной реакции.

2.9.1. Выделение РНК и определение содержания нуклеиновых. кислот.

2.9.2. Электрофорез в агарозном геле.

2.9.3. Проведение одноэтапной полимеразной цепной реакции. с помощью обратной транскриптазы.

2.9.4. Количественная полимеразная цепная реакция.

2.10. Анализ активности а-секретазы с использованием. клеток нейробластомы человека.

2.11. Флуоресцентный метод определения активности неприлизина.

2.12. Метод определения активности ацетилхолинэстеразы.

2.13. Методы определения содержания белка.

2.14. Анализ влияния кортикальных инъекций ингибитора. а-секретазы батимастата на формирование памяти у крыс.

2.15. Статистические методы обработки полученных данных.

Глава 3. Результаты исследований и их обсуждение.

3.1. Возрастные изменения экспрессии АРР и продукции его. растворимых фрагментов в норме и после пренатальной гипоксии.

3.2. Возрастная динамика экспрессии амилоид-деградирующего. фермента НЕП и ЕСЕ-1 в норме и после пренатальной гипоксии.

3.3. Влияние острой нормобарической гипоксии у взрослых. животных на экспрессию АРР и активность ферментов,. участвующих в его метаболизме.

3.4. Влияние острой гипобарической гипоксии на активность.

НЕП в коре и гиппокампе крыс.

3.5. Влияние ишемии и реперфузии на экспрессию ферментов,. участвующих в метаболизме АРР.

3.6. Влияние ишемии и реперфузии на экспрессию амилоид-. деградирующих ферментов НЕП и ЕСЕ-1 в коре мозга крыс.

3.7. Влияние специфического ингибитора а-секретазы на. формирование памяти у крыс.

3.8. Анализ участия а-секретазы предшественника амилоидного. пептида в секреции растворимой формы ацетилхолинэстеразы.

3.9. Влияние гипоксии и окислительного стресса на активность. и экспрессию амилоид-деградирующих ферментов в клетках. нейробластомы человека.

3.10. Влияние гипоксии на активность и экспрессию НЕП в. первичных культурах нейрональных клеток мозга крыс.

3.11. Поиск путей регуляции активности амилоид-деградирующих. ферментов.

Глава 4. Общая оценка результатов исследования.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль гипоксии и ишемии мозга в метаболизме амилоидного пептида и патогенезе болезни Альцгеймера»

Болезнь Альцгеймера является одним из наиболее распространенных нейродегенеративных заболеваний нервной системы, сопровождающимся тяжелыми нарушениями деятельности мозга и встречающимся, в основном, у людей пожилого возраста. В связи с увеличением средней продолжительности жизни число людей, страдающих старческой формой данного заболевания, возрастает каждый год. По данным Международной организации здравоохранения сейчас в мире насчитывается около 24 миллионов людей, страдающих этим заболеванием, а к 2020 году их число составит 42 миллиона. Только в Европе к 2010 году затраты на лечение больных, страдающих этим заболеванием, будут составлять более 500 миллионов евро в год. Кроме того, существуют генетически обусловленные формы болезни Альцгеймера, встречающиеся в более молодом возрасте, и требующие специальных подходов диагностики и лечения. Несмотря на то, что в мировой литературе накоплен значительный экспериментальный материал по изучению морфологических, физиологических и биохимических основ болезни Альцгеймера, в настоящее время все еще нет ясной концепции патогенеза этого заболевания и адекватных подходов к его лечению. Одним из факторов, приводящим к гибели нервных клеток и когнитивным нарушениям, сопровождающим болезнь Альцгеймера, является патологическое накопление в ткани мозга агрегатов [3-амилоидного пептида, являющегося основным компонентом так называемых сенильных бляшек. Последние являются одним из наиболее характерных морфологических проявлений болезни Альцгеймера. Амилоидный пептид (А(3) образуется в результате протеолиза более крупных молекул белка, называемого предшественником амилоидного пептида или (ЗАРР ([3-amyloid precursor protein) под действием ряда протеиназ. Амилоидный пептид обладает высоко выраженными фибрилогенными свойствами и его олигомеры являются токсичными для нервных клеток, вызывая дегенерацию и гибель нейронов, и нарушение, в частности, холинергической синаптической передачи.

До недавнего времени считалось, что накопление амилоидных фибрилл в ткани мозга является необратимым, однако становится все более очевидным, что амилоидный метаболизм является динамическим процессом, зависящим как от разнообразных внутренних факторов (генетических, клеточных, васкулярных), так и факторов окружающей среды (например, гипоксия и стресс). Перечисленные факторы могут влиять как на формирование и накопление амилоидного пептида, так и на его деградацию различными амилоид-деградирующими ферментами и выведение его из мозга по периваскулярным путям. Поскольку частота проявлений болезни Альцгеймера в пожилом возрасте существенно повышается в связи с нарушением снабжения мозга кислородом при ишемии и инсультах, представляет большой интерес систематическое исследование влияния гипоксии и ишемии мозга на процессы образования |3-амилоидного пептида, а также на активность и экспрессию в ткани мозга как амилоид-образующих, так и амилоид-деградирующих ферментов. На эту роль в последние годы претендует все большее число хорошо известных ферментов. Такое исследование представляет несомненную практическую ценность, поскольку позволяет не только ближе подойти к пониманию молекулярных основ патогенеза болезни Альцгеймера, но также открывает новые стратегические пути лечения и даже профилактики данного заболевания.

Цели и задачи исследования

В ходе данного многолетнего исследования планировалось систематическое изучение влияния острой и хронической гипоксии (как нормо-, так и гипобарической), а также ишемии мозга на экспрессию ряда ферментов, принимающих участие в катаболизме предшественника амилоидного пептида РАРР, в частности а- и (3-секретаз, а также ферментов, участвующих в расщеплении Ар, а именно неприлизина (НЕП) и эндотелин-конвертирующего фермента (ЕСЕ-1). Работа проводилась как на уровне целого организма с использованием зооморфных моделей (модель пре- и постнатальной гипоксии у крыс, модель глобальной ишемии и реперфузии мозга крыс), так и на клеточных культурах с использованием клеток нейробластомы человека, а также первичных нейрональных культур мозга крыс. В ходе данного исследования также проводилось изучение свойств перечисленных выше ферментов и регуляции их экспрессии и активности различными биологически активными веществами, с целью создания новых концепций лечения и профилактики болезни Альцгеймера. К числу таких соединений относились агонисты и антагонисты холинергической и опиоидной систем и нейропептиды. В результате проведения данного инновационного исследования планировалось создание новой концепции о влиянии гипоксии и ишемии на регуляцию амилоидного метаболизма и развитие болезни Альцгеймера, а также создание новых путей профилактики и коррекции нейродегенеративных нарушений в мозге.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Наливаева, Наталия Николаевна

ВЫВОДЫ

1. Содержание предшественника амилоидного пептида (АРР) в коре, стриатуме, гиппокампе и амигдале мозга крыс возрастает в течение первого месяца после рождения и снижается к старости. В первый месяц после рождения также наблюдается самый высокий уровень продукции растворимых форм АРР, образующихся при участии а-секретазы и обладающих нейритогенными и нейропротекторными свойствами.

2. Действие гипоксии в период эмбриогенеза приводит к изменению уровня экспрессии АРР в исследованных структурах мозга крыс и снижению секреции его растворимых фрагментов в коре и стриатуме в ходе первого месяца постнатального онтогенеза, что коррелирует с наблюдаемым в этот период жизни дефицитом развития сенсо-моторных реакций у гипоксических животных.

3. Наряду с протеолитическим расщеплением АРР, а-секретаза принимает участие в секреции растворимой формы АХЭ, обладающей нейритогенными свойствами. Секреция АХЭ снижается при действии гипоксии и в присутствии ингибитора а-секретазы батимастата. Наблюдаемые нами изменения в поведении крыс при внутрикортикальных инъекциях батимастата на разных этапах онтогенеза свидетельствует о важной роли а-секретазы в процессах формирования памяти.

