Разработка основы биопрепарата для деструкции жиров тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Поскрякова, Наталья Владимировна

• Поскрякова, Наталья Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Поскрякова, Наталья Владимировна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Биологическая очистка сточных вод

1.2 Локальная очистка сточных вод

1.3 Методы скрининга микроорганизмов - продуцентов липаз и определение их липолитической активности.

1.4 Микробные липазы

1.5 Факторы, определяющие биосинтез липаз микроорганизмами

1.6 Применение микробных липаз

2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1 Объекты исследований

2.2 Скрининг липолитически активных микроорганизмов

2.3 Изучение фенотипических характеристик выделенных культур.

2.4 Идентификация микроорганизмов

2.5 Определение липолитичекой активности

2.6 Изучение условий культивирования, влияющих на биосинтез липаз исследуемыми микроорганизмами

2.7 Исследование окислительной активности микроорганизмов

2.8 Исследование процесса биодеструкции растительных и животных жиров

2.9 Изучение эффективности процесса очистки модельных растворов жиросодержащих сточных вод

2.10 Статистическая обработка результатов

3. СКРИНИНГ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ НОВЫХ ШТАММОВ БАКТЕРИЙ, ПРОЯВЛЯЮЩИХ ЛИПОЛИТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ

3.1 Выделение и фенотипическая характеристика новых штаммов продуцентов липазы

3.2 Идентификация исследуемых штаммов путем секвенирования 16S рРНК

4. ИЗУЧЕНИЕ ЛИПОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ НОВЫХ ШТАММОВ БАКТЕРИЙ РОДА SERRATIA

4.1 Влияние источника углерода на продукцию липаз изучаемыми штаммами

4.2 Оптимизация состава питательной среды для увеличения липолитической активности выделенных штаммов

5. ИССЛЕДОВАНИЕ СПЕКТРА ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ НОВЫХ ШТАММОВ БАКТЕРИЙ РОДА SERRATIA

6. ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОЦЕССА БИОДЕСТРУКЦИИ ЖИРОВ РАСТИТЕЛЬНОГО И ЖИВОТНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ БАКТЕРИМИ РОДА SERRATIA

7. ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРОЦЕССА ОЧИСТКИ МОДЕЛЬНЫХ РАСТВОРОВ ЖИРОСОДЕРЖАЩИХ СТОЧНЫХ ВОД БАКТЕРИЯМИ РОДА SERRATIA

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка основы биопрепарата для деструкции жиров»

Актуальность проблемы.

Развитие пищевых предприятий и расширение сети быстрого питания в России за последние годы, сделало особенно актуальным решение проблемы очистки сточных вод предприятий пищевой промышленности от жиров, масел, белков и других органических загрязнений. Другой серьезной проблемой является удаление отложения жиров в канализационных системах предприятий и утилизация жира в жироуловителях.

Состояние водной среды, особенно в индустриально развитых регионах, заставляет разрабатывать и вводить в действие все более жесткие нормативы на сброс загрязнений в водоемы и городские коллекторы. Одним из перспективных способов решения этих проблем является биоферментная технология разложения органических веществ, в том числе жиров и растительных масел на локальных очистных сооружениях, находящихся непосредственно на предприятиях (Молоканов с соавт., 2005; Новохатко, Михельсон, 2006).

Биоферментные технологии по разложению и утилизации жиров в сточных водах основаны на использовании микробных липаз и микроорганизмов, способных к их продуцированию. Однако, на рынке Российской Федерации представлены лишь несколько препаратов зарубежного происхождения.

Таким образом, поиск активного продуцента липаз, который мог бы стать основой отечественного биопрепарата для локальной очистки жиросодержащих сточных вод, является весьма актуальным.

Цель исследования. Выделение новых штаммов микроорганизмов, обладающих высокой липолитической активностью, и их изучение в качестве основы биопрепарата для деструкции жиров.

Задачи исследования.

1. Выделить из природных и техногенных мест обитания новые штаммы липолитически активных микроорганизмов.

2. Подобрать оптимальные питательные среды для культивирования изучаемых штаммов с максимальным выходом липазы.

3. Определить спектр окислительной активности исследуемых микроорганизмов в отношении растительных и животных жиров, а также углеводородов различных классов.

4. Определить эффективность использования липолитически активных микроорганизмов для биологической очистки жиросодержащих сточных вод.

Научная новизна. Выделена и идентифицирована группа новых штаммов бактерий рода Serratia, проявляющих высокую липолитическую активность: Serratia marcescens ИБ 2-1, Serratia marcescens ИБ 2-2, Serratia species ИБ 1, Serratia species ИБ 3-1, Serratia species ИБ 3-3.

