Продуктивные и биологические особенности свиней с интегрированным в геном чужеродным геном релизинг-фактора соматотропного гормона тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Чабан, Иван Михайлович

• Чабан, Иван Михайлович
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Чабан, Иван Михайлович

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Генноинженерные технологии - новый путь развития жи- 7 вотноводства

1.2. Методы получения трансгенных животных

1.3. Общая характеристика гормона роста

1.4. Разведение трансгенных животных

1.4.1. Особенности фенотипа свиней, трансгенных по гену 20 тМП-ЬОШ

1.4.2. Использование ПЦР для определения присутствия рекомбинантной генной конструкции в геноме трансгенных животных

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Продуктивные и биологические особенности свиней с интегрированным в геном чужеродным геном релизинг-фактора соматотропного гормона»

Актуальность темы. Совершенствование и создание новых высокопродуктивных пород свиней традиционными методами селекции является делом долговременным и трудоемким. Современная биологическая наука сделала прорыв в этом вопросе на основе использования методов генной и клеточной инженерии, разработав методику изменения наследственной природы, путем интеграции чужеродных генов в геном животного.

Одним из наиболее актуальных направлений биотехнологической науки является изменение генома эукариот (в том числе сельскохозяйственных животных) методами генетической инженерии с целью придания им желательных качеств.

В последнее десятилетие развернут широкий фронт исследований по созданию трансгенных животных с конечной целью повышения продуктивности, использования их как продуцентов биологически активных веществ, получения трансгенных животных с повышенной устойчивостью к инфекционным заболеваниям, применения этих животных в качестве биомоделей в медицине, а также для ксенотрансплантации органов и тканей (59, 123).

Многочисленные успешные работы Палмиттера, Гордона, Брема и ряда других исследователей по получению трансгенных животных как лабораторных (в основном мышей), так и сельскохозяйственных животных, продемонстрировали широчайшие возможности использования метода трансформации генома организма (68, 73, 82, 100).

Применение такого подхода сделало возможным изучение влияния различных регуляторных элементов на уровень и тканесцецифичность экспрессии генов и выяснение влияния экспрессии интегрированных генноинженерных конструкций на организм животного.

Совместными усилиями российско-германских ученых были созданы свиньи, трансгенные по конструкции mMTl-hGRF. Рекомбинантная генная конструкция mMTl-hGRF содержит структурную часть гена релизинг- фактора гормона роста человека (hGRF) и металлотионеиновый промотор 1 мыши (mMTl). Ранее проведенными исследованиями установлено, что у полученных трансгенных свиней до достижения живой массы 100 кг существенных отличий по скорости роста от их аналогов выявлено не было. Различия проявлялись по отложению в теле белка при откорме свиней свыше 100 кг живой массы, т.е. когда у обычных животных усиливаются процессы синтеза жира, а синтез белка резко снижается.

Эксперименты по получению и изучению трансгенных животных проводятся во многих странах мира. Однако, несмотря на многочисленность и многообразие этих исследований, многие факторы, определяющие эффективность экспрессии чужеродных генов в клетках целостного организма остаются недос-> таточно изученными. В связи с этим, изучение экспрессии введенных генов и изучение их взаимосвязи с физиолого-морфологическими признаками у трансгенных свиней является актуальной задачей как в биотехнологии, так и селекции сельскохозяйственных животных.

Цель и задачи исследований:

Целью настоящей работы являлось изучение продуктивности, обмена веществ и энергии у выращиваемых откармливаемых трансгенных по релизинг- фактору гормона роста свиней IY поколения. В задачи исследований входило определить: а) динамику среднесуточных привесов при откорме свиней с 50 до 150 кг живой массы; б) переваримость основных питательных веществ, обмен азота, углерода и энергии при живой массе свыше 100 кг; в) мясо-сальную продуктивность при убое свиней в 150 кг живой массы, морфологический состав туш, развитие внутренних органов; г) химический состав мяса и сала свиней; д) энергетическую ценность мяса и сала свиней; е) затраты кормов и энергии на производство прироста живой массы.

