Некоторые патогенетические особенности ишемического и реперфузионного повреждения миокарда тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.16, кандидат медицинских наук Савченко, Александр Сергеевич

• Савченко, Александр Сергеевич
• кандидат медицинских наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Савченко, Александр Сергеевич

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Современные представления о патогенезе ишемического повреждения миокарда.

1.2. Роль окислительного стресса в процессах ишемического и реперфузионного повреждения миокарда.

1.3. Механизмы гибели кардиомиоцитов при ишемическом и реперфузионном повреждении.

1.4. Механизмы адаптации кардиомиоцитов к ишемическому и реперфузионному повреждению миокарда.

1.5. Маркеры раннего повреждения миокарда при ишемии и реперфузии.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

Глава 3. Результаты собственных исследований.

3.1. Клеточная гибель по типу апоптоза и некроза при ишемии и реперфузии миокарда.

3.2. Альтерация и адаптация кардиомиоцитов при хронической гипоксии.

3.3. Оценка степени и характера повреждения кардиомиоцитов с помощью флуоресцентного анализа нуклеотидов плазмы крови.

3 .4. Оценка окислительного стресса на этапах ишемии и реперфузии миокарда.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Некоторые патогенетические особенности ишемического и реперфузионного повреждения миокарда»

Актуальность исследования. Ишемическое повреждение миокарда составляет основу большой группы заболеваний сердца, однако представление о патогенезе повреждения клеток как о цепи метаболических и структурных сдвигов, развивающихся в ответ на ишемию и приводящих к гибели кардиомиоцитов, не отличается завершенностью.

Известны два основных варианта клеточной гибели -запрограммированная клеточная гибель (апоптоз) и некроз. Роль апоптоза в кардиопатологии стала изучаться сравнительно недавно [Fliss Н. et al., 1996; Galang N. et al., 2000; Сторожаков Г.И. и др., 2000; Kang P.M. et al., 2000; Литвицкий П.Ф., 2002]. Доминирующим представлением является то, что основной механизм гибели кардиомиоцитов в периоде острой ишемии - некроз, а развитие апоптоза возможно [Misao J. et al., 1996; Gill С. et al., 2002], но не определяет тяжести поражения миокарда. Вместе с тем, очевидно, что последствия острой ишемии миокарда, в том числе электрофизиологические нарушения, могут быть патогенетически связаны именно с развитием апоптоза кардиомиоцитов. При хронической коронарной недостаточности апоптоз можно рассматривать как своеобразную адаптационную реакцию на клеточно-тканевом уровне, направленную на элиминирование кардиомиоцитов со значительно контрактильной дисфункцией вследствие их выраженной дисрегенераторной перестройки [Maulik N. et al., 1999; Jiang L. et al., 2003].

Несмотря на доказанную роль окислительного стресса в развитии апоптоза и некроза, его особенности при ишемии и реперфузии миокарда, а также причинно-следственная связь между генерацией свободных радикалов и инициацией процессов клеточной гибели изучены недостаточно [Duranteau J. et al., 1997; Ferrari R. et al., 1998; Зенков H.K. и др., 1999; Maulik N. et al., 2000].

Одним из мало изученных процессов в патогенезе ишемического повреждения клеток является изменение метаболизма внутриклеточных пиридиновых и флавиновых нуклеотидов, чья концентрация в условиях регионарной ишемии миокарда отражает митохондриальную активность [Jeffrey F.M. et al., 1987; Karmazyn M. et al., 1996; Литвицкий П.Ф., 2002].

Поиск «идеального» биохимического маркера ишемического повреждения клеток миокарда представляет собой одно из актуальных направлений экспериментальной и клинической кардиологии. Диагностическая значимость таких маркеров во многом определяется временем высвобождения их из клеток, тканеспецифичностью, длительностью нахождения маркера в периферическом кровотоке, патогенетической обоснованностью их использования [Panteghini М., 1998].

Существуют попытки использовать флуориметрический анализ (оценка клеточной аутофлуоресценции) для мониторинга состояния тканей в условиях гипоксии in situ: гепатоцитов [Obi-Tabot Е.Т. et al., 1993], нейронов дыхательного центра ствола головного мозга [Mironov S.L. et al., 2001], клеток почек [Coremans J.M. et al., 2000], а также скелетной мускулатуры in vivo [Van-der-Laan L. et al., 1998]. Однако не изучена возможность анализа эндогенных флуорофоров (флавиновые и пиридиновые нуклеотиды), характеризующих функциональную активность и сохранность клеточных структур, а также степень митохондриальной дисфункции при окислительном стрессе [Zago Е.В. et al., 2000], во внеклеточной жидкости с целью ранней идентификации метаболических нарушений в ткани, сопровождающих ишемически-реперфузионное воздействие.

Цель работы. Исследовать особенности развития двух вариантов клеточной гибели кардиомиоцитов (апоптоз, некроз) и роль окислительного стресса в ишемическом и реперфузионном поражении миокарда у больных с ишемической болезнью сердца (ИБС) и приобретенными пороками сердца (ППС).

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Определить преобладающий вариант клеточной гибели кардиомиоцитов (апоптоз, некроз) в периодах острой ишемии и реперфузии у больных с ИБС иППС.

