Разработка иммуноферментной тест-системы для диагностики хламидиоза овец тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Кочиш, Иван Иванович

• Кочиш, Иван Иванович
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кочиш, Иван Иванович

ВВЕДЕНИЕ

1. ОЬЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. 11ммуноферментный анализ в ветеринарии

I.II 11рииципы и методы ИФА

1. 1.2 Выбор фермет-субстратной системы 19 1.1.3. Синтез иммуноферментных конъюгатов ' 21 1.1.1 Результаты ИФА и практическое применение анализа 24 1.2 Характеристика возбудителя хламидиозов 27 1.2.1. Хламидиоз овен, и коз 30 1.2 2. Культивирование и очистка хламидий 33 1.2.3. Методы лабораторной диагностики хламидиозов

1.2.3.1. Серологические методы

1.2.3.2. Методы индикации хламидий

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 45 2.1 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 45 2.1.1. Iii гаммы хламидий 45 2.1 2 Получение хламидийных и аптивидовых сывороток 45 2 1.3. Животные и куриные эмбрионы 46 2.1 I Выделение IgG из сыворотки крови барана 47 2.1.5. Очистка аптивидовых антител

2.1.6 11олучение иммуноферментных конъюгатов

2.1.7 Концентрирование препаратов антигенов и антител 48 2.1 8. Иммунологические реакции 48 2.1.9 Биохимические методы 49 2.110 Статистическая обработка результатов

3. И ¡У'11.1 ЛТЫ С0БСТВЕ1ИТЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Культнвировапие, очистка и концентрирование хламидий

3.2 11олучсиие антигенов хламидий

3.3. Получение хламидийпых сывороток 57 3.3.1 Получение хламидийпых сывороток па кроликах 58 3.3.2. I ¡олучепне хламидийпых сывороток на овцах

3.4. Получение антител меченных ферментом пероксидазы для поста- 63 новки реакции ИФА

3.4.1 Выделение из нормальной сыворотки крови барана

3. 1.2. Иммунизация кроликов препаратом ^С барана для получения ан- 70 тир, и допой сыворотки

3.4.3 Выделение специфических антител из антивидовых сывороток

3.4.4. Мечение антивидовых антител с ферментом пероксидазы

3.4.5. Контроль иммунопероксидазпых конъюгатов

3.5. Отработка оптимальных условий постановки реакции ИФА для вы- 77 явления анти тел к антигенам хламидий

3.6. Конструирование набора для иммуиоферментной диагностики хла- 83 мидиоза оиец

3.7. Апробация набора для иммуиоферментной диагностики хламидио- 85 за овец

3.8. Внедрение набора для иммуиоферментной диагностики хламидиоза ' 90 овец

4 ()!>( УЖДЕППК РЕЗУЛЬТАТОВ

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

6 С! ШСОК ЛИТЕРАТУРЫ

7. I !РИ НОЖЕПИЕ '

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка иммуноферментной тест-системы для диагностики хламидиоза овец»

Актуальность темы. В последние годы среди инфекционных болезней животных и птиц все большее внимание привлекают хламидийные инфекции.

Но данным ряда исследователей (Ю.Д.Караваев 1999 г., Х.З.Хазипов, А З.Равплов 1984 г.) наиболее значительный экономический ущерб испытывает промышленное овцеводство из-за больших потерь приплода в результате массовых абортов и гибели ягнят в первые дни после рождения.

Поэтому борьба с хламидийным абортом овец признана одной из актуальных задач ветеринарной науки и практики.

В настоящее время основным методом серологической диагностики хлнмидиозов является реакции связывания комплемента (РСК, РДСК). Недостатками этого метода является: трудоемкость, длительность выполнения и 11 из к а я 11 у вств ител ьность.

Для устранения перечисленных недостатков в ветеринарную практику интенсивно внедряется иммуноферменгный анализ, который занял лидирующее положение при диагностике многих инфекционных болезней (В.Н. Сюрип 1989 г.). Явным преимуществом этого теста является простота выполнения, высокая чувствительность, экспрессность, доступность и стабильность реагентов, возможность автоматизации процесса и объективность инструментального учета реакции.

Однако практическое применение ИФА во многом затрудняется из-за отсутствия в достаточном количестве необходимых специфических диагностику мо в.

Таким образом, разработка компонентов и создание тест-систем для иммунофермситной диагностики хламидиоза овец на сегодняшний день является важной и актуальной задачей.

Цели и задачи исследований. Целыо настоящих исследований явились разработка технологии получения специфических компонентов для ИФЛ, отработка условий постановки ИФА для выявления антител к хлами-дням. вы бывающим аборты у овец в сыворотках иммунизированных живот-пых и сравнительное изучение чувствительности РСК (РДСК) и ИФА при количественном определении антител в этих сыворотках.

Для реализации указанной цели были поставлены следующие задачи:

- получить, очистить и концентрировать суспензию хламидий штамм «Уле-тово»;

- приготовить антигены хламидий;

- получить хламидпйпые сыворотки на кроликах и овцах;

- синтезировать коныогат ангивидовых антител с ферментом пероксидазы р для постановки ИФА;

- отработать оптимальные условия постановки реакции ИФА для выявления антител к антигенам хламидий;

- изучить чувствительность ИФА и РСК (РДСК) при количественном определении агтгихламидийных антител в сыворотках иммунизированных овец;

- провести опытные испытания набора для иммуноферментной диагностики хламидиоза овец.

Научная новизна. Впервые для ветеринарных лабораторий России разработан набор компонентов для иммуноферментной диагностики, позволяющий выявлять инфицированных хламидиями овец. Экспериментально доказана возможность повышения эффективности диагностики хламидиоза на 17,5% за счет применения набора ИФА.

