Производные камфоры как противогриппозные соединения широкого спектра действия тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.02, доктор наук Зарубаев Владимир Викторович
Зарубаев Владимир Викторович
доктор наук
2019
- Специальность ВАК РФ03.02.02
- Количество страниц 247
Оглавление диссертации доктор наук Зарубаев Владимир Викторович
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Вирус гриппа и его жизненный цикл
1.2 Строение и фузогенная активность гемагглютинина
1.3 Препараты для профилактики и терапии гриппа
1.4 Противогриппозные соединения - ингибиторы гемагглютинина
1.4.1. Ингибиторы связывания с рецептором
1.4.2. Ингибиторы фузогенной активности HA
1.5 Ингибиторы протонного насоса M2
1.5.1. BL-1743 и его аналоги
1.5.2. Каркасные гомологи адамантана и их производные
1.6 Биологическая активность камфоры и её производных
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Химические соединения
2.2. Вирусы и клетки
2.3. Изучение противовирусной активности соединений
2.4. Титрование вирусов
2.5. Исследование токсичности соединений in vitro
2.6. Оценка токсичности соединений in vivo
2.7. Оценка противовирусной активности соединений in vivo
2.8. Гистологические исследования
2.9. Изучение стадии вирусной репродукции - мишени действия соединений
2.10. Изучение воздействия соединений на гемагглютинин вируса гриппа
2.11. Компьютерное моделирование взаимодействия препаратов с рецептором
2.12. Получение устойчивых к камфецину вариантов вируса гриппа
2.13. Молекулярно-биологические методы
2.14. Электронно-микроскопические исследования
2.15. Статистическая обработка результатов
ГЛАВА 3. ПРОТИВОВИРУСНАЯ АКТИВНОСТЬ ПРОИЗВОДНЫХ КАМФОРЫ
3.1. Закономерности противовирусной активности производных камфоры по результатам первичного скрининга соединений in vitro
3.2. Изучение спектра противовирусной активности производных камфоры
3.3. Определение уровня и спектра противогриппозной активности камфецина в опытах на животных
3.4. Влияние камфецина на морфогенез экспериментальной летальной гриппозной инфекции у белых мышей
3.5. Оптимизация режима и способа применения камфецина для терапии экспериментальной гриппозной инфекции
3.6. Токсикологическая характеристика камфецина
3.7. Заключение
ГЛАВА 4. ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМА ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТИ ПРОИЗВОДНЫХ КАМФОРЫ
4.1. Изучение стадии вирусного цикла - мишени действия производных камфоры
4.2. Активность производных камфоры в отношении гемагглютинина вируса гриппа
4.3. Влияние производных камфоры на ультраструктуру клеток в ходе морфогенеза гриппозной инфекции in vitro
4.4. Оценка сайта связывания производных камфоры с вирусным гемагглютинином
4.5. Заключение
ГЛАВА 5. СЕЛЕКЦИЯ И ИЗУЧЕНИЕ ВИРУСНЫХ ШТАММОВ, РЕЗИСТЕНТНЫХ К КАМФЕЦИНУ
5.1. Селекция камфецин-резистентного варианта вируса in vitro
5.2. Исследование свойств камфецин-резистентного вируса гриппа
5.3. Идентификация мутаций, обусловливающих камфецин-резистентность
5.4. Заключение
ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
Рекомендованный список диссертаций по специальности «Вирусология», 03.02.02 шифр ВАК
Изучение противовирусной активности синтетических производных цитизина в отношении вирусов гриппа и парагриппа2021 год, кандидат наук Федорова Виктория Александровна
Исследование активности производных усниновой кислоты в отношении вируса гриппа2014 год, кандидат наук Штро, Анна Андреевна
Активность азоло-адамантанов в отношении вируса гриппа2011 год, кандидат биологических наук Анфимов, Павел Михайлович
Механизм вирусспецифического действия препарата Арбидол2005 год, доктор биологических наук Ленева, Ирина Анатольевна
Хинолизидиновые алкалоиды растений семейства FABACEAE в синтезе новых противогриппозных агентов2020 год, кандидат наук Петрова Полина Радиковна
Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Производные камфоры как противогриппозные соединения широкого спектра действия»
Актуальность темы
Грипп представляет собой широко распространённую во всем мире респираторную инфекцию. Он вызывает ежегодные эпидемии, быстро распространяющиеся из страны в страну, вовлекая в тяжёлых случаях (пандемии) значительную часть человеческой популяции земного шара. Большая часть случаев заболевания и смерти приходится на долю детей и пожилых людей, а также пациентов с уже имеющимися патологиями, в том числе иммунодефицитами (Monto, 2008; Schanzer et al., 2006). B соответствии с последними данными CDC и ВОЗ ежегодно около 650 000 смертей связывают с сезонным гриппом (CDC, 2017; WHO, 2017). Примерно 90% летальных исходов гриппа приходится на долю пациентов старше 65 лет (Cocoros et al., 2010).
Вакцинация, согласно стандартам ВОЗ, является первой и наиболее
важной линией защиты против гриппа. Вторым способом контроля
распространения гриппозной инфекции является применение
химиопрепаратов, снижающих уровень репродукции вируса, а следовательно,
скорость его распространения и длительность и тяжесть заболевания у
конкретного пациента. Тем не менее, особенности генома и механизмов
репликации вируса гриппа дают возможность быстрого накопления мутаций.
Это приводит к селекции вариантов, не соответствующих антителам,
выработанным на исходный вирус после вакцинации. Такая способность
приводит к ускользанию от специфического иммунного ответа, антигенному
дрейфу вируса и объясняет, почему штаммовый состав вакцин требует
ежегодного обновления (Osterhaus et al., 2011). С другой стороны, благодаря
этим особенностям сохраняется постоянный риск появления новых
пандемических вариантов вируса, а также преодоления вирусом межвидового
барьера, как это случилось с вирусами гриппа птиц H5N1, H7N7, H9N2 и H7N9.
Смертность от высокопатогенного вируса H5N1, например, составляет 59%
(WHO, 2012). При несовпадении антигенных свойств вакцинного штамма с
циркулирующими штаммами эффективность вакцинации многократно
снижается, и она перестаёт играть сдерживающую роль в распространении
4
эпидемии. Кроме того, согласно рекомендациям ВОЗ, существует доля людей с противопоказаниями к вакцинации вследствие онкологических заболеваний, дисбаланса иммунной системы различного генеза, дети до 6-месячного возраста и др. В этом случае химиотерапия гриппа становится единственным способом как лечения конкретного пациента, так и сдерживания распространения инфекции в популяции. Для этой цели в настоящее время существуют несколько препаратов. Препараты первого поколения -производные адамантана амантадин и ремантадин - блокируют вирусный ионный канал M2. Второе поколение средств терапии гриппа представлено ингибиторами нейраминидазы, из которых в России зарегистрированы два -осельтамивир (тамифлю™) и занамивир (реленза™). Обе группы препаратов имеют свои недостатки. Для ремантадина это узкий спектр активности (он активен против вирусов гриппа A, но не против гриппа B), для осельтамивира - большое количество побочных эффектов, таких как тошнота, неврологические расстройства, а также недостаточно высокая эффективность, в особенности среди групп риска (Michiels et al., 2013). Рибавирин, нуклеозидный аналог, обладающий широким спектром противовирусной активности, имеет большое количество побочных действий (http: //www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2011/021511s023lbl.pdf), ещё один аналог нуклеозидов, T-705 (фавипиравир, Avigan™), в России не зарегистрирован.
Высокая скорость мутаций в сочетании с коротким жизненным циклом вируса приводит к быстрой выработке лекарственной резистентности, что может серьёзно снизить эффективность химиотерапии. Повсеместное использование этиотропных противогриппозных лекарств, их безрецептурный статус и, как следствие - частое несоблюдение дозировок и режимов применения, в том числе в качестве профилактических средств, приводит к появлению устойчивых разновидностей вируса и их распространению в человеческой популяции.
Следует отметить, что, хотя применение химиопрепаратов и способствует появлению резистентных штаммов, они могут появляться и
независимо от использования лекарств (Lackenby et al., 2008). Тем не менее, опасность развития и распространения лекарственной резистентности является одной из основных угроз при разработке средств специфической терапии гриппозной инфекции. Например, противогриппозные препараты первого поколения - амантадин и ремантадин - начали утрачивать свою эффективность в середине 90-х годов вследствие выработки вирусной резистентности. На сегодняшний день выявление чувствительного к ним штамма является скорее исключением, чем правилом - практически 100% изолятов вируса являются ремантадин-устойчивыми (Dawood et al., 2009).
В ранних работах, посвящённых блокаторам слияния и проникновения в клетку, утверждалось, что резистентность к новому тогда препарату осельтамивиру- ингибитору вирусной нейраминидазы - не представляет проблемы (Deshpande et al., 2001). События 2007-2009 г. показали, однако, что это не так. Спустя почти десять лет после начала использования препарата, за полтора года (ноябрь 2007 - март 2009) устойчивость к осельтамивиру в пределах подтипа H1N1 выросла с 0 до 90-98 % во всех регионах земного шара (Samson et al., 2013). Если бы не появление пандемического штамма A(H1N1)pdm09, который оказался, с одной стороны, достаточно агрессивным, чтобы вытеснить все ранее циркулировавшие вирусы, а с другой стороны -чувствительным к осельтамивиру, это сильно осложнило бы ситуацию со средствами химиотерапии гриппа.
Вызывает серьёзные опасения тот факт, что вирусы, устойчивые к осельтамивиру, зафиксированы среди особо опасных вирусов гриппа птиц с пандемическими потенциями (H5N1, H9N2, H7N9), сочетающие высокую патогенность с лекарственной устойчивостью (Ke et al., 2017; Gillman, 2016). Следовательно, выработка резистентности к осельтамивиру не исключает высокой патогенности возбудителя. Таким образом, мутации в обеих мишенях для этиотропной терапии гриппа - и белке M2, и нейраминидазе -позволили вирусу гриппа выработать резистентность к ингибиторам без потери трансмиссивности и высокой патогенности. С этой точки зрения в качестве мишеней чрезвычайно актуально использовать вирусные белки по
возможности максимально консервативные и жизненно важные для репродукции вируса, модификации которых под давлением отбора на лекарственную устойчивость были бы летальны для возбудителя или достигались бы ценой снижения интенсивности его размножения и/или патогенности.
В этом смысле одной из актуальных мишеней такого рода является гемагглютинин, а точнее - его стеблевая часть, обладающая большей консервативностью по сравнению с вариабельным глобулярным доменом. Сам по себе гемагглютинин представляет собой исключительно важный компонент вируса, необходимый для прикрепления вириона к клетке и последующего слияния мембран вируса и эндосомы. Важным преимуществом лигандов к гемагглютинину является блокирование вирусной инфекции на её раннем этапе - проникновении вируса внутрь клетки. Этим они отличаются от ингибиторов нейраминидазы тамифлю и релензы, которые действуют на следующем этапе, катализируя процесс высвобождения вирусных частиц из инфицированных клеток.
Дополнительными аспектами, которые следует принимать во внимание при разработке новых фармакологических препаратов, являются, во-первых, их биодоступность, и во-вторых, стоимость их синтеза и как следствие - практическая доступность лекарственной формы для широких слоёв общества. Принятые для лечения гриппа в России этиотропные препараты осельтамивир и занамивир удовлетворяют этим критериям лишь в малой степени. Занамивир имеет очень низкую биодоступность, вследствие чего проявляет свою активность лишь при местном - ингаляционном -применении. Это, в свою очередь, не позволяет использовать его при тяжёлом течении гриппа, в реанимационных отделениях, у пациентов, находящихся на искусственной вентиляции лёгких и внешней оксигенации. Осельтамивир обладает большей биодоступностью, однако его стоимость, как и стоимость занамивира, достаточно высока (^п, 2013).