2. Выявить патогенетические особенности апоптоза и некроза кардиомиоцитов у больных с ИБС и ППС при ишемии миокарда и в раннем реперфузионном периоде на фоне предсуществующей хронической гипоксии.

3. Исследовать динамику развития окислительного стресса в кардиомиоцитах на этапах ишемии и реперфузии миокарда.

4. Оценить состояние энергетического гомеостаза и характер повреждения кардиомиоцитов в периодах острой ишемии и реперфузии по анализу пула пиридиновых и флавиновых нуклеотидов плазмы крови.

Положения, выносимые на защиту:

1. Интенсификация процессов гибели кардиомиоцитов характерна для периода реперфузии, но не острой ишемии, при этом преобладающим вариантом клеточной гибели у больных ИБС является апоптоз, у больных с ППС -некроз.

2. Характер предсуществующей хронический гипоксии, определяющий степень выраженности кардиосклероза и гипертрофии миокарда как механизмов ремоделинга, определяет вариант развития клеточной гибели кардиомиоцитов в ишемический и реперфузионный периоды у больных с ИБС и ППС за счет реализации различных механизмов клеточной адаптации.

3. Интенсивность окислительного стресса при острой ишемии и реперфузии миокарда не отличается у больных с ИБС и ППС и максимальна в ранний реперфузионный период.

4. Анализ соотношения ФАД/НАД(Ф)Н в артериальной крови и крови коронарного синуса является дополнительным биохимическим маркером для выявления степени и характера повреждения миокарда при гипоксии и окислительном стрессе.

Научная новизна. В работе впервые систематически изучены патогенетические особенности развития двух видов клеточной гибели кардиомиоцитов: апоптоза и некроза на этапах ишемии и последующей реперфузии миокарда у больных с ишемической болезнью сердца (ИБС) и приобретенными пороками сердца (ППС).

1. Впервые установлено, что интенсификация процессов гибели кардиомиоцитов характерна для периода реперфузии, но не ишемии: у больных ИБС в ответ на реперфузию происходит преимущественно индукция апоптоза, а у больных с ППС - некроза кардиомиоцитов.

2. Впервые показано, что чувствительность кардиомиоцитов к индукции и прогрессии двух вариантов клеточной гибели в ишемический и реперфузионный периоды в значительной степени определяется характером предсуществующего хронического поражения и ремоделинга миокарда.

3. Впервые произведена сравнительная оценка особенностей развития окислительного стресса и изменения редокс-статуса кардиомиоцитов в динамике ишемии и реперфузии миокарда у больных с ИБС и ППС.

4. Впервые метод флуоресцентного анализа плазмы крови (соотношение уровней флуоресценции ФАД и НАД(Ф)Н) использован для мониторинга состояния кардиомиоцитов при ишемии и реперфузии миокарда.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Научно-теоретическое значение работы заключается в том, что в ней исследованы механизмы адаптации миокарда у больных с ИБС и ППС к действию апоптогенных и некрозогенных факторов (острая ишемия и реперфузия).

Разработана патогенетически обоснованная схема развития ишемического и реперфузионного повреждения миокарда у больных с ИБС и ППС.

Впервые теоретически обоснована и экспериментально доказана возможность использования флуоресцентного анализа плазмы крови для мониторинга состояния миокарда при ишемии и реперфузии.

Апробация работы. Основные положения диссертации представлены на:

1. Юбилейной международной студенческой научно-практической конференции, посвященной 60-летию Красноярской государственной медицинской академии, Красноярск, 2002.

2. Конкурсе работ имени проф. И.И. Гительзона в номинации «Лучшая теоретическая работа», Красноярск, 2002.

3. Научной конференции молодых ученых и специалистов Российской Федерации им. академика Б.С. Гракова, Красноярск, 2003.

4. Конкурсе научных работ молодых ученых по специальности: «Кардиология», в рамках юбилейного X Российского национального конгресса «Человек и лекарство», Москва, 2003.

5. X Международном симпозиуме Японо-Российского фонда медицинского обмена, Якутск, 2003.

6. Ежегодной сессии научного центра сердечно-сосудистой хирургии им. А.Н. Бакулева РАМН, Москва, 2003.

7. Конгрессе кардиологов стран СНГ, Санкт-Петербург, 2003.

8. Международном конгрессе «Высокие медицинские технологии XXI века», Бенидорм, Испания, 2003.

9. Совместном заседании проблемных комиссий «Теоретические проблемы медицины» и «Терапия» КрасГМА (Красноярск, 2003).

Полученные результаты диссертационной работы внедрены в учебный процесс на кафедре биохимии с курсом медицинской химии и кафедре внутренних болезней №1 Красноярской государственной медицинской академии.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 10 печатных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 114 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, списка литературы и приложений, иллюстрирована 5 таблицами и 21 рисунком. Библиографический указатель включает 146 литературных источников, из них 44 отечественных и 102 иностранных.

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Савченко, Александр Сергеевич

ВЫВОДЫ:

1. Интенсификация процессов гибели кардиомиоцитов характерна для периода реперфузии, но не острой ишемии. В результате реперфузионного воздействия преобладающим вариантом клеточной гибели кардиомиоцитов у больных ишемической болезнью сердца (ИБС) является апоптоз, у больных с приобретенными пороками сердца (ППС) - некроз.

