Ресурсы медицинской пиявки (Hirudo medicinalis L.) в акваториях Западного Предкавказья и их рациональное использование тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.32, кандидат биологических наук Каменев, Олег Юрьевич

• Каменев, Олег Юрьевич
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Каменев, Олег Юрьевич

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1 ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1 Распространение медицинской пиявки и методы ее количественной оценки.

1.1.1 Распространение медицинской пиявки.

1.1.2 Методы оценки численности медицинской пиявки.

1.2 Некоторые аспекты физиологии медицинской пиявки значимые для ее использования.

1.3 Применение медицинской пиявки человеком.

Глава 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1 Характеристика исследуемой формы медицинской пиявки {Hirudo medicinalis officinalis).

2.2 Природно-климатическая характеристика Западного Предкавказья.

2.3 Разработка методики оценки запасов медицинской пиявки.

2.4 Метод изучения химического состава секрета слюнных желез медицинской пиявки.

2.5 Метод изучения влияния токсичных веществ на медицинскую пиявку.

Глава 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1 Оценка и динамика ресурсов медицинской пиявки в акваториях Западного Предкавказья.

3.2 Влияние токсичных веществ на выживание медицинской пиявки.

3.3 .Пути сохранения ресурсов медицинской пиявки и ее рационального использования.

3.3.1 Рекомендации по сохранению и использованию ресурсов медицинской пиявки.

3.3.2 Совершенствование технологии искусственного разведения пиявки с целью сохранения её запасов.

3.3.3 Использование медицинской пиявки как тест-объекта загрязнения водной среды.

3.3.4 Рекомендации к применению Hirudo medicinalis в медицине в связи с особенностями физиологии ее питания. ^

3.3.5 Рациональное использование пиявок в процессе получения биологически активной добавки для косметических и лечебных средств.

ВЫВОДЫ.

РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Ресурсы медицинской пиявки (Hirudo medicinalis L.) в акваториях Западного Предкавказья и их рациональное использование»

Одним из значимых биологических ресурсов является пиявка медицинская Hirudo medicinalis L. Эти гидробионты особенно важны для медицинской практики, пиявка свыше 35 веков активно используется человеком как лечебное средство.

В последние три десятилетия наблюдается неуклонный рост интереса к методам традиционной медицины. Особенно велик он в отношении лечения пиявками (трудотерапии). В последние годы проводятся исследования различных полученных из тканей пиявок веществ, которые влияют на свертываемость крови и обменные процессы в организме человека. Пиявки также представляют большой интерес как сырье для получения лекарственных препаратов, пищевых биологических добавок (БАД) и косметических средств. Потенциальным источником ресурсов пиявок являются лов дикой пиявки и искусственное ее разведение на биофабриках или фермах. Искусственно выращенная пиявка отличается от дикой, то есть выловленной в естественных водоемах, физиологическими (меньшей агрессивностью, подвижностью), биохимическими (более высоким содержанием липидов, антиоксидантов и др. веществ), микробиологическими (бактериальная обсемененность) показателями. Указанные особенности пиявок могут определять качественные показатели производимых из них лекарственных препаратов. Искусственно выращенная пиявка может быть использована в промышленной переработке, в медицинских целях, а также для восполнения природной популяции путем замены выловленных особей. В связи с этим совершенствование технологии искусственного разведения пиявок представляет собой важную задачу.

Сохранение ресурсов пиявки и ее рациональное использование на сегодняшний день является одной из актуальных проблем природопользования. Без данных о величине ресурсов медицинской пиявки невозможно ее научно обоснованное использование. Однако систематических работ по количественной оценке ресурсов пиявки в СССР и Российской Федерации практически не проводилось. Только в последние годы возросший интерес медицины к пиявке побудил ученых начать исследование распространения ее в природных водоемах. Так в 2006 г. С.В.Михайловым впервые обобщены данные по распространению медицинской пиявки в реках Краснодарского края. Вместе с тем, эта информация приблизительная, она не дает объективных количественных данных по величине ресурсов медицинской пиявки. Приведенные в литературе данные по численности пиявок требуют проверки, так как не было разработано стандартных методов оценки ее ресурсов.

