Разработка препарата иммуноглобулина для внутривенного введения и использование его для терапии иммунодефицитных состояний. тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат медицинских наук Тюриков, Юрий Михайлович

• Тюриков, Юрий Михайлович
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Тюриков, Юрий Михайлович

Список сокращений

Введение

Обзор литературы

1. Гуморальные иммунодефициты. Классификация, клинические проявления и заместительная терапия иммуноглобулинами

1.1. Гуморальные иммунодефициты

1.1.1. Классификация и виды иммунодефицитов

1.1.2. Молекулярные основы и клинические проявления гуморальных иммунодефицитов

1.2. Цитомегаловирусная инфекция как осложнение иммунодефицитов

1.2.1. Вирусы семейства герпеса

1.2.2. Особенности цитомегаловирусной инфекции

1.3. Препараты иммуноглобулинов для внутривенного введения и их применение для лечения иммунодефицитов

1.3.1. Характеристика препаратов иммуноглобулинов для внутривенного введения

1.3.2.Использование иммуноглобулинов для лечения иммунодефицитных состояний и их осложнений

Собственные исследования и их обсуждение

2. Материалы и методы

2.1. Материалы исследования

2.2. Методы исследования

3. Создание промышленной технологии производства иммуноглобулина для внутривенного введения

3.1. Организация технологического процесса получения препарата

3.2. Анализ факторов, определяющих качественные показатели конечного продукта

3.3. Разработка методов инактивации возможно присутствующих вирусов

4. Получение препарата внутривенного иммуноглобулина для лечения цитомегаловирусной инфекции

4.1. Анализ донорской плазмы на содержание антител к ЦМВ и определение критериев отбора доноров

4.2. Технологический процесс производства внутривенного антицитомегаловирусного иммуноглобулина и анализ его качественных характеристик

5. Клинические испытания габриглобина при врожденных ^^ гуморальных иммунодефицитах Заключение

Выводы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка препарата иммуноглобулина для внутривенного введения и использование его для терапии иммунодефицитных состояний.»

Первичные иммунодефицитные состояния - это врожденные нарушения системы иммунитета, связанные с генетическими дефектами одного или нескольких компонентов иммунного ответа, в частности, клеточного или гуморального звена, фагоцитоза или системы комплемента /доклад группы ВОЗ, 1978, 1980, 1995; Ballow М., 2002/.

Актуальность проблемы иммунодефицитов у человека обусловлена высокой частотой встречаемости данного заболевания, которая составляет от 1:10000 до 1:500 /Cunningham-Rundles С., 2002/, неизбежностью летальных исходов при отсутствии заместительной терапии и тем обстоятельством, что постоянное воздействие на человека ксенобиотиков, рост сопротивляемости микроорганизмов, неэффективность традиционных антимикробных средств и недостаточная реакция иммунной системы на интервенцию патогенов вызывают генетические дефекты и, как следствие, способствуют развитию иммунодефицитов /Ярцев М.Н., Яковлева К.П., 2004; Etzioni А., 2003/.

Первичные иммунодефицита, как правило, проявляются после рождения в виде обычных или оппортунистических инфекций. Одной из основных задач при лечении иммунодефицитов является борьба с оппортунистическими инфекциями, вызываемыми, в частности, вирусами семейства Herpesviridae. Для всех 8-ми антигенных серотипов (вирусы простого герпеса 1 и 2 типа, ветряной оспы — опоясывающего герпеса, цитомегаловирус (ЦМВ), вирус Эпштейна-Барр, вирусы герпеса человека 6, 7 и 8 типов) характерна большая вариабельность, высокая контагиозность, полиморфизм клинических проявлений и резистентность к проводимой антивирусной терапии.

Особое место среди вирусных осложнений, клиническое проявление которых становится возможным лишь на фоне иммунной недостаточности, занимает цитомегаловирусная инфекция, что обусловлено ее широким распространением среди детей раннего возраста. Так, следы перенесенной

ЦМВ-инфекции выявляются у 40-60 % детей в возрасте до 5 лет и у 30-90 % взрослых старше 25 лет /Adler S.P. et al., 1995/.

Необходимость изучения ЦМВ объясняется не только его способностью инфицировать плод, но и риском посттрансфузионных ЦМВ-инфекций, развитием инфекции у реципиентов трансплантатов, не вполне ясной ролью вируса в патогенезе ряда злокачественных заболеваний /Казанцев А.П., Попова Н.И. 1980; Yamani М.Н. et al., 2001; Weinberg А., 2002/.

Считается, что единственным эффективным функциональным барьером на пути ЦМВ к плоду являются нейтрализующие антитела класса IgG, как материнские, так и внесенные извне /Абазова Ф.И., Хахалин JI.H., 1997; Калинина Н.М., Кетлинский С.А., 2002/. Поэтому в качестве одного из возможных средств борьбы с вирусными инфекциями могут быть использованы препараты иммуноглобулинов /Алешкин В.А. и соавт., 1996/.

Исследования в области молекулярной биологии позволили идентифицировать молекулярные дефекты основных первичных иммунодефицитных состояний и способствовали созданию новых терапевтических подходов, таких как пересадка костного мозга или генная терапия /Ярцев М.Н., Яковлева К.П., 2004; Buckley R.H., 2002/. Тем не менее, основным принципом лечения всех форм агаммаглобулинемии (гуморальных иммунодефицитов) и ее осложнений, является регулярная заместительная терапия иммуноглобулинами для внутривенного введения в сочетании с антибиотикотерапией /Сетдикова Н.Х. и соавт., 2004; Goldman A.S., Goldblum R.M, 1977/.

В настоящее время имеется достаточно большой выбор иммуноглобулинов для внутривенного введения. Для лечебного применения предлагаются препараты, в основном, зарубежного производства, различающиеся по своему качеству, физическим параметрам, длительности циркуляции в организме и эффективности /Сапожникова В.С, 1990; Шарыгин C.JL, 1997; Berkman S.A. et al., 1990/. Предлагается ряд специфических, или направленных, иммуноглобулинов /Алешкин В.А. и соавт., 2003/.

Отечественные иммуноглобулины для внутривенного введения выпускаются с использованием ферментативной обработки, что приводит к повреждению Fc-фрагмента молекулы иммуноглобулина G и ускоренному, в течение нескольких суток, выведению такого препарата из организма /Анастасиев В.В., 2000/. Восполнение уровня иммуноглобулинов в крови при агамма- или гипогаммаглобулинемии (заместительная терапия) данными препаратами недостаточно эффективно.

Поэтому создание препаратов иммуноглобулина для внутривенного введения, как неспецифических, пригодных для заместительной терапии различных форм гуморальных иммунодефицитов, так и направленных, предназначенных для лечения осложнений недостаточности иммунного ответа, в частности, цитомегаловирусной инфекции, является актуальной задачей.

Цель работы: создание препарата иммуноглобулина для внутривенного введения, пригодного для терапии гуморальных иммунодефицитов и их осложнений, в частности, цитомегаловирусной инфекции.

Задачи исследования:

1. Масштабировать лабораторный процесс получения иммуноглобулина до промышленного уровня и организовать производственный выпуск препарата, имеющего цельные молекулы IgG в мономерной форме.

2. Установить факторы, определяющие качественные показатели иммуноглобулина и оптимизировать технологические приемы получения препарата.

3. Включить в технологический процесс стадии инактивации возможно присутствующих вирусов.

4. Исследовать возможность получения иммуноглобулина для внутривенного введения с высоким титром антител к вирусу цитомегалии.

5. В рамках государственных клинических испытаний изучить эффективность иммуноглобулина для внутривенного введения (габриглобина) при первичных гуморальных иммунодефицитах.

Научная новизна.

Создана научно обоснованная технология получения иммуноглобулина для внутривенного введения, пригодного для заместительной терапии гуморальных иммунодефицитов, Препарат содержит цельные молекулы IgG в мономерной форме, которые сохраняют свои бифункциональные свойства.

Основными факторами, определяющими качество препарата, являются степень очистки воды, используемой в технологическом цикле и процесс снижения антикомплементарной активности.

Разработан алгоритм отбора донорского сырья с высоким титром антител к вирусу цитомегалии и показана принципиальная возможность получения направленного иммуноглобулина для внутривенного введения.

Продемонстрирована высокая эффективность заместительной терапии габриглобином у больных с общим вариабельным иммунодефицитом и сохранение повышенной концентрации IgG в крови после введения препарата в течение более 21 суток.

Практическое значение работы.

Организовано промышленное производство иммуноглобулина для внутривенного введения с торговым названием "Габриглобин". Препарат может быть с успехом использован для терапии различных заболеваний, в первую очередь, для эффективного восполнения дефицита иммуноглобулинов у больных с гуморальными иммунодефицитами, а таюке для лечения вирусных инфекций.

Внедрение результатов исследования в практику.

Впервые в Российской Федерации на Ивановской областной станции переливания крови организовано промышленное производство иммуноглобулина для внутривенного введения "Габриглобин", имеющего две стадии вирусинактивации (ФСП № 42-0265-1621-01).

Производственный регламент получения препарата "Габриглобин" (иммуноглобулин человека нормальный для внутривенного введения сухой) утвержден Комиссией по стандартизации Центральной лаборатории государственного контроля и изучения качества препаратов крови, кровезаменителей и консервирующих растворов ГУ "Гематологический научный центр РАМН" (протокол №414 от 10.12.2003 г.).

Опытно-промышленный регламент производства препарата "Габриглобин-анти-ЦМВ" утвержден Комиссией по стандартизации Центральной лаборатории государственного контроля и изучения качества препаратов крови, кровезаменителей и консервирующих растворов ГУ "Гематологический научный центр РАМН", (протокол № 106 от

23.04.2003 г.)

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Разработана научно обоснованная промышленная технология получения иммуноглобулина для внутривенного введения с торговым названием "Габриглобин", который имеет низкое значение рН и цельные молекулы IgG в мономерной форме.

Процесс получения препарата включает карантинизацию плазмы, тестирование на вирусные маркеры, спиртовое фракционирование, концентрирование фильтрата «Б» ультрафильтрацией, стадию снижения антикомплементарной активности и удаления низкомолекулярных веществ путем диализа-диафильтрации, первую вирусинактивацию, высушивание, вторую вирусинактивацию, контроль, упаковку и маркировку.