Научная новизна и практическая значимость работы: В результате проведенных исследований в настоящей работе определены продуктивные и мясные качества у откармливаемых свиней, трансгенных по релизинг-фактору гормона роста.

Апробация работы:

Материалы диссертации были представлены на заседании отдела биотехнологии ВИЖа.

По материалам диссертации опубликовано две работы.

Структура и объем работы:

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений, списка литературы. Диссертация изложена на 141 страницах машинописного текста, включает 42 таблицы, 6 рисунков, 14 фотографий. Список литературы включает 127 источник, в том числе 64 на иностранных языках.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Чабан, Иван Михайлович

6. ВЫВОДЫ

1. У трансгенных свиней IV поколения и их аналогов отсутствуют достоверные отличия по среднесуточному приросту живой массы, затратам кормов на единицу прироста живой массы, переваримости питательных веществ, обмену азота и энергии.

2. Туши опытных животных были более полномясными и более постными, толщина шпика у трансгенов существенно ниже, в сравнении с контролем (при живой массе 107-109 кг контроль превосходит трансгенов по средней толщине шпика на 7,8%, а при 162-168 кг - на 15%; количество сала в туше больше у контрольных на 4,8% и 15%, коэффициент мясности у трансгенов выше на 15,5 и8,0% в обеих весовых категориях).

3. Установлен более высокий выход основных субпродуктов 1 категории (печени, почек, сердца) у экспериментальных животных в сравнении с контролем.

4. Не выявлено заметных нарушений в протекании посмертных биохимических процессов в мышечной ткани. Отмечен значительный разброс величины рН мяса, особенно длиннейшей мышцы спины у индивидуальных животных как в опытной, так и контрольной группах.

5. По химическому составу: а) не выявлено существенных различий по содержанию влаги в изученных мышцах как для отдельных животных внутри группы, так и у животных опытной и контрольной групп; б) отмечены достаточно существенные колебания между отдельными животными внутри каждой отдельной группы по содержанию жира и белка; в) установлено несколько большее содержание внутримышечного жира в контрольной группе, наиболее выраженное в полусухожильной мышце.

6. По микроструктурным показателям: а) у опытных животных отмечено наличие дистрофических процессов в печени; б) отмечены несколько большие размеры мышечных волокон в длиннейшей мышце спины и полусухожильной мышце опытных животных по сравнению с таковыми же мышцами у животных контрольной группы; в) в мышечной ткани животных максимальный диаметр мышечных волокон превышает минимальный в 3-4 раза.

7. При иммунизации свиней вакциной против классической чумы повышается уровень активности генов рРНК в лимфоцитах свиней, наибольшая активность отмечена у трансгенных свиней на 30 день после иммунизации. Целесообразно использование цитогенетических показателей для оценки функционального состояния хромосомного аппарата у трансгенных животных.

8. Показатели пенетрации мышц т. 1ог^18в1ти8 ёогэ! и т. БеткепсНпеш (при измерении поперек волокон) свидетельствуют о том, что мясо контрольных животных нежнее соответственно на 6,45 и 9,46% в сравнении с мясом опытных животных и на 10,93% при измерении вдоль волокон т. БеткепсНпеш. Это можно объяснить большим содержанием жира и влаги в мясе животных контрольной группы.

9. При анализе средней пробы свиного жира на содержание высших жирных кислот установлено, что трансгенные свиньи достоверно превосходят аналогов по содержанию линолевой кислоты.

7. ПРЕДЛОЖЕНИЯ

В результате изучения целого комплекса биотехнологических и хозяйственно-полезных признаков в ряде поколений установлено, что трансгенные по релизинг-фактору гормона роста свиньи характеризуются рядом существенных изменений, связанных с трансгенезом.

Это прежде всего значительное снижение содержания жира в туше и организма в целом. Эти животные характеризуются более высокими коэффициентами мясности и постности. Все эти признаки являются значимыми для селекции.

