Особенности роста опухолевых клеток in vitro после облучения в малых дозах тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.01, кандидат биологических наук Демидова, Наталья Игоревна

• Демидова, Наталья Игоревна
• кандидат биологических наук
• 1991

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Демидова, Наталья Игоревна

Введение.5

I. Обзор литературы.

1.1. Роль естественного радиационного фона.9

1.2. Понятие "малые дозы" и их стимулирующее действие.ю

1.3. Понятие "гормезис".14

1.4. Отдаленные эффекты, индуцируемые малыми дозами ионизирующей радиации.15

1.5. Закономерности роста клеточных культур.20

Экспериментальная часть

II. Материал и методы исследования.

2.1. Культура клеток HeLa.27

2.2. Облучение.

2.3. Метод авторадиографии.30

2.4. Метод радиометрии.32

2.5. Определение клоногенной способности.35

2.6. Определение размеров клеток HeLa в различных стадиях роста.38

2.7. Исследование топографии поверхности клеток методом растровой электронной микроскопии в различных стадиях роста.42

Результаты собственных исследований

III. Действие малых доз ионизирующего излучения (0,1 Гр) на кинетику роста опухолевых клеток

HeLa.

3.1. Кривые роста необлученной и облученной в дозе 0,1 Гр популяции клеток HeLa.44

3.2. Динамика изменения количества ДНК-синтезирующих клеток и интенсивности синтеза нуклеиновых кислот в необлученной и облученной (0,1 Гр) популяции в процессе роста.47

3.3. Определение размеров клеток культуры HeLa необлученной и облученной в дозе ОД Гр популяций в процессе культивирования.53

3.4. Микрорельеф поверхности клеток HeLa, в различных фазах роста.

3.5. Резюме.56

IV. Кинетика открепления клеток в суспензию в контрольной и облученной (0,1 Гр) культуре.

4.1. Кривые открепления клеток в суспензию.60

4.2. Жизнеспособность открепившихся клеток.65

4.3. Пролиферативная способность открепившихся клеток.67

4.4. Резюме.70

V. Изучение восстановления популяции опухолевых клеток HeLa после облучения в различных режимах.

5.1. Выживаемость клоногенных клеток после облучения в различных режимах.73

5.2. Радиочувствительность клоногенных клеток в разные сроки после однократного облучения в дозе 0.1 Гр.82

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Особенности роста опухолевых клеток in vitro после облучения в малых дозах»

Проблема малых доз, особенно в последнее время в связи с аварией на Чернобыльской АЭС, привлекает к себе все большее число исследователей как в области медицины, так и биологии, сельского хозяйства.

Известно, что для нормальной жизнедеятельности живых организмов необходим естественный радиационный фон (55, 63, 64, 73, 100, 138). Однако, в этом случае величина дозы достаточно низкая. Дозы ионизирующего излучения, используемые в данной работе, так называемые "малые дозы", на порядок выше естественного радиационного фона и на два порядка ниже летальных доз, это дозы радиационного гормезиса (для клеток млекопитающих - 0,1 Гр) (43, 139). Практически каждый человек чаще или реже подвергается воздействию таких доз ионизирующего излучения в нашей повседневной жизни в виде рентгенологических, радиоизотопных исследований, не говоря уже о контингенте людей, проживающих или находившихся какое-то время в зонах радиоэкологически неблагополучных.

Одним из важных аспектов действия ионизирующего излучения являются их отдаленные последствия. В отличие от действия больших доз радиации, где четко показано длительное последействие облучения, которое нередко сказывается на потомках в последующих поколениях (22, 23, 39, 45) об отдаленном влиянии на потомство малых доз ионизирующего излучения существует мало данных. В доступной нам литературе имеется небольшой ряд публикаций по данной теме, т.е. по наличию "радиационной памяти" (9, 22, 59, 74, 109, 118). У различных млекопитающих и человека в популяции клеток костного мозга после слабых радиационных воздействий (у людей - даже после рентгенодиаг-ностических процедур) сохраняется некоторое стойкое (в течение многих лет) повышение доли аберрантных клеток (109, 118) Большинство этих работ проводилось на организменном уровне. Исследований, выполненных на клеточном уровне - чрезвычайно мало.

Нам казалось целесообразным расширить представление о возможных последствиях действия малых доз ионизирующего излучения на моделях in vitro.

Таким образом, целью настоящей работы явилось исследование эффектов, индуцируемых малыми дозами ионизирующей радиации в популяции опухолевых клеток Не La в процессе ее роста (лог-стац-фазы).

Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи.

1. Изучить влияние облучения в малых дозах на процесс перехода опухолевых клеток HeLa из логарифмической фазы в стационарную.

2. Исследовать влияние облучения в дозах гормезиса на кинетику открепления и жизнеспособность вышедших в суспензию клеток в процессе роста культуры.

3. Изучить эффект предварительного облучения малыми дозами ионизирующего излучения на восстановление популяции опухолевых клеток HeLa от повреждений, вызванных последующим воздействием в больших дозах радиации.