2. Предложен алгоритм отбора донорского сырья с высоким титром антител к вирусу цитомегалии и доказана принципиальная возможность получения иммуноглобулина для внутривенного введения с титром антител к цитомегаловирусу 1:6400 — 1:12800, или с содержанием антител более 50 МЕ/мл - "Габриглобин-анти-ЦМВ".

3. Габриглобин обладает высокой терапевтической активностью при лечении первичных гуморальных иммунодефицитах, эффективно восполняя имеющийся дефицит IgG, что приводит к сокращению частоты рецидивов хронических заболеваний. Повышенная концентрация IgG в крови после введения препарата сохраняется в течение более 21 суток.

Апробация материалов диссертации.

Диссертация прошла апробацию на совместном заседании секций Ученого совета «Медицинская биотехнология» и «Общая и прикладная иммунология» Федерального Государственного Учреждения Науки «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора РФ 15 июня 2008 г. Основные положения диссертационной работы были доложены и обсуждены на Международной научно-практической конференции по донорству крови (Архангельск, 2001 г.), на «Научно-практической конференции по иммунологии» (Москва, 2003 г.), на научной конференции «Актуальные вопросы трансфузиологии и клинической медицины (Киров, 2005 г.), на Всероссийской научной конференции «Медицинские иммунобиологические препараты в XXI веке: разработка, производство и применение», Уфа, 2005 г., на научно-практической конференции «Вопросы трансфузиологии и клинической медицины» (Киров, 2007 г.).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 работ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Тюриков, Юрий Михайлович

выводы

1. Научно обоснованный процесс масштабирования лабораторной технологии позволил впервые в Российской Федерации организовать промышленное производство препарата иммуноглобулина для внутривенного введения, с низким значением рН, состоящего из цельных молекул IgG в мономерной форме и сохранивших свои бифункциональные свойства.

Технологическая схема производства препарата, получившего торговое наименование "Габриглобин", включает: карантинизацию плазмы, тестирование на вирусные маркеры, спиртовое фракционирование, концентрирование фильтрата «Б», стадии диафильтрации и диализа, первую вирусинактивацию, высушивание, вторую вирусинактивацию, контроль, упаковку и маркировку.

2. Оптимизированы Технологические производственные операции и установлены факторы, определяющие основные качественные показатели препарата: степень очистки воды, используемой в технологическом цикле и этап снижения антикомплементарной активности. Соблюдение регламентных режимов позволяет выпускать габриглобин с минимальными колебаниями показателей качества.

3. Подобраны и включены в технологический процесс получения препарата "Габриглобин" две стадии инактивации возможно присутствующих вирусов: инкубация жидкого полуфабриката иммуноглобулина при величине рН 4,2 в течение более 21 суток и прогрев флаконов с сухим препаратом при 60 °С в течение 72 часов. Процесс вирусинактивации не ухудшает физико-химические и биологические свойства препарата.

4. Разработан алгоритм отбора донорского сырья с высоким титром антител к вирусу цитомегалии и доказана принципиальная возможность получения иммуноглобулина для внутривенного введения с титром антител к цитомегаловирусу 1:6400 - 1:12800, или с содержанием антител более 50 МЕ/мл. Препарат "Габриглобин-анти-ЦМВ" стабилен в течение трех лет (срок наблюдения).

5. Клинические испытания показали высокую эффективность заместительной терапии габриглобином у больных с общим вариабельным иммунодефицитом, сохранение повышенной концентрации IgG в крови после введения препарата в течение более 21 суток. Препарат обладает терапевтической активностью при синдроме атипичной пневмонии, врожденной ЦМВ-инфекции и энцефалите, вызванном вирусом Эпштейна-Барр.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Иммунодефицитные состояния — широкое понятие, которое включает врожденные и приобретенные нарушения иммунного ответа, сопровождающиеся инфекционными бактериальными или вирусными заболеваниями. Врожденные нарушения системы иммунитета могут быть связаны с генетическими дефектами только одного или сразу нескольких компонентов системы иммунитета, в частности, клеточного или гуморального звена, фагоцитоза или системы комплемента /Ballow М., 2002; Yel L. et al., 2003/.

Иммунодефицитные состояния характеризуется повторными и хроническими инфекционными осложнениями, повышенной частотой возникновения аллергических или аутоиммунных заболеваний и развитием злокачественных опухолей /Rosen F.S. et al., 1997; Spector B.D. et al., 1978; Rehman S. et al., 2003/.

Лечение иммунодефицитов заключается в заместительной терапии иммуноглобулином, пересадке костного мозга или генной терапии /Buckley R.H., 2002/. Тем не менее до настоящего времени основным принципом лечения всех форм агаммаглобулинемии и ее осложнений, является регулярная заместительная терапия иммуноглобулинами для внутривенного введения в сочетании с антибиотикотерапией /Сетдикова Н.Х. и соавт., 2004; Goldman A.S., Goldblum R.M, 1977, De Gracia J. et al., 2004).

Одной из основных задач в терапии врожденных и приобретенных иммунодефицитов является профилактика оппортунистических инфекций, вызываемых вирусами семейства Herpesviridae, в частности, цитомегаловирусом. Распространенность данной инфекции среди детей раннего возраста, беременных женщин, способность инфицировать плод и вызывать заболевания у реципиентов трансплантатов делают борьбу с ЦМВИ особенно актуальной /Ф.И.Абазова, Л.Н.Хахалин, 1997, Pass P.F.et al.,1990/.

Эффективным барьером на пути передачи вируса цитомегалии от матери к плоду являются материнские антитела к цитомегаловирусу. Аналогичный эффект наблюдается и при пассивном введении в организм беременной женщины иммуноглобулина, содержащего специфические антитела /Абазова Ф.И., Хахалин J1.H., 1997; Калинина Н.М., Кетлинский С.А., 2002/.

Создание препаратов иммуноглобулина для внутривенного введения, пригодных для заместительной терапии гуморальных иммунодефицитов и их осложнений, в частности, цитомегаловирусной инфекции, является актуальной задачей.

Разработка препаратов иммуноглобулинов, пригодных для заместительной терапии агаммаглобулинемии, является непростым делом. Например, существующие отечественные препараты иммуноглобулинов получены с использованием фермента пепсина, который, обеспечивая отсутствие побочных эффектов при внутривенном вливании, значительно укорачивает время циркуляции иммуноглобулина в организме /Анастасиев В.В., 2000/.

Алешкиным В.А. и Лютовым А.Г. /1998/ предложена технология получения нерасщепленного иммуноглобулина с низким значеним рН, который может быть эффективным средством терапии гуморальных иммунодефицитов.

Задачами настоящего исследования было масштабирование процесса получения препарата иммуноглобулина, состоящего из цельных молекул IgG в мономерной форме, до промышленного уровня; установление факторов, определяющих основные качественные показатели иммуноглобулина и оптимизация технологических приемов получения препарата; использование двух стадий инактивации возможно присутствующих вирусов; исследование возможности получения иммуноглобулина для внутривенного введения с высоким титром антител к вирусу цитомегалии и изучение клинической эффективности иммуноглобулина для внутривенного введения, получившего торговое наименование "Габриглобин", при первичных гуморальных иммунодефицитах.

Для решения поставленных задач в первую очередь было необходимо изучить возможность получения иммуноглобулина, пригодного для внутривенного вливания, в соответствии с рекомендациями Алешкина В.А., Лютова А.Г. /1998/, с использованием технологических приемов и исходного сырья Ивановской областной станции переливания крови.

Проведенный анализ технологического процесса фракционирования плазмы, принятого на станции, и эксперимент, выполненный в лабораторных условиях по концентрированию фильтрата "Б" на ультрафильтрационном модуле, состоящем из кассетной системы «Pellicon» и шестеренчатого насоса, показали принципиальную возможность приготовления препарата иммуноглобулина, пригодного для внутривенного введения. Экспериментальный образец содержал более 95 % мономерного IgG и имел антикомплементарную активность 10 мг белка, не активирующих 2 СН50.

Положительные результаты эксперимента позволили перейти к масштабированию технологии. Процесс концентрирования фильтрата «Б» в производственных условиях проводили на 5 ультрафильтрационных кассетах фирмы «Владисарт», использовали промышленный шестеренчатый насос с регулируемой производительностью.

Центрифугат "Б" в количестве 177 л был разведен дистиллированной водой, а величина рН раствора была снижена до 4,3. После концентрирования и диафильтрации (для полного освобождения иммуноглобулина от остаточного содержания этанола и солей) раствор иммуноглобулина подвергли осветляющей и стерилизующей фильтрации. Снижение антикомплементарной активности было проведено диализом в вискозных оболочках, а затем препарат был высушен. Иммуноглобулину было присвоено торговое наименование "Габриглобин".

Аналогичным образом были приготовлены еще четыре серии препарата. Анализ биологических и иммунохимических параметров полученных образцов показал, что все параметры производственных серий иммуноглобулина соответствовали требованиям фармакопейной статьи. Однако антикомплементарная активность трех серий из пяти составила только 5 мг белка, не активирующих комплемент, хотя значительных отличий в технологических приемах, которые были использованы во время процесса приготовления препарата, найдено не было.

Подробный анализ всех стадий технологического процесса показал, что процесс высушивания не оказывает существенного влияния на иммуноглобулин. Было высказано предположение о том, что параметры конечной продукции может определять качество дистиллированной воды, используемой в технологическом цикле приготовления препарата. В пользу этого предположения свидетельствует тот факт, что экспериментальный образец иммуноглобулина, приготовленный с использованием дистиллированной воды трехкратной перегонки, полученной на Ивановской ОСПК, имел антикомплементарную активность только 5 мг белка, тогда как образец иммуноглобулина, изготовленный из той же партии фильтрата "Б", но на дистиллированной воде однократной перегонки в МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского, имел антикомплементарную активность 10 мг белка, не активирующих 2 СН50.

Сравнительный полуколичественный анализ качества воды показал, что в воде из Иваново более высокое значение величины рН, чем в воде из МНИИЭМ Г.Н.Габричевского, одинаковое содержание восстанавливающих веществ, и несколько более высокое количество нитритов, нитратов и тяжелых металлов.

