Роль экспрессии гена Stat3 в нейтрофильном воспалении при бронхиальной астме тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Никольский Александр Аркадьевич

• Никольский Александр Аркадьевич
• кандидат наук
• 2023

Оглавление диссертации кандидат наук Никольский Александр Аркадьевич

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования

Научная новизна

Теоретическая и практическая значимость работы

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Фенотипы бронхиальной астмы

1.1.1. Атопическая бронхиальная астма

1.1.2. Астма позднего дебюта

1.1.3. Астма физического усилия

1.1.4. Астма, ассоциированная с ожирением

1.1.5. Нейтрофильная астма

1.2. Молекулярные и клеточные механизмы БА с нейтрофильным типом воспаления

1.2.1. Роль ^-8, Т№-а и 1Ъ-6

1.2.2. Роль ТЫ-клеток

1.2.3. Роль ТЫ7-клеток

1.2.4. Роль других молекулярных и клеточных факторов

1.3. Подходы к терапии БА с нейтрофильным типом воспаления

1.3.1. Бимосиамоза

1.3.2. Анти-СХСЯ2-терапия

1.3.3. Анти-1Ь-17- и анти-1Ь-1р-терапия

1.3.4. Ингибиторы киназ

1.3.5. Макролиды

1.3.6. Ингибиторы PDE4

1.4. Роль транскрипционного фактора STAT3 в патогенезе бронхиальной астмы

1.4.1. Открытие и структурные особенности STAT3

1.4.2. Молекулярные механизмы активации STAT3

1.4.3. Биологическая роль STAT3

1.4.4. Участие STAT3 в поляризации ТЫклеток

1.4.5. Роль STAT3 в поляризации макрофагов

1.4.6. Роль STAT3 в эндотелиальных и эпителиальных клетках

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Животные

2.2. Протокол создания экспериментальной модели

2.3. Индукция продукции цитокинов спленоцитами

2.4. Иммуноферментный анализ

2.5. Определение гиперреактивности бронхов

2.6. Отбор образцов бронхоальвеолярного лаважа

2.7. Гистологический анализ легких

2.8. Полимеразная цепная реакция в реальном времени

2.9. Проектирование и синтез миРНК

2.10. Скрининг активности миРНК in vitro

2.11. Исследование активности комплекса миРНК/пептид in vitro

2.12. Дизайн исследования siSTAT3/LTP in vivo

2.13. Статистический анализ

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1. Модель бронхиальной астмы с нейтрофильным типом воспаления у мышей

3.1.1. Изменения уровня аллерген-специфических антител

3.1.2. Развитие ГРБ после различных протоколов индукции БА

3.1.3. Клеточный состав БАЛ

3.1.4. Гистологические изменения легочной ткани

3.1.5. Экспрессия цитокинов в дыхательных путях

3.1.6. Усиление нейтрофильного воспаления легких на модели бронхиальной астмы у мышей

3.2. Исследование устойчивости нейтрофильного воспаления легких к кортикостероидам

3.3. Подавление экспрессии гена Stat3 в экспериментах in vitro

3.4. Исследование способности комплекса миРНК и пептида-носителя LTP подавлять Stat3 in vitro

3.5. Изучение влияния супрессии экспрессии гена Stat3 молекулами миРНК на проявления экспериментальной бронхиальной астмы с нейтрофильным типом воспаления у мышей

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ

4.1. Обсуждение моделирования бронхиальной астмы с нейтрофильным типом воспаления у мышей

4.2. Обсуждение роли ТЫ7-иммунного ответа в развитии нейтрофильного воспаления при бронхиальной астме

4.3. Обсуждение роли ТЫ7-зависимого нейтрофильного воспаления легких в развитии устойчивости бронхиальной астмы к терапии кортикостероидами

4.4. Обсуждение состава комплекса миРНК и пептида-носителя

4.5. Обсуждение эффектов от подавления экспрессии гена Stat3 в Th17-зависимом нейтрофильном воспалении

4.6. Обсуждение преимуществ специфического подавления экспрессии гена Stat3 молекулами миРНК как подхода к терапии бронхиальной астмы с нейтрофильным типом воспаления

4.7. Обсуждение роли гена Stat3 в нейтрофильном воспалении при бронхиальной астме

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АК - аллергический конъюнктивит АПК - антигенпрезентирующие клетки АР - аллергический ринит

АСИТ - аллерген-специфическая иммунотерапия

АтД - атопический дерматит

АФУ - астма физического усилия

БА - бронхиальная астма

БАЛ - бронхоальвеолярный лаваж

ГРБ - гиперреактивность бронхов

ИФА - иммуноферментный анализ

кДНК - комплементарная ДНК

мАт - моноклональные антитела

миРНК - малые интерферирующие РНК

МПО - миелопероксидаза

мРНК - матричная рибонуклеиновая кислота

НАФ - неполный адъювант Фрейнда

ОП - оптическая плотность

ПАФ - полный адъювант Фрейнда

ПЦР - полимеразная цепная реакция

РНК - рибонуклеиновая кислота

ФБС - фетальная бычья сыворотка

ФСБ - фосфатно-солевой буфер

ХОБЛ - хроническая обструктивная болезнь легких

Arg (arginase) - аргиназа

CCD (coiled-coil domain) - двойной альфа-спиральный домен

CCR (C-C chemokine receptor type 1) - C-C-рецептор хемокина

CD (cluster of differentiation) - кластер дифференцировки

CNTF (ciliary neurotrophic factor) - цилиарный нейротрофический фактор

CT (cardiotrophin) - кардиотропин

CXCL ((C-X-C motif) ligand) - лиганд с мотивом C-X-C

CXCR (C-X-C chemokine receptor) - C-X-C хемокиновый рецептор

DBD (DNA-binding domain) - ДНК-связывающий домен

EGF (epidermal growth factor) - эпидермальный фактор роста

FEV1 (forced expiratory flow in 1 second) - объем форсированного выдоха за

секунду

FoxP3 (forkhead box P3) - вилкоголовый фактор с блоком P3

G-CSF (granulocyte colony-stimulating factor) - гранулоцитарный

колониестимулирующий фактор

Gfp (green fluorescent protein) - зеленый флуоресцентный белок

Gp130 (glycoprotein 130) - гликопротеин

HDM (house dust mite) - аллерген клеща домашней пыли

Hprt (hypoxanthine phosphoribosyltransferase) - гипоксантин-

гуанинфосфорибозилтрансфераза

ICAM (inter-cellular adhesion molecule) - межклеточная молекула адгезии IFN (interferon) - интерферон Ig (immunoglobulin) - иммуноглобулин IL (interleukin) - интерлейкин

ILC (innate lymphoid cells) - врожденные лимфоидные клетки Imp-a3 (importin-a3) - импортин-а3 JAK (janus kinase) - янус-киназа LD (linker domain) - линкерный домен

LIF (leukemia inhibitory factor) - фактор ингибирования лейкемии LPS (lipopolysaccharide) - липополисахарид

MET (mesenchymal-epithelial transition) - мезенхимально-эпителиальный переход

MMP (matrix metallopeptidase) - матриксная металлопротеиназа MRAS (muscle RAS oncogene homolog) - мышечный гомолог онкогена RAS mTOR (mammalian target of rapamycin) - мишень рапамицина у млекопитающих

ND (N-terminal domain) - спиральный N-концевой домен NF-kB (nuclear factor kB) - ядерный фактор kB

NLRP3 (NLR family pyrin domain containing 3) - белок семейства NLR,

содержащий пириновый домен

NP (neuropoietin) - нейропоэтин

OSM (oncostatin M) - онкостатин M

OVA (ovalbumin) - овальбумин

PDE (phosphodiesterase) - фосфодиэстераза

PIAS3 (protein inhibitor of activated STAT3) - белковый ингибитор активированного STAT3

RANTES (regulated on activation, normal T cell expressed and secreted) -регулятор активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток ROR (RAR-related orphan receptor) - RAR-родственный орфанный рецептор SAA (serum amyloid A) - сывороточный амилоид A SH2 (Src homology 2) - домен Src 2 гомологии

SOCS (suppressor of cytokine signalling) - супрессор передачи сигналов цитокинов

sRaw (specific airway resistance) - удельное сопротивление дыхательных путей STAT (signal transducer and activator of transcription) - преобразователь сигнала и активатор транскрипции

TAD (transcriptional activation domain) - домен трансактивации T-bet (T-box expressed in T-cells) - T-box, выраженный в Т-клетках Tfh (T follicular helper cells) - фолликулярные Т-хелперы TGF (transforming growth factor) - трансформирующий фактор роста Th (Т-helper) - Т-хелпер

TLR (toll-like receptor) - толл-подобный рецептор TNF (tumor necrosis factor) - фактор некроза опухоли Treg (T regulatory cells) - Т-регуляторные клетки TYK (tyrosine kinase) - тирозинкиназа

VCAM (vascular cell adhesion molecule) - васкулярная молекула клеточной адгезии

VEGFA (vascular endothelial growth factor A) - фактор роста эндотелия сосудов-А

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль экспрессии гена Stat3 в нейтрофильном воспалении при бронхиальной астме»

Актуальность темы исследования

Бронхиальная астма (БА) - гетерогенное заболевание, обычно характеризующееся хроническим воспалением дыхательных путей. За последние десятилетия резко возросло количество больных БА; в отдельных странах заболеваемость достигает 15-18%. В России общее число больных БА приближается к 10 млн. человек, что составляет около 7% населения страны.

Рост распространенности БА, в частности, связан с недостаточностью существующих способов терапии, которая на сегодняшний день предусматривает применение кортикостероидов, ингибиторов лейкотриенов и бронходилататоров. Эти препараты снижают выраженность проявлений астмы у значительной доли пациентов. Успешно применяют аллерген-специфическую иммунотерапию (АСИТ) - единственный патогенетически-значимый вид лечения БА. Однако АСИТ имеет ряд ограничений, основное из которых - опасность возникновения нежелательных местных и системных реакций (примерно у 3,7% пациентов). К тому же АСИТ не используется в лечении пациентов с неаллергической БА.

С раскрытием молекулярных и клеточных патогенетических механизмов БА появляются новые способы терапии, главным образом препараты на основе моноклональных антител, направленные против ключевых воспалительных факторов, чаще всего цитокинов и их рецепторов. Однако клинические исследования большинства из них еще продолжаются, а их результаты зачастую противоречивы, что можно объяснить гетерогенностью БА.

