Оптимизация применения регуляторов роста и развития растений в биотехнологиях in vitro тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, доктор биологических наук Нам, Ирина Ян-Гуковна

• Нам, Ирина Ян-Гуковна
• доктор биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации доктор биологических наук Нам, Ирина Ян-Гуковна

Список сокращений

Введение

1. Литературный обзор

1.1. Применение регуляторов роста и развития растений в современной биотехнологии

1.1.1. Применение регуляторов роста и развития растений при клональном микроразмножении

1.1.2. Гормональная регуляция регенерации растений плодово-ягодных культур in vitro

1.1.3. Генетическая трансформация плодово-ягодных культур

1.1.4. Использование метода эмбриокультуры in vitro в селекционном процессе

1.2.1. Молекулярно-генетическое маркирование растений методом ISSR-PCR

1.3. Применение модельных систем на основе изолированных органов in vitro для исследования действия регуляторов роста и развития растений при созревании и прорастании семян

1.3.1. Гормональная регуляция созревания семян in vivo

1.3.2. Влияние фитогормонов на рост и развитие зародышей в культуре in vitro

1.3.3. Гормональная регуляция прорастания семян

1.3.4. Изолированные семядоли как модельная система для изучения действия фитогормонов

1.3.4. Изучение молекулярных механизмов действия фитогормонов на модельных системах на основе изолированных органов растений

1.4.1. Регуляция роста и развития растений с помощью фитогормонов и синтетических регуляторов роста

1.4.2. Применение фитогормонов и синтетических регуляторов роста на огурце

1.4.2.1. Применение фитогормонов на огурце в открытом и закрытом грунте

1.4.2.2. Применение на огурце регуляторов роста растений негормональной природы

1.4.3. Применение препаратов из эндофитных симбионтных грибов

1.4.4. Применение регуляторов роста, синтезированных на основе фурфурола

2. Объекты и методы исследований 91 2.1. Характеристика объектов исследования

2.1.1. Биологическая характеристика огурца

2.1.2. Биологическая характеристика малины

2.1.3. Биологическая характеристика люпина

§> 2.2. Методы исследования

2.2.1. Культивирование малины in vitro

2.2.2. Регенерация и генетическая трансформация растений малины

2.2.3. Молекулярно-генетический анализ методом ISSR

2.2.4. Отбор растительного материала люпина желтого

2.2.5. Анализ фитогормонов в тканях люпина желтого

2.2.6. Культивирование зародышей незрелых семян люпина in vitro 107 '* 2.2.7. Технология выращивания огурца в защищенном грунте

3. Результаты и их обсуждение 112 3.1. Оптимизация применения регуляторов роста и развития растений при культивировании in vitro малины 112 3.1.1. Разработка методов клонального микроразмножения ремонтантной малины

3.1.1.1. Применение регуляторов роста на этапе введения ремонтантной малины в культуру in vitro

3.1.1.2. Этап размножения пробирочных растений ремонтантных форм малины.

3.1.1.3. Укоренение пробирочных растений ремонтантной малины

3.1.1.4. Адаптация укорененных пробирочных растений к внешним условиям

3.1.1.5. Общая характеристика генетического разнообразия образцов ремонтантной малины при их размножении в культуре in vitro

3.1.1.6. Описание сортов ремонтантной малины, полученных с помощью биотехнологических подходов

3.1.1.7. Хранение образцов ремонтантной малины in vitro

3.1.2. Регенерация растений ремонтантной малины in vitro

3.1.3. Разработка метода генетической трансформации ремонтантных форм малины

3.1.4. Разработка метода молекулярно-генетического анализа малины методом ISSR-PCR

3.2. Исследование гормональной регуляции процессов, протекающих на разных этапах онтогенеза растений люпина

3.2.1. Создание модельной системы на основе зародышей из созревающих семян люпина желтого

3.2.2. Создание модельной системы на основе семядолей проростков люпина желтого

3.2.3. Изучение механизма действия фитогормонов на модельных системах изолированных органов люпина

3.3.1. Разработка метода применения РРР для повышения продуктивности огурца при возделывании в защищенном грунте

3.3.1.1. Определение диапазона оптимальных концентраций РРР при их воздействии на прорастание семян ф 3.3.1.2. Влияние регуляторов роста растений на появление и развитие всходов огурца в опытах в защищенном грунте 248 3.3.1.3. Влияние регуляторов роста и развития растений на цветение растений огурца в условиях защищенного грунта

3.3.1.5. Влияние регуляторов роста и развития растений на продуктивность растений огурца

3.3.1.6. Влияние препарата кавказ на урожайность огурца в производственных опытах в защищенном грунте

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оптимизация применения регуляторов роста и развития растений в биотехнологиях in vitro»

Исследование влияния регуляторов роста и развития на жизнедеятельность растений является важнейшим направлением современной биотехнологии. Интерес к нему связан как с теоретической значимостью проблемы, так и с возможностью практического использования результатов в селекции и технологии.

Регуляторы роста представлены широким спектром природных и синтетических веществ, оказывающих воздействие на все этапы онтогенеза растений (Муромцев Г.С. и др., 1987). Среди них особое место занимают природные фитогормоны и их синтетические аналоги (Кулаева О.Н., 1973, 1982; Кефели В.И., 1974, 1989), направленно регулирующие процессы, протекающие в растениях, что позволяет использовать их в биотехнологиях in vitro (Муромцев Г.С. и др., 1987; Шевелуха B.C., 1992).

Важное значение среди биотехнологических подходов имеют кло-нальное микроразмножение и регенерация in vitro, которые разработаны для многих видов культурных растений (Бутенко Р.Г., 2001). Однако для сложно размножаемых культур актуальным остается поиск эффективных регуляторов роста для разработки технологий их размножения и регенерации in vitro.

Фундаментальной основой для поиска новых физиологически активных веществ и разработки методов их применения является изучение механизмов действия регуляторов роста на различных уровнях. Большие возможности в этом отношении дают модельные системы in vitro, включая изолированные органы, ткани, а также бесклеточные системы (Третьяков Н.Н. и др., 1998; Глазко В.И., Глазко В.Г., 2003). Разработка модельных систем включает изучение физиологических процессов, характерных для данного органа, исследование специфичности их гормональной регуляции и чувствительности по отношению к различным гормонам, взаимодействие разных типов фитогормонов и т.д. Особый интерес представляют системы, позволяющие изучать действие регуляторов роста на молекулярном уровне, в том числе на уровне транскрипции и регуляции экспрессии отдельных генов и генетических программ. Разработка таких модельных систем на разных культурах способствует расширению наших представлений о молекулярном механизме действия фитогормонов на процессы, протекающие на разных этапах онтогенеза, и в конечном счете, дальнейшему развитию теории гормональной регуляции жизнедеятельности растений.

Создание теории гормональной регуляции у растений стало возможным благодаря накоплению большого количества данных о воздействии фитогормонов на рост и развитие различных видов растений, в то же время для многих представителей обширной группы синтетических регуляторов роста изучено лишь их влияние на продуктивность отдельных сельскохозяйственных культур (Муромцев Г.С. и др., 1979; 1984; Никелл Л.Дж., 1984; Шевелуха B.C. и др., 1998). Поэтому их применение на других видах растений с целью повышения продуктивности растений и ее стабилизации, например, на огурце при возделывании в защищенном грунте, требует дальнейшего изучения.

Исследования, результаты которых представлены в данной работе, были проведены в период с 1978 по 2004 гг. на ремонтантной малине, огурце в защищенном грунте и люпине желтом - культурах разных семейств, сильно различающихся в физиологическом отношении, а также по степени изученности и проблемам, которые решались с применением регуляторов роста.

В настоящей работе были использованы ремонтантные формы малины селекции чл.-корр. РАСХН И.В. Казакова, полученные при межвидовой гибридизации малины красной, замечательной, черной, боярышниколист-ной, душистой и поленики. На Кокинском опорном пункте ВСТИСП (Брянская обл.) собрана многочисленная коллекция ремонтантных сортов и форм, здесь создан самый крупный в стране гибридный фонд. В гибридном питомнике было оценено около 120 тысяч гибридов, при этом отобрано более 250 образцов, превосходящих районированный ремонтантный сорт Бабье лето. Однако ремонтантные формы имеют существенные особенности в развитии (Казаков И.В., 1994), резко замедляющие их вегетативное размножение. Главной отличием этих генотипов является плодоношение на побегах первого года, в связи с чем вегетативные почки рано дифференцируются по цветковому типу. Распределение питательных веществ также подчинено раннему плодоношению, поэтому ассимиляты преимущественно потребляются растущими побегами и плодоэлементами. Это вызывает существенное уменьшение образования корневых отпрысков, замедление вегетативного размножения и, следовательно, селекционного процесса в целом. Для ускорения создания новых ремонтантных сортов малины актуальной была разработка биотехнологических приемов размножения элитных ремонтантных форм, в частности методов их кло-нального микроразмножения и регенерации растений in vitro.

В работе мы использовали результаты отечественных и зарубежных исследователей, ранее разработавших методы клонального микроразмножения in vitro для растений рода Rubus: малины красной, черной, ежевики (Коротаева М.С. и др., 1975; Высоцкий В.А., 1984, 1998; Туровская Н.И., 1990; Fiola J.A. et al., 1990; Graham J. et al., 1997). Так, при микроразмножении этих видов растений на этапах введения эксплантов in vitro и собственно размножения пробирочных растений применяются цитокинины пу-ринового ряда - 6-БАП, реже кинетин и зеатин, а на этапе индукции ризо-генеза - ауксины ИУК, ИМК или НУК. Для регенерации in vitro растений разных видов из эксплантов различного типа - листовых пластинок, дисков и черешков, семядолей, зародышей и других органов, используются сочетания различных цитокининов и ауксинов. Из цитокининов наиболее эффективным для индукции регенерации является 6-БАП, а в качестве ауксинов чаще всего упоминаются ИУК, ИМК, реже 2,4-D. В ряде работ по регенерации растений плодовых культур авторы индуцируют стеблевой морфогенез на семядолях и листовых дисках с помощью тидиазурона - ци-токинина ряда дифенилмочевины.

В начальный период нашей работы литературных данных о размножении и регенерации in vitro ремонтантной малины не было. Разработку методов клонального микроразмножения и регенерации in vitro ремонтантных форм малины мы начали с изучения эффективности применения при их культивировании традиционно используемых фитогормонов 6-БАП и ауксинов ИУК и ИМК.

Основные сложности при разработке метода клонального микроразмножения наблюдались на этапе введения образцов ремонтантной малины в культуру in vitro, что было связано с биологическими особенностями этих форм — с ранним плодоношением растений, формированием ягод на побегах текущего года. В связи с этим были ограничены как сроки вычленения апексов для культивирования in vitro, так и количество исходного материала - всего по 6 -15 эксплантов на образец. Малое количество исходного материала объективно не позволяло проводить опыты по оптимизации питательных сред, особенно на этапе введения материала в культуру in vitro. Кроме того, оптимизировать гормональный состав питательных сред на других этапах микроразмножения также было сложно из-за большого генетического разнообразия размножаемых форм - с 1993 по 2004 гг. нами было введено в культуру более 145 гибридных образцов, размножено и передано селекционерам более 15 тысяч растений 130 генотипов. То есть, необходимо было разработать универсальные среды, эффективные для большинства образцов, но, возможно, не оптимальные для отдельных генотипов. При недостаточной активности традиционно используемых фитогормонов на разных этапах этой работы важно было исследовать возможность применения новых регуляторов роста, ранее не использованных для ремонтантной малины.

