Разработка липосомальной формы фитоэкстракта и оценка эффективности при формировании адаптационного потенциала организма тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат биологических наук Большунова, Елена Анатольевна

• Большунова, Елена Анатольевна
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Большунова, Елена Анатольевна

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1Л. Современные представления об адаптационном потенциале

организма

1Л Л. Понятие об адаптационной системе организма

1Л.2. Стресс и адаптация. Биохимические механизмы обеспечения

общего адаптационного синдрома

1Л.З. Холодовой стресс и его физиологическое значение

1.2. Средства, повышающие адаптационный потенциал организма

1.2.1. Природные адаптогены

1.2.2. Адаптогенные свойства бадана толстолистного

1.2.3. Жир байкальской нерпы - перспективный источник для создания адаптогенных средств

1.3. Липосомы как средство адресной доставки лекарственных веществ37 ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Животные

2.2. Материал исследований

2.3. Методы получения и исследования фармакотерапевтической эффективности липосомальной формы экстракта из черных листьев бадана толстолистного

2.3.1. Выделение смеси фосфолипидов из печени нерпы

2.3.2. Приготовление липосомальных структур

2.3.3. Исследование мембраностабилизирующей активности средств

2.3.4. Моделирование холодового стресса

2.3.5. Оценка состояния иммунной системы организма животных

2.3.6. Определение активности монооксигеназной системы печени животных

2.3.7. Оценка физической выносливости лабораторных животных

2.3.8. Определение нейротропной активности исследуемых средств...53 2.3.8.1. Оценка состояния нервной системы организма животных в

тесте «Открытое поле»

2.3.8.2. Оценка эмоционального состояния крыс в тесте «Т-образный

лабиринт»

2.3.9. Оценка антиоксидантной системы организма животных при

введении изучаемых средств

2.4. Статистический анализ результатов

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Разработка способа получения липосомальных структур с включением экстракта из черных листьев бадана толстолистного

3.1.1. Приготовление экстракта сухого из черных листьев бадана толстолистного

3.1.2. Получение липосомальных структур с включением экстракта из черных листьев бадана толстолистного

3.1.3. Мембраностабилизирующая активность исследуемого средства в процессе хранения

3.1.4. Определение степени окисления липидов в липосомальных структурах с включением экстракта из черных листьев бадана толстолистного в процессе хранения

3.1.5. Оценка микробиологической чистоты липосомальной формы фитоэкстракта в процессе хранения

3.2. Исследование эффективности липосомальной формы экстракта из черных листьев бадана толстолистного в экспериментах на животных,

адаптирующихся к холоду

3.2.1. Исследование влияния экстракта из черных листьев бадана толстолистного, включенного в липосомальные структуры на иммунный статус животных при холодовом стрессе

3.2.1.1. Исследование относительной массы и клеточности иммунных органов при введении исследуемых средств на фоне

холодового стресса

3.2.1.2. Анализ гематологических показателей экспериментальных животных в условиях холодового воздействия и введения липосомальной формы фитоэкстракта

3.2.2. Влияние липосомальной формы фитоэкстракта на активность ферментов микросомальной монооксигеназной системы (системы цитохрома Р-450) в условиях холодового стресса

3.2.3. Исследование физической выносливости лабораторных животных в условиях адаптации к холоду и при введении им липосомальной формы экстракта из черных листьев бадана толстолистного

3.2.4. Исследование нейротропной активности фитоэкстракта при введении животным на фоне холодового стресса

3.2.4.1. Исследование влияния исследуемого средства в тесте

«Открытое поле»

3.2.4.1. Влияние липосомальной формы экстракта из черных листьев бадана толстолистного на психомоторную активность в эксперименте с крысами, адаптирующимися к холоду, в тесте «Т-

образный лабиринт»

3.3. Исследование антиоксидантной активности липосомальной формы экстракта из черных листьев бадана толстолистного при воздействии холода

3.3.1. Исследование активности каталазы и СОД в крови животных при введении им испытуемого средства на фоне холодового стресса

3.3.2. Исследование глутатионпероксидазы/глутатионредуктазы в сыворотке крови экспериментальных крыс при введении липосомальной формы экстракта из черных листьев бадана толстолистного при холодовом воздействии

3.3.3. Влияние липосомальной формы экстракта из черных листьев бадана толстолистного на содержание восстановленного и окисленного

глутатиона в сыворотке крови крыс при адаптации к холоду

3.3.4. Уровень малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови и печени животных при введении липосомальной формы экстракта из

черных листьев бадана толстолистного и воздействии холодом

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ

Список используемых в тексте сокращений

АДГ - алкилдиацилглицериды АОС - антиоксидантная система АП - адаптационный потенциал АФК - активные формы кислорода БАВ - биологически активные вещества ГР - глутатионредуктаза ГП - глутатионпероксидаза

КМАФАнМ - количество мезофильных аэробных и факультативно-

анаэробных микробов

ЛВ - лекарственные вещества

ЛС - липосомы

МДА - малоновый диальдегид

ОРВИ - Острое респираторное вирусное заболевание

ПНЖК - полиненасыщенные жирные кислоты

ПОЛ - перекисное окисление липидов

СОД - супероксиддисмутаза

Тз - трийодтиронин

Тд-тироксин

ЦНС - центральная нервная система

ЭБТ - экстракт из черных листьев бадана толстолистного

НЬ - гемоглобин

08Н - восстановленный глутатион 08- окисленный глутатион

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка липосомальной формы фитоэкстракта и оценка эффективности при формировании адаптационного потенциала организма»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Снижение адаптационных возможностей и функциональных резервов - реальность современного состояния организма человека, оказавшегося на рубеже XX-XXI веков. Экологический прессинг, чрезмерно усложнившийся социум, психоэмоциональные перегрузки, по данным ВОЗ последних лет, занимают лидирующие позиции в перечне факторов риска состояния здоровья [Резенькова О.В., 2003; Маслов Л.Н., Гузарова Н.В., 2007].