В результате проведенных исследований получены новые данные об отдаленных последствиях воздействия малых доз ионизирующего излучения у потомков облученных клеток.

Впервые было показано, что облучение в дозе 0,1 Гр меняет кинетику роста популяции клеток, проявляющуюся в потере способности клеток переходить в стационарную стадию роста. Эти данные были подтверждены исследованиями, в которых использовались дополнительные методы: метод авторадиографии, метод радиометрии, анализ гистограмм распределения клеток по размерам в процессе роста культуры. Методом растровой электронной микроскопии были также подтверждены полученные данные: рельеф клеточной поверхности у облученных клеток и их потомков не меняется на протяжении процесса культивирования, вплоть до открепления их из монослоя.

Впервые было обнаружено, что среди открепившихся в суспензию клеток существует небольшая доля жизнеспособных клеток (<1%), которые могут давать колонии. Облучение в дозе 0,1 Гр усиливает процесс перехода клеток из монослоя в суспензию и уменьшает долю жизнеспособных клеток в суспензии.

Впервые было показано, что однократное облучение в дозе 0,1 Гр снижает эффективность восстановления популяции от последующих воздействий в поражающих дозах радиации и существенно увеличивает радиочувствительность потомков облученных клеток, препятствуя появлению резистентной фракции в популяции, наблюдаемое в однократно облученной группе после 7-х суток.

Практическая значимость.

Полученные результаты дают возможность прогнозировать радиационные последствия действия ионизирующего излучения в малых дозах. Представленные данные являются важными для выяснения феномена синергизма с воздействием различных повреждающих факторов.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Облучение в дозе 0,1 Гр меняет кинетику роста популяции клеток, проявляющуюся в потере клетками способности переходить в стационарную стадию роста.

2. Облучение в дозе 0,1 Гр способствует более интенсивному откреплению клеток в суспензию. Среди открепившихся клеток есть небольшая доля жизнеспособных клоногенных клеток (<1%). Однако, жизнеспособность и пролиферативная активность облученных в дозе 0,1 Гр клеток значительно ниже, чем необлу-ченных.

3. Однократное облучение в дозе 0,1 Гр снижает эффективность восстановления от последующих поражающих доз и увеличивает радиочувствительность потомков облученных клеток.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Малые дозы ионизирующего излучения и их действие на живые объекты

I.I. Роль естественного радиационного фона.

В настоящее время все большую актуальность приобретает изучение действия малых доз ионизирующей радиации на живые объекты. Говоря о действии малых доз ионизирующей радиации, надо выяснить, какой вклад вносит естественное фоновое излучение при действии на живые объекты. Еще в тридцатые годы 1.1. Чижевский выдвинул гипотезу о наличии обратной связи между размножением патогенных микроорганизмов, возникновением эпидемий и периодичностью солнечной активности. Известно, что в годы активного солнца, уровень естественного радиационного фона - наиболее низкий. Вспышки заболеваемости приходятся на годы, когда радиационный фон земли - максимальный, то есть через 1-2 года после года солнечной активности (73).

В 60-ые годы Планель с соавторами показали на. одноклеточных организмах (Paramecium caudatum и Paramecium, aurelia), помещая их в глубинные подземные штреки или экранируя их свинцом, что скорость размножения микроорганизмов уменьшается тем больше, чем становится ниже естественный фон, а продолжительность клеточного цикла увеличивается.Исходя из полученных данных, авторы пришли к выводу о необходимости естественного радиационного фона для нормального размножения одноклеточных организмов (100, 138,

-10139).

Аналогичные данные были получены у нас в стране группой исследователей (63) на низших (спорообразование у гриба Aspergillus niger) и высших растениях (по прорастанию семян редиса), а также на крысах породы Вистар (замедление темпа развития) в условиях низкофоновой камеры (63). Обобщая полученные данные, авторы пришли к заключению, что естественный фон ионизирующей радиации является постоянно действующим, физиологически значимым фактором, способствующим росту и развитию живых организмов (42, 44). Сложеникиной Л.В. с соавторами было показано на примере спонтанного синтеза глюкокиназы, ускорение энзиматической дифференцировки при однократном облучении в малой дозе (0,01 Гр) развивающихся крыс. Эти данные могут являться подтверждением полученных ранее данных о необходимости природного радиоактивного фона для развития млекопитающих (63, 64).

Заключение диссертации по теме «Радиобиология», Демидова, Наталья Игоревна

ВЫВОДЫ.

1. Однократное облучение в малых дозах ионизирующего излучения (0,1 Гр), приводит к длительно сохраняющемуся стимулированному состоянию клеточной популяции, что проявляется по ряду показателей у потомков облученных клеток: отсутствие стационарной фазы роста, высокий уровень включения меченых предшественников синтеза нуклеиновых кислот в сроки перехода контрольной культуры в стационарную фазу и сохранение в эти сроки размеров и поверхностного микрорельефа клеток, присущего клеткам экспоненциальной фазы роста.