Традиционно основным источником дикой пиявки в России являются водоемы Западного Предкавказья. С разной интенсивностью лов пиявки здесь осуществлялся в течение двух веков, хотя количественных данных, а тем более динамики запасов пиявки в этом регионе, как и в других, не было. К сожалению, запасы медицинской пиявки могут истощаться в результате неправильного или чрезмерного ее вылова, резкого сокращения кормовой базы, падения уровня воды и ее цветения, а также загрязнения водоемов химическими веществами, в том числе используемыми в сельском хозяйстве средствами защиты растений и удобрениями. Влияние токсичных веществ, в том числе различных классов пестицидов и солей тяжелых металлов, на жизнеспособность взрослых и новорожденных особей пиявки не изучалось. Медицинская пиявка является факультативным паразитом-гематофагом: она преимущественно питается кровыо теплокровных животных, хотя может паразитировать на земноводных, рыбах и даже беспозвоночных. При питании пиявка в ранку, образуемую ее хитиновыми зубцами, вводит секрет слюнных желез, который образован комплексом более чем из 20 различных соединений, обладающих противовоспалительным, иммуногенным и антикоагулянтным эффектами. Главной особенностью воздействия медицинской пиявки на человека является то, что лечебные эффекты развиваются в процессе воздействия одного живого организма на другой. Однако практически нет данных о динамике выделения в процессе питания различных компонентов секрета слюнных желез и в целом о механизме питания пиявок.

Учитывая вышеизложенное, цель работы заключалась в оценке ресурсов медицинской пиявки в акваториях Западного Предкавказья и разработке путей ее сохранения и рационального использования.

Для выполнения поставленной цели были определены и решены следующие основные задачи:

1. Научное обоснование и разработка методики количественного определения ресурсов медицинской пиявки в различных водоемах.

2. Оценка величины ресурсов медицинской пиявки в основных акваториях Западного Предкавказья.

3. Выяснение влияния на медицинскую пиявку токсичных веществ и изучение возможности ее использования в качестве биоиндикатора загрязнений водной среды.

4. Разработка способов рационального использования и сохранения ресурсов медицинской пиявки.

5. Совершенствование технологии искусственного разведения медицинской пиявки.

6. Разработка рекомендаций по рациональному применению пиявки в медицинской практике в связи с особенностями физиологии ее питания.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Ресурсы медицинской пиявки в акваториях Западного Предкавказья (реки Кагальник, Куго-Ея, Челбас, Кирпили, Егорлык) в 2006 г. составили 1193,7 ± 52,1 тысяч половозрелых особей. В среднем, запасы медицинской пиявки по изученным рекам с 2001 по 2006 гг. снизились в 3,2 раза.

2. Методика количественной оценки ресурсов медицинской пиявки в акваториях Западного Предкавказья, предусматривающая стандартное воздействие для привлечения пиявок, оптимальные величины продолжительности и величины участка лова, а также учитывающая физиологическое состояние особей в различные сезоны года.

3. Основными путями сохранения ресурсов медицинской пиявки и ее рационального использования следует считать регламентированный вылов особей из естественных водоемов, совершенствование технологии искусственного воспроизводства, а также экономичное использование пиявок в практике трудотерапии (в свете особенностей ее питания и динамики последовательно выделяемых фракций слюны).

4. Медицинская пиявка может служить для биоиндикации загрязнений водоемов солями тяжелых металлов и пестицидами.

Научная новизна. Разработана научно обоснованная методика количественной оценки биологических ресурсов медицинской пиявки в водоемах открытого и закрытого типа. Впервые с использованием предложенной методики, определены величина и динамика ресурсов медицинской пиявки в основных акваториях Западного Предкавказья в 20012006 годах.

На водных модельных системах определены концентрации пестицидов (фосфорорганических, хлорорганических и др. ) и солей тяжёлых металлов (Hg, Cd, Си, и др.), приводящие к гибели 50% пиявок при 24-часовой инкубации (JIK50). Научно обосновано использование пиявки в качестве биологического тест-объекта.

Разработаны технологические параметры водного режима при содержании пиявок в условиях искусственного разведения: определена оптимальная плотность поселения медицинской пиявки, обеспечивающая максимальный выход молоди.

Предложена биологически активная добавка для косметических и лечебных средств и способ ее получения из тканей медицинской пиявки. Новизна способа подтверждена патентом на изобретение № 2225196 (Бюллетень изобретений №7 от 10.03.2004).

Впервые установлен состав последовательно выделяемых фракций секрета слюнных желез пиявки в процессе ее питания и на этой основе предложены рекомендации по особенностям применения медицинской пиявки в практике трудотерапии.

Практическая ценность. Разработаны рекомендации по рациональному использованию природной популяции для промышленного производства медицинской пиявки. Усовершенствованная технология разведения пиявки в искусственных условиях внедрена на Санкт-Петербургской биофабрике и позволяет успешно решать задачу обеспечения пиявкой аптек и лечебных учреждений. По результатам совместных исследований с кафедрой зоологии беспозвоночных и энтомологии Кубанского государственного университета, впервые был поставлен вопрос о необходимости сохранения медицинской пиявки в Краснодарском крае, что впоследствии легло в основу рекомендаций для подготовки Постановления губернатора Краснодарского края № 955 от 19 августа 2002 г. «Об изучении и сохранении медицинской пиявки на территории Краснодарского края».