В современной селекции широко используются методы генетической инженерии, позволяющей направленно создавать сорта, несущие новые, уникальные свойства. Однако для трансгеноза растений необходимо предварительно разработать высокоэффективный метод регенерации растений изучаемой культуры in vitro, а также выбрать способ трансформации растительных тканей и подобрать условия ее проведения. В литературных источниках в начале 90-х годов были данные о получении трансгенных растений малины и ежевики, однако с ремонтантными формами работа не проводилась, что явилось основанием для разработки методов регенерации и трансформации ремонтантных генотипов.

В современной биотехнологии в последние годы четко проявилась тенденция использования методов, подходов и достижений этой науки для проведения исследований в смежных областях биологии. Так, например, успехи генетической инженерии позволили разрабатывать модельные системы типа растение - агробактерия A. tumefaciens, которые применяются для изучения физиологических (гормональных) и молекулярных механизмов генетической трансформации, а также генетических систем, отвечающих за их взаимодействие (Лутова JI.A. и др., 2002).

Методы культивирования изолированных органов и тканей растений также широко используются в физиологии и молекулярной биологии растений. Так, при изучении регуляторов роста и развития растений особое внимание ученых привлекает их воздействие на растения на молекулярном уровне, например, влияние фитогормонов на экспрессию генов и генетических программ на уровне регуляции их транскрипции и трансляции (Ку-лаева О.Н., 1987, 1999; Холл A.M., 2002). Для этого требуется разработка модельных систем, отвечающих определенным требованиям. Создание модельных систем на основе культивируемых in vitro органов растений позволяет упростить регуляторные взаимодействия, вычленить и охарактеризовать отдельные процессы, и изучить влияние на них внешних факторов, в том числе фитогормонов.

Исследования гормональной регуляции процессов, протекающих на разных этапах онтогенеза люпина желтого, были начаты нами в 1978 году.

На модельной системе цветочной кисти люпина изучена гормональная регуляция процесса опадения плодоэлементов и на этой основе был предложен препарат ингибиторного действия 2-аминоизомасляная кислота. Она является конкурентным ингибитором АЦК-синтазы - ключевого фермента биосинтеза этилена, и существенно подавляет опадение плодоэлементов, повышая тем самым продуктивность растений.

Изолированные семядоли проростков и незрелые зародыши люпина, культивируемые in vitro, также могут быть использованы в качестве модельных систем для изучения действия гормонов на этапах формирования и прорастания семян, в том числе на молекулярном уровне. Ранее на люпине желтом подобные исследования не проводились, и этой проблеме посвящена часть настоящей диссертации.

Регуляторы роста широко используются при возделывании многих сельскохозяйственных культур, при этом они стимулируют рост и развитие растений, увеличивают их продуктивность и устойчивость. Для повышения урожайности огурца в защищенном грунте мы изучали действие ряда регуляторов негормональной природы из числа стимуляторов роста общего действия, которые в целом ускоряют рост, развитие и плодоношение растений. В настоящее время таких препаратов известно довольно много. Многие из них не являются аналогами фитогормонов или имеют весьма отдаленное сходство с ними. Механизмы и особенности их действия на растения изучены в недостаточной степени. Поэтому возникает задача исследования физиологических особенностей действия таких веществ на растения.

К эффективным, но малоизученным фиторегуляторам, созданным в последние десятилетия, относятся препараты эмистим, экост-ГФ, красно-дар-1 и кавказ (Ненько Н.И., 1999; Ковалев В.М, 2003). Наряду с исследованием их действия на продуктивность и устойчивость растений огурца, важно изучить морфофизиологические показатели эффективности этих веществ, влияние на разные этапы онтогенеза.

Целью настоящей работы является оптимизация применения регуляторов роста: а) при создании высокоэффективной системы клонального микроразмножения, регенерации и генетической трансформации in vitro растений ремонтантных форм малины; б) при разработке модельных систем для изучения молекулярных механизмов действия фитогормонов на разных этапах онтогенеза люпина; в) при разработке методов использования новых регуляторов роста и развития для увеличения продуктивности растений огурца.

При этом решались следующие задачи:

- разработка метода клонального микроразмножения ремонтантной малины: введение материала в культуру in vitro, оптимизация условий по-бего- и корнеобразования, разработка способов длительного хранения пробирочных растений;

- разработка системы регенерации растений ремонтантной малины из листовых дисков, а также метода молекулярно-генетического анализа на основе ISSR-PCR для изучения генетической стабильности регенерантов;

- разработка метода трансформации растений ремонтантной малины с использованием A. tumefaciens, доказательство его эффективности с помощью PCR и тест-системы на наличие лихеназной активности;

- разработка модельных систем для исследования молекулярных механизмов действия фитогормонов в онтогенезе на растениях люпина желтого с использованием прорастающих и созревающих семян;

- изучение эффективности новых синтетических регуляторов роста растений эмистим, экост-ГФ, Краснодар-1, кавказ на разных этапах онтогенеза огурца и оптимизация их применения в условиях защищенного фунта для повышения продуктивности и устойчивости.

Научная новизна работы.

Впервые разработан метод клонального микроразмножения ремонтантной малины, при этом оптимизированы этапы введения материала в культуру in vitro, размножения и укоренения пробирочных растений и длительного сохранения клонов в пробирочных условиях.

Впервые показана способность регуляторов цитокининового действия структурного ряда дифенилмочевины - тидиазурона (TDZ) и N-(4-пиридил)-М-фенилмочевины (4-PU), индуцировать стеблевой морфогенез из цветочных почек, что позволило вводить в культуру in vitro новые формы ремонтантной малины в течение всего года.

Разработан метод регенерации растений из листовых дисков ремонтантной малины с применением 4-PU и TDZ, универсальный для различных генотипов. Стеблевой морфогенез наблюдается у всех исследованных форм - на уровне 3.3 - 96.0% в зависимости от генотипа.

Впервые разработан молекулярно-генетический метод анализа растений малины на основе ISSR-PCR. Показана генетическая однородность полученных регенерантов ремонтантной малины и их идентичность исходному образцу. Эффективность метода подтверждена путем проведения генетической паспортизации и построения дендрограмм генетического родства более 30 видов и сортообразцов малины.

Разработана система генетической трансформации ремонтантной малины методом кокультивирования листовых дисков с A. tumefaciens. Эффективность метода доказана с помощью PCR и тест-системы на наличие лихеназной активности.

Разработаны модельные системы с использованием семядолей прорастающих семян и незрелых зародышей люпина желтого, культивируемых in vitro, для изучения молекулярных механизмов гормональной регуляции процессов созревания и прорастания семян и экспрессии генов.

Впервые на люпине желтом показано, что АБК и 6-БАП влияют на РНК-полимеразную активность хроматина и степень его фосфорилирова-ния. Были выделены, частично очищены и охарактеризованы ядерные РНК-полимеразы I и II и показано, что с ними ассоциирована протеинкиназная активность, которая специфически активируется цитокининами с четко выраженной концентрационной зависимостью.

Впервые изучено физиологическое действие экологически чистых препаратов кавказ, Краснодар-1, эмистим и экост-ГФ на разных этапах развития растений огурца в условиях защищенного грунта, показано их стимулирующее действие на рост, развитие и плодоношение растений. Определены оптимальные концентрации препаратов, повышающие продуктивность растений огурца в защищенном грунте на 9 - 17%.

Положения, выносимые на защиту:

1. Метод клонального микроразмножения in vitro ремонтантной малины с применением цитокининов TDZ и 4-PU для оптимизации этапов введения эксплантов в культуру in vitro и размножения пробирочных растений, обеспечивающий размножение образцов практически независимо от генотипа.

2. Системы регенерации ремонтантной малины из листовых дисков и ее трансформации методом кокультивирования с A. turn.

3. Метод молекулярно-генетического анализа малины для оценки генетической стабильности и однородности растений - регенерантов, а также для характеристики размножаемых ремонтантных форм.

4. Модельные системы с использованием изолированных семядолей проростков и незрелых зародышей люпина желтого для исследования молекулярных механизмов действия фитогормонов и регуляции экспрессии генов.

5. Способы применения регуляторов роста Краснодар-1, кавказ и эмистим в условиях интенсивной технологии выращивания огурца в защищенном грунте для повышения продуктивности растений и ее стабилизации.

Практическая значимость работы. Применение предложенных методов и технологий размножения in vitro ремонтантной малины обеспечило сокращение на 4 - 5 лет сроков селекции от получения элитной формы до передачи сорта в систему сортоиспытания, что особенно важно для ремонтантных генотипов, которые отличаются низким коэффициентом вегетативного размножения. В период с 1993 г. по 2004 г. размножено и передано селекционерам более 130 образцов и на этой основе ими создано 8 новых высокоурожайных, устойчивых к болезням и вредителям сортов ремонтантной малины. Клональное микроразмножение необходимо также для организации массового производства посадочного материала новых перспективных сортов этой культуры.

Применение экологически чистых препаратов эмистим, Краснодар-1 и кавказ повышает продуктивность растений огурца в условиях интенсивного производства в защищенном грунте на 9 - 17%.

Таким образом, настоящая работа затрагивает различные аспекты применения регуляторов роста и развития растений в биотехнологии:

1. Применение ранее не использовавшихся для ремонтантной малины регуляторов роста ряда дифенилмочевины привело к разработке технологии клонального микроразмножения и регенерации растений этой культуры in vitro, что позволило резко ускорить создание новых сортов. Разработка методов генетической инженерии на основе эффективной регенерации растений in vitro открывает новые перспективы в селекции этой культуры.

2. Решение технологических проблем при возделывании огурца в защищенном грунте оказалось возможным при использовании экологически чистых препаратов эмистим, кавказ и Краснодар-1, повышающих продуктивность растений на 9-17%.

3. Для исследования механизма действия фитогормонов и регуляторов роста перспективно применение модельных систем, созданных на основе культивируемых in vitro изолированных зародышей и семядолей люпина желтого, что важно для развития гормональной теории регуляции жизнедеятельности растений.

1. Литературный обзор.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Нам, Ирина Ян-Гуковна

Выводы.

1. Разработана технология клонального микроразмножения и регенерации растений ремонтантной малины in vitro, применение которой обеспечивает ускорение создания высокопродуктивных и устойчивых сортов этой культуры. Технология оптимизирована для ремонтантных гибридов малины сложного межвидового происхождения на этапах введения эксплантов в культуру in* vitro, размножения, укоренения и длительного сохранения пробирочных растений. Ее высокая эффективность основана на применении цитокининов ряда дифенилмочевины - тидиазурона и Н-(4-пиридил)-Н-фенилмочевины; подборе эксплантов различного происхождения; возможности круглогодичного введения эксплантов в культуру in vitro; дифференцированной оптимизации условий размножения элитных сортообразцов малины.

2. Применение разработанной технологии позволяет сократить на 4 - 5 лет сроки создания сортов и гибридных образцов ремонтантной малины. За период с 1993 по 2004 годы получено, размножено и передано селекционерам более 15 тысяч растений 130 гибридных образцов. На их основе создано 8 новых сортов этой культуры.

