Одиночные поры, индуцированные электрическим полем в липидном бислое тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.02, кандидат биологических наук Меликов, Камран Чингиз оглы

• Меликов, Камран Чингиз оглы
• кандидат биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Меликов, Камран Чингиз оглы

Оглавление.

Сгр.

Введение

Часть I. Литературный обзор

Глава 1.1. Электрический пробой клеток

1.1.1. История вопроса

1.1.2. Значение исследований электрического пробоя. 8 Глава 1.2. Феноменология электрического пробоя БЛМ

1.2.1. Необратимый электрический пробой

1.2.2. "Стрессованное" состояние

1.2.3. Обратимый пробой. 15 Глава 1.3. Механизм электропорации

1.3.1. Ранние теории электрического пробоя

1.3.2. Формирование пор при электропорации

1.3.3. Теория электропорации

1.3.4. Гидрофильные и гидрофобные поры

1.3.5. Метастабильные поры

1.3.6. Заключение. 32 Часть П. Материалы и методы

II. 1. Эксперименты на плоских бислойных липидных мембранах

11.2. Эксперименты на мембранах на конце микропипетки

11.3. Электрическая схема измерений. 36 П.4. Реактивы. 36 II.5. Липидный состав мембран

Часть Ш. Результаты. 38 Глава III. 1. Общая картина изменений проводимости БЛМ, вплоть до

разрушения

III. 1.1. Картина электрического пробоя плоских БЛМ из ДФФХ

III. 1.2. Картина электрического пробоя участка мембраны ю

ДФФХ на конце стеклянной микропипетки. 42 Глава IIL2. Ступенчатые изменения проводимости мембраны,

индуцированные электрическим полем

111.2.1. Эксперименты на плоских БЛМ

111.2.2. Эксперименты на мембранах на конце микропипегки. 50 Глава III.3. Рост проводимости мембраны связан с накоплением мегасгабильных пор

111.3.1. Обратимость изменений проводимости

111.3.2. Рост проводимости мембраны связан с формированием более чем одного дефекта

Глава III.4. Свойства проводящих дефектов- мегасгабильных пор

111.4.1. Анализ проводимости пор. ■

111.4.2. Анализ времен жизни пор

111.4.3. Анализ константы скорости "рождения" пор

111.4.4. Среднее количество пор перед необратимым разрушением мембраны

Глава III.5. Непроводящее дефектное подсосгояние- "предпоры"

111.5.1. Флуктуации проводимости БЛМ из ДФФХ вблизи 76 уровня фоновой проводимости: пачечная активность.'

111.5.2. Влияние предобработки на рост проводимости 77 мембраны.

Часть IV. Обсуждение

Выводы

Литература

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Одиночные поры, индуцированные электрическим полем в липидном бислое»

Введение.

Известно, что под действием достаточно высоких потенциалов происходит сильное увеличение проводимости клеточных и искусственных мембран. После выключения внешнего поля проводимость мембраны может вернуться к исходному значению. Этот феномен носит название обратимой электропорации или обратимого электрического пробоя. В случае, если амплитуда или длительность импульса внешнего напряжения достаточно велики, происходит необратимое разрушение мембраны.

Интерес к электрическому пробою связан с тем, что уже много лет электропорация используется в различных биотехнологических приложениях и в медицине [1, 2]. Среди биотехнологических приложений, в которых электропорация нашла широкое применение, необходимо отметить трансфекцию различных типов клеток - от прокариот до дрожжей, растительных и животных клеток [1, 3-7]. Другой областью применения электрического пробоя плазматической мембраны является введение в клетку различных веществ в разных экспериментальных целях. Так введение в клетки рестриктаз дает возможность исследовать влияние специфических делений на клеточную жизнедеятельность [5]. Введение в клетку с помощью электропорации антител к определенным белкам позволяет ингибировать их работу в клетке [1,5, 8]. Электропорация также может использоваться для прижизненной окраски клеточных органел различными флуоресцентными красителями [5, 9]. Электропорация находит применение и в медицине для лечения раковых заболеваний [1, 10, 11]. Кроме того интерес к исследованиям электрического пробоя проявляют исследователи, занимающиеся экзоцитозом и вирусным слиянием. Ряд авторов предполагает, что одной из промежуточных стадий в этих биологически важных процессах является липидная пора - структура, формирование которой предполагается и при электропорации [12-14].