Практическая значимость работы. Результаты научно-исследовательской работы, полученные при выполнении диссертации вошли в нормативно-техническую документацию:

1. Временная инструкция по изготовлению и контролю набора для иммуно-ферментной диагностики хламидиоза овец;

2. Г^^-938800-004 «Набор для иммупоферментной диагностики хламидиоза овец», утвержденные 31 марта 1997 г. ГУВ Минсельхоза и продовольствия Российской Федерации;

3. Временное наставление по применению набора для иммупоферментной диагностики хламидиоза овец, утвержденное ГУВ Минсельхоза и продовольствия Российской Федерации 31 марта 1997 г.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на конференциях:

1. V Всероссийской конференциях «Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов», Москва, 19% гг.;

2. Всероссийской научно-практической конференции «Вирусные болезни сельскохозяйственных животных», Владимир, 1995 г.;

3. Всероссийской научной конференции «Инфекционные болезни молодняка сельскохозяйственных животных», Москва, 1996 г.;

4. Ученых советах ВНИТИБП (1995-1998 гг.).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 3 статьи, заключительный отчет по научно-исследовательской работе, нормативно-техническая документация на изготовление, контроль и применение диагно-стикума.

Основные положения диссертации, выносимые па защиту:

- получение специфических компонентов для постановки иммунофермент-по| о анализа;

- отработка условий постановки иммупоферментной тест-системы для- выявления антител к антигенам хламидий;

- изучение сравнительной чувствительности РСК (РДСК) и ИФА при определении антихламидийпых ант тел в сыворотках иммунизированных животных;

- апробация набора для иммуноферментной диагностики хламидиоза овец.

Объем и структура диссертации. Диссертационный материал изложен на 128 машинописного текста и включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы и приложения. Диссертация иллюстрирована 17 таблицами и 13 рисунками. Список литературы содержит 220 источников., в том числе 105 иностранных.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Кочиш, Иван Иванович

4. ВЫВОДЫ

1. Разработан метод, включающий очистку ультразвукового супсрпатаита желточных оболочек куриных эмбрионов, инфицированных штаммом «Улетово»-(ВНИТИЬП) хроматографией па сефакриле S-300, получения диагностического антигена хламидий для ИФА активностью 1:2560

1:5 1 20.

2. Предложены схемы получения хламидийных сывороток для ИФА и РСК гиперпммупнзацией кроликов и овец.

3. IIa основе очищенных иммуносорбцией антител синтезирован с ферментом пероксидазы перйодатпым методом антивидовой конъюгат активностью 1:20()00.

4. Разработана тест-система ИФА определения хламидийных антител в сыворотках крови инфицированных овец в диагностическом титре 1:2()0.

5. Установлена коррелятивная зависимость РСК и ИФА (коэффициент корреляции г 0,86 при Р<0,01), при большей эффективности ИФА в 1 7,5%.

6. Разработана технология получения компонентов набора для иммунофер-мептпой диагностики хламидиоза овец.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

На основе проведенных иаучио-исследовательских работ оформлена научно-техническая документация:

1. Временная инструкция по изготовлению и контролю набора для иммуио-фермеитной диагностики хламидиоза овец;

2. ТУ-938800-004 «Набор для иммунофермептной диагностики хламидиоза овец», утвержденные 31 марта 1997 г. ГУ В Минсельхоза и продовольствия Российской Федерации;

3. Временное наставление по применению набора для иммунофермептной диагностики хламидиоза овец, утвержденное ГУВ Минсельхоза и продовольствия Российской Федерации 31 марта 1997 г.

4. Набор для иммунофермептной диагностике овец был апробирован ветеринарными лабораториями России.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кочиш, Иван Иванович, 2000 год

1. Абортогенные иифекции овец в Восточном Забайкалье и перспективы борьбы с ними. / Стремилов П.И., Усольцев В.М., Сроков В.И. и др. Ветер. пробл. Забайкалья. Сб. научи, тр. СО РАСХИ. Новосибирск, 1993,сЛ-().

2. Авдосьева И.К., Лукьянчук В.А., Беклешова АЛО. Сравнительная оценка специфической активности хламидийных антигенов. // Тез.докл. Вссс.паучн.конф. «Соверщ. методов гос. контроля вет. препаратов» 14-16 мая 1991 / ВП 1КИ ветпрепаратов -М. 1991 ,-98с.

3. Альбертсоп Пер-Окс. Разделение клеточных частиц и макромолекул. -М.: Мир, 1974,-382с.

4. Ашмарин И.П., Воробьев A.A. Статистические методы в микробиолог ических исследованиях JI., 1962.

5. Белоусов 13.И., Юпокина В.И., Кочиш И.И. Разработка набора для имму-иофермсптной серодиагностики хламидиоза овец / Вирусы, болезни с/х животных Владимир, 1995. - С.76.

6. Беклешова АЛО. Болезни овец хламидиями. Хламидиозы // Инфекционные болезни животных: Справочник. М:Агропромиздат 1987 - с.141

7. Ьортпичук В.А. Значение реакции иммунофлуоресценции при диаг ностике хлампдиоза свиней // Микробиол. Ж. 1989.- № 1. - С. 12.

8. Бортпичук В.А. Хламидиоз свиней Киев: Урожай, 1991. - 192с.

9. Васильев A.B., Непоклонова И.В. Иммуноферментный метод в диагностике вирусных инфекций // Ветеринария. 1982. - № 8. - С. 63-65.

10. Введение в прикладную эпзимологию. Иммобилизованные ферменты / Иод, ред. И.В. Березина и К. Мартенека. М,- МГУ,- 1982. - 384 с.1 6. Вши пяков И.Ф., Цыбанова Л.Я. Иммуноферментный анализ // Ветеринария. 1983. - № 9. - С. 68-70.

