Противоопухолевое действие модифицированных штаммов Streptococcus pyogenes в экспериментальных моделях in vivo и in vitro тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.03, кандидат наук Суворова Мария Александровна

• Суворова Мария Александровна
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Суворова Мария Александровна

ВВЕДЕНИЕ

1. Применение S.pyogenes для лечения онкологических заболеваний (Обзор литературы)

1.1 Основные подходы к лечению онкологических заболеваний с помощью бактерий

1.2 Историческое и современное обоснование лечения рака S.pyogenes

1.3 S. pyogenes - возбудитель заболеваний человека. Основные факторы патогенности

1.3.1 Общая характеристика S. pyogenes

1.3.2 Поверхностный М-белок S. pyogenes

1.3.3 Основные токсины и ферменты, вырабатываемые S. pyogenes

1.4 Возможные механизмы воздействия S. pyogenes на опухолевые клетки

1.4.1 Прямое цитотоксическое воздействие S.pyogenes на опухолевые клетки

1.4.2 Активация плазминогена

1.4.3 Активация иммунной системы

1.4.4 Воздействие высокой температуры

1.4.5 Ингибирующее действие аргининдеиминазы

1.5 Обобщение материала, изложенного в литературном обзоре

2. Материалы и методы исследования

3. Выбор штамма S.pyogenes для проведения экспериментов и разработка способа введения бактерий животным

4. Создание штамма S.pyogenes «Гуров» с блокированной продукцией М-белка и изучение его противоопухолевого действия

4.1 Получение штамма S.pyogenes «Гуров» с блокированной продукцией М-белка

4.1.1 Анализ нуклеотидной последовательности в области гена М-белка

4.1.2.Электротрансформация emm гена S. pyogenes штамма «Гуров» методом электропорации

4.1.3 Анализ полученных мутантных клонов по характеру локализации ДНК вставки в геноме и по стабильности инсерции в область генома

4.1.4 Секвенирование ДНК штамма «Гуров» после трансформации

4.2 Результаты полногеномного секвенирования Streptococcus pyogenes штамм «Гуров» и его мутанта по М-белку «Гуров» emm~

4.3 Сравнение эффективности терапии мышиных перевиваемых опухолей с использованием S. pyogenes штамма «Гуров» и его мутантного штамма, лишенного М-белка в экспериментах in vivo

4.4 Изучение жизнеспособности S.pyogenes штаммов «Гуров» и «Гуров» emm-после введение внутрь опухоли

4.5 Взаимодействие S. pyogenes штамма «Гуров» и его мутанта по М-белку с клетками гепатомы 22а in vitro

4.5.1 Оценка цитотоксического воздействия штаммов «Гуров» и «Гуров» emm- в отношении гепатомы 22а

4.5.2 Оценка адгезии штаммов «Гуров» и «Гуров» emm- в отношении гепатомы 22а

4.6 Взаимодействие штамма «Гуров» S. pyogenes и его мутанта по М-белку с перитонеальными макрофагами интактных мышей in vitro

4.6.1 Фагоцитарная активность макрофагов в отношении штамма S. pyogenes «Гуров» и его мутанта по М-белку

4.6.2 Влияние штамма «Гуров» и его мутанта по М-белку на способность макрофагов продуцировать нитроксидные радикалы in vitro

4.6.3 Влияние штамма S.pyogenes «Гуров» и его мутанта по М-белку на способность макрофагов к продукции супероксид анионов in vitro

4.6.4 Влияние штамма S.pyogenes «Гуров» и его мутанта по М-белку на способность макрофагов к продукции цитокинов in vitro

5. Изучение противоопухолевого действия штамма S.pyogenes М49-16 и его мутанта с инактивированным геном аргининдеиминазы М49-16ёе1ДО

5.1 Исследование цитотоксического действия штамма S.pyogenes M49-16 и его мутанта по гену аргининдеиминазы M49-16delAD в отношении клеток гепатомы 22а in vitro

5.2 Исследование противоопухолевой активности штамма S. pyogenes M49-16 и его мутанта по гену аргининдеиминазы на модели лабораторных животных с саркомой S37

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Противоопухолевое действие модифицированных штаммов Streptococcus pyogenes в экспериментальных моделях in vivo и in vitro»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность исследования. Несмотря на то, что за последнее время достигнут существенный прогресс в области терапии онкологических заболеваний, они продолжают оставаться одной из наиболее распространенных причин смерти в развитых странах. Общепринятые методы, такие как лучевая и химиотерапия, не дают полного излечения, что обуславливает необходимость поиска новых альтернативных методов, одним из которых является лечение опухолей с применением микроорганизмов.

Патогенетические особенности опухолей позволяют им «ускользать» от действия макрофагов и других клеток системы врождённого иммунитета, поэтому одной из магистральных линий поиска способов терапии опухолей является изучение возможностей стимуляции воспалительного процесса и активации клеток его реализующих для лечения злокачественных образований. Для этой цели используют живые, аттенуированные или генетически модифицированные бактерии, которые обладают прямым цитотоксическим эффектом и оказывают воздействие на клетки иммунной системы [11, 12]. Изучение способов и механизмов реализации эффектов действия клеток и веществ с противоопухолевой активностью является важнейшей задачей современной патофизиологии.

Особый интерес вызывает применение для этих целей бактерий Streptococcus pyogenes и продуктов их жизнедеятельности [13-15]. Эти бактерии являются хорошо изученными патогенными микроорганизмами, выделяемыми исключительно из образцов биологического материала человека. Известно, что S. pyogenes могут проявлять как прямые, так и опосредованные цитолитические воздействия на эукариотические клетки, обусловленные наличием различных ферментов и токсинов [16]. Существенным преимуществом использования S. pyogenes является высокая чувствительность стрептококков к пенициллину, которая позволяет легко уничтожить их после терапевтического применения. При этом S. pyogenes могут длительное время существовать в тканях, плохо снабжаемых кислородом, в том числе в злокачественных новообразованиях

[16]. Необходимо отметить, что S. pyogenes относятся к микроорганизмам, которые возможно подвергнуть генно-инженерной модификации, что позволяет инактивировать отдельные гены для изучения их свойств. Таким образом, S.pyogenes являются перспективными микроорганизмами для создания на их основе новых подходов к противоопухолевой терапии.

Степень разработанности темы. S. pyogenes стал впервые использоваться в клинической практике для терапии злокачественных опухолей в конце 19 века американским хирургом W.Coley [17]. Coley отмечал, что наилучшего результата ему удавалось достигнуть, когда в ходе терапии у пациента развивался мощный воспалительный процесс. Для клинического применения был разработан и активно применялся так называемый "токсин Коли", который представлял собой фильтрат термически обработанных S. pyogenes, не содержащий живых бактерий. В 50-60-ых годах XX века было опубликовано несколько статей по применению фильтратов S. pyogenes ("токсина Коли") для лечения экспериментальных опухолей, в которых было показано, что саркома S37 у мышей является опухолью, чувствительной к данному методу терапии [15]. В начале XXI века была опубликована монография, обобщившая успешный многолетний опыт применения S. pyogenes штамма «Гуров» в клинической практике для терапии онкологических заболеваний на базе Пермского государственного медицинского университета [10]. Позднее была продемонстрирована успешная возможность лечения опухоли поджелудочной железы у мышей после однократного введения живой культуры S. pyogenes M49 серотипа штамм №591 внутрь опухоли [14]. Предполагают, что этот эффект обусловлен ответом организма на патоген-ассоциированные молекулярные паттерны (PAMP), присутствующие на микроорганизмах, что может усиливать противоопухолевую защиту организма. Однако, механизмы противоопухолевого действия S. pyogenes до сих пор недостаточно ясны.

При этом также было показано, что живые бактерии оказались более эффективными, чем убитые S. pyogenes [14]. Эти данные доказывают необходимость сохранять жизнеспособность S. pyogenes. Синтез микроорганизмами широкого набора биологически активных веществ, включающих токсины и разнообразные ферменты, в физиологически активном состоянии обуславливает более выраженное противоопухолевое действие живых

бактерий. В частности, показано, что стрептококковый фермент -аргининдеиминаза способен в существенной степени замедлять развитие большой группы опухолевых клеток [18]. Однако существенным недостатком такого рода терапии является высокая токсичность S. pyogenes. С целью снижения потенциальной опасности живых стрептококков для организма нами была поставлена задача сконструировать штамм S. pyogenes, лишенный М-белка -одного из главных факторов патогенности стрептококков.

Цель исследования. Изучить противоопухолевое действие модифицированных штаммов S. pyogenes на экспериментальных моделях in vivo и in vitro и обосновать новые подходы к терапии опухолей с использованием модифицированных бактерий.

Задачи исследования:

1. Для снижения вирулентности живых S. pyogenes штамма «Гуров», используемых при лечении опухолей в эксперименте, получить и охарактеризовать новый мутантный штамм с инактивированным геном М-белка (emm~).

2. Провести сравнительный анализ генетических различий между штаммами Гуров» и «Гуров» emm~ (GURSA1) с помощью полногеномного секвенирования.

3. Оценить динамику опухолевого роста и выживаемость у мышей с перевиваемыми опухолями - гепатомой 22а и саркомой S37 при введении штаммов S. pyogenes «Гуров» и «Гуров» emm~ (GURSA1).

4. Сравнить прямое цитотоксическое воздействие исходного штамма S. pyogenes «Гуров» и его мутанта «Гуров» emm~ (GURSA1) на клетки гепатомы 22а in vitro.