С древнейших времен человечество неустанно занимается целенаправленным поиском природных адаптогенов, способных усиливать собственный биологический потенциал организма [Пчеленко Л. Д., Метелкина Л.Г., Володина С.О., 2002; Резенькова О.В., 2003]. Природные адаптогены - биологически активные вещества (БАВ), которые в отличие от синтетических препаратов обладают относительно небольшим анаболическим действием и при этом в значительной степени способствуют повышению физической и умственной работоспособности, улучшению психомоторной активности, половых функций, гуморального иммунитета [Шабров A.B. с соавт., 2003]. Следует отметить, что проблема парафармацевтической коррекции резистентности здорового человека к холодовому стрессу — одна из наименее изученных. В связи с этим, создание новых корректоров адаптационного процесса на основе природных средств является особо актуальным на сегодняшний день [Смагулова Т.Б., Тэн Н.В., Николаев С.М., 2008; Сейфулла Р.Д., Анкудинова И.А., Азизов А.П., 1997].

Известно, что химический состав дикорастущих растений представлен широким набором различных химических соединений, многие из которых обладают высокой биологической активностью. Одним из широко распространенных на территории Бурятии и часто используемых в тибетской медицине в качестве адаптогенного средства лекарственных

растений является бадан толстолистный, в частности, с этой целью использовались его черные перезимовавшие листья. Сотрудниками Отдела биологически активных веществ Института общей и экспериментальной биологии СО РАН был разработан и получен экстракт сухой из черных листьев бадана толстолистного, представляющий собой сумму экстрактивных веществ из указанного вида растительного сырья [Патент РФ 2076727].

В последнее время все большую актуальность приобретают растительные препараты, включаемые в липосомальные структуры. Так, Глинкиной А.Е. (2009) были разработаны липосомальные формы с ситостерином гороха. Куркин В. А. с соавт. (2009) исследовал взаимодействие флаванонолов плодов расторопши пятнистой с бислоями липосом. Между тем, таких исследований очень мало по сравнению с разработкой липосомальных форм лекарственных синтетических препаратов, это и определило основное направление нашей работы.

Известно, что наноструктуры на основе липосомальных везикул являются нетоксичными, высокоэффективными переносчиками лекарственных веществ [Назаров Г.В., Галан С.Е., Назарова Е.В., 2009]. Жир байкальской нерпы богат ПНЖК и может быть использован при получении липосомальных структур. Расширение возможных путей использования природных адаптогенов и повышение их фармакологической эффективности является весьма актуальным на сегодняшний день.

Цель настоящей работы - разработка способа получения липосомальной формы экстракта из черных листьев бадана толстолистного, содержащего полиненасыщенные жирные кислоты, и оценка его эффективности на модели холодового стресса.

Для достижения указанной цели были сформулированы следующие задачи:

-разработать технологическую схему получения экстракта из черных листьев бадана толстолистного в липосомальной форме, содержащей ПНЖК;

-оценить качественные характеристики и

мембраностабилизирующую активность при хранении включенного в липосомы экстракта из черных листьев бадана толстолистного;

-исследовать влияние липосомальной формы исследуемого фитоэкстракта на показатели иммунного статуса животных при холодовом воздействии;

-оценить активность ферментов монооксигеназной системы печени крыс, подвергавшихся холодовому стрессу, при введении им экстракта из черных листьев бадана толстолистного, включенного в липосомальные структуры;

-изучить нейропротекторную активность липосомальной формы фитоэкстракта у экспериментальных животных на фоне холодового стресса;

-оценить эффективность действия включенного в липосомы экстракта из черных листьев бадана толстолистного на физическую работоспособность лабораторных животных в условиях холодового стресса;

-исследовать молекулярно-клеточный механизм адаптогенного действия исследуемого средства.

Научная новизна. Разработана технологическая схема получения липосомальной формы экстракта из черных листьев бадана толстолистного. Впервые установлено, что включенный в липосомы экстракт из черных листьев бадана толстолистного обладает выраженным иммуномодулирующим действием; индуцирует активность микросомальных ферментов, ответственных за детоксикацию ксенобиотиков; обладает выраженной нейропротекторной активностью и повышает физическую выносливость при воздействии холодового стресса.

При введении исследуемого средства животным на фоне холодового воздействия снижается интенсивность свободнорадикального окисления липидов, восстанавливается функциональная активность эндогенной антиоксидантной системы организма и индуцируются восстановительные процессы в биологических мембранах, которые способствуют повышению защитно-компенсаторных реакций организма. Показано, что при включении экстракта из черных листьев бадана толстолистного в липосомальные структуры, содержащие ПНЖК, усиливается его биологическая эффективность.

Практическая ценность работы. На липосомальную форму экстракта из черных листьев бадана толстолистного разработаны ТУ 9214083-0206947311 (Приложение 1). Разработанная форма фитоэкстракта может быть использована как биологически активная добавка к пище в качестве профилактического средства, снижающего выраженность стресс-синдрома и повышающего устойчивость организма к воздействию холода.

Теоретические и прикладные результаты работы используются в учебном процессе при проведении занятий по биологической и пищевой химии, при подготовке студентов специальности «Биотехнология», бакалавров и магистров направления «Технология продуктов питания».

Основные положения, выносимые на защиту:

- способ получения липосомальной формы фитоэкстракта;

- экстракт сухой из черных листьев бадана толстолистного, включенный в липосомальные структуры, оказывает иммуномодулирующее, нейропротекторное, адаптогенное действие на фоне холодового стресса;

- в основе молекулярно-клеточного механизма действия липосомальной формы экстракта из черных листьев бадана толстолистного лежит ингибирование свободнорадикального окисления липидов, восстановление функций эндогенной антиоксидантной системы и стабилизация биологических мембран;

- включение фитоэкстракта в липосомальные структуры, содержащие ПНЖК, способствует усилению его биологической эффективности.