11. Вишняков И.Ф., Цыбанова Л.Я., Молчанова Т.В. Иммуноферментный анализ при диагностике инфекционных болезней сельскохозяйственных животных / Вопр. вет. вирусол., эииз. и микроб.: Тез. докл. научи, конф. -Покров, 1983.-С.66-76.

12. Волкова A.A. Вирусный аборт овец // Малоизученные заболевания с.-х. животных: -М. Колос, 1967, -с. 123-124.

13. Выбор метода получения коныогатов стафилококкового белка А с перок-сидазой для иммупофермептпого анализа / Е.В.11ерельман, В.Ф.Булк, П.В.Щетинина и др. //ЖМ')И. 1986. - № 10. - С. 68-71.

14. Га(|)фаров Х.З., Хамадеев Р.Х., Шафикова Р.А. и др. Итоги широкого производственного испытания диагиостикума хламидийного аборта овец / Болезни овец и меры борьбы с ними: Тез. докл. Всесоюз. конф. Чита, 1980. С. 33-36.

15. Гаффаров Х.З., Михайлова Л.И., Кривоносов B.C., Рашевский И.П., Вале-св К.И. Выделение вируса из группы ОЛТ при энзоотическом аборте овец //1 ветеринария, -1971, №7, с. 104-1 1 1.

16. Гаффаров Х.З., Хамадеев. Эпизоотологические аспекты хламидиозпого аборта овец и основные принципы его профилактики. // Актуальн. воир. эпtI300T. Тез. докл. Всесоюзи. научн. комф. но проблемам эпизоотологии -Казань, 1983, - с. 138.

17. Гольдпп р.Б., Пурапова И.В., Мипакова П.Г. Способ получения хлами-дийпой иммунной асцитической жидкости. Ав.св. 1700823, 1989.

18. Громыко Л.Г., Громыко А.И. Диагностика орнигоза у птиц с помощью реакции агглютинации элементарных телец// Экология вирусов. Матер. К) симп. Баку, - 1976, - с. 209-210.

19. Громыко JI.Г., Терских И.И. Применение иммуноферментного метода (HI,ISA) при хламидийных инфекциях // Вопр. вирусол. 1981. - № 2. — С. 245-248. ■

20. Гусев A.A., Панин А.И. Методические указания по диагностике заболеваний сельскохозяйственных животных иммуноферментным методом. Владимир, 1998. - 179 с.

21. Деханов A.A. Выделение при энзоотической бронхопневмонии телят микроорганизмов из группы орпитоза-пситтакоза / Профилактика и лечение заболеваний сельскохозяйственных животных: Труды Ульяновского с.-х. нп-та. 1970,-№ 16. -С.26-28.

22. Дзаптиев Б.Б. Гетерогенные методы иммуноферментного анализа // Бюл. BIDB. 1985. Вып. 58. - С. 10-22.

23. Дзаптнев Б.Б., Егоров A.M. Современное состояние и перспективы развития иммуноферментного анализа // ЖВХО. 1982. - Т. 27,- № 4. -С. 442--449.

24. Диагностика, лечение и профилактика заболеваний, передаваемых половым путем: Методич. мазер. / Под ред. Борисенко К.К. и др. М.: Асе.1. Сенам». 1997.

25. Диксон М„ Уэбб ). Ферменты. М.: Мир,- 1982. - Т. 1-3. - 1 11 8 с.

26. Домейка М.А. ЭЛИСА для индикации антител и антигена хламидий энтерита и пневмоний телят // Бюлл. ВНИИ экспер.вет. 1985. - № 58.1. С.58-61.

27. Домейка М.Л., Абрамова JI.I1., Мальцева Н.П., Терских И.И. Использование пммунофсрмситпого метода для исследований аптихла-мидийных сывороток // Вопр. Вирусол. 1985. - № 4. - С. 474.

28. Т'встифеев 13.В., Хамадеев Р.Х., Хусаинов Ф.М., Равилов А.З. Выявление хдампдийных антител и антигенов в РИГА / Матер. Междунар. науч. конф. поев. 125-летию академии. Казань, 1998. - 4.1. - С.37-38.

29. Звягин И.В. Хорьков И.А. и др. Методические рекомендации по разработке режимов замораживания-высушивания биологических препаратов, М„ 1981,- 33с.

30. Иммунофермент пый анализ / Под ред. Т.Т.Иго, Г.Ленхоффа, М.: Мир, -1988,- 446 с.

31. Иммупофермсптная тест-система на основе (Pab)2 -фрагментов антител для индикации гемагглютинина вируса гриппа / С.В. Леонов, Ю.А.Закомырдип, Г.И.Э1 терт и др. // Вопр. вирусол. -1987. № 4. - С.498 502.

32. Белоусов В.И. Средства специфической профилактики и диагностики хдамидиоза, кампилобактерпоза, сальмонеллеза и лептоспироза животных. Дисс. докт. вет. наук. Москва, 1997 г.

33. Исатасва ИТИ. Сравнительная оценка лабораторных методов диагностики хламидиозного аборта овец. Автор, дис. канд. вет. наук. М., 1983, -17с.

34. Испы тание иммунных коныогатов / Шаткин А.А., Караваев Ю.Д., Панкратова В.! I. и др. // Ветеринария, 1974, - №6, - с. 43-45.

35. Калугина И.А. Культивровапие Chlamydia psitlaci клеток почки сайги:

36. Автор, дне. канд. биол. наук., М., - 1992, - 22с.

37. К).Д. Караваев, Л.П.Дьяконов. Ультраструктура возбудителя хламидий-ного аборта овец // Ветеринария, 1985, - Т5, - с. 34-36.

38. KapaBaei? Ю.Д. Хламидиозный аборт овец (этиология, диагностика, специфическая профилактика): Диссерт. док. вет. наук, М., -1987, - 416с.