5. Исследовать функциональную активность перитонеальных макрофагов интактных мышей в системе in vitro в ответ на воздействие штаммов S. pyogenes «Гуров» и «Гуров» emm~ (GURSA1).

6. Изучить рост клеток гепатомы 22а в условиях in vitro и выживаемость мышей с саркомой S37 при воздействии штамма S. pyogenes М49-16 с инактивированным геном аргининдеиминазы.

Научная новизна исследования. Впервые получен и охарактеризован новый штамм S. pyogenes с инактивированным геном М-белка, обладающий противоопухолевой активностью в отношении перевиваемых опухолей мышей in vivo и in vitro. В результате полногеномного секвенирования штамма S. pyogenes «Гуров» установлено, что штамм «Гуров» относится к серотипу М111, а не к серотипу М39, как считалось ранее; получены ранее неизвестные данные о строении Mga регулона М111 серотипа. Впервые показано, что инактивация белка М-белка 111 серотипа приводит к повышению адгезивной способности S. pyogenes в отношении клеток гепатомы 22а мышей. Также впервые показано, что инактивация гена белка М111 приводит к снижению антифагоцитарных свойств стрептококков в отношении резидентных перитонеальных макрофагов интактных мышей. Кроме того, инактивация гена белка М111 влияет на способность стрептококков индуцировать синтез цитокинов и усиливать продукцию активных форм кислорода перитонеальными макрофагами интактных мышей. Впервые показан противоопухолевый эффект аргининдеиминазы, продуцируемой S. pyogenes М 49 серотипа, на модели перевиваемой саркомы S37 мышей in vivo.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Для проведения экспериментов по изучению противоопухолевой активности живых S. pyogenes получен и охарактеризован новый изогенный мутант штамма «Гуров» с инактивированным геном М-белка «Гуров» emm~ (GURSA1).

2. Наличие единичной вставки интегративной плазмиды в области кодирования гена emm, обнаруженной при сравнительном полногеномном секвенировании исходного штамма S. pyogenes «Гуров» и его мутанта «Гуров» emm~ (GURSA1), доказывает, что целостность генома мутантного штамма в других областях не нарушена.

3. На моделях перевиваемых опухолей у мышей продемонстрировано подавление опухолевого роста при введении живых бактерии S. pyogenes штамма «Гуров» emm~ (GURSA1) по сравнению с исходным штаммом «Гуров».

4. Бактерии штамма S.pyogenes «Гуров» emm~ (GURSA1) обладают более выраженным прямым цитотоксическим действием в отношении клеток гепатомы 22а in vitro по сравнению с исходным штаммом «Гуров».

5. Стимулирование продукции активных форм кислорода в резидентных перитонеальных макрофагах бактериями S. pyogenes штамма «Гуров» emm~ (GURSA1), в отличие от исходного штамма «Гуров» можно рассматривать как один из механизмов противоопухолевого действия этих бактерий.

Теоретическая и практическая значимость исследования. Представленная диссертационная работа является фундаментальным научным исследованием, результаты которого вносят вклад в изучение прямого и опосредованного цитотоксического воздействия S. pyogenes на злокачественные перевиваемые опухоли у животных. Работа носит экспериментальный характер. Результаты исследования создают основу для дельнейшего изучения механизмов противоопухолевого действия живых S. pyogenes как потенциальных средств терапии опухолевых заболеваний человека. Заявка на изобретение № 2016152829 от 30.12.2015 принята и проходит экспертизу по существу. Штамм S. pyogenes «Гуров» emm~ был депонирован нами и находится в коллекции патогенных штаммов ФБУН ГНУ ПМБ (Оболенск).

Личное участие автора в получении результатов. Автором, совместно с научными руководителями, были спланированы и лично выполнены все экспериментальные исследования in vitro и in vivo, а также проведена статистическая обработка данных. В постановке и решении конкретных задач, организации и выполнении исследований, обработке и интерпретации полученных результатов автору принадлежит ведущая роль.

Публикации по материалам исследования. По теме диссертации опубликовано 5 научных работ, в том числе 4 публикации в рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК при Министерстве образования и науки Российской Федерации, 1 в зарубежном журнале. Принята заявка № 2016152829 от 30.12.2015 на изобретение, проходит экспертизу по существу. Штамм «Гуров» emm~ (GURSA1) депонирован в коллекции патогенных штаммов ФБУН ГНУ ПМБ (Оболенск).

Степень достоверности и апробация результатов. Достоверность результатов, полученных при проведении экспериментов, подтверждается достаточным и репрезентативным объёмом выборки выполненных наблюдений и контрольных исследований и подтверждена адекватными методами статистической обработанных. Методы математической обработки полученных результатов

соответствуют поставленным задачам. Материалы диссертации доложены на XXI, XXII, XXIV, XXVI конгрессах европейского клинического микробиологического общества ECCMID (Милан, Италия, 2011 г.; Лондон, Великобритания, 2012 г., Барселона, Испания, 2014, Амстердам, Нидерланды. 2016), на конференции "Современная диагностика и лечение стрептококков группы А в клинической практике" (Рим, Италия 2013), XIX конгрессе им. Ленсфильд по стрептококкам и стрептококковым заболеваниям (Буэнос-Айрес, Аргентина, 2014), на X, XIV и XV Всероссийских научных форумах с международным участием им. акад. В.И. Иоффе "Дни иммунологии в Санкт-Петербурге" (Санкт-Петербург, Россия 2011, 2015,), на конференции «Клеточные и молекулярные механизмы взаимоотношения опухоли и микроокружения» (Томск, Россия, 2015 г.), на II и III Петербургских международных онкологический форумах «Белые ночи 2016» и «Белые ночи 2017».

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 143 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, результатов работы, заключения, выводов и списка литературы, содержащего 154 источников, 10 отечественных и 144 зарубежных. Текст диссертации иллюстрирован 10 таблицами и 37 рисунками.

1. Применение S.pyogenes для лечения онкологических заболеваний

(Обзор литературы) 1.1Основные подходы к лечению онкологических заболеваний с помощью

бактерий.

Значение исследований в области поиска новых эффективных средств терапии онкологических заболеваний обусловлено их высокой распространенностью и постоянно возрастающей смертностью от рака - как в России, так и в мире.

Несмотря на современные методы диагностики, оперативное лечение, лучевую и химиотерапию, в 2012 г. было зарегистрировано 14,1 млн. вновь диагностированных случаев рака и 8,2 млн. случаев смерти от этого заболевания. Ожидается, что данные показатели будут увеличиваться с ростом населения и продолжительностью жизни [19-22]. Эти неутешительные прогнозы, сформулированные органами эпидемиологического надзора за заболеваемостью, указывают на существующий дефицит средств эффективной терапии рака и обуславливают необходимость поиска альтернативных способов лечения онкологических заболеваний.

Одним из активно развивающихся в настоящее время направлений является разработка способов лечения онкологических заболеваний с помощью различных микроорганизмов (бактерий, грибов, простейших); также для этих целей используются и вирусы. Наибольший интерес исследователей вызывает возможность лечения рака с помощью бактерий, многие из которых обладают различными цитотоксическими факторами, содержат анти-ангиогенные вещества или обладают иммуномодулирующими свойствами.

Гипотеза о том, что живые микроорганизмы могут функционировать как противоопухолевые терапевтические агенты, была впервые выдвинута в середине XIX века. Сообщается, что при раковом процессе из-за возможной гипоксии и некроза доступ к опухолевой ткани с помощью традиционных методов лечения

оказывается затруднительным [23, 24]. Вместе с этим некоторые бактерии могут активно мигрировать из сосудистой сети, проникать вглубь опухолевой ткани и накапливаться в ней [25, 26].

К настоящему времени были попытки изучить три класса анаэробных и факультативных анаэробных бактерий для использования в противораковой терапии: бифидобактерии, факультативные внутриклеточные бактерии, строго анаэробные бактерии [27]. Например, анаэробные бактерии из рода клостридий (Clostridium histolyticium, Clostridium tetani, Clostridium oncolyticum, Clostridium sporogenes, Clostridium acetobutylicum), которые колонизируют организм только в областях, лишенных кислорода, могут активно проникать глубоко в ткань опухоли и накапливаться в ней после систематических инъекций [19, 28]. Анаэробные, а также микроаэрофильные бактерии, такие как стрептококки, способны размножаться в областях гипоксии или некроза и непосредственно убивать опухолевые клетки [21, 29]. Благодаря их способности колонизировать солидные опухоли, плохо снабжаемые кислородом по сравнению со здоровыми тканям организма, бактерии могут быть использованы для лечения онкологических заболеваний [30]. Другим аргументом в пользу использования бактерий для терапии опухолевых заболеваний является особенность ряда опухолей, в первую очередь солидного характера, образовывать в процессе нарастания участки некроза с большим содержанием низкомолекулярных метаболитов, являющихся бактериальными хемоаттрактантами. По совокупности вышеперечисленных факторов, некоторые бактерии могут активно находить и непосредственно проникать в опухолевую ткань, пролиферируя в ней [31] .

В современной клинической практике в первую линию стандартной терапии опухолей мочевого пузыря входит использование вакцины Bacillus Calmette-Guerin (BCG). Положительные результаты ее применения были опубликованы еще в 1976 году у пациентов с раком мочевого пузыря [32].