Апробация материалов диссертации. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на:

- ежегодных научных конференциях преподавателей, научных работников, аспирантов Восточно-Сибирского государственного технологического университета на секции «Химия биологически активных веществ» (Улан-Удэ, 2008, 2009, 2010);

- международной научно-практической конференции «Пищевая промышленность: состояние, проблемы, перспективы» (Оренбург, 2009);

- III Международной научно-технической конференции молодых ученых: «Актуальные проблемы технологии живых систем» (Владивосток, 2009);

- международной школе-семинаре «Current Problems of Food Engineering and Biotechnology» (Ulan-Ude, 2010).

Заключение диссертации по теме «Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)», Большунова, Елена Анатольевна

выводы

1. Разработана технологическая схема получения липосомальной формы экстракта из черных листьев бадана толстолистного. В 1 мл полученного средства содержалось 5 мг жира и 120 мг экстракта из черных листьев бадана толстолистного.

2. Установлена выраженная мембраностабилизируюгцая активность липосомальной формы фитоэкстракта. Показатели безопасности соответствовали требованиям, предъявляемым СанПиН. Рекомендуемый срок хранения липосомальной формы ЭБТ составил 5 месяцев.

3. Липосомальная форма ЭБТ:

- оказывала иммуномодулирующее действие, введение которого на фоне холодового стресса вызывало увеличение популяции Т-хелперов и снижение популяции Т-супрессоров иммунного ответа;

- восстанавливала активность ферментов монооксигеназной системы, что проявлялось в уменьшении мединалового сна у животных в 2 раза по сравнению с таковыми у животных, подвергнувшихся воздействию холодового стресса;

- активировала мотивационные характеристики поведения, повышала уровень ориентировочно-исследовательского поведения при одновременном снижении уровня тревоги, страха и неуверенности животных на фоне холодового воздействия;

- повышала устойчивость животных к физическому утомлению, при этом продолжительность плавания животных достоверно увеличивалась на 32% по сравнению с таковыми в группе животных, находившихся в состоянии холодового стресса.

4. Молекулярно-клеточным механизмом действия комплексного липосомального средства явилась его способность принимать участие в базисных реакциях стабилизации биологических мембран, блокируя при этом процессы перекисного окисления, снижая уровень гидроксильных радикалов и восстанавливая активность эндогенной антиоксидантной защиты клетки.

5. Установлено, что включение экстракта из черных листьев бадана толстолистного в липосомальные структуры, полученные с добавлением жира нерпы, способствовало усилению его биологического эффекта.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Большунова, Елена Анатольевна, 2012 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Аваканян О.М., Ширинян З.А. Исследование физической деятельности лабораторных животных в антиортостатическом положении // Новые данные об элеутерококке и других адаптогенах. -Владивосток, 1981. - С. 39-45.

2. Азизов А.П., Сейфулла Р.Д., Чубарова A.B. Влияние настойки левзеи и леветона на гуморальный иммунитет спортсменов // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 1997. - №6. - С. 47-48.

3. Александровский Ю.А. К вопросу о механизмах развития невротических расстройств (Идеи И.П. Павлова и современность) // VI Российский национальный конгресс «Человек и лекарство», 19-23 апреля 1999г. - 1999. - 32с.

4. Александровский Ю.А. Психофармакотерапия пограничных психических расстройств. - М., 2005. - 250с.

5. Алексеева Р.И., Шарафетдинов Х.Х., Плотникова O.A., Зыкина В.В. Роль полиненасыщенных жирных кислот семейства со-3 в профилактике и лечении сахарного диабета 2-го типа // Российский медицинский журнал. - 2009. - №5. - С. 42-46.

6. Алешина В.Н. Актуальные вопросы современной эндокринологии; Нейробиологические аспекты. - М.: Наука, 1981. - 240 с.

7. Аржакова Л.И. Влияние адаптогенов на функциональную активность клеток иммунной и кроветворной систем при холодовом воздействии: Автореф. дисс. ... канд. мед. наук. - Новосибирск, 1996. - 18 с.

8. Атлас ареалов и ресурсов лекарственных растений СССР. - М.: Медицина, 1976. - 339 с.

9. Бабичев В.Н. Успехи физиологических наук. - 1985. - Т.16. - №3. - С. 52-73.

10. Бабий H.B. Разработка и оценка потребительских свойств фитонапитков на основе природных адаптогенов. Дисс ... канд. т. н. -Кемерово, 2009.- 148 с.

11. Базарон Э.Г., Асеева ТА. Вайдурья-онбо - трактат индо-тибетской медицины. -Новосибирск: Наука, Сиб.отд.,1984.- С.89

12. Баллюзек Ф.В., Куркаев A.C., Сенте JI. Нанотехнологии для медицины. М.: ООО «Сезам-Принт», 2008. - 103 с.

13. Банникова Л.П. Адаптационные резервы организма у воспитанников дошкольных образовательных учреждений с учетом групп здоровья // Известия Челябинского научного центра. — 2005. - вып. 4(30). - С. 212215

14. Барсуков Л.И. Липосомы // Соросовский образовательный журнал. -1998.-№10.-С. 2-9

15. Баторова С.М., Ракшаин К.В., Богданова Т.В., Шантанова Л.Н. Фармакологическая оценка отвара корней Echinops latifolia Taush. //Растительные ресурсы.-1980. - Т. 16. - вып. 1. - С.134-136.

16. Безруков Д.А., Королева А.И., Каплун А.П., Ланцова A.B., Орлова О.Л., Обортова H.A. Оптимизация метода получения стерически стабилизированных термочувствительных липосом с активной загрузкой доксорубицином // Российский биотерапевтический журнал. - 2006. - № 4. - С. 79-84.

17. Бодоев A.B. Влияние экстракта черных листьев бадана толстолистного и его лекарственной формы на течение раневых повреждений кожи. Дисс. ...к.м. н. - Улан-Удэ, 1999. - 104с.

18. Бородин, Е.А. Антиокислительный эффект фосфолипидов // Нейрофармакология на рубеже двух тысячелетий. — Санкт-Петербург. -1992. - Т. 1. - С. 68.