39. Караваев Ю.Д., Калугина И.А., Дудар В.П. Адаптация хламидий штамма К-8 ВИЭВ к перевиваемой культуре клеток почки сайги. В кн. Культивирование клеток животных и человека. Тезис, докл., Пугциио, -1990, -с.90.

40. Караваев К).Д., Налетов П.П., Калугина И.А. // Ветеринарная газета -1 993, №26, - 4с.

41. Караваев К).Д. Активность диагностических положительных сывороток, полученных от различных видов животных, гипериммунизированпых возбудителем аборта овец// Бюлл. ВИЭВ. 1972. -№ 14. -С.60-61.

42. Караваев 10.Д. Агглютинирующая активность штаммов возбудителя, выделенных при массовых абортах овец // Бюлл. ВИЭВ. 1972. - № 14. -С.62-63.

43. Караваев 10.Д., Дзиова 11.11., Крюков H.H. Сравнительное изучение чувствительности РСК и мпкроагпнотинации при диагностике энзоотического аборта овец// Бюлл. ВИЭВ. 1971. - II. - С.77-78.

44. Караваев 10.Д., Исатаева III.И., Налетов И.И. Сравнительное изучение РСК, PI НА и РМИФ при диагностике хламидиозного аборта овец // Бюлл. ВНИИ жепер. вет. 1986. -№62 -С. 14-18.

45. Каральник Б.В. Научные основы изготовления эритроцитарпых диагио-стикумов // Ж. Микробиол. 1977. - № 4. - С.29-34.

46. Ковалев В.П. Выделение и изучение некоторых биологических свойств возбудителя эпизоотического аборта овец в Таджикской ССР: Диссерт. канд. биол. наук, Душанбе, - 1970, -133с.

47. Кравченко Т.Ф. Серологическая диагностика при хламидиозе свиней // Матер. Всесоюзп. конфер. «Эпизоотология, эпидемиология, средства диагностики, терапии и специфической профил. инф. болезней, общих для человека и животных» /-Львов, -1988, с. 114-1 15.

48. Кульбсрг А.Я. Молекулярная иммунология. М.: Высшая школа, 1985. -287 с.

49. Курбапов И.А., Авзалов Ф.З. Иммуни тет при хламидийпых инфекциях // Ветеринария, 1984, - №4, с. 26-27.

50. Кэрстак Э. Успехи в разработке иммуноферментных методов: получение реагентов, планирование экспериментальных исследований и интерпретация результатов // Бюл. ВОЗ, 1985, - №4, - с. 1 18-139.

51. Лаковская И.А. Определение параметров сублимационного консервирования и исследование их влияния па сохранение исходных биологических свойств объектов: Автор, дис. канд. техн. наук., М., 1971, -22 с.

52. Марепппкова С.С., Хабакпашева H.A., Мальцева H.H., Ефремова Е.Е. Получение и сравни тельная оценка пероксидазных конъюгатов на основе чистых ан тител и РаБ-фрагмента Jg // Ж.МЭИ, -1982, №9, - с.99-103.

53. Обухов ИЛ. Молекулярный механизм паразитизма хламидий и их внутриклеточное развитие // С/х биол. сер. биол. животных. 1997. - № 2. -С.86-98.

54. Поляков A.A., Купешев Г.III. Выживаемость возбудителя хлами-диозпого аборта овец и режимы дезинфекции./ Ветеринария, 1983,- 7,- С. 24-26.

55. Попович Г.Г. Оценка серологических методов диагностики хламидиозов // Микробиол. жури. 1981. - Т.43. - № 2. - С. 188-192.

56. PaBH.MOB А.З., Хазипов Н.Э. Меры профилактики и борьбы // Хламидиозы сельскохозяйственных животных, М., Колос, 1984, - с.205-215.

57. Реутова Ii.Г., Чевелев С.Ф., Архипов H.H. Иммуиоферментный метод в вирусологических исследованиях (обзор литературы) // Ветеринария." -1 976. № 3. - С. 53-55.

58. Рубцов I I.В., Пимепова Г.П., Кулаков В.I I. Метод статистической обработки результатов иммуиофермептного анализа // ЖМЭИ. 1985. - № 6. -С.44-48.

59. Савосппа U.C. Видоспецифический и группоспецифический антигены возбуди теля орпитоза. / Двтореф. докт. дисс,- М.- 1987.

60. ВЗ.Савосина II.С., Попова О.М. Обнаружение гуморальных антител к видос-цецп(|)пческому и группоспецифическому антигенам орнитоза в динамике инфекции // Вопросы вирусологии. 1979. - № 4. - С.422-427.

61. Сравнительное изучение РДСК и РИГА при диагностике хламидиозпого аборта овец / Амирбеков М., Ковалев В.Л., Степанова С.П. и др. // Меры борьбы и профил. с инфекц. ииваз. и пезар. болезнями с-х ж-х в Таджикистане, -1989, с.25-29.

62. Гарасшпин J1.A. Иммуноферментный анализ и его модификации в исследовании вирусных антигенов // Микробиол. журнал. 1986. — Т. 48, №4. С. 99-104.

63. Терских И.И. Орнигоз и другие хламидиальные инфекции. М., Медицина, 1979.

64. Хазипов П.З., Гаффаров Х.З., Хамадесв Р.Х., Шафикова Р.А., Равилов А.З. Хламидиозы круниого рогатого скота и меры борьбы с ним. Казань, Га г. книгоиздат, - 1980, - 100 с.

65. Хамадесв Р.Х. Хламидиозы рогатого скота и свиней (Эпизоотология, дирагностика, специфическая профилактика и меры борьбы: Диссерт. докт. вет. наук, Казань, -1990, - с.412.

66. Хамадесв Р.Х. Методы лабораторной диагностики // Хламидиозы сельскохозяйственных животных. Под ред. И.З.Хазипова и А.З. Равилова, -1()Р0, №2,-48с.