2. Предсуществующая хроническая гипоксия приводит к ремоделингу миокарда, степень выраженности которого определяет чувствительность кардиомиоцитов к индукции того или иного варианта клеточной гибели при острой ишемии и реперфузии миокарда.

3. Степень выраженности окислительного стресса при острой ишемии и реперфузии миокарда не имеет существенных отличий у больных с ИБС и ППС. Окислительный стресс проявляет максимальную интенсивность к 1 часу реперфузионного периода, с последующим ее снижением в течение 24 часов.

4. Изменения спектра флуоресценции флавиновых и пиридиновых нуклеотидов при острой ишемии и реперфузии миокарда регистрируются в плазме крови коронарного синуса и артериальной, но не венозной крови, в одинаковой степени у больных с ИБС и ППС. При этом, увеличение соотношения флуоресценции окисленных флавиновых и восстановленных пиридиновых нуклеотидов характерно для 1 часа периода реперфузии, с последующим снижением этого параметра к 24 часу, что позволяет использовать его в качестве дополнительного маркера для мониторинга состояния миокарда.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Савченко, Александр Сергеевич, 2004 год

1. Автандилов, Г.Г. Основы патологоанатомической практики / Г.Г. Автандилов. М., 1994.

2. Андреева, Л.И. Модификация метода определения перекисей липидов в тесте с тиобарбитуровой кислотой / Л.И. Андреева, Л.А. Кожемякин, A.A. Кишкун // Лаб. дело. 1988. - № 11. - С.41-44.

3. Андрианова, М.Ю. Перекисное окисление липидов и содержание средних молекул при операциях на сердце с искусственным кровообращением / М.Ю. Андрианова, М.В. Палюлина, Е.А. Кукаева, В.И. Мильчаков // Анестезиол. и реаниматол. 2001. - №2. - С.33-35.

4. Белушкина, H.H. Молекулярные основы апоптоза / H.H. Белушкина, А. Хасан Хамад, С.Е. Северин // Вопр. биол., мед. и фармацевт, химии. 1998. -№4.-С. 15-22.

5. Биленко, М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов / М.В. Биленко. М.: Медицина, 1989. - 368с.

6. Василевская, Т.А. / Т.А. Василевская, П.Ф. Литвицкий // Бюлл. эксперимент, биол.и мед. 1985. - №7. - С.97-100.

7. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю.А. Владимиров // Вестн. РАМН. 1998. - №7. - С.43-50.

8. Гавриш, A.C. Морфофункциональные аспекты адаптационной и патологической перестройки сократительного миокарда при коронарной недостаточности / A.C. Гавриш. Ин-т кардиологии им. Н.Д. Стражеско АМН Украины // Укр. баннерная сеть Интернет. 2000.

9. Гавриш, A.C. Морфофункциональные эквиваленты поверхностной и экстремальной медицины миокарда / A.C. Гавриш // Врач. дело. 1984. -№2. - С.45-49.

10. Ю.Галенко-Ярошевский, П. А. Экспериментальные аспекты оптимизации фармакотерапии острой ишемии миокарда / П.А. Галенко-Ярошевский, В.В. Гацура. М.: Медицина, 2000. - 383с.

11. П.Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. Пер. с англ. М.: Практика, 1998. - 459с.

12. Городецкая, Е.А. Образование гидроксильных радикалов при реперфузии миокарда после экспериментальной ишемии различной длительности / Е.А. Городецкая, Е.И. Каленикова // Бюлл. эксперимент, биол. и мед. 2001. -Т.131, №6. - С.629-632.

13. З.Дубинина, Е.Е. Антиоксидантная система плазмы крови / Е.Е. Дубинина // Укр. биохим. журн. 1992. - Т.64, №2. - С.3-15.

14. Зенков, Н.К. Внутриклеточный окислительный стресс и апоптоз / Н.К. Зенков, Е.Б Меньшикова, H.H. Вольский, В.А. Козлов // Усп. соврем, биол. -1999. Т.119, №5. С.440-450.

15. Иродова, H.J1. Окислительный стресс у больных первичной легочной гипертензией / H.J1. Иродова, В.З. Панкин, Г.Г. Конова-лова, А.Г. Кочетов // Бюлл. эксперимент, биол. и мед. 2002. - Т.133, №6. - С.668-671.

16. Капелько, В.И. Метаболические и функциональные основы экспериментальных кардиомиопатий / В.И. Капелько, М.И. Попович. -Кишинев: Штиинца, 1990. 207с.

17. Капелько, В.И. Нарушение энергообразования в клетках сердечной мышцы: причины и следствия / В.И. Капелько // Соросов, образов, журн. 2000. -Т.6, №5. - С. 14-20.

18. Карнута, Г.Г. Клиническое значение дисфункции левого желудочка при ишемической болезни сердца / Г.Г. Карнута, B.C. Гасилин, Г.В. Чернышева, Г.Н. Гороховская // Кремлевская мед. Клин, вестн. 1999. - №2.

19. Козлов, Д.В. Ишемическая болезнь сердца: Метод, рекоменд. Новокузнецк, 1990.-37с.

20. Кремнева, JI.B. Молекулярно-клеточные механизмы ремоделирования миокарда при сердечной недостаточности / JI.B. Кремнева, О.В. Абатурова // Клин. мед. 2003. - №2. - С.4-8.