В настоящее время в литературе активно обсуждается вопрос о бактериях, используемых для доставки и экспрессии в опухолевой ткани противораковых агентов [33, 34]. Так, бактерии могут быть искусственно связаны с некоторыми противораковыми средствами для достижения более успешного терапевтического эффекта [16, 35, 36]. Были изучены два преобладающих механизма: прямая экспрессия противоопухолевых белков и передача эукариотических векторов экспрессии в инфицированные раковые клетки. Доказано, что с данной целью могут быть использованы четыре категории противоопухолевых средств: белки с физиологической активностью против опухолей, цитотоксические и анти-ангиогенные агенты, а также ферменты, которые превращают нефункциональное пролекарство в противоопухолевое лекарственное средство [37, 38]. В таблице 1 представлены некоторые из вышеперечисленных веществ с доказанной активностью против клеток опухолей различной специфичности.

Таблица 1. Вещества, выделяемые бактериями, которые обладают противоопухолевыми свойствами

Вещество Вид бактерии Механизм действия Влияние на клетки опухоли Ссылка

Азурин Pseudomon as aeruginosa Повышает содержание р53 в ядре Нарушение пролиферации, апоптоз, противоангиоген ный эффект Bernardes et al., 2013

Экзотоксин А P.aeruginos a Нарушение белкового синтеза ЛОР рибозилирование цитоплазменного фактора элонгации 2 Risberg et al., 2011

Энтеротоксин Clostridium Нарушение Прямое и Pahle J,

СРЕ perfringens клеточной селективное Aumann J,

мембраны онколитическое Kobelt D,

как действие за счет Walther W.

следствие связывания Use of the

взаимодейств токсина с Pore-

ия с поверхностными Forming

клаудином клаудинами Clostridium

клеток опухоли, perfringens

нарушение Enterotoxin

пролиферации (CPE) for

Suicide Gene

Therapy.

Methods Mol

Biol. 2015;

1317:69-85.

English

DPI, Santin

AD. 2013

Дифтерийный Corynebact Нарушение ДБР Martarelli et

токсин erium белкового рибозилирование al., 2009

diphteriae синтеза цитоплазменного

фактора

элонгации 2,

апоптоз

Пеп27анал2 Streptococc Разрушение Нарушение Lee et al

us клеточной пролиферации и 2005

pneumoniae мембраны индукция

гидрофобной апоптоза

частью

пептида

Энтап Enterococc Нарушение Нарушение Tomasz M.

us spp. пролифераци пролиферации, Karpinskil

и и аутофагия, and Anna K.

клеточного апоптоз Szkaradkiewi

цикла в фазе c, 2013

01

IL-2, TNF-a Mycobacter Активация Снижение Microorganis

and INF-y ium bovis продукции цитокинов пролифирации опухолевых клеток ms and cancer: quest for a therapy. Chakrabarty AM1. J Bacteriol. 20 03

В качестве активных противораковых агентов, пригодных для доставки бактериями в опухоль, к настоящему моменту были исследованы различные гены, кодирующие цитотоксины, цитокины и факторы роста, а также опухолевые антигены [39]. Кроме этого, в последнее время количество потенциально полезных противораковых агентов увеличивается из-за новых разработок в комбинаторном синтезе и появления метагеномики, которая является неограниченным источником информации о метаболитах, имеющих противораковые свойства [40]. Бактерии обладают способностью вырабатывать и поставлять вещества, которые могут сочетаться с определенными противораковыми препаратами [41].

Многие виды бактерий могут проявлять способность непосредственно убивать опухолевые клетки за счет размножения в опухолевой ткани или же

опосредованно за счет стимуляции защитных механизмов организма хозяина, относящихся как к врожденному, так и к приобретенному иммунитету. Различные противораковые механизмы представлены на рисунке.

Рисунок 1. Некоторые механизмы противоопухолевого действия бактерий

[42]

1.2 Историческое и современное обоснование лечения рака S.pyogenes

Стрептококковые заболевания известны на протяжении веков. В первоначальных трудах Гиппократа от IV века до нашей эры описывается рожа, а также симптомы детской лихорадки. Обзоры многих средневековых ученых были связаны с изучением воспаления горла или миндалин. Джованни Филиппо Инграссиас, сицилийский анатом и практик, в 1553 г. дал первое описание

скарлатины, назвав ее «россалия». Он также сообщил, что эта «россалия» или сыпь отличается от кори. В 1578 г. Жан Коттяр из Пуатье дал первое окончательное описание скарлатины во Франции как «Общая усталость, головная боль, покраснение глаз, боль в горле и лихорадка. Пурпура появилась на второй или третий день, сопровождаясь бредом и болезненностью горла». Даниэль Сеннерт описал эпидемию в Виттенберге в начале семнадцатого столетия и был первым, кто описал скарлатиновую десквамацию, артрит. Термин «скарлатина» впервые был введен в медицинскую литературу в 1675 г. Сиденхэмом, который идентифицировал его как отдельную болезнь от других экзантем, особенно кори.

Первое описание стрептококковой инфекции было приписано австрийскому хирургу Теодору Бильроту в 1874 г., когда он описал состояние больного при рожистых и раневых инфекциях. В 1879 г., когда Луи Пастер выделил этот микроорганизм из маток и крови женщины с послеродовой лихорадкой, он также продемонстрировал, что стрептококк является этиологическим агентом, ответственным за заболевание, которое вызвало наибольшую смертность женщин и новорожденных в то время. Скорее всего, Пастер выделил стрептококки группы В (Streptococcus agalactiae), которые и сейчас являются частой причиной заболеваний у рожениц и смерти новорожденных. Фридрих Юлиус Розенбах в 1884 г., который исследовал бактерии, выделенные из гнойных образований, обнаружил другой вид стрептококков, который получил название Streptococcus pyogenes.

Любопытно, что на ранних этапах изучения стрептококков группы А уже была показана способность данных бактерий замедлять развитие опухолей. Так рожа, вызываемая гемолитическим стрептококком группы А, по утверждению многих ученых, способна излечить тяжелые хронические заболевания и в том числе злокачественные новообразования. Немецкий ученый Буш в 1866 г. впервые описал пример полного исчезновения множественной саркомы после случайного рожистого воспаления. Наибольшее число подобных наблюдений относится к практической деятельности основоположника бактериальной

токсинотерапии американского ученого доктора W. Coley, который в 1891 г. продемонстрировал успешное применение вакцины, изготовленной из живых Streptococcus pyogenes, для лечения саркомы человека [43]. Однако лечение живыми бактериями оказалось крайне сложным и даже рискованным, учитывая возможные инфекционные осложнения. В связи с тем же W. Coley был разработан препарат, называемый "токсин W. Coley". Его получали путем длительной культивации Streptococcus pyogenes и Serratia marcescens с последующим фильтрованием и прогреванием с целью удаления жизнеспособных бактерий [44]. Данный препарат достаточно долго с успехом применялся в онкологической практике.

В 50-е годы XX века были получены эксперментальные подтверждения противоопухолевого действия "токсина Coley" на животных. Различные препараты, полученные из культур Serratia marcescens и Streptococcus pyogenes, исследователи тестировали в семи спонтанных, индуцированных и трансплантированных опухолях мышей и саркоме Рауса у цыплят. Установлено, что токсины эффективны против карциномы Кребса-2, вызывающей регрессию хорошо известных опухолей. Они оказались неэффективными против саркомы 180, лимфосаркомы Гарднера 6C3HED, карциномы 755, вызванной метилхолантреном, и спонтанной опухоли молочной железы, а также против индуцированной вирусом саркомы Рауса у цыплят. Были описаны и обсуждены гистопатологические изменения, вызванные бактериальными токсинами в опухолях и животных с карциномой Кребса-2. Рассмотрена возможная роль феномена Шварцмана в механизме терапии опухолей бактериальным токсином [45].

В современной научной литературе также имеются данные по введению стрептококков животным с опухолями. Однократное применение живых бактерий в опухоли Panc02 приводило к полной регрессии опухоли у мышей. Этот противоопухолевый эффект сопровождался массивной инфильтрацией лейкоцитов в опухоли, а также значительным и устойчивым повышением

системных уровней провоспалительных цитокинов, фактора некроза опухоли а и интерлейкина 6. В полученных результатах была отмечена прямая цитотоксичекая активность по отношению к опухолевым клеткам, а также инфильтрация опухолей клетками иммунной системы. Полученные данные показывают, что применение живых S.pyogenes может быть перспективной новой стратегией лечения пациентов с раком поджелудочной железы, что требует дальнейшего изучения [14].

В Японии на основе инактивированных Streptococcus pyogenes был создан препарат ОК-432, обладающий мощным иммуномодулирующем свойством и противораковой активностью [46]. ОК-432 или пицибанил, убитый пенициллином Streptococcus pyogenes, в настоящее время используется для лечения лимфангиом и карцином in vitro. Была исследована роль мононуклеарных фагоцитов, включая очищенные моноциты в иммунном ответе на ОК-432. Выделения Macrophage Inflammatory Proteins (MIP-1a) / ß и Monocyte Chemoattractant Protein-1 (MCP-1) оценивали в цельной крови, мононуклеарных клетках периферической крови и очищенных моноцитах, после стимуляции in vitro OK-432 с или без соблюдения режима лечения в течение 24 часов. В результате исследования OK-432 стимулировал MNPs секрецию MCP-1 и MIP-1a / ß у здоровых людей и у пациентов с плоскоклеточным раком головы и шеи [47].

Причин, по которым стрептококки столь часто использовались для борьбы с опухолями, несколько: Streptococcus pyogenes продуцируют широкий набор токсинов и внеклеточных ферментов, прекрасно развиваются в бескислородных условиях, способны как внеклеточному, так и внутриклеточному существованию. Streptococcus pyogenes в настоящее время рассматривается в качестве наиболее перспективного бактериального препарата для противораковой терапии.