Проведенные исследования используются при повышении квалификации врачей на курсах по гирудотерапии Санкт-Петербургской медицинской Академии последипломного образования, а также в Кубанском государственном университете при чтении курсов лекций по дисциплинам «Зоология беспозвоночных», «Сравнительная анатомия беспозвоночных», «Экология беспозвоночных».

Материалы диссертации послужили основой монографии Каменева O.IO. в соавторстве с Барановским А.Ю. «Теория и практика гирудотерапии: лечение пиявками», рекомендованной УМО по медицинскому и фармацевтическому образованию ВУЗов России в качестве учебного пособия для системы послевузовского профессионального образования врачей.

Структура и объем работы.

Диссертация состоит из введения и 3-х глав (обзора литературы, описания материалов и методов исследований и результатов исследований с их обсуждением), выводов, списка литературы и приложения (с 2-мя актами внедрения). Работа изложена на 156 машинописных страницах текста, содержит 24 таблицы и 11 рисунков. Список литературы включает 135 наименований, в том числе 47 зарубежных источников.

Заключение диссертации по теме «Биологические ресурсы», Каменев, Олег Юрьевич

выводы

1. Оценка биологических ресурсов медицинской пиявки в основных реках Западного Предкавказья (Кагальник, Куго-Ея, Челбас, Кирпили, Егорлык) показала, что в 2006 г. они составили 1193,7 тысяч половозрелых особей, т.е. около 1,84 тонн. Наиболее значительные ресурсы сосредоточены в реках Челбас - 474,7 тысяч и Кирпили - 355,5 тысяч особей.

2. Впервые разработана и апробирована методика количественной оценки ресурсов медицинской пиявки, предусматривающая стандартное воздействие для их привлечения (ударный способ, обеспечивающий низкочастотные колебания в воде); оптимальные величины продолжительности (10 минут) и протяженности участка лова (20-метровое расстояние между точками обловов), а также учитывающая наиболее благоприятные для лова месяцы года. Предложена формула для расчета ресурсов медицинской пиявки в реках Западного Предкавказья.

3. Исследование динамики ресурсов медицинской пиявки в 2001 -2006 гг. позволило установить повсеместное сокращение ее запасов. Наиболее значительное (в 5,5 раз) снижение величины ресурсов отмечено для р. Куго-Ея. В среднем, запасы медицинской пиявки по исследуемым рекам за 6 лет снизились в 3,2 раза.

4. Сравнительное исследование токсичности фосфорорганических и хлорорганических веществ, карбаматов, пиретроидов и цианидов показало, что наибольшую опасность для пиявки представляют пестициды из класса пиретроидов фенотрин (ЛК50=1,79мг/л) и фенвалерат (ЛК50=2,75мг/л), а также фосфорорганический пестицид хлорофос (ЛК50=2,25мг/л).

5. Установлено токсическое действие солей тяжелых металлов, которое уменьшается в ряду: Hg»Cd>Cu»Ni. Наибольшую опасность в сравнении со всеми изученными в работе отравляющими веществами представляют соли ртути ЛК50=0,29мг/л. К малотоксичным для пиявки относятся соли никеля ЛК5о=1000мг/л. Величины ЛК50 для солей кадмия и меди находятся на уровне 8-10мг/л.

6. Показано, что токсичные соединения различных классов по-разному воздействуют на взрослую и новорожденную пиявку. Эти различия наиболее выражены для пестицидов из группы синтетических пиретроидов, которые для молоди в 9 раз токсичнее. Судорожные агенты для новорожденных пиявок токсичнее в 2,5 раза. Чувствительность молоди и взрослых пиявок мало отличается при отравлении карбаматами, хлорорганическими пестицидами, тяжелыми металлами, а также никотином и цианидом калия.

7. Высокая чувствительность медицинской пиявки к токсическому действию пестицидов и тяжелых металлов позволяют использовать ее в качестве биологического тест-объекта для идентификации данных ксенобиотиков в воде.

8. Совершенствование технологического процесса воспроизводства и выращивания медицинской пиявки в искусственных условиях позволило рекомендовать содержание медицинской пиявки в соотношении 5 особей на спаривание и 3 на откладку коконов, что обеспечивает выход потомства 32 особи на матку. Смену воды при содержании пиявок целесообразно производить через 72 часа.

