Разработка подходов к иммунодиагностике интоксикации сернистым ипритом тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.20, кандидат биологических наук Стосман, Кира Иосифовна

• Стосман, Кира Иосифовна
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Стосман, Кира Иосифовна

Список сокращений, принятых в диссертации ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. Обзор литературы. Биомаркеры интоксикации ипритом и методы их исследования

1.1. Патогенез токсического действия иприта

1.1.1. Механизмы, лежащие в основе местного действия

1.1.2. Механизмы резорбтивного действия

1.2. Морфологические и функциональные особенности иммунной системы млекопитающих

1.2.1. Морфологические особенности иммунной системы

1.2.2. Иммунекомпетентные клетки

1.3. Особенности функционирования иммунной системы

1.4. Иммунокомпетентность

1.5. Иммунотоксичность

1.6. Изучение влияния иприта на иммунную систему

1.7. Методы индикации иприта в биосредах и выявление ее биомаркеров

1.7.1. Определение иприта и его метаболитов физико-химическими методами

1.7.2. Эндокринологические исследования

1.7.3. Гематологические исследования

1.7.4. Иммунологические исследования

ГЛАВА 2. Материалы и методы

2.1. Метод определения уровня антител к стрептолизину О

2.2. Метод определения продукции супероксиданиона (НСТ-тест)

2.3. Оценка пролиферативной активности лимфоцитов селезенки при стимуляции Т- и В-митогенами (реакция бласттрансформации лимфоцитов)

2.4. Метод оценки апоптоза в спленоцитах

2.5. Оценка экспрессии рецепторов С095 на мононуклеарах методом проточной цитофлуориметрии

2.6. Определение активности холинэстераз

2.7. Подбор схемы иммунизации кроликов

2.8. Синтез антигенов для иммунизации и тест-антигенов для имму-ноферментного анализа

2.9. Получение иммунных сывороток

2.10. Анализ и отбор иммунных сывороток

2.11. Реакция гемагглютинации

2.12. Реакция преципитации в геле

2.13. Статистическая обработка результатов

ГЛАВА 3. Полученные результаты и их обсуждение.

3.1. Изучение токсикометрических параметров иприта при накожной аппликации

3.2. Изучение влияния иприта на некоторые параметры функционального состояния иммуннои системы

3.2.1. Влияние иприта на показатели неспецифической резистентности

3.2.1.1. Оценка уровня антител к стрептококковому ферменту (стреп- ^ толизину-О)

3.2.1.2. Влияние иприта на показатели НСТ-теста

3.2.2. Изучение влияния иприта на некоторые показатели гуморально- ^ го и клеточного иммунитета

3.2.3. Определение апоптоза спленоцитов крыс

3.2.4. Определение апоптоза в человеческих лимфоцитах при совместном культивировании с ипритом

3.2.5. Определение активности холинэстераз 70 3.3. Разработка иммунологического метода выявления детерминант, образующихся при алкилировании ипритом белков 3.3.1. Разработка иммунноферментного метода для индикации иприта ^ в биосредах

3.3.1.1. Получение поликлональных антител к детерминантам белка, ^ алкилированного ипритом

4. Испытания работоспособности тест-системы

4.1. Испытания тест-системы в режиме индикации и в режиме диагно- ^ стики

4.2. Оптимизация условий постановки ИФА (исследование субстра- ^ тов, планшет)

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка подходов к иммунодиагностике интоксикации сернистым ипритом»

Актуальность исследования.

В связи с процессом уничтожения химического оружия, в том числе и сернистого иприта, одними из наиболее актуальных вопросов токсикологии являются: дальнейшее углубленное изучение патогенеза интоксикаций, поиск способов диагностики патологического процесса и индикации токсических агентов в биосредах. Поскольку, как само отравляющее вещество, так и соединения, образующиеся в ходе их переработки, могут оказывать токсическое воздействие на обслуживающий персонал и население, проживающее вблизи объектов хранения и уничтожения химического оружия. Актуальность подобного рода исследований обусловлена и беспрецедентным ростом масштабов химического производства, авариями и нечастными случаями на нем, террористическими актами с возможным применением подобных веществ.

При этом внимание к иприту, в первую очередь, обусловлено практически полным отсутствием эффективных средств профилактики и терапии резор-бтивных форм отравления. Несмотря на то, что особенности токсического воздействия иприта на организм исследовались в течение почти столетия, однако, целый ряд аспектов механизма его действия остаются неясными, и никакое противоядие до сих пор не существует (Michaelson S., 2000; Cowan F.M., Broomfield С.А., Smith W.J., 2002, Naghii M:R., 2002; Федосеева B.H., Манько B.M. и др., 2006).

В последние годы активизировалось изучение системы иммунитета в качестве мишени действия различных экотоксикантов. Имеются многочисленные доказательства, полученные в экспериментах in vitro и in vivo, что повреждение иммунной системы или ее отдельных компонентов химическими соединениями может приводить к развитию иммунодефицитных состояний различной степени тяжести (Kehe К., Szinicz L., 2005; Федосеева И.Н., Манько В.М., 2006). Спектр иммунологических расстройств, вызываемых иммуносупрессией, включает как относительно небольшие изменения классов или подклассов иммуноглобулинов, так и тяжелые комбинированные иммунодефицита, которые характеризуются поражением всех звеньев иммунной системы, вплоть до запуска аутоиммунных процессов и являются опасными для жизни (Levitt J.M., Lodhi I.J., Nguyen P.K.et al., 2003).

Токсическое воздействие иприта приводит к изменению механизмов как специфического, так и неспецифического иммунного ответа. При этом происходит нарушение синтеза антител, деления и созревания иммунокомпетентных клеток и их предшественников, экспрессии или рестрикции основного антигенного комплекса тканевой совместимости, угнетение субпопуляции Т-лимфоцитов, обладающей супрессорной активностью, увеличение количества ЦИК, снижение процентного содержания NK-клеток (Lieske C.N. et al., 1992; Millard C.B. et al., 1994; Горшенин A.B., Рембовский B.P., 2001; Ghotbi L., Hassan Z., 2002).

Другим механизмом влияния иприта на клетки иммунной системы может быть его генотоксическое действие и изменение механизмов программированной клеточной гибели, что также ведет нарушению нормального функционирования иммунной системы (Clayson Е.Т., 1992, 1993; Hur G.H. et. al., 1998 Dabrowska МЛ. et al., 1996; Rosental D.S., et al., 1998; Hur G.H. et al., 1998; Sun J. al., 1999; Michaelson S., 2000). Вышеизложенное определило цель настоящего исследования.

Цель исследования: Разработка специфического иммунологического метода определения антигенных детерминант белка, алкилированных ипритом, как биомаркера интоксикации данным токсическим агентом.

Задачи исследования:

1. Определить токсикометрические параметры сернистого иприта при накожной аппликации крысам в остром эксперименте.