1.3 S. pyogenes - возбудитель заболеваний человека. Основные факторы

патогенности

1.3.1 Общая характеристика S. pyogenes

Streptococcus pyogenes это вид факультативно анаэробных ß-гемолитических бактерий [48].

По классификации R. Lancefield, S. pyogenes является стрептококком серогруппы A (СГА). Клетки Streptococcus pyogenes имеют сферическую форму. Род стрептококки (Streptococcus) входит в семейство Streptococcaceae, порядок Lactobacillales, класс Bacilli, тип Firmicutes, царство Bacteria [49].

Streptococcus pyogenes является разновидностью внеклеточных бактерий, состоящих из неподвижных и неспоровых кокков. S. pyogenes обычно колонизируют область носоглотки человека, вызывая фарингиты, однако в ряде случаев они колонизируют поверхность кожи, вызывая стрептодермии. Streptococcus pyogenes - один из наиболее распространенных возбудителей бактериальных инфекций человека, который вызывает такие заболевания как скарлатина, менингит, тонзиллит, импетиго, бактериальная пневмония, эндокардит, рожистое воспаление, флегмоны, миозит, артрит, синдром токсического шока [50]. S.pyogenes является основной причиной фаринготонзиллитов у детей младшего школьного возраста и единственной причиной постинфекционных заболеваний - ревматизма и острого гломерулонефрита [51, 52].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Суворова Мария Александровна, 2018 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Атретханы, К.С.Н., М.С. Друцкая. Миелоидные супрессорные клетки и провоспалительные цитокины как мишени терапии рака / Атретханы, К.С.Н., М.С. Друцкая // Биохимия. - 2016. - Vol. 81 № 11. - p. 1520-1529.

2. Боровиков, В.П. STATISTICA: искусство анализа данных на компьютере. Для профессионалов / Боровиков, В.П. - СПб.: Питер, 2001. - 656 с.

3. Боровиков, В.П., И.П. Боровиков. STATISTICA - Статистический анализ и обработка данных в среде Windows / Боровиков, В.П., И.П. Боровиков -M.: Филин, 1997. - 608 с.

4. Грабовская, К.Б., Г.Ф. Леонтьева, Л.Ф. Мерингова, et al. Протективные свойства некоторых поверхностных белков стрептококков группы / Грабовская, К.Б., Г.Ф. Леонтьева, Л.Ф. Мерингова, et al. // Журн. микробиол. - 2007. - Vol. 5 - p. 44-50.

5. Каркищенко, Н.Н. Руководство по лабораторным животным и альтернативным моделям в биомедицинских исследованиях: учебное пособие для системы медицинского и фармацевтического послевузовского образования / Каркищенко, Н.Н. - M.: Профиль, 2010. -358 с.

6. Киселева, Е.П., А.В. Полевщиков. Метод автоматизированного учета НСТ-теста / Киселева, Е.П., А.В. Полевщиков // Клиническая лабораторная диагностика. - 1994. - Vol. № 4. - p. 27-29.

7. Реброва, О.В. Статистический анализ медицинских данных с помощью пакета программ «Статистика» / Реброва, О.В. - M.: Медиа Сфера, 2002. -380 с.

8. Суворова, М.А., А.Н. Цапиева, Н.В. Дуплик, et al. Конструирование штамма стрептококка, мутантного по гену М-белка / Суворова, М.А., А.Н. Цапиева, Н.В. Дуплик, et al. // Медицинский академический журнал. -2016. - Vol. № 4. - p. 235-236.

9. Трухачева, Н.В. Математическая статистика в медико-биологических исследованиях с применением пакета STATISTICA / Трухачева, Н.В. -M.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. - 384 с.

10. Черешнев, В.А., А.А. Морова, И.Н. Рямзина. Биологические законы и жизнеспособность человека (метод многофункциональной восстановительной биотерапии) / Черешнев, В.А., А.А. Морова, И.Н. Рямзина - Пермь: Пермский ГСХА, 2006. - 215 с.

11. Josephson, I.R., N. Sperelakis. Developmental increases in the inwardly-rectifying K+ current of embryonic chick ventricular myocytes / Josephson, I.R., N. Sperelakis // Biochim Biophys Acta. - 1990. - Vol. 1052 № 1. - p. 123-7.

12. Jessy, T. Immunity over inability: The spontaneous regression of cancer / Jessy, T. // J Nat Sci Biol Med. - 2011. - Vol. 2 № 1. - p. 43-9.

13. Hoption Cann, S.A., J.P. van Netten, C. van Netten. Dr William Coley and tumour regression: a place in history or in the future / Hoption Cann, S.A., J.P. van Netten, C. van Netten // Postgrad Med J. - 2003. - Vol. 79 № 938. - p. 672-80.

14. Maletzki, C., M. Linnebacher, B. Kreikemeyer, et al. Pancreatic cancer regression by intratumoural injection of live Streptococcus pyogenes in a syngeneic mouse model / Maletzki, C., M. Linnebacher, B. Kreikemeyer, et al. // Gut. - 2008. - Vol. 57 № 4. - p. 483-91.

15. Havas, H.F., M.E. Groesbeck, A.J. Donnelly. Mixed bacterial toxins in the treatment of tumors. I. Methods of preparation and effects on normal and sarcoma 37-bearing mice / Havas, H.F., M.E. Groesbeck, A.J. Donnelly // Cancer Res. - 1958. - Vol. 18 № 2. - p. 141-8.

16. Forbes, N.S. Profile of a bacterial tumor killer / Forbes, N.S. // Nat Biotechnol.

- 2006. - Vol. 24 № 12. - p. 1484-5.

17. Nauts, H.C., G.A. Fowler, F.H. Bogatko. A review of the influence of bacterial infection and of bacterial products (Coley's toxins) on malignant tumors in man; a critical analysis of 30 inoperable cases treated by Coley's mixed toxins, in which diagnosis was confirmed by microscopic examination selected for special study / Nauts, H.C., G.A. Fowler, F.H. Bogatko // Acta Med Scand Suppl. - 1953. - Vol. 276 - p. 1-103.

18. Fiedler, T., M. Strauss, S. Hering, et al. Arginine deprivation by arginine deiminase of Streptococcus pyogenes controls primary glioblastoma growth in vitro and in vivo / Fiedler, T., M. Strauss, S. Hering, et al. // Cancer Biol Ther.

- 2015. - Vol. 16 № 7. - p. 1047-55.

19. Liu, S., X. Xu, X. Zeng, et al. Tumor-targeting bacterial therapy: A potential treatment for oral cancer (Review) / Liu, S., X. Xu, X. Zeng, et al. // Oncol Lett. - 2014. - Vol. 8 № 6. - p. 2359-2366.

20. Wei, M.Q., K.A. Ellem, P. Dunn, et al. Facultative or obligate anaerobic bacteria have the potential for multimodality therapy of solid tumours / Wei, M.Q., K.A. Ellem, P. Dunn, et al. // Eur J Cancer. - 2007. - Vol. 43 № 3. - p. 490-6.

21. Liu, S.C., N.P. Minton, A.J. Giaccia, et al. Anticancer efficacy of systemically delivered anaerobic bacteria as gene therapy vectors targeting tumor hypoxia/necrosis / Liu, S.C., N.P. Minton, A.J. Giaccia, et al. // Gene Ther. -2002. - Vol. 9 № 4. - p. 291-6.

22. Fuchita, M., A. Ardiani, L. Zhao, et al. Bacterial cytosine deaminase mutants created by molecular engineering show improved 5-fluorocytosine-mediated cell killing in vitro and in vivo / Fuchita, M., A. Ardiani, L. Zhao, et al. // Cancer Res. - 2009. - Vol. 69 № 11. - p. 4791-9.

23. Parker, R.C., H.C. Plummer, et al. Effect of histolyticus infection and toxin on transplantable mouse tumors / Parker, R.C., H.C. Plummer, et al. // Proc Soc Exp Biol Med. - 1947. - Vol. 66 № 2. - p. 461-7.

24. Brown, J.M. Tumor hypoxia in cancer therapy / Brown, J.M. // Methods Enzymol. - 2007. - Vol. 435 - p. 297-321.

25. Theys, J., S. Barbe, W. Landuyt, et al. Tumor-specific gene delivery using genetically engineered bacteria / Theys, J., S. Barbe, W. Landuyt, et al. // Curr Gene Ther. - 2003. - Vol. 3 № 3. - p. 207-21.

26. Brown, J.M., W.R. Wilson. Exploiting tumour hypoxia in cancer treatment / Brown, J.M., W.R. Wilson // Nat Rev Cancer. - 2004. - Vol. 4 № 6. - p. 43747.

27. Vassaux, G., J. Nitcheu, S. Jezzard, et al. Bacterial gene therapy strategies / Vassaux, G., J. Nitcheu, S. Jezzard, et al. // J Pathol. - 2006. - Vol. 208 № 2. -p. 290-8.

28. Barbe, S., L. Van Mellaert, J. Anne. The use of clostridial spores for cancer treatment / Barbe, S., L. Van Mellaert, J. Anne // J Appl Microbiol. - 2006. -Vol. 101 № 3. - p. 571-8.

29. St Jean, A.T., M. Zhang, N.S. Forbes. Bacterial therapies: completing the cancer treatment toolbox / St Jean, A.T., M. Zhang, N.S. Forbes // Curr Opin Biotechnol. - 2008. - Vol. 19 № 5. - p. 511-7.