Для каждого штамма подобрана оптимальная питательная среда, на которой биосинтез липазы максимален. Выявлено, что штаммы S. marcescens ИБ 2-2 и Serratia sp. ИБ 3-1 проявляют липазную активность намного превышающую показатели, известные для бактерий этого рода.

Определен спектр окислительной активности бактерий p. Serratia по отношению к жирам растительного и животного происхождения, индивидуальным углеводородам, нефти и продуктам ее переработки.

Практическая значимость.

Предложены новые штаммы Serratia sp. ИБ 3-1 и S. marcescens ИБ 2-2, которые могут быть использованы в качестве продуцентов липолитических ферментов (Решения Роспатента о выдаче Патентов РФ от 1.03.2007 и от 11.04.2007, соответственно).

В модельных условиях выявлено, что исследуемые микроорганизмы способны осуществлять 100% биодеградацию жиров растительного и животного происхождения. Показана возможность использования штаммов S. marcescens ИБ 2-2 и Serratia sp. ИБ 3-1 для разработки биопрепарата для очистки жиросодержащих сточных вод.

Апробация работы. Основные результаты исследований были представлены на III Всероссийской научной internet-конференции

Интеграция науки и высшего образования в области био- и органической химии и механики многофазных систем» (Уфа, 2004), Всероссийской молодежной школе-конференции «Актуальные аспекты современной микробиологии» (Москва, 2005), XIX Международной научно-технической конференции «Химические реактивы, реагенты и процессы малотоннажной химии» (Уфа, 2006).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 10 научных работ, в том числе 3 статьи в рецензируемых научных журналах, входящих в Перечень ВАК, рекомендованных для соискателей ученой степени, и 2 патента Российской Федерации.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Поскрякова, Наталья Владимировна

выводы

1. Выделены и идентифицированы пять новых штаммов бактерий рода Serratia: Serratia marcescens ИБ 2-1, Serratia marcescens ИБ 2-2, Serratia species ИБ 1, Serratia species ИБ 3-1, Serratia species ИБ 3-3, обладающих высокой липолитической активностью.

2. Установлен оптимальный состав сред, обеспечивающий максимальное продуцирование липолитических ферментов каждым штаммом. Показано, что штаммы Serratia marcescens ИБ 2-2 и Serratia species ИБ 3-1 могут быть использованы в качестве продуцентов липаз.

3. Определена величина окислительной активности новых штаммов по отношению к жирам растительного и животного происхождения, а также углеводородам (алифатическим, циклическим, окисленным) нефти и нефтепродуктам.

4. Показано, что штаммы Serratia marcescens ИБ 2-2 и Serratia species ИБ 3-1 могут служить основой биопрепарата для очистки жиросодержащих сточных вод.

101

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Сточные воды предприятий пищевой промышленности, образующиеся в технологических процессах, характеризуются высоким содержанием органических загрязнений. Отсутствие современных локальных очистных сооружений на большинстве предприятий, а также рост объемов производства, зачастую приводит к ухудшению состава производственных сточных вод по таким показателям, как ХПК, БПК, жирам, аммонийному азоту, фосфатам и т.п. Вместе с тем, с каждым годом, со стороны контролирующих органов предъявляются все более жесткие требования к предприятиям, оказывающим отрицательное воздействие на окружающую среду. Одним из способов решения этой проблемы является локальная биологическая очистка сточных вод.

Современные технологии локальной биологической очистки сточных вод основаны, главным образом, на применении микробиологических препаратов, целенаправленно воздействующих на специфические загрязнения.

Новые штаммы бактерий рода Serratia, выделенные нами из образцов активного ила биологических очистных сооружений Пермского мясокомбината, обладают высокой липолитической и оксислительной активностью по отношению к жирам растительного и животного происхождения, углеводородам нефти и продуктам ее переработки.

Величина липолитической активности изучаемых штаммов бактерий рода Serratia зависит от наличия в питательной среде таких сложных органических компонентов, как соевая мука и дрожжевой экстракт. Добавление дрожжевого экстракта в состав питательной среды, содержащей соевую муку, и увеличение его концентрации не просто повышает синтез фермента изучаемыми бактериями, а на порядок увеличивает липолитическую активность исследуемых культур. Для каждого исследуемого штаммаподобрана питательная среда, оптимальная для биосинтеза липазы. Выявлены два штамма, S. marcescens ИБ 2-2 и Serratia sp. ИБ 3-1, которые продуцировали максимальное количество липазы по сравнению со всеми известными нам бактериями этого рода.