2. Изучить влияние сернистого иприта в дозе, не вызывающей летальности, на некоторые параметры функционального состояния иммунной системы крыс:

- исследовать уровень антител к стрептококковому ферменту;

- изучить уровень продукции супероксид аниона нейтрофилами перитоне-ального экссудата;

- исследовать уровень индуцированной клеточными митогенами и спонтанной пролиферативной активности спленоцитов.

3. Изучить значение нарушения механизмов программированной клеточной гибели в реализации токсического воздействия сернистого иприта на им-мунокомпетентные клетки.

4. Синтезировать иммуногенные антигены для иммунизации экспериментальных животных;

5. Синтезировать антигены для иммуноферментного анализа (ИФА);

6. Провести анализ иммунных сывороток с целью выявления детерминант иприта с белком в биоматериале.

7. Оптимизировать условия постановки ИФА.

8. Провести скрининг разработанного метода диагностики интоксикации сернистым ипритом.

Научная новизна

Впервые показано, что накожная аппликация сернистого иприта крысам в дозе, не вызывающей летальности, приводит к нарушениям механизмов неспецифической резистентности и супрессии Т- и В-клеточного звена иммунитета в ранние сроки интоксикации.

Впервые продемонстрировано, в этих условиях, развитие нарушения механизмов апоптоза иммунокомпетентных клеток in vivo и in vitro.

Доказано, что конъюгаты белка с ипритом являются иммуногенными и индуцируют синтез антител к детерминантам, образующимся в результате ал-килирования белков сернистым ипритом.

Экспериментально разработаны новые подходы к созданию специфического иммунологического метода диагностики поражения сернистым ипритом.

Практическая значимость. Полученные в настоящей работе данные о влиянии сернистого иприта в дозе, не вызывающей летальности, на функциональное состояние иммунной системы и возможности иммунодиагностики интоксикации этим токсическим агентом могут быть использованы в системе комплексных лечебно-профилактических и диагностических мероприятий, направленных на обеспечение безопасности персонала объектов по "уничтожению химического оружия и населения окружающих территорий.

Положения, выносимые на защиту

1. Сернистый иприт, при накожной аппликации крысам в нелетальной дозе, обладает выраженным иммуносупрессивным действием, характеризующимся нарушением механизмов неспецифической резистентности и снижением активности Т- и В-клеточного звена иммунитета. Нарушения механизмов программированной клеточной гибели, развивающиеся вследствие специфического ци-тотоксического действия иприта, являются одним из факторов поражения им-мунокомпетентных клеток.

2. Конъюгаты белка с ипритом являются иммуногенными и индуцируют синтез антител к детерминантам, образующимся в результате алкилирования белков. Разработанный в эксперименте иммуноферментный метод диагностики интоксикации ипритом позволяет детектировать алкилированные белки в организме животных (гемолизат эритроцитов) и человеческом материале (эритроцитах).

Апробация работы

Материалы исследований доложены на заседаниях Российской научной конференции «Медицинские аспекты радиационной и химической безопасности (СПб, 2001), на Международном симпозиуме по антитерроризму «Разработка и принятие решений по снижению последствий для здоровья населения при террористических актах с применением опасных веществ (Волгоград, 2002), на Международном симпозиуме «Медицинские и биологические проблемы, связанные с уничтожением химического оружия» (Волгоград, 2003), на Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 45-летию ФГУП «НИИГПЭЧ» ФМБА России (СПб, 2007), основные положения диссертации доложены и обсуждены на расширенном заседании Ученого Совета Института токсикологии (СПб, 2007).

Публикация материалов исследования. По теме диссертации опубликовано 9 научных работ.

Объем и структура диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, глав с описанием результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы, включающего 65 отечественных и 133 иностранных источников. Материал изложен на 119 страницах машинописного текста, иллюстрирован 17 таблицами и 14 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Токсикология», Стосман, Кира Иосифовна

Заключение

Анализ литературы свидетельствует, что воздействие иприта на организм может проявляться в самых разнообразных нарушениях специфического v неспецифического иммунного ответа (Venkateswaran K.S. et al., 1994; Pu Y. et al., 1995; Tsuruta J. et al., 1996; Ярилин A.A., 1999; Sabourin G.L., Danne M.M. et al., 2002; V avra A.K., Laurent С .J., Ngo V., Sweeney J.F., Levitt J.M., 2004).

Описанные нами в разделе 3.2. данные подтверждают выше сказанное. Результаты, полученные в экспериментах на животных, которые подвергались воздействию иприта в дозе, равной 1 /2 от LD50, свидетельствуют, о ранних изменениях механизмов неспецифической резистенции. Так достоверно можно сказать, что изменения наблюдаются уже в первые сутки после накожной аппликации вещества. На 3 сутки после начала эксперимента наблюдается значимое повышение уровня антител к стрептококковому ферменту (на 37% по сравнению с контрольной группой животных). На 7 сутки в организме детектируется значительное снижение активности нейтрофилов, что совпадает с нарушением кислородозависимых механизмов бактерицидности. Этот показатель является высокочувствительным индикатором нормы и патологии гомеостаза. По анализу этих данных можно заключить, что имеется длительное воздействие на ней-трофилы стимулирующих чужеродных агентов. Нейтрофилы играют ключевую роль в опосредовании неспецифического иммунного ответа. Дефект их функций снижает устойчивость организма к инфекции (Глоба А.Г., Демидова B.C., Земляной А.Б., 2002).

Гибель животных на 3-7 сутки после начала эксперимента, возможно, связана с активацией эндогенной инфекции, развивающейся в процессе интоксикации. Это предположение подтвердили результаты, полученные в эксперименте по определению антител к стрептококковому ферменту. Значимое увеличение их уровня как раз и выявлялось на 3 сутки. Повышение смертности животных при заражении их E.coli спустя 3 суток после введения иприта также отмечали и Горшенин A.B. и Рембовский В.Р. (2001). i ■ 94

Итак, воздействие иприта инициирует механизмы первой линии защиты организма от. биологической агрессии — естественный иммунитет. В его реали-¡; ! зации участвуют различные фагоцитирующие клетки. Основными эффекторами естественного иммунитета являются ; и нейтро филы, ранее всего вовлекаемые в воспалительные и иммунные процессы. Хотя факторы естественного иммуни-I тета и обладают высокой эффективностью в борьбе с биологической агрессией, наряду с ними в организме запускаются антигенспецифические иммунные реакции. В связи с выше сказанным представлялось необходимым исследовать I реакцию Т- и В-клеточногозвена иммунной систёмы на воздействие иприта.

В литературе описывается, мощное иммуносупрессивное действие д'анно-' го токсиканта на Т-и В-лимфоциты (Горшенин А.В; с соавт., 2001; Калинин

Ф.Б. с соавтр., 2001). В наших исследованиях при оценке пролиферативного ответа наблюдалось угнетение их функциональной активности на всех сроках эксперимента. На 1-3 сутки ответ на митогены снижен на 89-93 %, а на 7 сутки - на 72-79 % по сравнению с контролем. Подобное угнетение митогенного от' вета лимфоцитов наблюдали и Калинин Ф.Б. с. соавт. (2001). Повреждение J пролиферирующих клеток отмечалось также и другими авторами (Lieske C.N., I Klopcic R.S., Gross C.L. et al., 1992; Millard C.B., Meier H.L., Broomfield C:A., 1994; Горшенин A.B., Рембовский B.P., 2001).

Таким образом, проведенные исследования свидетельствуют об очень выраженном угнетении, как Т-, так и В-клеточного звена иммунной системы в течение всего времени эксперимента. Некоторое исключение составляют 7 сутки эксперимента, где супрессия В-клеток выражена значительнее, различие | составляет почти 10% (р<0,05). Так, возможно; гуморальный иммунный ответ является в большей степени чувствительным^ к действию токсиканта, чем клеточный. . '

Также следует отметить генотоксическое; действие иприта, изменение под ; его воздействием механизмов, программированной клеточной гибели (CÎayson

Е.Т., 1992; Dabrowska M.I. et al., 1996; Rosental D.S., et al., 1998; Hur G.Ii. et al.,

1998, Sun J., Wang YX, Sun M.J., 1999; Michaelson S., 2000). В последние годы f: . , . . появились работы, свидельствующие о том, что иприт представляет собой сильный индуктор апоптоза (Clayson Е.Т., 1992; Dabrowska M.I. et al., 1996; Rosental D.S., et al., 1998; Hur G.H. et al., 1998; Sun J., Wang Y.X., Sun M.J., 1999; Michaelson S., 2000). Ряд работ, проведенных по анализу фрагментов ДНК, позволяет предположить, что апоптоз является одним из компонентов, ведущих клетку к гибели после интоксикации (Michaelson S., 2000). Запуск механизмов программированной клеточной гибели также приводит и к повреждению нормального функционирования иммунной системы в целом (Clayson Е.Т., 1993; Hur G.H. et al., 1998).

То что, иприт является сильным индуктором апоптоза, было продемонстрировано как в наших исследованиях, так и в работах целого ряда иностранных и отечественных ученых (Clayson Е.Т., 1992; Dabrowska M.I. et al., 1996; Rosen-tai D.S., et al., 1998; Hur G.H. et al., 1998; Sun J., Wang Y.X., Sun M.J., 1999; Michaelson S., 2000; Калинин Ф.Б., Любимов Ю.А. и др., 2001).

Результаты изучения апоптоза клеток селезенки животных, полученные в наших экспериментах, показали достоверно значимое увеличение доли фраг-ментированной ДНК лишь в начальные сроки после аппликации иприта, через одни сутки. Аналогичные данные были получены и в экспериментах по изучению экспрессии CD 95 лимфоцитами человека в опытах in vitro. Так, достоверно значимое увеличение экспрессии CD 95 наблюдалось лишь при минимальном времени экспозиции, причем, чем выше была концентрация иприта, тем менее выраженной была экспрессия данного маркера апоптоза. Подобный феномен, выявленный как в условиях in vivo, так и в условиях in vitro, скорее всего, отражает потерю работоспособности генетического аппарата клетки, обусловливающей запуск механизмов апоптоза, что возникает вследствие алкили-рующего воздействия иприта на молекулы ДНК.

Влияние иприта на лимфоциты in vitro зависит от концентрации и времени культивирования клеток. Эти результаты подтверждают и эксперименты in vivo на крысах.

•'•.■ ., 96

Таким образом, проведенные нами исследования, свидетельствуют об индукции программированной клеточной?, гибели при накожной аппликации даже несмертельных доз; иприта: . . '

В литературе имеются сведения о способности иприта изменять активность холинэстераз (Черкес А.И., 1964; Саватеев Н.В. и др., 1987; Калинин Ф.Б., Любимов Ю.А. и др., 2001). В нашей работе также были проведены исследования по определению активности сывороточной и эритроцитарной хол-линэстераз. Как показывают полученные результаты, активность обоих ферментов изменяется в динамике эксперимента. Активность, сывороточной холинэстеразы достоверно повышается на 3 сутки на 56,8%, на 7 сутки — на 96 %. Активность ацетилхолинэстеразы эритроцитов достоверно снижается на 3 сутки на 28,3 %, на 7 сутки — на 49,5 %. Подобные различия, вероятно, связаны с тем, что активность сывороточной холинэстеразы отражает функциональное состояние печени, а ингибирование активности эритроцитарного фермента, скорее всего, связано с действием иприта или;; его метаболитов на мембраны этих клеток. I

Итак, динамика интоксикации выглядит следующим образом. В' течение уже 1 суток наблюдается снижение фагоцитарных функций организма, мощная иммуносупрессия и активация процессов запуска механизмов апоптоза, ведущих к дальнейшему нарушению/ нормального функционирования иммунной системы. На фоне этих событий на 3 сутки детектируется усиление выработки антител к стрептолизину О, а, следовательно^ активация эндогенной инфекции, что, возможно, является следствием нарушения; функций нейтрофилов. На 7 сутки прослеживается максимальная супрессия клеточного и гуморального иммунного ответа, а также некоторых показателей неспецифической резистентности, снижение активности эритроцитарной холинэстеразы. Полученные экспериментальные данные демонстрируют наличие фазности в воздействии иприта на организм. Так, возможно, нарушения, наблюдаемые в течение первых суток, можно назвать компенсаторной реакцией) организма на воздействие токсиканта. На этом сроке, вероятно, начинает происходить запуск процессов, ведущих к иммунносупрессии. На 7 сутки, скорее всего, наблюдается прямое токсическое действие алкилирующего агента на организм.

Поскольку все представленные выше исследования не являются специфическими методами определения ипритной интоксикации, перед нами встала задача создания специфического метода для индикации данного токсиканта.

Все проведенные исследования по разработке специфического метода ранней диагностики поражений ипритом продемонстрировали, что конъюгаты белка с ипритом являются иммуногенными, и индуцируют синтез антител к детерминантам, образующимся в результате алкилирования белков.

Такого рода работы, судя по проведенному анализу литературы, проводились как в России, так и странах НАТО. Исследования в области возможной разработки методов специфической диагностики интоксикации ипритом ведутся с применением современных методов молекулярной биологии, биохимии, иммунологии, цитологии и химии. Эти работы направлены на обнаружение иприта или его метаболитов в биосредах организма, взаимодействия ~ипри га с клетками, ДНК и белками организма и на определение последствий такого воздействия. ;

В связи со всем вышеизложенным нами были осуществлены исследования, направленные на разработку специфического иммунологического метода диагностики поражений ипритом.

