Разработка новой наносомальной лекарственной формы ломефлоксацина на основе биодеградируемых полимеров тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат биологических наук Климова, Ольга Владимировна

• Климова, Ольга Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Климова, Ольга Владимировна

Список основных сокращений

Актуальность темы

Введение

Цели и задачи исследования

Научная новизна и практическая значимость работы

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 16 1.Ломефлоксацин, как действующее вещество новой наносомальной ЛФ. Его физико-химические и терапевтические свойства. Методы получения и применения

1.1 Ломефлоксацин в клинической практике

1.2 Ломефлоксацин. Химическая структура.

Методы получения и физико-химические свойства

2 Наносомальная лекарственная форма.

Преимущества и недостатки.

2.2. Общие сведения о наночастицах

2.2.1. История открытия и изучения наночастиц

2.2.2. Механизм действия наносомальных препаратов

2.2.3. Требования, предъявляемые к наночастицам и их классификация

3. Полимеры, используемые для получения наночастиц. Классификация полимеров 35 3.1. Наночастицы, получаемые на основе полиалкилцианоакрилатов (ПАЦА)

3.2 Наночастицы, получаемые на основе сополимеров молочной и гликолевой кислот

4. Наносомальные лекарственные формы фторхинолонов на основе сополимеров молочной и гликолевой кислот.

5. Методы получения наночастиц на основе полимеров различных типов

5.1 Получение наночастиц путем эмульгирования

5.2. Получение наночастиц путем нанопреципитации

6. Методы изучения и контроля параметров полученных наночастиц

II МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

1.Получение наносомальных форм JIB.

1.1 Метод преципитации

1.2 Метод одинарных эмульсий

1.3 Метод двойных эмульсий

1.3.1 Метод двойных эмульсий, осуществляемый с использованием PLGA 50:50, PLGA 75:25 и PLA

1.3.2 Метод двойных эмульсий, осуществляемый с изменением соотношения ЛВ:полимер

1.3.3 Метод двойных эмульсий, осуществляемый с использованием различных первичных растворителей для полимера и ЛВ

1.3.4 Метод двойных эмульсий, осуществляемый с использованием различных режимов гомогенизации

1.4 Метод двойных эмульсий, осуществляемый с применением противоиона

1.4.1 Метод двойных эмульсий, осуществляемый с применением противоиона, вводимого совместно с ломефлоксацином

1.4.2 Метод двойных эмульсий, осуществляемый 67 с применением противоиона, вводимого совместно с полимером

1.5 Метод двойных эмульсий, осуществляемый с использованием в качестве ПАВ TWEEN-80, декстрана, альбумина и ПВС

1.6 Гельфильтрация наносомального препарата

2. Анализ полученных наночастиц

2.1 Тест на ресуспендируемость

2.2 Определение размера наночастиц

3.3 Качественное и количественное определение ломефлоксацина в наночастицах и в супернатанте

3.3.1 Спектрофотометрический способ определения ломефлоксацина.

3.3.1.1 Определение общего содержания ломефлоксацина в наносомальной ЛФ

3.3.1.2 Определение содержания свободного и связанного ломефлоксацина в наносомальной ЛФ

3.3.2 Определение ломефлоксацина методом ВЭЖХ

4. Исследование параметров высвобождения ломефлоксацина из лекарственной формы in vitro. Релиз.

Проведение диализа наносомального препарата и чистого вещества

5. Изучение полученных наносомальных композиций in vitro и in vivo

5.1 Определение специфической активности

5.2 Определение острой токсичности

5.3 Релиз in vivo 77 5.4. Изучение распределения чистого и наносомального ломефлоксацина по органам и тканям in vivo

III РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1.1 .Влияние технологических параметров синтеза на свойства получаемых наночастиц

1.1.1 .Метод получения НЧ и его влияние на свойства получаемой наносомальной ЛФ

1.1.2 Зависимость свойств получаемых НЧ от типа используемого полимера (бутилцианоакрилат, PLA, PLGA 50:50)

1.1.3 Зависимость свойств получаемых НЧ от природы полилактида

1.1.4 Зависимость свойств получаемых НЧ от соотношения ЛВ:полимер

1.1.5 Зависимость свойств получаемых НЧ от типа используемого стабилизатора эмульсии

1.1.6 Изучение зависимости степени сорбции

JIB в НЧ от способа предварительного растворения ломефлоксацина

1.1.7 Изучение зависимости степени сорбции ЛВ в НЧ от способа предварительного растворения полимера

1.1.8 Зависимость свойств НЧ от введения в синтез в качестве противоиона гликохолата калия гидрохлорида

1.1.9. Изучение зависимости степени сорбции JIB в НЧ от режима первичной и вторичной гомогенизации

1.1.10 Изучение зависимости свойств получаемых НЧ от времени первичной гомогенизации

1.1.11. Изучение зависимости свойств получаемых НЧ от времени вторичной гомогенизации

1.1.12 Изучение зависимости свойств получаемых НЧ от времени совместного перемешивания перед первичным гомогенизированием

1.1.13 Изучение зависимости свойств получаемых НЧ от времени перемешивания перед вторичным гомогенизированием

1.2Изучение стабильности экспериментальной лекарственной формы, разработка методов анализа

1.2.1 Изучение стабильности ломефлоксацина

1.2.2 Изучение стабильности суспензии наночастиц 118 2.1. Результаты исследования параметров высвобождения JIB из полимерной матрицы in vivo и in vitro; изучение специфической активности наносомального препарата

2.2. Определение специфической активности

2.3. Определение острой токсичности

2.4. Высвобождение JIB из полимерной матрицы in vitro в условиях равновесного диализа

2.5. Высвобождение JIB из полимерной матрицы in vivo 123 2.6 Изучение фармакокинетики наносомального ломефлоксацина в сравнении с чистой субстанцией JIB

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка новой наносомальной лекарственной формы ломефлоксацина на основе биодеградируемых полимеров»

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ.

Выбранная тема является актуальной и новой в связи с тем, что на данный момент лечение внутриклеточных инфекций и опухолевых заболеваний является одной из наиболее важных проблем современной медицины. На пути решения этой проблемы возникает немалое количество трудностей. Лекарственные вещества (ЛВ), используемые настоящее время обладают низкой эффективностью, повышенной токсичностью, и к ним быстро развивается бактериальная резистентность. Поиск новых более эффективных лекарственных средств (ЛС) - это длительный и весьма дорогостоящий процесс. В связи с этим является актуальной разработка новых лекарственных форм (ЛФ) для повышения эффективности уже имеющихся и активно использующихся в клинической практике субстанций. Одним из перспективных направлений повышения эффективности, снижения побочных эффектов ЛВ и преодоления лекарственной резистентности представляется использование полимерных наночастиц (НЧ). Также с помощью НЧ становится возможным контролирование высвобождения ЛВ, что позволит, во-первых, создать на их основе пролонгированные ЛФ, во-вторых, обеспечивать внутриклеточную концентрацию на оптимальном уровне.

Данная концепция была неоднократно подтверждена экспериментально, и в настоящее время имеется значительное количество работ по этой тематике, в частности, публикации о высокой эффективности наносомальных препаратов в лечении туберкулеза, опухолевых заболеваний и т. д.

Среди используемых для получения НЧ полимеров особый интерес представляют сополимеры молочной и гликолевой кислот (PLGA). НЧ из данного вида полимеров эффективно сорбируют различные ЛВ, быстро биодеградируют, высвобождая ЛВ, обладают низкой токсичностью и хорошо выводятся из организма. Они также способны образовывать устойчивые коллоидные системы, пригодные для парентерального введения. Таким образом, НЧ из сополимеров молочной и гликолевой кислот (PLGA) являются перспективным носителем для создания коллоидных систем доставки JIB.

При анализе литературных данных было выяснено, что наиболее часто встречающимися в научной литературе фторхинолонами, используемыми для создания микро- и наносомальных ЛФ направленного действия являются ципрофлоксацин и моксифлоксацин. Однако, до настоящего момента не было сделано ни одной попытки создания наносомальной ЛФ на основе сополимеров молочной и гликолевой кислот такого фторхинолона, как ломефлоксацин. Ломефлоксацин является одним из наиболее активных современных антиактериальных препаратов группы фторхинолонов. Введение ломефлоксацина в состав НЧ позволит значительно изменить его свойства, существенно расширить антибактериальную активность и улучшить фармакокинетические свойства данного ЛВ. Наличие в молекуле ломефлоксацина двух атомов фтора и мётильной группы в пиперазиновом ядре требует индивидуального подхода к созданию его наносомальной ЛФ, а также разработки оригинальных методик его качественного и количественного определения как в составе наносомальной ЛФ, так и в биологических образцах. В виду изменения свойств данного ЛВ потребуется также тщательное изучение его специфической и антибактериальной активности и изменений в распределении по органам и тканям во времени.

ВВЕДЕНИЕ.

Научно-техническое развитие современного общества ставит перед фармацевтической технологией ряд новых теоретических и практических задач, касающихся создания новых усовершенствованных лекарственных форм (ЛФ). Особенная роль стала отводиться именно ЛФ, т. к. все чаще рассматривается влияние на организм не только собственно лекарственной субстанции, но и препарата в целом. Именно лекарственный препарат с совокупностью сложных и многообразных взаимоотношений между всеми его компонентами и их влиянием на биологически активный компонент становится объектом активного дальнейшего изучения и усовершенствования. Наиболее рациональными могут считаться лишь те ЛФ, которые могут обеспечить максимальную доступность ЛВ, сводя при этом к минимуму побочные эффекты и возможные неудобства при его применении. Разработка новых ЛФ является хорошей альтернативой разработке новых ЛВ, что обусловлено рядом причин. Несмотря на то, что стало возможным применение математического моделирования для прогнозирования взаимосвязи между терапевтическим эффектом и химическим строением предполагаемой молекулы, путь создания новых ЛВ все также требует больших временных и финансовых затрат. С момента открытия нового ЛВ и до его внедрение в массовое производство и использование проходит около 10-15 лет.

Следует помнить также, что все ЛВ независимо от их принадлежности к той или иной фармацевтической группе обладают такими свойствами, как:

- токсичность '

- побочные эффекты

- относительно низкая специфичность действия (у многих)

- возникновение резистентности в случае их длительного применения

- особенности взаимодействия с другими ЛВ при совместном применении

Таким образом, наравне с разработкой новых ЛВ, не менее актуальным является и разработка новых ЛФ, для коррекции некоторых из

10 вышеперечисленных свойств ЛВ. При создании ЛФ желательно учитывать следующее:

- ЛФ должна повышать терапевтическую эффективность ЛВ

- ЛФ должна способствовать снижению побочных и токсических эффектов Важно также помнить, что при создании нового ЛП необходимо сделать для пациента лечение максимально комфортным, т.е. увеличить временные промежутки между приемами препарата, заменить, если это возможно, инфузионные и внутривенные методы введения ЛВ на пероральные. Разработка ЛФ является таким же важным этапом в создании ЛП, как и создание самого действующего ЛВ.

Одной из современных и соответсвующих выше описанным требованиям ЛФ являются наночастицы (НЧ) на основе различных полимеров. Использование наночастиц позволяет обеспечивать направленный транспорт лекарственного вещества в пораженный орган или ткань, что существенно уменьшает общее токсическое воздействие на организм [50] и, как следствие, снижает выраженность побочных эффектов. Также с помощью наночастиц становится возможным контролировать высвобождение лекарственного вещества, что позволяет, во-первых, создавать на их основе пролонгированные лекарственные формы, во-вторых, обеспечивать внутриклеточную концентрацию на оптимально высоком уровне.

В продолжении ранее начатых работ в ММА имени И. М. Сеченова, в Центре Молекулярной Диагностики и Лечения и в Московском научно-исследовательском институте медицинской экологии Департамента здравоохранения г. Москвы по разработке направленной доставки противомикробных и противоопухолевых средств для данной исследовательской работы был выбран препарат фторхинолонового ряда ломефлоксацин, а в качестве полимера для создания НЧ - сополимер молочной и гликолевой кислот (как основной).

ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Цель: разработка биотехнологического получения ломефлоксацина, иммобилизованного на НЧ из биодеградируемых полимеров для повышения эффективности, снижения выраженности побочных эффектов, а также обеспечения пролонгированного действия ЛВ.

В соответствии с целью исследования были поставлены следующие задачи:

-осуществить иммобилизацию ЛВ на НЧ и оптимизировать технологию синтеза наносомальной ЛФ.

-разработать методику качественного и количественного определения ломефлоксацина в наносомальной ЛФ, в биологических образцах. Изучить стабильность ломефлоксацина в условиях его иммобилизации на НЧ.

-изучить специфическую активность химиотерапевтического ЛП на выбранных моделях с использованием микроорганизмов в нативном состоянии, и после сорбции на НЧ.

- изучить скорость высвобождения ЛВ из матрицы полимера-носителя in vitro и in vivo (изучение пролонгированного эффекта).

-изучить распределение ЛВ по органам и тканям с целью выявления изменения фармакокинетических параметров ломефлоксацина, ассоциированного с полимерными НЧ, полученными на основе сополимеров молочной и гликолевой кислоты.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ

Впервые разработан подход к созданию наносомальной ЛФ на основе сополимеров молочной и гликолевой кислот (PLGA) с ломефлоксацином, включающий в себя разработку оптимальных параметров синтеза для получения стабильной и воспроизводимой ЛФ, а также методики качественного и количественного определения ломефлоксацина в наносомальной ЛФ и в биологических образцах.

Впервые изучен механизм высвобождения лекарственного вещества из НЧ in vitro и in vivo и специфическая активность наносомальной ЛФ ломефлоксацина на основе сополимеров молочной и гликолевой кислот (PLGA).

Экспериментальные подходы, разработанные для оптимизации методов получения наносомальной ЛФ ломефлоксацина, могут быть использованы при создании других наносомальных препаратов.

Результаты изучения механизма высвобождения ЛВ из НЧ in vitro и in vivo, а также результаты изучения распределения наносомального ломефлоксацина по органам и тканям могут быть использованы при выборе доз и режимов лечения в последующих биологических испытаниях наносомальной формы ломефлоксацина.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. Принципиальная возможность создания наносомальной ЛФ ломефлоксацина, получаемой на основе биодеградируемых полимеров и обладающей повышенной эффективностью, менее выраженными побочными эффектами, а также обеспечивающей пролонгированное действие ЛВ.

2. Иммобилизованный на НЧ ломефлоксацин сохраняет, а в случае с некоторыми микроорганизмами даже увеличивает анибактериальную активность.

3. Иммобилизация ломефлоксацина на НЧ приводит к его перераспределению по органам и тканям живого организма.

ЛИЧНЫЙ ВКЛАД АВТОРА

Соискатель самостоятельно провела все эксперименты по получению НЧ с иммобилизованным на них ломефлоксацином, в динамике оценила перераспределение ЛВ по органам и тканям в сравнении с контролем. Интерпретация полученных результатов и их статистическая обработка также осуществлены автором.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Результаты работы были представлены на следующих конференциях, конгрессах и научных школах:

Всероссийская научная школа для молодежи «Наномедицина и нанотоксикология» 2009

VI международная конференция «Молекулярная медицина и биобезопасность» 2009

- Итоговая научная конференция молодых исследователей с международным участием «Татьянин день» 2010

- XVII Российский национальный конгресс «Человек и Лекарство» 2010

VII международная конференция РАН «Молекулярная медицина и биобезопасность» 2010

Работа была награждена в 2010 году дипломом как лучшая научно-исследовательская работа в области диагностики и терапии социально-значимых заболеваний на основе достижений молекулярной медицины в рамках VII международной конференции РАН «Молекулярная медицина и биобезопасность».

ПУБЛИКАЦИИ

По теме диссертации опубликовано 9 научных работ (3 из них - в журналах из списка ВАК, 6 - тезисы докладов)

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ

Диссертация состоит из введения, 3 глав, заключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 154 страницах, содержит 3 схемы, 9 рисунков, 20 таблиц, 37 графиков.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)», Климова, Ольга Владимировна

Выводы

1. В ходе проведенного исследования разработаны подходы к созданию наносомальной ЛФ ломефлоксацина в виде наноразмерных частиц на основе сополимеров молочной и гликолевой кислот; оптимизированы технологические параметры получения ломефлоксацина, иммобилизованного на НЧ.

2. Изучены физико-химические свойства полученной наносомальной ЛФ ломефлоксацина методами УФ-спектроскопии, ВЭЖХ, фотонно-корреляционной спектроскопии и др.

3. Показано, что иммобилизованный ломефлоксацин превосходит по специфической антимикробной активности субстанцию ломефлоксацина.

4. В опытах in vivo на крысах линии Wistar было показано пролонгированное действие иммобилизованного ЛВ по сравнению с субстанцией ломефлоксацина.

5. Изучено распределение по органам и тканям наносомального ломефлоксацина, полученного на основе сополимеров молочной и гликолевой кислоты.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В данной работе был разработан метод включения противомикробного антибиотика широкого профиля фторхинолонового ряда - ломефлоксацина в состав частиц субмикронного размера на основе сополимера молочной и гликолевой кислот, с целью повышения эффективности и безопасности ЛВ, а также обеспечения его пролонгированного эффекта. Отбор оптимального состава и технологических параметров получения полимерных композиций проводился с использованием таких критериев, как размер полимерных частиц и степень включения в них ломефлоксацина. Удовлетворительными считались результаты позволяющие получать частицы с размерами от 100 до 500 нм и степенью включения ЛВ >30%.

В ходе выполнения работы было установлено, что оптимальным является состав наносомальной ЛФ ломефлоксацина, указанный в таблице№20.

Состав лекарственного препарата (ЛП) Таблица № 20

Наименование компонента Содержание в ЛФ, % от общей массы компонентов

Ломефлоксацин 5,8

PLGA 50:50 40,6

D-маннит 24,3

ЛВС 29,2

Poloxamer 188 0,1

Итого: 100 %

В ходе выполнения данной научно-исследовательской работы была оптимизирована технология получения наносомальной ЛФ ломефлоксацина.

139

Оптимальным является использование в качестве растворителей 1) для ломефлоксацина -0,01 М раствор соляной кислоты, 2) для полимера — хлороформ; соотношение водной и органической фазы 1:2,5; соотношение полимер:ЛВ 7:1; использование стабилизатора первичной эмульсии Poloxamer 188. Кроме того, было установлено, что время совместного перемешивания компонентов перед первичным и вторичным гомогенизированием смеси должно составлять 20 минут; рекомендуемый режим первичной и вторично гомогенизации заключается в следующем: 1.скорость вращения ротора гомогенизатора - 24 000 об./мин; 2. время гомогенизации - трехкратно по одной минуте с минутными интервалами. Показана стабильность ЛФ при хранении более 1 года.

Полученная наносомальная ЛФ ломефлоксацина была охарактеризована с помощью различных физико-химических методов: уф-спектроскопии, ВЭЖХ, фотонной-корреляционной спектроскопии и т. д. Была также изучена кинетика высвобождения ЛВ из полимерной матрицы в модельных опытах в условиях равновесного диализа. Время полного высвобождения ЛВ из наночастиц составило 96 часов. Полученная наносомальная ЛФ может храниться без признаков разложения антибиотика в течение 1 года при 5-8 °С в защищенном от света месте.

Было проведено изучение антибактериальной активности полученной новой ЛФ на культурах микроорганизмов: Escherihia coli, Klebsiella pneumonia spp., Staphylococcus aureus, штамм 906, Salmonella enteritidis ATCC 9640, Salmonella infantis spp., Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145, Pseudomonas aeruginosa spp., которое показало некоторое увеличение активности ЛВ в ЛФ по сравнению с субстанцией ломефлоксацина.

В опытах in vivo на крысах линии Wistar наносомальная лекарственная форма проявила пролонгированность действия, в сравнении с чистым ломефлоксацином.

Изучение общего токсического воздействия наносомального ломефлоксацина на организм мышей не показало его увеличения, а также усиления токсических эффектов, равно как и возникновения новых ранее не описанных нежелательных явлений.

Полученная новая композиция ломефлоксацина может быть использована в виде суспензии для внутримышечного или подкожного, кроме того она может быть использована для получения таблеток, капсул и других лекарственных форм перорального применения.

Таким образом, полученная полимерная композиция не уступает по большинству параметров используемым в настоящее время ЛФ ломефлоксацина, а по некоторым из них превосходит. В дальнейшем после определенной доработки новая наносомальная ЛФ ломефлоксацина может стать предметом для внедрения в промышленное производство.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Климова, Ольга Владимировна, 2011 год

1. Зузова А. П. Новые фторхинолоны при интераабдоминальных инфекциях и инфекциях малого таза // Фарматека №10-2007

2. Майчук Ю.Ф., Вахова Е.С., Кононенко JI.A. Ломефлоксацин в лечении инфекционных заболеваний глаз // Антибиотики и химиотерапия, 1998-N10, стр. 32-35.

3. Максаквин новый антибактериальный препарат из группы фторхинолонов//Пульмонология, 1993. Приложение.

4. Оганесян Е. А., X Бадур и др. Разработка пероральной лекарственной формы рифампицина // Фармация №5, (2009) с. 37-39

5. Падейская E.H. Дифторхинолон, ломефлоксацин (максаквин): место среди фторхинолонов, возможности и перспективы. // Антибиотики и химиотерапия, 1998; 43 (10): 4-9.

6. Падейская E.H., Яковлев В.П. Антимикробные препараты группы фторхинолонов в клинической практике. М.: ЛОГ ATA, 1998. 352 е.;

7. Падейская E.H., Яковлев В.П. Фторхинолоны. М.: Биоинформ, 1995. 208с.

8. Патент 2314103 С1, Нестерук В. В., Сыров К. К., Опубликовано: 10.01.2008 РАСТВОР МОКСИФЛОКСАЦИНА ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ

9. Патент №2308970; Дата публикации 2007.10.27; Название: АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЕ СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВНУТРИКЛЕТОЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ; Патентообладатель Автономная некоммерческая организация "Институт молекулярной диагностики" (AHO "ИнМоДи") (RU)

10. Под ред. Курганова A.A. Хроматография на благо России. М.: Издательская группа «Граница».- 2007. - 688с.

11. Страчунский Л.С., Белоусов Ю.Б., Козлов С.Н., Практическое руководство по антиинфекционной химиотерапии. Смоленск: МАКМАХ, 2007;

12. Чучалин А.Г., Цой А.Н., Архипов В.В. Диагностика и лечение пневмоний с позиций медицины доказательств. // Consilium-Medicum. 2002. - Том 4. -№12.;

13. Шипуло Е. В, Любимов И. И., Максименко О . О. и др. Получение и исследование наносомальной формы моксифлоксацина на основе полибутилцианоакрилата // Хим.-Фарм. журнал; том 42 №3, С.43-47, 2008

14. Шмелев Е.И., Чуканов В.И. Применение фторхинолонов при туберкулезе.// Consilium-Medicum. 2000. - Том 2. - №10

15. Шубин С.В. Артриты, связанные с урогенитальной инфекцией;Новый медицинский журнал ,-1996.-№1-2,- с.20-23

16. Яковлев В.П. Антибактериальные препараты группы фторхинолонов. // Русский медицинский журнал, Антибактериальные препараты, 1997; 5 (21): 1405-1413

17. Яковлев В.П., Блатун Л.А., Гришина И.А. Рандомизированное клинико-лабораторное исследование эффективности максаквина в сравнении с ципрофлоксацином. Пульмонология 1993; прилож: 92-94.

18. Ahmad Z, Pandey R, Sharma S, Khuller GK. Novel chemotherapy for tuberculosis: chemotherapeutic potential of econazole- and moxifloxacin-loaded PLG nanoparticles. // Int J Antimicrob Agents. 2008 Feb;31(2): 142-6. Epub 2007 Dec 26

19. Ahmed S. Zidan, Omaima A. Formulation of anastrozole nanoparticles as biodegradable anticancer drug carriers // PharmSciTech 2006; 7 (3) Article 61

20. Ain Q, Sharma S, Garg SK, Khuller GK. Role of poly DL-lactide-co-glycolide. in development of a sustained oral delivery system for antitubercular drug(s). // Int J Pharm 2002;239:37-46.

21. Asano et al. Effect of the composition on the hydrolytic degradation rate of poly(lactide)-poly(glycolide) copolymers. // J. Controlled Release 1989, 9, 111

22. Avgoustakis K. Pegylated poly(lactide) and poly(lactide-co-glycolide) nanoparticles: preparation, properties and possible application in drug delivery.// CurrDrug Deliv 2004;1:321-33

23. Bai L, Zhu H, Thrasher JS, Street SC. Synthesis and Electrocatalytic Activity of Photoreduced Platinum Nanoparticles in a Poly(ethylenimine) Matrix. // ACS Appl Mater Interfaces. 2009 Oct 28;1(10):2304-11

24. Branco Monica C., Schneider Joel P. Self-assembling materials for therapeutic delivery// Acta Biomaterialia 5 (2009) 817-831

25. C. Perez, A. Sanchez, D. Putnam, et al. Poly (lactic acid)-poly (ethylene glycol) nanoparticles as new carriers for the delivery of plasmid DNA, // J. Control Release,2001, 75:211-224.

26. Chasin M., Langer R. Biodegradable Polymers as Drug Delivery Systems// Marcel Dekker.- New York.- 1990

27. Chiellini F, Piras AM, Errico C, Chiellini E, Micro/nanostructured polymeric systems for biomedical and pharmaceutical applications. // Nanomedicine, 2008, 3(3):367-393 ;

28. Davis ME, Chen ZG, Shin DM, Nanoparticle therapeutics: an emerging treatment modality for cancer. // Nat Rev Drug Discov., 2008, 7(9):771-782

29. Debbia E.A., Pesce A., Schito E.G. In vitro assessment of the postantibiotic effect of lomefloxacin against gram-positive and gram-negative pathogens.// Amer.J.Med., 1992; 92: suppl. 4A: 455-475

30. Deppermann K., Lode H. Fluoroquinolones: interaction profile during enteral absorption. // Drugs, 1993; 45: suppl.3: 65-72

31. Dillen K, Vandervoort J, Van den Mooter G, Verheyden L, Ludwig A, Factorial design, physicochemical characterisation and activity of ciprofloxacin-PLGA nanoparticles. // Int J Pharm., 2004, 275(1-2):171-187

32. Drusano G.L. et al. Pharmacodynamics of a Fluoroquinolone Antimicrobial

33. Agent in a Neutropenic Rat Model of Pseudomonas Sepsis. // Antimicrob agentschemother. 1993. Vol. 37(3).- P. 483-490145

34. Dutt M, Khuller GK. Chemotherapy of Mycobacterium tuberculosis infections in mice with a combination of isoniazid and rifampicin entrapped in poly (DL-lactide-co-glycolide)microparticles. // J. Antimicrob Chemother 2001;47: 829835

35. Fawaz F, Bonini F,Maugein J, Lagueny AM. Ciprofloxacin-loaded polyisobutylcyanoacrylate nanoparticles: pharmacokinetics and in vitro antimicrobial activity. // Int J Pharm 1998;168:255-259

36. Fuminori Ito, Kimiko Makino Preparation and properties of monodispersed rifampicin-loaded poly(lactide-co-glycolide) microspheres // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces 39 (2004) 17-21

37. Fysicochemische en microbiologische karakterisatie van PLGA nanopartikels bereid met Eudragit® of kationogene stoffen. Unpublished thesis, Katholieke Hogeschool Kempen, Gezondheidszorg en Chemie Geel, Theunis, S. (2004).

38. Haider KK, Mandal B, Debnath M. et al. Chloramphenicol-incorporated poly lactide-co-glycolide (PLGA) nanoparticles: formulation, characterization, technetium-99m labeling and biodistribution studies.

39. Harivardhan Reddy and R. S. R. Murthy PHARMACOKINETICS AND BIODISTRIBUTION STUDIES OF DOXORUBICIN LOADED POLY(BUTYL CYANOACRYLATE) NANOPARTICLES SYNTHESIZED BY TWO DIFFERENT TECHNIQUES; L. // Biomed., 2004, Papers 148(2), 161-166

40. Janoir Panyam, Labhasetwar V. Biodegradable nanoparticles for drug and gene delivery to cells and tissue. //Adv. Drug Deliv. Rev., 2003, 55: 329-347.

41. Jain, R. The manufacturing techniques of various drug loaded biodegradable poly(lactide-co-glycolide) (PLGA) devices. //Biomaterials, 2000, 21 (23), 24752490.

42. Janoir C., Zeller V., Kitzis M.D., Moreau N.J., Gutmann L. High-level fluoroquinolone resistance in Streptococcus pneumoniae requires mutations in parC and gyrA. II Antimicrob Agents Chemother. 1996; 40: 2760-4.;

43. Kante B., Couverur B., Dubois-Krack G. Toxicity of polyalkylcyanoacrylate nanoparticles. I. Free nanoparticles. // J. Pharm. Sci., 1982, 71: 786

44. Kim I.Y., Jung U.W., Kim C.S. et al. Effects of a tetracycline blended polylactic and polyglycolic acid membrane on the healing of one-wall intrabony defects in beagle dogs. // Biomed Mater., 2007, 2(3):S106-S110

45. Kreuter J. Nanoparticles—a historical perspective // International Journal of Pharmaceutics 331 (2007) 1-10

46. Kristin L. Aillon, Yumei Xie, Nashwa El-Gendy, Cory J. Berkland et al. Effects of nanomaterial physicochemical properties on in vivo toxicity // Advanced Drug Delivery Reviews 61 (2009) 457-466

47. Kulkarni R.K., Pani K.C., Neuman C., Leonard F., Polylactic Acid for Surgical Implants. // AMA Arch Surg. 1966;93(5):839-843;

48. Kurkemyer J., Lima J., Adams M. et al. 29th Intersci Conf Antimicrob Agents// Chemotner. Houston, 1989; Abstr. 16.

49. Laura J. V., Paddock M. S. et al. Mechanism of Action of Lomefloxacin // ANTIMICROBIAL AGENTS AND CHEMOTHERAPY, June 1990, p. 1088-1093

50. Lenaerts V., Nagelkerke J.F., van Berkel N.J.C. et al. Toxicity and association of polycyanoacrylate nanoparticles with hepatocytes. // J. Microencapsul., 1984, 1:253

51. Li Y, Kissel T. Synthesis, characteristics and in vitro degradation of star-block copolymers consisting of L-lactide, glycolide, and branched multi-arm polyethylene oxide). Polymer. 1998;39:4421-4427

52. Lim H, Raku T, Tokiwa Y, Hydrolysis of polyesters by serine proteases, // Biotechnology Letters, 2005, 27(7): 459-464;

53. Lim H, Raku T. Formulation pH modulates the interaction of insulin with chitosan nanoparticles. // J. Pharm Sei. 2002;91:1404-11

54. Lin B.Se Pu. Multi-residue determination of 11 quinolones in chicken muscle by high performance liquid chromatography with fluorescence detection // 2009 Mar;27(2) :206-10. Chinese