2. В облученных в дозе 0,1 Гр культурах открепление и переход клеток в суспензию происходит значительно более интенсивно, чем в контрольной. Оказалось, что небольшая доля {<!%) открепившихся клеток сохраняет жизнеспособность.

3. Облучение в дозе 0,1 Гр снижает как жизнеспособность (клоногенность), так и пролиферативную активность вышедших в суспензию клеток.

4. Потомки клеток, подвергшихся облучению в дозах гормезиса (0,1 Гр), оказываются более радиочувствительными к последующему облучению в больших дозах (5 Гр).

5. По мере восстановления от радиационных повреждений в контрольно облученной популяции выявляется резистентная фракция. Предварительное облучение в дозе 0,1 Гр снижает способность клеток к восстановлению сублетальных повреждений и в этих популяциях отсутствует резистентная фракция.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Демидова, Наталья Игоревна, 1991 год

1. Аль-Одат М. Влияние предпосевного ^-облучения семян на рост, развитие и урожайность кукурузы в производственных условиях Сирийской Арабской Республики. - Радиобиология, 1989, т.29, N 6, с. 842-845.

2. Андрушкевич В,В., Серебряков Н.Г., Календо Г.С. Изменение поверхностного микрорельефа клеток под действием ионизирующего излучения. Докл. АН СССР. 1987, т. 293, №4, с. 976-978.

3. Баркан Р.С., Никольский Н.Н. Минимально трансформированные клеточные линии, как объект исследования механизмов пролиферации. Цитология, 1985, т. 27, N1, с. 5-11.

4. Березина Н.М., Каушанский Д.А. Предпосевное облучение семян сельско-хозяйственных растений. М. Атомиздат, 1975.

5. Бычкова З.Н., Абрамова Л.И., Хлебный B.C. Ростовые и физиологические процессы пшеницы при ^-облучении семян. -Всес. конф. по действию малых доз ионизирующей радиации. Севастополь, 1984 - Киев: Наукова думка,с. 48.

6. Бычковская И.Б.,Комаров Е.И. Особое радиационное наследуемое нестохастическое повреждение на клеточном уровне организма. Радиобиология, 1990, т. 30, вып. 4, с. 467-476.

7. Бычковская И.Б. Проблемы отдаленной радиационной гибели клеток . М. Энергоатомиздат, 1986, с. 159.

8. Волчков В.А. Явление "радиационной памяти" в популяции размножающихся клеток. Мед. радиология, 1976, т. 21, N1, с. 75-77.

9. И. Гаспарян Г.Г., Терских В.В., Закарян Г.Г., Магакян Ю.А. Факторы, контролирующие скорость размножения клеток стационарных культур, стимулированных к пролиферации. 2. Плотность клеточного слоя. Цитология, 1980, т. 22, N6, с. 689-693.

10. Готлиб В.Я., Тапонайнен Н.Я. Изучение отдаленных последствий на клетках в культуре ткани при воздействии облучения, нитрозомочевины, производных платины. Тез. 1 Всесоюз. радиобиол. съезда, Москва, 1989. - Пущино, т.4, с. 817-818.

11. Епифанова 0.И.,Терских В.В., Полуновский В.А.

12. Покоящиеся клетки. М. Наука, 1983.

13. Епифанова О.И., Терских В.В. Периоды покоя и активной пролиферации в жизненном цикле клетки. Журн. общ. биологии, 1968, N29, с.392-402.

14. Епифанова О.И. Метаболизм пролиферирующих и покоящихся клеток. Цитология, 1979, т. 21, N12, с. 1379-1396.

15. Епифанова О.И., Терских В.В., Полуновский В.А. Регуляторные механизмы пролиферации клеток. Итоги науки и техники, серия общие проблемы физико-химической биологии, М. 1988, т.10.

16. Епифанова О.И., Терских В.В., Захаров А.Ф. Радиоавтография, М. Высшая школа, 1977, с. 245.

17. Иванов В.А., Терпиловская О.Н., Куликов А.В., Третьяк Т.М. Репарация ДНК в нервных клетках млекопитающих. 1. Синтез ДНК в неокортексе, индуцированный / -облучением крыс. Цитология, 1987, T.29,N1, с.73-78.

18. Календо Г.С., Меркулов А.С., Кузин A.M. Действие биологических активных веществ, выделенных из печени облученных крыс, на синтез ДНК в клетках HeLa. ДАН СССР, 1969, т. 184, N3, с. 716-718.

19. Календо Г.С., Ярмоненко С.П., Винская Н.П. О радиосенсибилизирующем эффекте малых доз облучения. Радиобиология, 1971, т.И, N6, с. 871-874.

20. Календо Г. С. О возможности адаптационного синдрома-стресса на клеточном уровне, его роли в реакции клетки на облучение. Успехи совр. биологии, 1972,т. 73, вып. 1, с. 59-80.