21. Ланкин, В.З. Свободно-радикальные процессы при заболеваниях сердечнососудистой системы / В.З. Ланкин, А.К. Тихазе, Ю.Н. Беленков // Кардиол. -Т.40, №7. С.48-61.

22. Лисовский, В.А. Люминесцентный анализ в гастроэнтерологии / В.А. Лисовский. Л.: Наука, 1984. - 236с.

23. Литвицкий, П.Ф. Адаптивные ,и патогенные эффекты реперфузии и реоксигенации миокарда / П.Ф. Литвицкий, В.А. Сандриков, Е.А. Демуров -М., 1994.

24. Литвицкий, П.Ф. Патогенные и адаптивные изменения в сердце при его регионарной ишемии и последующем возобновлении коронарного кровотока / П.Ф. Литвицкий // Патол. физиол. и эксперимент, терапия. 2002. - №2. -С.2-12.

25. Маколкин, В.И. Приобретенные пороки сердца / В.И. Маколкин. М.: Медицина, 1986. - 256с.

26. Меерсон, Ф.З. Адаптационная медицина: Концепция долговре-менной адаптации / Ф.З. Меерсон. М.: Дело, 1993. - 138с.

27. Меерсон, Ф.З. Адаптация сердца к большой нагрузке и сердечная недостаточность / Ф.З. Меерсон. М.: Наука, 1975. - 263с.

28. Меерсон, Ф.З. Адаптация, деадаптация и недостаточность сердца / Ф.З. Меерсон. М.: Медицина, 1978. - 344с.

29. Меерсон, Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца / Ф.З. Меерсон. М.: Медицина, 1984. - 344с.

30. Саркисова, Д.С. Руководство: микроскопическая техника / Д.С. Саркисова, Ю.Л. Перова. М.: Медицина, 1996.

31. Сауля, А.И. Постстрессорные нарушения функции микарда / А.И. Сауля, Меерсон Ф.З. Кишинев: Штиинца, 1990. - 163с.

32. Сперелакис, Н. Физиология и патофизиология сердца / Н. Сперелакис. Пер. с англ. В 2-х т. М.: Медицина, 1988. - Т.2 - 624с.

33. Сторожаков, Г.И. Роль апоптоза в развитии атеросклероза, ишемии миокарда и сердечной недостаточности / Г.И. Сторожаков, Д.Б. Утешов // Сердечная недостаточность. 2000. - Т.1, №4. - С.1-5.

34. Сукоян, Г.В. Действие энергостима на состояние симпатико-адреналовой системы и содержание пиридиновых нуклеотидов при остром инфаркте миокарда / Г.В. Сукоян, Е.А. Чикобаева, Д.Р. Татулашвили // Бюлл. эксперимент, биол. и мед. 2001. - №12. - С.648-651.

35. Тепляков, А.Т. Ишемия и инфаркт миокарда / А.Т. Тепляков, А.А. Гарганеева. Томск: Изд-во Томск. Ун-та, 1994. - 408с.

36. Тодосийчук, В.В. Оценка феномена ишемической предпосылки у больных ишемической болезнью сердца / В.В. Тодосийчук: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Тюмень, 1998. - 16с.

37. Чазов, Е.И. Болезни сердца и сосудов: Руководство для врачей / Е.И. Чазов. -М.: Медицина, 1992. В 4-х т.

38. Anversa, P. Myocyte cell death in the diseased heart / P. Anversa, J. Kajstura // Circ. Res. 1998. -V.82. - P. 1231-1233.

39. Ausma, J. Dedifferentiatied cardiomyocytes from chronic hibernating myocardium are ischemia-tolerant / J. Ausma, F. Thone, G.D. Dispersyn // Mol. Cell. Biochem. 1998. - V.186, №1-2. - P.159-168.

40. Bartling, B. Quantification of cardioprotective gene expression in porcine short-term hibernating myocardium / B. Bartling, J. Hoffmann, J. Holtz, R. Schulz // J. Mol. Cell. Cardiol. 1999. - V.31, №1. - P.147-158.

41. Bernardi, P. Mitochondria and cell death: Mechanistic aspects and methodological issues / P. Bernardi, L. Scorrano, R. Colonna // Eur. J. Biochem. 1999. - V.264, №3. -P.687-701.

42. Bolli, R. The late phase of preconditioning / R. Bolli // Circ. Res. 2000. - V.87. -P.972-983.

43. Brasch, F. Mapping of capillary flow, cellular redox state, and resting membrane potential in hypoperfiised rat myocardium / F. Brasch, M. Neckel, R. Volkmann // Am. J. Physiol. 1999. - V.277. - P.2050-2064.

44. Byrne, J.A. Oxidative stress and heart failure / J.A. Byrne, D.J. Grieve, A.C. Cave, A.M. Shah // Arch. Mai. Coeur. Vaiss. 2003. - V.96, №3. - P.214-221.

45. Cai, J. Superoxide in Apoptosis. Mitochondrial generation triggered by cytochrome c Loss / J. Cai, D.P. Jones // J. Biol. Chem. 1998. - V.273, №19. -P.l 1401-11404.

46. Catchpoole, D.R. Formation of apoptotic bodies is associated with internucleosomal DNA fragmentation during drug-induced apoptosis / D.R. Catchpoole, B.W. Stewart // Exp. Cell Res. 1995. - V.216, №1. - P.169-177.