Изучение биохимических показателей крови, а также морфологического ряда клеток, показало, что они у трансгенов не выходят за пределы нормы. Не отмечено также никаких отклонений в состоянии здоровья трансгенных свиней в сравнении с контролем. Стала очевидной перспектива создания линии транг-сенных свиней. Поэтому необходимо начать работу по получению монозиготных трансгенных свиней с интегрированным геном релизинг-фактора гормона роста.

После изучения биохимических и хозяйственно-полезных качеств этих животных можно рекомендовать их для практической селекции.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Чабан, Иван Михайлович, 2000 год

1. Андреева JI.B., Хайдарова Н.В. и др. Микроинъекция гена релизинг фактора гормона роста человека в зиготы и эмбрионы свиней // Доклады ВАСХНИЛ.- 1990.- №.7.- С.46 51.

2. Балаболкин М.И. Секреция гормона роста в норме и патологии. М.'Медицина, 1978.- 173 с.

3. Балаболкин М.И. Эндокринология. М.-.Медицина, 1989.- 416 с.

4. Богатырев А.Н., Эрнст Л.К. Генная инженерия сельскохозяйственных животных мощный рычаг селекции XXI века // Генноинженерные сельскохозяйственные животные /Сб. науч. тр. - 1995.- Вып.1.- С. 3-13.

5. Брем Г., Зиновьева H.A., Эрнст Л.К. Генные формы новый путь производства биологически активных протеинов трансгенными животными // Сельскохозяйственная биология.- 1993 - №.6 - С.3-27.

6. Брем Г., Эрнст Л.К., Андропов Л.А. и др. Трансгенные свиньи (mMTl-hGRF): оценка качества туш и химического состава мяса при убое животных // Генноинженерные сельскохозяйственные животные /Сб. науч. тр. 1995.-Вып. 1С. 26-33.

7. Вайсман Б., Капелинская Т., Городецкий С., Дыбан А. Возможность получения животных продуцентов биологически активных препаратов путем микроинъекции клонированных генов в яйцеклетки // Антибиотики и химиотерапия.- 1988.- T.XXXIII.- №.2.

8. Верховский O.A., Федоров Ю.Н., Сологуб В.К. и др. Использование моноклональных антител для оценки антигенных свойств иммуноглобулинов животных // Сельскохозяйственная биология.- 1995.- №.4.- С.94-100.

9. Волкова О.В., Елецкий Ю.К. Основы гистологии с гистологической техникой. М., Медицина, 1982.

10. Волкова О.В., Елецкий Ю.К., Дубовая Т. К. и др. Гистология, цитология и эмбриология: Атлас. М., Медицина, 1996.

11. Газарян К. Трансгенные животные: перспективы использования животноводстве // Сельскохозяйственная биология.- 1988.- №.2.- С.31-39.

12. Гоголевский П., Гольдман И., Гусев В. и др. Исследование экспрессии гена В-галактозидазы в трансгенных ранних эмбрионах кроликов // Доклады ВАСХНИЛ.- 1991.- №.10.- С.38-42.

13. Гольдман И.Л., Башкеев Е.Д., Гоголевский П.А. Прогрессивная технология получения трансгенных овец // Докл. РСХА 1992.- №.9-10.- С.25-30.

14. Гольдман И.Л., Разин C.B., Эрнст Л.К. и др. Молекулярно-биологические аспекты проблемы позиционно-независимой экспрессии чужеродных генов в клетках трансгенных животных // Биотехнология.- 1994.- №.2.-С.3-8.

15. Гольдман И.Л., Эрнст Л.К., Гоголевский П. и др. Теоретические вопросы получения трансгенных животных. Эксперименты на кроликах // Ген-ноинженерные сельскохозяйственные животные / Сб. науч. тр. Вып.1.- 1995.-С.93-102.

16. ГОСТ 19496-93. Мясо. Метод гистологического анализа. М., "Стандарты", 1993.