На сегодняшний день накоплено большое количество данных, касающихся электрического пробоя как клеточных, так и искусственных мембран. Показано, что электропорация мембран клеток бактерий, водорослей, растительных клеток, эритроцитов, лимфоцитов, нервных клеток и ряда других типов мембран имеет общие закономерности. Это позволяет предположить, что основную роль в электрическом пробое клеточных мембран играет липидный матрикс. В то же время биологические мембраны пробиваются обратимо, тогда как для плоских БЛМ, сформированных из большинства липидов, характерен необратимый пробой и лишь искусственные мембраны таких довольно экзотических составов как окисленный холестерин, азолектиновые мембраны, модифицированные 1Ю2+, и холестеринсодержащие мембраны в присутствии голотурина А, пробиваются обратимо.

В предыдущих работах была развита теория электрического пробоя, предполагающая, что в основе механизма электропорации лежит формирование локальных дефектов структуры бислоя - гидрофильных пор. Эта теория достаточно хорошо описывает имеющиеся данные. Кроме того имеется ряд экспериментальных данных подтверждающих локальный характер пробоя, в то же время имеется необходимость в дополнительных экспериментальных доказательствах формирования локальных дефектов под действием электрического поля.

В работах по исследованию обратимого пробоя азолектиновых мембран, модифицированных 1Ю2"\ были найдены характеристики локальных проводящих дефектов - пор. В то же время большое число дефектов, формирующихся в мембранах в описанных экспериментальных условиях (105 согласно оценкам авторов), и приближенный характер формул, использованных для расчета параметров пор, позволяет рассматривать полученные характеристики лишь в качестве оценок.

В данной работе был исследован пробой мембран из 1,2-дифитаноил-вп-глицеро-З-фосфатидилхолина, сформированных из раствора липида в сквалене. Особое внимание уделено исследованию начальных стадий пробоя. Путем сравнения пробоя на мембранах разного размера получены новые доказательства локального характера пробоя. С помощью методики "пэтч-клампа", примененной к плоским БЛМ, зарегистрированы изменения проводимости мембраны, которые можно связать с одиночными проводящими дефектами. На основе анализа таких изменений проводимости исследованы свойства одиночных дефектов.

Часть I Литературный обзор.

Заключение диссертации по теме «Биофизика», Меликов, Камран Чингиз оглы

Выводы.

1. Показано, что индуцируемые электрическим полем флуктуации мембранного тока связаны с локальными дефектами в мембране, а не с изменением ее интегральной проводимости.

2. Показано, что для мембран разного состава необратимому пробою, как правило, предшествует стадия обратимого увеличения проводимости, во время которой происходит накопление липидных пор.

3. Анализ распределения времен жизни проводящих дефектов позволяет заключить, что существует 2 популяции дефектов, отличающиеся средним временем жизни: короткоживущие (т~1 мс) и долгоживущие (т~500 мс) поры.

4. Показано, что структурные дефекты могут существовать в двух подсостояниях - проводящем (открытые поры) и непроводящем состоянии ("предпоры").

5. Тремя независимыми методами показано, что средний радиус пор составляет ~1 нм. Однако, в отличие от белковых каналов, проводимость и размер липидных пор характеризуются значительной дисперсией, что обусловлено их структурным многообразием.

В заключение считаю своим долгом выразить глубокую благодарность своему руководителю Юрию Александровичу Чизмаджеву. Я также очень благодарен Вадиму Фролову и Андрею Самсонову за их активную помощь; плодотворные обсуждения с ними позволяли мне преодолеть встававшие в ходе работы проблемы. Я хочу выразить свою благодарность Леониду Витальевичу Черномордику, под руководством котрого была выполнена часть работы в ходе моего трехмесячного визита в N111. Благодарю Петра Ивановича Кузьмина за помощь в написании программного обеспечения использованного нами.