3. Использование тидиазурона и Н-(4-пиридил)-Ы-фенилмочевины обеспечило введение в культуру in vitro более 145 новых форм ремонтантной малины, а также индукцию стеблевого морфогенеза из цветковых почек, что позволило вводить материал в культуру in vitro в течение всего года.

4. На этапе собственно микроразмножения in vitro для большинства ремонтантных образцов наиболее эффективным оказался препарат 6-БАП в концентрации 2 мг/л, а для трудно размножаемых форм - препараты 4-PU и TDZ в концентрациях 0.4 мг/л и 0.1 мг/л, соответственно. Лучшему укоренению побегов способствуют ауксины ИУК и ИМК в концентрации

0.5 — 0.75 мг/л, а для слабо укореняемых генотипов преимущество имеет обработка побегов раствором ИМК, 1 г/л с дальнейшим перенесением на безгормональную питательную среду или в песок.

5. Полученные in vitro растения при выращивании их в полевых условиях имеют более высокий коэффициент вегетативного размножения и обладают повышенной продуктивностью. Указанный эффект постепенно снижается в течение 4-5 лет.

6. При регенерации растений из листьев, листовых дисков и листовых черешков различных генотипов in vitro стеблевой морфогенез индуцируется у всех исследованных форм в широком диапазоне - от 3.3 до 96.0%. Показано, что регенерационная способность ремонтантной малины зависит от генотипа, происхождения эксплантов, концентрации используемых регуляторов роста, условий культивирования.

7. Впервые для ремонтантной малины применен метод молекулярно-генетического анализа с использованием ISSR-PCR. С его помощью показана генетическая однородность растений - регенерантов малины и их идентичность исходному образцу, а также проведена генетическая паспортизация и построены дендрограммы генетического родства более 30 видов и сортообразцов малины.

8. Для ремонтантной малины разработан метод генетической трансформации с помощью кокультивирования листовых дисков с А. tumefaciens, получены трансформированные растения с генами nptll и термостабильной бактериальной лихеназы, что доказано методом PCR и тестом на наличие лихеназной активности.

9. Разработаны модельные системы с использованием семядолей прорастающих и незрелых зародышей созревающих семян люпина желтого, культивируемых in vitro. Эти системы могут быть использованы для изучения молекулярных механизмов гормональной регуляции процессов созревания и прорастания семян этой культуры.

10. Впервые на люпине желтом показано, что АБК и 6-БАП влияют на РНК-полимеразную активность хроматина и степень его фосфорилирования. Были выделены, частично очищены и охарактеризованы ядерные РНК-полимеразы I и II. Показано, что с ними ассоциирована протеинкиназная активность, которая специфически активируется цитокининами с четко выраженной концентрационной зависимостью.

11. Впервые изучено физиологическое действие экологически чистых регуляторов роста: кавказ, Краснодар-1, эмистим и экост-ГФ,- на разных этапах развития растений огурца в условиях защищенного грунта. Препараты стимулируют прорастание семян, рост, цветение и плодоношение растений. Определены оптимальные концентрации препаратов, повышающие продуктивность растений огурца в защищенном грунте на 9-17%. Наибольшую прибавку продукции, в среднем на 16% за три года, обеспечил препарат кавказ в концентрации 25 мкл/л, рентабельность в производственных опытах возросла при этом на 5.5% -11.9%.

Практические рекомендации.

1. Разработанная технология клонального микроразмножения ремонтантных форм малины может быть применена для ускорения селекции и для производства посадочного материала новых сортов этой культуры.

2. Метод ISSR-PCR рекомендуется использовать для молекулярно-генетического анализа малины при селекции, в частности для поиска молекулярных маркеров на хозяйственно-ценные признаки, при уточнении схем селекции и для установления родства различных образцов.

3. Генетическая паспортизация с помощью ISSR-PCR позволяет различать между собой сорта малины и может быть рекомендована для оценки сортовой чистоты при производстве и внедрении новых сортов.

4. Разработанные методы регенерации и трансформации in vitro ремонтантной малины могут быть использованы в работах по созданию трансгенных форм этой культуры.

5. Модельные системы на основе семядолей прорастающих и незрелых зародышей созревающих семян люпина желтого рекомендуются для изучения механизмов действия фитогормонов и регуляторов роста.

6. Для повышения эффективности производства огурца в защищенном грунте перспективным является использование препаратов кавказ в концентрации 25 мкл/л и Краснодар-1 в концентрации 125 мг/л.

7. Полученные результаты рекомендуется использовать в учебных курсах по физиологии и биохимии растений при обучении студентов в вузах.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Нам, Ирина Ян-Гуковна, 2004 год

1. Аветисова Л.В., Марьяхина И.Я. Ультраструктура клеток каллуса капусты при различном характере морфогенеза in vitro. // Культура клеток растений и биотехнология. / М.: Наука, 1986, с. 124 127.

2. Авакян А.Г., Арзуманян А.Т. Влияние физиологически активных веществ на рост, развитие и продуктивность огурцов. // Наука — овощеводству, Ереван, 1990а, с. 96-101.

3. Авакян А.Г., Арзуманян А.Т. Капельное орошение огурца в условиях защищенного грунта. // Наука овощевод. Ереван, 1990,6, С. 75-79.

4. Алексеенко JI.B. Особенности размножения нейтральнодневных и ремонтантных сортов земляники in vitro. // Автореф. дисс. канд. с/х наук. М., 1998, 20 с.

5. Андреева Е.А., Ходжайова JI.T. Изучение роли цитокининов в развитии признака устойчивости к болезням в модельной системе карфтофель фитофтора. // 2-й съезд генетиков и селекц., С-Пб., 2000, Т.1, С. 275.

6. Армитидж Ф., Уолден Р., Дрейпер Дж. Агробактериальные трансформирующие векторы растений.// Генная инженерия растений. Лабораторное руководство / Под ред. Дрейпера Дж., М.: Мир, 1991, с. 11-86.

7. Бадовская J1.A., Кульневич В.Г., Ненько Н.И. Новый регулятор роста кукурузы — препарат кротонолактон. / Рекоменд. АПК Краснодарск. края, 1986, 5с.

8. Балуева H.J1. Перспективность применения биостимуляторов на яровой пшенице. // Тез. докл. областной научно -практ. конф., Курган, 1999, с. 61-62.

9. Балуева H.J1. Сравнительная эффективность влияния биологическиактивных веществ на начальный рост и продуктивность яровой пшеницы. / Автореф. дисс. на соиск. уч. степ. канд. с/х наук, Курган, 2000, 19 с.

10. Баскаков Ю.А. Новые гербициды и регуляторы роста растений. // Журн. Всесоюзн. хим. общ-ва им. Менделеева, 1984, т.29, №1, с. 22-39.

11. Баскаков Ю.А. Новый антистрессовый препарат цитокининового типа действия. // Регуляторы роста растений. JI, 1989, С. 42 45.

12. Батыгина Т.Б., Бутенко Р.Г. Морфогенетический потенциал зародыша покрытосеменных растений (на примере представителей рода Рае-onia сем. Paeoniaceae). // Бот. журн., 1981, Т. 66, № 11, с. 1531 1547.

13. Бленда В.Ф., Радилова Л.Д. Клональное микроразмножение подвоев косточковых культур. // Садоводство и виноград., 1991, №3, с. 21 24.

14. Бленда В.Ф. Адаптация подвоев косточковых культур, полученных из изолированных меристем. // Садоводство и виногр., 1996, №3, с. 18—19.

15. Болотских А.С. Выращивание огурцов./ М.:Колос,1975, 114 с.

16. Болотских А.С., Даус Е.Г. Промышленное производство огурцов. / М.: Колос, 1983,203 с.

17. Будыкина Н.П., Шабалина Л.П., Кучко JI.A. Эффективность применения гиберсиба в сочетании с хлорхолинхлоридом на тепличной культуре томата. // Эколого-физиологические основы устойчивости, роста и развития растений, Петрозаводск, 1992, с. 98-103.

18. Бургутин А.Б., Бутенко Р.Г., Катаева Н.В., Голодрига П.Я. Быстрое клональное размножение виноградного растения // Сельскохозяйственная биология, 1983, N 5, с. 48-50 .

19. Бурдейная Т.В., Высоцкий В.А., Алексеенко JI.B. Использование тидиазурона в культуре изолированных тканей и органов ягодных растений. // Плодоводство и ягодоводство России, 1998, Т.5, С. 55-59.

20. Брызгалов В.А. Советкина В.Е., Савинова Н.И., Девочкин Л.А., Лебл Д.О., Нестругин Н.А., Попов Г.Ф., Калиненок Н.П. Овощеводство защищенного грунта. / М."Колос", 1995, 352 с.

21. Бутенко Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений./ М.:Наука, 1964.

22. Бутенко Р.Г., Лунева М.З. Применение метода стерильных культур для выращивания отдаленных гибридов Nicotiana. // Физ. раст., 1966, Т. 13, №4, с. 733-736.

23. Бутенко Р.Г. Экспериментальный морфогенез и дифференциация в культуре клеток растений./ М.: Наука, 1975, 121 с.

24. Бутенко Р.Г. Использование культуры тканей растений в сельскохозяйственной науке и практике // Сельскохозяйственная биология, 1979, Т.14,№3, с. 306-315.

25. Бутенко Р.Г. Клеточные технологии в селекционном процессе // Состояние и развитие сельскохозяйственной биотехнологии / Мат. Всесоюзн. конф., Москва, 1986, с. 29-38.

26. Бутенко Р.Г. Биология клеток высших растений и биотехнология на их основе. // Учебное пособие, М.: ФБК-Пресс, 1999, 160 с.

27. Вакуленко В.В., Гашников Э.Г., Янина М.М. Результаты испытаний Эмистима на капусте белокочанной, картофеле, яблоне зимних сортов, рисе и сахарной свекле.//Аграрная Россия, 1999, т.1-2, с. 27-35.

28. Васильева В.Е., Батыгина Т.Б. Культура in vitro зародышей и семядолей лотоса, изолированных на разных стадиях развития. // Физиол. раст., 1981, т. 28, №2, с. 319-327.

29. Вартапетян А.Б. Полимеразная цепная реакция. // Мол. биол., 1991, т.25, №4, с. 926-936.

30. Ващенко С.Ф., Чекунова З.И., Савинова Н.И. и др., Овощеводство защищенного грунта. / М.: Колос, 1984, 272 с.

31. Винклер Г.Н., Бутенко Р.Г. Применение черенкования при выращивании безвирусных растений картофеля методом культуры меристемы //

32. Физиол. раст.,. 1970, т.17, N 4, с.851-853.

33. Вовк В.В. Оптимизация селекционного процесса и ускоренное размножение ремонтантных форм малины методом in vitro. / Автореф. на соиск. канд. с.-х. н., Брянск, 2000, 20 с.

34. Волохов М.М. Совершенствование родительских форм малины ремонтантного типа на основе межвидовой гибридизации. / Автореф. на соиск. . канд. с.-х. н., Брянск, 2003, 23 с.