С этой точки зрения лидирующие позиции в качестве прототипов для новых препаратов занимают природные, в первую очередь, растительные,
вторичные метаболиты и их производные (Martinez et al., 2015). Благодаря особенностям химической структуры, природные соединения являются уникальной базой для дизайна новых биологически активных соединений, в том числе и противовирусных средств. Будучи продуктами деятельности биологических ферментных комплексов, они по определению являются веществами, приспособленными для участия в биологических процессах, в том числе и с точки зрения стереоизомерии. Доступность растительного сырья в необходимых количествах также служит дополнительным преимуществом этого класса соединений. Тем не менее, противогриппозных препаратов на основе природных структур практически не разработано. Соединением - производным природного медиатора гистамина является ингавирин, позиционируемый как противовирусный препарат широкого спектра действия. Несмотря на его эффективность в экспериментах на животных и в клинике, этот препарат не является этиотропным, а оказывает опосредованное ингибирующее действие на репродукцию вируса. Стоимость его также высока, а кроме того, этот препарат следует с осторожностью применять пациентам с нарушениями гемопоэза, почечной фильтрации, а также детям до 13 лет.
Ещё одним препаратом на основе доступного природного сырья является глицирризиновая кислота, входящая в состав препарата «Цитовир-3», позиционирующегося как средство для лечения гриппа. Подобно ингавирину, глицирризиновая кислота не является этиотропным средством, и эффективность её низка.
Одной из наиболее распространённых групп растительных вторичных метаболитов являются производные терпенов, таких, например, как камфора. Несмотря на большое химическое разнообразие и широкий спектр биологической активности (Zhong et al., 2017; Adekenov, 2017), конкретно противовирусный потенциал этой группы раскрыт далеко не полностью. Это объясняется целым рядом причин. Во-первых, лишь очень немногие монотерпеноиды являются коммерчески доступными, что тормозит синтез обширных химических библиотек для изучения зависимости структура -
активность. Во-вторых, направленная модификация терпеноидов является сложной задачей, так как многие из них либо реакционноспособны сами по себе, либо обладают несколькими функциональными группами сходной реакционной способности. В результате, несмотря на высокий потенциал группы в целом, в настоящее время описаны лишь единичные примеры применения терпенов, в частности, производных камфоры, в качестве базовых молекул для разработки противовирусных средств.
Таким образом, перспективным и приоритетным направлением фармацевтической науки и практического здравоохранения является разработка и внедрение новых противогриппозных препаратов на основе растительных метаболитов, действующих на максимально важные и консервативные вирусные компоненты, не используемые пока для лекарственного воздействия.
Степень разработанности темы исследования
В качестве вирусных мишеней для ингибирования химическими соединениями в терапии гриппа используются несколько вирусных белков. Так, помимо уже применяемых в клинике препаратов, направленных на блокирование протонного канала М2 (амантадин, ремантадин), нейраминидазы (осельтамивир, занамивир, перамивир, ланинамивир) и вирусной РНК-зависимой РНК-полимеразы (фавипиравир, рибавирин), фазу 11а клинических испытаний проходит препарат |^-63623872 (Trevejo et al., 2017), ранее известный как VX-787, ингибирующий кэп-связывающую активность субъединицы РВ2 полимеразного комплекса (Ма et а1., 2017), и фазу III - ингибитор эндонуклеазы РА - соединение S-033188 (Koszalka et al., 2017). На блокирование консервативных сайтов гемагглютинина направлены несколько препаратов моноклональных антител, находящихся на разных стадиях клинических исследований ^6261, CR8020, MEDI8852, МНАА4549А, VIS-410) (Koszalka et а1., 2017). Помимо этого, для борьбы с гриппом в России и Китае используется арбидол (умифеновир), обладающий свойствами ингибитора вирусного гемагглютинина, а также иммуностимулирующей
активностью. Несколько лет назад арбидол на международном уровне был признан этиотропным противовирусным препаратом.
Из соединений, наиболее близких по структуре к исследуемой группе, следует упомянуть дейтифорин - соединение на основе изоборнеола, разработанное ещё в Советском Союзе как средство борьбы с гриппом. Мишенью его действия, как и для ремантадина, является вирусный протонный канал М2, что обусловило перекрёстную резистентность вирусов к ремантадину и дейтифорину и низкую эффективность его применения.
Сложность химического строения соединений ^-63623872 и S-033188 диктует их потенциально высокую стоимость, что будет существенно ограничивать их доступность для населения. Производство препаратов на основе моноклональных антител, как и всех биологических препаратов, требует особых мер стандартизации, что также скажется на их стоимости. Кроме того, при их клиническом использовании весьма вероятна выработка на них (как на белковые молекулы) собственных антител, что снижает эффективность лечения. Кроме того, к соединениям как одной, так и другой группы вирус гриппа способен формировать резистентные штаммы, обладающие патогенными свойствами. Таким образом, существует настоятельная потребность в разработке и внедрении новых, эффективных, и в то же время доступных противогриппозных препаратов. В настоящее время как уже используемые, так и находящиеся в разработке препараты удовлетворяют этим критериям далеко не в полной мере.
Все изложенное определяет безусловную актуальность представляемых исследований и позволяет сформулировать основную цель исследования как разработку противогриппозного препарата на основе камфоры, ингибирующего гемагглютинин вируса гриппа, характеристику его механизма действия и способности выработки к нему резистентных вариантов вируса.
Задачи исследования
1. Провести первичный скрининг in vitro химических библиотек соединений на основе камфоры, определить их цитотоксические и противовирусные свойства, провести анализ «структура-активность», отобрать наиболее активные соединения и среди них - соединение-лидер.
2. Провести доклинические исследования соединения-лидера, включающие определение спектра его противовирусной активности с использованием репрезентативной панели вирусов гриппа и ОРВИ человека, оценку протективной активности на модели летальной гриппозной пневмонии у мышей, вызванной вирусами гриппа, различающимися по происхождению и резистентности к коммерческим противогриппозным препаратам и дать характеристику токсикологических свойств препарата.
3. Провести оптимизацию режима и способа применения соединения-лидера на модели летальной гриппозной пневмонии у животных.
4. Изучить влияние соединения-лидера на морфогенез гриппозной пневмонии у лабораторных животных.
5. Определить стадию жизненного цикла вируса гриппа, на которой активные производные камфоры, в том числе соединение-лидер, проявляют своё специфическое вирусингибирующее действие.
6. Изучить влияние соединения-лидера на фузогенную активность гемагглютинина вирусов гриппа A и B.
7. Изучить влияние соединения-лидера на ультраструктурные особенности морфогенеза гриппозной инфекции при помощи электронно-микроскопического анализа.
8. При помощи компьютерного моделирования создать молекулярную модель взаимодействия наиболее активных производных, включая соединение-лидер, с вирусом гриппа.
9. Провести селекцию вариантов адаптированного к мышам штамма вируса гриппа, устойчивых к действию наиболее активного производного
камфоры и оценить уровень резистентности полученных вариантов вируса к соединению-лидеру.
10. Охарактеризовать полученные резистентные вирусы с точки зрения продуктивности и патогенности для мышей.
11. Локализовать мутации резистентности вируса гриппа A к наиболее активному производному камфоры при помощи секвенирования сегментов вирусного генома и компьютерного моделирования.
Научная новизна исследования
Несмотря на то, что природные соединения и их производные широко используются для поиска новых антивирусных средств, в том числе и против вируса гриппа, в настоящее время описаны лишь единичные примеры успешного применения терпенов в качестве базовых молекул для разработки таких препаратов (Martinez et al., 2015). Научная новизна исследования состоит, прежде всего, во впервые предложенных систематических исследованиях, направленных на создание новых средств против вируса гриппа различных типов на основе одного из представителей класса терпеноидов - камфоры. В результате исследования проведена идентификация принципиально нового класса химических веществ, обладающего высокой противовирусной активностью. Впервые проведена систематическая оценка цитотоксических и вирусингибирующих свойств химической библиотеки каркасных соединений на основе природного терпеноида камфоры. На основании анализа «структура-активность» оценена роль базовых структур и боковых заместителей в формировании противовирусной активности веществ. Впервые показано, что каркасная часть молекулы в виде 1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептана принципиально важна для наличия у соединений противовирусной активности. Даже незначительные ее модификации приводят к утрате вирусингибирующих свойств.
Впервые идентифицирована стадия вирусной репродукции, ингибируемая производными камфоры. Показано, что максимальную активность в культуре клеток имино-производные камфоры проявляют на ранних стадиях вирусного цикла (0-2 часа после заражения). При добавлении соединений на более поздних стадиях инфекции их вирусингибирующая активность снижается.
Впервые показана прямая антифузогенная активность активного производного камфоры (камфецина) в отношении гемагглютинина вируса гриппа А и гриппа В.Основным механизмом противовирусного действия камфецина является ингибирование процесса слияния оболочки вируса с мембраной эндосомы, что в дальнейшем приводит к нарушению вирусного морфогенеза и как следствие - снижению уровня вирусной репродукции.
Впервые продемонстрирована активность камфецина в экспериментах на животных. Показано, что в оптимальных комбинациях использованного штамма вируса, инфицирующей дозы и дозы лекарственного средства активность камфецина была сопоставима с активностью препаратов сравнения - осельтамивира (Тамифлю) и ремантадина. Показано, что оптимальные показатели протективной активности камфецина достигаются при пероральном его применении по лечебно-профилактической схеме.
Впервые путём последовательных пассажей в клеточной культуре получены и охарактеризованы камфецин-резистентные вирусные штаммы. Впервые показано, что мутации в вирусном гемагглютинине сопровождаются развитием камфецин-резистентности. Впервые показано, что камфецин-резистентные штаммы вируса гриппа обладают резко сниженной репликативной активностью в лёгких, и более низкой патогенностью на модели летальной гриппозной пневмонии у мышей по сравнению с исходным, камфецин-чувствительным, вирусом, а также вирусом, пассированным в аналогичных условиях, но без камфецина.
Теоретическая и практическая значимость
В результате проведённых исследований решена научная проблема, имеющая существенное социально-экономическое значение -идентифицирован и подготовлен к клиническим испытаниям перспективный противогриппозный препарат на основе природного терпенового соединения, выработка лекарственной устойчивости к которому приводит к уникальной потере вирусом гриппа патогенных свойств.
Охарактеризован уровень и спектр противогриппозной активности химических соединений - производных природных терпеноидов. Результаты проведённых исследований свидетельствуют о высоком потенциале соединений на основе камфоры как противовирусных средств в отношении вируса гриппа. Установлено, что производные камфоры проявляют широкий спектр и высокий уровень противовирусной защиты в отношении вирусов гриппа типов А и В, в том числе резистентных к используемым в клинике противогриппозным препаратам - ремантадину и осельтамивиру. По совокупности параметров цитотоксичности и противовирусной активности идентифицировано соединение - 1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-илиден-аминоэтанол (камфецин), обладающее оптимальными фармакологическими характеристиками (Патент РФ № 2530554 от 10.10.2014).
Данные об активности камфецина в отношении ремантадин-резистентных штаммов вируса гриппа позволяют рассматривать его как потенциально эффективное соединение для терапии гриппозной инфекции, вызванной современными ремантадин-, а также осельтамивир-резистентными возбудителями гриппа. В результате исследования проведены доклинические испытания камфецина, оценены его специфическая активность и токсикологические характеристики. Эта часть исследования была поддержана Государственным контрактом «Доклинические исследования противовирусного лекарственного средства на основе иминопроизводного природного монотерпеноида» № 14411 2049999 19085 от 22 октября 2014 г., по итогам которого препарат камфецин подготовлен к клиническим испытаниям.
Бесспорным преимуществом нового противогриппозного препарата является снижение патогенности вирусных штаммов, которые всё же выработали к нему устойчивость. Чрезвычайно важно также, что этот препарат обладает широким спектром активности, нетоксичен и при этом имеет высокую биодоступность, а также характеризуется простотой синтеза и низкой стоимостью производства.
Методология и методы исследования
В работе использован широкий набор методик, включая вирусологические, биохимические, морфологические, молекулярно-биологические и электронно-микроскопические методы, а также методы компьютерного моделирования. Цитотоксические свойства химических соединений изучены при помощи метилтетразолиевого теста, противовирусная их активность оценена в системе in vitro в культуре клеток MDCK и in vivo - в опытах на животных на модели летальной гриппозной пневмонии. Данные о протективной активности камфецина получены при помощи анализа динамики смертности животных, а также при помощи оценки инфекционного титра вируса в ткани лёгких и морфологического её анализа. Анализ морфогенеза вируса гриппа на ультраструктурном уровне в присутствии камфецина проведён при помощи электронно-микроскопического анализа. Первичные последовательности гена HA камфецин-резистентных клонов вируса определены при помощи ОТ-ПЦР с последующим секвенированием фрагмента, после чего при помощи компьютерного моделирования осуществлена локализация мутаций устойчивости, смоделировано взаимодействие камфецина с молекулами гемагглютинина чувствительного и резистентного штаммов вируса.
Положения, выносимые на защиту
1. Производные камфоры обладают выраженной способностью ингибировать репродукцию вирусов гриппа. Из 212 проанализированных
соединений оптимальными фармакологическими характеристиками обладает 1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-илиден-аминоэтанол
(камфецин). Его противовирусная активность проявляется против вирусов гриппа A и B как в культуре клеток, так и в опытах на животных. Применение камфецина приводит к ограничению гриппозной пневмонии, снижению степени отёка и воспалительной инфильтрации ткани лёгких. Максимальную активность камфецин проявляет при пероральном применении по лечебно-профилактической схеме. Использование камфецина с интервалом в 6 часов (4 раза в сутки) позволяет снизить дозу соединения в 7 раз по сравнению с режимом применения раз в сутки без потери протективного эффекта.
2. Производные камфоры, в частности, камфецин, проявляют противовирусную активность на ранних стадиях вирусного цикла (0-2 ч). С увеличением срока между инфицированием клеток и добавлением соединения активность их падает. Камфецин способен напрямую ингибировать фузогенную активность гемагглютинина как вируса гриппа A, так и вируса гриппа B, что проявляется достоверным уменьшением доли вирионов, находящихся на стадии слияния мембран. Молекулярное моделирование позволяет идентифицировать два потенциальных сайта связывания камфецина с гемагглютинином. Первый из них расположен в районе пептида слияния, второй - в районе сайта протеолиза HA0 на субъединицы HA1 и HA2.
3. Резистентность вируса гриппа к камфецину в лабораторных условиях вырабатывается относительно легко. Последовательное серийное пассирование вируса гриппа A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) в присутствии камфецина приводит к нарастанию резистентности, достигающей к 6 пассажу 250-кратной разницы по сравнению с исходным вирусом. Ростовые свойства вируса при этом практически не изменяются. Приобретение вирусом камфецин-резистентности приводит к снижению его патогенности для мышей минимум в 50 раз и снижению уровня репродукции в ткани лёгких. Формирование камфецин-устойчивости у вируса гриппа при пассировании его в клетках MDCK сопровождается аминокислотными заменами P199S в
Похожие диссертационные работы по специальности «Вирусология», 03.02.02 шифр ВАК
Комплексное исследование новой противогриппозной субстанции прямого действия2021 год, кандидат наук Одноворов Артём Игоревич
Иммунные механизмы интерференции РНК в противогриппозной защите2024 год, кандидат наук Пашков Евгений Алексеевич
Нейраминидазная специфичность штаммов вирусов гриппа A и B, циркулировавших в России в эпидсезоны 2006-2010 гг.2010 год, кандидат биологических наук Белякова, Наталья Владимировна
Разработка способов получения и исследование свойств рекомбинантных иммуноглобулинов класса A, специфичных к гемагглютинину вируса гриппа A2018 год, кандидат наук Алиев, Теймур Кантамирович
Чувствительность эпидемических штаммов вирусов гриппа А и В к химиопрепаратам2006 год, кандидат медицинских наук Шевченко, Елена Сергеевна
Список литературы диссертационного исследования доктор наук Зарубаев Владимир Викторович, 2019 год
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Беляев А.Л., Бурцева Е.И., Слепушкин А.Н. и др. Арбидол-новое средство для профилактики гриппа и острых респираторных вирусных инфекций у детей. Вестник РАМН. 1996;3:34-7.
2. Вафина Г.Ф., Узбеков А.Р., Зарубаев В.В., Карпинская Л.А., Штро
A.А., Юнусов М.С. Поиск веществ с противовирусной активностью среди каркасных производных хинопимаровой кислоты. Химия природных соединений, 2015; №1 - 92-96.
3. Гагаринова В.М., Игнатьева Г.С., Синицкая Л.В. и др. Новый химиопрепарат арбидол: профилактическая эффективность во время эпидемий гриппа. Журнал микробиологии. 1993. № 5. С. 40-43.
4. Колобухина Л.В., Меркулова Л.Н., Григорян С.С., Щелканов М.Ю., Оспельникова Т.П., Гусева О.А., Бурцева Е.И., Исаева Е.И., Орлова С.Н., Борзунов
B.М., В.М.Волжанин, Шульдяков А.А., Суточникова О.А., Малышев Н.А., Чучалин А.Г., Львов Д.К. Эффективность и безопасность препарата Ингавирин в лечении гриппа и других ОРВИ у взрослых. Справочник поликлинического врача. 2010;9:3-7.
5. Тандура С.Н., Зарубаев В.В., Анфимов П.М., Киселев О.И. Противогриппозный химиопрепарат Дейтифорин. Антибиотики и химиотерапия, 2013; 58:36-48.
6. Abdelwhab EM, Veits J, Mettenleiter TC. Biological fitness and natural selection of amantadine resistant variants of avian influenza H5N1 viruses. Virus Res. 2017;228:109-113.
7. Adekenov SM. Sesquiterpene lactones with unusual structure. Their biogenesis and biological activity. Fitoterapia. 2017;121:16-30. doi: 10.1016/j.fitote.2017.05.017
8. Agamennone M, Pietrantoni A, Superti F. Identification of small molecules acting against H1N1 influenza A virus. Virology. 2016;488:249-58. doi: 10.1016/j.virol.2015.11.024.
9. Aldrich PE, Hermann EC, Meier WE, Paulshock M, Prichard WW, Snyder JA, Watts JC. Antiviral agents. 2. Structure-activity relationships of compounds related to 1-adamantanamine. J Med Chem. 1971;14(6):535-43.
10. Arns S, Balgi AD, Shimizu Y, Pfeifer TA, Kumar N, Shidmoossavee FS, Sun S, Tai SS, Agafitei O, Jaquith JB, Bourque E, Niikura M, Roberge M. Novel spirothiazamenthane inhibitors of the influenza A M2 proton channel. Eur J Med Chem. 2016;120:64-73. doi: 10.1016/j.ejmech.2016.05.008.
11. Balannik V, Wang J, Ohigashi Y, Jing X, Magavern E, Lamb RA, Degrado WF, Pinto LH. Design and pharmacological characterization of inhibitors of amantadine-resistant mutants of the M2 ion channel of influenza A virus. Biochemistry. 2009;48(50):11872-82. doi: 10.1021/bi9014488.
12. Baron J, Tarnow C, Mayoli-Nüssle D, Schilling E, Meyer D, Hammami M, Schwalm F, Steinmetzer T, Guan Y, Garten W, Klenk HD, Böttcher-Friebertshäuser E. Matriptase, HAT, and TMPRSS2 activate the hemagglutinin of H9N2 influenza A viruses. J Virol. 2013;87(3):1811-20. doi: 10.1128/JVI.02320-12.
13. Basaric N, Sohora M, Cindro N, Mlinaric-Majerski K, De Clercq E, Balzarini J. Antiproliferative and antiviral activity of three libraries of adamantane derivatives. Arch Pharm (Weinheim). 2014;347(5):334-40. doi: 10.1002/ardp.201300345.
14. Basu A, Antanasijevic A, Wang M, Li B, Mills DM, Ames JA, Nash PJ, Williams JD, Peet NP, Moir DT, Prichard MN, Keith KA, Barnard DL, Caffrey M, Rong L, Bowlin TL. New small molecule entry inhibitors targeting hemagglutinin-mediated influenza a virus fusion. J Virol. 2014;88(3):1447-60. doi: 10.1128/JVI.01225-13.
15. Basu A, Komazin-Meredith G, McCarthy C, Antanasijevic A, Cardinale SC, Mishra RK, Barnard DL, Caffrey M, Rong L, Bowlin TL. Molecular Mechanism Underlying the Action of Influenza A Virus Fusion Inhibitor MBX2546. ACS Infect Dis. 2017;3(5):330-335. doi: 10.1021/acsinfecdis.6b00194.
16. Bijl D. Pandemic influenza vaccines and neuraminidase inhibitors: efficacy and side effects. Int J Risk Saf Med. 2011;23:65-71.
17. Blaising J, Lévy PL, Polyak SJ, Stanifer M, Boulant S, Pécheur EI. Arbidol inhibits viral entry by interfering with clathrin-dependent trafficking. Antiviral Res. 2013;100(1):215-9. doi: 10.1016/j.antiviral.2013.08.008.
18. Bodian, D. L., R. B. Yamasaki, R. L. Buswell, J. F. Stearns, J. M. White, and I. D. Kuntz. 1993. Inhibition of the fusion-inducing conformational change of influenza hemagglutinin by benzoquinones and hydroquinones. Biochemistry 32:2967-2978.
19. Boriskin YS, Leneva IA, Pécheur EI, Polyak SJ. Arbidol: a broad-spectrum antiviral compound that blocks viral fusion. Curr Med Chem. 2008;15(10):997-1005.
20. Bottcher E, Matrosovich T, Beyerle M, Klenk HD, Garten W, et al. (2006) Proteolytic activation of influenza viruses by serine proteases TMPRSS2 and HAT from human airway epithelium. J Virol 80: 9896-9898.
21. Bottcher-Friebertshauser E, Freuer C, Sielaff F, Schmidt S, Eickmann M, et al. (2010) Cleavage of influenza virus hemagglutinin by airway proteases TMPRSS2 and HAT differs in subcellular localization and susceptibility to protease inhibitors. J Virol 84: 5605-5614.
22. Brooks MJ, Burtseva EI, Ellery PJ, Marsh GA, Lew AM, Slepushkin AN, Crowe SM, Tannock GA. Antiviral activity of arbidol, a broad-spectrum drug for use against respiratory viruses, varies according to test conditions. J Med Virol. 2012;84:170-81.
23. Campana R, Casettari L, Fagioli L, Cespi M, Bonacucina G, Baffone W. Activity of essential oil-based microemulsions against Staphylococcus aureus biofilms developed on stainless steel surface in different culture media and growth conditions. Int J Food Microbiol. 2017;241:132-140. doi: 10.1016/j.ijfoodmicro.2016.10.021.
24. Camps P, Duque MD, Vázquez S, Naesens L, De Clercq E, Sureda FX, López-Querol M, Camins A, Pallàs M, Prathalingam SR, Kelly JM, Romero V, Ivorra D, Cortés D. Synthesis and pharmacological evaluation of several ring-contracted amantadine analogs. Bioorg Med Chem. 2008;16(23):9925-36. doi: 10.1016/j.bmc.2008.10.028.
26. CDC Press Release. Seasonal flu death estimate increases worldwide. December 13, 2017. https://www.cdc.gov/media/releases/2017/p1213-flu-death-estimate.html.
27. Chen DY, Shien JH, Tiley L, Chiou SS, Wang SY, Chang TJ, Lee YJ, Chan KW, Hsu WL. Curcumin inhibits influenza virus infection and haemagglutination activity. Food Chem. 2010;119(4):1346-51.
28. Chen JX, Xue HJ, Ye WC, Fang BH, Liu YH, Yuan SH, Yu P, Wang YQ. Activity of andrographolide and its derivatives against influenza virus in vivo and in vitro. Biol Pharm Bull. 2009;32(8):1385-91.
29. Chen Y, Cheng M, Liu FQ, Xia P, Qian K, Yu D, Xia Y, Yang ZY, Chen CH, Morris-Natschke SL, Lee KH. Anti-AIDS agents 86. Synthesis and anti-HIV evaluation of 2',3'-seco-3'-nor DCP and DCK analogues. Eur J Med Chem. 2011;46(10):4924-36. doi: 10.1016/j.ejmech.2011.07.051.
30. Cheung PP, Watson SJ, Choy KT, Fun Sia S, Wong DD, Poon LL, Kellam P, Guan Y, Malik Peiris JS, Yen HL. Generation and characterization of influenza A viruses with altered polymerase fidelity. Nat Commun. 2014 3;5:4794.
31. Chow AW, Jakas DR, Hoover JRE. Preparation of some trimethylpentacyclo-[5.4.0.02,6.03,10.05,9]undecane-8,11-dione derivatives. J Med Chem. 1971;14:1242-3. doi: 10.1021/jm00294a034
32. Chung S, Joung YS. Oseltamivir (tamiflu) induced depressive episode in a female adolescent. Psychiatry Investig. 2010;7:302-4.
33. Cocoros N, Hernandez R, Harrington N, Rausch-Phung E, Schulte CR, Blog D, Gallagher K, Klevos A, Kim C, Marano N, Alvarado-Ramy F. Estimates of deaths associated with seasonal influenza—United States, 1976-2007. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 2010;59:1057-1062.
34. Corti D, Lanzavecchia A. Broadly neutralizing antiviral antibodies. Annu Rev Immunol. 2013;31:705-42. doi: 10.1146/annurev-immunol-032712-095916.
35. da Silva ET, da Silva Araujo A, Moraes AM, de Souza LA, Silva Louren^o MC, de Souza MV, Wardell JL, Wardell SM. Synthesis and Biological Activities of
36. Daniels RS, Downie JC, Hay AJ, Knossow M, Skehel JJ, et al. Fusion mutants of the influenza virus hemagglutinin glycoprotein. Cell. 1985 40: 431-439.
37. Dawood F. S., Jain S., Finelli L., Shaw M. W. et al. Emergence of a novel swine-origin influenza A(H1N1) virus in humans. N. Engl. J. Med. 2009; 360:260515.
38. De Clercq E. Antiviral agents active against influenza A viruses. Nat Rev Drug Discov. 2006;5:1015-25.
39. DeGrado WF, Wang J. (University of Pennsylvania), 2011, WO 2011/022191.
40. Derksen A, Hensel A, Hafezi W, Herrmann F, Schmidt TJ, Ehrhardt C, Ludwig S, Kühn J. 3-O-galloylated procyanidins from Rumex acetosa L. inhibit the attachment of influenza A virus. PLoS One. 2014;9(10):e110089. doi: 10.1371/journal.pone.0110089.
41. Deshpande MS, Wei J, Luo G, Cianci C, Danetz S, Torri A, Tiley L, Krystal M, Yu KL, Huang S, Gao Q, Meanwell NA. An approach to the identification of potent inhibitors of influenza virus fusion using parallel synthesis methodology. Bioorg Med Chem Lett. 2001;11(17):2393-6.
42. Dong J, Chen S, Li R, Cui W, Jiang H, Ling Y, Yang Z, Hu W. Imidazole-based pinanamine derivatives: Discovery of dual inhibitors of the wild-type and drug-resistant mutant of the influenza A virus. Eur J Med Chem. 2016;108:605-15. doi: 10.1016/j.ejmech.2015.12.013.
43. Du QS, Huang RB, Wang CH, Li XM, Chou KC. Energetic analysis of the two controversial drug binding sites of the M2 proton channel in influenza A virus. J Theor Biol. 2009;259(1):159-64. doi: 10.1016/j.jtbi.2009.03.003.
44. Duque MD, Ma C, Torres E, Wang J, Naesens L, Juárez-Jiménez J, Camps P, Luque FJ, DeGrado WF, Lamb RA, Pinto LH, Vázquez S. Exploring the size limit of templates for inhibitors of the M2 ion channel of influenza A virus. J Med Chem. 2011;54(8):2646-57. doi: 10.1021/jm101334y.
45. Duque MD, Torres E, Valverde E, Barniol M, Guardiola S, Rey M, Vazquez S. Inhibitors of the M2 channel of influenza A virus. Recent Advances in Pharmaceutical Sciences (Ed. Munos-Torrero D), 2011:35-64. ISBN: 978-81-7895528-5.
46. Durrant MG, Eggett DL, Busath DD. Investigation of a recent rise of dual amantadine-resistance mutations in the influenza A M2 sequence. BMC Genet. 2015;16 Suppl 2:S3. doi: 10.1186/1471-2156-16-S2-S3.
47. Durrer S, Ehnes C, Fuetsch M, Maerkel K, Schlumpf M, Lichtensteiger W. Estrogen sensitivity of target genes and expression of nuclear receptor co-regulators in rat prostate after pre- and postnatal exposure to the ultraviolet filter 4-methylbenzylidene camphor. Environ Health Perspect. 2007;115 Suppl 1:42-50. doi: 10.1289/ehp.9134.
48. Edinger TO, Pohl MO, Stertz S. Entry of influenza A virus: host factors and antiviral targets. J Gen Virol. 2014;95(Pt 2):263-77. doi: 10.1099/vir.0.059477-0.
49. Feng F, Miura N, Isoda N, Sakoda Y, Okamatsu M, Kida H, Nishimura S. Novel trivalent anti-influenza reagent. Bioorg Med Chem Lett. 2010;20(12):3772-6. doi: 10.1016/j.bmcl.2010.04.060.
50. Furuse, Y., Suzuki, A., and Oshitani, H. (2009) Large-Scale Sequence Analysis of M Gene of Influenza A Viruses from Different Species: Mechanisms for Emergence and Spread of Amantadine Resistance. Antimicrob. Agents Chemother. 53, 4457-4463. doi: 10.1128/AAC.00650-09
51. Fytas G, Stamatiou G, Foscolos GB, Kolocouris A, Kolocouris N, Witvrouw M, Pannecouque C, De Clercq E. Synthesis and Anti-HIV Activity of Some New Aminoadamantane Heterocycles. Bioorg Med Chem Lett. 1997;7(14):1887-90. Doi: 10.1039/a705868c
52. Galloway SE, Reed ML, Russell CJ, Steinhauer DA. Influenza HA subtypes demonstrate divergent phenotypes for cleavage activation and pH of fusion: implications for host range and adaptation. PLoS Pathog. 2013;9(2):e1003151. doi: 10.1371/journal.ppat.1003151.
53. Garten W, Hallenberger S, Ortmann D, Schafer W, Vey M, et al. (1994) Processing of viral glycoproteins by the subtilisin-like endoprotease furin and its inhibition by specific peptidylchloroalkylketones. Biochimie 76: 217-225.
54. Geldenhuys WJ, Malan SF, Bloomquist JR, Marchand AP, Van der Schyf CJ. Pharmacology and structure-activity relationships of bioactive polycyclic cage compounds: a focus on pentacycloundecane derivatives. Med Res Rev. 2005;25(1):21-48. doi 10.1002/med.20013
55. Gillman A. Risk of resistant avian influenza A virus in wild waterfowl as a result of environmental release of oseltamivir. Infect Ecol Epidemiol. 2016;6:32870. doi: 10.3402/iee.v6.32870. eCollection 2016.
56. Gleed ML, Busath DD. Why bound amantadine fails to inhibit proton conductance according to simulations of the drug-resistant influenza A M2 (S31N). J Phys Chem B. 2015 Jan 22;119(3):1225-31. doi: 10.1021/jp508545d.
57. Gôktaç F, Vanderlinden E, Naesens L, Cesur N, Cesur Z. Microwave assisted synthesis and anti-influenza virus activity of 1-adamantyl substituted N-(1-thia-4-azaspiro[4.5]decan-4-yl)carboxamide derivatives. Bioorg Med Chem. 2012;20(24):7155-9. doi: 10.1016/j.bmc.2012.09.064.
58. Gotoh B, Ogasawara T, Toyoda T, Inocencio NM, Hamaguchi M, et al. (1990) An endoprotease homologous to the blood clotting factor X as a determinant of viral tropism in chick embryo. EMBO J 9: 4189-4195.
59. Gotoh B, Yamauchi F, Ogasawara T, Nagai Y (1992) Isolation of factor Xa from chick embryo as the amniotic endoprotease responsible for paramyxovirus activation. FEBS Lett 296: 274-278.
60. Govorkova EA, Baranovich T, Marathe BM, Yang L, Taylor MA, Webster RG, Taylor GL, Connaris H. Sialic acid-binding protein Sp2CBMTD protects mice against lethal challenge with emerging influenza A (H7N9) virus. Antimicrob Agents Chemother. 2015;59(3):1495-504. doi: 10.1128/AAC.04431-14
61. Gregory, W. A. (E. I. Du Pont de Nemours & Co), 1971, US Patent 3558704.
62. Gu RX, Liu LA, Wang YH, Xu Q, Wei DQ. Structural comparison of the wild-type and drug-resistant mutants of the influenza A M2 proton channel by
63. Haffizulla J, Hartman A, Hoppers M, Resnick H, Samudrala S, Ginocchio C, Bardin M, Rossignol JF; US Nitazoxanide Influenza Clinical Study Group. Effect of nitazoxanide in adults and adolescents with acute uncomplicated influenza: a double-blind, randomised, placebo-controlled, phase 2b/3 trial. Lancet Infect Dis. 2014 Jul;14(7):609-18. doi: 10.1016/S1473-3099(14)70717-0.
64. Hamilton BS, Gludish DW, Whittaker GR (2012) Cleavage Activation of the Human-Adapted Influenza Virus Subtypes by Matriptase Reveals both Subtype and Strain Specificities. J Virol 86: 10579-10586.
65. Han X, Bushweller JH, Cafiso DS, Tamm LK. Membrane structure and fusion-triggering conformational change of the fusion domain from influenza hemagglutinin. Nat Struct Biol. 2001;8:715-20.
66. Hatesuer B, Bertram S, Mehnert N, Bahgat MM, Nelson PS, Pöhlmann S, Schughart K. Tmprss2 is essential for influenza H1N1 virus pathogenesis in mice. PLoS Pathog. 2013;9(12):e1003774. doi: 10.1371/journal.ppat.1003774.
67. Hoffman LR, Kuntz ID, White JM. Structure-based identification of an inducer of the low-pH conformational change in the influenza virus hemagglutinin: irreversible inhibition of infectivity. J Virol. 1997;71(11):8808-20.
68. Horimoto T, Nakayama K, Smeekens SP, Kawaoka Y (1994) Proprotein processing endoproteases PC6 and furin both activate hemagglutinin of virulent avian influenza viruses. J Virol 68: 6074-6078.
69. Hu W, Zeng S, Li C, Jie Y, Li Z, Chen L. Identification of hits as matrix-2 protein inhibitors through the focused screening of a small primary amine library. J Med Chem. 2010;53(9):3831-4. doi: 10.1021/jm901664a.
70. Hu Y, Musharrafieh R, Ma C, Zhang J, Smee DF, DeGrado WF, Wang J. An M2-V27A channel blocker demonstrates potent in vitro and in vivo antiviral activities against amantadine-sensitive and -resistant influenza A viruses. Antiviral Res. 2017;140:45-54. doi: 10.1016/j.antiviral.2017.01.006.
71. Huang L, Yuan X, Yu D, Lee KH, Chen CH. Mechanism of action and resistant profile of anti-HIV-1 coumarin derivatives. Virology. 2005;332(2):623-8.
72. Ison MG. Clinical use of approved influenza antivirals: therapy and prophylaxis. Influenza Other Respir. Influenza Other Respir. Viruses 2013, 3 (Suppl. 3), 1-7.
73. Jeon JH, Yang JY, Lee HS. Evaluation of the acaricidal toxicities of camphor and its structural analogues against house dust mites by the impregnated fabric disc method. Pest Manag Sci. 2014;70(7):1030-2. doi: 10.1002/ps.3769.
74. Kaihatsu K, Mori S, Matsumura H, Daidoji T, Kawakami C, Kurata H, Nakaya T, Kato N. Broad and potent anti-influenza virus spectrum of epigallocatechin-3-O-gallate-monopalmitate. J Mol Genet Med. 2009;3:195-7.
75. Kao RY, Yang D, Lau LS, Tsui WH, Hu L, Dai J, Chan MP, Chan CM, Wang P, Zheng BJ, Sun J, Huang JD, Madar J, Chen G, Chen H, Guan Y, Yuen KY. Identification of influenza A nucleoprotein as an antiviral target. Nat Biotechnol. 2010;28: 600-5.
76. Ke C, Mok CKP, Zhu W, Zhou H, He J, Guan W, Wu J, Song W, Wang D, Liu J, Lin Q, Chu DKW, Yang L, Zhong N, Yang Z, Shu Y, Peiris JSM. Human Infection with Highly Pathogenic Avian Influenza A(H7N9) Virus, China. Emerg Infect Dis. 2017;23(8):1332-1340. doi: 10.3201/eid2308.170600.
77. Kim M, Kim SY, Lee HW, Shin JS, Kim P, Jung YS, Jeong HS, Hyun JK, Lee CK. Inhibition of influenza virus internalization by (-)-epigallocatechin-3-gallate. Antiviral Res. 2013;100(2):460-72. doi: 10.1016/j.antiviral.2013.08.002.
78. Kolocouris A, Spearpoint P, Martin SR, Hay AJ, Lopez-Querol M, Sureda FX, Padalko E, Neyts J, De Clercq E. Comparisons of the influenza virus A M2 channel binding affinities, anti-influenza virus potencies and NMDA antagonistic activities of 2-alkyl-2-aminoadamantanes and analogues. Bioorg Med Chem Lett. 2008;18(23):6156-60. doi: 10.1016/j.bmcl.2008.10.003.
79. Kolocouris A, Tataridis D, Fytas G, Mavromoustakos T, Foscolos GB, Kolocouris N, De Clercq E. Synthesis of 2-(2-adamantyl)piperidines and structure anti-influenza virus A activity relationship study using a combination of NMR spectroscopy and molecular modeling. Bioorg Med Chem Lett. 1999;9(24):3465-70.
80. Kolocouris A, Tzitzoglaki C, Johnson FB, Zell R, Wright AK, Cross TA, Tietjen I, Fedida D, Busath DD. Aminoadamantanes with persistent in vitro efficacy
81. Kolocouris N, Foscolos GB, Kolocouris A, Marakos P, Pouli N, Fytas G, Ikeda S, De Clercq E. Synthesis and antiviral activity evaluation of some aminoadamantane derivatives. J Med Chem. 1994;37(18):2896-902.
82. Kolocouris N, Foscolos GB, Kolocouris A, Marakos P, Pouli N, Fytas G, Ikeda S, De Clercq E. Synthesis and antiviral activity evaluation of some aminoadamantane derivatives. J Med Chem. 1994;37(18):2896-902.
83. Kolocouris N, Kolocouris A, Foscolos GB, Fytas G, Neyts J, Padalko E, Balzarini J, Snoeck R, Andrei G, De Clercq E. Synthesis and antiviral activity evaluation of some new aminoadamantane derivatives. 2. J Med Chem. 1996;39(17):3307-18.
84. Kolocouris N, Kolocouris A, Foscolos GB, Fytas G, Neyts J, Padalko E, Balzarini J, Snoeck R, Andrei G, De Clercq E. Synthesis and antiviral activity evaluation of some new aminoadamantane derivatives. 2. J Med Chem. 1996;39(17):3307-18.
85. Kolocouris N, Zoidis G, Foscolos GB, Fytas G, Prathalingham SR, Kelly JM, Naesens L, De Clercq E. Design and synthesis of bioactive adamantane spiro heterocycles. Bioorg Med Chem Lett. 2007;17(15):4358-62.
86. Koszalka P, Tilmanis D, Hurt AC. Influenza antivirals currently in late-phase clinical trial. Influenza Other Respir Viruses. 2017;11(3):240-246. doi: 10.1111/irv.12446.
87. Koväcovä A, Ruttkay-Nedecky G, Haverlik IK, Janecek S. Sequence similarities and evolutionary relationships of influenza virus A hemagglutinins. Virus Genes. 2002;24(1):57-63.
88. Kühn N, Bergmann S, Kösterke N, Lambertz RL, Keppner A, van den Brand JM, Pöhlmann S, Weiß S, Hummler E, Hatesuer B, Schughart K.The Proteolytic Activation of (H3N2) Influenza A Virus Hemagglutinin Is Facilitated by Different Type II Transmembrane Serine Proteases. J Virol. 2016;90(9):4298-307. doi: 10.1128/JVI.02693-15.
89. Kurtz S, Luo G, Hahnenberger KM, Brooks C, Gecha O, Ingalls K, Numata K, Krystal M. Growth impairment resulting from expression of influenza virus M2 protein in Saccharomyces cerevisiae: identification of a novel inhibitor of influenza virus. Antimicrob Agents Chemother. 1995;39(10):2204-9.
90. Kuzuhara T, Iwai Y, Takahashi H, Hatakeyama D, Echigo N. Green tea catechins inhibit the endonuclease activity of influenza A virus RNA polymerase. PLoS Curr. 2009;1:RRN1052.
91. Lackenby A, Thompson CI, Democratis J. The potential impact of neuraminidase inhibitor resistant influenza. Curr Opin Infect Dis. 2008;21(6):626-38. doi: 10.1097/QC0.0b013e3283199797
92. Lai KK, Cheung NN, Yang F, Dai J, Liu L, Chen Z, Sze KH, Chen H, Yuen KY, Kao RY. Identification of Novel Fusion Inhibitors of Influenza A Virus by Chemical Genetics. J Virol. 2015;90(5):2690-701. doi: 10.1128/JVI.02326-15.
93. Leneva IA, Russell RJ, Boriskin YS, Hay AJ. Characteristics of arbidol-resistant mutants of influenza virus: implications for the mechanism of antiinfluenza action of arbidol. Antiviral Res. 2009;81(2):132-40. doi: 10.1016/j.antiviral.2008.10.009.
94. Li R, Song D, Zhu Z, Xu H, Liu S. An induced pocket for the binding of potent fusion inhibitor CL-385319 with H5N1 influenza virus hemagglutinin. PLoS One. 2012;7(8):e41956. doi: 10.1371/journal.pone.0041956.
95. Li VW, Tsui MP, Chen X, Hui MN, Jin L, Lam RH, Yu RM, Murphy MB, Cheng J, Lam PK, Cheng SH. Effects of 4-methylbenzylidene camphor (4-MBC) on neuronal and muscular development in zebrafish (Danio rerio) embryos. Environ Sci Pollut Res Int. 2016;23(9):8275-85. doi: 10.1007/s11356-016-6180-9.
96. Liu G, Xiong S, Xiang YF, Guo CW, Ge F, Yang CR, Zhang YJ, Wang YF, Kitazato K. Antiviral activity and possible mechanisms of action of pentagalloylglucose (PGG) against influenza A virus. Arch Virol. 2011;156(8):1359-69. doi: 10.1007/s00705-011-0989-9.
97. Liu HS, Xu SQ, Cheng M, Chen Y, Xia P, Qian K, Xia Y, Yang ZY, Chen CH, Morris-Natschke SL, Lee KH. Anti-AIDS agents 87. New bio-isosteric dicamphanoyl-dihydropyranochromone (DCP) and dicamphanoyl-khellactone (DCK) analogues
98. Liu S, Li R, Zhang R, Chan CC, Xi B, Zhu Z, Yang J, Poon VK, Zhou J, Chen M, Münch J, Kirchhoff F, Pleschka S, Haarmann T, Dietrich U, Pan C, Du L, Jiang S, Zheng B. CL-385319 inhibits H5N1 avian influenza A virus infection by blocking viral entry. Eur J Pharmacol. 2011;660(2-3):460-7. doi: 10.1016/j.ejphar.2011.04.013.
99. Lundahl K, Schut J, Schlatmann JL, Paerels GB, Peters A. Synthesis and antiviral activities of adamantane spiro compounds. 1. Adamantane and analogous spiro-3'-pyrrolidines. J Med Chem. 1972;15(2):129-32.
100. Luo G, Colonno R, Krystal M. Characterization of a hemagglutinin-specific inhibitor of influenza A virus. Virology. 1996;226(1):66-76.
101. Ma X, Xie L, Wartchow C, Warne R, Xu Y, Rivkin A, Tully D, Shia S, Uehara K, Baldwin DM, Muiru G, Zhong W, Zaror I, Bussiere DE, Leonard VHJ. Structural basis for therapeutic inhibition of influenza A polymerase PB2 subunit. Sci Rep. 2017;7(1):9385. doi: 10.1038/s41598-017-09538-x.
102. Maeda T, Kawasaki K, Ohnishi S. Interaction of influenza virus hemagglutinin with target membrane lipids is a key step in virus-induced hemolysis and fusion at pH 5.2. Proc Natl Acad Sci USA. 1981;78(7):4133-7.
103. Manoharan RK, Lee JH, Lee J. Antibiofilm and Antihyphal Activities of Cedar Leaf Essential Oil, Camphor, and Fenchone Derivatives against Candida albicans. Front Microbiol. 2017;8:1476. doi: 10.3389/fmicb.2017.01476.
104. Martinez J. P., Sasse F., Bronstrup M., Diez J., Meyerhans A. Antiviral drug discovery: broad-spectrum drugs from nature. Nat. Prod. Rep., 2015, 32, 29-48
105. Matsubara T, Onishi A, Saito T, Shimada A, Inoue H, Taki T, Nagata K, Okahata Y, Sato T. Sialic acid-mimic peptides as hemagglutinin inhibitors for antiinfluenza therapy. J Med Chem. 2010;53(11):4441-9. doi: 10.1021/jm1002183.
106. Matsuya Y, Sasaki K, Ochiai H, Nemoto H. Synthesis and biological evaluation of dihydrofuran-fused perhydrophenanthrenes as a new anti-influenza agent having novel structural characteristic. Bioorg Med Chem. 2007;15(1):424-32.
107. Michiels B, Van Puyenbroeck K, Verhoeven V, Vermeire E, Coenen S. The value of neuraminidase inhibitors for the prevention and treatment of seasonal influenza: a systematic review of systematic reviews. PLoS One. 2013;8(4):e60348. doi: 10.1371/journal.pone.0060348.
108. Monto AS. Epidemiology of influenza. Vaccine 2008;26(Suppl 4):D45-
D48.
109. Motohashi Y, Igarashi M, Okamatsu M, Noshi T, Sakoda Y, Yamamoto N, Ito K, Yoshida R, Kida H. Antiviral activity of stachyflin on influenza A viruses of different hemagglutinin subtypes. Virol J. 2013;10:118. doi: 10.1186/1743-422X-10-118.
110. Nakazawa M, Kadowaki SE, Watanabe I, Kadowaki Y, Takei M, Fukuda H. PA subunit of RNA polymerase as a promising target for anti-influenza virus agents. Antiviral Res. 2008;78:194-201.
111. Nishioka H, Uesugi K, Ueda N, Kondo Y, Tsuji M, Abe H, Harayama T, Hamasaki T, Baba M, Takeuchi Y. Synthesis and anti-human immunodeficiency virus activity of the skeleton isomers of 3',4'-Di-(O)-(-)-camphanoyl-(+)-khellactone. Chem Pharm Bull (Tokyo). 2011;59(8):1075-6.
112. Osterhaus A, Fouchier R, Rimmelzwaan G. Towards universal influenza vaccines? Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci 2011;366:2766-2773.
113. Otterstrom J, van Oijen AM. Visualization of membrane fusion, one particle at a time. Biochemistry. 2013;52(10):1654-68. doi: 10.1021/bi301573w.
114. Ou JL, Mizushina Y, Wang SY, Chuang DY, Nadar M, Hsu WL. Structure-activity relationship analysis of curcumin analogues on anti-influenza virus activity. FEBS J. 2013;280(22):5829-40. doi: 10.1111/febs.12503.
115. Pécheur EI, Lavillette D, Alcaras F, Molle J, Boriskin YS, Roberts M, Cosset FL, Polyak SJ. Biochemical mechanism of hepatitis C virus inhibition by the broad-spectrum antiviral arbidol. Biochemistry. 2007;46(20):6050-9.
116. Pielak RM, Chou JJ. Influenza M2 proton channels. Biochim Biophys Acta. 2011;1808(2):522-9. doi: 10.1016/j.bbamem.2010.04.015.
117. Plotch SJ, O'Hara B, Morin J, Palant O, LaRocque J, Bloom JD, Lang SA Jr, DiGrandi MJ, Bradley M, Nilakantan R, Gluzman Y. Inhibition of influenza A virus
118. Reed ML, Yen HL, DuBois RM, Bridges OA, Salomon R, Webster RG, Russell CJ. Amino acid residues in the fusion peptide pocket regulate the pH of activation of the H5N1 influenza virus hemagglutinin protein. J Virol. 2009;83(8):3568-80. doi: 10.1128/JVI.02238-08.
119. Rey-Carrizo M Torres E, Ma C, Barniol-Xicota M, Wang J, Wu Y, Naesens L, DeGrado WF, Lamb RA, Pinto LH, Vázquez S. 3-Azatetracyclo[5.2.1.1(5,8).0(1,5)]undecane derivatives: from wild-type inhibitors of the M2 ion channel of influenza A virus to derivatives with potent activity against the V27A mutant. J Med Chem. 2013;56(22):9265-74. doi: 10.1021/jm401340p.
120. Rey-Carrizo M, Barniol-Xicota M, Ma C, Frigolé-Vivas M, Torres E, Naesens L, Llabrés S, Juárez-Jiménez J, Luque FJ, DeGrado WF, Lamb RA, Pinto LH, Vázquez S. Easily accessible polycyclic amines that inhibit the wild-type and amantadine-resistant mutants of the M2 channel of influenza A virus. J Med Chem. 2014;57(13):5738-47. doi: 10.1021/jm5005804.
121. Rey-Carrizo M, Gazzarrini S, Llabrés S, Frigolé-Vivas M, Juárez-Jiménez J, Font-Bardia M, Naesens L, Moroni A, Luque FJ, Vázquez S. New polycyclic dual inhibitors of the wild type and the V27A mutant M2 channel of the influenza A virus with unexpected binding mode. Eur J Med Chem. 2015;96:318-29. doi: 10.1016/j.ejmech.2015.04.030.
122. Roschek B Jr, Fink RC, McMichael MD, Li D, Alberte RS. Elderberry flavonoids bind to and prevent H1N1 infection in vitro. Phytochemistry. 2009;70(10):1255-61. doi: 10.1016/j.phytochem.2009.06.003.
123. Rossignol JF, La Frazia S, Chiappa L, Ciucci A, Santoro MG. Thiazolides, a new class of anti-influenza molecules targeting viral hemagglutinin at the post-translational level. J Biol Chem. 2009;284(43):29798-808. doi: 10.1074/jbc.M109.029470.
124. Rossignol JF. Nitazoxanide: a first-in-class broad-spectrum antiviral agent. Antiviral Res. 2014;110:94-103. doi: 10.1016/j.antiviral.2014.07.014.
126. Russell RJ, Kerry PS, Stevens DJ, Steinhauer DA, Martin SR, Gamblin SJ, Skehel JJ. Structure of influenza hemagglutinin in complex with an inhibitor of membrane fusion. Proc Natl Acad Sci USA. 2008;105(46):17736-41. doi: 10.1073/pnas.0807142105.
127. Saito R, Sakai T, Sato I, Sano Y, Oshitani H, Sato M, Suzuki H. Frequency of amantadine-resistant influenza A viruses during two seasons featuring cocirculation of H1N1 and H3N2. J Clin Microbiol. 2003;41(5):2164-5.
128. Sakai K, Ami Y, Tahara M, Kubota T, Anraku M, Abe M, Nakajima N, Sekizuka T, Shirato K, Suzaki Y, Ainai A, Nakatsu Y, Kanou K, Nakamura K, Suzuki T, Komase K, Nobusawa E, Maenaka K, Kuroda M, Hasegawa H, Kawaoka Y, Tashiro M, Takeda M. The host protease TMPRSS2 plays a major role in in vivo replication of emerging H7N9 and seasonal influenza viruses. J Virol. 2014;88(10):5608-16. doi: 10.1128/JVI.03677-13.
129. Samson M, Abed Y, Desrochers FM, Hamilton S, Luttick A, Tucker SP, Pryor MJ, Boivin G. Characterization of drug-resistant influenza virus A(H1N1) and A(H3N2) variants selected in vitro with laninamivir. Antimicrob Agents Chemother. 2014;58(9):5220-8. doi: 10.1128/AAC.03313-14.
130. Samson M, Pizzorno A, Abed Y, Boivin G. Influenza virus resistance to neuraminidase inhibitors. Antiviral Res. 2013, 98(2):174-85. doi: 10.1016/j.antiviral.2013.03.014.
131. Schanzer DL, Langley JM, Tam TW. Hospitalization attributable to influenza and other viral respiratory illnesses in Canadian children. Pediatr Infect Dis J 2006;25:795-800.
132. Schnell JR, Chou JJ. Structure and mechanism of the M2 proton channel of influenza A virus. Nature. 2008;451(7178):591-5. doi: 10.1038/nature06531.
133. Scholtissek C, Quack G, Klenk HD, Webster RG. How to overcome resistance of influenza A viruses against adamantane derivatives. Antiviral Res. 1998;37(2):83-95. doi: 10.1016/S0166-3542(97)00061-2.
134. Sellitto G, Faruolo A, de Caprariis P, Altamura S, Paonessa G, Ciliberto G. Synthesis and anti-hepatitis C virus activity of novel ethyl 1H-indole-3-carboxylates in vitro. Bioorg Med Chem. 2010;18(16):6143-8. doi: 10.1016/j.bmc.2010.06.058.
135. Shen X, Zhang X, Liu S. Novel hemagglutinin-based influenza virus inhibitors. J Thorac Dis. 2013;5 Suppl 2:S149-59. doi: 10.3978/j.issn.2072-1439.2013.06.14.
136. Shetty AK, Peek LA. Peramivir for the treatment of influenza. Expert Rev Anti Infect Ther.2012;10:123-43.
137. Song D, Xu H, Liu S. Theoretical studies of the interaction between influenza virus hemagglutinin and its small molecule ligands. J Mol Model. 2013;19(12):5561-8. doi: 10.1007/s00894-013-2036-0.
138. Song G, Shen X, Li S, Si H, Li Y, Luan H, Fan J, Liang Q, Liu S. Discovery of 3-O-ß-chacotriosyl oleanane-type triterpenes as H5N1 entry inhibitors. RSC Adv., 2015,5, 39145-39154. DOI: 10.1039/C5RA02677F.
139. Song JM, Lee KH, Seong BL. Antiviral effect of catechins in green tea on influenza virus. Antiviral Research 2005;68:66-74.
140. Song MS, Kumar G, Shadrick WR, Zhou W, Jeevan T, Li Z, Slavish PJ, Fabrizio TP, Yoon SW, Webb TR, Webby RJ, White SW. Identification and characterization of influenza variants resistant to a viral endonuclease inhibitor. Proc Natl Acad Sci U S A. 2016;113(13):3669-74.
141. Sriwilaijaroen N, Suzuki Y. Molecular basis of the structure and function of H1 hemagglutinin of influenza virus. Proc Jpn Acad Ser B Phys Biol Sci. 2012;88(6):226-49.
142. Staschke KA, Hatch SD, Tang JC, Hornback WJ, Munroe JE, Colacino JM, Muesing MA. Inhibition of influenza virus hemagglutinin-mediated membrane fusion by a compound related to podocarpic acid. Virology. 1998;248(2):264-74.
143. Stevens, J.; Corper, A.L.; Basler, C.F.; Taubenberger, J.K.; Palese, P.; Wilson, I.A. Structure of the uncleaved human H1 hemagglutinin from the extinct 1918 influenza virus. Science 2004, 303, 1866-1870.
144. Su CY, Cheng TJ, Lin MI, Wang SY, Huang WI, Lin-Chu SY, Chen YH, Wu CY, Lai MM, Cheng WC, Wu YT, Tsai MD, Cheng YS, Wong CH. High-throughput
145. Sun L, Tian F, Feng B, Liu Z, Zhang L, Pei J. Computational identification of a new binding site in influenza virus hemagglutinin for membrane fusion inhibitors. Chem Biol Drug Des. 2013;82(3):267-74. doi: 10.1111/cbdd.12156.
146. Sun X, Tse LV, Ferguson AD, Whittaker GR. Modifications to the hemagglutinin cleavage site control the virulence of a neurotropic H1N1 influenza virus. J Virol. 2010;84(17):8683-90. doi: 10.1128/JVI.00797-10.
147. Suzuki H, Saito R, Masuda H, Oshitani H, Sato M, Sato I. Emergence of amantadine-resistant influenza A viruses: epidemiological study. J Infect Chemother. 2003;9(3):195-200.
148. Tang G, Lin X, Qiu Z, Li W, Zhu L, Wang L, Li S, Li H, Lin W, Yang M, Guo T, Chen L, Lee D, Wu JZ, Yang W. Design and synthesis of benzenesulfonamide derivatives as potent anti-influenza hemagglutinin inhibitors. ACS Med Chem Lett. 2011;2(8):603-7. doi: 10.1021/ml2000627. eCollection 2011.
149. Tang G, Qiu Z, Lin X, Li W, Zhu L, Li S, Li H, Wang L, Chen L, Wu JZ, Yang W. Discovery of novel 1-phenyl-cycloalkane carbamides as potent and selective influenza fusion inhibitors. Bioorg Med Chem Lett. 2010;20(12):3507-10. doi: 10.1016/j.bmcl.2010.04.141.
150. Tarnow C, Engels G, Arendt A, Schwalm F, Sediri H, Preuss A, Nelson PS, Garten W, Klenk HD, Gabriel G, Bottcher-Friebertshàuser E. TMPRSS2 is a host factor that is essential for pneumotropism and pathogenicity of H7N9 influenza A virus in mice. J Virol. 2014 May;88(9):4744-51. doi: 10.1128/JVI.03799-13.
151. Teissier E, Penin F, Pécheur EI. Targeting cell entry of enveloped viruses as an antiviral strategy. Molecules. 2010;16(1):221-50. doi: 10.3390/molecules16010221.
152. Teissier E, Zandomeneghi G, Loquet A, Lavillette D, Lavergne JP, Montserret R, Cosset FL, Bockmann A, Meier BH, Penin F, Pécheur EI. Mechanism of inhibition of enveloped virus membrane fusion by the antiviral drug arbidol. PLoS One. 2011;6(1):e15874. doi: 10.1371/journal.pone.0015874.
153. Torres E, Duque MD, López-Querol M, Taylor MC, Naesens L, Ma C, Pinto LH, Sureda FX, Kelly JM, Vázquez S Synthesis of benzopolycyclic cage amines: NMDA receptor antagonist, trypanocidal and antiviral activities. Bioorg Med Chem. 2012;20(2):942-8. doi: 10.1016/j.bmc.2011.11.050.
154. Torres E, Duque MD, Vanderlinden E, Ma C, Pinto LH, Camps P, Froeyen M, Vázquez S, Naesens L. Role of the viral hemagglutinin in the anti-influenza virus activity of newly synthesized polycyclic amine compounds. Antiviral Res. 2013;99(3):281-91. doi: 10.1016/j.antiviral.2013.06.006.
155. Trevejo JM, Asmal M, Vingerhoets J, Polo R, Robertson S, Jiang Y, Kieffer TL, Leopold L. JNJ-63623872 treatment in adult volunteers experimentally inoculated with live influenza virus: a Phase IIa, randomized, double-blind, placebo-controlled study. Antivir Ther. 2017. doi: 10.3851/IMP3212.
156. Tse LV, Hamilton AM, Friling T, Whittaker GR. A novel activation mechanism of avian influenza virus H9N2 by furin. J Virol. 2014;88(3):1673-83. doi: 10.1128/JVI.02648-13.
157. Vanderlinden E, Göktas F, Cesur Z, Froeyen M, Reed ML, Russell CJ, Cesur N, Naesens L. Novel inhibitors of influenza virus fusion: structure-activity relationship and interaction with the viral hemagglutinin. J Virol. 2010;84(9):4277-88. doi: 10.1128/JVI.02325-09.
158. Vavricka CJ, Li Q, Wu Y, Qi J, Wang M, Liu Y, Gao F, Liu J, Feng E, He J, Wang J, Liu H, Jiang H, Gao GF. Structural and functional analysis of laninamivir and its octanoate prodrug reveals group specific mechanisms for influenza NA inhibition. PLoS Pathog. 2011;7:e1002249.
159. Villalaín J. Membranotropic effects of arbidol, a broad anti-viral molecule, on phospholipid model membranes. J Phys Chem B. 2010;114(25):8544-54. doi: 10.1021/jp102619w.
160. Waldmann M, Jirmann R, Hoelscher K, Wienke M, Niemeyer FC, Rehders D, Meyer B. A nanomolar multivalent ligand as entry inhibitor of the hemagglutinin of avian influenza. J Am Chem Soc. 2014;136(2):783-8. doi: 10.1021/ja410918a.
161. Wang C, Lu L, Na H, Li X, Wang Q, Jiang X, Xu X, Yu F, Zhang T, Li J, Zhang Z, Zheng B, Liang G, Cai L, Jiang S, Liu K. Conjugation of a Nonspecific Antiviral Sapogenin with a Specific HIV Fusion Inhibitor: A Promising Strategy for Discovering New Antiviral Therapeutics. J Med Chem. 2014;57(17):7342-54. doi: 10.1021/jm500763m.
162. Wang G, Luo M, Yang Z, inventors. Compounds Useful as Antiviral Agents, Composition, and Methods of Use. United States of America, 2011, patent WO 2011160024 A2.
163. Wang J, Cady SD, Balannik V, Pinto LH, DeGrado WF, Hong M. Discovery of spiro-piperidine inhibitors and their modulation of the dynamics of the M2 proton channel from influenza A virus. J Am Chem Soc. 2009;131(23):8066-76. doi: 10.1021/ja900063s.
164. Wang J, Ma C, Balannik V, Pinto LH, Lamb RA, Degrado WF. Exploring the Requirements for the Hydrophobic Scaffold and Polar Amine in inhibitors of M2 from Influenza A Virus. ACS Med Chem Lett. 2011;2(4):307-312.
165. Wang J, Ma C, Fiorin G, Carnevale V, Wang T, Hu F, Lamb RA, Pinto LH, Hong M, Klein ML, DeGrado WF. Molecular dynamics simulation directed rational design of inhibitors targeting drug-resistant mutants of influenza A virus M2. J Am Chem Soc. 2011;133(32):12834-41. doi: 10.1021/ja204969m.
166. Wang J, Ma C, Wang J, Jo H, Canturk B, Fiorin G, Pinto LH, Lamb RA, Klein ML, DeGrado WF. Discovery of novel dual inhibitors of the wild-type and the most prevalent drug-resistant mutant, S31N, of the M2 proton channel from influenza A virus. J Med Chem. 2013;56(7):2804-12. doi: 10.1021/jm301538e.
167. Wang J, Ma C, Wu Y, Lamb RA, Pinto LH, DeGrado WF. Exploring organosilane amines as potent inhibitors and structural probes of influenza A virus M2 proton channel. J Am Chem Soc. 2011;133(35):13844-7. doi: 10.1021/ja2050666.
168. Wang J, Wu Y, Ma C, Fiorin G, Wang J, Pinto LH, Lamb RA, Klein ML, Degrado WF. Structure and inhibition of the drug-resistant S31N mutant of the M2 ion channel of influenza A virus. Proc Natl Acad Sci USA. 2013;110(4):1315-20. doi: 10.1073/pnas.1216526110.
169. Wang S, Chi X, Wei H, Chen Y, Chen Z, Huang S, Chen JL. Influenza A virus-induced degradation of eukaryotic translation initiation factor 4B contributes to viral replication by suppressing IFITM3 protein expression. J Virol. 2014;88(15):8375-85. doi: 10.1128/JVI.00126-14.
170. Wang X, Hinson ER, Cresswell P. The interferon-inducible protein viperin inhibits influenza virus release by perturbing lipid rafts. Cell Host Microbe. 2007;2(2):96-105. http://dx.doi.org/10.1016/jxhom.2007.06.009.
171. Wang Y, Busch-Petersen J, Wang F, Kiesow TJ, Graybill TL, Jin J, Yang Z, Foley JJ, Hunsberger GE, Schmidt DB, Sarau HM, Capper-Spudich EA, Wu Z, Fisher LS, McQueney MS, Rivero RA, Widdowson KL. Camphor sulfonamide derivatives as novel, potent and selective CXCR3 antagonists. Bioorg Med Chem Lett. 2009;19(1):114-8. doi: 10.1016/j.bmcl.2008.11.008.
172. White KM, De Jesus P, Chen Z, Abreu P Jr, Barile E, Mak PA, Anderson P, Nguyen QT, Inoue A, Stertz S, Koenig R, Pellecchia M, Palese P, Kuhen K, García-Sastre A, Chanda SK, Shaw ML. A Potent Anti-influenza Compound Blocks Fusion through Stabilization of the Prefusion Conformation of the Hemagglutinin Protein. ACS Infect Dis. 2015;1(2):98-109.
173. WHO news release. Up to 650 000 people die of respiratory diseases linked to seasonal flu each year. December 14, 2017. http://www.who.int/mediacentre/news/releases/2017/seasonal-flu/en/
174. WHO. Cumulative number of confirmed human cases for avian influenza A(H5N1) reported to WHO, 2003-2012. http://www.who.int/influenza/human_animal_interface/consulted on 7-6-2012.
175. WHO. Influenza A(H1N1) virus resistance to oseltamivir -2008/2009 influenza season, northern hemisphere. http://www.who.int/influenza/resources/documents/H1N1webupdate20090318_ ed_ns.pdf
176. Wilson IA, Skehel JJ, Wiley DC. Structure of the haemagglutinin membrane glycoprotein of influenza virus at 3 A resolution. Nature. 1981;289(5796):366-73.
177. Wu S, Huang J, Gazzarrini S, He S, Chen L, Li J, Xing L, Li C, Chen L, Neochoritis CG, Liao GP, Zhou H, Domling A, Moroni A, Wang W. Isocyanides as Influenza A Virus Subtype H5N1 Wild-Type M2 Channel Inhibitors. ChemMedChem. 2015;10(11):1837-45. doi: 10.1002/cmdc.201500318.
178. Wu W, Lin D, Shen X, Li F, Fang Y, Li K, Xun T, Yang G, Yang J, Liu S, He J. New influenza A Virus Entry Inhibitors Derived from the Viral Fusion Peptides. PLoS One. 2015;10(9):e0138426. doi: 10.1371/journal.pone.0138426.
179. Wu W, Wang J, Lin D, Chen L, Xie X, Shen X, Yang Q, Wu Q, Yang J, He J, Liu S. Super short membrane-active lipopeptides inhibiting the entry of influenza A virus. Biochim Biophys Acta. 2015;1848(10 Pt A):2344-50. doi: 10.1016/j.bbamem.2015.06.015.
180. Wu Y, Canturk B, Jo H, Ma C, Gianti E, Klein ML, Pinto LH, Lamb RA, Fiorin G, Wang J, DeGrado WF. Flipping in the pore: discovery of dual inhibitors that bind in different orientations to the wild-type versus the amantadine-resistant S31N mutant of the influenza A virus M2 proton channel. J Am Chem Soc. 2014;136(52):17987-95. doi: 10.1021/ja508461m.
181. Yagi S, Ono J, Yoshimoto J, Sugita K, Hattori N, Fujioka T, Fujiwara T, Sugimoto H, Hirano K, Hashimoto N. Development of anti-influenza virus drugs I: improvement of oral absorption and in vivo anti-influenza activity of Stachyflin and its derivatives. Pharm Res. 1999;16(7):1041-6.
182. Yamada K, Ogawa H, Hara A, Yoshida Y, Yonezawa Y, Karibe K, Nghia VB, Yoshimura H, Yamamoto Y, Yamada M, Nakamura K, Imai K. Mechanism of the antiviral effect of hydroxytyrosol on influenza virus appears to involve morphological change of the virus. Antiviral Res. 2009;83(1):35-44. doi: 10.1016/j.antiviral.2009.03.002.
183. Yanagita H, Yamamoto N, Fuji H, Liu X, Ogata M, Yokota M, Takaku H, Hasegawa H, Odagiri T, Tashiro M, Hoshino T. Mechanism of drug resistance of hemagglutinin of influenza virus and potent scaffolds inhibiting its function. ACS Chem Biol. 2012;7(3):552-62. doi: 10.1021/cb200332k.
184. Yanagita H, Yamamoto N, Fuji H, Liu X, Ogata M, Yokota M, Takaku H, Hasegawa H, Odagiri T, Tashiro M, Hoshino T. Mechanism of drug resistance of
185. Yang J, Yang JX, Zhang F, Chen G, Pan W, Yu R, Wu S, Tien P. Design, synthesis and biological evaluation of small molecular polyphenols as entry inhibitors against H5N1. Bioorg Med Chem Lett. 2014;24(12):2680-4. doi: 10.1016/j.bmcl.2014.04.057.
186. Yoon WJ, Moon JY, Song G, Lee YK, Han MS, Lee JS, Ihm BS, Lee WJ, Lee NH, Hyun CG. Artemisia fukudo essential oil attenuates LPS-induced inflammation by suppressing NF-kappaB and MAPK activation in RAW 264.7 macrophages. Food Chem Toxicol. 2010;48(5):1222-9. doi: 10.1016/j.fct.2010.02.014
187. Yoshimoto J, Kakui M, Iwasaki H, Fujiwara T, Sugimoto H, Hattori N. Identification of a novel HA conformational change inhibitor of human influenza virus. Arch Virol. 1999;144(5):865-78.
188. Yoshimoto J, Kakui M, Iwasaki H, Sugimoto H, Fujiwara T, Hattori N. Identification of amino acids of influenza virus HA responsible for resistance to a fusion inhibitor, Stachyflin. Microbiol Immunol. 2000;44(8):677-85.
189. Yoshimoto J, Yagi S, Ono J, Sugita K, Hattori N, Fujioka T, Fujiwara T, Sugimoto H, Hashimoto N. Development of anti-influenza drugs: II. Improvement of oral and intranasal absorption and the anti-influenza activity of stachyflin derivatives. J Pharm Pharmacol. 2000;52(10):1247-55.
190. Yu M, Si L, Wang Y, Wu Y, Yu F, Jiao P, Shi Y, Wang H, Xiao S, Fu G, Tian K, Wang Y, Guo Z, Ye X, Zhang L, Zhou D. Discovery of pentacyclic triterpenoids as potential entry inhibitors of influenza viruses. J Med Chem. 2014;57(23):10058-71. doi: 10.1021/jm5014067.
191. Zeng LY, Yang J, Liu S. Investigational hemagglutinin-targeted influenza virus inhibitors. Expert Opin Investig Drugs. 2017;26(1):63-73. doi: 10.1080/13543784.2017.1269170.
192. Zhang W, Xu J, Liu F, Li C, Jie Y, Chen S, Li Z, Liu J, Chen L, Zhou G. Heterodimers of histidine and amantadine as inhibitors for wild type and mutant M2 channels of influenza A. Chin. J. Chem. 2010; 28:1417-23.
193. Zhao X, Jie Y, Rosenberg MR, Wan J, Zeng S, Cui W, Xiao Y, Li Z, Tu Z, Casarotto MG, Hu W. Design and synthesis of pinanamine derivatives as antiinfluenza A M2 ion channel inhibitors. Antiviral Res. 2012;96(2):91-9. doi: 10.1016/j.antiviral.2012.09.001.
194. Zhao X, Li C, Zeng S, Hu W. Discovery of highly potent agents against influenza A virus. Eur J Med Chem. 2011;46(1):52-7. doi: 10.1016/j.ejmech.2010.10.010.
195. Zhao X, Zhang ZW, Cui W, Chen S, Zhou Y, Dong J, Jie Y, Wan J, Xu Y, Hu W. Identification of camphor derivatives as novel M2 ion channel inhibitors of influenza A virus. Med. Chem. Commun., 2015,6, 727-731. DOI: 10.1039/C4MD00515E
196. Zhirnov OP, Klenk HD, Wright PF. Aprotinin and similar protease inhibitors as drugs against influenza. Antiviral Res. 2011;92(1):27-36. doi: 10.1016/j.antiviral.2011.07.014.
197. Zhong C, Wall NR, Zu Y, Sui G. Therapeutic Application of Natural Medicine Monomers in Cancer Treatment. Curr Med Chem. 2017;24(34):3681-3697. doi: 10.2174/092986732466617071410150
198. Zhou T, Shi Q, Chen CH, Huang L, Ho P, Morris-Natschke SL, Lee KH. Anti-AIDS agents 85. Design, synthesis, and evaluation of 1R,2R-dicamphanoyl-3,3-dimethyldihydropyrano-[2,3-c]xanthen-7(1H)-one (DCX) derivatives as novel anti-HIV agents. Eur J Med Chem. 2012;47(1):86-96. doi: 10.1016/j.ejmech.2011.10.025
199. Zhou T, Shi Q, Chen CH, Huang L, Ho P, Morris-Natschke SL, Lee KH. Anti-AIDS agents 85. Design, synthesis, and evaluation of 1R,2R-dicamphanoyl-3,3-dimethyldihydropyrano-[2,3-c]xanthen-7(1H)-one (DCX) derivatives as novel anti-HIV agents. Eur J Med Chem. 2012;47(1):86-96. doi: 10.1016/j.ejmech.2011.10.025.
200. Zhu L, Li Y, Li S, Li H, Qiu Z, Lee C, Lu H, Lin X, Zhao R, Chen L, Wu JZ, Tang G, Yang W. Inhibition of influenza A virus (H1N1) fusion by benzenesulfonamide derivatives targeting viral hemagglutinin. PLoS One. 2011;6(12):e29120. doi: 10.1371/journal.pone.0029120.
201. Zhu Z, Li R, Xiao G, Chen Z, Yang J, Zhu Q, Liu S. Design, synthesis and structure-activity relationship of novel inhibitors against H5N1 hemagglutinin-
202. Zmora P, Blazejewska P, Moldenhauer AS, Welsch K, Nehlmeier I, Wu Q, Schneider H, Pöhlmann S, Bertram S. DESC1 and MSPL activate influenza A viruses and emerging coronaviruses for host cell entry. J Virol. 2014;88(20):12087-97. doi: 10.1128/JVI.01427-14.
203. Zoidis G, Kolocouris N, Kelly JM, Prathalingam SR, Naesens L, De Clercq E. Design and synthesis of bioactive adamantanaminoalcohols and adamantanamines. Eur J Med Chem. 2010;45(11):5022-30. doi: 10.1016/j.ejmech.2010.08.009.
ПРИЛОЖЕНИЕ.
Структура Показатели биологической активности
СС50, мкМ 1С50, мкМ
98 >3284,5 >3284,5 1
99 3284,5±224,1 997,2±81,1 3
100 >3284,5 >3284,5 1
101 >3284,5 3284,5±214, 2 1
102 ''ОН >2143 155,8±18,4 14
103 Е^о 433,7±22.8 >198,8 <2
104 % 37,7±2.8 4,9±0.5 8
105 1 кн2 536,3±22,6 >215,3 <2
106 ф 943,4±51.2 60,1±6.1 16
107 1884,1±94,5 8,5±1,1 221
108 ^Х^он 180,8±14.5 22,2±2.9 8
109 Чр^-ы-он >1796,4 377,2±41,4 5
110 рн ерО 968,0±53.2 397,8±44.7 2
111 фг.-он 509,7±32.9 >168,4 <3
112 65,4±4,4 49,4±6,2 1
113 125,1±9.2 83,7±10.5 1
114 1804,4±43.3 24,1±3.0 75
115 ^Л >1421,8 473,9±56.1 3
ll6 650,8±53,2 518,1±49,8 1
ll7 1V >1S38,S 219,0±26.7 7
llB >2S86,3 19,7±2,3 132
ll9 ^ >1446,8 17,8±2,S >81
lZO _ 800,0±31,4 7,7±0,8 104
lZl ^- 553,2±31.8 29,8±3.5 19
lZZ ^N_ 233,7±12,7 1,4±0,5 171
1Z3 97,3±6.1 9,9±1.2 10
lZ4 ^- 50,9±2.4 10,3±1.9 S
1Z5 92,0±5.4 >40,0 <2
lZ6 >743,1 743,1±0,0 1
lZ7 1662,2±145,4 590,7±44,8 3
lZB >128S,4 35,8±3.8 >36
lZ9 248,6±19,2 34,8±3,8 7
1З0 368,1±32,3 14,9±1,8 25
1З1 Y4) >1039,S >1039,S 1
13Z 804,7±62,1 65,0±8,4 12
1ЗЗ >1328,4 12,5±2.3 106
1З4 f^X) >1143,2 26,7±4.1 43
1З5 tfWo- 294,6±11.6 25,0±3.0 12
136 -çwo 618,3±41.8 25,6±3.2 24
137 >1456,3 485,4±52,5 3
13B ^^N^^ S^""OH >1176.5 9.4±1.0 125
139 502,0±22 5,5±0.8 91
140 >1140,1 6,2±1.0 183
141 -Çw^O 99,4±5.3 5,2±1.1 19
142 384,6±22.8 19,5±2.3 20
143 1134,0±72.2 343,6±43.7 3
144 90,1±5,5 26,6±3,9 3
145 -fWCNJ 62,9±4,7 18,2±2,9 3
146 1083,0±66.1 45,1±5.6 24
147 ■ifl ^ 1254,8±62.9 38,4±5.3 33
14B 302.6±16.8 56.3±6.8 5
149 >1087.0 615.9±60.5 2
150 N=N >1034.5 55.2±6.9 19
151 <t>f N=N 239.1±18.5 31.3±4.2 8
152 970.8±65.4 >429.2 <2
153 ^_____CnV" 203.3±15.9 24.0±3.3 8
1S4 0 >607.3 25.3±2.8 24
1SS >638.3 297.9±32.5 2
15б 1 oA>Y 89.2±62.9 >56.6 2
1S7 fît -ли 32.1±2.2 >31.4 1
1SB 137.8±10.7 62.5±7.3 2
1S9 C^W^HT 201.4±11.5 >103.8 2
1б0 o / >624.6 353.9±42.1 2
1б1 517.0±36.6 264.2±32.8 2
1б2 162,9±11,9 29,8±3,7 6
1б3 XA-HCI >803,5 >803,5 1
1б4 "ïb 946,2±42.6 117,7±21.3 8
1б5 % >998,5 >998,5 1
1бб 255,5±14.8 >95,7 3
1б7 575,0±21.4 165,3±22.9 3
1бВ ^Xjli „-ía^-- 195,2±15.3 63,4±7.2 3
169 h,nI¿N >1657,5 138,7±16,9 12
ITC HO¿N >1648,4 63,2±7,8 26
1T1 1049.0±77.2 244.8±31.9 4
1T2 O 88.0±7.6 >33.5 3
1T3 mß*- 50.6±4.4 >31.8 2
1T4 /Vn O 140.1±10.9 31.7±4.0 4
1T5 677,9±55.8 >314.0 2
1T6 H 29.7±1.7 >12.4 <2
1TT / t X) / N y OH 58,4±3,1 >41,2 1
1TS ЧХГ N 139,1±10,1 5,8±0,6 24
1T9 HO^ JÍÍ 112,3±5,3 >41,4 3
1SC 4 ь....... N \\ // ^—N 2063,0±188,4 7,4±0,6 278
1S1 921,1±82,8 0,6±0,3 >500
1S2 .....-xCh O / 1530,2±139,8 8,3±0,9 185
1S3 Çn-H 774.4±10.1 1,2±0,1 645
1B4 v...... ' N OH >2388,9 6,7±0,5 357
1B5 .....^ 2106,3±168,4 18,5±2,2 114
1B6 / n^/^oh h 311,8±22,7 9,5±1,1 33
1B7 ................ 1 H^^OH 304,5±21,4 14,2±2,3 21
1BB HO—N 259,7±21,9 >181,6 1
1B9 H 50,7±4,1 26,4±3,2 2
190 Jjd -fr 81,7±6,6 13,3±0,6 6
191 62,0±4,3 5,5±1,1 11
192 Г) 34,1±2,8 3,9±0,7 9
193 95,2±6,4 9,5±1,0 10
194 ^nXN 121,5±7,4 29,3±4,2 4
195 123,5±6,6 38,1±5,1 3
196 я 532,3±41,2 274,2±22,3 2
197 Ь >1433,1 23,4±3,0 61
19B 4 2238,6±216,3 17,5±1,8 128
199 149,6±12,7 24,0±2,6 6
2OO >1090.9 38.9±4.2 28
2Ol O >1433,3 >1433,3 1
2O2 Ó 731.0±51,7 >292.4 3
2O3 195,7±16,1 5,2±0,5 38
2O4 722,4±58,8 25,6±3,0 28
2O5 2111,7±154,3 39,1±4,1 54
2O6 >2115,1 21,2±2,0 100
2O7 346,3±31,8 26,2±2,1 13
2OB 2538.1±149.5 83.8±10.4 30
2O9 >1077.5 >1077.5 1
2lO 'h.......,-o 459,7±42,9 5,0±0,4 91
2ll 32,9±2,1 4,2±0,6 8
2l2 30,1±2,3 15,0±2,0 2
2l3 69,6±7,9 2.1±0,4 33
2l4 138.4±11.2 42.7±5,3 3
2l5 Г"/! H XT >811.0 8.1±0,9 100
2l6 114.3±10.5 15.8±1,7 7
2l7 S 408.1±32.6 >272.1 2
2lB 68.0±5.5 15.7±1,4 4
2l9 N ^tV^ 16.3±1.5 4.6±0,8 4
22G bf4" >896.7 106.0±12,8 8
22l 70,1±5.3 >38,3 2
222 156,0±9,9 28,8±1,8 5
223 597,4±49,9 163,8±15,1 4
224 69,2±4.4 >34,0 2
225 o---^nC--^^ 41,8±3,2 7,1±1,1 6
226 301,4±17,2 33,9±3,0 9
227 124,5±9,9 14,3±1,7 9
22B 137,4±11,8 14,3±1,6 10
229 ^o^-nQ 69,5±5,2 7,8±1,0 9
23G ^oXN^ 93.7±8.5 10.2±8.9 9
231 56,3±4,4 15,3±2,8 4
232 1 4—N ^NH 102,7±8,3 7,1±0,8 14
233 99,9±7,2 4,4±1,1 23
234 65,7±3.6 8,1±0.5 8
235 СUJ^T >852,3 >852,3 1
236 k/N 12,6±0,6 6,8±1,0 2
237 N_N— 48,0±3,3 1,9±0,7 25
238 Ф-- J-— ■■ -^N \ 1 31,6±2,2 8,4±1,2 4
239 ^^-X^n^O o— 149,3±8,8 >98,2 2
24G 202,8±15.6 >94,0 2
241 108,8±8.6 12,2±2.1 9
242 215,5±17.8 11,8±2.3 18
243 49,5±3,3 9,5±1,8 5
244 ^ "N 1 N^ 607,9±42,4 41,8±5,3 15
245 T o 116,8±8,4 17,5±1,9 7
246 230,9±16,4 91,8±8,6 3
247 S >917,9 >917,9 1
248 11—r >1264,0 35,4±3,1 36
249 ^—NH 103,1±8.6 12,9±2.7 8
250 O >1884,7 >1884,7 1
251 O >1732,0 981,5±103,4 2
252 579,3±44,4 7,1±0,4 82
253 —N_о 551,8±45,1 12,2±2,3 45
254 1372,5±112,6 2,7±0,5 500
255 1189,4±100,5 57,1±4,9 21
256 1311,3±126,2 2,4±0,4 556
257 "Ç^o^NC; 110,8±8,2 >79,7 1
258 298,0±18,6 12,4±1,7 24
259 30,3±2,6 3,5±0,8 9
260 y ^ ^ 40,3±3,1 3,2±0,6 13
261 G >1239,2 >1239,2 1
262 h /G4 >1113,7 1113,7±0,0 1
263 981,0±72,4 35,7±4,1 28
264 132,6±8,8 32,7±5,2 4
265 >856,0 20,8±3.6 >41
266 / >930,5 >930,5 1
267 / O\ 298,6±15,5 >86,3 3
268 856,2±41,3 63,6±6,0 13
269 414,6±21,8 148,4±19,0 3
270 o Сч^Оз 1077,0±0,0 >1077,0 1
271 ^чЛ >832,5 >832,5 1
272 / ^Ч^Ъ ^ W W 832,5±0,0 >832,5 1
273 "ёнгй 148,5±12,9 12,9±1,8 12
274 Ow >500 50±6,7 10
275 1883,5±144,2 70,4±8,1 27
276 1781,8±99,6 141,0±11,0 13
277 с® ,-N 4- 52,3±4,7 31,4±4,2 2
27B 5,8±0,6 1,1±0,5 S
279 H -vi^-i- 60,5±4,4 8,1±1,2 7
2BG 1 OH 173.2±8.2 2.0±0.4 88
2B1 283,2±20,7 9,3±1,1 30
2B2 7S9,9±41,3 10,7±1,1 71
2B3 681,0±59,4 12,3±2,0 SS
2B4 ^Xn-^ 2218,7±154,8 4S,1±3,9 49
2B5 390,1±25,6 24,2±3,1 16
2B6 с 376,6±26,1 14,6±1,9 26
2B7 с: 60S,3±54,0 229,3±26,2 3
2BB 734,0±65,1 379,8±38,6 2
2B9 113,2±10,6 94,1±10,8 1
Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.