Новые штаммы-продуценты липазы способны утилизировать на 100% жиры растительного и животного происхождения как на богатых питательных средах, содержащих сложные органические компоненты, так и в условиях модельных жиросодержащих растворов.

Совокупность положительных свойств изученных штаммов позволяет считать их перспективной основой для создания биопрепаратов, которые могут использоваться в процессах локальной очистки жиросодержащих стачных вод. Наиболее активными из всех исследованных являются штаммы Serratia species ИБ 3-1 и Serratia marcescens ИБ 2-2, способные эффективно утилизировать широкий спектр жиров.

100

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Поскрякова, Наталья Владимировна, 2007 год

1. Алещенкова З.М., Самсонова А.С., Семочкина Н.Ф. Влияние микроорганизмов-деструкторов на очистку в активном иле сточных вод производства лавсана // Прикладная биохимия и микробиология,- 1999.- Т. 35.-№4.-С. 448-451.

2. Аренде И.М., Дорохов В.В., Турочкина Т.М., Борисова Т.Г. Питательные среды для биосинтеза липазы Aspergillus awamori // Прикладная биохимия и микробиология.- 1975 .- Т. 11.- № 5.- С. 691-696.

3. Артемов А.В., Попов В.О., Королева О.В., Шубина Е.В., Кудрявцева Т.Н. Перспективы использования ферментативного катализа в текстильной промышленности // Катализ в промышленности.- 2006,- № 1.- С. 42-47.

4. Башкатова Н.А, Северина Л.О. Влияние условий культивирования на биосинтез липазы у Serratia marcescens // Микробиология,- 1979.- Т. 48.- № 5.- С. 826-831.

5. Башкатова Н.А., Северина Л.О. Выделение и характеристика внутриклеточной липазы Serratia marcescens 345 // Прикладная биохимия и микробиология.- 1980.- Т. 16.- № 3.- С. 315-325.

6. Башкатова Н.А., Северина Л.О. Экзолипазы некоторых видов Pseudomonas // Микробиология.- 1978.- Т. 47, № 2.-С. 234-240.

7. Безбородое A.M. Биотехнология продуктов микробного синтеза,- М.: Агропромиздат, 1991.- 238 с.

8. Безбородое А.М. Биохимические основы микробного синтеза.- М.: Легкая и пищевая промышленность, 1984.- 304 с.

9. Брокерхоф X., Дженсен Р. Липолитические ферменты.- М.: Мир, 1978.396 с.

10. Вожова И.М., Лебедева Ж.Д. Влияние липидного компонента среды на биосинтез липазы грибами // Микробиология -1979. Т. 48.- № 4. - С. 653-657.

11. Глазунова Л. М., Гончаров Ю. И., Минина В. С. Липазы микроорганизмов,- М.: ОНТИТЭИмикробиопром, 1984.- 36 с.

12. Голубовская Э.К. Биологические основы очистки воды. М.: Высшая школа, 1978.- 232 с.

13. Гореликова Г.А. Основы современной пищевой биотехнологии: Учебное пособие. Кемерово , 2004.- 100 с.

14. Давранов К.Д., Гулямова К.А., Розмухомедова Б., Шамшиева М. Выделение и характеристика внеклеточных липаз микромицета Penicillium sp. // Прикладная биохимия и микробиология.- 1994,- Т. 30.- № 2.- С. 234237.

15. Давранов К.Д., Куйлибаев И.Т., Розмухамедова Б.Х., Махсумханов А.А. Некоторые свойства внеклеточной липазы из Rhizopus microsporus УзЛТ-3 // Прикладная биохимия и микробиология.- 1995.- Т. 31.- № 4.- С. 405-411.

16. Давранов К.Д. Микробные липазы в биотехнологии // Прикладная биохимия и микробиология,- 1994,- Т. 30, № 4.- С. 527-533.

17. Дужак А. Б., Панфилова З.И., Васюнина Е.А. Выделение и свойства препаратов внеклеточных липаз природного (В-10) и мутантного (М-1) штаммов Serratia marcescens // Прикладная биохимия и микробиология.-2000.- Т. 36, №4.- С. 402-411.

18. Закиров М.З., Султанова И.Г., Давранов К. Rhizopus microsporus штамм УзЛТ-1 термотолерантный продуцент липазы // Прикладная биохимия и микробиология.- 1975.- Т. 11.- № 4,- С. 546-549.

19. Заявка ЕПВ (WO) № 0528828 МКИ 5 С 12 N 9/20. Щелочные липазы Bacillus, кодирующие их последовательности ДНК и продуцирующие эти липазы бациллы. Опубл. 03.03.93.