35. Высоцкий В.А., Попов Ю.Г., Трушечкин В.Г. Регенерация изолированных меристематических верхушек древесных растений. // Плодоводство и ягодоводство нечерноземной полосы / Сб. научных трудов НИ-ЗИСНП, 1976, т. 9, с. 89 100.

36. Высоцкий В.А. Действие некоторых регуляторов роста на изолированные меристематические верхушки черной смородины. // Плодоводство и ягодоводство нечерноземной полосы / Сб. научных трудов НИЗИСНП, 1979, т. 9, с. 101-107.

37. Высоцкий В.А. Культура изолированных тканей и органов плодовых растений: оздоровление и микроклональное размножение. // Сельскохозяйственная биология, 1983, №7, с. 42 47.

38. Высоцкий В.А. Усовершенствование способов получения растений малины из изолированных меристематических верхушек. // Плодоводство и ягодоводство нечерноземной полосы / Сб. научных трудов НИЗИСНП, 1984, с. 3-8.

39. Высоцкий В.А. Морфогенез и клональное микроразмножение растений. // Культура клеток раст. и биотехнол. / М.: Наука, 1986, с. 91 102.

40. Высоцкий В.А. Использование методов культуры изолированных тканей для оздоровления и ускоренного размн.плодовых и ягодных культур. // Селекц. Плод, и ягодн. культур, Новосибирск, 1989, с. 132 — 138.

41. Высоцкий В.А., Хамукова Ф.М. Возможности регенерации растений земляники и малины из каллусов различного происхождения. // Ягодоводство в Нечерноземье, 1993, с. 19 — 24.

42. Высоцкий В.А. О генетической стабильности при клональном мик-роразмнож. плодовых и ягодных культур // С/х. биол., 1995, N 5, с. 57-63.

43. Высоцкий В.А. Особенности клонального микроразмножения некоторых форм ремонтантной малины. // Плодоводство и ягодоводство России / Сб. научных трудов ВСТИСП, 1996, т.З, с. 90-95.

44. Высоцкий В.А., Бурдейная Т.В. Влияние селективных агентов на регенерационные процессы в культуре листовых дисков малины красной. // Садоводство и ягодоводство России, 1998, Т.5, С. 72 77.

45. Высоцкий В.А. Биотехнологические методы в системе производства оздоровленного посадочного материала и селекции плодовых и ягодных культур // Дисс. на соиск. уч. степ. докт. с.-х. наук, М., 1998, 321 с.

46. Высоцкий В.А., Карпова О.В., Янина М.М. Использование препаратов Эмистим и Экост 1/3 в технологиях микроклонального размножения ежевики // Аграрная Россия, 1999, т. 1-2. с. 44 46.

47. Высоцкий В.А., Алексеенко JT.B. Чувствительность изолированных органов плодовых растений к Agrobacterium rhizogenes в культуре in vitro. // Плодоводство и ягодоводство России, 2001, Т.8, С. 154 157.

48. Гамбург К.З. Биохимия ауксина и его действие на клетки растений. Новосибирск, 1976,272 с.

49. Гельцер Ф.Ю. Приемы обработки желудей микоризным грибком и источники его получения. // Советская агрономия, 1951, № 11. с. 54 — 62.

50. Гельцер Ф.Ю. Эффективный стимулятор роста растений // Сельское хозяйство СССР, 1973, № 12, с. 46-51.

51. Ф.Ю.Гельцер. Симбиоз с микроорганизмами основа жизни растений. / М.: изд.МСХА, 1990, с. 135.

52. Глазко В.И., Глазко Г.В. Толковый словарь./Киев:КВИЦ, 2001, 580.

53. Глазко В.И., Глазко Г.В. Введение в генетику./ Киев: КВИЦ, 2003,640 с.

54. Глеба Ю.Ю., Сытник К.М. Клеточная инженерия растений / Киев :Наукова думка, 1984, 160 с.

55. Говорова Г.Ф. Биотехнология в селекции земляники на устойчи вость к болезням. // Актуальные проблемы биотехнологии в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии / Тез. докл. конф., М., 1996, с. 16.

56. Голденкова И.В., Мусийчук К.А., Абдеев P.M., Кобец Н.С., Пиру-зян Э.С. и др. Новый репортерный ген для растений. // Тез. докл. IV съезда ВОФР, Москва, 1999, С. 760.

57. Головин С.Е. Корневые гнили малины в питомниках, причины возникновения и борьба с ними // Плодоводство и ягодоводство России. / Сб. трудов ВСТИСП. / М., 1986, т.2. с. 30 38.

58. Горьковцева Е.А., Юлдашев О.Х. Микроклональное размножение ценных сортов винограда. // Садоводство и виноград., 1991, N 11, с. 17-20.

59. Гринько Н.Н., Вялых А.К., Соколова JI.M., Ерошин В.К. Защитное и стимулирующее действие иммунофита на культуры томата и огурца в защищенном грунте. // Мир теплиц, 1998, №8, с. 62-63.

60. Гудвин Т., Мерсер Э. Введение в биохимию растений./ М.: Мир, 1986, с. 203-267.

61. Деменко В.И., Трушечкин В.Г. Размножение вишни методом in vitro // Сельскохоз. биол., 1983, N 7, с. 51-53.

62. Дерфлинг К. Гормоны растений. / М.: Мир, 1985, 303 с.

63. Джигадло М.И. Использование биотехнолгических и биофизических методов в селекции и сорторазведении плодовых и ягодных культур. / Автореф. на соиск. канд. с.-х. н., Орел, 2003, 27 с.

64. Джонс О.П. Размножение хозяйственно важных древесных растений in vitro. // В кн.: Биотехнол. с/х растений, М., 1987, с. 134-152.

65. Долежел Й., Новак Ф.Й. Кариологические изменения в ходе дедиф-ференцировки клеток чеснока (Allium sativum)./ Культура клеток растений и биотехнология, М.: Наука, 1986, с. 20 24.

66. Дорошенко Н.И. Микроклональное размножение столового винограда сорта Агат Донской. // Садоводство и виноград., 1989, №3, с. 24 — 25.

67. Дорошенко Н.П., Кострикин И.А. Клональное микроразмножение столового винограда сорта Агат донской // Садоводство и виноградарство, 1989, №3, с. 37-40.

68. Дорошенко Н.П. Биотехнологические методы ускоренного размножения и оздоровления, селекции бессемянных сортов и создания коллекций генофонда винограда / Автореф. на соиск.докт. с.-х.н., 1999, 59 е.

69. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта./ М.: Колос, 1974, 416 с.

70. Дрейпер Дж., Скотт Ф., Армитидж Ф. Генная инженерия растений. Лабораторное руководство / Под ред. Дж. Дрейпера, М.: Мир, 1991. 408 с.

71. Ежов М.Н., Прусакова Л.Д., Сальников А.И. Повышение продуктивности и повышение качества зерна гречихи под действием эмистима и эпибрассинлида.//Агрохимия, 1999, №5, с. 88-90.

72. Ежов М.Н., Прусакова Л.Д., Сальников А.И. Использование эмистима для улучшения плодообразования гречихи. // Регуляторы роста и развития растений. / Сб. тр. 5 междунар. конф., 1999, с. 180-181.

73. Ежов М.Н. Регуляция плодообразования гречихи эмистимом и эпи-брассинолидом для повышения продуктивности./ Москва, 1999,21 с.

74. Жукова П.С. Гербициды и стимуляторы роста в овощеводстве. / Минск, 1976, 47 с.

75. Жуков П.С. и Аниховская Т.Б. Использование регуляторов роста при выращивании огурцов // Хим. сельского хозяйства, 1991, N.5, с.28-31.

76. Жученко А.А. К проблемам научного овощеводства // Картофель и овощи, 2002, №2, с. 2-5.

77. Заулкова Н.П., Микроразмножение алычи // Проблемы интенсификации современного садоводства / Тез. конф., Мичур.,1990, с. 165-166.

78. Здруйковская-Рихтер А.И. Культура незрелых зародышей миндаля от межвидовой гибридизации и свободного опыления. // Бюлл. Гл. бот. сада, 1980, т. 115, с. 85 90.

79. Здруйковская-Рихтер А.И. Культура in vitro зародышей хурмы от межвидовой гибридизации. // Бюлл. Гл. бот. сада, 1981, т. 121, с. 84 — 86.

80. Здруйковская-Рихтер А.И. Рост и дифференцировка изолированных зародышей бобовых растений in vitro. // Бот. журн., 1983, т. 70, №10, с. 1355- 1362.

81. Игнатьев Н.Н., Дозорцева Н.В. Оценка биологической активности стимуляторов роста растений по интенсивности поглощения кислорода системой почва растение. // Изв. ТСХА, 981, т. 1, с. 72-78.

82. Казаков И.В. Селекция малины в средней полосе РСФСР ./Тула: Приокск. кн. изд., 1989, 217 с.

83. Казаков И.В. Малина и ежевика / М., 1994. 114 с.

84. Казаков И.В., Рожнов Н.И., Евдокименко С.Н. Совершенствование исходных форм малины ремонтантного типа. // Генетика и наследование важнейших хозяйственных признаков плодовых растений, Мичуринск, 1994, с. 64-69.

85. Калашников Д.В. О некоторых результатах применения препарата Эмистим во Вьетнаме // Аграрная Россия, 1999, т. 1-2, с. 47.

86. Калашникова Е.А. Клеточная селекция растений на устойчивость к грибным болезням // Автореф. дисс. на соиск. уч. степ.докт. биол. наук, М., МСХА, 2003.

87. Калашникова Е.А. Влияние факторов гормональной и негормональной природы на морфогенетический потенциал интактных растений пшеницы и в культуре in vitro.// Сельскохозяйственная биотехнология. Под ред. Шевелухи B.C., М.: Евразия+, 2001, т.2, с. 71-80.

88. Калашников Д.В. О некоторых результатах применения препарата Эмистим во Вьетнаме // Аграрная Россия. 1999. — 1-2.- С. 47.

89. Калинин Ф.Л. Биологически активные вещества в растениеводстве // Киев, «Наукова думка», 1984. 320 с.

90. Кан А.А. Физиология и биохимия покоя и прорастания семян. / М.: Колос, 1982, с. 495.

91. Катаева Н.В., Аветисова В.А. Клональное микроразмножение растений в культуре ткани. // Культура клеток растений, М.: 1981, с. 137 149.

92. Катаева Н.В., Бутенко Р.Г. Принципы микроклонального размножения растений на примере герберы. // Изв. АН СССР, сер. Биология, 1982, №1, с. 126- 129.

93. Катаева Н.В. Особенности клонального микроразмножения трудно-укореняемых сортов яблони. // Сельхоз. биология, 1984, №4, с. 18 — 22.

94. Кефели В.И. Рост растений. / М.: Наука, 1984, 175 с.

95. Кефели В.И., Прусакова Л.Д. Химические регуляторы растений . Сер. Биология, М.,1985, 64 с.

96. Кефели В.И., Коф Э.М., Власов П.В., Кислин Е.Н. Природный ингибитор роста абсцизовая кислота. / М.: Наука, 1989, 184 с.

97. Кефели В.И., Власов П.В., Прусакова Л.Д. Природные и синтетические регуляторы онтогенеза растений // Итоги науки и техники, т.7 / М., ВИНИТИ, 1990, с.26-111.

98. Князева Т.П. Огурцы защищенного фунта. / М., Армада-пресс, 2001, 31 с.