Антикомплементарная активность - один из основных параметров качества иммуноглобулинов, предназначенных для внутривенного введения, а вода - главный фактор, определяющий конформационные изменения белковых молекул в растворе. Поэтому любые воздействия, изменяющие конфигурацию иммуноглобулина, могут приводить к открытию участка, связывающего Clq (субкомпонент первого компонента системы комплемента), и запуску каскада активации комплемента /Кэбот Е., Мэйер М., 1968; Евченко Т.А., 2000; Козлов JI.B. и соавт., 2005/.

Исследования Tenold R.A. /1983/ продемонстрировали, что чем меньше раствор иммуноглобулина содержит низкомолекулярных примесей в виде NaCl, спирта и пр., то тем больший процент молекул IgG находится в мономерной форме и тем ниже его антикомплементарная активность. По-видимому, определяющее влияние дистиллированной воды на качество "Габриглобина", объясняется наличием в воде Ивановской ОСПК повышенного содержания ионов тяжелых металлов, которые могут дестабилизировать гидратную оболочку молекул иммуноглобулина, снижать его дзета-потенциал, что приводит к изменению конформации молекулы, образованию агрегатов и раскрытию участков, связывающих компоненты комплемента.

Опираясь на полученные данные, в технологическом цикле приготовления препарата мы предложили использовать только воду, приготовленную путем обратного осмоса, что обеспечило стабильность всех показателей препарата от серии к серии.

Далее, для увеличения объема выпускаемой продукции, был проведен комплекс исследований по замене ручной стадии диализа иммуноглобулина в вискозных оболочках (этап уменьшения антикомплементарной активности) на диафильтрацию полуфабриката с использованием ультрафильтрационной кассетной системы.

Для подбора условий снижения антикомплементарной активности иммуноглобулина методом диафильтрации полуфабриката на ультрафильтрационном модуле было исследовано несколько режимов проведения процесса и выбран метод, обеспечивающий гарантированное снижение антикомплементарной активности иммуноглобулина. Данный прием заключается в использовании противотока диализирующей жидкости во время ультрафильтрации в количестве от 20 до 40 объемов по отношению к объему иммуноглобулина.

В результате первого этапа исследований, посвященного масштабированию производственного процесса и поддержанию стабильных показателей качества препарата от серии к серии, с 2002 г. организован промышленный выпуск препарата "Иммуноглобулина человека нормального для внутривенного введения сухого", получившего коммерческое название "Габриглобин" (ФСП № 42-0265-1621-01).

В связи с тем, что при контакте с донорской кровью возможна передача более 30 различных видов инфекций /Подгорная Е.Ю., Порохненко С.Г., 2005/, при производстве препаратов из данного сырья необходимо соблюдение определенных мероприятий, таких как карантинизация плазмы и наличие одной или нескольких стадий инактивации вирусов /Карякин А.В., 2005/.

Панов В.П. и соавт. /2005/ указывают, что вирусная безопасность продуктов крови обеспечивается тремя непременными факторами: отбором доноров, тестированием донаций и пулов плазмы, инактивацией и удалением вирусов в процессе производства. Причем способы удаления вирусов должны быть четко различимы от способов их инактивации.

Возможность передачи инфекционных агентов с продуктами крови заставляет производителей препаратов совершенствовать технологию их производства и вводить специальные стадии вирусной инактивации. Так, например, в производственный цикл получения отечественного препарата иммуновенин включены несколько международных валидированных методик инактивации вирусов: этанольное фракционирование плазмы крови по Кону, глубинная фильтрация через мембраны LP-60 (Cuno), нанофильтрация через фильтры L+VR (Cuno) или Ultipor DV50 (Pall) и инкубация при кислом значении рН 4,25 /Исрафилов и соавт., 2005/.

Несмотря на то, что, по данным Henin et al. /1988/, в фильтрате "Б" вирус иммунодефицита не определяется, теоретическая возможность передачи на сегодняшний день неизвестных инфекций остается.

Вследствие этого одной из задач исследования было изучение возможности включения в технологический цикл производства габриглобина двух стадий вирусинактивации.

Комбинация спиртового метода с выдерживанием полуфабриката при кислом значении рН позволили ведущим фирмам — производителям внутривенных иммуноглобулинов "Bayer" и "Sandoz" валидировать свою продукцию в США и Европе /Исрафилов и соавт., 2005/. Поэтому первой стадией инактивации возможно присутствующих вирусов в технологическом цикле приготовления препарата "Габриглобин" стал этап выдерживания полуфабриката иммуноглобулина при величине рН 4,0 - 4,5 в течение 21 суток.

Оценка качества полуфабриката до и после выдерживания при данных условиях показала, что различия основных параметров иммуноглобулина были статистически незначимым (значение р между группами от 0,226 до 1,0), что доказывает отсутствие значимого влияния условий инкубации препарата на его качественные характеристики.

В связи с тем, что рекомендованные в настоящее время методы инактивации вирусов, а именно, сухой прогрев, пастеризация, обработка растворителем и детергентом практически одинаково эффективны /Horowitz В et al., 1992; Laso М. et al., 2002/, особенно эффективен прогрев иммуноглобулина /Зубкова Н.В., Анастасиев В.В., 2002/, в качестве второй стадии вирусинактивации возможно присутствующих вирусов был использован прогрев сублимационно высушенного габриглобина во флаконах. Для выбора режима вирусинактивации было проведено исследование влияния температурной обработки при 60, 70 и 80 °С в течение 6, 24, 48 и 72 часов на отдельные параметры иммуноглобулина.

Анализ препаратов по ряду показателей, проведенный до и после прогревания, показал, что прозрачность и цветность испытуемых образцов несколько изменялись и зависели от длительности и режима прогрева. Тем не менее данные показатели находились в пределах допустимых значений в соответствии с требованием фармакопейной статьи.

Анализ антикомплементарной активности габриглобина при различных режимах прогревания показал, что данный параметр несколько изменялся в зависимости от температуры и длительности инкубации. При сопоставлении динамики изменения антикомплементарной активности препарата и его прозрачности в процессе инактивации было отмечено, что снижение антикомплементарной активности габриглобина с 20 до 10 мг белка сопровождалось уменьшением прозрачности раствора к 24 часам инкубации, а затем, к 72 часам, показатели прозрачности и антикомплементарной активности возвращались к исходным значениям. Возможный механизм изменения антикомплементарной активности иммуноглобулина, сопровождающийся колебаниями прозрачности раствора, может объясняться следующим. При сублимационном высушивании в «сухом» иммуноглобулине остается до 3 % воды, что регистрируется при определении показателя «потеря массы при высушивании» в открытом сосуде. При прогреве в герметично закрытом флаконе вполне возможно, что сначала белок (иммуноглобулин) начинает терять остаточную воду, в результате чего происходят конформационные изменения молекул иммуноглобулина, и участок связывания для первого компонента комплемента становится более доступным. Затем, в процессе продолжающегося прогрева, наступает равновесие между водой, находящейся в гидратных оболочках молекул иммуноглобулина и ограниченным объемом герметичного флакона. Наступившее равновесие сопровождается восстановлением первоначальной влажности и конформации молекул иммуноглобулина.

Данное предположение подтверждается тем, что молекулярные параметры иммуноглобулина практически не изменялись ни при прогревании сухих образцов при температуре 60 °С, ни при выдерживании их при 80 °С.

Содержание антител к вирусу кори при всех режимах вирусинактивации оставалось стабильным на протяжении первых 24 часов и к 48 часам содержание антител уменьшалось на одно разведение. Концентрация антител к альфа-стафилолизину в образцах уменьшалась более плавно и зависела от температуры и длительности инкубации. Количество антител к ЦМВ в образцах иммуноглобулина при прогревании при температурах 60 °С и 70 °С снижалось к концу процедуры не более, чем на 3,5 % (рис. 3). Однако прогревание препарата при 80 °С привело к значительному падению уровня антител к ЦМВ уже через 24 часа (на 43 %), а к 72 часам - на 53,9 %.

Таким образом, был сделан вывод об отсутствии значительного влияния прогревания сухой формы препарата габриглобина при 60 °С в течение 72 часов или при 70 °С в течение 48 часов на качественные характеристики препарата.

Производственные возможности и наличие оборудования на станции переливания крови позволили ввести в .производственный процесс приготовления вирусбезопасного габриглобина стадию прогревания препарата при 60 °С в течение 72 часов. Таким образом, в процесс производства габриглобина были включены две специальные стадии инактивации возможно присутствующих вирусов.

Учитывая, что одним из самых серьезных осложнений иммунодефицитных состояний является развитие оппортунистических инфекций, в частности, вызванных цитомегаловирусом, и принимая во внимание данные о терапевтической эффективности нормальных и специфических иммуноглобулинов при цитомегаловирусной инфекции, одной из задач настоящего исследования было изучение возможности получения иммуноглобулина для внутривенного введения с цельной, нерасщепленной молекулой IgG с высоким титром антител к ЦМВ.

С этой целью был определен титр антител к ЦМВ в препаратах нормального иммуноглобулина человека, выпускаемого Ивановской станцией переливания крови, и установлены критерии отбора донорской крови.

Фоновое содержание указанных антител в иммуноглобулине составило величину 1:1600 - 1:3200 (титр в пересчете на 5 %-ный белок), поэтому, принимая во внимание минимальное различие в содержании антител между «нормальным» и «специфическим» иммуноглобулином в 4-6 раз, допустимый титр антител к ЦМВ в гипериммунном препарате должен составлять 1:6400 — 1:12800, а минимальный допустимый титр анти-ЦМВ-антител в плазме крови доноров иметь величину 1:1600.

Был создан банк из 107 доноров, имеющих титр антител к вирусу ЦМВ более 1:1600. Плазму собирали методом плазмафереза. После карантинизации плазма была использована для приготовления трех промышленных серий иммуноглобулина с повышенным титром антител к вирусу цитомегалии, получившего коммерческое название "Габриглобин-анти-ЦМВ".

Степень концентрирования антител к ЦМВ во всех полученных образцах составила 8 раз, что свидетельствует о правильности выбранных технологических параметров процедуры фракционирования.