17. Григорян Г.Ш. Биотехнологические основы повышения производства говядины, свинины и сокращения потерь в процессе переработки. ВНИИплем. М., 1993.- 239 с.

18. Дворянчиков Г.А., Иванов Л.Ю., Рудько Н.П. и др. Идентификация и анализ интегрированного в геном животных трансгена методом ПЦРамплификации и с помощью блот-гибридизации // Сельскохозяйственная биология.- 1993.- №.4.- С.39-46.

19. Дыбан А.П., Городецкая С.И. Трансгенные млекопитающие: изучение фенотипических эффектов гормона роста человека, индуцированного животным // Биотехнология.- 1987.- №.3.- С.352-357.

20. Блинов Н.П. Основы биотехнологии. С.Петербург:Наука, 1995.- 600 с.

21. Жданов А.Б., Дворянчиков Г.А. Амплификация интегрированного трансгена гена гормона роста быка методом полимеразной цепной реакции (PCR)//Генетика 1993.-Т.29.-С.905-913.

22. Зиновьева H.A., Попов А.Н., Эрнст JI.K. и др. Методические рекомендации по использованию метода полимеразной цепной реакции в животноводстве. Дубровицы, 1998. 47 с.

23. Зоотехнический анализ кормов /Петухова Е.А., Бессарабова Р.Ф., Ха-ленова Л.Д. М.:Колос, 1981. 256 с.

24. Изучение липидного обмена у сельскохозяйственных животных / Ме-тодич. указания. Боровск, 1980.- 73 с.

25. Калашникова Л.А. Получение и размножение трансгенных животных // Современные аспекты селекции, биотехнологии, информатизации в племенном животноводстве /Сб. ВНИИПЛЕМ.- 1997.- С.257-264.

26. Кудрявцев A.A. Методы исследования газового и энергетического обмена с.-х. животных. М.:Колос, 1974.- 405 с.

27. Кудрявцев A.A., Кудрявцева Л.А. Клиническая гематология животных. М.:Колос, 1974.- 405 с.

28. Лапшин С.А., Эрнст Л.К., Матяев В.И. Особенности жирнокислотно-го состава тканей трансгенных свиней // Генноинженерные сельскохозяйственные животные /Сб. науч. тр. 1995.- Вып.1.- С. 58-61.

29. Лашас Л.В., Лашене Д.Г. Соматотропин человека. Вильнюс:Мокслас, 1981.- 143 с.

30. Лебедев П.Г., Усович А.Г. Методы исследования кормов, органов и тканей. М.:Россельхозиздат, 1976.- 271 с.

31. Лукашик H.A., Тащилин В.А. Зоотехнический анализ кормов. М.-.Колос, 1965.- 126 с.

32. Медведев С.Ю., Козикова Л.В., Бавин В.Г., Яковлев А.Ф. Рост и развитие трансгенных кроликов и свиней с перенесенным геном релизинг-фактора гормона роста человека // Сельскохозяйственная биология.- 1995.- №.6.- С.43-48.

33. Меркурьева Е.К. Биометрия в селекции и генетике с.-х. животных. М.гКолос, 1970.- 424 с.

34. Мертвецов Н.П. Гормональная регуляция экспрессии генов. М.:Наука, 1986.- 207 с.

35. Методические указания по изучению качества туш, мяса и подкожного жира убойных свиней. М., 1978.- 26 с.

36. Методические указания по исследованию липидного обмена у с.-х. животных. Боровск, 1973.- 115 с.

37. Науменко П.А., Владимиров В.Л., Фридберг Р.В., Школьник Г.С. Биохимические показатели крови, органов и тканей у трансгенных (МТ1-hGRF) и интактных свиней // Генноинженерные сельскохозяйственные животные /Сб. науч. тр. 1995.- Вып.1.- С. 54-57.

38. Ноздрин Н.Т., Мысик А.Т. Обмен веществ и энергии у свиней. М.:Колос, 1975.- 240 с.

39. Овсянников А.И. Основы опытного дела в животноводстве. М.:Колос, 1976.-304 с.