9. Изучение динамики последовательного выделения различных компонентов слюнных желез (гликопротеидов, мукоидов, пептидаз, гиалуронидаз, бделлинов, гирустазина, калина и полисахаридов) показало, что первоначально секретируются вещества, оказывающие на ткани лизирующее действие, затем вещества блокирующие свертываемость крови, после чего вещества-ингибиторы защитных реакций организма. На основе выявленных особенностей рекомендовано рациональное применение пиявок в лечебных целях.

10. Предложен новый способ получения из пиявки биологически активной добавки для косметических и лечебных средств, позволяющий извлекать активные композиции при минимальном расходе пиявок.

РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ

Для эффективного воспроизводства медицинской пиявки необходимо: 1) осуществлять заготовку пиявки в строго определенные месяцы, с учетом данных о величине и распределении биоресурсов пиявки в различных акваториях; 2) с целью получения оптимального приплода учитывать предложенные плотность поселения маток при спаривании и откладке коконов, а также условия водного режима; 3) проводить работы по воспроизводству родительского стада в конкретных водоемах-донорах маток для поставки на биофабрики, пополнения маточного стада и проведения работ по селекции.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Каменев, Олег Юрьевич, 2007 год

1. Андреев П.Н. О сохраняемости микроорганизмов и иммунных тел в пищеварительном канале пиявок и о роли последних в распространении заразных болезней //Арх. научн. и практ. ветеринарии, 1923. 1. - 1. - С. 3845.

2. Баскова И.П., Бородин В.Г., Селезнев К.Г. и др. Гирудотерапия. Методические рекомендации для практикующих врачей. М, 1990. - 23 с.

3. Баскова И.П., Завалова Л.Л. Ингибиторы протеолитических ферментов медицинской пиявки (Hirudo medicinalis). Обзор // Биохимия. -2001.-66, 7.-С. 869-883.

4. Баскова И.П., Исханян Г.С. Гирудотерапия. М.: 2004. - 507 с.

5. Баскова И.П., Никонов Г.И. Дестабилаза фермент секрета слюнных желез медицинских пиявок гидролизирует изопептидные связи в стабилизированном фибрине // Биохимия. - 1985. - № 50. - С. 424-431.

6. Брыков И. Руководство к разведению и сохранению пиявок. СПб.,1852.

7. Гвоздецкий Н.А. Физическая география Кавказа. Вып. 1. М.: Изд-во МГУ.- 1954.-208 с.

8. Гвоздецкий Н.А. Физическая география Кавказа. Вып. 2. М.: Изд-во МГУ.- 1958.-265 с.

9. П.Голькин М.Б. Послеоперационные тромбозы вен нижних конечностей / Дисс . канд. мед. н. Саратов, 1947. - 24 с.

10. Догель В.А. Зоология беспозвоночных: Учебник для ун-тов / Под ред. проф. Полянского Ю.И. -М.: Высш. школа, 1981. 606 с.

11. Думитрашенко Н.В. Кавказ // Горные страны Европейской части СССР и.Кавказ (под ред. Думитрашко Н. В.). М.: Наука, 1974. - С. 90-226.

12. Жизнь животных (в 6 тт.) / Под ред. JI.A. Зенкевича. М.: Просвещение, 1968-69. - 580 с.

13. Запкувене Д.В., Синявичене Д.П. Гистофизиологический анализ развития слюнных желез медицинской пиявки. В кн.: Актуальные вопросы обмена веществ // Матер, конф. по вопросам физиологии обмена веществ человека и животных. Вильнюс, 1976. - С. 77-79.

14. Запкувене Д.В. Разведение и выращивание медицинских пиявок в лабораторных условиях // Тр. АН Литовской ССР. 1972. - В. - 3 (59). - С. 71-84.

15. Исаханян Г.С. Гирудотерапия в клинике внутренних болезней. -Ереван: Айастан, 1991.

16. Каменев 0.10. Комплексная регенерация (омоложение) кожи на основе косметической программы Гирулайн // Гирудо 2003: Матер. . 8-й науч.-практ. конф. Ассоциации гирудологов России и стран СНГ / Под ред. проф. И.П. Басковой. - М., 2003. - С. 52-54.

17. Каменев 0.10. Количественная оценка биоресурсов медицинской пиявки на территории Краснодарского края // Гирудо 2006: Матер. . 9-й науч.-практ. конф. Ассоциации гирудологов России и стран СНГ / Под ред. проф. И.П. Басковой. - Балаково, 2006. - С. 80-83.