19. Брехман И.И. Элеутерококк. - Л., Наука, 1968.

20. Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон Д.П. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения. - М., 1991. - 268 с.

21. Бурлакова Е.Б. Изучение аддитивного антиокислительного действия суммы природных антиоксидантов липидов// Вопросы медицинской химии. - 1990. - Т.36. - №4. - С. 72-74.

22. Бутенко Г.М., Терешина О.П. Стресс и иммунитет // Международный медицинский журнал. — 2001. — №3. — С. 91-93.

23. Бушмакина И.М., Дроздова Н.И., Голенко Н.С., Мартынова М.А. Получение липосомальной формы бутаминофена методом механического диспергирования» // Химико-фармацевтический журнал. - 2009. - Том 43. - №4. - С. 41 - 43.

24. Василенко К.П., Бурова Е.Б., Антонов В.Г., Никольский H.H. Окисленный глутатион вызывает активацию рецептора эпидермального фактора роста и МАР-КИНАЗ ERK 1,2 //Цитология. -2006. - Том 48. - №6. - С.500-507.

25. Васьковский В.В. Липиды // Соросовский Образовательный Журнал. -1997.-№3.-С. 32-37.

26. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты // Вестник РАМН. - 1998. - №7. - С.89-92.

27. Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б., Уколова М.А. Адаптационные реакции и резистентность организма. - Ростов-на-Дону, 1990. - 223 с.

28. Геннис Р. Биомембраны. Молекулярная структура и функции, М. Мир, 1997.-624с.

29. Гиляров М.Ю со -3- полиненасыщенные жирные кислоты в лечении нарушений ритма сердца // Медицинский вестник - 2010г. -№6 (511) -С. 12.

30. Глинкина А.Е. Разработка липосомальных форм с ситостерином гороха с целью применения в медицинской практике. Автореф. дис. канд. фарм. наук.- Москва, 2009.-22с.

31. Грегориадис Г., Аллисон А. Липосомы в биологических системах. -М., Медицина, 1983. - 576с.

32. Громовая В.Ф., Шаповал Г.С., Миронюк И.Е., Нестюк Н.В. Антиоксидантные свойства лекарственных растений // Химико-фармацевтический журнал. - 2008. - Том 42. -№1. - С. 26-29.

33. Гублер И.В., Генкин A.A. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях. - JL, 1973. - 53 с.

34. Турин В.Н. Симпатическая нервная система и регуляция температуры тела у эндотермных животных // Успехи физиологических наук. -1989. - Т.20. - №2. - С. 3-25.

35. Дар дымов И.В. Женьшень, элеутерококк (К механизму биологического действия). - М., 1976. - 184 с.

36. Доровских, В.А. Антиоксиданты в профилактике и коррекции холодового стресса. - Благовещенск, 2001. 59 с.

37. Дубинина Е.Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состояниях окислительного стресса // Вопр. мед. химии. -2001. - Т. 47. - №6. - С. 561-581.

38. Ефременко В.И. Липосомы (получение, свойства, аспекты применения в биологии и медицине). - Ставрополь, 1999. - 236 с.

39. Зайцев С.Ю. Супрамолекулярные наноразмерные системы на границе раздела фаз: Концепции и перспективы для бионанотехнологий. - М.: ЛЕНАНД, 2010.-208 с.

40. Иммунологические методы / Под ред. Г. Фримеля: Пер. с нем. - М.: Медицина, 1987. - 476 с.

41. Иристе A.A. Иммунофармакологические и биохимические свойства биотехнологических препаратов женьшеня: Автореф. дисс. ... канд. мед. наук. - Минск, 1992. - 22 с.

42. Кабирова И.Р. Характеристика и промышленное использование печени байкальской нерпы на пищевые цели: дис ... канд. тех. наук. -Улан-Удэ, 2005- 118 с.

43. Казначеев, В.П. Современные аспекты адаптации. - Новосибирск, 1980- 191с.

44. Калу ев A.B. Стресс, тревожность и поведение (актуальные проблемы моделирования тревожного поведения у животных). - Киев: CSF, 1998. - 98 с.

45. Каплун А.П., Шон Д., Краснопольский Ю.М., Швец В.И. Липосомы и другие наночастицы как средство доставки лекарственных веществ // Вопросы медицинской химии. - 1999. - Т .45. - Вып. 1. - С. 5-15.

46. Кейтс М. Техника липидологии. - М.: «Мир», 1975. - 236 с.

47. Клебанов Г.И., Бабенкова И.В., Теселкин Ю.О. Оценка антиокислительных свойств плазмы крови с применением желточных липопротеидов // Лабораторное дело. - 1988. - № 3 - С. 59-62.

48. Ковалев В.В. Применение эпиталона и кортексина в комплексной терапии острой общей холодовой травмы. Дисс. ...канд. мед. наук. -Улан-Удэ, 2009. - 150с.

49. Ковалев И.Е, Данилова Н.П., Андронати С.А., Жеребин Ю.Л. Влияние эномеланина на гемолиз эритроцитов, вызываемый свободнорадикальными реакциями и др. факторами // Фармакология и токсикология. - 1986. - № 4. - С.89-91.

50. Колисниченко Л.С. Глутатионтрансферазы // Успехи современной биологии. - 1999. -Т.107. -№3. -С.179-191.

51. Копейкин Н.Г., Замошкина H.A. Бадан, его бактерицидное свойство и лечебное действие при желудочно-кишечных заболеваниях сельскохозяйственных животных. //Ветеринария. - 1968. - № 10.- С.8.

52. Корнева Е.А. О взаимодействии нервной и иммунной систем // Иммунофизиология. - 1993. - С. 7-10.

53. Королюк М.А. Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова, В.Е. Токарев // Лаб. дело. -1988,-№6.-С. 16-19

54. Коршунова Н.В. Токсиколого-гигиеническое обоснование использования продуктов переработки пантов для повышения

резистентности организма к холоду: Дисс. ... д-ра. мед. наук. - Санкт-Петербург, 2001.-233 с.