4. Динамика экспрессии амилоид-деградирующего фермента неприлизина (НЕП) в коре и стриатуме головного мозга стареющих крыс и мышей свидетельствует о развитии эндогенного возрастного дефицита этой металлопептидазы в коре, что коррелирует с образованием депозитов амилоидного пептида при болезни Альцгеймера в этой структуре мозга. Пренатальная гипоксия приводит к существенному снижению уровня экспрессии НЕП и эндотелин-конвертирующего фермента (ЕСЕ-1) как в коре, так и в стриатуме мозга крыс в ходе постнатального онтогенеза, а гипоксическое прекондиционирование нормализует уровень их экспрессии.

5. Острая гипоксия и ишемия мозга взрослых крыс приводят к повышению уровня экспрессии АРР в коре и гиппокампе и его расщеплению с образованием высоких концентраций sAPP(3. В этих условиях также наблюдается снижение экспрессии и активности амилоид-деградирующих ферментов НЕП и ЕСЕ-1. Как гипоксия, так и ишемия мозга в целом приводят к изменению баланса ферментов амилоидного метаболизма в сторону накопления амилоидного пептида, что объясняет увеличение риска развития болезни Альцгеймера при ишемии и инсультах.

6. Нейропептид соматостатин, агонист опиоидных рецепторов ДАГО и антиоксидант эпигаллокатехин-3-галлат способны повышать уровень экспрессии НЕП и ЕСЕ-1 в клетках нейробластомы человека NB7. Направленное увеличение экспрессии и повышение активности этих ферментов предлагается как один из перспективных подходов к профилактике и лечению болезни Альцгеймера.

7. Полученные данные позволяют сформулировать концепцию о динамичности метаболизма амилоидного пептида в ткани мозга в норме и при патологии, о его важной функциональной роли в развитии нервной системы и о возможности его регуляции с помощью различных физиологических и фармакологических агентов (гипоксическое прекондиционирование, биологически активные пептиды и антиоксиданты) с целью предотвращения накопления патологически высоких концентраций амилоидного пептида и нейродегенерации.

СЛОВА БЛАГОДАРНОСТИ

В первую очередь слова глубокой благодарности адресуются моим коллегам И.А. Журавину, С.А. Плесневой, Н.М. Дубровской, H.JI. Тумановой, Б.И. Клементьеву, Е.Г. Кочкиной, С.М. Лавреновой, Л. Фиск, Н. Маковой, Д. Доброте, Е. Бабусиковой, кто принимал участие в выполнении определенных этапов данной работы и критическом анализе полученных результатов, а также профессору Тони Тернеру за неоценимую всестороннюю поддержку и предоставленную возможность работы в его лаборатории.

Особая благодарность выражается моему научному консультанту и руководителю лаборатории д.б.н. Н.Ф. Авровой за знания и опыт, приобретенные за годы работы под ее руководством, а также всем сотрудникам лаборатории нейрохимии Института им. И.М. Сеченова за создание дружеской и творческой атмосферы. Также я не могу не вспомнить моих научных руководителей Ю.П. Глушанкова, Е.П. Харченко и, конечно же, Е.М.Крепса, оказавших на разных этапах большое влияние на мое научное формирование.

Данная работа была бы невыполнима без финансовой поддержки, которую я и коллеги получали за годы работы от различных фондов, включая Российский Фонд Фундаментальных Исследований, Королевское научное общество Великобритании (The Royal Society), ИНТАС и Фонд правительства Словацкой Республики.

И кончено же, самые искренние слова благодарности я адресую моим родителям - Николаю Павловичу и Вере Михайловне Лысенко, которые привили мне такие черты характера, как трудолюбие, терпение и уверенность в себе. Без их любви и веры данный труд и вся моя научная карьера были бы невозможны. Также огромное спасибо моей дочери, зятю и внучке - Екатерине, Владимиру и Марине Кочкиным, за любовь, моральную поддержку и чувство юмора.

Заключение

Проведенное исследование существенно дополняет и расширяет имеющиеся в литературе данные о метаболизме предшественника амилоидного пептида и свойствах ферментов, принимающих участие в секреции его растворимых фрагментов, а также в катаболизме амилоидного пептида Ар. Полученные новые данные об экспрессии АРР и содержании его растворимых форм в ходе онтогенетического развития мозга млекопитающих (крыс) в норме и при патологии (гипоксия и ишемия) свидетельствуют об их важной роли в формировании и функционировании нервной системы. Сопоставление данных, полученных на зооморфных моделях, с результатами исследований, проводимых с использованием культур нейрональных клеток человека при гипоксии и окислительном стрессе, позволяет глубже понять механизмы процессов, протекающих в нервной ткани и оценить уровень и характер изменения экспрессии и активности как ферментов, участвующих в катаболизме АРР, так и способных деградировать амилоидный пептид Ар. В результате проведенного исследования становится очевидным, что амилоидный метаболизм в нервных клетках является динамичным процессом и зависит от условий окружающей среды, в частности, от снабжения клеток кислородом. Это позволяет оценить молекулярные основы повреждающего действия гипоксии и ишемии и их роль в патогенезе нейродегенеративных заболеваний и развития болезни Альцгеймера, а также предложить пути их коррекции путем повышения активности ферментов, как расщепляющих АРР по неамилоидогенному пути, так и деградирующих Ар, с помощью фармакологических агентов. Полученные данные свидетельствуют, что регуляция уровня экспрессии НЕП и ЕСЕ-1 находится под строгим генетическим контролем, изменяющимся с возрастом, и для поиска путей повышения экспрессии НЕП и ЕСЕ-1 необходимы дальнейшие исследования механизмов регуляции экспрессии генов этих ферментов. Как было показано совсем недавно, одними из факторов, контролирующими экспрессию НЕП могут быть компоненты ферментативного комплекса, приводящего к продукции А(3, а именно пресенилины (Pardossi-Piquard et al., 2005). С этой точки зрения представляет интерес не только углубленное изучение данного феномена, но также анализ механизмов, приводящих к репрессии гена НЕП, наблюдаемое с возрастом. Развитие исследований именно в этом направлении открывает новый этап научных поисков автора.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Наливаева, Наталия Николаевна, 2006 год

1. Буреш, Я, Бурешова, О, Хьюстон, Д.П. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения. М.: Высшая школа, 1991. 399 с.

2. Дубровкая, Н.М, Потапов, Д.О, Туманова, Н.Л. Влияние пренатальной гипоксии на развитие крыс в постнатальном онтогенезе // Вестн. Мол. Уч. Серия: Науки о жизни. 2002. Т. 4. С. 9-15.

3. Журавин, И.А, Дубровская, Н.М, Туманова, Н.Л. Постнатальное физиологическое развитие у крыс после острой пренатальной гипоксии // Росс. Физиол. Журн. им. И.М. Сеченова. 2003. Т.89. С. 522-532.

4. Журавин, И.А, Толкунов, Б.Ф, Добрылко, А.К. Сравнительный анализ роли второй и первой соматосенсорных областей коры в формировании соматических реакций ретикулярной формации продолговатого мозга крыс /7 Нейрофизиология. 1983. Т. 15, С. 42-49.

5. Журавин, И.А, Дубровская, Н.М, Кочкина, Е.Г, Наливаева, Н.Н, Плеснева, С.А. Роль условий эмбрионального развития в формировании механизмов обучения в онтогенезе млекопитающих // Росс. Физиол. Журн. им. И.М.Сеченова. 2004. Т. 90. С. 173-174.

6. Журавин, И.А, Туманова, Н.Л, Потапов, Д.О. Структурные изменения в сенсомоторной коре мозга в раннем постнатальном онтогенезе крыс, перенесших пренатальную гипоксию // Журн. Эвол. Биохим. Физиол. 2001. Т.37. С. 518-520.

7. Журавин, И.А., Туманова, Н.Л., Дубровская, Н.М., Федосеева, К.Н. Нарушение формирования старой и новой коры при изменении условий эмбрионального развития//Ж. Эвол. Биохим. Физиол. 2003. Т.39. С. 609-618.

8. Каданцева, А.Г., Журавин, И.А., Толкунов, Б.Ф. Перекрытие в стриатуме областей окончания кортикофугальных волокон из соматосенсорной и моторной зон коры мозга крысы. // Журн. Эвол. Биох. Физиол. 1992. Т.28. С. 2430.

9. Лавренова, С.М., Наливаева, Н.Н., Журавин, И.А. Активность ацетилхолинестеразы сенсомоторной коры в раннем онтогенезе крыс, перенесших пренатальную гипоксию // Журн. Эвол. Биохим. Физиол. 2003. Т. 39. С. 154-159.