Работа была поддержана Грантами РФФИ 96-04-50779 и 96-15-97972.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Меликов, Камран Чингиз оглы, 1999 год

Литература.

1. Tsong T.Y. Electroporation of cell membranes. Biophys. J., 1991, V. 60, № 2, P. 297-306.

2. Chang D.C., Chassy D.M., Saunders J.A. and Sowers A.E., editors. 1992. Guide to Electroporation and Electrofusion. Academic Press, New York.

3. Titomirov A.V., KistanovaE., Sukharev S. In vivo electroporation and stable transformation of skin cells of newborn mice by plasmid DNA. BBA, 1991, V. 1088, № l.P. 131-134.

4. Zheng Q.A., Chang D.C. High-efficiency gene transfection by in situ electroporation of cultured cells. BBA, 1991, V. 1088, № 1,P. 104-110.

5. Gallagher S.R., Chang D.C. Novel Applications of Electroporation. In "Guide to Electroporation and Electrofusion", Chang D.C., Chassy B.M., Saunders J.A., Sowers A.E. (eds.), Academic Press, New York, 1992, P. 411-425.

6. Weaver J.C. Electroporation: a general phenomenon for manipulating cells and tissues. J. Cell. Biochem., 1993, V. 51, № 4, P. 426-435.

7. Neumann E., Tomov Т., Nikolova В., Tsoneva I., Kakorin S. Calcium-mediated DNA adsorption to yeast cells and kinetics of cell transformation by electroporation. Biophys. J., 1996, V. 71, №2, P. 868-877.

8. Verspohl E.J., Wienecke A., Kaiserling-Buddemeier. Introducing specific antibodies into electropermeabilized cells is a valuable tool for eliminating specific cell functions. Cell Biochem. Funct., 1997, V. 15, № 2, P. 127-134.

9. Bright G.R., Przybylski R.J., Dowe C., Burden S., Chow D., Kuo N.T. Delivery of macromolecules into adherent cells via electroporation for use in fluorescence spectroscopic imaging and metabolic studies. Cytometry, 1996, V. 24, № 3, P. 226233.

10. Dev S.B. and Hofmann G.A. Electrochemotherapy-a novel method of cancer treatment. Cancer Treat Rev., 1994, V. 20, № 1, P. 105-115.

11. Nishi T., Ushio Y., Kuratsu J., Yoshizato K., Dev S.B. Treatment of cancer using pulsed electric field in combination with chemotherapeutic agents or genes. Hum Cell, 1997, V. 10, №1, P. 81-86.

12. Nanavati C., Markin V.S., Oberhauser A.F., Fernandez J.M. The Exocytotic Fusion Pore Modeled as a Lipidic Pore. Biophys. J., 1992, V. 63, P. 1118-1132.

13. Chernomordik L. V., Frolov V. A., Leikina E., Bronk P., Zimmerberg J. The pathway of membrane fusion catalyzed by influenza hemagglutinin: restriction of lipids, hemifusion, and lipidic fusion pore formation. J. Cell Biol., 1998, V. 140, P. 13691382.

14. Melikyan G.B., Chernomordik L.V. Membrane rearrangements in fusion mediated by viral proteins. Trends Microbiol., 1997, V. 5, № 9, P. 349-355.

15. Zimmermann U. Electric field-mediated fusion and related electric phenomena. BBA, 1982, V. 694, P. 227-277.

16. Tsong T. Y. Voltage modulation of membrane permeability and energy utilization in cells. Biosciense Reports, 1983, V. 3, P 487-505.

17. Chizmadzhev Yu.A., Abidor I.G. Membranes in strong electric fields. Bioelectrochem. Bioenerg., 1980, V. 7, P. 83-100.

18. Pfluger U.D. Physiology des Electronus. Berlin, Hirswald, 1859.

19. Hill A. V., Solandt D.Y. The measurement of "accomodation" in nerve. Proc. Roy. Society, London, ser. B, 1936, V. 119, P. 355-379.

20. Stampfli R., Willi M. Membrane potential of a Ranvier node measured after electrical destruction of its membrane. Experientia, 1957, V. 13, P. 297.