30. Ganai, S., R.B. Arenas, J.P. Sauer, et al. In tumors Salmonella migrate away from vasculature toward the transition zone and induce apoptosis / Ganai, S., R.B. Arenas, J.P. Sauer, et al. // Cancer Gene Ther. - 2011. - Vol. 18 № 7. - p. 457-66.

31. Loeffler, M., G. Le'Negrate, M. Krajewska, et al. Attenuated Salmonella engineered to produce human cytokine LIGHT inhibit tumor growth / Loeffler, M., G. Le'Negrate, M. Krajewska, et al. // Proc Natl Acad Sci U S A. - 2007. -Vol. 104 № 31. - p. 12879-83.

32. Kucerova, P., M. Cervinkova. Spontaneous regression of tumour and the role of microbial infection--possibilities for cancer treatment / Kucerova, P., M. Cervinkova // Anticancer Drugs. - 2016. - Vol. 27 № 4. - p. 269-77.

33. Bernardes, N., A.M. Chakrabarty, A.M. Fialho. Engineering of bacterial strains and their products for cancer therapy / Bernardes, N., A.M. Chakrabarty, A.M. Fialho // Appl Microbiol Biotechnol. - 2013. - Vol. 97 № 12. - p. 5189-99.

34. Danino, T., J. Lo, A. Prindle, et al. In Vivo Gene Expression Dynamics of Tumor-Targeted Bacteria / Danino, T., J. Lo, A. Prindle, et al. // ACS Synth Biol. - 2012. - Vol. 1 № 10. - p. 465-470.

35. Schmidt-Wolf, G.D., I.G. Schmidt-Wolf. Non-viral and hybrid vectors in human gene therapy: an update / Schmidt-Wolf, G.D., I.G. Schmidt-Wolf // Trends Mol Med. - 2003. - Vol. 9 № 2. - p. 67-72.

36. Mager, D.L. Bacteria and cancer: cause, coincidence or cure? A review / Mager, D.L. // J Transl Med. - 2006. - Vol. 4 - p. 14.

37. Gardlik, R., M. Behuliak, R. Palffy, et al. Gene therapy for cancer: bacteria-mediated anti-angiogenesis therapy / Gardlik, R., M. Behuliak, R. Palffy, et al. // Gene Ther. - 2011. - Vol. 18 № 5. - p. 425-31.

38. Jain, K.K. Use of bacteria as anticancer agents / Jain, K.K. // Expert Opin Biol Ther. - 2001. - Vol. 1 № 2. - p. 291-300.

39. Morille, M., C. Passirani, A. Vonarbourg, et al. Progress in developing cationic vectors for non-viral systemic gene therapy against cancer / Morille, M., C. Passirani, A. Vonarbourg, et al. // Biomaterials. - 2008. - Vol. 29 № 24-25. -p. 3477-96.

40. Forbes, N.S. Engineering the perfect (bacterial) cancer therapy / Forbes, N.S. // Nat Rev Cancer. - 2010. - Vol. 10 № 11. - p. 785-94.

41. Minton, N.P., M.L. Mauchline, M.J. Lemmon, et al. Chemotherapeutic tumour targeting using clostridial spores / Minton, N.P., M.L. Mauchline, M.J. Lemmon, et al. // FEMS Microbiol Rev. - 1995. - Vol. 17 № 3. - p. 357-64.

42. Nair, N., T. Kasai, M. Seno. Bacteria: prospective savior in battle against cancer / Nair, N., T. Kasai, M. Seno // Anticancer Res. - 2014. - Vol. 34 № 11. - p. 6289-96.

43. Coley, W.B. The treatment of malignant tumors by repeated inoculations of erysipelas. With a report of ten original cases. 1893 / Coley, W.B. // Clin Orthop Relat Res. - 1991. - Vol. № 262. - p. 3-11.

44. Maletzki, C., U. Klier, W. Obst, et al. Reevaluating the concept of treating experimental tumors with a mixed bacterial vaccine: Coley's Toxin / Maletzki, C., U. Klier, W. Obst, et al. // Clin Dev Immunol. - 2012. - Vol. 2012 - p. 230625.

45. Havas, H.F., A.J. Donnelly. Mixed bacterial toxins in the treatment of tumors. IV. Response of methylcholanthrene-induced, spontaneous, and transplanted tumors in mice / Havas, H.F., A.J. Donnelly // Cancer Res. - 1961. - Vol. 21 -p. 17-25.

46. Chen, I.J., C.F. Yen, K.J. Lin, et al. Vaccination with OK-432 followed by TC-1 tumor lysate leads to significant antitumor effects / Chen, I.J., C.F. Yen, K.J. Lin, et al. // Reprod Sci. - 2011. - Vol. 18 № 7. - p. 687-94.

47. Olsnes, C., H. Stavang, K. Brokstad, et al. Chemokines are secreted by monocytes following OK-432 (lyophilized Streptococcus pyogenes) stimulation / Olsnes, C., H. Stavang, K. Brokstad, et al. // BMC Immunol. -2009. - Vol. 10 - p. 6.

48. O'Loughlin, R.E., A. Roberson, P.R. Cieslak, et al. The epidemiology of invasive group A streptococcal infection and potential vaccine implications: United States, 2000-2004 / O'Loughlin, R.E., A. Roberson, P.R. Cieslak, et al. // Clin Infect Dis. - 2007. - Vol. 45 № 7. - p. 853-62.

49. Nasser, W., S.B. Beres, R.J. Olsen, et al. Evolutionary pathway to increased virulence and epidemic group A Streptococcus disease derived from 3,615 genome sequences / Nasser, W., S.B. Beres, R.J. Olsen, et al. // Proc Natl Acad Sci U S A. - 2014. - Vol. 111 № 17. - p. E1768-76.

50. Totolian, A.A. [Past and present of streptococcus pyogenes: some pathogenic factors and their genetic determination] / Totolian, A.A. // Vestn Ross Akad Med Nauk. - 2015. - Vol. № 1. - p. 63-9.

51. Stevens, D.L., A.E. Bryant. Severe Group A Streptococcal Infections / Stevens, D.L., A.E. Bryant - Oklahoma City (OK): University of Oklahoma Health Sciences Center., 2016. - 29 p.

52. Burova, L., P. Pigarevsky, N. Duplik, et al. Immune complex binding Streptococcus pyogenes type M12/emm12 in experimental glomerulonephritis / Burova, L., P. Pigarevsky, N. Duplik, et al. // J Med Microbiol. - 2013. - Vol. 62 № Pt 9. - p. 1272-80.

53. Carapetis, J.R., A.C. Steer, E.K. Mulholland, et al. The global burden of group A streptococcal diseases / Carapetis, J.R., A.C. Steer, E.K. Mulholland, et al. // Lancet Infect Dis. - 2005. - Vol. 5 № 11. - p. 685-94.

54. Bisno, A.L., M.O. Brito, C.M. Collins. Molecular basis of group A streptococcal virulence / Bisno, A.L., M.O. Brito, C.M. Collins // Lancet Infect Dis. - 2003. - Vol. 3 № 4. - p. 191-200.

55. Ferretti, J.J., W.M. McShan, D. Ajdic, et al. Complete genome sequence of an M1 strain of Streptococcus pyogenes / Ferretti, J.J., W.M. McShan, D. Ajdic, et al. // Proc Natl Acad Sci U S A. - 2001. - Vol. 98 № 8. - p. 4658-63.

56. Kansal, R.G., V. Datta, R.K. Aziz, et al. Dissection of the molecular basis for hypervirulence of an in vivo-selected phenotype of the widely disseminated M1T1 strain of group A Streptococcus bacteria / Kansal, R.G., V. Datta, R.K. Aziz, et al. // J Infect Dis. - 2010. - Vol. 201 № 6. - p. 855-65.

57. Canchaya, C., F. Desiere, W.M. McShan, et al. Genome analysis of an inducible prophage and prophage remnants integrated in the Streptococcus pyogenes strain SF370 / Canchaya, C., F. Desiere, W.M. McShan, et al. // Virology. - 2002. - Vol. 302 № 2. - p. 245-58.

58. Totolian, A.A., L.A. Burova. [Fc-receptor proteins of Streptococcus pyogenes and pathogenesis of post-infection complications] / Totolian, A.A., L.A. Burova // Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol. - 2014. - Vol. № 3. - p. 7890.

59. Nitzsche, R., M. Rosenheinrich, B. Kreikemeyer, et al. Streptococcus pyogenes triggers activation of the human contact system by streptokinase / Nitzsche, R., M. Rosenheinrich, B. Kreikemeyer, et al. // Infect Immun. - 2015. - Vol. 83 № 8. - p. 3035-42.

60. Horstmann, R.D., H.J. Sievertsen, M. Leippe, et al. Role of fibrinogen in complement inhibition by streptococcal M protein / Horstmann, R.D., H.J.

Sievertsen, M. Leippe, et al. // Infect Immun. - 1992. - Vol. 60 № 12. - p. 5036-41.

61. Thern, A., L. Stenberg, B. Dahlback, et al. Ig-binding surface proteins of Streptococcus pyogenes also bind human C4b-binding protein (C4BP), a regulatory component of the complement system / Thern, A., L. Stenberg, B. Dahlback, et al. // J Immunol. - 1995. - Vol. 154 № 1. - p. 375-86.