Исследования проводили в нескольких направлениях:

1. Синтез наиболее иммуногенных конъюгатов белка с ипритом.

2. Поиск оптимального соотношения белок-иприт в используемых конъюга-тах.

3. Разработка схемы иммунизации экспериментальных животных полученными антигенами.

4. Отбор отвечающих животных.

5. Получение иммунореагентов с характеристиками, позволяющими их использование в твердофазном иммуноферментном анализе.

6. Применение полученных иммунореагентов для определения белков, ал-килированных ипритом с помощью ELISA.

Решение всех этих задач позволило разработать твердофазный иммуно-ферментный метод определения белков, алкилированных ипритом, в организме животных (гемолизат эритроцитов) и человеческом материале (эритроциты, обработанные ипритом).

Принцип работы, использованного нами варианта ИФА, заключается в адсорбировании биоматериала (плазмы крови, гемолизата эритроцитов и т.д.) и контрольных материалов в лунках модуля микропланшеты; блокировании свободных мест связывания; на полистироле: инертным белком; инкубации материала с рабочим разведением иммунной сыворотки, специфичной к детерминантам алкилированного белка; обработке лунок модуля антиглобулиновым реагентом-конъюгатом Белка. А-пероксидаза; добавлении субстратной смеси для выявления пероксидазной активности визуально или спектрофотометриче-ски. Наличие такой активности в опыте означает наличие детерминант алкилированного белка в биоматериале и свидетельствует о контакте пораженного с ипритом.

Чувствительность метода позволила получить положительные результаты в экспериментах на животных, которым наносили 1 /2 LD50 иприта, а также в человеческом материале (эритроциты) с внесением 5-10 мкМ иприта.

Помимо спектрофотометрического варианта система удовлетворительно работает и при визуальном способе оценкщ но с чувствительностью в 5-8 раз меньшей. Метод с успехом может работать не только с целью диагностики поражения ипритом, но и с целью индикации^ этого соединения; Для этого необходимо только проводить отбор проб'в раствор белка, а может быть и прямо в лунки микропланшета с сорбированным там белком, а затем применять разработанный нами ИФА.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Стосман, Кира Иосифовна, 2007 год

1. Александров В:Н; Отравляющие вещества.- М;: Воениздат, \969-C.96-126.

2. Антитела 2. Методы: Пер. с: англ. /Под. ред. Д. Кэтти.- М.: Мир, 1991.575 с.

3. Бей л и Н. Статистические методы в биологии. М.: Издательство-Иностранной литературы, 1962. - С.34-123.

4. Болотников И:А., Добротина H.A., Лызлова С.Н. Иммунология, иммунитет, иммунологические реакции. Петрозаводск: Рио петразоводского государственного университета им; О.В. Куусинена, 1987.- С. 17-58.

5. Бородин Ю.И., Григорьев В.Н. и др. Функциональная морфология иммунной системы. Новосибирск: Наука Сиб. отд., 1987. 238 с.

6. Бравер-Чернобульская Б.С., Луйк А.И. Резорбтивное действие сернистого иприта. Киев: Наукова думка, 1983.- 105 с.

7. Браун Д. Индукция иммунного ответа с высоким уровнем антител доминирующего клонотипа./ В кн. «Методы исследования в иммунологии» под ред. И. Лсфковитса и Б.Перниса. М.: Мир, 1981.- С.353-364.

8. Бутюгов A.A. Взаимодействие реактантов острой фазы воспаления и ци-токинов с бактериальными токсинами.//Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Санкт-Петербург.- 1998.-24 с.

9. Вербов В:Н. Принципы твердофазного иммуноферментного анализа. Труды НИИЭМ им. Пастера. Л.,1988.- т.64.- с.3-27.

10. Военная токсикология, радиобиология и; медицинская защита./ Под, редакцией проф. Куценко С.А. СПб: «Издательство Фолиант», 2004.- сЛ 97-212.

11. Войцеховский Б.Л. Математическая обработка результатов гетерогенного иммуноферментного анализа. В сб; Твердофазный иммуноферментный анализ: Труды НИИЭМ им. Пастера. Л:, 1988.- т. 64. С.42-54.

12. Глебович A.A. О ранней диагностике ипритных поражений кожи. Медико-санитарные вопросы противохимической обороны. / Под ред; Аничкова С.В., Зеленева H.A., Ласточкина П.Н.-Л., 1928.-С. 126-182. ,

13. Глоба А.Г., Демидова В;С., Земляной А.Б. Респираторный1 ответ нейтро-филов при хирургической инфекции и связь с плазмамембранным синте-зом.//Вёстник академии медицинских наук.- 2002.- №8.- С. 13-19.

14. Горшенин! А.В., Рембовский В.Р. Иммунотропные эффекты отравляющих веществ кожно-нарывного действия. Материалы V Всероссийской; научной? конференции «Дни иммунологов в Санкт-Петербурге». Санкт-Петербург 21-24 мая 2001.- Санкт-Петербург: 2001.- С.290;

15. Гублер Б.В., Гсикин АЛ. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях. Л., 1973.- 286 с.

16. Егорове А. М; и др. Теория и практика иммуноферментного анализа. М.: Высшая школа, 1991- 358 с.

17. Иммунологические методы./ Под:ред. Фримеля X. М.: Мир, 1979.- 518 с.

18. Иммуноферментный анализ./ Под.ред. Т. Иго и Г. Ленхофф. М.: Мир, 1988.-446 с.

19. Камышников B.C. Справочник по клинико-биохимическим;исследованиям и лабораторной/диагностике. М{::МЕДпресс-информ, 2004.- с.864-884.

20. Каспаров A.A., Мусийчук Ю.И. «Медико-биологичсские аспекты уничтожения иприта'и люизита» М. - СПб: 1998.- 52 с.

21. Кашкин А.Ш, Немцова-Н;Н;:, Аак О.В; Иммуноферментный анализ лекарственных веществ. Труды НИИЭМ4им; Пастера т.64; Л., 1988.- С.59-69.

22. Калинина Н.М., Пйсчик В.П., Давыдова Н:И; Синдром Гуда первичный иммунодефицит с поздними клиническими проявлениями. Обзор литературы исобственное наблюдение. // Цитокины и воспаление. 2006. - т. 5.- № 1.- С.56-59.

23. Клиническая иммунология и- аллергология./ Под ред. Л. Иегер, М.: Медицина, 1986.- 475 с.

24. Козяков; В.П. с соавт. Использование геста на индукцию хромосомных аберраций в оценке резорбтивного действия иприта, в сб. НИИ Военной медицины «Актуальные проблемы и перспективы развития военной медицины».-СПб: 1998.-С.96-103. •

25. Колер Дж. Методы получения гибридом. В кн. Иммунологические методы исследования. /Под ред. И.Лефковитса и Б.Перниса.- М1: Мир., 1983.-С.313-328: •

26. Куценко С.А. Основы токсикологии; СПб, «Издательство Фолиант», 2004.-С. 397-424.

