Неквантовая секреция ацетилхолина в миокарде крысы и механизмы ее регуляции тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.01, кандидат наук Бородинова, Анастасия Александровна

• Бородинова, Анастасия Александровна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Бородинова, Анастасия Александровна

ОГЛАВЛЕНИЕ

1. ВВЕДЕНИЕ

1.1. Актуальность темы

1.2. Задачи исследования

1.3. Научная новизна

1.4. Научно-практическая значимость

1.5. Основные положения, выносимые на защиту

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Экстракардиальные и интракардиальные влияния

2.1.1. Интракардиальные ганглии

2.1.1.1.Пре- и постнатальное развитие внутрисердечных ганглиев

2.1.1.2.Локализация внутрисердечных ганглиев и их проекции

2.1.1.3. Структурно-морфологические и нейрохимические особенности внутрисердечных ганглиев

2.1.2. Структура вегетативных синапсов в сердечной ткани

2.2. Симпато-парасимпатические взаимодействия

2.2.1. Взаимодействия на уровне ганглиев

2.2.2. Взаимодействия на пре- и постсинаптическом уровне

2.2.2.1.Пресинаптическое взаимодействие

2.2.2.2.Постсинаптическое взаимодействие

2.2.2.2.1. Мускариновые и адренергические рецепторы в миокарде

2.2.2.2.2. Механизмы действия ацетилхолина и норадреналина на миокард. Аденилатциклазный и фосфоинозитольный каскады

2.3. Жизненный цикл ацетилхолина

2.3.1. Синтез ацетилхолина в нейронах

2.3.2. Синтез ацетилхолина в мышечных клетках

2.3.3. Квантовая секреция ацетилхолина

2.3.4. Распад ацетилхолина. Ацетилхолинэстераза

2.3.5. Обратный захват холина. Система захвата холина высокого сродства

2.3.6. Перенос холина и ацетилхолина. Транспортеры органических катионов

2.4. Неквантовая секреция ацетилхолина

2.4.1. Открытие неквантовой секреции ацетилхолина

2.4.2. Механизм неквантового выделения ацетилхолина

2.4.3. Неквантовая секреция ацетилхолина в нейронах, иннервирующих гладкие мышцы дыхательных путей

2.4.4. Неквантовая секреция ацетилхолина в афферентных нейронах зрительной системы позвоночных и беспозвоночных

2.4.5. Регуляция неквантовой секреции ацетилхолина в нервно-мышечных синапсах

2.4.5.1 .Влияние температуры и ионного состава внешней среды на интенсивность неквантовой секреции

2.4.5.2.Влияние активности №+/К+-АТФазы на интенсивность неквантовой секреции ацетилхолина

2.4.5.3.Действие пероксида водорода на процесс неквантовой секреции ацетилхолина

2.4.5.4.Влияние денервации мышцы на процесс неквантовой секреции ацетилхолина

2.4.5.5.Динамика неквантовой секреции ацетилхолина в условиях гипоксии

2.4.5.6.Пуринергическая регуляция неквантовой секреции ацетилхолина

2.4.5.7.Глутаматергическая регуляция неквантовой секреции ацетилхолина

2.4.5.8.Ауторегуляция неквантовой секреции ацетилхолина

2.4.6. Прочие виды неквантовой секреции

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

3.1. Животные

3.1.1. Взрослые крысы

3.1.2. Получение эмбрионов и новорожденных крыс

3.1.3. Хроническая десимпатизация крыс

3.2. Препаровка

3.2.1. Выделение препарата правого предсердия

3.2.2. Препаровка стенки правого желудочка

3.2.3. Выделение препарата папиллярной мышцы

3.3. Внутриклеточная регистрация электрической активности

3.4. Обработка препаратов миокарда ботулиническим токсином

3.5. Оценка динамики эндоцитоза и экзоцитоза в предсердных препаратах с помощью флуоресцентной метки РМ1-43

3.6. Обработка результатов

4. РЕЗУЛЬТАТЫ

4.1. Влияние различных ингибиторов ацетилхолинэстеразы на параметры электрической активности предсердного миокарда

4.1.1. Изучение влияний армина и прозерина на параметры электрической активности в правом предсердии крысы

4.1.2. Влияние параоксона на параметры электрической активности в правом предсердии крысы

4.1.3. Аритмогенные эффекты ингибиторов ацетилхолинэстеразы

4.1.4. Исследование влияния атропина на конфигурацию потенциалов действия предсердного миокарда крысы в нормальных условиях

4.2. Проверка гипотезы о вкладе вызванного квантового выделения в накопление ацетилхолина в миокраде

4.2.1. Эксперименты с тетродотоксином

4.2.2. Эксперименты с бромидом гексаметония

4.3. Проверка гипотезы о вкладе спонтанной квантовой секреции в накопление ацетилхолина в миокарде

4.3.1. Эксперименты с ботулотоксином. Проверка эффективности действия ботулотоксина в предсердных препаратах

4.3.2. Эксперименты с ботулотоксином. Влияние инкубации препарата с ботулотоксином на выраженность эффектов армина

4.4. Рассмотрение механизма неквантовой секреции ацетилхолина в миокарде

4.5. Исследование механизмов регуляции неквантовой секреции ацетилхолина

4.5.1. Изучение возможности пуринергической регуляции неквантовой секреции ацетилхолина

4.5.2. Регуляция неквантовой секреции ацетилхолина оксидом азота

4.5.3. Адренергическая модуляция неквантовой секреции ацетилхолина

4.5.3.1. Исследование влияния норадреналина на неквантовую секрецию

ацетилхолина

4.5.3.2.Определение подтипа адренорецепторов, участвующего в модуляции неквантовой секреции ацетилхолина

4.6. Исследование вопроса о тканеспецифичности неквантовой секреции

ацетилхолина

4.6.1. Сравнение эффектов параоксона в препаратах миокарда различных отделов

сердца крысы

4.6.2. Исследование возможности существования ненейрональных источников ацетилхолина неквантового происхождения

4.7. Появление неквантовой секреции ацетилхолина в процессе пренатального развития

5. ОБСУЖДЕНИЕ

5.1. Доказательство роли неквантовой секреции в накоплении ацетилхолина в миокарде и рассмотрение механизмов ее регуляции

5.2. Симпато-парасимпатические взаимодействия и возможная кардиопротекторная роль ацетилхолина неквантовой формы

5.3. Становление парасимпатической нейропередачи в сердце и возможное значение неквантовой секреции ацетилхолина

5.4. Возможность участия неквантового ацетилхолина в прорастании нейронов к клеткам мишеням и формировании очагов синаптогенеза в процессе эмбрионального развития

6. ВЫВОДЫ

7. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

8. БЛАГОДАРНОСТИ

Список используемых сокращений

АДФ - аденозиндифосфат

АМФ - аденозинмонофосфат

АТФ - аденозинтрифосфат

АЦ - аденилатциклаза

Ацетил-СоА - ацетил-коэнзим А

АЦХ - ацетилхолин

АЦХ-Э - ацетилхолинэстераза

ВНС - вегетативная нервная система

ВНСп - внутрисердечное нервное сплетение

ВТдцх - везикулярный транспортер ацетилхолина

ГДФ - гуанозиндифосфат

ГТФ - гуанозинтрифосфат

ГЦ - гуанилатциклаза

ДПД50 - длительность ПД на уровне 50% реполяризации ДПД90 - длительность ПД на уровне 90% реполяризации ДЦ - длина сердечного цикла

МВПСТ - миниатюрные возбуждающие постсинаптические токи

МПКП - миниатюрные потенциалы концевой пластинки

НА - норадреналин

ПД - потенциал действия

ПЖ - правый желудочек

ПМ - папиллярная мышца

ПУ - ушко правого предердия

СЗХВС - система захвата холина высокого сродства

СПЖ - стенка правого желудочка

СПР - саркоплазматический ретикулюм

ТТХ - тетродотоксин

ФДЭ - фосфодиэстераза

ФОС - фосфорорганические соединения

ФЭ - фенилэфрин

ХАТ - холинацетилтрансфераза

цАМФ - циклический аденозинмонофосфат

цГМФ - циклический гуанозинмонофосфат

СаМ - кальмодулин СагАТ - карнитинацетилтрансфераза CGRP - кальцитонин-подобный пептид ChAT - см. ХАТ

CHT - высокоаффинный транспортер холина

CNTF - цилиарный нейротрофический фактор

DAG - диацилглицерол

ED - эмбриональный день

Glu - глутамат

Н2О2 - пероксид водорода

IcaL - кальциевый ток L-типа

iKach - калиевый ацетилхолинзависимый ток

1кмз - калиевый ток, наблюдаемый при активации МЗ рецепторов 1Рз - инозитолтрифосфат

If - активируемый гиперполяризацией ток, ток Ди Франческо

LIF - лейкемия-ингибирующий фактор

NAAG - N-ацетиласпартилглутамат

nACh-R - никотиновые холинорецепторы

N0 - оксид азота

NOS - синтаза оксида азота

NPY - нейропептид Y

ОСТ - транспортеры органических катионов

РАСАР - гипофизарный активирующий аденилатциклазу полипептид

PIP2 - фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфат

РКА - протеинкиназа А

РКС - протеинкиназа С

PLC - фосфолипаза С

SP - субстанция Р

SNAP - б'-Нитрозо-А^-ацетилпеницилламин

ТН - тирозингидроксилаза

VIP - вазоактивный интестинальный пептид

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Неквантовая секреция ацетилхолина в миокарде крысы и механизмы ее регуляции»

1. ВВЕДЕНИЕ

1.1. Актуальность темы

Парасимпатическая регуляция чрезвычайно важна для нормального функционирования сердца у млекопитающих. Помимо очевидной адаптивной функции, позволяющей снижать синусовый ритм и в меньшей степени - силу сокращений желудочков в зависимости от условий среды, холинергические нервные влияния выполняют также важную кардиопротекторную роль. Это делает исследование механизмов холинергической регуляции сердца востребованным не только с фундаментальной, но и с практической точки зрения.

Парасимпатические механизмы регуляции сердечной деятельности издавна привлекали к себе внимание исследователей. Еще в 1845 году братья Вебер открыли эффект замедления работы сердца при раздражении продолговатого мозга, пропадавший после перерезки вагуса. А в 1921 году в экспериментах Отто Лёви именно благодаря основному парасимпатическому медиатору ацетилхолину (АЦХ) была доказана возможность химической передачи сигнала от нервов к эффекторному органу. Несмотря на то, что в течение прошлого века усилия физиологов были в большей степени сконцентрированы на выяснении адренергических механизмов регуляции сердца, к концу столетия сформировалась достаточно целостная картина парасимпатической регуляции. В настоящее время относительно хорошо исследованы рецепторные механизмы воздействия АЦХ на кардиомиоциты. Кроме того, в значительной степени известно, какие механизмы внутриклеточной сигнализации оказываются задействованы в реализации эффектов АЦХ и каковы конечные мишени данных сигнальных каскадов.

В настоящее время изучение регуляции сердечной деятельности развивается высокими темпами, что в первую очередь связано с остро стоящей перед человечеством проблемой сердечно-сосудистых заболеваний. Поэтому важно отметить, что выяснение тонких механизмов холинергической регуляции миокарда значительно ускорилось в связи с осознанием кардиопротекторного значения парасимпатической регуляции сердца, пришедшим в конце прошлого века. На исключительную важность холинергических воздействий для выживания миокарда в условиях ишемии указывает целый ряд экспериментальных данных. К примеру, в известной работе академика Л.В. Розенштрауха было показано, что сердце кошки после блокирования всех парасимпатических влияний путем атропинизации или введения коклюшного токсина становится многократно более склонным к возникновению фибрилляции желудочков в результате экспериментальной окклюзии коронарной артерии, чем сердце нормального животного (Rosenshtraukh et al, 1994). Нет

сомнений в том, что раскрытие механизмов кардиопротекторного действия АЦХ поможет в борьбе с заболеваниями сердца. Поэтому изучение механизмов парасимпатической регуляции сердца является исключительно важной задачей для современной физиологии.

Несмотря на то, что механизмы воздействия АЦХ на кардиомиоциты изучены достаточно хорошо, другому важнейшему звену холинергической регуляции, выделению АЦХ из холинергических интрамуральных окончаний в миокарде, уделяется недостаточно внимания.