21. Календо Г.С., Журбицкая В.А., Исследование механизма радиосенсибилизирующего действия малых доз ионизирующей радиации в культуре клеток HeLa. Радиобиология, 1975, т. 15, N2, с. 222-227.

22. Календо Г. С. Межклеточные взаимодействия и популяционный уровень защиты. Мед. радиология, 1975, N1,с. 28.

23. Календо Г.С., Савинов А.Г., Демидова Н.И., Серебряков Н.Г. Изменение собственной ультрафиолетовой флуоресценции клеток, облученных в различных дозах ионизирующего излучения. Цитология, 1984, т.26, N9, с. 1048-1054.

24. Календо Г.С. Возможные причины высокой надежности роста популяции опухолевых клеток. Сб. Надежность биологических систем.- Киев, Наукова думка, 1985, с. 127-132.

25. Календо Г.С. Радиационный гормезис и новый принцип модификации. 1 Всесоюз. радиобиол. съезд, Москва, 1989. -Пущно, т.5, с. 1147.

26. Кондратьева Т.М., Сафронова В.Г., Барский И.Я., Брумберг Е.М. Необратимые изменения клеток крови и костного мозга при действии ионизирующей радиации. Тез. докл. 8 Всесоюз. съезда рентгенологов и радиологов. М. 1964, с. 236.

27. Кондратьева Т.М. Характеристики популяций соматических клеток облученных животных по интенсивности ультрафиолетовой флуоресценции. Цитология, 1967, т. 9, N12, с. 1559-1563.

28. Крапивко Т.П., Ильенко А.И. Первые признаки радиоадаптации в популяции рыжих полевок (Clethrionomysglareolus) в радиационном биогеоценозе. - ДАН СССР, 1988, т. 302, N5, с. 1272-1274.

29. Кудряшов Ю.Б., Пархоменко И.М. Молекулярно-клеточные механизмы биологического действия малых доз рентгеновского излучения на изолированные клетки млекопитающих. Радиобиология, 1987, т.27, вып. 3, с. 297-302.

30. Кузин A.M., Хакимов П.А. Ускорение синтеза белка и ДНК в клетках асцитной карциномы Эрлиха при ^-облучении в сравнительно малых дозах. Радиобиология, 1967, т.7, N3, с. 328-330.

31. Кузин A.M., Хакимов П.А., Шайхов Р.Т., Хамидов Д.Х. Рост, развитие эмбрионов, цыплят и яйценоскость кур, облученных до и в процессе инкубации. Радиобиология, 1975, т. 15, N6, с. 866.

32. Кузин A.M. Стимулирующее действие ионизирующего излучения на биологические процессы (к проблеме биологического действия малых доз) М. Атомиздат, 1977, с. 6-133.

33. Кузин A.M., Kayшанский Д. А. Прикладная радиобиология. М. Энергоиздат, 1981, с. 220.

34. Кузин A.M., Сложеникина Л.В., Фиалковская Л.А., Примак-Миролюбов В.Н. О возможном влиянии естественного фона ионизирующей радиации на развитие млекопитающих. Радиобиология, 1983, т.23, вып.2, с. 192-195.

35. Кузин A.M., Вагабова М.Э., Юров С.С. Радиационное, нерепарабельное, наследуемое изменение клеток, способсотвующее их опухолевой трансформации. Радиобиология, 1988, т. 28, N2, с. 175-178.

36. Кузин A.M. Особенности механизма действия атомной радиации на биоту в малых, благоприятных для нее дозах. -Пущино, 1989, с. 23.

37. Левин В.И. О трех фазах в реакции семян ячменя на воздействие г—облучения. Тез. 1 Всесоюз. радиобиологического съезда, т.2, с. 293-294.

38. Лейтес С.М. Авторегуляторные механизмы в обмене веществ Успехи совр. биол., 1945, 19, 1 , с. 79-97.

39. Литинская Л.Л., Векслер A.M., Оглобина Т.А., Лейкина М.И. Динамика внутриклеточного рН в клеточном цикле монослойных культур.

40. Москалев Ю.И., Стрельцова В.Н. Отдаленные последствия радиационного поражения. Неопухолевые формы. -Итоги науки и техники, серия радиационная биология, 1987, т.6, с. 3-39.

41. Нариманов А.А., Копылов В.А., Кузин A.M. Отдаленныенестохастические последствия r-облучения лимфоидных клеток. Радиобиология, 1988, 28, N3, с. 322-325.

42. Пелевина И.И., Афанасьев Г.Г., Готлиб В. Я. Клеточные факторы реакции опухолей на облучение и химиотерапевтические воздействия. - М. Наука, 1978, с. 302.

43. Петин В.Г. Проявление нелетальных эффектов у отдаленных потомков облученных дрожжевых клеток. Тез. 1 Всесоюз. радиобиологического съезда, Москва, 1989. - Пущино, т.4, с. 843-844.

44. Пол Д. Культура клеток и тканей. М. Медгиз, 1963, 348 с.