27. Лебедев К.А., Понякина И.Д. Иммунная недостаточность: Выявление и лечение. М.: Мед.книга.- 2003. - 442 с.

28. Санин М.Р., Никитюк Д.Б. Иммунная система, стресс и иммуннодефецит.51. -М- Джангар, 2000.- 184 с.

29. Сбойчиков В.В., Королюк А.М. Выбор способа оптимального выражения результатов иммуноферментного анализа. В сб. Твердофазный; иммунофер-ментный анализ. Труды 11ИИЭМ им. ГТастера т. 64, Л., 1988.- С.81-83.

30. Соколов Е.И., Глан 11.В., Гришина Т.И. и др. Клиническая ¡иммунология. М., 1998.-С.5-56.

31. Справочник по лабораторным методам исследования; / Под ред. Даниловой Л .А. СПб.: Издательский дом «Питер», 2003.- С. 143-144, 277-282.

32. Уильман Е. Пол. Иммунология, т. 1.-М:: Мир. 1987.-СЛ 4-45.

33. Федосеева В.Н., Шарецкий А.Ы., Аристовская Л.В. и др. Методические рекомендации по экспериментальному изучению < иммунотоксических . свойств химических факторов окружающей среды. М.: АМН СССР, 1989.-30 с.

34. X. Кантор. Т- лимфоциты. Иммунология т. 1. М.: Мир, 1987. - С.93-110.

35. Чарльз В. Паркер. Медиаторы: высвобождение и функции. Иммунология т.З. М.: Мир, 1989. - С.170-230.

36. Черкес А.И. Руководство по токсикологии отравляющих веществ.;— Киев: Наукова думка, 1964.- 464 с.

37. Шульга В.Я. Отставленная нейро-эндокринная токсичность ФОС как закономерное следствие применения ОВ в террористических актах. Материалы Международного симпозиумашо антитёрроризму. Волгоград 8-9 октября'2002.-Волгоград: 2002.-С.34 36.

38. Эжен С. Батчер, Ирвинг J1. Вайссман. Иммунология, т. 1. М.: Мир. 1987.-С. 173-203. ' • '64: Я. Туркова. Аффинная хроматография. М.: Мир, 1980.- С. 15-280.

39. Ярилин А.А. Основы иммунологии: Учебник. М:: Медицина, 1999--G. 17-381.

40. Amir A., Chapman S., Kadar Т., Gozes Y., Sahar R., Allon N. Sulfur mustard toxicity in macrophages:, effect; of dexamethasone. //J: Appl. Toxicol. -2000,-v. 20, №1. P.51-58.

41. Andrew D.J., Lindsay C.D. Protection of human' upper respiratory tract cell lines against sulphur mustard toxicity by glutathione esters.// Hum: Exp. Toxicol: — 1998. v. 17, №7. - P.387-395.

42. Ахтоуо C.M., Broomfield C.A., Hackley B.E. The role of interleukin-6 (IL-6) in human sulfur mustard (HD) toxicology .//int. J. Toxicol. 2001-v. 20; №5: - P.281-296.

43. Atkins K.B., Lodhi I.J., Hurley L.L., Hinshaw D.B. N-acetylcysteine and endo-thelial cell injury by sulfur mustard.// J. Appl. Toxicol. 2000. - v.20. - P.125-1-28.

44. Benschop H.P., van der Schans G.Pi, Noort D., Fidder A. Verification of exposure to sulfur mustard in two casualties of the Iran-Iraq ,conflict.// J. Anal. Toxicol.-1997,-v. 21,№4.- P;249-251.

45. Benschop H.P., van der Schans G.P., Noort D., Fidder A., Mars Grocnendijk R.H., de Jong IL.P.' Verification of exposure to sulfur mustard in two casualties of the Iran-Iraq conflict.// J: Anal; Toxicol;- 1997.- v. 21, №4.- P.249-251.

46. Bijani Kh., Moghadamnia A.A. Long-term effects of chemical weapons on respiratory tract in Iraq-Iran war victims living in Babol (North of Iran). //Ecotoxicol Environ Saf. 2002.-v. 53.-P.422-424.

47. Bobb A.J., Arfsten D.P. N-acetyl-L-Cysteine as prophylaxis against sulfur mustard:// Mil: Med: -2005. v. 170, №1. - P.52-56.

48. Brown R.F., Rice P. Histopathological changes in Yucatan minipig skin following challenge with sulphur mustard. A sequential study of the first 24 hours following challenge. //Int: J. Exp. Pathol: 1997. - v. 78, №1.- P.9-20.

49. Buczynski A., Gnitecki W. Effect of mustard gas on supraoxide dismutase activity and the level of malonyl dialdehyde: in-vitro studies. //Int. J. Occup. Med. Environ Health':-.-1999: v. 12, №2. - P:119-122:

50. Bullman T.A.; Kang H:K.The Effects of Mustards Gas, Ionizing Radiation, Herbicides, Trauma, and Oil Smoke on US Military Personnel: The Results of Veteran Studies.//Annu. Rev. Public Health. -1994. v. 15. - P.69.

51. Calvet J.IL, Jarreau P.H., Levame M., D'Ortho M.P., Lorino H., Harf A.,. Macquin-Mavier I. Acute and chronic respiratory effects of sulfur mustard' intoxication in guinea pig.//J. Appl. Physiol.- 1994.- v. 76, №2.- P.681-688.

52. Chauhan R.S., Murthy L.V., Pandey M. Histomorphometric study of animal skin exposed to sulphur mustard.// Bull. Environ. Contain. Toxicol. -1993. v. 51, №1.-P. 138-145.

53. Chevillard M:, Lainee P., Robineau P., Puchelle E.:Toxic effects of sulfur mustard on respiratory epithelial cells in culture.//Cell Biol. Toxicol; -1992. v. 8, №2. - P. 171-181.

54. Clayson E.T., Kelly S.A., Meier II.L. Effects of specific inhibitors of cellular functions on sulfur mustard-induced ccll death.// Cell Biol. Toxicol.- 1993.- v. 9, №2.- P. 165-175.

55. Cowan F.M;, Broomfield C.A., Smith W.J. Sulfur mustard exposure enhances Fc receptor expression on human epidermal keratinocytes in cell culture: implicationsfor toxicity and medical countermeasures.// Cell Biol. Toxicol; 1998. - v. 14, №4. -P.261-266.

56. Cowan F.M.; Broomfield C.A.; Smith W.J. Inhibition of sulfur mustard-increased protease activity by niacinamide, N-acetyl-L-cysteine or dexa-methasone.//Cell Biol. Toxicol.- 1992.- v. 8, №2.- P. 129-138.