40. Пасхина Т.С. Определение глутаминаланиновой и глютаминоаспара-гиновой аминофераз (аминотрансфераз) в сыворотке крови человека. М., 1959.12 с.

41. Покровский A.A. Биохимические методы исследований в клинике. М.:Медицина, 1969.- 586 с.

42. Попов А.Н., Зиновьева H.A., Брем Г. Экспресс- метод тестирования новорожденных поросят на интеграцию в геном чужеродных генов // Сельскохозяйственная биология.- 1995.- №.6.- С.136-138.

43. Раецкая Ю.И., Сухарева В.Н., Самохин В.Т. Методы зоотехнических и биохимических анализов кормов, продуктов обмена и животноводческой продукции / ВИЖ, дубровицы, 1970.- 128 с.

44. Росохатский С., Смирнов А.Ф., Ефимов А.Ф. и др. Повышение скорости роста кроликов, трансгенных по гену РФГР человека // Доклады РАСХН.- 1994.- №.2.- С.24-26.

45. Рядчиков В., Солодухина Л. Соколов Н. и др. Трансгенные свиньи с геном mTl/hGRF и перспективы их использования в селекции // Генноинженерные сельскохозяйственные животные /Сб. науч. тр. 1995.- Вып.1.- С. 7384.

46. Симон Е.И. Методика определения баланса азота у с.-х. животных. М.:ПТМ, 1956.- 32 с.

47. Скалинский Е.И., Белоусов A.A. Микроструктура мяса. М.:Пищевая промышленность, 1978.

48. Татулов Ю.В., Ивашов В.И., Немчинова И.П. Особенности качества свинины, производимой по интенсивной технологии выращивания и откорма // XXXVI Международный конгресс по проблемам науки и технологии мяса и мясопродуктов.- Куба, Гавана.- 1990.

49. Татулов Ю.В., Борткевич Л.Л. Транспортировка и стресс свиней // Обзорная информация. М., АгроНИИТЭИмясомолпром.- 1990.- 32 с.

50. Томмэ М.Ф. Методика взятия образцов корма для химического анализа. М., 1969.- 34 с.

51. Томмэ М.Ф. Методика изучения убойных выходов и мяса. М., 1956.16 с.

52. Томмэ М.Ф. Методика определения переваримости кормов и рационов. М., 1961.- С.245-250.

53. Федоров H.A., Суханов Ю.С., Асади Мобархан А.Х., Артемьев М.И. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) / Методическое пособие.- М., 1996.- С.33.

54. Хвыля С.И., Авилов В.В., Кузнецова Т.Г. Практическое применение гистологических методов анализа // Мясная промышленность.- 1994.- №.6. С. 9-11.

55. Хвыля С.И., Авилов В.В., Кузнецова Т.Г., Тимин E.H. Компьютерная приставка к человеческому глазу // Мясная промышленность.- 1995.- №.1.-С.23-25.

56. Хвыля С.И., Кузнецова Т.Г., Авилов В.В. Оценка мясного сырья и определение состава мясопродуктов микроструктурными методами. РАСХН. М., 1998.- с.38.

57. Эрнст JI.К. Итоги и перспективы исследований по биотехнологии животных // Зоотехния.- 1999.- №.8.- С.23-25.

58. Эрнст Л.К., Брем Г., Зиновьева Н. Генноинженерные технологии новый путь развития животноводства // Зоотехния.- 1994.- №.5.- С.2-4.

59. Эрнст Л.К., Гольдман И.Л., Семенова В.А. Фенотипический эффект трансгенности по гену гормона роста крупного рогатого скота у кроликов // Доклады ВАСХНИЛ.- 1990.- №.6.- С.32-36.

60. Эрнст Л.К., Гольдман И.Л., Кадулин С.Г. Генная инженерия в животноводстве: трансгенные животные, кормовые растения, микроорганизмы рубца //Биотехнология.- 1993.-№.5.- С.2-14.