Практически все имеющиеся данные относительно секреции АЦХ из нервных окончаний были получены при изучении нервно-мышечной синаптической передачи. Помимо общеизвестной квантовой секреции медиатора, связанной с экзоцитозом синаптических везикул, уже более 30 лет назад был описан и неквантовый способ секреции, представляющий собой непрерывное выделение АЦХ из цитоплазмы в синаптическую щель, опосредованное мембранными белками-транспортерами катионов. В нервно-мышечном синапсе в состоянии покоя подавляющее количество АЦХ секретируется неквантовым путем, в то время как квантовым способом выделяется всего около 2% молекул медиатора (Mitchell and Silver, 1963; Vizi and Vyskocil, 1979). Явление неквантовой секреции в скелетной мускулатуре было детально охарактеризовано в исследованиях, проводившихся в лаборатории академика Е.Е. Никольского (см. обзор Маломуж и Никольский, 2007). Тем не менее, несмотря на очевидную важность неквантовой секреции, нигде, кроме нервно-мышечного синапса, данный феномен обнаружен не был. В настоящей работе мы впервые демонстрируем наличие неквантового выделения АЦХ в миокарде, кроме того, исследуем механизмы регуляции неквантовой секреции и по крайней мере отчасти выясняем физиологическое значение этого феномена.

Целью данной работы являлось доказательство существования неквантовой секреции АЦХ в сердце крысы, а также выяснение некоторых характеристик этого процесса, в том числе физиологических механизмов его регуляции.

1.2. Задачи исследования

1. Используя ингибиторы ацетилхолинэстеразы (АЦХ-Э) различных классов показать способность АЦХ накапливаться в изолированных препаратах миокарда, лишенных экстракардиальных нервных влияний.

2. Выяснить способ секреции АЦХ, накапливающегося в исследуемых препаратах. Поскольку в ходе работы нам удалось доказать неквантовый характер секреции

аккумулирующегося АЦХ, последующие задачи были направлены на изучение феномена неквантовой секреции в миокарде.

3. Изучить влияние АТФ и оксида азота, признанных регуляторов неквантовой секреции АЦХ в нервно-мышечном синапсе, на интенсивность неквантового выделения АЦХ в предсердном миокарде крысы.

4. Исследовать влияние важнейшего кардиорегулятора норадреналина на интенсивность неквантового выделения АЦХ с выяснением подтипа адренорецепторов, опосредующих этот процесс.

5. Исследовать возможность существования миогенных источников неквантовой формы АЦХ в сердце крыс.

6. С целью выяснения времени становления неквантовой секреции АЦХ в процессе онтогенеза изучить действие ингибитора АЦХ-Э параоксона на параметры электрической активности в предсердном миокарде новорожденных крыс, а также 19-дневных эмбрионов.

1.3. Научная новизна исследования

Впервые явление неквантовой секреции АЦХ обнаружено не в скелетной мускулатуре, а в миокарде млекопитающих. Показано, что значительная часть неквантового АЦХ выделяется из постганглионарных парасимпатических интрамуральных нейронов, причем механизм неквантовой секреции в данном случае представляется таким же, как и в нервно-мышечном синапсе, а именно основанным на функционировании транспортера обратного захвата холина высокого сродства.

В данной работе впервые описаны физиологические эффекты АЦХ кардиомиогенного происхождения в миокарде взрослых крыс. С другой стороны показано, что в миокарде новорожденных крысят неквантовый АЦХ имеет исключительно нейрональное происхождение.

Кроме того, впервые описан новый способ регуляции неквантовой секреции АЦХ - с участием медиатора симпатических постганглионаров норадреналина.

1.4. Научно-практическая значимость

Полученные данные существенно расширяют наши представления о механизмах парасимпатической регуляции миокарда. В связи с этим нужно отметить, что хорошо известно

защитное действие АЦХ на кардиомиоциты в условиях ишемии, поэтому периодически предпринимаются попытки использовать естественные парасимпатические кардиотропные воздействия в терапевтических целях. К примеру, были предложены пути применения карбаматного ингибитора ацетилхолинэстеразы пиридостигмина для терапии хронических ишемических состояний (Castro et al, 2004; Zimerman et al, 2010). Поэтому выяснение механизмов и источников выделения АЦХ в миокарде представляет значительную практическую ценность.

1.5. Основные положения, выносимые на защиту

1. АЦХ способен выделяться неквантовым (невезикулярным) способом из окончаний постганглионарных парасимпатических нейронов в предсердном миокарде крысы.

2. В миокарде взрослых крыс АЦХ также может выделяться невезикулярным путем из кардиомиоцитов.

3. Неквантовая секреция АЦХ в миокарде является регулируемым процессом, по крайней мере, она может подавляться норадреналином и оксидом азота.

4. В миокарде плодов крысы, находящихся на стадии 19-21 дня внутриутробного развития, неквантовая секреция является единственным способом выделения АЦХ из окончаний парасимпатических постганглионарных нейронов.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

История изучения АЦХ как одного из наиболее важных соединений в организме берет начало в середине позапрошлого столетия. В 40-х годах 19 века Дюбуа-Реймонд предложил гипотезу, согласно которой нервное окончание выделяет возбуждающее вещество, вызывающее сокращение мышцы (Du Bois-Reymond, 1849). С другой стороны, в 1845 г. братья Вебер установили, что достаточно сильное раздражение блуждающего нерва останавливает сердцебиения, а более слабое его раздражение снижает частоту сокращений сердца, при этом они, разумеется, не предполагали, что описанные эффекты опосредуются ацетилхолином (АЦХ), или каким-либо другим веществом, выделяющимся из парасимпатических окончаний. В 1892 году Лэнгли предположил, что синаптическая передача в вегетативных ганглиях млекопитающих имеет химическую природу, а не электрическую (Langley and Anderson, 1892). Эти, а также некоторые другие гипотезы послужили отправной точкой на пути изучения синаптических процессов в организме.

Однако только в 1921 году Отто Леви в классическом эксперименте на сердце лягушки впервые продемонстрировал прямые доказательства химической природы передачи сигнала в вегетативных синапсах сердца. Позднее было выяснено, что роль этого передатчика играет АЦХ. В работе 1936 года Дейл и его сотрудники доказали, что стимуляция двигательных нервов, иннервирующих скелетную мускулатуру, вызывает освобождение АЦХ (Dale et al., 1936).

В настоящее время в литературе представлены многочисленные сведения о роли АЦХ в опосредовании нервно-мышечной передачи, вегетативной регуляции внутренних органов, в функционировании центральной нервной системы. Достижения современной физиологии и молекулярной биологии помогли выявить основные молекулярные механизмы секреции медиаторов, в том числе АЦХ. В настоящее время хорошо изучен квантовый способ секреции АЦХ, когда молекулы медиатора, хранящиеся в синаптических везикулах, высвобождаются в синаптическую щель в виде порций-квантов за счет экзоцитоза этих везикул. С другой стороны, на сегодняшний день имеется много данных о неквантовом пути высвобождения медиатора из нервных окончаний. Данный тип секреции давно показан в нервно-мышечных синапсах скелетной мускулатуры, однако механизмы этого явления исследованы слабо.

Еще меньше сведений имеется о неквантовой секреции АЦХ в вегетативных синапсах. Этот круг вопросов рассматривается в обзоре литературы. В первой части обзора рассмотрены структурные и функциональные аспекты холинергической иннервации сердца, а также жизненный цикл АЦХ от синтеза медиатора до его ферментативного разложения

ацетилхолинэстеразой (АЦХ-Э) с уточнением особенностей секреции и эффектов АЦХ в сердце. Во второй части мы подробнее рассматриваем известные сведения о феномене неквантовой секреции АЦХ и механизмах ее регуляции.

2.1. Экстракардиальные и интракардиальные влияния

В контексте рассмотрения различных кардиорегуляторных механизмов важно учитывать двухступенчатый характер осуществления контроля работы сердца. С одной стороны, регуляция сердечной деятельности осуществляется за счет местных, интракардиальных, механизмов, в основе которых лежит функционирование ганглиев внутрисердечной нервной системы. По сути, эти ганглии являются местами локализации парасимпатических постганглионарных нейронов и различных вспомогательных клеток (см. ниже). Интракардиальные ганглии широко распространены в ткани сердца, а отростки входящих в их состав нейронов охватывают множество сердечных структур, участвуя в формировании своеобразной сети, известной также как внутрисердечное нервное сплетение (ВНСп). Надо отметить, что ВНСп представляет собой сложную систему, включающую помимо принимающих внешние сигналы парасимпатических постганглионарных нейронов еще и регуляторный компонент, представленный отростками симпатических постганглионарных нейронов, интернейронами и внутренними сенсорными (афферентными) нейронами (см. ниже). Таким образом, проведение внешних сигналов и осуществление местной регуляции деятельности сердца реализуются во многом благодаря работе внутрисердечной нервной системы.

С другой стороны, контроль сердечной функции осуществляется за счет экстракардиальных механизмов, реализация которых определяется работой нейронов вегетативной нервной системы. Парасимпатический компонент вегетативной системы чрезвычайно важен для осуществления экстракардиального контроля работы сердца. В работах Ваи11еу1сшз и коллег было показано, что у млекопитающих экстракардиальные нервные волокна контактируют с нейронами внутрисердечных ганглиев, лежащих в основании сердца, в области входа и выхода магистральных венозных (легочный синус, легочный ствол) и артериальных (аорта) сосудов сердца (Вай11еу1сш8 е1 а1., 2004; Вай11еу1сш5 е1 а1., 2005). Таким образом, вегетативные нейроны, контактирующие с клетками ВНСп, способны не только проводить внешние сигналы от высших центров, но и модулировать работу ганглионарных клеток. Согласно данным Ричардсона и коллег, окончания нейронов, дающих проекции на интракардиальные ганглии, имеют тенденцию быть

иммунореактивными к гипофизарному активирующему аденилатциклазу полипептиду (РАСАР) и холинацетилтрансферазе (ХАТ) (Richardson et al., 2003). По-видимому, они могут считаться парасимпатическими преганглионарными нейронами. Присутствие РАСАР в этих нейронах дает основания считать, что этот регуляторный пептид выделяется из окончаний парасимпатических преганглионаров и способен модулировать холинергическую нейропередачу на преганглионарном уровне (Richardson et al., 2003). Таким образом, экстракардиальная система способна обеспечивать изменение работы интракардиальной системы и через неё влиять на работу сердца.

Принимая во внимание важность интракардиальной системы, а также ее посредническую роль между экстракардиальной нервной системой и сердцем, рассмотрим далее некоторые аспекты иннервации сердца, ультраструктуру и локализацию ганглиев внутрисердечного нервного сплетения, химический профиль отдельных клеток, составляющих интракардиальные ганглии.

2.1.1. Интракардиальные ганглии

2.1.1.1. Пре- и постнатальное развитие внутрисердечных ганглиев

Внутрисердечное нервное сплетение у млекопитающих играет очень важную роль в регуляции целого ряда функций сердца. По сути, ВНСп представляет собой скопления внутрисердечных ганглиев, соединенных друг с другом тонкими комиссурами и, соответственно, функционирующих как единая сеть.

В ряде исследований, проведенных на сердце взрослых млекопитающих с применением метода иммуногистохимии, было показано, что интракардиальные ганглии расположены по большей части в суправентрикулярной области, особенно плотно концентрируясь вокруг главных артериальных и венозных сосудов (Richardson et al., 2003; Batulevicius et al., 2004; Batulevicius et al., 2005). Локализация этих ганглиев в основании сердца представляется не случайной и, по-видимому, связана с развитием иннервации сердца еще в эмбриогенезе.

Как было показано ранее на сердце цыпленка, формирование внутрисердечной системы сердца включает в себя несколько основных стадий. Сначала клетки-предшественники сердечных ганглиев (нейробласты) мигрируют в область сердца и агрегируют с образованием кластеров клеток. Затем скопления нейробластов способны дифференцироваться в морфологически и функционально различные типы клеток внутрисердечных ганглиев, о которых будет рассказано далее. Впоследствии вплоть до момента вылупления цыпленка

происходит созревание этих ганглиев (Baptista and Kirby, 1997). Согласно ряду работ, в процессе эмбрионального развития в сердце млекопитающих прослеживается похожая схема формирования внутрисердечного нервного сплетения. Далее рассмотрим ее более подробно.

В исследовании, проведенном на сердце крыс, было показано, что уже на 12 день эмбрионального развития ветви вагуса и симпатические волокна обнаруживают вблизи полых вен и аорты. Следуя по магистральным сосудам, вегетативные нервные волокна прорастают к основанию сердца (Gomez, 1958). В это же время, недалеко от места вхождения в сердце экстракардиальных нервов впервые появляются кластеры незрелых нейробластов - своего рода предшественники внутрисердечных ганглиев (Gomez, 1958). На 14 день эмбрионального развития нейробласты концентрируются в многочисленные группы, формируя небольшую сеть из внутрисердечных ганглиев, расположенную субэпикардиально в основании правого предсердия вблизи легочных сосудов (Gomez, 1958). Далее, на 15 день в эмбриональном сердце крысы становятся видимыми постганглионарные волокна внутрисердечного нервного сплетения, прорастающие в область синусного узла и разрастающиеся между кардиомиоцитами. В то же время на дорзальной поверхности правого желудочка и предсердия субэпикардиальный плексус с нейробластами дает начало другой группе ганглиев, локализованных вблизи коронарного синуса в стенке предсердия. Их постганглионарные волокна ветвятся в предсердном миокарде, а на 16 день разрастаются в область межпредсердной перегородки. Ганглии, локализованные вблизи коронарного синуса, дают многочисленные проекции в миокард желудочков, а также в область атриовентрикулярного узла (Gomez, 1958). К моменту рождения крысы иннервация сердца становится более обширной и плотной, а внутрисердечные ганглии дифференцируются, увеличиваются в размерах и количественно. В сердце морской свинки рост числа ганглиев в некоторых отделах сердца наблюдается и после рождения в течение продолжительного времени. Так, в исследовании, проведенном на молодых (3-4 недели) и взрослых (18-24 месяца) морских свинках, было показано, что с возрастом количество внутрисердечных ганглиев значительно увеличивается в дорзальных регионах левого и правого предсердия, однако в остальных областях сердца значимых возрастных различий в количестве ганглиев не наблюдалось (Batulevicius et al., 2005).

Отметим, что в отличие от внутрисердечной нервной системы цыпленка (Baptista and Kirby, 1997), созревание нейронов интракардиальных ганглиев крысы и приобретение ими специфического нейрохимического профиля происходит только после рождения. В первую неделю постнатального развития крыс наблюдается созревание нейронов в ганглиях, локализованных в области межпредсердной перегородки (Horackova et al., 2000). Было

показано, что большая их часть имеет иммунореактивность к ферменту тирозингидроксилазе (ТН), что свидетельствует о приобретении нейронами норадренергического фенотипа. С возрастом количество этих нейронов постепенно снижается. Другая группа нейрональных клеток, обнаруженных в области межпредсердной перегородки в первую неделю развития, обладала иммунореактивностью к холинацетилтрансферазе, что свидетельствует о становлении холинергического профиля этих нейронов (Horackova et al., 2000). Пептидергической специализации внутрисердечных нейрональных структур у крысы в первые две недели постнатального развития не наблюдалось. С возрастом иммунореактивность на различные медиаторы обнаруживается в ганглиях, прилегающих к основанию полых вен, легочных вен и области атриовентрикулярного узла (Horackova et al., 2000). Полное созревание внутрисердечной нервной системы крыс происходит на третьей неделе постнатального развития. Спустя четыре недели после рождения в сердце крыс появляются первые признаки формирования пептидергической иннервации. Так, в стенках предсердий недалеко от атриовентрикулярного узла обнаруживают небольшие группы нейронов, иммунореактивных к вазоактивному интестинальному пептиду (VIP), часть этих нейронов в дополнение к VIP обладает холинергическим профилем (Horackova et al., 2000). А некоторые внутрисердечные норадренергические нейроны обнаруживают иммунореактивность к нейропептиду Y (NPY). Кроме того, на пятой неделе развития появляются нейроны, содержащие субстанцию Р (SP) (Horackova et al., 2000). Таким образом, только спустя месяц после рождения происходит полное становление внутрисердечной нервной системы крыс и функциональная дифференциация отдельных ее компонентов (подробнее об этом см. главу 2.1.1.3).

2.1.1.2. Локализация внутрисердечных ганглиев и их проекции

Проведенные гистологические исследования распределения внутрисердечных ганглиев в ткани сердца свидетельствуют о достаточно общих принципах их локализации у разных млекопитающих. Сердечные ганглии расположены преимущественно эпикардиально, не заходя в миокард, реже - субэпикардиально (Pardini et al., 1987; Armour et al., 1997; Pauza et al., 2000; Batulevicius et al., 2004; Batulevicius et al., 2005). В исследовании, проведенном на сердце морской свинки, было продемонстрировано, что немногочисленные внутрисердечные ганглии могут располагаться эндокардиально в области межпредсердной перегородки и, в меньшей степени, в области межжелудочковой перегородки (Batulevicius et al., 2005).

У большинства млекопитающих, как правило, внутрисердечные ганглии не обнаруживаются ниже предсердий и атриовентрикулярной борозды. Наибольшая плотность их распределения приходится преимущественно на предсердные структуры - область синоатриального узла, основание полых вен и легочных вен, межпредсердную перегородку, а также область атриовентрикулярного узла и ушков предсердий (Baptista and Kirby, 1997; Richardson et al., 2003; Batulevicius et al., 2004; Batulevicius et al., 2005).

В сравнительном гистологическом исследовании Pardini и коллег было продемонстрировано наличие в сердце крысы четырех основных групп внутрисердечных ганглиев. Скопления ганглиев располагались следующим образом: в области между полой веной и аортой; в верхней части межпред сер дной перегородки; в области левого предсердия; в области между нижней частью межпредсердной перегородки и правого предсердия (Pardini et al., 1987). Две последних группы ганглиев могли также захватывать область непосредственно вблизи атриовентрикулярного узла.

Несомненно, особое внимание многие исследователи уделяют внутрисердечным ганглиям предсердий. Действительно, повышенный интерес к данной области можно объяснить тесным соседством отдельных ганглиев и клеток синоатриального узла. В исследовании Richardson и коллег, проведенном с использованием метода иммуногистохимического окрашивания на фермент ХАТ, было продемонстрировано субэпикардиальное расположение предсердных ганглиев крысы, формирующих сплетение вокруг входа легочных вен (Richardson et al., 2003). Это сплетение включало в себя три-четыре крупных ганглия, насчитывающих несколько сотен нейронов в каждом, а также некоторое количество более мелких ганглиев. Данные интракардиальные ганглии были соединены между собой тонкими нервными волокнами, образуя нечто вроде замкнутого кольца, огибающего область вхождения легочных вен в сердце (Richardson et al., 2003). Подобные межганглионарные соединения, реализуемые при помощи нервных волокон или интернейронов, отмечаются также в предсердных отделах сердца человека и кошки (Armour et al., 1997; Pauza et al., 2000; Gray et al., 2004). Все перечисленные данные позволяют предполагать, что интракардиальные ганглии внутри одного кластера представляют собой не дискретные единицы, а функционально-связанные компоненты. С другой стороны, существуют свидетельства в пользу функциональной независимости внутрисердечных ганглиев, принадлежащих разным пространственно-локализованным кластерам. Так, например, в серии экспериментов Pardini и коллеги проводили инъекцию флуоресцентного красителя Fast blue в левый или правый желудочек сердца крысы, исследуя затем ретроградный транспорт метки в тела ганглионарных нейронов и определяя таким способом

источник иннервации желудочков (Pardini et al., 1987). Оказалось, что левый желудочек иннервируется ганглионарными нейронами, лежащими преимущественно вблизи левого предсердия, а также вблизи межпред сер дной перегородки. Правый желудочек иннервируется преимущественно нейронами межпредсердной перегородки, а также, в меньшей степени, ганглионарными нейронами левого и правого предсердия. Интересно отметить, что ткань желудочков не получала каких-либо проекций из ганглиев, расположенных в области аорты и полой вены (Pardini et al., 1987). Полученные данные позволяют предполагать наличие в сердце крыс дискретных групп внутрисердечных ганглиев, постганглионарные нейроны которых избирательно иннервируют отдельные сердечные структуры.

Четыре группы ганглиев, описанные выше, дают многочисленные проекции на различные отделы сердца. Это достигается за счет формирования отростками ганглионарных нейронов обширной сети. В ряде исследований, проведенных на сердце крыс, морских свинок и человека было продемонстрировано, что отдельные группы ганглиев формируют четко обособленные сплетения (плексусы), которые в совокупности часто рассматриваются как внутрисердечное нервное сплетение (ВНСп) (Pauza et al., 2000; Batulevicius et al., 2004; Batulevicius et al., 2005). Рассмотрим их подробнее.

В области вхождения в сердце магистральных вен располагается особое нервное сплетение в основании сердца (NPCH, nerve plexus of cardiac hilum). Оно образовано отростками экстракардиальных нейронов и скоплениями ганглиев, локализованных в левой и правой части основания сердца и связанных между собой тонкими комиссурами (Batulevicius et al., 2004; Batulevicius et al., 2005). Внутрисердечные нервные волокна от этого сплетения (NPCH) дают проекции в различные эпикардиальные регионы, формируя там так называемые субплексусы (subplexuses) (см. рис.1). Так, например, скопление ганглиев правой части этого сплетения (NPCH) дает начало вентральному и дорзальному субплексусу правого предсердия (VRAS, ventral right atrial subplexus; DRAS, dorsal right atrial subplexus). Нервы вентрального субплексуса (VRAS) простираются от основания сердца к атриовентрикулярной борозде и ветвятся в вентральной стенке правого предсердия и в правом ушке (Pauza et al., 2000; Batulevicius et al., 2004; Batulevicius et al., 2005). В свою очередь, нервы дорзального субплексуса (DRAS) обнаруживаются в дорзальной и латеральной стенках правого предсердия и в правом ушке. Кроме того, волокна этого сплетения обнаруживают в области синусного узла (Pauza et al., 2000; Batulevicius et al., 2004; Batulevicius et al., 2005). Если говорить о ганглиях, расположенных в левой части сплетения в основании сердца (NPCH), то они дают начало вентральному субплексусу левого предсердия (VLAS, ventral left atrial subplexus) и левому дорзальному субплексусу (LDS, left dorsal subplexus). Нервные волокна

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Бородинова, Анастасия Александровна, 2013 год

7. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Нейрохимия / И.П. Ашмарин (и др.) под ред. И.П. Ашмарина, П.В. Стукалова. М.: Изд-во Инст. биомед. химии РАМН, 1996. 470 с.

2. Абрамочкин Д.В., Бородинова А.А., Никольский Е.Е., Розенштраух Л.В. Модуляция оксидом азота интенсивности неквантовой секреции ацетилхолина в миокарде правого предсердия крысы // Биологические мембраны. - 2012. - Т.29 (4). - С. 1-7.

3. Абрамочкин Д.В., Сухова Г.С., Розенштраух Л.В. Особенности регуляции сердечной деятельности у некоторых млекопитающих // Кардиология. - 2006. - Т.46 (5). - С.50-53.

4. Абрамочкин Д.В., Сухова Г.С. МЗ-холинорецепторы в сердце млекопитающих // Успехи физиологических наук. - 2009. - Т.40(1). - С. 16-27.

5. Данилов А.Ф., Иванов Ю.Я. Механизм блокады и восстановления нервно-мышечной передачи под действием армина в экспериментах на кошках // Фармакол. Токсикол. - 1972. -Т.35 (5). - С.571-575.

6. Маломуж А.И., Никольский Е.Е. Неквантовая секреция ацетилхолина из двигательных нервных окончаний: молекулярный механизм, физиологическая роль, регуляция // Нейрофизиология. - 2007. - Т.39 (4-5). - С.352-363.

7. Никольский Е.Е., Воронин В.А. Температурная зависимость процессов спонтанного квантового и неквантового освобождения медиатора из двигательных нервных окончаний мыши // Нейрофизиология. - 1986. - Т. 18 (3). - С.361-367.

8. Нуруллин Л. Ф., Абрамочкин Д. В., Тарасова Н. В., Розенштраух Л. В., Никольский Е. Е. Эндо- и экзоцитоз везикул в интрамуральных нервных волокнах правого предсердия крысы // ДАН. - 2009. - Т.428. (4). - С.570-573.

9. Abramochkin D.V., Borodinova А.А., Rosenshtraukh L.V., Nikolsky Е.Е. Both neuronal and non-neuronal acetylcholine takes part in non-quantal acetylcholine release in the rat atrium // Life Sciences. - 2012. - V.91 (21-22). - P.1023-1026.

10. Abramochkin D.V., Nurullin L.F., Borodinova A.A., Tarasova N.V., Sukhova G.S., Nikolsky E.E., Rosenshtraukh L.V. Non-quantal release of acetylcholine from parasympathetic nerve terminals in the right atrium of rats // Exp Physiol. - 2010. - V.95 (2). - P.265-273.

11. Aloyo V.J., Mcllvain H.B., Bhavsar Y.H., Roberts J. Characterization of norepinephrine accumulation by a crude synaptosomal-mitochondrial fraction isolated from rat heart // Life Sci. -1991.-V.48 (13). - P.1317-1324.

12. Antonov S.M., Magazanik L.G. Intense non-quantal release of glutamate in an insect neuromuscular junction // Neurosci Lett. - 1988. - V.93 (2-3). - P.204-208.

13. Armour J.A., Murphy D.A., Yuan B.X., Macdonald S., Hopkins D.A. Gross and microscopic anatomy of the human intrinsic cardiac nervous system // Anat Rec. - 1997. - V.247 (2). - P.289-298.

14. Atienza F., Jalife J. Reentry and atrial fibrillation // Heart Rhythm. - 2007. - V.4 (3 Suppl). -P.13-16.

15. Azevedo E.R., Parker J.D. Parasympathetic control of cardiac sympathetic activity: normal ventricular function versus congestive heart failure // Circulation. - 1999. - V.100 (3). - P.274-279.

16. Baptista C.A., Kirby M.L. The cardiac ganglia: cellular and molecular aspects // Kaohsiung J Med Sci. - 1997. - V.13 (1). - P.42-54.

17. Batulevicius D., Pauziene N., Pauza D.H. Key anatomic data for the use of rat heart in electrophysiological studies of the intracardiac nervous system // Medicina. - 2004. - V.40 (3). -P.253-259.

18. Batulevicius D., Pauziene N., Pauza D.H. Architecture and age-related analysis of the neuronal number of the guinea pig intrinsic cardiac nerve plexus // Ann Anat. - 2005. - V.187 (3). -P.225-243.

19. Bean B.P., Nowycky M.C., Tsien R.W. Beta-adrenergic modulation of calcium channels in frog ventricular heart cells // Nature. - 1984. - V.307 (5949). - P.371-375.

20. Benkirane S., Arbilla S., Langer S.Z. Phenylethylamine-induced release of noradrenaline fails to stimulate alpha 1-adrenoceptors modulating [3H]-acetylcholine release in rat atria, but activates alpha 2-adrenoceptors modulating [3H]-serotonin release in the hippocampus // Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. - 1986. - V.334 (2). - P. 149-155.

21. Berger U.V., Carter R.E., Coyle J.T. The immunocytochemical localization of N-acetylaspartyl glutamate, its hydrolysing enzyme NAALADase, and the NMDAR-1 receptor at a vertebrate neuromuscular junction // Neurosci. - 1995. - V.64. - P.847-850.

22. Bibevski S., Zhou Y., Mcintosh J.M., Zigmond R.E., Dunlap M.E. Functional nicotinic acetylcholine receptors that mediate ganglionic transmission in cardiac parasympathetic neurons // J Neurosc. - 2000. - V.20 (13). - P.5076-5082.

23. Black S.A., Ribeiro F.M., Ferguson S.S., Rylett R.J. Rapid, transient effects of the protein kinase C activator phorbol 12-myristate 13-acetate on activity and trafficking of the rat high-affinity choline transporter // Neuroscience. - 2010. - V. 167 (3). - P.765-773.

24. Blakely R.D., Robinson M.B., Thompson R.C., Coyle J.T. Hydrolysis of the brain dipeptide N-acetyl-L-aspartyl-L-glutamate: subcellular and regional distribution, ontogeny, and the effect of lesions on N-acetylated-alphalinked acidic dipeptidase activity // J Neurochem. - 1988. - V.50 (4). -P.1200-1209.

25. Bon S., Vigny M., Massoulie J. Asymmetric and globular forms of acetylcholinesterase in mammals and birds // Proc Natl Acad Sci U. S. A. - 1979. - V.76 (6). - P.2546-2550.

26. Booij L.H. Neuromuscular transmission and its pharmacological blockade. Part 1: Neuromuscular transmission and general aspects of its blockade // Pharm World Sci. - 1997. - V.19 (1). - P.1-12.

27. Bristow M.R., Minobe W., Rasmussen R., Hershberger R.E., Hoffman B.B. Alpha-1 adrenergic receptors in the nonfailing and failing human heart // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 1988. -V.247 (3). - P.1039-1045.

28. Brodde O.E., Bruck H., Leineweber K., Seyfarth T. Presence, distribution and physiological function of adrenergic and muscarinic receptor subtypes in the human heart // Basic Res Cardiol. -

2001.-V.96 (6). - P.528-538.

29. Brodde O.E., Bruck H., Leineweber K. Cardiac adrenoceptors: physiological and pathophysiological relevance // J Pharmacol Sci. - 2006. - V.100 (5). - P.323-337.

30. Brodde O.E., Khamssi M., Zerkowski H.R. Beta-adrenoceptors in the transplanted human heart: unaltered beta-adrenoceptor density, but increased proportion of beta 2-adrenoceptors with increasing posttransplant time // Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. - 1991. - V.344 (4). -P.430-436.

31. Brodde O.E., Michel M.C. Adrenergic and muscarinic receptors in the human heart // Pharmacol Rev. - 1999. - V.51 (4). - P.651 -689.

32. Bucchi A., Baruscotti M., Robinson R.B., DiFrancesco D. Modulation of rate by autonomic agonists in SAN cells involves changes in diastolic depolarization and the pacemaker current // J Mol Cell Cardiol. - 2007. - V.43 (1). - P.39-48.

33. Bukharaeva E.A., Salakhutdinov R.I., Vyskocil F., Nikolsky E.E. Spontaneous quantal and non-quantal release of acetylcholine at mouse endplate during onset of hypoxia // Physiol Res. - 2005. -V.54 (2). - P.251-255.

34. Bullens R.W., O'Hanlon G.M., Wagner E., Molenaar P.C., Furukawa K., Furukawa K., Plomp J.J., Willlison H.J. Complex gangliosides at the neuromuscular junction are membrane receptors for autoantibodies and botulinum neurotoxin but redundant for normal synaptic function // J Neurosc. -

2002. - V.22 (16). - P.6876-6884.

35. Burnstock G. Physiology and pathophysiology of purinergic neurotransmission // Physiol Rev. - 2007. - V.87 (2). - P.659-797.

36. Busch A.E., Quester S., Ulzheimer J.C., Waldegger S., Gorboulev V., Arndt P., Lang F., Koepsell H. Electrogenic properties and substrate specificity of the polyspecific rat cation transporter rOCTl // J Biol Chem. - 1996. - V.271 (51). - P.32599-32604.

37. Busch A.E., Karbach U., Miska D., Gorboulev V., Akhoundova A., Volk C., Arndt P., Ulzheimer J.C., Sonders M.S., Baumann C., Waldegger S., Lang F., Koepsell H. Human neurons express the polyspecific cation transporter hOCT2, which translocates monoamine neurotransmitters, amantadine, and memantine // Mol Pharmacol. - 1998. - V.54 (2). - P.342-352.

38. Cassidy M., Neale J.H. N-acetylaspartylglutamate catabolism is achieved by an enzyme on the cell surface of neurons and glia //Neuropeptides. - 1993. - V.24 (5). - P.271-278.

39. Castro R.R., Serra S.M., Porphirio G., Mendes F.S., Oliveira L.P., Nobrega A.C. Pyridostigmine reduces QTc interval during recovery from maximal exercise in ischemic heart disease // Int J Cardiol. - 2006. - V.107 (1). - P.138-139.

40. Chavez J., Vargas M.H., Cruz-Valderrama J.E., Montano L.M. Non-quantal release of acetylcholine in guinea-pig airways: role of choline transporter // Exp Physiol. - 2011. - V.96 (4). -P.460-467.

41. Cheng Z., Powley T.L., Schwaber J.S., Doyle F.J. 3rd. Vagal afferent innervation of the atria of the rat heart reconstructed with confocal microscopy // J Comp Neurol. - 1997. - V.381 (1). - P.l-17.

42. Chiba T., Yamauchi A. On the fine structure of the nerve terminals in the human myocardium // Z Zellforsch Mikrosk Anat. - 1970. - V.108 (3). - P.324-338.

43. Cho H., Hwang J.Y., Kim D., Shin H.S., Kim Y., Earm Y.E., Ho W.K. Acetylcholine-induced phosphatidylinositol 4,5- bisphosphate depletion does not cause short-term desensitization of G protein-gated inwardly rectifying K+ current in mouse atrial myocytes // J Biol Chem. - 2002. -V.277 (31). - P.27742-27747.

44. Choate J.K., Klemm M., Hirst G.D. Sympathetic and parasympathetic neuromuscular junctions in the guinea-pig sino-atrial node // J. Auton. Nerv. Syst. - 1993. - V.44 (1). - P. 1-16.

45. Colliei B., Kwok Y.N., Weiner S.A. Increased acetylcholine synthesis and release following presynaptic activity in a sympathetic ganglion // J Neurochem. - 1983. - V.40 (1). - P.91-98.

46. Cochilla A.J., Angleson J.K., Betz W.J. Monitoring secretory membrane with FM1-43 fluorescence // Annu Rev Neurosci. - 1999. - V.22. - P. 1-10.

47. Corsetti V., Mozzetta C., Biagioni S., Augusti Tocco G., Tata A.M. The mechanisms and possible sites of acetylcholine release during chick primary sensory neuron differentiation // Life Sci. -2012.-V.91 (15-16).-P.783-788.

48. Cunha R.A., Sebastiao A.M. Adenosine and adenine nucleotides are independently released from both the nerve terminals and the muscle fibres upon electrical stimulation of the innervated skeletal muscle of the frog // Pflugers Arch. - 1993. - V.424 (5-6). - P.503-510.

49. Dale H.H., Feldberg W., Vogt M. Release of acetylcholine at voluntary motor nerve endings // J Physiol. - 1936. - V.86 (4). - P.353-380.

50. Dascal N. Signalling via the G protein-activated K+ channels // Cell Signal. - 1997. - V.9 (8). - P.551-573.

51. De Jaco A., Ajmone-Cat M.A., Baldelli P., Carbone E., Augusti-Tocco G., Biagioni S. Modulation of acetylcholinesterase and voltage-gated Na(+) channels in choline acetyltransferase-transfected neuroblastoma clones // J Neurochem. - 2000. - V.75 (3). - P.1123-1131.

52. Dhein S., Van Koppen C.J., Brodde O.E. Muscarinic receptors in the mammalian heart // Pharmacol Res. - 2001. - V.44 (3). - P.161-182.

53. DiFrancesco D., Tortora P. Direct activation of cardiac pacemaker channels by intracellular cyclic AMP // Nature. - 1991. - V.351 (6322). - P. 145-147.

54. DiFrancesco D., Tromba C. Muscarinic control of the hyperpolarizing-activated current, if, in rabbit sino-atrial node myocytes // J Physiol (Lond.). - 1988. - V.405. - P.493-510.

55. Drew G.M. Pharmacological characterization of the presynaptic alpha-adrenoceptors regulating cholinergic activity in the guinea-pig ileum // Br J Pharmacol. - 1978. - V.64 (2). - P.293-300.

56. Dolezal V., Tucek S. The synthesis and release of acetylcholine in normal and denervated rat diaphragms during incubation in vitro // J Physiol. - 1983. - V.334. - P. 461-474.

57. Dolezal V., Tucek S. Effects of tetrodotoxin, Ca2+absence, d-tubocurarine and vesamicol on spontaneous acetylcholine release from rat muscle // J Physiol. - 1992. - V.458. - P.1-9.

58. Dolezal V., Vyskocil F., Tucek S. Decrease of the spontaneous non-quantal release of acetylcholine from the phrenic nerve in botulinum-poisoned rat diaphragm // Pflugers Arch. - 1983. -V.397 (4).-P.319-322.

59. Doxey J.C., Roach A.G. Presynaptic alpha-adrenoreceptors; in vitro methods and preparations utilised in the evaluation of agonists and antagonists // J Auton Pharmacol. - 1980. - V.l (1). - P.73-99.

60. Du Bois-Reymond E. Untersuchungen uber thierische // Electricitat. - 1849. - V.2. - P.425-430.

61. Dumont M., Lemaire S. Inhibitory effects of dynorphin A on noradrenaline uptake by cardiac synaptosomal-mitochondrial fractions // J Cardiovasc Pharmacol. - 1995. - V.25 (4). - P.518-523.

62. Dumont M., Roy D., Lemaire S. Nonexocytotic noradrenaline release from rat cardiac synaptosomal-mitochondrial fractions // J Cardiovasc Pharmacol. - 1997. - V.30 (3). - P.302-308.

63. Edwards C., Dolezal V., Tucek S., Zemkova H., Vyskocil F. Is an acetylcholine transport system responsible for non-quantal release of acetylcholine at the rodent myoneural junction // Proc Natl Acad Sci USA. - 1985. - V.82 (10). - P.3514-3518.

64. Eglen R.M. Muscarinic receptor subtypes in neuronal and non-neuronal cholinergic function // Auton Autacoid Pharmacol. - 2006. - V.26 (3). - P.219-233.

65. Eiden L.E. The cholinergic gene locus // J Neurochem. - 1998. - V.70 (6). - P.2227-2240.

66. Elghozi J.L., Julien C. Sympathetic control of short-term heart rate variability and its pharmacological modulation // Fundal Clin Pharmacol. - 2007. - V.21 (4). - P.337-347.

67. Ellison J.P., Hibbs R.G. An ultrastructural study of mammalian cardiac ganglia // J Mol Cell Cardiol. - 1976,-V.8 (2).-P.89-101.

68. Erecinska M. The neurotransmitter amino acid transport systems. A fresh outlook on an old problem // Biochem Pharm. - 1987. - V.36 (21). - P.3547-3555.

69. Fatt P., Katz B. Spontaneous subthreshold activity at motor nerve endings // J Physiol. - 1952. - V.l 17 (1). - P. 109-128.

70. Featherstone D.E., Rushton E., Broadie K. Developmental regulation of glutamate receptor field size by nonvesicular glutamate release // Nat Neurosci. - 2002. - V.5 (2). - P. 141-146.

71. Fedida D., Shimoni Y., Giles W.R. A novel effect of norepinephrine on cardiac cells is mediated by al-adrenoreceptors // Am J Physiol. - 1989. - V.256 (5 Pt 2). - P. 1500-1504.

72. Felder C.C. Muscarinic acetylcholine receptors: signal transduction through multiple effectors // FASEB J. - 1995. - V.9 (8). - P.619-625.

73. Ferguson S.M., Blakely R.D. The choline transporter resurfaces: new roles for synaptic vesicles? // Mol Interv. - 2004. - V.4 (1). - P.22-37.

74. Ferguson S.M., Savchenko V., Apparsundaram S., Zwick M., Wright J., Heilman C.J., Yi H., Levey A.I., Blakely R.D. Vesicular localization and activity-dependent trafficking of presynaptic choline transporters // J Neurosci. - 2003. - V.23 (30). - P.9697-9709.

75. Finkelstein A., Rubin L.L., Tzeng M.C. Black widow spider venom: effect of purified toxin on lipid bilayer membranes// Science. - 1976. - V.l 93 (4257). - P. 1009-1011.

76. Fischmeister R., Hartzell H.C. Mechanism of action of acetylcholine on calcium current in single cells from frog ventricle // J Physiol. - 1986. - V.376. - P. 183-202.

77. Flavahan N.A., McGrath J.C. alpha 1-adrenoceptor activation can increase heart rate directly or decrease it indirectly through parasympathetic activation // Br J Pharmacol. - 1982. - V.77 (2). -P.319-328.

78. Forsgren S., Moravec M., Moravec J. Catecholamine-synthesizing enzymes and neuropeptides in rat heart epicardial ganglia; an immunohistochemical study // Histochem J. - 1990. - V.22 (12). - P.667-676.

79. Foster K.A., Bigalke H., Aoki K.R. Botulinum neurotoxin-from laboratory to bedside // Neurotox Res. - 2006. - V.9 (2-3). - P. 133-140.

80. Franco D., Moorman A.F., Lamers W.H. Expression of the cholinergic signal-transduction pathway components during embryonic rat heart development // Anat Rec. - 1997. - V.248 (1). -P.110-120.

81. Fujinaga Y. Transport of bacterial toxins into target cells: pathways folloved by cholera toxin and botulinum progenitor toxin // J Biochem. - 2006. - V.140 (2). - P. 155-160.

82. Galkin A.V., Giniatullin R.A., Mukhtarov M.R., Svandova I., Grishin S.N., Vyskocil F. ATP but not adenosine inhibits nonquantal acetylcholine release at the mouse neuromuscular junction // Eur J Neurosci. - 2001. - V.13 (11). - P.2047-2053.

83. Gauthier C., Tavernier G., Charpentier F., Langin D., Le Marec H. Functional beta3-adrenoceptor in the human heart // J Clin Invest. - 1996. - V.98 (2). - P.556-562.

84. Giniatullin A.R., Giniatullin R.A. Dual action of hydrogen peroxide on synaptic transmission at the frog neuromuscular junction // J Physiol. - 2003. - V.552 (1). - P.283-293.

85. Giniatullin A.R, Darios F., Shakirzyanova A., Davletov B., Giniatullin R. SNAP25 is a presynaptic target for the depressant action of reactive oxygen species on transmitter release // J Neurochem. - 2006. - V.98 (6). - P. 1789-1797.

86. Giniatullin R.A., Sokolova E.M. ATP and adenosine inhibit transmitter release at the frog neuromuscular junction through distinct presynaptic receptors // Br J Pharm. - 1998. - V.124 (4). -P.839-844.

87. Goiuin A.L. Diversity of mammalian voltage-gated sodium channels // Ann N Y Acad Sci. -1999. - V.868. - P.38-50.

88. Gomez H. The development of the innervation of the heart in the rat embryo // Anat Rec. -1958. - V. 130 (1). - P.53-71.

89. Gorboulev V., Ulzheimer J.C., Akhoundova A., Ulzheimer-Teuber I., Karbach U., Quester S., Baumann C., Lang F., Busch A.E., Koepsell H. Cloning and characterization of two human polyspecific organic cation transporters // DNA Cell Biol. - 1997. - V.16 (7). - P.871-881.

90. Govier W.C., Mosal N.C., Whittington P., Broom A.H. Myocardial alpha and beta adrenergic receptors as demonstrated by atrial functional refractory-period changes // J Pharmacol Exp Ther. -1966.-V.154 (2). - P.255-263.

91. Gray A.L., Johnson T.A., Ardell J.L., Massari V.J. Parasympathetic control of the heart. II. A novel interganglionic intrinsic cardiac circuit mediates neural control of heart rate // J Appl Physiol.

- 2004. - V.96 (6). - P.2273-2278.

92. Grozdanovic Z., Gossrau R. Co-localization of nitric oxide synthase I (NOS I) and NMDA receptor subunit 1(NMDAR-1) at the neuromuscular junction in rat and mouse skeletal muscle // Cell Tissue Res. - 1998. - V.291 (1). - P.57-63.

93. Hall Z.W. Multiple forms of acetylcholinesterase and their distribution in endplate and non-endplate regions of rat diaphragm muscle // J Neurobiol. - 1973. - V.4 (4). - P.343-361.

94. Hamilton B.R., Smith D.O. Autoreceptor-mediated purinergic and cholinergic inhibition of motor nerve terminal calcium currents in the rat // J Physiol. - 1991. - V.432. - P.327-341.

95. Hartzell H.C. Distribution of muscarinic acetylcholine receptors and presynaptic nerve terminals in amphibian heart // J Cell Biol. - 1980. - V.86 (1). - P.6-20.

96. Harvey R.D., Belevych A.E. Muscarinic regulation of cardiac ion channels // Brit J Pharmacol. -2003.-V.139 (6).-P. 1074-1084.

97. Harvey R.D., Clark C.D., Hume J.R. Chloride current in mammalian cardiac myocytes. Novel mechanism for autonomic regulation of action potential duration and resting membrane potential // J Gen Physiol. - 1990,-V.95 (6). - P. 1077-1102.

98. Harvey R.D., Hume J.R. Autonomic regulation of a chloride current in heart // Science. - 1989 (a). - V.244 (4907). - P.983- 985.

99. Harvey R.D., Hume, J.R. Autonomic regulation of delayed rectifier K+ current in mammalian heart involves G proteins // Am J Physiol. - 1989 (b). - V.257 (3 Pt 2). - P.818-823.

100. Hasan W., Smith P.G. Modulation of rat parasympathetic cardiac ganglion phenotype and NGF synthesis by adrenergic nerves // Auton Neurosci. - 2009. - V.145 (1-2). - P.17-26.

101. Hirst G.D., Choate J.K., Cousins H.M., Edwards F.R., Klemm M.F. Transmission by postganglionic axons of the autonomic nervous system: the importance of the specialized neuroeffector junction//Neuroscience. - 1996. - V.73 (1). -P.7-23.

102. Hoover D.B., Ganóte C.E., Ferguson S.M., Blakely R.D., Parsons R.L. Localization of cholinergic innervation in guinea pig heart by immunohistochemistry for high-affinity choline transporters // Cardiovasc Res. - 2004. - V.62 (1). - P. 112-121.

103. Hoover D.B., Isaacs E.R., Jacques F., Hoard J.L., Page P., Armour J.A. Localization of multiple neurotransmitters in surgically derived specimens of human atrial ganglia // Neuroscience.

- 2009. - V. 164 (3). - P. 1170-1179.

104. Horackova M., Slavikova J., Byczko Z. Postnatal development of the rat intrinsic cardiac nervous system: a confocal laser scanning microscopy study in whole-mount atria // Tissue Cell. -2000. - V.32 (5). - P.377-388.

105. Horiuchi Y., Kimura R., Kato N., Fujii T., Seki M., Endo T., Kato T., Kawashima K. Evolutional study on acetylcholine expression // Life Sci. - 2003. - V.72 (15). - P. 1745-1756.

106. Israel M., Lesbats B., Meunier F.M., Stinnakre J. Postsynaptic release of adenosine triphosphate induced by single impulse transmitter action // Proc R Soc Lond B Biol Sci. - 1976. -V.193 (1113). - P.461-468.

107. Israel M., Lesbats B., Bruner J. Glutamat and acetylcholine release from cholinergic nerve terminals, a calcium control of the specificity of the release mechanism // Neurochem Int. - 1993. -V.22 (1). - P.53-58.

108. Iwamoto H., Blakely R.D., De Felice L.J. Na+, C1-, and pH dependence of the human choline transporter (hCHT) in Xenopus oocytes: the proton inactivation hypothesis of hCHT in synaptic vesicles // J Neurosci. - 2006. - V.26 (39). - P.9851 -9859.

109. Jabaudon D., Shimamoto K., Yasuda-Kamatani Y., Scanziani M., Gahwiler B.H., Gerber U. Inhibition of uptake unmasks rapid extracellular turnover of glutamate of nonvesicular origin // Proc Natl Acad Sci U S A. - 1999. - V.96 (15). - P.8733-8738.

110. Jakob H., Nawrath H., Rupp J. Adrenoceptor-mediated changes of action potential and force of contraction in human isolated ventricular heart muscle // Br J Pharmacol. - 1988. - V.94 (2). -P.584-590.

111. Johnson E.M., Cantor E., Douglas J.R. Biochemical and functional evaluation of the sympathectomy produced by the administration of guanethidine to newborn rats // J Pharmacol Exp Ther. - 1975. - V.193 (2). - P.503-512.

112. Jo S.A., Higgins D.M., Berman H.A. Regulation of acetylcholinesterase in avian heart. Studies on ontogeny and the influence of vagotomy // Circ Res. - 1992. - V.70 (4). - P.633-643.

113. Kakinuma Y., Akiyama T., Okazaki K., Arikawa M., Noguchi T., Sato T. A non-neuronal cardiac cholinergic system plays a protective role in myocardium salvage during ischemic insults // PLoS One. - 2012. - V.7 (11). e50761.

114. Kakinuma Y., Akiyama T., Sato T. Cholinoceptive and cholinergic properties of cardiomyocytes involving an amplification mechanism for vagal efferent effects in sparsely innervated ventricular myocardium // FEBS J. - 2009. - V.276 (18). - P.5111-5125.

115. Kalandakanond S., Coffield J.A. Cleavage of intracellular substrates of botulinum toxins A, C and D in a mammalian target tissue // J Pharmacol Exp Ther. - 2001. - V.296 (3). - P.749-755.

116. Kamsler A., Segal M. Hydrogen peroxide as a diffusible signal molecule in synaptic plasticity // Mol Neurobiol. - 2004. - V.29 (2). - P. 167-178.

117. Kanazawa H., Ieda M., Kimura K., Arai T., Kawaguchi-Manabe H., Matsuhashi T., Endo J., Sano M., Kawakami T., Kimura T., Monkawa T., Hayashi M., Iwanami A., Okano H., Okada Y., Ishibashi-Ueda H., Ogawa S., Fukuda K. Heart failure causes cholinergic transdifferentiation of cardiac sympathetic nerves via gpl30-signaling cytokines in rodents // J Clin Invest. - 2010. - V.120 (2). - P.408-421.

118. Katz B., Miledi R. Transmitter leakage from motor nerve endings // Proc R Soc Lond B Biol Sci. - 1977. - V.196 (1122). - P.59-72.

119. Kawada T., Yamazaki T., Akiyama T., Uemura K., Kamiya A., Shishido T., Mori H., Sugimachi M. Effects of Ca2+ channel antagonists on nerve stimulation-induced and ischemia-induced myocardial interstitial acetylcholine release in cats // Am J Physiol Heart Circ Physiol. -2006.-V.291 (5). - P.H2187-H2191.

120. Kawashima K., Fujii T. Extraneuronal cholinergic system in lymphocytes // Pharmacol Ther. - 2000. - V.86 (1). - P.29-48.

121. Kawashima K., Misawa H., Moriwaki Y., Fujii Y.X., Fujii T., Horiuchi Y., Yamada T., Imanaka T., Kamekura M. Ubiquitous expression of acetylcholine and its biological functions in life forms without nervous systems // Life Sci. - 2007. - V.80 (24-25). - P.2206-2209.

122. Kekuda R., Prasad P.D., Wu X., Wang H., Fei Y.J., Leibach F.H., Ganapathy V. Cloning and functional characterization of a potential-sensitive, polyspecific organic cation transporter (OCT3) most abundantly expressed in placenta//J Biol Chem. - 1998.-V.273 (26). - P.15971-15979.

123. Khvotchev M., Sudchov T.C. alpha-latrotoxin triggers transmitter release via direct insertion into the presynaptic plasma membrane // EMBO J. - 2000. - V.l9 (13). - P.3250-3262.

124. Klemm M., Hirst G.D., Campbell G. Structure of autonomic neuromuscular junctions in the sinus venosus of the toad // J Auton Nerv Syst. - 1992. - V.39 (2). - P. 139-150.

125. Koepsell H., Schmitt B.M., Gorboulev V. Organic cation transporters // Rev Physiol Biochem Pharmacol. - 2003. - V.l50. - P.36-90.

126. Koepsell H., Lips K., Volk C. Polyspecific organic cation transporters: structure, function, physiological roles, and biopharmaceutical implications // Pharm Res. - 2007. - V.24 (7). - P.1227-1251.

127. Konopka L.M., Merriam L.A., Hardwick J.C., Parsons R.L. Aminergic and peptidergic elements and actions in a cardiac parasympathetic ganglion // Can J Physiol Pharmacol. - 1992. -V.70. - P.S32-S43.

128. Kovoor P., Wickman K., Maguire C.T., Pu W., Gehrmann J., Berul C.I., Clapham D.E. Evaluation of the role of I(KACh) in atrial fibrillation using a mouse knockout model // J Am Coll Cardiol. - 2001. - V.37 (8). - P.2136-2143.

129. Kubista H., Kosenburger K., Mahlknecht P., Drobny H., Boehm S. Inhibition of transmitter release from rat sympathetic neurons via presynaptic Ml muscarinic acetylcholine receptors // Br J Pharmacol. - 2009. - V.156 (8). - P. 1342-1352.

130. Kuncova J., Slavikova J., Reischig J. Distribution of vasoactive intestinal polypeptide in the rat heart: effect of guanethidine and capsaicin // Ann Anat. - 2003. - V.185 (2). - P.153-161.

131. Kurz T., Richardt G., Hagl S., Seyfarth M., Schomig A. Two different mechanisms of noradrenaline release during normoxia and simulated ischemia in human cardiac tissue // J Mol Cell Cardiol. - 1995. - V.27 (5). - P.l 161-1172.

132. Kurz T., Richardt G., Hagl S., Schomig A. Nonexocytotic noradrenaline release induced by pharmacological agents or anoxia in human cardiac tissue // Naunyn-Schmiedeberg's Arch Pharmacol. - 1996. - V.354 (1). - P.7-16.

133. Kwak B.R., Jongsma H.J. Regulation of cardiac gap junction channel permeability and conductance by several phosphorylating conditions // Mol Cell Biochem. - 1996. - V.157 (1-2). -P.93-99.

134. Lamhonwah A.M., Wong J., Tam C., Mai L., Tein I. Organic cation/carnitine transporter family expression patterns in adult murine heart // Pathol Res Pract. - 2009. - V.205 (6). - P.395-402.

135. Langley J.N., Anderson N.K. The action of nicotin on the ciliary ganglion and on the endings of the third cranial nerve // J Physiol. - 1892. - V.13. - P.460-468.

136. Laszlo G.S., Rosoff M.L., Amieux P.S., Nathanson N.M. Multiple promoter elements required for leukemia inhibitory factor-stimulated M2 muscarinic acetylcholine receptor promoter activity // J Neurochem. - 2006. - V.98 (4). - P. 1302-1315.

137. Legay C. Why so many forms of acetylcholinesterase? // Microsc Res Tech. - 2000. - V.49 (1). - P.56-72.

138. Liang B.T., Frame L.H., Molinoff P.B. Beta 2-adrenergic receptors contribute to catecholamine-stimulated shortening of action potential duration in dog atrial muscle // PNAS. -1985.-V.82 (13).-P.4521-4525.

139. Li K., He H., Li C., Sirois P., Rouleau J.L. Myocardial a 1-adrenoceptor: inotropic effect and physiologic and pathologic implications // Life Sci. - 1997. - V.60 (16). - P. 1305-1318.

140. Lindmar R., Loffelholz K., Muscholl E. A muscarinic mechanism inhibiting the release of noradrenaline from peripheral adrenergic nerve fibres by nicotinic agents // Br J Pharmacol Chemother. - 1968. - V.32 (2). - P.280-294.

141. Lips K.S., Pfeil U., Haberberger R.V., Kummer W. Localisation of the high-affinity choline transporter-1 in the rat skeletal motor unit // Cell Tissue Res. - 2002. - V.307 (3). - P.275-280.

142. Lopez-Alonso E., Canaves J., Arribas M., Casanova A., Marsal J., Gonzalez-Ros J.M., Solsona C. Botulinum toxin type A inhibits Ca+2- dependent transport of acetylcholine in reconstituted giant liposomes made from presynaptic membranes from cholinergic nerve terminals // Neurosci Lett. - 1995. - V.196 (1-2). - P.37-40.

143. Lowenstein P.R., Coyle J.T. Rapid regulation of [3H] hemicholinium-3 binding sites in the rat brain//Brain Res. - 1986,-V.381 (1). - P.191-194.

144. Luff S.E., McLachlan E.M. Frequency of neuromuscular junctions on arteries of different dimensions in the rabbit, guinea pig and rat // Blood Vessels. - 1989. - V.26 (2). - P.95-106.

145. Lunt G.G., Olsen R.W. Comparative invertebrate neurochemistry // Cornell University Press - Ithaca- New York. - 1988. - P.42-89.

146. Magazanik L.G., Fedorova I.M. Modulatory role of adenosine receptors in insect motor nerve terminals // Neurochem Res. - 2003. - V.28 (3-4). - P.617-624.

147. Malomouzh A.I., Mukhtarov M.R., Nikolsky E.E., Vyskocil F., Lieberman E.M., Urazaev A.K. Glutamate regulation of non-quantal release of acetylcholine in the rat neuromuscular junction // J Neurochem. - 2003. - V.85 (1). - P.206-213.

148. Malomouzh A.I., Nikolsky E.E., Lieberman E.M., Sherman J.A., Lubischer J.L., Grossfeld R.M., Urazaev A.Kh. Effect of N-acetylaspartylglutamate (NAAG) on non-quantal and spontaneous quantal release of acetylcholine at the neuromuscular synapse of rat // J Neurochem. - 2005. - V.94 (1). - P.257-267.

149. Malomouzh A.I., Mukhtarov M.R., Nikolsky E.E., Vyskocil F. Muscarinic Ml acetylcholine receptors regulate the non-quantal release of acetylcholine in the rat neuromuscular junction via NO-dependent mechanism // J Neurochem. - 2007. - V.l02 (6). - P.2110-2117.

150. Malomouzh A.I., Arkhipova S.S., Nikolsky E.E., Vyskocil F. Immunocytochemical demonstration of M(l) muscarinic acetylcholine receptors at the presynaptic and postsynaptic membranes of rat diaphragm endplates // Physiol Res. - 2011 (a). - V.60 (1). - P.185-188.

151. Malomouzh A.I., Nikolsky E.E., Vyskocil F. Purine P2Y receptors in ATP-mediated regulation of non-quantal acetylcholine release from motor nerve endings of rat diaphragm // Neurosci Res. - 2011 (b). - V.71 (3). - P.219-225.

152. Manabe N., Foldes F.F., Torocsik A., Nagashima H., Goldiner P.L., Vizi E.S. Presynaptic interaction between vagal and sympathetic innervation in the heart: modulation of acetylcholine and noradrenaline release // J Auton Nerv Syst. - 1991 - V.32 (3). - P.233-242.

153. Marques M. J., Pereira E. C., Minatel E., Neto H. S. Nerve-terminal and Schwann-cell response after nerve injury in the absence of nitric oxide // Muscle Nerve. - 2006. - V.34 (2). - P.225-231.

154. Martyn J. A., Fagerlund M.J., Eriksson L.I. Basic principles of neuromuscular transmission // Anaesthesia. - 2009. - Suppl. 1. - P. 1 -9.

155. Marvin W.J. Jr., Hermsmeyer K., McDonald R.I., Roskoski L.M., Roskoski R. Jr. Ontogenesis of cholingergic innervation in the rat heart // Circ Res. - 1980. - V.46 (5). - P.690-695.

156. Marx S.O., Kurokawa J., Reiken S., Motoike H., D'Armiento J., Marks A.R., Kass R.S. Requirement of a macromolecular signaling complex for beta adrenergic receptor modulation of the KCNQ1-KCNE1 potassium channel // Science. - 2002. - V.295 (5554). - P.496-499.

157. Massoulie J., Pezzementi L., Bon S., Krejci E., Vallette F.M. Molecular and cellular biology of cholinesterases // Prog Neurobiol. - 1993.-V.41 (1). - P.31-91.

158. Massoulie J. The origin of the molecular diversity and functional anchoring of cholinesterases // Neurosignals. - 2002. - V. 11 (3). - P. 130-143.

159. Matsuo A., Bellier J.P., Nishimura M., Yasuhara O., Saito N., Kimura H. Nuclear choline acetyltransferase activates transcription of a high-affinity choline transporter // J Biol Chem. - 2011. -V.286 (7). - P.5836-5845.

160. McDonough P.M., Wetzel G.T., Brown J.H. Further characterization of the presynaptic alpha-1 receptor modulating [3H] ACh release from rat atria // J Pharmacol Exp Ther. - 1986. - V.238 (2). - P.612-617.

161. McGrattan P.A., Brown J.H., Brown O.M. Parasympathetic effecis on in vivo rat nearl can be regulated through an alpha 1-adrenergic receptor // Circ Res. - 1987. - V.60 (4). - P.465-471.

162. Meister B., Arvidsson U., Zhang X., Jacobsson G., Villar M.J., Hokfelt T. Glutamate transporter mRNA and glutamate-like immunoreactivity in spinal motoneurones // Neuroreport. -1993.-V.5 (3).-P.337-340.

163. Mitchell J.F., Silver A. The spontaneous release of acetylcholine from the denervated hemidiaphragms of the rat // J Physiol. - 1963. - V. 165 (1). - P. 117-129.

164. Montecucco C., Rossetto O., Schiavo G. Presynaptic receptor arrays for clostridial neurotoxins // Trends Microbiol. - 2004. - V.12 (10). - P.442-446.

165. Mukhtarov M.R., Vyskocil F., Urazaev A.K., Nikolsky E.E. Non-quantal acetylcholine release is increased after nitric oxide synthase inhibition // Physiol Res. - 1999 - V.48 (4). - P.315-317.

166. Mukhtarov M.R., Urazaev A.K., Nikolsky E.E., Vyskocil F. Effect of nitric oxide and NO synthase inhibition on nonquantal acetylcholine release in the rat diaphragm // Eur J Neurosci. - 2000.

- V.12 (3). - P.980-986.

167. Mullner C., Vorobiov D., Bera A.K., Uezono Y., Yakubovich D., Frohnwieser-Steinecker B., Dascal N., Schreibmayer W. Heterologous facilitation of G protein-activated K+ channels by P-adrenergic stimulation via cAMP-dependent protein kinase // J Gen Physiol. - 2000. - V.l 15 (5). -P.547-557.

168. Nakata K., Okuda T., Misawa H. Ultrastructural localization of high-affinity choline transporter in the rat neuromuscular junction: enrichment on synaptic vesicles // Synapse. - 2004. -V.53 (1). - P.53-56.

169. Neel D.S., Parsons R.L. Anatomical evidence for the interaction of sympathetic and parasympathetic neurons in the cardiac ganglion of Necturus // J Auton Nerv Syst. - 1986. - V.l5 (4). - P.297-308.

170. Nikolsky E.E., Oranska T.I., Vyskocil F. Non-quantal acetylcholine release in the mouse diaphragm after phrenic nerve crush and during recovery // Exp Physiol. - 1996 - V.81 (3). - P.341-348.

171. Nikolsky E.E., Voronin V.A., Oranska T.I., Vyskocil F. The dependence of non-quantal acetylcholine release on the choline-uptake system in the mouse diaphragm // Pflugers Arch. - 1991a.

- V.418 (1-2). - P.74-78.

172. Nikolsky E.E., Voronin V.A., Vyskocil F. Kinetic differences in the effect of calcium on quantal and non-quantal acetylcholine release at the murine diaphragm /'/' Neurosci Lett. - 1991b. -V.123 (2).-P. 192-194.

173. Nikolsky E.E., Zemkova H., Voronin V.A., Vyskocil F. Role of non-quantal acetylcholine release in surplus polarization of mouse diaphragm fibres at the endplate zone // J Physiol. - 1994. -V.477 (Pt 3). - P.497-502.

174. Nishimaru H., Restrepo C.E., Ryge J., Yanagawa Y., Kiehn O. Mammalian motor neurons corelease glutamate and acetylcholine at central synapses // Proc Natl Acad Sci USA. - 2005. - V. 102 (14). - P.5245-5249.

175. Oda Y. Choline acetyltransferase: the structure, distribution and pathologic changes in the central nervous system // Pathol Int. - 1999. - V.49 (11). - P.921-937.

176. Okuda T., Haga T., Kanai Y., Endou H., Ishihara T., Katsura I. Identification and characterization of the high-affinity choline transporter // Nat Neurosci. - 2000. - V.3 (2). - P. 120125.

177. Okuda T., Haga T. High-affinity choline transporter // Neurochem Res. - 2003. - V.28 (3-4).

- P.483-488.

178. Oliveira L., Correia-de-Sa P. Protein kinase A and Ca(v)l (LType) channels are common targets to facilitatory adenosine A2A and muscarinic Ml receptors on rat motoneurons // Neurosignals. - 2005. - V.14 (5). - P.262-272.

179. Ondicova K., Mravec B. Multilevel interactions between the sympathetic and parasympathetic nervous systems: a minireview // Endocr regul. - 2010. - V.44 (2). - P.69-75.

180. Ono K., Fozzard H.A., Hanck D.A. Mechanism of cAMP-dependent modulation of cardiac sodium channel current kinetics // Circ Res. - 1993. - V.72 (4). - P.807-815.

181. Ono K., Shibata S., Ijima T. Pacemaker mechanism of porcine sino-atrial node cells // J Smooth Muscle Res. - 2003. - V.39 (5). - P. 195-204.

182. Pappano A.J. Propranolol-insensitive effects of epinephrine on action potential repolarization in electrically driven atria of the guinea pig // J Pharmacol Exp Ther. - 1971. - V. 177 (1). - P. 85-95.

183. Pardini B.J., Patel K.P., Schmid P.G., Lund D.D. Location, distribution and projections of intracardiac ganglion cells in the rat // J Auton Nerv Syst. - 1987. - V.20 (2). - P.91-101.

184. Parsons R.L., Neel D.S., McKeon T.W., Carraway R.E. Organization of a vertebrate cardiac ganglion: a correlated biochemical and histochemical study // J Neurosci. - 1987. - V.7 (3). - P.837-846.

185. Parsons R.L., Neel D.S. Distribution of calcitonin gene-related peptide immunoreactive nerve fibers in the mudpuppy cardiac septum // J Auton Nerv Syst. - 1987. - V.21 (2-3). - P.135-143.

186. Paton W.D., Vizi E.S. The inhibitory action of noradrenaline and adrenaline on acetylcholine output by guinea-pig ileum longitudinal muscle strip // Br J Pharmacol. - 1969. - V.35 (1). - P.10-28.

187. Pauza D.H., Skripka V., Pauziene N., Stropus R. Morphology, distribution, and variability of the epicardiac neural ganglionated subplexuses in the human heart // Anat Rec. - 2000. - V.259 (4).

- P.353-382.

188. Pauziene N., Pauza D.H. Electron microscopic study of intrinsic cardiac ganglia in the adult human // Ann Anat. - 2003. - V.185 (2). - P. 135-148.

189. Phillips J.H. Dynamic aspects of chromaffin granule structure // Neurosci. - 1982. - V.7 (7).

- P.1595-1609.

190. Petrov A.M., Naumenko N.V., Uzinskaya K.V., Giniatullin A.R., Urazaev A.K., Zefirov A.L. Increased non-quantal release of acetylcholine after inhibition of endocytosis by methyl-[3-cyclodextrin: the role of vesicular acetylcholine transporter // Neuroscience. - 2011. - V. 186. - P. 112.

191. Pochini L., Scalise M., Galluccio M., Indiveri C. Regulation by physiological cations of acetylcholine transport mediated by human OCTN1 (SLC22A4). Implications in the non-neuronal cholinergic system // Life Sci. - 2012 (a). - V.91 (21-22). - P. 1013-1016.

192. Pochini L., Scalise M., Galluccio M., Pani G., Siminovitch K.A., Indiveri C. The human OCTN1 (SLC22A4) reconstituted in liposomes catalyzes acetylcholine transport which is defective in the mutant L503F associated to the Crohn's disease // Biochim Biophys Acta. - 2012 (b). - V. 1818 (3). - P.559-565.

193. Prado M.A., Reis R.A., Prado V.F., de Mello M.C., Gomez M.V., de Mello F.G. Regulation of acetylcholine synthesis and storage // Neurochem Int. - 2002. - V.41 (5). - P.291-299.

194. Rana O.R., Schauerte P., Kluttig R., Schroder J.W., Koenen R.R., Weber C., Nolte K.W., Weis J., Hoffmann R., Marx N., Saygili E. Acetylcholine as an age-dependent non-neuronal source in the heart // Auton Neurosc. - 2010. - V. 156 (1-2). - P.82-89.

195. Ribeiro A.J., Cunha R.A., Correia-de-Sa P., Sebastiao A.M. Purinergic regulation of acetylcholine release // Prog Brain Res. - 1996. - V. 109. - P.231 -241.

196. Ribeiro J. A., Sebastiao A.M. On the role, inactivation and origin of endogenous adenosine at the frog neuromuscular junction // J Physiol. - 1987. - V.384. - P.571-585.

197. Ribeiro J.A., Walker J. The effects of adenosine triphosphate and adenosine diphosphate on transmission at the rat and frog neuromuscular junctions // Br J Pharmacol. - 1975. - Y.54 (2). -P.213-218.

198. Richardson R.J., Grkovic I., Anderson C.R. Immunohisiochemical analysis of intracardiac ganglia of the rat heart // Cell Tissue Res. - 2003. - V.314 (3). - P.337-350.

199. Richardt D., Dendorfer A., Tolg R., Dominiak P., Richardt G. Inhibition of nonexocytotic norepinephrine release by desipramine reduces myocardial infarction size // Can J Physiol Pharmacol. - 2006. - V.84 (11). - P. 1185-1189.

200. Rodefeld M.D., Beau S.L., Schuessler R.B., Boineau J.P., Saffitz J.E. p-Adrenergic and muscarinic cholinergic receptor densities in the human sinoatrial node: Identification of a high P2-receptor density // J Cardiovasc Electrophysiol. - 1996. - V.7 (11). - P.1039-1049.

201. Rogart R.B. High-STX-affinity vs. low-STX-affinity Na+ channel subtypes in nerve, heart, and skeletal muscle // Ann N Y Acad Sci. - 1986. - V.479. - P.402-430.

202. Rosenshtraukh L., Danilo P., Jr, Anyukhovsky E.P., Steinberg S.F., Rybin V., Brittain-Valenti K., Molina-Viamonte V., Rosen M.R. Mechanisms for vagal modulation of ventricular repolarization and of coronary occlusion-induced lethal arrhythmias in cats // Circ Res. - 1994. - V.75 (4). - P.722-732.

203. Rosman Y., Makarovsky I., Bentur Y., Shrot S., Dushnitsky T., Krivoy A. Carbamate poisoning: treatment recommendations in the setting of a mass casualties event // Am J Emerg Med.

- 2009. - V.27 (9). - P.l 117-1124.

204. Rosoff M.L., Wei J., Nathanson N.M. Isolation and characterization of the chicken m2 acetylcholine receptor promoter region: induction of gene transcription by leukemia inhibitory factor and ciliary neurotrophic factor // Proc Natl Acad Sci USA.- 1996. - V.93 (25). - P. 14889-14894.

205. Rossetto O., Rigoni M., Montecucco C. Different mechanism of blockade of neuroexocytosis by presynaptic neurotoxins // Toxicol Lett. - 2004. - V.149 (1-3). - P.91-101.

206. Rotundo R.L. Expression and localization of acetylcholinesterase at the neuromuscular junction // J Neurocytol. - 2003. - V.32 (5-8). - P.743-766.

207. Santos D.A., Salgado A.I., Cunha R.A. ATP is released from nerve terminals and from activated muscle fibres on stimulation of the rat phrenic nerve // Neurosci Lett. - 2003. - V.338 (3).

- P.225-228.

208. Satin J., Kyle J.W., Chen M., Bell P., Cribbs L.L., Fozzard H.A., Rogart R.B. A mutant of TTX-resistant cardiac sodium channels with TTX-sensitive properties // Science. - 1992. - V.256 (5060). - P.1202-1205.

209. Scheibner J., Trendelenburg A.U., Hein L., Starke K., Blandizzi C. Alpha 2-adrenoceptors in the enteric nervous system: a study in alpha 2A-adrenoceptor-deficient mice // Br J Pharmacol. -2002. - V.135 (3). - P.697-704.

o 1 a c^u^-r/-^ n a a A a + C1 ry-fV^^ + ^^r /-noi'r. //

z,iu, ounavu vj., iviattcwii ivi.5 ivnjmcvuv_/v_u ixs^unjivjAina ai issuing n^ui utaut) ludid // i n)iiui

Rev. - 2000. - V.80 (2). - P.717-766.

211. Schomig A., Dart A.M., Dietz R., Mayer E., Kiibler W. Release of endogenous catecholamines in the ischemic myocardium of the rat. Part A: Locally mediated release // Circ Res.

- 1984,- V.55 (5). - P.689-701.

212. Schomig A., Fischer S., Kurz T., Richardt G., Schomig E. Nonexocytotic release of endogenous noradrenaline in the ischemic and anoxic rat heart: Mechanism and metabolic requirements // Circ Res. - 1987. - V.60 (2). - P. 194-205.

213. Shakirzyanova A. V., Malomouzh A. I., Naumenko N. V., Nikolsky E. E. The effect of hydrogen peroxide on spontaneous quantal and nonquantal acetylcholine release from rat motor nerve endings // Dokl Biol Sciences. - 2009. - V.424. - P. 18-20.

214. Shi H., Wang H., Yang B., Xu D., Wang Z. The M3 receptor-mediated K+ current (Ikm3), a Gq protein-coupled K+ channel // J Biol Chem. - 2004. - V.279 (21). - P.21774-21778.

215. Silinsky E.M., Redman R.S. Synchronous release of ATP and neurotransmitter within milliseconds of a motor nerve impulse in the frog // J Physiol. - 1996. - V.492 (Pt 3). - P.815-822.

216. Silman I., Sussman J.L. Acetylcholinesterase: 'classical' and 'non-classical' functions and pharmacology // Curr Opin Pharmacol. - 2005. - V.5 (3). - P.293-302.

217. Simon J.R., Kuhar M.J. High affinity choline uptake: ionic and energy requirements // J Neurochem. - 1976. - V.27 (1). - P.93-99.

218. Sokolova E., Grishin S., Shakirzyanova A., Talantova M., Giniatullin R. Distinct receptors and different transduction mechanisms for ATP and adenosine at the frog motor nerve endings // Eur J Neurosci. - 2003. - V.18 (5). - P. 1254-1264.

219. Stanley E.F., Drachman D. The effects of nerve sectionon the non-quantal release of Ach from the motor nerve terminal // Brain Research. - 1986. - V.365 (2). - P.289-292.

220. Starke K. Alpha sympathomimetic inhibition of adrenergic and cholinergic transmission in the rabbit heart // Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. - 1972. - V.274 (1). - P. 18-45.

221. Steinfath M., Chen Y.Y., Lavicky J., Magnussen O., Nose M., Rosswag S., Schmitz W., Scholz H. Cardiac al-adrenoceptor densities in different mammalian species // Br J Pharmacol. -1992. - V. 107 (1). - P. 185-188.

222. Stoop R., Poo M.M. Potentiation of transmitter release by ciliary neurotrophic factor requires somatic signaling // Science. - 1995. - V.267 (5198). - P.695-699.

223. Stoop R., Poo M.M. Synaptic modulation by neurotrophic factors: differential and synergistic effects of brain-derived neurotrophic factor and ciliary neurotrophic factor // J Neurosci. - 1996. -V.16 (10). - P.3256-3264.

224. Szatkowski M., Barbour B., Attwell D. Non-vesicular release of glutamate from glial cells by reversed electrogenic glutamate uptake // Nature. - 1990. - V.348 (6300). - P.443-446.

225. Terzic A., Puceat M., Vassort G., Vogel S.M. Cardiac al-adrenoceptors: an overview // Pharmacol Rev. - 1993. - V.45 (2). - P. 147-175.

226. Trautwein W., Cavalie A., Flockerzi V., Hofmarin F., Pelzer D. Modulation of calcium channel function by phosphorylation in guinea pig ventricular cells and phospholipid bilayer membranes//Circ Res. - 1987. - V.61 (4 Pt 2). - P. 17-23.

227. Trendelenburg A.U., Gomeza J., Klebroff W., Zhou H., Wess J. Heterogeneity of presynaptic muscarinic receptors mediating inhibition of sympathetic transmitter release: a study with M2- and M4-receptor-deficient mice // Br J Pharmacol. - 2003. - V.138 (3). - P.469-480.

228. Trendelenburg A.U., Meyer A., Wess J., Starke K. Distinct mixtures of muscarinic receptor subtypes mediate inhibition of noradrenaline release in different mouse peripheral tissues, as studied with receptor knockout mice // Br J Pharmacol. - 2005. - V.145 (8). - P.l 153-1159.

229. Tucek S. The synthesis of acetylcholine in skeletal muscles of the rat // J Physiol. - 1982. -V.322. - P.53-69.

230. Van der Kloot W. Loading and recycling of synaptic vesicles in the Torpedo electric organ and the vertebrate neuromuscular junction // Prog Neurobiol. - 2003. - V.71 (4). - P.269-303.

231. Vincenzi F.F., West T.C. Release of autonomic mediators in cardiac tissue by direct subthreshold electrical stimulation // J Pharmacol Exp Ther. - 1963. - V.141. - P.185-194.

232. Vizi E.S., Vyskocil F. Changes in total and quantal release of acetylcholine in the mouse diaphragm during the inhibition of membrane ATPase // J Physiol. - 1979. - V.286. - P. 1-14.

233. Volders P.G., Stenql M., van Opstal J.M., Gerlach U., Spatjens R.L., Beekman J.D., Sipido K.R., Vos M.A. Probing the contribution of Iks to canine ventricular repolarization // Circulation. -2003. - V.107 (21). - P.2753-2760.

234. Vyas S., Bradford H.F. Co-release of acetylcholine, glutamate and taurine from synaptosomes of Torpedo'electric organ //Neurosci. Lett. - 1987. - V.82. - P.58-64.

235. Vyskocil F., Illes P. Non-quantal release of transmitter at mouse neuromuscular junction and its dependence on the activity of Na+-K+ ATP-ase // Pflugers Arch. - 1977. - V.370 (3). - P.295-297.

236. Vyskocil F., Malomouzh A.I., Nikolsky E.E. Non-quantal acetylcholine release at the neuromuscular junction // Physiol Res. - 2009. - V.58 (6). - P.763-784.

237. Vyskocil F., Nikolsky E.E., Edwards C. An analysis of the mechanisms underlying the non-quantal release at the mouse neuromuscular junction //Neuroscience. - 1983. - V.9 (2). - P.429-435.

238. Vyskocil F., Nikolsky E.E., Zemkova H., Krusek J. The role of non-quantal release of acetylcholine in regulation of postsynaptic membrane electrogenesis /'/' J Physiol Paris. — 1995. — V.89 (3). - P.157-162.

239. Vyskocil F., Vrbova G. Non-quantal release of acetylcholine affects polyneuronal innervation on developing rat muscle fibres // Eur J Neurosci. - 1993. - V.5 (12). - P.1677-1683.

240. Waerhaug O., Ottersen O.P. Demonstration of glutamate-like immunoreactivity at rat neuromuscular junction by quantitative electron microscopic immunocytochemistry // Anat Embriol (Berl).- 1993,-V. 188 (5). - P.501-513.

241. Wang X., Halvorsen S.W. Reciprocal regulation of ciliary neurotrophic factor receptors and acetylcholine receptors during synaptogenesis in embryonic chick atria // J Neurosci. - 1998. - V.18 (18). - P.7372-7380.

242. Wang Y.G., Rechenmacher C.E., Lipsius S.L. Nitric oxide signaling mediates stimulation of L-type Ca2+ current elicited by withdrawal of acetylcholine in cat atrial myocytes // J Gen Physiol. -1998.-V.111 (1). - P.113-125.

243. Wang Z., Shi H., Wang H. Functional M3 muscarinic receptors in mammalian hearts // Brit J Pharmacol. - 2004. - V. 142 (3). - P.395-408.

244. Wellner-Kienitz M.C., Bender K., Pott L. Overexpression of beta 1 and beta 2 adrenergic receptors in rat atrial myocytes. Differential coupling to G protein-gated inward rectifier K(+) channels via G(s) and G(i)/o // J Biol Chem. - 2001. - V.276 (40). - P.37347-37354.

245. Wessler I., Kirkpatrick C.J., Racke K. Non-neuronal acetylcholine, a locally acting molecule, widely distributed in biological systems: expression and function in humans // Pharmacol Ther. -1998. - V.77 (1). - P.59-79.

246. Wessler I., Michel-Schmidt R., Dohle E., Kirkpatrick C.J. Release of acetylcholine from murine embryonic stem cells: effect of nicotinic and muscarinic receptors and blockade of organic cation transporter // Life Sci. - 2012. - V.91 (21-22). - P.973-976.

247. Wessler I., Roth E., Deutsch C., Brockerhoff P., Bittinger F., Kirkpatrick C.J., Kilbinger H. Release of non-neuronal acetylcholine from the isolated human placenta is mediated by organic cation transporters // Br J Pharmacol. - 2001. - V. 134 (5). - P.951-956.

248. Wetzel G.T., Brown J.H. Presynaptic modulation of acetylcholine release from cardiac parasympathetic neurons // Am J Physiol. - 1985. - V.248 (1 Pt 2). - P.H33-H39.

249. Wetzel G.T., Goldstein D., Brown J.H. Acetylcholine release from rat atria can be regulated through an alpha 1-adrenergic receptor // Circ Res. - 1985. - V.56 (5). - P.763-766.

250. Wikberg J.E. Differentiation between pre- and postjunctional alpha-receptors in guinea pig ileum and rabbit aorta // Acta Physiol Scand. - 1978. - V.103 (3). - P.225-239.

251. Wit A.L., Hoffman B.F., Rosen M.R. Electrophysiology and pharmacology of cardiac arrhythmias IX. Cardiac electrophysiologic effects of beta adrenergic receptor stimulation and blockade. Part C // Am Heart J. - 1975. - V.90. - P.795-803.

252. Wright E.M., Loo D.D., Panayotova-Heiermann M., Hirayama B.A., Turk E., Eskandari S., Lam J.T. Structure and function of the Na+/glucose cotransporter // Acta Physiol Scand Suppl. -1998. - V.643. - P.257-264.

253. Wright E.M., Turk E. The sodium/glucose cotransport family SLC5 // Pflugers Arch. - 2004. -V.447 (5). - P.510-518.

254. Wu X., George R.L., Huang W.; Wang H., Conway S.J., Leibach F.H., Ganapathy V. Structural and functional characteristics and tissue distribution pattern of rat OCTN1, an organic

cation transporter, cloned from placenta // Biochim Biophys Acta. - 2000. - V.1466 (1-2). - P.315-327.

255. Xiao R.P., Avdonin P., Zhou Y.Y., Cheng H., Akhter S.A., Eschenhagen T., Lefkowitz R.J., Koch W.J., Lakatta E. Coupling of (32-adrenoceptor to G, proteins and its physiological relevance in murine cardiac myocytes // Circ Res. - 1999. - V.84 (1). - P.43-52.

256. Xiao R.P., Zhang S.J., Chakir K., Avdonin P., Zhu W., Bond R.A. Enhanced G, signaling selectively negates p2-adrenergic receptor (AR), but not pi-AR-mediated positive inotropic effect in myocytes from failing rat hearts // Circulation. - 2003. - V.108 (13). - P.1633-1639.

257. Xi-Moy S.X., Randall W.C., Wurster R.D. Nicotinic and muscarinic synaptic transmission in canine intracardiac ganglion cells innervating the sinoatrial node // J Auton Nerv Syst. - 1993. - V.42 (3). - P.201-213.

258. Yamada T., Fujii T., Kanai T., Amo T., Imanaka T., Nishimasu H., Wakagi T., Shoun H., Kamekura M., Kamagata Y., Kato T., Kawashima K. Expression of acetylcholine (ACh) and ACh-synthesizing activity in archaea // Life Sci. - 2005. - V.77 (16). - P. 1935-1944.

259. Yamamura H.I., Snyder S.H. High affinity transport of choline into synaptosomes of rat brain //J Neurochem. - 1973.-V.21 (6). - P.1355-1374.

260. Yang H., Kunes S. Nonvesicular release of acetylcholine is required for axon targeting in the Drosophila visual system // Proc Natl Acad Sci USA.- 2004. - V. 101 (42). - P. 15213-15218.

261. Zemkova H., Vyskocil F. Effect of Mg on non-quantal acetylcholine release at the mouse neuromuscular junction //Neurosci Lett. - 1989. - V.103 (3). - P.293-297.

262. Zemkova H, Vyskocil F, Edwards C. The effects of nerve terminal activity on non-quantal release of acetylcholine at the mouse neuromuscular junction // J Physiol. - 1990. - V.423. - P.631-640.

263. Zhao Q.Y., Huang C.X., Liang J.J., Chen H., Yang B., Jiang H., Li G.S. Effect of vagal stimulation and differential densities of M2 receptor and Ikacii in canine atria // Int J Cardiol. - 2008. -V.126 (3). - P.352-358.

264. Zochodne D. W., Levy D. Nitric oxide in damage, disease and repair of the peripheral nervous system // Cell Mol Biol (Noisy-le-grand). - 2005. - V.51 (3). - P.255-267.

265. Zimerman L.I., Liberman A., Castro R.R., Ribeiro J.P., Nobrega A.C. Acute electrophysiologic consequences of pyridostigmine inhibition of cholinesterase in humans // Braz J Med Biol Res. - 2010. - V.43 (2). - P.211-216.

Автор выражает глубокую признательность академику РАН Розенштрауху Леониду Валентиновичу за разработку концепции данной работы и незаменимые методические рекомендации.

Автор выражает глубокую благодарность академику РАН Никольскому Евгению Евгеньевичу за разработку концепции данной работы и ценные методические рекомендации.

Автор искренне благодарит профессора кафедры физиологии человека и животных Тарасову Ольгу Сергеевну за всестороннюю помощь в период выполнения настоящей работы.

Автор выражает искреннюю признательность научному руководителю доценту Суховой Галине Сергеевне за всестороннюю поддержку в проведении этой работы.

Автор выражает глубокую благодарность научному руководителю Абрамочкину Денису Валерьевичу за помощь в проведении экспериментов и всестороннюю поддержку.

Автор искренне благодарит Нуруллина Лениза Фаритовича за помощь в проведении экспериментов с флуоресцентным красителем РМ1-43.

Автор благодарит коллектив кафедры физиологии человека и животных биологического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова за ценные советы и замечания.