57. Cowan F.M.; Yourick J J.; Hurst C.G.; Broomfield C.A.; Smith W.J. Sulfur mustard-increased proteolysis following in vitro and in vivo exposures.//Cell Biol. Toxicol.-1993,-v. 9, №3.-P.269-277.

58. Dabrowska M.I., Becks L.L., Lelli S.L. et al. Sulfur mustard induces apoptosis and necrosis in endotelial cells.//Toxicol Appl. Pharmacol. 1996. - v. 14, №2. -P.568-583.

59. Davis K.G., Aspera G. Exposure to liquid sulfur mustard. //Ann. Emerg. Med.-2001.- v. 37, №6.- P.653-656.

60. Dean J.H., Murray M.J. In: Toxicology: The basic science ofpoisons. 1990.-v. 4.-P.282-333.

61. Descotes J. Immunotoxicology of drugs and chemicals, 2nd Ed, Elsevier. -1988.-P.19-237.

62. Dillman J.F., McGary K.L., Schlager J.J. Sulfur mustard induces the formation of keratin aggregates in human epidermal keratinocytes. //Toxicol. Appl. Pharmacol. 2003.-v. 193, №2. - P.228-236.

63. Dube S.N., Husain K., Sugendran K., Vijayaraghavan R., Somani S.M. Dose response of sulphur mustard: behavioral and toxic signs in rats. //Indian. J. Physiol. Pharmacol. 1998. - v. 42, №3. - P.389-394.

64. Ebtekar M., Hassan Z.M. Effect of immunomodulators pyrimethamine and ci-metidine on immunosuppression induced by sulfur mustard in mice. //Int. J. Im-munopharmacol. -1993. v. 15, №4. -P.533-541.

65. Ellmann G.L., Courtney K.D., Andress V., Fcatherstone R.M. A new and rapid colorimetric determination of activity acetylcholinesterase // Biochem. Pharmacol.-1961.-V.7, № 2. P.88-95.

66. Environmental health criteria; 180 Principles and methods for assessing direct immunotoxicity associated with exposure to chemcals. World Health Organization, Geneva.- 1996.-P. 152-160.

67. Franco A.L. de, Raveche E.S., Asofsky R., Paul W.E. Frecuency of B lymphocytes responsive to anti-immunoglobulin. //J. Exp. Med.-1982. № 155.-P.1523.

68. Gershon R.K. T-cell control of antibody responce. Contemp.// Top. Immunol. -1974.- № 3.- P.l.

69. Ghanei M, Vosoghi AA. An epidemiologic study to screen for chronic myelocytic leukemia in war victims exposed to mustard gas. // Environ. Health. Perspect.-2002.-v. 110-P. 519-521.

70. Ghotbi L., Hassan Z. The immunostatus of natural killer cells in people exposed to sulfur mustard.//Int. Immunopharmacol. -2002. v. 2, №7.- P.981-985.

71. Ghotbi L.,Hassan Z.The immunostatus of natural killer cells in people exposed to sulfur mustard.//Int. Immunopharmacol.-2002.- v. 2, №7.-P.981-985.

72. Gold M.B., Schrf B.A. Hematological profile of the euthymyc hairless guinea pig following sulfur mustard vesicant exposure. //J. Appl. Toxicol. 1995. - v. 15, №6.- P.433-438.

73. Gray P.; Lewis K.; Masta A.; Phillips D. Modulation of mustard toxicity by acrine.//Biochem Pharmacol.-1994. v.47, №3.-P.581-583.

74. Gross C.L.; Innace J.K.; Hovatter R.C.; Meier H.L.; Smith W.J. Biochemical manipulation of intracellular glutathione levels influences cytotoxicity to isolated human lymphocytes by sulfur mustard.//Cell. Biol. Toxicol.- 1993.- v. 9, №3.- P.259-267.

75. Harrison J.M., Read RW. Biological fate of sulphur mustard: in vitro alkyla-tion of human haemoglobin by sulphur mustard.// J. Appl. Toxicol. 1997. - v. 17, №6.- P.415-419.

76. Hay A. Effects on health of mustard gas. // Nature.-1993.- v. 366, №6454.-P.398.

77. Hua A.; Daniel R.; Jasseron M.P.; Thiriot C. Early cytotoxic effects induced by bis-chloroethyl sulphide (sulphur mustard): Ca2+.i rise and time-dependent inhibition of B77 fibroblast serum response. //J. Appl. Toxicol.- 1993.- v. 13, №3.- P.161-168.

78. Hur G.H.; Kim Y.B.; Choi D.S.; Kim J.H.; Shin S. Apoptosis as a mechanism of 2-chloroethylethyl sulfide-induced cytotoxicity.// Chem. Biol. Interact.- 1998,- v. 110, №1-2.- P.57-70.

79. Kehe K, Szinicz L. Medical aspects of sulphur mustard poisoning.// Toxicology: 2005.- v. 214, №3 .-P. 198-209.

80. Kehe K., Reisinger H., Szinicz L. Sulfur mustard induces apoptosis and necrosis in SCL II cells in vitro .//J. Appl. Toxicol. 2000. - v. 20, №1.- P.81-86.

81. Kumar O, Vijayaraghavan R. Effect of sulphur mustard inhalation exposure on some urinary variables in mice. //J. AppL Toxicol. 1998.- v. 18, №4. - P.257-259.

82. Lakshmana Rao PV, Vijayaraghavan R, Bhaskar AS. Sulphur mustard induced DNA damage in mice after dermal and inhalation exposure.// Toxicology. 1999. - v. 139, №1-2.- P.39-51.

83. Lardot C., Dubois V., Lison D. Sulfur mustard upregulates the expression of interleukin-8 in cultured human keratinocytes. / Toxicol Lett. 1999.- v. 110, №1-2.-P.29-33.

84. Leftkowitz L.J., Smith W.J. Sulfur mustard-induced arachidonic acid release is mediated by phospholipase D in human keratinocytes.// Biochem. Biophys. Res. Commun. 2002,- v. 295, №5.- P. 1062-1067.

85. Levitt J.M. , Lodhi I.J., Nguen P.K., Ngo V., Clift R. et all. Low-dose sulfur mustard primes oxidative function and induces apoptosis in human polymorphonuclear leukocytes.// Int. Immunopharmacol. 2003. - v. 3, №5. - P.747-756.

86. Lieske G.N., Klopcic R.S., Gross C.L. et al. Development of an antibodies that binds sulfur mustard./ Immunol. Lett. -1992. v. 3 l-№2.-P. 117-122.

87. Lin P., Bernstein I.A., Vaughan F.L. Failure to observe a relationship betwen bis-(beta-chloroetyl)sulfide-induced NAD depletion and cytotoxicity in the rat kersti-nocyte culture. //J. Toxicol. Environ. Health.-1994. v.42, №4.- P.393-405.