21. Stampfli R. Reversible electrical breakdown of the excitable membrane of a Ranvier node. An. Acad. Brasil. Cien., 1958, V. 30, P. 57-63.

22. Ooyama H., Wright E.B. Anode break excitation on single Ranvier node of frog nerve. Am. J. Physiol., 1961, V. 200, P. 209-218.

23. Ходоров Б.И., Пеганов Э.М. О механизме изменений ионной проницаемости мембраны перехвата Ранвье при генерации гиперполяризационных ответов. ДАН СССР, 1969, Т. 185, С. 1189-1192.

24. Sale A.J.H., Hamilton W.A. Effects of high electric fields on microorganisms. I. Killing of bacteria and yeast. BBA, 1967, V. 148, P. 781-788.

25. Hamilton W.A., Sale A.J.H. Effects of high electric fields on microorganisms. II. Mechanism of the lethal effect. BBA, 1967, V. 148, P. 789-800.

26. Sale A.J.H., Hamilton W.A. Effects of high electric fields on microorganisms. III. Lysis of erythrosytes and protoplasts. BBA, 1968, V. 163, P. 37-43.

27. Hulsheger H., Niemann E-G. Lethal effect of high-voltage pulses on E.coli K12. Radiat. Envirin. Biophys., 1980, V. 18, P. 281-288.

28. Hulsheger H., Potel J., Niemann E-G. Killing of bacteria with electric pulses of high field strength. Radiat. Envirin. Biophys., 1981, V. 20, P. 53-65.

29. Coster H.G.L. A quantitative analysis of the voltage-current relationships of fixed charge membranes and associated property of "punch-through". Biophys. J., 1965, V. 5, P. 669-686.

30. Williams E.J., Bradley J. Steady-state membrane hyperpolarization by large applied currents in Nitella translucens. Biophys. J., 1968, V. 1, P. 145-147.

31. Coster H.G.L., Zimmermann U. Direct demonstration of dielectric breakdown of the membranes of Valonia utricularis. Z. Naturforsch., 1975, P. 77-81.

32. Coster H.G.L., Zimmermann U. The mechanism of electrical breakdown in the membranes of Valonia utricularis. J. Membrane Biol., 1975, V. 22, P. 73-90.

33. Riemann F., Zimmermann U., Pilwat G. Release and uptake of haemoglobin and ions in red blood cells induced by dielectric breakdown. BBA, 1975, V. 394, P. 449462.

34. Zimmermann U., Pilwat G., Holzapfel Ch., Riemann F. Electrical hemolysis of human and bowine red blood cells. J. Membrane Biol., 1976, V. 30, P. 135-152.

35. Zimmermann U., Pilwat G., Beskers F., Riemann F. Effects of external electrical fields on cell membranes. Bioelectrochem. Bioenerg., 1976, V. 3, P. 58-83.

36. Kinozita K., Tsong T.Y. Haemolysis of human erythrocytes by a transient electric field. Proc. Natn. Acad. Sci. USA, 1977, V. 74, P. 1923-1927.

37. Kinozita K., Tsong T.Y. Voltage-induced pore formation and haemolysis of human erythrocytes. BBA, 1977, V. 471, P. 227-242.

38. Kinozita K., Tsong T.Y. Formation and resealing of pores of controlled sizes in human erythrocyte membrane. Nature, 1977, V. 268, P. 438-441.

39. Dressier V., Schwister K., Haest C.W.M., Deuticke B. Dielectric breakdown of the erythrocyte membrane enhances transbilayer mobility of phospholipids. BBA, 1983, V. 732, P. 304-307.

40. Haest C.W.M., Kamp D., Deuticke B. 1997. Transbilayer reorientation of phospholipid probes in the human erythrocyte membrane. Lessons from studies on electroporated andresealed cells. BBA, V. 1325, P. 17-33.

41. Benz R., Zimmermann U. Relaxation studies on cell membranes and lipid bilayers in the high electric field range. Bioelectrochem. Bioenerg., 1980, V. 7, P. 723-739.

42. Сухарев С.И., Попов С.В., Черномордик J1.B., Абидор И.Г. Исследование электрического пробоя клеточных мембран методом "стекляной пипетки" (patch-clamp). Биол. мембраны, 1985, Т. 2, № 1, С. 77-86.