61. Эрнст Л.К., Брем Г., Махаев Е.А. Результаты выращивания и изучения обмена веществ трансгенных по гену релизинг-фактора гормона роста свиней 1 поколения // Генноинженерные сельскохозяйственные животные /Сб. науч. тр. 1995.-Вып. 1.-С. 48-57.

62. Эрнст Л.К., Татулов Ю.В. , Хвыля С.И. и др. Комплексная оценка качественных характеристик мясного сырья, полученного от трансгенных животных // Материалы 3 Международной НТК.- 1999.- С. 147.

63. Agellon L.B., Davies S.L., Chen Т.Т., Powers D.A. Structure of fish (rainbow trout) growth hormone gene and it s evolutionary implications // Proc.Nat.Acad.Sci. USA, 1988.

64. Ausubel F.M., Brent R, Kingston R.E. et.al. Current protocols in molecular biology // Join Wiley and Sons.- New York.- 1987.

65. Behringer R.R, Ryan T.M, Reilly M.P. et.al. Synthesis of functional hyman hemoglobin in transgenic mice // Science 245.- 1989.- P.971-973.

66. Bishop J, Smith R. Mechanism of chromosomal integration of microinyection DNA // Mol. Biol. Med. 1989.- V.6.- P.283-298.

67. Brem G. Transgenic animals. In Biotechnology. A Multy Volume Comprehensive Treatise. Edited by H.J.Rehm and G.Reed in cooperation with A.Puhler and. P.Stadtler. VCH. Weinhein,New York, Basel, Cambridge. P.745-832.

68. Brem G. Transgene Nutztiere // Zuchtungkunde.- 1988.- V.60.- N.3.-P.248-262.

69. Brem G. Interifance and tissue-specific expression of transgenes in rabbits and pigs // Mol. Deprod. and. Dev.- 1993.- 36.- N.2.- P.242-244.

70. Brem G. Production of transgenic mice, rabit and pigs by microinjection into pronuclei // Zuchtyniene.- 1995.- V.20.- N.5.- P.134-139.

71. Brem G., Brening B., Goodman H.M. et.al. Production of transgenic mice, rabbits and pig by microinjection into pronuclei // Zuchthug.- 1985.- V.20.- P.251-252.

72. Brem G., Brening B., Salamons B. et.al. Unerwartets transgene Expression eines gesaengespezifischen Wachstumshormon Genkonstruktes in den Bergmann-Gliazellen der Maus // Tiwrarztl. Prax.-1991.- V.19.- P.l-6.

73. Brem G., Muller M. Large transgenic mammals // Animals with novel genes / by Ed.N.Maclean.- Cambridge University Press.- 1994.- P. 179-224.

74. Church R.B. Embryo manipulation and gene transfer in domestic animal. Trends Biotechnol. 5.- 1987.- P.13-19.

75. Clark A., Bissinger P., Bullock D. et.al. Chromosomal position effects and modulation of transgene expression // Reprod. Fertil. Dev. 1994.- V.6.- N.5.-P.589-598.

76. Erlich H.A. PCR technology: principles and applications for DNA ampflication. Stocton Press, New York. 1989.

77. Evans M.J. and. Kaufman M.H. Establishment in culture of pluripotential cells from mouse embryos //Nature 292.- 1981.- P. 154-156.

78. Evans M., Bradley A., Robertson E.J. Genetic manipulation of the mammalion ovum and early embryos // Bandbury Report.- Gold Spring Harbor, New York, 1985.

79. Gavora J.S., Benkel B., Sasada H. et.al. An attempt at sprem mediated gene transfer in mice and chikens // Can.J. Anim.Sci. 71.-1991.- P.287-291.

80. Glosser A., Doetschman T., Korn R. et.al. Transgenessis by means of blastocyst derived embrionic stem cell lines // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 1986.-V.83.- P.9065-9069.

81. Gordon J., Ruddle F. Integration and stable germ line transmission of genes injected into mouse pronuclei // Scince.- 1981.- V.214.- P.1244-1246.