10. Наливаева, Н.Н., Клементьев, Б.И., Плеснева, С.А., Чекулаева, У.Б., Журавин, И.А. Влияние гипоксии на состояние клеточных мембран правого и левого полушария мозга эмбрионов крыс // Журн. Эвол. Биохим. Физиол. 1998. Т. 34. С. 485-491.

11. Наливаева, Н.Н., Плеснева, С.А., Чекулаева, У.Б., Васильева, Ю.В., Варлинская, Е.И., Клементьев, Б.И. Биохимические характеристики сенсомоторной коры крыс-правшей, левшей и амбидекстров // Журн. Эвол. Биохим. Физиол. 1996. Т. 32. С. 75-81.

12. Оленев, С.Н. Развивающийся мозг. Л.: Наука. 1978. 220 с.

13. Самойлов М.О. Реакция нейронов на гипоксию. Л.: Наука. 1985. 190 с.

14. Степаничев, М.Ю., Моисеева, Ю.В., Гуляева, Н.В. «Инъекционные» модели болезни Альцгеймера: окислительный стресс в механизме токсичности AF64A и (3-амилоидного пептида у грызунов // Нейрохимия. 2002. Т. 19. С. 165175.

15. Allinson, Т.М., Parkin, Е.Т., Turner, A.J., Hooper, N.M. ADAMs family members as amyloid precursor protein a-secretases // J. Neurosci. Res. 2003. Vol. 74. P. 342-352.

16. Alvarez, J., Moreno, R.D., Llanos, O., Inestrosa, N.C., Brandan, E., Colby, Т., Esch, F.S. Axonal sprouting induced in the sciatic nerve by the amyloid precursor protein (APP) and other antiproteases // Neurosci. Lett. 1992. Vol. 144. P. 130-134.

17. Alzheimer, A. Z. Uber eine eigenartige Erkrankung der Hirnrinde // Allgem. Z. Psych. 1907. Vol. 64. P. 146-148.

18. Alzheimer, A. Uber eigenartige Krankheitsfalle des spateren Alters // Z. Gesamte Neurol. Psych. 1911. Vol. 4. P. 356-385.

19. Appleyard, M.E. Non-cholinergic functions of acetylcholinesterase // Biochem.

20. Soc. T. 1994. Vol. 22. P. 749-755.

21. Appleyard, M.E. Secreted acetylcholinesterase: non-classical aspects of a classical enzyme // Trends Neurosci. 1992. Vol. 15. P. 485-490.

22. Arendt, Т., Bruckner, M.K., Lange, M., Bigl, V. Changes in acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase in Alzheimer's disease resemble embryonic development a study of molecular forms // Neurochem. Int. 1992. Vol. 21. P. 381-396.

23. Backstrom, J.R., Lim, G.P., Cullen, M.J., Tokes, Z.A. Matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) is synthesized in neurons of the human hippocampus and is capable of degrading the amyloid-P peptide (1-40) // J. Neurosci. 1996. Vol. 16. P. 7910-7919.

24. Baiden-Amissah, K., Joashi, U., Blumberg, R., Mehmet, H., Edwards, A.D., Cox, P.M. Expression of amyloid precursor protein (|3-APP) in the neonatal brain following hypoxic ischaemic injury // Neuropathol. Appl. Neurobiol. 1998. Vol. 24. P. 346-352.

25. Barker, P.E., Shipp, M.A., D'Adamio, L., Masteller, E.L., Reinherz, E.L. The common acute lymphoblastic leukemia antigen gene maps to chromosomal region 3 (q21-q27) //J. Immunol. 1989. Vol. 142. P. 283-287.

26. Barnes, K., Turner, A.J. Endothelin converting enzyme is located on (3-actin filaments in smooth muscle cells // Cardiovasc. Res. 1999. Vol. 42. P. 814-822.

27. Barnes, К., Walkden, В.J., Wilkinson, T.C., Turner, A.J. Expression of endothelin-converting enzyme in both neuroblastoma and glial cell lines and its localization in rat hippocampus. J. Neurochem. 1997. Vol. 68. P. 570-577.

28. Bellingham, S. A., Lahiri, D. K., Maloney, В., La Fontaine, S., Multhaup, G., Camakaris, J. Copper depletion down-regulates expression of Alzheimer's disease Amyloid-p precursor protein gene // J. Biol. Chem. 2004. Vol. 279. P. 20378-20386.

29. Bennett, B.D., Babu-Khan, S., Loeloff, R., Louis, J.C., Curran, E., Citron, M., Vassar, R. Expression analysis of BACE2 in brain and peripheral tissues // J. Biol. Chem. 2000. Vol. 275. P. 20647-20651.

30. Bigl, M., Apelt, J., Eschrich, K., Schliebs, R. Cortical glucose metabolism is altered in aged transgenic Tg2576 mice that demonstrate Alzheimer plaque pathology III Neural. Transm. 2003. Vol. 110. P. 77-94.

31. Bour A., Little S., Dodart J.C., Kelche C., Mathis C. A secreted form of the p-amyloid precursor protein (sAPP695) improves spatial recognition memory in OF1 mice // Neurobiol. Learn. Mem. 2004. Vol. 81. P. 27-38.

32. Boussaha, M., Hannequin, D., Verpillat, P., Brice, A., Frebourg, Т., Campion, D. Polymorphisms of insulin degrading enzyme gene are not associated with Alzheimer's disease //Neurosci. Lett. 2002. Vol. 329. P. 121-123.

33. Bronfman, F.C., Fernandez, H.L., Inestrosa, N.C. Amyloid precursor protein fragment and acetylcholinesterase increase with cell confluence and differentiation in a neuronal cell line // Exp. Cell Res. 1996. Vol. 229. P. 93-99.

34. Bush, A.I. and Tanzi, RE. The galvanization of B-amyloid in Alzheimer's disease //Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2002. Vol. 99. P. 7317-7319.

35. Butterfield, D.A., Drake, J., Pocernich, C., Castegna, A. Evidence of oxidative damage in Alzheimer's disease brain: central role for amyloid (3-peptide // Trends Mol. Med. 2002. Vol. 7. P. 548-554.

36. Caccamo, A., Oddo, S., Sugarman, M.C., Akbari, Y., LaFerla, F.M. Age- and region-dependent alterations in A(3-degrading enzymes: implications for Ap-induced disorders // Neurobiol. Aging. 2005. Vol. 26. P. 645-654.

37. Caille, I., Allinquant, В., Dupont, E., Bouillot, C., Langer, A., Muller, U., Prochiantz, A. Soluble form of amyloid precursor protein regulates proliferation of progenitors in the adult subventricular zone // Development. 2004. Vol. 131. P. 21732181.

38. Carlson, K. & Ehrich, M. Human neuroblastoma cell viability and growth are affected by altered culture conditions // In Vitr. Mol. Toxicol. 2000. Vol. 13. P. 249262.

39. Carson, J.A, Turner, A.J. (3-amyloid catabolism: role for neprilysin (NEP) and other metallopeptidases? // J. Neurochem. 2002. Vol. 81. P. 1-8.

40. Connelly, J.C, Skidgel, R.A, Schulz, W.W, Johnson, A.R, Erdos, E.G. Neutral endopeptidase 24.11 in human neutrophils: Cleavage of chemotactic peptide // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1985. Vol. 82. P. 8737-8741.

41. Conti, L, Cattaneo, E. Controlling neural stem cell division within the adult subventricular zone: an APPealing job // Trends Neurosci. 2005. Vol. 28. P. 57-59.

42. Cuevas, P, Gutierrez Diaz, J.A, Dujovny, M, Diaz, F.G, Ausman, J.I. Freeze-fracture cytochemistry of cholesterol content in neuronal plasma membrane following cerebral ischaemia // Neurol. Res. 1988. Vol. 10. P. 2-6.

43. Cummings, J.L. & Back, C. The cholinergic hypothesis of neuropsychiatric symptoms in Alzheimer's disease // Am. J. Geriatr. Psychiatry. 1998. Vol. 6, Suppl. 1. P. 64-78.

44. De Strooper, В. Aph-1, Pen-2 and Nicastrin with Presenilin generate an active y-Secretase complex//Neuron. 2003. Vol. 38. P. 9-12.