45. Пхаладзе JI.K., Мачарашвили Г.Р., Гогебашвили М.Э. Действие малых доз r-радиации на регенерационные процессы в зоне срастания растительных трансплантатов. Сообщ. АН ГССР, 1988, т.132, N2, с. 361-364.

46. Ровенский Ю.А. Растровая электронная микроскопия нормальных и опухолевых клеток. М. Медицина, 1979, с. 151.

47. Розенвальд И.Б., Макарова Г.Ф., Епифанова О.И. Приобретение покоящимися клетками компетентности к вступлению в период синтеза ДНК после инкубации с факторами роста и ингибиторами синтеза белка. ДАН СССР, 1989, т. 305, N4, с. 977-980.

48. Савинов А,Г. Изменение белковой ультрафиолетовой флуоресценции опухолевых клеток HeLa после облучения в малых дозах ионизирующей радиации. Дисс. на соиск. учен, степени кандидиата биол. наук. - М. 1986, с. 53-88.

49. Семеняк О.Ю. Реакция популяции опухолевых клеток HeLa стационарной фазы роста на облучение в различныхрежимах. Дисс. на соиск. учен, степени кандидата биол. наук. - М. 1987, с. 65-113.

50. Сетков Н.А., Полуновский В.А., Епифанова О.И. Синтез ДНК в ядрах покоящихся и пролиферирующих клеток линии NIH3T3 в монокарионах, гомо- и гетеродикарионах. ,-Цитология, 1984, т. 26, N6, с. 691-698.

51. Скворцов В.И. Курс фармакологии. М. 1948.

52. Сложеникина Л.В., Фиалковская Л.А., Кузин A.M. Стимулирующее действие малых доз ионизирующей радиации на синтез глюкокиназы в печени развивающихся крыс. Радиобиология, 1989, т. 29, N4, с. 473-476.

53. Тапонайнен Н.Я., Готлиб В.Н., Пелевина И.И. Чувствительность к воздействию ингибиторов пострадиационной репарации и повторного облучения потомков облученных клеток. Радиобиология, 1986, т. 26, N6, с. 755-760.

54. Тапонайнен Н.Я., Готлиб В.Я., Конрадов А.А.,Г

55. Пелевина И. И. Пролифераивная активность, синтез ДНК и репродуктивная гибель ближайших и отдаленных потомков облученных клеток. Радиобиология, 1987, т. 27, N1, с. 30-36.

56. Терских В.В., Зорин Е.В. Кинетика пролиферации и популяционный состав культуры диплоидных клеток человека при длительном выращивании без смены среды. Цитология, 1971,-103т. 13, с. 1396-1401.

57. Терских В.В., Зосимовская А.И. Изучение параметров митотического цикла в однослойной культуре клеток китайского хомячка. Цитология, 1971, т.13, с. 1388-1395.

58. Уикли Б. Электронная микроскопия для начинающих. -М. Мир, 1975, с. 320.

59. Хакимов П.А., Муртазаева JI.A., Туйчиев С. Влияние малых доз ионизирующей радиации на клетки щитовидной железы в процессе эмбриогенеза. Радиобиология, 1983, т. 23, N1, с. 105-108.

60. Хакимов П.А., Хамидов Д.Х. Стимулирующее действие малых доз ионизирующей радиации на рост и развитие куриныхэмбрионов. Всесоюз. конф. по действию малых дозоионизирующей радиации, Севастполь. Киев: Наукова думка, 1984, с. 99.

61. Холл Э. Дж. Радиация и жизнь. М. Медицина, 1989, с. 38-48.

62. Чижевский A.JI. Эпидемические катастрофы и периодическая деятельность Солнца. Москва, 1930.

63. Шмелева Н.И., Станжевская Т.Н. Механизм биологического действия ионизирующих излучений. Львов, Гос. университет, 1969, с. 339-340.

64. Шлумукова И.Ф., Серкиз Я.И., Чеботарев Е.Е. и др. Влияние сезонных и суточных ритмов на динамику лучевого поражения.

65. Ягунов А.С. 0 наследственной передаче лучевых изменений в соматических клетках. Вопр. онкологии, 1968, т. 14, N2, с. 43-44.

66. Ярмоненко С.П. Радиобиология человека и животных.1. М. Высшая школа, 1977.

67. Ярмоненко С.П., Вайнсон А.А., Календо Г.С., Рампан Ю.И. Биологические основы лучевой терапии опухолей. М. Медицина, 1976.

68. Abercombie М. Heaysman J.E. Observations on the social behaviour of cells in tissue culture. Exp. Cell. Res., 1952, v.5, p.111-131.

69. Absher P.M., Absher R.G. Clonal variation and aging of diploid fibroblasts. Cinematographic studies of cell pedigrees. Ibid. 1976, 103, p. 247-255.

70. Andersson G. Accumulation of polyploid cells and G2-phase cells during ascites tumour growth. J. Cell. Physiol., 1977,v.90,p. 329-336.

71. Augenlicht L.H., Baserga R. Changes in the GQ state of Wl-38 fibroblasts at different times after confluence. -Exp. Cell. Res., 1974, 896 p. 255-262.