82. Gordon J.W., Lee E., Vitale J.A. et.al. Production of human tissue plasminogen activator in transgenic mouse milk // Biotechnology 5.- 1987.- P.l 1831187.

83. Gray R., Hamm R. Eine einfache Methods sur Bestimming der Wasserbindung in Muskel //Naturwissen Schäften.- 1953.- V.40.- N.I.- S.29.

84. Hammer R.E., Palmiter R.D., Brinster R.L. Partial correction of murine hereditary growth disorder by germline incorporation of a new gene // Nature.-V.311.- 1984.-P.65-67.

85. Hammer R.E., Pursei V., Rexroad C. et.al. Production of transgenic rabbits sheep and pigs by microinjection // Nature.- 1985.- V.315.- P.680-683.

86. Hogan B., Costantini F. and Lacy E. Manipulation of the mouse embryo. In: Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York. 1986.

87. Huzar D., Balling R., Kothary R. et.al. Insertion of a bacterial gene into the mouse germ line using an infections retro virus vector // Proc. Natl. Acad. Sci. 82.1985.- P.8587-8591.

88. Jaehner D., Haase K., Mulligan R. et.al. Insertion of the bacterial gpt gene into germ of mice by retro viral infection // Proc. Natl.Acad. Sci. 82.- 1985.- P.6927-6931.

89. Kostyo J.L. Rapid effect of growht hormone on amino acid transport and protein synthesis // Ann. N.Y. Acad.Sci.- V.148.- P.284-312.

90. Kostyo L.J., Nutting D.K. Growth hormone and protein metabolism. In: Handbook of physiology.- 1979.- P. 187-210.

91. Lavitrano M., Camaioni A., Fazio V.M. et.al. Sprem cells as vectors for introducing foreign DNA into eggs: genetic transformation of mice. Cell 57. 1989.-P.717-723.

92. Mannino R.J. and Gould-Fogerite S. Liposome mediated gene transfer // Bio Technigues 6.- 1988.- P.682-690.

93. Mansour S.L., Thomas K.R. and Capecchi M.R. Diruption of the proto-oncogene int -2 in the mouse embrio derived stem calls; a general strategy for targeting mutations to nonselectable genes // Nature 336. - 1988.- P.348-352.

94. Mansour S.L. Gene targeting in mouse embrionic stem cells: introduction of specific alteration into the mammalian genome // Gene-Anal. Tech. 7.- 1990.-P.219-227.

95. Mehtali N., LeMeur V., Lathe R. The methylationfree ststus of a houskeeping transgene is lost at high copy number // Gene.- 1990.- V.91.- P. 179184.

96. Mullis K.B., Fallona F.A. Speccific synthesis of DNA in vitro via a polymerase-catalyzed chaim reaction // Meth. Enzymol.- 1987.- V.155.- P.335-350.

97. Nazario E. Petits on grands: Une histoire d'hormone? // Rev. Palais decouv.- 1996.- V.24.- N.237.- P.53-60.

98. Palmiter R.D., BrinsterR.L., Hammer R.E. et.al. Dramatic growth of mice that develop from eggs microinjected with metallothionein-growth hormone fusion genes //Nature.- 1982.- V.306.- P.611-615.

99. Palmiter R.D., Norstedt R.E., Gelinas R.E. et.al. Metallothionein-human GH fusion genes stimulate growt of mice // Science.- 1983.- V.222.- P.809-814.

100. Palmiter R.D., Brinster R.L. Germ-line transformation of mice // Ann. Rev. Genet. 1986.- V.20.- P.465-499.

101. Panthier J.J., Condamine H. and Jacob F. Inoculation of newborn SWR/J gemales nith an ecotropic murine llucemia virus can produce transgenic mice // Proc. Natl.Acad. Sci. 85.- 1988.-P. 1156-1160.

102. Pinkert C.A. The future of transgenic livestok with enhanced production characteristics, Vancouver, Canada. 1989.

103. Pursel V.G., Rexroad C., Pincert C. et.al. Progress on gene transfer in animals // Vet.Immunol. Immunopathol.- 1987.- V.17.- P.303-312.