99. Ковалев В.М., Шилова Е.В. Роль физиологически активных веществ в повышении адаптивной способности растений // Вестник с/х науки, 1987, №1, с. 74-78.

100. Ковалев В.М. Теоретические основы оптимизации формирования урожая. / М.: изд. МСХА, 1997, 284 с.

101. Ковалев В.М., Сей Хуей Гуан, Лей Юнь Бо. Применение фиторегу-ляторов при выращивании культуры огурца в Китае .// Аграрная наука, 1998, В.4, с. 45-46.

102. Ковалев В.М., Янина М.М. Методологические принципы и способы применения рострегулирующих препаратов нового поколения в растениеводстве. // Аграрная Россия, 1999, т. 1-2, с. 9-12.

103. Ковалев В.М. Теория урожая. / М.гизд. МСХА, 2003, 332 с.

104. Козлова Л.Н., Гашников Э.Г., Богомаз В.И. Испытания биопрепаратов Эмистим и Экост 1/3 на хлопчатнике в условиях Таджикистана. // Аграрная Россия, 1999, т. 1-2, с. 17-22.

105. Кордюм Е.Л., Недуха Е.М., Сидоренко П.Г. Структурно-функциональная характеристика растительной клетки в процессах диффе-ренцировки и дедифференцировки // Культура клеток растений и биотехнология. Киев: Наукова думка, 1980. - 112 с.

106. Коротаева М.С., Попов Ю.Г., Трушечкин В.Г., Ярославцев Е.И. О регенерации стеблевых верхушек малины. // Биологические науки, 1975, N 10, с. 133-136.

107. Корховой В.И., Радчук В.В., Бартиш И.В., Долгов С.В. Генетическая трансформация клона яблони сорта Флорина с помощью Agrobacte-rium tumefaciens.// Матер, междунар. конф. «Садоводство и виноградарство 21 века». Краснодар, 1999, ч.З, С. 138 141.

108. Кособрюхов А.А. Физиологические аспекты оптимизации выращивания огурца в защищенном грунте / Автореф. дисс. . канд. к.б.н., ЛГУ им. Жданова, Л., 1986, 16 с.

109. Кудрявцев Н.А., Янина М.М., Озерецковская O.JL, Богомаз В.И. Эффективность и безопасность применения препарата Экост в льноводстве. // Аграрная Россия, 1999, т. 1-2, с. 22 27.

110. Кукина И.М., Микулович Т.П., Кулаева О.Н. Изменение синтеза хлоропластных белков и структуры хлоропластов семядолей тыквы под влиянием АБК. // Физиол. раст., 1995, Т. 42, №. 5, С. 686 695.

111. Кулаева О.Н. Цитокинины и их физиологическое действие. // Успехи совр. биол., 1967, Т. 63, №1, С. 28-53.

112. Кулаева О.Н. Цитокинины, их структура и функции / М.: Наука, 1973,263 с.

113. Кулаева О.Н. Гормональная регуляция физиологических процессов у растений на уровне синтеза РНК и белка. // XLI Тимиряз. Чтение., М, Наука, 1982, 83 с.

114. Кульневич В.Г., Калашникова В.Г., Ненько Н.И. и др. Новый стимулятор роста сладкого перца -препарат «Краснодар-1» / Рекомендации АПК Краснодарск. края, 1986, 5с.

115. Кульневич В.Г., Бадовская JI.A., Ненько Н.И. Новые перспективные регуляторы роста растений, полученные на основе фурфурола. // Регуляторы роста и развития растений: Сб. тез. докл. на всесоюзн. рабочем совещании. / 1991, с. 55.

116. Кучук Н.В., Каневский И.Ф. Методы генетической трансформации растений. // Биотехнология, 1987, т.З, с. 365 369.

117. Кучук Н.В. Выделение и культивирование протопластов 5 видов бобовых // Физиол. раст., 1989, Т.36, С. 821 824.

118. Кучук Н.В. Генетическая инженерия высших растений. / Киев.: Наукова думка, 1997, 152 с.

119. Латашко В.М., Бадовская JI.A., Ненько Н.И. Эффективность применения препарата Кавказ на яровой пшенице // Регуляторы роста и развития растений: Сб. тез. докл. на IV междунар. конф., 1997, с.194.

120. Лебедев В.Г, Долгов С.В. Влияние селективного агента и растительного интрона на эффективность трансформации и экспрессию гетеро-логичных генов в растениях груши (Pyrus commynis). // Генетика, 2000, Т 6, №6, С. 792-798.

121. Лутова Л.А., Бондаренко Л.В., Бузовкина И.С., Левашина Е.А., Ти-ходеев О.Н., Ходжайова Л.Т., Шарова Н.В., Шишкова С.О. Влияние генотипа на регенерационные процессы // Генетика. 1994. - Т. 30, №8. - С. 1065-1074.

122. Лутова Л.А., Проворов Н.А., Шишкова С.О. Генетика развития цветка. / Генетика развития растений // СПб.: Наука, 2000, с. 201-255.

123. Лутова Л.А. Взаимодействие растений с агробактериями: концепция генетической колонизации. // Генетика развития растений // СПб.: Наука, 2000, с. 388-438.

124. Лычкин В.В. Совхоз-комбинат «Московский»: опыт индустриального выращивания овощей в теплицах // М.:Моск. рабочий, 1986, 112 с.

125. Майсурян Н.А., Атабекова А.И. Люпин. / М.: Колос, 1974, 463 с.

126. Макеев А.В., Кузнецов В.В., Оельмюллер Р., Кренделева Т.Е., Мок-роносов А.Т., Кулаева О.Н. Лимитирующая стадия формирования фотосинтетического аппарата в процессе зеленения изолированных семядолей люпина. // Физиол. раст., 1994, Т. 41, №.5, С. 668 674.

127. Марышев Н.В„ Сучкова Л.В., Калимулина Э.Ш. Влияние регуляторов роста на урожайность огурца и томата в весеннем пленочных теплицах // Проблемы аграрного сектора Южного Урала и пути их решения, Челябинск, 1999, вып. 1, с. 47 -51.

128. Матвеева Т.В., Лутова Л.А., Нестор Ю. Опухолеобразование у растений. // Генетика, 2001, т 37, №9, с. 1188 1197.

129. Машкина О.С., Буторина А.К. Генетическая инженерия лесных древесных растений. // Генетика, 2003, т. 39, №3, с. 309 -317.

130. Мельников Н.Н., Баскаков Ю.А. Химия гербицидов и регуляторов роста растений. /М.:Госхимиздат, 1962, 724 с.

131. Меркулов С.М., Бартиш И.В., Долгов С.В., Пастернак Т.П., Макхь-юген А. Генетическая трансформация груши (Pyrus communis L.) с помощью Agrobacterium tumefaciens. // Генетика, 1998, т.34, № 3, с. 373 378.

132. Микулович Т.П., Кукина И.М., Кулаева О.Н. Влияние теплового шока и цитокинина на позеленение изолированных семядолей тыквы. // Докл. АН/РАН, 1999, Т. 365, №2, С. 270 272.

133. Мироненко А.В. Биохимия люпина. / Минск: Наука и техника, 1978,310с.

134. Михальчик Л.С. Ускоренное выращивание посадочного материала яблони для интенсивных насаждений Нечерноземной зоны РСФСР // Ав-тореф. дисс. канд. с.-х. наук., М., 1990, 23 с.

135. Морозова Э.В., Селиванкина С.Ю., Романко Е.Г., Новикова Г.В., Моисеева Т.В. Изучение влияния картолина на устойчивость пшеницы к засухе и активацию в листьях РНК-полимеразы. // Бюлл. ВИУА, 1990, Т.94, С. 37-41.

136. Муратова С.А., Фирсов Ф.П., Долгов С.В. Разработка методов регенерации и генетической трансформации сливы домашней (Использование в селекции). // Молодые ученые — садоводству России., М., 1995, С. 30-32.

137. Муратова С.А., Долгов С.В., Фирсов Ф.П. Генетическая трансформация сливы домашней с использованием Agrobacterium tumefaciens. // Бюлл. Научн. инф. ВНИИ генетики и селекции плодовых ратсений, 1998, В. 53, С. 3-8.

138. Муромцев Г.С. Регуляторы роста растений./ М.:Колос, 1979, 247 с.

139. Муромцев Г.С., Чкаников Д.И., Кулаева О.Н., Гамбург К.З. Основыхимической регуляции роста и продуктивности растений. / М.: ВО «Агро-промиздат", 1987, 383 с.

140. Муромцев Г.С., Бутенко Р.Г., Тихоненко Т.И., Прокофьев М.И. Основы сельскохозяйств. биотехнологии. //М.: Агропромиздат, 1990, 430 с.

141. Муромцев Г.С., Данилина Е.Э. Эндогенные химические сигналы растений и животных: сравнительный анализ // Успехи совр. биологии, 1996, т. 116, в. 5, с.533-551.

142. Мусийчук К.А. Бифункциональные репортерные системы для про-и эукариот на основе делеционного варианта термостабильной лихеназы Clostridium thermocellum. / Автореф. на соиск. . канд б.н., 2001, 20 с.

143. Муштакова В.М., Фомина В.А., Роговин В.В., Богомаз В.И., Янина М.М. Применение метода хемилюминесценции для изучения иммуностимулирующего действия Экоста и Эмистима. // Аграрная Россия, 1999, т.1-2,. с. 13-15.

144. Наумов Н.П. От молекулы до человека./ М.: Просвещение, 1973, с. 362-366.

145. Ненько Н.И., Косулина Т.П., Арустамова И.С., Поспелова Ю.С., Алехина Е.М. Действие 2-(фурил-2)-1,3-диоксалана на семена черешни. // Химия и технология фурановых соединений,-1985, с. 91-87.

146. Ненько Н.И., Поспелова Ю.С. Некоторые аспекты воздействия препарата фуролан на биологические процессы плодовых косточковых культур // Регуляторы роста и развития ратсений / Сб. тез. докл. на II междунар. конференции, 1993, с. 211.

147. Ненько Н.И., Поспелова Ю.С. Влияние препарата фуролан на засухоустойчивость яблони и груши // Регуляторы роста и развития растений / Сб. тез. Докл. на III междунар. конф, 1995, с. 169.

148. Ненько Н.И., Поспелова Ю.С., Косулина Т.П. Эффективность применения экологически чистого регулятора роста фуролан на озимой пшенице // Регуляторы роста и развития растений / Сб. тез. Докл. на III междунар. конф., М., 1995, с. 86-87.

149. Ненько Н.И., Поспелова Ю.С., Котляров В.В. Влияние препарата фуролан на развитие внутренней и внешней инфекции Fusarium graminearum семян озимой пшеницы // Регуляторы роста и развития растений: Сб. тез. докл. на IV междунар. конф. / М., 1997, б, с. 217.

150. Ненько Н.И., Поспелова Ю.С., Котляров В.В., Бурдун A.M. Изучение влияния препарата фуролан на устойчивость пшеницы к поражению фузариозом // Теоретические основы производства экологически чистых продуктов растениеводства / Краснодар, 1997, в, с. 13-21.

151. Ненько Н.И. Действие на растения регуляторов роста, синтезированных на основе фурфурола. / Автореферат на соиск. уч. степ. докт. с/х наук, 1999, Краснодар, 48 с.