62. Horstmann, R.D., H.J. Sievertsen, J. Knobloch, et al. Antiphagocytic activity of streptococcal M protein: selective binding of complement control protein factor H / Horstmann, R.D., H.J. Sievertsen, J. Knobloch, et al. // Proc Natl Acad Sci U S A. - 1988. - Vol. 85 № 5. - p. 1657-61.

63. Ly, D., J.M. Taylor, J.A. Tsatsaronis, et al. Plasmin(ogen) acquisition by group A Streptococcus protects against C3b-mediated neutrophil killing / Ly, D., J.M. Taylor, J.A. Tsatsaronis, et al. // J Innate Immun. - 2014. - Vol. 6 № 2. - p. 240-50.

64. Nordenfelt, P., S. Bauer, P. Lonnbro, et al. Phagocytosis of Streptococcus pyogenes by all-trans retinoic acid-differentiated HL-60 cells: roles of azurophilic granules and NADPH oxidase / Nordenfelt, P., S. Bauer, P. Lonnbro, et al. // PLoS One. - 2009. - Vol. 4 № 10. - p. e7363.

65. Pahlman, L.I., M. Morgelin, J. Eckert, et al. Streptococcal M protein: a multipotent and powerful inducer of inflammation / Pahlman, L.I., M. Morgelin, J. Eckert, et al. // J Immunol. - 2006. - Vol. 177 № 2. - p. 1221-8.

66. Metzgar, D., A. Zampolli. The M protein of group A Streptococcus is a key virulence factor and a clinically relevant strain identification marker / Metzgar, D., A. Zampolli // Virulence. - 2011. - Vol. 2 № 5. - p. 402-12.

67. Fiedler, T., B. Kreikemeyer, V. Sugareva, et al. Impact of the Streptococcus pyogenes Mga regulator on human matrix protein binding and interaction with eukaryotic cells / Fiedler, T., B. Kreikemeyer, V. Sugareva, et al. // Int J Med Microbiol. - 2010. - Vol. 300 № 4. - p. 248-58.

68. Liu, G., W. Feng, D. Li, et al. The Mga Regulon but Not Deoxyribonuclease Sda1 of Invasive M1T1 Group A Streptococcus Contributes to In Vivo Selection of CovRS Mutations and Resistance to Innate Immune Killing Mechanisms / Liu, G., W. Feng, D. Li, et al. // Infect Immun. - 2015. - Vol. 83 № 11. - p. 4293-303.

69. Hondorp, E.R., S.C. Hou, L.L. Hause, et al. PTS phosphorylation of Mga modulates regulon expression and virulence in the group A streptococcus / Hondorp, E.R., S.C. Hou, L.L. Hause, et al. // Mol Microbiol. - 2013. - Vol. 88 № 6. - p. 1176-93.

70. Pahlman, L.I., A.I. Olin, J. Darenberg, et al. Soluble M1 protein of Streptococcus pyogenes triggers potent T cell activation / Pahlman, L.I., A.I. Olin, J. Darenberg, et al. // Cell Microbiol. - 2008. - Vol. 10 № 2. - p. 404-14.

71. Chen, C.C., P.P. Cleary. Complete nucleotide sequence of the streptococcal C5a peptidase gene of Streptococcus pyogenes / Chen, C.C., P.P. Cleary // J Biol Chem. - 1990. - Vol. 265 № 6. - p. 3161-7.

72. Walker, M.J., T.C. Barnett, J.D. McArthur, et al. Disease manifestations and pathogenic mechanisms of Group A Streptococcus / Walker, M.J., T.C. Barnett, J.D. McArthur, et al. // Clin Microbiol Rev. - 2014. - Vol. 27 № 2. - p. 264301.

73. Edwards, R.J., G.W. Taylor, M. Ferguson, et al. Specific C-terminal cleavage and inactivation of interleukin-8 by invasive disease isolates of Streptococcus pyogenes / Edwards, R.J., G.W. Taylor, M. Ferguson, et al. // J Infect Dis. -2005. - Vol. 192 № 5. - p. 783-90.

74. Zinkernagel, A.S., A.M. Timmer, M.A. Pence, et al. The IL-8 protease SpyCEP/ScpC of group A Streptococcus promotes resistance to neutrophil killing / Zinkernagel, A.S., A.M. Timmer, M. A. Pence, et al. // Cell Host Microbe. - 2008. - Vol. 4 № 2. - p. 170-8.

75. Kurupati, P., C.E. Turner, I. Tziona, et al. Chemokine-cleaving Streptococcus pyogenes protease SpyCEP is necessary and sufficient for bacterial dissemination within soft tissues and the respiratory tract / Kurupati, P., C.E. Turner, I. Tziona, et al. // Mol Microbiol. - 2010. - Vol. 76 № 6. - p. 1387-97.

76. Hynes, W.L., A.R. Dixon, S.L. Walton, et al. The extracellular hyaluronidase gene (hylA) of Streptococcus pyogenes / Hynes, W.L., A.R. Dixon, S.L. Walton, et al. // FEMS Microbiol Lett. - 2000. - Vol. 184 № 1. - p. 109-12.

77. Akesson, P., A.G. Sjoholm, L. Bjorck. Protein SIC, a novel extracellular protein of Streptococcus pyogenes interfering with complement function / Akesson, P., A.G. Sjoholm, L. Bjorck // J Biol Chem. - 1996. - Vol. 271 № 2. - p. 1081-8.

78. Fernie-King, B.A., D.J. Seilly, C. Willers, et al. Streptococcal inhibitor of complement (SIC) inhibits the membrane attack complex by preventing uptake of C567 onto cell membranes / Fernie-King, B.A., D.J. Seilly, C. Willers, et al. // Immunology. - 2001. - Vol. 103 № 3. - p. 390-8.

79. Kasper, K.J., W. Xi, A.K. Rahman, et al. Molecular requirements for MHC class II alpha-chain engagement and allelic discrimination by the bacterial superantigen streptococcal pyrogenic exotoxin C / Kasper, K.J., W. Xi, A.K. Rahman, et al. // J Immunol. - 2008. - Vol. 181 № 5. - p. 3384-92.

80. Lappin, E., A.J. Ferguson. Gram-positive toxic shock syndromes / Lappin, E., A.J. Ferguson // Lancet Infect Dis. - 2009. - Vol. 9 № 5. - p. 281-90.

81. Hondorp, E.R., K.S. McIver. The Mga virulence regulon: infection where the grass is greener / Hondorp, E.R., K.S. McIver // Mol Microbiol. - 2007. - Vol. 66 № 5. - p. 1056-65.

82. Ikebe, T., M. Ato, T. Matsumura, et al. Highly frequent mutations in negative regulators of multiple virulence genes in group A streptococcal toxic shock

syndrome isolates / Ikebe, T., M. Ato, T. Matsumura, et al. // PLoS Pathog. -2010. - Vol. 6 № 4. - p. e1000832.

83. Symington, D.A., J.P. Arbuthnott. Effects of staphylococcus alpha-toxin and streptolysin S on the oxidation of succinate by ascites tumour cells / Symington, D.A., J.P. Arbuthnott // J Med Microbiol. - 1969. - Vol. 2 № 4. -p. 495-505.

84. Pahle, J., W. Walther. Bacterial Toxins for Oncoleaking Suicidal Cancer Gene Therapy / Pahle, J., W. Walther // Recent Results Cancer Res. - 2016. - Vol. 209 - p. 95-110.

85. Zacharski, L.R., V.P. Sukhatme. Coley's toxin revisited: immunotherapy or plasminogen activator therapy of cancer? / Zacharski, L.R., V.P. Sukhatme // J Thromb Haemost. - 2005. - Vol. 3 № 3. - p. 424-7.

86. Wang, H., R. Lottenberg, M.D. Boyle. Analysis of the interaction of group A streptococci with fibrinogen, streptokinase and plasminogen / Wang, H., R. Lottenberg, M.D. Boyle // Microb Pathog. - 1995. - Vol. 18 № 3. - p. 153-66.

87. Lottenberg, R., L.E. DesJardin, H. Wang, et al. Streptokinase-producing streptococci grown in human plasma acquire unregulated cell-associated plasmin activity / Lottenberg, R., L.E. DesJardin, H. Wang, et al. // J Infect Dis. - 1992. - Vol. 166 № 2. - p. 436-40.

88. Sverdrup, B., M. Blomback, E. Borglund, et al. Blood coagulation and fibrinolytic systems in patients with erysipelas and necrotizing fasciitis / Sverdrup, B., M. Blomback, E. Borglund, et al. // Scand J Infect Dis. - 1981. -Vol. 13 № 1. - p. 29-36.

89. Ooe, K., H. Nakada, H. Udagawa, et al. Severe pulmonary hemorrhage in patients with serious group A streptococcal infections: report of two cases / Ooe, K., H. Nakada, H. Udagawa, et al. // Clin Infect Dis. - 1999. - Vol. 28 № 6. - p. 1317-9.

90. Huang, T.T., H. Malke, J.J. Ferretti. Heterogeneity of the streptokinase gene in group A streptococci / Huang, T.T., H. Malke, J.J. Ferretti // Infect Immun. -1989. - Vol. 57 № 2. - p. 502-6.

91. McCoy, H.E., C.C. Broder, R. Lottenberg. Streptokinases produced by pathogenic group C streptococci demonstrate species-specific plasminogen activation / McCoy, H.E., C.C. Broder, R. Lottenberg // J Infect Dis. - 1991. -Vol. 164 № 3. - p. 515-21.