20. Заявка ПНР № 265870 МКИ 4 С 12 N. Способ получения нерастворимых препаратов липазы и эстеразы Mucor racemosus А 37 // Опубл. 26.05.88.

21. Заявка РСТ (WO) № 94/01542 МКИ 5 С 12 N 9/12. Способ очистки двух изоферментных липаз Candida rugosa // Опубл. 02.07.93.

22. Заявка Японии № 4-30833 МКИ 5С N 1/14; 9/12. Способ получения микробной биомассы с высокой липазной активностью // Опубл. 22.05.92

23. Звягинцева И.С., Городнянская Л.И. Липолитическая активность осмотолерантных дрожжей // Микробиология.- 1978.- Т. 47.- № 2.- С. 230233.

24. Звягинцева И.С., Дмитриев В.В., Рубан Е.Л., Фихте Б.А. Локализация внеклеточной липазы у дрожжей Candida paralipolytica // Микробиология.-1980.- Т. 49.- № 3.- С. 417-420.

25. Илларионова Р.П., Бондаренко Б.Н., Пархоменко Л.В., Бернасовская Е.П. Количественный метод определения лецитиназ и липаз у микроорганизмов. // Прикладная биохимия и микробиология.- 1976.- Т. 12.-№ 5.- С. 784-787.

26. Илялетдинов А.Н., Алиева P.M. Микробиология и биотехнология очистки промышленных сточных вод.- Алма-Ата: Гылым, 1990.- 224 с.

27. Казанина Г.А., Петрова Л.Я., Селезнева А.А., Рубан Е.Л. Сравнительное изучение свойств липаз микробного происхождения // Прикладная биохимия и микробиология.- 1976.- Т. 12.- № 44.- С. 537-540.

28. Кольман Я., Рем К.-Г. Наглядная биохимия: Пер. с нем. М.: Мир, 2000. - 469 с.

29. Коновалов А.А. Разработка методов разделения рацемических эфиров с помощью гидролаз микроорганизмов: Автореф. дис. канд. техн. наук. -Уфа,2002.-24 с.

30. Коршунова Т.Ю., Силищев Н.Н., Логинов О.Н. Микробиологические процессы на очистных сооружениях. Уфа: Реактив, 2005.- 62 с.

31. Крушенко Г.Г., Сабирова Д.Р., Петров С.А., Талдыкин Ю.А. Проблема воды // Вода и экология.- 2000,- № 3.- С. 2-8.

32. Кудряшова Н.В., Андреева И.Н. Serratia marcescens продуцент пигмента продигиозина // Материалы 10-ой Пущинской школы-конференции молодых ученых «Биология - наука XXI века». 17-21 апреля 2006.- С. 380.

33. Куимова Т.Ф., Шабанова Е.А., Казаков Г.А. Быстрый отбор микроорганизмов, образующих внеклеточные липазы // Микробиология.-1975.- Т. 44.- № 2.- С. 365-367.

34. Лещинская И.Б. Современная промышленная микробиология // Соросовский образовательный журнал.- 2000.- Т. 6,- № 4.- С. 14-18.

35. Лобырева Л.Б. Липолитическая активность дрожжей Candida utilis 295t // Известия АН СССР. Серия биологическая.- 1974.- № 6.- С. 885-890.

36. Лобырева Л.Б., Марченкова А.И. Липолитическая активность спорообразующих бактерий Bacillus subtilis // Микробиология.- 1979.- Т. 48.-№2.- С. 208-211.

37. Международная заявка № 91/00910 МКИ 5С 12 N 15/55. Мутантные липазы, продуцируемые Pseudomonas // Опубл. 24.01.91

38. Меледина Т.В., Соколова А.А. К вопросу очистки жиросодержащих сточных вод. Л., 1990.- 3 с.

39. Методы общей бактериологии: Пер. с англ. В 3 т. / Под ред. Ф.Герхардта и др.- М.: Мир, 1984.- 264 с.

40. Михеев А.В., Зиновьева М.Е., Калачева Н.В. Получение и некоторые свойства липазы Saccharomicopsis lipolytica-35 // Материалы 10-ой Пущинской школы-конференции молодых ученых «Биология наука XXI века». 17-21 апреля 2006.- С. 384.

41. Молоканов Д.А., Молчан А.В., Хайруллин Р.С. Очистка сточных вод предприятий пищевой промышленности // Пищевая промышленность.-2005.- № 4.

42. Определитель бактерий Берджи: В 2 т. / Под редакцией Дж. Хоулта и др.-М.: Мир, 1997.-Т. 1.

43. Очистка сточных вод. Пер. с англ. / Хенце М., Армоэс П., Ля-Кур-Янсен Й., Арван Э. М.: Мир, 2004.- 480 с.

44. Пат. 2233325 Российской Федерации, 7 С12 N9/02. Способ получения комплексного препарата липазы и липоксигеназы / Шеламова С.А., Янышева Н.В. / Заявлено 08.01.2003; опубл. 27.07.2004.

45. Перевозникова О.А., Козырева Т.М. Липолитическая активность дрожжей Yarrowia lipolytica при различных условиях культивирования // Материалы 10-ой Пущинской школы-конференции молодых ученых «Биология наука XXI века». 17-21 апреля 2006.- С. 388.

46. Попова Н.И., Кривова А.Ю., Растимешина И.О., Бурцева С.А. Взаимосвязь биосинтеза липидов, липоксигеназы и липазы у культур актиномицетов // Микробиология.- 2005.- Т. 74.- № 5.- С. 717-719.

47. Практикум по микробиологии. / Под ред. Н.С. Егорова.- М.: Изд-во Моск. Ун-та, 1976.- 308 с.

48. Прист Ф. Внеклеточные ферменты микроорганизмов. М.: Мир, 1987.117с.

49. Рубан Е.Л., Лобырева Л.Б., Свириденко Ю.Я., Марченкова А.И., Уманский М.С. Липолитическая активность микроорганизмов, выделенных из различных источников // Прикладная биохимия и микробиология.- 1978.Т. 14,- №4,- С. 499-502.

50. Рубан Е.Л. Микробные липиды и липазы. М.: Наука, 1977.- 192 с.

51. Свириденко Ю. Я., Лобырева Л. Б., Марченкова А. И., Рубан Е. Л., Усманский М. С. Влияние состава среды на биосинтез и свойства экзолипаз микроорганизмов // Прикладная биохимия и микробиология- 1978.- Т. 14.- № 5.- С. 677-683.

52. Северина Л.О., Башкатова Н.А. Выделение внутриклеточной липазы у Serratia marcescens // Микробиология.- 1979.- Т. 48.- № 6.- С. 994-998.

53. Современная микробиология. Прокариоты: В 2-х томах. Пер. с англ. / Под ред. Ленглера Й., Древса Г., Шлегеля Г.- М.: Мир, 2005,- 656 с.

54. Стебловская Е.Ф. Липолитичекие ферменты микроорганизмов. Институт микробиологии АН Респ. Молдова.- Кишинев, 1997.- 5 с.

55. Табак М.Я., Щелокова С.С. Влияние твинов на липазную активность // Микробиология. -1979. Т. 48, № 4. - С. 658-662.

56. Тимофеева С.С. Современные методы очистки сточных вод предприятий мясоперерабатывающей промышленности // Химия и технология воды.- 1993.- Т. 15.- № 7-8.- С. 571-577.

57. Тютюнников Б.Н. Химия жиров. М.: Пищевая промышленность, 1974.446 с.

58. Феофанов Ю.А. Проблемы и задачи в сфере обеспечения населения питьевой водой // Вода и экология.-1999. №1. - С. 4-7.

59. Шаяхметов И.Ф. Экологическая биотехнология. Уфа: РИО БашГУ, 2003.- 168 с.

60. Шеламова С.А., Жеребцов Н.А., Щеголев В.В. Оптимизация условий биосинтеза липазы // Ферментная и спиртовая промышленность,- 1984.- № 4.- С. 26-28.

61. Яковлев С.В., Воронов Ю.В. Водоотведение и очистка сточных вод / Учебник для вузов. М.: АСВ, 2004.- 704 с.

62. Abdou A.M. Purification and partial characterization of psychrotrophic Serratia marcescens lipase // J. Dairy Sci.- 2003.- Vol. 86.- P. 127-132.

63. Adamitsch B.F., Karner F., Hampel W.A. High cell density cultivation of Brevibacterium linens and formation of proteinases and lipase Biotechnology Letters.- 2003.- Vol. 25.- P. 705-708.

64. Aires-Barros M.R., Taipa M.A., Cabral J.M.S. Isolation and purification of lipases. In: Wooley P, Petersen SB (eds) Lipases-their structure, biochemistry and application // Cambridge University Press: Cambridge, -1994. P. 243-270.

65. Becker P., Koester D., Popov M. N., Markossian S., Antranikian G., Maerkl H. The biodegradation of olive oil and the treatment of lipid-rich wool scouring wastewater under aerobic thermophilic conditions // Wat. Res.- 1999.- Vol. 33.- № 3.- P. 653-660.

66. Berne C., Montjarret В., Guountti Y., Garcia D. Tributyl phosphate degradation by Serratia odorifera. // Biotechnology Letters.- 2004.- Vol 26.- P. 681 -686.

67. Berry G. Detection of Microbial Lipase by Copper Soap Formation // Journal of Bacteriology.- 1933.- Vol. 25.- № 2.- P. 433-434.

68. Berto P., Belingheri L., Dehorter B. Production and purification of a novel extracellular lipase from Alternaria brassicicola // Biotechnology Letters.-1997.-Vol 19, No 6, P. 533-536.

69. Bloomer S. Lipase-catalysed lipid modifications in nonaqueous media // Dissertation Abstracts International.- 1993.- Vol. 53.- № 4.- P. 0703.

70. Borgstrom B. a. Brockman H. L. Lipases.- Amsterdam: Elsevier Science Publishers В. V., 1984.- 527 p.

71. Bours J., Mossel D. A comparison of methods for the determination of lipolytic properties of yeasts isolated from margarine // Antonie van Leeuwenhoek. J. Microbio.- 1969.- Vol. 35.- № 1.- P. 246.

72. Bradoo S., Saxena RK., Gupta R. Two acidothermotolerant lipases from new variants of Bacillus sp. H // World Journal Microbiol. Biotechnol. 1999. - Vol. 15. -P. 87-91.

73. Bridoux G., Dhulster P. and Manem J. Analyse des graisses dans les stations d'epuration // Tech. Sci. Methodes.-1994.- Vol. 5.- P. 257-262.

74. Brockerhoff H., Hoyle R., Hwang P. An assay of lipase based on the liberation of acetaldehyde from vinyl oleate // Anal. Biochem.- 1970.- Vol. 37.- № 1.- P. 26-31.

75. Brune A.K., Gotz F. Degradftion of lipids by bacterial lipases. In: Winkelman G (ed) Microbial degradation of natural products.- VCH: Weinhein, 1992.-P. 243-266.

76. Burlina A., Galzigna Z. Turbidimetric Procedure for Determination of lipase activity // Clin. Chem.- 1973.- Vol. 19.- № 4.- P. 384 386.

77. Cang S., Sanada M., Johdo O., Ohta S., Nagamatsu Y., Yoshimoto A. High production of prodigiosin by Serratia marcescens grown on ethanol // Biotechnology Letters.- 2000.- Vol. 22.- P. 1761-1765.

78. Cheng Y-C., Tsai S-W. Enantioselective esterification of (SR)-2-(4-chlorophenoxy) propionic acid via Carica papaya lipase in organic solvents // Tetrahedron Asymmetry.- 2004.- Vol. 15.- № 18.- 2917-2920.

79. Deive F.J., Costas M., Longo M.A. Production of a thermostable extracellular lipase by Kluyveromyces marxianus Biotechnology Letters.- 2003.-Vol. 25.- P. 1403-1406.

80. Dharmsthiti S., Kuhasuntisuk B. Lipase from Pseudomonas aeruginosa LP602: biochemical properties and application for wastewater treatment // Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology 1998.- Vol. 21.- P. 75-80.

81. Dharmsthiti S., Luchai S. Production, purification and characterization of thermophilic lipase from Bacillus sp. THL027. FEMS // Microbiol. Letters. 1999. -Vol. 179.-P. 241-246.

82. Dole V. A relation between nonesterified fatty acids in plasma and the metabolism of glucose // Journal of clinical investigation.- 1956. Vol. 35.- P. 150154.

83. Dong H., Gao S., Han S., Cao S. Purification and characterization of a Pseudomonas sp. lipase and its properties in non-aqueous media // Appl Microbiol Biotechnol. -1999. Vol. 30. - P. 251-256.

84. Donnerhock W. Abwasserbehaudlung in der Lebensmittelindustrie // {Correspond. Abwasser.-1991.- Vol. 38.- № 3.- P. 432-435.

85. Dunkley W., Smith Z. Hydrolytic rancidity in milk. IV. Relationship between tributyrinase and lipolysis // Journal of Dairy Science. 1951.- Vol. 34, № 4, P. 940-947.

86. Fruer Т., Rieter В., Lawrence R. Methods for isolation and enumeration of lipolytic organisms // J. Dairy Sci.- 1967.- Vol. 50, № 4 .- P. 477-484.

87. Garber N. The effect of osmotic stress and antibiotic on the production of protease and lipase by Serratia marcescens // European Journal of Biochemistry.-2001.- Vol. 268.-P. 189-243.

88. Ghosh P.K., Saxena R.K., Gupta R, Yadav R.P., Davidson W.S. Microbial lipases: production and applications // Science Progress. -1996. -Vol. 79.-P. 119-157.