152. Никелл Л.Дж. Регуляторы роста растений. Применение в сельском хозяйстве. / М.: Колос, 1984, 192 с.

153. Николаева М.Г. Покой семян и факторы, его контролирующие. -Физиол. и биохимия покоя и прораст. семян. / М.: Колос, 1982, с. 72 98.

154. Норишина М.В., Клочкова И.Н., Суслова Т.А., Хатаева Л.Ю. Новые регуляторы роста на основе фурфурола.// Тезисы Междунар. конф. «Развитие научного наследия акад. Н.И. Вавилова». Саратов, 1997, ч.2, с. 260-262.

155. Нурметов Р.Д., Микелян Г.А., Прянишников Л.Н. Защищенный грунт интенсивная отрасль. // Картофель и овощи, 2001, №5, с. 24-25.

156. Олешко Е.В. Особенности клонального микроразмножения подвоев и сортов вишни. / М., 1985, с. 25-28.

157. Острейко С.А., Дроздовский И.М. О полифункциональности регуляторов роста и разв. растений. // С/х. биол., 1981, т. 7, N. 5, с. 702-711.

158. Оурецки Д.К. Малина и ежевика. // Advances in fruit breeding / Ed. JJanick, J.N.Moore, 1975, p.142-180.

159. Павлова M.K., Банникова В.П. Преодоление перекрестной несовместимости при отдаленной гибридизации методом культуры незрелых гибридных семян. // С/х биол., 1974, т. 9, № 1, с. 23 27.

160. Пирузян Э.С., Андрианов В.М. Плазмиды агробактерий и генетиче екая инженерия растений. / М.: Наука, 1985, 289 с.

161. Полевой В.В. Фитогормоны. Л., 1982, 288 с.

162. Пондева Р., Загорска Н. Использование методов in vitro для преодоления стерильности межвидового гибрида Capsicum annuum х С. praetermissum // В кн.: Культура клеток растений и биотехнология. / М.: Наука, 1986, с. 171-176.

163. Пономаренко С.П., Боровикова Г.С., Анишин А.А., Деева В.П. Композиции биостимуляторов. // Сахарная свекла, 1996, №5, с. 20-23.

164. Пономаренко С.П. Гашников Э.Г. Определение типа физиологической активности Эмистима с использованием специфических биотестов.// Аграрная Россия, 1999, т.1-2, с.15-16.

165. Попов Г.Д., Трушечкин В.Г. Получение растений земляники методом культуры изолированных верхушек побега. // Плодоводство и ягодо-водство нечерноземной полосы / Сб. научных трудов НИЗИСНП., М., 1972, т.4. — с. 184-193.

166. Попов Ю.Г. Культура in vitro меристематических верхушек стебля как метод оздоровления и размножения растений. // Биологические науки, 1976, №6, с. 13-24.

167. Попов Ю.Г., Высоцкий В.А. Культура стеблевых верхушек in vitro как метод ускоренного размножения плодовых и ягодных растений. // Вестник с.-х. науки, 1978, №4, с. 124 — 127.

168. Попов Ю.Г. Оздоровление и размножение плод, и ягодных раст. методом культуры меристем, верхушек. //Метод, указания, М., 1979.

169. Прусакова Л.Д., Чижова С.И., Третьяков Н.Н., Агеева Л.Ф., Голан-цева Е.Н., Яковлев А.Ф. Антистрессовые функции Экоста и эпибрассино-лида на яровой пшенице в условиях центральной нечерноземной зоны. // Аграрная Россия, 1999, т.1-2., с. 39 41.

170. Пугаев С.В. Снижение содержания нитратов в плодах огурца при обработке растений кинетином. // Агрохимия, 1990, №10, с. 109-112.

171. Пугаев С.В. Фототехнические методы снижения нитратов в продукции растениеводства. // Изв. Тимирязевской с/х академии, 1992, вып. 6, с.174- 179.

172. Пугаев С.В., Пугаев А.В. Динамика содержания нитратов в растущих огурцах и его регуляция. / Приемы повышения продуктивности растениеводства в нечерноземной зоне России.- изд. Мордовс. унив-та, 1992, с. 116-119.

173. Рожнова Н.А., Геращенков Г.А., Янина М.М., Гилязетдинов Ш.Я. Эмистим индуктор устойчивости к вирусным болезням пасленовых. // Аграрная Россия, 1999, т. 1-2, с. 35-38.

174. Розанова М.А. Ягодоведение и ягодоводство / М., 1935, с. 135-148.

175. Рукавцова Е.Б., Золова О.Э., Бурьянова Н.Я., Борисова В.Н., Быков В.А. Бурьянов Я.И. Анализ трансгенных растений табака, содержащих ген пов. антигена вируса гепатита В. // Генетика, 2003, т.39, № 1, с. 51 -56.

176. Русанов В.А., Паршин В.Г. Применение биологически активных веществ для получения дополнительного урожая огурца и повышения его устойчивости к фузариозу. //Всероссийский съезд по защите растений, С.Петербург, 1995, с. 455.

177. Селиванкина С.Ю., Муромцева Д.Г., Новикова Г.В., Кулаева О.Н. Регуляция фузикокцином протеинкиназ, ассоциированных с хроматином и РНК-полимеразой 1. // Докл. ВАСХНИЛ, 1990, Т.З, С. 2-4.

178. Симола Л.К. Каллусные культуры и размножение березы in vitro. // Культура клеток растений и биотехнология / М.: Наука, 1986, с.102 — 106.

179. Соболев A.M. Запасание белка в семенах растений.// М.: Наука, 1985, 111с.

180. Старых Г.А. Эффективность минеральных удобрений при выращивании огурца в зимних теплицах // ВСХИЗО агропромышленному комплексу, М., 1994, с. 10-12.

181. Сулимова Г.Е. Полиморфизм длин рестрикционных фрагментов ДНК у сельскохозяйственных животных: методы изучения и перспективы использования // Успехи совр. генет., 1993, с. 3 — 35.

182. Суриков И.М. Несовместимость и эмбриональная стерильность растений. / М.: ВО Агропромиздат, 1991, 218 с.

183. Стрыгина О.В. Размножение новых сортов малины методом культуры тканей. // Достижения науки — в практику / Тез. докл. конф. (27 29 апреля 1990), М., 1990, с. 123 - 124.

184. Тараканов Г.И., Мухин В.В. Овощеводство. / М.:Колос, 1993, 511 с.

185. Титова И.В. Преодоление постгамной несовместимости в скрещиваниях лука репчатого с дикими видами методом культуры зародышей. // Культура клеток растений и биотехнология / М., Наука, 1986, с. 195 198.

186. Томилин А.А., Упадышев М.Т. М. К вопросу об эффективности оздоровления растений малины красной от вируса мозаики резухи с использованием метода культуры меристем. // Ягодоводство в Нечерноземье, М, 1993, с.25 — 29.

187. Третьяков Н.Н. Физиология и биохимия сельскохозяйственных растений. /М.:Колос, 2000, 640 с.

188. Трушечкин В.Г., Высоцкий В.А., Леонтьев-Орлов О.А. Размножение клоновых подвоев яблони методом культуры тканей. // Сельскохоз. биол., 1992, N4, с. 455-457.

189. Туровская Н.И., Стрыгина О.В. Микроклональное размножение малины. // Садоводство и виноградарство, 1990, N 8, с. 26-29.

190. Тюленев В.М., Нафталиев П.М., Осипова П.В., Расторгуев С.Л. Способ укоренения побегов яблони in vitro. // Бюл. науч. информ. ЦГЛ им. И.В. Мичурина., 1990, Вып. 48, с. 34-36.

191. Тюленев В.М., Расторгуев С.Л., Туровский И.И. Получение растений регенерантов из изолированных тканей земляники. // Бюл. науч. информ. ЦГЛ им. И.В. Мичурина, 1991, Вып. 50, с. 21-27.

192. Упадышев М.Т., Высоцкий В.А. Размножение ежевики и малины черной методом культуры тканей. // Садоводство и виноградарство, 1991, №6, с. 24 27.

193. Упадышев М.Т. Клональное микроразмножение и особенности растений ежевики и малины черной методом in vitro. // Дисс. .канд.с.-х.наук, 1992, 211 е.

194. Упадышев М.Т., Высоцкий В.А. Совершенствование процесса клонального микроразмножения ежевики и малины черной. // Совершенствование технологии выращивания ягодных культур в Нечерноземье, М., 1992,.с. 42-53.

195. Упадышев М.Т Клональное микроразмножение некоторых нетрадиционных культур рода Rubus. // Ягодоводство в Нечерноземье, М., 1993, с. 10-18.

196. Упадышев М.Т., Высоцкий В.А. Регенерационная способность эксплантов рода Rubus в зависимости от длительности культивирования in vitro.//Сельскохозяйственная биология, 1995, №1, с. 85-88.

197. Филипеня B.JL, Брель Н.Г., Попович Е.А., Долгов С.В. Влияние ти-диазурона на регенерацию адвентивных побегов из листовых эксплантов клюквы крупноплодной. // Регуляция роста, развития и продуктивности растений. / Минск, 1999, С. 117 118.

198. Фурманова М., Совинска Д., Олендэка Г. Регенерация растений путем эмбриогенеза из каллуса тмина обыкновенного (Carum carvi (L.). // Культура клеток растений и биотехнология / М.: Наука, 1986, с. 127 128.

199. Хапова С.А. Условия культивирования in vitro и последующая продуктивность растений земляники. // Автореф. дисс. канд. с.-х. наук,-М., 1997, 23 с.

200. Хавкин Э.Е. Молекулярные маркеры в растениеводстве // Сельско-хоз. биол., 1997, №5, с. 3-21.

201. Хайдекер У. Стресс и прорастание семян: агрономическая точка зрения. // Физиология и биохимия покоя и прорастания семян. / М.: Колос, 1982, с. 273-319.

202. Хасси Г. Размножение сельскохозяйственных культур in vitro. // Биотехнология сельскохозяйственных растений, 1987, с. 105 — 133.

203. Холл М.А., Новикова Г.В., Мошков И.Е., Мур Л.А.Дж., Смит А.Р. Протеинкиназы растений в трансдукции абиотических и биотических сигналов. // Физиол. раст., 2002, Т. 49, №1, С. 121 135.

204. Хомчак A.M. Влияние предпосевной обработки семян регуляторами роста на продуктивность растений огурца в теплице. // Пути интенсификации овощеводства, 1987, с. 63-65.

205. Хомчак A.M. Влияние предпосевной обработки семян регуляторами роста ивин и его солями на рост, развитие и продуктивность огурцов в зимних теплицах. // Овощеводство и бахчеводство, 1989, № 34, с.56-58.

206. Хотылева Л.В., Савченко А.П. Генетика люпина./ Минск: Наука и тезника, 1988, с. 183.

207. Читра Поннаммал Манн. Влияние новых регуляторов роста и уровня азотного питания на урожай и качество плодов огурца в закрытом грунте. / Автореф. дисс. . канд. с/х наук, РУДН, 1995, 18 с.

208. Шамина З.Б. Андрогенез и получение гаплоидов в культуре пыльников и микроспор. / Культ, клеток раст., М.: Наука, 1981, с. 124 — 136.