43. Chernomordik L.V., Sukharev S.I., Popov S.V., Pastushenko V.F., Sokirko A.V., Abidorl.G., Chizmadzhev Y.A. The Electrical Breakdown of Cell and Lipid Membranes: the Similarity of Phenomenologies. BBA, 1987, V. 902, P. 360-373.

44. Wong T-K., Neumann E. Electric field mediated gene transfer. Biochem. Biophys. Res. Comm., 1982, V. 107, P. 584-587.

45. Fromm M., Taylor L.P., Walbot V. Expression of genes transferred into monocot and dicot plant cells by electroporation. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1985, V. 82, P. 5824-5828.

46. Morikawa H., Iida A., Matsury C., Ikegami M., Yamada Y. Gene transfer into intact plantcells by electroinjection through cell walls and membranes. Gene, 1986, V. 41, P. 121-124.

47. Trevors J.T., Chassy B.M., Dower W.J., Blaschek H.P. Electrotransformation of bacteria by plasmid DNA. In "Guide to Electroporation and Electrofusion", Chang D.C., Chassy B.M., Saunders J.A., Sowers A.E. (eds.), Academic Press, New York, 1992, P. 265-290.

48. Dower W.J., Cwirla S.E. Creating vast peptide expression lobraries: Electroporation as a tool to constract plasmid libraries of greater then 109 recombinants. In "Guide to Electroporation and Electrofusion", Chang D.C., Chassy B.M., Saunders J.A., Sowers A.E. (eds.), Academic Press, New York, 1992, P. 291-301.

49. Potter H., Cooke S.W. Gene transfer into adherent cells growing on microbeads. In "Guide to Electroporation and Electrofusion", Chang D.C., Chassy B.M., Saunders J.A., Sowers A.E. (eds.), Academic Press, New York, 1992, P. 201-208.

50. Traas J.A., Doonan J.H., Rawlins D.J., Shaw P.J., Watts J., Lloyd C.W. An actin network is present in cytoplasm throughout the cell cycle of carrot cells and associated with dividing nucleus. J. Cell. Biol., 1987, V. 105, P. 387-395.

51. Kinozita K., Tsong T.Y. Survival of sucrose-loaded erythrocytes in the circulation. Nature, 1978, V. 272, P. 258.

52. Zimmermann U., Vienkel J., Pilwat G. Development of drug carrier system: electric field induced effects in cell membranes. Bioelectrochem. Bioenerg., 1980, V. 7, P. 553-574.

53. Путвинский A.B., Попов СЛ., Пучкова Т.В., Данилов Ю.А., Владимиров Ю.А. Электрический пробой мембран эритроцитов за счет диффузионной разности потенциалов. Биофизика, 1983, Т. 28, С. 505-506.

54. Пучкова Т.В., Путвинский А.В., Владимиров Ю.А., Парнев О.М. Электрический пробой мембран фосфолипидных везикул диффузионным потенциалом. Биофизика, 1981, Т. 26, С. 265-270.

55. Владимиров Ю.А., Париев О.М., Аннабердыев Е.М., Путвинский А.В., ПучковаТ.В., Черемисина З.П. Электрическая прочность мембран митохондрий. Биол. мембраны, 1984, Т. 1, С. 428-434.

56. Chanturiya A., Chernomordik L.V., ZimmerbergJ. Flickering fusion pores comparable with initial exocytotic pores occur in protein-free phospholipid bilayers. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1997, V. 94, P. 14423-14428.

57. Tien H.T. Bilayer Lipid Membrane (BLM). Teory and Practice. New York, 1974.

58. Чизмаджев Ю.А., Черномордик Jl.В., Пастушенко В.Ф., Абидор И.Г. Электрический пробой бислойных липидных мембран. В Биофизика мембран Т. 2. Ионные каналы и их модели, Итоги науки и техн., ВИНИТИ, АН СССР, Москва, 1982.

59. Абидор И.Г., Аракелян В.Б., Пастушенко В.Ф., Тарасевич М.Р., Черномордик Л.В., Чизмаджев Ю.А. 1978. Электрический пробой бислойных липидных мембран. ДАН СССР, Т. 240, № 3, С. 733-736.