89. Gilbert E.J., Drozd J.W., Jones C.W. Physiological regulation and optimization of lipase activity in Pseudomonas aeruginosa EF2 // Journal of General Microbiology. -1991. Vol. 137 - P. 2215-2221.

90. Guieysee D., Sandoval G., Faure L., Nicaud J-M., Monsan P., Marty A. New efficient lipase from Yarrowia lipolytica for the resolution of 2-bromo-arylacetic acid estrs // Tetrahedron Asymmetiy.- 2004.- Vol. 15.- № 22.- P. 3539-3543.

91. Gupta R., Gupta N., Rathi P. Bacterial lipases: an overview of production, purification and biochemical properties // Applied and Environment Microbiology.2004.-Vol. 64.-P 763-781.

92. Jiali X., Jun Z., Zutong Q. Lipase from Penicillium camembert II-PG3 // Acta mycol. sin.- 1995.- Vol. 14.- № 2.- P. 136-142.

93. Jaeger K.E., Schneidinger В., Rosenau F., Werner M., Lang M., Dijkstra B.W., Schimossek K., Zonta A., Reetz M.T. Bacterial lipases for biologycal application // Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic.- 1997.- Vol. 3.-№ 1-4.-P. 3-12.

94. Kanwar L., Gogoi B.K., Goswami P. Production of a Pseudomonas lipase in n-alkane substrate and its isolation using an improved ammonium sulfate precipitation technique // Bioresource Technology. 2002. - Vol. 84. - P. 207-211.

95. Kawai E., Akatsuka H., Sakurai N., Idei A., Matsumae H., Shibatani N., Komatsubara S., Omori K. Isolation and analysis of lipase-overproducing mutant of Serratia marcescens // J. Biosci. Bioeng.- 2001.- Vol. 91.- P. 409-415.

96. Kim S.S., Kim E.K., Rhee J.S. Effects of growth rate on the production ofPseudomonas fluorescens lipase during the fedbatch cultivation of Escherichia colill //Biotechnology Progress. -1996. Vol. 12. - P. 718-722.

97. Mahler G.F., Kok R.G., Cordenons A., Hellingwerf K.J., Nudel B.C. Effects of carbon sources on extracellular lipase production and lipA transcription in Acinetobacter calcoaceticus // Applied and Environment Microbiology.- 2000. -V. 24.-P. 25-30.

98. Makhzoum A., Knapp J.S., Owusu R.K. Factors affecting growth and exstracellular lipase production by Pseudomonas fluorescencs 2D // Food Microbiol.- 1995.- Vol. 12.- № 4.- P. 277-290.

99. Montpas S. , Samson J., Langlois E., Lei J., Piche Y., Chenevert R. Degradation of 2,4,6-trinitrotoluene by Serratia marcescens. Biotechnology Letters, Vol 19, № 3, March 1997, P. 291-294.

100. Murty V.R., Bhat J.,. Muniswaran P.K.A Hydrolysis of rice bran oil using an immobilized lipase from Candida rugosa in isooctane // Biotechnology Letters.-2004.-Vol. 26.-P. 563-567.

101. Nascimento M.G., Zanotto S.P., Melegari S.P., Femandes L., Mandolesi S.M., Resolution of a-methylene-p-hydroxy esters catalysed by free and immobilized Pseudomonas sp. lipase // Tetrahedron Asymmetry.- 2003.- Vol. 14.-№20.-P. 3111-3115.

102. Nawani N., Dosanjh N.S., Kaur J. A novel thermostable lipase from a thermophilic Bacillus sp.: characterization and esterification studies Biotechnology Letters.-1998.- Vol 20.- No 10.-P. 997-1000.

103. Ogino H., Ishikawa H. Enzymes which are stable in the presence of organic solvents // Journal of Bioscience and Bioengineering.-2001.-Vol. 91, № 3.-P.109-116.

104. Oh B.-C., Kim H.-K., Lee J.-K., Kang S.-C., Oh T.-K. Staphylococcus haemolyticus lipase: biochemical properties, substrate specificity and gene cloning // FEMS Microbiology Letters. 1999. - Vol. 179.- P. 385-392.

105. Ota Y., Yamada К., Tomizuka N. Lipase from Candida cylindracea. I. Purification and properties // Agric. and Biol. Chem.- 1966 Vol. 30.- P. 576584.

106. Pancholy S., Lynd J. Characterization of Wheat Germ Lipase // Phytochemistry.- 1972.- Vol. 11.- № 4.- P. 643-645.

107. Pepeyira-Meireles F., Rocha-Leao M.H.M., Sant'Anna Jr. Lipase location in Yarrowia lipolytica cells // Biotechnology Letters.- 2000.- Vol. 22.- P. 71-75.