92. Zacharski, L.R., D.L. Ornstein, E.C. Gabazza, et al. Treatment of malignancy by activation of the plasminogen system / Zacharski, L.R., D.L. Ornstein, E.C. Gabazza, et al. // Semin Thromb Hemost. - 2002. - Vol. 28 № 1. - p. 5-18.

93. Collen, D. The plasminogen (fibrinolytic) system / Collen, D. // Thromb Haemost. - 1999. - Vol. 82 № 2. - p. 259-70.

94. Gately, S., P. Twardowski, M.S. Stack, et al. The mechanism of cancer-mediated conversion of plasminogen to the angiogenesis inhibitor angiostatin /

Gately, S., P. Twardowski, M.S. Stack, et al. // Proc Natl Acad Sci U S A. -1997. - Vol. 94 № 20. - p. 10868-72.

95. Merchan, J.R., B. Chan, S. Kale, et al. In vitro and in vivo induction of antiangiogenic activity by plasminogen activators and captopril / Merchan, J.R., B. Chan, S. Kale, et al. // J Natl Cancer Inst. - 2003. - Vol. 95 № 5. - p. 38899.

96. Soff, G.A. Angiostatin and angiostatin-related proteins / Soff, G.A. // Cancer Metastasis Rev. - 2000. - Vol. 19 № 1-2. - p. 97-107.

97. O'Reilly, M.S., L. Holmgren, Y. Shing, et al. Angiostatin: a novel angiogenesis inhibitor that mediates the suppression of metastases by a Lewis lung carcinoma / O'Reilly, M.S., L. Holmgren, Y. Shing, et al. // Cell. - 1994. - Vol. 79 № 2. - p. 315-28.

98. Romanovskaia, A.A., V.N. Nikandrov. [Effects of plasminogen, streptokinase and their equimolar complexes with pyruvate kinase on the human neuroblastoma IMR-32 cells] / Romanovskaia, A.A., V.N. Nikandrov // Tsitologiia. - 2007. - Vol. 49 № 8. - p. 656-63.

99. Bobek, V., D. Pinterova, K. Kolostova, et al. Streptokinase increases the sensitivity of colon cancer cells to chemotherapy by gemcitabine and cis-platine in vitro / Bobek, V., D. Pinterova, K. Kolostova, et al. // Cancer Lett. -2006. - Vol. 237 № 1. - p. 95-101.

100. Decker, W.K., A. Safdar. Bioimmunoadjuvants for the treatment of neoplastic and infectious disease: Coley's legacy revisited / Decker, W.K., A. Safdar // Cytokine Growth Factor Rev. - 2009. - Vol. 20 № 4. - p. 271-81.

101. Trieb, K., A. Sztankay, A. Amberger, et al. Hyperthermia inhibits proliferation and stimulates the expression of differentiation markers in cultured thyroid carcinoma cells / Trieb, K., A. Sztankay, A. Amberger, et al. // Cancer Lett. -1994. - Vol. 87 № 1. - p. 65-71.

102. Kurts, C., R.M. Sutherland, G. Davey, et al. CD8 T cell ignorance or tolerance to islet antigens depends on antigen dose / Kurts, C., R.M. Sutherland, G. Davey, et al. // Proc Natl Acad Sci U S A. - 1999. - Vol. 96 № 22. - p. 127037.

103. Schuurhuis, D.H., N. Fu, F. Ossendorp, et al. Ins and outs of dendritic cells / Schuurhuis, D.H., N. Fu, F. Ossendorp, et al. // Int Arch Allergy Immunol. -2006. - Vol. 140 № 1. - p. 53-72.

104. Udono, H., P.K. Srivastava. Heat shock protein 70-associated peptides elicit specific cancer immunity / Udono, H., P.K. Srivastava // J Exp Med. - 1993. -Vol. 178 № 4. - p. 1391-6.

105. Multhoff, G., C. Botzler, M. Wiesnet, et al. A stress-inducible 72-kDa heat-shock protein (HSP72) is expressed on the surface of human tumor cells, but not on normal cells / Multhoff, G., C. Botzler, M. Wiesnet, et al. // Int J Cancer. - 1995. - Vol. 61 № 2. - p. 272-9.

106. Botzler, C., R. Issels, G. Multhoff. Heat-shock protein 72 cell-surface expression on human lung carcinoma cells in associated with an increased sensitivity to lysis mediated by adherent natural killer cells / Botzler, C., R. Issels, G. Multhoff // Cancer Immunol Immunother. - 1996. - Vol. 43 № 4. -p. 226-30.

107. Basu, S., P.K. Srivastava. Fever-like temperature induces maturation of dendritic cells through induction of hsp90 / Basu, S., P.K. Srivastava // Int Immunol. - 2003. - Vol. 15 № 9. - p. 1053-61.

108. Shi, H., T. Cao, J.E. Connolly, et al. Hyperthermia enhances CTL cross-priming / Shi, H., T. Cao, J.E. Connolly, et al. // J Immunol. - 2006. - Vol. 176 № 4. - p. 2134-41.

109. Cusumano, Z.T., M.G. Caparon. Citrulline protects Streptococcus pyogenes from acid stress using the arginine deiminase pathway and the F1Fo-ATPase / Cusumano, Z.T., M.G. Caparon // J Bacteriol. - 2015. - Vol. 197 № 7. - p. 1288-96.

110. Cunin, R., N. Glansdorff, A. Pierard, et al. Biosynthesis and metabolism of arginine in bacteria / Cunin, R., N. Glansdorff, A. Pierard, et al. // Microbiol Rev. - 1986. - Vol. 50 № 3. - p. 314-52.

111. Ascierto, P.A., S. Scala, G. Castello, et al. Pegylated arginine deiminase treatment of patients with metastatic melanoma: results from phase I and II studies / Ascierto, P.A., S. Scala, G. Castello, et al. // J Clin Oncol. - 2005. -Vol. 23 № 30. - p. 7660-8.

112. Izzo, F., P. Marra, G. Beneduce, et al. Pegylated arginine deiminase treatment of patients with unresectable hepatocellular carcinoma: results from phase I/II studies / Izzo, F., P. Marra, G. Beneduce, et al. // J Clin Oncol. - 2004. - Vol. 22 № 10. - p. 1815-22.

113. Dillon, B.J., V.G. Prieto, S.A. Curley, et al. Incidence and distribution of argininosuccinate synthetase deficiency in human cancers: a method for identifying cancers sensitive to arginine deprivation / Dillon, B.J., V.G. Prieto, S.A. Curley, et al. // Cancer. - 2004. - Vol. 100 № 4. - p. 826-33.

114. Ni, Y., U. Schwaneberg, Z.H. Sun. Arginine deiminase, a potential anti-tumor drug / Ni, Y., U. Schwaneberg, Z.H. Sun // Cancer Lett. - 2008. - Vol. 261 № 1. - p. 1-11.

115. Starikova, E.A., A.V. Sokolov, A.Y. Vlasenko, et al. Biochemical and biological activity of arginine deiminase from Streptococcus pyogenes M22 / Starikova, E.A., A.V. Sokolov, A.Y. Vlasenko, et al. // Biochem Cell Biol. -2016. - Vol. 94 № 2. - p. 129-37.

116. Starikova, E.A., A.M. Lebedeva, L.A. Burova, et al. [Regulation of endothelial cells functions by ultrasonic supernatant of Streptococcus pyogenes] / Starikova, E.A., A.M. Lebedeva, L.A. Burova, et al. // Tsitologiia. - 2012. -Vol. 54 № 1. - p. 49-57.

117. Maletzki, C., J. Emmrich. Inflammation and immunity in the tumor environment / Maletzki, C., J. Emmrich // Dig Dis. - 2010. - Vol. 28 № 4-5. -p. 574-8.

118. Suvorov, A.N., E.M. Polyakova, W.M. McShan, et al. Bacteriophage content of M49 strains of Streptococcus pyogenes / Suvorov, A.N., E.M. Polyakova, W.M. McShan, et al. // FEMS Microbiol Lett. - 2009. - Vol. 294 № 1. - p. 915.

119. Suvorov, A., J. Kok, G. Venema. Transformation of group A streptococci by electroporation / Suvorov, A., J. Kok, G. Venema // FEMS Microbiology Letters. - 1988. - Vol. 56 № 1. - p. 95-99.

120. Bankevich, A., S. Nurk, D. Antipov, et al. SPAdes: a new genome assembly algorithm and its applications to single-cell sequencing / Bankevich, A., S. Nurk, D. Antipov, et al. // J Comput Biol. - 2012. - Vol. 19 № 5. - p. 455-77.

121. Edgar, R.C. Search and clustering orders of magnitude faster than BLAST / Edgar, R.C. // Bioinformatics. - 2010. - Vol. 26 № 19. - p. 2460-1.

122. Magoc, T., S.L. Salzberg. FLASH: fast length adjustment of short reads to improve genome assemblies / Magoc, T., S.L. Salzberg // Bioinformatics. -2011. - Vol. 27 № 21. - p. 2957-63.

123. Migliorini, P., G. Corradin, S.B. Corradin. Macrophage NO2- production as a sensitive and rapid assay for the quantitation of murine IFN-gamma / Migliorini, P., G. Corradin, S.B. Corradin // J Immunol Methods. - 1991. -Vol. 139 № 1. - p. 107-14.

124. Nakagawa, I., K. Kurokawa, A. Yamashita, et al. Genome sequence of an M3 strain of Streptococcus pyogenes reveals a large-scale genomic rearrangement in invasive strains and new insights into phage evolution / Nakagawa, I., K. Kurokawa, A. Yamashita, et al. // Genome Res. - 2003. - Vol. 13 № 6a. - p. 1042-55.