45. Di Legge, S., Hachinski, V. Prospects for prevention and treatment of vascular cognitive impairment // Curr. Opin. Invest. Drugs. 2003. Vol. 4. P. 1082-1087.

46. Dolinak, D., Smith, C., Graham, D. I. Global hypoxia per se is an unusual cause of axonal injury // ActaNeuropathol. (Berl). 2000. Vol. 100. P. 553-560.

47. Dore, S., Kar, S., Rowe, W., Quirion, R. Distribution and levels of 125I.IGF-I, [125I]IGF-II and [125I]insulin receptor binding sites in the hippocampus of aged memory-unimpaired and-impaired rats//Neuroscience. 1997. Vol. 80. P. 1033-1040.

48. Duckworth, W.C., Bennett, R.G., Hamel, F.G. Insulin degradation: progress and potential//Endocr. Rev. 1998. Vol. 19. P. 608-624.

49. Eckman, E.A., Reed, D.K., Eckman, C.B. Degradation of the Alzheimer's amyloid p peptide by endothelin-converting enzyme // J. Biol. Chem. 2001. Vol. 276. P. 24540-24548.

50. Eckman, E.A., Watson, M., Marlow, L., Sambamurti, K., Eckman, C.B. Alzheimer's disease P-amyloid peptide is increased in mice deficient in endothelin-converting enzyme //J. Biol. Chem. 2003. Vol. 278. P. 2081-2084.

51. Egashira, N., Iwasaki, K., Ishibashi, M., Hatip-Al-Khatib, I., Wolozin, В., Mishima, K., Irie, K., Fujiwara, M. Hypoxia enhances P-amyloid-induced apoptosis in rat cultured hippocampal neurons // Jpn. J. Pharmacol. 2002. Vol. 90. P. 321-327.

52. Ehehalt, R., Keller, P., Haass, C., Thiele, C., Simons, K. Amyloidogenic processing of the Alzheimer p-amyloid precursor protein depends on lipid rafts // J. Cell Biol. 2003. Vol. 160. P. 113-123.

53. Ehrich, M. and Veronesi, B. Esterase comparison in neuroblastoma cells ofhuman and rodent origin// Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 1995. Vol. 22. P. 385-386.

54. Ehrich, M, Corell, L., Veronesi, B. Acetylcholinesterase and neuropathy targetesterase inhibitions in neuroblastoma cells to distinguish organophosphoruscompounds causing acute and delayed neurotoxicity // Fund. Appl. Toxicol. 1997.1. Vol. 38. P. 55-63.

55. El-Agnaf, O.M., Mahil, D.S., Patel, B.P., Austen, B.M. Oligomerization and toxicity of P-amyloid-42 implicated in Alzheimer's disease // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2000. Vol. 273. P. 1003-1007.

56. Ellman, G.L., Courtney, K.D., Andres, V., Jr., Featherstone, R.M. A new and rapid colorimetric determination of acetylcholinesterase activity // Biochem. Pharmacol. 1961. Vol. 7. P. 88-95.

57. Emoto, N., Yanagisawa, M. Endothelin-converting enzyme-2 is a membrane-bound, phosphoramidon-sensitive mettaloprotease with acidic pH optimum // J. Biol.Chem. 1995. Vol. 270. P. 15262-15268.

58. Erdos, E.G., Skidgel, R.A. Neutral endopeptidase 24.11 (enkephalinase) and related regulators of peptide hormones // FASEB J. 1989. Vol. 3. P. 145-151.

59. Ertekin-Taner, N., Graff-Radford, N., Younkin, L.H., Eckman, C., Baker, M., Adamson, J., Ronald, J., Blangero, J., Hutton, M., Younkin, S.G. Linkage of plasma

60. A(342 to a quantitative locus on chromosome 10 in late-onset Alzheimer's disease pedigrees // Science. 2000. Vol. 290. P. 2303-2304.

61. Evangelopoulos, M.E., Weis, J., Kruttgen, A. Signalling pathways leading to neuroblastoma differentiation after serum withdrawal: HDL blocks neuroblastoma differentiation by inhibition of EGFR// Oncogene. 2005. Vol. 24. P. 3309-3318.

62. Facchinetti, P., Rose, C., Schwartz, J.C., Ouimet, T. Ontogeny, regional and cellular distribution of the novel metalloprotease neprilysin 2 in the rat: a comparison with neprilysin and endothelin-converting enzyme-1. Neuroscience. Vol. 118. P. 627639.

63. Fahlman, C.S., Bickler, P.E., Sullivan, В., Gregory, G.A. Activation of the neuroprotective ERK signaling pathway by fructose-1,6-bisphosphate during hypoxia involves intracellular Ca2+ and phospholipase С // Brain Res. 2002. Vol. 958. P. 4351.

64. Farooqui A.A., Ong W.Y., Horrocks L.A. Biochemical aspects of neurodegeneration in human brain: involvement of neural membrane phospholipids and phospholipases A2 //Neurochem. Res. 2004. Vol. 29. P. 1961-1977.

65. Fifkova E., Marsala J. Stereotaxic atlases for the cat, rabbit and rat // In: Elecrophysiological methods in biological research / Eds J. Bures, M. Petran, J. Zahar. Prague: Academia. 1967. P. 653-695.

66. Fisk, L., Nalivaeva, N.N., Turner, A.J. The metallopeptidase neprilysin is shed from human neuroblastoma cells //31st Lome Protein Conference. 2006. P. 88.

67. Fuentes, M.E., Inestrosa, N.C. Amphiphilic behavior of a brain tetrameric acetylcholinesterase form lacking the plasma membrane anchoring domain // Brain Res. 1992. Vol. 580. P. 1-5.

68. Fulcher, I.S., Matsas, R, Turner, A.J., Kenny, A.J. Kidney neutral endopeptidase and the hydrolysis of enkephalin by synaptic membranes show similar sensitivity to inhibitors // Biochem. J. 1982. Vol. 203. P. 519-522.

69. Gasparini, L., Xu, H. Potential roles of insulin and IGF-1 in Alzheimer's disease // Trends Neurosci. 2003. Vol. 26. P. 404-406.

70. Ge, Y.-W. & Lahiri, D. K. Regulation of promoter activity of the APP gene by cytokines and growth factors: implications in Alzheimer's disease // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2002. Vol. 973. P. 463-467.

71. Ghiso, J., Shayo, M., Calero, M., Ng, D., Tomidokoro, Y., Gandy, S, Rostagno, A., Frangione, B. Systemic catabolism of Alzheimer's A340 and A[342 // J. Biol. Chem. 2004. Vol. 279. P. 45897-45908.

72. Golomb, J., de Leon, M.J., Kluger, A., George, A.E., Tarshish, C., Ferris, S.H. Hippocampal atrophy in normal aging. An association with recent memory impairment // Arch. Neurol. 1993. Vol. 50. P. 967-973.

73. Grasemann, H., Lu, В., Jiao, A., Boudreau, J., Gerard, N.P., De Sanctis, G.T. Targeted deletion of the neutral endopeptidase gene alters ventilatory responses to acute hypoxia in mice//J. Appl. Physiol. 1999. Vol. 87. P. 1266-1271.

74. Gregory, G.C., & Halliday, G.M. What is the dominant A3 species in human brain tissue? A review // Neurotox. Res. 2005. Vol. 7. P. 29-41.

75. Grossman, H. Does diabetes protect or provoke Alzheimer's disease? Insights into the pathobiology and future treatment of Alzheimer's disease // CNS Spectr. 2003. Vol. 8. P. 815-823.

76. Gunyuzlu, P.L., White, W.H, Davis, G.L., Hollis, G.F, Toyn, J.H. A yeast genetic assay for caspase cleavage of the amyloid-P precursor protein // Mol. Biotechnol. 2000. Vol. 15. P. 29-37.

77. Haass, C, Schlossmacher, M.G, Hung, A.Y, Vigo-Pelfrey, C, Mellon, A, Ostaszewski, B.L, Lieberburg, I, Koo, E.H, Schenk, D, Teplow, D.B. Amyloid Ppeptide is produced by cultured cells during normal metabolism // Nature. 1992. Vol, 359. P. 322-325.

78. Hardy, J. Amyloid, the presenilins and Alzheimer's disease // Trends Neurosci. 1997. Vol. 20. P. 154-159.

79. Harrison, N.K, Dawes, K.E, Kwon, O.J, Barnes, P.J, Laurent, G.J, Chung, KF. Effects of neuropeptides on human lung fibroblast proliferation and chemotaxis // Am. J. Physiol. 1995. Vol. 268. P. L278-L283.