108. Rapp P. Production, regulation and some properties of lipase activiti from Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum // Enzyme and microbial tecnology.-1995.- Vol. 17.-P.832-838.

109. Rashid N, Shimada Y, Ezaki S, Atomi H, Imanaka T. Lowtemperature lipase from psychrotrophic Pseudomonas sp. Strain KB700A // Applied and Environment Microbiology. 2001.- V. 67.- P. 4064-4069.

110. Rathi P., Saxena R.K., Gupta R. A novel alkaline lipase from Burkholderia cepacia for detergent formulation // Process Biochemistry. 2001. - Vol. 37. - P. 187-192.

111. Reetz M.T., Jaeger K.-E. Overexpression, immobilization and biotechnological application of Pseudomonas lipases // Chem Phys Lipids.- 1998.-Vol. 93.- P.3-14.

112. Schmidt-Dannert C., Luisa R. M., Schmid R.D. Two novel lipases from the thermophile Bacillus thermocatenulatus: Screening, purification, cloning, overexpression and properties // Methods Enzymol. 1997. - Vol. 284. - P. 194-219.

113. Schrag J.D., Li Y., Wu Sh., Cygler M. Multiple crystal forms of lipases from Geotrichum candidum // Journal of Molecular Biology.- 1991,- V 220.- P 541-543.

114. Schrag J.D., Li Y., Wu Sh., Cygler M. Ser-His-Glu Forms the Catalytic Site of a Lipase from Geotrichum candidum // Lett, to Nature.- 1991.- V 351.- P 761764.

115. Schuepp C., Kermasha S., Michalski M.-C., Morin A. Production, partial purification and characterization of lipases from Pseudomonas fragi CRDA 037 //

116. Process Biochemistry. -1997.- Vol. 32.- P. 225-232.

117. Sharma R., Soni S.K., Vohra R.M., Jolly R.S., Gupta L.K., Gupta J.K. Production of extracellular alkaline lipase from a Bacillus sp. RSJ1 and its application in ester hydrolysis // Ind. J. Microbiol.- 2002.- Vol. 42.- P.49-54.

118. Sierra G.A Simple method for the detection of lipolytic activity of microorganisms and some observations on the influence of the contact between cells and fatty substrates // Antonie van Leeuwenhoek 1957. - Vol. 23.- P. 15-22.

119. Sugihara A., Tani Т., Tominaga Y. Purification and characterization of a novel thermostable lipase from Bacillus sp. // Journal of Biochemistry.- 1991,- Vol. 109.-P.211-216.

120. Vargos V.A., Delgado O.D., Hatti-Kaul R., Mattiason B. Lipase-producing microorganisms from a Kenyan alkaline soda lake // Biotechnology Letters.-2004.-Vol. 26.-P. 81-86.

121. Wang Y., Srivastava K.C., Shen G.J., Wang H.Y. Thermostable alkaline lipase from a newly isolated thermophilic Bacillus strain, A30-1 (ATCC 53841) // Journal of Ferment Bioengineering -1995. Vol. 79. - P. 433-438.

122. Wei D., Zhang L., Song Q. Studies on a novel carbon source and cosolvent for lipase production by Candida rugosa // Applied and Environment Microbiology. 2004. - Vol. 31. - P. 133-136.

123. Wei Y., Lai H., Chen S., Yeh M., Chang J. Biosurfactant production by Serratia marcescens SS-1 and its isogenic strain SMAR defective in SpnR, a quorum-sensing LuxR family protein // Biotechnology Letters.- 2004.- Vol 26.- № 10.- P. 799-802.

124. Wimmer Z.K., Skouridou V., Zarevuska M., Saman D., Kolisis F.N. Enzymic resolution of 2-substituted cyclohexanols through lipase-mediated esterification // Tetrahedron Asymmetry.- 2004.- Vol. 15.- № 24.- P. 3911-3917/

125. Wu H.-Y., Xu J.-H., Shen D., Xin Q. Improved production of (S)-ketoprofen ester hydrolase by a mutant of Trichosporon brassicae CGMCC 0574 // Journal Ind Microbiol. Biotechnol. 2003. - Vol. 30. - P. 357-361.

126. Yeoh H.H., Wong P.M., Lin G. Screening for fungal lipases using chromogenic lipid substrates // Mycologia. -1986. Vol. 78. - P. 298-300.

127. Zhang J., Hou Z., Yao C., Yu Y. Purification and properties of lipase from a Bacillus strain for catalytic resolution of (R)-naproxen // Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic.- 2002.- Vol. 18 № 4-6.- P. 205-210.