209. Шевелуха B.C., Ковалев В.М., Груздев Л.Г., Блиновский И.К. Регуляторы роста растений в сельском хозяйстве. // Вестник с.-х. науки, 1985, №9, с. 57-65.

210. Шевелуха B.C., Ковалев В.М., Лезжова Т.В. Эффективность действия регуляторов роста картолина на продуктивность ярового ячменя в условиях почвенной засухи. // С.-х. биология, 1987, №9, с. 3 — 6.

211. Шевелуха B.C., Шанбанович Г.Н., Тальчук J1.C. Защитная функция картолина при выращивании ячменя в неблагоприятных условиях. // Регуляторы роста растений, М.: Агропромиздат, 1990, с. 45- 52.

212. Шевелуха B.C. Рост растений и его регуляция в онтогенезе. / М.: Колос, 1992.

213. Шевелуха B.C., Ковалев В.М., Курапов П.Б. Регуляторы роста и проблемы селекции растений. // Физиол. основы селекции. Теорет. основы селекции, т.2, ч.1., С-Пб.: ВИР, 1995, с. 259-292.

214. Шевелуха B.C. Современные проблемы гормональной регуляции живых систем и организмов. // Регуляторы роста и развития растений / Сб. тез. докл. III конф., М., 1997, с. 3-4.

215. Шевелуха B.C., Калашникова Е.А., Дегтярев С.В., Кочиева Е.З., Прокофьев М.И., Новиков Н.Н., Ковалев В.М., Калашников Д.В. Сельскохозяйственная биотехнология. // М.: Высшая школа, 1998, 416 с.

216. Шевелуха B.C. Проблемы, приоритеты и масштабы сельскохозяйственной биотехнологии в XXI веке. / Сельскохозяйственная биотехнология / Под ред. Шевелухи B.C., М.: Евразия +, 2000, с. 3 — 16.

217. Шевелуха B.C. Трансгеноз и биобезопасность. // Сельскохозяйственная биотехнология / Под ред. Шевелухи B.C., М.:Воскресенье, 2000, с

218. Щелкунова С.Е., Попов Ю.Г. Получение свободных от вируса растений малины путем культуры изолированных апексов. // Физиол. раст., 1970, т.17, N 3, с.618-622.

219. Шишов А.Д. Регуляция роста, развития и продуктивности растений основных овощных культур открытого и защищенного грунта (Применение регуляторов роста и развития растений). / Автореф. дисс. докт. с.-х. н., С.Петербург. ГАУ, Пушкин, 1994, 44 с.

220. Шкиперова О.М. Влияние некоторых физических и химических факторов на рост и продуктивность огурца и томата в регулируемых условиях. / Автореф. дисс.канд. с.-х. н., С.-Петерб. ГАУ, Пушкин, 1994, 18 с.

221. Abbot A.J. Propagating temperate woody species in tissue cultures. // Sci.Hort., 1977, N.28, P. 4.

222. Anderson W.C. Tissue culture propagation of red and black raspberry, Rubus idaeus and Rubus occidentalis.// Acta hort., 1980, V.l 12, P. 13-20.

223. Apostol J., Heinstein P.F., Low P.S. Rapid stimulation of oxidative burst during elicitation of cultured plant cells // J.Plant Physiol., 1990, V. 39, P. 109-116.

224. Atkinson R.G., Schroder R., Hallett I.C., Cohen D., Elspeth A.M. Overex-pression of polygalacturonase in transgenic apple trees leads to a range of a novel phenotypes involving changes in cell adhesion. // Plant Physiol., 2002, V. 129, P. 122-133.

225. Baker В., Bhatia S. Factors effecting adventitious shoot regeneration from leaf explants of quince (Cydonia oblonga) // Plant cell, tissue and organ culture, 1993.- V. 35. P. 273 - 277.

226. Bakker J.C. Effects of humidity of on stomatal density and its relation to leaf conductance// J. Hort. Sci SI., 1991, P.205-212.

227. Barcelo M., El-Mansouri I., Mercado J.A., Quesada M.A., Alfaro F.P. Regeneration and transformation via Agrobacterium tumefaciens of the strawberry cultivar Chandler // Plant cell, tissue and organ culture. 1998, V. 54. - P. 29-36.

228. Belfanti E., Tartarini S., Patocci A., Zhu J. The HcrV£2 gene from a wild apple confers scab resistance to a transgenic cultivated variety. // PNAS USA, 2004, V.101, N.3, P.886 890.

229. Boxus P.H. The production of strawberry plants by in vitro micropropa-gation // J. Hort. Sci., 1974, V. 49., P. 209 210.

230. Boxus P., Quoirin M., Laine J.M. Large scale propagation of strawberry plant from tissue culture. // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. Springer-Verlag.- Berlin, Heidelberg, New York, 1977, P. 130-143.

231. Broome O.C., Zimmerman R.N. In vitro propagation of blackberry. // HortScience., 1978, V.13, N.2, P. 151-153.

232. Brown P., Tanksley S.D. Characterization and genetic mapping in simple sequence repeats in the tomato genome. // Mol. Gen. Genet., 1996, V.250, p. 3949.

233. Carbanne F., Martin-Tanquy J. & Martin C. Phenolamines associees a l'induction florale et a l'etat reproducteur.// Physiotogie Vegetale, 1977, V. 15, P. 429-43.

234. Cekis C., Battey N.H., Wilkinson M.J. The potential of ISSR-PCR primer-pair combinations for genetic linkage analysis using the seasonal flowering lokus on fragaria as a model. // Theor Appl Genet, 2001, V. 103, P. 540 — 546.

235. Chandler S.F., Radolsky E., Pua E. Some morphogenetic effects of sodium sulfate in tobacco callus // Plant cell tissue organ cult., 1987, V.l 1, P. 141 150.

236. Chauvin J.E., Hamann H., Cohat J., Le Nard M. Selective agents and marker genes for use in genetic transformation of Gladiolus grandiflorus and Tulip gesneriana // Acta hort., 1997, V. 430, P. 291 297.

237. Chauvin J.E., Marhadour S., Cohat J., Le Nard M. Effect of gelling agents on in vitro regeneration and kanamycin efficiency as a selective agents in plant transformation procedures // Plant cell tissue organ cult., 1999, V.58, P. 213-217.

238. Chevreau E., Skirvin R.M., Abu-Qaoud H.A., Korban S.S., Sullivan J.G. Adventitious shoot regeneration from leaf tissue of three pear (Pyrus sp) culti-vars in vitro // Plant cell reports, 1989, V.7, P.688-691.

239. Dandekar A.M., McGranaham G., Uratsu S., Leslie C., James D.J. et al. Engineering for apple and walnut resistance to codling moth // Pest and diseases, 1992, P. 741-746.

240. Davies F.T., Joiner J.N. Growth regulator effects on adventitious root formation in leaf cuttings of juvenile and mature Ficus pumila // J. Amer. Soc. Hort. Sci., 1980, V. 105, P. 91 -95.

241. Echt C.S., May-Marquardt P., Hsein M., Zahorchak R. Characterization pf microsatellite markers in eastern white pine. // Genome, 1996, V. 39, P. 1102 -1108.

242. Echt C.S., May-Marquardt P. Survey of microsatellite DNA in pine. // Genome, 1997, V. 40, P. 9 17.

243. Eeuwens C.L., Schwabe W.W. Seed and pod wall development in pisum sativum L. in relation to extracted and applied hormones //J. Exp. Bot. 1975.V.26. N.90. P. 1-14

244. Evans D.A. Somaclonal variation genetic basis and breeding applications // Trends genet., 1989, V. 5, P. 46, 50.

245. Fasolo Z., Zimmerman R.H., Fordham I. Adventitious shoot formation on excised leaves of an in vitro grown apple cultivar // Plant cell tissue organ cult., 1989, V. 16, P. 75-87.

246. Fiola J.A., Swartz H.J. Somatic embryogenesis, organogenesis and proliferation in vitro from Rubus embryos // Acta hortic., 1986, V. 183, P. 91 -96.

247. Fiola J.A., Swartz H.J., Hassan M.A., Bors R.H., Mc Nicol R.J. Effect of thidiazuron, light fluence rates and kanamycin on shoot organogenesis from excised Rubus cotyledons and leaves // Plant cell tissue organ cult., 1990, V. 20, P. 223-228.

248. Gheysen G., Dhase P., VanMontagu M. & Schell J. DNA flux across genetic barriers: the crown gall phenomenon // Plant gene res.:genetic flux in plants. Ed. B. Hohn, E.S. Dennis. New York : Springer - Verlag, 1985, P. 1147.

249. Gortner G., Nenno M., Weising K., Zink D., Nagl W., Kahl G. Chromosomal localization and distribution of simple sequence repeats and the Arabi-dopsis tipe telomere sequence in the genome of Cicer arietinum L. // Chromo Res, 1998, V.6, P. 97-104.

250. Graham J., McNicol R.J., Greig K., Van de Ven. Identification of red cultivars and an assessment of their relatedness using fingerprints produced by random primers. // J. Hort. Sci, 1994, V. 69, P. 123 130.

251. Graham J., McNicol R.J., Greig K. Towards genetic based insect resistance in strawberry using the cowpea tripsin inhibitor gene // Ann. Appl. Biol., 1995, V. 127, P. 163- 173.

252. Graham J.A., Iasi L., Millam S. Genotype-specific regeneration from a number of Rubus cultuvars // Planr cell org. Cult., 1997, V.48, P. 167-173.

253. Graham J., Gordon S.C., McNicol R.J. The effect of the CpTi gene in strawberry against attack by vine weevil (Otiorhynchus sulcatus F. Coleoptera: Curculionidae) // Ann. Appl. Biol., 1997, V. 131, P. 133 139.

254. Gresshoff P.M., Doy C.H. Development and differentiation of haploid Lycopersicon esculentum (tomato) // Planta, 1972, V. 107, P. 161 -170.

255. Hammerschlag F.A., Bauchan G., Scorza R. Regeneration of peach plants from callus derived from immature embryos // Theor. Appl. Genet., 1985, V. 70, P. 248-251.

256. Hammerschlag F., Liu Q., Zimmerman R. Generation apple transformation free of Agrobacterium tumefaciens by vacuum infiltration with an acidified medium and with antibiotics. // Acte hort. Proc., 2000, V. 530, P. 103 108.

257. Hicks G.S. Patterns of organ development in plant tissue culture and the problem of organ determination // Bot. Rev., 1980, 46, P. 1 -23.

258. Hilder V.A., Gatehouse A.M., Sheerman S.E., Barker R.F., Boulter D. A novel mechanism of insect resistance engineered into tabacco // Nature, 1987, V. 330, P. 160-163.

259. Hiratsuka S., Katagari M. Shoot and callus formation in explants from immature seeds of Japanese pear // Sci Hortic,1988, V. 34, P. 193 -199.

260. Hodges Т.К., Kamo K.K., Imbrie C.W., Becwar M.R. Genotype specificity of somatic embryogenesis and regeneration im maize // BioTechnology, 1986, V. 4, P. 219-223.

261. Hood D.W., Deadman M.E., Jennings M.P., Bisercic M., Fleischman R.D., Venter J.C., Moxon E.R. DNA repeats identify novel virulence genes in Haemophyllus influenzae. // Proc Natl Acad Sci USA, 1996, V. 93, P. 1112111125.