Титр антител в трех сериях препарата непосредственно после их изготовления составлял 1:12800 - 1:25600, что соответствовало расчетным данным на специфический антицитомегаловирусный иммуноглобулин. Через три года хранения (срок наблюдения) титр антител к ЦМВ уменьшался всего лишь на одно разведение, что, тем не менее, удовлетворяло заложенным в проект ФСП требованиям на препарат (1:6400).

Контрольные исследования содержания антител к ЦМВ, проведенные с использованием двух различных тест-систем, показали, что обе ИФА-тест-системы одинаково пригодны для этой цели. Для грубой оценки, в связи с большим шагом разведения проб, может быть использована тест-система «BeKToUMB-IgG-cTpHn», а если необходимо получение более точных результатов, необходимо применять тест-систему "ДС-ИФА-анти-ЦМВ-G".

Все три серии препарата "Габриглобин-анти-ЦМВ" имели содержание антител более 50 МЕ/мл и не уступали по специфической активности коммерческому образцу — препарату "Цитотект".

Положительные результаты, достигнутые при фракционировании плазмы с высоким титром таких лабильных антител подкласса IgG3, какими являются антитела к ЦМВ, позволили разработать общую технологию фракционирования плазмы для получения препаратов "Габриглобин" и "Габриглобин-анти-ЦМВ". Схема включает карантинизацию плазмы, тестирование на вирусные маркеры, спиртовое фракционирование, концентрирование фильтрата «Б» ультрафильтрацией при величине рН 4,2, стадию снижения антикомплементарной активности (диализ-диафильтрация), первую вирусинактивацию (выдерживание при рН 4,2 в течение 21 суток), высушивание, вторую вирусинактивацию (прогрев при 60 °С в течение 72 ч), контроль, упаковку и маркировку.

Располагая официально выпускаемым препаратом с содержанием, по данным колоночной хроматографии, мономерного иммуноглобулина G 9899 %, мы должны были убедиться в его терапевтических возможностях.

Абсолютным показанием для назначения иммуноглобулина является первичный гуморальный иммунодефицит /Кострова О.М., Алешкин В.А., 1995; Сетдикова Н.Х. и соавт., 2004; Goldman A.S., Goldblum R.M, 1977/. При этом выявляются все преимущества и недостатки того или иного коммерческого препарата иммуноглобулина: скорость достижения уровня циркулирующего IgG в сыворотке крови, длительность сохраняющейся концентрации и частота побочных реакций. Клиническая эффективность внутривенных иммуноглобулинов напрямую связана со степенью повреждения молекулы иммуноглобулина во время процедуры получения коммерческого препарата.

С целью доказательства сохранности всех основных функциональных свойств молекулы IgG были проведены клинические испытания препарата габриглобин у больных, страдающих врожденной агаммаглобулинемией.

Клинические испытания выполнены в рамках "Протокола открытого одноцентрового исследования безопасности и клинической эффективности препарата "Габриглобин" у взрослых с агаммаглобулинемией", утвержденного Фармакологическим комитетом МЗ РФ, согласованного с Комитетом по этике Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации, в отделении иммунопатологии (заведующая - д.м.н. Латышева Т.В.) ГНЦ "Институт иммунологии МЗ РФ".

Целью исследования была оценка безопасности и клинической эффективности применения габриглобина в комплексной терапии у взрослых пациентов с агаммаглобулинемией.

Разовая доза препарата составляла 0,6 г/кг веса. Все больные до начала лечения получали заместительную терапию: плазмой (2 человека) и иммуноглобулинами для внутривенного введения отечественного производства (г. Нижний Новгород и г. Уфа) - 8 человек. Несмотря на ранее проводимую заместительную терапию у больных сохранялось значительное снижение концентрации иммуноглобулина G и полностью отсутствовали иммуноглобулины классов М и А. Только у одного больного присутствовало остаточное количество иммуноглобулинов А и М.

Во время введения габриглобина ни у одного больного не было зарегистрировано каких-либо системных реакций. За время применения габриглобина больными агаммаглобулинемией в течение 3-х месяцев отмечалось сокращение частоты рецидивов хронических заболеваний, что вело за собой сокращение потребности и длительности применения антибактериальной терапии. Так, например, перед началом лечения четверо больных нуждались практически в постоянном приеме антибиотиков в связи с непрерывно рецидивирующим воспалительным процессом, в последующие 2 месяца только один больной нуждался в антибактериальной терапии.

Исследование концентрации IgG в крови больных на 0, 1-ый, 2-ой, 5-ый, 10-й, 15-ый и 21-ый дни после инфузии подтвердили, что длительность сохранения повышенного уровня IgG в крови после введения габриглобина составляет более 21 суток (3 недели).

Кроме того, препарат "Габриглобин" был успешно использован для терапии вирусных инфекционных заболеваний: при так называемом "синдроме атипичной пневмонии", при невынашивании беременности, связанной с цитомегаловирусной инфекцией, и при лечении вирусного энцефалита, вызванного вирусом Эпштейна-Барр.

Положительные результаты клинического использования габриглобина при синдроме атипичной пневмонии позволили рекомендовать включение препаратов иммуноглобулинов в комплексную терапию данного заболевания /Письмо МЗ РФ, 2003/.

Эффективность терапии препаратами иммуноглобулина, в частности, с высоким титром антител к ЦМВ, такого грозного осложнения, каким является присоединяющаяся при трансплантации органов цитомегаловирусная инфекция, подтверждена исследованиями Моисеева С.И. и соавт. /2002/; Valatine Н.А. et al. /2001/; Andreoni К.А. et al. /2001/; Snydman D.R. /2001/; Zamora M.R. /2001/; Vrtovec B. et al. /2004/. Другие исследователи не нашли существенной разницы в использовании обычных (нормальных) и специфических иммуноглобулинов /Kocher A.A. et al., 2003, Kruger R.M., et al., 2003, Bonaros N.E. et al., 2004/.

Вполне вероятно, что недостаточная эффективность направленных антицитомегаловирусных препаратов, продемонстрированная в ряде исследований, была связана с тем, что использованные препараты имели недостаточно высокий уровень специфических защитных антител или поврежденные во время фракционирования или последующей химической обработке молекулы иммуноглобулина G, а также избирательным снижением подкласса IgG4. Это подкрепляется данными Мостовской Е.В. /2004/ и Лютова А.Г. и соавт. /2005/ о низком титре антител к ЦМВ в препарате цитотект и отрицательном действии химической обработки растворителем/детергентом на антительную активность иммуноглоблинов.

Мы считаем, что препарат "Габриглобин" с высоким титром антител к вирусу цитомегалии, неповрежденным Fc-фрагментом, цельными молекулами IgG в мономерной форме, полученный без использования химической или ферментативной обработки, может стать эффективным средством лечения ЦМВ-инфекции у иммунокомпрометированных лиц. Предположение косвенно подтверждается высокой эффективностью препарата, проявленной при лечении больных с первичными иммунодефицитами. Это позволило предложить "Габриглобин-анти-ЦМВ" для клинических испытаний. Составлена программа проведения исследования безвредности и клинической эффективности препарата "Габриглобин-анти-ЦМВ" у больных с трансплантированными органами, которая представлена для согласования в Фармакологический комитет Министерства здравоохранения и социального развития России. Оценка эффективности данного препарата является задачей дальнейшего научного исследования.

Таким образом, в результате проведенных исследований была разработана производственная технология получения иммуноглобулина с неповрежденным Fc-фрагментом, имеющего цельные молекулы IgG в мономерной форме, низкое значение рН и две стадии инактивации возможно присутствующих вирусов. Технологический процесс обеспечивает получения препаратов "Габриглобин" (иммуноглобулин человека нормальный для внутривенного введения сухой) и "Габриглобин-анти-ЦМВ" (габриглобин с высоким титром антител к вирусу цитомегалии). Клинические испытания подтвердили высокое качество габриглобина, который эффективно восполнял дефицит циркулирующего IgG в крови больных с первичными гуморальными иммунодефицитами и сохранял высокую концентрацию IgG в течение более 21 суток.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Тюриков, Юрий Михайлович, 2008 год

1. Абазова Ф.И., Хахалин J1.H. Методические указания «Неизвестная эпидемия: Герпес» // Смоленск,- Фармаграфикс.- 1997.- С. 6-96.

2. Алешкин В.А., Зацепин Ю.К., Башлай А.Г. и др. Получение противодифтерийного иммуноглобулииа // Роль иммунобиологических препаратов в современной медицине. Уфа. - 1995. - Ч.1.- С. 100-102.

3. Алешкин В.А., Лютов А.Г. Препарат иммуноглобулина для внутривенного введения и способ его получения // Патент RU 2122864. А61К39/395. -1998.- Бюл. 34.

4. Алешкин В.А., Лютов А.Г., Афанасьев С.С. и др. Место иммуноглобулиновых препаратов в лечении и реабилитации инфекционных больных // Новые лекарственные препараты. М. - 2003. - В. 4. - С. 6-32.

5. Анастасиев В.В. Иммуноглобулин для внутривенного введения // Изд. НГМА.- Н.Н.-2000. 168 с.

6. Анастасиев В.В., Киселева И.А., Новикова Л.П., Тарасва Г.А. Получение из плазмы крови доноров иммуноглобулина для внутривенного введения // Гематология и трасфузиология. 1985. - № 10. - С. 46-48.

7. Антонов А .Г., Евтеева Н.В., Матвеева Н.К., Байбарина Е.Н., Вантко Л.В., Сухих Г.Т. Опыт применения отечественного человеческого иммуноглобулина для внутривенного введения у недоношенных детей // Акушерство и гинекология. 1996. - № 3. - С. 36-39.

8. Афанасьев С.С., Онищенко Г.Г., Алешкин В.А. и др. Интерфероновый статус, препараты интерферона в лечении и профилактике инфекционных заболеваний и реабилитации больных // М. "Триада-Х". - 2005. - 767 с.

9. Ю.Барашнев Ю.И. Перинатальная медицина и инвалидность с детства // Акушерство и гинекология. 1991. - № I. - С. 12-18

10. Барашнев Ю.И., Антонов А.Г. Перинатальная патология у новорожденных // Акушерство и гинекология. 1994. - № 4. - С. 20-31.