80. Heldin, C.H, Ericsson, J. Signal transduction. RIPping tyrosine kinase receptors apart// Science. 2001. Vol. 294. P. 2111-2113.

81. Hoang, M.V, Turner, A.J. Novel activity for endothelin-converting enzyme: hydrolysis of bradykinin // Biochem. J. 1997. Vol. 327. P. 23-26.

82. Hong, C.S, Goins, W.F, Goss, J.R, Burton, E.A, Glorioso, J.C. Herpes simplex virus RNAi and neprilysin gene transfer vectors reduce accumulation of

83. Alzheimer's disease-related amyloid-(3 peptide in vivo // Gene Ther. 2006. Mar 16; Epub ahead of print.

84. Hong, L., Koelsch, G., Lin, X., Wu, S., Terzyan, S., Ghosh, A.K., Zhang, X.C. and Tang, J. Structure of the protease domain of memapsin 2 ((3-secretase) complexed with inhibitor// Science. 2000. Vol. 290. P. 150-153.

85. Hooper, N.M. Families of zinc metalloproteases // FEBS Lett. 1994. Vol. 354. P. 1-6.

86. Hooper, N.M. & Turner, A.J. The search for a-secretase and its potential as a therapeutic approach to Alzheimer s disease // Curr. Med. Chem. 2002. Vol. 9. P. 1107-1119.

87. Hooper, N.M., Karran, E.H., Turner, A.J. Membrane protein secretases // Biochem. J. 1997. Vol. 321. P. 265-279.

88. Hoshino, M., Dohmae, N., Takio, K., Kanazawa, I., Nukina, N. Identification of a novel amino-terminal fragment of amyloid precursor protein in mouse neuroblastoma Neuro2a cell//Neurosci. Lett. 2003. Vol. 353. P. 135-138.

89. Hoyer S. Glucose metabolism and insulin receptor signal transduction in Alzheimer disease // Eur. J. Pharmacol. 2004. Vol. 490. P. 115-125.

90. Hu, J., Igarashi, A., Kamata, M., Nakagawa, H. Angiotensin-converting enzyme degrades Alzheimer amyloid (3-peptide (A(3); retards A(3 aggregation, deposition, fibril formation; and inhibits cytotoxicity // J. Biol. Chem. 2001. Vol. 276. P. 47863-47868.

91. Janicke, В., Coper, H. The effect of prenatal exposure to hypoxia on the bahaviour of rats during their life span // Pharmacol. Biochem. Behav. 1994. Vol. 48. P. 863-873.

92. Jin, К., Мао, X.O., Eshoo, M.W., Nagayama, Т., Minami, M., Simon, R.P., Greenberg, D.A. Microarray analysis of hippocampal gene expression in global cerebral ischemia // Ann. Neurol. 2001. Vol. 50. P. 93-103.

93. Johnson, G.D., Stevenson, Т., Ahn, K. Hydrolysis of peptide hormones by endothelin-converting enzyme-1. A comparison with neprilysin. J. Biol. Chem. 1999. Vol. 274. P. 4053-4058.

94. Jolly-Tornetta, С. & Wolf, В.A. Protein kinase С regulation of intracellular and cell surface amyloid precursor protein (APP) cleavage in CH0695 cells // Biochemistry. 2000. Vol. 39. P. 15282-15290.

95. Kaether C. & Haass C. A lipid boundary separates APP and secretases and limits amyloid P-peptide generation // J. Cell. Biol. 2004. Vol. 167. P. 809-812.

96. Kanemitsu, H., Tomiyama, Т., Mori, H. Human neprilysin is capable of degrading amyloid (3 peptide not only in the monomeric form but also the pathological oligomeric form. Neurosci. Lett. 2003. Vol. 350. P. 113-116.

97. Kern, A., Roempp, В., Prager, K., Walter, J., Behl, C. Down-regulation of endogenous amyloid precursor protein processing due to cellular aging // J. Biol. Chem. 2005. Vol. 281. P. 2405-2413

98. Killar, L., White, J., Black,, R., Peschon, J. Adamalysins. A family of metzincins including TNF-alpha converting enzyme (TACE) // Arm. N. Y. Acad. Sci. 1999. Vol. 878. P. 442-452.

99. Kimberly, W.T, Xia, W., Rahmati, Т., Wolfe, M.S., Selkoe, D.J. The transmembrane aspartates in presenilin 1 and 2 are obligatory for y-secretase activity and amyloid р-protein generation// J. Biol. Chem. 2000. Vol. 275. P. 3173-3178.

100. Kingston, I. В., Castro, M.J.M., Anderson, S.A. In vitro stimulation of tissue-type plasminogen activator by Alzheimer amyloid р-peptide analogues // Nature Med. 1995. Vol. l.P. 138-142.

101. Khachaturian, Z.S. Diagnosis of Alzheimer's disease // Arch. Neurol. 1985. Vol. 42. P. 1097-1105.

102. Khaspekov, L.G., Lyzhin, A.A., Victorov, I.V., Dupin, A.M., Erin, A.N. Hypoxic and posthypoxic neuronal injury in hippocampal cell culture: attenuation by lipophylic antioxidant U-18 and superoxide dismutase // Int. J. Neurosci. 1995. Vol. 82. P. 33-45.

103. Koudinov, A.R. & Berezov, T.T. Alzheimer's amyloid-(3 (Af3) is an essential synaptic protein, not neurotoxic junk // Acta Neurobiol. Exp. (Wars). 2004. Vol. 64. P. 71-79.

104. Kowalska, A. Amyloid precursor protein gene mutations responsible for early-onset autosomal dominant Alzheimer's disease // Folia Neuropathol. 2003. Vol. 41. P. 35-40.

105. Kristian, T. Metabolic stages, mitochondria and calcium in hypoxic/ischemic brain damage // Cell Calcium. 2004. Vol. 36. P. 221-233.

106. Kumar, G.K., Yu, R.K., Overholt, J.L., Prabhakar, N.R. Role of substance P in neutral endopeptidase modulation of hypoxic response of the carotid body // Adv. Exp. Med. Biol. 2000a. Vol. 475. P. 705-713.

107. Kuperstein, F., Brand, A., Yavin, E. Amyloid Aj3M() preconditions non-apoptotic signals in vivo and protects fetal rat brain from intrauterine ischemic stress // J. Neurochem. 2004. Vol. 91. P. 965-974.

108. Kurochkin, I.V. & Goto, S. Alzheimer's p-amyloid peptide specifically interacts with and is degraded by insulin degrading enzyme// FEBS Lett. 1994. Vol 345. P. 33-37.

109. Madani, R., Nef, S., Vassalli, J.D. Emotions are building up in the field of extracellular proteolysis // Trends Mol. Med. 2003. Vol. 9. P. 183-185.

110. Maldonado, Т. A., Jones, R. E., Norris, D. O. Intraneuronal amyloid precursor protein (APP) and appearance of extracellular (3-amyloid peptide (A|3) in the brain of aging kokanee salmon // J. Neurobiol. 2002. Vol. 53. P. 11-20.

111. Malfroy, В., Swerts, J.P., Guyon, A., Roques, B.P., Schwartz, J.C. High-affinity enkephalin-degrading peptidase in brain is increased after morphine // Nature. 1978. Vol. 276. P. 523-526.

112. Maloney, В., Ge, Y.W., Greig, N., Lahiri, D.K. Presence of a "CAGA box" in the APP gene unique to amyloid plaque-forming species and absent in all APLP-1/2 genes: implications in Alzheimer's disease // FASEB J. 2004. Vol. 18. P. 1288-1290.

113. Mapp, P.I., Walsh, D.A., Kidd, B.L., Cruwys, S.C., Polak, J.M, Blake, D.R. Localization of the enzyme neutral endopeptidase to the human synovium // J. Reumatol. 1992. Vol. 19. P. 1838-1844.

114. Marr, R.A., Rockenstein, E., Mukherjee, A., Kindy, M.S., Hersh, L.B., Gage, F.H., Verma, I.M., Masliah, E. Neprilysin gene transfer reduces human amyloid pathology in transgenic mice // J. Neurosci. 2003. Vol. 23. P. 1992-1996.