88. Lohs K. Sulfur-lost (2,2'-dichlorodiethyl sulfide)-still of current toxicologic impor tance). //Z. Arztl. Fortbild (Jena).- 1993.- v. 87, №8.- P. 659-664.

89. Ludlum D.B.; Austin-Ritchie P.; Hagopian M.;, Niu T.Q.; Yu D. Detection of sulfur mustard-induced DNA modifications.//Chem. Biol. Interact. -1994. v. 91, №1.- P.39-49.

90. Luster M.I., Kimber I. Immunotoxicity: hazard identification and risk assessment.// Hum. Exp. Toxicol. 1996.- v. 15.- P.947-948.

91. Maisonneuve A., Callebat I., Debordes L., Coppet L. Distribution of sulfur mustard in rats after intravenous exposure.//Toxicol. Appl. Pharmacol.- 1994.- v. 125, №2.- P.281-287.

92. Masta A., Gray P.J., Phillips D.R. Effect of sulphur mustard on the initiation and elongation of transcription. //Carcinogenesis.- 1996. №3P:525-532.

93. Mazumder P.K., Sugendran K., Vijayaraghavan R. Protective efficacy of calcium channel blockers in sulphur mustard poisoning. //Biomed. Environ: Sci. 1998;-v. 11, №4.- P.363-369.

94. Meier H.L., Millard C., Moser J. Poly(ADP-ribose) polymerase inhibitors regulate the-mechanism of sulfur mustard-initiated cell death in human lymphocytes. Hi. Appl. Toxicol. 2000.- v. 20, №1.- P.93-100.

95. Meisenberg B.R.; Melaragno AJ^; Monroy R.L. Granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) for- mustard-induced bone; marrow suppression. //Mil. Med.-1993.- v. 158; №7.- P.470-474.

96. Melchers F., von Boehmer H., Phillips R.A. B lymphocyte subpopulations in the mouse:X)rgan distribution andiontogeny of immunoglobulinsyntehesizing and mitogen sensitive cells:/Transplatant. Rev.-1975.-P.25-26.

97. Merat S, Perez JP, Riittimann M, Bordier E, Lienhard A, Lenoir B, Pats B. Acute poisoning by chemical warfare agent: sulfur mustard: //Ann. Fr. Anesth. Re-anim. 2003 - v. 22. - P. 108-118.

98. Michaelson S. DNA fragmentation pattern induced in thymocytes by sulphur mustard.//Chem. BioL Interact. 2000:-v. 125, №1.- P:1-15;

99. Millard G.B., Meier H.L., Broom field C.A. Exposure of human lymphocytes to bis-(2-chloroethyl)sulfide solubilizes truncated and intact core histones.// Biochim. Biophys. Acta.- 1994.-v. 1224, jY»3.- P.389-394.

100. Mol M.N., Smith W.J. Ca 2+ homeostasis and Ca 21 signalling in sulfur mustard exposed normal human epidermal keratinocytes. //Chem. Biol. Interact.-1996. -v. 100, №1.- P.85-93. '

101. Momeni A.Z.; Aminjavaheri M. Skin manifestations of mustard gas in a group of 14 children and teenagers: a clinical study .//Int. J. Dermatol.- 1994.- v.33, №3. -P. 184-187.

102. Mosier D.E. A requirement for two cell types for antibody formation in vi-tro.//Science.-1967.- v. 158. P.1573-1575.

103. Naghii M.R. Sulfur mustard intoxication, oxidative stress, and antioxidants. //Mil. Med. 2002.-v. 167, №7.-P.573-575.

104. Neumann D.A. Immunotoxicity testing andrisk assessment: Summary ofa 1994 workshop.// Fund. Chem. Toxic. 1995,- v. 33, № 10.- P.887-894.

105. Noort D., Hulst A.G., Trap H.C., Benschop H.P. et al. Synthesics and mass spectrometric identification of the major amino acid adducts formed between sulfur mustard and hemoglobin in human blood. //Arch-Toxicol.- 1997. v. 71, №3.- P. 171178.

106. Petrali J.P., Oglesby-Megee S. Toxicity of mustard gas skin lesions.//Microsc. Res. Tech. 1997.-v. 37, №3.-P.221-228.

107. Petrali J.P.; Oglesby SB.; Hamilton T.A.; Mills K.R.Comparative morphology of sulfur mustard effects in the hairless guinea pig and a human skin equivalent. //J Submicrosc. Cytol. Pathol. 1993. - v. 25, №1.-P. 113-118.

108. Platteborze P.L. Effects of sulfur mustard on transcription in human epidermal keratinocytes: analysis by mRNA differential display.// J. Appl. Toxicol. 2003.- v. 23, №4. - P.249-254.

109. Pu Y., Lin P., Vaughan F.L. Bermstein appearance of interleukin-1 alpha relates DNA interstrand cross-links and cytotoxicity in cultured human keratinocytes exposed to bis-(2-chloroethyl)sulfide.// J. Appl. Toxicol.-1995.- v. 15, №6.- P.477-482.

110. Pub Med . Инф.База. 30000 работ по методу ELISA за 1996-2001.

111. Ray P., AÍi S.T. Protease in normal human epidermal keratinocytes.// Drug Chem. Toxicol. -1998. v. 21, №3. - P.319-327.

112. Ray R., Hauck S., Kramer R., Benton B. A convenient fluorometric method to study sulfur mustard-induced apoptosis in human epidermal keratinocytes monolayer microplate culture.//Drug Chem. Toxicol. 2005. - v. 28, № 1. - P. 105-116.

113. Ray R.; Legere R.H.; Majerus B.J.; Petrali J.P. Sulfur mustard-induced increase in intracellular free calcium level and arachidonic acid release from cell mem-brane.//Toxicol. Appl. Pharmacol. -1995. v. 131, №1. - P.44-52.

114. Ricketts K.M., Santai C.T., France J.A., Graziosi A.M., Doyel T.D., Gazaway M.Y., Casillas R.P. Inflammatory cytokine response in sulfur mustard-exposed mouse skin. //J. Appl. Toxicol.-2000. v. 20, №1. - P.73-76.

115. Rosenthal A.S., Lipsky P.E., Shevach E.M. Macrophage-lymphocyte interaction and antigen recognition. /Fed. Proc.-1975. v. 34. - P. 1743-1745.

116. Ruhl C.M.; Park S.J.; Danisa O.; Morgan R.F.; Papirmeister B.; Sidell F.R.; Edlich R.F.; Anthony L.S.; Himel H.N. A serious skin sulfur mustard burn from an artillery shell.//J. Emerg. Med. 1994.- v. 12, №2.- P.159-166.