11. Баринов А.В., Ольмезов В.В. Применение окгагама и пентаглобина в лечении тяжелого сепсиса в неонатальном периоде // Анестезиология и реаниматология. 1999. - 3. - С. 59-60.

12. Бегер Р.Х., Боде-Бегер С.М., Фролих Ю.Ц. Иммуноглобулины для внутривенного введения. Обзор // Medizinische Klinik. 1995. - V. 9. - P. 520526.

13. Безрукова Н.Д. Эпидемиология и диагностика критерия ЦМВИ у новорожденных детей: Автореф. дисс.канд. мед. наук. М. - 1992. - С. 1719.

14. Безрукова Н.Д., Умарова А.А., Мирякова М.М. Цитомегалия патологии новорожденных детей // Иммунология репродукции: Тез. докл. IV Всесоюзного симпозиума. Киев. - 1990. - С. 238-240.

15. Биавен В.И. Проспект фирмы Farma Biagini S.p.A. 2002. - 3 с.

16. Борисова A.M. Новые подходы к изучению иммунодефицитных состояний при хронических неспецифических заболеваниях легких II Тер. архив. 1991.- № 10.-С. 4-14.

17. Борисова A.M. Проблемы иммунотерапии общей вариабельной иммунной недостаточности у взрослых // International Journal on Immunorehabilitation. -1998.-№ 10.-С. 118-125.

18. Борисова И.В., Алешкин В.А., Холчев Н.В. и др. Комплексные иммуноглобулиновые препараты для перорального и ректального применения // Сб. научных трудов "Иммунобиологические препараты".- М,-1989.-е. 5-9.

19. Брок Т. Мембранная фильтрация // М.- Мир,- 1987.- С. 359.

20. Бундшу Г., Шнеевайс Б. Иммунология. Справочник // Киев. Наукова думка.- 1981.-С. 202 -204.

21. Бухахер А., Бизерт Л., Хельмих J1. Требования к ВВИГ 4-го поколения. Свойства октагама, краткая характеристика препарата // Hamostaseologie. -1996.-V. 16.-Р. 74-77.

22. Веденеева Г.Н., Фоненко Б.А., Евсюкова И.И., Семков С.А. Состояние и последующее развитие новорожденных детей от матерей с ЦМВИ // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 1997. - № 3. - С. 25-29.

23. Володин Н.Н., Дегтярева. Использование препаратов иммуноглобулинов при инфекционных заболеваниях у новорожденных // Педиатрия. 1997. - 4. - С. 92-100.

24. Воронкина Е.Н. Клинико-иммунологические аспекты инфекции у детей первого месяца жизни: Дисс. канд. мед. наук Ставрополь.- 1999, - 143 с.

25. Газовская J1.A. Клиническое течение и лабораторная диагностика внутриутробных инфекций (хламидийной, микоплазменной, цитомегаловирусной, герпесвирусной) у новорожденных детей // Дисс. канд. мед. наук.- 1997. 128 с.

26. Гамимун Н. Инструкция по применению. Утв. 09.04.2004.

27. Государственная фармакопея // Одиннадцатое издание. В.1, 2. М.- Мед.- 1990.

28. Дяченко Н.С. Сайт: /biofarma.kiev.ua./rus/articles/2003/.

29. Евченко Т.А. Комплексная оценка комплементсвязывающей способности внутривенных иммуноглобулинов//Дисс. канд.биол.наук.- М,- 2000.- 117 с.

30. Ершов А.Н. Антивирусные препараты // М.-Мед.- 1998.- 187 с.

31. Зимин Ю.И. Внутривенные иммуноглобулины при иммунной недостаточности // Клиническая фармакология и терапия. 1994. - № 4. - С. 32-34.

32. Змушко Е.И., Белозеров Е.С., Митин Ю.А. Клиническая иммунология: Руководство для врачей // СПб.- Питер.- 2001. 576 с.

33. Зубкова Н.В. Физико-химические и биологические свойства препаратов иммуноглобулинов при разных способах удаления и инактивации вирусов // Автореф. дисс. канд. биол. наук,- М,- 2002. 24 с.

34. Зубкова Н.В., Анастасиев В.В. Методы инактивации вирусов в технологии производства иммуноглобулиновых препаратов // Новое в трансфузиологии. Информационный бюллетень.- М.- 2002.- вып. 33,- С. 52-59.

35. Иммунологическая недостаточность // Доклад научной группы ВОЗ. — Женева. 1980. - 93 с.

36. Исаков В.А., Исаков Д.В. Современные средства и перспективы терапии герпесвирусных инфекций //Terra medica.- 2001.- № 2,- С. 6-9.

37. Йегер Л. Клиническая иммунология и аллергология // М.- Мед.- 1986,- Т. 1.473 с.

38. Казанцев А.П., Попова Н.И. Внутриутробные инфекционные заболевания детей и их профилактика. Л. - Мед. -1980. - 232 с.

39. Калинина Н.М., Кетлинский С.А. Справочник по иммунотерапии. М. -«Диалог». - 2002. - 433 с.

40. Капирова Е.И. и соавторы. Клиническое течение и диагностика внутриутробной инфекции у новорожденных // Эпидемиология и инфекционные болезни. 1997. - № 1. - С. 27-30.

41. Карякин А.В. Контроль и обеспечение вирусной безопасности при заготовке плазмы для фракционирования и производства препаратов крови // Актуальные вопросы трансфузиологии и клинической медицины. Киров. -2005. - С. 109-112.

42. Кетлинский С.А., Калинина И.М. Иммунология для врача // СПб. 1998. - С. 55-71.

43. Кондратенко И.В., Юрасова А.С., Тверская С.М., Евграфов О.И., Резник И.Б. Опыт пренатальной диагностики первичных иммунодефицитов // Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. 2003.- № 4,- С. 8486.

44. Корницкий Н.А. К вопросу патоморфоза цитомегаловирусного менингоэнцефалита // Прикладные аспекты морфологии клеток, тканей и органов. Новосибирск. - 1984. - С. 29-32.

45. Коровина Н.А., Заплатников АЛ., Анохин В.А. Руководство по использованию иммуноглобулинов для внутривенного введения в клинической практике // Формуляр для врачей. М. - 2000. - 69 с.

46. Корочкина О.В. Иммуноглобулин для внутривенного введения в клинической практике: Методическое пособие.- Н.Н.- НГМА.- 2003.- 28 с.

47. Кострова О.М. Разработка физико-химических и иммунологических основ получения препарата противогерпетического иммуноглобулина человека // Дисс. канд.биол.наук.- М.- 1993.- 141 с.

48. Кострова О.М., Алешкин В.А. Иммуноглобулиновая терапия вирусных инфекций // Российский мед. журнал.- 1995.- № 1. С. 52-54.

49. Кострова О.М., Алешкин В.А. Иммуноглобулины для профилактики и лечения вирусных инфекций // Иммунология.- 1995.- № 6.- С. 6-11.

50. Кудашева Г.Б. Обоснование технологии получения антистафилококкового иммуноглобулина методом аффинной хроматографии // Автореф. дисс. канд.мед.наук. Челябинск.- 1993.- 21 с.

51. Кузнецова О.В. Распространенность и клинические особенности течения цитомегаловирусной инфекции у детей первого года жизни в г. Перми // Автореф. Дисс. канд. мед. наук. Пермь.- 1997.- 134 с.

52. Кэбот Е., Мейер М. Экспериментальная иммунохимия // М,- Мед.- 1968. С. 140-246.

53. Лопухин Ю.М., Петров Р.В. Врожденные иммунодефицитные состояния у детей // М.- Хирургия. 1975.- в. 9. - с. 270.

54. Лютов А.Г., Алешкин В.А. Разработка внутривенного иммуноглобулина нового поколения // Проблемы мед. биотехнологии и иммунологии инфекционных болезней: Сб. трудов МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского.- М.-1996.-Т.2.- С. 21-27.

55. Мартин Т.Д. Вопросы применения вводимого внутривенного иммуноглобулина // Терапевтический архив. 1996. - № 10.- С. 83-86.

56. Матвеев В.А. Цитомегаловирусная инфекция у детей. (Клинико-иммуно-патогенегические аспекты) //Дисс. докт. мед. наук. Витебск. - 1996.- 312 с.

57. Матвеев В.А., Новикова В.И. Иммунологическая диагностика врожденной ЦМВ инфекции у детей раннего возраста // Здравоохранение Белоруссии.-1992.-№ 2.- С. 20-22.

58. Миронов П.И., Руднов В.А. Проблемы и перспективные направления коррекции медиаторного ответа при сепсисе // Анестезиология и реаниматология.- 1999. № 3. - С. 54-59.

59. Моисеев С.И., Нуйя М.Л., Чеботкевич В.Н., Гончар В.А., Абдулкадыров К.М. Цитомегаловирусная инфекция при пересадках костного мозга // Терапевтический архив,- 2002.- № 7.- С. 44-48.

60. Мостовская Е.В. Оптимизация технологии получения жидкой формы иммуноглобулина для внутривенного введения // Дисс. канд. биол. наук.-М.- Уфа.- 2004,- 134 с.

61. Нагибина Н.С., Ширинская О.Г. Нейрография при внутриутробной инфекции у новорожденных // Эпидемиология и инфекционные болезни. 1997.- № 1.-С. 30-32.

62. Орехов К.В. ЦМВИ у детей раннего возраста // Экология человека и инфекционные заболевания детей Ставропольского края. Сб. научных трудов,- Ставрополь. 1994. - С. 26-36.

63. Орехов К.В., Голубева М.В., Барычева Л.Ю. Врожденная цитомегал о вирусная инфекция // Детские инфекции. 2004. - № 1. - С. 49-55.

64. Панов В.П. Принципы обеспечения вирусной безопасности продуктов крови // Химико-фармацевтический журнал.- 2004.- № 3. С. 39-44.

65. Панов В.П., Карякин А.В., Иванова B.C. Основные принципы обеспечения вирусной безопасности продуктов крови // Актуальные вопросы трансфузиологии и клинической медицины. Киров. - 2005. -С. 221-225.

66. Письмо'МЗ РФ № 2510/4194-03-27. 2003.