115. Martin, В., de Maturana, R.L., Brenneman, R., Walent, Т., Mattson, M.P., Maudsley, S. Class II G protein-coupled receptors and their ligands in neuronal function and protection//Neuromolecular Med. 2005. Vol. 7. P. 3-36.

116. Martoglio, B. & Golde, Т.Е. Intramembrane-cleaving aspartic proteases and disease: presenilins, signal peptide peptidase and their homologs // Hum. Mol. Genet. 2003. Vol. 12. Suppl. 2. P. R201-R206.

117. Matsas, R., A.J. Kenny, Turner, A.J. An immunohistochemical study of endopeptidase-24.11 ("enkephalinase") in the pig nervous system // Neuroscience. 1986. Vol. 18. P. 991-1012.

118. Matsumura Y, Ikegawa R, Takaoka M, Morimoto S. Conversion of porcine big endothelin to endothelin by an extract from the porcine aortic endothelial cells // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1990. Vol. 167. P. 203-210.

119. Mattson, M.P. Cellular action of (3-amyloid precoursor protein and its soluble and fibrillogenic derivatives // Physiol. Rev. 1999. Vol. 77. P. 1081-1132.

120. Mattson, M.P., Guo, Q., Furukawa, K., Pedersen, W.A. Presenilins, the endoplasmic reticulum, and neuronal apoptosis in Alzheimer's disease // J. Neurochem. 1998. Vol. 70. P. 1-14.

121. Mattson, M.P., Duan, W., Pedersen, W.A., Culmsee, C. Neurodegenerative disorders and ischemic brain diseases // Apoptosis. 2001. Vol. 6. P. 69-81.

122. Mattson, M. Pathways towards and away from Alzheimer's disease // Nature. 2004. Vol. 430. P. 631-639.

123. McKee, A.C., Kowall, N.W., Schumacher, J.S., Beal, M.F. The neurotoxicity of amyloid (3 protein in aged primates // Amyloid. 1998. Vol. 5. P. 1-9.

124. Mehta, P.D., Pirttila, Т., Patrick, B.A., Barshatzky, M., Mehta, S.P. Amyloid (3 protein 1-40 and 1-42 levels in matched cerebrospinal fluid and plasma from patients with Alzheimer's disease //Neurosci. Letters. 2001. Vol. 304. P. 102-106.

125. Mehlhorn, G., Hollborn, M., Schliebs, R. Induction of cytokines in glial cells surrounding cortical (3-amyloid plaques in transgenic Tg2576 mice with Alzheimer's pathology // Int. J. Dev. Neurosci. 2000. Vol. 18. P. 423-431.

126. Melzig, M.F. & Janka, M. Enhancement of neutral endopeptidase activity in SK-N-SH cells by green tea extract // Phytomedicine. 2003. Vol. 10. P. 494-498.

127. Montine, T.J., Neely, M.D., Quinn, J.F., Beal, M.F., Markesbery, W.R., Roberts, L.J., Morrow, J.D. Lipid peroxidation in aging brain and Alzheimer's disease // Free Radic. Biol. Med. 2002. Vol. 33. P. 620-626.

128. Moran, M.A., Mufson, E.J., Gomezramos, P. Colocalization of cholinesterases with (3 amyloid protein in aged and Alzheimer's brains. // Acta Neuropathol. 1993. Vol. 85. P. 362 -369.

129. Mori, H., Takio, K., Ogawara, M., Selkoe, D.J. Mass spectrometry of purified amyloid (3 protein in Alzheimer's disease // J. Biol. Chem. 1992. Vol. 267. P. 1708217086.

130. Mrak, R.E. & Griffin, W.S. Glia and their cytokines in progression of neurodegeneration //Neurobiol. Aging. 2005. Vol. 26. P. 349-354.

131. Munoz, F.J. & Inestrosa, N.C. Neurotoxicity of acetylcholinesterase amyloid (3-peptide aggregates is dependent on the type of A(3 peptide and the AChE concentration present in the complexes // FEBS Lett. 1999. Vol. 450. P. 205-209.

132. Nakagami, Y., Abe, K., Nishiyama, N., Matsuki, N. Laminin degradation by plasmin regulates long-term potentiation// J. Neurosci. 2000. Vol. 20. P.2003-2010.

133. Nalivaeva N.N., Fisk L., Canet Aviles R.M., Plesneva S.A., Zhuravin I.A., Turner A.J. Effect of prenatal hypoxia on expression of amyloid precursor protein and metallopeptidases in the rat brain // Lett. Peptide Sci. 2003. Vol. 10. P. 455-462.

134. Nawrot, B. Targeting В ACE with small inhibitory nucleic acids a future for Alzheimer's disease therapy? //Acta Biochim. Pol. 2004. Vol. 51. P. 431-444.

135. Nocolls, M.R. The clinical and biological relationship between Type II diabetes mellitus and Alzheimer's disease // Curr. Alzheimer Res. 2004. Vol. 1. P. 47-54.

136. Nyakas, C., Buwalda, B. Luiten P. G. Hypoxia and brain development // Prog. Neurobiol. 1996. Vol. 49. P. 1-51.

137. Oddo, S, Caccamo, A, Kitazawa, M, Tseng, B.P, LaFerla, F.M. Amyloid deposition precedes tangle formation in a triple transgenic model of Alzheimer's disease//Neurobiol. Aging. 2003. Vol. 24. P. 1063-1070.

138. Oddo, S. & LaFerla, F.M. The role of nicotinic acetylcholine receptors in Alzheimer's disease // J. Physiol. Paris. 2006. Vol. 99. P. 172-179.

139. Oh-hashi, K, Nagai, T, Tanaka, T, Yu, H, Hirata, Y, Kiuchi, K. Determination of hypoxic effect on neprilysin activity in human neuroblastoma SH-SY5Y cells using a novel HPLC method // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2005. Vol. 334. P. 380-385.

140. Okamoto, T, Takeda, S, Murayama, Y, Ogata, E, Nishimoto, I. Ligand-dependent G protein coupling function of amyloid transmembrane precursor // J. Biol. Chem. 1995. Vol. 270. P. 4205-4208.

141. Ouimet, T, Facchinetti, P, Rose, C, Bonhomme, M.C, Gros, C. Schwartz, J.C. Neprilysin II: a putative novel metalloprotease and its isoforms in CNS and testis // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2000. Vol. 271. P. 565-570.

142. Pahlsson, P, Shakin-Eshleman, S.H, Spitalnik, S.L. N-linked glycosylation of |3-amyloid precursor protein // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1992. Vol. 189. P. 1667-1673.

143. Palmer, A.M., DeKosky, S.T. Monoamine neurons in aging and Alzheimer's disease // J. Neural. Transm. Gen. Sect. 1993. Vol. 91. P. 135-159.

144. Parvathy, S, Hussain, I, Karran, E.H, Turner, A.J, Hooper, N.M. Cleavage of Alzheimer's amyloid precursor protein by a-secretase occurs at the surface of neuronal cells // Biochemistry. 1999. Vol. 38. P. 9728-9734.

145. Perez, A, Morelli, L, Cresto, J.C, Castano, E.M. Degradation of soluble amyloid P-peptides 1-40, 1-42, and the Dutch variant 1-40Q by insulin degrading enzyme from Alzheimer disease and control brains // Neurochem. Res. 2000. Vol. 2. P. 247-255.

146. Perry, T.A, Greig, N.H. A new Alzheimer's disease interventive strategy: GLP-1. Curr. Drug. Targets. 2004. Vol. 5. P. 565-571.

147. Petty, M.A. & Wettstein, J.G. Elements of cerebral microvascular ischaemia // Brain Res. Brain Res. Rev. 2001. Vol. 36. P. 23-34.

148. Pfefferkorn, Т., Wiessner, C., Allegrini, P.R., Staufer, В., Vosko, M.R., Liebetrau, M., Bueltemeier, G., Kloss, C.U., Hamarm, G.F. Plasminogen activation in experimental permanent focal cerebral ischemia // Brain Res. 2000. Vol. 882. P. 1925.

149. Pierart, M.E., Najdovski, Т., Appelboom, Т.Е., Deschodt-Lanckman, M.M. Effect of human endopeptidase 24.11 ("enkephalinase") on IL-1-induced thymocyte proliferation activity//J. Immunol. 1988. Vol. 140. P. 3808-3811.