72. Baenzuger N.L., Jacobi C.H., Thach R.E. Regulation of protein synthesis during denaity dependent growth inhibition of BHK 21/13 cells. - J. Biol. chem., 1974, 249,p. 3483-3488.

73. Baldassar J.J., Silbert D.F. Membrane phospholipid metabolism in response to sterol depletion. Compensatory compositional changes wich maintain 3-0-methilglucose transport. J. Biol. Chem., 1979, 254,p. 10078-10083.

74. Ban J., Brdar В., Soric J. The effects of 1-methy1-1-nitrosourea in the survival pattern of cycling and noncycling HeLa cells. J. Cancer Res. Clin. Oncol., 1979,v. 94, p. 265-275.

75. Baserga K., Waechter D.E., Soprano K.J., Galanti A.N. Molecular biology of cell division. In: Cell proliferation, cancer and cancer therapea./Ed. K. Baserga/, New York, London, 1982, vol.397,p. 110-120.

76. Bichel P., Barford N., Jokobsen A. 7-th Meet. ESGCP. ABSTR. Papers. Amsterdam, 1975, p. 17.

77. Born R., Trott K.R. Clonogenicity of the progeny of surviving cells after irradiation.- Int. J. Radiat. Biol., 1988, 53, N2, p. 319-330.

78. Bruse W.R., Meeker B.E., Valeriote F. Comparison of the sensitivity of normal hamatopoetic and transplanted lymphoma colony-friming cells to chematherapeutic agents administered in vivo. J. Nat. Cancer Inst., 19666 37,p. 233-245.

79. Buckton K.E., Jacobs P.A., Court- Brown W.N. et al. A study of the chromosome damage persisting after X-ray therapy for ankylosing spondylitis. Lancet, 1962,v.2, p. 676-682.

80. Burns F.J., Tannock J.F. On the existence of a GQ-phase in the cell cycle. Cell and Tissue Kinet,1970,3, N 4, p. 321-334.

81. Caspari D. Phisiology die Rortgen und Radium Strallen. Handbuch Norm, and Pat. Physiol., 1926, N17,p.343.

82. Chu-Der O.M.Y. , Orthwerth B.J. Lys-tRNAd and celldivision. Changes in lys-tRNA during the growth of mouse L-cells. Ibid., 1980, v. 128, p. 159-170.

83. Clarkson B.D. The survival value of the dormant state in neoplastic and normal cell populations. In: Control of proliferation in animal cells /Ed. B. Clarkson, R. Baserga. Cold spring Harbor Conf. on Cell Proliferation, 1974, 1, p. 945- 972.

84. Clarkson B.D., Fried J., Chou T.-Ch et al. Duration of the dormant state in an established cell kine of human hematopoietic cells. Cancer Res., 1977, 37,p. 4506-4522.

85. Comings D.E., Okada T.A. Electron microscopy of human fibroblasts in tissue culture during logarithmic and confluent stages of growth. Exp. Cell Res., 1970, 61,p. 295-301.

86. Cpecial issue Radiation Hormesis. health. Phys., 1987, 52, N-5.

87. Darzynkiewicz Z., Traganos F., Melamed M.R. New compartments of the cell cycle identified by multiparameter flow cytometry. J. Cell Biol., 1980,87, p.5a.

88. Engel R.L., Soli G. Method of Monitoring Low-Level Radioactivity by the Stimulated Growth of bacteria. U.S. Patent,1964, v.3, M56,p. 821.

89. Epifanova 0.1., Terskikh V.V. On the resting periods in the cell life cycle. Cell, and Tissue Kinet., 1969,2.p. 75-93.

90. Evans R.B., Morhenn V., Jones A.L., Tomcins G.M. Concomitant effects of insulin on surface membrane conformation and polysome profiles of serum-starved Balb/c 3T3 fibroblasts. J. Cell Biol.,1974, 61, N1, p. 95-106.

91. Fendrik I., Bors I. Union Barley Trials Modeled on the Fao/IAEA Coordinated Programme. Stimulation Newsletter, 1971, N2, p. 59.

92. Ferber E., de Pasquale G.G., Resch K. Phospholipid metabolism of stimulated lymphocytes compositio of phospholipid fatty acids. Biochim. et biophys. acta, 1975, 398,p. 364-376.

93. Fouad F.M., Scherer R., Abd-El-Fattah M., Ruhenstroth-Bauer G. Biosynthesis of plasma proteins in serum-free medium by primary mono layer culture of rat hepatocytes. Europ. J. Ctll Biol., 1980, 21, p. 175-179.

94. Gerson D.F., Kiefer M. Intracellular pH and the Cell Cycle of Mytogen Stimulated Murine Lymphocytes. J. Cell Phys., 1983, 114,1, p. 132-136.

95. Goh K.O. Total-body irradiation and human chromosomes: cytogenetic studies of the peripheral blood and bone marrow leucocytes seven years after total-body irradiation. Radiat. Res., 1968, v.35, N1, p. 155-159.

96. Herrmann Th., Rupprecht E. Voighmann L., Kuchheuser W. Kinder prakonzeptionell bestrahlter Elterneine Longitudinalstudie (Ergebnisse 1986). Strahlenter. und Oncol. - 1988, 164,N11, p. 629-637.

97. Hoiley R.W. Serum factors and growth control. -In. Control of proliferation in animal cells / Ed. by В Clarkson, R. Baserga, Cold Sring Harbor Conferences on cell Proliferation, 1974, 1 p. 13-18.

98. Hulser D.F., Frank W. Electrophysiologische Messungen an den Oberflachenmembranen. Ztschr. Naturforsch., 1971, 26, s. 1045-1048.

99. Isido S., Yahara G. GQ-transition of least Cells. J. of Cell Biology,1984,98,p. 1188-1193.

100. Inbar M., July I., Raz A. Contact-mediated changes in the fluidity of membrane lipids in normal and malignant transformed mammalian fibroblasts. Exp. Cell Res., 1977, 105, p. 325-335.

101. Jacobsоn-Kram David, Williams Jerry R. Failure to observe adaptive response to ionizing radiation in mouse bone marrow cells in vivo. Environ, and Mol. Mutagenes, 1988,11, Suppl. N11, p. 49-50.

102. Kalina J.J., Mackova N., Brezani P. et al. Chronic irradiation effects with daily dose rate 0,5 Gy on Haematopoiesis. 1. Haematopoietic cell changes in bone marrow. Radiol. Radiother., 1982,v.23, N3, p. 277-282.

103. Kim M., Wook B. Kinetic analysis of cell size and

104. DNA content distributions during tumor cell proliferation: Ehrlich ascites tumor study. Cell Tissue Kinet., 1975, v. 8, p. 197-218.

105. Коteles G.I. Radiation effects on cell membranes. Nikleonika, 1982, v. 27, N9, p. 447-470.

106. Коteles G.I. Radiat. Enviro. Biophys., 1982, v. 21, Ш, p. 18.

107. Koren R., Shohane E, The interaction of inophore A23187 with the uridine uptake system of quiescent and serum-activated hamster fibroblasts. Exp. cell Res., 1980, v. 127, p. 55-61.

108. Krizman D.B., Carpenter N.J., Pattak S., Olive M., Caillean R., Hsu T.C. HeLa marker chromosomes in human breast tumors: proposal about the origin of the HeLa cell line. J. Clin. Lab. Anal., 1987, 1, p. 93-97.

109. Kruse P. F., Jun , Miedenna E., Carter H.C. Amino acid utilizations and protein synthesis at various proliferation rates, population densities and protein contents of perfused animal cell and tissue cultures. -Biochemistry, 1967, 6, p. 949-955.

110. Lerman M.L. The biological essence of resting cells in cell populations. J. Theor. Biol., 1978,N73, p. 615-629.

111. Levis R., Mc. Reynolds L., Penman S. Coordinate regulation of protein synthesis and messenger RNA content during growth arrest of suspension Chinese hamster ovary cells. J. Cell Physiol., 1977, v. 90, p. 485-502.

112. Lowery M.C., Rithidech K.W.W., Adams P.M., Legator M.S. Genetic damage and the expression of benavioralalmormalities in the progeny of male rats exposed to ionizing radiation. Environ. Mutagenes., 1987, 9, Suppl. 8, p. 64.

113. Michel C. Radiation embriology. Experlentia,1989, 45, N1, p. 69-77.

114. Miller Morton W., Miller W. Marcus. Radiation hormesis in plants. -Health Phys., 1987, 52, N5, p. 607-616.

115. Moolenaar W.H., Laast S.tf.de., Saag P.T. van der. Serum triggers a sequence of rapid ionic conductance changes in quiescent neuroblastoma cells. Nature, 1979, 279, p. 721-723.

116. Nicolini C. The principles and methods of cell synchronization in cancer chemotherapy. Biochem. et Biothys. Acta, 1976,458, p. 243-282.

117. Onda H. A new hypothesis on mitotic control mechanism in eukaryotic cell: Cell specific mitosis-inhibiting protein extretion hypothesis. J. Theor. Biol., 1979, 77, p. 367-377.

118. Onda H. A Theoretical consideration of fundamental biological phenomena on cell-specific mitosis-inhibiting protein excretion hypothesis. Ibid., 1980, 86, p. 771-787.

119. Pardee А.В., Dubrow R., Hamlin I.L., Kletjien R.F. Animal cell cycle. Annu. Rev. Biochem., 1978, v. 47, p. 715-750.

120. Pardee A.B. Campisi J., Croy R.G. Differences in growth regulation of normal and tumor cells. In: Cell proliferation, cancer and cancer therapy. /Ed. R. Basserga. New York; London, 1982, p. 121-129.