117. Sabourin C.L., Danne M.M., Buxton K.L. et al. Cytokine, chemokine, and matrix metalloproteinase response after sulfur mustard injury to weanling pig skin. //J. Biochem. Mol. Toxicol.- 2002.- v. 16, №6.- P.263-272.

118. Sasser L.B., Cushing J.A., Dacre J.C. Two-generation reproduction study of sulfur mustard in rats. //Reprod. Toxicol. 1996. - v. 10, №4. -P.311-319.

119. Sasser L.B., Miller R.A., Kalkwarf D.R., Cushing J.A., Dacre J.C. Subchronic toxicity evaluation of sulfur mustard in rats.11 J. Appl. Toxicol. 1996.- v. 16, №1.-P.5-13.116

120. Sawyer T.W., Lundy P.M., Weiss M.T. Protective effect of an inhibitor of nitric oxide synthase on sulfur mustard toxicity in vitro.// Toxicol. Appl. Pharmacol.-1996.-V. 141, №1.-P.138-144.

121. Sawyer T.W., Risk D. Effect of lowered temperature on the toxicity of sulphur mustard in vitro and in vivo.// Toxicology.- 1999.- v. 134, №1.- P.27-37.

122. Schafer R.J., Kurt E.M., Broomfield C.A.,.Carmichael A.J. Response of normal human keratinocytes to sulfur mustard (HD): cytokine release using a non-enzymatic detachment procedure.// Hum. Exp. Toxicol. 1999. - v. 18, №1.- P.l-11.

123. Shahriary A., Asgari A., Hollisaz M.T., Fallah-Husseini H., Sahraei H. Long-term effect of a single dose of sulfur mustard on nerve conduction velocity and electromyography pattern in rat hindlimb. //Mil. Med. 2003.- v. 168, №10.- P.849-851.

124. Shakil F.A.; Kuramoto A.; Yamakido M.; Nishimoto Y.; Kamada N. Cytogenetic abnormalities of hematopoietic tissue in retired workers of the Ohkunojima poison gas factory.//Hiroshima J. Med. Sci. -1993.- v. 42, №4.- P. 159-165. .

125. Smith C.N., Lindsay C.D., Upshall D.G. Presence of methenamine/glutathione mixtures reduces the cytotoxic effect of sulphur mustard on cultured SVK-14 human keratinocytes in vitro. //Hum. Exp. Toxicol. -1997. v. 16, №5. - P.247-253;

126. Smith K.J., Skelton H. Chemical warfare agents: their past and continuing threat and evolving therapies. Part II of II. Skinmed. 2003. - v. 2, №5. - P.297.

127. Sugendran K.; Jeevaratnam K.; Husain K.; Singh R.; Srivastava D.K. Effects of topically applied sulphur mustard on tissue glycogen, blood glucose, lactate and pyruvate in mice. //Indian J. Physiol. Pharmacol. -1992. v. 36, №3. - P.219-22I.

128. Sun J., Wang Y.X., Sun M.J. Apoptosis and necrosis induced by sulfur mustard in Hela cells.// Zhongguo Yao Li Xue Bao.- 1999.- v. 20, №5.- P.445-448.

129. Vavra A.K., Laurent C.J., Ngo V., Sweeney J.F., Levitt J.M. Sulfur mustard primes phagocytosis and degranulation in human polymorphonuclear leukocytes.//Int. Immunopharmacol. 2004. - v. 4, №3. - P.437-445.

130. Vavra A.K., Laurent C.J., Ngo V., Sweeney J.F., Levitt J.M. Sulfur mustard primes phagocytosis and degranulation in human polymorphonuclear leukocytes. //Int. Immunopharmacol. 2004. - v. 4, №3.- P.437-445.

131. Vena G.A.; Foti C.; Grandolfo M.; Angelini G. Contact irritation associated with airborne contact irritation from mustard gas./Contact Dermatitis.- 1994.- v. 31, №2,- P. 130.

132. Venkateswarwn K. Antibodies to sulfur mustard letter;comment./ Comment on: Immunol Lett. 1992. v. 31, №2. - P. 117-122.

133. Vijayaraghavan R. Modifications of breathing pattern induced by inhaled sulphur mustard in mice. //Arch. Toxicol. -1997. v. 71, №3. - P.157-164.

134. Vindevoghel L.; Capdevila C.; Binder P.; Adolphe M. Cytotoxicity of sulphur mustard on a human keratinocyte cell line: direct effects compared to conditioned-medium effects./Toxicol. Lett. 1994. v. 71, № 3. - P. 227-234.

135. Watson A.P., Jones T.D., Griffin G.D. Sulfur mustard as a carcinogen: application of relative potency analysis to the chemical warfare-agents H, HD, and HT. //Regul Toxicol. Pharmacol.- 1989.- v. 1 P.25.

136. Watson A.P.; Griffin G.D. Toxicity of vesicant agents scheduled for destruction by the Chemical Stockpile Disposal Program. //Environ Health Perspect. -1992,-v. 98.-P.259-280. "

137. Weigand D.A. Chemical warfare. //J. Am. Acad. Dermatol. -1989. v. 21, №2.-P.324-325.

138. Wormser U., Brodsky B., Green B.S., Arad-Yellin R., Nyska A. Protective effect of povidone-iodine ointment against skin lesions induced by sulphur and nitrogen mustards and by non-mustard vesicants.// Arch. Toxicol. 1997. - v. 71, №3.- P.165-170.

139. Wormser U., Brodsky B., Sintov A. Skin toxicokinetics of mustard gas in the guinea pig: effect of hypochlorite and safety aspects.// Arch. Toxicol. -2002. v. 76, №9.-P.517-522.

140. Yourick J.J.; Dawson J.S.; Mitcheltree LW. Sulfur mustard-induced microve-sication in hairless guinea pigs: effect of short-term niacinamide administration.// Toxicol. Appl. Pharmacol. -1992. v. 117, №1. - P.104-109.

141. Zaman-Saroya S.; Vaughan F.L.; Bernstein I.A. The effect of 2,2'-dichlorodiethyl sulfide on DNA synthesis of a murine stratified keratinocyte culture system.//Chem. Biol. Interact.- 1992.- v. 84, №2.- P. 133-142.

142. Zang Z., Riviere J.E., Monteiro- Riviere N.A. Evaluation of protective effects of sodium thiosulfate, cysteine, niacinamide and indometacin on sulfur mustard-treated isolated perfused porcine skin.//Chem. Bio.l Interact. 1995. - v. 96, №3.-P.249-262.

143. Zang Z., Riviere J.E., Monteiro- Riviere N.A.Assessment of sulfur mustard interation with basement membrane components. //Chem. Biol. Interact. -1995. v. 11, №2.-P.89-101.

144. Zlotogorski A., Goldenhersh M., Shafran A. A model for quantitative measurement of sul fur mustard skin lesions in the rabbit ear. //Toxicology.- 1997. v. 120, №2.-P. 105-110.