18. Каменев 0.10. Антипов А.Д. Патент на изобретение №2225196 Биологически активная добавка для косметических и лечебных средств и способ ее получения. Бюллетень изобретений №7 10.03.2004

19. Каменев О.Ю., Барановский АЛО. Теория и практика гирудотерапии: лечение пиявками. Руководство для врачей. СПб, 2006. -302 с.

20. Каменев О.Ю., Май В.Н. Реакция организма на приставку медицинских пиявок, ее оценка и способы ведения. В кн.: Матер. VI науч.-практ. конф. по гирудотерапии / Под ред. О.Ю. Каменева. СПб, 2000. - С. 10-17.

21. Каменев Ю.Я., Каменев О.Ю. Вам поможет пиявка (практическое руководство по гирудотерапии). СПб, 2000. - 252 с.

22. Канонников A.M. Природа Кубани и Причерноморья. -Краснодар, 1977. 112 с.

23. Канонников A.M. Географические комплексы Кубани: Природа и мы. Краснодар: Краснодарское книжное издательство, 1984. - 75 с.

24. Кобахидзе Д.Н. К выяснению местообитаний медицинской пиявки в природных условиях Грузии // Сообщения АН Грузинской ССР. 1942. - 3. - 1.-69-72.

25. Кобахидзе Д.Н. К изучению гидростойкости медицинской пиявки // Сообщения АН Грузинской ССР. Тбилиси, 1944. - 5 - 4. - С. 423-429.

26. Кобахидзе Д.Н. Материалы к инвентаризации гидрофауны Грузии // Труды Зоол. ин-та АН Грузинской ССР. 1946. - 6. - 291-297.

27. Косенко И.С. Определитель высших растений Северо-Западного Кавказа и Предкавказья. -М.: Колос, 1970. 613 с.

28. Кузнецова О.Н. Распределение гирудина в теле медицинской пиявки // Зоол. журн. 1953. - Т. 32, вып. 5. - С. 833-839.

29. Кузнецова О.Н. Научное пиявководство в Советском Союзе // Труды Московской ветеринарной академии. 1961. - 33. - С. 149-152.

30. Лагутенко Ю.П. Структурная организация туловищного мозга аннелид. JL: Наука, 1981.

31. Лакин Б.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа, 1980. - 295 с.

32. Лапкина Л.Н., Флеров Б.А. Исследование острого отравления пиявок некоторыми токсическими веществами // Физиология и паразитология пресноводных животных. Л., 1979. - С. 50-59.

33. Лапкина Л.Н., Флеров Б.А. Использование пиявок для идентификации пестицидов в воде. // Гидробиологический журнал. 1980. -Т. 16, №3.-С. 113-119.

34. Ливанов Н.А. Класс Пиявок (Hirudinea). Руководство по зоологии 2.-М.-Л., 1940.-С. 205-257.

35. Лукин Е.И. К вопросу о распространении медицинской пиявки в СССР // Зоол. журн.- 1957. 36. - 5. - С. 658-669.

36. Лукин Е.И. Географическое распространение пресноводных пиявок на территории СССР // Проблемы зоогеографии суши. Львов, 1958. - С. 144-149.

37. Лукин Е.И. К фауне пиявок реки Волги // Ученые записки Куйбышевского гос. педагогического института им. В.В. Куйбышева. Естествознание. Куйбышев, 1959. - 22. - С. 32-38.

38. Лукин Е.И. К фауне пиявок Северного Кавказа. Итоги северокавказской гидробиологической экспедиции // Труды ЗИН АН СССР.- 1959.-26.-С. 355-359.

39. Лукин Е.И. Пиявки // Жизнь животных. Т. 1. - М., 1968. - С. 509526.

40. Лукин Е.И. Пиявки пресных и солоноватых водоемов // Фауна СССР: Пиявки. 1976.-Т. 1.

41. Михайлов С.В. Распространение и биология медицинской пиявки в Краснодарском крае / Автореф . канд. биол. наук. Ставрополь, 2006. -20с.

42. Михайлов С.В., Ярошенко В.А. Особенности биологии, экологии и распространения кубанской медицинской пиявки // Актуальные вопросы экологии и охраны природы экосистем южных регионов России и сопредельных территорий. Краснодар, 2005. - С. 136-138.

43. Нагалевский Ю.Я., Чистяков В.И. Физическая география Краснодарского края. Краснодар, 2001. - 256 с.

44. Никонов Г.И. Медицинская пиявка. Основы гирудотерапии. СПб.: Изд-во СДС, 1998.-294 с.

45. Определитель пресноводных беспозвоночных России и сопредельных территорий: Низшие беспозвоночные / Под общ. ред. С.Я. Цалолихина. СПб.: 1999. - Т. 1. - 400 с.

46. Плотников В. Glossosiphonidae, Hirudinidae, Herpobdellidae Зоологического музея Академии наук // Ежегодн. Зоол. музея Академии наук. 1907.- 10.- 133-158.

47. Прозоровский В.Б., Чурносов Е.В., Лесников Л.А. Методические указания по ускоренному определению эффективных доз и концентраций биологически активных веществ. Л., 1991. - 23 с.

48. Селезнев Л.Г. Лечение пиявками в домашних условиях. СПб.: Изд. дом Нева, 2003.- 119с.

49. Сергеева С.С., Антипов А.Д., Каменев О.Ю. Определение содержания сиаловых кислот в нервной системе медицинской пиявки // Колосовские чтения: IV Международная конференция по функциональной нейроморфологии. СПб, 2002. - С. 260.

50. Синева М.В. Наблюдения над выращиванием медицинских пиявок // Зоол. журн. 1944. - 23. - 6. - 293-303.

51. Синева М.В. Биологические наблюдения над размножением медицинской пиявки // Зоол. журн. 1949. - 28. - 3. - 213-224.

52. Синева М.В. Зависимость роста медицинской пиявки от приемов пищи //-Бюллетень московского общ-ва испытателей природы, отд. биол. -1950.-55.-6.-С. 55-56.

53. Сокол Е.Г. Лечение пиявками септических тромбофлебитов // Акушерство и гинекология.- 1939.- 11.-С. 61-64.

54. Спицина В.И. Новый метод лечения стомалгии медицинскими пиявками // Стоматология. 1987. - 66. - 1. - С. 34-36.

55. Степанов А.Д. Лечение пиявками при сотрясении мозга // Межобластная научная конференция практических врачей: Тез. научн. докл. -Рязань, 1954.-С. 51-53.

56. Тер-Григоряи М.А. Некоторые наблюдения над распространением медицинской пиявки в Армении //Зоол. сб. 1950. - 7. - С. 122-126.

57. Тонкопий В.Д., Загребин А.О., Куценко С.А. Обоснование новых подходов к биоидентификации антихолинестеразных соединений в водной среде с использованием медицинской пиявки // Журнал экологической химии. 1993.-№4-С. 261-265.

58. Устинова З.Г. Лечение больных с сердечно-сосудистой недостаточностью пиявками // Сборник науч. трудов клинической больницы неотложной помощи (МЗ УзССР). Ташкент, 1969. - 3. - 43-47.

59. Фарбер Ф.М. Применение медицинских пиявок патогенетический метод терапии периферического паралича лицевого нерва // Заболевания центральной нервной системы. - Новосибирск, 1985. - С. 26-28.

60. Федоров П.С. Опыт лечения фурункула медицинской пиявкой // Сборник научных трудов, посвященных памяти проф. Р.И. Березниговского.- Иркутск, 1946. С. 263-265.

61. Флеров Б.А. Эколого-физиологические аспекты токсикологии пресноводных животных. Л.: Наука, 1989. - 139 с.

62. Хомякова Т.И., Савинов В.А., Хомяков Ю.Н. Aeromonas hydrophila- бактерия-симбионт медицинской пиявки. -М.: Асклепейон, 1998. -С.73-78.

63. Чернух A.M., Фролов Е.П. Кожа. (Строение, функция, общая патология и терапия). М.: Медицина, 1982. - 336 с.

64. Чалисова Н.И., Журавский С.Г., Пеннияйнен В.А. и др. Стимулирующее влияние дестабилазы, компонента слюнных желез медицинской пиявки, на рост нейритов чувствительных нейронов в органитипической культуре // Цитология. 1999. - 41. - С. 48-52.

65. Шполянский Г.М. Гирудотерапия в гинекологии // Сборник работ по военно-полевой и общей хирургии, посвященный 30-летию научной деятельности А.В. Смирнова. Л., 1944. - С. 162-164.

66. Шумкина О.Б. Развитие и метаморфоз личинки медицинской пиявки // Доклады АН СССР. 1951. - 77.-4.-С. 761-765.

67. Шумкина О.Б. Эмбриональное развитие медицинской пиявки // Труды ин-та морфологии животных им. А.Н. Северцова. 1953. - 8. - С. 216279.

68. Щеголев Г.Г. О величине, достигаемой медицинскими пиявками. К вопросу о частоте кормлений // Зоол. журн. 1945. - 24. - 5. - С. 273-276.

69. Щеголев Г.Г. Наблюдения над многократной откладкой коконов медицинскими пиявками// Зоол. журн. 1948.-27. - 1.- С. 13-16.

70. Щеголев Г.Г. Пиявки (Hirudinea) // Жизнь пресных вод СССР. М,-Л., 1949.-2.-С. 131-145.