67. Хамадесв Р.Х. Усовершенствование способа устранения антикомгт-лсмептарности антигенов / Актуал. воир. вет. вирусол: 1 езисы докл. Все-союз. конф. Казань, 1980. - С. 141.

68. Хамадесв Р.Х., Хусапнов Ф.М., Евсгифеев В.В., Равилов А.З. Получение чритроцитарпого диагностикума для выявления ан тител при хламидиозе / Науч. основы техн. пром. произв. вет. биол. преп.: Тез.докл. V Всерос. конф. Щелково, 1996. - С. 153-154.

69. Хамадеев Р.Х., Боровик Р.В., Гаффаров Х.З., Шафикова P.A. Получение гннериммунных сывороток для диагностики энзоотического аборта овец // Ветеринария. 1975. - № 10. - С.36-38.

70. Хамадесв Р.Х., Габидуллина Р.Г., Полуянов В. Изыскание оптимальных условий лиофилизации комплемеитсвязывающего антигена хламидий // Тег докл. респ. науч.-техн. конф. по пробл. вет. Казань, 1980. —С. 131132.

71. Хамадеев Р.Х., Боровик Р.В., Гаффаров Х.З., Шафикова P.A. Способ получения антигена для серологической диагностики вирусных заболевании: Авторское свидетельство № 543259. 1976.

72. Хамадеев Р.Х. Хламидмозы рогатого скота и свиней: Автореф. дис. докт. нет. наук. Казань, 1991. -40с.

73. Хламидиоз (клиника, диагностика, лечение): Методические рекомендации / Под ред. Серова В.И, Краспопольского В.И., Делекторского В.В. и др. М.: Патент, 1996. -22 с.

74. Хламидиозы сельскохозяйственных животных / Хазипов Н.З., Гаф-фаров Х.З., Шафикова P.A. и др. // М., -1984.

75. Хусаииов Ф.М., Хамадеев Р.Х., Равилов А.З., Хисматуллина H.A. Использование иммуноферментного анализа для диагностики хламидиоза свнпей / Вирусн. болезни с/х животных. Владимир, 1995. - С. 67.

76. Червонский В.Н., Панова О.М. Антиген для РСК при орпитозе-нситл'оказе // Вопрос, вирусологии, 1959, №1, - с.68-71.

77. Шаткин A.A. Индикация антигенов гальпровий (хламидий) прямым иммунопероксидазпым методом //Ж. Микроб., эпидем. и иммунобиол. -1970. № 9. - С.74-78.

78. Rec. 1990, v. 126, №>6, p. 136-138. I 16. Aitken I.D., Clarkson M. Chlamydial abortion and Toxoplasmolis // Proc.

79. Antigenic diversity of ruminant Chlamidia psittaci strain demonstrated by the inderect microimmunonuorescence test with monoclonal antibodies / Salina S.J., Sourian A., Cuello P., et. al. // Veter. Microb. 1995, v. 43, №. 2-3, p.r *219.226.

80. Ari/.mendi P., Grimes I.E. Evaluation of latex agglutination for detection chlamydial antibody activity in psittacine bird sera by comparison with direct complement fixation fest.// J.veter.Diagnostic-invcstig. 1993, № 5, JST« 2, p. 277-279

81. A.Simple EIA to discriminate between Antibodies to EpS and to protein chlamydia //Osseawaarte T.M., Mauten 1 .M., I looft H.Tetal // Proc. of the Eur. Soc. lor chlamydia Res.,1 st. Meet, Bologna, Italy, May-30 june 1, 1988, p. 2.70.

82. Avrameas S. Coupling of enzymes to proteins with glutaraldehyde. Use of the conjugates lor the detection of antigens and antibodies // Immunochem. -1969. V.6. P. 43-52.

83. Avrameas S. Enzyme immunoassays and related techniques: development and limitations // Curr. fop. Microbiol, and Immunol. 1983. - V. 104. - P. 9Ï-W.

84. Avrameas S., Ternynck T., Guesdon J.L. Coupling of enzymes to antibodies and antigens // Scand. J. Immunol. 1978. -V. 8, suppl., N 7. - P. 7-23.

85. Barbour U.M. Development of enzyme immunoassay for human placenta! lactogen using labelled antibodies // J. Immunol. Meth. 1976. - V. 1 1. - P.с. о15.23.

86. Bavoil P., Ohlin A., Schachter T. Rolle dissulfide bonding in onter membrane structure and permeability in Chlamydia trachomatis // In feet.Immun. 1984, v. 44, p. 479-485.

87. Beer T. Untersuchungen on und mit Komplementbinden antigenen des vims-aborts der Schafe // Zntbl. Veterin, 1 958, v. 5, p. 305-308.

88. Bidvvell D.E., Bartlett A., Voiler A. Enzyme immunoassays for viral diseases /7 .1. Infect. Dis. 1977. - V. 136, suppl. - P. 274-278.

89. Bioch N., Dialio J. Serological survey on Sheep and goats in four department of Niger// Rev. Elev. Med. Veter. Pays-Tropicaux 1991, v. 44, №. 4, p. 397-404.

90. Buonavoglia D., Montagua C., Giuratrabocohetti G., Prestera G. Serolagical survey of Clamydiosis in Sheep and Goals in Potenza province // Acta Medica Veterin 1994, v. 40,№.l, p.37-40.

91. Brunham R., Peeling R., Maclean T., Mc Dowel! T., Persson. K, Osser S. Postabortal C.trachomatis salpingitis: correlating rick with antigen-specifik serological responses and with neutralization // J.Inf. Dis. 1987, v. 155, p. 749-45S.

92. Caldwell I I.D., Kuo C.C., Kenny G.E. Antigenic analysis of Chlamydia by two-dimensional Immunoelectrophoresis II A.trachorua-LGV-specific antigen /V.l. Immunol. 1975, v. 115, p. 969.