60. Abidor I.G., Arakelyan V.B., Chernomordik L.V., Chizmadzhev Yu.A., Pastushenko V.F., Tarasevich M.R. 1979. Electric Breakdown of Bilayer Lipid Membranes. I. The Main Experimental Facts and Their Qualitative Discussion. Bioelectrochem. Bioenerg., V. 6, P. 37-52.

61. Черномордик Л.В., Абидор И.Г., Аракелян В.Б., Баскаков В.А., Тарасевич М.Р. 1978. Влияние "стрессовых" воздействий на электрические свойства БЛМ. Биофизика, Т. 23, В. 5, С. 806-812.

62. Черномордик Л.В., Абидор И.Г. 1980. Катионная селективность БЛМ в "стрессовом" состоянии. Биофизика, Т. 25, В. 5, С. 918-919.

63. Benz R., Beckers F., Zimmermann U. Reversible electrical breakdown of Lipid Bilayer Membranes: a charge-pulse relaxation study. J. Membr. Biol., 1979, V. 48, P. 181-204.

64. Абидор И.Г., Черномордик Л.В., Сухарев С.И., Чизмаджев Ю.А. 1981.

Обратимый электрический пробой бислойных липидных мембран,

модифицированных ураниловыми ионами. Электрохимия, Т. 17, В. 12, С. 1852-1857.

65. Abidor I.G., Chernomordik L.V., Sukharev S.I., Chizmadzhev Yu.A. 1982. The Reversible Electrical Breakdown of Bilayer Lipid Membranes Modified by Uranyl Ions. Bioelectrochem. Bioenerg., V. 9, P. 141-148.

66. Chernomordik L.V., Sukharev S.I., Abidor I.G., Chizmadzhev Yu.A. Breakdown of Bilayer Lipid Membranes in an Electric Field. BBA, 1983, V. 736, P. 203-213.

67. Черномордик JI.B., Сухарев С.И., АбидорИ.Г., Чизмаджев Ю.А. 1984. Обратимый электрический пробой бислойных липидных мембран. Биол. мембраны, Т. 1, № 3, С. 229-243.

68. Chernomordik L.V., Sukharev S.I., Popov S.V., Pastushenko V.F., Sokirko A.V., Abidor I.G., Chizmadzhev Y.A. 1987. The Electrical Breakdown of Cell and Lipid Membranes: the Similarity of Phenomenologies. BBA, V. 902, P. 360-373.

69. Сухарев С.И., Черномордик Л.В., Абидор И.Г. 1983. Обратимый электрический пробой холестеринсодержащих бислойных липидных мембран, модифицированных голотурином А. Биофизика, Т. 28, В. 3, С. 423426.

70. Crowley J.M. Electrical breakdown of bimolecular lipid membrane as an electromechanical instability. Biophys. J., 1973, V. 13, P. 711-724.

71. Chernomordik L.V., Abidor I.G. 1980. The Voltage-Induced Local Defects in Unmodified BLM. Bioelectrochem. Bioenerg., V. 7, P. 617-623.

72. Chernomordik L.V., Sukharev S.I., Abidor I.G., Chizmadzhev Yu.A. 1982. The Study of the BLM Reversible Electrical Breakdown Mechanism in the Presence of ¿7022+ . Bioelectrochem. Bioenerg., V. 9, P. 149-155.

73. Черномордик Л.В., Сухарев С.И., Абидор И.Г., Чизмаджев Ю.А. 1982. Исследование механизма обратимого электрического пробоя бислойных липидных мембран в присутствии JJOl+. Электрохимия, Т. 18, В. 1, С. 98-102.

74. Chang D.C. Structure and Dynamics of Membrane Pores. 1992. In "Guide to Electroporation and Electrofusion", Chang D.C., Chassy B.M., Saunders J.A., Sowers A.E. (eds.), Academic Press, New York, P. 9-27.

75. Schwister K., Deuticke B. Formation and properties of aqueous leaks induced in human erythrocytes by electrical breakdown. BBA, 1985, V. 816, P. 332-348.