71. Щеголев Г.Г. Наблюдения над подвижностью медицинских пиявок в водоемах // Зоол. журн. 1951. - 30. - 5. - С. 430-439.

72. Щеголев Г.Г., Щеголева З.А. Пиявки Туркменистана // Тр. Мургабской гидробиологической станции. 1951. - 1. - С. 77-102.

73. Щеголев Г.Г. Федорова М.С. Медицинская пиявка и ее применение. -М„ 1955.-67 с.

74. Щекотов Г.М. Применение пиявок при варикозном расширении вен // Военно-медицинский журнал. 1980. - 3. - С. 68.

75. Autrum Н. Hirudinea // Die Tierwelt Mitteleuropas. Leipzig, 1958. -1. - 7b. - S. 1-30.

76. Baskova I.P., Khalil S., Nartikova V.F., Paskhina T.S. Inhibition of plasma kallikrein. Kininase and kinin-like activities of preparations from the medicinal leeches// Thromb. Res. 1992. -V.15,N.67. -P.721-730.

77. Bazyluk W. Przyczynek do znajomosci fauny pijawek (Hirudinea) Podlasia // Fragm. faun. Mus. Zool. Polonici. 1957. - 6. - 6. - S. 129-133.

78. Bennike S.A. Contribution to the ecology of Danish freshwater leeches (Hirudinea).-Kobenhavvn, 1943.-P. 1-109.

79. Busing H.K., Doll W., Freytag K. Die Bakterienflora der medizinischen Blutegel// Arch.Microbiol. -1953. -V. 19 P. 52-86.

80. Dathe H. Beitrag zum Vorkommen von Hirudo medicinalis in Mitteldeutschland // Zool. Anz. 1934. - 106. - S. 94.

81. Eldor A., Orevi M., Rigbi M. The role of the leech in medical therapeutics // Blood Rev. 1996. - 10 (4). - P. 201-209.

82. Franz F. Uber den die Blutgerinnung aufhebenden Bestandteil des medizinischen Blutegels // Naunyn Schmiedebergs Arch. Exp. Pathol Pharmak, 1903.- 49. -S. 342-357.

83. Fields W.S. The history of leeches and hirudin // Haemostasis, 1991. -21 (S 1).-P. 3-10.

84. Fritz H., Oppitz R-H., Gebhardt M., Oppitz I., Werle I., and Marx R. Hoppe-Seyler Z. Phisiol. Chem. 1969. - V. 350. - P. 91-92.

85. Graf J. The symbiosis of Aeromonas veronii biovar sobria and H.medicinalis, the medicinal leech: a novel model for digestive tract associations// Infect. Immun. 1999. - V. 67. - P. 1-7.

86. Harding W.A. A revision of the british leeches // Parasitology. -1910.-7.-P. 130-201.

87. Haycraft J.B. On the action of a secretion obtained from the medicinal leech on the coagulation of the blood // Proc Roy Soc London, 1884. 36. - P. 478-487.

88. Haycraft J.B. Uber die Einwirkung eines Sekretes des officinellen Blutegels auf die Gerinnbarkeit des Bluts // Naunyn Schmiedebergs Arch Exp Pathol Pharmak, 1884.-36. S. 478-487.

89. Hesse E. Uber einige faunistische Vorkommen aus dem Leipziger Gebiet // Zool. Anz. 1920. - 51. - S. 258.

90. Hecht G. Beitrage zur Verbreitung von Hirudo medicinalis in Deutschland//Zool. Anz. 1929.-85.-S. 105-110.

91. Herter K. Die Okologie der Hirudineer // Bronn Klassen und Ordnungen des Tierreichs. 1937. - Teil 2. - S. 321-496.

92. Hirst G.K. The effect of a polysaccharidesplitting enzyme on streptococcal infection//J.Exp.Med. 1941. -V, N 4. - P.493-505.

93. Indergand S. and Graf J. Ingested Blood Contributes to the Specificity of the Symbiosis of Aeromonas veronii Biovar Sobria and Hirudo medicinalis, the Medicinal Leech. Appl. Env. Microb. 2000. - V.66. P. 4735^741.

94. Iveson-Iveson J. Leeches in medicine // Nursing Mirror, 1978. 22.1. P.8-9.

95. Jennings J.B., and van der Lande V.M. Histochemical and bacteriological studies on digestion in nine species of leeches (Annelidia: Hirudinea)//Biol. Bull. 1967. - V.33. -P. 166-183.