67. Подгорная Е.Ю., Порохненко С.Г. Обеспечение инфекционной безопасности донорской крови и ее компонентов // Актуальные вопросы трансфузиологии и клинической медицины. Киров. - 2005.- С. 69-72.

68. Понкратова Т.С. Принципы ИФА-диагностики внутриутробного поражения новорожденных инфекциями TORCH-комплекса // Иммуноферментный анализ в системе лабораторной диагностики. Звенигород.- 1994. - С. 68-73.

69. Попкова Н.Г., Соловьев А.Ф., Смирнова Н.И., Болотов В.В. Опыт карантинизации компонентов крови // Актуальные вопросы трансфузиологии и клинической медицины.- Киров. 2005,- С. 72 - 76.

70. Проспект фирмы Биотест. 2002.

71. Резник И.Б. Современное состояние вопроса о первичных иммунодефицитах // Педиатрия,- 1996,- 2.- С .4-14.

72. Русанов В.М., Левин И. Лечебные препараты крови // М.- 2004.- 284 с.

73. Русанов В.М., Скобелев Л.И. Фракционирование белков плазмы в производстве препаратов крови // М.- Мед.- 1983. 223 с.

74. Салита И.В., Исаак В.В., Футор И.Ф. Цитомегаловирусная инфекция у детей // Актуальные вопросы теоретической и клинической медицины: Сб. науч. трудов. Кишинев. - 1989. - С. 261-262.

75. Самсыгина Г.А. Иммуноглобулины для внутривенного введения в педиатрии //Лечащий врач.- 2002. 9.- С. 14-18.

76. Самсыгина Г.А., Дудина Т.А. Клиническая эффективность октагама -иммуноглобулина для внутривенного введения у детей первого года жизни // Педиатрия.- 2001,- № 3,- С. 83-85.

77. Самсыгина Г.А., Дудина Т.А., Алексеева В.В. Результаты применения отечественного иммуноглобулина для внутривенного введения // Педиатрия.-2000.-№3.-С. 79-80.

78. Сапожникова B.C. Разработка и изучение свойств антистафилококкового и противостолбнячного иммуноглобулинов для внутривенного введения // Автореф. Дисс. канд. биол. наук,- Л,-1990.- 20 с.

79. Серов В.Н., Гуртовой Б.Л., Тютюнник В.Л., Зайдиева З.С. Иммуноглобулинотерапия у беременных с герпес-вирусной инфекцией // Клиническое применение иммуноглобулинов для внутривенного введения. Сб. трудов НГМА. 1999. - В. 2. - С. 46-52.

80. Серов В.Н., Гуртовой Б.Л., Тютюнник В Л., Зайдиева З.С. Иммуноглобулинотерапия у беременных с герпесвирусной инфекцией // В сб.: Клиническое применение иммуноглобулина для внутривенного введения. Н.Н.- 1998.- С. 30-35.

81. Степурина О.В. Бактериально-иммунологические параллели в периоде новорожденности: Автореф. дисс. к.м.н. Ставрополь. - 1995.- 23 с.

82. Стригин В. А., Трофимов В. А., Магазов Р.Ш. Антиаллергические иммуноглобулиновые препараты // Уфа.- «Гилем»,- 1997.- 140 с.

83. Сухих Г.Т., Ванько JI.B., Кулаков В.И. Иммунитет и генитальный герпес // Н. Н. Издательство НГМА. - М. - 1997. - С. 106-108.

84. Таранов А.Г. Диагностические тест-системы (радиоиммунный и иммуноферментный методы диагностики) //М.- MX.- 2002.- С. 185-187.

85. Фром А.А., Скобелев Л.И., Русанов В.М., Никитенко А.А. Белки плазмы и их фракционирование в производстве препаратов крови // М.- Медицина. -1974.-251 с.

86. Фармакопейная статья производства (ФСП) "Габриглобин" (иммуноглобулин человека нормальный) № 42-0265-1621,-01. t

87. ЮО.Хабибуллина В.В. Разработка способа получения препарата иммуноглобулина человека против цитомегаловируса // Автореф. дисс. канд.биол.наук. М.- 2003. - 25 с.

88. Хватов В.Б., Михайлова Н.А., Биткова Е.Е., Кобзева Е.Н. Иммунобиологические препараты из плазмы крови человека // Новое в трансфузиологии. М.- 2002.- Вып. 32,- С. 66-73.

89. Холчев Н.В. Гамма-глобулин (методы получения и стандартизации) // Дисс. докт.биол.иаук в форме научного доклада.- М. 1965.- 44 с.

90. Холчев Н.В., Колесникова Л.И. Исследования по очистке и концентрированию противокоревых сывороток. Сообщение 1. Методика получения очищенной гамма-глобулиновой фракции // Журн. микробиол.-1947.- №5.- С. 6- 16.

91. Юб.Холчев Н.В. Современные препараты иммуноглобулинов для медицинского применения. // Препараты нормальных и специфических иммуноглобулинов человека. Сб. научн. Трудов МНИИЭМ.- М.- .- 1976.- Т.-18.- С. 5-14.

92. Шабалов Ы.П. Внутриутробная инфекция и патология человека // Перинатальная патология и здоровье детей. Л. - 1988. - С. 106-110.

93. Шаригин И.П. Внутривенные иммуноглобулины в педиатрической практике //Педиатрия. 1991.-Т. 9.-С. 105-107.

94. Шарыгин СЛ. Препараты внутривенных иммуноглобулинов из донорской плазмы для терапии бактериальных и вирусных инфекций (получение и клиническое применение): Автореф. дисс. д.м.н. СПб.- 1997. - 41 с.

95. Ш.Ширяева ТЛ. Течение и исходы цитомегаловирусной инфекции у детей раннего возраста// Дисс. канд. мед. наук.- Архангельск. 1999.-166 с.

96. И2.Шкуратова О.В. Разработка научно-методических основ технологии производства специфического препарата для лечения больных дифтерией // Автореф. дисс. к.б.н.- Уфа.- 2002.- 22 с.

97. ПЗ.Шульженко А.Е. Человек и герпес настоящее и будущее // Физиология и патология иммунной системы. - 2004. - Т. 8. - № 2. - С. 45-57.

98. Чернохвостова Е.В., Герман Г.П. Иммунохимическая диагностика гаммапатий // Методические рекомендации. М.- 1984. - 52 с.

99. Эндобулин. Иммуноглобулин человеческий для внутривенного введения, лиофилизированный вирусинактивированный // Проспект фирмы "Immuno AG". 1995.- 16 с.

100. Пб.Юшков В.В., Юшкова Т.А., Казьянин А.В. Иммунокорректоры: Руководство для врачей и провизоров. Екатеринбург. — 2002. - 255 с.

101. Ярцев М.Н., Яковлева К.П. Физиология и патология иммунной системы. 2004.-№ 2.-С. 11-19

102. Ярцев М.Н., Гомес Л.А., Хахалин Л.Н., Бачурин А.В., Филатов А.В., Еремина О.Ф., Пинегин Б.В. Клиника и диагностика синдромов недостаточности антител // Вопросы охраны материнства и детства.- 1989. -№2.-С. 13-16.

103. Ades А.Е. Methods for estimating the incidence of pima ru infection in pregnancy: A reappraisal of toxoplasmosis and cytomegalovirus data // Epidemiol, infect.- 1992. V.108. - № 2. - P. 367-375.

104. Adler S.P. Starr S.E., Plotkin S.A. Immunity induced by primary human Cytomeqalovirus infection protects again secondary infection among women of childbearing age // J-infect.-Dis.- 1995. V. 171. № 1. - P. 26-32.

105. Aghamohammadi A, Moin M, Farhoudi A. et al. Primary immunodeficiency in Iran: first report of the National Registry of PID in children and adults // J. Clin. Immunol. 2002. - V. 22.- № 6. - P. 375-380.

106. Akman S, Guven AG, Ince S, Yegin O. IgG and IgG subclasses deficiency in children undergoing continuous ambulatory peritoneal dialysis and its provocative factors // Pediatr. Int. 2002. - V. 44 - № 3. - P. 273-276.

107. Ardeniz O, Gulbahar O, Mete N, Cicek C, Basoglu OK, Sin A, Kokuludag A. Chlamydia pneumoniae arthritis in a patient with common variable immunodeficiency // Ann Allergy Asthma Immunol. 2005 - V. 94 - Suppl. 4. - P. 504-8.

108. Ballow M. Primary immunodeficiency disorders: antibody deficiency // J. Allergy Clin. Immunol. 2002,-V. 109. -№ 4. - P. 581-591.

109. Barandun S., Isliker H. Development of immunoglobulin preparations for intravenous use. Vox Sang.- 1986.-51.-P. 157-160.

110. Bayry J, Hermine O, Webster DA, Levy Y, Kaveri SV. Common variable immunodeficiency: the immune system in chaos // Trends Mol. Med. 2005. -V. 11. -№ 8.-P. 370-376.

111. Bean B. Antiviral therapy: current concepts and practices // Clin Microbiol Rev. 1992.- 5.-2,-P. 146-82.

112. Berkman S.A., Lee M.L., Gale R.P. Clinical uses of intravenous immunoglobulins //Annals of internal medicine.- 1990. V.112. - №. 4.- P. 278-292.

113. Brown Z.A., Gardella C., Wald A., Morrow R.A., Corey L. Genital herpes complicating pregnancy // Obstet Gynecol. 2005. - V. 106. - № 4. - P. 845-56.

114. Bruton O.C. Agammaglobulinemia // Pediatrics.- 1952.- № 9. P. 722.

115. Buckley R.H. Primary cellular immunodeficiencies // J. Allergy Clin. Immunol.-2002. V. 109. - № 5,- P. 747-57.

116. Bystricka M., Russ G. Immunity in latent Herpes simplex virus infection // Acta Virol. 2005. - V. 49. - № 3. - P. 159-67.

117. Castigli E, Wilson SA, Garibyan L, Rachid R, Bonilla F, Schneider L, Geha RS. TACI is mutant in common variable immunodeficiency and IgA deficiency // Nat. Genet. 2005. - V. 37. - № 8. - P. 829-34.