76. Antonov V.F., Petrov V.V., Molnar A.A., Predvoditelev D.A., Ivanov A.S. 1980. Nature, V. 283, P. 585.

77. Петров B.B., Мольнар А.А., Иванов A.C., Предводителев Д.А., Антонов В.Ф. 1978. Появление одиночных каналов ионной проводимости в немодифицированных бислойных мембранах при температуре фазового перехода . ДАН СССР, Т. 239, № 5, С. 1245-1247.

78. Дерягин Б.В., Гутоп Ю.В. Теория разрушения (прорыва) свободных пленок. Коллоидный журн., 1962, Т. 24, С. 431-437.

79. Chernomordik L.V. and Chizmadzhev Yu.A. 1989. Electrical Breakdown of Lipid Bilayer Membranes. In "Electroporation and Electrofusion in Cell Biology". E. Neumann, A.E. Sowers, C.A. Jordan (eds.), Plenum Press, New York, P. 83-95.

80. Pastushenko V.F., Chizmadzhev Yu.A., Arakelyan V.B. 1979. Electric Breakdown of Bilayer Lipid Membranes. II. Calculation of the Membrane Lifetime in the Steady-State Diffusion Approximation. Bioelectrochem. Bioenerg., V. 6, P. 53-62.

81. Pastushenko V.F., Arakelyan Y.B., Chizmadzhev Yu.A. 19796. Electric Breakdown of Bilayer Lipid Membranes. VI. A Stochastic Theoty Taking into Account the Processes of Defect Formation and Death: Membrane Lifetime Distribution Function. Bioelectrochem. Bioenerg., V. 6, P. 89-95.

82. Chernomordik L.V., Kozlov M.M., Melikyan G.B., Abidor I.G., Markin V.S., Chizmadzhev Yu.A. The shape of lipid molecules and monolayer membrane fusion. BBA, 1985, V. 812, P. 643-655.

83. Pastushenko V.F., Chizmadzhev Yu.A., Arakelyan V.B. 1979a. Electric Breakdown of Bilayer Lipid Membranes. IV. Consideration of the Kinetic Stage in the Case of Single-Defect Membrane. Bioelectrochem. Bioenerg., V. 6, P. 71-79.

84. Абидор И.Г., Аракелян В.Б., Пастушенко В.Ф., Черномордик Л.В., Чизмаджев Ю.А. 1979. Механизм электрического пробоя БЛМ. ДАН СССР, Т. 245, №5, С. 1239-1242.

85. Benz R., Zimmermann U. The resealing process of lipid bilayers after reversible electrical breakdown. BBA, 1981, V. 640, P. 169-178.

86. Черномордик Л.В., Сухарев С.И., Абидор И.Г. 1985. Долгоживущие дефекты в липидном бислое после обратимого пробоя. Биол. мембраны. Т. 2, № 1, С. 8794.

87. Черномордик Л.В., Сухарев С.И., Кушнев В.В., Абидор И.Г. 1983. Развитие пор при обратимом электрическом пробое бислойных липидных мембран. Электрохимия, Т. 19, В. 9, С. 1218-1224.

88. Лейкин С.Л., Глазер Р.В., Черномордик Л.В. 1986. Механизм образования пор при электрическом пробое мембран. Биол. мембраны, Т. 3, № 9, С. 944-951.

89. Glaser R.W., Leikin S.L., Chernomordik L.V., Pastushenko V.F., Sokirko A.I. 1988. Reversible electrical breakdown of lipid bilayers: formation and evolution of pores. BBA, V. 940, P. 275-287.

90. Chernomordik L.V., Melikyan G.B., Dubrovina N.I., Abidor I.G., Chizmadzhev Yu.A. 1984. Solvent-Free Bilayers from Squalene Solutions of Phospholipids. Bioelectrochem. Bioenerg., V. 12, P. 155-166.

91. Hamill O.P., Marty A., Neher E., Sakmann В., Sigworth FJ. Improved patch-clamp techniques for high-resolution current recording from cells and cell-free membrane patches. Pflugers Arch., 1981, V. 391, P. 85-100.