Распределение синтазы оксида азота во внутрисердечных нервных ганглиях в норме и при ишемической болезни сердца у человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат биологических наук Шуклин, Андрей Викторович

• Шуклин, Андрей Викторович
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шуклин, Андрей Викторович

Список сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Общие сведения об иннервации сердца человека и экспериментальных животных.

1.1.1. Архитектоника иннервации сердца.

1.1.2. Топография и характеристика внутрисердечных холинергических ганглиев.

1.1.3. Нейрохимические маркеры внутрисердечных нейронов.

1.2. Краткая характеристика синтаз оксида азота.

1.3. Современные представления о локализации синтаз оксида азота в нервных клетках. Сайт-специфичность влияния N0.

1.4. Морфология нейронов, иммунореактивных к NOS, в сердце крысы.

1.5. Физиологическое значение синтаз оксида азота в вегетативных нейронах, иннервирующих сердце.

1.5.1. Значение NOS в парасимпатических нервных клетках и терминалях сердца.

1.5.2. Роль N0 для симпатических нервных волокон.

1.5.3. NO-ергическая модуляция центральных отделов вегетативной нервной системы.

1.5.4. Потенциальное биомедицинское значение N0S1, экспрессирующейся в интрамуральных ганглиях сердца.

1.6. Влияние гипертрофии, ишемии и физической нагрузки на экспрессию синтаз оксида азота в сердце.

Глава 2. Материал и методы.

2.1. Материал исследования.

• 2.2. Методы исследования.

2.2.1. Реагенты.

2.2.2. Локализация внутрисердечных ганглиев.

2.2.3. Окрашивание по Нисслю.

2.2.4. Определение АХЭ по методу Карновского - Руте.

2.2.5. Определение активности NADPH-диафоразы.

2.2.6. Иммуногистохимическое окрашивание.

2.2.7. Анализ препаратов, морфометрия и статистическая обработка данных.

Глава 3. Результаты собственных исследований.

3.1. Характеристика внутрисердечных ганглиев.

3.2. NADPH-диафораза во внутрисердечных ганглиях.

3.3. Иммуногистохимическое определение NOS 1 во внутрисердечных ганглиях человека.

3.4. Влияние ИБС на активность NADPH-d в ганглиях сердца человека

3.5. Окрашивание смежных срезов внутрисердечных ганглиев на NADPH-d, АХЭ, по Нисслю и гематоксилином-эозином.

Глава 4. Обсуждение результатов.

4.1. Организация нервных ганглиев у человека, кошки и крысы.

4.2. NADPH-d во внутрисердечных ганглиях в норме.

4.3. Иммуногистохимическое выявление NOS1 у человека.

4.4. Влияние ИБС на активность NADPH-d/NOS в ганглиях сердца человека.

4.5. Окрашивание смежных срезов внутрисердечных ганглиев на НАОРИСЬ АХЭ, по Нисслю и гематоксилином-эозином.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Распределение синтазы оксида азота во внутрисердечных нервных ганглиях в норме и при ишемической болезни сердца у человека»

Актуальность проблемы.

Как известно, в настоящее время заболевания сердечно-сосудистой системы являются наиболее часто встречающейся причиной смерти человека. Поэтому любые подходы к их лечению сейчас весьма актуальны. Современная фармакологическая терапия сердечно-сосудистых заболеваний имеет своей мишенью главным образом либо мышечные клетки сердца (блокаторы кальциевых каналов, сердечные гликозиды, р-блокаторы, нитраты), либо гуморальные системы регуляции сосудистого тонуса (ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента, нитраты), ф Перспективным, но недостаточно разработанным направлением в данной области, является воздействие на нервные сплетения сердца - естественную и сложноорганизованную систему активной регуляции его работы и трофики. Одной из предпосылок фармакологического воздействия на нервные клетки является знание их нейрохимической специализации.

Данная работа посвящена изучению фермента, продуцирующего один из важных мессенджеров внутрисердечных нейронов - оксида азота (N0). Благодаря способности проникать через мембрану, оксид азота способен выступать как внутри- (вторичный), так и межклеточный мессенджер, при ф этом малое время существования свободной молекулы в цитозоле [Ванин,

1998b] ограничивает зону его действия, что обеспечивает высокоспецифичность NO-ергической регуляции, даже в пределах одной клетки [Barouch et al., 2002; Herring et al., 2002; Patón et al., 2002; Mohan et al., 2004]. В качестве вторичного посредника оксид азота нарабатывается практически во всех типах клеток сердца [Champion et al., 2003; Massion et al., 2003], однако в нервных клетках, влияющих на работу органа в целом, роль

NOS представляется особенно важной в качестве мишени потенциального терапевтического воздействия. Недавние исследования как на культурах # клеток, так и in vivo, подтверждают, что основной вклад NO-ергического влияния на сердце происходит через внутрисердечные нервные структуры. Показано, что культивирование кардиомиоцитов совместно с нервными клетками увеличивает реактивность их сократимости к внесению доноров N0 [Horackova et al., 1995, 1996]. На органном уровне изменения ЧСС под действием ингибиторов NOS происходят в основном за счет модуляции выделения нейротрансмиттеров из симпатических и парасимпатических окончаний [Choate et al., 2001; Herring, Paterson, 2001; Herring et al., 2002; Mohan et al., 2000, 2004; Schwarz et al., 1995].

Отметим также, что влияние нитратсодержащих препаратов на деятельность сердца также связано с их воздействием на регуляторные каскады NO в нервных клетках [Мазур, 2003; Чазов, 2004].

Цель и задачи работы:

Целью настоящей работы является выявление синтазы оксида азота в нервных ганглиях сердца человека, изучение ее содержания и распределения в этих структурах в норме и при ишемической болезни сердца.