47. Chedrawy, E. Postoperative elevation of creatine kinase (CK-MB): does it contribute to diagnosis of myocardial infarction? / E. Chedrawy, R. Hall, V. Nedelcu // Can. J. Anesth. 1997. - V.44. - P.843-848.

48. Chen, C. Myocardial cell death and apoptosis in hibernating myocardium / C. Chen, L. Ma, D.R. Linfert, T. Lai // J. Am. Coll. Cardiol. 1997. - V.30, №5. -P.1407-1412.

49. Chilian, W.M. Prologue: ishemic preconditioning in cardiac vascular muscle / W.M. Chilian, G.J. Gross // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 1999. - V. 277, №6. - P.2416-2417.

50. Collinson, P.O. Troponin T, or troponin I, or CK-MB (or none?) / P.O. Collinson // Eur. Heart J. 1998. - V.19, Suppl N. - N. 16-24.

51. Coremans, J.M. (Semi-)quantitative analysis of reduced nicotinamide adenine dinucleotide fluorescence images of blood-perfused rat heart / J.M. Coremans, C. Ince, H.A. Bruining, G.J. Puppels // Byophys. J. 1997. - V. 72. - P. 1849-1860.

52. Coremans, J.M. Pretransplantation assessment of renal viability with NADH fluorimetry / J.M. Coremans, M.Van Aken, D.C. Naus // Kidney Int. 2000. -V.57.-P.671-683.

53. Czubryt, M.P. The roles of free radicals, peroxides and oxidized lipoproteins in second messenger system dysfunction / M.P. Czubryt, V. Panagia, G.N. Pierce // EXS. 1996. - V.76. - P.57-69.

54. Das, D.K. Oxigen free radical signaling in ischemic preconditioning / D.K. Das, R.M. Engelman, N. Maulik // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1999. - V.874. - P.49-65.

55. Dean, R.T. Reactive species and their accumulation on radical-damaged proteins / R.T. Dean, S. Gieseg, M.J. Davies // Trends Biochem. Sci. 1993. - V.18,№11. -P.437-441.

56. Depre, C. Metabolic aspects of programmed cell survival and cell death in the heart / C. Depre, H. Taegtmeyer // Cardiovasc. Res. 2000. - V.45, №3. - P.538-548.

57. Dispersyn, G.D. Apoptosis in chronic hibernating myocardium: sleeping to death? / G.D. Dispersyn, M. Borgers, W. Flameng // Cardiovasc. Res. 2000. - V.45, №3. - P.696-703.

58. Dispersyn, G.D. Cardiomyocyte remodelling during myocardial hibernation and atrial fibrillation: prelude to apoptosis / G.D. Dispersyn, J. Ausma, F. Thone, W. Flameng // Cardiovasc. Res. 1999. - V.43, №4. - P.947-957.

59. Dispersyn, G.D. Dissociation of cardiomyocyte apoptosis and dedifferentation in infarct border zones / G.D. Dispersyn, L. Mesotten, B. Meuris, L. Mortelmans // Eur. Heart. J. 2002. - V.23, №11.- P.849-857.

60. Donati, Y.R. Oxidative injury and the heat shock response / Y.R. Donati, D.O. Slosman, B.S. Polla // Biochem. Pharmacol. 1990. - V.40, №12. - P.2571-2577.

61. Duranteau, J. Intracellular signaling by reactive oxygen species during hypoxia in cardiomyocytes / J. Duranteau, N.S. Chandel, A. Kulisz // J. Biol. Chem. 1998. -V.273, №19.-P.l 1619-11624.

62. Elsasser, A. Unresolved issues regarding the role of apoptosis in the pathogenesis of ischemic injury and heart failure / A. Elsasser, K. Suzuki, J. Schaper // J. Mol. Cell. Cardiol. 2000. - V.32, №5. - P.711-724.

63. Ferrari, R. Oxidative stress during myocardial ischaemia and heart failure / R. Ferrari, L. Agnoletti, L. Comini, G. Gaia // Eur. Heart J. 1998. - V.19, Suppl B. -B2-11.

64. Feuerstein, G.Z. Apoptosis in cardiac diseases: stress- and mitogen-activated signaling pathways / G.Z. Feuerstein, P.R. Young // Cardiovasc. Res. 2000. - V. 45, №3. - P.560-569.

65. Fliss, H. Apoptosis in ischemic and reperfused rat myocardium / H. Fliss, D. Gattinger // Circ. Res. 1996. - V.19. - P.949-956.

66. Galang, N. Apoptotic cell death during ischemia/reperfusion and its attenuation by antioxidant therapy / N. Galang, H. Sasaki, N. Maulik //Toxicology. 2000. -V.148, №2-3. -P.lll-118.

67. Garcia-Dorado, D. Propagation of cell death during myocardial reperfusion / D. Garcia-Dorado, M. Ruiz-Meana // News Physiol. Sci. 2000. - V.15. - P.326-330.

68. Gill, C. Losing heart: the role of apoptosis in heart disease-a novel therapeutic target? / C. Gill, R. Mestril, A. Samali // FASEB J. 2002. - V.16. - P.135-146.