93. Caldwell I I.D., Perry L.T. Neutralization of Chlamydia trachomatis infec-tivity with antibodies to the major outer membrane protein// Infect. Immun. 1982, v. 38, p. 745-754.

94. Caldwell I I.D., Judd R.C. Structural analysis of chlamydial major outer membrane proteina // Infect. Immunol.- 1982. N38. - P.960-968.

95. Campbell L.A., Chou-Chou Kuo, Grayston T.I. Characterization of the new Chlamydia agent TWAR, as a unigue organism by restriction endenuclease analysis and DNA DNA hybridization // J. Clin. Microbiol. 1987, v. 25, p. 1911-1916.

96. Catt K.J., Tregear G.W. Solid-phase radioimmunoassay in antibody-coated tubes // Science. 1967. - V. 158.-P. 1570-1572.

97. Cevenini R. Rumpianesi P., Donati M., Sarov I. A rapid immunoperoxidase assay for the detection of specific IgG antibodies to Chi. trachomatis // J. Clin. Pat hot. 1983. V.36. - №3. - P. 353-356.

98. Charan S., Gautam O.P. Applications of enzyme-linked immunosorbent assay in veterinary medicine: a bibliography// Vet. Res. Commun. 1984. - № 8. - P.255-267.

99. Collins A.R., Barron A.L. Demonstration of Group- and Species-specific antigens ofchlamydiai agents by gel diffusion // J. Infect. Dis. 1970. - V. 121.1. V" 1. P. 1-8.

100. Dane D.S., Clapp K.M. Complement fixing antibodies to the psittocosis-lymphagranulema group of virus in south Australian Sheep// Austr. Vet. J. I 956, v. 32, p. 91-93.

101. Development and evaluation of on indirect Elisa to detect antibodies to abortion strains of Chlamydia psittaci in sheep sera / Anderson J.E., Herring A.I. Jones E et. al. // Veter. Microb. 1995, v.43, №.1, p. 1-12.

102. Dhir S.P., Boatmon E.E. Location of polysaccharide on Chlamydia psittaci by silver-mcthenamine staining and electron! microscopy // T. Bacteriol. 1972, v.l I I. p.267-271.

103. Diagnostic value of the polymerase chain reaction for \Chlamydia detection as determined in a fol-lovv-up study / Claas H.Wagenvoort T., Niesters LI. el. al. //J. Clin. Microb. 1991, v.29, p.42-45.

104. Differentiation of abortion-inducing and intestinal strains of Chlamydia psittaci isolated from rumianats by microimmunofluorescence / Sourian A., Rou/Jc E., Bernard F. et. al. // Vet. Ree. 1993, v. 132, №.9, p.217-219.

105. Ehlers U., Paul I LL. Binding of viruses from crude plant extracts to gluta-raidehyde-treated plates for indirect ELISA //J. Virol. Meth. 1984. - V. 8,-3. P. 217-224.

106. Giroud P., Jadin J. Importance des micro-agglutinations pour le diagnostic serologigue des infections provogues par der clement virulent a la limite des rickettsie. CR // Soc. Biol. (Paris) 1954, v. 148, p. 1157-1158.

107. GrimesT. E. Latex agglutination: a rapid sérodiagnostic aid for Chlamidia psittaci infection in psittacine herds// 4 Intern symp. of Vet. labor diagn. Amsterdam 02-06. 06. 1986.

108. Grimes T.E., Arizmendi F. Elementary body agglutinations rapid clinical diagnostic aid for avain chlamydiosis// Proc. Ann. Conf. Ass. Avian Veter, Nashille, Aug.- 4 September 1993.

109. Harris T.W., Hunter A.R., Martin D.A. Experimental chlamydial pneumonia in pigs// Comp. Immun. Microbiol. Infect. Dis. 1984, v. 7, p. 19-26.

110. Jensen A.E., Andersen A.A., Tappe T.P. el. al.// Avian Dis. 1993, v.37, №.1, p. I 70-1 76.

111. Immuno-dot blot as a rapid diagnostic method for detection of chlamydial in lection in coalax(phascolarctors cinerens) / Giles A. A., Ellis W.A.I 1., Lavin M.l;. el. al. // Veter.Rec. 1993, v.133, №.6, p. 136-141.

112. Intenstinal chlamydia psillaci-infection in cattle incidence and tecnical aspects of chlamydial isolation/witten brink M.M.,Bisping W.,Mrozek M. et. al. // Deutsche-Tierarztl.Wochenschr.1993, v. 100, №.5, p. 195-198.

113. Jenkin II.M.,Ross M.R.,Moulder T.W. Species specific antigens from cell walls of agents meningopneumonitis and feline pneumonitis// .(.Immunol. 1961, v.86, p. 123.

114. Jensen R. Enzootic abortion in ewes: in book: Diesease of Sheep. 1974, I'hiladelfia, p.46-51.

115. Jonhson F.W.A.,Clarkson M.F.,Spencer W.N. Direct isolation of the agent of enzootic abortion in ewes (Chlamydia psittaci) in cell cultures // Vet.Rec.1983, v.l 13, №.18, p.413-414.

116. Johnson F.W.A. Enteric infections in sheep associated with enzootic abortion (Chlamydia psittaci) // Irish.Veter.News. 1984, №.12, p. 10-15.

117. Jones M.F., Smith T.F., Hougluru A.T., Herrman T.E. Detection of chlamydia trachomatis in genital specimens by the chlamydiazyme test // J. Clin. Microbiol., 1984, v.20, p.465-467.

118. Judd M.A., Britten K.J.M. Tissue preparation for the demonstration of surface antigens by immunoperoxidase techniques// Ilistochem. J. 1982. - V. 14,- № 5.-P. 747-753.