В работе были поставлены следующие задачи:

1. Выявить наличие NOS гистохимическим методом в ганглиях сердца человека и кошки, описать ее распределение и архитектонику NOS-содержащих нейронов.

2. Оценить размеры популяции NOS-содержащих нейронов в сердце человека в норме.

3. Иммуногистохимическим методом определить наличие NOS1 во внутрисердечных ганглиях человека.

4. Разработать количественный подход оценки активности NOS во внутрисердечных ганглиях.

5. Описать распределение синтазы оксида азота и количественно оценить ее содержание в ганглиях сердца человека в норме и при ИБС.

Научная новизна и теоретическое значение работы:

В работе впервые показано наличие NO-синтазы в нервных клетках сердца человека. Впервые описано распределение фермента в пре- и постганглионарном звене парасимпатического отдела вегетативной нервной системы. Описано также влияние ИБС на экспрессию NOS во внутрисердечных ганглиях. Согласно полученным данным, доля NOS-содержащих нейронов в сердце у человека превышает таковую у исследованных экспериментальных животных. Практическая значимость работы связана с потенциальным использованием нервных сплетений сердца в качестве мишени фармакологического воздействия с целью модуляции деятельности этого органа. Межвидовые различия и отсутствие NO-синтазы в преганглионарном звене у крысы являются важным субстратом для экспериментального тестирования фармакологических препаратов. Кроме того, разработан подход для селективной локализации нервных ганглиев в сердце человека, что позволяет уменьшить расход реактивов для гисто- и иммуногистохимических процедур.

На защиту выносятся следующие положения:

1. Во внутрисердечных ганглиях человека и кошки экспрессируется синтаза оксида азота.

2. Во внутрисердечных нейронах у человека NOS солокализована с ацетилхолинэстеразой (АХЭ).

3. При ишемической болезни сердца у человека, если не происходит дистрофических процессов, приводящих к поражению нервных клеток, во внутрисердечных ганглиях усиливается экспрессия NOS.

Структура и объем диссертации.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов, их обсуждения, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 34 рисунками, содержит 6 таблиц и 7 диаграмм. Диссертация изложена на 103 страницах, список литературы включает 191 источник.

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Шуклин, Андрей Викторович

Выводы

1. Во внутрисердечных ганглиях человека и кошки экспрессируется синтаза оксида азота и в отличие от крыс фермент содержится в перицеллюлярных аппаратах, окружающих ряд нервных клеток в сердце. Доля внутрисердечных нейронов, содержащих NOS, у человека в норме составляет около 40%.

2. В большинстве нейронов, входящих в состав интрамуральных нервных ганглиев сердца человека, экспрессируется NOS1 (нейрональная изоформа NOS).

3. Во внутрисердечных нейронах у человека NADPH-d/NOS солокализована с АХЭ. Таким образом, NOS-содержащие нейроны в сердце человека являются холинергическими и принадлежат парасимпатическому отделу вегетативной нервной системы.

4. При ишемической болезни сердца у человека, если не происходит дистрофических процессов, приводящих к поражению нервных клеток, во внутрисердечных ганглиях усиливается экспрессия NOS. В таких случаях NOS появляется в строме внутрисердечных ганглиев и увеличивается доля NADPH-d-позитивных клеток и слабо окрашенных перикарионов нейронов.

5. Окрашивание нервных структур по Нисслю крезиловым фиолетовым и толуидиновым синим на секционном материале не позволяют выявлять тела всех нервных клеток во внутрисердечных ганглиях.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Шуклин, Андрей Викторович, 2006 год

1. Капелько В.И. Регуляторная роль кислородных радикалов в миокардиальных клетках. Росс, физиол. ж. им. И.М. Сеченова, 2004, т. 90, №6, с. 681-692.

2. Колосов Н.Г., Хабарова А .Я. Структурная организация вегетативных ганглиев. JL, «Наука», 1978. 72 с.

3. Мазур H.A. Дисфункция эндотелия, монооксид азота и ишемическая болезнь сердца. Тер. арх., 2003, №3, с.84-86.

4. Марков Х.М. Оксид азота и сердечно-сосудистая система. Успехи физиол. наук, 2001, т.32, №3, с.49-65.

5. Охотин В.Е., Калиниченко С.Г., Дудина Ю.В. NO-ергическая трансмиссия и NO как объемный нейропередатчик. Влияние NO на механизмы синаптической пластичности и эпилептогенез. Успехи физиологических наук, 2002, т. 33, №2, с. 41-55.

6. Охотин В.Е., Куприянов В.В. Нейровазальные отношения в новой коре головного мозга человека. Морфология, 1996, т. 110, №4, с. 17-22.

7. Реутов В.П., Сорокина Е.Г., Охотин В.Е., Косицин Н.С. Циклические превращения оксида азота в организме млекопитающих. М.: Наука, 1997.- 156 с.

8. Реутов В.П., Сорокина Е.Г., Косицин Н.С., Охотин В.Е. Проблема оксида азота в биологии и медицине и принцип цикличности: ретроспективный анализ идей принципов и концепций. М: Едиториал УРСС, 2003.-96 с.

9. Сосунов A.A. Ультрастуктура малых гранулярных клеток в сердечных ганглиях. Арх. анат. гистологии, эмбриологии, 1980, т. 78, №3, с. 7581.

10. Тищенко О.В., Елисеева Е.В., Мотавкин П.А. Значение оксида азота в развитии гипертрофии сердца в условиях экспериментальной почечной гипертензии. Цитология, 2002, т. 44, № 3, с. 263-269.