121. Pardee A.B., Janes S.J. Selective killing oftransformed baby hamster kidney (BHK) cells. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1975, v.72, p.4994-4998.

122. Pavinthran K., Shobha B. Studies on germination behaviour in rice treated with gamma rays. Curr. Sci. (India), 1989, 58, N4, p. 210-211.

123. Planel H., Soleilhavoup J.P., Tixador R.,Caratero C. Effect of Protection Against Natural Irradiations in Paramecium aurelia after Autogramy. Compt. rend. Soc. biol., 1968, v. 62, p. 990.

124. Pochin E.E. Health effects of low-dose ionizing radiation-recent advances and their implications. Int. J. Radiat. Biol., 1987, 52,N4, p. 659-664.

125. Puck T.T., Marcus P.J., Cieciura S.J. Clonal growth of mamalian cells in vitro: Growth characteristics of colonies of single HeLa cells with and without a "Feeder" layer. J. Exp. Med., 1956, v. 103, N2, p. 273-284.

126. Riddle V.G., Dubrow R., Pardee A.B. Changes in synthesis of action and other cell proteins after stimulation of serum-arrested-cells. Proc. Nat. Acad. Scie. USA, 1979, v. 76, p. 1298-1303.

127. Rowinski J., Pienkovski M., Abramczuk J. Area representation of optical density of chromatin in resting and stimuladed lymphocytes as measured by means of quantiment. Histochemie, 1972, 32, p. 75-80.

128. Sagan Leonard A. What is hormesis and why haven't we heard about it before ? Health Phys., 1987,52,N5, p. 521-525.

129. Saito Y, Silbert D.F. Selective effects of membrane sterol depletion on surface function. Thymidine and 3-0-methyl-D-glucose transport in a sterol auxotroph. J. Biol. Chem., 1979, 254,p. 1102-1107.

130. Schachtschabel D.O., Pohlen M.T. Zuchtung von Zellen des Harding-Passey-Melanomes in Serum freien Kulturmedien. Wiss Beitz.,M- Zuther- Univ. Halle -Wittenberg, 1986, 12, N92, p. 177-184.

131. Sheridan G.W., Bishop C.G., Simmons R.S. Biophysical and morphlogical correlate of kinetic change and death in a starved human melanoma cell line. J. Cell Sci., 1981, 49, p. 119-137.

132. Soloff B.L., Nagle W.A., Moss A.J., Henle K.J., Crawford J.T. Apoptosis induced by cold shock in vitro is dependent of cell growth phase. Biochem. and biophys. res. Commun, 1987,145, N2, p. 876-883.

133. Stebbing F. Hormesis the stimulation of growth by low levels inhibit. - The Science of the Total Enviroment, 1982, 27, p. 213.

134. Steel G.G. Cytokinetics in neoplasma. In: Cancer medicine /Ed. J.F.Holland, E. Frei, 3/ Philadelphia: Lea and Febiger, 1973, p. 125-140.

135. Steel G.G. Growth kinetics of tumours. Oxford: Clarendon press, 1977, p. 351.

136. Todaro G.J., Lasar G.K., Green H. The initiation of cell division in a contact- inhibited mammalian cell line. J. Cell Comp> Physiol., 1965, v. 66, p. 325-334.

137. Tsao M., Earp S., Grisham J. J. Cell Physiol., 1986, v. 126, N1, p. 167-173.

138. Totter J.R. Physiology of the hormetic effect -Health Phys., 1987, 52, N5, p. 549-551.

139. Use of radiation for improvement of crop plants. -Nucl. India, 1986, 25, N4, p. 4-5.

140. Vasiliev J.M., Gelfand I.M., Domnina 1.4., Rappoport R.I. Wound healing processes in cell cultures. -Exp. Cell Res., 1969, 54, p. 83-93.-114162. Wachsmann F. Was wir uber die Gefarlichkeit kleiner Strahlendosen wissen. MTA, 1987, 2 N9, p. 705-707.

141. Washsmann F. Sind Kleine Dosen wirklich so gefahrlich ? Electromedica, 1987, 55, N3, p. 86-90.

142. Weichselbaum R.K., Dahlberg W., Sittle J.B. Inherently radioresistant cells exist in some human tumors. Proc. Nat> Acad. Sci. USA, 1985, v. 82,Ш4, p. 4732-4735.

143. Wixon H.N., Hant W.A. Ionizing Radiation decreases veratridine-stimulated uptake of sodium in rat brain synap-tosomes. Science, 1983, v. 220, N4601, p. 1068-1071.

144. Yen A., Fried J., Kitahara Т., Strife A., Clarkson B.D. The kinetic significance of cell size. 11. Size distributions of resting and proliferating cells during interphase. Exp. Cell Res., 1975, v. 95, p. 303-310.

145. Yung H. Postirradiation growth kinetics of viable CH0 cells. Radiat. Res., 1982, v. 89, M, p. 88-98.

146. Zubrod G.G. Selective toxicites of anticancer drugs: presidential address. Cancer Res., 1978, 38, p. 4377-4384.