104. Pursel V.G. et.al. II-th International Congress on Animal Reproduction and Artificial Insemination, Dublin, 1988.

105. Pursel V.G., Pincert C., Mileer K. et.al. Genetic engineering of livestok // Science.- 1989.- V.244.- P.1281-1288.

106. Pursel V.G., Pinkert C., Rexroad C., Mileer K. Animal growth regulation // Et by D.K.Campion, C.J.Hausman, K.J.Martin. New York.- London. 1989.

107. Pursel V.G., Bolt D.J., Mileer K. Expression and performance in transgenic pigs // J.Reprod. Fert. Suppl.- 1990.- V.40.- P.235-245.

108. Pursel V.G., Rexroad C. Status of research with transgenic farm animals //J.Anim.Sci.- 1993.- V.71.- P.10-19.

109. Rexroad C.E., Pursel V.G. Status of gene transfer in domestic animals // Proc. of 11th inter.congress on animal reproduction and artifical insemination. Dublin, 1988.- V.5.- P.28-35.

110. Rexroad C.E. Transgenic technology in animal agriculture // Animal Biotechnology.- 1992.- V.3.- N.I.- P. 1-13.

111. Saiki R.K., Scharf S., Faloona F. et.al. Enzymatic amplification of (3-globulin genomic seguenes and restriction site analysis for diagnosis of sockle cell anemia// Science, 230.- 1985.- P.1350-1354.

112. Saiki R.K., Gelfand D.N., Stoffel S. et.al. Primer-directed enzymatic ampflication of DNA with a thermostable DNA polymerase // Science, 239.- 1988.-P.439-491.

113. Saiki R.K., Scharf S., Faloona F. et.al. Enzymatic amplification of b-globulin genomic sequences and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia// Science.- 1985.- V.230.- P.1350-1354.

114. Schoenenberger C.F., Andres A.C., Groner B. et.al. Targeted c-mys gene expression in mammary glands of transgenic mice induces mammar y tumors with constitutive milk protein gene transcription // EMBO J.- 1988.- 7.- P. 169-175.

115. Sippel A.E., Saueressing H., Winter D. et.al. Transgenic animals. N.Y.L: Academic Press Inc.- 1992.- P.3-26.

116. Stotish R.L. Repartitioning agents in animal production // Proceeding of the fourth animal CMS A symposium. Vancouver, Canada. Februarry, 1998.

117. Thompson S, Clarke A.R, Row A.M. et.al. Cerm line transmission and expression of corrected HPRT gene produced by gene targeting in embryonic stem cells//Cell 56.- 1989.-P.313-321.

118. Tyrreil H.F, Brown A.C, Peynolds P.J. Effect of bovine somatotropin on metabolism of lactating dairy cows: energy and nitrogen utilization as determined by respiration calorimetry // J.Nutr. 1988.- V,118.- N.8.- P.1024-1030.

119. Wagner E.F. Of transferring genes into sprem cells and mice // EMBO J.9. 1990.- P.3025-3052.

120. Wall RJ, Hawk H.W, Nel Neil. Varking transgenic livestok: genetic engineering on a large seale // J.Cell. Biochem.- 1992.- 49.- N.2.- P.l 13-120.

121. Ward K.A. Nancarrow C.D. The genetic engineering of production traits in domestic animals // Experienta 1991.- V.47.- P.913-922.

122. Wilkil T.M, Brinster R.L, Palmiter R.D. Germline and somatic mosaicism in transgenic mice // Dev. Biol.- 1986.- V.l 18.- P.9-18.

123. Wilmut I, Archibald A.L, Harris S. et.al. Metods of gene transfer and their and their potential use to modify milk composition // Theriogenology.- 1990,-V.33.-N.1.- P.l 13-123.

124. Yones S.D.M. The effect of repartioning agents on meat quality. Vancouver. Canada, 1989.