69. Granville, DJ. Apoptosis: molecular aspects of cell death and disease / D.J. Granville, C.M. Carthy, D.W. Hunt, B.M. McManus // Lab. Invest. 1998. -V.78, №8. - P.893-907.

70. Gschwend, M.H. Optical detection of mitochondrial NADH content in intact human myotubes / M.H. Gschwend, R. Rudel, W.S.L. Strauss // Cell. Mol. Biol. -2001. V.47, №13. - OL95-104.

71. Halestrap, A.P. Elucidating the molecular mechanism of the permeability transition pore and its role in reperfusion injury of the heart / A.P. Halestrap, P.M. Kerr, S. Javadov, K.Y. Woodfield // Biochim. Biophys. Acta. 1998. - V.1366. №1-2. — P.79-94.

72. Halestrap, A.P. The mitochondrial permeability transition: its molecular mechanism and role in reperfusion injury / A.P. Halestrap // Biochem. Soc. Symp. 1999. - V.66. - P.181-203.

73. Heads, R.J. The molecular basis of adaptation to ischemia in the heart: the role of stress proteins and anti-oxidants in the ischemic and reperfused heart / R.J. Heads, D.S. Latchman, D.M. Yellon // EXS. 1996. - V.76. - P.383-407.

74. Henderson, A.R. An overview and ranking of biochemical markers of cardiac disease. Strengths and limitations / A.R. Henderson // Clin. Lab. Med. 1997. -V.17, №4. - P.625-654.

75. Higashida, H. Sympathetic potentiation of cyclic ADP-ribose formation in rat cardiac myocytes / H. Higashida, A. Egorova, C. Higashida, Zhen-Guo Zhong // J. Biol. Chem. 1999. - V. 274, №47. - P.33348-33354.

76. Horvath, K.A. Intraoperative myocardial ischemia detection with laser-induced fluorescence/ K.A. Horvath, K.T. Schomacker, C.C. Lee // J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 1994. - V.107, №1. - P.220-225.

77. Javadov, S.A. Protection of hearts from reperfusion injury by propofol is associated with inhibition of the mitochondrial permeability transition / S.A. Javadov, K.H. Lim, P.M. Kerr, M.S. Suleiman // Cardiovasc. Res. 2000. - V.45, №2. - P.360-369.

78. Jeffrey, F.M. Influence of intracellular acidosis on contractile function in the working rat heart / F.M. Jeffrey, C.R. Malloy, G.K. Radda // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 1987. - V.253. - P.1499-1505.

79. Jiang, L. Cardiomyocyte apoptosis is associated with increased wall stress in chronic failing left ventricle / L. Jiang, Y. Huang, S. Hunyor, C.G. dos Remedios // Eur. Heart J. 2003. - V. 24, №8. - P.742-751.

80. Kanaya, N. Ca2+ channel modulation alters halothane-induced depression of ventricular myocytes / N. Kanaya, M. Matsumoto, S. Kawana, H. Tsuchida // Can. J. Anesth. 1998. - V. 45. - P.584-591.

81. Kang, P.M. Morphological and molecular characterization of adult cardiomyocyte apoptosis during hypoxia and reoxygenation / P.M. Kang, A. Haunstetter, H. Aoki // Circ. Res. 2000. - V.87. - P.l 18-125.

82. Karmazyn, M. Myocardial ischemia: mechanisms, reperfusion, protection / M. Karmazyn. Birkhauser Verlag Basel/Switzerland. - 1996.

83. Karras, D.J. Serum markers in the emergency department diagnosis of acute myocardial infarction / D.J. Karras, D.L. Kane // Emerg. Med. Clin. North. Am. -2001. V.19, №2. - P.321-337.

84. Kerr, P.M. Reversal of permeability transition during recovery of hearts from ischemia and its enhancement by pyruvate / P.M. Kerr, M.-Saadeh Suleiman, A.P. Halestrap // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 1999. - V. 276, №2. - P496-502.

85. Kloner, R.A. Medical and cellular implications of stunning, hibernation, and preconditioning: An NHLBI Workshop / R.A. Kloner, R. Bolli, E. Marban, L. Reinlib // Circulation. 1998. - V.97. - P.1848-1867.

86. Kohen, E. Microspectrofluorometry and fluorescence imaging in the study human cytopathology / E. Kohen, S. Gatt, A. Schachtschabel, D.O. Schachtschabel // Microsc. Res. Tech. 2000. - V.51, №5. - P.469-480.

87. Kowaltowski, AJ. Bcl-2 prevents mitochondrial permeability transition and cytochrome c release via maintenance of reduced pyridine nucleotides / AJ. Kowaltowski, A.E. Vercesi, G. Fiskum // Cell Death. Differ. 2000. - V.7, №10. -P.903-910.

88. Kroemer, G. The mitochondrial death/life regulator in apoptosis and necrosis / G. Kroemer, B. Dallaporta, M. Resche-Rigon // Annu. Rev. Physiol. 1998. -V.60.-P.619-642.

89. Levine, R.L. Ischemia: from acidosis to oxidation / R.L. Levine // FASEB J. -1993.-V. 7. P. 1242-1246.

90. Lim, H. Profound apoptosis- mediated regional myocyte loss and compensatory hypertrophy in pigs with hibernating myocardium / H. Lim, J.A. Fallavollita, R. Hard // Circulation. -1999. V.100. - P.2380.