119. Kahane S., Metzer E., Friedman M. Evidence that the novel microorganism " may belong to a new genus in the family Chlamydiaceae // FEMS Microbiol. fett. 1995, v.l26, p.203-208.

120. Kaltenboeck В.К., Konsoulas K.G., Storz. Detection and strain differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction // J. Clin. Microbiol. 1991, v.29, p. 1967-1975.

121. Kallenboeck В., Konsoulas K., Stonz T. Structures of and Allelic diversity and relationship among the major outer membrane protein (om A) genes of the Гош- chlamydial Species// Am.Soc.Microbiol. 1993, v.l 75, №.2, p.487-502.

122. KaulR., Roy K., Wenman W. Cloning expression and primary structure of a Chlamydia trachmatis binding protein // J.Bacteriol. 1987, v. 169, p.5 152-5 1 56.

123. Kawakami E., Kaji Т., Sugimura K., Omori Т., Matumoto M. Miyagawan-ella: psitacosis-lymphogranuloma group of viruses, isolation of a virus from feces of naturally infected sheep // Bull.Natl.Anim.Health 1958, №36.

124. Kuo Cho-Chou, ChiEmil Y. Ultrastructural study of Chlamydia trachomatis surface antigens by immunogold staining with monoclonal antibodies // Infect and Immun. 1987, v.55, №.5, p. 1324-1328.

125. Eayashi K., Rodolakis A., Buzoni G.D. Identification by western blots of virulence specific antigens of Chlamydia psittaci isolated from ewes // Vet.Res. 1993, v.24, №.1, p.55-65.

126. Eehtonen O.P., Viljanen M.K. Antigen attachment in EEISA//J. Immunol. Meth. 1980. - V. 34,-№1. - P. 61-70.180. levis V., Thacker.E., Engelman 11. Sudirect hemagglutination test for chlamydial antibodies // APPI. Microbiol. 1972, v.24, №.1, p.22-25.

127. Eiplet 11., Brand G. Die Complemenlbindungsreaklion in der Diagnostik dcr Ornithose (Psittacosis)// Dtsch. Med. Whschr. 1951, bd.80, №.3, p. 110

128. Lucher M., Storey C., Richmond S. Plasmid diversity within the genus Chlamydia //J. Gen. Microbiol. 1989, v.135, p.l 145-1151.

129. Ma bey D.C.W., Robertson T.N., Ward M.E. Detection of Chlamydia trachomatis by Enzyme-immunoassay in patent with trachoma // Lancet ii 1987, p. I 491-1492.

130. Markey B.K., McNulty M.S., Bums K. Chlamydia psittaci infection in sheep in Northern Ireland // Veter. Ree. 1993, v. 132, №. 15, p.389.

131. Markey B.K., McNulti M.S., Todd D. Comparison of serological tests for the diagnosis of chlamydia psittaci infection of sheep// Veterin. Microbiol. 1993, v.36, №3-4, p.233-252.

132. Martin P.K. A complement-fixation enzym-linked immunosorbent assay as on aid in the serological investigation of anzootic abortion in sheep // Res. Vet. Sei., 1995.v.58, №2, p.193-197.

133. Mitscherlich E. Die Bekämpfung der virusabortes der Schafe// Berl. Munh. Tierarztl. 1965, v.78, p.81-88.

134. Moreno-Iorez T., Tornovist M. Vaccination against acute respiratory enteric disease during calfood-Reports summaries // Intern, congr. dis. cattle, Pel-Aviv, 20-23. 10, 1980, p.388-393.

135. Moulder P., Match T., Kuo C., Schachter T., Storz T. Genus 1 Chlamydia Tones Rake and Stearns 1945, 55 AL, p.729-739. In N.R. Krieg and T. G. Holt (ed), Bergeys manual of systematic bacteriology 1984, v. 1. Williams and Wil-kins, Baltimore.

136. Nevjestie A. Primjena kvalitattivinog u kvantitativinog mikroagglutina-cionhotesta u dijagnostici enzootskod polacaaja avaca// J.Veter.(Tugoslaw), 1965. v. 14, №.3, p.347-358.

137. Newhall V., Batleigcr B., Jones R. Analisis of human serological response to proteins of (".trachomatis// Infect. Immun. 1982, v.38, p.l 181-1 189.

138. Nurminen M., Ecinonen M., Soikku P., Makela P. The genus spesific antigen of chlamydia resemblance to the lipopolysaccharide of enteric bacteria// Science 1983. v. 220, p. 1279-1281.

139. Ovine chlamydiosis: serological survey / Valente C., Gialetti L., Cuteri V., Battistacci I., Bonoflglio T. // Arch. Veterin. Italiano, 1993, v.44, №2, p.51-54.

140. Philips I I.L., Clarkson M.T. Cultura of sheep chlamydia in a sheep fibroblast cell culture// Res. Vet. Sci. 1992, v.53, № 2, p.267-268.

141. Pickett M.A., Everson T.S., Clarke J.N. Chlamydia psittaci ewe abortion agent: complete nucleotide seguence of the major outer membrane protein gene //1 I .MS Microbiol. Lett 1988, v. 55, p. 229-234.

142. Popovici V. Ovine virus abortion I. Incidence and diagnosis II.Epidemiology// Eucr. Inst. Cere. Vet. Bioprep, Past. 1962, v. 1, p. 339-347.

143. Preparation and use of monoclonal antibody to detect Chlamydia psittaci antigen in paraffinembedded tissue section / Bollo E., Biolatti B., Donn A. el.al. // Res. Vet. Sci., 1992, v. 53, p. 393-396.

144. Rapid genotyping of the Chlamydia trachomatis major outer membrane protein by the polymerase chain reaction / Sayada C., Denamur E., Orfila T. el.al. // EEMS Microbiol. Lett. 1991, v.83, p.73-78.