11. Чазов Е.И. Вклад нарушений регуляторных механизмов в развитие сердечно-сосудистых патологий. Тер. арх., 1999, т. 71, №9, с. 8-12.

12. Швалев В.Н., Сосунов А.А., Гускн Г. Морфологические основы иннервации сердца. М. "Наука", 1992. -368 с.

13. Aimi Y, Fujimura М, Vincent SR, Kimura H. Localization of NADPH-diaphorase-containing neurons in sensory ganglia of the rat. J Comp Neurol, 1991, v. 306:382-392.

14. Aoki C, Fenstemaker S, Lubin M, Go CG. Nitric oxide synthase in the visual cortex of monocular monkeys as revealed by light and electron microscopic immunocytochemistry. Brain Res. 1993, v. 620(1):97-113.

15. Arany I, Brysk MM, Brysk H, Tyring SK. Induction of iNOS mRNA by interferon-gamma in epithelial cells is associated with growth arrest and differentiation. Cancer Lett. 1996; 110(l-2):93-6.

16. Ardell JL, Randall WC. Selective vagal innervation of sinoatrial and atrioventricular nodes in canine heart. Am J Physiol 1986;251H:764-73.

17. Armour JA, Murphy DA, Yuan B-X, Macdonald S, Hopkins DA. Gross and microscopic anatomy of the human intrinsic cardiac nervous system. The anatomical record, 1997, v. 247, p. 289-298.

18. Armour JA, Smith FM, Losier AM, Ellenberger HH, Hopkins DA. Modulation of intrinsic cardiac neuronal activity by nitric oxide donors induces cardiodynamic changes. Am J Physiol, 1995, v.268, №2 Pt 2, p. R403-R413.

19. Arnhold S, Andressen C, Bloch W, Mai JK, Addicks K. NO synthase-II is transiently expressed in embryonic mouse olfactory receptor neurons. Neurosci Lett. 1997; 229(3): 165-8.

20. Arora RC, Waldmann M, Hopkins DA, Armour JA. Porcine intrinsic cardiac ganglia. Anat Rec, 2003, v. 271A, №1, p. 249-258.

21. Arstall MA, Kelly RA. The role of nitric oxide in heart failure. Coron Artery Dis, 1999, v. 10, №5, p. 301-308.

22. Arstall MA, Sawyer DB, Fukazawa R, Kelly RA. Cytokine-mediated apoptosis in cardiac myocytes: the role of inducible nitric oxide synthase induction and peroxynitrite generation. Circ Res, 1999, v. 85, №9, p. 829840.

23. Ashley EA, Sears CE, Bryant SM, Watkins HC, Casadei B. Cardiac nitric oxide synthase 1 regulates basal and beta-adrenergic contractility in murine ventricular myocytes. Circulation, 2002, v. 105, №25, p. 3011-3016.

24. Baptista CA, Kirby ML. The cardiac ganglia: cellular and molecular aspects. Kaohsiung J Med Sci 1997;13:42-54.

25. Bloch W, Fleischmann BK, Lorke DE, Andressen C, Hops B, Hescheler J et al. Nitric oxide synthase expression and role during cardiomyogenesis. Cardiovasc Res, 1999, v. 43, №3, p. 675-684.

26. Balligand JL. Regulation of cardiac beta-adrenergic response by nitric oxide. Cardiovasc Res, 1999, v.43, №3, p. 607-620.

27. Barouch LA, Harrison RW, Skaf MW, Rosas GO, Cappola TP, Kobeissi ZA et al. Nitric oxide regulates the heart by spatial confinement of nitric oxide synthase isoforms. Nature, 2002, v. 416, №6878, p. 337-339.

28. Belai A, Schmidt HHHW, Hoyle CHV, Hassall CJS, Saffrey MJ, Moss J, Forstermann U, Murad F, Burnstock G. Colocalization of nitric oxide synthase and NADPH-diaphorase in the myenteric plexus of the rat gut. Neurosci Lett, 1992, v. 143:60-64.

29. Bredt DS, Snyder SH. Nitric oxide, a novel neuronal messenger. Neuron. 1992, 8(1):3-11.

30. Brunner F, Andrew P, Wolkart G, Zechner R, Mayer B. Myocardial contractile function and heart rate in mice with myocyte-specific overexpression of endothelial nitric oxide synthase. Circulation, 2001, v. 104, p. 3097-3102.

31. Bucher B, Ouedraogo S, Tschopl M, Paya D, Stoclet JC. Role of the L-arginine-NO pathway and of cyclic GMP in electrical field-induced noradrenaline release and vasoconstriction in the rat tail artery. Br J Pharmacol., 1992;107:976-982.

32. Calupca MA, Locknar SA, Parsons RL. TRPC6 immunoreactivity is colocalized with neuronal nitric oxide synthase in extrinsic fibers innervating guinea pig intrinsic cardiac ganglia. J Comp Neurol, 2002, v. 450, №3, p. 283-291.

33. Calupca MA, Vizzard MA, Parsons RL. Origin of neuronal nitric oxide synthase (NOS)-immunoreactive fibers in guinea pig parasympathetic cardiac ganglia. J Comp Neurol, 2000, v. 426, №3, p. 493-504.

34. Casadei B, Sears CE. Nitric-oxide-mediated regulation of cardiac contractility and stretch responses. Prog Biophys Mol Biol, 2003, v. 82, №1-3, p. 67-80.

35. Champion HC, Hare JM. Emerging therapeutic targets in nitric oxide-dependent cardiac disease. Expert Opin Ther Targets, 2001, v. 5, №5, p. 547-556.