91. Liu, H. Preconditioning blocks cardiocyte apoptosis: role of KATP channels and PKC-S / H. Liu, H.Y. Zhang, X. Zhu, Z. Shao // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. - 2002. - V. 282, №4. - P.1380-1386.

92. Maulik, N. Apoptosis, heart failure, ischemic heart disease / N. Maulik, D.K. Das // Heart Failure Rev. 1999. - №4. - P. 165-173.

93. Maulik, N. Differential regulation of apoptosis by ischemia-reperfusion and ischemic adaptation / N. Maulik, H. Sasaki, N. Galang // Ann. N. Y. Acad. Sci. -1999. V.874. - V.401-411.

94. Maulik, N. Ischemic preconditioning attenuates apoptotic cell death associated with ischemia/reperfusion / N. Maulik, T.Yoshida, R.M. Engelman, D. Deaton // Mol. Cell Biochem. 1998. - V.186, №1-2. - P.139-145.

95. Maulik, N. Ischemic preconditioning reduces apoptosis by upregulating anti-death gene Bcl-2 / N. Maulik, R.M. Engelman, J.A. Rousou, J.E. Flack // Circulation. 1999. - V.100. - P.369-375.

96. Maulik, N. Oxidative stress developed during open heart surgery induces apoptosis: reduction of apoptotic cell death by ebselen, a glutathione peroxidase mimic / N. Maulik, T. Yoshida // J. Cardiovasc. Pharmacol. 2000. - V.36, №5. -P.601-608.

97. Maulik, N. Regulation of cardiomyocyte apoptosis in ischemic reperfused mouse heart by glutathione peroxidase / N. Maulik, T. Yoshida // Mol. Cell. Biochem. 1999. - V.196, №1-2. - P.13-21.

98. McDonough, J.L. Troponin I degradation and covalent complex formation accompanies myocardial ischemia/reperfusion injury / J.L. McDonough, D. Kent Arrell, J.E. Van Eyk // Circ. Res. 1999. - V.84. - P.9-20.

99. Mironov, S.L. Oscillations and hypoxic changes of mitochondrial variables in neurons of the brainstem respiratory centre of mice / S.L. Mironov, D.W. Richter // J. Physiol. 2001. - V.533, №1. - P.227-236.

100. Morkunaite-Haimi, S. Reactive oxygen species are involved in the stimulation of the mitochondrial permeability transition by dihydrolipoate / S. Morkunaite-Haimi, A.G. Kruglov, V.V. Teplova, K. Stolze // Biochem. Pharmacol. 2003. -V.65, №1. - P.43-49.

101. Nakajima, H. Atrial but not ventricular fibrosis in mice expressing a mutant transforming growth factor-/?. transgene in the heart / H. Nakajima, H.O. Nakajima, O. Salcher // Circ. Res. 2000. - V.86. - V.571-579.

102. Narula, J. Apoptosis and the systolic dysfunction in congestive heart failure. Story of apoptosis interruptus and zombie myocytes / J. Narula, E. Arbustini, Y. Chandrashekhar, M. Schwaiger // Cardiol. Clin. 2001. - V.19, №1. - P.l 13-126.

103. Nieminen, A.L. Apoptosis and necrosis in health and disease: role of mitochondria / A.L. Nieminen // Int. Rev. Cytol. 2003. - V. 224. - P.29-55.

104. Obi-Tabot, E.T. Changes in hepatocyte NADH fluorescence during prolonged hypoxia / E.T. Obi-Tabot, L.M. Hanrahan, R. Cachecho // J. Surg. Res. 1993. -V.55, №6. - P.575-580.

105. Osbakken, M. Multiparameter monitoring and analysis of in vivo ischemic and hypoxic heart / M. Osbakken, A. Mayevsky // J. Basic. Clin. Physiol. Pharmacol. 1996. - V.7, №2. - P.97-113.

106. Panteghini, M. Standardization activities of markers of cardiac damage: the need of a comprehensive approach / M. Panteghini // Eur. Heart J. 1998. - V.19, Suppl N. -P.8-11.

107. Piot, C.A. Ischemic preconditioning decreases apoptosis in rat hearts in vivo / C.A. Piot, D. Padmanaban, P.C. Ursell, R.E. Sievers // Circulation. 1997. -V.96. - P. 1598-1604.

108. Qin, F. Antioxidants attenuate myocyte apoptosis an improve cardiac function in CHF: association with changes in the MAPK pathways / F. Qin, J. Shite, C.S. Liang // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. - 2003. - V. 285. - P.822-832.

109. Ramakrishnan, N. Ebselen inhibition of apoptosis by reduction of peroxides / N. Ramakrishnan, J.F. Kalinich, D.E. McClain // Biochem. Pharmacol. 1996. -V.51, №11. -P.1443-1451.

110. Roberts, R. Management of acute coronary syndromes based on risk stratification by biochemical markers: An Idea whose time has come / R. Roberts, R.E. Fromm // Circulation. 1998. - V.98. -P.1831-1833.

111. Rozanski; A. Impact of psychological factors on the pathogenesis of cardiovascular disease and implications for therapy / A. Rozanski, J.A. Blumenthal, J. Kaplan // Circulation. 1999. - V.99. - P.2192-2217.

112. Ruffolo, R.R. Jr. Neurohormonal activation, oxygen free radicals, and apoptosis in the pathogenesis of congestive heart failure / R.R. Ruffolo Jr, G.Z. Feuerstein // J. Cardiovasc. Pharmacol. 1998. - V.32, Suppl 1. - S.22-30.

113. Saraste, A. Morphologic and biochemical hallmarks of apoptosis / A. Saraste, K. Pulkki // Cardiovasc. Res. 2000. - V.45, №3. - P.528-537.

114. Schmitt, J.P. Role of apoptosis in myocardial stunning after open heart surgery / J.P. Schmitt, J. Schroder, H. Schunkert // Ann. Thorac. Surg. 2002. - V.73. -P.1229-1235.

115. Skinner, J.L. Novel methods to evaluate controlled reperfusion techniques in cardiac surgery / J.L. Skinner, S.B. Digerness, R.D. Spruell // Int. J. Surg. Investig. 2000. - V.l, №5. - P.397-407.

116. Stadler, B. Adenosine-enhanced ischemic preconditioning modulates necrosis and apoptosis: effects of stunning and ischemia-reperfusion / B. Stadler, J. Phillips, Y. Toyoda, M. Federman // Ann. Thorac. Surg. 2001. - V.72. - P.555-563.

117. Suzuki, Y.L. Redox regulation of signal transduction in cardiac and smooth muscle / Y.L. Suzuki, G.D. Ford // J. Mol. Cell. Cardiol. 1999. - V.31, №2. -P.345-353.

118. Swynghedauw B. Molecular mechanisms of myocardial remodeling / B. Swynghedauw // Physiol. Rev. 1999. - V. 79, №1. - P.215-262.

119. Tomai, F. Ischemic preconditioning in humans: Models, Mediators, and Clinical Relevance / F. Tomai, F. Crea, L. Chiariello, P.A. Gioffre // Circulation. -1999. V.100. - P.559-563.

120. Valen, G. The basic biology of apoptosis and its implications for cardiac function and viability / G. Valen // Ann. Thorac. Surg. 2003. - V.75. - S656-S660.

121. Van der Laan, L. NADH videofluorimetry to monitor the energy state of skeletal muscle in vivo / L. Van der Laan, A. Coremans, C. Ince // J. Surg. Res. -1998. V.74, №2. - P. 155-160.

122. Vanden Hoek, T.L. Mitochondrial electron transport can become a significant source of oxidative injury in cardiomyocytes / T.L. Vanden Hoek, Z. Shao, C. Li, P.T. Schumacker // J. Mol. Cell. Cardiol. 1997. - V.29, №9. p.2441-2450.

123. Vanden Hoek, T.L. Preconditioning in cardiomyocytes protects by attenuating oxidant stress at reperfusion / T.L. Vanden Hoek, L.B. Becker, Z. Shao, C. Li // Circ. Res. 2000. - V.86. - P.541-548.

124. Vanden Hoek, T.L. Significant levels of oxidants are generated by isolated cardiomyocytes during ischemia prior to reperfusion / T.L. Vanden Hoek, C. Li, Z. Shao, P.T. Schumacker // J. Mol. Cell. Cardiol. 1997. - V.29, №9. - P.2571-2583.

125. Vanoverschelde, J.L. The pathophysiology of myocardial hibernation: current controversies and future directions / J.L. Vanoverschelde, J.A. Melin // Prog. Cardivasc. Dis. 2001. - V.43, №5. - P.387-398.

126. Wu, A.H.B. Characterization of cardiac troponin subunit release into serum after acute myocardial infarction and comparison of assays for troponin T and I / A.H.B. Wu, Y.L. Feng, R. Moore, F.S. Apple // Clin. Chem. 1998. - V.44. -P.l 198-1208.

127. Xie, Z. Coronary reperfusion following ischemia: different expression of bcl-2 and bax proteins, and cardiomyocyte apoptosis / Z. Xie, T. Koyama, J. Suzuki, Y. Fujii // Jpn. Heart. J. 2001. - V.42, №6. - P.759-770.

128. Xu, M. Calcium preconditioning inhibits mitochondrial permeability transition and apoptosis / M. Xu, Y. Wang, K. Hirari, A. Ayub // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2001. - V. 280, №2. - P.899-908.

129. Xue, L. Inhibition of mitochondrial permeability transition and release of cytochrome c by anti-apoptotic nucleoside analogues / L. Xue, V. Borutaite, A.M. Tolkovsky // Biochem. Pharmacol. 2002. - V.64, №3. - P.441-449.

130. Yamamoto, K. Metabolism of pyridine nucleotides in cultured rat hepatocytes intoxicated with tert-butyl hydroperoxide / K. Yamamoto, J.L. Farber // Biochem. Pharmacol. 1992. - V.43, №5. - P.l 119-1126.

131. Yaoita, H. Apoptosis in relevant clinical situations contribution of apoptosis in myocardial infarction / H. Yaoita, K. Ogawa, K. Maehara, Y. Maruyama // Cardiovasc. Res. 2000. - V.45, №3. - P.630-641.

132. Zhao, Z.Q. Reperfusion induces myocardial apoptotic cell death / Z.Q. Zhao, M. Nakamura, N.P. Wang, J.N. Wilcox // Cardiovasc. Res. 2000. - V.45, №3. -P.651-660.