262. Horsch R.B., Fry J., Hoffman N. A simple and general method for trans-fering genes into plants // Science, 1985, V. 227, P. 1229-1231.

263. Huetteman C.A., Preece J.E. Thidiazuron: a potent cytokinin for woody plant tissue culture // Plant cell, tissue and organ culture, 1993, V.33, P. 9-17.

264. Hussey G. & Stacey N.J. In vitro propagation of potato (Solanum tuberosum L.). //Annals of Botany, 1981, V.48, P. 787-96.

265. James D. J., Newton B. Auxin: citokinin interactions in the in vitro micropropagation of strawberry plant. // Acta Hort., 1977, V.78, P. 321-331.

266. James D.J. The role of auxins and phloroglucinol in adventitious root formation in Rubus and Fragaria grown in vitro // J. Hort. Sci., 1979, V. 54, P. 273 -277.

267. James D.J. , Knight V.H., Thurbon I.J. Micropropagation of red raspberry and the influence of phloroglucinol //Sci. Hort., 1980, V.12, P.313-319.

268. James D.J., Newton B. Auxin: cytokinin interactions in the in vitro micropropagation of strawberry plants // Acta hort., 1988, V. 78, P. 321-331.

269. James D.J., Passey A.J., Barbara D.J., Bevan M.W. Genetic transformation of apple (Malus pumilla Mill.) using a disarmed Ti-binaiy vector // Plant cell rep., 1989, V.7, P. 658 661.

270. James D.J., Passey A.J., Barbara D.J., Bevan M.W. Genetic transformation of apple (Malus pumila Mill.) using a disarmed Ti-binaiy vector // Plant Cell Reports, 1989, V. 7, P. 658 -661.

271. James D.J., Passey A.J., Barbara D.J. Agrobacterium-mediated transformation of the cultivated strawberry (Fragaria x anannassa Duch.) using disarmed binary vectors // Plant science, 1990, V. 69, P. 79 94.

272. Johnson R., Narvaez J., Ryan C.A. Expression of proteinase inhibitors I and II in transgenic tobacco plants: effects on natural defence against Mandula sexta larvae // PNAS USA., 1989, V. 86, P. 9871 9875.

273. Jones O.P. Effect of phloridzin and phloroglucinol on apple shoots // Nature, 1976, V. 262, P. 392 393.

274. Jones O.P., Waller В .J., Beech M.G. The production of strawberry plants from callus cultures // Plant cell tissue cult., 1988, V. 12, P. 235 241.

275. Kerns H.R., Meyer M.M.Jr. Tissue culture propagation of Acer x Freemanii using thidiazuron to stimulate shoot tip proliferation // Hort Science, 1986, V. 21, P. 1209- 1210.

276. Korban S.S., Skirvin R.M. In vitro shoot regeneration fron an intact and sectioned embryo axis of apple seed // Plant Scie, 1985, V. 39, P. 61 66.

277. Mante S., Scorza R., Cordts J.M. Plant regeneration from cotyledons of Prunus persika, Prunus domestica, Prunus cerasus. // Plant cell tissue org.cult.,1989, V.19, P. 1-11.

278. Matsuta N., Hirabayashi T. Embryogenic cell lines from somatic embri-ous of grape (Vitis vinifera L.). // Plant cell rep., 1989, V.7, P.684 687.

279. McGranaham G.H., Leslie C.A., Uratsu S.L., Dandekar A.M. Improved efficiency of the walnut somatic gene transfer system // Plant Cell Reports,1990, V. 8, P. 512-516.

280. McNicol R.J., Graham J. In vitro regeneration of Rubus from leaf and stem segments // Plant cell tissue organ cult., 1990, V. 21, P. 45 50.

281. Millan-Mendoza В., Graham J. Organogenesis and micropropagation in red raspberry using forchlorfenuron (CPPU) // J. Hort. Sci & Biotech., 1999, V. 74, N. 2, P. 219-223.

282. Morgante M., Oliveri A.M. PCR-amplified microsatellites as markers in rice.//Plant J., 1993; V. 3, P. 175- 182.

283. Murashige Т., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassay with tobacco tissue culture // Physiol. Plant., 1962, V. 15, P. 473 497.

284. Murashige T. Plant propagation through tissue cultures // Ann. Rev. Plant Physiol., 1974, V. 25, P. 135 166.

285. Murashige Т. Plant cell and organ cultures as horticultural practices. // Acta Hort., 1977, V. 78, P. 17-30.

286. Murata M., Haruta M., Murai N., Itoh Y. Transgenic apple (Malus x do-mestica) shoot showing low browning potential. // J. agric. Food chem., 2000, V. 48, N.l 1, P. 5243-5248.

287. Nap J.P., Bijvoet J., Stiekema W.J. Biosafety of kanamycin resistant transgenic plants // Transgenic res., 1992, V. 1, P. 239 - 249.

288. Nehra N.S., Stushnoff C., Kartha K.K. Direct shoot regeneration from strawberry leaf disks// J. Amer. Soc. Hort. Sci.,1989, V. 114, P. 1014 1018.

289. Nehra N.S., Chibbar R.N., Kartha K.K., Datla R.S.S., Crosby W.L., Stushnoff C. Agrobacterium-mediated transformation of strawberry calli and recovery of transgenic plants // Plant cell rep., 1990, V. 9, P. 10-13.

290. Nehra N.S., Chibbar R.N., Kartha K.K., Datla R.S.S., Crosby W.L., Stushnoff C. Genetic transformation of strawberry by Agrobacterium tumefa-ciens using a leaf disc regeneration system 1990, V. 9.- P. 293 — 298

291. Nienwkirk K., van Fordham J., Zimmerman R.H. Tidiazuron stimulation of apple shoot proliferation in vitro. // Hort. Sci., 1987, V. 21, P. 516-518.

292. Oosawa K.K., Takayanagi K. High yielding variants in strawberry derived from anther culture // Abstr. 5 Int. congr. Plant tissue cell cult., Tokio, 1982, P. 121.

293. Owens у de Novoa C. Empirical evalution of in vitro media components for cell growth and shoot regeneration from rubus explants II New Zealand Natural Sci. 1992, V. 19. - P. 79 - 86.

294. Parsons B.J., Newbury H.J., Jackson M.T., Ford-Lloyd B.V. Contrasting genetic diversity relationships are revealed in rice using different marker types. // Mol Breed, 1997, V. 3, P. 115 125.

295. Pedersen C., Rasmussen S.K., Linde-Laursen I. Genome and chromosome identification in cultivated barley and related species of the Triticeae by in situ hybridization with the GAA satellite sequence. // Genome, 1996, V. 39, P. 93 - 104.

296. Phillips I.D.J. Apical dominance. Annual Review of Plant Physiology. / 1975, V.26, P. 341-67.

297. Pyott J.R. Converse R.H. In vitro propagation of heat-treated red rasp-beny clones //HortSci.,1981, V. 16, P. 308-309.

298. Powell W., Machray G.C., Provan J. Polymorphism revealed by simple sequence repeats. // Trends plant Sci, 1996, V. 1, P. 215 222.

299. Preece J.E., Huetteman C.A., Puello C.H., Neuman M.C. Influence of thidiazuron on in vitro culture of woody plants // HortScience, 1988, V. 22, P. 1071.

300. Reed B.M. Application of gas-permeable bags for in vitro cold storage of strawberry germplasm. // Plant cell reports, 1991, V.10, P.431-434.

301. Sarwar M, The effect of different media and culture technicques oh planting efficiency of strawberry mesophyll cells in culture. // Physiol. Plant., 1984, V. 60, P. 57-60.

302. Schmidt Т., Heslop-Harrison J.S. The physical organization of micro-satellites in sugar beet. // Proc Nat Acad Sci USA, 1996, V. 93, P. 8761 8765.

303. Scoog F., Armstrong D.J. Cytokinins // Ann. Rev. Plant physiol., 1970, V. 21, P. 415-444.

304. Scott Т.К. Auxins and roots // Ann. Rev. Plant physiol., 1972, V.23, P. 235-258.

305. Snir I. Red raspberry (Rubus idaeus). In Biotechnology in Agriculture and Foresty 6: Crops II (Ed. Y.P.S. Bajaj), Springer-Verlag, Berlin, P. 124 -141.

306. Sorvari S., Ulvinen S., Hietaranta Т., Hiirsalmi H. Preculture medium promotes direct shoot regeneration from micropropagatied strawberry leaf disks //Hort Science, 1993, V. 28, N.l, P. 55-57.

307. Swartz H.J., Bors R., Mohamed F., Naess S.K. The effect of in vitro pretreatment on subsequent shoot organogenesis from excised Rubus and Malus leaves // Plant cell tissue organ cult., 1990, V. 21, P. 179 184.

308. Tikunov Yu.M., Khrustaleva L.I., Karlov G.I. Application of ISSR in the genus Lycopersicon. // Euphytica, 2003, V. 131, P. 71 80.

309. Tulecke W., McGranaham G. Somatic embryogenesis and plant regeneration from cotyledons of walnut J J Plant Sci., 1985, V. 40. P. 57 - 63.

310. Turk B.A., Swartz H.J., Zimmerman R.H. Adventitious shoot regeneration in vitro cultured leaves of Rubus genotypes // Plant cell tissue cult., 1994, V. 38, P. 11-17.

311. Van der Beek J.G., Verkerk, K., P. Zabel & P. Lindhout, 1991. Mapping strategy for resistant genes in tomato based on RFLPs between cultivars: Cf9 (resistance to Cladosporium fulvum) on chromosome 1. Theor Appl Genet 84: 106-112.

312. Walkey D.G.A. Production of apple plantlets from axillary bud meris-tems // Plant Sci., 1972, V. 52, P. 6.

313. Wang D., Wergin W.P., Zimmerman R.H. Somatic embryogenesis and plant regeneration from immature embryos of strawberry // HortScience, 1984, V. 19, P. 71-72.

314. Wang Z., Weber J.L., Zhong G., Tanksley S.D. Survey of plant short tandem repeats. //Theor Appl Genet, 1994, V. 88, P. 1-6.

315. Welander M. In vitro culture of raspberry (Rubus ideaus) for mass propagation // J. Hort. Sci.- 1985, V.60, N.4, P. 493-499.

316. Welander M. Plant regeneration from leaf and stem segments of shoots reised in vitro from mature apple trees // J/ Plant Physiol., 1988, V. 132, P. 738 — 744.зп

317. Wolff К., Zietkiewicz Е., Hofstra Н., Identification of chysanthemum cultivars and stability of DNA fingerprint patterns. // Theor. Appl. Genet, 1995, V. 91, P. 439-447.

318. Yang S.F., Hoffman N.E. Ethylene biosynthesis and its regulation in higher plants.//Annu Rev Plant Physiol., 1984, V.35, P.155-189.

319. Yao J.-L., Cohen D., Atkinson R Regeneration of transgenic plants frpm the commercial apple cultivar Royal Gala // Plant Cell Reports., 1995, V.14, N.7, P. 407-412.

320. Yepes L.M., Aldwincle H.S. Factors that affect leaf regeneration efficiency in apple, and effect of antibiotics in morphogenesis // Plant cell, tissue and organ culture, 1994, V.37, P. 257 269.