36. Champion HC, Skaf MW, Hare JM. Role of nitric oxide in the pathophysiology of heart failure. Heart Fail Rev, 2003, v. 8, №1, p. 35-46.

37. Cheng Z, Powley TL, Schwaber JS, Doyle FJ. Vagal afferent innervation of the atria of the rat heart reconstructed with confocal microscopy. J Comp Neurol 1997;381:1-17.

38. Cheng Z, Powley TL, Schwaber JS, Doyle FJ 3rd. Projections of the dorsal motor nucleus of the vagus to cardiac ganglia of rat atria: an anterograde tracing study. J Comp Neurol. 1999; 410:320-341.

39. Chiba T, Yamauchi A. Fluorescence and electron microscopy of the monoamine-containing cells in the turtle heart. Z Zellforsch Mikrosk Anat. 1973; 140(l):25-37.

40. Choate JK, Danson EJ, Morris JF, Paterson DJ. Peripheral vagal control of heart rate is impaired in neuronal NOS knockout mice. Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2001, v. 281, №6, p. H2310-H2317.

41. Choate JK, Feldman R. Neuronal control of heart rate in isolated mouse atria. Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2003, v. 285, №3, p. H1340-H1346.

42. Choate JK, Paterson DJ. Nitric oxide inhibits the positive chronotropic and inotropic responses to sympathetic nerve stimulation in the isolated guinea-pig atria. J Auton Nerv Syst, 1999, v.75, №2-3, p. 100-108.

43. Conlon K, Kidd C. Neuronal nitric oxide facilitates vagal chronotropic and dromotropic actions on the heart. J Auton Nerv Syst, 1999, v. 75: 136-146.

44. Dail WG Jr, Palmer GC. Localization and correlation of catecholamine-containing cells with adenyl cyclase and phosphodiesterase activities in the human fetal heart. AnatRec. 1973;177(2):265-87.

45. Damy T, Ratajczak P, Shah AM, Camors E, Marty I, Hasenfuss G et al. Increased neuronal nitric oxide synthase-derived NO production in the failing human heart. Lancet, 2004, v. 363, №9418, p. 1365-1367.

46. Danson EJ, Choate JK, Paterson DJ. Cardiac nitric oxide: emerging role for nNOS in regulating physiological function. Pharmacol Ther, 2005, v. 106, №1, p. 57-74.

47. Danson EJ, Mankia KS, Golding S, Dawson T, Everatt L, Cai S et al. Impaired regulation of neuronal nitric oxide synthase and heart rate during exercise in mice lacking one nNOS allele. J Physiol, 2004, v. 558, №Pt 3, p. 963-974.

48. Danson EJF, Mohan RM, Garland T, Paterson DJ. NO-cGMP pathway enhances the heart rate response to peripheral vagal nerve stimulation in exercise trained mice. Circulation 104: S833, 2001.

49. Danson EJ, Paterson DJ. Enhanced neuronal nitric oxide synthase expression is central to cardiac vagal phenotype in exercise-trained mice. J Physiol, 2003, v. 546, №Pt 1, p. 225-232.

50. David M, Petricoin E III, Benjamin C, Pine R, Weber MJ, Larner AC. Requirement for MAP kinase (ERK2) activity in interferon-{alpha}- and interferon ß-stimulated gene expression through STAT proteins. Science. 1995;269:1721-1723.

51. De Souza RR, Gama EF, de Carvalho CA, Liberti EA. Quantitative study and architecture of nerves and ganglia of the rat heart. Acta Anat (Basel) 1996;156:53-60.

52. Dinerman JL, Lowenstein CJ, Snyder SH. Molecular mechanisms of nitric oxide regulation. Potential relevance to cardiovascular disease. Circ Res. 1993, 73(2):217-222.

53. Dogiel AS. Uber den Bau der Ganglien in den Geflechten des Darms und der Gallenblase des Menschen und der Saugetiere. Arch. Anat. u. Physiol., 1899, Bd 4, S. 130-158.

54. Ellison JP, Hibbs RG. Catecholamine-containing cells of the guinea pig heart: an ultrastructural study. J Mol Cell Cardiol. 1974, 6(l):17-26.

55. Elvan A, Rubart M, Zipes DP. NO modulates autonomic effects on sinus discharge rate and AV nodal conduction in open-chest dogs. Am J Physiol, 1997, v. 272, p. H263-271.

56. Feron O, Han X, Kelly RA. Muscarinic cholinergic signaling in cardiac myocytes: dynamic targeting of M2AChR to sarcolemmal caveolae and eNOS activation. Life Sci, 1999, v.64, №6-7, p. 471-477.

57. Francis GS. 50th anniversary historical article. Heart failure. J Am Coll Cardiol. 1999, v. 33(2):291-4.

58. Forstermann U, Boissel JP, Kleinert H. Expressional control of the 'constitutive' isoforms of nitric oxide synthase (NOS I and NOS III). FASEB J, 1998, v. 12, №10, p. 773-790.

59. Fuder H, Ries P, Schwarz P. Histamine and serotonin released from the rat perfused heart by compound 48/80 or by allergen challenge influence noradrenaline or acetylcholine exocytotic release. Fundam Clin Pharmacol. 1994; v. 8:477-490.

60. Gallo MP, Malan D, Bedendi I, Biasin C, Alloatti G and Levi RC. Regulation of cardiac calcium current by NO and cGMP-modulating agents. Pflugers Arch., 2001, v. 441, №5, p. 621-628.

61. Goncharuk VD. Changes in ganglion nodosum neurons associated with stress-related cardiac deficiency. Exp Toxic Pathol, 1994; v. 46, p. 457-464.

62. Gray AL, Johnson ТА, Ardell JL, Massari VJ. Parasympathetic control of the heart. II. A novel interganglionic intrinsic cardiac circuit mediates neural control of heart rate. J Appl Physiol, 2004, v. 96: 2273-2278.

63. Greenberg SS, Diecke FPJ, Cantor E, Peevy K, Tanaka TP. Inhibition of sympathetic neurotransmitter release by modulators of cyclic GMP in canine vascular smooth muscle. Eur J Pharmacol. 1990;187:409-423.

64. Greenberg S, Diecke FPJ, Peevy K, Tanaka TP. The endothelium modulates adrenergic neurotransmission to canine pulmonary arteries and veins. Eur J Pharmacol. 1989;162:67-80.

65. Grozdanovic Z, Baumgarten HG, Brüning G. Histochemistry of NADPH-diaphorase, a marker for neuronal nitric oxide synthase, in the peripheral autonomic nervous system of the mouse. Neuroscience, 1992, v. 48:225235.

66. Han X, Kobzik L, Balligand JL, Kelly RA, Smith TW. Nitric oxide• • • 2+synthase (NOS3)-mediated cholinergic modulation of Ca current in adultrabbit atrioventricular nodal cells. Circ Res, 1996, v. 78, №6, p. 998-1008.

67. Han X, Shimoni Y, Giles WR. An obligatory role for nitric oxide in autonomic control of mammalian heart rate. J Physiol, 1994, v. 476, №2, p. 309-314.

68. Hare JM. Oxidative stress and apoptosis in heart failure progression. Circ Res, 2001, v.89, №3, p. 198-200.

69. Hare JM, Keaney JF, Jr., Balligand JL, Loscalzo J, Smith TW, Colucci WS. Role of nitric oxide in parasympathetic modulation of beta-adrenergic myocardial contractility in normal dogs. J Clin Invest, 1995, v. 95, №1, p. 360-366.

70. Hare JM, Kim B, Flavahan NA, Ricker KM, Peng X, Colman L et al. Pertussis toxin-sensitive G proteins influence nitric oxide synthase III activity and protein levels in rat heart. J Clin Invest, 1998, v. 101, №6, p. 1424-1431.

71. Hare JM, Stamler JS. NOS: modulator, not mediator of cardiac performance. Nat Med, 1999, v. 5, №3, p. 273-274.

72. Harvey RD, Belevych AE. Muscarinic regulation of cardiac ion channels. Br J Pharmacol, 2003, v. 139, №6, p. 1074-1084.

73. Hassall CJ, Saffrey MJ, Belai A, Hoyle CH, Moules EW, Moss J et al. Nitric oxide synthase immunoreactivity and NADPH-diaphorase activity in a subpopulation of intrinsic neurones of the guinea-pig heart. Neurosci Lett, 1992, v. 143, №1-2, p. 65-68.

74. Hassall CJS, Saffrey MJ, Burnstock G. Expression of NADPH-diaphorase activity by guinea-pig paratracheal neurones. NeuroReport, 1993, v. 4:49— 52.

75. Heneka MT, Feinstein DL. Expression and function of inducible nitric oxide synthase in neurons. Journal of Neuroimmunology, 2001, v. 114, p. 8-18.

76. Her WY, Fu YS, Liu TS, Liu KM. Morphological study of cultured cardiac ganglionic neurons from different postnatal stages of rats. Auton Neurosci 2000;84:89-97.

77. Herring N, Danson EJ, Paterson DJ. Cholinergic control of heart rate by nitric oxide is site specific. News Physiol Sci., 2002, v. 17, №10, p. 202206.

78. Herring N, Golding S, Paterson DJ. Pre-synaptic NO-cGMP pathway modulates vagal control of heart rate in isolated adult guinea pig atria. J Mol Cell Cardiol, 2000, v. 32: 1795-1804.

79. Herring N, Paterson DJ. Nitric oxide-cGMP pathway facilitates acetylcholine release and bradycardia during vagal nerve stimulation in the• guinea-pig in vitro. J Physiol, 2001, v. 535: 507-518.

80. Hopkins DA, Armour JA. Brainstem cells of origin of physiologically identified cardiopulmonary nerves in the rhesus monkey (Macaca mulatta). J Auton Nerv Syst, 1998, v. 68, №1-2, p. 21-32.

81. Hopkins DA, Armour JA. Ganglionic distribution of afferent neurons innervating the canine heart and cardiopulmonary nerves. J Auton Nerv Syst, 1989, v. 26, №3, p. 213-222.

82. Hopkins DA, Macdonald SE, Murphy DA, Armour JA. Pathology of intrinsic cardiac neurons from ischemic human hearts. Anat Rec, 2000, v.259, №4, p. 424-436.

83. Horackova M, Armour JA, Byczko Z. Distribution of intrinsic cardiac neurons in whole-mount guinea pig atria identified by multiple neurochemical coding. A confocal microscope study. Cell Tissue Res. 1999, 297(3):409-21.

84. Horackova M, Armour JA, Hopkins DA, Huang MH. Nitric oxide modulates signaling between cultured adult peripheral cardiac neurons and cardiomyocytes. Am J Physiol, 1995, v. 269, №2 Pt 1, p. C504-C510.

85. Horackova M, Croll RP, Hopkins DA, Losier AM, Armour J A.

86. Morphological and immunohistochemical properties of primary long-term cultures of adult guinea-pig ventricular cardiomyocytes with peripheral cardiac neurons. Tissue Cell, 1996, v. 28, №4, p. 411-425.

87. Jacob JM, Dorheim MA, Grammas P. The effect of age and injury on the expression of inducible nitric oxide synthase in facial motor neurons in F344 rats. Mech Ageing Dev. 1999;107(2):205-18.

88. Jacobowitz D. Histochemical studies of the relationship of chromaffin cells and adrenergic nerve fibers to the cardiac ganglia of several species. J Pharmacol Exp Ther. 1967;158:227-240.

89. Jaffrey SR, Snowman AM, Eliasson MJ, Cohen NA, Snyder SH. CAPON: a protein associated with neuronal nitric oxide synthase that regulates its interactions with PSD95. Neuron, 1998, v. 20(1): 115-24.

90. Ji GJ, Fleischmann BK, Bloch W, Feelisch M, Andressen C, Addicks K et al. Regulation of the L-type Ca2+ channel during cardiomyogenesis: switch from NO to adenylyl cyclase-mediated inhibition. FASEB J, 1999, v. 13, №2, p. 313-324.

91. Jurgaitiene R, Pauziene N, Azelis V, Zurauskas E. Morphometric study of age-related changes in the human intracardiac ganglia. Medicina (Kaunas), 2004, v. 40, №6, p. 574-581.

92. Kanno S, Kim PK, Sallam K, Lei J, Billiar TR, Shears LL. Nitric oxide facilitates cardiomyogenesis in mouse embryonic stem cells. Proc Natl Acad Sci USA, 2004, v.101, №33, p. 12277-12281.

93. Karnovsky MJ, Roots L. A "direct-coloring" thiocholine method for cholinesterase. J. Histochem Cytochem, 1964, v. 12, p. 219-221.

94. Kelly RA, Balligand JL, Smith TW. Nitric oxide and cardiac function. Circ Res, 1996, v. 79, №3, p. 363-380.

95. Kelly RA, Smith TW. Cytokines and cardiac contractile function.

96. Circulation, 1997, v. 95, №4, p. 778-781.

97. Kim SJ, Bang OS, Lee YS, Kang SS. Production of inducible nitric oxide is required for monocytic differentiation of U937 cells induced by vitamin E-succinate. J Cell Sei. 1998 Feb; 111 ( Pt 4):435-41.

98. Kleinert H, Schwarz PM, Forstermann U. Regulation of the expression of inducible nitric oxide synthase. Biol Chem, 2003, v. 384, №10-11, p. 13431364.

99. Klimaschewski L, Kummer W, Mayer B, Couraud JY, Preissler U, Philippin B et al. Nitric oxide synthase in cardiac nerve fibers and neurons of rat and guinea pig heart. Circ Res, 1992, v. 71, №6, p. 1533-1537.

100. Kuramoto H, Furness JB, Gibbins IL. Calbindin immunoreactivity in sensory and autonomic ganglia in the guinea pig. Neurosci Lett., 1990, 115(l):68-73.

101. Leger J, Croll RP, Smith FM. Regional distribution and extrinsic innervation of intrinsic cardiac neurons in the guinea pig. J Comp Neurol 1999; 407:303-317.

102. Linzbach AJ. Heart failure from the point of view of quantitative anatomy.1. Am J Cardiol 1960;370-82.

103. Malan D, Ji GJ, Schmidt A, Addicks K, Hescheler J, Levi RC et al. Nitric oxide, a key signaling molecule in the murine early embryonic heart. FASEB J, 2004, v. 18, № 10, p. 1108-1110.

104. Massion PB, Feron O, Dessy C, Balligand JL. Nitric oxide and cardiac function: ten years after, and continuing. Circ.Res., 2003, v. 93, №5, p. 388398.

105. Mohan RM, Choate JK, Golding S, Herring N, Casadei B, Paterson DJ. Peripheral pre-synaptic pathway reduces the heart rate response to sympathetic activation following exercise training: role of NO. Cardiovasc Res, 2000, v. 47, №1, p. 90-98.

106. Mohan RM, Golding S, Paterson DJ. Intermittent hypoxia modulates nNOS expression and heart rate response to sympathetic nerve stimulation. Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2001, v. 281, №1, p. H132-H138.

107. Mohan RM, Golding S, Heaton DA, Danson EJ, Paterson DJ. Targeting neuronal nitric oxide synthase with gene transfer to modulate cardiac autonomic function. Progress in Biophysics & Molecular Biology, 2004, v. 84, p. 321-344.

108. Mohan RM, Heaton DA, Danson EJ, Krishnan SP, Cai S, Channon KM et al. Neuronal nitric oxide synthase gene transfer promotes cardiac vagal gain of function. Circ Res, 2002, v. 91, № 12, p. 1089-1091.

109. Mohan RM, Paterson DJ. Activation of sulphonylurea-sensitive channels and the NO-cGMP pathway decreases the heart rate response to sympathetic nerve stimulation. Cardiovasc Res, 2000, v. 47(1): 81-89.

110. Moncada S, Palmer RMJ, Higgs EA Nitric oxide: physiology,pathophysiology, and pharmacology. Pharmacol Rev., 1991, v. 43:109-142.

111. Musialek P, Rigg L, Terrar DA, Paterson DJ, Casadei B. Role of cGMP-inhibited phosphodiesterase and sarcoplasmic calcium in mediating theincrease in basal heart rate with nitric oxide donors. J Mol Cell Cardiol, 2000, v. 32, №10, p. 1831-1840.

112. Murphy DA, O'Blenes S, Hanna BD, Armour JA. Capacity of intrinsic cardiac neurons to modify the acutely autotransplanted mammalian heart. J Heart Lung Transplant 1994;13: 847-56.

113. Nakagawa H, Yoshida M, Miyamoto S. Nitric oxide underlies the differentiation of PC 12 cells induced by depolarization with high KC1. J Biochem (Tokyo). 2000 Jan;127(l):l 13-9.

114. Papka RE. A study of catecholamine-containing cells in the hearts of fetal and postnatal rabbits by fluorescence and electron microscopy. Cell Tissue Res. 1974; 154(4):471-84.

115. Pardini BJ, Patel KP, Schmid PG, Lund DD. Location, distribution and projections of intracardiac ganglion cells in the rat. J Auton Nerv Syst, 1987; 20:91-101.

116. Paton JF, Kasparov S, Paterson DJ. Nitric oxide and autonomic control of heart rate: a question of specificity. Trends Neurosci, 2002, v. 25, №12, p. 626-631.

117. Pauza DH, Skripkiene G, Skripka V, Pauziene N, Stropus R. Morphological study of neurons in the nerve plexus on heart base of rats and guinea pigs. J Auton Nerv Syst, 1997, v. 62:1-12.

118. Peterson J, Kanai AJ, Pearce LL. A mitochondrial role for catabolism of nitric oxide in cardiomyocytes not involving oxymyoglobin. Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2004, v. 286, №1, p. H55-H58.

119. Peunova N, Enikolopov G. Nitric oxide triggers a switch to growth arrest during differentiation of neuronal cells. Nature. 1995 May 4;375(6526):68-73.

120. Phung YT, Bekker JM, Hallmark OG, Black SM. Both neuronal NO synthase and nitric oxide are required for PC 12 cell differentiation: a cGMP independent pathway. Brain Res Mol Brain Res. 1999 Feb 5;64(2): 165-78.

121. Piech A, Dessy C, Havaux X, Feron O, Balligand JL. Differential regulation of nitric oxide synthases and their allosteric regulators in heart and vessels of hypertensive rats. Cardiovasc Res, 2003, v.57, №2, p. 456467.

122. Pollock JS, Forstermann U, Tracey WR, Nakane M. Nitric oxide synthase isozymes antibodies. Histochem J, 1995, v. 27, №10, p. 738-744.

123. Randall WC, Ardell JL, Wurster RD, Milosavljevic M. Vagal postganglionic innervation of the canine sinoatrial node. J Auton Nerv Syst 1987;20:13-23.

124. Randall W, Wurster R, Randall D, Xi-Moy S. From cardioaccelerator and inhibitory nerves to a "heart brain": an evolution of concepts. In: Nervous control of the heart. Harwood Academic, London, 1995, pp 173-199.

125. Razavi HM, Hamilton JA, Feng Q. Modulation of apoptosis by nitric oxide: implications in myocardial ischemia and heart failure. Pharmacol Ther, 2005, v. 106, №2, p. 147-162.

126. Richardson RJ, Grkovic I, Anderson CR. Immunohistochemical analysis of intracardiac ganglia of the rat heart. Cell Tissue Res, 2003, v. 314, №3, p. 337-350.

127. Rothe F, Canzler U, Wolf G. Subcellular localization of the neuronal isoform of nitric oxide synthase in the rat brain: a critical evaluation. Neuroscience. 1998, v. 83(l):259-69.

128. Saffrey MJ, Hassall CJ, Hoyle CH, Belai A, Moss J, Schmidt HH et al. Colocalization of nitric oxide synthase and NADPH-diaphorase in cultured myenteric neurones. Neuroreport, 1992, v. 3, №4, p. 333-336.

129. Saffrey MJ, Hassall CJS, Moules EW, Burnstock G. NADPH-diaphorase and nitric oxide synthase are expressed by the majority of intramural neurones in the neonatal guineapig urinary bladder. J Anat, 1994, v. 185:487-495.

130. Saito T, Hu F, Tayara L, Fahas L, Shennib H, Giaid A. Inhibition of NOS II prevents cardiac dysfunction in myocardial infarction and congestive heart failure. Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2002, v. 283, №1, p. H339-H345.

131. Schmidt HHHW, Lohmann SM, Walter U. The nitric oxide and cGMP signal transduction system: regulation and mechanism of action. Biochem Biophys Acta 1993, v. 1178:153-175.

132. Schmidt HH, Murad F. Purification and characterization of a human NO synthase. Biochem Biophys Res Commun, 1991, v. 181, №3, p. 1372-1377.

133. Schmidt HH, Pollock JS, Nakane M, Forstermann U, Murad F. Ca /calmodulin-regulated nitric oxide synthases. Cell Calcium, 1992, v. 13, №6-7, p. 427-434.

134. Schulz R, Nava E, Moncada S. Induction and potential biological relevance of a Ca(2+)-independent nitric oxide synthase in the myocardium. Br J Pharmacol, 1992, v. 105, №3, p. 575-580.

135. Sears CE, Ashley EA, Casadei B. Nitric oxide control of cardiac function: is neuronal nitric oxide synthase a key component? Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci, 2004, v. 359, №1446, p. 1021-1044.

136. Sears CE, Bryant SM, Ashley EA, Lygate CA, Rakovic S, Wallis HL et al. Cardiac neuronal nitric oxide synthase isoform regulates myocardial contraction and calcium handling. Circ Res, 2003, v. 92, №5, p. e52-e59

137. Sears CE, Choate JK, Paterson DJ. Inhibition of nitric oxide synthase slows heart rate recovery from cholinergic activation. J Appl Physiol, 1998, v. 84, p. 1596-1603.

138. Sears CE, Choate JK, Paterson DJ. NO-cGMP pathway accentuates the decrease in heart rate caused by cardiac vagal nerve stimulation. J Appl Physiol, 1999, v. 86:510-516.

139. Sears CE, Noble P, Noble D, Paterson DJ. Vagal control of heart rate is modulated by extracellular potassium. J Auton Nerv Syst, 1999, v. 77, №23, p. 164-171.

140. Sessa WC, Pritchard K, Seyedi N, Wang J & Hintze TH. Chronic exercise in dogs increases coronary vascular nitric oxide production and endothelial cell nitric oxide synthase gene expression. Circ Res, 1994, v. 74, p. 349353.

141. Shah AM, MacCarthy PA. Paracrine and autocrine effects of nitric oxide on myocardial function. Pharmacol Ther, 2000, v.86, №1, p. 49-86.

142. Shimojo T, Hiroe M, Ishiyama S, Ito H, Nishikawa T, Marumo F. Nitric oxide induces apoptotic death of cardiomyocytes via a cyclic-GMP-dependent pathway. Exp Cell Res, 1999, v.247, №1, p. 38-47.

143. Shin WS, Kawaguchi H, Sasaki T, Wang YP, Yang WD, Inukai M et al. The role of nitric oxide in the cardiovascular system. Ann N Y Acad Sci, 1996, v.786:233-44., p. 233-244.

144. Shinozuka K, Kobayashi Y, Shimoura K, Hattori K. Role of nitric oxide from the endothelium on the neurogenic contractile responses of the rabbit pulmonary artery. Eur J Pharmacol., 1992; v. 222:113-120.

145. Singh S, Johnson PI, Javed A, Gray TS, Lonchyna VA, Wurster RD. Monoamine- and histamine-synthesizing enzymes and neurotransmitters within neurons of adult human cardiac ganglia. Circulation 1999;99:411-9.

146. Singh S, Johnson PI, Lee RE, Orfei E, Lonchyna VA, Sullivan HJ, Montoya A, Tran H, Wehrmacher WH, Wurster RD. Topography of cardiac ganglia in the adult human heart. J Thorac Cardiovasc Surg. 1996; 112(4):943-53.

147. Sladek T, Gerova M, Znojil V, Devat L. Morphometric characteristics of cardiac hypertrophy induced by long-term inhibition of NO synthase. Physiol Res, 1996, v.45, №4, p. 335-338.

148. Sladek T, Gerova M, Znojil V, Devat L. Morphometric characteristics of cardiac hypertrophy induced by long-term inhibition of NO synthase. Physiol Res, 1996, v. 45, №4, p. 335-338.

149. Song W, Lu X, Feng Q. Tumor necrosis factor-alpha induces apoptosis via inducible nitric oxide synthase in neonatal mouse cardiomyocytes. Cardiovasc Res, 2000, v. 45, №3, p. 595-602.

150. Sosunov AA, Hassall CJS, Loesch A, Turmaine M, Burnstock G. Ultrastructural investigation of nitric oxide synthaseimmunoreactive nerves associated with coronary blood vessels of rat and guinea-pig. Cell Tissue Res, 1995, v. 280:575-582.

151. Steele PA, Choate JK. Innervation of the pacemaker in guinea-pig sinoatrial node. J Auton Nerv Syst, 1994, v. 47, №3, p. 177-187.

152. Steele PA, Gibbins IL, Morris JL, Mayer B. Multiple populations of neuropeptide-containing intrinsic neurons in the guinea-pig heart. Neuroscience. 1994, 62(l):241-50.

153. Tanaka K, Hassall CJ, Burnstock G. Distribution of intracardiac neurones and nerve terminals that contain a marker for nitric oxide, NADPH-diaphorase, in the guinea-pig heart. Cell Tissue Res, 1993a, v. 273, №2, p. 293-300.

154. Tanaka K, Ohshima H, Esumi H, Chiba T. Direct synaptic contacts of nitric oxide synthase-immunoreactive nerve terminals on the neurons of theintracardiac ganglia of the guinea pig. Neurosci Lett, 1993b, v. 158:67-70

155. Vernet D, Bonavera JJ, Swerdloff RS, Gonzalez-Cadavid NF, Wang C. Spontaneous expression of inducible nitric oxide synthase in the hypothalamus and other brain regions of aging rats. Endocrinology. 1998 Jul;139(7):3254-61.

156. Vincent SR. Nitric oxide: a radical neurotransmitter in the central nervous system. Prog Neurobiol, 1994, v. 42:129-160.

157. Vincent SR, Hope BT. Neurons that say NO. Trends Neurosci, 1992, v. 15:108-113.

158. Vincent SR, Kimura H. Histochemical mapping of nitric oxide synthase in the rat brain. Neuroscience, 1992, v. 46, № 4, p. 755-784.

159. Vo AP, Reid JJ, Rand MJ. Attenuation of vasoconstriction by endogenous nitric oxide in rat caudal artery. Br J Pharmacol., 1992; 107:1121-1128.

160. Yuan BX, Ardell JL, Hopkins DA, Losier AM, Armour JA. Gross and microscopic anatomy of the canine intrinsic cardiac nervous system. Anat Rec 1994;239:75-87.

161. Zieman SJ, Gerstenblith G, Lakatta EG, Rosas GO, Vandegaer K, Ricker KM et al. Upregulation of the nitric oxide-cGMP pathway in aged myocardium: physiological response to 1-arginine. Circ Res, 2001, v. 88, №1, p. 97-102.

162. Ziolo MT, Maier LS, Piacentino V, Bossuyt J, Houser SR, Bers DM. Myocyte nitric oxide synthase 2 contributes to blunted beta-adrenergic response in failing human hearts by decreasing Ca transients. Circulation, 2004, v. 109, №15, p. 1886-1891.

163. Zypen van der E, Hasselhorst G, Merz R, Fillinger H. Histochemical and electron microscopic studies on the intramural ganglia of the heart in man and the rat. Acta Anat (Basel). 1974; 88 (2): 161-87.