145. Reeve P., Tavcrne T. Some prorerties of the complement-fixing antigens of the agents of trachoma and inclusion blennorrhea and the relationship of the antigens to developmental cycle//J. Gen. Microbiol. 1962, v.27, p.501-508.

146. Riera M.C., Barron A.I. Reaction with hemagglutinin of psittacosis agent in gel diffusion // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1970. - V.135. - №1. - P.594-597.

147. Rubenstein K.E., Schneider R.S., Ullman E. "Homogeneous" enzyme-immunoassay: a new immunochemical technique// Biochem. Biophys. Res. Commun. 1972. - V. 47. - P. 846-851.

148. Salinas T., Caro M.R., Cuello F. Comparison of different serological methods for the determination of antibodies to Chlamydia psittaci in pigeon sera // J. Vet. Med. Series B. 1993, v.40, №4, p.239-244.

149. Salinas T., Sourian A., Cuello F., Rodolakis A. Anticenic diversity of ruminant Chlamydia psittaci strains demonstrated by the inderect microimmuno-lluorescence test with monoclonal antibodies // Vetcr. Microbiol. 1995, v.43, №2/3, p.219-226.

150. Serological survey of Chlamydia psittaci in cows and pigs in 1984 in Japan / Ogata !'., Nagano 1., HasegawaT. et. al. // T. lap. Vet. Med. Ass. 1988, v.42, №1 1, p.799-802.

151. Serological assesment of chlamidial infection in the Koala by a slide EIA technique / IJeno II., Mizino S., Takashima J. et. al. // Austr. Vet. J., 1991, v.68, №. 12, p.393-396.

152. Spears P., Storz T. Biotyp of C.psittaci based of inclusion morphology and responce to diethylaminoethil-dextran and cycloheximide // Infect. Immun. 1979, v.24, p.224-232.

153. I'amura A., Monire G. Preparation and chemical composition of the cell membranes of developmental reticulate forms of meningopneumonitis organisms //.I. Bact. 1967, v.94, p. 1 184-1 188.

154. Taylor-Robinson D., Thomas B.T. Chlamydial diagnosis in the context of epidemiology // Epidemiology 1980, v.30, p. 14.

155. Taylor-Robinson D., Thomas 13.T., Osborne M.F. Evalution enzyme immu-noassay (ehlamydiazym) for detection Chlamydia trachomatis in genital tract specimes //J. Clin. Pathol. 1987, v.40, p. 194-196.

156. Thiele D., Karo M., Krauss 11. Monoclonal antibody based capture Elisa / Flila for the detection of Chlamydia psittaci in veterinary clinical specimens // Zbl. Bacter. 1992, v.277, №1, p.39-48.

157. I. The use of fliiorescein-conjugated monoclonal antibodies cell culture and transmission electromicroscopy to detect Chlamydia psittaci / Biolatti T.,

158. Dagnoll Ci.T.R., Bollo E. el. al. //J. Compar. Pathol. 1991, v. 105, №.1, p. 1726.

159. Vanrompay D., Ducatelle R., Halsebrouck P. Diagnosis of avian chlamy-diosis: speei (Icily of the modified Gimenez staining on smears and comparison of (he sensitivity Chlamydia psittaci // J. Vet. Med. / 1992, v.39, №2, p. 1051 12.

160. Varzques-Cisneros C., Wilsmore A. P., Bollo E. Experimental infections of pregmant sows with ovine Chlamydia psittaci strains // Veter. Microb. 1994, \ .42. №.4, p.383-387.

161. Voller A., Bidwell D.E., Bartlett A. Enzyme immunoassays in diagnostic medicine. Theory and practice // Bull. World. Health Organ. 1976. - V. 53. -N 1. P. 55-65.

162. Wang S.P., Gtrayston J.T. Immunologic relationchip between genital TRIG, lymphogranuloma venerium and related organisms in a new microtiter indirect immunofluorescence test//Am. J. Ophtalmol 1970, v.70, p.367-374.

163. Wang S.P., Grayston J.T. Classification of trachoma virus strains by protection of mice from toxic death // J. Immunol. 1963, v.90, p.849-856.

164. NN. «IIх-.х!.)^''1,'.' '-'I

165. НАБОР ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХЛАМИДИОЗА ОВЕЦ1. ТЕХНИЧЕСКИЕ УСЛОВИЯ

166. ТУ 938800-004 ( на опытную серию в количестве 1000 наборов) Вводятся впервые

167. Срок введения с " 199 5 г.

168. Срок действия с " "199? г.1. СОГЛАСОВАНО:

169. Директор Всероссийского • государственного научно-исследовательского инстистандарти-рикации вепре парат о в1. НИН1995 г.

170. Директор Всероссийского научно-исследовательскогоа экспериментальной1. Г.Ф.Коромыслов199X7.

171. Продолжение' на следующем листе -130

172. МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА

173. ВРЕМЕННОЕ НАСТАВЛЕНИЕ по применению набора для иммуно-ферментной диагностики хламидиоза овец (в порядке широкого производственного опыта 1997-1999 гг.)1. Общие сведения

174. Набор для иммуноферментной диагностики хламидиоза- овец применяют при первичной постановке диагноза и с целью установления' степени распространения инфекции в отаре.

175. При первичной постановш диагноза исследованию подвергают парные сыворотки., взятые в начале заболевания и спустя 10-15 суток.

176. Сыворотки исследуют в разведении 1:200, парные сыворотки в разведениях 1:200, 1:400, 1:800, 1:1600.

177. Набор рассчитан на исследование 350 проб сывороток, в разведении 1:200 или 84 парных сывороток в разведениях 1:200, .1:400, 1:800, 1:1600.

178. Набор содержит 12 компонентов, четырех 96-луночных полистироловых палелей для постановки реакции ИФА, упакованных в одну картонную коробку: