Активность азоло-адамантанов в отношении вируса гриппа тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.02, кандидат биологических наук Анфимов, Павел Михайлович

• Анфимов, Павел Михайлович
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Анфимов, Павел Михайлович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

РАЗДЕЛ 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Глава 1. Этиология и репродукция вируса гриппа.

1.1. Этиология вируса гриппа.

1.2. Строение и репродукция вируса гриппа.

Глава 2. Современные методы профилактики и лечения гриппа.

2.1. Вакцинопрофилактика.

2.2. Химиотерапия.

2.2.1. Ингибиторы адсорбции и проникновения.

2.2.2. Ингибиторы декапсидации.

2.2.3. Ингибиторы протеаз.

2.2.4. Ингибиторы репликации и транскрипции.

2.2.5. Ингибиторы кэпирования мРНК.

2.2.6. Ингибиторы высвобождения вируса из клетки.

2.2.7. Интерфероны и индукторы интерферонов.

2.2.8. Резистентность к противогриппозным препаратам.

2.2.9. Перспективы поиска новых химиопрепаратов.

РАЗДЕЛ 2. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Глава 1. Материалы и методы.

1.1. Исследуемые препараты.

1.2. Вирусы и клетки.

1.3. Питательные среды.

1.4 Препараты.

1.5. Исследование токсичности препаратов.

1.6. Подготовка вируса.

1.7. Определение противовирусной активности препаратов.

1.8.Определение ингибирования активности нейраминидазы флюоресцентным методом.

1.9. Получение устойчивых к азоло-адамантанам штаммов вируса гриппа.

1.10. Молекулярно-биологические методы.

1.11. Исследование противовирусной активности азоло-адамантанов in vivo на модели гриппозной пневмонии у белых мышей.

1.12. Статистическая обработка данных.

Глава 2. Результаты исследований.

2.1. Первичный скрининг препаратов.

2.2. Сравнение активности азоло-адамантанов и римантадина в эквимолярных концентрациях.

2.3 Исследование ингибирующей активности азоло-адамантанов в отношении нейраминидазы вируса гриппа.

2.4 Исследование противовирусной активности активных азоло-адамантанов в отношении эпидемических изолятов вируса гриппа.

2.5. Исследование активности азоло-адамантанов in vivo на модели гриппозной пневмонии у белых мышей.

2.6. Исследования мутаций изменчивости в вирусах, устойчивых к азоло-адамантанам.

ОБСУЖДЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Активность азоло-адамантанов в отношении вируса гриппа»

Актуальность проблемы

Проблема гриппа является актуальной на сегодняшний день. Уникальная^ способность вирусов гриппа к изменчивости путем мутаций, рекомбинаций и реассортации генов, сопровождающаяся модификацией биологических свойств вируса — причина неконтролируемого распространения инфекции. Несмотря на успехи в1 создании вакцин и средств химиотерапии, эпидемиш гриппа по-прежнему имеют огромные масштабы. Подтверждением этому стала пандемия 2009/2010« года; вызванная вирусами гриппа А(Н>Ш1)р(кп09. На сегодняшний день мировое признание получили только > два» класса лекарственных соединений для терапии гриппозной инфекции: производные адамантана (амантадин, римантадин), являющиеся ингибиторами функциональной активности белка М2 и производные сиаловой кислоты, имеющие специфическую мишень действия- - нейраминидазу (занамивир, осельтамивир). Среди циркулирующих эпидемически актуальных вирусов зафиксирован рост устойчивости к данным препаратам, а резистентность к римантадину среди выделенных вирусов в последние эпидемические сезоны достигла практически 100% (http://www.cdc.gov/flu/about/qa/antiviralresistance.htm). В пределах подтипа НШ1 стопроцентная устойчивость к осельтамивиру была достигнута всего<за полтора года (ноябрь 2007 - март 2009). В связи с этим чрезвычайно актуальны поиск и разработка новых, активных в,отношении вируса гриппа, лекарственных средств, а также исследование механизма их действия.

Целенаправленный синтез соединений с противовирусной активностью позволил получить принципиально новые соединения азоло-адамантанового ряда, содержащие адамантановый цикл, который входит в состав классического противогриппозного препарата римантадин. Азотистые гетероциклы, включенные в структуру азоло-адамантанов, обладают собственной противовирусной активностью, кроме того, по литературным данным, введение триазольных производных в химическую структуру занамивира усиливает ингибирование нейраминидазы (Lu et al, 2007). Таким образом, дизайн азоло-адамантанов определяет перспективность исследования их противовирусного действия и возможность получения этиотропных препаратов с несколькими мишенями.

Цель исследования

Целью исследования являлось изучение противовирусного действия химических соединений класса азоло-адамантанов в отношении вируса гриппа.

Задачи исследования

• Провести первичный скрининг противовирусной активности Ч тестируемых соединений в опытах in vitro, выявить среди них наиболее активные.

• Изучить активность азоло-адамантанов в отношении циркулирующих вирусов гриппа А, в том числе A(HlNl)pdm09.

• Оценить активность азоло-адамантанов как ингибиторов вирусной нейраминидазы.

• Исследовать протективную активность отобранных соединений на модели летальной гриппозной пневмонии у мышей.

• Получить устойчивые к азоло-адамантанам штаммы вируса гриппа и изучить генетические изменения при смене фенотипа с чувствительного на резистентный.

Научная новизна работы

1. Впервые исследована противовирусная активность азольных производных адамантанов.

2. Сформулированы основные условия противовирусной активности азоло-адамантанов. Определена зависимость противовирусной активности азоло-адамантанов от их химической структуры.

3. Впервые показано, что соединения класса азоло-адамантанов обладают высоким уровнем противовирусной активности in vitro в отношении лабораторных (референс) и циркулирующих сезонных вирусов гриппа А, и умеренной активностью против вирусов гриппа A(HlNl)pdm09.

4. Впервые показано, что азоло-адамантаны не проявляют ингибирующей активности в отношении вирусной нейраминидазы.

5. Впервые показано, что! азоло-адамантаны обладают, умеренной противовирусной активностью или не активны на модели летальной гриппозной пневмонии у мышей.

6. Впервые путем многократных пассажей в клеточных культурах получены и охарактеризованы вирусные варианты, резистентные к азоло-адамантанам и изучены молекулярно-биологические основы резистентности к ним.

Практическая значимость работы

В результате проделанной работы сформулированы основные требования к структуре соединений класса азоло-адамантанов4 как противовирусных средств. Установлен механизм формирования резистентности вирусов гриппа к азоло-адамантанам. Полученные результаты являются основой для дальнейшей разработки соединений с целью создания новых противогриппозных препаратов широкого спектра действия.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Триазольные и тетразольные производные адамантанов обладают высоким уровнем противовирусной активности in vitro в отношении лабораторных (референс) и циркулирующих сезонных вирусов гриппа А и умеренной активностью против вирусов гриппа A(HlNl)pdm09.

2. Тетразольные производные адамантанов более активны, нежели их триазольные и диазольные гомологи.

3. Азоло-адамантаны не проявляют ингибирующей активности в отношении нейраминидазы вируса гриппа.

4. Азоло-адамантаны проявляют умеренный уровень активности или не проявляют противовирусной активности in vivo на модели летальной гриппозной пневмонии у мышей.

5. Пассирование вируса1 в присутствии азоло-адамантанов приводит к снижению чувствительности вируса и появлению мутации S31N в М2-белке, характерной для римантадин-устойчивых вирусов.

Апробация материалов диссертации

Материалы диссертационной работы доложены на международных конференциях: Strengthening influenza pandemic preparedness through civil-militaiy co-operation, Saint-Petersburg, Russia, May 9-11, 2003, XI международная научно-техническая конференция, Волгоград, Россия, 3-6 июня 2008 г., конференция "Third European influenza conference" Vilamoura, Portugal, September 14-17, 2008.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ, в том числе 3 статьи в журналах, рекомендованных ВАК.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 118 страницах машинописного текста, включая 24 таблицы и 16 рисунков. Работа состоит из введения, обзора литературы, описания использованных материалов и методов, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка цитируемой литературы. Список литературы содержит 144 источника на русском и английском языках.

Заключение диссертации по теме «Вирусология», Анфимов, Павел Михайлович

Выводы

1. Триазольные и тетразольные производные адамантанов обладают высоким уровнем противовирусной активности in vitro в отношении лабораторных (референс) и циркулирующих сезонных вирусов гриппа А и умеренной активностью против вирусов гриппа A(HlNl)pdm09.

2. Тетразольные производные адамантанов более активны, нежели их триазольные гомологи. На реализацию противовирусной активности влияют следующие параметры:

- Молекула должна содержать не более одного тетразольного и не более одного адамантильного остатка.

- Адамантильные заместители должны занимать в тетразольном цикле положение 1.

3. Азоло-адамантаны не проявляют ингибирующей активности в отношении нейраминидазы вируса гриппа.

4. Азоло-адамантаны проявляют умеренный уровень активности или не проявляют противовирусной активности in vivo на модели летальной гриппозной пневмонии у мышей.

5. Пассирование вируса в присутствии азоло-адамантанов приводит к снижению чувствительности вируса и появлению мутации S31N в М2-белке, характерной для римантадин-устойчивых вирусов. При этом мутаций в гемагглютинине и РВ2-белке не зафиксировано.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Анфимов, Павел Михайлович, 2011 год

1. Алферов В. П., Ариненко Р. Ю., Аникин В. Б., Малиновская Р. В. Система интерферона и интерферонотерапия: новые возможности и перспективы.// Росс. Семейный врач. 1998. - №.1. - С. 35-41.

2. Галегов Г. А., Наровлянский А. Н., Мезенцева М. В., Нестеренко В. Г.,t

3. Ершов Ф. И. «Кагоцел подавляет репродукцию вируса герпеса in vitro».// Russian Journal of Immunology. Official Journal of Russian Society of Immunology. 2004. - 9(suppl .1). - P. 44.

4. Гендон Ю.З. Новости вакцинопрофилактики.// Вакцинация. 1999. - №5. -С.З.

5. Гринбаум Е.Б., Литвинова О.М., Банников А.И. и др. Полиморфизм популяции современных вирусов гриппа А и В человека.// Вестник РАМН. -1994.-№9. -С. 36-40.

6. Грипп и другие респираторные вирусные инфекции. СПб.- 2003

7. Ерофеева М.К., Максакова М.А., Шадрин A.C. и др. Оценка эффективности применения препарата "иммунал" с целью профилактики гриппа и других острых респираторных недугов.// Terra medica.- 2000. N 4. - Р.379

8. Ершов Ф. И., Киселев О. И. Интерфероны и их индукторы (от молекул до лекарств). М. ГЭОТАР-Медиа. - 2005. - С.368.

9. Железникова Г.Ф., Иванова В.В., Монахова Н.Е. Варианты иммунопатогенеза острых инфекций у детей. СПб. - 2007. - С. 254

10. Иванова В.В. Острые респираторно-вирусные заболевания.// Инфекционные болезни у детей. М., - 2002.

11. Киселев О.И., Деева Э.Г., Слита A.B., Платонов В.Г. Антивирусные препараты для лечения гриппа и ОРЗ. Дизайн препаратов на основе полимерных носителей. 2000. - С-Петербург - С.46.

12. Лепехин А.В., Зорина 3:И., Бужак Н.С., Пучкова Н.Н. Йодантипирин -эффективное средство для профилактики гриппа и других ОРВИ.// Информационное письмо для врачей. — Томск. 2005

13. Литвинова О.М., Юхнова Л.Г., Коновалова Н.И. и др. Этиологический-надзор в России на базе Федерального центра по гриппу.// Тезисы научн. конф. "Грипп XXI век", 28 сент. - 2'окт. 1997 г., - С.-Петербург. - Россия.-1997. - С. 34.

14. Малашенкова И.К.,. Дидковский Н.А. Современные подходы к профилактике и лечению ОРВИ и гриппа.// Русский медицинский журнал. -2006. № 27. - С. 1968.

15. Малый'В.П:, Романцов M.F.,„Сологуб Т.В., Грипп. Пособие для врачей. -Санкт-Петербург — Харьков. 2007.

16. Никитин Е.В. Использование Амиксина в терапии и. профилактике вирусных инфекций.// Одесский* государственный, медицинский университет, кафедра инфекционных болезней.и.эпидемиологии. Украина. - Медицина сегодня. - 2007. - № 2. — С. 206.

17. Онищенко Г.Г., Киселев О.И., Соминина* А.А1. Усиление надзора и контроля за гриппом как важнейший элемент подготовки к сезонным эпидемиям и очередной пандемии. М., 2004. - С. 5-9.

18. Abed Y., Goyette N., Boivin G. Generation and characterization of recombinant influenza- A (H1N1) viruses harboring amantadine resistance mutations.//Antimicrob Agents Chemother. 2005. - V. 49 (2). - P.556-559.

19. Anhlan D., Grundmann N., Makalowski W., Ludwig S., Scholtissek C. Origin of the 1918 pandemic H1N1 influenza A virus as studied by codon usage patterns and phylogenetic analysis.// RNA. 2011. - P. 64-73.

20. Aoki F.Y., Boivin G., Roberts N. Influenza virus susceptibility and resistance to oseltamivir.// Antivir. Ther. 2007. -V. 12. - P. 603-616.

21. Arnaud P. The interferons: pharmacology, mechanism of action, tolerance and side effects.// Rev Med Interne. 2002. - Nov. 23. - Suppl. 4. - P. 449-458.

22. Azuma M., Suzutani T., Sazaki K., Yoshida I., Sakuma T., Yoshida T. Roleof interferon in the augmented resistance of trehalose-6,6'-dimycolate-treatedmice to influenza virus infection.// J Gen Virol. 1987. - Mar. 68 ( Pt 3). -P.835-843.

23. Balezina T.I., Fadeeva L.L., Zemskov V.M., Korneeva L.E., Loidina G.I. Interferonogenic and antiviral activity of the tobacco mosaic virus, tilorone and sodium-nucleinate.// Antibiotiki. 1976. - Mar. 21(3). - P. 250-254.

24. Baz M., Abed Y., McDonald J. and Boivin G. Characterization of multidrug-resistant influenza^ A/H3N2 viruses shed during' 1 year by an immunocompromised child.// Clin. Infect. Dis. 2006. - V. 43. - P. 1555-1561.

25. Borman S. Flu virus proton channel analyzed: structures of key surface protein suggest different drug mechanisms.// Chem Eng News. 2008. - V.86. -P. 53-54.

26. Bouvier N.M., Lowen A.C., Palese P. Oseltamivir-resistant influenza A viruses are transmitted efficiently among guinea pigs by direct contact but not by aerosol.// J. Virol. 2008. -V. 82. - P. 10052-10058.

27. Collins P.J., Haire L.F., Lin Y.P., Liu J., Russell R.J., Walker P.A., Skehel

28. J.J., Martin S.R., Hay A.J., Gamblin S.J. Crystal structures of oseltamivir104resistant influenza virus neuraminidase mutants .// Nature. 2008. - V. 453 (7199).-P. 1258.

29. Cox N .J., Fukuda K. Influenza // Infect. Dis. Clin. N. Amer. 1998. -vol. 12. -P. 27-37.

30. De Clercq E. Emerging antiviral drugs.// Expert. Opin. Emerg. Drugs. 2008. v. 3 -p. 393-416i

31. Dutkowski R., Thakrar B., Froehlich E., et al. Safety and pharmacology of oseltamivir in clinical use.// Drug Saf., 2003. - V. 26. - P. 787-801.

32. Fields B.N., Knipe D.M., Howley P.M. Fields. Virology. Philadelphia: Wolters Kluwer Health/Lippincott Williams & Wilkins. - 2007.

33. Furuta Y., Takahashi K., Kuno-Maekawa M., Sangawa H., Uehara S., Kozaki

34. K., Nomura N., Egawa H., Shiraki K. Mechanism of action of T-705 againstinfluenza virus.// Antimicrob Agents Chemother. 2005. V.49. - P. 981-986.105

35. Gubareva L.V., Kaiser L., Matrosovich M.N., Soo-Hoo Y. and Hayden F.G., Selection of influenza virus mutants in experimentally infected volunteers treated with oseltamivir.// J. Infect. Dis. V. 183. - 2001. - P. 523-531.

36. Guo Y., Rumschlag-Booms E., Wang J:, Xiao H., Yu J1., et al. Analysis of hemagglutinin-mediated entry tropism of H5N1' avian influenza.// Virology Journal. 2009. - V. 6. - P. 39.

37. Hatta T., Ishikawa M., Takai K., Nakada S., Yokota T., Hata T., Miura K., Takaku H. Inhibition of influenza virus RNA polymerase by 5'-capped short RNA fragments.// Biochem. Biophys. Res. Commun. 1998. - Aug. 10; -V. 249(1). -P. 103-106.

38. Hayden F.G. Antivirals for pandemic influenza.// J. Infect. Dis. 1997 Aug; 176. - Suppl. l.-P. 56-61.

39. Herlocher M.L., Carr J., Ives J., et al. Influenza virus carrying an R292K mutation in the neuraminidase gene is not transmitted in ferrets.// Antiviral Res. -2002.-V. 54.-P. 99-111.

40. Hope-Simpson R.E., Golubev D.B. A new concept of the epidemic process of influenza A virus // Epidemiol", and Infec. 1987. - vol. 99. - p. 5-54.

41. Hosoya M., Shigeta S., Ishii T., Suzuki H:, De Glercq, E. Comparative inhibitory effects of various nucleoside and nonnucleoside analogues on replication of influenza virus types A and'B in vitro and in ovo.// J: Infect. Dis. -1993.-V. 168.-P. 641-646.

42. Huffman J.H., Sidwell R.W., Barnard D.L. et al. Influenza virus inhibitory effects a series of germanium - and silicon-centred polyoxometalates // Antiviral Chemistry & Chemotherapy. - 1997 - V.8 - P.75-83.

43. Jackson H.C., Roberts N., Wang Z.M., et al. Management of influenza: use of new antivirals and resistance in-perspective.// Clin. Drug. Invest. — 2000: V.20. -P. 447-454.

44. Jakeman K.Jv Tisdale M:, Russell S., Leone A., Sweet C. Efficacy of 2'-deoxy-2'-fluororibosides against influenza A and B viruses in ferrets.// Antimicrob. Agents. Chemother. 1994. - V.38, P. 1864-1867.

45. Ison M.G., Gubareva L.V., Atmar R.L., Treanor J. and Hayden F.G. Recovery of drug-resistant influenza virus from immunocompromised patients: a case series.// J. Infect. Dis. -2006. P. 760-764.

46. Kido H., Yokogoshu Y., Saski K. et al. Isolaton and characterization of a novel trypsin-like protease found in rat bronchiolar epithelial cells // J. Biol. Chem. 1993. - V. 267. - P.13573-579.

47. Kinnunen L., Ikonen N., Pory T., Pyhala R. Evolution of influenza B/Victoria/2/87-like viruses: occurrence of a genetically conserved virus under condition of low epidemic activity.// Gen. Virol. 1992. -vol. 73. - P. 733-736.

48. Kiso M., Mitamura K., Sakai-Tagawa Y. et al. Resistant influenza A viruses in children treated with oseltamivir: descriptive study.// Lancet. 2004. - V. 364. -P. 759-65.

49. Klenk H.D., Garten W., Matrosovich M. Molecular mechanisms of interspecies transmission and pathogenicity of influenza viruses: Lessons from the 2009 pandemic.//Bioessays. 2011.-V. 33(3).-P. 180-188.

50. Kolocouris N., Zoidis G., Foscolos G.B1., Fytas G., Prathalingham S.R., Kelly J.M., Naesens L., De Clercq E. Design and synthesis of bioactive adamantane spiro heterocycles.// Bioorg. Med. Chem. Lett. 2007 - V. 17(15). -P. 43584362.

51. Kolocouris A., Foscolos G.B., Fytas G., Kolocouris N., DeClercq, E.

52. Synthesis of 2-(2-adamantyl)piperidines and' structure anti-influenza virus Aactivity relationship study using a combination of NMR spectroscopy andmolecular modeling.// Bioorg. Med. Chem. Lett. 1999. - V. 9. - P. 3465.108

53. Kolocouris A., Kolocouris N., Foscolos G.B., De Clercq E. Synthesis and antiviral activity evaluation of some new aminoadamantane derivatives. 2.// J. Med. Chem. 1996.-V. 39.-P. 3310.

54. Kramer M.J., Cleeland R., Grunberg E. Antiviral- activity of 10-carboxymethyl-9-acridanone.// Antimicrob. Agents. Chemother. 1976. - V. 9(2).-P. 233-238.

55. Li M.L., Rao P., Krug R.M. The active sites of the influenza cap-dependent endonuclease are on different polymerase subunits.// EMBO J. 2001. -V.20(8). -P. 2078-2086.

56. Lu Y., Gervay-Hague Ji Synthesis of C-4 and C-7 triazole analogs of zanamivir as multivalent sialic acid containing scaffolds.// Carbohydr Res. 2007 V.42(12-13). -P.1636-1650.

57. Ludwig S., Stilz L., Planz O. et al. European swine virus as a possible source for the next influenza pandemic.// Virology. 1995. - V. 212. - P. 555-561".

58. Luo G., Colonno R., Krystal M.Characterization of a hemagglutinin-specific inhibitor of influenza A virus.// Virology. 1996. - V. 226(1). - P. 66-76.

59. McGeer A., Green K.A., Plevneshi A., et al. Antiviral therapy and outcomes of influenza requiring hospitalization in Ontario, Canada.// Clin. Infect. Dis. -2007.-Y. 45.-P. 1568-1575.

60. McKimm-Breschkin J. L. Resistance of influenza viruses to neuraminidase inhibitors—a review.// Antiviral Research. 2000. - V. 47. - P. 1-17.

61. Mossmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays. J. Immunol. Methods. 1983. -V. 65.-P. 55-63.

62. Nayak D.P., Balogun R.A., Yamada H., Zhou Z.H., Barman S. Influenza virus morphogenesis and budding.// Virus Res. 2009. - V. 143(2). - P. 147161.

63. Noboru U., Kunio O. Antiviral function of pyrrolidine dithiocarbamate against influenza virus: the inhibition of viral gene replication and transcription.// J. Antimicrob. Chem. 2003. -V. 52. - P. 8-10

64. Peiris M. Pathogenesis of avian flu H5N1 and SARS.// Novartis Found Symp. 2006. - V. 279. - P. 56-60.

65. Pielak R.M., Schnell J.R., Chou J J. Mechanism of drug inhibition and drug resistance of influenza A M2 channel.// Proc. Natl Acad Sci USA. -2009. -V. 106.-P. 7379-7384.

66. Poland G.A., Jacobson R.M., Ovsyannikova I.G. Influenza virus resistance to antiviral agents: A plea for rational use.// Clin. Infect. Dis. 2009. - V.48. - P. 1254-1256.

67. Pontoriero A., Baumeister E., Campos A.M., Moreno A., Cadario M.E., Savy V. Surveillance of adamantane resistance among influenza A H3 viruses isolated in Argentina between 2001 and 2007.// Rev. Argent. Microbiol. 2008. -V. 40(3).-P. 180-184.

68. Potier M., Mameli L., Belislem L., Dallaire L., Melanxon S.B. Fluorometric assay of neuraminidase with a sodium (4-methylumbeliferiyl-a-B-T-acetylneuraminate) substrate.// Anal.Biochem. 1979. V.94. - P.287-296:

69. Reed L.J., Muench H. A simple method of estimating fifty percent endpoints.// The American Journal of Hygiene. 1938. - V. 27. - P. 493^197.

70. Reid A.N., Fanning T.G., Hultin J.Y., Taubenberger J.K. Origin and evolution« of the 1918 "Spanish" influenza virus haemagglutinin gene. // Microbiol: 1999. -V. 96.-P. 1651-1656.

71. Robb N.C., Chase G., Bier K., Vreede F.T., Shaw P.C., Naffakh N., Schwemmle M., Fodor E. The Influenza A Virus NS1 Protein Interacts with the Nucleoprotein of Viral Ribonucleoprotein Complexes.// J. Virol. 2011. - V. 85(10).-P. 5228-5231.

72. Roberts N.A., Wiltshire H.R., Mendel D.B., et al. Oseltamivir carboxylate is effective against all subtypes of influenza neuraminidase.// Abstracts of the ASM Biodefense Research Meeting. 2003. - Baltimore. Poster.

73. Rosenberg M.R., Casarotto M.G. Coexistence of two adamantane binding sites in the influenza A M2 ion channel.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2010. -V. 107(31). -P.13866-13871.

74. Rothberg M.B., Bellantonio S., Rose D.N. Management of influenza in adults older than 65 years of age: Cost-effectiveness of rapid testing and antiviral therapy.// Ann. Intern. Med.-2003. -V.139.-P. 321-321.

75. Saito R, Sakai T., Sato I., Sano Y., Oshitani H., Sato M., Suzuki H. Frequency of amantadine-resistant influenza A viruses during two seasons featuring cocirculation of H1N1 and H3N2.// J. Clin. Microbiol. 2003 -V. 41(5).-P. 2164-2165.

76. Samji T. Influenza A: Understanding the Viral' Life Cycle.// Yale. J. Biol. Med.-2009.-V. 82(4).-P. 153-159.

77. Scharfenorth H., Glathe H., Giese H:, Diffmann, S. Zur Epidemiologic und Klinik der Influenza C-lnfektion.// ZKM: Z. Klin. Med. 1991. - V. 46. - P. 11831187.

78. Scholtissek C., Burger H., Bachmann P.A., Hannoun C. Genetic relatedness of haemagglu-tinins of the HI subtype swine and birds.// Virology. 1983. - V. 129.-P. 521-523.

79. Scholtissek C. Molecular evolution of influenza viruses.// Virus. Genes. -1996. VI1.-P. 209-215.

80. Scholtissek C., Quack G., Klenk H.D., Webster R.G. How to overcome resistance of influenza A viruses against adamantane derivatives.// Antiviral Res. 1998. - V. 37(2). - P. 83-95.

81. Shigeta S., Mori S., Yamase T., Yamamoto N., Yamamoto N. Anti-RNA virus activity of polyoxometalates.Biomed Pharmacother.// 2006. — V. 60(5). — P. 211-219.

82. Shigeta S., Mori S., Kodama E., Kodama J., Takahashi K., Yamase T. Broad spectrum anti-RNA virus activities of titanium and vanadium substituted polyoxotungstates.// Antiviral Res. 2003. - V. 58(3). - P. 265-271.

83. Shigeta S. Approaches to antiviral chemotherapy for acute respiratory infections.// Antivir Chem Chemother. 1998. - V. 9(2). - P. 93-107.

84. Shigeta S., Mori S., Watanabe J., Soeda S., Takahashi K., Yamase T. Synergistic anti-influenza virus A (H1N1) activities of PM-523 (polyoxometalate) and ribavirin in vitro and in vivo.// Antimicrob. Agents. Chemother. 1997.-V. 41(7).-P. 1423-1427.

85. Shultz-Cherry S., Dybdahl-Sisso N., Neumann O. et al.// J. Virol. 2001. -V.75.-P. 7875-7881.

86. Semenenko T.A., Selkova E.P., Nikitina G.Y., Gotvyanskaya T.P., Yudina T.I., Amaryan M.P., Nosik N.N., Turyanov M.H. Immunomodulators in the prevention of acute respiratory viral infections.// Russ. J. Immunol. 2002. - V. 7(2).-P. 105-114.

87. Shneider M.A., Golovkin V.I., Chizhov N.P., Shtil'bans EB. Amphoglucamine in the combined chemotherapy of viral diseases.// Vopr. Virusol. 1987. - V. 32(6). - P. 736-739.

88. Schnell J.R., Chou J J. Structure and mechanism of the M2 proton channel of influenza A virus.//Nature.-2008. V. 451(7178).-P. 591-595.

89. Sologub T.V., Shul'diakov A.A., Romantsov M.G., Zhekalov A.N.,

90. Petlenko S.V., Erofeeva M.K., Maksakova V.L., Isakov V.A., Zarubaev V.V.,

91. Stamatiou G., Foscolos G.B., Fytas G., Kolocouris A., Kolocouris N., De Clercq E. Heterocyclic rimantadine analogues with antiviral activity.// Bioorg. Med. Chem. 2003. - V. 11 - P. 5485.

92. Stephenson I., Democratis J., Lackenby A., et al. Neuraminidase inhibitor resistance after oseltamivir treatment of acute influenza A and B in children.// Clin. Infect. Dis. 2009. - V. 48. - P. 389-396.

93. Sukhinin V.P., Pleskov V.M., Zarubaev V.V., Slita A.V., Pestrinskaia E.A., Brzheskii V.V., Kovalenko A.L., Ershov P.I. The use of cycloferon in the therapy of experimental herpetic keratitis.// Antibiot .Khimioter. 2000. -V. 45(6). -P.13-16.

94. Sukhinin V.P., Zarubaev V.V., Platonov V.G., Kovalenko A.L., Ershov F.I. Protective effect of cycloferon in experimental influenza.// Vopr. Virusol. -2000.-V. 45(5).-P. 26-30.

95. Tao SJ. A screening method for anti-influenzal drugs; influenza virus propagation inhibition test (author's transí).// Zhonghua Yi Xue Za Zhi. 1981 V. 61(6).-P: 359-361.

96. Taubenberger J.K., Reid A.M., Krafft A.E. et al. Initial genetic characterization of the 1918 "Spanish" influenza virus.// Science. - 1997. - V. 275.-P. 1793-1795.

97. Tellier R. Aerosol transmission of influenza A virus: a review of new studies.// J. R. Soc Interface. 2009. - V. 6. - P. 783-790.

98. Timofeev I.V., Chaplygina S.R., Zorin V.V., Khromykh A.A., Kolokol'tsov AA. Comparative study of interferon inducers obtained from natural sources.// Antibiot. Med. Biotekhnol. 1987. - V. 32(2). - P. 144-147.

99. Triana-Baltzer G.B., Babizki M., Chan M.C., Wong A.C, Aschenbrenner

100. M., Campbell E.R., Li Q.X., Chan R.W., Peiris J.S., Nicholls J.M., Fang

101. F.DAS181, a sialidase fusion protein, protects human airway epithelium againstinfluenza virus infection: an in vitro pharmacodynamic analysis.// J. Antimicrob.

102. Chemother. 2010. - V. 65(2). - P. 275-284.115

103. Tu Q., Pinto L.H., Luo G., Shaughnessy M.A., Mullaney D., Kurtz S., Krystal M., Lamb R.A. Characterization of inhibition of M2 ion channel activity by BL-1743, an inhibitor of influenza A virus.// J. Virol. 1996 - V. 70. - P. 4246-4252.

104. Update: drug susceptibility of swine-origin influenza A. (H1N1) viruses, April 2009. Centers for Disease Control and Prevention- (CDC). MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 2009: - V. 58(16). - P. 433-435.

105. Wang T., Wade R.C.// J. Med. Chem. 2001 - V. 44 - P. 961-971.

106. Wang M.Z., Tai C.Y. and''Mendel D.B. Mechanism by which mutations at His274 alter sensitivity of influenza A virus N1 neuraminidase to oseltamivir carboxylate and zanamivir.// Antimicrobial Agents Chemotherapy. 2002. - V. 46.-P. 3809-3816.

107. Wang J., Cady S.D., Balannik V., Pinto L.H., DeGrado W.F., Hong M. Discovery of spiro-piperidine inhibitors and their modulation of the dynamics of the M2 proton channel from influenza. A virus.// J. Am. Chem. Soc. 2009 -V. 131(23).-P. 8066-8076.

108. Ward P., Small I., Smith J., et al. Oseltamivir (Tamiflu) and its potential for use in the event of an influenza pandemic.// J. Antimicrob. Chemother. 2005. -V. 55.-P. 15-21.

109. White L.K., Yoon J.-J., Lee J.K., Sun A., Du Y., Fu H., Snyder J.P., Plemper R.K.// Antimicrob. Agents Chemother. 2007. - V. 51. - P. 2293.

110. Whitley R.J., Hayden F.G., Reisinger K.S., Young N., Dutkowski R., Ipe D., Mills R.G., Ward P. Oral oseltamivir treatment of influenza in children.// Pediatr. Infect. Dis. 2001. - V. 20. - P. 127-133.

111. Witkowski J.T., Robins R.K., Khare G.P., Sidwell R.W. Synthesis and antiviral activity of l,2,4-triazole-3-thiocarboxamide and l,2,4-triazole-3-carboxamidine ribonucleosides.// Ji Med Chem. 1973. - V.16. -P. 935-937.

112. Wray S.K., Gilbert B.E., Knight V. Effect of ribavirin triphosphate on primer generation and elongation during influenza virus transcription in vitro.// Antiviral. Res. 1985. - V. 5. - P: 39-48.

113. Yen H.L., Herlocher L.M., Hoffmann E., Matrosovich M.N., Monto A.S., et al. Neuraminidase inhibitor-resistant' influenza viruses may differ substantially in fitness and transmissibility.// Antimicrob. Agents Chemother. 2005. - V. 49. -P. 4075-4084.

114. Zoidis G., Kolocouris N., Kelly J.M., Prathalingam S.R., Naesens E., De Clercq E. Design and synthesis of bioactive adamantanaminoalcohols and adamantanamines.// Eur. J. Med. Chem. 2010. - V. 45(11). - P. 5022-5030.

115. Zoidis G., Kolocouris N., Naesens L., De Clercq, E.Design and'synthesis of 1,2-annulated adamantane piperidines with'anti-influenza virus activity.// Bioorg. Med. Chem. 2009. - V.17(4). - P. 1534-1541.

116. Zoidis G., Tsotinis A., Kolocouris N., Kelly J.M., Prathalingam S.R., Naesens L., De Clercq E. Design and synthesis of bioactive 1,2-annulated adamantane derivatives.// Org. Biomol. Chem. 2008. - V.6(17). - P. 3177-3185.

117. Zoidis G., Foscolos G.B., Fytas G., Padalko E., DeClercq E., Kolocouris N. Heterocyclic rimantadine analogues with antiviral activity.// Bioorg. Med. Chem. 2006.- V. 14-P. 3341.

118. Zoidis G., Kolocouris N., Foscolos G.B., Kolocouris A., Fytas G., Karayannis P., Padalko E., Neyts J., De Clercq E. Are the 2-isomers of the drug rimantadine active anti-influenza A agents?// Antivir. Chem. Chemother. 2003. -V. 14(3).-P. 153-164.