125. Green, N.M., S. Zhang, S.F. Porcella, et al. Genome sequence of a serotype M28 strain of group a streptococcus: potential new insights into puerperal sepsis and bacterial disease specificity / Green, N.M., S. Zhang, S.F. Porcella, et al. // J Infect Dis. - 2005. - Vol. 192 № 5. - p. 760-70.

126. Courtney, H.S., D.L. Hasty, J.B. Dale. Molecular mechanisms of adhesion, colonization, and invasion of group A streptococci / Courtney, H.S., D.L. Hasty, J.B. Dale // Ann Med. - 2002. - Vol. 34 № 2. - p. 77-87.

127. Hagman, M.M., J.B. Dale, D.L. Stevens. Comparison of adherence to and penetration of a human laryngeal epithelial cell line by group A streptococci of various M protein types / Hagman, M.M., J.B. Dale, D.L. Stevens // FEMS Immunol Med Microbiol. - 1999. - Vol. 23 № 3. - p. 195-204.

128. Podbielski, A., N. Schnitzler, P. Beyhs, et al. M-related protein (Mrp) contributes to group A streptococcal resistance to phagocytosis by human

granulocytes / Podbielski, A., N. Schnitzler, P. Beyhs, et al. // Mol Microbiol. -1996. - Vol. 19 № 3. - p. 429-41.

129. Cunningham, M.W. Pathogenesis of group A streptococcal infections / Cunningham, M.W. // Clin Microbiol Rev. - 2000. - Vol. 13 № 3. - p. 470511.

130. Areschoug, T., J. Waldemarsson, S. Gordon. Evasion of macrophage scavenger receptor A-mediated recognition by pathogenic streptococci / Areschoug, T., J. Waldemarsson, S. Gordon // Eur J Immunol. - 2008. - Vol. 38 № 11. - p. 3068-79.

131. Staali, L., S. Bauer, M. Morgelin, et al. Streptococcus pyogenes bacteria modulate membrane traffic in human neutrophils and selectively inhibit azurophilic granule fusion with phagosomes / Staali, L., S. Bauer, M. Morgelin, et al. // Cell Microbiol. - 2006. - Vol. 8 № 4. - p. 690-703.

132. Nathan, C.F., J.B. Hibbs, Jr. Role of nitric oxide synthesis in macrophage antimicrobial activity / Nathan, C.F., J.B. Hibbs, Jr. // Curr Opin Immunol. -1991. - Vol. 3 № 1. - p. 65-70.

133. Farias-Eisner, R., M.P. Sherman, E. Aeberhard, et al. Nitric oxide is an important mediator for tumoricidal activity in vivo / Farias-Eisner, R., M.P. Sherman, E. Aeberhard, et al. // Proc Natl Acad Sci U S A. - 1994. - Vol. 91 № 20. - p. 9407-11.

134. Goldmann, O., I. Sastalla, M. Wos-Oxley, et al. Streptococcus pyogenes induces oncosis in macrophages through the activation of an inflammatory programmed cell death pathway / Goldmann, O., I. Sastalla, M. Wos-Oxley, et al. // Cell Microbiol. - 2009. - Vol. 11 № 1. - p. 138-55.

135. Sigurdardottir, T., V. Bjorck, H. Herwald, et al. M1 protein from streptococcus pyogenes induces nitric oxide-mediated vascular hyporesponsiveness to phenylephrine: involvement of toll-like receptor activation / Sigurdardottir, T., V. Bjorck, H. Herwald, et al. // Shock. - 2010. - Vol. 34 № 1. - p. 98-104.

136. Hafeman, D.G., Z.J. Lucas. Polymorphonuclear leukocyte-mediated, antibody-dependent, cellular cytotoxicity against tumor cells: dependence on oxygen and the respiratory burst / Hafeman, D.G., Z.J. Lucas // J Immunol. - 1979. - Vol. 123 № 1. - p. 55-62.

137. Landskron, G., M. De la Fuente, P. Thuwajit, et al. Chronic inflammation and cytokines in the tumor microenvironment / Landskron, G., M. De la Fuente, P. Thuwajit, et al. // J Immunol Res. - 2014. - Vol. 2014 - p. 149185.

138. Zou, W., N.P. Restifo. T(H)17 cells in tumour immunity and immunotherapy / Zou, W., N.P. Restifo // Nat Rev Immunol. - 2010. - Vol. 10 № 4. - p. 24856.

139. Barin, J.G., G.C. Baldeviano, M.V. Talor, et al. Macrophages participate in IL-17-mediated inflammation / Barin, J.G., G.C. Baldeviano, M.V. Talor, et al. // Eur J Immunol. - 2012. - Vol. 42 № 3. - p. 726-36.

140. Numasaki, M., J. Fukushi, M. Ono, et al. Interleukin-17 promotes angiogenesis and tumor growth / Numasaki, M., J. Fukushi, M. Ono, et al. // Blood. - 2003. - Vol. 101 № 7. - p. 2620-7.

141. Kariks, J., V.J. McGovern. Impaired spermatogenesis and tubular fibrosis in testes of New Guineans: a post-mortem study / Kariks, J., V.J. McGovern // Pathology. - 1971. - Vol. 3 № 1. - p. 13-20.

142. Narain, B. Effect of ultra-violet rays on the life cycle stages of Bunostomum trigonocephalum (Rudolphi 1808) / Narain, B. // Anat Anz. - 1971. - Vol. 128 № 3. - p. 209-15.

143. Price, J.D., J. Schaumburg, C. Sandin, et al. Induction of a regulatory phenotype in human CD4+ T cells by streptococcal M protein / Price, J.D., J. Schaumburg, C. Sandin, et al. // J Immunol. - 2005. - Vol. 175 № 2. - p. 67784.

144. Feun, L., M. You, C.J. Wu, et al. Arginine deprivation as a targeted therapy for cancer / Feun, L., M. You, C.J. Wu, et al. // Curr Pharm Des. - 2008. - Vol. 14 № 11. - p. 1049-57.

145. Synakiewicz, A., T. Stachowicz-Stencel, E. Adamkiewicz-Drozynska. The role of arginine and the modified arginine deiminase enzyme ADI-PEG 20 in cancer therapy with special emphasis on Phase I/II clinical trials / Synakiewicz, A., T. Stachowicz-Stencel, E. Adamkiewicz-Drozynska // Expert Opin Investig Drugs. - 2014. - Vol. 23 № 11. - p. 1517-29.

146. Watanabe, Y., J. Shimizu, Y. Hashizume, et al. Changes in immunological parameters in lung cancer patients undergoing immunotherapy with streptococcal preparation OK-432 / Watanabe, Y., J. Shimizu, Y. Hashizume, et al. // Biotherapy. - 1990. - Vol. 2 № 3. - p. 235-45.

147. Horiuchi, M., K. Sato, I. Nakarai, et al. [Clinical significance of Su-polysaccharide (Su-PS) skin test in patients with primary lung cancer treated with chemotherapy and administration of OK-432, with special reference to the therapeutic effect and prognosis] / Horiuchi, M., K. Sato, I. Nakarai, et al. // Gan To Kagaku Ryoho. - 1990. - Vol. 17 № 3 Pt 2. - p. 468-74.

148. Monden, T., H. Morimoto, M. Murotani, et al. [Intratumoral injection of OK-432 in conjunction with fibrinogen greatly enhances antitumor effect on colorectal carcinomas] / Monden, T., H. Morimoto, M. Murotani, et al. // Nihon Geka Gakkai Zasshi. - 1991. - Vol. 92 № 1. - p. 31-6.

149. Monden, T., H. Morimoto, T. Shimano, et al. Use of fibrinogen to enhance the antitumor effect of OK-432. A new approach to immunotherapy for colorectal carcinoma / Monden, T., H. Morimoto, T. Shimano, et al. // Cancer. - 1992. -Vol. 69 № 3. - p. 636-42.

150. Naito, H., M.M. Ziegler, A. Miyakawa, et al. Establishment of animal liver metastatic model for C-1300 murine neuroblastoma and immunotherapy for it

using OK-432, streptococcus preparation / Naito, H., M.M. Ziegler, A. Miyakawa, et al. // J Surg Res. - 1992. - Vol. 52 № 1. - p. 79-84.

151. Podbielski, A., I. Zarges, A. Flosdorff, et al. Molecular characterization of a major serotype M49 group A streptococcal DNase gene (sdaD) / Podbielski, A., I. Zarges, A. Flosdorff, et al. // Infect Immun. - 1996. - Vol. 64 № 12. - p. 5349-56.

152. Eyal, O., J. Jadoun, A. Bitler, et al. Role of M3 protein in the adherence and internalization of an invasive Streptococcus pyogenes strain by epithelial cells / Eyal, O., J. Jadoun, A. Bitler, et al. // FEMS Immunol Med Microbiol. - 2003. - Vol. 38 № 3. - p. 205-13.

153. Ryan, P.A., B. Juncosa. Group A Streptococcal Adherence / Ryan, P.A., B. Juncosa - Oklahoma City (OK): University of Oklahoma Health Sciences Center, 2016. - 25 p.

154. Dramsi, S., H. Bierne. Spatial Organization of Cell Wall-Anchored Proteins at the Surface of Gram-Positive Bacteria / Dramsi, S., H. Bierne // Curr Top Microbiol Immunol. - 2017. - Vol. 404 - p. 177-201.