55. Краснопольский Ю.М., Степанов А.Е. , Швец В.И. Некоторые аспекты технологии получения липосомальных форм лекарственных препаратов // Химико-фармацевтический журнал. - 1999. - № 10. - С. 20-23.

56. Кудаева О.Т., Колесникова О.П., Оськина И.Н., Козлов В.А. Влияние длительной физической тренировки на иммунные реакции IN VITRO и IN VIVO у экспериментальных животных // Иммунология. - 2007. -№2.-С. 102- 105.

57. Куркин В.А., Рыжов В.М., Бирюкова О.В., Мельникова Н.Б., Селехов В.В. Взаимодействие флаванонолов плодов расторопши пятнистой с ленгмюровскими монослоями лецитина и бислоями липосом // Химико-фармацевтический журнал. - 2009. - Том 43. - №2. - С. 33 -42.

58. Ламажапова Г.П. Создание и характеристика липосомальных структур из жира байкальской нерпы. Дисс. ...канд. биол. наук. - Улан-Удэ,

2001.-132с.

59. Лебедев К.А. Иммунология в клинической практике/ 1-й том издания медицинской электронной библиотеки, М., электронная медицинская книга, 1996.

60. Ловкова М.Я., Рабинович A.M., Пономарева С.М. и др. Почему растения лечат. - М.: Наука, 1990.- 256 с.

61. Лубсандоржиева П.Б. Антиоксидантная активность экстрактов из Bergenia Crassifolia(L.) Fritsch. и Vaccinium vitis-idaeae L. IN У1ТБЮ//Химия растительного сырья. - 2006. - №4. - С. 45-48.

62. Лубсандоржиева П.Б. Серия. Лекарственные растения тибетской медицины. Бадан толстолистный. - Улан-Удэ: Изд-во БНЦ СО РАН,

2002, 90с.

63. Лубсандоржиева П.Б., Цыренжапова О.Д., Даргаева Т.Д., Патудин A.B. Некоторые фармакологические свойства сухого экстракта из черных (перезимовавших) листьев Bergenia Crassifolia(L.) Fritsch// Растит. Ресурсы. - 1994. - Т.ЗО. - Вып. 4. -С. 63-66.

64. Лубсандоржиева П.Б., Цыренжапова О.Д., Николаев С.М., Николаева Г.Г. Способ получения суммы экстрактивных веществ, обладающих адаптогенной активностью: Патент РФ 2076727. Заявка № 93028222/ 14. Заявл. 02.06.93. Опубл. 10.04.97. Бюл.№10.

65. Лукьянова Л.Д. Клеточные механизмы резистентности организма к гипоксии // Гипоксия. - М. - 1997. - С. 97.

66. Макаренко Ю.А. Адаптивные возможности организма как показатель уровня здоровья // Педиатрия. - 1989. - № 3. - С. 85—87.

67. Мамыкова О.И. Иммунорегуляторная активность стимулятора неспецифической резистентности риботана и его ингибирующее действие на систему цитохрома Р-450 печени мышей, инвазированных A. tetraptera// Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. - 2009. - №5. - С. 51 - 54.

68. Марголис Л.Б., Бергельсон Л.Д. Липосомы и их взаимодействие с клетками - М.: Наука, 1986. -240с.

69. Маслова М.Н. Молекулярные механизмы стресса // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. - 2005. - Том 91. - №11. -С. 132- 138.

70. Маслов Л.Н., Гузарова Н.В. Кардиопротекторные и антиаритмические свойства препаратов LEUZEA CARTHAMOIDES, ARALIA MANDSHURICA, ELEUTHEROCOCCUS SENTICOSUS // Экспериментальная и клиническая фармакология - 2007. - Том 70. -№6.-С. 48-54.

71. Машковский М.Д. Лекарственные средства- М., 1988.- Т. 1.- С. 203.

72. Мирошкина Ю.И., Макарова Н.В. Антиоксидантные свойства различных сортов вишни. // Материалы Международной научно-

практической конференции «Пищевая промышленность: состояние, проблемы, перспективы»./Оренбург: ИПК ГОУ ОГУ, 2009 - С. 354 -356.

73. Митева Л. П.-Е, Иванов С. В., Алексиева В. С. Изменение пула глутатиона и некоторых ферментов его метаболизма в листьях и корнях растений гороха, обработанных гербицидом глифосатом// Физиология растений. - 2010 г. -Т.57. -№ 1. - С. 139-145.

74. Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник. - М., 1987.-364 с.

75. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика. - М., 1981. - 278 с.

76. Методические рекомендации по экспериментальному изучению иммунотоксических свойств фармакологических средств. -М., 1992. -39с.

77. Назаров Г.В., Галан С.Е., Назарова Е.В.и др. Наноразмерные формы лекарственных соединений // Химико-фармацевтический журнал. -2009. - Том 43. - №3. - С. 41-48.

78. Новгородцева Т.П., Касьянов С.П., Виткина Т.И., Янькова В.И, Гвозденко Т.А. Разработка липидных препаратов, содержащих полиненасыщенные жирные кислоты, из печени камчатского краба // Вопросы биологической медицинской и фармацевтической химии. -2006. -№1,- С. 47-52.

79. Нуржанова Т.М. Ремоделирование сердца у больных артериальной гипертензией и экспериментальных животных при остром стрессе и возможности медикаментозной коррекции (клинико-экспериментальное исследование). Автореф. дисс. ... канд. мед. наук.-Великий Новгород, 2010.-26с

80. Павлов И.А. Разработка и стандартизация липосом с 4-тиоурендоиминометилпиридиний перхлоратом, полученных на основе

природных триацилглицеринов: Дисс... канд.фарм.наук. Улан-Удэ, 2010.-124 с.

81. Парьева К.В. Разработка и стандартизация адаптогенного средства растительного происхождения: Дисс ... канд. фарм. наук. Улан-Удэ, 2005.- 176 с.

82. Пастухов В.Д. Нерпа Байкала. - Новосиб.: Наука, 1993. - 271 с.

83. Патент РФ на изобретение №2153328. Способ получения липосом. // Бюл. №21. - 2000

84. Пестерева О.В. Теоретическое обоснование и практические рекомендации использования жира байкальской нерпы на пищевые цели. Дисс. ... канд. тех. наук., Улан-Удэ, 1995. -97 с.

85. Пивоварова А.С, Лесновская Е.Е. Исследование взаимодействия комбинаций препаратов лекарственных растений тонизирующего действия // Растительные ресурсы. - 2003. - Т. 39. - №1. -С. 94-101.

86. Поздняков О.Г. Возрастные и тканеспецифические особенности свободнорадикальных процессов и антиоксидантной системы у крыс на раннем этапе холодового воздействия: Дисс. ... канд. биол. наук., 2005, 139с

87. «Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных». // Приложение к приказу МЗ СССР №755 от 12.08.77.

88. Приказ МЗ СССР №1179 от 10.10.83 г.

89. Прокопьева Н. В., Гуляева Л.Ф., Полякова Н. Е. Изменение микросомальной монооксигеназной системы печени крыс при индукции фенобарбиталом на фоне острого панкреатита// Вопросы медицинской химии. - 1999. -№4.

90. Пупочная В.И. Определение гемоглобина в крови // «Новости Вектор-бест». - 2003. - №2 (28). - С. 12-14.

91. Пчеленко Л.Д., Метелкина Л.Г., Володина С.О. Адаптогенный эффект экдистероидсодержащей фракции SERRATULA CORONATA L. //Химия растительного сырья - 2002. - №1. - С. 69- 80.

92. Раднаева Л.Д., Пестерева О.В., Чиркина Т.Ф., Аверина Е.С., Бодоев Н.В. Исследование химического состава жира байкальской нерпы // Химия в интересах устойчивого развития. - 1999. -№7. - С. 713 — 717.

93. Резенькова О.В. Изучение влияния экстракта Солодки голой на процессы адаптации организма: Дисс. ... канд. биол. наук.-Ставрополь, 2003.-175с

94. Рупасова Ж.А., Кухарева Л.В., Игнатенко В.А. Особенности накоплени фенольных соединений в бадане толстолистном при интродукции в Беларуси // Физиолого-биохимические аспекты изучения лекарственных растений. - Новосибирск. - 1998. - С. 84.

95. Русин В.Я. Влияние мышечной тренировки, адаптации к холоду и введений дибазола на неспецифическую сопротивляемость организма. Автореф. докт.. - Л., 1969. - 22 с.

96. Саков И.А., Новиков B.C. Неспецифические механизмы адаптации. -Л., Наука, 1984.- 146 с.

97. Саратиков А.С, Краснов Е.А. Родиола розовая - ценное лекарственное растение. - Томск, 1987. - 125 с.

98. Седунова Е. Г. Влияние экстракта бадана толстолистного на состояние иммунной системы организма в эксперименте. Автореф. дис. канд. мед. наук.- Улан-Удэ, 2000.-26с

99. Сейфулла Р.Д., Анкудинова И.А. , Азизов А.П. Адаптогены и физическая работоспособность. - М., 1997.- 267с.

100. Селина O.E., Чинарев A.A., Бартковиак А., Бовин Н.В., Марквичева Е.А. Альгинат-хитозановые микросферы для специфической сорбции антител // Биоорганическая химия. - 2008. - Т. 34. - № 4. - С. 522-529.

101. Сердитых В.В. Бадан и его промышленное значение.- Верхнеудинск, 1927,- 15 с.

102. Скоромец A.A. Нейропротекция при острой и хронической недостаточности мозгового кровообращения: сб. науч. ст. - СПб., 2007. - 200с.

103. Смагулова Т.Б., Тэн Н.В., Николаев С.М. Адаптогенное действие комплексного растительного средства «Фитотон» в условиях эксперимента // Сибирский медицинский журнал. - 2008. - №4 - С. 80 -82.

104. Соколов И.К., Каплан Е.Я. Системный принцип - теоретическая основа для создания высокоэффективных рецептур адаптогенов // Новые данные об элеутерококке и других адаптогенах. - Владивосток, 1981. - С. 166-171.

105. Сорокоумова Г.М., Селищева A.A., Каплун А.П. Фосфолипиды. Методы их выделения, обнаружения и изучения физико-химических свойств липидных дисперсий в воде. - М. : МИТХТ, 2000, 100с.

106. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии. Под ред. В.Н. Ореховича. — М.: Медицина, 1977. — С. 66-68.

107. Стрелкова М.А., Гойло Е.Э., Грачева Ю.А., Комов В.П. Иммуностимуляторы из культивируемых клеток женьшеня // III Российский национальный конгресс «Человек и лекарство»: Тез.докл. -М., 1996.-С. 50.

108. Таран Т.В. Биотехнология получения лекарственных и иммуногенных липосомальных композиций, используемых в лечении экспериментальных особо опасных инфекций и получении сырья для производства медицинских иммунобиологических препаратов: Дисс. докт. м. н. - Ставрополь, 2004.

109. Телятьев В. В. Целебные клады., - Иркутск, 1991. - 400с.

110. Торчилин В.П., Смирнов В.Н., Чазов Е.И. Проблемы и перспективы использования липосом для направленного транспорта лекарств (обзор) // Вопросы медицинской химии. - 1982. - Т. 28. - № 1. - С. 312.

111. Тыхеева H.A. Иммуномодулирующее действие липосомальных средств, полученных на основе жира байкальской нерпы. Дисс... к.м.н. Улан-Удэ, 1999.-112 с.

112. Тыхеева H.A., Ламажапова Т.П., Жамсаранова С.Д. Изучение иммунокоррегирующих свойств липосомальных средств, полученных на основе жира нерпы // Вестник ВСГТУ.-№3.-Улан-Удэ.-2001 .-С.51-58.

113. Убашеев И.О. Природные лекарственные средства при повреждениях органов и тканей: Дисс. докт.биол. наук. - Улан-Удэ, 1997.

114. Федосеева Л.М., Кудрикова Л.Е., Турчанинов A.A., Сивова Ю.С. Изучение флавоноидов сборов на основе листьев бадана толстолистного // Химия растительного сырья. - 2006, №4. С. 49-54.

115. Хайдав Ц., Алтанчимэг Б., Варламова Т.С. Лекарственные растения в монгольской медицине. - Улан-Батор.-1985.-390 с.

116. Хамнаева A.B., Хамаганова Ю.Е., Пластинина З.А. Использование листьев бадана толстолистного в качестве пищевой добавки // Биологически активные добавки и здоровое питание. - 2001.Улан-Удэ. -С. 117-118.

117. Чевари С. Роль супероксиддисмутазы в окислительных процессах клетки и метод определения ее в биологических материалах / С. Чевари, И. Чаба, Й. Секкей // Лаб. Дело. - 1985. - №11. - С. 678-681.

118. Чиркина Т.Ф., Пестерева О.В. Выбор антиоксидантов жира нерпы // Сборник статей. Серии: Биотехнология пищевых производств. Вып.1. Химия. /ВСГТУ.- Улан-Удэ, 1994.- С. 115-119.

119. Шабанов П.Д. Концепция адаптогенов: истоки, современное состояние, перспективы: Акт. речь на 2-х Лазаревских чтениях. -СПб., 2002.-72с.

120. Шабров A.B., Дадали В.А., Макаров В.Г. Биохимические основы действия микрокомпонентов пищи. - М.: Аввалон, 2003. -184с.

121. Швец В.И. Перспективные направления создания эффективных лекарственных препаратов методами нанобиотехнологии // Международный форум по нанотехнологиям Rusnanotech-08: сб. тез. докл. -М., 2008.-С. 195.

122. Швец В.И. Липосомы и их взаимодействие с клетками и тканями. 1981, М. : Наука.-С. 44-51

123. Швецова Н.Е., Бойков Т.Г. Ресурсы дикорастущих полезных растений Западного Забайкалья // Растит, ресурсы. - 1997. - Т.ЗЗ. - Вып.4. -С.45-54

124. Шоуа И.Б. Разработка липосомальных лекарственных форм для увеличения доставки химиопрепаратов и возможности преодоления множественной лекарственной резистентности: Дисс... канд.биол.наук. Москва, 2005.-109 с.

125. Янькова В.И., Гвозденко Т.А. Возрастные аспекты состояния пероксидации липидов и антиоксидантной защиты при действии аллоксана// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -2005. - Том 139. - № 3. - С. 283 - 286.

126. Яременко К.В. Адаптогены как средства профилактической медицины. - Томск: Изд-во Томск, университета, 1990. - 90 с.

127. Adetumbi М.А., Lau B.N.S. Allium sativatum (darlic) - a natural antibiotik//Med.Hypotheses.-1983.-V. 12-N.3.-P 227-237.

128. Adolph E. F. General and specific characteristics of physiological adaptation//Am. J. Physiol., 1956, P. 18-28.

129. Anderson R.L. Nonoleguric acute renal failure / R.L. Anderson, S.L. Linas, A.S. Berns et al. // N. Engl. J. Med. - 1977. - Vol.236. - P. 1134.

130. Aples H, Allman K, Platter H, Reichert J, Riek R. and Schulz S. Formation of large unilamellar vesicles using alkyl maltoside detergent. Biochim. Biophys. Acts, 1986, v. 862, p. 294-302

131.Armitage PA, Berry G. Statistical Methods in Medical Research. 3rd edition. Oxford: Blackwell, 1994p207-ll.

132. Ashady R. Microspheres, Microcapsules and liposomes. Citrus Books, London, 1999, vol.1,chapter 10, pp. 279-322.

133. Bangham A.D., Home R.W. Negative Stating of Phospholipids and their Structured Modification by Surface Agents as Observed in the Electron Microscope //J. Mol. Biol. - 1964. - V.8 - P. 660-668.

134. Bangham, A.D., Standish, M.M., Watkins, J.S. Diffusion of Univa-lent Ions Across the Lamelae of Swollen Phospholipids // Ibid. - 1965. -Vol.13.-P. 238-252.

135. Barnet, S.A. Wild mice on the cold: some findings on adaptation// Biol. Rev. Camp. Philos. Soc. - 1989. - Vol.64, №4. - P. 317-340.

136. Calder P.C. N-3 polyunsaturated fatty acids and inflammation: from molecular biology to the clinic // Lipids. - 2003. - Vol. 38, N 4. - P. 206212.

137. Cevc, G. Transferosomes, liposomes, and other lipid suspensions on the scin. Crit. Rev in: Therapeutical Drug Carrier Systems, 1996. - P. 257-388.

138. Darr, D. Adaptation to oxidative stress in young, but not in mature or old. Caenorhabditis elegans// Free Radic Biol Med. -1995. - Vol. 18,№ 2. -P. 195- 201.

139. Dawson C.A., Horvath S.M. Swimming in small laboratory animals // Med. Sci. Sports Exerc. - 1970. - V. 2. -N 5. - P. 51-78.

140. Deamer W. and Uster P.S. Liposome preparation: methods and mechanism, 1984, In: Liposomes (M. J. Ostro, Ed.), pp. 27-51, Marcel Dekker, New York

141. Deng H., Guan Y., Kwan C. Effects of ginseng saponins on lipid peroxydation in liver and cardiac muscle homogenates // Biochem. Arch.-1990.-Vol.6.- P. 359-365.

142. Eytan, G.'D. Use of liposomes for reconstitution of biological functions// Biochim. et biophys. acta. - 1982. - Vol.694. - P. 185-202.

143. Noctor G. Metabolic Signalling in Defense and Stress: The Central Roles of Soluble Redox Couples // Plant Cell Environ. 2006. V. 29. P. 409-425.

144. Filomeni G, Rotilio G, Ciriolo M.R. Cell signaling and the glutathione redox system//Biochem. Pharmacol, 2002. - P. 1057- 1064.

145. Grahl-Nielsen O, Halvorsen A.-K, Bodoev N. et al. Fatty acid composition of the blubber of Baikal Seal, Phoca sibirica, and its marine relative, the ringed seal, Phoca hispida II Mar Ecol Prog Ser. - 2005. - V. 305.-P. 261-274.

146. Hope M. J, Bally M. B, Mayer L.D, Janoff A.S. and Cullis P.R. Generation of multilammellar and unilamellar phospholipids vesicles. Chem. Phys. Lipids, 1986, v. 40, p.89-107.

147. Keranova B, Neychev C, Petkov V. Infulence of ginsengoside Rg 1 on some parameters of immune response// Докл. Болг. АН .- 1990.- Vol. 43.-№6.-P. 101-104.

148. Liu J, Wang S, Liu H. Et al. Stimulatory effect of saponin from Panax ginseng on immune function of lymphocytes in the elderly // Mech. Ageing Dev.- 1995,- Vol. 83.- №1.- P. 43-53.

149. Levi L. Stress and distress in response to psychosocial stimuli//Acta med. scand, Suppl. 1973, 528 p.

150. Mc Ewen B.S. Physiology and Neurobiology of Stress and Adaptation: Central Role of the Brain // Physiol. - 2007. - Rev. 87. - P. 873-904.

151. Mimica-Dukie N. M, Budencevic M. M, Mihajlovic B. A. et al. Antioxidant activity of plant phenolic. Flavonoids and phenolic acids// J. Serb. Chem. Soc. - 1994. - V. 59. - № 11.-P. 823-828.

152. Mitchell J, Rowe W, Meaney M. Serotonin regulates type II corticosteroid receptor binding hippocampal cell cultures // J. Neurosci.- 1990.- Vol. 10.-P. 1745-1752.

153. Mead J.F.//J.LipidRes.-1984.-V.25.-P. 1517-1521

154. Prasaed G, Kumar A, Singh A.K. et al. Antimicrobial activiti of essential oils of some Ocium species and clove oil.// Fitotherapia- 1986.-V. 57.-№6.-P. 429-432.

155. Prescott S.L., Calder P.C. N -3 polyunsaturated fatty acids and allergic disease// Curr. Opin. Clin. Nutr. Metab. Care. - 2004. - Vol. 7, N 2. -P.123 - 129.

156. Perez-Pinzon M.A. Neuroprotective effects of ischemic preconditioning in brain mitochondria following cerebral ischemia // Bioenrrg. Bio- membr. -2004.-Vol. 36.-P. 323-327.

157. Pugliese P.T., Jordan K., Cederberg H. Some biological actions of alkylglycerols from shark liver oil // J. Altern. Complement. Med. - 1998. Vol. 4, № 1. - P. 87-99.

158. Racker E. Clutatione reductase from baker's yeast and beef liver// J Biol. Chem. - 1955. - V. 217. - № 2. - P. 855-865.

159. Ramadas M., Paul W., Dileep K.J. et al. Lipoinsulin encapsulated alginate-chitosan capsules: intestinal delivery in diabetic rats // J. Microencapsul. 2000.-V. 17.-№4.-P. 405-411.

160. Ramachandran U., Divekar H., Grover S. New experemental model for the evaluation of adaptogenic products // J.Ethnopharmacol- 1990.- Vol.29.-№3.- P.275-281.

161. Sarman I., Bolin D., Holmer and Tunell R.: Assessment of thermal conditions in neonatal care : Use of a mannequin of premature baby size. American J of Perinatology: 1992: P. 239-246.

162. Sakac V., Sakac M. Free oxygen radicals and kidney diseases // Med. Pregl. - 2000. - Vol. 53. -№9-10. - P. 463- 474.

163. Selye H. The evolution of the stress concept//American Scientist., 1973, P. 642-649.

164. Selye, H. The general adaptation syndrome and the diseases of adaptation // J. Clin. Endocrinol. - 1946. - Vol. 6. - P. 117-152.

165. Sidiqui R.A., Exton J.H. II Eur. J. Biochem. - 1992. - V.210. - P. 601-607.

166. Stern L. Thermoregulation in the Newborn Infant: Historical, Physiological and Clinical Considerations. Historical Review and Recent Advances in

Neonatal and Perinatal Medicine. Published by Mead Johnson Nutritional Division, 1980

167. Stults F.H, Forstrom J.W, Chiu D. T.Y, Tappel A.L. Rat liver glutathione peroxidase: Purifi cation and study of multiple forms // Arch. Biochem. Biophys. - 1977. -V. 183. - P. 490-497.

168. Valko M. Metals Toxicity and oxidative stress // Curr. Med.Chem. - 2005. -Vol. 12.-№10.-P. 1161-1208.

169. Teplyi, D.L.Surfactant activity and lipid peroxidation in cold exposure and after alpha-tocopherol administration // Ross Fiziol Zh Im I M Sechenova. - 1997. - Vol. 83, №10. - P.63-67

170. Tran T. Stimulation of sexual performance in male rats with the root extract of dinh lang (Policias fruticosum L.) // Acta physiol. Hung/- 1990.- Vol. 75.-№1.-P. 61-67.

171. Yang B, Kotani A, Arai K, Kusu F. Estimation of the antioxidant activities of flavonoids from their oxidation potentials // Analytical Sciences (Japan). 2001, V. 17, P. 599-604.

172. Zhang L, Hu J, Lu Z. Preparation of Liposomes with a Controlled Assembly Procedure // J. of Colloid and Interface Science. - 1997. - V. 190. -№ 1. - P. 76-80.

173. Eder M, Mehnert W. Bedentung pflanzlicher Begleitstoffe in Extraxten.// Pharmazie. - 1998. - V. 53. - №5. -S. 285-293.

174. Fridrich H. Untersuchungen über den Gerbstoff von Bergenia - Arten und Seine Bezichunden zum arbutin// Pharmazie. - 1954. - Jg. 9, H. 2. - S.240-251.