55. Longstreth J.A. 17th Intern Congr Chemother. Berlin, 1991; Abstr. 381

56. Mandal B, Halder KK, Dey SK, Bhoumik M, Debnath MC, Ghosh LK, Development and physical characterization of chloramphenicol loaded biodegradable nanoparticles for prolonged release. // Pharmazie, 2009, 64(7):445-449;

57. Mandal B., Alexander K.S. Evaluation of the drug-polymer interaction in calcium alginate beads containing diflunisal. // Pharmazie 65(2): 106-9, 2010 Feb.;

58. MARIE-THE'RE'SE LABRO, Interference of Antibacterial Agents with Phagocyte Functions: Immunomodulation or "Immuno-Fairy Tales"? // CLINICAL MICROBIOLOGY REVIEWS, Oct. 2000, p. 615-650

59. Melisande Holzer, Vitali Vogel Physico-chemical characterisation of PLGA nanoparticles after freeze-drying and storage // European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 72 (2009) 428-437

60. Misra R, Acharya S, Dilnawaz F, Sahoo SK, Sustained antibacterial activity of doxycycline-loaded poly(D,L-lactide-co-glycolide) and poly(e-caprolactone) nanoparticles. // Nanomedicine, 2009, 4(5):519-530;

61. Misra R, Acharya S, Dilnawaz F, Sahoo SK, Sustained antibacterial activity of doxycycline-loaded poly(D,L-lactide-co-glycolide) and poly(e-caprolactone) nanoparticles. //Nanomedicine, 2009, 4(5):519-530;

62. Neumann M. Clinical pharmacokinetics of the newer antibacterial 4-quinolons.// Clin. Pharmacokin., 1988; 14: 96-121

63. Owen I. Corrigan, Xue Li Preparation and properties of monodispersed rifampicin-loaded poly(lactide-co-glycolide) microspheres // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces 39 (2004) 17-21

64. Owen I. Corrigan, Xue Li Quantifying drug release from PLGA nanoparticulates // European Journal of Pharmaceutical Sciences 37 (2009) 477485

65. Park TG. Degradation of Poly(D,L-lactic acid) microspheres—effect of molecular-weight. // J. Controll Release 1994;30(2): 161-73

66. Patrick B. O'Donnell, James W. McGinity Preparation of microspheres by the solvent evaporation technique // Advanced Drug Delivery Reviews 28 (1997) 25^42

67. Perrin D.E.; English J. P. Polyglicolide and polylactide. Biocompatibility. Handbook of biodegradable polymers.- CRC Press.- 2007.- chapter 1.- P. 13-15.

68. Piddock L. Characterization of the QRDR of gyrA of Bacteroides fragilis and role in fluoroquinolone resistance. 11 Proceedings of the 38th ICAAC; 1998 Sep 24-27; San Diego, USA. p. 121.

69. Pinto-Alphandary H, Andremont A, Couvreur P. Targeted delivery of antibiotics using liposomes and nanoparticles: research and applications. // Int J Antimicrob Agents. 2000 Jan;13(3):155-68.

70. Quintiliani R., Owens R.Jr., Grant E. Clinical role of fluoroquinolones in patients with respiratory tract infections. // Infect Dis Clin Pract 1999; 8 (Suppl 1):S28-41.;

71. Rawat M, Singh D, Saraf S. Nanocarriers: Promising Vehicle for Bioactive. // Biol Pharm Bull.- 2006.- Vol. 29(9).- P. 1790-1798.

72. Reddy L.H., Murthy R.S. Pharmacokinetics and biodistribution studies of Doxorubicin loaded poly(butyl cyanoacrylate) nanoparticles synthesized by two different techniques. // Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Olomouc Czech Repub. 2004 Dec; 148(2): 161-6.

73. Ricci V. QuinoloneBinding Pocket of DNA Gyrase: Role of GyrB. // Antimicrob. Agents Chemother. 2002, 46, 1805-1815

74. Richer M., LeBel M. Pharmacokinetics of fluoroquinolones in selected populations. -In: Quinolone Antimicrobi? Agentsed // Washing-ton, 1993; 225244.

75. S. Hirosue, B. G. Muller, R. C. Mulligan, et al. Plasmid DNA encapsulation and release from solvent diffusion nanospheres. // J. Control Release, 2001, 70: 231242.

76. Sanchez A, Jose L, Alonso MJ. Development of biodegradable microspheres and nanospheres for the controlled release of cyclosporine // A. Int J fharm.-1993,- Vol. 99.-P. 263-73.

77. Senthilkumar M, Mishra P, Jain NK. Long circulating PEGylated poly(D,L-lactide-co-glycolide) nanoparticulate delivery of Docetaxel to solid tumors. // J Drug Target. 2008 Jun;16(5):424-35.

78. Sharma A, Pandey R, Sharma S, Khuller GK. Chemotherapeutic efficacy of poly (DL-lactide-co-glycolide) nanoparticle encapsulated antitubercular drugs at subtherapeutic dose against experimental tuberculosis. // J. Antimicrob Agents 2004;24:599-604

79. Simone EA, Dziubla TD, Muzykantov VR, Polymeric carriers: role of geometry in drug delivery. //Expert Opin Drug Deliv., 2008, 5(12):1283-1300;

80. Singh U.V., Bisht K.S., Rao S. et al. Reduced toxicity and enhanced antitumor efficacy of plumbagin using poly (lactic-co-glicolic) biodegradable injectable implant.// Indian Journal of Pharmacology.- 1997.- N. 29.- P. 168-172

81. Sokolsky-Papkov M, Agashi K, Olaye A, Shakesheff K, Domb AJ, Polymer carriers for drug delivery in tissue engineering. //Adv Drug Deliv Rev., 2007, 59(4-5):187-206;

82. Soppimath KS, Aminabhavi TM, Kulkarni AR, Rudzinski WE. Biodegradable polymeric nanoparticles as drug delivery devices. // J. Control Release 2001;70:1-20

83. Sorqel F., Kinzig M. Pharmacokinetics of gyrase inhibitors, part 2: renal and hepatic elimination pathways and drug interactions. //Amer.J.Med., 1993; 94: suppl.: 56-69

84. Stevanovic M, Uskokovic D, Poly(lactide-co-glycolide)-based Micro and Nanoparticles for the Controlled Drug Delivery of Vitamins. //Current Nanoscience, 2009, 5(1):1-14;

85. Stone J.W., Andrews J.M., Ashby J.P. Pharmacokinetics and inflammatory fluidpenetration of moxifloxacin following oral or intravenous administration.//

86. Antimicrob Agents Chemother 1988; 32: 1508-1510151

87. Surfactants and Polymers in Drug Delivery Martin Malmsten // Institute for Surface Chemistry and Royal Institute of Technology Stockholm, Sweden

88. Svetlana Gelperina, Kevin Kisich, Michael D. Iseman, and Leonid Heifets The Potential Advantages of Nanoparticle Drug Delivery Systems in Chemotherapy of Tuberculosis // AMERICAN JOURNAL OF RESPIRATORY AND CRITICAL CARE MEDICINE VOL 172, 2005

89. Tailoring of Poly(lactide-co-glycolide) to Control Properties. // Lakeshore Biomaterials, 21 (2000)

90. Tong R, Yala L, Fan TM, Cheng The formulation of aptamer-coated paclitaxel-polylactide nanoconjugates and their targeting to cancer cells. // J. Biomaterials. 2010 Apr;31(l l):3043-53

91. US patent №4528287 // Itoh Y., Kato H «6-Fluoro-l, 4-dihydro-4-oxo-7-substituted piperazinylquinoline-3-carboxylic acids and the method for preparing the same».

92. Van der Auwera, P., and M. Husson. Influence of antibiotics on motility and adherence of human neutrophils studied in vitro. // Drugs Exp. Clin. Res. 1989, XV:211-218

93. Vauthier C, Dubernet C, Fattal E, Pinto-Alphandary H, Couvreur P. Poly(alkylcyanoacrylates) as biodegradable materials for biomedical applications. // Adv. Drug Deliv. Rev. 2003;55:519-548

94. Vauthier C, Dubernet C, Fattal E, Pinto-Alphandary H, Couvreur P. Poly(alkylcyanoacrylates) as biodegradable materials for biomedical applications //Adv. Drug Deliv. Rev. 2003 Apr 25;55(4):519-48

95. Vyas SP, Kannan ME, Jain S, Mishra V, Singh P. Design of liposomal aerosols for improved delivery of rifampicin to alveolar macrophages.// Int. J. Pharm. 2004 Jan 9;269(l):37-49.

96. Wadworth A.N., Goa K.L. Lomefloxacin. A review of its antimicrobial activity, pharmacokinetics properties, and therapeutic use. // Drugs. 1991; 42: 1018-1060.

97. Wang TW, Wu Y, Li MJ Preparation and drug release property of paclitaxel nanoparticles // Zhong Yao Cai. 2009 Sep;32(9): 1447-9

98. Wolfson J.S., Hooper D.C., Pharmacokinetics of fluoroquinolones in selected populations. // J. Quinolone Antimicrob. Agents, Washing-ton, 1993; 225-244.

99. Wolfson John S. and Hooper David C. Fluoroquinolone Antimicrobial Agents// CLINICAL MICROBIOLOGY REVIEWS, Oct. 1989, p. 378-424

100. Yanasarn N., Sloat B.R., Cui Z. Nanoparticles engineered from Iecithin-in-water emulsions as a potential delivery system for docetaxel. // Int J Pharm. 2009 Sep 8;379(1): 174-80

101. YI Jeong, Na H.S., Nah J.W., Lee H.C., Preparation of ciprofloxacin-encapsulated poly(DL-lactide-co-glycolide) microspheres and its antibacterial activity. // J. Pharm Sci. 2009, 98(10):3659-3665;

102. Young-Jeong, Hee-Sam Na, Dong-Hyuk Seo Ciprofloxacin-encapsulated poly(dl-lactide-co-glycolide) nanoparticles and its antibacterial activity // International J. of Pharmaceutics 352 (2008) 317-323

103. Zhang T., Zhou X., Chen Y., Gu W. et al. Fluoroquinolone resistance and mutation patterns in gyrA and parC genes in Neisseria gonorrhoeae isolates from Shanghai // Univ. Sci. Technolog. Med. Sci. 2009 Feb;29(l):29-34

104. Zhigaltsev V., Winters G., Srinivasulu M. Development of a weak-base docetaxel derivative that can be loaded into lipid nanoparticles. // J. Control Release. 2010 Mar 2