118. Cecere A, Marotta F, Vangieri B, Tancredi L, Gattoni A. Progressive liver injury in chronic hepatitis С infection is related to altered cellular immune response and to different citokine profile // Panminerva Med. 2004. - V. 46. - № 3. - P. 17187.

119. Cerry L.M., Cytogenetic and public health-human mutagen exposure and the risk of disease // Cancer Bull.- 1983,- V. 35.- P. 144-149.

120. Chinen J, Shearer W.T. Basic and clinical immunology // J. Allergy Clin. Immunol. 2005. - V. 116. - № 2. - P. 411-18.

121. Coursu K., Lisse I, Richter H. Antikorper qeqen cytomeqalievirus bei Blutspenotern // Folia Haematol, Int.Maq.Klin. Morphol. Blutforseh. -1989.-V. 116. -№ 2. P. 183-86.

122. Cunningham-Rundles C, Radigan L. Deficient IL-12 and dendritic cell function in common variable immune deficiency // Clin. Immunol. -2005. -V. 115. № 2. - P. 147-53.

123. Cunningham-Rundles C. Clinical and immunological analysis of 103 patients with common variable immunodeficiency // J. Clin. Immunol. 1989. - V. 32.- P. 22-23.

124. Cunningham-Rundles C. Hematologic complications of primary immune deficiencies // Blood Rew.- 2002,- V. 16.- № 1.- P. 61-64.

125. De Ory F. et al. Serological diagnosis of cytomegalovirus infections: comparison of six commercial methods of ELISA // Serodiagnosis and Immunotherapy. -1988.-V. 2,-P. 423.

126. Derry J.M., Ochs H.D., Francke U. Isolation of a novel gene mutated in Wiskott-Aldrich syndrome // Cell.- 1994.- V. 79.- 5.- P. 635-644.

127. Dimopoulos MA, Anagnostopoulos A. Waldenstrom's macroglobulinemia // Best Pract. Res. Clin. Haematol. 2005. - V. 18. - № 4. - P. 747-65.

128. Dwyer J.M. Intravenous therapy with gamma globulin // Adv. Intern. Mtd. -1987.-V.32.-P. 111-135.

129. Eibl M.M., Wedgwood R.J. Intravenous immunoglobulin: a rewiew // Immunodefic. Rev. 1989. - Suppl. 1. - P. 1-42.

130. Einsele H, Ebninger G, Steidle M. et al. Limphocytopenia as an unfavorable prognostik factor in patients with cytomegalovirus infection after bone marrow transplantation 11 Blood. 1993 -V. 82. - № 5,- P. 1672-78.

131. Eisenfeld L. Mc.Lanqhlin J.C. May D. et al. Cytomegalovirus antibody detection in blood. Donors and mothers of very low birth weight neonatalis by using three serologic methods // Diagh. Microbiol. .Infect. Dis.- 1992,- V. 15. P. 125-128.

132. Eisenstein E.M, Aker M, Savoldi G, Jaffe R, Prus D. A primary immunodeficiency disorder associated with absence of lymphoid germinal centers // J. Clin. Immunol. 2002. - V. 22. - № 5. - P. 297-305.

133. Engel W.K. Intravenous immunoglobulin G is remarkably beneficial in chronic immune dysshwannian/dysneuronal polyneuropathy, diabetes-2 neuropathy, and potentially in severe acute respiratory syndrome // Acta Myol.- 2003.- № 3.- P. 97103.

134. Etzioni A. Immune deficiency and autoimmunity //Autoimmun. Rev. 2003. - V. 2. - № 6. — P. 364-369.

135. Finlayson J.S. Immunoglobulin // Semin. Tromb. Hemostas. 1980. - V. 6. - P. 44-47.

136. Fischer A., Arnaiz-Villena A. Immunodeficiencies of genetic origin // Immunol. Today. 1995.- N.U.-P. 510-514.

137. Fisher G.W. Immunoglodulin therapy in older infants and children // Infect. Dis. Clin. North. Am. 1992.-V.6. -№ 1.-P. 97-116.

138. Fletcher C.V., Goodroad B.K., Cummins L.M., Balfour H.H., Rhame F.S. Pharmacokinetics of hyperimmune anti-human immunodeficiency virus immunoglobulin in persons with AIDS // Antimicrob. Agents Chemother. 1997. -V. 41. -№ 7.-P 1571-74.

139. Freeman J.W. Fresh frozen plasma: can you afford the risk // Clinical Courier. -1994.- V. 5.- P. 1-8.

140. Friesen A.D., Bowman J.M., Bees W.C.H. Column ion exchange chromatographic production of human immune serum globulin for intravenous use. Vox Sang.- 1985.-48.- P. 201-212.

141. Gardi A. Quality control in the production of an immunoglobulin for intravenous use // Blut.-1984.- 48.- P. 337-344.

142. Geha R.S., Rosen RS. Therapeutic Immunology. II RSG Chapter.- 1994.-11.- P. 1-31

143. Gisserot O, Landais C, Cremades S, Terrier JP, Leyral G, Bernard P, de Jaureguiberry JP. Amyloid arthropathy and Waldenstrom macroglobulinemia // Joint Bone Spine. 2006 .- V,- 73.- N 4,- P. 456-458.

144. Goldman A.S., Goldblum R.M. Primary deficiencies in humoral immunity // Pediatr. Clin. North. Am. 1977. - V. 24.- № 2. - P. 277- 291.

145. Grimaldi A., Barletta A., Rascente M., Pisani F., Iaria G., Maccarone D., Maira E., D'Angelo M., Famulari A. Infectious Complications in the Renal Transplant Recipient // Transplant. Proc. 2005. - V. 37. - N. 6.- P. 2502-2503.

146. Grint P.C.A. et al. Screening tests for antibodies to Cytomegalovirus: an evaluation of five commercial products // J. Clin. Pathol. 1985. - V. 38. - P. 1059

147. Harrison L.F., Shearer W.T. Evaluation and management of В and T cell abnormalities//Allergy Proc. 1991. -V. 12. -№ l.-P. 25-30

148. Hasset J.M. Humoral immunodeficiency: a review // Pediatr. Ann. -1987.- V. 16. -№5.-P. 404- 11.

149. Hassig A. Requirements for modern intravenous immunoglobulin preparation and their safe clinical use // Triangle.-1987.- V. 26,- N 1.- P. 23-30.

150. НШ H.R. Intravenous immunoglobulin use in the neonate: role in prophylaxis and therapy of infection. // Pediatr Infect Dis J. 1993.- V. 12,- N. 7.- P. 549-558.

151. Hirota K., Muraquchi K., Watabe N. et al. A. prospective study on maternal, intrauterine, and perinatal infections with cytomeqalovirus in Japan durinq 1976-1990//J. Med. Virol. 1992. - V. 37.-№ 4. - P. 303-306.

152. Hoanq В., Le-Xuan O., Guichoux P., Sinonneau M. Prevalence of antibodies to cytomeqalovirus in a population of blood donors fron Paris reqion. // Rev. Fr. Transfus. Hemobiol. 1991.-V.34. - № 2. - P. 119-130.

153. Horowitz B. et al. Solvent/detergent treated plasma: a virus inactivated substitute for fresh frozen plasma // Blood. -1999.- V. 3.- P. 826-31.

154. Immunodeficiency. Report of a WHO Group. WPIO // Genova.-1978.- 80 p.

155. Jabara HH, Fu SM, Geha RS, Vercelli D. CD40 and IgE: synergism between anti-CD40 monoclonal antibody and interleukin 4 in the induction of IgE synthesis by highly purified human В cells // J Exp Med. 1990.- V. 172.-N. 6. P. 1861-1864.

156. Kasper C.K., Silva M.C. World Federation Hemophilia // Registry of clotting factor concentrates, update of January 2003. USA.-Los Angeles. - 2003.

157. Kazatchkine M.D., Bayry J., Lacroix-Desmazes S., Kaveri S.V. Mechanism ofiaction of intravenous immunoglobulin in autoimmune and inflammatory diasease. // Intravenous immunoglobulins in the third millennium.- 2003.- P. 105-112.

158. Koskinen S. Long-term follow-up of health in blood donors with primary selective IgA deficiency // J. Clin. Immunol.- 1996,- V. 16. P. 165-70.

159. Kumor M.L., McDonald J.M., Lietman P.S. Effect of'high-dose' amikacin in children // Dev Pharmacol Ther. 1984,- V.- 7,- N 6.- P. 368-376.

160. Kyle RA, Rajkumar SV. Monoclonal gammopathies of undetermined significance // Best Pract. Res. Clin. Haematol. 2005. - V. 18. - № 4. - P. 689-707.

161. Laso A., Caple M., Moore C. et al. Broad-spectrum virusreduction in red cell concentrates using Inactine pen 110 chemistry // Vox. Sang. 2002. - V. 4. - P. 313-17.

162. Lebing W., Remington K.M., Schreiner C. et al. Properties of new intravenous immunoglobulin (IGIV-C, 10 %) produced by virus inactivation with caprilate and column chromatography // Vox. Sang. 2003. - V. 84. - P. 193-201.

163. Leuzinger H., Ziegler U., Schraner E.M., Fraefel C., Glauser D.L., Heid I., Ackermann M., Mueller M., Wild P. Herpes simplex virus 1 envelopment follows two diverse pathways//J. Virol. 2005.-V. 79. -№ 20. - P. 13047-13059.

164. Linhares M.I., de-Andrabe G.P, Tateno S. et al. Prevalence of cytomeqalovirus antibodies in Brazilian and Japanese populations in the north east of Brazil // Microbiol. Immunol. 1989. -V. 33. - № 11. - P. 975-980.

165. Louie R.E., Galloway C.J., Dumas M.L., Wong M.F., Mitra G. Inactivation of hepatitis С virus in low pH intravenous immunoglobulin. // Biologicals. 1994. -V. 22. -№ l.-P. 13-19.

166. Lutskiy M.I., Rosen F.S., Remold-O'Donnell E. Genotype-proteotype linkage in the Wiskott-Aldrich syndrome // J. Immunol. 2005. V. 15. - № 175. - Suppl. 2. -P. 1329-36.