Длительное время считалось, что БА развивается исключительно по ТЪ2-зависимому механизму, в котором центральную роль играют ТМ-клетки, продуцирующие про-воспалительные цитокины 1Ь-4, 1Ь-5 и ГЬ-13, активность которых приводит к формированию основных проявлений БА (эозинофильное воспаление легких, гиперреактивность бронхов, ремоделирование дыхательных путей и пр.). Однако недавние успехи в области молекулярной

9

иммунологии привели к пересмотру представлений о её патогенезе. К настоящему времени БА рассматривается как гетерогенное заболевание, включающее в себя несколько фенотипов. Наиболее распространённый фенотип - атопическая БА, которая протекает преимущественно по ТМ-зависимому механизму и сопровождается эозинофильным воспалением. Пациенты с такой астмой хорошо поддаются традиционному лечению кортикостероидами. Однако в некоторых случаях (по различным данным до 10% от всех случаев тяжелой астмы) течение заболевания сопряжено с инфильтрацией легких другими провоспалительными клетками -нейтрофилами. Некоторые исследователи выделяют нейтрофильную БА в отдельный фенотип. Нейтрофильный фенотип БА ассоциируется с агрессивным течением заболевания, выраженной деструкцией тканей и характеризуется низким ответом на стандартную терапию кортикостероидами. Все это приводит к необходимости в создании новых способов терапии заболевания.

В то же время создание новых способов лечения невозможно без раскрытия молекулярных и клеточных патогенетических механизмов развития заболевания. Исследование клеточных и молекулярных патогенетических механизмов данного фенотипа установили взаимосвязь степени тяжести БА и нейтрофильного воспаления, которое коррелировало с активацией ТЫ7-иммунного ответа, а также с повышенной продукцией ГЬ-17А, IL-17F и ГЬ-8 в мокроте. Стоит отметить, что поляризация иммунного ответа в сторону ТИ2-клеток происходит при активации ГЬ-4-8ТАТ6-сигнального пути, тогда как ТЫ7-клетки формируются при активации ГЬ-6-БТАТЭ-сигнального пути. В свою очередь ТЫ7-клетки секретируют цитокины ^-17А, ^-21 и ГЬ-22, которые приводят к развитию проявлений БА:

нейтрофильному воспалению, гиперсекреции слизи и ремоделированию респираторного тракта.

Стоит отметить, что в патогенез БА вовлечены не только клетки иммунной системы (Т-клетки, В-клетки, эозинофилы, нейтрофилы, и пр.), но

также и неиммунные клетки (эпителиальные и эндотелиальные клетки, фибробласты), которые, активируясь, продуцируют широкий спектр провоспалительных факторов. В процесс активации клеток вовлечено 7 факторов транскрипции семейства STAT. Об участии STAT6 в запуске Th2-опосредованного воспаления лёгких при БА опубликовано много работ, тогда как о роли STAT3 в патогенезе БА имеется значительно меньше информации. Установлено, что STAT3 вовлечён в активацию Т-хелперов (в частности, Th2-и ТЫ7-клеток) и макрофагов, а также он способствует усилению инфильтрации лёгких нейтрофилами и эозинофилами.

В подавляющем большинстве опубликованных исследований роль STAT3 изучалась путем его инактивации различными ингибиторами, многие их которых представляют собой низкомолекулярные соединения с низкой специфичностью. Использование высокоспецифичных моноклональных антител для изучения биологическая роли STAT3 невозможно ввиду того, что этот фактор транскрипции локализуются внутри клетки.

В то же время появляются новые способы регуляции активности генов, например технология интерференции РНК, которая заключается в использовании молекул малых интерферирующих РНК (миРНК), способных сиквенс-специфично деградировать мРНК целевых генов, что дает возможность исследовать биологические свойства внутриклеточных мишеней.

Научная новизна

В ходе настоящей работы создана модель бронхиальной астмы c нейтрофильным типом воспаления у мышей. Данная модель воссоздает основные проявления этой патологии (нейтрофильное воспаление, гиперреактивность бронхов, ремоделирование респираторного тракта), а также имеет профиль иммунного ответа, соответствующий клинической картине, что свидетельствует о ее адекватности.

Также в ходе работы спроектированы, а затем синтезированы молекулы миРНК с уникальными нуклеотидными последовательностями, способные

11

эффективно и специфично подавлять экспрессию гена 81^3., участвующего в патогенезе бронхиальной астмы с нейтрофильным типом воспаления.

Кроме того, впервые проведены исследования по изучению эффекта, вызванного подавлением экспрессии гена 81М3 в ткани легких молекулами миРНК, на проявления признаков нейтрофильной бронхиальной астмы у мышей.

Теоретическая и практическая значимость работы

Теоретическая значимость диссертационной работы заключается в выявлении молекулярных и клеточных патогенетических механизмов нейтрофильной БА. Полученные результаты вносят вклад в понимание роли гена в патогенезе нейтрофильной БА.

Практическая значимость работы заключается в демонстрации перспективности применения интерференции РНК в качестве инновационного подхода к терапии бронхиальной астмы с нейтрофильным типом воспаления. Кроме того создание экспериментальной модели бронхиальной астмы с нейтрофильным типом воспаления у мышей может быть в дальнейшем использована для изучения биологической активности новых лекарственных препаратов в рамках проведения доклинических исследований.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Фенотипы бронхиальной астмы

Существующий термин «Астма» [Bateman и др., 2018] описывает ряд клинических симптомов и характеризует не одиночное заболевание, а целую группу заболеваний дыхательных путей.

С развитием молекулярно-биологических методов исследований была установлена роль Т-хелперов 2 (Th2 - Т-helper 2) и врожденных лимфоидных клеток 2 типа (ILC2 - type 2 innate lymphoid cells), а также продуцируемых ими интерлейкинов (IL - interleukin) (IL-4, -5, -9 и -13) в формировании основных проявлений БА (продукция аллерген-специфических иммуноглобулинов класса Е (IgE - immunoglobulin E), развитие гиперреактивности бронхов, эозинофильное воспаление, ремоделирование бронхов и пр.) [Grayson и др., 2018].

Длительное время считалось, что БА развивается исключительно по Th2-зависимому механизму. К настоящему времени БА рассматривается как гетерогенное заболевание, включающее в себя несколько подгрупп, которые обозначают термином «фенотип». Под фенотипом понимаются наблюдаемые свойства организма, которые формируются при взаимодействии генотипа и окружающей среды [Wenzel, 2012]. Термин «фенотип» предшествовал другому термину - «эндотип». Под эндотипом понимают конкретный биологический путь, объясняющий наблюдаемые свойства фенотипа, который зависит от эпигенетических факторов [Тимошенко и др., 2021].

Разделение БА на фенотипы осуществляют на основе клинических характеристик, анамнеза и идентифицируемых биомаркеров. Чаще всего выделяют следующие фенотипы БА: атопическая, позднего дебюта, физического усилия, ассоциированная с ожирением и нейтрофильная [Wenzel, 2012; Джумабаева и др., 2021].

1.1.1. Атопическая бронхиальная астма

Данный фенотип характеризуется выраженными аллергическими симптомами (АР - аллергический ринит, АК - аллергический конъюнктивит,

13

АтД - атопический дерматит). Несмотря на то, что конкретный возрастной предел для атопической астмы не определен, симптомы аллергии чаще всего возникают в детском возрасте, а признаки самой БА окончательно устанавливаются во взрослом состоянии. Большинство пациентов с БА имеют именно этот фенотип; как правило, они хорошо поддаются лечению кортикостероидами [Fitzpatrick и др., 2011; Фомина и др., 2022]. Атопическая астма преимущественно протекает по ТЪ2-зависимому механизму [Moore и др., 2010; Пирогов и др., 2021а].

Помимо неспецифической терапии кортикостероидами для лечения данного фенотипа БА применяют специфичные препараты на основе моноклональных антител, направленные против молекулярных компонентов ТЪ2-иммунного пути (IgE, ТЪ2-ассоциированные цитокины и их рецепторы) [Шиловский и др., 2017]. В настоящее время для лечения БА в мире и в России, в частности, одобрены следующие таргетные препараты на основе моноклональных антител: Реслизумаб (анти-1Ь-5), Меполизумаб (анти-1Ь-5), Бенрализумаб (анти-1Ь-5), Дупилумаб (анти-1Ь-4 и анти-1Ь-13) и Омализумаб (анти-IgE).

1.1.2. Астма позднего дебюта

Астма позднего дебюта характеризуется наличием значительного количества эозинофилов в мокроте и периферической крови [Иванов, Черняк, 2019]. К этому фенотипу принято относить БА, при которой доля эозинофилов в мокроте превышает 2% от всех воспалительных клеток [Jayaram и др., 2006]. Несмотря на выраженную эозинофилию, симптомы аллергии у этих пациентов как правило возникают не в детстве, а во взрослом возрасте. Эта форма астмы часто сопровождается синуситом и полипозом носовой полости [Moore и др., 2010]. Астма данного фенотипа зачастую протекает тяжело, при этом большое количество эозинофилов сохраняется, несмотря на лечение ингаляционными и пероральными кортикостероидами [Veen van и др., 2009]. Данный фенотип, в отличие от ранней аллергической БА, скорее всего, развивается не только по ТЪ2-зависимому пути, а по более сложному IgE-независимому механизму с

14

вовлечением в патогенез ILC2 и цитокина IL-33. Эпителиальные клетки под воздействием патогенетических стимулов высвобождают IL-33, который активирует ILC2. Последние являются мощными продуцентами IL-5 [Хаитов и др., 2018], который отвечает за привлечение и созревание эозинофилов [Hassani, Koenderman, 2018].

Эозинофилы обычно очень чувствительны к кортикостероидам, т.к. последние индуцируют их апоптоз [Druilhe, Létuvé, Pretolani, 2003]. Поэтому удивительно, что, несмотря на лечение ингаляционными кортикостероидами, эозинофилы сохраняются на повышенном уровне в легких и в периферической крови у 50% пациентов с такой астмой. Тем не менее, высокие дозы системных кортикостероидов позволяют преодолевать эту резистентность [Brinke и др., 2004]. Учитывая высокий уровень эозинофилии, для пациентов с этим фенотипом БА антилейкотриеновые препараты, анти-1Ь-5 и анти-1Ь-13-терапия оказывают значительный благоприятный эффект [Doran и др., 2017].

1.1.3. Астма физического усилия

Астму физического усилия (АФУ) относят к отдельному фенотипу. Симптомы АФУ проявляются в основном после физической нагрузки [Грошева, Попова, 2016]. Пациенты с АФУ часто страдают легкой формой БА и демонстрируют снижение объема форсированного выдоха за 1 секунду (FEV1 - forced expiratory flow in 1 second) на 10-15% в ответ на длительные физические нагрузки, при этом снижение FEV1 более выражено в холодных и сухих условиях. Хотя патогенез этого фенотипа БА мало изучен, имеются доказательства участия в нем ТИ2-иммунного ответа. В частности, этот фенотип заболевания более распространен у атлетов с атопией и связан с повышенным количеством эозинофилов в мокроте. АФУ также связана с активацией тучных клеток в слизистой оболочке бронхов. Для терапии этого фенотипа БА применяют антилейкотриеновые препараты; также пациенты с АФУ хорошо отвечают на анти-1Ь-9-терапию [Parker и др., 2011], что может свидетельствовать о Th9- а не ТЪ2-зависмых механизмах развития данного фенотипа астмы.

1.1.4. Астма, ассоциированная с ожирением

Вопрос о том, является ли ожирение источником развития астмы или сопутствующим заболеванием, остается спорным. Ряд исследований подтверждает связь ожирения с воспалением, опосредованным такими молекулярными факторами как фактор некроза опухоли-а (TNF-а - tumor necrosis factor-alpha), IL-6 и лептины.

Согласно текущим представлениям, данный фенотип гетерогенен, т.к. у части пациентов БА развивается с участием ТМ-имунного ответа, в то время как у другой - по ТМ-независимому механизму [Уксуменко, Антонюк, 2019]. При этом потеря веса пациентами с неаллергической БА (не Т2-тип) приводила к улучшению симптомов БА. Напротив, у лиц с аллергической астмой (Т2-тип) симптомы заболевания не улучшались после похудения; более того происходила усиленная выработка Th2-цитокинов. Таким образом, быстрая потеря веса в качестве терапии целесообразна не во всех случаях. Неудовлетворительные результаты лечения большинства таких пациентов кортикостероидами говорят об отсутствии или слабой связи патогенеза этого фенотипа БА с Th2-опосредованным воспалением [Wenzel, 2012].

1.1.5. Нейтрофильная астма

Астму долгое время связывали с эозинофильным воспалением и с IgE-опосредованной активацией тучных клеток. Однако накапливаются экспериментальные свидетельства об участии других воспалительных клеток - нейтрофилов в патогенезе БА [Пирогов и др., 2021b; Трушина, Костина, 2021]. Например, у пациентов, погибших в результате приступа БА, при вскрытии в легких обнаруживалось значительное количество нейтрофилов. Также количество нейтрофилов в мокроте коррелировало с тяжестью заболевания [Moore и др., 2014]. Согласно ряду авторов к нейтрофильной БА относят пациентов с уровнем нейтрофилии мокроты либо более 65%, либо более 5х106 кл/мл [Ray, Kolls, 2017]. Другие авторы в качестве диагностического критерия применяют уровень эозинофилов менее 3% при

уровне нейтрофилов более 60% [Gao, Wu, 2018].

16

Дополнительная сложность идентификации пациентов с нейтрофильной БА заключается в том, что появление нейтрофилов в мокроте может не зависеть от патогенеза БА как такового, а быть результатом воздействия факторов окружающей среды или сопутствующих патологий (ожирение и инфекции дыхательных путей) [Camp, Jonsson, 2017]. Несмотря на то, что первоначальные исследования не выявляли связи между ожирением и нейтрофильным воспалением дыхательных путей при астме, дополнительные исследования установили эту взаимосвязь, но только для женщин [Scott и др., 2011].

Нейтрофильное воспаление легких и резистентность к кортикостероидам чаще всего наблюдаются у людей, имеющих в дыхательных путях какие-либо патогены (грибы, вирусы и бактерии). Среди грибов Aspergillus fumigatus чаще всего идентифицируется в респираторном тракте при БА; наличие этого патогена коррелирует с нейтрофилией [Brown, 2011]. Респираторно-синцитиальный вирус и риновирус вызывают осложнения БА, сопровождающиеся нейтрофильным воспалением дыхательных путей [Openshaw и др., 2017]. Бактериальные инфекции также сопровождаются устойчивой нейтрофилией и резистентностью к кортикостероидам [Simpson и др., 2016]. Показано, что помимо ожирения и инфекций респираторного тракта, курение также ухудшает симптомы заболевания и способствует развитию нейтрофильного воспаления при БА [Polosa, Thomson, 2013].

Стоит отметить, что нейтрофилия в мокроте часто наблюдается у пациентов, получавших кортикостероиды. Известно, что кортикостероиды ингибируют апоптоз нейтрофилов и активируют их, поэтому лечение кортикостероидами способствует развитию нейтрофилии. Исследование профиля экспрессии генов клетками мокроты показало, что нейтрофильное воспаление сопровождалось активацией IL-1ß и TNF-a [Baines и др., 2011]. Нейтрофилия может также сосуществовать с эозинофилией, что подчеркивает сложность патофизиологии тяжелой формы БА [Hastie и др., 2010].

Существование самостоятельного фенотипа БА с нейтрофильным типом воспаления подтверждают результаты т.н. кластерного исследования, когда с помощью определенных алгоритмов проводится компьютеризированный анализ большого количества клинических показателей пациентов. В результате был выявлен кластер пациентов с тяжелой формой БА, которые характеризовались значительными нарушениями функции дыхания и наличием эозинофилов в БАЛ в сочетании с высоким количеством нейтрофилов [Wu и др., 2014].

1.2. Молекулярные и клеточные механизмы БА с нейтрофильным типом воспаления

Молекулярные механизмы развития нейтрофильного воспаления при БА изучались как с использованием биоматериала, полученного от пациентов, так и с применением моделей заболевания у мышей. Данные исследования установили взаимосвязь степени тяжести БА и нейтрофильного воспаления, которое коррелировало с активацией Th1- [Raundhal и др., 2015] и Th17-иммунного ответа, а также с повышенной продукцией интерферона гамма (IFN-y — interferon gamma), IL-17A, IL-17F и IL-8 в мокроте [Liu и др., 2017].

1.2.1. Роль IL-8, TNF-a и IL-6

Концентрация IL-8 в мокроте коррелирует с количеством нейтрофилов у пациентов с тяжелой формой БА [Gibson, Simpson, Saltos, 2001]. Данный цитокин могут экспрессировать макрофаги и эпителиальные клетки, активированные патогенами (бактериальной или вирусной природы) и факторами окружающей среды (табачный дым, частицы, содержащиеся в выхлопных газах и пр.) [Gibson, Simpson, Saltos, 2001]. Кроме того, Т-клетки и сами нейтрофилы, в ответ на активацию ГЬ-17А, продуцируют IL-8 [Pelletier и др., 2010]. Помимо IL-8 аттракции нейтрофилов в легкие также способствует TNF-a, продуцируемый эпителием [Nguyen и др., 2016; Смольникова и др., 2019] (рис. 1).

Экспрессия другого провоспалительного цитокина (IL-6) также повышена в сыворотке крови, мокроте и образцах БАЛ пациентов, страдающих БА [Peters и др., 2016]. Данный цитокин продуцируется широким спектром клеток (эпителиальные клетки, макрофаги, Т-клетки и пр.) и участвует в поляризации ТЫ7-иммунного ответа. Его роль в нейтрофильном воспалении была подтверждена в исследованиях на мышах, нокаутных по данному гену; инактивация IL-6 снижала степень нейтрофильного (и эозинофильного) воспаления ткани легких при моделировании экспериментальной БА (рис. 1) [Chu и др., 2015].

1.2.2. Роль TM-клеток

В образцах БАЛ пациентов с тяжелой БА содержалось значительное количество CD4+ (CD - cluster of differentiation; кластер дифференцировки) Т-клеток, продуцирующих IFN-y [Raundhal и др., 2015]. Исследования на животных показали, что именно IFN-y, а не IL-ПА, играл решающую роль в развитии ГРБ при экспериментальной БА [Гайсина и др., 2016]. После инактивации гена Ifny, мыши не развивали ГРБ в ответ на индукцию тяжелой БА, тогда как после нокаута рецептора IL-17RA ГРБ не снижалась, несмотря на уменьшение степени воспаления в легких [Raundhal и др., 2015]. Сходное наблюдение было и в клинической практике, где количество Thl-клеток в БАЛ коррелировало с ухудшением функции легких [Duvall и др., 2017].

Дифференциацию ThO-клеток в Th1 осуществляют цитокины IL-12 и IFN-y. После взаимодействия Т-клеточного рецептора с антигеном, а также воздействия указанных цитокинов, индуцируется экспрессия факторов STAT1 и T-bet (T-box expressed in T-cells; T-box, выраженный в Т-клетках), которые осуществляют дифференцировку Thl-клеток и запускают продукцию IFN-y (рис. 1) [Куприянов, Синицкий, Долгушин, 2021].

1.2.3. Роль Th^-клеток

Накоплено значительное количество экспериментальных свидетельств участия ^П-клеток, продуцирующих т.н. ^^-ассоциированные цитокины

(IL-17A и IL-17F), в развитии нейтрофильного воспаления при БА [Нурдина, Купаев, 2017]. Увеличенное количество IL-17A и IL-17F и их мРНК (матричная рибонуклеиновая кислота) детектируется в мокроте, образцах БАЛ и биопсийном материале, полученных от пациентов с БА [Ricciardolo и др., 2017]. Нейтрофилия дыхательных путей у пациентов с тяжелой БА коррелировала с экспрессией IL-17A, при этом терапия кортикостероидными препаратами не снижала их количество в дыхательных путях [Bullens и др., 2006]. Сходные исследования были получены и на животных, когда экспрессия ТЫ7-ассоциированных цитокинов коррелировала с нечувствительностью к кортикостероидам [Torjusen, Matsui, 2009].

Согласно современным представлениям дифференциацию ТЮ-клеток мыши в ТЫ7-клетки запускает комбинация цитокинов TGF-ß (transforming growth factor beta; трансформирующий фактор роста бета) и IL-6 [Mangan и др., 2006] или TGF-ß и IL-21. При этом сами ТЫ7-клетки продуцируют значительное количество IL-21, тем самым аутокринно усиливая свою дифференцировку. ТЮ-клетки человека поляризуются в Th17 сходными комбинациями цитокинов: TGF-ß + IL-21 или TGF-ß + IL-23 + IL-6. В дифференцировке ТЫ7-клеток участвуют транскрипционные факторы БТАТЭ, RORa (RAR-related orphan receptor alpha; RAR-родственный орфанный рецептор альфа) и RORyt (рис. 1). ТЫ-ассоциированный цитокин (IFN-y) негативно регулирует дифференциацию ТЫ7-клеток (рис. 1). Также регуляторные Т-клетки подавляют поляризацию ТЫ7-иммунного ответа, т.к. повышение соотношения экспрессии IL-17A/IL-10 и RORyt/FoxP3 (forkhead box P3; вилкоголовый фактор с блоком P3) увеличено у пациентов с высокой частотой обострений [Zou и др., 2018]. Кроме того, дифференциации ТЮ-клеток в ТЫ7 способствует процесс презентации аллергена дендритными клетками 2-го типа [Norimoto и др., 2014]. В то же время презентация, осуществляемая дендритными клетками 1 -го типа, приводит к развитию толерантности на аллерген за счет активации Т-регуляторных клеток (Treg - Т regulatory cells) (рис. 1) [Khare и др., 2013].

Цитокины IL-17A, IL-17F и IL-22 стимулируют гены муцинов в эпителиальных клетках, приводя к гиперплазии и метаплазии бронхиального эпителия, а также способствуют пролиферации клеток гладкой мускулатуры бронхов [Chang и др., 2012], что в итоге приводит к ремоделированию дыхательных путей [Wang и др., 2010]. Кроме того, ТЫ7-ассоциированные цитокины (IL-17A, IL-17F и IL-22) воздействуют на бронхиальный эпителий, стимулируя продукцию CXCL1 и IL-8, которые в свою очередь участвуют в хемоаттракции нейтрофилов в легкие (рис. 1) [Liu и др., 2020].

1.2.4. Роль других молекулярных и клеточных факторов

Существуют и другие механизмы нейтрофильного воспаления. Один из них - активация инфламмасомы NLRP3 (NLR family pyrin domain containing 3; белок семейства NLR, содержащий пириновый домен 3) - внутриклеточного мультипротеинового комплекса. Активация осуществляется за счет белка сывороточного амилоида A (SAA - serum amyloid A), который продуцируется респираторным эпителием под действием патогенетических факторов (бактерии, поллютанты и пр.). Активированная инфламмасома NLRP3 способствует каспаза-1-опосредованному процессингу провоспалительных цитокинов IL-ip и IL-18 [Kelley и др., 2019]. Повышенная экспрессия NLRP3, IL-ip и каспазы-1 обнаруживается в мокроте пациентов с нейтрофильной БА [Simpson и др., 2014; Осипенко и др., 1999], что подтверждает участие этих факторов в нейтрофильном воспалении дыхательных путей.

Исследования на мышах показали, что цитокин IL-1P, выделяемый макрофагами, стимулирует ILC3 продуцировать IL-17A, что в итоге приводит к ГРБ и нейтрофилии легких [Doherty, Broide, 2019]. Косвенные данные, подтверждающие участие ILC3 в тяжелой БА с нейтрофильным типом воспаления, были получены при анализе транскриптома клеток индуцированной мокроты; в мокроте пациентов с тяжелой астмой был повышен уровень мРНК-экспрессии генов, которые вовлечены в пути активации ILC3 (рис. 1) [Hekking и др., 2018].

Также сообщается об участии 1Ь-33, высвобождаемого клетками респираторного эпителия, в усилении не только ТЬ2-иммунного ответа, но и ТЫ- и ТЫ7-ответа [Yagami и др., 2010] (рис. 1).

Рис. 1. Молекулярные и клеточные механизмы развития нейтрофильного воспаления при бронхиальной астме.

После контакта с аллергеном антигенпрезентирующие клетки (АПК) презентируют его на своей поверхности и мигрируют в региональные лимфоузлы, где активируют наивные ТЮ-клетки, которые под влиянием определенного цитокинового окружения дифференцируются в ТЫ - или ТЫ7-клетки, которые, в свою очередь, продуцируют провоспалительные цитокины (ИК-у, 1Ь-17А, IL-17F и ГЬ-21). Данные цитокины обеспечивают формирование таких признаков БА как: ГРБ, инфильтрация легких нейтрофилами, ремоделирование дыхательных путей. Мощными хемоаттрактантами являются ГЬ-8 и Т№-а, которые продуцируются

эпителиальным клетками и макрофагами при бактериальной инвазии или вирусной инфекции. IL-33, выделяемый из эпителиальных клеток при их повреждении, способен усиливать поляризацию Th17-клеток. Врожденные лимфоидные клетки 3 типа продуцируют значительные количества IL-17A, тем самым усиливая нейтрофильное воспаление.

Таким образом, эпителиальные клетки, макрофаги, ILC3, Th1- и Th17-клетки проявляют свою скоординированную активность при помощи выделяемых хемокинов и цитокинов, приводя к нейтрофильному воспалению ткани легких и развитию признаков БА: гиперсекреции слизи, ГРБ и ремоделированию респираторного тракта (гипертрофия гладкой мускулатуры бронхов, фиброз ткани легких и гиперплазия эпителия).

1.3. Подходы к терапии БА с нейтрофильным типом воспаления

Нейтрофильная астма трудно поддается лечению кортикостероидами. Более того, длительное их применение способствует развитию нейтрофильного воспаления легких [Cowan и др., 2010], т.к. кортикостероиды индуцируют апоптоз эозинофилов [Ивашкин и др., 2012] и при этом ингибируют апоптоз нейтрофилов. Demarche с коллегами показали, что снижение дозы кортикостероидов у 70% пациентов с БА приводило к уменьшению числа нейтрофилов в мокроте [Demarche и др., 2018]. Тем не менее требуется разработка новых подходов к лечению нейтрофильного воспаления дыхательных путей.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Никольский Александр Аркадьевич, 2023 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Бабахин А. и др. Моделирование бронхиальной астмы с нейтрофильным фенотипом воспаления // Иммунология. 2017. Т. 38. № 4. С. 199-205.

2. Борута С.А., Шахнис Е.Р., Омельяненко М.Г. Роль дисфункции эндотелия в формировании легочной гипертензии у больных бронхиальной астмой // Пульмонология. 2008. № 2. С. 38-41.

3. Гайсина А.Р. и др. Изучение баланса Th1/Th2-иммунного ответа при вирус-индуцированных осложнениях бронхиальной астмы // Российский аллергологический журнал. 2016. № 4. С. 20-28.

4. Глазова Т.Г. и др. Структурно-функциональные особенности эндотелиальных и лейкоцитарных клеток при бронхиальной астме у детей // «Педиатрия» Журнал имени Г.Н. Сперанского. 2015. Т. 94. № 4. С. 24-29.

5. Грошева Е.С., Попова О.А. Гиперреактивность бронхов как предрасполагающий фактор развития астмы физического усилия у студентов, активно занимающихся спортом // Культура физическая и здоровье. 2016. Т. 57. № 5. С. 113-114.

6. Джумабаева С.Э. и др. Фенотипы бронхиальной астмы // Экономика и социум. 2021. Т. 82. № 3. С. 511-514.

7. Иванов А.Ф., Черняк Б.А. Бронхиальная астма с поздним дебютом // Астма и аллергия. 2019. № 1. С. 8-14.

8. Ивашкин В.Т. и др. Эозинофильный эзофагит: обзор литературы и описание собственного наблюдения // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2012. № 1. С. 71-78.

9. Кологривова И.В., Кологривова Е.Н., Суслова Т.Е. Молекулярные аспекты функционирования T-хелперов 17-го типа // Бюллетень сибирской медицины. 2011. Т. 10. № 4. С. 93-98.

10. Колоскова О. и др. Липосомальные средства доставки миРНК (обзор) // Биофармацевтический журнал. 2017. Т. 9. № 5. С. 3-10.

11. Корытина Г.Ф. и др. Молекулярные механизмы фенотипической гетерогенности хронической обструктивной болезни легких: роль JAK/STAT-, №КВ1- сигнального пути и молекул иммунного ответа // Медицинская генетика. 2020. Т. 19. № 8. С. 100-104.

12. Куприянов С.В., Синицкий А.И., Долгушин И.И. Сложные регуляторные сети: взаимосвязи метаболизма, внутриклеточных сигнальных путей и эпигенетических регуляторов в контроле функций ТЫ // Иммунология. 2021. Т. 42. № 5. С. 562-573.

13. Маев И.В. и др. Функциональная активность альвеолярных макрофагов у больных бронхиальной астмой и гастроэзофагеальной рефлюксной болезнью // Клиническая медицина. 2013. Т. 91. № 6. С. 41-47.

14. Минеев В.Н. и др. Роль SOCS-белков в негативной регуляции 1АК^ТАТ сигнализации // Цитокины и воспаление. 2012. Т. 11. № 2. С. 1422.

15. Никольский А.А. и др. Влияние локального подавления экспрессии гена Stat3 на нейтрофильное воспаление легких в экспериментальной модели на мышах // Иммунология. 2021. Т. 42. № 6. С. 600-614.

16. Нурдина М.С., Купаев В.И. Взаимосвязь уровня 1Ь-17, 1Ь-10 со степенью контроля бронхиальной астмы // Вестник современной клинической медицины. 2017. Т. 10. № 3. С. 35-38.

17. Осипенко А.Л. и др. Продукция провоспалительных цитокинов (1Ь-1р, 1Ь-8) и 1Ь-2 у детей с бронхиальной астмой // Аллергология. 1999. № 2. С. 4-6.

18. Пирогов А.Б. и др. Функциональная активность гранулоцитов бронхов в формировании цитокинового профиля у больных бронхиальной астмой при реакции дыхательных путей на холодовой стимул // Иммунология. 2021а. Т. 41. № 5. С. 432-440.

19. Пирогов А.Б. и др. Обострение астмы и нейтрофильный сегмент воспаления бронхов у пациентов с холодовой гиперреактивностью

дыхательных путей // Бюллетень сибирской медицины. 2021Ь. Т. 20. № 2. С. 71-78.

20. Смольникова М.В. и др. Уровень 1Ь-4, 1Ь-5, 1Ь-13 и ТЫБ-а у детей с бронхиальной астмой в зависимости от степени контролирования заболевания // Российский иммунологический журнал. 2019. Т. 13. № 2. С. 545-547.

21. Смольникова М.В. и др. Цитокиновый профиль ТЫ/ТК2/ТЫ7 в плазме и полиморфизм генов (1Ь12Ь, 1Ь13, ГЬ31, 1Ь33) у больных астмой детей: мультиплексный анализ // Медицинская иммунология. 2021. Т. 23. № 4. С. 887-894.

22. Соболев В.В., Денисова Е.В., Корсунская И.М. Изменение экспрессии гена STAT3 при лечении псориаза // Медицинский совет. 2020. № 12. С. 71-74.

23. Тимошенко Д.О. и др. Эпигенетика бронхиальной астмы // Иммунология. 2021. Т. 42. № 2. С. 93-101.

24. Трушина Е.Ю., Костина Е.М. Маркеры эозинофильного и нейтрофильного воспаления дыхательных путей больных неаллергической бронхиальной астмой и хронической обструктивной болезнью легких // Фарматека. 2021. Т. 28. № 5. С. 103-108.

25. Уксуменко А.А., Антонюк М.В. Патогенетические аспекты фенотипа бронхиальной астмы, ассоциированной с ожирением // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2019. № 71. С. 112-119.

26. Фомина Д.С. и др. Анализ предикторов ответа на анти-1§Б-терапию пациентов с тяжелой атопической бронхиальной астмой в реальной клинической практике // Терапевтический архив. 2022. Т. 94. № 3. С. 413-419.

27. Хаитов М. и др. Роль интерлейкина 33 в патогенезе бронхиальной астмы. Новые экспериментальные данные // Биохимия. 2018. Т. 83. № 1. С. 1933.

28. Шиловский И.П. и др. Антицитокиновая терапия бронхиальной астмы // Молекулярная биология. 2017. Т. 51. № 1. С. 3-17.

29. Шиловский И.П. и др. Активация Th17-иммунного ответа при экспериментальной нейтрофильной бронхиальной астме у мышей // Иммунология. 2019. Т. 40. № 6. С. 5-15.

30. Шиловский И.П. и др. Современные представления о молекулярных механизмах нейтрофильной бронхиальной астмы и её терапии // Биохимия. 2020. Т. 85. № 8. С. 1004-1020.

31. Abdelaziz M.H. и др. Alternatively activated macrophages; a double-edged sword in allergic asthma // J. Transl. Med. 2020. Т. 18. № 1. С. 58.

32. Agache I. и др. Increased serum IL-17 is an independent risk factor for severe asthma // Respir. Med. 2010. Т. 104. № 8. С. 1131-1137.

33. Ahmad B. и др. Alantolactone induces apoptosis in THP-1 cells through STAT3, survivin inhibition, and intrinsic apoptosis pathway // Chem. Biol. Drug Des. 2021. Т. 97. № 2. С. 266-272.

34. Alexandrow M.G. и др. Curcumin: A novel Stat3 pathway inhibitor for chemoprevention of lung cancer // Eur. J. Cancer Prev. 2012. Т. 21. № 5. С. 407412.

35. An T.J. и др. Effects of macrolide and corticosteroid in neutrophilic asthma mouse model // Tuberc. Respir. Dis. (Seoul). 2018. Т. 81. № 1. С. 80-87.

36. Aun M.V. и др. Animal models of asthma: utility and limitations. // J. Asthma Allergy. 2017. Т. 10. С. 293-301.

37. Babon J.J. и др. Suppression of cytokine signaling by SOCS3: Characterization of the mode of inhibition and the basis of its specificity // Immunity. 2012. Т. 36. № 2. С. 239-250.

38. Baines K.J. и др. Transcriptional phenotypes of asthma defined by gene expression profiling of induced sputum samples // J. Allergy Clin. Immunol. 2011. Т. 127. № 1. С. 153- 160.e9.

39. Bardin P. и др. Roflumilast for asthma: Efficacy findings in mechanism of action studies // Pulm. Pharmacol. Ther. 2015. Т. 35. С. S4-S10.

40. Basit A. h gp. ICAM-1 and LFA-1 play critical roles in LPS-induced neutrophil recruitment into the alveolar space // Am. J. Physiol. Cell. Mol. Physiol. 2006. T. 291. № 2. C. L200-L207.

41. Bateman E.D. h gp. Roflumilast for asthma: Efficacy findings in non-placebo-controlled comparator and dosing studies // Pulm. Pharmacol. Ther. 2015. T. 35. C. S11-S19.

42. Bateman E.D. h gp. Erratum: Global strategy for asthma management and prevention: GINA executive summary (European Respiratory Journal (2008) 31 (143-178) DOI: 10.1183/09031936.00138707) // Eur. Respir. J. 2018. T. 51. № 2. C. 143-178.

43. Bharadwaj U. h gp. Drug-repositioning screening identified piperlongumine as a direct STAT3 inhibitor with potent activity against breast cancer // Oncogene. 2015. T. 34. № 11. C. 1341-1353.

44. Bitko V. h gp. Inhibition of respiratory viruses by nasally administered siRNA // Nat. Med. 2005. T. 11. № 1. C. 50-55.

45. Bogaert P. h gp. Inflammatory signatures for eosinophilic vs. neutrophilic allergic pulmonary inflammation reveal critical regulatory checkpoints // Am. J. Physiol. - Lung Cell. Mol. Physiol. 2011. T. 300. № 5.

46. Bosch-Barrera J., Menendez J.A. Silibinin and STAT3: A natural way of targeting transcription factors for cancer therapy // Cancer Treat. Rev. 2015. T. 41. № 6. C. 540-546.

47. Bragonzi A. h gp. Comparison between cationic polymers and lipids in mediating systemic gene delivery to the lungs. // Gene Ther. 1999. T. 6. № July 1999. C. 1995-2004.

48. Braun D.A., Fribourg M., Sealfon S.C. Cytokine response is determined by duration of receptor and signal transducers and activators of transcription 3 (STAT3) activation // J. Biol. Chem. 2013. T. 288. № 5. C. 2986-2993.

49. Brinke A. Ten h gp. «Refractory» eosinophilic airway inflammation in severe asthma: Effect of parenteral corticosteroids // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2004. T. 170. № 6. C. 601-605.

50. Brosius F.C., Tuttle K.R., Kretzler M. JAK inhibition in the treatment of diabetic kidney disease // Diabetologia. 2016. T. 59. № 8. C. 1624-1627.

51. Brown G.D. Innate antifungal immunity: The key role of phagocytes // Annu. Rev. Immunol. 2011. T. 29. № 1. C. 1-21.

52. Bullens D.M. h gp. IL-17 mRNA in sputum of asthmatic patients: linking T cell driven inflammation and granulocytic influx? // Respir. Res. 2006. T. 7. № 135. C. 1-9.

53. Busse W.W. h gp. Randomized, double-blind, placebo-controlled study of Brodalumab, a human anti-IL-17 receptor monoclonal antibody, in moderate to severe asthma // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2013. T. 188. № 11. C. 1294-1302.

54. Cahill K.N. h gp. KIT inhibition by imatinib in patients with severe refractory asthma // N. Engl. J. Med. 2017. T. 376. № 20. C. 1911-1920.

55. Camp J.V., Jonsson C.B. A Role for Neutrophils in Viral Respiratory Disease // Front. Immunol. 2017. T. 8. № 550. C. 1-17.

56. Cervilha D.A.B. h gp. The Th17/Treg cytokine imbalance in chronic obstructive pulmonary disease exacerbation in an animal model of cigarette smoke exposure and lipopolysaccharide challenge association // Sci. Rep. 2019. T. 9. № 1. C. 1921.

57. Chambers E.S. h gp. Distinct endotypes of steroid-resistant asthma characterized by IL-17Ahigh and IFN-yhigh immunophenotypes: Potential benefits of calcitriol // J. Allergy Clin. Immunol. 2015. T. 136. № 3. C. 628- 637.e4.

58. Chang H.S. h gp. Neutrophilic inflammation in asthma: mechanisms and therapeutic considerations // Expert Rev. Respir. Med. 2017.

59. Chang Y. h gp. Th17-associated cytokines promote human airway smooth muscle cell proliferation // FASEB J. 2012. T. 26. № 12. C. 5152-5160.

60. Chaudhry A. h gp. CD4+ regulatory T cells control Th17 responses in a STAT3-dependent manner // Science. 2009. T. 326. № 5955. C. 986-991.

61. Chen M. h gp. Cytokine signaling protein 3 deficiency in myeloid cells promotes retinal degeneration and angiogenesis through arginase-1 up-regulation in

experimental autoimmune uveoretinitis // Am. J. Pathol. 2018. T. 188. N° 4. C. 10071020.

62. Chen Q. h gp. Targeted inhibition of STAT3 as a potential treatment strategy for atherosclerosis // Theranostics. 2019. T. 9. № 22. C. 6424-6442.

63. Choi Y.H. h gp. Silibinin attenuates allergic airway inflammation in mice // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2012. T. 427. № 3. C. 450-455.

64. Chong L. h gp. Protective effect of Curcumin on acute airway inflammation of allergic asthma in mice through Notch1-GATA3 signaling pathway // Inflammation. 2014. T. 37. № 5. C. 1476-1485.

65. Chu D.K. h gp. Therapeutic potential of anti-IL-6 therapies for granulocytic airway inflammation in asthma // Allergy, Asthma Clin. Immunol. 2015. T. 11. № 14. C. 1-6.

66. Chung C.D. h gp. Specific inhibition of Stat3 signal transduction by PIAS3 // Science. 1997. T. 278. № 5344. C. 1803-1805.

67. Cowan D.C. h gp. Effects of steroid therapy on inflammatory cell subtypes in asthma // Thorax. 2010. T. 65. № 5. C. 384-390.

68. Dejager L. h gp. Neutralizing TNFa restores glucocorticoid sensitivity in a mouse model of neutrophilic airway inflammation // Mucosal Immunol. 2015. T. 8. № January. C. 1-14.

69. Demarche S. h gp. Step-down of inhaled corticosteroids in non-eosinophilic asthma: A prospective trial in real life // Clin. Exp. Allergy. 2018. T. 48. № 5. C. 525-535.

70. Deshayes S. h gp. Peptide-mediated delivery of nucleic acids into mammalian cells. // Methods Mol. Biol. 2007. T. 386. № 3. C. 299-308.

71. Diehl S.A. h gp. IL-6 Triggers IL-21 production by human CD4 + T cells to drive STAT3-dependent plasma cell differentiation in B cells // Immunol. Cell Biol. 2012. T. 90. № 8. C. 802-811.

72. Diveu C. h gp. IL-27 blocks RORc expression to inhibit lineage commitment of Th17 cells // J. Immunol. 2009. T. 182. № 9. C. 5748-5756.

73. Doherty T.A., Broide D.H. Airway innate lymphoid cells in the induction and regulation of allergy // Allergol. Int. 2019. T. 68. № 1. C. 9-16.

74. Don-Doncow N. h gp. Galiellalactone is a direct inhibitor of the transcription factor STAT3 in prostate cancer cells // J. Biol. Chem. 2014. T. 289. № 23. C. 15969-15978.

75. Doran E. h gp. Interleukin-13 in Asthma and Other Eosinophilic Disorders // Front. Med. 2017. T. 4. № 139. C. 1-14.

76. Druilhe A., Létuvé S., Pretolani M. Glucocorticoid-induced apoptosis in human eosinophils: Mechanisms of action // Apoptosis. 2003. T. 8. № 5. C. 481495.

77. Duvall M.G. h gp. Natural killer cell-mediated inflammation resolution is disabled in severe asthma // Sci. Immunol. 2017. T. 2. № 9. C. 1-23.

78. Eggimann G.A. h gp. Designed cell penetrating peptide dendrimers efficiently internalize cargo into cells. // Chem. Commun. (Camb). 2014. T. 50. № 55. C. 7254-7.

79. Fitzpatrick A.M. h gp. Heterogeneity of severe asthma in childhood: Confirmation by cluster analysis of children in the National Institutes of Health/National Heart, Lung, and Blood Institute Severe Asthma Research Program // J. Allergy Clin. Immunol. 2011. T. 127. № 2. C. 382- 389.e13.

80. Ford A.Q. h gp. Adoptive transfer of IL-4Ra+ macrophages is sufficient to enhance eosinophilic inflammation in a mouse model of allergic lung inflammation // BMC Immunol. 2012. T. 13. № 1. C. 6.

81. Fulton A. h gp. Effective treatment of respiratory alphaherpesvirus infection using RNA interference // PLoS One. 2009. T. 4. № 1.

82. Gao J., Wu F. Association between fractional exhaled nitric oxide, sputum induction and peripheral blood eosinophil in uncontrolled asthma // Allergy, Asthma Clin. Immunol. 2018. T. 14. № 21. C. 1-9.

83. Gavino A.C. h gp. STAT3 inhibition prevents lung inflammation, remodeling, and accumulation of Th2 and Th17 cells in a murine asthma model // Allergy Eur. J. Allergy Clin. Immunol. 2016. T. 71. № 12. C. 1684-1692.

84. Geall A.J. h gp. Nonviral delivery of self-amplifying RNA vaccines. // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2012. T. 109. № 36. C. 14604-9.

85. Gharibi T. h gp. Targeting STAT3 in cancer and autoimmune diseases // Eur. J. Pharmacol. 2020. T. 878. C. 173107.

86. Ghosn B. h gp. Efficient gene silencing in lungs and liver using imidazole-modified chitosan as a nanocarrier for small interfering RNA // Oligonucleotides. 2010. T. 20. C. 163-172.

87. Gibson P.G. h gp. Effect of azithromycin on asthma exacerbations and quality of life in adults with persistent uncontrolled asthma (AMAZES): a randomised, double-blind, placebo-controlled trial // Lancet. 2017. T. 390. № 10095. C. 659-668.

88. Gibson P.G., Simpson J.L., Saltos N. Heterogeneity of airway inflammation in persistent asthma: evidence of neutrophilic inflammation and increased sputum interleukin-8. // Chest. 2001. T. 119. № 5. C. 1329-36.

89. Gioia S.Di, Conese M. Polyethylenimine-mediated gene delivery to the lung and therapeutic applications // Drug Des. Devel. Ther. 2008. № 2. C. 163-188.

90. Girodet P.-O. h gp. Alternative macrophage activation is increased in asthma // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2016. T. 55. № 4. C. 467-475.

91. Gjurich B. h gp. L-selectin deficiency decreases aortic B1a and Breg subsets and promotes atherosclerosis // Thromb. Haemost. 2014. T. 112. № 10. C. 803-811.

92. Goula D. h gp. Polyethylenimine-based intravenous delivery of transgenes to mouse lung. // Gene Ther. 1998. T. 5. № 9. C. 1291-1295.

93. Grayson M.H. h gp. Advances in asthma in 2017: Mechanisms, biologics, and genetics // J. Allergy Clin. Immunol. 2018. T. 142. № 5. C. 14231436.

94. Gutbier B. h gp. RNAi-mediated suppression of constitutive pulmonary gene expression by small interfering RNA in mice // Pulm. Pharmacol. Ther. 2010. T. 23. № 4. C. 334-344.

95. Halwani R. h gp. Th-17 regulatory cytokines IL-21, IL-23, and IL-6 enhance neutrophil production of IL-17 cytokines during asthma // J. Asthma. 2017. T. 54. № 9. C. 893-904.

96. Hassani M., Koenderman L. Immunological and hematological effects of IL-5(Ra)-targeted therapy: An overview // Allergy Eur. J. Allergy Clin. Immunol. 2018. T. 73. № 10. C. 1979-1988.

97. Hastie A.T. h gp. Analyses of asthma severity phenotypes and inflammatory proteins in subjects stratified by sputum granulocytes // J. Allergy Clin. Immunol. 2010. T. 125. № 5. C. 1028- 1036.e13.

98. Hausding M. h gp. Induction of tolerogenic lung CD4+ T cells by local treatment with a pSTAT-3 and pSTAT-5 inhibitor ameliorated experimental allergic asthma // Int. Immunol. 2011. T. 23. № 1. C. 1-15.

99. Hekking P.P. h gp. Pathway discovery using transcriptomic profiles in adult-onset severe asthma // J. Allergy Clin. Immunol. 2018. T. 141. № 4. C. 12801290.

100. Hendrickson B. h gp. Development of lentiviral vectors with regulated respiratory epithelial expression in vivo // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2007. T. 37. № 4. C. 414-423.

101. Hernandez M.L. h gp. IL-1 receptor antagonist reduces endotoxin-induced airway inflammation in healthy volunteers // J. Allergy Clin. Immunol. 2015. T. 135. № 2. C. 379-385.

102. Hillmer E.J. h gp. STAT3 signaling in immunity // Cytokine Growth Factor Rev. 2016. T. 31. C. 1-15.

103. Howard K. h gp. RNA interference in vitro and in vivo using a novel chitosan/siRNA nanoparticle system. // Mol. Ther. 2006. T. 14. № 4. C. 476-484.

104. Huang X.P., Qin C.Y., Gao Y.M. miR-135a inhibits airway inflammatory response in asthmatic mice via regulating JAK/STAT signaling pathway // Brazilian J. Med. Biol. Res. 2021. T. 54. № 3. C. 1-10.

105. Ikramy A.K. h gp. Uptake pathways and subsequent intracellular trafficking in nonviral gene delivery // Pharmacol. Rev. 2006. T. 58. № 1. C. 32-45.

106. Ito K. h gp. Steroid-resistant neutrophilic inflammation in a mouse model of an acute exacerbation of asthma // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2008. T. 39. № 5. C. 543-550.

107. Jayaram L. h gp. Determining asthma treatment by monitoring sputum cell counts: Effect on exacerbations // Eur. Respir. J. 2006. T. 27. № 3. C. 483-494.

108. Jen R., Rennard S.I., Sin D.D. Effects of inhaled corticosteroids on airway inflammation in chronic obstructive pulmonary disease: a systematic review and meta-analysis. // Int. J. Chron. Obstruct. Pulmon. Dis. 2012. T. 7. C. 587-95.

109. Jiang Z. h gp. Lack of SOCS3 increases LPS-induced murine acute lung injury through modulation of Ly6C(+) macrophages // Respir. Res. 2017. T. 18. № 217. C. 1-14.

110. Juliano R.L. The delivery of therapeutic oligonucleotides // Nucleic Acids Res. 2016.

111. Kato T. h gp. Inhibition by dexamethasone of human neutrophil apoptosis in vitro. // Nat. Immun. 1995. T. 14. № 4. C. 198-208.

112. Kay M.A., Glorioso J.C., Naldini L. Viral vectors for gene therapy: the art of turning infectious agents into vehicles of therapeutics // Nat. Med. 2001. T. 7. № 1. C. 33-40.

113. Kelley N. h gp. The NLRP3 inflammasome: An overview of mechanisms of activation and regulation // Int. J. Mol. Sci. 2019. T. 20. N° 13. C. 124.

114. Kershaw N.J. h gp. SOCS3 binds specific receptor-JAK complexes to control cytokine signaling by direct kinase inhibition // Nat. Struct. Mol. Biol. 2013. T. 20. № 4. C. 469-476.

115. Khare A. h gp. Cutting edge: Inhaled antigen upregulates Retinaldehyde dehydrogenase in lung CD103+ but not plasmacytoid dendritic cells to induce Foxp3 de novo in CD4+ T cells and promote airway tolerance // J. Immunol. 2013. T. 191. № 1. C. 25-29.

116. Kim D.J., Tremblay M.L., DiGiovanni J. Protein tyrosine phosphatases, TC-PTP, SHP1, and SHP2, cooperate in rapid dephosphorylation of Stat3 in keratinocytes following UVB irradiation // PLoS One. 2010. T. 5. № 4. C. 1-11.

117. Knudsen N.P.H. h gp. Different human vaccine adjuvants promote distinct antigen-independent immunological signatures tailored to different pathogens // Sci. Rep. 2016. T. 6. C. 19570.

118. Kootstra N.A., Verma I.M. Gene therapy with viral vectors. // Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2003. T. 43. C. 413-39.

119. Kozhikhova K.V h gp. A novel peptide dendrimer LTP efficiently facilitates transfection of mammalian cells. // Org. Biomol. Chem. 2018. T. 16. № 43. C. 8181-8190.

120. Leaker B.R., Barnes P.J., O'Connor B. Inhibition of LPS-induced airway neutrophilic inflammation in healthy volunteers with an oral CXCR2 antagonist // Respir. Res. 2013. T. 14. № 137. C. 1-9.

121. Lee B.K. h gp. Anti-allergic effects of sesquiterpene lactones from Saussurea costus (Falc.) Lipsch. determined using in vivo and in vitro experiments // J. Ethnopharmacol. 2018. T. 213. C. 256-261.

122. Lee C.-C., Huang H.-Y., Chiang B.-L. Lentiviral-mediated interleukin-4 and interleukin-13 RNA interference decrease airway inflammation and hyperresponsiveness. // Hum. Gene Ther. 2011. T. 22. № 5. C. 577-86.

123. Lehto T., Kurrikoff K., Langel U. Cell-penetrating peptides for the delivery of nucleic acids. // Expert Opin. Drug Deliv. 2012. T. 9. № 7. C. 823-36.

124. Li B. h gp. Using siRNA in prophylactic and therapeutic regimens against SARS coronavirus in Rhesus macaque. // Nat. Med. 2005. T. 11. № 9. C. 944-51.

125. Li R.F., Wang G.F. JAK/STAT5 signaling pathway inhibitor ruxolitinib reduces airway inflammation of neutrophilic asthma in mice model // Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci. 2018. T. 22. № 3. C. 835-843.

126. Liang Y. h gp. Elevated IL-33 promotes expression of MMP2 and MMP9 via activating STAT3 in alveolar macrophages during LPS-induced acute lung injury // Cell. Mol. Biol. Lett. 2018. T. 23. № 1. C. 52.

127. Lim H. h gp. Dynamic control of Th2 cell responses by STAT3 during allergic lung inflammation in mice // Int. Immunopharmacol. 2015. T. 28. № 2. C. 846-853.

128. Liu D. h gp. Th17/IL-17 axis regulated by airway microbes get involved in the development of asthma // Curr. Allergy Asthma Rep. 2020. T. 20. № 11. C. 1-9.

129. Liu Q. h gp. JAK2/STAT1-mediated HMGB1 translocation increases inflammation and cell death in a ventilator-induced lung injury model // Lab. Investig. 2019. T. 99. № 12. C. 1810-1821.

130. Liu W. h gp. Mechanism of TH2/TH17-predominant and neutrophilic TH2/TH17-low subtypes of asthma // J. Allergy Clin. Immunol. 2017. T. 139. № 5. C. 1548-1558.

131. Liu X. h gp. Loss of STAT3 in CD4 + T cells prevents development of experimental autoimmune diseases // J. Immunol. 2008. T. 180. N° 9. C. 6070-6076.

132. Liu X. ming h gp. Effects of Ligustrazine on Airway Inflammation in A Mouse Model of Neutrophilic Asthma // Chin. J. Integr. Med. 2018a.

133. Liu Y. h gp. The natural polyphenol curcumin induces apoptosis by suppressing STAT3 signaling in esophageal squamous cell carcinoma // J. Exp. Clin. Cancer Res. 2018b. T. 37. № 1. C. 1-12.

134. Lu C. h gp. Piperlongumine reduces ovalbumin-induced asthma and airway inflammation by regulating nuclear factor-KB activation // Int. J. Mol. Med. 2019. T. 44. № 5. C. 1855-1865.

135. Lu D. h gp. IL-27 suppresses airway inflammation, hyperresponsiveness and remodeling via the STAT1 and STAT3 pathways in mice with allergic asthma // Int. J. Mol. Med. 2020a. T. 46. № 2. C. 641-652.

136. Lu H.C. h gp. STAT3 signaling in myeloid cells promotes pathogenic myelin-specific T cell differentiation and autoimmune demyelination // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2020b. T. 117. № 10. C. 5430-5441.

137. Mangan P.R. h gp. Transforming growth factor-P induces development of the TH17 lineage // Nature. 2006. T. 441. № 7090. C. 231-234.

138. Marino F. h gp. STAT3P controls inflammatory responses and early tumor onset in skin and colon experimental cancer models // Am. J. Cancer Res. 2014. T. 4. № 5. C. 484-94.

139. Matsukawa A. h gp. Aberrant inflammation and lethality to septic peritonitis in mice lacking STAT3 in macrophages and neutrophils // J. Immunol. 2003. T. 171. № 11. C. 6198-6205.

140. Melillo J.A. h gp. Dendritic cell (DC)-specific targeting reveals Stat3 as a negative regulator of DC function // J. Immunol. 2010. T. 184. № 5. C. 26382645.

141. Meltzer E.O. h gp. Roflumilast for asthma: Efficacy findings in placebo-controlled studies // Pulm. Pharmacol. Ther. 2015. T. 35. C. S20-S27.

142. Merkel O.M. h gp. Nonviral siRNA delivery to the lung: Investigation of PEG-PEI polyplexes and their in vivo performance // Mol. Pharm. 2009. T. 6. № 4. C. 1246-1260.

143. Milner J.D. h gp. Early-onset lymphoproliferation and autoimmunity caused by germline STAT3 gain-of-function mutations // Blood. 2015. T. 125. № 4. C. 591-599.

144. Miyajima I. h gp. Systemic anaphylaxis in the mouse can be mediated largely through IgG1 and Fc gammaRIII. Assessment of the cardiopulmonary changes, mast cell degranulation, and death associated with active or IgE- or IgG1-dependent passive anaphylaxis. // J. Clin. Invest. 1997. T. 99. № 5. C. 901-14.

145. Mohrherr J. h gp. STAT3: Versatile functions in non-Small cell lung cancer // Cancers (Basel). 2020. T. 12. № 5. C. 1107.

146. Moore W.C. h gp. Identification of asthma phenotypes using cluster analysis in the severe asthma research program // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2010. T. 181. № 4. C. 315-323.

147. Moore W.C. h gp. Sputum neutrophil counts are associated with more severe asthma phenotypes using cluster analysis // J. Allergy Clin. Immunol. 2014. T. 133. № 6. C. 1557- 1563.e5.

148. Morishima Y. h gp. Th17-Associated Cytokines as a Therapeutic Target for Steroid-Insensitive Asthma // Clin. Dev. Immunol. 2013. T. 2013. C. 19.

149. Morlacchi P. h gp. Targeting SH2 domains in breast cancer // Future Med. Chem. 2014. T. 6. № 17. C. 1909-1926.

150. Mullane K., Williams M. Animal models of asthma: Reprise or reboot? // Biochem. Pharmacol. 2014. T. 87. № 1. C. 131-139.

151. Nair P. h gp. Safety and efficacy of a CXCR2 antagonist in patients with severe asthma and sputum neutrophils: A randomized, placebo-controlled clinical trial // Clin. Exp. Allergy. 2012. T. 42. № 7. C. 1097-1103.

152. Nakagome K., Matsushita S., Nagata M. Neutrophilic inflammation in severe asthma // International Archives of Allergy and Immunology. 2012. C. 96102.

153. Nakamura R. h gp. IL10-driven STAT3 signalling in senescent macrophages promotes pathological eye angiogenesis // Nat. Commun. 2015. T. 6. C. 1-14.

154. Newcomb D.C., Peebles R.S. Th17-mediated inflammation in asthma // Curr. Opin. Immunol. 2013.

155. Nguyen-Jackson H. h gp. STAT3 controls the neutrophil migratory response to CXCR2 ligands by direct activation of G-CSF-induced CXCR2 expression and via modulation of CXCR2 signal transduction // Blood. 2010. T. 115. № 16. C. 3354-3363.

156. Nguyen J., Szoka F.C. Nucleic acid delivery: the missing pieces of the puzzle? // Acc. Chem. Res. 2012. T. 45. № 7. C. 1153-1162.

157. Nguyen T.H. h gp. TNF-a and macrophages are critical for respiratory syncytial virus-induced exacerbations in a mouse model of allergic airways disease // J. Immunol. 2016. T. 196. № 9. C. 3547-3558.

158. Nieuwenhuizen N.E. h gp. Allergic airway disease is unaffected by the absence of IL-4Ra-dependent alternatively activated macrophages // J. Allergy Clin. Immunol. 2012. T. 130. № 3. C. 743- 750.e8.

159. Niu G. h gp. Gene therapy with dominant-negative Stat3 suppresses growth of the murine melanoma B16 tumor in vivo // Cancer Res. 1999. T. 59. № 20. C. 5059-5063.

160. Norimoto A. h gp. Dectin-2 promotes house dust mite-induced T helper type 2 and type 17 cell differentiation and allergic airway inflammation in mice // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2014. T. 51. № 2. C. 201-209.

161. O'Byrne P.M. h gp. Efficacy and safety of a CXCR2 antagonist, AZD5069, in patients with uncontrolled persistent asthma: a randomised, doubleblind, placebo-controlled trial // Lancet Respir. Med. 2016. T. 4. № 10. C. 797-806.

162. Oettgen H.C. h gp. Active anaphylaxis in IgE-deficient mice. // Nature. 1994. T. 370. № 6488. C. 367-70.

163. Openshaw P.J.M. h gp. Protective and harmful immunity to RSV infection // Annu. Rev. Immunol. 2017. T. 35. № 1. C. 501-532.

164. Parker J.M. h gp. Safety profile and clinical activity of multiple subcutaneous doses of MEDI-528, a humanized anti-interleukin-9 monoclonal antibody, in two randomized phase 2a studies in subjects with asthma // BMC Pulm. Med. 2011. T. 11. № 14. C. 1-10.

165. Paul B. h gp. Status of STAT3 in an ovalbumin-induced mouse model of asthma: Analysis of the role of SOCS3 and IL-6 // Int. Arch. Allergy Immunol. 2009. T. 148. № 2. C. 99-108.

166. Pelletier M. h gp. Evidence for a cross-talk between human neutrophils and Th17 cells // Blood. 2010. T. 115. № 2. C. 335-343.

167. Pencik J. h gp. STAT3 regulated ARF expression suppresses prostate cancer metastasis // Nat. Commun. 2015. T. 6. № 7736. C. 1-14.

168. Perl M. h gp. Silencing of Fas, but not caspase-8, in lung epithelial cells ameliorates pulmonary apoptosis, inflammation, and neutrophil influx after hemorrhagic shock and sepsis. // Am. J. Pathol. 2005. T. 167. № 6. C. 1545-1559.

169. Peters M.C. h gp. Plasma interleukin-6 concentrations, metabolic dysfunction, and asthma severity: a cross-sectional analysis of two cohorts // Lancet Respir. Med. 2016. T. 4. № 7. C. 574-584.

170. Pichavant M. h gp. Animal models of airway sensitization. // Curr. Protoc. Immunol. 2007. T. Chapter 15. C. Unit 15.18.

171. Polosa R., Thomson N.C. Smoking and asthma: Dangerous liaisons // Eur. Respir. J. 2013. T. 41. № 3. C. 716-725.

172. Qi H. h gp. STAT3 activates MSK1-mediated histone H3 phosphorylation to promote NFAT signaling in gastric carcinogenesis // Oncogenesis. 2020. T. 9. № 15. C. 1-16.

173. Qin H. h gp. SOCS3 deficiency promotes M1 macrophage polarization and inflammation // J. Immunol. 2012. T. 189. № 7. C. 3439-3448.

174. Rabe K.F. h gp. Effect of roflumilast in patients with severe COPD and a history of hospitalisation // Eur. Respir. J. 2017. T. 50. № 1700158. C. 1-4.

175. Raundhal M. h gp. High IFN-y and low SLPI mark severe asthma in mice and humans // J. Clin. Invest. 2015. T. 125. № 8. C. 3037-3050.

176. Ray A., Kolls J.K. Neutrophilic Inflammation in Asthma and Association with Disease Severity // Trends Immunol. 2017. T. 38. № 12. C. 942954.

177. Ricciardolo F.L.M. h gp. Identification of IL-17F/frequent exacerbator endotype in asthma // J. Allergy Clin. Immunol. 2017. T. 140. № 2. C. 395-406.

178. Rosas-Taraco A.G. h gp. Intrapulmonary delivery of XCL1-targeting small interfering RNA in mice chronically infected with Mycobacterium tuberculosis // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2009. T. 41. № 2. C. 136-145.

179. Ruwanpura S.M. h gp. IL-6/Stat3-driven pulmonary inflammation, but not emphysema, is dependent on interleukin-17A in mice // Respirology. 2014. T. 19. № 3. C. 419-427.

180. Saradna A. h gp. Macrophage polarization and allergic asthma // Transl. Res. 2018. T. 191. C. 1-14.

181. Sarkar G. h gp. Peptide carrier-mediated non-covalent delivery of unmodified cisplatin, methotrexate and other agents via intravenous route to the brain // PLoS One. 2014. T. 9. № 5.

182. Schmit T. h gp. IL-6 deficiency exacerbates allergic asthma and abrogates the protective effect of allergic inflammation against Streptococcus pneumoniae pathogenesis // J. Immunol. 2020. T. 205. № 2. C. 469-479.

183. Scott H.A. h gp. Airway inflammation is augmented by obesity and fatty acids in asthma // Eur. Respir. J. 2011. T. 38. № 3. C. 594-602.

184. Senoo T. h gp. Suppression of plasminogen activator inhibitor-1 by RNA interference attenuates pulmonary fibrosis // Thorax. 2010. T. 65. № 4. C. 334340.

185. Serrano C. h gp. Compartmentalized response of IL-6/STAT3 signaling in the colonic mucosa mediates colitis development // J. Immunol. 2019. T. 202. № 4. C. 1239-1249.

186. Sharma N., Akkoyunlu M., Rabin R. L. Macrophages—common culprit in obesity and asthma // Allergy. 2018. T. 73. № 6. C. 1196-1205.

187. Shi Y. h gp. Naringenin inhibits allergen-induced airway remodeling in a murine model of asthma // Mol. Med. Rep. 2014. T. 9. № 4. C. 1204-1208.

188. Shilovskiy I.P. h gp. Adjuvant and adjuvant-free protocols produce similar phenotypes of allergic asthma in mice // Curr. Trends Immunol. 2015. T. 16. C. 79-91.

189. Shilovskiy I.P. h gp. Experimental protocol for development of adjuvant-free murine chronic model of allergic asthma // J. Immunol. Methods. 2019. T. 468. № March. C. 10-19.

190. Shilovskiy Igor P. h gp. Murine model of steroid-resistant neutrophilic bronchial asthma as an attempt to simulate human pathology // J. Immunol. Methods. 2022. T. 505. C. 113268.

191. Shin Y.S., Takeda K., Gelfand E.W. Understanding asthma using animal models // Allergy, Asthma Immunol. Res. 2009. T. 1. № 1. C. 10-18.

192. Simeone-Penney M.C. h gp. Airway epithelial STAT3 is required for allergic inflammation in a murine model of asthma // J. Immunol. 2007. T. 178. № 10. C. 6191-6199.

193. Simpson J.L. h gp. Clarithromycin targets neutrophilic airway inflammation in refractory asthma // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2008. T. 177. № 2. C. 148-155.

194. Simpson J.L. h gp. Elevated expression of the NLRP3 inflammasome in neutrophilic asthma // Eur. Respir. J. 2014. T. 43. № 4. C. 1067-1076.

195. Simpson J.L. h gp. Airway dysbiosis: Haemophilus influenzae and Tropheryma in poorly controlled asthma // Eur. Respir. J. 2016. T. 47. № 3. C. 792800.

196. Solun B., Shoenfeld Y. Inhibition of metalloproteinases in therapy for severe lung injury due to COVID-19 // Med. Drug Discov. 2020. T. 7. C. 100052.

197. Steinke J.W., Borish L. Th2 cytokines and asthma. Interleukin-4: its role in the pathogenesis of asthma, and targeting it for asthma treatment with interleukin-4 receptor antagonists. // Respir. Res. 2001. T. 2. № 2. C. 66-70.

198. Stritesky G.L. h gp. The transcription factor STAT3 Is required for T helper 2 cell development // Immunity. 2011. T. 34. № 1. C. 39-49.

199. Szelag M. h gp. Targeted inhibition of STATs and IRFs as a potential treatment strategy in cardiovascular disease // Oncotarget. 2016. T. 7. № 30. C. 48788-48812.

200. Tan H.T.T. h gp. Tight junction, mucin, and inflammasome-related molecules are differentially expressed in eosinophilic, mixed, and neutrophilic experimental asthma in mice // Allergy Eur. J. Allergy Clin. Immunol. 2019. T. 74. № 2. C. 294-307.

201. Tiscornia G. h gp. A general method for gene knockdown in mice by using lentiviral vectors expressing small interfering RNA. // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2003. T. 100. № 4. C. 1844-8.

202. Tolomeo M., Cascio A. The multifaced role of STAT3 in cancer and its implication for anticancer therapy // Int. J. Mol. Sci. 2021. T. 22. № 2. C. 603.

203. Torjusen E., Matsui E.C. TH17 cells mediate steroid-resistant airway inflammation and airway hyperresponsiveness in mice // Pediatrics. 2009. T. 124. C. 140.

204. Tsai C.F., Chen J.H., Yeh W.L. Pulmonary fibroblasts-secreted CXCL10 polarizes alveolar macrophages under pro-inflammatory stimuli // Toxicol. Appl. Pharmacol. 2019. T. 380. C. 114698.

205. Veen I.H. van h gp. Consistency of sputum eosinophilia in difficult-to-treat asthma: A 5-year follow-up study // J. Allergy Clin. Immunol. 2009. T. 124. № 3. C. 615- 617.e2.

206. Veldhoen S., Laufer S.D., Restle T. Recent developments in peptide-based nucleic acid delivery // Int. J. Mol. Sci. 2008. T. 9. № 7. C. 1276-1320.

207. Wang Q. h gp. The overexpression of heparin-binding epidermal growth factor is responsible for Th17-Induced airway remodeling in an experimental asthma model // J. Immunol. 2010. T. 185. № 2. C. 834-841.

208. Wang R.-X. h gp. Interleukin-35 induces regulatory B cells that suppress autoimmune disease // Nat. Med. 2014. T. 20. № 6. C. 633-641.

209. Watz H. h gp. Inhaled pan-selectin antagonist Bimosiamose attenuates airway inflammation in COPD // Pulm. Pharmacol. Ther. 2013. T. 26. № 2. C. 265270.

210. Wei Z. h gp. The IL-6/STAT3 pathway regulates adhesion molecules and cytoskeleton of endothelial cells in thromboangiitis obliterans // Cell. Signal. 2018. T. 44. C. 118-126.

211. Weidler M. h gp. Inhibition of interleukin-6 signaling by galiellalactone // FEBS Lett. 2000. T. 484. № 1. C. 1-6.

212. Wenzel S.E. h gp. Evidence that severe asthma can be divided pathologically into two inflammatory subtypes with distinct physiologic and clinical characteristics // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1999. T. 160. № 3. C. 1001-1008.

213. Wenzel S.E. Asthma phenotypes: The evolution from clinical to molecular approaches // Nat. Med. 2012. T. 18. № 5. C. 716-725.

214. Wiejak J. h gp. Flavanoids induce expression of the suppressor of cytokine signalling 3 (SOCS3) gene and suppress IL-6-activated signal transducer and activator of transcription 3 (STAT3) activation in vascular endothelial cells // Biochem. J. 2013. T. 454. № 2. C. 283-293.

215. Woolley K.L. h gp. Eosinophil apoptosis and the resolution of airway inflammation in asthma // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1996. T. 154. № 1. C. 237243.

216. Worsham D.N. h gp. In Vivo Gene Transfer into Adult Stem Cells in Unconditioned Mice by in Situ Delivery of a Lentiviral Vector // Mol. Ther. 2006. T. 14. № 4. C. 514-524.

217. Wu S.Y., McMillan N.J. Lipidic systems for in vivo siRNA delivery. // AAPS J. 2009. T. 11. № 4. C. 639-652.

218. Wu W. h gp. Unsupervised phenotyping of Severe Asthma Research Program participants using expanded lung data // J. Allergy Clin. Immunol. 2014. T. 133. № 5. C. 1280-1288.

219. Xu L. h gp. MBD2 regulates differentiation and function of Th17 cells in neutrophils- dominant asthma via HIF- 1a // J. Inflamm. (United Kingdom). 2018. T. 15. № 1. C. 1-12.

220. Yagami A. h gp. IL-33 mediates inflammatory responses in human lung tissue cells. // J. Immunol. 2010. T. 185. № 10. C. 5743-5750.

221. Yang J. h gp. Unphosphorylated STAT3 accumulates in response to IL-6 and activates transcription by binding to NFkB // Genes Dev. 2007. T. 21. № 11. C. 1396-1408.

222. Yoneyama H. h gp. Pivotal role of dendritic cell-derived CXCL10 in the retention of T helper cell 1 lymphocytes in secondary lymph nodes // J. Exp. Med. 2002. T. 195. № 10. C. 1257-1266.

223. Younis U.S. h gp. Preformulation and evaluation of Tofacitinib as a therapeutic treatment for asthma // AAPS PharmSciTech. 2019. T. 20. № 5. C. 123.

224. Yu L. ming h gp. Melatonin protects diabetic heart against ischemia-reperfusion injury, role of membrane receptor-dependent cGMP-PKG activation // Biochim. Biophys. Acta - Mol. Basis Dis. 2018. T. 1864. № 2. C. 563-578.

225. Zhang X. h gp. Small Interfering RNA Targeting Heme Oxygenase-1 Enhances Ischemia-Reperfusion-induced Lung Apoptosis // J. Biol. Chem. 2004. T. 279. № 11. C. 10677-10684.

226. Zhang Y. h gp. IL33/ST2 contributes to airway remodeling via p-JNK MAPK/STAT3 signaling pathway in OVA-induced allergic airway inflammation in mice // Exp. Lung Res. 2019. T. 45. № 3-4. C. 65-75.

227. Zhao J. h gp. Protective effect of suppressing STAT3 activity in LPS-induced acute lung injury // Am. J. Physiol. Cell. Mol. Physiol. 2016. T. 311. № 5. C. 868-880.

228. Zou X.L. h gp. Th17/Treg homeostasis, but not Th1/Th2 homeostasis, is implicated in exacerbation of human bronchial asthma // Ther. Clin. Risk Manag. 2018. T. 14. C. 1627-1636.