96. Leake L.D. The Leeches as a scientific tool //Endeavor: 1983. 7. -P.88-93.

97. Lent C. New medical and scientific uses of the Leech // Nature. -1986.-323.-P. 494.

98. Lent С. M., Dickinson M. H. On the termination of ingestive behaviour by the medicinal leech// J. Exp. Biol. -1987. -V. 131 -P. 1-15.

99. Lent, C.M., Fliegner K.H., Freedman E., Dickinson M.H. Ingestive behavior and physiology of the medicinal leech// J. Exp. Biol. 1988. -V.137. -P.513-527.

100. Lent, С. M., Dickinson М. П., Marshall C.G. Serotonin and leech feeding behaviour: obligatory neuromodulation// Amer.Zool. 1989. -V.29. -P.1241-1254.

101. Mackay, D. R., Manders E. K., Saggers G. C., Banducci D. R., Prinsloo J., Klugman K. Aeromonas species isolated from medicinal leeches// Ann. Plast. Surg. 1999. -V. 42. -P.275-279.

102. Mann K.N. The ecology of the British freshwater leeches // J. Animal Ecology. 1955.- Vol. 24, № 1.

103. Mann K.N. Some factors influencing the distribution of freshwater leeches in Britan // Verh. Int. Ver. Limnol. 1955. - 12. - P. 582-587.

104. Munro R., Jones C., and Sawer R. Blood coagul. fibrinol.// 1991. -V.2. -P.179-184.

105. Moquin-Tandon A. Monographie de la famille des Hirudinees. -Paris, 1846.-P. 1-448.

106. Nehili M., Ilk C., Mehlhorn H., Ruhnau K., Dick W., Njayou M. Experiments on the possible role of leeches as vectors of animal and human pathogens: a light and electron microscopy study// Parasitol. Res. 1994. -V. 80. -P.277-290.

107. Payton B.W. History of Medicinal Leeching and Early Medical References // Neurobiology of the Leech. Eds. by Muller K.J., Nicholls J.G., Stent G.S.: Gold Spring Harbor lab. New York, 1981. - P. 27-33.

108. Pavlovski L.K. Pijawki (Hirudinea) // Fauna slodkowodna Polski -1936.-S. 26-176.

109. Remy P. Sangsues de Yugoslavie // Bull. Soc. Zool. France. 1937. -62.-P. 140-148.

110. Rigbi M., Levy H., Iraqi F. et al. The saliva of the medicinal leech Hirudo medicinalis: I. Biochemical characterization of the high molecular weight fraction. Comp Biochem Biophys 1987; 87. P. 567-573.

111. Rigbi M., Levy Ы., Eldor A. et al. The saliva of the medicinal leech Hirudo medicinalis: II. Ingibition of platelet aggregation and of leukocyte activity and examination of reputed anaestetic effects. Comp Biochem Physiol 1987; 88. -P. 567-573.

112. Roters F.J., Zebe E. Protease inhibitors in the alimentary tract of the medicinal leech Hirudo medicinalis: in vivo and in vitro studies// J.Comp Physiol. -1992.-V.162.-P. 85-92.

113. Sandner H. Badania nad fauna pijawek // Acta zool. et oecol. Univ. lodzoenzis. 1951. -4. - S. 5-50.

114. Sawyer R.T. Leech biology and behaviour. Oxford, 1986.

115. Sciacchitano I. Sangsues de 1 Afganistan // Contribution a l'etude de la fauna d'Afganistan. 1960. - 24. - P. 533-541.

116. Svendsen I., Boisen S., Hejgaard J. Amino acid sequence of serine protease inhibitor chymotripsin inhibitor 1 from barley // Homology with barley inhibitor 1 and leech eglin. Carlsberg Res. Commun, 1882.-47.- 1.-P. 45-53.

117. Tonkopii V., Kamenev O., Zagrebin A. A new principles of xenobiotics bioidentification in fresh water // Proceedings of International Congress on Environmental Problems of Mideterranean Region, 2002. Nicosia, North Cyprus.-P. 178-181.

118. Tonkopii V., Sherstneva L., Kamenev O. Bioidentification of pesticides in water // Proceedings of the Workshop on Monitoring, Typology, Ecological Classification and assessment of the State of Large Lakes. Joensuu, Finland, 2003.-P.36-41

119. Tonkopii V., Zagrebin A, Kamenev O., Iofina I. Ecotoxicological monitoring of surface water // Proceedings of the Workshop on Sustainable Use,

120. Management and Development of Lake Ladoga Basin. Joensuu, Finland, 2004. -P. 30-35.

121. Zick K. Zur Frage der Verbreitung des Medizinischen Blutegels (Hirudo medicinalis) in Deutschland // Zool. Anz. 96. - S. 328-330.