167. Ma Y.C., Shyur S.D., Ho T.Y., Huang L.H., Wu J.Y., Liang D.C., Chien Y.H. Wiskott-Aldrich syndrome complicated by an atypical lymphoproliferative disorder: a case report // J. Microbiol. Immunol. Infect. 2005. - V.38. - № 4. -P. 289-92.

168. Matamoros F.N., Mila L.J., Espanol B.T., Raga B.S., Fontan C.G. Primary immunodeficiency syndrome in Spain: first repot of the National Registry in children and adults // J. Clin. Immunol. -1997.- V.17.- P. 333-39.

169. McCue J.P., Hein R.H., Tenold R. Three generations of immunoglobulin G preparations for clinical use. Reviews of infectious diseases.-1986.-v.8.-suppl.4.-p.374-381

170. Mihaly E., Nemeth A., Zagoni Т., Nemet A., Werling K., Racz I., Tulassay Z. Gastrointestinal manifestations of common variable immunodeficiency diagnosed by video- and capsule endoscopy // Endoscopy. 2005. -V. 37. - № 6. - P. 603 -604.

171. Mirph J.R., Baron J.C., Browh C.K. et al. The occupational risk of cytomeqalovirus infection amonq day care providers // JAMA. -1991.- V. 265. -№ 5,- P. 603- 608.

172. Mitra A., Pollock В., Gooi J., Darling J.C., Boon A., Newton-Bishop JA. Cutaneous granulomas associated with primary immunodeficiency disorders // Br. J. Dermatol. 2005. - V. 153.-№1.-P. 194-199.

173. Mitra G., Mozen M.M., Louie R.E. Preparation of human immunoglobulin free of hepatitis С //US patent N 5419906, Miles Inc. 1995.

174. Mori I, Nishiyama Y.Herpes simplex virus and varicella-zoster virus: why do these human alphaherpesviruses behave so differently from one another? // Rev Med Virol. 2005.- V,- 15.- N. 6.- P. 393-406.

175. Morimoto Y., Routes J.M. Granulomatous disease in common variable immunodeficiency // Curr Allergy Asthma Rep. 2005. - V. 5. - № 5. - P. 370375.

176. Musiani M. et al. Rapid detection of antibodies against Cytomegalovirus induced immediate early and early antigens by an enzyme linked immunosorbent assay // J. Clin. Pathol. 1984.- V. 37,- P. 122.

177. Neuman-FIaetfelin D. Detsch. Med.Wschr. 1986. - Bd.2. - № 3.- P. 1251-1257.

178. Noelle RJ, Shepherd DM, Fell HP. Cognate interaction between T helper cells and В cells. VII. Role of contact and lymphokines in the expression of germ-line and mature gamma 1 transcripts. // J Immunol. 1992,- V. 149.- N 4.- P. 1164-1169.

179. Padeh Y.C., Rubinstein A., Shliozberg J. Common variable immunodeficiency and testing for HIV-1 // N. Engl. J. Med. 2005. - V. 8. - № 353. - Suppl. 10. - P. 1074-1075.

180. Panoskaltsis N, Abboud C.N. Human immunodeficiency virus and the hematopoietic repertoire: implications for gene therapy. // Front Biosci. 1999,- 4.-P. 457-467.

181. Pass P.F., Hutto C., Lyon M.D. et al. Increased rade of cytomegalavirus infection among day care center workers // Pediatr-infect. Dis. J. 1990. - V. 9. - № 7. - P. 465-70.

182. Patel J.Y., Huston D.P. Gene therapy in Wiskott-Aldrich syndrome: the next step? // Curr Allergy Asthma Rep. 2005. - V. 5. - № 5. - P. 347-348.

183. Prentice H.G., Sacchi S., Russell N. Future directions in haematology: beyond multiple myeloma // Acta Haematol. 2005. - V 114. - Suppl. 1. - P. 27-32.

184. Primary immunodeficiency diseases report of WHO scientific group // Clin. Exp. Immunol. - 1995.- V. 99. - Suppl 1. - P. 1-24.

185. Ralph J.P., Wedwood R.J., Rosen F.S. Globulin replacement therapy in immunodeficiency // Clin. Immunol. Immunopath. - 1987. - V. 43. - № 2. - P. 151.

186. Rewvie D. Novel validation approaches to obtain maximum viral clearence from an immunoglobulin production process. // IBC 2nd Intern. Symp. on viral clearence.- Philadelphia.-1998.- 235 p.

187. Rosen F.S., Cooper M.D., Wedgwood R.J.P. The primary immunodeficiencies // New England J. Medicine.-1995.- V. 333. № 7,- P. 431-40.

188. Rosen F.S., Wedgwood R.J.P., Eibl M. et al. Primary immunodeficiency diseases: Report of a WHO scientific group // Clin. Exp. Immunol. 1997.-V. 109. - Suppl. l.-P. 1-28.

189. Rossi F. Viral safety of intravenous immunoglobulin: the view of the French medicine agency // Intravenous immunoglobulin: research and therapy // Bath.-UK.- 1996.-P. 19- 25.

190. Ryser O., Morell A., Hitzig W.H. Primary immunodeficiency in Switzerland: fist report of National Registry in adults and children // J. Clin. Immunol. 1988. - V. 8. - P. 479-485.

191. Schiff R.I., Williams L.W., Nelson R.P., Buckley R.H., Burks W., Good

192. Schmidt R.E., Deicher H. Indikationen zur anwendung intravenoser immunoglobulin // Dtsch. Med. Wochenschr. 1983. - V. 108. - № 6. - P. 337231.

193. Sedlacek H.H., Gronski.P, Hofstaetter Т., Kanzy E.J., Schorlemmer H.U., Seiler F.R. The biological properties of immunoglobulin G and its split products F(ab)2 and Fab., Klin. Wochenschr.-1983.-V. 61.-N. 13.-P. 723-736.

194. Sia I.G., Patel R. New strategies for prevention and therapy of cytomegalovirus infection and disease in solid-organ transplant recipients // Clin. Microbiology reviews.- 2000.-V. 13.-№ 1.-83-121.

195. Spector B.D., Perry G.S., Kersey J.H. Genetically determined immunodeficiency disease (GDID) and malignancy: report from immunodeficiency-cancer registry // Clin. Immunol. Immunopathol. -1978.-V.- 11.- P. 12-29. ?

196. Spickett G.P., Misbah S.A., Chapel H.M. Primary antibody deficiency in adults // Lancet. 1991. -V. 337. - № 8736.- P. 281-284.

197. Staqno S. The Infection Disea ses of the Fetusand Newborn Infant // Eds J. S. Reninqton, J.O.Kbin Philadelphia. - 1990.- № 3. - P. 241 -81.

198. Steinmuller D.R., Novick A.C., Streem S.B., Graneto D., Swift C. Intravenous immunoglobulin infusions for the prophylaxis of secondary cytomegalovirus infection // Transplantation. 1990.- № 1,- P. 68-70.

199. Stewart D.M., Lian L., Nelson D.L. The clinical spectrum of Bruton's agammaglobulinemia //Curr Allergy Asthma Rep.- 2001.- V. 1.- № 6.- P. 558-565.

200. Stippel D., Wienand P., Weissenberg N., Baldamus C., Kruppenbacher U. CMV prophylaxis after renal transplantation with immunoglobulin or CMV-hyperimmunoglobulinemia prospective clinical trial // Transpl. Int. 1992. - V. 5. - Suppl. l.-P. 146-147.

201. Tenold R.A. Intravenously injectable immune serum globulin. // Patent USA No. 4396608.- 1983,- C08L 89/00

202. Wada Т., Schurman S.H., Garabedian E.K., Yachie A., Candotti F. Analysis of T-cell repertoire diversity in Wiskott-Aldrich syndrome // Blood. 2005. - V. 106.-N. 12.-P. 3895-3897.

203. Waner J.L. Mixed viral infections: detection and management // Clin. Microbiology reviews.-1994.- V. 7.- № 2.-P. 143-151.

204. Wang J., Cunningham-Rundles C. Treatment and outcome of autoimmune hematologic disease in common variable immunodeficiency (CVID) // J. Autoimmun. 2005. - V. 25. - № 1. - P. 57-62.

205. Wedwood R.J. Intravenous immunoglobulin // Clin. Immunol. Immunopath. -1986. -V. 40. № l.-P. 147-151.

206. Weiler C.R., Bankers-Fulbright J.L. Common variable immunodeficiency: test indications and interpretations // Mayo Clin. Proc 2005 - V. 80,- № 9. - P. 11871200.

207. Weinberg A. The role of immune reconstitution in cytomegalovirus infection // Biodrugs. 2002.- V. 2,- P. 89-95.

208. Weltzin R., Monath T.P. Intranasal antibody prophylaxis for protection against viral disease // Clin. Microbiol. Rev. 1999. - V. 12. - № 3. - P. 383-393.

209. WHO guidance document of viral inactivation and removal procedures interned to assure the viral safety of blood plasma products // WHO HQ.-Geneva. 2001.

210. Williams P.E. Intravenous immunoglobulin: mechanisms of action // Intravenous immunoglobulins in the third millennium. 2003.- P. 393-397.

211. Wisdom G.B. Enzyme-Immunoassay // Clin. Chem. 1976. - V. 22,- 1243 p.

212. Yamanaka Т., Abo W., Chiba S., Nakao Т., Masuho Y., Tomibc K.,Noguchi T. Clinical effect and metabolism of S-sulfonated immunoglobulin in 7 patients with congenital humoral immunodeficiency // Vox Sang.- 1979.- V. 37.- P. 14-20.

213. Zamora M.R. Use cytomegalovirus immune globulin and ganciclovir fr the prevntion of cytomegalovirus disease in lung transplantation. // Transpl. Infect Dis. 2001.- 3,- Suppl 2, P. 49-56.

214. Zegers B.J., Rijkers G.T., Stoop J.W. Humoral immunodeficiency: ^from description to the cellular and molecular basis of the defect // Neth. J. Med. -1991. V. 39. - № 3. - Suppl. 4. - P. 199-208.

215. Zhao C.Q., Shao J.J. Detection of specific antibodies to cytomeqalovirus in the blood donors in Qinqdao // Chunq. Hua. Lin. Hsiq. Pinq. Hsues. Tsa.Chih.-1989. -V. 10.-№2.-P. 78-81.