150. Pighetti, M., Tommaselli, G.A., D'Elia, A., Di Carlo, C., Mariano, A., Di Carlo, A., Nappi, C. Maternal serum and umbilical cord blood leptin concentrations with fetal growth restriction // Obstet. Gynecol. 2003. Vol. 102. P. 535-543.

151. Prince, J.A., Feuk, L., Gu, H.F., Johansson, В., Gatz, M., Blennow, K., Brookes, A.J. Genetic variation in a haplotype block spanning IDE influences Alzheimer disease // Hum. Mutat. 2003. Vol. 22. P. 363-371.

152. Pulsinelli, W.A., Levy, D.E., Duffy, Т.Е. Cerebral blood flow in the four-vessel occlusion rat model // Stroke. 1983. Vol. 14. P. 832-834.

153. Qi, Y., Jamindar, T.M., Dawson, G. Hypoxia alters iron homeostasis and induces ferritin synthesis in oligodendrocytes // J. Neurochem. 1995. Vol. 64. P. 2458-2464.

154. Racchi, M. & Govoni, S. The pharmacology of amyloid precursor protein processing //Exp. Gerontol. 2003. Vol 38. P. 145-157.

155. Racchi, M., Solano, D.C., Sironi, M., Govoni, S. Activity of a-secretase as the common final effector of protein kinase C-dependent and -independent modulation of amyloid precursor protein metabolism// J. Neurochem. 1999. Vol. 72. P. 2464-2470.

156. Raiha, I., Kaprio, J., Koskenvuo, M., Rajala, Т., Sourander, L. Environmental differences in twin pairs discordant for Alzheimer's disease // J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry. 1998. Vol. 65. P. 785-787.

157. Rangan, S.K., Liu, R., Brune, D., Planque, S., Paul, S., Sierks, M.R. Degradation of p-amyloid by proteolytic antibody light chains // Biochemistry. 2003. Vol. 42. P. 14328-14334.

158. Robert, S., Maillet, M., Morel, E., Launay, J.M., Fischmeister, R, Mercken, L., Lezoualc'h, F. Regulation of the amyloid precursor protein ectodomain shedding by the 5-HT4 receptor and Epac // FEBS Lett. 2005. Vol. 579. P. 1136-1142.

159. Roques, B.P., Noble, F., Dauge, V., Fournie-Zaluski, M.C., Beaumont, A. Neutral endopeptidase 24.11: Structure, inhibition, and experimantal and clinical pharmacology// Pharmacol. Rev. 1993. Vol. 45. P. 87-146.

160. Ryder, J., Su, Y., Liu, F., Li, В., Zhou, Y., Ni, B. Divergent roles of GSK3 and CDK5 in APP processing // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2003. Vol. 312. P. 922-999.

161. Saito, Т., Takaki, Y., Iwata, N., Trojanowski, J., Saido, T.C. Alzheimer's disease, neuropeptides, neuropeptidase, and amyloid-P peptide metabolism // Sci. Aging Knowledge Environ. 2003. Vol. 3. P. El.

162. Saito, Т., Iwata, N., Tsubuki, S., Takaki, Y., Takano, J., Huang, S.M., Suemoto, Т., Higuchi, M., Saido, T.C. Somatostatin regulates brain amyloid 3 peptide Af342 through modulation of proteolytic degradation // Nat. Med. 2005. Vol. 11. P. 434-439.

163. Sales, N, Dutriez, I, Maziere, B, Ottaviani, M, Roques, B.P. Neutral endopeptidase 24.11 in rat peripheral tissues: comparative localization by 'ex vivo' and 'in vitro' autoradiography // Regul. Pept. 1991. Vol. 33. P. 209-222.

164. Sayre, L.M, Zelasko, D.A, Harris, P.L, Perry, G, Salomon, R.G, Smith, M.A. 4-Hydroxynonenal-derived advanced lipid peroxidation end products are increased in Alzheimer's disease // J. Neurochem. 1997. Vol. 68. P. 2092-2097.

165. Sberna, G, Saez-Valero, J, Li, Q.-X, Czech, C, Beyreuther, K, Masters, C.L,

166. Mclean, C.A, Small, D.H. Acetylcholinesterase is increased in the brains oftransgenic mice expressing the C-terminal fragment (CT100) of the (3-amyloid proteinprecursor of Alzheimer's disease // J. Neurochem. 1998. Vol. 71. P. 723-731.

167. Schmitz, A, Schneider, A, Kummer, M.P, Herzog, V. Endoplasmic reticulum-localized amyloid (3-peptide is degraded in the cytosol by two distinct degradation pathways // Traffic. 2004. Vol. 5. P. 89-101.

168. Schweizer, A, Valdenaire, O, Nelbock, P, Deuschle, U, Dumas, M, Edwards, J.B, Stumpf, J.G, Loffler, B.M. Human endothelin converting enzyme (ECE-1): Three isoforms with distinct subcellular localizations // Biochem. J. 1997. Vol. 328. P. 871-877.

169. Selkoe, D.J. Altered structural proteins in plaques and tangles: what do they tell us about the biology of Alzheimer's disease? // Neurobiol. Aging. 1986. Vol. 7. P. 425-432.

170. Selkoe, D.J. The cell biology of p-amyloid precursor protein and presenilin in Alzheimer's Disease // Trends Cell Biol. 1998. Vol. 8. P. 447-453.

171. Seta, K.A. & Roth, R.A. Overexpression of insulin degrading enzyme: cellular localization and effects on insulin signalling // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1997. Vol. 231. P. 167-171.

172. Shen, J, Bronson, R.T, Chen, D.F, Xia, W, Selkoe, D.J, Tonegawa, S. Skeletal and CNS defects in Presenilin-1-deficient mice // Cell. 1997. Vol. 89. P. 629639.

173. Shirotani, K, Edbauer, D, Prokop, S, Haass, C, Steiner, H. Identification of distinct y-secretase complexes with different APH-1 variants // J. Biol. Chem. 2004. Vol. 279. P. 41340-41345.

174. Shivers, B.D., Hilbich, С., Multhaup, G., Salbaum, M., Beyreuther, K., Seeburg, P. H. Alzheimer's disease amyloidogenic glycoprotein: expression pattern in rat brain suggests a role in cell contact // EMBO J. 1988. Vol. 7. P. 1365-1370.

175. Small, D. Acetylcholinesterase inhibitors for the treatment of dementia in Alzheimer's disease: do we need new inhibitors? // Expert Opin. Emerg. Drugs. 2005. Vol. 10. P. 817-825.

176. Smith, P.K., Krohn, R.I., Hermanson, G.T., Mallia, A.K., Gartner, F.H., Provenzano, M.D., Fujimoto, E.K., Goeke, N.M., Olson, B.J., Klenk, D.C. Measurement of protein using bicinchoninic acid // Anal. Biochem. 1985. Vol. 150. P. 76-85.

177. Souren, L.E., Franssen, E.H., Reisberg, B. Neuromotor changes in Alzheimer's disease: implications for patient care // J. Geriatr. Psychiatry. Neurol. 1997. Vol. 10. P. 93-98.

178. Sprecher, C.A., Grant, F.J., Grimm, G., O'Hara, P.J., Norris, F., Norris, K.3 Foster, D.C. Molecular cloning of the cDNA for a human amyloid precursor protein homolog: evidence for a multigene family // Biochemistry. 1993. Vol. 32. P. 44814486.

179. Takahashi, M., Matsushita, Y., Iijima, Y., Tanzawa, K. Purification and characterization of endothelin converting enzyme from rat lung // J. Biol. Chem. 1993. Vol. 268. P. 21394-21398.

180. Tarn, H., Yoshikawa, K., Suzuki, T. Suppression of the caspase cleavage of P-amyloid precursor protein by its cytoplasmic phosphorylation // FEBS Lett. 2004. Vol. 567. P. 248-252.

181. Toescu, E.C. & Verkhratsky, A. Ca2+ and mitochondria as substrates for deficits in synaptic plasticity in normal brain ageing // J. Cell. Mol. Med. 2004. Vol. 8. P. 181-190.

182. Tong, Y., Zhou, W., Fung, V., Christensen, M.A., Qing, H., Sun, X., Song, W. Oxidative stress potentiates BACE1 gene expression and A(3 generation // J. Neural. Transm. 2005. Vol. 112. P. 455-469.

183. Tran-Paterson, R., Willard, H.F., Letarte, M. The common acute lymphoblastic leukemia antigen (neutral endopeptidase-3.4.24.11) gene is located on human chromosome 3 // Cancer Genet. Cytogenet. 1989. Vol. 42. P. 129-134.

184. Tsirka, S.E., Rogove, A.D., Strickland, S. Neuronal cell death and tPA // Nature. 1996. Vol. 384. P. 123-124.

185. Tucker, H.M., Kihiko-Ehmann, M., Wright, S., Rydel, R.E., Estus, S. Tissue plasminogen activator requires plasminogen to modulate amyloid-(3 neurotoxicity and deposition // J. Neurochem. 2000b. Vol. 75. P. 2172-2177.

186. Tucker, H.M., Kihiko-Ehmann, M., Estus, S. Urokinase-type plasminogen activator inhibits amyloid-p neurotoxicity and fibrillogenesis via plasminogen // J. Neurosci. Res. 2002. Vol. 70. P. 249-255.

187. Turner, A.J. Neuropeptide signalling and cell-surface peptidases // Adv. Second. Messenger Phosphoprotein Res. 1990. Vol. 24. P. 467-471.

188. Turner, A.J., Tanzawa, K. Mammalian membrane metallopeptidases: NEP, ECE, KELL, and PEX // FASEB J. 1997. Vol. 11. P. 355-364.

189. Turner, A.J., Barnes, К., Schweizer, A., Valdenaire, 0. Isoforms of endothelinconverting enzyme: why and where? // Trends Pharmacol. Sci. 1998. Vol. 19. P. 483-486.

190. Turner, P.R., O'Connor, K., Tate, W.P., Abraham, W.C. Roles of amyloid precursor protein and its fragments in regulating neural activity, plasticity and memory // Prog. Neurobiol. 2003. Vol. 70. P. 1-32.

191. Valdenaire, O., Rohrbacher, E., Mattei M.G. Organization of the gene encoding the human endothelin-converting enzyme (ECE-1) // J. Biol. Chem. 1995. Vol. 270. P. 29794-29798.

192. Van Nostrand, W.E. & Porter, M. Plasmin cleavage of the amyloid p-protein: alteration of secondary structure and stimulation of tissue plasminogen activator activity//Biochemistry. 1999. Vol. 38. P. 11570-11576.

193. Vassar, R BACE1: the 3-secretase enzyme in Alzheimer's disease // J. Mol Neurosci. 2004. Vol. 23. P. 105-114.

194. Vassar, R. & Citron, M. AB-generating enzymes: recent advances in B- and y-secretases research //Neuron. 2000. Vol. 27. P. 419-422.

195. Vaughan, D.W. & Peters, A. The structure of neuritic plaque in the cerebral cortex of aged rats // J. Neuropathol. Exp. Neurol. 1981. Vol. 40. P. 472-487.

196. Vekrellis, K., Ye, Z, Qiu, W.Q., Walsh, D, Hartley, D., Chesneau, V., Rosner, M.R., Selkoe, D.J. Neurons regulate extracellular levels of amyloid (3-protein via proteolysis by insulin-degrading enzyme // J. Neurosci. 2000. Vol. 20. P. 1657-1665.

197. Wade, J.A., Vaughan, P.F.T., Peers, C. Hypoxia enhances 3H.noradrenaline release evoked by nicotinic receptor activation from the human neuroblastoma SH-SY5Y// J. Neurochem. 1998. Vol. 71. P. 1482-1489.

198. Walker, E.S., Martinez, M., Brunkan, A.L., Goate, A. Presenilin 2 familial Alzheimer's disease mutations result in partial loss of function and dramatic changes in Ap 42/40 ratios // J. Neurochem. 2005. Vol. 92. P. 294-301.

199. Walsh, D.M., Klyubin, I., Fadeeva, J.V., Rowan, M.J., Selkoe, D.J. Amyloid-beta oligomers: their production, toxicity and therapeutic inhibition // Biochem. Soc. Trans. 2002. Vol. 30. P. 552-557.

200. Wang, D.S., Iwata, N., Hama, E., Saido, T.C., Dickson; D.W. Oxidized neprilysin in aging and Alzheimer's disease brains // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2003. Vol. 310. P. 236-241.

201. Wang, Z., Wu, D., Vinters, H.V. Hypoxia and reoxygenation of brain microvascular smooth muscle cells in vitro: cellular responses and expression of cerebral amyloid angiopathy-associated proteins // APMIS. 2002. Vol. 110. P. 423434.

202. Webster, N.J, Green, K.N, Peers, C, Vaughan, P.F. Altered processing of amyloid precursor protein in the human neuroblastoma SH-SY5Y by chronic hypoxia // J. Neurochem. 2002. Vol. 83. P. 1262-1271.

203. Wei, W, Norton, D.D, Wang, X, Kusiak, J.W. Abeta 17-42 in Alzheimer's disease activates JNK and caspase-8 leading to neuronal apoptosis // Brain. 2002. Vol. 125. P. 2036-2043.

204. Weinreb, O, Mandel, S, Amit, T, Youdim, M.B. Neurological mechanisms of green tea polyphenols in Alzheimer's and Parkinson's diseases // J. Nutr. Biochem. 2004. Vol. 15. P. 506-516.

205. Wehner, S, Siemes, C, Kirfel, G, Herzog, V. Cytoprotective function of sAPPalpha in human keratinocytes // Eur. J. Cell Biol. 2004. Vol. 83(11-12)/ Р/ 701708.

206. Weller, R.O, Massey, A, Kuo, Y.M, Roher, A.E. Cerebral amyloid angiopathy: accumulation of A 3 in interstitial fluid drainage pathways in Alzheimer's disease. Ann. N. Y. Acad. Sci. 2000. Vol. 903. P. 110-117.

207. Weller, R.O, Yow, H.Y, Preston, S.D, Mazanti, I, Nicoll, J.A. Cerebrovascular disease is a major factor in the failure of elimination of A(3 from the aging human brain // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2002. Vol. 977. P. 162-168.

208. Wen, Y, Onyewuchi, 0, Yang, S, Liu, R, Simpkins, J.W. Increased beta-secretase activity and expression in rats following transient cerebral ischemia // Brain Res. 2004. V. 1009. P. 1-8.

209. Werb, Z. ECM and cell surface proteolysis: regulating cellular ecology // Cell. 1997. Vol. 91. P. 439-442.

210. Wogulis, M, Wright, S, Cunningham, D, Chilcote, T, Powell, K, Rydel, R.E. Nucleation-dependent polymerization is an essential component of amyloid-mediated neuronal cell death // J. Neurosci. 2005. Vol. 25. P. 1071-1080.

211. Xie, L, Helmerhorst, E, Taddei, K, Plewright, B, Van Bronswijk, W, Martins, R. Alzheimer's (3-amyloid peptides compete for insulin binding to the insulin receptor // J. Neurosci. 2002. Vol. 22. P. RC221.

212. Xu, D, Emoto, N, Giaid, A, Slaughter, C, Kaw, S, deWit, D, Yanagisawa, M. ECE-1: a membrane-bound metalloprotease that catalyzes the proteolytic activation of big endothelin-1 // Cell. 1994. Vol. 78. P. 473-485.

213. Yasojima, K, Akiyama, H, McGeer, E.G., McGeer, P.L. Reduced neprilysin in high plaque areas of Alzheimer's brain: a possible relationship to deficient degradation of (3-amyloid peptide // Neurosci. Lett. 2001. Vol. 297. P. 97-100.

214. Yepes, M. & Lawrence, D.A. Tissue-Type Plasminogen Activator and Neuroserpin: A Well-Balanced Act in the Nervous System? // Trends Cardiovasc. Med. 2004. Vol. 14. P. 173-180.

215. Zhang, J.Z., Bebrooz, A., Ismail-Beigi, F. Regulation of glucose transport by hypoxia // Am. J. Kidney Dis. 1999. Vol. 34. P. 189-202.

216. Zhu, G., Wang, D., Lin, Y.H., McMahon, Т., Koo, E.H., Messing, R.O. Protein kinase С 8 suppresses A{3 production and promotes activation of a-secretase // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001. Vol. 285. P. 997-1006.